SU1284981A1 - Способ выделени анионных фосфолипидов - Google Patents
Способ выделени анионных фосфолипидов Download PDFInfo
- Publication number
- SU1284981A1 SU1284981A1 SU853890211A SU3890211A SU1284981A1 SU 1284981 A1 SU1284981 A1 SU 1284981A1 SU 853890211 A SU853890211 A SU 853890211A SU 3890211 A SU3890211 A SU 3890211A SU 1284981 A1 SU1284981 A1 SU 1284981A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- chloroform
- methanol
- column
- purity
- phospholipids
- Prior art date
Links
Abstract
Изобретение относитс к химии природных соединений, а именно к способам получени индивидуальных фосфолипидов , может быть применено в изучении структуры и функций клеточных мембран и дл приготовлени липосо- мальных препаратов, биологически активных эмульсий, антигенных препаратов дл диагностики сифилиса. Цель изобретени - повышение чистоты и выхода продукта достигаетс тем,что используют адсорбент, позвол ющий сочетать ионообменную и афинную хроматографию и подбирают растворители дл элюировани . Дл этого раздел ли смеси фосфолипидов из мора крупного рога . Свежий мозг гомогенизируют в-системе хлороформ - этанол (IH), остаток экстрагируют в той же системе
Description
родных соединений, конкретно к способам получени индивидуальных фосфо- липидов, и может быть использовано
дл удалени с колонки остатков муравьиной кислоты, затем 120 мл 0,02М раствора формиата аммони . Пблученпри изучении структуры и функций кле- на фракци содержит 0,0225 г монофосфоинозитида , выход 99% от исходного содержани , чистота 100%. После -ЭТОГО через колонку пропускают 120мл 0,1 М раствора формиата аммони . По- 10 лученна фракци содержит 0,0034 г кардиолипина, выход 99% от исходного содержани , чистота 100%. Далее через колонку пропускают 120 мл 0,4 М раствора формиата аммони . Полученчетать элементы афинной и ионообмен- 15 па фракци содержит 0,0032 г дифос- ной хроматографии, и подбора систем фоинозитида, выход 99% от исходного
точных мембран, а также дл приготовлени липосомальных препаратов, биологически активных эмульсий, антигенных препаратов дл диагностики сифилиса.
Целью изобретени вл етс повышение чистоты и выхода продукта.
Цель достигаетс за счет используемого адсорбента позвол ющего со
содержани , чистота 100%. В заключение колонку промывают 120 мл 1 М раствора формиата аммони . Получен- 20 на фракци содержит 0,0034 г три- фосфоинозитида, выход 99% от исходного- содержани , чистота 100%.
растворителей дл элюировани .
Пример. U Разделение сме си фосфолипидов из моэга крупного рогатого скота.
Свежий мозг (10 г) гомогенизирую в 200 мл системы хлороформ-метанол (1:1), а остаток повторно экстрагируют 200 мл системы хлороформ - метанол (2:1). Полученный суммарный экстракт, содержащий 0,45 г фосфолипидов , нанос т на колонку с. макропористым силикагелем tinC-1000-ВГХ, содержащим неомицин, присоединенный известным способом. Объем адсорбента 20 мл.
Дл приготовлени элюируюнщх систем используют растворы формиата аммони в системе хлороформ - метанол - вода (1:2:0,4).
После нанесени смеси фосфолипидов через колонку пропускают 60 мл системы хлороформ - метанол (:). Полученна фракци содер жит 0,181 г нейтральных липидов. Затем через колонку пропускают 60 мп системы хлороформ - метанол (1:2). Полученна фракци содержит следы нейтральных липидов, а также 0,146 г смеси фос- фатидилхолина и фосфатидилэтанолами- на. После этого колонку промывают 120 мл системы хлороформ - метанол - муравьина кислота (1:2:0,1). Полученна фракци содержит 0,0045 г фос фатидной кислоты, выход 99% от исходного содержани , чистота 100%. Затем колонку промывают 120 мл системы хлороформ - метанол - муравьина кислота (1:2:0,2). Полученна фракци содержит О,081 г фосфатидил- серина, выход 99% от исходного содержани , чистота 100%. Далее колонку промывают 40 мл системы хло
дл удалени с колонки остатков муравьиной кислоты, затем 120 мл 0,02М раствора формиата аммони . Пблучен5 па фракци содержит 0,0032 г дифос- фоинозитида, выход 99% от исходного
5
содержани , чистота 100%. В заключение колонку промывают 120 мл 1 М раствора формиата аммони . Получен- 0 на фракци содержит 0,0034 г три- фосфоинозитида, выход 99% от исходного- содержани , чистота 100%.
Пример 2. Разделение смеси МОНО-, ди- и трифосфоинозитидов, выделенных из мозга крыс.
Образцы МОНО-, ди- и трифосфоинозитидов раствор ют в 10 мл системы хлороформ - метанол (1:1) и полученный раствор, содержащий 0,09 г суммарных фосфолипидов, нанос т на колонку с макропористым силикагелем МПС - 1000-ВГХ, содержащим неомицин , присоединенный известным способом . Объем адсорбента 5 мл.
0
5
0
5
0
5
Дл приготовлени элюирующих систем используют растворы формиата аммони в системе хлороформ - метанол - вода (1:2:0,4).
После нанесени смеси фосфолипидов через колонку пропускают 15 мл системы хлороформ - метанол (1:1) дл удалени следов нейтральных липидов , фосфатидилхолина и фосфатидил- этаноламина и 15 мл системы хлороформ - метанол муравьина кислота (1:2:0,05) дл удалени следов фос- фатидной кислоты и фосфатидилсерина. Далее колонку промывали 10 мл системы хлороформ метанол - вода (1:2: :0,4) дл удалени с колонки остатков муравьиной кислоты, затем 30 мп 0,01 М раствора формиата аммони . Полученна фракци содержит 0,03 г мо- нофосфозитида, выход 99% от исходного содержани , чистота 100%. Затем колонку промьшали 30 мп 0,4 М раствора формиата аммони . Полученна фракци содержит 0,029 г дифосфоиноfO
зитида, выход 99% от исходного, чистота 100%, В заключение колонку промывают 30 мл 1 М фосфора формиата аммони . Полученна фракци содержит 0,03 г трифосфоинозитида, выход 99% от исходного, чистота 100%.
Пример 3 . Вьщеление монофос- фоинозитида из пекарских дрожжей.
Суммарный липидный хлороформно-ме танольный (1:1) экстракт, содержащий около 0,5 г липидов, полученньш из пекарских дрожжей известным способом , нанос т на колойку с макропористым силикагелем МПС - 1000-ВГХ, со- держапщм неомицин, присоединенный из- -5 вестным способом. Объем адсорбента 5 мл.
После нанесени смеси фосфолипи- дов через колонку пропускают по 30 мл системы хлороформ - метанол (1:1) и 30 мл системь хлороформ - метанол (1:2). Полученные фракции содержат 0,44 г нейтральных и цвиттерионных липидов (фосфатидилхолин, фосфатидил- этаноламин и их лизопроизводные). После этого колонку промывают 30 мл системы хлороформ - метанол - муравьина кислота (,li j2:0,2), получа 0,01 г фосфатидилсерина. Затем колон20
25
ные и цвиттерионные липиды (фосфати дилхолин, фocфaтидилэтaнoлa fflн и их лизопроизводные). После этого 30 мл смеси хлороформ - метанол - муравьина кислота (1:2:0,2) вымывают фос фатидилсерин. Затем колонку промыва ют 10 мл системы хлороформ - метано вода (1:2:0,4) дл удалени с колон остатков муравьиной кислоты и в заключение 30 мл 0,05 М раствора формиата аммони в системе хлороформ - метанол - вода (1:2:0,4). Полученна фракци содержит 0,033 г кардиолипи на, выход 99%, чистота 100%.
Пример 5. Выделение кардио липина из сердечной мышцы крупного рогатого скота.
Раствор суммарных фосфолипидов сердечной мьшцы в системе хлороформ метанол (1:1), полученный как описа но в примере 4, нанос т на колонку с макропористым силикагелем МПС- 1000-ВГХ, содержащим L-лизин,, присо единенный известным способом. Объем адсорбента 5 мл.
После нанесени смеси фосфолипидов через колонку пропускают 30 мл системы хлороформ - метанол (1:1) и 30 мл системы хлороформ - метанол
ку промывают 10 мл системы хлороформ - р:2). Полученные фракции .содержат
метанол - вода (1:2:0,4) дл удалени с колонки остатков муравьиной кислоты и в заключение 30 мп 0,01 М раствора формиата аммони в системе хлороформ - метанол - вода (1:2:0,4).
Полученна фракци содержит 0,05 г монофосфоинозитида, выход 99% от исходного содержани , чистота 100%.
Пример 4. Выделение кардио- липина из сердечной мьшщы крупного рогатого скота.
Сердечную мышцу (80 г) гомогенизируют с 600 мл ацетона, а остаток дважды экстрагируют 600 мл метанола. Метанольный экстракт, содержащий ,4 г суммарных фосфолипидов, упаривают остаток раствор ют в системе хлороформ - метанол (1:1), отфильт- ровьшают и нанос т на колонку со сфе- роном Р-300 (оксиэтилметакрилатный гель) содержащим неомицин, присоединенный известным способом. Объем адсорбента 5 мл.
После нанесени смеси фосфолипидов через колонку пропускают 30 мл смеси хлороформ - метанол (1:1) и 30 мл смеси хлороформ - метанол (1:2), вымыва фракции, содержащие,нейтраль40
нейтральные и цвиттерионные фосфо- липиды (фосфатидилхолин, фосфатидил этаноламин и их лизопроизводные). После этого системой хлороформ - м 35 танол - муравьина кислота (1:2:0,2 вымывают фракцию, содержащую фосфа- тидилсерин. Затем колонку промывают 10 мл системы хлороформ - метанол - вода-(1:2:0,4) дл удалени с колон ки остатков муравьиной кислоты и в заключение 30 мл 0,02 М раствора фо миата аммони в системе хлороформ - метанол - вода (1:2:0,4). Полученна фракци содержит 0,033 г кардиолипи на, вькод 99%, чистота 100%.
Пример 6. Выделение кардио липина из сердечной мышцы крупного рогатого скота.
Раствор суммарных фосфолипидов сердечной мышцы в системе хлорофор метанол (1:1), полученньш как описа но в примере 4, нанос т на колонку с аминосилохромом 350/80. Объем адсорбента 5 мл.
После нанесени смеси фосфолипидов через колонку пропускают 30 мл системы хлороформ - метанол (1:1) и 30 мл системы хлороформ - метанол
45
50
55
-5
0
5
ные и цвиттерионные липиды (фосфатидилхолин , фocфaтидилэтaнoлa fflн и их лизопроизводные). После этого 30 мл. смеси хлороформ - метанол - муравьина кислота (1:2:0,2) вымывают фос- фатидилсерин. Затем колонку промывают 10 мл системы хлороформ - метанол- вода (1:2:0,4) дл удалени с колонки остатков муравьиной кислоты и в заключение 30 мл 0,05 М раствора формиата аммони в системе хлороформ - метанол - вода (1:2:0,4). Полученна фракци содержит 0,033 г кардиолипи- на, выход 99%, чистота 100%.
Пример 5. Выделение кардио- липина из сердечной мышцы крупного рогатого скота.
Раствор суммарных фосфолипидов сердечной мьшцы в системе хлороформ - метанол (1:1), полученный как описано в примере 4, нанос т на колонку с макропористым силикагелем МПС- 1000-ВГХ, содержащим L-лизин,, присоединенный известным способом. Объем адсорбента 5 мл.
После нанесени смеси фосфолипидов через колонку пропускают 30 мл системы хлороформ - метанол (1:1) и 30 мл системы хлороформ - метанол
0
нейтральные и цвиттерионные фосфо- липиды (фосфатидилхолин, фосфатидил- этаноламин и их лизопроизводные). После этого системой хлороформ - мё- 5 танол - муравьина кислота (1:2:0,2) вымывают фракцию, содержащую фосфа- тидилсерин. Затем колонку промывают 10 мл системы хлороформ - метанол - вода-(1:2:0,4) дл удалени с колонки остатков муравьиной кислоты и в заключение 30 мл 0,02 М раствора формиата аммони в системе хлороформ - метанол - вода (1:2:0,4). Полученна фракци содержит 0,033 г кардиолипи- на, вькод 99%, чистота 100%.
Пример 6. Выделение кардио- липина из сердечной мышцы крупного рогатого скота.
Раствор суммарных фосфолипидов . сердечной мышцы в системе хлороформ- метанол (1:1), полученньш как описано в примере 4, нанос т на колонку с аминосилохромом 350/80. Объем адсорбента 5 мл.
После нанесени смеси фосфолипидов через колонку пропускают 30 мл системы хлороформ - метанол (1:1) и 30 мл системы хлороформ - метанол
5
0
5
(1:2), Полученные фракции содержат нейтральные и цвиттерионные лнпиды (фосфатидилхолин, фосфатидилэтанол- амин и их лизопроизводные). После этого 30 мл системы хлороформ - метанол - муравьина кислота (1:2:0,2) вымывают фосфатидилсерин. Затем колонку промывают 10 мл системы хлороформ - метанолвода (1:2:0,4) дл удалени с колонки остатков муравьиной кислоты и в заключение 30 мл 0,1 М раствора формиата аммони в системе хлороформ - метанол - вода (1:2:0,4). Полученна фракци содержит 0,033 г кардиолипина, выход 99% от исходного содержани , чистота 100%.
Предлагаемый способ позвол ет выделить из сложньрс сМесей фосфоли- пидов за одну стадию индивидуальные анионные фосфолипиды с выходом 99% и чистотой 100%, тогда как по известному способу выхОД анионных фосфолипидов составл ет 90% от исходного содержани в ткани, чистота 90%.
Claims (1)
- Формула изобрет-ениСпособ вьщелёни анионных фосфолипидов путем хроматографировани экстрактов природного сырь на твердых носител х с использованием дл элюировани систем на основе хлороформа и метанола, отличающий- с тем, что, ,с целью повышени выхода и чистоты продукта, зкстракт, содержащий смесь фосфолипидов, нанос т на колонку с аминрсилохромом или макропористым силикагелем, модифицированным неомицином или L-лизином, а злюацию осуществл ют системой, содержащей хлороформ - метанол - муравьиную кислоту в объемном соотношении 1:2:(0,05-0,2), или системой, содержащей 0,01-1 М раствор формиата аммони в смеси растворителей хлороформ - метанол - вода в объемном соотношении 1:2:0,4.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU853890211A SU1284981A1 (ru) | 1985-03-21 | 1985-03-21 | Способ выделени анионных фосфолипидов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU853890211A SU1284981A1 (ru) | 1985-03-21 | 1985-03-21 | Способ выделени анионных фосфолипидов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1284981A1 true SU1284981A1 (ru) | 1987-01-23 |
Family
ID=21175268
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU853890211A SU1284981A1 (ru) | 1985-03-21 | 1985-03-21 | Способ выделени анионных фосфолипидов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1284981A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109011698A (zh) * | 2018-08-25 | 2018-12-18 | 江苏曼氏生物科技股份有限公司 | 一种硅胶填料分离柱在线清洗及储存方法 |
-
1985
- 1985-03-21 SU SU853890211A patent/SU1284981A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ronser G., Kritchevsky G. et aE. Lipid composition of beef broin, beef liver, and the sea anemone: two approaches to quantitative fractiona- tion of complex Eipid mixtures. - J. Amer. Oil Chemists Soc., 1963, v.40, p. 425-452. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109011698A (zh) * | 2018-08-25 | 2018-12-18 | 江苏曼氏生物科技股份有限公司 | 一种硅胶填料分离柱在线清洗及储存方法 |
| CN109011698B (zh) * | 2018-08-25 | 2020-12-01 | 江苏曼氏生物科技股份有限公司 | 一种硅胶填料分离柱在线清洗及储存方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0922707B2 (en) | A process for the purification of phosphatidylserine | |
| CA2055503C (en) | Process for the preparation of l-.alpha.-glycerylphosphorylcholine and of l-.alpha.-glycerylphosphorylethanolamine | |
| CA1164476A (en) | Process for the separation of oil and/or phosphatidylethanolamine from alcohol soluble phosphatidylcholine products containing the same | |
| KR100262281B1 (ko) | 글리세로포스포리피드의 제조방법 | |
| EP0749693B1 (en) | Method of concentration of acidic phospholipid | |
| EP0689579B1 (en) | Method for extracting sphingomyelin | |
| Schneider et al. | Thyroidal iodide transport VI. On a possible role for iodide-binding phospholipids | |
| SU1284981A1 (ru) | Способ выделени анионных фосфолипидов | |
| Nelson | Studies on the lipids of sheep red blood cells. I. Lipid composition in low and high potassium red cells | |
| Hara et al. | Simple procedures for the rapid cleavage of ester lipids and for the large-scale isolation from brain of cerebroside sulfate | |
| Rathbone et al. | The preparation and properties of lysophosphatidylserine | |
| Misra | Isolation of lysophosphatidylethanolamine from human serum | |
| US4983327A (en) | Process for isolating a phosphatidylcholine free of other phospholipids in the starting material | |
| Tokumura et al. | Chemical and pharmacological properties of vasopressor phospholipid in crude soybean lecithin | |
| SU831129A1 (ru) | Способ получени фосфатидилглицерина | |
| Bieber et al. | Phospholipid patterns of the developing chick embryo | |
| Baer et al. | Synthesis of propylene glycol phospholipids: analogues of α-lecithins and α-cephalins | |
| SU950730A1 (ru) | Способ выделени фосфоинозитида из соевых фосфатидов | |
| Renkonen | Phosphatides of normal human serum | |
| JPH0662648B2 (ja) | 高純度レシチンの製造方法 | |
| Witter et al. | Circular chromatography of phospholipides | |
| JPH01160988A (ja) | ドコサヘキサエノイルジアシルグリセロールの製造法 | |
| Hanahan et al. | Novel route to preparation of high purity lysoplasmenylethanolamine. | |
| Torley et al. | Lipid patterns of edible fungi | |
| Brown | Phospholipids of yeast: I. Improvements in analysis by two-dimensional strip-transfer paper chromatography |