DK155490B - Fremgangsmaade til adskillelse af olie og/eller phosphatidylethanolamin fra alkoholoploeselige phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse - Google Patents
Fremgangsmaade til adskillelse af olie og/eller phosphatidylethanolamin fra alkoholoploeselige phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse Download PDFInfo
- Publication number
- DK155490B DK155490B DK551081A DK551081A DK155490B DK 155490 B DK155490 B DK 155490B DK 551081 A DK551081 A DK 551081A DK 551081 A DK551081 A DK 551081A DK 155490 B DK155490 B DK 155490B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- oil
- ethanol
- phosphatidylcholine
- column
- volume
- Prior art date
Links
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 title claims abstract description 40
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 title claims abstract description 23
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 title description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- JCABVIFDXFFRMT-DIPNUNPCSA-N [(2r)-1-[ethoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCC)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC JCABVIFDXFFRMT-DIPNUNPCSA-N 0.000 claims description 4
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 2
- AWFYPPSBLUWMFQ-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-1,3,4-oxadiazol-2-yl]-1-(1,4,6,7-tetrahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1=NN=C(O1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=C2 AWFYPPSBLUWMFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 abstract description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 abstract 1
- 239000008349 purified phosphatidyl choline Substances 0.000 abstract 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 26
- 239000000047 product Substances 0.000 description 15
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 13
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 5
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 4
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 4
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 235000021184 main course Nutrition 0.000 description 3
- 125000001095 phosphatidyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 3
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- OZXIZRZFGJZWBF-UHFFFAOYSA-N 1,3,5-trimethyl-2-(2,4,6-trimethylphenoxy)benzene Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1OC1=C(C)C=C(C)C=C1C OZXIZRZFGJZWBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYCNUMLMNKHWPZ-SNVBAGLBSA-N 1-acetyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CC(=O)OC[C@@H](O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C RYCNUMLMNKHWPZ-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 235000014698 Brassica juncea var multisecta Nutrition 0.000 description 1
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 description 1
- 240000000385 Brassica napus var. napus Species 0.000 description 1
- 235000006618 Brassica rapa subsp oleifera Nutrition 0.000 description 1
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 239000008157 edible vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002314 glycerols Chemical class 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- SHOJXDKTYKFBRD-UHFFFAOYSA-N mesityl oxide Natural products CC(C)=CC(C)=O SHOJXDKTYKFBRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- MTZWHHIREPJPTG-UHFFFAOYSA-N phorone Chemical compound CC(C)=CC(=O)C=C(C)C MTZWHHIREPJPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000012958 reprocessing Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- -1 sterol esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 235000008979 vitamin B4 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011579 vitamin B4 Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
- C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
- C07F9/09—Esters of phosphoric acids
- C07F9/10—Phosphatides, e.g. lecithin
- C07F9/103—Extraction or purification by physical or chemical treatment of natural phosphatides; Preparation of compositions containing phosphatides of unknown structure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J7/00—Phosphatide compositions for foodstuffs, e.g. lecithin
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
- Liquid Crystal Substances (AREA)
- Developing Agents For Electrophotography (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Water Treatment By Sorption (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
i
DK 155490 B
Den foreliggende opfindelse angår en særlig fremgangsmåde til adskillelse af olie og/eller phosphatidylethanolamin fra al kohol opløselige phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse under udvinding af meget rent phosphatidylcholin ved kromatografi på silicagel.
5 De ved spiseoliefremstilling fremkomne vegetabilske råphosphatider indeholder udover phosphatidylcholin, phosphatidylethanolamin og mono-, di- og triglycerider (olie) såvel phophatidylinosit som andre phosphor-holdige glycerinestre og stoffer som peptider, aminosyrer, steroler, sterol estre, fri fedtsyrer og carbohydratderivater. Til anvendelse i 10 medicinalindustrien er der især behov for oliefrit og phosphatidyl-ethanol ami nfrit phosphatidylcholin med høj renhedsgrad.
Til adskillelse af de i råphosphatidet indeholdte ledsagestoffer er der allerede beskrevet flere fremgangsmåder. Som regel foretages der i et første trin en fjernelse af olie fra det vegetabilske råphosphatid 15 i acetone (DE-AS 1 053 299, US-PS 3 268 335, DE-AS 1 047 597), hvorefter der ekstraheres med ethanol i det andet trin (US-PS 2 724 649). I det tredje trin underkastes den ethanolopløselige phosphatidfraktion søjlekromatografi ved temperaturer, der ikke overstiger 35°C (US-PS 3 031 478). Ved oliefjernelsen med acetone dannes der acetonebiprodukter som 20 mesityloxid, di acetoneal kohol, phoron o.a. i små mængder. Fjernelsen af disse toxiske og p.g.a. deres karakteristiske lugt forstyrrende stoffer er meget kostbar og til dels endda umulig. Desuden er oliefjernelsen med acetone forbundet med en stigning i peroxiderne, hvis uheldige fysiologiske indflydelse er velkendt.
25 Den alkoholiske ekstraktion af vegetabilske råphosphatider fører til en olieholdig phosphatidfraktion (DE-OS 2 718 797, DE-PS 1 492 952, DE-AS 1 692 568), ud fra hvilken der efter kromatografisk behandling ved stuetemperatur kan udvindes et olieholdigt, phosphatidylethanolaminfrit phosphatidylcholin. Ifølge en af vore egne patentansøgninger (P 30 23 30 814.3) lykkes det ved tilsætning af en lille mængde vand at fraskille olien og udvinde et stærkt renset, oliefrit phosphatidylcholin. I alt udgør denne oliefjernelse med vand, der er velegnet til fremstilling af bestemte phosphatidfraktioner, imidlertid også en tretrinsproces (ekstraktion, kromatografi, oliefjernelse) ved udvinding af oliefrit phos-35 phatidylcholin, hvilken desuden er behæftet med oparbejdningen af vandige ethanol opløsninger.
Udvindingen af rent phosphatidylcholin forudsætter en kromatografisk adskillelse af de i den ethanolopløselige phosphatidfraktion
DK 155490B
2 indeholdte ledsagestoffer. Som adsorptionsmiddel anvendes der hovedsagelig aluminiumoxid. Rensning sker både søjlekromatografisk og ved omrøring med skillemidlet, til enhver tid ved stuetemperatur.
I teknisk målestok anvendes basisk aluminiumoxid. Også her gennem-5 føres kromatografien altid ved stuetemperatur. Da aluminiumoxidet efter kromatografien er belagt med forureninger, navnlig med phosphatidyl -ethanolamin, må det kasseres. En yderligere ulempe består i dannelsen af lysophosphatidylcholin under kromatografien (0. Renkonen, J. Lipid. Res.
3, 181-3 (1962), D. Van Damme et al., Int. Symp. Chromatogr. Elektro-10 phoresis, 5th, 1968 (Pub. 1969), 268-78). Kromatografien over silicagel er hidtil kun tillagt analytisk og præparativ betydning. Således ad-sorberes phosphatider i hexanopløsninger ikke af silicagel (JA 77012202, US-PS 3 869 482), mens de i alkoholiske opløsninger tilbageholdes af silicagel (H. Richter et al., Pharmazie, 1977, 32 (3), 164). De for-15 skellige forhold kan forklares ved dannelsen af lipofile, polymolekylære phosphatidmiceller i hexan i modsætning til de molekylært foreliggende phosphatider i alkohol. Kromatografien gennemføres også her ved stuetemperatur. Adskillelsen og den selektive desorption af phosphatiderne sker ved anvendelse af alkoholiske phosphatidopløsninger enten med 20 al kohol/ammoni ak (JA 49093400) eller med blandinger af chloroform/ methanol (C.H. Lea et al., Biochem. J. 60, 353-63 (1965)) hhv. chloro-form/methanol/vand (DDR-PS 79 916). Denne fremgangsmåde har ikke hidtil haft nogen teknisk betydning, da der som elueringsmiddel altid er blevet anvendt blandinger af toksiske materialer, såsom ammoniak 25 eller chloroform, hvis genvinding og fjernelse fra lecithinet er meget bekostelig.
Sædvanlige, i handelen værende phosphatidylcholi nråprodukter, navnlig af sojabønnephosphatider, er produkter, der er udvundet ved ekstraktion med alkohol og de er al kohol opløselige og indeholder olie og 30 phosphatidylethanolamin som hovedforurening. Der findes imidlertid også phosphatidylcholi nråprodukter, der som beskrevet kun indeholder den ene eller den anden af de to hovedforureninger. Den foreliggende opfindelse er baseret på den opgave at udvikle en fremgangsmåde til adskillelse af olie og/eller phosphatidylethanolamin fra al kohol opløselige phosphat-35 idylcholinprodukter indeholdende disse under fremstilling af meget rent phosphatidylcholin, som er befriet for disse forureninger. Til alle de hidtil beskrevne fremgangsmåder er knyttet den ulempe, at de til fremstilling af et rent, olie- og phosphatidyl ethanol aminfrit produkt kræver
DK 155490B
3 omstændelige fremgangsmådetrin, ved hvilke der må regnes med dannelse eller forbi i ven af toxiske produkter. Det ved kromatografisk rensning anvendte aluminiumoxid har tilmed måttet kasseres.
Det har nu overraskende vist sig, at man ud fra al kohol opløselige, 5 olie- og/eller phosphatidylethanolaminholdige phosphatidfraktioner opnår et olie- og phosphatidyl ethanolaminfrit phosphatidylcholin med høj renhedsgrad ved hjælp af en sil icagelsøjlekromatografi ved højere temperaturer.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til adskillelse af olie og/eller 10 phosphatidylethanolamin fra al kohol opløselige phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse under fremstilling af olie- og phosphatidyl-ethanol aminfrit phosphatidylcholin er ejendommelig ved, at man ved en temperatur i området fra 60-90eC kommer opløsningen af det olie og/eller phosphatidylethanolaminholdige, al kohol opløselige phosphatidylcholin-15 produkt i en Cj^ lavere alkanol, eventuelt blandet med indtil 20 vol-% vand, eller en sådan blanding af flere Cj_4 lavere alkanoler, på en søjle af silicagel, eluerer søjlen ved denne temperatur med en Cj_4 lavere alkanol, eventuelt indeholdende indtil 20 vol-% vand, eller en sådan blanding af flere Cj_4 lavere alkanoler, og derved opsamler et 20 forløb indeholdende olien og/eller phosphatidyl ethanol aminen, som skal fraskilles, og adskilt herfra restløbet, som indeholder det rene phosphatidyl chol in, og adskiller opløsningsmidlet fra restløbet på sædvanlig måde.
Tilsætningen til si licagelsøjlen og elueringen af denne gennem-25 føres fortrinsvis ved en temperatur i området fra 60 til 70°C. Som elueringsmiddel foretrækkes det at anvende det benyttede opløsningsmiddel, hvilket gør fremgangsmåden særlig enkel. Som Cj_4 lavere alkanol foretrækkes ethanol.
Mængden af forløbet afhænger af det anvendte phosphatidylcholin-30 produkt. Ved simple analytiske metoder lader det sig fastslå, fra hvilket tidspunkt eluatet er fri for ledsageprodukterne, som skal fra-skilles og praktisk taget kun indeholder phosphatidylcholin. Erfaringsmæssigt udgør forløbet ca. 20 til 25% af eluatets samlede volumen. I forløbet befinder der sig alt efter det anvendte phosphatidylcholin-35 produkt også de andre, sædvanligvis tilstedeværende ledsagestoffer som sterol er, sterolderi vater, glycol ipider og phospholipider, som kan bringes til en videre anvendelse.
Som silicagel kan der anvendes for kromatografi sædvanlige produk-
DK 155490 B
4 ter af forskellig kornstørrelse eller også presset silicagel, som kan være aktiveret eller desaktiveret. Der anvendes fortrinsvis neutrale silicagelprodukter.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan gennemføres ved normalt tryk 5 eller også ved overtryk. En ganske særlig fordel ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen består i, at man stadig kan genanvende silicagelen efter udført kromatografi. Samtlige forureninger opfanges i forløbet og efter hovedløbet bliver der kun en ringe restbelægning af phosphatidyl -cholin tilbage.
10 En yderligere fordel ved silicagelen ligger i den meget høje be lastning, dette sorptionsmiddel kan udsættes for. Således adskilles der ca. 60 dele faststof fra den al kohol opløselige phosphatidfraktion ved en søjlekromatografisk adskillelse med 100 dele silicagel.
Som phosphatidylcholinprodukter kan der anvendes sådanne, som fås 15 ved ekstraktion med alkohol fra fx. soja, jordnød, solsikke eller raps. Phosphatidet opløses med en laveremolekylær alifatisk alkohol, såsom fx. methanol, ethanol, n-propanol eller isopropanol, men især med 94 til 96 vol-%ig ethanol. Opløsningen befris for bundfald, og den klare alkoholfase overføres således eller i form af et koncentrat til fremgangsmåden 20 ifølge opfindelsen. Det ved ekstraktionen anvendte opløsningsmiddel kan fjernes helt, og det opnåede produkt kan igen opløses i en eller flere Cj_4 lavere al kano!er, eventuelt indeholdende 1-20 vol-% vand. Udvindingen af rent phosphatidylcholin fra såvel olie- som phosphatidyl-ethanol ami nhol dige phosphatidylcholinråprodukter forenkles i forhold til 25 de kendte fremgangsmåder, specielt ved sammenlægningen af oliefjernelses- og rensningsfremgangsmådetrinnene. En yderligere fordel, der også opnås ved anvendelse af phosphatidylcholinprodukter, fra hvilke et af de to følgestoffer allerede er adskilt på anden måde, opnås ved genanvendelsen af silicagelen.
30
Eksempler:
Analvsemetode
Phosphatiderne analyseredes ved hjælp af tyndtlagskromatografi.
35 Olieindholdet blev sat lig med det dialyserbare. Vandet blev bestemt efter Karl Fischer og restethanolindholdet ved gaskromatografi.
DK 155490B
5 Sø.i le kromatografi
Der anvendtes en doppeltkappekromatografisøjle (indvendig diameter 4,5 cm, højde 37 cm). Før søjlen var der tilsluttet en varmeveksler for at sikre en ensartet søjle- og tilsætningstemperatur. Søjlen fyldtes med 5 en opslæmning af 200 g silicagel (Merck) i det til enhver tid angivne opløsningsmiddel. Efter udført kromatografi kan silicagelen anvendes igen.
Udgangsmateriale 10 Sojaråphosphatid ekstraheres ved 35°C med 95 vol-%ig ethanol i vægtforholdet 1:2,5 (råphosphatid:ethanol). Bundfaldet adskilles fra den overstående ethanol fase ved stuetemperatur. Ethanol fasen inddampes.
Det derved opnåede faste stof har følgende sammensætning: 15 Phosphatidylcholin (PC) 43%
Phosphatidyl ethanolamin (PE) 12%
Olie 21%
Dette faste stof anvendtes til eksemplerne 1-4.
20 Det i eksempel 5 anvendte faste stof fremstilledes som følger:
Sojaråphosphatid befris for olie med acetone og ekstraheres derefter med 95 vol-%ig ethanol. Den ethanol opløselige phosphatidfraktion inddampes og analyseres: 25 PC-indhold 52% PE-indhold 20%
Det i eksempel 6 anvendte olieholdige phosphatidyl ethanolaminfri phosphatidylcholin fremstilledes ifølge DE-OS 2 718 797 (eksempel 3).
30 PC-indehold 68%
Olie-indhold 28% 35 Eksempel 1
Der gennemføres en søjlekromatografi ved forhøjet temperatur:
DK 155490 B
6 Søjlepåfyldning: 118 g fast stof i 275 g 95 vol-%ig ethanol
Elueringsmiddel: 95 vol-%ig ethanol til 4 1 eluat Søjletemperatur: 70°C.
5
Efter et forløb på 1 1 opsamles ialt 3 1 hovedløb. Hovedløbet inddampes og analyseres.
Faststofudbytte 34 % d.Th.
10 PC-indhold 92 % PE-indhold <1 %
Olie-indhold <1 % PC-udbytte i forhold til udgangsfaststof 72 % d.Th.
15
Eksempel 2 Søjlepåfyldning: 118 g fast stof i 1280 g 95 vol-%ig ethanol
Elueringsmiddel: 95 vol-%ig ethanol til 4 1 eluat 20 Søjletemperatur: 65°C.
Efter et forløb på 2 1 opsamles ialt 2 1 hovedløb. Hovedløbet inddampes og analyseres.
25 Faststofudbytte 22 % d.TH.
PC-indhold 90 % PE-indhold <1 %
Olie-indhold <1 % PC-udbytte i forhold til udgangsfaststof 46 % d.Th.
30
Eksempel 3 Søjlepåfyldning: 118 g fast stof i 29 g 95 vol-%ig ethanol 35 Elueringsmiddel: 95 vol-%ig ethanol til 4 1 eluat Søjletemperatur: 65°C.
Efter et forløb på 0,5 1 opsamles ialt 3,5 1 hovedløb. Hovedløbet
DK 155490B
7 inddampes og analyseres.
Faststofudbytte 38 % d.Th.
PC-indhold 87 % 5 PE-indhold <1 %
Olie-indhold <1 % PC-udbytte i forhold til udgangsfaststof 77 % d.Th.
10 Eksempel 4 Søjlepåfyldning: 118 g fast stof i 50 g n-propanol
Elueringsmiddel: n-propanol til det første eluat (1 1), derefter 85 vol-%ig vandig n-propanol til 15 3 1 eluat Søjletemperatur: 90°C.
Efter et forløb på 1 1 opsamles 3 1 hovedløb 85 vol-%ig n-propanol. Hovedløbet inddampes og analyseres.
20 Faststofudbytte 45 % d.Th.
PC-indhold 86 % PE-indhold <1 %
Olie-indhold <1 % PC-udbytte i forhold til udgangsfaststof 90 % d.Th.
25
Eksempel 5 Søjlepåfyldning: 110 g fast stof (ethanolopløselig fraktion 30 af oliefrit soja-råphosphatid) i 40 g 95 vol- %ig ethanol
Elueringsmiddel: 95 vol-%ig ethanol til 4 1 eluat Søjletemperatur: 65°C.
35 Efter et forløb på 1 1 opsamles 3 1 hovedløb. Hovedløbet inddampes og analyseres.
Claims (3)
1. Fremgangsmåde til adskillelse af olie og/eller phosphatidyl - ethanolamin fra al kohol opløselige phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse under fremstilling af olie- og phosphatidyl ethanol aminfrit phosphatidylcholin, KENDETEGNET ved, at man ved en temperatur i området fra 60-90°C kommer opløsningen af det olie- og/eller phosphatidyl-30 ethanol aminholdige, al kohol opløselige phosphatidylcholinprodukt i en Cj_4 lavere alkanol, eventuelt blandet med indtil 20 vol-% vand, eller en sådan blanding af flere C14 lavere alkanoler, på en søjle af si 1 i - cagel, eluerer søjlen ved denne temperatur med en Cj_4 lavere alkanol, eventuelt indeholdende indtil 20 vol-% vand, eller en sådan blanding af 35 flere Cj_^ lavere alkanoler, og derved opsamler et forløb indeholdende olien og/eller phosphatidyl ethanol aminen, som skal fraskilles, og adskilt herfra restløbet, som indeholder det rene phosphatidylcholin, og adskiller opløsningsmidlet fra restløbet på sædvanlig måde. DK 155490B
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1 KENDETEGNET ved, at man anvender samme opløsningsmiddel til opløsning af phosphatidylcholi nproduktet, som skal renses, og til elueringen.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2 KENDETEGNET ved, at man som 5 Cj ^ lavere al kano! anvender ethanol. 10 15
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19803047048 DE3047048A1 (de) | 1980-12-13 | 1980-12-13 | Verfahren zur abtrennung von oel und/oder phosphatidylethanolamin aus diese enthaltenden alkoholloeslichen phosphatidylcholin-produkten |
| DE3047048 | 1980-12-13 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK551081A DK551081A (da) | 1982-06-14 |
| DK155490B true DK155490B (da) | 1989-04-17 |
| DK155490C DK155490C (da) | 1989-09-04 |
Family
ID=6119104
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK551081A DK155490C (da) | 1980-12-13 | 1981-12-11 | Fremgangsmaade til adskillelse af olie og/eller phosphatidylethanolamin fra alkoholoploeselige phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4425276A (da) |
| EP (1) | EP0054770B1 (da) |
| JP (1) | JPS57123194A (da) |
| AT (1) | ATE12451T1 (da) |
| BR (1) | BR8108065A (da) |
| CA (1) | CA1164476A (da) |
| DE (1) | DE3047048A1 (da) |
| DK (1) | DK155490C (da) |
| ES (1) | ES507889A0 (da) |
| FI (1) | FI68160C (da) |
| GR (1) | GR76944B (da) |
| HU (1) | HU195826B (da) |
| IE (1) | IE51980B1 (da) |
| PL (1) | PL132246B1 (da) |
| ZA (1) | ZA818409B (da) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3218028A1 (de) * | 1982-05-13 | 1983-11-17 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Blattduengemittel |
| DE3227001C1 (de) * | 1982-07-20 | 1983-07-07 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Verfahren zur Gewinnung von mit Phosphatidylcholin hochangereicherten ethanolischen Phosphatidfraktionen |
| DE3346525A1 (de) * | 1983-12-22 | 1985-07-04 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Pharmazeutische zubereitung mit speziellen 1,2-diacyl-glycero-3-phosphocholinen zur behandlung von erkrankungen im magen-darmbereich |
| DE3346526C2 (de) * | 1983-12-22 | 1986-12-11 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Pharmazeutisches Präparat zur therapeutischen Behandlung von rheumatischen Erkrankungen |
| US4714571A (en) * | 1984-02-13 | 1987-12-22 | The Liposome Company, Inc. | Process for purification of phospholipids |
| US4588745A (en) * | 1984-04-17 | 1986-05-13 | A. E. Staley Manufacturing Company | Treatment of vegetable oils |
| DE3445949A1 (de) * | 1984-12-17 | 1986-06-19 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Verfahren zur isolierung eines begleitphospholipid-freien phosphatidylcholins |
| DE3445950A1 (de) * | 1984-12-17 | 1986-06-19 | A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln | Verfahren zur isolierung von lysophosphatidylcholin-freiem phosphatidylcholin aus ei-pulver |
| EP0259495B1 (en) * | 1986-02-10 | 1991-04-17 | Q.P. Corporation | Process for producing egg yolk lecithin containing a reduced amount of pe and/or containing substantially no impurities |
| JPH0657715B2 (ja) * | 1987-04-09 | 1994-08-03 | キユーピー株式会社 | Ｌｐｃ以外のリゾ型リン脂質をほとんど含まないリゾリン脂質の製造方法 |
| US5214171A (en) * | 1988-12-08 | 1993-05-25 | N.V. Vandemoortele International | Process for fractionating phosphatide mixtures |
| JP2793317B2 (ja) * | 1990-01-31 | 1998-09-03 | 株式会社ワイエムシィ | ホスファチジルコリン或いはホスファチジルエタノールアミンの分離方法 |
| US5741513A (en) * | 1990-02-08 | 1998-04-21 | A. Natterman & Cie. Gmbh | Alcoholic aqueous gel-like phospholipid composition, its use and topical preparations containing it |
| US5120561A (en) * | 1991-04-25 | 1992-06-09 | American Lecithin Company | Food composition and method |
| US5310734A (en) * | 1991-07-05 | 1994-05-10 | Rhone-Poulenc Rorer | Phospholipid composition |
| JP3025590B2 (ja) * | 1992-10-14 | 2000-03-27 | エーザイ株式会社 | 粗製物の精製法 |
| DE19828799A1 (de) * | 1998-06-27 | 1999-12-30 | Meyer Lucas Gmbh & Co | Extraktion von Pflanzenlecithin |
| US7465717B2 (en) * | 2004-09-27 | 2008-12-16 | Soymor | Process for releasing and extracting phosphatides from a phosphatide-containing matrix |
| DE102010028365A1 (de) | 2010-04-29 | 2011-11-03 | Lichtblick Gmbh | Verwendung einer Phospholipid enthaltenden Zusammensetzung zur Entfernung von subkutanen Fettansammlungen |
| CN101838285B (zh) * | 2010-05-07 | 2013-09-04 | 南昌大学 | 一种分离纯化油料中磷脂的方法 |
| US10561674B2 (en) | 2012-12-02 | 2020-02-18 | Lipogen Ltd. | Processes for the preparation of phospholipid-enriched dairy products as neutraceuticals for the formulation of functional foods |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2276316A (en) | 1937-10-30 | 1942-03-17 | Purdue Research Foundation | Emulsifying and foaming agents and process of producing them |
| US2724649A (en) | 1951-03-23 | 1955-11-22 | Glidden Co | Margarine |
| GB860888A (en) * | 1956-04-30 | 1961-02-15 | Upjohn Co | Soya phosphatides and therapeutic compositions containing them |
| DE1053299B (de) | 1957-07-09 | 1959-03-19 | Nattermann A & Cie | Verfahren zur Gewinnung von colaminphosphorsaeurediglyceridester-freien natuerlichen Cholinphosphorsaeure-diglyceridestern |
| US3031478A (en) * | 1957-07-09 | 1962-04-24 | Nattermann A & Cie | Process for the production of natural phospholipids and substances produced thereby |
| DE1905253U (de) | 1960-08-20 | 1964-11-26 | Continental Gummi Werke Ag | Vulkanisierform fuer fahrzeugluftreifen. |
| NL126750C (da) | 1960-12-05 | |||
| US3268335A (en) | 1962-01-16 | 1966-08-23 | Central Soya Co | Soy protein and soy lecithin composition |
| NL302470A (da) | 1962-12-29 | |||
| BE651582A (da) | 1963-08-09 | |||
| DE1617679A1 (de) | 1967-08-21 | 1971-03-18 | Nattermann A & Cie | Verfahren zur Gewinnung von hochgereinigtem Phosphatidylcholin |
| US3661946A (en) | 1967-09-19 | 1972-05-09 | Lever Brothers Ltd | Phosphatide extraction |
| US3869482A (en) | 1972-07-31 | 1975-03-04 | Etapharm Chem Pharm Lab G M B | Method of producing highly purified phosphatides |
| DE2718797B2 (de) | 1977-04-27 | 1979-10-04 | A. Nattermann & Cie Gmbh, 5000 Koeln | Verfahren zur Gewinnung von ölhaltigen hochgereinigten Phosphatidylcholinen |
| DE2915614A1 (de) * | 1979-04-18 | 1980-10-30 | Guenter Dr Heidemann | Verfahren zur gewinnung von reinen phosphatiden |
-
1980
- 1980-12-13 DE DE19803047048 patent/DE3047048A1/de active Granted
-
1981
- 1981-12-01 AT AT81110045T patent/ATE12451T1/de not_active IP Right Cessation
- 1981-12-01 EP EP81110045A patent/EP0054770B1/de not_active Expired
- 1981-12-01 US US06/326,379 patent/US4425276A/en not_active Expired - Lifetime
- 1981-12-02 IE IE2831/81A patent/IE51980B1/en not_active IP Right Cessation
- 1981-12-03 ZA ZA818409A patent/ZA818409B/xx unknown
- 1981-12-08 GR GR66732A patent/GR76944B/el unknown
- 1981-12-08 FI FI813930A patent/FI68160C/fi not_active IP Right Cessation
- 1981-12-09 CA CA000391853A patent/CA1164476A/en not_active Expired
- 1981-12-11 BR BR8108065A patent/BR8108065A/pt unknown
- 1981-12-11 HU HU813744A patent/HU195826B/hu unknown
- 1981-12-11 DK DK551081A patent/DK155490C/da active
- 1981-12-11 JP JP56198743A patent/JPS57123194A/ja active Granted
- 1981-12-11 ES ES507889A patent/ES507889A0/es active Granted
- 1981-12-12 PL PL1981234217A patent/PL132246B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK551081A (da) | 1982-06-14 |
| DE3047048A1 (de) | 1982-07-29 |
| GR76944B (da) | 1984-09-04 |
| US4425276A (en) | 1984-01-10 |
| CA1164476A (en) | 1984-03-27 |
| FI68160C (fi) | 1985-08-12 |
| EP0054770B1 (de) | 1985-04-03 |
| DK155490C (da) | 1989-09-04 |
| EP0054770A3 (en) | 1982-08-04 |
| JPS57123194A (en) | 1982-07-31 |
| HU195826B (en) | 1988-07-28 |
| DE3047048C2 (da) | 1989-03-02 |
| ES8207187A1 (es) | 1982-09-01 |
| FI813930L (fi) | 1982-06-14 |
| PL132246B1 (en) | 1985-02-28 |
| FI68160B (fi) | 1985-04-30 |
| ES507889A0 (es) | 1982-09-01 |
| PL234217A1 (da) | 1982-08-02 |
| IE812831L (en) | 1982-06-13 |
| EP0054770A2 (de) | 1982-06-30 |
| ATE12451T1 (de) | 1985-04-15 |
| BR8108065A (pt) | 1982-09-21 |
| JPH0244316B2 (da) | 1990-10-03 |
| ZA818409B (en) | 1982-10-27 |
| IE51980B1 (en) | 1987-05-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK155490B (da) | Fremgangsmaade til adskillelse af olie og/eller phosphatidylethanolamin fra alkoholoploeselige phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse | |
| DK153116B (da) | Fremgangsmaade til adskillelse af olie og/eller phosphatidylethanolamin fra alkoholoploeselige phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse | |
| Rouser et al. | Lipid composition of beef brain, beef liver, and the sea anemone: two approaches to quantitative fractionation of complex lipid mixtures | |
| CA1097672A (en) | Process to obtain oily, highly purified phosphatidylcholines | |
| IE58399B1 (en) | Process for isolating phosphatidylcholine free of lysophosphatidylcholine from egg powder | |
| DK153041B (da) | Fremgangsmaade til adskillelse af acylerede phospholipider fra phosphatidylcholinprodukter indeholdende disse | |
| DK166364B (da) | Fremgangsmaade til isolering af ledsagephospholipidfrit phosphatidylcholin fra en vegetabilsk lipidblanding | |
| Zvezdina et al. | Effect of lysolecithin and lecithin of blood serum on the sensitivity of heart to acetylcholine | |
| EP0090454B1 (en) | Process for the manufacture of a preparation having a high content of phosphatidylcholine from a phosphatide mixture | |
| Kiselev | Preparative isolation of polyphosphoinositide fractions from ox brain | |
| Talipova | Lipids of Helianthus tuberosus | |
| SU825084A1 (ru) | Способ одновременного получения дифосфатидилглицерина, фосфатидилэтаноламина и фосфатидилхолина 1 2 |