DE60114159T2 - Messung von stoffen in flüssigkeiten - Google Patents

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Description

  • Vorrichtungen zum Messen von Blutglukoseniveaus sind für Diabetiker von unschätzbarem Wert und insbesondere Vorrichtungen, die von den Patienten selbst verwendet werden können, da diese dann ihre eigenen Glukoseniveaus beobachten und eine geeignete Insulindosis einnehmen können. Dementsprechend ist die Genauigkeit derartiger Vorrichtungen besonders wichtig, da ein nicht korrekter Ablesewert zur Verabreichung der falschen Insulinmenge führen könnte, was sehr schädlich sein könnte.
  • Bei allen in der Praxis verwendeten Blutglukosemeßsystemen ist ferner zumindest ein Teil der Vorrichtung, d.h. der Teil, der mit der Blutprobe in Berührung kommt, wegwerfbar. Das bedeutet, daß es besonders wichtig ist, daß insbesondere die Kosten aller Einwegteile minimiert werden können, da ein Nutzer im allgemeinen eine große Anzahl davon benötigt.
  • Bei bekannten Glukosemeßvorrichtungen wird derzeit ein elektrochemisches Meßverfahren gegenüber früheren kolorimetrischen Verfahren bevorzugt. Das allgemeine Prinzip besteht darin, daß ein elektrischer Strom zwischen zwei Sensorteilen gemessen wird, die als das Arbeitssensorteil bzw. das Referenzsensorteil bezeichnet werden. Das Arbeitssensorteil umfaßt eine Elektrode, auf der eine Schicht aus einem Enzymreagenz aufgebracht ist, das ein Enzym und eine Elektronenvermittlerverbindung umfaßt. Bei Anlage eines Potentials über die Sensorteile wird durch den Transfer von Elektronen von der gemessenen Substanz (dem Enzymsubstrat) über das Enzym und zur Oberfläche der Elektrode ein Strom erzeugt. Der erzeugte Strom ist sowohl zur Fläche des Sensorteils als auch der Konzentration der Glukose in der Testprobe proportional. Da die Fläche des Arbeitssensorteils vermutlich bekannt ist, sollte der elektrische Strom proportional zur Glukosekonstruktion sein.
  • Im Stand der Technik ist bereits bekannt, daß ungenaue Ergebnisse erzielt werden, wenn das Arbeitssensorteil nicht vollständig mit Blut bedeckt ist, da dann seine wirksame Fläche reduziert ist. Es wurden zahlreiche Wege zur Bewältigung dieses Problems vorgeschlagen, wovon zwei in den US-Patenten 5,628,890 und US 5,582,697 offenbart sind. Beide Verfahren basieren auf einem unidirektionalen Blutfluß über die Oberfläche des Teststreifens und bei beiden wird die Testmessung durch Wahrnehmung des Vorhandenseins der Probenflüssigkeit an einer Elektrode oder einem Sensorteil initiiert, die bzw. das dem Arbeitssensorteil nachgeordnet ist.
  • Im internationalen Patent WO 9958709 wird ein verbesserter Einweg-Teststreifen offenbart, der drei oder mehr Elektroden umfaßt. Dieser Streifen ist so gestaltet, daß zwischen einer gemeinsamen Pseudo-Referenz/Gegenelektrode und jeder der anderen Elektroden bei der Anlage eines gemeinsamen Potentials mittels eines amperometrischen Meßgeräts unterschiedliche elektrische Potentiale aufrecht erhalten werden können. Diese Fähigkeit wird dem Teststreifen durch Vorsehen unterschiedlicher Schaltkreiswiderstände für jede dieser anderen Elektroden verliehen.
  • Gemäß dem europäischen Patent EP 0537761 wird ein Biosensor bereitgestellt, der ein elektrisch isolierendes Substrat, ein auf dem Substrat ausgebildetes Hauptelektrodensystem, das eine Arbeitselektrode und eine Gegenelektrode aufweist, eine sich in Kontakt mit oder in der Nähe des Hauptelektrodensystems befindende Reaktions schicht, die eine Oxidoreduktase enthält, und ein mit einem Abstand vom Hauptelektrodensystem vorgesehenes Unterelektrodensystem als Referenz, das eine Arbeitselektrode und eine Gegenelektrode aufweist, umfaßt.
  • Schließlich wird im US-Patent US 5,628,890 ein Elektrodenstreifen beschrieben, der einen Elektrodenträger, eine Referenz- oder Gegenelektrode, die auf dem Träger angeordnet ist, eine von der Referenz- oder Gegenelektrode auf dem Träger beabstandete Arbeitselektrode, eine einen umschlossenen Raum über der Referenz- und Arbeitselektrode definierende Abdeckschicht, die eine Öffnung zur Aufnahme einer Probe im geschlossenen Raum aufweist, und mehrere im umschlossenen Raum zwischen der Abdeckschicht und dem Träger eingefügte Netzschichten umfaßt, wobei die Abdeckschicht eine von den Elektroden beabstandete Probenapplizierungsöffnung aufweist und die Referenzelektrode von der Arbeitselektrode an einer Position beabstandet ist, die von der Öffnung entfernt und auf der gegenüberliegenden Seite der Arbeitselektrode angeordnet ist. Die Arbeitselektrode umfaßt ein Enzym, das zur Katalyse einer Reaktion geeignet ist, die ein Substrat für das Enzym oder ein Substrat, das mit einem Enzym katalytisch reagiert, und einen Vermittler umfaßt, der dazu geeignet ist, Elektronen, die zwischen der Enzym-katalysierten Reaktion und der Arbeitselektrode übertragen werden, zu übertragen, um ein für die Aktivität des Enzyms und für die Verbindung repräsentativen Strom zu erzeugen.
  • Das Problem des Vorhandenseins einer nicht ausreichenden Probenflüssigkeit und daß somit der Arbeitssensorteil nicht vollständig bedeckt ist, kann offensichtlich durch Reduzieren der Größe der Arbeitssensorteils verringert werden. Jedoch ergibt ein Arbeitssensorteil mit einer kleineren Fläche tendenziell eine größere Schwankung bei den kalibrierten Ergebnissen.
  • Von den Erfindern wurde im vorliegenden Fall erkannt, daß ungenaue Ergebnisse neben einer Verursachung durch eine unvollständige Bedeckung des Arbeitssensorteils auch von gelegentlichen Defekten bei der Produktion der Teststreifen für derartige Vorrichtungen und auch von einer unbeabsichtigten Beschädigung des Arbeitssensorteils, beispielsweise durch einen Nutzer, stammen können. Soweit es den Erfindern bekannt ist, bestand der einzige praktische Weg zur Berücksichtigung dieses Problems in der Sicherstellung eines möglichst präzisen Druckprozesses bei der Erzeugung der Teststreifen und darin, sich auf eine angemessene Qualitätskontrolle zu verlassen.
  • Es ist eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung, die oben genannten Nachteile mit dem Verfahren, wie es im Anspruch 1 definiert ist, zumindest teilweise abzumildern.
  • Es ist somit ersichtlich, daß erfindungsgemäß der von der Substanzkonzentration abhängige Strom effektiv zweimal gemessen wird und die beiden Messungen so miteinander verglichen werden, daß jede als eine Überprüfung der anderen verwendet werden kann.
  • Die Erfindung wird als besonders vorteilhaft im Kontext elektrochemischer Untersuchungen gesehen, bei welchen die Substanz, deren Konzentration überprüft werden soll, wie beispielsweise Glukose im Blut, mit einem Element auf den Arbeitssensorteilen, wie beispielsweise einem Enzymreagenz reagiert, um Ladungsträger zu erzeugen und dadurch die Erzeugung des zur Konzentration der Substanz in der Flüssigkeit proportionalen elektrischen Strom zu bewirken.
  • Somit wird ersichtlich, daß gemäß dem in Anspruch 1 definierten erfinderischen Verfahren die durch die beiden Arbeitssensorteile geführten Ströme in Folge ihrer Erzeugung von Ladungsträgern verglichen werden und einen Hinweis auf einen Fehler liefern, wenn die beiden Ströme stark ungleich sind, d.h. wenn der Strom an einem Sensorteil zu deutlich davon abweicht, was aus der Betrachtung des Stroms am anderen zu erwarten wäre. Darauffolgend wird mit dem Verfahren bestimmt, daß eines der Sensorteile nicht richtig mit der Probenflüssigkeit bedeckt war.
  • Bei Betrachtung der Erfindung in einer anderen Weise wird somit ein Verfahren bereitgestellt, mit dem für eine gegebene Gesamtfläche des Arbeitssensorteils und somit ein gegebenes minimales Probenvolumen eine Erfassung einer unzureichenden Befüllung durch Unterteilen der Fläche des Arbeitssensorteils in zwei Teile sichergestellt wird.
  • Für den Fachmann ist verständlich, daß gewissermaßen ein Verfahren bereitgestellt wird, das einen Selbsttest für einen richtigen Gebrauch umfaßt. Insbesondere im Zusammenhang mit einer Vorrichtung, bei der die Sensorteile auf einem getrennten Testelement vorgesehen sind, ist dies von Vorteil, da es sich typischerweise um einen in Massen hergestellten Teststreifen, wie beispielsweise zum Messen von Blutglukoseniveaus handelt. Typischerweise werden derartige Streifen von Laien verwendet, die diese nicht notwendigerweise mit ausreichender Sorgfalt behandeln. Daher umfaßt das abnehmbare Testelement einen Einwegteststreifen.
  • Die beiden Sensorteile sind in zweckmäßiger Weise am Testelement angeordnet. Das Testelement kann so angeordnet sein, daß die Probenflüssigkeit frei über die Arbeitssensorteile fließen kann. Noch weiter bevorzugt ist jedoch, daß die Probenflüssigkeit auf einen im wesentlichen unidirektionalen Fluß über die Arbeitssensorteile beschränkt ist.
  • Besonders bevorzugt wird, daß die beiden Arbeitssensorteile einander nachgeordnet sind. Dadurch kann sichergestellt werden, daß eines der Sensorteile immer vollständig bedeckt ist, bevor das Bedecken des anderen beginnt, so daß die wenn auch geringe Gefahr vermieden werden kann, daß keine ausreichende Probenflüssigkeit zur Bedeckung beider Sensorteile aufgebracht wird, und darüber hinaus, daß jedes Sensorteil teilweise mit derselben Menge bedeckt wird. Es ist jedoch verständlich, daß die erfindungsgemäßen Einrichtungen, falls das oben genannte geringe Risiko als akzeptabel betrachtet wird, eine viel höhere Flexibilität bei der Anordnung der Sensorteile als bekannte Vorrichtungen zulassen, während dennoch ein Schutz gegen die Anwendung eines unzureichenden Volumens an Probenflüssigkeit oder gegen einen anderweitigen nicht korrekten Gebrauch des Produkts oder gegen eine Beschädigung gewährleistet wird.
  • Es kann vorkommen, daß die von den beiden Arbeitssensorteilen erzeugten Ströme nicht direkt vergleichbar sind, weil beispielsweise die Sensorteile nicht gleich sind. In diesem Fall ist die Meßeinrichtung vorzugsweise dazu eingerichtet, geeignete Gewichtungen auf die von einem oder beiden Arbeitssensorteilen zurückgegebenen Messungen anzuwenden, um diese zu normieren. Der Differenzparameter könnte dann beispielsweise einfach die arithmetische Differenz zwischen den beiden normierten Stromwerten sein. Vorzugsweise umfassen beide Sensor teile jedoch dasselbe Arbeitsmaterial und alternativ, jedoch vorzugsweise zusätzlich dieselbe Fläche. Am meisten wird somit bevorzugt, daß die beiden Arbeitssensorteile im wesentlichen identisch sind. Damit können die Differenzparameter auf einfache Weise einen direkten Vergleich zwischen den jeweiligen Strömen an den Sensorteilen beinhalten, um zu bestimmen, ob eine zuverlässige Messung der Substanzkonzentration durchgeführt werden kann.
  • Der zur Festlegung einer ungenauen Messung verwendete Schwellwert kann in zweckmäßiger Weise gewählt werden. Typischerweise wird der Schwellwert empirisch gewählt, da ein geeigneter Wert von der inhärenten Veränderlichkeit beim Herstellungsprozeß, der gewünschten Präzision der Ergebnisse, etc. abhängt. In einem bestimmten Umfang besteht ein Kompromiß zwischen der Genauigkeit, die durch das Setzen einer niedrigen Schwelle erreicht werden kann, und dem Anteil der Messungen, die als zu ungenau vernachlässigt werden. Daher könnte die Schwelle vorteilhafter Weise beispielsweise auf ein Niveau gesetzt werden, bei dem ein Patient, der sich auf die Ergebnisse zur Verabreichung von Insulin verließe, keinen nennenswerten Schaden erleiden könnte.
  • Bei dem Differenzparameter kann es sich um einen absoluten Wert, wie beispielsweise die Differenz zwischen den an jedem Sensorteil gemessenen Strömen, handeln. Vorzugsweise ist der Differenzparameter jedoch dimensionslos, d.h. beispielsweise ein Prozentsatz des einen oder des anderen der gemessenen Ströme.
  • Vorzugsweise werden die Ströme nach einer bestimmten Zeit gemessen, obwohl dies nicht unbedingt notwendig ist.
  • Der zur Berechnung der Konzentration der Substanz verwendete tatsächliche Stromwert kann der von einem der Arbeitssensorteile sein. Vorzugsweise ist er jedoch eine Kombination daraus, wie beispielsweise die Summe oder der Mittelwert der beiden. Daraus ergibt sich der Vorteil, daß die maximale effektive Arbeitsfläche verwendet wird, was weiter dazu beiträgt, die Präzision der erhaltenden Ergebnisse zu verbessern. Eine bevorzugte Ausführungsform der Erfindung wird im folgenden anhand eines Beispiels mit Bezugnahme auf die begleitenden Zeichnungen beschrieben, in welchen:
  • 1 ein Basiselement für einen Teststreifen gemäß der Erfindung zeigt;
  • 2 die Anordnung von auf das Basiselement aufgebrachten Kohlenstoffspuren zeigt;
  • 3 die auf den Streifen aufgebrachte Isolationsschicht zeigt;
  • 4 die Enzymreagenzschicht zeigt;
  • 5 eine Haftschicht zeigt;
  • 6 eine Schicht aus einem hydrophilen Film zeigt;
  • 7 die Deckschicht des Streifens zeigt;
  • 8 eine Graphik der ohne Verwendung eines erfindungsgemäßen Verfahrens erhaltenden Ergebnisse zeigt; und
  • 9 eine zu 8 ähnliche Graphik zeigt, die unter Verwendung eines erfindungsgemäßen Verfahrens erhalten wurde.
  • Mit Bezugnahme auf 1 ist dort ein länglicher Polyesterstreifen 2 gezeigt, der die Basis eines Teststreifens zum Messen der Glukosekonzentration in einer Blutprobe bildet. Das Basiselement 2 ist isoliert gezeigt, ob wohl in der Praxis am Ende des Herstellungsprozesses ein Array derartiger Streifen aus einer großen Hauptlage herausgeschnitten wird.
  • In 2 ist das Muster einer Kohlenstofffarbe gezeigt, die bei diesem Beispiel durch Siebdruck auf das Basiselement aufgebracht wird. Dazu könnte jedoch jede geeignete im Stand der Technik bekannte Ablagerungstechnik verwendet werden. Die Kohlenstoffschicht umfaßt vier verschiedene Bereiche, die voneinander elektrisch isoliert sind. Durch die erste Spur 4 wird an ihrem distalen Ende eine Elektrode 4b für ein Referenz-/Gegensensorteil gebildet. Die Spur 4 erstreckt sich in Längsrichtung zur Bildung eines Verbindungsanschlusses 4a an ihrem proximalen Ende. Durch die zweite und dritte Spur 6, 8 werden Elektroden 6b, 8b an ihren distalen Enden für zwei Arbeitssensorteile und jeweilige Verbindungsanschlüsse 6a, 8a an ihren proximalen Enden gebildet. Der vierte Kohlenstoffbereich ist lediglich eine Verbindungsbrücke 10, die vorgesehen wird, um in einer geeigneten Meßvorrichtung einen Stromkreis zu schließen, um sie einzuschalten, wenn der Teststreifen korrekt eingeführt wurde.
  • In 3 ist die nächste ebenfalls durch Siebdruck aufzubringende Schicht gezeigt. Dabei handelt es sich um eine wasserunlösliche Isolationsmaske 12, durch die ein Fenster über den Elektroden 4b, 6b, 8b gebildet wird und mit der somit die Größe des freigelegten Kohlenstoffs und somit kontrolliert wird, wo die Reagenzschicht 14 (4) mit den Kohlenstoffelektroden in Berührung kommt. Die Größe und die Form des Fensters ist so gewählt, daß die beiden Elektroden 6b, 8b ein Enzymfeld mit exakt derselben auf diese aufgedruckten Fläche aufweisen. Da bedeutet, daß bei einem gegebenen Potential jedes Arbeitssensorteil in Gegenwart einer Blutprobe theoretisch denselben elektrischen Strom führt.
  • Auf die Maske 12 und somit auf die Elektroden 4b, 6b, 8b ist durch das Fenster in der Maske eine Enzymschicht, bei der es sich bei dieser Ausführungsform um eine Glukoseoxidase-Reagenzschicht 14 (4) handelt zur Bildung des Referenz-/Gegensensorteils bzw. der beiden Arbeitssensorteile aufgedruckt. Eine Haftschicht mit einer Dicke von 150 μm wird dann auf den Streifen mit dem in 5 gezeigten Muster aufgedruckt. Verglichen mit den vorherigen Figuren wurde dieses Muster zur Verdeutlichung vergrößert. Drei getrennte Bereiche des Klebstoffs 16a, 16b, 16c definieren zusammen zwischen diesen eine Probenkammer 18.
  • Zwei Abschnitte eines hydrophilen Films 20 (6) werden auf das distale Ende des Streifens laminiert und dort mit Hilfe des Klebstoffs 16 in Position gehalten. Der erste Abschnitt des Films hat die Wirkung, die Probenkammer 18 in einen schmalen Kanal umzuformen, durch den mit Hilfe einer Kapillarwirkung Flüssigkeit in diesen und entlang desselben gezogen wird. Die Endschicht ist in 7 gezeigt. Es handelt sich dabei um ein schützendes Kunststoffabdeckband 22, das am distalen Ende einen transparenten Abschnitt 24 aufweist. Dadurch wird es einem Nutzer möglich, unmittelbar die Aussage zu treffen, ob ein Streifen verwendet wurde, und es wird eine grobe visuelle Überprüfung unterstützt, ob eine ausreichende Menge an Blut aufgebracht wurde.
  • Die Verwendung des Streifens wird im folgenden beschrieben. Der Teststreifen wird in eine Meßvorrichtung eingeführt. Durch den Brückenabschnitt 10 wird ein Schaltkreis in der Vorrichtung geschlossen und die Vorrichtung somit durch diesen automatisch eingeschaltet. Die Vorrichtung umfaßt auch Kontakte zur Verbindung mit den Anschlüssen 4a, 6a, 8a am Streifen. Durch die Meßvorrichtung wird ein Potential von 400 mV zwischen dem Gegen-/Referenzsensorteil und jedem der beiden Arbeitssensorteile über die oben genannten Anschlüsse angelegt.
  • Danach wird ein Bluttropfen auf das distale Ende des Streifens aufgebracht. Durch die Kapillarwirkung wird das Blut längs der Probenkammer 18 und über den Gegen-/Referenzsensorteil und die beiden Arbeitssensorteile gesogen.
  • Nach einer vorbestimmten Zeit wird der durch jeden Arbeitssensorteil fließende elektrische Strom gemessen und werden die beiden Messungen verglichen. Falls sie um mehr als 10% voneinander abweichen, wird an der Meßvorrichtung eine Fehlernachricht angezeigt und der Test muß wiederholt werden. Falls sie jedoch innerhalb von 10% voneinander liegen, werden die beiden Ströme in der Vorrichtung addiert und in einen Glukosepegel umgewandelt, der auf einem LCD angezeigt wird.
  • Zur beispielhaften Darstellung der gemäß der Erfindung erzielbaren Vorteile wurde unter Verwendung eines in der oben angegebenen Form hergestellten Streifens ein Vergleichsexperiment ausgeführt. Im Experiment wurden Bluttropfen mit einem in Schritten von 0,2 μl von 1 auf 2 μl zunehmenden Volumen und einer konstanten Glukosekonzentration auf derartige Streifen aufgebracht, wobei jedes Volumen acht mal wiederholt wurde. Der an jedem Arbeitssensorteil gemessene Strom wurde gemessen und aufgezeichnet. Die Ergebnisse sind in der an diese Beschreibung angefügten Tabelle 1 gezeigt.
  • Im ersten Teil des Tests wurden die beiden Ströme lediglich miteinander addiert, um einen einzelnen Arbeitssensorteil mit ihrer kombinierten Fläche zu simulieren. Die Ergebnisse sind in 8 aufgetragen.
  • Im zweiten Teil des Tests wurden die beiden Ströme zunächst miteinander verglichen. Lediglich, wenn sie sich um weniger als 10% unterschieden, wurden sie addiert und als gültige Werte vorgelegt. Sich um mehr als 10% unterscheidende Werte wurden nicht berücksichtigt. Die Ergebnisse dieses zweiten Teils des Tests sind in 9 aufgetragen.
  • Es ist unmittelbar ersichtlich, daß die zweite Gruppe von Ergebnissen wesentlich präziser ist, d.h. daß sie eine viel geringere Schwankung aufweist. Darüber hinaus ist die zweite Gruppe von Ergebnissen auch wesentlich genauer als die erste, da sicher davon ausgegangen werden kann, daß die Ergebnisse lediglich dann den Tatsachen entsprechen, wenn beide Arbeitssensorteile vollständig bedeckt sind, da die beiden Arbeitssensorteile in der Praxis lediglich dann miteinander konsistente Ergebnisse liefern, wenn sie beide vollständig bedeckt sind.
  • Somit ist erkennbar, daß die vorliegende Erfindung die Erfassung und Zurückweisung der Tests ermöglicht, bei welchen eine nicht ausreichende Probe auf den Teststreifen aufgebracht wurde, d.h. solche, bei welchen der Teststreifen nicht korrekt verwendet wurde.
  • Für den Fachmann ist verständlich, daß viele Änderungen an dem vorangehend Beschriebenen innerhalb des Umfangs der Erfindung möglich sind. Beispielsweise kann die Erfindung dazu verwendet werden, den Pegel jeder geeigneten Substanz in jeder beliebigen Flüssigkeit zu messen und nicht lediglich von Glukose in Blut. Des weiteren ist auch die Differenzzahl von 10%, die bei der oben beschriebenen Ausführungsform verwendet wurde, lediglich beispielhaft und es kann jede beliebige geeignete Zahl gewählt werden.
  • Tabelle 1
    Figure 00080001
  • Tabelle 1 (Fortsetzung)
    Figure 00090001

Claims (3)

  1. Verfahren zur Bestätigung eines hinreichenden Volumens einer zu einer elektrochemischen Meßvorrichtung auf einem Teststreifen zugeführten Probenflüssigkeit, umfassend die Schritte: Bereitstellen einer Meßvorrichtung zum Messen der Konzentration einer Substanz in einer Probenflüssigkeit, wobei die Vorrichtung einen ersten Arbeitssensorteil (6(b)) zur Erzeugung von Ladungsträgern im Verhältnis zur Konzentration der Substanz in der Probenflüssigkeit, einen zweiten Arbeitssensorteil (8(b)) ebenfalls zur Erzeugung von Ladungsträgern im Verhältnis zur Konzentration der Substanz in der Probenflüssigkeit und einen Referenzsensorteil (4(b)) umfaßt, welcher eine gemeinsame Referenz sowohl für den ersten als auch den zweiten Arbeitssensorteil bildet, wobei der erste und zweite Arbeitssensorteil und der Referenzsensorteil auf einem Einwegteststreifen vorgesehen sind; Zuführen der Probenflüssigkeit zur Meßvorrichtung; Messen eines elektrischen Stroms an jedem Arbeitssensorteil proportional zur Konzentration der Substanz in der Probenflüssigkeit; Vergleichen des elektrischen Stroms von jedem der Arbeitssensorteile zur Festlegung eines Differenzparameters; und wenn der Differenzparameter größer ist als eine vorbestimmte Schwelle, Festlegen eines Fehlerzustands zur Angabe eines Mangels eines ausreichenden Probenvolumens.
  2. Verfahren nach Anspruch 1, welches das Messen des Stroms an jedem Arbeitssensorteil nach einer vorbestimmten Zeit, welche auf das Zuführen der Probe folgt, umfaßt.
  3. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die zu messende Substanz Glukose ist und jeder der Arbeitssensorteile Ladungsträger im Verhältnis zur Konzentration der Glukose in der Probenflüssigkeit erzeugt.
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