DE69708059T2

DE69708059T2 - Thiophenopyrimidine

Info

Publication number: DE69708059T2
Application number: DE69708059T
Authority: DE
Inventors: Chen Chen; James R. Mccarthy; Terence J. Moran; Thomas R. Webb
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV; Neurocrine Biosciences Inc
Current assignee: Neurocrine Biosciences Inc
Priority date: 1996-02-07
Filing date: 1997-01-30
Publication date: 2002-07-18
Anticipated expiration: 2017-01-31
Also published as: US6469166B2; AU1720997A; EP0882051B1; ID15904A; MY119118A; DK0882051T3; NO981356D0; ATE208395T1; AR005731A1; PT882051E; AU725674B2; CA2233307A1; ES2167710T3; TW448178B; WO1997029110A1; KR19990067390A; US20020052362A1; NZ330118A; DE69708059D1; EP0882051A1

Description

Hintergrund der Erfindung

Die vorliegende Erfindung betrifft Thiophenopyrimidine mit CRF-Rezeptor-antagonistischen Eigenschaften, pharmazeutische Zusammensetzungen, die diese Verbindungen als Wirkstoffe enthalten, und deren Verwendung bei der Behandlung von endokrinen, psychiatrischen und neurologischen Zuständen oder Krankheiten, einschließlich mit Streß verbundenen Erkrankungen im allgemeinen.
Das erste Corticoliberin (corticotropin-releasing factor, CRF) wurde aus Hypothalami von Schafen isoliert und als ein Peptid mit 41 Aminosäuren identifiziert (Vale et al., Science 213: 1394-1397, 1981). Im Anschluß daran wurden Sequenzen von humanem und Ratten-CRF isoliert und als miteinander identisch, jedoch in 7 der 41 Aminosäurereste vom Schaf-CRF verschieden bestimmt (Rivier et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80: 4851, 1983; Shibahara et al., EMBO J. 2: 775, 1983). Es wurde gefunden, daß CRF tiefgehende Veränderungen in den Funktionen des Endokrin-, Nerven- und Immunsystems bewirkt. Man nimmt an, daß es sich bei CRF um den physiologischen Hauptregulierungsstoff für die basale und durch Streß bewirkte Freisetzung von adrenokortikotropischem Hormon ("ACTH"), β-Endorphin und anderen von Proopiomelanocortin ("POMC") abgeleiteten Peptiden aus den Hypophysenvorderlappen handelt (Vale et al., Science 213: 1394-1397, 1981). Kurz gesagt nimmt man an, daß CRF seine biologischen Wirkungen einleitet, indem es sich an einen Plasmamembranrezeptor bindet, der verteilt über das gesamte Gehirn (DeSouza et al., Science 221: 1449-1451, 1984), die Hypophyse (DeSouza et al., Methods Enzymol. 124: 560, 1986; Wynn et al., Biochem. Biophys. Pes. Comm. 110: 602-608, 1983), die Nebennieren (Udelsman et al., Nature 319: 147-150, 1986) und die Milz (Webster, E. L., und E. B. DeSouza Endocrinology 122: 609: 617, 1988) vorkommt. Der CRF-Rezeptor ist mit einem GTP-bindenden Protein gekoppelt (Perrin et al., Endocrinology 118: 1171, 1986), welches die durch CRF stimulierte vermehrte intrazelluläre Produktion von cAMP vermittelt (Bilezikjian, L. M. und W. W. Vale, Endocrinology 223: 657-662, 1983).
Zusätzlich zu seiner Rolle bei der Stimulierung der Produktion von ACTH und POMC nimmt man an, daß CRF viele der endokrinen autonomen Reaktionen und Verhaltensreaktionen auf Streß koordiniert und an der Pathophysiologie von affektiven Störungen beteiligt sein könnte. Außerdem wird angenommen, daß es sich bei CRF um ein Schlüsselbindeglied bei der Kommunikation zwischen Immunsystem, zentralem Nervensystem, Endokrinsystem und Herzkreislaufsystem handelt (Crofford et al., J. Clin. Invest. 90: 2555-2564, 1992; Sapolsky et al., Science 238: 522-524, 1987; Tilders et al., Regul. Peptides 5: 77-84, 1982). Insgesamt scheint CRF einer der wichtigsten Neurotransmitter des zentralen Nervensystems zu sein und eine entscheidende Rolle bei der Integration der Gesamtreaktion des Körpers auf Streß zu spielen.
Eine direkte Verabreichung von CRF in das Gehirn bewirkt Verhaltensreaktionen, physiologische Reaktionen und Endokrinreaktionen, die identisch mit denen sind, die bei Tieren beobachtet werden, die einer streßvollen Umgebung ausgesetzt sind. So führt beispielsweise eine intracerebroventrikulare Injektion von CRF zu einer Verhaltensaktivierung (Sutton et al., Nature 297: 331, 1982), zu einer anhaltenden Aktivierung des Elektroenzephalogramms (Ehlers et al., Brain Res. 2/8332, 1983), zu einer Stimulierung des sympathoadrenomedullären Pfades (Brown et al., Endocrinology 110: 928, 1982), zu erhöhter Herzfrequenz und erhöhtem Blutdruck (Fisher et al., Endocrinology 110: 2222, 1982), zu einer Zunahme des Sauerstoffverbrauchs (Brown et al., Life Sciences 30: 207, 1982), zu einer Veränderung der gastrointestinalen Aktivität (Williams et al.; Am. J. Physiol. 253: G582, 1987), zu einer Unterdrückung der Nahrungsaufnahme (Levine et al., Neuropharmacology 22: 337, 1983), zu einer Änderung des Sexualverhaltens (Sirinathsinghji et al., Nature 305: 232, 1983) und zu einer Beeinträchtigung der Immunfunktion (Irwin et al., Am. J. Physiol. 255: R744, 1988). Weiterhin legen klinische Daten nahe, daß CRF bei Depression, mit Angstzuständen in Zusammenhang stehenden Erkrankungen und Anorexia nervosa im Gehirn vermehrt sezerniert wird. (DeSouza, Ann. Reports in Med. Chem. 25: 215-223, 1990).
Dementsprechend legen klinische Daten nahe, daß CRF- Rezeptor-Antagonisten neue Antidepressiva und/oder Anxiolytika mit potentiellem Nutzen bei der Behandlung von neuropsychiatrischen Erkrankungen, bei denen eine Hypersezernierung von CRF in Erscheinung tritt, darstellen könnten.
CRF-Rezeptor-Antagonisten wurden beispielsweise in der US-Patentschrift Nr. 5,063,245, in der substituierte 4- Thio-5-oxo-3-pyrazolinderivate offenbart werden, und im australischen Patent Nr. AU-A-41399/93, in dem substituierte 2-Aminothiazolderivate offenbart werden, beschrieben. Weiterhin werden in WO-94/13676, WO- 94/13677 und WO-95/33750 Pyrrolopyrimidine, Pyrazolo[3,4-d]pyrimidine und substituierte Purine als CRF-Rezeptor-Antagonist offenbart. In EP-0,452,002 werden Thienopyrimidine als Pestizide offenbart.
Die Synthese einiger in der 2-Stellung substituierter 6-Phenyl- und 7-Phenylthieno[3,2-d]pyrimidin-4(3H)-one ist in einem Artikel mit dem gleichen Titel von C. J. Shishoo et al. im Indian Journal of Chemistry, Band 33B, Mai 1994, S. 436-440 beschrieben.
Verbindungen der Formel
sind in WO-96/35689 als hochselektive partielle Agonisten bzw. Antagonisten an humanen CRF1-Rezeptoren beschrieben.
Aufgrund der physiologischen Bedeutung von CRF bleibt die Entwicklung weiterer biologisch aktiver, kleiner Moleküle mit signifikanter CRF-Rezeptor-Bindungsaktivität, die dazu in der Lage sind, den CRF-Rezeptor zu antagonisieren, ein erstrebenswertes Ziel. Solche CRF-Rezeptor-Antagonisten wären bei der Behandlung von endokrinen, psychiatrischen und neurologischen Zuständen bzw. Krankheiten einschließlich mit Streß in Zusammenhang stehenden Erkrankungen im allgemeinen von Nutzen.

Beschreibung der Erfindung

Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der Formel
einschließlich der Stereoisomere und der pharmazeutisch unbedenklichen Säureadditionssalze derselben, wobei
X S, SO oder SO&sub2; ist;
R¹ NR&sup4;R&sup5; oder OR&sup5; ist;
R² C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylthio ist;
R³ Wasserstoff, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylsulfonyl, C&sub1;&submin;&sub6;- Alkylsulfoxy oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylthio ist;
R&sup4; Wasserstoff, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, Mono- oder Di-(C&sub3;&submin;&sub6;- cycloalkyl)methyl, C&sub3;&submin;&sub6;-Cycloalkyl, C&sub3;&submin;&sub6;-Alkenyl, Hydroxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylcarbonyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl ist;
R&sup5; C&sub1;&submin;&sub8;-Alkyl, Mono- oder Di-(C&sub3;&submin;&sub6;-cycloalkyl)methyl, Ar¹CH&sub2;, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, Hydroxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, C&sub3;&submin;&sub6;- Alkenyl, Thienylmethyl, Furanylmethyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylthio- C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, Morpholinyl, Mono- oder Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl) amino- C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl) amino, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylcarbonyl-C&sub1;&submin;&sub6;- alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, substituiert mit Imidazolyl; oder ein Rest der Formel -Alk-O-CO-Ar¹ ist;
oder R&sup4; und R&sup5;, zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, eine Pyrrolidinyl-, Piperidinyl-, Homopiperidinyl- oder Morpholinyl-Gruppe bilden können, gegebenenfalls substituiert mit C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;- Alkyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl;
Ar Phenyl; Phenyl, substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halogen, C&sub1;&submin;&sub6;- Alkyl, Trifluormethyl, Hydroxyl, Cyano, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy, Benzyloxy, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylthio, Nitro, Amino und Mono- oder Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl)amino; Pyridinyl; Pyridinyl, substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten unabhängig ausgewählt aus Halogen, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, Trifluormethyl, Hydroxyl, Cyano, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy, Benzyloxy, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylthio, Nitro, Amino, Mono- oder Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl)amino und Piperidinyl, ist; und wobei besagtes substituiertes Phenyl gegebenenfalls weiter substituiert sein kann mit einem oder mehreren Halogenen;
Ar¹ Phenyl; Phenyl, substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten, jeder unabhängig ausgewählt aus Halogen, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy, Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl)amino-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, Trifluormethyl und C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, substituiert mit Morpholinyl; oder Pyridinyl ist; und
Alk C&sub1;&submin;&sub6;-Alkandiyl ist.
In den obigen Definitionen und im folgenden steht Halogen generisch für Fluor, Chlor, Brom und Iod; C&sub1;&submin;&sub6;- Alkandiyl definiert zweiwertige geradkettige und verzweigte gesättigte Kohlenwasserstoffreste mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen wie beispielsweise Methylen, 1,2- Ethandiyl, 1,3-Propandiyl, 1,4-Butandiyl, 1,5- Pentandiyl, 1,6-Hexandiyl und die verzweigten Isomere davon; C&sub1;&submin;&sub2;-Alkyl definiert geradkettige gesättigte Kohlenwasserstoffreste mit 1 bis 2 Kohlenstoffatomen wie Methyl und Ethyl; C&sub2;&submin;&sub4;-Alkyl definiert geradkettige und verzweigte gesättigte Kohlenwasserstoffreste mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen wie Ethyl, Propyl, Butyl, 1- Methylethyl und dergleichen; C&sub3;&submin;&sub4;-Alkyl definiert geradkettige und verzweigte gesättigte Kohlenwasserstoffreste mit 3 bis 4 Kohlenstoffatomen wie Propyl, Butyl, 1-Methylethyl und dergleichen; C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl schließt die oben definierten C&sub1;&submin;&sub2;-Alkyl- und C&sub3;&submin;&sub4;- Alkylreste und deren höhere Homologe mit 5 bis 6 Kohlenstoffatomen wie Pentyl, die Pentylisomere, Hexyl und die Hexylisomere ein; C&sub1;&submin;&sub8;-Alkyl schließt C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl und dessen höhere Homologe mit 7 bis 8 Kohlenstoffatomen wie beispielsweise Heptyl, Octyl und dergleichen ein; C&sub3;&submin;&sub6;-Alkenyl definiert geradkettige und verzweigte Kohlenwasserstoffreste mit einer Doppelbindung und 3 bis 6 Kohlenstoffatomen wie beispielsweise 2-Propenyl, 3-Butenyl, 2-Pentenyl, 3-Pentenyl, 3- Methyl-2-butenyl und dergleichen; und in den Fällen, in denen C&sub3;&submin;&sub6;-Alkenyl mit einem Stickstoff oder Sauerstoff verbunden ist, ist das die Bindung ausbildende Kohlenstoffatom vorzugsweise gesättigt. Zu C&sub3;&submin;&sub6;- Cycloalkyl gehören Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl. Hydroxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl bezieht sich auf C&sub1;&submin;&sub6;- Alkyl, das durch eine Hydroxylgruppe substituiert ist.
Homopiperidinyl bezieht sich auf einen 7gliedrigen gesättigten Ring mit einem Stickstoffatom.
Abhängig von der Beschaffenheit einiger der Substituenten können die Verbindungen der Formel (I) ein oder mehrere asymmetrische Zentren enthalten, die durch die allgemein verwendete R/S-Nomenklatur bezeichnet werden können.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung enthalten basische Stickstoffatome und können daher als freie Base oder in der Form von Säureadditionssalzen, die beide mit in den Schutzumfang dieser Erfindung fallen, vorliegen. Säureadditionssalze lassen sich durch im Stand der Technik gut bekannte Methoden darstellen, und sie können sowohl mit organischen als auch mit anorganischen Säuren gebildet werden. Zu den geeigneten organischen Säuren gehören Maleinsäure, Fumarsäure, Benzoesäure, Ascorbinsäure, Bernsteinsäure, Methansulfonsäure, Essigsäure, Oxalsäure, Propionsäure, Weinsäure, Salicylsäure, Citronensäure, Gluconsäure, Milchsäure, Mandelsäure, Zimtsäure, Asparaginsäure, Stearinsäure, Palmitinsäure, Glykolsäure, Glutaminsäure und Benzolsulfonsäure. Zu den geeigneten anorganischen Säuren gehören Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure und Salpetersäure.
Besondere Gruppen von erfindungsgemäßen Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), auf die eine oder mehrere der folgenden Einschränkungen zutreffen:
a) R¹ steht für NR&sup4;R&sup5;, wobei R&sup4; für C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;- Alkyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl steht und R&sup5; für C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, C&sub3;&submin;&sub6;- Alkenyl, C&sub3;&submin;&sub6;-Cycloalkylmethyl oder Hydroxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl steht; R&sup4; steht insbesondere für C&sub2;&submin;&sub4;-Alkyl oder Methoxy-C&sub1;&submin;&sub2;-alkyl und R&sup5; für C&sub2;&submin;&sub4;-Alkyl, Cyclopropylmethyl oder Hydroxy-C&sub2;&submin;&sub4;-alkyl;
b) oder R¹ steht für OR&sup5;, wobei R&sup5; für C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, insbesondere für C&sub2;&submin;&sub4;-Alkyl, steht;
c) R² steht für C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, insbesondere für C&sub1;&submin;&sub2;-Alkyl;
d) R³ steht für Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, insbesondere für Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub2;-Alkyl;
e) Ar steht für Phenyl, substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten, jeder unabhängig ausgewählt aus C&sub1;&submin;&sub6;- Alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy oder Halogen, wobei einer der weiteren Wasserstoffe am substituierten Phenyl Halogen sein kann; Ar ist insbesondere Phenyl, substituiert in der 4-, 2,4- oder 2,4,6-Stellung jeweils unabhängig mit Halogen, C&sub1;&submin;&sub2;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub2;- Alkyloxy; oder Ar ist Pyridinyl, substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten, jeder unabhängig ausgewählt aus Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl) amino oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl; Ar ist insbesondere Pyridinyl, substituiert in der 2,4-, 2,6- oder 2,4,6-Stellung jeweils unabhängig mit Di- (C&sub1;&submin;&sub2;-alkyl) amino oder C&sub1;&submin;&sub2;-Alkyl.
Eine andere besondere Gruppe von Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), in denen R¹ für NR&sup4;R&sup5; steht und R&sup4; und R&sup5; zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, eine gegebenenfalls durch C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl substituierte Pyrrolidinyl-, Piperidinyl-, Homopiperidinyl- oder Morpholinylgruppe bilden.
Bevorzugte Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), in denen R¹ für NR&sup4;R&sup5; steht, wobei R&sup4; für C&sub3;&submin;&sub4;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub2;-Alkyloxy-C&sub3;&submin;&sub4;-alkyl, vorzugsweise für Propyl, steht; und R&sup5; für C&sub3;&submin;&sub4;-Alkyl oder Cyclopropylmethyl, vorzugsweise für Propyl, steht; oder R¹ für OR&sup5; steht, wobei R&sup5; für C&sub3;&submin;&sub4;-Alkyl steht; R² für Methyl steht; R³ für Wasserstoff oder Methyl steht; und Ar in der 2-, 4- und 6-Stellung durch Halogen oder C&sub1;&submin;&sub4;- Alkyl substituiert ist und gegebenenfalls weiter durch ein 3-Halogen substituiert ist; besonders bevorzugt steht Ar für 2,4,6-Trimethylphenyl, 3-Brom-2,4,6- trimethylphenyl, 6-(Dimethylamino)-4-methylpyridinyl oder 2,4-Dimethylpyridinyl.
Besonders bevorzugt ist Ar in der 4- und/oder 6- Stellung durch Methyl oder Dimethylamino substituiertes 3-Pyridinyl.
Ganz besonders bevorzugt sind die Verbindungen ausgewählt aus
2-Methyl-4-(N-propyl-N-cyclopropylmethylamino)-7- (2,4,6-trimethylphenyl)thiopheno[3,2-d]pyrimidin und 2- Methyl-4-(N,N-dipropylamino)-7-(2,4,6-trimethylphenyl)thiopheno[3,2-d]pyrimidin, die stereochemisch isomeren Formen oder die pharmazeutisch unbedenklichen Säureadditionssalze derselben.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können im allgemeinen durch Alkylieren eines Thiazolopyrimidins der Formel (II) mit einem Zwischenprodukt der Formel (III) dargestellt werden.
Im Zwischenprodukt (II) steht W für eine geeignete Abgangsgruppe wie Halogen, z. B. Chlor oder Brom, oder eine Sulfonyloxygruppe, z. B. eine Mesyloxy- oder Tosyloxygruppe. Die obige Reaktion wird normalerweise in einem geeigneten Lösungsmittel, z. B. einem aprotischen Lösungsmittel wie DMF oder Acetonitril, einem Ether, z. B. Tetrahydrofuran, vorzugsweise bei erhöhter Temperatur und, wenn es sich bei den Zwischenprodukten der Formel (III) um flüchtige Amine handelt, in einer verschlossenen Reaktionsampulle durchgeführt.
Durch die Formel (I-a) wiedergegebene Verbindungen der Formel (I), in denen R für OR&sup5; steht, lassen sich auch durch O-Alkylierung eines Zwischenproduktes der Formel (IX) mit einem Zwischenprodukt der Formel (X), in dem W wie oben definiert ist, durchführen. Diese Reaktion kann in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie beispielsweise N,N-Dimethylformamid und in Gegenwart einer geeigneten Base wie beispielsweise Natriumhydrid durchgeführt werden, vorzugsweise bei einer Temperatur im Bereich zwischen Raumtemperatur und Rückflußtemperatur.
Die durch die Formel (I-c) wiedergegebenen Verbindungen der Formel (I), in denen R¹ für NR&sup4;R&sup5; steht, können entweder aus Verbindungen der Formel (XI) oder der Formel (XII) dargestellt werden, indem man geeignete, wie unten beschriebene N-Alkylierungsreaktionen durchführt, wobei W wie oben definiert ist. Diese N- Alkylierungen werden in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie beispielsweise einem Ether, z. B. Tetrahydrofuran, und vorzugsweise in Gegenwart einer starken Base, z. B. NaH, durchgeführt.
In gewissen Fällen können bei dieser Reaktion Nebenprodukte entstehen, in denen R² durch (R&sup4; oder R&sup5;)- W alkyliert ist, insbesondere wenn R² für Methyl und R&sup4; oder R&sup5; für niederes Alkyl steht.
Wie unten ausgeführt, kann man Verbindungen der Formel (I) nach im Stand der Technik bekannten Transformationsvorschriften ineinander umwandeln.
So kann man beispielsweise Verbindungen der Formel (I), in denen X für 5 steht, durch eine Oxidationsreaktion, z. B. eine Behandlung mit einem Peroxid wie 3- Chlorperbenzoesäure in einem reaktionsinerten Lösungsmittel, z. B. Dichlormethan, in Verbindungen der Formel (I) umwandeln, in denen x für SO oder SO&sub2; steht. Durch Steuerung der Menge an Oxidationsmittel und anderer Reaktionsparameter ist es möglich, entweder Verbindungen der Formel (I), in denen X für SO oder X für SO&sub2; steht, zu erhalten, oder eine Mischung der beiden Verbindungen, die anschließend durch herkömmliche Methoden, z. B. Säulenchromatographie, aufgetrennt werden kann. Auch ist es möglich, Verbindungen der Formel (I), in denen R³ für C&sub1;&submin;&sub6;- Alkylthio steht, in Verbindungen der Formel (I) umzuwandeln, in denen R³ für C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylsulfonyl oder C&sub1;&submin;&sub6;- Alkylsulfoxy steht, indem man eine Oxidationsreaktion ähnlich der oben beschriebenen durchführt. Durch Steuerung der Menge an Oxidationsmittel und anderer Reaktionsparameter und durch eine Trennung der Endprodukte ist es möglich, die verschiedenen oxidierten Produkte getrennt zu erhalten.
Weiterhin kann man die Ar-Gruppe von Verbindungen der Formel (I) unter Anwendung eines Halogenierungsmittels wie z. B. Chlor oder Brom in einem geeigneten Lösungsmittel, z. B. Essigsäure, halogenieren, wobei die Reaktion gegebenenfalls bei einer Temperatur im Bereich von Raumtemperatur bis zur Rückflußtemperatur der Reaktionsmischung durchgeführt werden kann.
Stereoisomere lassen sich durch eine Auftrennung der Endprodukte der Formel (I) nach im Stand der Technik bekannten Vorschriften, z. B. durch Behandeln mit einer optisch aktiven Säure und Trennen der so gebildeten diastereoisomeren Salze durch selektive Kristallisation oder Säulenchromatographie darstellen. Andererseits ist es auch möglich, Stereoisomere unter Einsatz stereoisomerer Ausgangsmaterialien in einem der obigen Reaktionsschemata oder bei der Darstellung der folgenden beschriebenen Zwischenprodukte darzustellen.
Durch die Formel (II-a) wiedergegebene Zwischenprodukte der Formel (II), in denen X für S steht, können wie unten umrissen dargestellt werden. Zwischenprodukte der Formel (VI) werden erhalten, indem man Zwischenprodukte der Formel (IV) mit einem Ester der Formel (V) in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie einem Alkohol, z. B. Ethanol, vorzugsweise in Gegenwart einer starken Base wie z. B. Natriumethanolat oder Natriumhydrid behandelt. Die Zwischenprodukte (VI) werden mit Methansulfonylchlorid und anschließend mit 2-(Acetylthio)acetonitril umgesetzt, was Aminothiophenderivate der Formel (VII) ergibt. Diese werden unter Anwendung von herkömmlichen Acylierungsmethoden wie z. B. der Verwendung eines Säureanhydrids (R&sub2;CO)&sub2;O in die Zwischenprodukte (VIII) umgewandelt. Zwischenprodukte der Formel (VIII) werden zu Zwischenprodukten (II'-b) cyclisiert, und die Hydroxylgruppe in diesen Verbindungen wird in die Abgangsgruppe W umgewandelt, z. B. indem man das Zwischenprodukt (II'-b) mit Methansulfonyloxychlorid oder einem Halogenierungsmittel wie z. B. POCl&sub3; behandelt, was die Zwischenprodukte (II-a) ergibt.
Zwischenprodukte der Formel (XI) werden durch Behandeln von Zwischenprodukten der Formel (II) mit Ammoniak dargestellt.
In einer Ausführungsform stellt die vorliegende Erfindung auch Verbindungen der Formel (II'-a) bereit, die als Verbindungen der Formel (II-a) definiert sind, in denen W' für Hydroxyl, Halogen, Mesyloxy oder Tosyloxy steht; mit der Maßgabe, daß 2-Methyl-7- phenylthieno[3,2-d]pyrimidin-4(1H)-on ausgeschlossen ist.
Diese Zwischenprodukte der Formel (II'-a) können nach den zur Darstellung von Zwischenprodukten der Formel (II-a) angewandten Vorschriften, wodurch man wodurch man Verbindungen der Formel (II'-b) erhält, die als Verbindungen der Formel (II'-a) definiert sind, in denen W' für Hydroxyl steht; und gegebenenfalls durch Umwandlung von Verbindungen der Formel (II'-b) in Verbindungen der Formel (II-a), die als Verbindungen der Formel (II'-a) definiert sind, in denen W' nicht für Hydroxyl steht, dargestellt werden.
Die Wirksamkeit einer Verbindung als CRF-Rezeptor- Antagonist läßt sich durch verschiedene Assaymethoden bestimmen. Geeignete erfindungsgemäße CRF-Antagonisten sind dazu in der Lage, die spezifische Bindung von CRF an seinen Rezeptor zu inhibieren und die mit CRF assoziierten Wirkungen zu antagonisieren. Man kann eine Verbindung der Struktur (I) durch einen oder mehrere allgemein akzeptierte Assays für diesen Zweck, einschließlich (jedoch nicht darauf beschränkt) der von DeSouza et al. (J. Neroscience 7: 88, 1987) und Battaglia et al. (Synapse I : 572, 1987) offenbarten Assays, auf Wirkung als CRF-Antagonist testen. Wie oben erwähnt gehören zu den geeigneten CRF-Antagonisten Verbindungen mit Affinität zum CRF-Rezeptor. Die CRF- Rezeptor-Affinität läßt sich durch Bindungsstudien bestimmen, bei denen die Fähigkeit einer Verbindung zur Inhibierung der Bindung von radioaktiv markiertem CRF (z. B. [¹²&sup5;I]Tyrosin-CRF) an einem Rezeptor (z. B. aus Großhirnrindenmembranen von Ratten isolierten Rezeptoren) gemessen wird. Mit dem von DeSouza et al. (oben, 1987) beschriebenen Bindungsassay mit radioaktiven Liganden steht ein Assay zur Bestimmung der Affinität einer Verbindung für den CRF-Rezeptor bereit. Diese Aktivität wird normalerweise aus dem IC&sub5;&sub0;- Wert, d. h. der Konzentration einer Verbindung, die erforderlich ist, um 50% des radioaktiv markierten Liganden vom Rezeptor zu verdrängen, berechnet, und wird als "Ki"-Wert angegeben, der durch die folgende Gleichung berechnet wird:
Ki = IC&sub5;&sub0;/1 + L/KD
wobei L = radioaktiv markierter Ligand und KC = Affinität des radioaktiv markierten Liganden für den Rezeptor (Cheng und Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22: 3099, 1973).
Zusätzlich zur Inhibierung der CRF-Rezeptorbindung läßt sich die CRF-Rezeptor-antagonistische Wirkung einer Verbindung durch die Fähigkeit der Verbindung, eine mit CRF assoziierte Wirkung zu antagonisieren, nachweisen. So ist beispielsweise bekannt, daß CRF verschiedene biochemische Prozesse einschließlich der Adenylatcyclaseaktivität stimuliert. Ob Verbindungen CRF- Antagonisten sind, läßt sich daher über ihre Fähigkeit, die durch CRF stimulierte Adenylatcyclaseaktivität zu antagonisieren, bestimmen, beispielsweise, indem man die cAMP-Konzentrationen mißt. Mit dem von Battaglia et al. (oben, 1987) beschriebenen Assay für die durch CRF stimulierte Adenylatcyclaseaktivität steht ein Assay zur Bestimmung der Fähigkeit einer Verbindung, die Wirkung von CRF zu antagonisieren, bereit. Demgemäß läßt sich eine CRF-Rezeptor-antagonistische Wirkung durch Assaymethoden bestimmen, zu denen im allgemeinen ein vorausgehender Bindungsassay (wie der von DeSouza (oben, 1987) beschriebene) gehört, an den sich ein cAMP-Screening-Protokoll (wie das von Battaglia (oben, 1987) beschriebene) anschließt.
Bezogen auf die CRF-Rezeptor-Bindungsaffinitäten weisen die erfindungsgemäßen CRF-Rezeptor-Antagonisten einen Ki-Wert von weniger als 10 uM auf. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung hat ein CRF- Rezeptor-Antagonist einen Ki-Wert von weniger als 1 uM, vorzugsweise von weniger als 0,25 pM (d. h. 250 nM).
Die CRF-Rezeptor-Antagonisten der vorliegenden Erfindung zeigen an der CRF-Rezeptorstelle Wirkung und lassen sich als therapeutische Mittel zur Behandlung einer großen Anzahl verschiedener Erkrankungen bzw. Leiden einschließlich endokriner, psychiatrischer und neurologischer Erkrankungen bzw. Leiden verwenden. So können die CRF-Rezeptor-Antagonisten der vorliegenden Erfindung insbesondere bei der Behandlung von physiologischen Zuständen bzw. Erkrankungen von Nutzen sein, die von einer Hypersezernierung von CRF herrühren. Da man annimmt, daß es sich bei CRF um einen der wichtigsten Neurotransmitter handelt, der die endokrinen Reaktionen, Verhaltensreaktionen und automatischen Reaktionen auf Streß aktiviert und koordiniert, lassen sich die CRF-Rezeptor-Antagonisten der vorliegenden Erfindung zur Behandlung von neuropsychiatrischen Erkrankungen einsetzen. Zu den neuropsychiatrischen Erkrankungen, die sich durch die erfindungsgemäßen CRF-Rezeptor-Antagonisten behandeln lassen, gehören affektive Störungen wie Depression, mit Angstzuständen in Zusammenhang stehende Erkrankungen wie generalisierte Angst, Panikanfälle und Zwangsneurosen, anormale Aggression, Herzkreislaufanomalitäten wie instabile Angina und reaktive Hypertonie, und Ernährungsstörungen wie Anorexia nervosa, Bulimie und Reizkolon. CRF-Antagonisten können auch bei der Behandlung von einer mit verschiedenen Krankheitszuständen assoziierten, streßinduzierten Immunschwäche sowie bei Schlaganfall von Nutzen sein. Weitere Verwendungsmöglichkeiten für die CRF- Antagonisten der vorliegenden Erfindung sind beispielsweise die Behandlung von Entzündungen (wie rheumatoider Arthritis, Uveitis, Asthma, entzündlicher Darmerkrankung und G. I.-Motilität), Morbus Cushing, infantiler zerebralparese, Epilepsie und anderen epileptischen Anfällen sowohl bei Kindern als auch Erwachsenen, und verschiedenen Arten von Substanzmißbrauch und Entzugserscheinungen (einschließlich Alkoholismus).
Bei einer anderen Ausführungsform der Erfindung werden pharmazeutische Zusammensetzungen offenbart, die einen oder mehrere CRF-Rezeptor-Antagonisten enthalten. Zum Zweck der Verabreichung kann man die Verbindungen der vorliegenden Erfindung als pharmazeutische Zusammensetzungen formulieren. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung enthalten einen erfindungsgemäßen CRF-Rezeptor-Antagonisten (d. h. eine Verbindung der Struktur (I)) und einen pharmazeutisch unbedenklichen Träger und/oder Verdünnungsmittel. In der Zusammensetzung liegt der CRF-Rezeptor-Antagonist in einer für die Behandlung der zur Frage stehenden Erkrankung wirksamen Menge vor, das heißt, in einer Menge, die ausreicht, um eine antagonistische Wirkung am CRF-Rezeptor zu erzielen, vorzugsweise mit einer für den Patienten akzeptablen Toxizität. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können einen CRF-Rezeptor-Antagonisten vorzugsweise in einer Menge von 0,1 mg bis 250 mg pro Dosis enthalten, je nach Verabreichungsweg, besonders bevorzugt in einer Menge von 1 mg bis 60 mg. Dem Fachmann ist es leicht möglich, geeignete Konzentrationen und Dosierungen festzulegen.
Der Fachmann ist mit pharmazeutisch unbedenklichen Trägern und/oder Verdünnungsmitteln vertraut. Zu den für als flüssige Lösungen formulierten Zusammensetzungen unbedenklichen Trägern und/oder Verdünnungsmitteln gehören Kochsalzlösung und steriles Wasser, sowie gegebenenfalls Antioxidationsmittel, Puffer, Bakteriostatika und andere herkömmliche Zusatzstoffe. Es ist weiterhin möglich, die Zusammensetzungen als Pillen, Kapseln, Granulate oder Tabletten zu formulieren, die zusätzlich zu einem CRF- Rezeptor-Antagonisten Verdünnungsmittel, Dispersionsmittel und Tenside, Bindemittel und Gleitmittel enthalten. Einem Fachmann auf diesem Gebiet ist es weiterhin möglich, den CRF-Rezeptor-Antagonisten in geeigneter Weise gemäß akzeptierter Arbeitsvorschriften, wie den in Remington's Pharmaceutical Sciences, Gennaro, Hrsg., Mack Publishing Co., Easton, USA, 1990 offenbarten, formulieren.
In einer anderen Ausführungsform stellt die vorliegende Erfindung Verbindungen zur Verwendung bei der Behandlung verschiedener Krankheiten oder Leiden einschließlich endokriner, psychiatrischer und neurologischer Erkrankungen oder Leiden bereit. Diese Verbindungen können einem Warmblüter in einer zur Behandlung der Erkrankung bzw. des Leidens ausreichenden Menge verabreicht werden. Es ist möglich, einen CRF-Rezeptor-Antagonisten der vorliegenden Erfindung systemisch zu verabreichen, vorzugsweise in Form einer pharmazeutischen Zusammensetzung. Der hier verwendete Begriff "systemische Verabreichung" umfaßt orale und parenterale Verabreichungsmethoden. Zu den für eine orale Verabreichung geeigneten pharmazeutischen Zusammensetzungen von CRF-Rezeptor- Antagonisten gehören Pulver, Granulate, Pillen, Tabletten und Kapseln sowie Flüssigkeiten, Sirupe, Suspensionen und Emulsionen. Diese Zusammensetzungen können darüber hinaus Geschmacksstoffe, Konservierungsstoffe, Suspensions-, Verdickungs- und Emulsionsmittel und andere pharmazeutisch akzeptable Zusatzstoffe enthalten. Zur parenteralen Verabreichung kann man die Verbindungen der vorliegenden Erfindung in wäßrigen Injektionslösungen zubereiten, die zusätzlich zum CRF-Rezeptor-Antagonisten Puffer, Antioxidationsmittel, Bakteriostatika und andere gewöhnlich in solchen Lösungen eingesetzte Zusatzstoffe enthalten können.
Wie oben erwähnt kann man durch die Verabreichung einer Verbindung der vorliegenden Erfindung eine große Anzahl verschiedener Erkrankungen bzw. Leiden behandeln. Insbesondere ist es möglich, die Verbindungen der vorliegenden Erfindung einem Warmblüter zur Behandlung von Depression, Angstzuständen, Panikanfällen, Zwangsneurosen, anormaler Aggression, instabiler Angina, reaktiver Hypertonie, Anorexia nervosa, Bulimie, Reizkolon, einer streßinduzierten Immunschwäche, Schlaganfall, Entzündungen, Morbus Cushing, infantiler zerebralparese, Epilepsie und Substanzmißbrauch bzw. Entzug zu verabreichen.
Somit wird die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) als Medizin bereitgestellt.
Die folgenden Beispiele dienen zur Erläuterung und sollen die Erfindung nicht einschränken.

Experimenteller Teil

Im folgenden steht "THF" für Tetrahydrofuran, "DCM" für Dichlormethan, "DMSO" für Dimethylsulfoxid und "ACN" für Acetonitril.

A. Darstellung der Zwischenprodukte

Beispiel A.1

a) Eine Lösung von 2,4,6-Trimethylphenylacetonitril (75 g) und Ameisensäureethylester (67 g) in 225 ml absolutem Ethanol wurde im Verlauf von 10 Minuten unter gutem Rühren mit kleinen Portionen an festem Natriumethanolat (36 g) behandelt. Die Mischung wurde unter Stickstoff 16 Stunden lang auf 60ºC erhitzt und auf Raumtemperatur abkühlen gelassen. Die Reaktionsmischung wurde in 1,2 l Wasser gegossen und mit Diethylether (3 · 200 ml) extrahiert. Die wäßrige Phase wurde mit 6 M HCl auf einen pH-Wert von 1 angesäuert und mit Essigsäureethylester extrahiert. Der Essigsäureethylesterextrakt wurde mit Kochsalzlösung gewaschen, über MgSO&sub4; getrocknet und konzentriert, wodurch man 46 g (98%) 3-Hydroxy-2-(2,4,6-trimethylphenyl)- acrylnitril (Zwischenprodukt 1) erhielt.
b) Eine Lösung von Zwischenprodukt 1 (1 g) in 10 ml Pyridin wurde unter Stickstoff auf 0ºC gekühlt und dann unter gutem Rühren mit Methansulfonylchlorid (0,67 g) behandelt. Die Lösung wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und 1 Stunde lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde in Wasser gegossen und mit Essigsäureethylester extrahiert. Die organische Phase wurde mit 1 M HCl, Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;) und eingedampft, wodurch man 3-Methansulfonyl-2-(2,4,6- trimethylphenyl)acrylnitril (Zwischenprodukt 2) als braunen Feststoff (1,4 g) erhielt.
c) Eine Suspension von NaOEt (3,7 g) in 40 ml DMSO wurde mit 2-(Acetylthio)acetonitril versetzt. Nach 30 Minuten wurde eine Lösung von Zwischenprodukt 2 (13,2 g) in THF (80 ml) zugegeben. LiN(TMS)&sub2; (1,0 M in THF, 100 ml) wurde über eine Spritze zugegeben. Die Reaktion wurde nach 1 Stunde bei Raumtemperatur mit ungefähr 1 Äquivalent Essigsäure gequetscht. Nachdem das meiste THF abgedampft worden war, wurde der Rückstand in 500 ml Essigsäureethylester gelöst und zweimal mit 500 ml Wasser extrahiert. Das rohe 2-Cyano-3-amino-4-(2,4,6-trimethylphenyl)thiophen (Zwischenprodukt 3) (6,0 g) wurde ohne weitere Reinigung in den nächsten Schritt eingebracht.
d) Eine Lösung von Zwischenprodukt 3 (6,0 g) in Essigsäure (6 ml) wurde mit Essigsäureanhydrid (5 g) versetzt. Die Reaktionsmischung wurde 1 Stunde lang bei 110ºC gerührt. Nach dem Abkühlen wurde die rohe Mischung in eine Mischung von Essigsäureethylester (400 ml), Wasser (600 ml) und gesättigter NaHCO&sub3; (200 ml) gegossen. Die organische Phase wurde mit Wasser gewaschen und eingedampft. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an SiO&sub2; (Gradient; Hexan : Diethylether = 2 : 1 bis Hexan : Essigsäureethylester = 1 : 1) gereinigt, wodurch man N-[2-Cyano-4-(2,4,6- trimethylphenyl)thiophen-3-yl]acetamid (Zwischenprodukt 4) erhielt.
e) Eine Suspension von Zwischenprodukt 4 (2,8 g) in 85%iger H&sub3;PO&sub4; (2 ml) wurde unter Stickstoff 30 Minuten lang bei einer Ölbadtemperatur von 130ºC gerührt. Nach dem Abkühlen wurden 20 ml Wasser in diese Mischung gegossen. Nach dem Mischen zum Einleiten der Ausfällung wurde der erhaltene Feststoff abfiltriert und in einem Vakuumofen getrocknet, wodurch man 2,7 g 3-Methyl-6-hydroxy-8- (2,4,6-trimethylphenyl)thiopheno[3,2-d]pyrimidin (Zwischenprodukt 5) erhielt.
f) Eine Suspension von Zwischenprodukt 5 (2,6 g) in POCl&sub3; (8,0 g) wurde 2 Stunden lang bei 100ºC gerührt. Nach dem Abkühlen wurde die Mischung in eine Mischung von gesättigter NaHCO&sub3; und DCM (100 ml) gegossen. Die organische Phase wurde abgetrennt und im Vakuum eingedampft, und der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an SiO&sub2; (Gradient; Essigsäureethylester : Hexan = 1 : 4 bis Essigsäureethylester : Methanol = 4 : 1) gereinigt, wodurch man 0,3 g 2-Methyl-6-chlor-8-(2,4,6- trimethylphenyl)thiopheno[3,2-d]pyrimidin (Zwischenprodukt 6) erhielt.
In Tabelle 1 sind die Zwischenprodukte aufgeführt, die gemäß Beispiel A.1 dargestellt wurden. Tabelle 1:

B. Darstellung der Endprodukte

Beispiel B.1

Eine Lösung von Zwischenprodukt 6 (20 mg) in N,N- Dipropylamin in einer 3-ml-Reaktionsampulle wurde bei 120ºC gerührt. Nach 1 Stunde wurde die Reaktionsmischung abgekühlt, 0,5 ml Acetonitril wurden zugegeben und die Mischung wurde weitere 30 Minuten lang auf Rückfluß erhitzt. Die so erhaltene Suspension wurde auf Raumtemperatur abkühlen gelassen und mit weiterem Acetonitril verdünnt. Der Rückstand wurde durch SiO&sub2;-Säulenchromatographie (Diethylether/Hexan) gereinigt, wodurch man 2-Methyl-6-(N,N-dipropylamino)- 8-(2,4,6-trimethylphenyl)thiopheno[3,2-d]pyrimidin (Verbindung 1) erhielt.

Beispiel B.2

Durch Behandeln von Zwischenprodukt 6 mit Natriumhydrid und 2-Propanol in THF und Aufreinigung unter Anwendung von SiO&sub2;-Säulenchromatographie erhielt man 2-Methyl-6- isopropoxy)-8-(2,4,6-trimethylphenyl) thiopheno[3,2-d]- pyrimidin (Verbindung 6).

Beispiel B.3

Eine Lösung von Verbindung 1 (5 mg) in 1 ml DCM wurde mit meta-Chlorperbenzoesäure (20 mg) versetzt. Diese Lösung wurde 24 Stunden lang gerührt und dann in eine Mischung von Essigsäureethylester und Wasser gegossen.
Die organische Phase wurde mit 5%iger wäßriger NaHCO&sub3;- Lösung und Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;) und eingedampft. Der Rückstand wurde durch präparative TLC (Diethylether/Hexan: 1/9) gereinigt, wodurch man 2- Methyl-6-(N,N-dipropylamino)-8-(2,4,6-trimethylphenyl)- thiopheno[3,2-d]pyrimidin-S,S-dioxid (Verbindung 7) erhielt.

Beispiel B.4

Verbindung 2 (0,05 mmol) wurde mit einem Überschuß an Brom in 1 ml Essigsäure 30 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde in eine Mischung von DCM und gesättigter wäßriger NaHCO&sub3; gegossen, und die organische Phase wurde eingedampft. Der Rückstand wurde durch SiO&sub2;-Chromatographie (Diethylether/Hexan) gereinigt, wodurch man 2-Methyl-6- (N-propyl-N-cyclopropylamino)-8-(3-brom-2,4,6-trimethylphenyl)thiopheno[3,2-d]pyrimidin (Verbindung 5) erhielt.
In den Tabellen 2, 3 und 4 sind die Verbindungen aufgeführt, die gemäß einem der obigen Beispiele dargestellt wurden, und in den Tabellen 5 und 6 sind die analytischen Daten für diese Verbindungen aufgeführt. Tabelle 2: Tabelle 3 Tabelle 4 Tabelle 5: Analytische Daten Tabelle 6: Analytische Daten

Pharmakologische Beispiele

Beispiel C.1: REPRÄSENTATIVE VERBINDUNGEN MIT CRF- REZEPTOR-BINDUNGSAKTIVITÄT

Die Verbindungen wurden durch einen Standard- Bindungsassay mit radioaktiv markierten Liganden, wie allgemein von DeSouza et. al. (J. Neurosci. 7: 88-100, 1987) beschrieben, auf Bindungsaktivität am CRF- Rezeptor untersucht. Durch Einsatz verschiedener radioaktiv markierter CRF-Liganden kann man den Assay zur Untersuchung der Bindungsaktivität der Verbindungen der vorliegenden Erfindung an einem beliebigen CRF- Rezeptor-Subtyp einsetzen. Kurz gesagt verdrängt man bei dem Bindungsassay einen radioaktiv markierten CRF- Liganden vom CRF-Rezeptor. Genauer gesagt wurde der Bindungsassay in 1,5-ml-Eppendorf-Hütchen durchgeführt, wobei pro Hütchen ungefähr 1 · 10&sup6; stabil mit humanen CRF-Rezeptoren transfizierte Zellen verwendet wurden. In jedes Hütchen wird etwa 0,1 ml Assaypuffer (z. B. Dulbeccos phophatgepufferte Kochsalzlösung, 10 mM Magnesiumchlorid, 20 uM Bacitracin) mit oder ohne nicht markiertes Sauvagin, Urotensin I oder CRF (Endkonzentration 1 uM) zur Bestimmung der nichtspezifischen Bindung, 0,1 ml [¹²&sup5;I]-Tyrosin-Schaf- CRF (Endkonzentration 200 pM, in etwa der durch Scatchard-Analyse bestimmte 1%-Wert) und 0,1 ml einer Membransuspension von Zellen mit CRF-Rezeptor gegeben. Die Mischung wurde 2 Stunden lang bei 22ºC inkubiert, woraufhin gebundene und freie radioaktiv markierte Liganden durch Zentrifugation getrennt wurden. Nachdem die Pellets zweimal gewaschen worden waren, wurden die Hütchen unmittelbar über dem Pellet durchgeschnitten und, bei einer Effizienz von ungefähr 80%, in einem Gammazähler auf Radioaktivität untersucht. Alle Bindungsdaten für die radioaktiv markierten Liganden wurden unter Anwendung eines nichtlinearen Kurvenanpassungsprogramms nach der Methode der kleinsten Quadrate analysiert. Die Bindungsaktivität entspricht der Konzentration (nM) der Verbindung, die erforderlich ist, um 50% des radioaktiv markierten Liganden vom Rezeptor zu verdrängen. Alle der in den Tabellen 2-4 aufgeführten Verbindungen weisen einen Ki- Wert von ≤ 250 nM auf. Es wurde gefunden, daß die Verbindungen 1, 2, 8, 10, 12-18, 20, 23, 34, 35, 37-41, 43, 48-56 in diesem Test die besten Ergebnisse zeigen.

Beispiel C.2

CRF-STIMULIERTE ADENYLATCYCLASEAKTIVITÄT

Es ist auch möglich, die Verbindungen der vorliegenden Erfindung mittels verschiedener Funktionstests zu untersuchen. So kann man beispielsweise die Verbindungen der vorliegenden Erfindung auf durch CRF stimulierte Adenylatcyclaseaktivität testen. Ein Assay zur Bestimmung der CRF-stimulierten Adenylatcyclaseaktivität läßt sich wie allgemein von Battaglia et al. (Synapse 1: 572, 1987) beschrieben durchführen, mit Änderungen zur Anpassung des Assays an Ganzzellpräparationen.
Genauer gesagt kann die Standard-Assaymischung in einem Endvolumen von 0,5 ml die folgenden Bestandteile enthalten: 2 mM L-Glutamin, 20 mM HEPES und 1 mM IMBX in DMEM-Puffer. Bei den Stimulationsstudien werden ganze Zellen mit den transfizierten CRF-Rezeptoren in Platten mit 24 Vertiefungen gegeben und mit verschiedenen Konzentrationen an mit CRF verwandten und nichtverwandten Peptiden 1 Stunde lang bei 37ºC inkubiert, um das pharmakologische Rangordnungsprofil des untersuchten Rezeptor-Subtyps festzustellen. Nach der Inkubation wird das Medium abgesaugt, die Vertiefungen werden einmal mit frischem Medium gespült und das Medium wird abgesaugt. Zur Bestimmung der Menge an intrazellulärem cAMP werden in jede Vertiefung 300 ul einer Lösung von 95%igem Ethanol und 20 mM wäßriger Salzsäure gegeben, und die so erhaltenen Suspensionen werden 16 bis 18 Stunden lang bei -20ºC inkubiert. Die Lösung wird in 1,5-ml-Eppendorf-Hütchen abgenommen, und die Vertiefungen werden mit weiteren 200 ul Ethanol/wäßriger Salzsäure gewaschen und mit der ersten Fraktion vereinigt. Die Proben werden lyophilisiert und dann in 500 ul Natriumacetatpuffer resuspendiert. Das cAMP in den Proben wird mit einem Single-Antibody-Kit gemessen. Zur funktionellen Beurteilung der Verbindungen wird eine einzelne Konzentration an CRF bzw. verwandten Peptiden, die eine 80%ige Stimulierung der cAMP-Produktion bewirkt, mit verschiedenen Konzentrationen kompetierender Verbindungen inkubiert (10&supmin;¹² bis 10&supmin;&sup6; M).

D. Beispiele für Zusammensetzung

Die folgenden Formulierungen sind typische Beispiele für pharmazeutische Zusammensetzungen in Einzeldosisform, die zur erfindungsgemäßen systemischen oder topischen Verabreichung an Warmblüter geeignet sind.
Der in diesen Beispielen verwendete Begriff "aktive Substanz" (A.S.) bezieht sich auf eine Verbindung der Formel (I), eine N-Oxidform, ein pharmazeutisch unbedenkliches Säure- oder Basenadditionssalz oder eine stereochemisch isomere Form davon.

Beispiel D.1: Lösung zur oralen Verabreichung

9 g 4-Hydroxybenzoesäuremethylester und 1 g 4-Hydroxybenzoesäurepropylester werden in 4 l kochendem gereinigtem Wasser gelöst. In 3 l dieser Lösung werden zunächst 10 g 2,3-Dihydroxybutandisäure und anschließend 20 g der A.S. gelöst. Die letztgenannte Lösung wird mit dem übrigen Teil der erstgenannten Lösung vereinigt und dann mit 12 l 1,2,3-Propantriol und 3 l 70%iger Sorbitlösung versetzt. 40 g Natriumsaccharin werden in 0,5 l Wasser gelöst und mit 2 ml Himbeeressenz und 2 ml Stachelbeeressenz versetzt. Die letztere Lösung wird mit der erstgenannten vereinigt, q.s. Wasser wird zugegeben, so daß man ein Volumen von 20 l einer Lösung zur oralen Verabreichung erhält, die pro Teelöffelvoll (5 ml) 5 mg der A.S. enthält. Die erhaltene Lösung wird in geeignete Behälter abgefüllt.

Beispiel D.2: Kapseln

20 g A.S., 6 g Natriumlaurylsulfat, 56 g Stärke, 56 g Lactose, 0,8 g kolloides Siliciumdioxid und 1,2 g Magnesiumstearat werden kräftig miteinander verrührt.
Die erhaltene Mischung wird anschließend in 1000 geeignete Kapseln aus gehärteter Gelatine gefüllt, die jeweils 20 mg A.S. enthalten.

Beispiel D.3: Lacktabletten

Herstellung des Tablettenkerns

Eine Mischung aus 100 g A.S., 570 g Lactose und 200 g Stärke wird gut vermischt und anschließend mit einer Lösung aus 5 g Natriumdodecylsulfat und 10 g Polyvinylpyrrolidon in etwa 200 ml Wasser befeuchtet. Die feuchte Pulvermischung wird gesiebt, getrocknet und nochmals gesiebt. Dann werden 100 g mikrokristalline Cellulose und 15 g hydriertes Pflanzenöl zugesetzt. Das Ganze wird gut vermischt und zu Tabletten verpreßt, was 10.000 Tabletten ergibt, die jeweils 10 mg der aktiven Substanz enthalten.

Überzug

Eine Lösung von 10 g Methylcellulose in 75 ml denaturiertem Ethanol wird mit einer Lösung von 5 g Ethylcellulose in 150 ml Dichlormethan versetzt.
Anschließend werden 75 ml Dichlormethan und 2,5 ml 1,2,3-Propantriol zugesetzt. 10 g Polyethylenglykol werden geschmolzen und in 75 ml Dichlormethan gelöst. Nach Zugabe der letztgenannten Lösung zu der erstgenannten werden 2,5 g Magnesiumoctadecanoat, 5 g Polyvinylpyrrolidon und 30 ml konzentrierte Farbsuspension zugesetzt und das Ganze homogenisiert. Die Tablettenkerne werden mit der so erhaltenen Mischung in einer Überzugsvorrichtung überzogen.

Beispiel D.4: Injektionslösung

1,8 g 4-Hydroxybenzoesäuremethylester und 0,2 g 4- Hydroxybenzoesäurepropylester werden in etwa 0,5 l kochendem Wasser für Injektionszwecke gelöst. Nach Abkühlen auf ungefähr 50 W werden unter Rühren 4 g Milchsäure, 0,05 g Propylenglykol und 4 g A.S. zugegeben. Die Lösung wird auf Raumtemperatur abgekühlt und mit q.s. Wasser für Injektionszwecke auf ein Volumen von 1 l aufgefüllt, wodurch man eine Lösung von 4 mg A.S. pro ml erhält. Die Lösung wird durch Filtration sterilisiert und in sterile Behälter abgefüllt.

Beispiel D. 5: Zäpfchen

3 g A.S. wurden in einer Lösung von 3 Gramm 2,3- Dihydroxybutandisäure in 25 ml Polyethylenglykol 400 gelöst. 12 Gramm Tensid und 300 Gramm Triglyceride werden zusammengeschmolzen. Die letztgenannte Mischung wird gut mit der erstgenannten Lösung vermischt. Die so erhaltene Mischung wird bei einer Temperatur von 37- 38ºC in Formen gegossen, wodurch man 100 Zäpfchen mit jeweils 30 mg/ml A.S. erhält.

Claims

1. Verbindung der Formel

einschließlich der Stereoisomere und der pharmazeutisch akzeptablen Säureadditionssalze derselben, wobei

X S, SO oder SO&sub2; ist;

R¹ NR&sup4;R&sup5; oder OR&sup5; ist;

R² C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylthio ist;

R³ Wasserstoff, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylsulfonyl, C&sub1;&submin;&sub6;- Alkylsulfoxy oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylthio ist;

R&sup4; Wasserstoff, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, Mono- oder Di-(C&sub3;&submin;&sub6;- cycloalkyl)methyl, C&sub3;&submin;&sub6;-Cycloalkyl, C&sub3;&submin;&sub6;-Alkenyl, Hydroxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylcarbonyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl ist;

R&sup5; C&sub1;&submin;&sub8;-Alkyl, Mono- oder Di-(C&sub3;&submin;&sub6;-cycloalkyl) methyl, Ar¹CH&sub2;, C&sub3;&submin;&sub6;-Alkenyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, Hydroxy- C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, Thienylmethyl, Furanylmethyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylthio- C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, Morpholinyl, Mono- oder Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl)amino- C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl, Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl) amino, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylcarbonyl-C&sub1;&submin;&sub6;- alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, substituiert mit Imidazolyl; oder ein Rest der Formel -Alk-O-CO-Ar¹ ist;

oder R&sup4; und R&sup5;, zusammengenommen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, eine Pyrrolidinyl-, Piperidinyl-, Homopiperidinyl- oder Morpholinyl-Gruppe bilden können, fakultativ substituiert mit C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl;

Ar Phenyl; Phenyl, substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten, unabhängig ausgewählt aus Halo, C&sub1;&submin;&sub6;- Alkyl, Trifluormethyl, Hydroxy, Cyano, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy, Benzyloxy, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylthio, Nitro, Amino und Mono- oder Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl)amino; Pyridinyl; Pyridinyl, substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten unabhängig ausgewählt aus Halo, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, Trifluormethyl, Hydroxy, Cyano, C&sub1;&submin;&sub6;- Alkyloxy, Benzyloxy, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylthio, Nitro, Amino, Mono- oder Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl)amino und Piperidinyl, ist; und wobei besagtes substituiertes Phenyl fakultativ weiter substituiert sein kann mit einem oder mehreren Halogenen;

Ar¹ Phenyl; Phenyl, substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten, jeder unabhängig ausgewählt aus Halo, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy, Di- (C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl) amino-C&sub1;&submin;&sub6;- alkyltrifluormethyl und C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, substituiert mit Morpholinyl; oder Pyridinyl ist; und

Alk C&sub1;&submin;&sub6;-Alkandiyl ist.

2. Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ OR&sup5; ist und R&sup5; C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist; oder R¹ NR&sup4;R&sup5; ist und R&sup4; Wasserstoff, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;- Alkyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl ist und R&sup5; C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, Hydroxy-C&sub1;&submin;&sub6;- alkyl, C&sub3;&submin;&sub6;-Alkenyl oder C&sub3;&submin;&sub6;-Cycloalkylmethyl ist; oder R¹ NR&sup4;R&sup5; ist und R&sup4; und R&sup5; zusammengenommen sind mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, um eine Pyrrolidinyl-, Piperidinyl-, Homopiperidinyl- oder Morpholinylgruppe zu bilden; fakultativ substituiert mit C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy-C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl; R² C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist; R³ Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl ist; und Ar ein Phenyl ist, substituiert mit 1, 2 oder 3 Substituenten, jeder unabhängig ausgewählt aus C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl, C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyloxy oder Halo, oder Ar ein Pyridinyl ist, substituiert mit 1, 2, oder 3 Substituenten, jeder unabhängig ausgewählt aus C&sub1;&submin;&sub6;-Alkyl oder Di-(C&sub1;&submin;&sub6;-alkyl) amino.

3. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 2, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ NR&sup4;R&sup5; ist, wobei R&sup4; C&sub2;&submin;&sub4;- Alkyl oder Methoxy-C&sub1;&submin;&sub2;-alkyl ist; R&sup5; C&sub2;&submin;&sub4;-Alkyl, Cyclopropylmethyl oder Hydroxy-C&sub2;&submin;&sub4;-alkyl ist; R² C&sub1;&submin;&sub2;- Alkyl ist; R³ Wasserstoff oder C&sub1;&submin;&sub2;-Alkyl ist.

4. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 2, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ NR&sup4;R&sup5; ist, wobei R&sup4; C&sub2;&submin;&sub4;- Alkyl ist; R&sup5; C&sub3;&submin;&sub4;-Alkyl oder Cyclopropylmethyl ist; R² Methyl ist; R³ Wasserstoff oder Methyl ist; und Ar 3- Pyridinyl ist, substituiert an der 4- und/oder 6- Position mit Methyl oder Dimethylamino.

5. Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung 2-Methyl-4-(Npropyl-N-cyclopropylmethylamino)-7-(2,4,6-trimethylphenyl)thiopheno[3,2-d]pyrimidin und 2-Methyl-4-(N,Ndipropylamino)-7-(2,4,6-trimethylphenyl)thiopheno[3,2- d]pyrimidin, die stereochemisch isomeren Formen oder die pharmazeutisch akzeptablen Säureadditionssalze derselben ist.

6. Zusammensetzung, die einen pharmazeutisch akzeptablen Träger und als Wirkstoff eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 umfaßt.

7. Verfahren zur Herstellung einer Zusammensetzung nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 innig mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger vermischt wird.

8. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 zur Verwendung als ein Arzneimittel.

9. Verbindung der Formel (II¹-a), wobei die Reste R², R³ und Ar sind, wie definiert in einem der Ansprüche 1 bis 4, und Rest W' Hydroxy, Halo, Mesyloxy oder Tosyloxy ist; eine stereoisomere Form oder eine Säureadditionssalzform derselben; mit der Maßgabe, daß 2-Methyl-7-phenylthieno[3,2-d]pyrimidin-4(1H)-on nicht eingeschlossen ist.

10. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß

a) eine Zwischenstufe der Formel (II) mit einer Zwischenstufe der Formel (III) in einem reaktionsinerten Lösungsmittel zur Reaktion gebracht wird,

b) eine Zwischenstufe der Formel (IX) mit einer Zwischenstufe der Formel (X) in einem reaktionsinerten Lösungsmittel und in Gegenwart einer geeigneten Base O-alkyliert wird, was Verbindungen der Formel (I-a) liefert, definiert als Verbindungen der Formel (I), in denen R¹ OR&sup5; ist,

wobei in den obigen Reaktionsschemen die Reste R¹, R², R³, R&sup5; und Ar sind, wie definiert in Anspruch 1, und W eine geeignete Abgangsgruppe ist;

oder falls gewünscht, Verbindungen der Formel (I) unter Befolgung von im Stand der Technik bekannten Umlagerungsreaktionen ineinander umgewandelt werden; und weiter, falls gewünscht, die Verbindungen der Formel (I) durch Behandlung mit einer Säure in ein Säureadditionssalz umgewandelt werden oder umgekehrt die Säureadditionssalzform durch Behandlung mit Alkali in die freie Base umgewandelt wird; und, falls gewünscht, die stereochemisch isomeren Farmen derselben hergestellt werden.

11. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (II'-a) nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß eine Zwischenstufe der Formel (VIII) zyklisiert wird, wodurch Zwischenstufen der Formel (II'-b) geliefert werden, definiert als Verbindungen der Formel (II'-a), in denen W' Hydroxy ist;

und fakultativ Verbindungen der Formel (II'-b) in Verbindungen der Formel (II-a), definiert als Verbindungen der Formel (II'-a), in denen W' von Hydroxy verschieden ist, umgewandelt werden;

wobei in den obigen Reaktionsschemen die Reste R², R³ und Ar sind, wie in einem der Ansprüche 1 bis 4 definiert, und W' Hydroxy, Halo, Mesyloxy oder Tosyloxy ist und W Halo, Mesyloxy oder Tosyloxy ist;

oder, falls gewünscht, Verbindungen der Formel (II'-a) unter Befolgung von im Stand der Technik bekannten Umlagerungsreaktionen ineinander umgewandelt werden; und weiter, falls gewünscht, die Verbindungen der Formel (II'-a) durch Behandlung mit einer Säure in ein Säureadditionssalz umgewandelt werden oder umgekehrt die Säureadditionsform durch Behandlung mit Alkali in die freie Base umgewandelt wird; und, falls gewünscht, stereochemisch isomere Formen derselben hergestellt werden.