DE69918283T2 - Stabilisierte herpesvirusformulierung - Google Patents

Stabilisierte herpesvirusformulierung Download PDF

Info

Publication number
DE69918283T2
DE69918283T2 DE1999618283 DE69918283T DE69918283T2 DE 69918283 T2 DE69918283 T2 DE 69918283T2 DE 1999618283 DE1999618283 DE 1999618283 DE 69918283 T DE69918283 T DE 69918283T DE 69918283 T2 DE69918283 T2 DE 69918283T2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
composition according
freeze
virus
herpesvirus
drying
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
DE1999618283
Other languages
English (en)
Other versions
DE69918283D1 (de
Inventor
Alison Claire VARLEY
Thomas Peter LOUDON
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Cantab Pharmaceuticals Research Ltd
Original Assignee
Cantab Pharmaceuticals Research Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cantab Pharmaceuticals Research Ltd filed Critical Cantab Pharmaceuticals Research Ltd
Publication of DE69918283D1 publication Critical patent/DE69918283D1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE69918283T2 publication Critical patent/DE69918283T2/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12Viral antigens
    • A61K39/245Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12Viral antigens
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/20Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011Details
    • C12N2710/16011Herpesviridae
    • C12N2710/16611Simplexvirus, e.g. human herpesvirus 1, 2
    • C12N2710/16634Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

  • Diese Erfindung betrifft Präparate von Viren, beispielsweise für Vakzinen oder andere pharmazeutische oder forschungsbezogene Zwecke, ihre Stabilisierung und Verfahren zur Herstellung solche Präparate sowie ihre Verwendung, beispielsweise als Vakzine oder als Virusvektor.
  • Hintergrund der Erfindung und Stand der Technik
  • Das Einfrieren und/oder Gefriertrocknen von lebensfähigen Viruspräparaten für Labor- oder Impfzwecke, um ihre Aktivität zu erhalten, ist bekannt.
  • Zahlreiche Verfahren sind bekannt, um Lebendviruspräparate, wie beispielsweise Herpesviruspräparate, für Vakzinen und andere Zwecke herzustellen.
  • Die US 5.024.836 (91.06.18) (Merck & Co. Inc.: WJ McAleer et al.) beschreibt eine stabile, gefriergetrocknete Lebendherpesvirusvakzine, die etwa 0,5 % bis etwa 8 Feuchtigkeit aufweist, und beansprucht eine gasinjizierte, gefriergetrocknete Lebendvakzine eines attenuierten Varicella-Virus, die 2 % bis 8 % Feuchtigkeit aufweist.
  • Die US 5075110 (91.12.24) und EP 0.353.108 (Institut Merieux: AJ Francon et al.) beschreiben die Stabilisierung von attenuierten gefriergetrockneten Vakzinen mit Amid- oder Thioamid-Gefriertrocknungsexzipienten, wie beispielsweise Harnstoff.
  • Die EP 0.048.194 (Merck & Co. Inc.: MR Hilleman et al.) beschreibt Gefriertrocknungsverfahren, bei denen die Gefriertrocknungsdauer und -kosten durch Einfrieren der äußeren Hülle einer Flüssigvakzine vor der Gefriertrocknung verringert werden, indem die Phiole liegend in einem Flüssigkeitsbad rotiert wird, das auf einer Temperatur unter dem eutektischen Punkt der Vakzine gehalten wird.
  • Die US 4.338.335 (82.07.06) und EP 0.028.563 (Merck & Co. Inc.: WJ McAlleer et al.) beschreiben Stabilisatoren für Flüssigvakzinen und stabilisierte, flüssige Lebendvirusvakzinen, die ein lebendes Virus, teilweise hydrolysierte Gelatine, ein Monosaccharid oder Disaccharid, ein Zellkulturmedium, L-Glutaminsäure, L-Arginin und einen Puffer zur Beibehaltung eines pH von etwa 6,0 bis etwa 6,5 enthalten.
  • Die EP 0.008.255 (Merck & Co. Inc.: WJ McAleer et al.) beschreibt eine Herpesvirusvakzine und ihre Herstellung, insbesondere eine Vakzine gegen die Mareksche Krankheit. Das Virus wird in Gegenwart eines pH-geregelten gepufferten Stabilisators gefriergetrocknet, sodass die Vakzine mit destilliertem Wasser wiederhergestellt werden kann.
  • Die EP 0.295.043 (88.12.14) (Kitasato Institute: S Makino et al.) beschreibt eine stabilisierte attenuierte Lebendvakzine, die zumindest einen lebenden attenuierten einfaches Virus, das aus Masern-, Mumps- oder Rötelnviren ausgewählt ist, und als Stabilisator Lactose, Saccharose, D-Sorbit, Natriumglutamat und Gelatinehydrolysat umfasst.
  • Die EP 0.252.059 (Smithkline Biologicals S.A.: E D'Hondt) beschreibt Stabilisatoren für attenuierte Vakzinen, die Lactose, Sorbit, Dextran, Caseinhydrolysat, L-Glutamat, EDTA und einen Puffer mit einem pH von 6,7–7,2 enthalten.
  • Die WO 96/29.096 (Hisamitsu Pharmaceutical Co., Inc.: H Kuma et al.) beschreibt die Herstellung von Gentransferpräparaten durch Gefriertrocknen eines Gemischs aus einem rekombinanten Virusvektor mit zumindest einem Additiv, ausgewählt aus Arginin, Glutaminsäure (oder einem Natriumsalz davon), Serin, Glucose, Inosit, Lactose, Mannit, Sorbit, Trehalose und Xylose.
  • Die US 4.985.244 (91.01.15) (Kitasato Institute: S Makino et al.) beschreibt eine stabilisierte, attenuierte Lebendvakzine mit verbesserter Wärmestabilität, die einfache lebende attenuierte Masern-, Mumps- oder Rötelnvirenvakzinen umfassen, die in ei nem Medium-199 als Zellkultur gezüchtet wurden, oder eine kombinierte attenuierte Lebendvakzine, die mit Lactose, Saccharose, D-Sorbit, Natriumglutamat und Gelatinehydrolysat stabilisiert ist.
  • Die US 4.622.222 (86.11.11) (Phylaxia Oltoanyagtermelo Vallalat: E Horvth et al.) beschreibt eine gefriergetrocknete Vakzine gegen das Enten-Hepatitisvirus unter Verwendung eines attenuierten Virus sowie ihre Herstellung unter Verwendung von infizierten Entenembryos, einschließlich das Gefriertrocknens des sterilen Virusmaterials mit Kollidon, Gelatine, Glucose und Saccharose.
  • Die US 4.500.512 (85.02.19) (Institut Pasteur: M Barme) beschreibt stabilisierte Vakzinen, die Lebendviren enthalten, insbesondere für das Gelbfiebervirus, und Stabilisatoren, die Phosphatpuffer, Calcium- und Magnesiumionen, Lactose, Sorbit und Aminosäure, ausgewählt aus Histidin, Alanin, Valin, Threonin, Arginin, Methionin, Hydroxyprolin, Lysin, Isoleucin, Phenlyalanin, Serin, vorzugsweise Histidin und Alanin, enthalten. Die stabilisierte Vakzine ist gefriergetrocknet.
  • Die US 3.985.615 (Osaka Res Foundation: T Kubo et al.) beschreibt die Herstellung von lebenden, attenuierten Varicella-Viren zur Verwendung als Vakzine durch Kultivierung, welche eine Passage in primären Embryonengewebezellen von Meerschweinchen umfasst. Die US 5.024.836 (Merck: WJ McAleer et al.) betrifft die Herstellung von gefriergetrockneten Vakzinepräparaten, die darauf basieren.
  • Die US 5.792.643 (97.03.28) und WO 95/10.601 (Viagene SM Hermann et al.) offenbaren die Konservierung von infektiösen rekombinanten Viren unter Verwendung eines Saccharids, eines Struktur-Additivs mit hohem Molekulargewicht, eines Puffer und von Wasser, wobei das Gemisch auf unter den eutektischen Punkt oder die Glastemperatur abgekühlt wird und Wasser durch Sublimation auf weniger als 10 % Wassergehalt verringert wird.
  • Die WO 93/18.790 (LK Csatary) beschreibt gefriergetrocknete Virusvakzinen (z.B. eine MDV-Vakzine) mit modifizierter Stärke, wie beispielsweise Hydroxyethylstärke mit einem Molekulargewicht von 100.000 – 300.000, die vor der Gefriertrocknung als Schutzkolloid zugesetzt wird.
  • Die JP 06.234.659 (94.08.23) (ZH Handai Biseibutsubyo Kenkyukai) offenbart eine stabilisierte Lebendvakzine, die ein attenuiertes oder rekombinantes Lebendvaricellavirus und einen Stabilisator umfasst, der frei von Ca2+-Ionen und Mg2+-Ionen ist, vorzugsweise mit Gelatine oder einem Gelatinehydrolysat oder einem Chelatbildner, wie z.B. EDTA.
  • Die EP 0.290.197 (88.11.09) (Merck & Co. Inc.: RZ Maigetter et al.) offenbart eine stabile gasinjizierte gefriergetrocknete Lebendherpesvirusvakzine, die 0,5 – 8 % Feuchtigkeit aufweist, was eine Lagerung eher bei herkömmlichen Kühlschrankbedingungen, d.h. 5 °C, als bei Gefrierbedingungen (-20 °C) ermöglicht. Die Gasinjektion während des primären Zyklus des Gefriertrocknungsvorgangs und das Trocknen mit höheren Feuchtigkeitswerten verringert die Gefriertrocknungsdauer, typischerweise auf 7 – 11 h für den primären und sekundären Zyklus zusammen.
  • Die DD-209.738 (Cent Cerc Bioprep: IV Patrascu) offenbart die Herstellung einer Herpesvirusvakzine gegen die Mareksche Krankheit durch (a) Kultivieren von Embryozellen auf Dextran-Mikrokügelchen); (b) Inokulieren der Kultur bei 80 % Konfluenz mit dem Truthahn-Herpesvirusstamm FC-126; (c) Gewinnen der infizierten Zellen in einem SPGA-Medium (Saccharose, Phosphat, Glutamat, Rinderalbuminfraktion V), wenn die zytopathische Wirkung 80 % erreicht; (d) Pulsen und Zentrifugieren, um eine erste Ernte der Vakzine zu gewinnen; (e) Resuspendieren des Niederschlags in einem SPGA-Medium und Wiederholen des Schritts (d), um eine zweite Vakzineernte zu erhalten (um die Vakzineausbeute zu erhöhen); (f) Einfrieren der vereinigten Vakzinen bei -100 °C, bevor der Virustiter bestimmt wird; und (g) Verdünnen mit einem SPGA-Medium und Gefriertrocknen.
  • Die JP 06.234.659-A (ZH Handai Biseibutsubyo Kenkyukai) beschreibt in einem Beispiel die Herstellung einer Herpesvirusvakzine auf menschlichen diploiden Fibroblasten-MRC-5-Zellen, die in einem MEM-Medium bei 37 °C kultiviert wurden; umfassend das Inokulieren eines Oka-Stamm-Varicella-Virus-Einsaat-Virus bei einem MOI von 0,03 in MRC-5-Zellen und 2 Tage langes Kultivieren bei 37 °C. Das Virus wird dann in einer Lösung suspendiert, die NaCl, KCl, Na2HPO4, KH2PO4, Saccharose, L-Glutamat, Gelatine, Gelatinehydrolysat und EDA-3Na enthält.
  • Die EP 0.573.107 , US 5.360.736 und US 5.607.852 (Merck: PA Friedman et al.) beschreiben Verfahren zur Herstellung einer attenuierten Varicella-Zoster-Virusvakzine.
  • Die WO 98/28.000 (Merck & Co., Inc., Rahway, NJ, US: DB Volkin et al.) beschreibt Vakzineformulierungen (z.B. Masern, Mumps, Röteln, VZV oder Herpes simplex), die Polyalkohol mit 6 Kohlenstoffen, Disaccharid und einen Puffer umfassen.
  • Die US 3.915.794 (Recherche et Industrie Therapeutique, Belgien: Z Nathan und J Petermans) beschreibt stabile Viruspräparate, die ein Herpesvirus der Gruppe B (z.B. Truthahn-Herpesvirus) und eine gepufferte wässrige Lösung pH 6,5 – 7,5 umfassen, die Polyvinylpyrrolidon, Zucker, Glutamat und einen Chelatbildner enthalten.
  • Die US 4.147.772 (79.04.03) (Merck & Co. Inc.: WJ McAleer et al.) beschreibt eine gefriergetrocknete Vakzine mit einem pH zwischen etwa 6,0 und 6,5, die ein Lebendvirus, teilweise hydrolysierte Gelatine (Molekulargewicht etwa 3.000), einen Polyalkohol mit 6 Kohlenstoffen, ein Zellkulturmedium und einen sauren Puffer umfasst.
  • Die US 5.665.362 und WO 92/05.263 (Cantab Pharmaceuticals Research Ltd.: SC Inglis et al.) und US 5.837.261 und WO 94/21.807 (Cantab Pharmaceuticals Research: Inglis et al.) und darin zitierte Dokumente beschreiben den Stand der Technik in Bezug auf gentechnisch inaktivierte infektiöse Herpesviren, wie beispielsweise das Herpes-simplex-Virus, z.B. zu Impfzwecken und zur Bereitstellung von rekombinanten Zellen, und Kultivierungsverfahren zu ihrer Herstellung. Andere Offenbarun gen eines gentechnisch inaktivierten Herpesvirus und von Zellen zu seiner Herstellung sind ebenfalls im Stand der Technik enthalten, wobei weiter unten auf einige davon Bezug genommen wird.
  • Die Bereitstellung von weiteren Formen stabilisierter Viruspräparate, beispielsweise zu Impfzwecken, bleibt wünschenswert.
  • Die vorliegende Erfindung
  • Gemäß vorliegender Erfindung wird eine stabilisierte, getrocknete pharmazeutische Zusammensetzung bereitgestellt, umfassend ein Virus, das in einer wässrigen Flüssigkeit zur Injektion dispergierbar ist und Folgendes umfasst: ein infektiöses, gentechnisch inaktiviertes Herpesvirus als aktive Vakzinekomponente; pflanzliches Pepton; einen Puffer; und Saccharid oder Zuckeralkohol oder ein anderes Mono- oder Oligosaccharid oder Derivat davon, z.B. Lactose oder Sorbit. Die Zusammensetzung kann gegebenenfalls auch Dextran oder ein anderes Polysaccharid mit einem Molekulargewicht über etwa 5.000 enthalten, das, falls gewünscht, das pflanzliche Pepton ersetzen kann. Optionale weitere Bestandteile können eine weitere Aminosäure, z.B. zweibasige Aminosäuren, wie z.B. Natrium-L-glutamat oder -L-Aspartat, oder ein Gemisch von Aminosäuren umfassen. Zu den weiteren Bestandteilen, die gegebenenfalls geeignet sind, gehören jene, die in den oben genannten Dokumenten über den Stand der Technik angeführt sind, vorzugsweise solche pflanzlichen oder mineralischen Ursprungs.
  • In bestimmten Beispielen können die stabilisierten, getrockneten pharmazeutischen Zusammensetzungen (i) ein infektiöses, gentechnisch inaktiviertes Herpesvirus als aktive Komponente, beispielsweise zur Verwendung als Vakzine oder als Virusvektor, z.B. für eine Gentherapie, vorzugsweise HSV oder Varicella-Zoster-Virus, (ii) ein Polysaccharid mit einem Molekulargewicht von über etwa 5.000, vorzugsweise etwa 11.000 bis etwa 40.000, und weniger als 70.000, wie beispielsweise Dextran, und/oder eine Quelle gemischter Aminosäuren pflanzlichen oder bakteriellen Ur sprungs, wie beispielsweise pflanzliches Pepton, z.B. Pepton, das durch enzymatische Hydrolyse von Sojabohnenprotein hergestellt wird, (iii) einen Puffer, beispielsweise Tris-HCl, Bicarbonat, Phosphat und/oder Citrat, und (iv) ein Monosaccharid oder einen Zuckeralkohol, wie beispielsweise Lactose, Saccharose, Trehalose oder Sorbit, enthalten. Bestimmte Beispiele können eines, nicht aber beide der oben genannten Polysaccharidkomponenten und der Quelle gemischter Aminosäuren enthalten. Neben den oben genannten Komponenten kann die Zusammensetzung auch zusätzliche Bestandteile enthalten, die weitere Aminosäuren, wie beispielsweise zweibasige Aminosäuren, wie z.B. Natrium-L-glutamat oder -L-Aspartat, oder ein Gemisch von Aminosäuren umfassen. Beispiele für zusätzliche Bestandteile, die geeignete Komponenten der Zusammensetzungen gemäß vorliegender Erfindung darstellen können, sind jene, die in den oben genannten Dokumenten des Stands der Technik angeführt sind, insbesondere Beispiele pflanzlichen oder mineralischen Ursprungs.
  • Zusammensetzungen gemäß vorliegender Erfindung umfassen Beispiele, die frei von Protein sind (mit Ausnahme der proteinbildenden Teile der aktiven Vakzinekomponente), insbesondere frei von Gelatine oder anderem tierischem Protein oder seinem Hydrolysat oder anderem Material tierischen Ursprungs. Umfassen die Zusammensetzungen eine Quelle gemischter Aminosäuren, wie beispielsweise tierisches Pepton, können sie frei von Materialien mit einem Molekulargewicht von über etwa 2.000 sein, beispielsweise frei von Materialien mit einem Molekulargewicht über etwa 1.500 (mit Ausnahme des materialbildenden Teils der aktiven Vakzinekomponente).
  • Es zeigte sich, dass gefriergetrocknete Zusammensetzungen, wie sie hierin beschrieben sind, am Ende von zweckmäßigen Lagerzeiten bei mäßigen Temperaturen, z.B. über 0 °C, z.B. bei etwa 8 °C, nach dem Gefriertrocknen der Zusammensetzung gute Beibehaltung des Titers aufweisen. Unter bestimmen Testbedingungen behielten die getrockneten Zusammensetzungen ohne Einschränkungen bei 8 °C 16 Wochen oder 52 Wochen lang einen Titer eines infektiösen Virus innerhalb von 0,5 eines Logarithmus des Titers bei, der direkt nach dem Gefriertrocknen vorhanden war, z.B. bei Titern im Bereich von 105 bis 106 pfu/ml in Bezug auf das Flüssigvolumen vor dem Gefriertrocknen.
  • Ein weiterer Aspekt der Erfindung betrifft die Verwendung von pflanzlichem Pepton oder anderen gemischten Aminosäuren pflanzlichen oder bakteriellen Ursprungs, die frei von tierischem Protein oder tierischem Proteinhydrolysat sind, oder anderen Materialien tierischen Ursprungs in Zusammensetzungen zur Stabilisierung eines Virus und bei der Herstellung von getrockneten, stabilisierten Viruszusammensetzungen für eine Vakzine und andere hierin genannte Verwendungen.
  • Pflanzliches Pepton, zur Herstellung von Zusammensetzungen gemäß vorliegender Erfindung geeignet und zur Zeit bevorzugt, kann beispielsweise im Wesentlichen aus einem Präparat bestehen, dass durch hydrolytische Verdauung mit Protease aus reinem, genießbarem, lösungsmittelextrahiertem Sojamehl hergestellt wurde, um ein Produkt mit einem mittleren Molekulargewicht im Bereich von etwa 300 – 400 zu erhalten, das im Wesentlichen frei von Bestandteilen mit höherem Molekulargewicht über etwa 2.000 ist. Ein lösliches Kohlenhydrat pflanzlichen Ursprungs kann auch in solch einem Peptonpräparat vorhanden sein. Alternativ dazu können gemischte Aminosäuren pflanzlichen oder bakteriellen Ursprungs wie oben beschrieben anstelle des Peptons verwendet werden.
  • Zusammensetzungen gemäß vorliegender Erfindung können im Allgemeinen gemäß allgemein bekannten pharmazeutischen Verfahren hergestellt werden, sodass sie annehmbare Standards, beispielsweise in Bezug auf die Sterilität, erreichen.
  • Der Gesamtgehalt von Komponenten im getrockneten Präparat kann so gewählt sein, dass die Zusammensetzung bei ihrer Wiederherstellung mit einer sterilen Flüssigkeit zur Injektion, beispielsweise Wasser zur Injektion oder Salzlösung zur Injektion, verwendet werden kann, um eine Injektion bereitzustellen, die eine annehmbare Annäherung an eine isotonische Konzentration darstellt. Eine exakte isotonische Konzentration stellt etwa 330 mOsm bereit, und in Übereinstimmung mit derzeitigen Praktiken kann es eine annehmbare Annäherung sein, um diese beispielsweise innerhalb eines Bereichs von etwa 100 – 600 mOsm, im Allgemeinen innerhalb etwa 250 – 450 mOsm zu erreichen. "Isotonisch" bezieht sich hierin normalerweise auf solch eine Annäherung.
  • Die Virusdosis in einem gefriergetrockneten Präparat gemäß einem Beispiel der Erfindung kann so gewählt sein, dass in der wiederhergestellten Flüssigkeit zur Injektion eine Dosis von beispielsweise etwa 103 bis etwa 108 pfu des Virus erhalten werden. Ein häufig gewähltes Beispiel für ein Dosisvolumen zur Injektion ist etwa 0,5 ml.
  • Das gefriergetrocknete Präparat kann aus einer flüssigen Zusammensetzung hergestellt werden, die entweder die gleiche Konzentration ihrer Hauptkomponenten aufweist wie die wiederherzustellende Flüssigkeit oder eine höhere oder niedrigere Konzentration aufweist.
  • Der Feuchtigkeitsgehalt des gefriergetrockneten Produkts kann im Bereich von 0,5 bis 15 % und unter etwa 10 %, beispielsweise unter etwa 5 %, beispielsweise bei bis zu etwa 2 % oder darunter, liegen.
  • Außerdem stellt die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung eines stabilisierten, getrockneten pharmazeutischen Präparats aus einer infektiösen, gentechnisch inaktivierten Herpesvirusvakzine, die in einer wässrigen Flüssigkeit zur Injektion dispergierbar ist, bereit, umfassend das Gefriertrocknen einer sterilen, wässrigen Zusammensetzung, die (i) als aktive Vakzinekomponente infektiöses, gentechnisch inaktiviertes Herpesvirus, z.B. ein Herpes-simplex-Virus oder Varicella-Zoster-Virus, (ii) oben genanntes pflanzliches Pepton, (iii) einen Puffer, wie beispielsweise Tris-HCl, Phosphat und/oder Citrat, und (iv) Saccharid oder einen Zuckeralkohol, wie beispielsweise Lactose oder Sorbit, umfasst. Die Zusammensetzung kann gegebenenfalls auch (v) Dextran oder ein anderes Polysaccharid, beispielsweise mit einem Molekulargewicht über 5.000, umfassen, das gegebenenfalls anstelle des pflanzlichen Peptons verwendet werden kann.
  • Das Gefriertrocknen des Produkts kann über einen beliebigen geeigneten Zeitraum gemäß einem herkömmlichen Gefriertrocknungsverfahren durchgeführt werden, beispielsweise bei einer Temperatur unter der Glastemperatur der gefrorenen Flüssigkeit, die gefriergetrocknet werden soll, und das Produkt kann in Form eines festen, getrockneten Kuchens in einer Glasphiole vorliegen, vorzugsweise unter sterilen Bedingungen. Der Gefriertrocknungsvorgang kann allgemein bekannte Verfahrensschritte umfassen, um Zweistufentrocknung durchzuführen, wobei ein erster Schritt des Sublimierens des Wassergehalts bei einer Temperatur von beispielsweise etwa – 40 °C oder darunter stattfindet, wonach die Temperatur der Zusammensetzung auf eine höhere Temperatur erhöht wird, beispielsweise 0 bis +10 °C, wobei das Trocknen zu diesem Zeitpunkt weit genug fortgeschritten ist, dass der durch die teilweise getrocknete Zusammensetzung gebildete Kuchen seine Gestalt bei einer höheren Temperatur beibehalten kann, wobei während und nach solch einer Temperaturerhöhung, immer noch unter reduziertem Druck, eine weitere Menge Wasser entfernt wird. In der Praxis zeigte sich, dass eine Verringerung des Wassergehalts auf einen Wert im Bereich von etwa 2 bis etwa 9 Gew.-% leicht erreicht werden kann und für die Produktstabilität ausreicht.
  • Das Produkt kann je nach Bedarf mit einer sterilen, wässrigen Flüssigkeit, beispielsweise Wasser zur Injektion, rehydratisiert werden.
  • Weiters wird gemäß vorliegender Erfindung ein Verfahren zur Herstellung eines Flüssigpräparats aus einer Virusvakzine zur Injektion bereitgestellt, welches das Dispergieren oder Lösen eines oben spezifizierten sterilen gefriergetrockneten Präparats, z.B. eines stabilisierten, getrockneten pharmazeutischen Präparats eines rekombinanten Herpes-simplex-Virus, in einer wässrigen Flüssigkeit zur Injektion umfasst, um eine flüssige Zusammensetzung mit annähernd isotonischer Konzentration herzustellen.
  • Beispiele für die vorliegende Erfindung sind stabilisierte, getrocknete Präparate von aktivem Herpesvirus, die durch Trocknen von flüssigen, wässrigen Präparaten erhalten werden, die folgende Stabilisatoren enthalten (Gew./Vol.): Disaccharid 2 – 12 %, z.B. Saccharose, Lactose und/oder Trehalose, vorzugsweise zumindest zwei Disaccharide, jeweils zu zumindest 2 %; gegebenenfalls ein Monosaccharid oder einen Monosaccharid-Zuckeralkohol, z.B. 1,5 – 4 % Sorbit; gegebenenfalls 1 – 5 % Dextran; gegebenenfalls 0,05 – 0,7 % Natriumglutamat oder -aspartat; und 1 – 4 % pflanzliches Pepton.
  • Die Zusammensetzungen können außerdem andere Materialien, wie beispielsweise andere Kolloide, die vorhanden waren, vorzugsweise Polysaccharide oder Polysaccharidderivate, wie z.B. Hydroxyethylstärke, umfassen.
  • Das Virus der Formulierungen kann im Allgemeinen ein Lebendvirus, das vorzugsweise attenuiert oder gentechnisch inaktiviert ist, umfassen.
  • Das Virus ist ein infektiöses, gentechnisch inaktiviertes Herpesvirus und kann beispielsweise eines der gentechnisch inaktivierten Viren sein, die in der WO 92/05.263 (Immunology Ltd.: Inglis et al.), in LH Nguyen, D Knipe et al., J. Virol. 66(12), 7067-7072 (Dez. 1992); in der WO 94/01.573 (Akzo: Peeters et al.), in der WO 94/03.595 (Akzo: Visser et al.), in der WO 94/21.807 (Cantab Pharmaceuticals Research Ltd.: Inglis et al.), in der WO 95/18.852 (Harvard College und Dana-Farber Cancer Institute: D Knipe et al.), in der WO 96/04.395 (Lynxvale Ltd.: P Speck) und in der WO 96/26.267 (Cantab Pharmaceuticals Research Ltd.: MEG Boursnell et al.) angeführt sind.
  • Insbesondere nützliche Anwendungen umfassen die Stabilisierung von HSV, beispielsweise HSV-2, z.B. in Form von inaktiviertem HSV-2, wie es beispielsweise in der WO 94/21.807 (Cantab Pharmaceuticals: Inglis et al.) und der WO 96/26.267 (Cantab Pharmaceuticals Research Ltd.: MEG Boursnell et al.) beschrieben ist, beispielsweise in Ausführungsformen, worin das Virus exogenes genetisches Material trägt, das für einen Immunomodulator oder ein heterologes Antigen kodiert. Andere Herpesviren, wie beispielsweise VZV, BHV und PRV, können ebenfalls wie hierin beschrieben formuliert werden.
  • Beispiele für Zusammensetzungen gemäß vorliegender Erfindung können beispielsweise Immunogene und Vakzinen und virale Vektorpräparate für In-vivo- und Ex-vivo-Verwendungen umfassen. Die Zusammensetzungen können auch andere Immunogene als das oben beschriebene Virus enthalten, beispielsweise Immunomodulatoren, wie z.B. Interleukine, z.B. IL-12; und allgemein bekannte Stabilisatoren und Exzipienten, wie sie für eine bestimmte Anwendung wünschenswert sind.
  • Eine Zusammensetzung, wie sie hierin beschrieben ist, kann vor dem Trocknungsschritt durch einen Sterilisationsfilter laufen gelassen werden und steril sein (abgesehen davon, dass sie beispielsweise beliebige gewünschte und beabsichtigte biologische Aktivität aufweisen kann, wie beispielsweise die des Virus selbst).
  • Beispiele für die hierdurch bereitgestellten Zusammensetzungen können frei von Bestandteilen bovinen Ursprungs, und in manchen Fällen auch anderen (oder jeden) tierischen Ursprungs, sein.
  • Hierdurch bereitgestellte Zusammensetzungen können zweckdienliche Stabilität, beispielsweise in Bezug auf den Anteil eines infektiösen Virus, das den Gefriertrocknungsvorgang überlebt, und/oder in Bezug auf die Lagerstabilität des Gefriertrocknungsprodukts über längere Zeiträume, beispielsweise bei Lagerung bei Temperaturen im Bereich von etwa 4 – 10 °C, z.B. etwa 8 °C, aufweisen.
  • Die Erfindung wird durch die nachstehenden Beispiele veranschaulicht, die jedoch keineswegs zu Einschränkung des Schutzumfangs der Erfindung dienen.
  • Beispiel 1
  • Ein Flüssigpräparat eines gentechnisch inaktivierten Herpes-simplex-Virus Typ 2 HSV-2 (siehe Beschreibung der WO 94/21.807, wobei die Erfindung auch für andere Viren anwendbar ist) kann gemäß einem Beispiel der vorliegenden Erfindung gefriergetrocknet werden, indem das Virus in einer wässrigen Flüssigkeit der folgenden Zusammensetzung dispergiert wird (Gew./Vol. in Wasser): 5 % Lactose, 5 % Saccharose, 1,8 % Sorbit, 0,1 % Natriumglutamat, 2 % pflanzliches Pepton, Puffer pH 5,5 – pH 8, vorzugsweise etwa pH 7 (etwa 50 bis 100 mM Tris-HCl, etwa 10 mM Natriumcitrat mit zusätzlichem Natriumchlorid, z.B. bis zu etwa 138 mM, oder 10 mM Natrium- und Kaliumphosphat) und das Produkt auf herkömmliche Weise in herkömmlichen Glasphiolen gefriergetrocknet wird.
  • In Varianten dieses Beispiels kann die Lactose durch Saccharose oder Trehalose ersetzt oder weggelassen werden.
  • Nach etwa 16-wöchiger Lagerung bei 8 °C wiesen bestimmte gemäß diesem Beispiel hergestellte Proben, in denen Phosphatpuffer vorhanden war, einen Titer in pfu/ml (des ursprünglichen Flüssigkeitsvolumens vor dem Gefriertrocknen) innerhalb von 0,5 eines Logarithmus des Titers auf, der direkt nach dem Gefriertrocknen vorhanden war, und besaßen einen Titer im Bereich von 105 bis 106 pfu/ml bezogen auf das Flüssigvolumen vor dem Gefriertrocknen.
  • In einer Variante dieses Beispiel kann Tris-Puffer anstelle von Phosphatpuffer verwendet werden.
  • Beispiel 2
  • Ein gefriergetrocknetes Präparat des gentechnisch inaktivierten HSV-2 des vorangegangenen Beispiels kann wie im vorangegangenen Beispiel hergestellt werden, mit der Ausnahme, dass die Flüssigkeit vor dem Gefriertrocknen neben dem Virus Fol gendes umfasst: 2,5 % Dextran (Molekulargewicht etwa 11.000 bis 40.000 oder mehr, vorzugsweise etwa 11.000), 0,5 % Natriumglutamat, 2,5 % Saccharose und einen Puffer pH 5,5 – pH 8, vorzugsweise etwa pH 7, wie in Beispiel 1 beschrieben.
  • In einer Variante dieses Beispiels umfasst der Puffer ein M-199-Gewebekulturmedium, und nach etwa 52-wöchiger Lagerung bei 8 °C wiesen gemäß diesem Beispiel hergestellte Proben einen Titer in pfu/ml (des ursprünglichen Flüssigkeitsvolumens vor dem Gefriertrocknen) innerhalb von 0,5 eines Logarithmus des Titers auf, der direkt nach dem Gefriertrocknen vorhanden war, und besaßen einen Titer im Bereich von 105 bis 106 pfu/ml bezogen auf das Flüssigvolumen vor dem Gefriertrocknen.
  • In Varianten dieses Beispiel kann Saccharose durch Trehalose ersetzt werden.
  • Nach etwa 54-wöchiger Lagerung bei 8 °C wiesen bestimmte gemäß diesem Beispiel hergestellte Proben, in denen Trehalose vorhanden war, einen Titer in pfu/ml (des ursprünglichen Flüssigkeitsvolumens vor dem Gefriertrocknen) innerhalb von 0,5 eines Logarithmus des Titers auf, der direkt nach dem Gefriertrocknen vorhanden war.
  • Beispiel 3
  • Ein gefriergetrocknetes Präparat eines gentechnisch inaktivierten HSV-2 gemäß Beispiel 1 kann wie in Beispiel 1 hergestellt werden, wobei die Komponenten aus Beispiel 2 verwendet werden, mit der Ausnahme, dass die Dextrankomponente Dextran mit einem Molekulargewicht von etwa 40.000 ist.
  • Nach etwa 54-wöchiger Lagerung bei 8 °C wiesen bestimmte gemäß diesem Beispiel hergestellte Proben einen Titer in pfu/ml (des ursprünglichen Flüssigkeitsvolumens vor dem Gefriertrocknen) innerhalb von 0,5 eines Logarithmus des Titers auf, der direkt nach dem Gefriertrocknen vorhanden war.
  • Beispiel 4
  • Ein gefriergetrocknetes Präparat des gentechnisch inaktivierten HSV-2 aus Beispiel 1 kann wie in Beispiel 1 hergestellt werden, mit der Ausnahme, dass die Flüssigkeit vor dem Gefriertrocknen neben dem Virus Folgendes umfasst: 2,5 % Dextran (Molekulargewicht etwa 11.000), 0,5 % Natriumglutamat, 2,5 % Saccharose und 0,1 M Tris-Puffer, vorzugsweise etwa pH 7,5.
  • In Varianten dieses Beispiel kann das Natriumglutamat weggelassen werden. Dieses Beispiel ist frei von Proteinen, mit Ausnahme aller proteinbildenden Teile der aktiven Vakzinekomponente.
  • Nach etwa 25-wöchiger Lagerung bei 8 °C wiesen bestimmte gemäß diesem Beispiel hergestellte Proben einen Titer in pfu/ml (des ursprünglichen Flüssigkeitsvolumens vor dem Gefriertrocknen) innerhalb von 0,5 eines Logarithmus des Titers auf, der direkt nach dem Gefriertrocknen vorhanden war, und besaßen einen Titer im Bereich von 105 bis 106 pfu/ml bezogen auf das Flüssigvolumen vor dem Gefriertrocknen.
  • Beispiel 5
  • Ein gefriergetrocknetes Präparat des gentechnisch inaktivierten HSV-2 aus Beispiel 1 kann wie in Beispiel 1 hergestellt werden, mit der Ausnahme, dass die Flüssigkeit vor dem Gefriertrocknen neben dem Virus Folgendes umfasst: 2,5 % Dextran (Molekulargewicht etwa 40.000), 0,5 % Natriumglutamat, 5 % Saccharose und 0,05 M Tris-Puffer, vorzugsweise etwa pH 7,5.
  • Dieses Beispiel ist frei von Proteinen, mit Ausnahme aller proteinbildenden Teile der aktiven Vakzinekomponente.
  • Nach etwa 40-wöchiger Lagerung bei 8 °C wiesen bestimmte gemäß diesem Beispiel hergestellte Proben einen Titer in pfu/ml (des ursprünglichen Flüssigkeitsvolumens vor dem Gefriertrocknen) innerhalb von 0,5 eines Logarithmus des Titers auf, der direkt nach dem Gefriertrocknen vorhanden war, und besaßen einen Titer im Bereich von 105 bis 106 pfu/ml bezogen auf das Flüssigvolumen vor dem Gefriertrocknen.
  • Beispiel 6
  • Ein gefriergetrocknetes Präparat des gentechnisch inaktivierten HSV-2 aus Beispiel 1 kann wie in Beispiel 1 hergestellt werden, mit der Ausnahme, dass die Flüssigkeit vor dem Gefriertrocknen neben dem Virus Folgendes umfasst: 2,5 % Dextran (Molekulargewicht etwa 40.000), 0,5 % Natriumglutamat, 2,5 % Saccharose und 0,1 M Tris-Puffer, vorzugsweise etwa pH 7,5.
  • In Varianten dieses Beispiels kann das Natriumglutamat weggelassen werden.
  • Dieses Beispiel ist frei von Proteinen, mit Ausnahme aller proteinbildenden Teile der aktiven Vakzinekomponente.
  • Nach etwa 40-wöchiger Lagerung bei 8 °C wiesen bestimmte gemäß diesem Beispiel hergestellte Proben einen Titer in pfu/ml (des ursprünglichen Flüssigkeitsvolumens vor dem Gefriertrocknen) innerhalb von 0,5 eines Logarithmus des Titers auf, der direkt nach dem Gefriertrocknen vorhanden war.
  • Beispiel 7
  • Ein gefriergetrocknetes Präparat des gentechnisch inaktivierten HSV-2 aus Beispiel 1 kann wie in Beispiel 1 hergestellt werden, mit der Ausnahme, dass die Flüssigkeit vor dem Gefriertrocknen neben dem Virus Folgendes umfasst: 5 % Lactose, 2,5 Saccharose, 1,8 % D-Sorbit, 0,1 % Natriumglutamat, 2 % pflanzliches Pepton und 0,05 M Tris-Puffer, vorzugsweise etwa pH 7,5.
  • In einer Variante dieses Beispiels kann das Natriumglutamat weggelassen werden. Dieses Beispiel ist frei von Proteinen, mit Ausnahme aller proteinbildenden Teile der aktiven Vakzinekomponente.
  • Nach etwa 25-wöchiger Lagerung bei 8 °C wiesen bestimmte gemäß diesem Beispiel hergestellte Proben einen Titer in pfu/ml (des ursprünglichen Flüssigkeitsvolumens vor dem Gefriertrocknen) innerhalb von 0,5 eines Logarithmus des Titers auf, der direkt nach dem Gefriertrocknen vorhanden war.
  • Beispiel 8
  • Ein gefriergetrocknetes Präparat des gentechnisch inaktivierten HSV-2 aus Beispiel 1 kann wie in Beispiel 1 hergestellt werden, mit der Ausnahme, dass die Flüssigkeit vor dem Gefriertrocknen neben dem Virus Folgendes umfasst: 5 % Lactose, 5 % Saccharose, 1,8 % D-Sorbit, 2 % pflanzliches Pepton und 0,1 M Tris-Puffer, vorzugsweise etwa pH 7,5.
  • Dieses Beispiel ist frei von Proteinen, mit Ausnahme aller proteinbildenden Teile der aktiven Vakzinekomponente.
  • Nach etwa 25-wöchiger Lagerung bei 8 °C wiesen bestimmte gemäß diesem Beispiel hergestellte Proben, bei denen Natriumglutamat weggelassen und das Gelatinehydrolysat durch pflanzliches Pepton ersetzt wurde, einen Titer in pfu/ml (des ursprünglichen Flüssigkeitsvolumens vor dem Gefriertrocknen) innerhalb von 0,5 eines Logarithmus des Titers auf, der direkt nach dem Gefriertrocknen vorhanden war.
  • Beispiele für Zusammensetzungen gemäß vorliegender Erfindung können geeigneterweise unter Verwendung von herkömmlichen Verfahren gefriergetrocknet werden, die auf dem Gebiet des Gefriertrocknens von biologischem Material allgemein bekannt sind.
  • Beispielsweise kann das folgende Gefriertrocknungsverfahren in Zusammenhang mit Zusammensetzungen gemäß vorliegender Erfindung, beispielsweise gemäß den oben genannten Beispielen, verwendet werden, das nachstehend erläutert ist und keineswegs zur Einschränkung des Schutzumfangs der vorliegenden Erfindung dient.
  • Eine Viruszusammensetzung zum Gefriertrocknen, wie es hierin beschrieben ist, wird zuerst 2 Stunden lang bei -60 °C gefroren und dann unter Verwendung des folgenden Trocknungsverfahrens unter reduziertem Druck von 100 Mtorr getrocknet:
    Die Temperatur der Zusammensetzung wird über einen Zeitraum von einer Stunde nach und nach auf -42 °C erhöht und weitere 60 Stunden lang bei diesem Wert gehalten. Dann wird die Temperatur über einen Zeitraum von 5 Stunden auf +5 °C erhöht und etwa weitere 7 Stunden lang bei diesem Wert gehalten. Schließlich wird die Temperatur über einen Zeitraum von einer Stunde auf +10 °C erhöht und etwa weitere 7 Stunden bei diesem Wert gehalten.
  • Ein alternatives und manchmal bevorzugtes Trocknungsverfahren sieht wie folgt aus: Die Zusammensetzung wird gefroren, indem ihre Temperatur über einen Zeitraum von einer Stunden auf -40 °C gesenkt und weitere 2 Stunden bei diesem Wert gehalten wird. Die Zusammensetzung kann dann einem Schritt unterzogen werden, der dazu dient, eine Vergrößerung von Eiskristallen herbeizuführen: Die Temperatur wird über einen Zeitraum von etwa 45 min auf -15 °C erhöht und weitere 2 Stunden bei diesem Wert gehalten. Dann kann die Temperatur über einen Zeitraum von 25 min wieder auf -40 °C gesenkt werden, wonach die Zusammensetzung unter reduziertem Druck von 50 Mtorr unter Verwendung des folgenden Trocknungsverfahrens getrocknet werden kann. Die Temperatur wird 2 Stunden lang bei -40 °C gehalten, dann über einen Zeitraum von 45 min auf -15 °C erhöht und eine weitere Stunde bei die sem Wert gehalten. Dann wird die Temperatur über einen Zeitraum von einer Stunde auf -35 ° gesenkt und weitere 32 Stunden bei diesem Wert gehalten. Dann kann die Temperatur auf über einen Zeitraum von 3 Stunden +5 °C erhöht und weitere 8 Stunden auf diesem Wert gehalten werden.
  • In einer Variante dieses Beispiels kann die Temperatur nach dem Frieren der Zusammensetzung anstelle von auf -15 °C auf 0 °C erhöht werden.

Claims (17)

  1. Stabilisierte, getrocknete pharmazeutische Zusammensetzung, die in einer wässrigen Flüssigkeit zur Injektion dispergierbar ist und die Folgendes umfasst: (i) infektiöses, genetisch inaktives Herpesvirus, (ii) zumindest eines aus (a) einem Polysaccharid oder Polysaccharid-Derivat, das ein Molekulargewicht von über etwa 5.000 aufweist, und (b) einer Quelle gemischter Aminosäuren pflanzlichen oder bakteriellen Ursprungs, (iii) einen Puffer und (iv) ein Monosaccharid, Oligosaccharid oder Derivat davon.
  2. Zusammensetzung nach Anspruch 1, die zusätzlich zumindest eine Aminosäure oder ein Aminosäuresalz enthält, beispielsweise L-Glutamat oder L-Aspartat.
  3. Zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, die ein Polysaccharid oder Polysaccharid-Derivat mit einem Molekulargewicht von über etwa 5.000 enthält.
  4. Zusammensetzung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, die frei von tierischem Protein ist.
  5. Zusammensetzung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, die frei von Protein (mit Ausnahme des Protein-bildenden Teils des Herpesvirus) ist.
  6. Zusammensetzung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, die ein Disaccharid, beispielsweise Lactose, Saccharose oder Trehalose, enthält.
  7. Zusammensetzung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, die (i) infektiöses, genetisch inaktives Herpesvirus, (ii) Dextran, (iii) Puffer, (iv) Natriumglutamat und (v) Saccharose umfasst.
  8. Zusammensetzung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, die ein Monosaccharid oder Monosaccharid-Derivat, beispielsweise Sorbit, enthält.
  9. Zusammensetzung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, die pflanzliches Pepton enthält.
  10. Zusammensetzung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, die Dextran mit einem Molekulargewicht im Bereich von etwa 5.000 bis etwa 70.000 enthält.
  11. Zusammensetzung nach einem der vorangegangenen Ansprüche, worin der Puffer ein Tris- oder ein Phosphat-Puffer ist.
  12. Injizierbares pharmazeutisches Flüssigpräparat, das durch Dispergieren einer stabilisierten, getrockneten Zusammensetzung nach einem der vorangegangenen Ansprüche in steriler Flüssigkeit zur Injektion, beispielsweise Wasser oder Kochsalzlösung, hergestellt worden ist.
  13. Pharmazeutisch Zusammensetzung nach einem der vorangegangenen Ansprüche zur Verwendung als Impfstoff.
  14. Verfahren zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung, welches das Lyophilisieren einer wässrigen Flüssigkeit umfasst, die (i) infektiöses, genetisch inaktives Herpesvirus, (ii) ein Polysaccharid oder Polysaccharid-Derivat mit einem Molekulargewicht von über etwa 5.000 und/oder eine Quelle von gemischten Aminosäuren pflanzlichen oder bakteriellen Ursprungs, (iii) einen Puffer und (iv) ein Monosaccharid, Oligosaccharid oder Derivat davon umfasst.
  15. Verfahren nach Anspruch 1, worin die wässrige Flüssigkeit ein Disaccharid in einer Konzentration von 2 bis 12 % (Gew./Vol.) umfasst.
  16. Verfahren nach Anspruch 14, worin die wässrige Flüssigkeit pflanzliches Pepton in einer Konzentration im Bereich von etwa 1 bis etwa 4 % (Gew./Vol.) umfasst.
  17. Verfahren nach Anspruch 14, worin die wässrige Flüssigkeit Dextran in einer Konzentration von 1 bis 5 % (Gew./Vol.) umfasst.
DE1999618283 1998-04-24 1999-04-26 Stabilisierte herpesvirusformulierung Expired - Fee Related DE69918283T2 (de)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB9808922A GB9808922D0 (en) 1998-04-24 1998-04-24 Virus preparations
GB9808922 1998-04-24
PCT/GB1999/001295 WO1999055348A2 (en) 1998-04-24 1999-04-26 Stabilised virus preparation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE69918283D1 DE69918283D1 (de) 2004-07-29
DE69918283T2 true DE69918283T2 (de) 2005-07-21

Family

ID=10831020

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE1999618283 Expired - Fee Related DE69918283T2 (de) 1998-04-24 1999-04-26 Stabilisierte herpesvirusformulierung

Country Status (12)

Country Link
US (1) US6258362B1 (de)
EP (1) EP1071438B1 (de)
JP (1) JP2002512970A (de)
AT (1) ATE269712T1 (de)
AU (1) AU3718299A (de)
CA (1) CA2329000C (de)
DE (1) DE69918283T2 (de)
DK (1) DK1071438T3 (de)
ES (1) ES2224646T3 (de)
GB (1) GB9808922D0 (de)
PT (1) PT1071438E (de)
WO (1) WO1999055348A2 (de)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19803453A1 (de) * 1998-01-30 1999-08-12 Boehringer Ingelheim Int Vakzine
WO2002009749A2 (en) * 2000-07-31 2002-02-07 Aventis Pasteur Limited Respiratory syncytial virus vaccine
US7101693B2 (en) 2001-09-07 2006-09-05 Brigham Young University Plasticized hydrophilic glasses for improved stabilization of biological agents
WO2003053463A2 (en) * 2001-12-10 2003-07-03 Bavarian Nordic A/S Poxvirus-containing compositions and process for their preparation
AU2008201215B2 (en) * 2001-12-10 2010-11-18 Bavarian Nordic A/S Poxvirus containing formulations and process for preparing stable, poxvirus containing compositions
ITMI20021040A1 (it) * 2002-05-16 2003-11-17 Novuspharma Spa Composizioni farmaceutiche iniettabili di un derivato antracenedionico ad attivita' antitumorale
US7592171B2 (en) * 2003-02-20 2009-09-22 Centro Nacional De Investigaciones Cientificas (Cnic) Vibrio cholerae with improved biological safety features in freeze dried form
WO2005071067A2 (en) * 2004-01-15 2005-08-04 Intervet International B.V. Non-animal origin stabilizers and processes for producing the same
WO2006012092A2 (en) * 2004-06-29 2006-02-02 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Safer attenuated virus vaccines with missing or diminished latency of infection
EP1807511B1 (de) * 2004-11-05 2017-01-04 Wellstat Biologics Corporation Stabile und filterbare eingehüllte virusformulierungen
US20060141483A1 (en) * 2004-12-23 2006-06-29 Calton Gary J Stabilization of viral compositions
AU2006278654A1 (en) * 2005-08-04 2007-02-15 Wyeth Stabilizers for veterinary vaccines
US8968721B2 (en) 2005-12-28 2015-03-03 Advanced Bionutrition Corporation Delivery vehicle for probiotic bacteria comprising a dry matrix of polysaccharides, saccharides and polyols in a glass form and methods of making same
EP1973406B1 (de) 2005-12-28 2014-03-12 Advanced Bionutrition Corporation Abgabekonstituens für probiotische bakterien umfassend eine trockene matrix aus polysacchariden, sacchariden und polyolen in glasform
WO2008079539A2 (en) 2006-11-09 2008-07-03 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Recombinant herpesvirus with diminished latency and methods of using same
US8460726B2 (en) 2006-12-18 2013-06-11 Advanced Bionutrition Corporation Dry food product containing live probiotic
US20080294361A1 (en) * 2007-05-24 2008-11-27 Popp Shane M Intelligent execution system for the monitoring and execution of vaccine manufacturing
JP5969731B2 (ja) * 2008-10-17 2016-08-17 国立大学法人東京海洋大学 鮮度測定用試薬キット
WO2010111565A2 (en) 2009-03-27 2010-09-30 Advanced Bionutrition Corporation Microparticulated vaccines for the oral or nasal vaccination and boostering of animals including fish
CN106987525B (zh) 2009-05-26 2020-10-27 先进生物营养公司 包含生物活性微生物和/或生物活性材料的稳定干粉组合物及其制造方法
US9504750B2 (en) 2010-01-28 2016-11-29 Advanced Bionutrition Corporation Stabilizing composition for biological materials
SG182317A1 (en) 2010-01-28 2012-08-30 Advanced Bionutrition Corp Dry glassy composition comprising a bioactive material
EP2603100B1 (de) 2010-08-13 2018-04-25 Advanced BioNutrition Corp. Stabilisierende zusammensetzung für biologische materialien zum zweck von deren trockenlagerung
CN101972474B (zh) * 2010-11-11 2012-06-27 长春祈健生物制品有限公司 冻干带状疱疹减毒活疫苗及制备方法
KR102023207B1 (ko) * 2010-12-02 2019-11-25 온콜리틱스 바이오테크 인코포레이티드 동결건조 바이러스 제형
EA201390810A1 (ru) 2010-12-02 2013-09-30 Онколитикс Байотек Инк. Жидкие вирусные составы
EP2802649B1 (de) 2012-01-09 2017-08-09 Sanofi Pasteur Biologics, LLC Aufreinigung von herpesvirus
WO2013177172A2 (en) 2012-05-21 2013-11-28 Sanofi Pasteur Limited Herpesvirus compositions and related methods
FR3024780B1 (fr) * 2014-08-07 2018-11-30 Bertin Pharma Reactif pret a l'emploi
WO2017019273A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Advanced Bionutrition Corporation Stable dry probiotic compositions for special dietary uses
GB201701239D0 (en) * 2017-01-25 2017-03-08 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novel formulation
US20220193222A1 (en) * 2018-11-30 2022-06-23 Vaccine Stabilization Institute Viral formulations containing amino acids

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE209738C (de)
GB960850A (en) * 1961-09-08 1964-06-17 Wellcome Found Measles virus vaccine
JPS4848621A (de) * 1971-10-20 1973-07-10
JPS4868730A (de) * 1971-12-21 1973-09-19
US3915794A (en) * 1973-02-09 1975-10-28 Rit Rech Ind Therapeut Stabilizing compositions for cell-free viruses and cell-free virus preparations containing them
JPS5648488B2 (de) * 1973-06-06 1981-11-16
JPS5341202B2 (de) * 1974-03-12 1978-11-01
US4147772A (en) * 1976-02-03 1979-04-03 Merck & Co., Inc. Vaccine stabilizer
AU532186B2 (en) * 1978-07-21 1983-09-22 Merck & Co., Inc. Herpes virus vaccine
PT71926B (en) * 1979-10-29 1982-03-31 Merck & Co Inc Process for preparing a liquid vaccine comprising a stabilizer
US4338335A (en) * 1980-02-05 1982-07-06 Merck & Co., Inc. Vaccine stabilizer containing L-glutamic acid and L-arginine
JPS5775929A (en) * 1980-08-28 1982-05-12 Merck & Co Inc Freeze drying method
FR2505657A1 (fr) * 1981-05-13 1982-11-19 Pasteur Institut Perfectionnements apportes aux agents de stabilisation de virus vivants pour la preparation de vaccins, et vaccins stabilises contenant lesdits agents de stabilisation
HU183765B (en) * 1981-12-23 1984-05-28 Phylaxia Oltoanyagtermeloe Process for producing lyophilized vaccine against duck hepatitis
DK331087A (da) 1986-06-30 1987-12-31 Smith Kline Rit Stabilisator for levende vaccine
JPS63230851A (ja) * 1987-03-20 1988-09-27 Sumitomo Metal Ind Ltd 耐食性に優れた油井管用低合金鋼
IL86180A (en) 1987-05-04 1992-08-18 Merck & Co Inc Stable lyophilized live herpes virus vaccine and such a vaccine combined with other virus vaccines
US5024836A (en) * 1987-05-04 1991-06-18 Merck & Co., Inc. Stable lyophilized live herpes virus vaccine
JPS63307827A (ja) * 1987-06-08 1988-12-15 Kitasato Inst:The 安定化された生ウイルスワクチンおよびその製造法
JP2779447B2 (ja) * 1988-03-20 1998-07-23 財団法人阪大微生物病研究会 弱毒マレック病ウイルス・ベクターを用いる組換え遺伝子作成法、及び該ウイルスの組換え体
DD299213A7 (de) * 1988-05-04 1992-04-09 Saechsische Landesgewerbefoerderungsgesellschaft M.B.H.,De Verfahren zur stabilisierung eines lebendvirusimpfstoffes gegen temperatureinwirkung
FR2633518B1 (fr) * 1988-06-30 1991-03-22 Merieux Inst Procede de stabilisation des vaccins et associations de vaccins a virus attenues conserves sous forme lyophilisee, et compositions obtenues
US5665362A (en) * 1990-09-25 1997-09-09 Cantab Pharmaceuticals Research Limited Viral vaccines
BR9106879A (pt) 1990-09-25 1993-07-20 Cantab Pharma Res Virus mutuante nao retroviral,uso do mesmo,vacina e processo de manufaturar umvirus mutante
US5837261A (en) * 1990-09-25 1998-11-17 Cantab Pharmaceuticals Research Limited Viral vaccines
AU673827B2 (en) 1992-03-24 1996-11-28 United Cancer Research Institute Vaccine containing live virus for therapy of viral diseases and malignancies
JPH06234659A (ja) 1992-05-05 1994-08-23 Handai Biseibutsubiyou Kenkyukai 安定化生ワクチン
SK279387B6 (sk) * 1992-06-04 1998-10-07 Merck & Co. Spôsob výroby živej atenuovanej bezbunkovej vakcín
US5360736A (en) * 1992-06-04 1994-11-01 Merck & Co., Inc. Process for attenuated varicella zoster virus vaccine production
WO1994021807A2 (en) 1993-03-19 1994-09-29 Cantab Pharmaceuticals Research Limited Defective mutant non-retroviral virus (e.g. hsv) as vaccine
CA2158935A1 (en) * 1993-10-12 1995-04-20 Chiron Viagene, Inc. Methods for preserving recombinant viruses
WO1996029096A1 (fr) 1995-03-17 1996-09-26 Hisamitsu Pharmaceutical Co., Inc. Preparation de transfert genique
JP2000507963A (ja) 1996-12-20 2000-06-27 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド 凍結乾燥ワクチン用安定剤

Also Published As

Publication number Publication date
EP1071438B1 (de) 2004-06-23
PT1071438E (pt) 2004-11-30
ES2224646T3 (es) 2005-03-01
JP2002512970A (ja) 2002-05-08
DK1071438T3 (da) 2004-10-25
CA2329000C (en) 2010-03-23
DE69918283D1 (de) 2004-07-29
CA2329000A1 (en) 1999-11-04
ATE269712T1 (de) 2004-07-15
AU3718299A (en) 1999-11-16
GB9808922D0 (en) 1998-06-24
WO1999055348A2 (en) 1999-11-04
WO1999055348A3 (en) 1999-12-16
EP1071438A2 (de) 2001-01-31
US6258362B1 (en) 2001-07-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69918283T2 (de) Stabilisierte herpesvirusformulierung
US6210683B1 (en) Stabilizers containing recombinant human serum albumin for live virus vaccines
DE69634960T2 (de) Stabilisatoren für lebendimpfstoffe
DE69929612T2 (de) Purifikation von viruspräparaten
US20080241187A1 (en) Stabilization of viral compositions
Ammar et al. Assembly and accumulation sites of maize mosaic virus in its planthopper vector
JPS6314729A (ja) 生ワクチン用改良安定剤、その製造法およびそれを含有するワクチン
DE69824856T2 (de) Rückgewinnung von viren aus zellkulturen durch verwendung einer hypertonischen salzlösung
CH423095A (de) Verfahren zur Herstellung eines Tollwutimpfstoffes
CN111961592B (zh) 一种rna病毒保存液及其制备方法和应用
WO2021020446A1 (ja) 単純ヘルペスウイルスを含む組成物
MXPA00010295A (es) Preparacion viral estabilizada
JP2008525023A (ja) ウイルス製剤及びその製造方法
DE2816349C2 (de)
AU780112B2 (en) Recovery of virus from cell culture using a hypertonic salt solution
CN1307480A (zh) 提高生育力的组合物及其应用
DE2158293B2 (de) Lebende Herpes-Viren der Gruppe B enthaltende Vaccine und Verfahren zu ihrer Herstellung
US20030139468A1 (en) Amiodarone solutions suitable for intravenous administration
CN117679377A (zh) 无动物源性蛋白成分的疫苗冻干保护剂及其应用
CH639853A5 (en) Stabilised vaccine and process for its preparation

Legal Events

Date Code Title Description
8364 No opposition during term of opposition
8339 Ceased/non-payment of the annual fee