DE69622735T2

DE69622735T2 - Lyophilisierte stabile pharmazeutische formulierung

Info

Publication number: DE69622735T2
Application number: DE69622735T
Authority: DE
Inventors: Colette Bouloumie; Thierry Breul; Laurence Colliere; Philippe Faure
Original assignee: Sanofi Synthelabo SA
Current assignee: Sanofi Aventis France
Priority date: 1995-11-03
Filing date: 1996-10-30
Publication date: 2003-04-03
Anticipated expiration: 2016-10-31
Also published as: CZ287178B6; EP0858325B1; PL326451A1; PL186284B1; WO1997017064A1; IS4729A; CA2234140C; EE04293B1; NZ321616A; FR2740686B1; NO981967D0; TR199800782T2; MY116578A; UA60297C2; JPH11507945A; RU2163801C2; AR004255A1; CA2234140A1; DK0858325T3; US6284277B1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft eine pharmazeutische Formulierung in Form eines gefriergetrockneten Produkts (Lyophilisats), welches mindestens einen natürlichen Nicht-Protein-Wirkstoff enthält. Die Erfindung betrifft insbesondere eine solche Formulierung, die bei Temperaturen stabil ist, die sich von 25ºC bis 40ºC erstrecken können, und welche durch Zugabe eines Lösungsmittels wieder in eine flüssige Form gebracht werden kann zur Verabreichung auf parenteralem oder oralem Wege oder welche direkt auf oralem Wege an Mensch oder Tier verabreicht werden kann.
Der in der erfindungsgemäßen Formulierung enthaltene Wirkstoff kann allein vorliegen oder in Kombination mit einem anderen natürlichen Protein- oder Nicht-Protein-Wirkstoff.
Es ist bekannt, daß die Gefriertrocknung einen erheblichen Effekt auf den Abbau von pharmazeutischen Wirkstoffen in einer Formulierung ausüben kann, so beispielsweise einen starken Einfluß auf deren Stabilität in gefriergetrockneter Form. Die verschiedenen Variablen, welche diese Parameter beeinflussen, sind insbesondere der pH-Wert, die Menge der vorhandenen Salze, die Art und die Menge der in der Formulierung vorhandenen Hilfsstoffe, die Art des gewählten Schutzes gegen das Gefrieren sowie die Temperatur, der Druck und die Zeit der Maßnahmen des Gefrierens, der Sublimation und der Trocknung. Diese verschiedenen Variablen beeinflussen den physikalischen Zustand des erhaltenen gefriergetrockneten Produkts, das heißt: amorph glasig, amorph weich, kristallin oder eine Kombination dieser Zustände.
Zur Konservierung der gefriergetrockneten Produkte greift man häufig auf Aminosäuren, vorzugsweise Glycin, und Polyole, vorzugsweise Mannitol, zurück, wobei die Literatur, die bezüglich dieses Problems sehr umfangreich ist, keinerlei Anleitungen vermittelt bezüglich der Lösung des allgemeinen Problems des Erhalts einer stabilen pharmazeutischen Formulierung, welche Rücksicht nimmt auf die verschiedenen Parameter, die bei den Maßnahmen der Formulierung und der Gefriertrocknung eines Nicht-Protein-Wirkstoffs in Kombination mit einer Aminosäure und einem Polyol von Bedeutung sind.
Insbesondere lehrt die Literatur, daß die Anwesenheit einer Aminosäure, eines Polyols, beispielsweise von Mannitol, einer kristallinen Phase oder einer amorphen Phase neben bestimmten Vorteilen zu Nachteilen führen kann, die sich im Fall von gefriergetrockneten Produkten, die besonders empfindliche Wirkstoffe enthalten, in relativ kurzen Verfallszeiten und/oder Lagerungstemperaturen der gefriergetrockneten Produkte von weniger als 8ºC bemerkbar machen. Es wäre daher von besonderem Vorteil, insbesondere für eine ambulante Behandlung, über eine Formulierung zu verfügen, die bei Raumtemperatur bis zu ihrer Wiederherstellung stabil wäre, um in dieser Weise ihre Aufbewahrung vor und im Verlaufe der Behandlung in einem Kühlschrank zu vermeiden.
Die Rolle des Polyols und der Aminosäure wurde getrennt im Fall des menschlichen Wachstumshormons (hGH) untersucht, jedoch ist ihre synergistische Wirkung noch wenig aufgeklärt (M. J. Pikal, K. M. Dellermann, M. L. Roy, M. N. Riggin, The effects of formulation variables on the stability of freeze dried Human Growth Hormone, Pharm. Research., 8, Nr. 4 (1991), 427-436).
Die Vorteile und die Nachteile, die mit der Anwesenheit von Aminosäuren, Mannitol, einer kristallinen Phase oder einer amorphen Phase verknüpft sind, werden nachfolgend verdeutlicht.
Vorteile, die mit der Anwesenheit von Aminosäuren verbunden sind.
Es wurde gezeigt, daß die Anwesenheit von Glycin in einem gefriergetrockneten Produkt zu einer Kristallisation der in der Lösung vorhandenen Moleküle im Verlaufe der Gefrierstufe der Gefriertrocknung verursacht (D. J. Korey, J. B. Schwartz, Effects of excipients on the cristallization of pharmaceutical compounds during lyophylization, J. Parenteral Sci. Tech., 43, 2 (1989), 80-83). Diese Kristallisation des Wirkstoffs ermöglicht die Verbesserung seiner Stabilität.
Alanin in kristalliner Form besitzt den Vorteil, das Zusammensinken des gefriergetrockneten Produkts im Verlaufe der Sublimation und der Entwässerung zu verhindern und den Erhalt eines gefriergetrockneten Produkts mit einer höheren spezifischen Oberfläche zu ermöglichen und damit eine schnellere Entwässerung (M. J. Pikal, Freeze-drying of proteins, Biopharm., 26.-30. Oktober 1990).
Nachteile, die mit der Anwesenheit von Aminosäuren verknüpft sind.
Die Zugabe einer Aminosäure zu einem Zucker oder einem Polyol in einer gefrierzutrocknenden Lösung hat im allgemeinen die Wirkung, die Glasübergangstemperatur des Zuckers zu verringern (M. P. W. M. Booy, R. A. de Ruiter. A. L. J. de Meere, Evaluation of the physical stability of freeze dried sucrose containing formulations by differential scanning calorimetry, Pharm. Research, 9 (1992), 109-114). Andererseits ist ein Absenken der Glasübergangstemperatur im allgemeinen ein Synonym für eine geringere Stabilität des gefriergetrockneten Produkts (F. Franks, Freeze-drying; from empiricism to predictability, Cryo-letters, 11 (1990), 93-110).
Vorteile, die mit der Anwesenheit von Mannitol verknüpft sind.
Die Anwesenheit von Mannitol in der Zubereitung eines gefriegetrockneten Produkts ist im allgemeinen als Ballast der Gefriertrocknung gerechtfertigt, das heißt, es ermöglicht gleichzeitig die Beibehaltung einer festen und starren Struktur des Volumens des gefriergetrockneten Produkts, welches dem Volumen der gefrierzutrocknenden Lösung entspricht, jedoch ermöglicht seine Anwesenheit auch die Einstellung der Isotonie der wiederhergestellten Injektionslösung. Wenn Mannitol das Haupt-Trägermaterial der Zusammensetzung eines gefriergetrockneten Produkts ist, liegt es am häufigsten in kristalliner Form vor (Lyophilized formulations recombinant tumor necrosis factor, M. S. Hora, R. K. Rana, F. W. Smith, Pharm. Res., 9(1) (1992), 33-36).
Nachteile, die mit der Anwesenheit von Mannitol verknüpft sind.
Es ist berichtet worden, daß der Grad der Hydrolyse von Natrium-methylprednisolonsuccinat in gefriergetrockneter Form in Gegenwart von Mannitol größer ist als in Gegenwart von Lactose und daß dieser Hydrolysegrad mit der Menge des in dem gefriergetrocknten Produkt vorhandenen Mannitols zunimmt. Dies wurde durch die Tatsache erklärt, daß die Kristallisation des Mannitols im Verlaufe der Gefriertrocknung die Verteilung des Wassers in der Matrix des gefriergetrockneten Produkts verändert. Die Zunahme der Menge des in der Mikroumgebung des Wirkstoffs vorhandenen Wassers, die sich dadurch ergibt, begünstigt die Hydrolyse des Wirkstoffs und verringert seine Stabilität (The effect of bulking agent on the solid state stability of freeze dried methylprednisolone sodium succinate, B. D. Herman, B. D. Sinclair, N. Milton, S. L. Nail, Pharma. Res., 11 (10) (1994), 1467-1473).
Vorteile, die mit der Anwesenheit einer kristallinen Phase verbunden sind.
Die Anwesenheit eines kristallinen löslichen Materials in einer gefrorenen Lösung ist ein Mittel zur Stabilisierung von Proteinen im Verlaufe der Entwässerung (J. F. Carpenter, J. H, Crowe, Modes of stabilization of a protein by organic solutes during dessiccation, Cryobiology, 25 (1988), 459-470). Weiterhin bewirkt die Kristallisation der in einer gefrierzutrocknenden Lösung vorhandenen Haupt- Trägermaterialien im Verlaufe des Gefrierens ein besseres Ablaufen der Maßnahmen der Sublimation und der sekundären Entwässerung durch Erhöhen der spezifischen Austausch-Oberfläche zwischen der Atmosphäre der Umgebung der Gefriertrocknungseinrichtung und dem zu sublimierenden Feststoff. Diese Erhöhung der spezifischen Oberfläche des kristallinen Formen im Vergleich zu den amorphen Formen erleichtert den Wärmeaustausch im Verlaufe der Gefriertrocknung. Die Konsequenz dieser gesteigerten Wirksamkeit der Gefriertrocknung ist der Erhalt von gefriergetrockneten Formen, deren Gehalt an restlichem Wasser geringer ist, was eine gesteigerte Stabilität des gefriergetrockneten Produkts bei höheren Temperaturen zur Folge hat (D. J. Korey, J. B, Schwartz, Effects of ex cipients an the cristallization of pharmaceutical compounds during lyophilization, J. Parenteral Sci. Tech., 43, 2 (1989), 80-83).
Nachteile, die mit der Anwesenheit einer kristallinen Phase verbunden sind.
Im allgemeinen zeigen kristalline Substanzen weniger schnelle Lösungsgeschwindigkeiten als amorphe Substanzen. In der Tat ist eine größere Energiemenge erforderlich, ein Molekül aus einem organisierten Netzwerk einer kristallinen Anordnung als aus einer nicht-organisierten Anordnung eines amorphen Zustandes herauszulösen. In gewissen Fällen reicht die Lösungsgeschwindigkeit nicht dazu aus, eine ausreichend schnelle Absorption dieser Substanzen zu ermöglichen, was zu einer Verringerung ihrer Aktivität führen kann, insbesondere im Fall von Molekülen, die in Lösung wenig stabil sind. In gleicher Weise führen die perfekte Regelmäßigkeit der Kristalle, die einen Idealfall darstellt, die Heterogenität der kristallinen Phase und der Polymorphismus, der für ein und dieselbe Substanz und zwischen assoziierten Substanzen auftritt, zu unterschiedlichen Lösungsgeschwindigkeiten ein und derselben Substanz und zwischen jeder der Substanzen, was zu nicht reproduzierbaren therapeutischen Effekten führen kann (Galenica 2, Biopharmacie 2. Aufl. (1982), technique et documentation).
Andererseits konnte gezeigt werden, daß der Aktivitätsverlust eines gefriergetrockneten Proteins direkt verbunden ist mit dem Kristallinitätsgrad des gegen das Gefrieren schützenden Moleküls (K. L. Izutus, S. Yoshioka, T. Terao, Decreased protein-stabilizing effects of cryoprotectants due to crystallization, Pharm. Research., 10, Nr. 8 (1993), 1232-1237; K. I. Izutus, S. Yoshioka, S. Kojima, Increased stabilizing effects of amphiphilic excipients an freeze drying of lactate deshydrogenase (LDH) by dispersion into sugar matrixes, Pharm. Res., 12 (6) (1995), 838-843). Bei der Formulierung von Arzneimitteln, die Proteine enthalten, muß daher die Kristallisation der Trägermaterialien vermieden werden, siehe: M. Hermansky, M. Pesak, Lyophilization of drugs. VI Amorphous and Cristalline forms Cesk. Farm.. 42, (2) (1993), 95-98).
Vorteile, die mit der Anwesenheit einer amorphen Phase verbunden sind.
In entsprechender Weise löst sich die amorphe Form schneller als die kristalline Form und besitzt nicht die Nachteile, die mit der Heterogenität und dem Polymorphismus von kristallinen Substanzen verbunden sind.
Andererseits stabilisiert die Anwesenheit von Additiven in amorphem Zustand die Aktivität bestimmter Enzyme proportional zur Konzentration des Additivs gemäß K. L. Izutsu, S. Yoshioka, T. Terao, Decreased protein-stabilizing effects of cryoprotectants due to crystallization.. Pharm Research., 10, Nr. 8 (1993), 1232-1237).
Der Gefrierschutz von Trägermaterialien wird dem amorphen Zustand des Glycins in dem erhaltenen gefriergetrockneten Produkt zugeschrieben (M. J. Pikal, K. M. Dellermann, M. L. Roy, M. N. Riggin, The effects of formulation variables on the stability of freeze dried Human Growth Hormone, Pharm. Research., 8, Nr. 4 (1991), 427-436).
Nachteile, die mit der Anwesenheit einer amorphen Phase verbunden sind.
In Gegenwart allein einer festen amorphen Phase sackt das gefriergetrocknete Produkt bei Temperaturen oberhalb der Glasübergangstemperatur im Verlaufe des Gefrierens zusammen. Im Rahmen einer weichen amorphen Phase zeigen die chemischen Abbaureaktionen eine deutlich schnellere Kinetik als im Rahmen einer kristallinen Phase (Solid state stability and preformulation study of a new parenteral cephalosporin antibiotics (E1040), K. Ashizawa, K. Uchikwa, T. Hattori, Y. Ishibashi, Y. Miyake, T. Sato, Yakugaku Zasshi, 110 (3) (1990), 191- 201).
Weiterhin ist die größere Lösungsgeschwindigkeit von amorphen Substanzen gelegentlich von einer größeren Instabilität begleitet, wobei die Umwandlung einer Form im allgemeinen vom amophen Zustand zum kristallinen Zustand erfolgt (Galenica 2, Biopharmacie 2. Aufl. (1982), technique et documentation).
Zusammenfassend ist festzuhalten, daß die wissenschaftliche Literatur in bezug auf die Wirkung von Trägermaterialien auf die Stabilisierung von pharmazeutischen Wirkstoffen widersprüchliche Informationen ihrer Eigenschaften vermittelt und es nicht ermöglicht, sichere Informationen zu den Beziehungen zwischen der Struktur eines gefriergetrockneten Produkts und seiner Stabilität zu erlangen. Weiterhin wird die Rolle der Polyole und der Aminosäuren, ob sie nun allein oder in Kombination eingesetzt werden, nicht im Rahmen von verallgemeinerbaren Eigenschaften beschrieben, sondern wurde mit widersprüchlichen Ergebnissen in Abhängigkeit von den untersuchten Wirkstoffen und den eingesetzten Trägermaterial-Mengen beobachtet.
WO 93/23017 betrifft feste Dosierungseinheiten, die leicht in Wasser dispergierbar sind und die eine poröse Matrix aufweisen, welche als essentielle Bestandteile enthält:
- ein Matrix-bildendes Mittel ausgewählt aus Gelatinen, Pektinen, aus Sojafasern extrahierten Proteinen und Mischungen davon;
- eine oder mehrere Aminosäuren; und
- gegebenenfalls ein Kohlenhydrat.
Die erfindungsgemäßen gefriergetrockneten Formulierungen unterscheiden sich von den Zubereitungen der WO 93/12017 dadurch, daß sie kein Matrix-bildendes Mittel enthalten, welches nach dem Stand der Technik unerläßlich ist.
Es wurde nunmehr gefunden, daß ein synergistischer Effekt bezüglich der Stabilisierung von gefriergetrockneten pharmazeutischen Wirkstoffen besteht zwischen Mannitol und Alanin. Es konnte insbesondere gezeigt werden, daß dieser synergistische Effekt nur in einem engen Bereich der relativen Konzentrationen jedes dieser beiden Trägermaterialien besteht.
Auf der Grundlage der vorliegenden Erfindung wurde nunmehr gefunden, daß sich ein überraschender synergistischer Effekt durch die Koexistenz einer amorphen Phase und einer kristallinen Phase ergibt, welcher zur Folge hat, daß der gefriergetrocknete pharmazeutische Wirkstoff stabilisiert wird. Die vorliegende Erfindung beschreibt somit die Erzielung dieses Effekts bei bestimmten Mannitol/Alanin-Verhältnissen.
Somit betrifft die vorliegende Erfindung eine gefriergetrocknete Formulierung, die aus einer amorphen Phase und einer kristallinen Phase gebildet ist und die eine wirksame Menge mindestens eines pharmazeutischen Nicht-Protein- Wirkstoffs, Mannitol und Alanin enthält, wobei die beiden letzteren Trägermaterialien in einem Massenverhältnis R zwischen 0,1 und 1 vorliegen, wobei R für das Verhältnis der Masse des Mannitols zu der Masse des Alanins steht. Der in der genannten Formulierung enthaltene Wirkstoff bleibt in der Formulierung in gefriergetrockneter Form bei Temperaturen stabil, die sich von 25ºC bis 40ºC erstrecken können. Im gegebenen Fall ist die Auflösung des erhaltenen gefriergetrockneten Produkts schnell und vollständig. Das Aussehen des gefriergetrockneten Produkts ist nicht zusammengefallen und sein Wassergehalt ist mit der Beibehaltung der Stabilität des Wirkstoffs verträglich.
Es hat sich gezeigt, daß bei Werten von R zwischen 0,1 und 1:
- das gefriergetrocknete Produkt aus einer amorphen Phase und einer kristallinen Phase gebildet ist,
- die amorphe Phase überwiegend durch Mannitol und den Wirkstoff gebildet wird,
- die kristalline Phase überwiegend durch Alanin gebildet wird.
Obwohl die Erfindung nicht durch eine besondere Theorie eingeschränkt werden soll, kann man im Hinblick auf die durch die Kombination eines oder mehrerer Nicht-Protein-Wirkstoffe, von Mannitol und Alanin in den angegebenen Verhältnissen erzielte Stabilisierung folgende Hypothese aufstellen:
- Die amorphe Phase, die durch die Differentialthermoanalyse nachgewiesen werden kann, führt zu einem Gefrierschutz des pharmazeutischen Wirkstoffs im Verlauf des Gefrierens, wobei der Wirkstoff seinerseits in dieser amorphen Form dispergiert ist, während die kristalline Phase, die durch Röntgenstrahlenbeugung nachgewiesen wer den kann, die Struktur des gefriergetrockneten Produkts fixiert und sein Zusammensacken vermeidet.
Gemäß einer weiteren Ausführungsform betrifft die vorliegende Erfindung stabile gefriergetrocknete Produkte, die einen pharmazeutischen Wirkstoff enthalten, der gefriergeschützt ist durch eine feste amorphe Phase, die vollständig oder teilweise durch Mannitol gebildet ist, wobei diese amorphe Phase in dem nach der Sublimation und der Entwässerung der gefrorenen Lösung erhaltenen gefriergetrockneten Produkt zusammen mit einer kristallinen Phase vorliegt, die im wesentlichen durch Alanin gebildet ist.
Weiterhin betrifft die vorliegende Erfindung auch ein Verfahren zur Herstellung von gefriergetrockneten pharmazeutischen Formulierungen, die mindestens einen Nicht-Protein-Wirkstoff enthalten, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß man eine Mischung aus dem Wirkstoff, Mannitol und Alanin, in der das Mannitol und das Alanin in einem Verhätlnis R zwischen 0,1 und 1 vorliegen, wobei R für das Verhältnis zwischen der Masse des Mannitols und der des Alanins steht, gefriertrocknet.
Man kann andere pharmazeutisch annehmbare Trägermaterialien, die normalerweise in gefriergetrockneten Formen verwendet werden, in die erfindungsgmäße Formulierung einbringen, beispielsweise Puffer oder Säuren-Basen, welche die Einstellung des pH-Werts ermöglichen, oberflächenaktive Mittel, Salze, Konservierungsmittel, Insbesondere antibakterielle Konservierungsmittel, Antioxidantien oder Chelatbildner, mit Ausnahme von Trägermaterialien, die in dem den Wirkstoff enthaltenden gefriergetrockneten Produkt die Koexistenz der amorphen Phase, die im wesentlichen durch Mannitol gebildet wird, und der kristallinen Phase, die überwiegend durch Alanin gebildet wird, verhindern würden, wie beispielsweise bestimmte Proteinderivate tierischen oder pflanzlichen Ursprungs, wie Gelatinen, Dextrine oder aus Getreidekörnern oder Soja extrahierte Proteine, Gummen, wie Agar oder Xanthan, Polysaccharide, Alginate, Carboxymethylcellulosen, Pektine, synthetische Polymere, wie Polyvinylpyrrolidon, oder Komplexe mit Polysaccharid-Natur, wie Acaciagelatine. Als Puffer, die in die erfindungsgemäße Formulierung eingebracht werden, kann man insbesondere nennen Carbonat-, Borat-, Phosphat-, Citrat-, Tri-(hydroxymethyl)-aminoethan-, Maleat- und Tartrat-Puffer, wobei die Säuren oder die Basen, welche diese Puffer bilden, auch allein eingebracht werden können.
Als oberflächenaktive Mittel, welche in die erfindungsgemäße Formulierung eingebracht werden können, kann man insbesondere Folysorbate. Poloxamere, Tyloxapol und Lecithine nennen. Als in die erfindungsgemäße Formulierung einzubringende Salze kann man insbesondere die Natriumsalze nennen, wie das Ededat (Tetranatrium-EDTA), das Chlorid, das Docusat (1,4-Bis(2-ethylhexyl)-na trium-sulfosuccinat), das Bicarbonat und das Glutamat; Kaliumacetat; Dikaliumcarbonat und Magnesiumstearat.
Als Konservierungsmittel, welche in die erfindungsgemäße Formulierung eingeführt werden können, kann man insbesondere p-Hydroxybenzoesäuremethylester und p-Hydroxybenzoesäurepropylester, Benzethoniumchlorid, Natriummercurothiolat, Nitratphenylquecksilber, Benzylalkohol, Phenol und Metacresol nennen.
Die Koexistenz der amorphen Mannitolphase und der kristallinen Anilinphase ist unabhängig von der Anwesenheit und der Konzentration des zur Einstellung des pH-Werts der Lösung verwendeten Puffers, sie hängt jedoch von dem oben definierten Verhältnis R ab.
Formulierungsbeispiele für gefrierzutrocknende Lösungen, die zu den erfindungsgemäßen Formulierungen führen, sind die folgenden:
Ein pharmazeutischer Wirkstoff oder eine Kombination von pharmazeutischen Wirkstoffen, ein pharmazeutisch annehmbarer Puffer zur Einstellung des pH-Werts, Mannitol und Alanin mit einem Massenverhältnis R = Masse Mannitol/Masse Alanin, zwischen 0,1 und 1, Wasser für Injektionszwecke (injizierbare Präparate) sowie, falls erforderlich, antibakterielle Konservierungsmittel und Trägermaterialien, welche die Lösung des oder der Wirkstoffe begünstigen.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung stellt die Alanin/- Mannitol-Mischung den Hauptbestandteil.
Die Menge des vorhandenen Wirkstoffs wird durch seine Löslichkeit in Waser begrenzt. Die erfindungsgemäßen Formulierungen ergeben sich in der Tat durch die Gefriertrocknung von wäßrigen Lösungen, in denen der Wirkstoff vollständig gelöst ist.
In jedem Fall ist jegliches Trägermaterial in der Formulierung in einer Menge vorhanden, die geringer ist als die Menge der Mischung aus Alanin und Mannitol.
Die gefrierzutrocknenden Lösungen werden wie folgt hergestellt:
Man gibt die gewünschten Mengen des Puffers, des Alanins, des Mannitols, der Konservierungsmittel und des Wirkstoffs bei einer geeigneten Lösungstemperatur zu der für die Herstellung von injizierbaren Präparaten erforderlichen Menge Wasser oder des für ihre Lösung erforderlichen löslich machenden Mittels bis zu einer vollständigen Auflösung. Man filtriert die erhaltenen Lösungen in steriler Umgebung und verteilt sie in Behälter, vorzugsweise in Fläschchen oder Kapseln.
Die Gefriertrocknung der Lösungen wird wie folgt durchgeführt:
Die Lösung wird einem Zyklus des Gefrierens, dann der Sublimation und der Entwässerung unterworfen, der an das gefrierzutrocknende Volumen und den die Lösung enthaltenden Behälter angepaßt ist.
Vorzugsweise wählt man eine Gefriergeschwindigkeit aus, die in der Nähe von -2ºC/min bei Anwendung einer Gefriertrocknungsvorrichtung Usifroid (Frankreich) vom Typ SMH 15, SMJ 100 oder SMH2000 liegt.
Die Zeit, die Temperaturen und die Drücke der Sublimation und der Entwässerung werden in Abhängigkeit von den Volumina der gefrierzutrocknenden Lösung und dem in dem gefriergetrockneten Produkt angestrebten Restwassergehalt eingestellt.
Man erhält in dieser Weise ein gefriergetrocknetes Produkt (Lyophilisat), in dem das Alanin in kristalliner Form und das Mannitol in vollständig oder teilweise amorpher Form vorliegen. Das gefriergetrocknete Produkt kann bei 25ºC oder sogar bis zu 40ºC aufbewahrt werden, ohne die chemische und biologische Stabilität des enthaltenen Wirkstoffs zu verändern.
Der Fachmann verfügt über die vollständige Information im Hinblick auf die Methoden für die Herstellung von injizierbaren Formulierungen durch Auflösen der erfindungsgemäßen Zubereitungen in Remington's Pharmaceutical Sciences (1985), 17. Auflage oder in N. A. William & G. P. Polli, The lyophilization of pharmaceuticals: a litterature review, J. Parenteral Sci. Tech., 38, (2) (1984), 48- 59 oder in F. Franks, Freeze-drying: from empiricism to predictability, Cryo-letters, 11 (1990), 93-110.
Der Wirkstoff oder die Kombination von Wirkstoffen vom Nicht-Protein-Typ, der bzw. die erfindungsgemäß formuliert wird bzw. werden, können Analgetika, antiflammatorische Mittel, Antispasmodika, Antikrebsmittel oder Wirkstoffe sein, die in der Kardiologie, Angiologie, Gastero-Enterologie, Hämatologie und Hämostase, Hepatologie, Infektologie, Neurologie-Psychiatrie, Rhinologie, Rheumatologie, Toxikologie, Urologie oder im Bereich der Diagnostik oder als Regulatoren des Stoffwechsels und der Ernährung eingesetzt werden können.
Bei den oben als Beispiele erwähnten therapeutischen Familien und der Bereiche der biologischen Aktivität kann jegliches Produkt den Wirkstoff der erfindungsgemäßen Formulierungen bilden, weiche einen beträchtlichen technischen Fortschritt im Bereich der pharmazeutischen Technik darstellen. Vorzugsweise sind die am besten an die erfindungsgemäßen Formulierungen angepaßten Wirkstoffe jene, deren Stabilität in wäßriger Lösung problematisch ist. Es ist jedoch ohne weiteres möglicht, die vorliegende Erfindung auf Wirkstoffe anzuwenden, die keine besonderen Stabilitätsprobleme aufwerfen.
Im folgenden werden internationale Freinamen für die Bezeichnung der Wirkstoffe verwendet.
Der Wirkstoff der gefriergetrockneten pharmazeutischen Formulierungen der vorliegenden Erfindung kann insbesondere aus der folgenden Gruppe ausgewählt werden, die folgendes umfaßt:
- Phenylalkancarbonsäuren, beispielsweise Ketoprofen;
- antiphlogistische nichtsteroidale Mittel vom Typ "Oxicam", beispielsweise Piroxicam, Isoxicam, Tenoxicam;
- Paracetamol;
- Lysin- oder Arginen-acetylsalicylat;
- Corticosteroide, beispielsweise Methylprednisolon;
- Phloroglucin;
- Gallensäuren, beispielsweise Ursodesoxycholsäure oder eines ihrer pharmazeutisch annehmbaren Salze mit anorganischen oder organischen Basen, vorzugsweise ihr Natriumsalz;
- Anthracycline, beispielsweise Doxorubicin, Epirubicin, Idarubicin, Daunorubicin, Pirarubicin;
- Platin-Derivate, beispielsweise Cisplatin, Oxaliplatin, Carboplatin;
- Derivate von Alkaloiden von Vinca minor, beispielsweise Vinblastin, Vincristin;
- Derivate von Mutterkornalkaloiden, beispielsweise Dihydroergotamin, Dihydroergotoxin, Nicergolin;
- Derivate von Purin- oder Pyrimidin-Basen, beispielsweise Acyclovir, Gancyclovir, Cytarabin;
- Prostaglandine, beispielsweise Sulproston, Alprostadil;
- Benzodiazepine, beispielsweise Dikaliumclorazepat, Devazepid;
- Beta-Lactam-Antibiotika, beispielsweise Piperacillin, Tazobactam;
- Makrolid-Antibiotika, beispielsweise Erythromycin oder seine Derivate, im allgemeinen Leucomycin;
- Antibiotika der Tetracyclin-Familie, beispielsweise Minocyclin;
- Antibiotika vom Typ Chloramphenicol, beispielsweise Thiamphenicol;
- Antibiotika vom Typ Spiramycin:
- Stickstoff-haltige Senfderivate, beispielsweise Chlorambucil und Nitroso-Harnstoffe, beispielsweise Carmustin und Streptozocin. Die Stickstoffhaltigen Senfderivate und die Nitroso-Harnstoffe sind genauer beschrieben in Pharmacologie von M. Schorderet et coll., 2. Auflage, Kapitel 69 (1992), Hrgb. Frison. Roche, Paris;
- H&sub2;-Antagonisten, beipsielsweise Ranitidin, Famotidin oder eines ihrer pharmazeutisch annehmbaren Salze;
- Omeprazol und dessen Analoga;
- Vitamine, beispielsweise Thiamin, Riboflavin, Nicotinamid, Pyridoxin, Natriumpanthotenat, Biotin, Ascorbinsäure, Folsäure, Cyancobalamin, Retinol, Chole calciferol, Alphatocopherol, Cobalamid, Hydroxycobalamid;
- Antitumormittel ausgewählt aus Taxol, Taxoter und deren Analoga, Dacarbazin, Methotrexat, Plicamycin, Thiotepa, Streptozocin;
- kardiovaskuläre Arzneimittel ausgewählt aus Molsidomin oder seinen pharmazeutisch annehmbaren Salzen, insbesondere seines Hydrochlorids, Linsidomin, Acetazolamid, Meclofenoxat, Diltiazim, Natriumnitroprussiat;
- hämatologische Arzneimittel ausgewählt aus Ticlopidin oder seinen pharmazeutisch annehmbaren Salzen, insbesondere seinem Hydrochlorid, Molgramostim, Folinsäure;
- antikoagulierende und antithrombotische Arzneimittel ausgewählt aus Heparin, Heparin mit niedrigem Molekulargewicht in Form von Nadroparin-Calcium, Pamaparin-Natrium, Dalteparin-Natrium, Enoxaparin-Natrium, Ardeparin-Natrium, Certoparin-Natrium, Reviparin-Natrium, Minolteparin-Natrium, natürliche oder synthetische antithrombotische Pentasaccharide;
- Heparinoide, beispielsweise Lomoparan;
- Di-arginin-oxoglutarat und die pharmazeutisch annehmbaren Salze der Oxoglutarsäure;
- Pflanzenextrakte, beispielsweise auf der Grundlage von Weide, Harpagophytum, Ginseng, Fucus;
- ein Gen, ein DNA-Fragment oder ein RNA-Fragment für die Gentherapie, ein Ollgonucleotid, ein Antisens-Oligonucleotid, Nucleotide, die mit Proteinverbindungen verknüpft sind, wie beispielsweise Extrakte von Ribosomfraktionen, abgeschwächte oder inaktivierte lebende Viren;
- Valproasäure und deren Analoga;
- Metopimazin;
- Moxisylit;
- Pralidoxim;
- Deferoxamin;
- Phenobarbital oder andere Barbiturate;
- Clomethiazol;
- Natriumpamidronat, Natriumalandronat, Natriumrisendronat und andere als anti-osteoporotische Mittel wirkende Biphosphonate, insbesondere Tiludronat oder das Dinatriumsalz von {[4-Chlorphenyl)-thio]-methylen}-bis(phosphonat) (SR 41319) in Form des Hemihydrats oder des Monohydrats;
- 5-HT&sub2;-Antagonisten, insbesondere Ketanserin, Ritanserin, (1Z, 2E)-1-(2-Fluorphenyl)-3-(4-hydroxyphenyl)-prop-2-en-1-on-O-(2-dimethylaminoethyl)-oxim (SR 46349) oder eines seiner pharmazeutisch annehmbaren Salze;
-Antaaonisten des Anglotensins 11, insbesondere Tasosartan, Telmisartan, Iosar tan-natrium, Iosartan in Kombination mit Hydrochlorthiazid (HCTZ), Eprosartan, Candesartan-cilexetil, Valsartan, Irbesartan oder 2-n-Butyl-3-{[2'-(1H-tetrazol-5-yl)-biphenyl-4-yl]-methyl}-1,3-diazaspiro[4,4]non-1-en-4-on (SR 47436) und seine pharmazeutisch annehmbare Salze;
- Fantofaron oder 1-[(p-{3-((3,4-Dimethoxyphenethyl)-methylamino)-propoxy}- phenyl)-sulfonyl]-2-isopropylindolizin und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze;
- Tirapazamin oder 3-Amino-1,2,4-benzotriazin-1,4-dioxid und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze;
- (2S)-1-[(2R,3S)-5-Chlor-3-(2-chlorphenyl)-1-(3,4-dimethoxybenzolsulfonyl)-3- hydroxy-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonyl]-pyrrolidin-2-carboxamid (SR 49059) und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze;
- N,N-Dibutyl-3-{4-[(2-butyl-5-methylsulfonamido)-benzofuran-3-yl-carbonyl]- phenoxy}-propylamin und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze, insbesondere das Hydrochlorid (SR 33589);
- 6-(2-Diethylamino-2-methyl)-propylamino-3-phenyl-4-propylpyridazin (SR 46559) und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze;
- {(7S)-7-[(2R)-2-(3-Chlorphenyl)-2-hydroxyethylamino]-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalin-2-yloxy}-essigsäureethylester und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze, insbesondere das Hydrochlorid (SR 58611 A);
- 1-(2,4-Dichlorphenyl)-3-(N-piperidin-1-yl-carboxamido)-4-methyl-5-(4-chlorphenyl)-1H-pyrazol und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze, insbesondere das Hydrochlorid (SR 141716 A);
- 4-{[N-(3,4-Dimethoxyphenethyl)]-N-methylaminopropoxy}-2-benzolsulfonyl-3- isopropyl-1-methyl-indol (SR 33805) und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze;
- 2-{[1-(7-Chlorchinolin-4-yl)-5-(2,6-dimethoxyphenyl)-1H-pyrazol-3-carbonyl]- amino}-adamantan-2-carbonsäure (SR 48692) und deren pharmazeutisch annehmbare Salze;
- N-Cyclohexyl-N-ethyl-3-(3-chlor-4-cyclohexylphenyl)-prop-2-enylamin (SR 31747);
- (-)-N-Methyl-N-[4-(4-acetylamino-4-phenylpiperidino)-2-(3,4-dichlorphenyl)-butyl]-benzamid (SR 48968) und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze;
- (S)-1-{2-[3-(3,4-Dichlorphenyl)-1-(3-isopropoxyphenylacetyl)-piperidin-3-yl]- ethyl}-4-phenyl-1-azoniabicyclo(2.2.2)octan-chlorid (SR 140333A) und dessen pharmazeutisch annehmbare quartäre Salze, beispielsweise das Benzolsulfonat;
- 4-Amino-1-(6-chlorpvrid-2-yl)-piperidin und dessen pharmazeutisch annehm bare Salze, insbesondere das Hydrochlorid (SR 57227A);
- (S)-N-(1-{3-[1-Benzoyl-3-(3,4-dichlorphenyl)-piperidin-3-yl]-propyl}-4-phenyl-piperidin-4-yl)-N-methylacetamid (SR 142801) und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze;
- 2-{[4-(2-Chlorphenyl)-thiazol-2-yl]-aminocarbonyl}-indol-1-essigsäure (SR 27897) und deren pharmazeutisch annehmbare Salze;
- Clopidogrel oder (+ )-(S)-α-(2-Chlorphenyl)-4,5,6,7-tetrahydrothieno[3,2-c]pyridin-5(4H)-essigsäuremethylester und dessen pharmazeutisch annehmbaren Salze, insbesondere dessen Hydrogensulfat;
- 1-(2-Naphthalin-2-yl-ethyl)-4-(3-trifluormethylphenyl)-1,2,3,6-tetrahydropyridin-Hydrochlorid (SR 57746A) und dessen pharmazeutisch annehmbaren Salze, insbesondere das Hydrochlorid;
- N,N-Dimethyl-N'-(pyridin-3-yl)-methyl-N'-[4-(2,4,6-triisopropylphenyl)-thiazol- 2-yl]-ethan-1,2-diamin und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze, insbesondere das Fumarat (SR 27417);
- 2-[(5-(2,6-Dimethoxyphenyl)-1-{4-[(3-dimethylaminopropyl)-methylcarbamoyl]- 2-isopropyl-phenyl}-1H-pyrazol-3-carbonyl)-amino]-adamantan-2-carbonsäure und deren pharmazeutisch annehmbaren Salze (SR 142948A);
- 3-(1-{2-[4-Benzoyl-2-(3,4-difluorphenyl)-morpholino-2-y1]-ethyl}-4-phenyl-piperidin-4-yl)-1,1-dimethylharnstoff und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze (SR 144190A);
- 3-[N-{4-(4-(Aminoiminomethyl)-phenyl]-1,3-thiazol-2-yl}-N-(1-carboxymethylpiperidin-4-yl)-amino]-propionsäure-Trihydrochlorid und deren pharmazeutisch annehmbaren Salze (SR 121566);
- 3-(N-{4-[4-(Amino-(N-ethoxycarbonyl-imino)-methyl)-phenyl]-1,3-thiazol-2-yl}- N-(1-ethoxycarbonylmethyl)-piperidin-4-yl)-amino]-propionsäureethylester (SR 121787) und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze;
- 5-Ethoxy-1-[4-(N-tert.-butylcarbamoyl)-2-methoxybenzolsulfonyl]-3-spiro-[4-(2- morpholinoethyloxy)-cyclohexan]-indolin-2-on (SR 121463) und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze.
Besonders bevorzugt sind die erfindungsgemäßen Formulierungen, bei denen der Wirkstoff ausgewählt ist aus 2-{[4-(2-Chlorphenyl)-thiazol-2-yl]-aminocarbonyl}-indol-1-essigsäure oder deren Kaliumsalz, Irbesartan, Clopidogrel, Ursodesocycholsäure und deren Natriumsalz, 1-(2-Naphthalin-2-ylethyl)-4-(3-trifluormethylphenyl)-1,2,3,6-tetrahydropyridin-Hydrochlorid, N, N-Dimethyl-N'-(pyridin-3-yl)-methyl-N'-(4-(2,4,6-triisopropylphenyl)-thiazol-2-yl]-ethan-1,2-diamin- Fumarat, 2-[(5-(2,6-Dimethoxyphenyl)-1-{4-[(3-dimethylaminopropyl)-methylcarbamoyll-2-isopropyiphenyl}-1H-pyrazoi-3-carbonyl)-amino]-adamantan-2-carbon säure, 3-(1-{2-[4-Benzoyl-2-(3,4-difluorphenyl)-morpholino-2-yl]-ethyl}-4-phenylpiperidin-4-yl)-1,1-dimethylharnstoff, 3-[N-{4-(4-(Aminoiminomethyl)-phenyl]-1,3- thiazol-2-yl}-N-(1-carboxymethylpiperidin-4-yl)-amino]-propionsäure-Trihydrochlorid, 3-[N-{4-[4-(Amino-(N-ethoxycarbonyl-imino)-methyl)-phenyl]-1,3-thiazol- 2-yl}-N-(1-ethoxycarbonylmethyl)-piperidin-4-yl)-amino]-propionsäureethylester, 5-Ethoxy-1-[4-(N-tert.-butylcarbamoyl)-2-methoxy-benzolsulfonyl]-3-spiro-[4-(2- morpholinoethyloxy)-cyclohexan]-indolin-2-on und dessen pharmazeutisch annehmbare Salze.
Die folgenden Formulierungen sind besonders vorteilhaft:
- Jede Formulierung, die erhalten worden ist durch Gefriertrocknung einer Lösung, in der Mannitol in einer Konzentration von 9 mg pro ml und Alanin in einer Konzentration von 18 mg pro ml enthalten ist, und der Wirkstoff 2-{[4-(2- Chlorphenyl)-thiazol-2-yl]- aminocarbonyl}-indol-1-essigsäure in einer Konzentration von 1,18 mg pro ml oder eines ihrer pharmazeutisch annehmbaren Salze in einer äquivalenten Konzentration ist;
- jede Formulierung, die erhalten worden ist durch Gefriertrocknung einer Lösung, in der Mannitol in einer Konzentration von 10 mg pro ml und Alanin in einer Konzentration von 23 mg pro ml enthalten ist, und der Wirkstoff Irbesartan in einer Konzentration von 1 mg pro ml oder eines seiner pharmazeutisch annehmbaren Salze in einer äquivalenten Konzentration ist; und
- jede Formulierung, die erhalten worden ist durch Gefriertrocknung einer Lösung, in der Mannitol in einer Konzentration von 9 mg pro ml und Alanin in einer Konzentration von 18 mg pro ml enthalten ist, und der Wirkstoff 1-(2-Naphthalin-2-yl-ethyl)-4-(3-trifluormethylphenyl)-1,2,3,6-tetrahydropyridin-Hydrochlorid in einer Konzentration zwischen 0,01 mg und 0,2 mg pro ml oder eines seiner pharmazeutisch annehmbaren Salze in einer äquivalenten Konzenration ist.
Als Wirkstoff kann man auch ein pharmazeutisch annehmbares Salz irgendeines der oben aufgezählten Wirkstoffe, der in ein Salz überführt werden kann, auswählen.
Der pharmazeutische Wirkstoff wird vorzugsweise aus der Gruppe ausgewählt, die durch das Kaliumsalz der Säure SR 27897, nachfolgend als SR 27897B bezeichnet, Irbesartan oder SR 47436, Clopidogrel, Ursodesoxycholsäure oder deren Natriumsalz, SR 57746A und SR 27417A umfaßt.
Zur Verdeutlichung der vorliegenden Erfindung, ohne sie jedoch in irgendeiner Weise einzuschränken, wurden Bewertungen durchgeführt, bei denen als Beispiel des pharmazeutischen Wirkstoffs SR 27897B, SR 47436 (Irbesartan) und SR 57746A ausgewählt worden sind. Hierzu wurden mehrere Lösungen, die SR 27897B in einer Konzentration von 1 mg/ml, einen Phosphat-Puffer (Na&sub2;H- PO&sub4;/NaH&sub2;PO&sub4;) in unterschiedlichen Molaritäten und pH-Werten zwischen 7,5 und 8,25; Mannitol und Alanin n einem Verhältnis R von Masse Mannitol zu Masse Alanin zwischen 0,1 und 1 enthielten, hergestellt, gefriergetrocknet und analysiert.
Weiterhin wurden verschiedene Lösungen, die SR 47436 in einer Konzentration von 1 mg/ml, Kaliumhydroxid in einem [KOH]/[SR 47436]-Molverhältnis von größer oder gleich 1 oder eine Mannitol/Alanin-Mischung mit einem Verhältnis R von Masse Mannitol/Masse Alanin zwischen 0,1 und 1 und Ethanol enthielten, hergestellt, gefriergetrocknet und analysiert.
Schließlich wurde eine Lösung, die SR 57746A in Form des Hydrochlorids in einer Konzentration von 0,11 mg/ml, wasserfreie Citronensäure und eine Mannitol/Alanin-Mischung mit einem Verhältnis R von Masse Mannitol/Masse Alanin von gleich 0,5 enthielt, hergestellt, gefriergetrocknet und analysiert.
Die nachfolgende TABELLE 1 verdeutlicht die Zusammensetzungen der untersuchten Lösungen, welche SR 27897B enthalten. Für jede dieser Formulierungen beträgt R = 0,5 mit Konzentrationen von Mannitol, Alanin beziehungsweise SR 27897B von 9 mg/ml, 18 mg/ml bzw. 1 mg/ml. TABELLE 1
Die nachfolgende TABELLE 2 gibt die Zusammensetzung der untersuchten gefriergetrockneten Lösungen an, die SR 47436 enthalten. TABELLE 11
Die nachfolgende TABELLE 3 gibt die Zusammensetzung der untersuchten gefriergetrockneten Lösungen an, die SR 57746A in Form des Hydrochlorids enthalten. TABELLE III
Es wird die Trübung der wiederaufgelösten gefriergetrockneten Produkte mit Hilfe eines Trübungsmeßgeräts Ratio Hach 18900-00 bestimmt. Die Ergebnisse sind in nephelometrischen Trübungseinheiten (NTU) angegeben, die in Standard methods for the examinatlon of water and wastewater der American Pubüc Health Assoclation definiert sind.
Die organoleptischen Kriterien der gefriergetrockneten Produkte werden visuell untersucht und berücksichtigen die Färbung des gefriergetrockneten Produkts, seine Struktur (zusammengefallen oder nicht) sowie die Beobachtung einer eventuellen Phasentrennung zwischen der Kruste und dem Kern des gefriergetrockneten Produkts.
Der Wassergehalt der gefriergetrockneten Produkte wird kolorimetrisch nach der in Ph. Fr. X.te Aufl., V. 3.5.6.A. bestimmt durch Injektion von 2 ml Methanol mit Hilfe einer Injektionsspritze in das in einem Fläschchen enthaltene gefriergetrocknete Produkt. Der Wassergehalt wird in Gewichtsprozent des gefriergetrockneten Produkts angegeben.
Die Röntgenbeugungsanalyse der gefriergetrockneten Produkte erfolgt mit Hilfe eines Diffraktometers SIEMENS D500 TT; Röntgenstrahlenquelle: CuKα; Generator: 40 kV, 25 mA: Hinter-Monochromator; Schlitzblenden: 1/1/1/0,16/0,6; Probenhaltezung auf einem Pyrex-Träger; Abtastbereich: von 4º bis 40º pro Minute in 2 Theta-Bragg-Winkel gemessen.
Die Differentialthermoanalyse (DSC) erfolgt unter Verwendung der Vorrich tung DSC 7 Perkin Eimer mit den folgenden Eigenschaften: Standard mit Indium und Blei, Probenmenge zwischen 5 und 10 mg in einer 50 ul-Kapsel, Anfangstemperatur 10ºC, Aufheizgeschwindigkeit 10ºC/Minute, Endtemperatur 300ºC. Die Bestimmung von SR 27897B erfolgt flüssigchromatographisch (Ph. Eur. 2. (I), V. 6.20.4) bei 254 nm unter Verwendung einer gepfropften Säule C 18 mit einer Länge von 25 cm, einem Innendurchmesser von 4,6 mm und einer Granulometrie von 10 um (Bischoff Referenz 25461840). Die mobile Phase wird gebildet durch eine Mischung aus gleichen Volumina eines Acetatpuffers mit einem pH-Wert von 4,0 (Eisessig und konzentrierter Ammoniak, Merck) und von Acetonitril für chromatographische Zwecke (Sharlau Referenz Ac33). Die Kontrollösung wird aus einer Lösung von SR 27897B (geliefert von Sanofi Recherche) mit einer Konzentration von 50 ug pro ml Methanol (Merck Referenz 6009) gebildet. Die zu analysierende Lösung wird gebildet durch Auflösen des gefriergetrockneten Produkts in 100 ml ultragereinigtem Wasser (Millipore, Wasser "Milli-Q"). Der Durchsatz beträgt 2 ml/min. Man berechnet die Fläche der spezifischen Peaks, die nach einer Injektion von 20 ul der Kontrollösung und dann der zu analysierenden Lösung für jedes der Chromatogramme erhalten worden sind. Ausgehend von der Berechnung dieser beiden Flächen kann der Gehalt des gefriergetrockneten Produkts an SR 27897B in mg/Fläschchen berechnet werden.
Die Bestimmung der Begleitsubstanzen (Verunreinigungen) von SR 27897B in dem gefriergetrockneten Produkt im Verlaufe der Aufbewahrung, einem signifikanten Parameter für die Stabilität des Produkts, erfolgt ebenfalls flüssigchromatographisch auf der gepfropften Säule C18 (Bischoff Referenz 25461840). Die mobile Phase wird aus einem Gradienten aus Acetonitril und dem Acetatpuffer mit einem pH-Wert von 4,0, dessen Zusammensetzung in der TABELLE A angegebenen ist, gebildet. TABELLE A
Die Kontrollösung wird durch eine Lösung von SR 27897B (Sanofi Recher che) in einer Konzentration von 10 ug pro ml Methanol gebildet. Die zu analysierende Lösung erhält man durch Auflösen des Inhalts eines Fläschchens mit dem gefriergetrockneten Produkt in 5 ml Methanol. Der Durchsatz beträgt 2 ml/min. Man berechnet in gleicher Weise die Fläche der spezifischen Peaks der unbekannten Verunreinigungen auf den Chromatogrammen nach der Injektion von 20 ul der zu analysierenden Lösung erhalten hat im Vergleich zu der Fläche des Peaks, der für SR 27897B spezifisch ist und den man nach der Injektion von 20 ul der Kontrollösung erhalten hat. Der Gehalt jeder der unbekannten Verunreinigungen und der Gesamtgehalt an Verunreinigungen des gefriergetrockneten SR 27897B, ausgedrückt als Gewichtsprozentsatz des Produkts, kann ausgehend von diesen Berechnungen bestimmt werden.
Die Bestimmung von SR 47436 erfolgt durch Flüssigchromatographie HPLC (Ph. Eur. 2(I), V 6.20.4.) bei 220 nm unter Verwendung einer gepfropften Siliciumdioxid-Säule C 18 aus nichtrostendem Stahl mit einer Länge von 25 cm, einem Außendurchmesser von 8 mm und einem Innendurchmesser von 4 mm, einem Durchmesser der sphärischen Siliciumdioxidkörnchen von 7 um und einem Porendurchmesser von 120 Å, welche einer "end capping"-Behandlung unterworfen worden sind (Vergleichssäule 720042 von der Firme Chromoptic). Die mobile Phase wird aus einer Mischung aus 60 Volumen einer Phosphatpufferlösung mit einem pH-Wert von 3,0 (Phosphorsäure, Prolabo Referenz 20624295, Triethylamin, Fluka Referenz 90340) und 40 Volumen Acetonitril für chromatographische Zwecke (Merck Referenz 14291) mit einem Durchsatz von 1 ml/min gebildet.
Die erste Kontrollösung wird durch eine Lösung von SR 47436 (Sanofi Recherche) in einer Konzentration von 0,5 mg pro ml der mobilen Phase gebildet. Die zweite Kontrollösung wird gebildet durch eine Lösung, die 0,5 mg SR 47436 und 0,5 mg Verunreinigungen, die dem Ausgangsprodukt entsprechen (Sanofi Recherche), pro ml der mobilen Phase enthält. Die zu analysierende Lösung erhält man durch Auflösen des gefriergetrockneten Produkts in 10 ml der mobilen Phase. Man stellt durch aufeinanderfolgende Injektion der ersten und zweiten Kontrollösung sicher, daß die Verfahrensbedingungen zufriedenstellend sind (Auflösungsfaktor besser als 2 zwischen zwei Peaks bei einer Injektion von 10 ul der zweiten Kontrollösung, Variationskoeffizient der Fläche des Peaks von kleiner oder gleich 1% bei einer Serie von 5 Injektionen von 10 /41 der ersten Kontrollösung). Nach der Injektion von 10 ul einer jeden Kontrollösung und 20 ul eine jeden zu analysierenden Lösung bestimmt man durch Berechnung der Flächen der spezifischen Peaks, die auf den Chromatogrammen erhalten worden sind, den Gehalt an SR 47436 in mg bezogen auf das gefriergetrocknete Produkt.
Die Bestimmung der begleitenden Substanzen (Verunreinigungen) von SR 47436 erfolgt durch Flüssigchromatographie HPLC (Ph. Eur. 2 (I) V 6.20.4.) bei 220 nm unter Verwendung einer Säule C18 mit gepfropftem Siliciumdioxid (siehe die Bestimmung von SR 47436). Die mobile Phase wird gebildet durch eine Mischung aus 60 Volumen eines Phosphatpuffers mit einem pH-Wert von 3,1 und 40 Volumen Acetonitril für chromatographische Zwecke bei einem Durchsatz von 1 ml/min. Die beiden Kontrollösungen werden für den ersten Fall durch eine Lösung von SR 47436 (Sanofi Recherche) in einer Konzentration von 0,5 mg pro ml Methanol (geliefert von SDS unter der Referenz 0930221) und im zweiten Fall durch eine Lösung von SR 47436 in einer Konzentration von 0,5 ug pro ml Methanol gebildet. Die zu analysierende Lösung erhält man durch Auflösung des gefriergetrockneten Produkts in 10 ml Wasser für Injektionszwecke (für die Herstellung von injizierbaren Präparaten, PPI). Die Analyse muß spätestens eine halbe Stunde nach der Wiederauflösung durchgeführt werden. Man stellt zufriedenstellende Versuchsbedingungen durch aufeinanderfolgende Injektionen von 10 ul Wasser für Injektionszwecke und 10 ul der beiden Kontrollösungen sicher (Retentionszeit des Hauptpeaks, der den beiden Kontrollen benachbart ist, bezogen auf das stärkste Rauschsignal, das gleich oder größer ist als 10 im Fall der ersten Kontrollösung). Nach der Injektion von 10 ul der zu analysierenden Lösung bestimmt man durch Berechnung der Flächen der spezifischen Peaks, die man auf den Chromatogrammen erhalten hat, die Gehalte an der begleitenden Substanz und den Gesamtgehalt an begleitenden Substanzen (Verunreinigungen) ausgedrückt als Prozentsatz des Gewichts des Produkts.
Die Bestimmung von SR 57746A (Sanofi Recherche) erfolgt durch Flüssigchromatographie bei 224 nm unter Verwendung einer gepfropften Sfliciumdioxidsäule C 18 mit einer Länge von 25 cm, einem Innendurchmesser von 4 mm und einer Korngröße von 7 um (Macherey Nagel. Referenz 720042). Die mobile Phase wird gebildet durch eine Mischung aus 45 Volumen Acetonitril für chromatographische Zwecke (Rathburn Referenz RH 1016) und 55 Volumen einer Pufferlösung mit einem pH-Wert von 3,0 (hergestellt durch Verdünnen von 5,5 ml Phosphorsäure in 950 ml entmineralisiertem filtriertem Wasser (Millipore Alpha-Q) und Einstellen des pH-Werts auf 3,0 mit einer Triethylamin-Lösung (Fluka, Referenz 90340) und anschließende Zugabe von 10 ml Acetonitril und Auffüllen mit entmineralisiertem filtriertem Wasser auf 1000 ml). Die Kontrollösung wird durch eine Lösung von SR 57746A in einer Konzentration von 15,0 mg pro 100 ml Methanol (Carlo Erba, Referenz 414814) gebildet. Die zu analysierende Lösung erhält man durch Auflösen des gefriergetrockneten Produkts in 3,0 ml einer Mischung aus 25 Volumen Methanol und 75 Volumen filtriertem entmineralisiertem Wasser. Der Durchsatz beträgt 1 ml pro Minute. Man bestimmt die Fläche der spezifischen Peaks, die man nach der Injektion von 10 ml der Kontrollösung und dann der zu analysierenden Lösung für jedes der Chromatogramme erhalten hat. Der Gehalt des gefriergetrockneten Produkts an SR 57746A, ausgedrückt als mg/Fläschchen, kann ausgehend von der Messung der beiden Flächen bestimmt werden.
Die Bestimmung der begleitenden Substanzen (Verunreinigungen) von SR 57746A in dem gefriergetrockneten Produkt im Verlaufe der Aufbewahrung wird ebenfalls durch Flüssig-Säulenchromatographie unter Anwendung der in "Dosage" von (Ph. Eur. 2. (I) V.6.20.4.) angegebenen chromatographischen Bedingungen durchgeführt. Die Kontrollösung wird durch eine Lösung von SR 57746A in einer Konzentration von 0,15 ug pro ml Methanol gebildet. Die zu analysierende Lösung erhält man durch Auflösung des Inhalts des gefriergetrockneten Produkts in 3 ml einer Mischung aus 25 Volumen Methanol und 75 Volumen filtriertem entmineralisiertem Wasser. Der Durchsatz beträgt 1 ml pro Minute. Man bestimmt in gleicher Weise die Fläche der spezifischen Peaks für die unbekannten Verunreinigungen, die man auf den Chromatogrammen nach der Injektion von 10 ul der zu analysierenden Lösung erhalten hat, im Vergleich zu der Fläche der spezifischen Peaks für SR 57746A, die man nach der Injektion von 10 ul der Kontrollösung erhalten hat. Man kann den Gehalt jeder der unbekannten Verunreinigungen und den Gesamtgehalt an Verunreinigungen des gefriergetrockneten SR 57746A, ausgedrückt als Prozentsatz der Fläche ausgehend von diesen Messungen bestimmen.
Die unter Verwendung dieser verschiedenen Methoden erhaltenen Analysenergebnisse sind nachfolgend beschrieben.
Die nachfolgende TABELLE 4 verdeutlicht die Anfangs-Kontrollergebnisse, die erhalten worden sind an den gefriergetrockneten Produkten von SR 27897B bezüglich des Wassergehalts (Gew.-% des gefriergetrockneten Produkts), der Glasübergangstemperatur Tg (in ºC), die durch DSC bestimmt worden ist, und von gefriergetrockneten Produkten, die mit Wasser für Injektionszwecke wiederhergestellt worden sind im Hinblick auf die Trübung (NTU) und den pH-Wert. TABELLE 4
Als zusätzliches Beispiel wurden mehrere Chargen von gefriergetrockneten Produkten SR 27897B im Hinblick auf ihre Stabilität bei 5ºC, 25ºC, 40ºC und 50ºC während 1 Monate, 3 Monaten und 6 Monaten untersucht.
Die TABELLE 5 verdeutlicht den Gesamtgehalt an begleitenden Substanzen (Verunreinigungen) ausgedrückt als Gewichts-% des anfänglichen SR 27897B, die man in den gefriergetrockneten Produkten von SR 27897B nach einer Lagerungszeit von 1 Monat erhalten hat und welche die Tatsache verdeutlichen, daß die Stabilität nach dieser Aufbewahrungsdauer ausgezeichnet ist. TABELLE 5
Die TABELLE 6 zeigt den Gesmtgehalt an begleitenden Substanzen (Verunreinigungen), die man bei den gefriergetrockneten Produkten von SR 27897B nach einer Aufbewahrungszeit von 3 Monaten bei 50ºC erhalten hat und welche zeigen, daß die Stabilität nach dieser Lagerungszeit ausgezeichnet ist. TABELLE 6
Schließlich verdeutlicht die TABELLE 7 den Gesamtgehalt an begleitenden Substanzen (Verunreinigungen), die man in den gefriergetrockneten Produkten von SR 27897B nach einer Aufbewahrungsdauer von 6 Monaten bei 5ºC und 40ºC erhalten hat und welche zeigen, daß die Stabilität nach dieser Aufbewahrungszeit ebenfalls ausgezeichnet ist. TABELLE 7

Röntgenstrahlenbeugung

Die Ergebnisse der Analyse durch Röntgenstrahlenbeugung an Pulvern von zwei gefriergetrockneten Produkten, die eine Mischung aus Mannitol und Alanin in einem Verhältnis von R = Masse Mannitol/Masse Alanin = 0,5 enthalten, ist in der Fig. 1 in den Diffraktogrammen 1 und 2 wiedergegeben. Die Diffraktogramme 3 und 4 der Fig. 1 verdeutlichen die Kontrollen für Alanin und Mannitol. Wie man aus dieser Figur entnehmen kann, erhält man die Bande zwischen 10º und 11º, die für kristallines Mannitol charakteristisch ist, bei den beiden gefriergetrockneten Produkten von SR 27897B nicht. Somit liegt bei R = 0,5 Alanin allein in kristalliner Form vor, während Mannitol in amorpher Form vorhandenist.

Differentialthermoanalyse

Die Fig. 2 verdeutlicht den Einfluß des Massenverhältnisses von Alanin zu Mannitol auf die Glasübergangstemperatur der gefriergetrockneten Produkte. Diese Figur zeigt uns, daß die maximale Glasübergangstemperatur bei (1/R) > 1 erhalten wird, das heißt, bei einem Wert von R zwischen 0 und 1. Im allgemeinen ist die Glasübergangstemperatur repräsentativ für die maximale Stabilitätstemperatur des gefriergetrockneten Produkts. So wird die maximale Stabilitätstemperatur des gefriergetrockneten Produkts bei Werten von R zwischen 0 und 1 erreicht.
Die nachfolgende TABELLE 8 faßt die Ergebnisse der anfänglich durchgeführten Kontrolluntersuchungen an den gefriergetrockneten Produkten von SR 47436 bezüglich des Wassergehalts, des Gesamtgehalts an begleitenden Substanzen (Verunreinigungen) und an gefriergetrockneten Produkten, die mit Wasser für Injektionszwecke aufgenommen worden sind, im Hinblick auf den pH-Wert zusammen. TABELLE 8
Die nachfolgende TABELLE 9 zeigt die Gesamtgehalte an begleitenden Substanzen ausgedrückt als Prozentsatz der Reinheit von SR 47436 in den gefriergetrockneten Produkten von SR 47436 Charge 12 nach einer Aufbewahrungsdauer von 1 Woche und 2 Wochen bei 5ºC, 25ºC, 35ºC und 50ºC. TABELLE 9
Die nachfolgende TABELLE 10 verdeutlicht die Gesamtgehalte an begleitenden Substanzen ausgedrückt als Prozentsatz der Verunreinigungen in den gefriergetrockneten Produkten von SR 47436 Charge 13 nach einer Aufbewahrungsdauer von 3 Monaten, 6 Monaten und 9 Monaten bei 5ºC, 25ºC und 35ºC. TABELLE 10
Die nachfolgende TABELLE 11 verdeutlicht die Gesamtgehalte an begleitenden Substanzen ausgedrückt als Prozentsatz der Verunreinigungen in den gefriergetrockneten Produkten von SR 57746A nach einer Aufbewahrungsdauer von 1 Monat und 3 Monaten bei 5ºC, 25ºC und 40ºC und eines unmittelbar wieder aufgelösten gefriergetrockneten Produkts von SR 57746A (Vergleich). TABELLE 11

BEISPIEL 1

Zusammensetzung eines gefriergetrockneten Produkts von SR 27897 (Base), das mit 1 ml Wasser für Injektionszwecke aufzunehmen ist

BESTANDTEILE Einheitsformulierung in (mg)
SR 27897B* 1,18 mg
Pyrogenfreies Alanin 18,0 mg
Mannitol 9,0 mg
Pyrogenfreies Mononatriumphosphat-Dihydrat 0,3 mg
Pyrogenfreies Dinatriumphosphat-Dodecahydrat 8,5 mg
Weißes Glasfläschen Typ 1,3 ml 1
Verschlußstopfen aus grauem Chlorbutylkautschuk 1
Blaue Aluminium-Flip-Off-Kapsel, Durchmesser 13 mm 1
* entsprechend 1 mg SR 27897 in der Säureform

BEISPIEL 2

Zusammensetzung eines gefriergetrockneten Produkts von SR 27897 (Base), das mit 5 ml Wasser für Injektionszwecke aufzunehmen ist

BESTANDTEILE Einheitsformulierung in (mg)
SR 27897B* 5,9 mg
Pyrogenfreies Alanin 90,0 mg
Pyrogenfreies Mannitol 45,0 mg
Pyrogenfreies Mononatriumphosphat-Dihydrat 1,5 mg
Pyrogenfreies Dinatriumphosphat-Dodecahydrat 42,5 mg
Weißes Glasfläschen Typ 1,20 ml 1
Verschlußstopfen aus grauem Chlorbutylkautschuk, Durchmesser 20 mm 1
Blaue Aluminium-Flip-Off-Kapsel, Durchmesser 20 mm 1
* entsprechend 5 mg SR 27897 in der Säureform

BEISPIEL 3

Zusammensetzung eines gefriergetrockneten Produkts von SR 47436 (Base) mit einem Gehalt von 5 mg, das mit 5 ml Wasser für Injektionszwecke aufzunehmen ist

BESTANDTEILE Einheitsformulierung in (mg)
SR 47463 5,0 mg
Pyrogenfreies Alanin 115,0 mg
Pyrogenfreies Mannitol 50,0 mg
Kaliumhydroxid 0,687 mg
Weißes Glasfläschen Typ 1,20 ml 1
Verschlußstopfen aus grauem Chlorbutylkautschuk, Durchmesser 20 mm 1
Aluminiumkapsel mit Innenhütchen, Durchmesser 20 mm 1

BEISPIEL 4

Zusammensetzung eines gefriergetrockneten Produkts von SR 57746A (Hydrochlorid), das mit 4 ml Wasser für Injektionszwecke aufzunehmen ist

BESTANDTEILE Einheitsformulierung in (mg)
SR 57746A 0,44 mg
Pyrogenfreies Alanin 72,0 mg
Pyrogenfreies Mannitol 36,0 mg
Pyrogenfreie wasserfreie Citronnensäure 30,8 mg
Weißes Glasfläschen Typ 1,20 ml 1
Verschlußstopfen aus grauem Chlorbutylkautschuk, Durchmesser 20 mm 1
Blaue Aluminium-Flip-Off-Kapsel, Durchmesser 20 mm 1

BEISPIEL 5

Zusammensetzung einer gefrierzutrocknenden Lösung von SR 57746A (Hydrochlorid), ausgedrückt in Konzentration für die Endvolumina der Lösung, die durch Zugabe einer geeigneten Menge Wassers für Injektionszwecke 100 ml erreichen können

BESTANDTEILE Einheitsformulierung in mg/ml
SR 57746A 0,11 mg/ml
Pyrogenfreies Alanin 18,0 mg/ml
Pyrogenfreies Mannitol 9,0 mg/ml
Pyrogenfreie wasserfreie Citronnensäure 7,5 mg/ml
Wasser für Injektioszwecke ad 1 ml
Weißes Glasfläschen Typ 1 1
Verschlußstopfen aus grauem Chlorbutylkautschuk 1
Blaue Aluminium-Flip-Off-Kapsel 1

BEISPIEL 6

Zusammensetzung eines gefriergetrockneten Produkts von SR 57746A (Hydrochlorid), welches 0,01 mg bis 0,2 mg SR 57746A (Hydrochlorid) enthält und mit 1 ml Wasser für Injektionszwecke aufzunehmen ist

BESTANDTEILE Einheitsformulierung in (mg)
Pyrogenfreies Alanin 18,0 mg
Pyrogenfreies Mannitol 9,0 mg
Pyrogenfreie wasserfreie Citronnensäure 7,7 mg
Weißes Glasfläschen Typ 1,3 ml 1
Verschlußstopfen aus grauem Chlorbutylkautschuk 1
Blaue Aluminium-Flip-Off-Kapsel, Durchmesser 13 mm 1

BEISPIEL 7

Zusammensetzung eines gefriergetrockneten Produkts von SR 57746A (Hydrochlorid), das mit 4 ml Wasser für Injektions zwecke aufzunehmen ist

BESTANDTEILE Einheitsformulierung in (mg)
SR 57746A 0,44 mg
Pyrogenfreies Alanin 72,0 mg
Pyrogenfreies Mannitol 36,0 mg
Pyrogenfreie wasserfreie Citronnensäure 30,8 mg
Polysorbat 80 4,0 mg
Weißes Glasfläschen Typ 1,20 ml 1
Verschlußstopfen aus grauem Chlorbutylkautschuk, Durchmesser 20 mm 1
Blaue Aluminium-Flip-Off-Kapsel, Durchmesser 20 mm 1

BEISPIEL 8

Zusammensetzung einer gefrierzutrocknenden Lösung von SR 57746A (Hydrochlorid), ausgedrückt in Konzentrationen der Endvolumina der Lösung, die 100 ml durch Zugabe einer geeigneten Menge Wasser für Injektionszwecke erreichen können

BESTANDTEILE Einheitsformulierung in mg/ml
SR 57746A 0,11 mg/ml
Pyrogenfreies Alanin 18,0 mg/ml
Pyrogenfreies Mannitol 9,0 mg/ml
Pyrogenfreie wasserfreie Citronnensäure 7,7 mg/ml
Polysorbat 80 1,0 mg/ml
Wasser für Injektioszwecke ad 1 ml
Weißes Glasfläschen Typ 1 1
Verschlußstopfen aus grauem Chlorbutylkautschuk 1
Blaue Aluminium-Flip-Off-Kapsel 1

BEISPIEL 9

BESTANDTEILE Einheitsformulierung in mg
Pyrogenfreies Alanin 18,0 mg/ml
Pyrogenfreies Mannitol 9,0 mg/ml
Pyrogenfreie wasserfreie Citronnensäure 7,7 mg/ml
Polysorbat 80 1,0 mg/ml
Weißes Glasfläschen Typ 1,3 ml 1
Verschlußstopfen aus grauem Chlorbutylkautschuk 1
Blaue Aluminium-Flip-Off-Kapsel, Durchmesser 13 mm 1

Claims

1. Gefriergetrocknete Formulierung gebildet aus einer amorphen Phase und einer kristallinen Phase, die pharmazeutisch annehmbar ist und mindestens einen Nicht-Protein-Wirkstoff enthält, dadurch gekennzeichnet, daß sie Mannitol und Alanin in einem Verhältnis R zwischen 0,1 und 1 enthält, worin R für das Verhältnis der Masse Mannitol zu der Masse Alanin steht, wobei Formulierungen ausgeschlossen sind, die zusätzlich einen oder mehrere Matrix-bildende Bestandteile enthalten, ausgewählt aus der folgenden Gruppe: Protein-Derivate tierischen oder pflanzlichen Ursprungs, wie Gelatinen, Dextrine oder aus Getreide oder Soja extrahierte Proteine, Gummen, wie Agar oder Xanthan, Polysaccharide, Alginate, Carboxymethylcellulose, Pektine, synthetische Polymere, wie Polyvinylpyrrolidon, Komplexe mit Polysaccharid-Natur, wie Acacia-Gelatine und Mischungen davon.

2. Formulierung nach Anspruch 1, worin der Wirkstoff in Kombination mit einem anderen Wirkstoff mit Protein-Natur vorliegt.

3. Formulierung nach Anspruch 1 oder 2, enthaltend zusätzlich mindestens eine zusätzliche Verbindung ausgewählt aus: einem Puffer, einem oberflächenaktiven Mittel, einem Konservierungsmittel, einem Salz, einem Antioxidans und einem Chelatbildner.

4. Formulierung nach Anspruch 1 oder 2 für die Erzeugung einer Lösung zur Verabreichung auf parenteralem Wege.

5. Formulierung nach Anspruch 1 oder 2 für die Erzeugung einer Lösung zur Verabreichung auf oralem Wege.

6. Formulierung nach Anspruch 4 für die Erzeugung einer injizierbaren Lösung.

7. Formulierung nach Anspruch 1, die direkt auf oralem Wege verabreichbar ist.

8. Formulierung nach Anspruch 1, worin der Wirkstoff ausgewählt ist aus der Gruppe, die Phenylalkansäuren, nichtsteroidale antiinflammatorische Mittel vom Typ Oxicam, Paracetamol. Lysin- oder Arginin-acetylsalicylat, Gallensäuren, Corticosteroide, Anthracyline, Phloroglucin, Platin-Derivaten, Derivate von Vincaminor-Alkaloiden, Derivate von Mutterkorn-Alkaloiden. Derivate von Purinbasen oder Pyrimidinbasen, Prostaglandine, Benzodiazepine, Beta-Lactam-Antibiotika, Macrolid-Antibiotika, Antibiotika der Familie der Tetracycline, Antibiotika vom Typ Chloramphenicol, Antibiotika vom Typ Spiramycin, Nitroso-Harnstoffe, azotiertem Senf, H&sub2;-Antagonisten, Omeprazol, Vitamine, antitumorale Mittel, kardlovaskuläre Arzneimittel, hämatologische Arzneimittel, antikoagulierende und antithrombotische Arzneimittel, Heparinoide, Diargin-Oxoglutarat, Pflanzenextrakte, Nucleotide, Valproinsäure-Analoga, Metopimazin. Moxisylit, als antiosteoporotisches Mittel wirksame Diphosphonate, Pralidoxim, Deferoxamin, Barbiturate, Clomethiazol, 5-HT&sub2;-Antagonisten, Angiotensin II-Antagonisten, Fantofaron, Tirapazamin, (2S)-1-[(2R,3S)-5-Chlor-3-(2-chlorphenyl)-1-(3,4-dimethoxybenzolsulfonyl)-3-hydroxy-2,3-dihydro-1H-indol-2-carbonyl]-pyrrolidin-2-carboxamid, N,N- Dibutyl-3-{4-[(2-butyl-5-methylsulfonamido)-benzofuran-3-yl-carbonyl]-phenoxy}- propylamin, 6-(2-Diethylamino-2-methyl)-propylamino-3-phenyl-4-propyl-pyridazin, {(7S)-7-[(2R)-2-(3-Chlorphenyl)-2-hydroxyethylamino]-5,6,7,8-tetrahydronaphthalin-2-yloxy}-essigsäureethylester, 1-(2,4-Dichlorphenyl)-3-(N-piperidin-1- yl-carboxamido)-4-methyl-5-(4-chlorphenyl)-1H-pyrazol, 4-{[N-(3,4-Dimethoxyphenethyl)]-N-methylaminopropoxyl}-2-benzolsulfonyl-3-isopropyl-1-methyl-indol, 2-{[1-(7-Chlorchinolin-4-yl)-5-(2,6-dimethoxyphenyl)-1H-pyrazol-3-carbonyl]-amino}-adamantan-2-carbonsäure, N-Cyclohexyl-N-ethyl-3-(3-chlor-4-cyclohexylphenyl)-prop-2-enylamin, (-)-N-Methyl-N-[4-(4-acetylamino-4-phenylpiperidino)-2- (3,4-dichlorphenyl)-butyl]-benzamid, (S)-1-{2-[3-(3,4-Dichlorphenyl)-1-(3-isopropoxyphenylacetyl)-piperidin-3-yl]-ethyl}-4-phenyl-1-azoniabicyclo[2.2.2]-octan und dessen pharmazeutisch annehmbare quaternäre Salze, 4-Amino-1-(6-chlorpyrid-2-yl)-piperidin, (S)-N-(1-{3-[1-Benzoyl-3-(3.4-dichlorphenyl)-piperidin-3-yl]- propyl}-4-phenylpiperidin-4-yl)-N-methylacetamid, 2-{[4-(2-Chlorphenyl)-thiazol- 2-yl]-aminocarbonyl}-indol-1-essigsäure, Clopidogrel, 1-(2-Naphthalin-2-ylethyl)- 4-(3-trifluormethylphenyl)-1,2,3,6-tetrahydropyridin-Hydrochlorld, N,N-Dimethyl- N'-(pyridin-3-yl)-methyl-N'-[4-(2,4,6-triisopropylphenyl)-thiazol-2-yl]-ethan-1,2- diamin und deren pharmazeutisch annehmbare Salze umfaßt.

9. Formulierung nach Anspruch 1, worin der Wirkstoff ausgewählt ist aus 2-{[4-(2-Chlorphenyl)-thiazol-2-yl]-aminocarbonyl}-indol-1-essigsäure oder deren Kaliumsalz, Irbesatan, Clopidogrel, Ursodesoxycholsäure und deren Natriumsalz, 1-(2-Naphthalin-2-ylethyl)-4-(3-trifluormethylphenyl)-1,2,3,6-tetrahydropyridin- Hydrochlorid, N,N-Dimethyl-N'-(pyridin-3-yl)-methyl-N'-[4-(2,4,6-trfisopropylphenyl)-thiazol-2-yl]-ethan-1,2-diamin-Fumarat, 2-[(5-(2,6-Dimethoxyphenyl)-1-{4- [(3-dimethylaminopropyl)-methylcarbamoyl]-2-isopropyl-phenyl}-1H-pyrazol-3- carbonyl)-amino]-adamantan-2-carbonsäure, 3-(1-{2-[4-Benzoyl-2-(3,4-difluorphenyl)-morpholino-2-yl]-ethyl}-4-phenyl-piperidin-4-yl)-1,1-dimethylharnstoff, 3-[N- {4-(4-(Aminoiminomethyl)-phenyl]-1,3-thiazol-2-yl}-N-(1-carboxymethylpiperidin- 4-yl)-amino-]-propionsäure-Trihydrochlorid, 3-[N-{4-(4-(Amino-(N-ethoxycarbonylimino)-methyl)-phenyl)-1,3-thiazol-2-yl}-N-[1-(ethoxycarbonylmethyl)-piperidin-4- yl)-amino]-propionsäurethylester, 5-Ethoxy-1-[4-(N-tert.-butylcarbamoyl)-2-methoxy-benzolsulfonyl]-3-spiro-[4-(2-morpholinoethyloxy)-cyclohexan]-indolin-2-on und deren pharmazeutisch annehmbaren Salzen.

10. Formulierung nach Anspruch 1 erhalten nach dem Gefriertrocknen einer Lösung, enthaltend Mannitol in einer Konzentration von 9 mg pro ml, Alanin in einer Konzentration von 18 mg pro ml und als Wirkstoff 2-{[4-(2-Chlorphenyl)- thiazol-2-yl]-aminocarbonyl}-indol-1-essigsäure in einer Konzentration von 1,18 mg pro ml oder eines ihrer pharmazeutisch annehmbaren Salze in einer äquivalenten Konzentration.

11. Formulierung nach Anspruch 1 erhalten nach dem Gefriertrocknen einer Lösung enthaltend Mannitol in einer Konzentration von 10 mg pro ml, Alanin in einer Konzentration von 23 mg pro ml und als Wirkstoff Irbesartan in einer Konzentration von 1 mg pro ml oder eines seiner pharmazeutisch annehmbaren Salze in einer äquivalenter Konzentration.

12. Formulierung nach Anspruch 1 erhalten nach dem Gefriertrockenen einer Lösung, enthaltend Mannitol in einer Konzentration von 9 mg pro ml, Alanin in einer Konzentration von 18 mg pro ml und als Wirkstoff 1-(2-Naphthalin-2-ylethyl)-4-(3-trifluormethylphenyl)-1,2,3,6-tetrahydropyridin-Hydrochlorid in einer Konzentration zwischen 0,01 mg und 0,2 mg pro ml oder eines seiner pharmazeutisch annehmbaren Salze in einer äquivalenten Konzentration.

13. Verfahren zur Stabilisierung eines Nicht-Protein-Wirkstoffs in einer pharmazeutisch annehmbaren gefriergetrockneten Formulierung, umfassend die folgenden Stufen:

- Lösen des Nicht-Protein-Wirkstoffs, von Mannitol und Alanin in einem Verhältnis R (Mannitol/Alanin) zwischen 0,1 und 1, gegebenenfalls in Gegenwart eines Puffers und von Konservierungsstoffen in Wasser für die Herstellung injizierbarer Präparate oder in einem löslich machenden Mittel bei einer geeigneten Lösungstemperatur;

- Filtrieren der erhaltenen Lösungen; und

- Gefriertrocknen der erhaltenen Lösungen durch einen Zyklus des Einfrierens und dann der Sublimation und der Trocknung.