DE60013164T2

DE60013164T2 - Ajuga turkestanika extrakt und seine kosmetische verwendung

Info

Publication number: DE60013164T2
Application number: DE60013164T
Authority: DE
Inventors: Marc Dumas; Frederic Bonte; Catherine Gondran
Original assignee: LVMH Recherche GIE
Current assignee: LVMH Recherche GIE
Priority date: 1999-11-26
Filing date: 2000-11-24
Publication date: 2005-05-04
Anticipated expiration: 2020-11-25
Also published as: ATE273692T1; ES2226960T3; DE60013164D1; HK1050841A1; EP1231893A1; EP1231893B1; FR2801504A1; WO2001037799A1; JP2003514839A; US7060693B1; FR2801504B1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft einen neuartigen Extrakt der Ajuga turkestanica-Pflanze sowie dessen Anwendungen im Kosmetikbereich.
In dem französischen Patent FR 2 696 075 ist die Verwendung von Ecdysteroiden zur Verstärkung der Wasserbarriere der Haut aufgrund ihrer Wirkung auf die Differenzierung der Keratinozyten beschrieben. Dieses Patent nennt zahlreiche Quellen von Ecdysteroiden sowohl im tierischen als auch im pflanzlichen Bereich. Unter diesen zahlreichen Quellen findet man insbesondere zwei Pflanzen der Familie der Ajuga, nämlich die Ajuga iva und die Ajuga decumbens.
Die Ajuga turkestanica-Pflanze ist eine Pflanze der Familie der Labiae, der Art Ajuga, Gattung turkestanica, die in Zentralasien, insbesondere in Usbekistan wächst. Ihr herkömmlicher usbekischer Name lautet „sanobar", die Zauberin.
Diese Pflanze wurde in der traditionellen Medizin wegen ihrer stärkenden und leberschützenden Eigenschaften in Form von Kräutertee verwendet.
Eine neue Studie mit dem Titel „Effect of a lipid concentrate from the aboveground portion of Ajuga turkestanica on the metabolic processes and dynamics of healing skin wounds experimentally", Pharmaceutical Chemistry Journal, Band 28, Nr. 11, 1994, 837–840, berichtete ausführlich über pharmakologische Versuche, die anhand von Chloroformextrakten der oberirdischen Teile dieser Pflanze durchgeführt wurden. Unter den in dieser Veröffentlichung aufgeführten Ergebnissen hat sich herausgestellt, dass die Extrakte eine gewisse Aktivität zur Hydratation der Gewebe aufwiesen.
Die Erfinder der vorliegenden Erfindung haben nun entdeckt, dass es – unter der Bedingung, dass Lösungsmittel verwendet werden, die deutlich polarer sind als diejenigen, welche im Rahmen dieser Versuchsstudie eingesetzt wurden – möglich war, sehr unterschiedliche Extrakte zu erhalten, die nicht nur bemerkenswert verbesserte Eigenschaften zur Hydratation der Epidermis aufweisen, die einerseits mit der Verbesserung der Differenzierung der Keratinozyten, was zur Verstärkung der Wasserbarriere der Haut führt, und andererseits auch mit einer Hydratation, der sogenannten „aktiven Hydratation" der Epidermis durch Wasserreabsorption und Verbesserung der Wasserströme in der Epidermis verbunden sind.
Die Extrakte, welche an sich neue Produkte bilden, stellen den ersten Gegenstand der vorliegenden Erfindung dar, die nach weiteren Gegenständen auch kosmetische Zusammensetzungen sowie Verwendungen dieser Extrakte auf dem Gebiet der Kosmetik betrifft.
Darüber hinaus haben die Erfinder der vorliegenden Erfindung unter Fortsetzung ihrer Untersuchungen nachgewiesen, dass einige unter den Extrakten der Erfindung Assoziationen ganz bestimmter aktiver Mittel in ganz bestimmten Verhältnissen enthielten, die nachfolgend als „Assoziationen" der Erfindung bezeichnet werden, die bis heute niemals in kosmetischen Zusammensetzungen verwendet wurden. Die kosmetischen Zusammensetzungen, die diese Assoziationen enthalten, sowie die kosmetischen Verwendungen dieser Assoziationen stellen folglich einen weiteren Gegenstand der Erfindung dar.
Die Erfinder der vorliegenden Erfindung leiteten aus den Eigenschaften der Extrakte und Assoziationen der Erfindung ab, dass diese Extrakte und Assoziationen besonders wirksam waren, um die Funktionalität der AQP3 Aquaporine zu regulieren und/oder zu verbessern
Die Aquaporine oder Wasserkanäle sind transmembrane Proteinsysteme, die Wasser und kleine Moleküle in Lösung, wie zum Beispiel Glyzerin und Harnstoff transportieren. Die Größe dieser Aquaporine beträgt etwa 30 kDA mit 6 transmembranen Durchgängen in Alpha-Helix (Jung et al. „Molecular structure of the water channel through aquaporin CHIP" in J. Biol. Chem. 1994; Band 269, Seiten 14648–14654).
Das Vorliegen von Aquaporinen vom Typ 3 oder AQP3 in der menschlichen Epidermis und genauer gesagt in der Plasmamembran der Keratinozyten der menschlichen Haut wurde von R. SOUGRAT et al. in einem Artikel „Functional expression of AQP3 in human epidermis and keratinocyte cell cultures" beschrieben, der in Molecular Biology of the Cell; Nov. 1998; Band 9, Seite 499a. veröffentlicht wurde. R. SOUGRAT et al. hat in diesem Artikel auch die wichtige Rolle beschrieben, die diese AQP3 beim Transport des Wassers innerhalb der menschlichen Epidermis spielen.
So geht die Erfindung aus der Entdeckung dessen hervor, dass es durch Auswahl von besonders polaren Lösungsmittelmedien möglich war, Extrakte der Ajuga turkestanica-Pflanze zu erhalten, die besonders interessante kosmetische Eigenschaften aufweisen, und dass einige unter diesen Extrakten Assoziationen aktiver Mittel enthalten, deren kosmetische Verwendung zu den gleichen bemerkenswerten kosmetischen Eigenschaften führt. Diese Extrakte und Assoziationen ermöglichen insbesondere, die Differenzierung der Keratinozyten zu verbessern, was ermöglicht, die Hydratation der Haut zu verbessern und eine besonders wirkungsvolle alterungshemmende Wirkung zu erzielen. Außerdem konnten die Erfinder der vorliegenden Erfindung beobachten, dass die Extrakte und Assoziationen der Erfindung eine besondere Wirksamkeit zur Regulierung der Wasserströme in der Epidermis aufwiesen, eine Aktivität, die sie mit einer bemerkenswerten Aktivität der erfindungsgemäße Extrakte auf die Regulierung und/oder Funktionalität der AQP3 Aquaporine in Verbindung bringen konnten, wodurch eine bessere Hydratation der basalen Schichten der Epidermis möglich ist.
So betrifft die Erfindung nach einem ihrer wesentlichen Merkmale einen Extrakt der Ajuga turkestanica-Pflanze, welcher dadurch gekennzeichnet ist, dass er wenigstens ein Ecdysteroid und wenigstens ein Iridoid enthält und dass er durch Extraktion aus mindestens einem Teil der genannten Pflanze mit Hilfe eines Lösungsmittels oder eines Lösungsmittelgemischs, bestehend aus 0 bis 60 Gew.-% Wasser, erhalten werden kann, wobei der Rest des Lösungsmittels oder Lösungsmittelgemischs aus mindestens einem C₁- bis C₄-Alkohol und/oder Aceton und/oder Butylenglykol und/oder Propylenglykol besteht.
Das Extraktionsverfahren, das für die Zubereitung der erfindungsgemäßen Extrakte eingesetzt werden kann, wird vorteilhafterweise unter Bedingungen, wie beispielsweise derjenigen, dass die Extraktion mit dem genannten Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch für 1 bis 4 Stunden vollzogen wird, durchgeführt.
Das Extraktionsverfahren, das für die Zubereitung der erfindungsgemäßen Extrakte eingesetzt werden kann, wird vorteilhafterweise unter Bedingungen, wie beispielsweise derjenigen, dass die Extraktion bei Rückfluss des genannten Lösungsmittels oder Lösungsmittelgemischs für 1 bis 4 Stunden vollzogen wird, durchgeführt.
Die Extraktion kann an der gesamten Pflanze oder an einem Teil der Pflanze durchgeführt werden. Jedoch werden für die Zubereitung der Extrakte der Erfindung bevorzugt die Wurzeln der Pflanze verwendet.
Die Verhältnisse von Wasser und Alkohol oder Wasser und Aceton in dem Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch, das für die Durchführung des die Zubereitung der erfindungsgemäßen Extrakte ermöglichenden Extraktionsverfahrens verwendet wird, können in hohem Maße variieren. Jedoch wird für die alkoholischen Lösungsmittel oder Aceton ein Wasserverhältnis zwischen 0 und 50 Gew.-% bevorzugt.
Die Verhältnisse von Wasser und Butylenglykol oder Propylenglykol in dem Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch, das für die Durchführung des die Zubereitung der erfindungsgemäßen Extrakte ermöglichenden Extraktionsverfahrens verwendet wird, können in hohem Maße variieren. Jedoch wird für Butylenglykol oder Propylenglykol ein Verhältnis nahe 50 Gew.-% Wasser bevorzugt.
Das Lösungsmittelgemisch, welches für die Durchführung des die Zubereitung der erfindungsgemäßen Extrakte ermöglichenden Extraktionsverfahrens verwendet wird, kann aus irgendeinem Gemisch aus C₁- bis C₄-Alkoholen, Wasser, Butylenglykol oder Propylenglykol bestehen.
Als bevorzugte Alkohole für die Durchführung des die Zubereitung der erfindungsgemäßen Extrakte ermöglichenden Verfahrens werden im Wesentlichen Methanol und Ethanol genannt.
Für die Zubereitung der erfindungemäßen Extrakte wird vorteilhafterweise auf Wasser-Ethanol-, Wasser-Methanol-, Wasser-Aceton-, Wasser-Propylenglykol- oder Wasser-Butylenglykol-Gemische zurückgegriffen.
Im Falle der Wasser-Ethanol-Gemische wird vorteilhafterweise eine Mischung mit 70 bis 90 % Ethanol und 30 bis 10 % Wasser, vorzugsweise eine Mischung mit 80 Ethanol bei 20 % Wasser gewählt.
Im Falle der Wasser-Methanol-Gemische wird vorteilhafterweise eine Mischung mit 70 bis 90 % Methanol und 30 bis 10 % Wasser, vorzugsweise eine Mischung mit 80 Methanol bei 20 % Wasser gewählt.
Im Falle der Wasser-Aceton-Gemische wird vorteilhafterweise eine Mischung mit 70 bis 90 % Aceton und 30 bis 10 % Wasser, vorzugsweise eine Mischung mit 80 Aceton bei 20 % Wasser gewählt.
Im Falle der Wasser-Propylenglykol-Gemische wird vorteilhafterweise eine Mischung mit 40 bis 60 % Propylenglykol und 60 bis 40 % Wasser, vorzugsweise 50 Propylenglykol bei 50 % Wasser gewählt.
Im Falle der Wasser-Butylenglykol-Gemische wird vorteilhafterweise eine Mischung mit 40 bis 60 % Butylenglykol und 60 bis 40 % Wasser, vorzugsweise 50 % Butylenglykol bei 50 % Wasser gewählt.
Es hat sich herausgestellt, dass die Extrakte der Erfindung vorteilhafterweise Assoziationen mit einem Gewichtsanteil von wenigstens einem Ecdysteroid und 2 bis 4 Gewichtsanteile, vorzugsweise 3 Gewichtsanteile von wenigstens einem Iridoid enthalten.
Diese Assoziationen werden nachfolgend der Einfachheit halber als „Assoziationen" gemäß der Erfindung benannt.
Nach einer vorteilhaften Variante sind die in diesen Assoziationen enthaltenen Ecdysteroide vorzugsweise ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Ecdysteron, 2,3-Ecdysteron-Monoacetonid, Turkesteron, Cyasteron, 22-Acetylcyasteron und alpha-Ecdyson.
Nach einer weiteren vorteilhaften Variante sind die in diesen Assoziationen enthaltenen Iridoide ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Harpagid und dessen 8-O-Acetylderivat.
Nach einer vorteilhaften Variante bestehen die in diesen Assoziationen enthaltenen Ecdysteroide aus 30 bis 35 Gew.-% Ecdysteron, 20 bis 25 Gew.-% Turkesteron, 20 bis 24 Gew.-% 22-Acetylcyasteron, 11 bis 15 Gew.-% 2,3-Ecdysteron-Monoacetonid, 6 bis 7 Gew.-% alpha-Ecdyson, 2 bis 4 Gew.-% Cyasteron.
Nach einer weiteren vorteilhaften Variante bestehen die Iridoide aus 60 bis 70 Gew.-% 8-O-Acetyl-Harpagid und aus 30 bis 40 Gew.-% Harpagid.
Wie im Vorangegangenen dargelegt weisen die Extrakte der Erfindung eine besondere Aktivität zur Differenzierung der Keratinozyten auf; dies ermöglicht Ihnen, zur Verstärkung der Rolle als Wasserbarriere der Epidermis beizutragen – wodurch deren Hydratation verbessert wird -, indem sie eine alterungshemmende Rolle spielen, was das Erscheinungsbild und die Qualität der Haut verbessert, wodurch es möglich ist, eine schöne Haut, eine sanfte Haut zu erhalten.
Die von den Erfindern der vorliegenden Erfindung durchgeführten Versuche haben gezeigt, dass die bemerkenswerten Eigenschaften der Extrakte der Erfindung auch mit den besonderen Assoziationen von Ecdysteroid und Iridoid, wie sie oben definiert sind, erhalten wurden.
So betrifft die vorliegende Erfindung folglich nach einem zweiten Aspekt die Verwendung eines Extraktes der Ajuga turkestanica-Pflanze oder einer Assoziation aus wenigstens einem Ecdysteroid und wenigstens einem Iridoid, wie sie zuvor definiert ist, als kosmetischer Wirkstoff, welcher die Differenzierung der Keratinozyten verbessert. Diese Aktivität auf die Differenzierung der Keratinozyten führt zur Verbesserung der Funktion als Wasserbarriere der Epidermis und demzufolge zu einer hydratisierenden Wirkung, einer alterungshemmenden Wirkung, und ermöglicht auch, das Erscheinungsbild und die Qualität der Haut zu verbessern, um insbesondere eine schöne Haut, eine sanftere Haut zu geben.
Wie zuvor dargelegt, ermöglichten die von den Erfindern durchgeführten Versuche, die Aktivität der erfindungsgemäßen Extrakte und der zuvor definierten Assoziationen auf den Wassertransport in der Epidermis nachzuweisen, eine Aktivität, die wenigstens teilweise mit einer ebenfalls durch die Erfinder der Erfindung nachgewiesenen Wirkung auf die Regulierung und/oder die Funktionalität der AQP3 Aquaporine verbunden ist.
Denn es ist wohl bekannt, dass die Haut während der Hautalterung feiner, trockener wird, was dieses feine, schuppige Erscheinungsbild ergibt, das man insbesondere bei älteren Menschen vorfindet. Es ist wohl bekannt, dass es in der Haut einen Wassergradienten von der basalen Schicht der Epidermis zu den oberflächlichsten Schichten des Stratum corneum gibt. Nun haben aber die Erfinder der vorliegenden Erfindung – nachdem sie den Wassertransport an hervorgetretenen Kulturen von behandelten normalen humanen Vergleichskeratinozyten studiert hatten – durch Permeabilitätsmessungen nachgewiesen, dass die Extrakte der Erfindung ermöglichten, die Wasserströme in der Epidermis und insbesondere die Wasserreabsorptionsströme zur basalen Schicht der Epidermis zu erhöhen, was zu einer besseren Hydratation der Epidermis und der basalen Schichten der Epidermis im Besonderen führt.
Weitere seitens der Erfinder der vorliegenden Erfindung durchgeführte Untersuchungen ermöglichten auch, die Wirkung auf die AQP3 Aquaporine nachzuweisen.
So betrifft die Erfindung nach einem weiteren Aspekt die Verwendung der Extrakte der Erfindung sowie der zuvor definierten Assoziationen als kosmetischer Wirkstoff zur Regulierung der Wasserströme und der Wiederaufnahme von Wasser in der Epidermis.
Nach einem noch weiteren Aspekt betrifft die Erfindung die Verwendung dieser Extrakte und Assoziationen als kosmetischer Wirkstoff zur Hydratation der Epidermis.
Die Erfindung betrifft auch, nach einem fünften Aspekt, eine kosmetische Zusammensetzung, insbesondere mit einer Aktivität zur Differenzierung der Keratinozyten, was die Funktion als Wasserbarriere der Epidermis verbessert, mit hydratisierender Wirkung, mit alterungshemmender Wirkung, wobei die Zusammensetzung dazu bestimmt ist, das Erscheinungsbild und die Qualität der Haut zu verbessern und deren Hydratation durch Regulierung der Wasserströme und der Reabsorption von Wasser in der Epidermis zu verbessern, wobei sie dadurch gekennzeichnet ist, dass sie eine für das angestrebte Ziel kosmetisch wirksame Menge eines Extraktes der Ajuga turkestanica-Pflanze, wie er zuvor definiert ist, oder einer Assoziation, wie sie zuvor definier ist, enthält.
Der Gehalt an Extrakt der Ajuga turkestanica-Pflanze liegt vorzugsweise zwischen 0,005 und 10, vorzugsweise zwischen 0,01 und 2 Gew.-% bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung.
Darüber hinaus wird der Ajuga turkestanica-Extrakt gemäß der vorliegenden Erfindung vorteilhafterweise bei den Zusammensetzungen der Erfindung in Kombination mit jedwedem anderen, seitens des Fachmannes bekannten Wirkstoff, insbesondere mit jedwedem anderen Wirkstoff eingesetzt, welcher ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Vitamin A und seinen Estern, insbesondere Vitamin-A-Palmitat und –Acetat, Vitamin E und seinen Estern, insbesondere Vitamin-E-Phosphat und -Acetat, Vitamin C und seinen Derivaten, insbesondere Magnesium-Ascorbylphosphat, Xanthinen, insbesondere Koffein, asiatische Säure, madekassische Säure, Asiaticosiden, Madecassoiden, Extrakten der Centella asiatica, Ellaginsäure, Sojasaponinen, Bertholletia-Extrakten, Panax Ginseng-Extrakten, Meerquellwasser, Magnesiumaspartat, Manganchlorid, zyklischem AMP, D-Xylose, Hyaluronsäure, Calciumgluconat, Isoflavonen, Ammoniumglycyrrhizinat, Corticosteroiden, Phellodendron amurense-Extrakten, Resveratrol und Piceiden.
Die oben genannten Isoflavone sind vor allem diejenigen, welche von der japanischen Gesellschaft FUJICCO unter dem Namen „Fujiflavone" in den Handel gebracht werden.
Allgemein enthalten die kosmetischen Zusammensetzungen der Erfindung kosmetisch akzeptable Bindemittel oder Träger für eine örtliche Anwendung auf der Haut. Beispiele für derartige kosmetisch akzeptable Bindemittel oder Träger sind seitens des Fachmannes wohl bekannt.
Die Zusammensetzungen der Erfindung können in jedweder kosmetisch akzeptablen Form, insbesondere in Form von Creme, Gel, Lotion formuliert werden.
Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur kosmetischen Behandlung der Haut, nach dem eine kosmetisch wirksame Menge von erfindungsgemäßem Extrakt oder einer Assoziation, wie sie zuvor definiert ist, auf die Haut aufgetragen wird.
Man versteht, dass die Erfindung auf diese Weise ermöglicht, die bei dem Extrakt der Ajuga turkestanica-Pflanze beobachteten, besonders unerwarteten Eigenschaften zu nutzen.
Weitere Ziele, Merkmale und Vorteile der Erfindung werden aus der nachfolgenden erläuternden Beschreibung, die unter Bezugnahme auf einen Aktivitätstest zur Verbesserung der Differenzierung der Keratinozyten sowie auf einen den Wassertransport in der Epidermis nachweisenden Test erfolgt, für den Fachmann klar hervorgehen. Verschiedene Beispiele von Formulierungen kosmetischer Zusammensetzungen werden ebenfalls einfach zur Veranschaulichung gegeben und können folglich den Bereich der Erfindung in keiner Weise einschränken In den Beispielen sind alle Prozentangaben – sofern nichts anderes angegeben ist – Gewichtsprozent.
BEISPIELE
A – Zubereitung eines Extraktes gemäß der Erfindung
Es wird eine heiße Extraktion aus Ajuga turkestanica-Wurzeln durch ein Lösungsmittel vollzogen, das zu 80 % aus Ethanol und zu 20 % aus Wasser besteht.
10 kg Trockensubstanz (Ajuga turkestanica-Wurzeln) werden bei 50°C für 2 Stunden 160 kg Lösungsmittel (Ethanol-Wasser-Gemisch in den jeweiligen Verhältnissen 80/20) ausgesetzt.
Das Ganze wird bis auf Umgebungstemperatur (etwa 21 °C) abgekühlt.
Das abgekühlte Ganze wird anschließend auf einem 5 μm-Filter gefiltert (um die Schwebstoffe und die Stoffe, die sich abgesetzt haben, zu entfernen).
Das gefilterte Ganze wird bis zur Trockne eingedampft (um das Extraktionslösungsmittel zu entfernen).
Das Ganze, das bis zur Trockne eingedampft worden ist, wird in 1 Liter Wasser zurückgenommen.
Das Ganze, das in 1 Liter Wasser zurückgenommen wurde, wird einer starken Homogenisierung (durch Bewegung) plus Ultraschall unterworfen. Diese Behandlung (Homogenisierung + Ultraschall) wird bis zum Erhalt einer homogenen Lösung fortgesetzt.
Das homogenisierte Ganze erfährt ein Tiefgefrieren auf –40°C und wird für ca. 4 Stunden auf dieser Temperatur gehalten.
Das gefrorene Ganze erfährt eine Lyophilisation.
Nach der Lyophilisation erhält man ein Pulver, das ein Ajuga turkestanica-Trockenextrakt gemäß der Erfindung ist, den wir als „Extrakt S" bezeichnen.
Dieser Extrakt wurde unter Anwendung der herkömmlichen analytischen Techniken, insbesondere:

– Verwendung von spezifischen Entwicklern der Reaktionschemie,
– Hochleistungs-Flüssigchromatographie (HPLC),
– Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie (HPTLC),
– Gaschromatographie (GC),

Ecdysteron	2,75 %
Turkesteron	2,00 %
22-Acetyl-Cyasteron	1,93 %
2,3-Ecdysteron-Monoacetonid	1,18 %
alpha-Ecdyson	0,59 %
Cyasteron	0,27 %
B Ajugasteron	0,028 %
Ajugalacton	0,016 %
8-O-Acetyl-Harpagid	16,70 %
Harpagid	9,20 %
Pektinsubstanzen	24,30 %
Tannine	4,92 %
Wasser	6,95 %
Monosaccharide (Fructose, Glucose)	19,98 %
Asche	6,97 %.

Dieser Extrakt kann kosmetischen Zusammensetzungen beigemengt werden.
Es ist selbstverständlich möglich, diesen Extrakt dadurch zu verbessern, dass er Reinigungen unterzogen wird, um beispielsweise die Tanninformen, die Polysaccharidformen, die Polypeptidformen und die chlorophyllhaltigen Pigmente zu entfernen. Der Fachmann verfügt über zahlreiche Techniken, um diese Reinigungen durchzuführen, genannt seien zum Beispiel die Verwendung von selektiven Absorbern wie Aktivkohle oder Kieselgele, die differentiellen Abscheidungstechniken, die differentiellen Solubilisierungstechniken oder die Techniken der Flüssig-Flüssig-Zerlegung.
Für die Bedürfnisse der folgenden Beispiele B, C und D wird dieses Pulver („der Extrakt S") erneut in Lösung gebracht, und zwar im Verhältnis von 25 % Pulver, 25 Wasser und 50 % Ethanol im Gesamtgewicht der Endlösung. Wir bezeichnen die erhaltene Lösung als „Extrakt L".
B- Nachweis der Aktivität des erfindungsgemäßen Extrakts auf die Differenzierung der normalen humanen Keratinozyten
Zur Durchführung dieses Versuchs wird der Wurzelextrakt der Ajuga turkestanica-Pflanze, der gemäß Beispiel A erhaltene „Extrakt L" verwendet.
Der vorliegende Versuch verwendet diesen Extrakt, um die Differenzierung der normalen humanen Keratinozyten in hervorgetretener Zellkultur zu messen.
Im Rahmen der Erfindung werden unter Differenzierung der Keratinozyten alle in die Reifung der Keratinozyten zu Corneocyten eingeschlossenen Phänomene verstanden.
Hierzu wurden hervorgetretene Zellkulturen von durch den erfindungsgemäßen Extrakt behandelten humanen Keratinozyten sowie unbehandelte Kulturen durch licht- oder elektronenmikroskopische Techniken nach morphologischen Kriterien verglichen.
Die besonderen Bedingungen des Versuchs werden nun nachfolgend beschrieben.
a) Erhalt der Kulturen von normalen humanen Keratinozyten, abgekürzt als NHK bezeichnet
Normale humane Keratinozyten oder NHK wurden aus Haut einer Brustplastik eines Menschen weißer Rasse von 29 Jahren nach dem Verfahren erhalten, das von Eisinger M. in einem Artikel mit dem Titel „Cultivation of normal human epidermal keratinocytes and melanocytes", in dem Buch „Methods in skin search", erschienen bei den Verlagen D. SKERROW und C.J. SKERROW, 1985, Seiten 191–212 beschrieben ist. Diese in SFMc-Medium von Gibco kultivierten NHK wurden für die Ausbildung von rekonstruierten Epidermen verwendet, an denen der erfindungsgemäße Extrakt getestet wird.
b) Ausbildung der rekonstruierten Epidermen
Die im Insert hervorgetretene Kultur ist eine Technik, die in der Literatur, insbesondere von M.S. NOEL-HUDSON et al. in dem Artikel „Human epidermis reconstructed on synthetic membrane: Influence of experimental conditions on terminal differentiation", in der Zeitschrift In Vitro Cell. Dev. Biol., 1995, 31, Seiten 508–515, beschrieben wird.
Die Kulturen werden in einem System mit zwei Kompartimenten (oberes/unteres) mit Hilfe von 12-Loch-COSTAR-Platten, die von D. DUTSCHER auf den Markt gebracht werden, hergestellt, in denen ebenfalls von DUTSCHER auf den Markt gebrachte Transwell-claer-COSTAR-Inserts mit einem Durchmesser von 12 mm eingebracht werden.
Die NHK werden auf Transwell-clear in einem Verhältnis von 115 000 NHK pro Insert ausgesät und werden in SFMc-Medium eingetaucht bis zur Konfluenz kultiviert, wobei das Kulturmedium in dem oberen Kompartiment zugefügt wird.
Bei Konfluenz der NHK wird das SFMc-Medium aus dem oberen Kompartiment entfernt, und dem Differenzierungsmedium wird nun der Extrakt der Ajuga turkestanica-Pflanze gemäß der vorliegenden Erfindung zugesetzt, und dieses wird anschließend dem unteren Kompartiment zugegeben, so dass an der Schnittstelle Luft/Flüssigkeit eine hervortretende Kultur erhalten wird.
Das Differenzierungsmedium weist die folgende wesentliche Zusammensetzung auf:
DMEM : HAM's F12 von Gibco enthaltend 5 % fötales Kälberserum ebenfalls von Gibco.
Der erfindungsgemäße Extrakt („Extrakt L", welcher in Beispiel A beschrieben ist) wurde in Mutterlösung mit 25 mg/ml in DMSO (Dimethylsulfoxid) konditioniert und auf Filtern mit einer Porosität von 0,22 μm, FGS Millex-Filter, mit sterilisierender Fähigkeit gefiltert.
Anschließend wird das Produkt, mit 2,5, 10 und 25 μg/ml in dem Differenzierungsmedium, für 14 Tage mit den Kulturen ab deren Hervortreten in Kontakt gebracht, wobei alle 48 bis 72 Stunden eine Erneuerung erfolgt. Es wurden für jede getestete Konzentration drei Versuche durchgeführt.
Die Vergleichskulturen erhielten das gleiche DMSO-Verhältnis wie die behandelten Kulturen, also 0,1 % v/v, und der Rhythmus des Mediumwechsels sowie die Dauer der Behandlung sind mit denjenigen der behandelten Kulturen identisch.
c) Behandlung der Kulturen für die Mikroskopieanalyse
Nach 14 Behandlungstagen mit dem erfindungsgemäßen Extrakt („Extrakt L") werden die rekonstruierten Epidermen behandelt, um Beobachtungen in der Elektronen- und Lichtmikroskopie anzustellen, die ermöglichen, eine Ultrastrukturuntersuchung der Differenzierung der Keratinozyten dieser rekonstruierten Epidermen durchzuführen.
Hierzu werden die hervorgetretenen Zellkulturen nacheinander einer Gewebefixierung mittels Glutaraldehyd, einer Ethanol-Dehydratisierung und einer Einbettung in Harz, beispielsweise nach der Methode, welche von A.R. SPURR in J. Ultrastruc. Res. USA, 1969, 26, Seiten 31–43, mit dem Titel „A low-viscosity epoxy resin embedding medium for electron microscopie" beschrieben wird, unterzogen.
Anschließend werden semifeine Schnitte für die Beobachtung in der Lichtmikroskopie sowie ultrafeine Schnitte für eine Beobachtung in der Elektronenmikroskopie angefertigt.
d) Beobachtungen
Die mit Toluidinblau gefärbten semifeinen Schnitte in der Lichtmikroskopie ermöglichten den Nachweis, dass die Dicke der die Hornschicht – oder das Stratum corneum – der Epidermis bildenden Corneocytenschichten in den durch den erfindungsgemäßen Extrakt behandelten, rekonstruierten Epidermen, gegenüber den rekonstruierten Vergleichsepidermen sehr beträchtlich zugenommen hat. Je nach den Kulturen ist diese Zunahme in etwa gleich einem Faktor 3 bis 4.
In Wirklichkeit konnte festgestellt werden, dass das Stratum corneum der hervorgetretenen Vergleichszellkulturen sehr reduziert war, während es dank der Behandlung mittels des erfindungsgemäßen Extrakts der Ajuga turkestanica-Pflanze möglich war, wieder eine Hornschicht normaler Dicke herzustellen.
Da die Gesamtdicke der Kultur in beiden Fällen die gleiche ist, kann festgestellt werden, dass bei der Vergleichskultur mehr basale und suprabasale Keratinozytenschichten vorhanden sind. Es besteht hier eine Wirkung des erfindungsgemäßen Extrakts auf die keratinozytäre Differenzierung. Genau an der Schnittstelle zwischen der letzten suprabasalen Keratinozytenschicht und der ersten Corneozytenschicht des Stratum corneum werden anschließend in der Transmissionselektronenmikroskopie die Beobachtungen angestellt, die nachfolgend dargelegt sind.
Andererseits wird bei den hervorgetretenen Zellkulturen, welche mit dem erfindungsgemäßen Extrakt mit Dosen von 10 μg/ml und 25 μg/ml behandelt werden, der gleiche Profiltyp keratinozytärer Differenzierung beobachtet, was schön eine Einheitlichkeit unter allen behandelten Kulturen gegenüber der Vergleichskultur zeigt, die wirklich sehr abweichend ist. Darüber hinaus kann hinsichtlich der Beobachtungen in der Transmissionselektronenmikroskopie im Bereich der Schnittstelle zwischen den suprabasalen Schichten (KH) und dem Stratum corneum (CO), anhand der mit Uranylacetat und Bleicitrat kontrastierten ultrafeinen Schnitte der Fortschritt der keratinozytären Differenzierung auf folgende Weise beurteilt werden:

a) hervorgetretene Vergleichszellkultur, mit einer Vergrößerung von 30 000: – weniger zahlreiche Desmosome – schwach differenzierte Desmosome – kaum sichtbare Hornhülle – dicke Corneozyten – ungeordnetes Keratinnetz – kein sichtbares Corneodesmosom.
b) Bei den hervorgetretenen Zellkulturen, die mit dem erfindungsgemäßen Extrakt mit einer Dosis von 2,5, 10 bzw. 25 μg/ml behandelt wurden, können die gleichen folgenden Beobachtungen gemacht werden: – zahlreiche Desmosome – sehr gut differenzierte Desmosome – mit der desmosomalen Platte verbundene Keratinfilamente – parallel zum Corneozyt ausgerichtete Keratinfilamente – seitens der KH gut sichtbare Hornhülle – dünne Corneozyten – kompaktes Keratinnetz – Vorhandensein von Corneodesmosomen – wahrnehmbarer zwischen den Corneozyten befindlicher Raum (Lipid).

Als Schlussfolgerung aus diesen Versuchen ergibt sich, dass die Extrakte gemäß der Erfindung bei geringer Dosis äußerst aktiv auftreten. Bei den durchgeführten Versuchen wirkt der erfindungsgemäße Extrakt ab der Konzentration von 2,5 μg/ml auf die interzelluläre Kohäsion speziell im Bereich von einer der Schlüsselschichten der Epidermis an der Schnittstelle zwischen der Hornschicht und den basalen Schichten.
Durch seinen ursprünglichen Charakter optimiert dieser Extrakt das Verhaken zwischen den lebenden Schichten und der Hornschicht, was bis heute in vitro nicht beobachtet worden ist.
Mit dem Extrakt gemäß der Erfindung sind die Keratinfilamente besser organisiert und mit den desmosomalen Platten besser verhakt. Dies lässt stark hoffen, dass die Hornschicht lokale Verformungen, welche mit den physischen Beanspruchungen, die sie erfährt, verbunden sind, hinnehmen kann, ohne – dank einer exzellenten lokalen Elastizität – Schaden zu nehmen. Des Weiteren ermöglicht die allgemeine Wirkung des Extraktes der Erfindung auf die Bildung einer Hornschicht guter Qualität, dank des Erhalts von dünnen Corneozyten mit einer gut sichtbaren Hornhülle und einem kompakten Keratinnetz, eine regulierende Wirkung auf die Hydratation der Oberflächenschichten der Epidermis in Betracht zu ziehen.
Auf diese Weise ermöglichen die erfindungsgemäßen Extrakte, die Rolle als Wasserbarriere der Epidermis zu verstärken, den Zustand der Epidermis und folglich das Erscheinungsbild und die Qualität der Haut zu verbessern, die somit schön und sanft erscheinen wird. Dank ihrer Wirkung der Differenzierung der Keratinozyten ermöglicht die Erfindung die Erzielung einer besonders interessanten alterungshemmenden Wirkung.
C- Nachweis der Wirkung eines Extrakts der Erfindung auf den Wassertransport in der Haut
Die Keratinozytenkulturen werden aus Zweitdurchgangskeratinozyten, welche aus einer an einer Frau von 21 Jahren vollzogenen chirurgischen Plastik stammen, auf einer Costar Transwell-Membran mit einer Porosität von 3 μm in einem Differenzierungsmedium für Keratinozyten, wie es von M.S. NOEL-HUDSON et al. in dem Artikel „Human epidermis reconstructed on synthetic membrane: Influence of experimental conditions on terminal differentiation", in der Zeitschrift In Vitro Cell. Dev. Biol., 1995, 31, Seiten 508–515, beschrieben wird, hergestellt.
Die Zellen sind mit dem erfindungsgemäßen Extrakt („Extrakt L" wie er in Beispiel A beschrieben ist) in der Konzentration von 2,5 μg/ml für 6 und 17 Tage mit Erneuerung des Mediums alle 2 bis 3 Tage behandelt worden. Wobei der erfindungsgemäße Extrakt in DMSO mit 10 mg/ml solubilisiert und auf der Stelle 1/4000 verdünnt wird. Die Vergleichszellen erhalten die gleiche Menge an DMSO.
Unter JO wird der Tag verstanden, an dem die Kulturen, welche die Konfluenz erreicht haben, aus ihrem Kulturmedium hervorgetreten und der Luft ausgesetzt sind.
Die Permeabilitätsmessungen sind bei J=0; J=6 und J=17 gemäß einem Protokoll, welches von R.A. Dorr et al. in „A new data-acquisition system for the measurement of the net water flux across epithelia"; Computer Methods and Programs in Biomedicine 1997, 53, Seiten 9–14 beschrieben wird, durchgeführt worden.
Zur Durchführung der Permeabilitätsmessungen werden die Filter in einer Messkammer angeordnet, die aus zwei mit Kulturmedium gefüllten Kompartimenten besteht. Das luminale Kompartiment (oberer Teil der Kultur) ist durch einen Katheder verschlossen, der mit einer mit Farbstoff gefüllten horizontalen Kapillarröhre verbunden ist. Jede Flüssigkeitsbewegung kommt durch eine Bewegung des Farbstoffs zum Ausdruck, die gemessen werden kann. Der Wasserstrom wird in Abwesenheit des osmotischen Gradienten (Isotonizität in beiden Medien) gemessen. Der gemessene Wasserstrom ist die Folge eines reinen Stroms von Gelöstem durch die Zubereitung. Die Wasserpermeabilität wird in μl/min/cm² gemessen.
Bei J=0 weisen die Zellen keine signifikante Wasserdurchgangsbarriere auf, was durch eine massive Wasserabsorption bei Anwendung eines hydrostatischen Drucks in dem luminalen Kompartiment bewiesen wird. Ab J0 differenzieren sich die Zellen zunehmend zu Multischichten, und ab J4 oder J7 entwickeln die Kulturen, je nach den verwendeten Stämmen, eine Widerstandsfähigkeit gegenüber dem Durchgang des Wassers.
Die unten stehende Tabelle gibt die Wasserströme in menschlichen Epidermen von Kulturen an, die mit dem erfindungsgemäßen Extrakt („Extrakt L" wie er in Beispiel A beschrieben ist) in der Konzentration von 2,5 μg/ml behandelt wurden. Die Ströme sind in μl/min/cm² ausgedrückt.
Ein negativer Wert gibt eine Absonderung, ein positiver Wert einen Absorptionsstrom an. Im Gegensatz zu den Vergleichszellen, bei denen eine Wasserabsonderung gemessen wird, absorbieren die mit dem erfindungsgemäßen Ajuga turkestanica-Extrakt behandelten Zellen Wasser in bedeutendem Maße. Der Umfang dieser Absorption nimmt bei j=17 ab, bleibt jedoch sehr signifikant. Der Grund für diese Abnahme resultiert aus der Zunahme der Dicke der Epidermen und aus der Bildung des Stratum corneum sowie aus dessen Wasserundurchlässigkeit. Die Wasserströme sind folglich geringer. Dies gilt auch für die Vergleichskulturen, jedoch in geringerem Maße.
SCHLUSSFOLGERUNG
Die vorliegende Untersuchung beweist, dass das in Beispiel A („Extrakt L") beschriebene Produkt, das in der Konzentration von 2,5 μg/ml unter den vorgenannten Bedingungen eingesetzt wird, ein Phänomen der Wasserreabsorption stark begünstigt. Der Strom fließt zu den keratinozytären Keimschichten und begünstigt deren Hydratation. Diese Reabsorption von Wasser ermöglicht, die Hydratation der unter der Hornschicht der Epidermis lokalisierten „lebenden" Schichten (Keratinozyten) der Epidermis zu erhöhen oder aufrechtzuerhalten.
D – Nachweis der Wirkung eines Extraktes der Erfindung auf die Funktionalität der AQP3 Aquaporine
R. SOUGRAT et al. hat in einem Artikel „Functional expression of AQP3 in human epidermis and keratinocyte cell cultures", der in Molecular Biology of the Cell; Nov. 1998; Band 9, Seite 499a. veröffentlicht wurde, das Vorhandensein von Aquaporinen 3 (AQP3) in der Plasmamembran der Keratinozyten der menschlichen Haut beschrieben. Er beschreibt ebenfalls deren bedeutende Rolle beim Transport des Wassers innerhalb der menschlichen Epidermis.
In Beispiel C wurde gezeigt, dass der Extrakt gemäß der Erfindung die Wasserreabsorptionsströme in der menschlichen Epidermis stark erhöht. Aufgrund der Bedeutung der gemessenen Wasserströme können diese nur durch einen durch die AQP3 kontrollierten Wassertransport erklärt werden. Ein transzellulärer Durchgang durch die Phospholipiddoppelschicht der Plasmamembran der Keratinozyten wäre von viel geringerer Größe. Eine Kontrolle ermöglichte, die Möglichkeit eines perizellulären Durchgangs des Wassers zu beseitigen. Denn wenn der auf die Epidermis angewandte hydrostatische Druck variiert wird, wird der Wasserstrom nicht beeinflusst.
Aus diesem Grund haben die Erfinder der vorliegenden Erfindung daraus abgeleitet, dass diese Extrakte besonders aktiv waren, um die Funktionalität der Aquaporine 3 (AQP3) zu regulieren und/oder zu verbessern.
E – Kosmetische Zusammensetzungen

Bei den nachfolgend beschriebenen kosmetischen Zusammensetzungen sind die Ajuga turkestanica-Extrakte – sofern nichts anderes angegeben ist – Trockenextrakte. E1 – Hydratisierende Anti Aging-Emulsion, die reich an Nährstoffen ist

Ajuga turkestanica-Extrakt (Extrakt S)	0,025 g
Vitamin-E-Acetat	0,100 g
Vitamin-A-Palmitat	0,010 g
Magnesiumascorbylphosphat	0,200 g
Weizenceramide	0,200 g
Weizenproteine	1,000 g
UVA-UVB-Filter	5,000 g
Bindemittel mit Konservierungs- und Duftstoffen	qs. 100 g

Der bei dieser Emulsion verwendete Ajuga turkestanica-Extrakt (Extrakt S) ist der Extrakt, welcher oben in Beispiel A beschrieben ist.

Diese Emulsion, welche reich an Nährstoffen ist, verbessert die Hauthydratation insbesondere der Epidermis, die Feinheit und das Oberflächenbild der Haut und mildert Falten. Sie wird täglich auf dem Gesicht angewendet. E2 – Festigendes und restrukturierendes hydratisierendes Gel

Ajuga turkestanica-Extrakt (Extrakt S)	0,040 g
Magnesiumaspartat	0,100 g
Extrakt der Centella asiatica	0,100 g
Sojasaponine	0,050 g
Bindemittel mit Konservierungs- und Duftstoffen	qs. 100 g

Der Ajuga turkestanica-Extrakt (Extrakt S), welcher bei diesem Gel verwendet wird, ist der oben in Beispiel A beschriebene Extrakt.
Dieses hydratisierende Gel übt eine straffende Wirkung auf die Haut aus und verbessert die Geschmeidigkeit und Festigkeit. Es wird täglich auf dem Gesicht, dem Hals und dem Oberkörper angewandt. E3 – hydratisierendes liposomales Repair-Gel

Ajuga turkestanica-Extrakt (Extrakt S) 0,020 g

Sojalecithin 2,000 g

Vitamin-A-Acetat 0,010 g

Vitamin-E 0,010 g

Bindemittel mit Konservierungs- und Duftstoffen qs. 100 g
Der bei diesem Gel verwendete Ajuga turkestanica-Extrakt (Extrakt S) ist der Extrakt, welcher oben in Beispiel A beschrieben ist.

Dieses liposomale Gel wird in täglicher Anwendung, vorzugsweise abends und auf dem Gesicht verwendet. Es verbessert die Geschmeidigkeit der Haut und deren Hydratation. Es begünstigt ihre Regeneration. E4 – hydratisierende und Spannkraft verleihende Lotion

Ajuga turkestanica-Extrakt (Extrakt S)	0,030 g
konzentriertes Meerquellwasser als Spurenelemente	10,000 g
Panax Ginseng-Extrakt	0,200 g
zyklisches AMP	0,010 g
Koffein	0,100 g
Bindemittel mit Konservierungs- und Duftstoffen	qs. 100 g

Der bei dieser Lotion verwendete Ajuga turkestanica-Extrakt (Extrakt S) ist der Extrakt, welcher oben in Beispiel A beschrieben ist.
Diese hydratisierende Lotion wird in täglicher Anwendung auf dem Gesicht, vorzugsweise morgens verwendet, um eine schönere, strahlendere Haut zu bekommen. E5 – hydratisierendes und beruhigendes Fluid

Ajuga turkestanica-Extrakt 0,04 g

Manganchlorid 0,10 g

D-Xylose 0,10 g

Weizenceramide 0,20 g

Süßholzextrakt 0,10 g

Vitamin-E-Acetat 0,20 g

Bindemittel mit Konservierungs- und Duftstoffen qs. 100 g
Der bei diesem Fluid verwendete Ajuga turkestanica-Extrakt ist ein Extrakt, der mit einem zu 80 % aus Methanol und zu 20 % aus Wasser bestehendem Lösungsmittel erhalten wird. Das Extraktionsverfahren ist dem in Beispiel A beschriebenen ähnlich, mit Ausnahme der Art des Lösungsmittelgemischs.
Dieses Fluid wird in täglicher, örtlicher Anwendung auf dem Gesicht und dem Körper verwendet. E6 – hydratisierendes Mascara

Ajuga turkestanica-Extrakt 0,025 g

Hyaluronsäure 0,500 g

D-Xylose 0,200 g

Farbpigmente 10,000 g

Wachse 30,000 g

Bindemittel mit Konservierungs- und Duftstoffen qs. 100 g
Der bei diesem Mascara verwendete Ajuga turkestanica-Extrakt ist ein Extrakt, der mit einem zu 80 % aus Aceton und zu 20 % aus Wasser bestehendem Lösungsmittel erhalten wird. Das Extraktionsverfahren ist demjenigen ähnlich, welches in Beispiel A beschrieben ist, mit Ausnahme der Art des Lösungsmittelgemischs. E7 – Rehydratisierender und alterungshemmender Après Sun-Patch

Ajuga turkestanica-Extrakt 0,5 g

Ammoniumglycyrrhizinat 0,5 g

Dextransulfat 0,2 g

Bindemittel für den Patch qs. 100 g
Der bei diesem Patch verwendete Ajuga turkestanica-Extrakt ist ein Extrakt, der mit einem zu 50 % aus Propylenglykol und zu 50 % aus Wasser bestehendem Lösungsmittel erhalten wird. Das Extraktionsverfahren ist demjenigen ähnlich, welches in Beispiel A beschrieben ist, mit Ausnahme der Art des Lösungsmittelgemischs. E8 – antiseptische, hydratisierende Creme für Risse, kleine oberflächliche Wunden und Irritationsrötungen

Ajuga turkestanica-Extrakt 0,4 g

Phellodendron amurense-Extrakt 0,1 g

Fusidinsäure 2,0 g

Bindemittel qs. 100 g

Der bei dieser Creme verwendete Ajuga turkestanica-Extrakt ist ein Extrakt, der mit einem zu 50 % aus Butylenglykol und zu 50 % aus Wasser bestehendem Lösungsmittel erhalten wird. Das Extraktionsverfahren ist demjenigen ähnlich, welches in Beispiel A beschrieben ist, mit Ausnahme der Art des Lösungsmittelgemischs. E9 – Hydratisierende Anti Aging-Emulsion, die reich an Nährstoffen ist

Ecdysteron	0,007 g
Turkesteron	0,005 g
22-Acetyl-Cyasteron	0,005 g
2,3-Ecdysteron-Monoacetonid	0,003 g
alpha-Ecdyson	0,0015 g
Cyasteron	0,0007 g
8-O-Acetyl-Harpagid	0,04 g
Harpagid	0,02 g
Vitamin-E-Acetat	0,100 g
Vitamin-A-Palmitat	0,010 g
Magnesiumascorbylphosphat	0,200 g
Weizenceramide	0,200 g
Weizenproteine	1,000 g
UVA-UVB-Filter	5,000 g
Bindemittel mit Konservierungs- und Duftstoffen	qs. 100 g

Claims

Ajuga turkestania Extrakt, enthaltend mindestens ein Ecdysteroid und mindestens ein Iridoid, dadurch gekennzeichnet, dass er einen Gewichtsanteil von mindestens einem Ecdysteroid und 2 bis 4 Gewichtsanteile, vorzugsweise 3 Gewichtsanteile, von mindestens einem Iridoid enthält.
Extrakt nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Ecdysteroid ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Ecdysteron, 2,3-Ecdysteron-Monoacetonid, Turkesteron, Cyasteron, 22-Acetylcyasteron und Alpha-Ecdyson.
Extrakt nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass das Iridoid ausgewählt ist aus der Gruppe, bestehend aus Harpagid und dessen Derivat 8-O-Acetyl.
Extrakt nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass die in dem Extrakt enthaltenen Ecdysteroide zusammengesetzt sind aus 30 bis 35 Gew.-% Ecdysteron, 20 bis 25 Gew.-% Turkesteron, 20 bis 24 % 22-Acetylcyasteron, 11 bis 15 Gew.-% 2,3-Ecdysteron-Monoacetonid, 6 bis 7 Gew.-% Alpha-Ecdyson, 2 bis 4 Gew.-% Cyasteron.
Extrakt nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass die in dem Extrakt enthaltenen Iridoide zusammengesetzt sind aus 60 bis 70 Gew.-% 8-O-Acetyl-Harpagid und 30 bis 40 Gew.-% Harpagid.
Extrakt nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass er hergestellt werden kann durch Extraktion aus mindestens einem Teil der Pflanze mit Hilfe eines Lösungsmittels oder eines Lösungsmittelgemischs, bestehend aus 0 bis 60 Gew.-% Wasser, wobei der Rest des Lösungsmittels oder Lösungsmittelgemischs aus mindestens einem Alkohol in C₁ bis C₄ und/oder Aceton und/oder Butylenglycol und/oder Propylenglycol.
Extrakt nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass die Extraktion mit dem Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch während 1 bis 4 Stunden ausgeführt wird.
Extrakt nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass die Extraktion im Rückfluss des Lösungsmittels oder Lösungsmittelgemischs während 1 bis 4 Stunden ausgeführt wird.
Extrakt nach einem der Ansprüche 6 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass die Extraktion an der ganzen Pflanze ausgeführt wird.
Extrakt nach einem der Ansprüche 6 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass die Extraktion an den Wurzeln der Pflanze ausgeführt wird.
Extrakt nach einem der Ansprüche 6 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass das Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch ein Gemisch aus Wasser und Ethanol ist.
Extrakt nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, dass das Gemisch aus Wasser und Ethanol ein Gemisch ist, das 70 bis 90 % Ethanol und 30 bis 10 Wasser, vorzugsweise 80 % Ethanol für 20 % Wasser, enthält.
Extrakt nach einem der Ansprüche 6 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass das Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch ein Gemisch aus Wasser und Methanol ist.
Extrakt nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, dass das Gemisch aus Wasser und Methanol ein Gemisch ist, das 70 bis 90 % Methanol und 30 bis 10 Wasser, vorzugsweise 80 % Methanol für 20 % Wasser, enthält.
Extrakt nach einem der Ansprüche 6 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass das Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch ein Gemisch aus Wasser und Aceton ist.
Extrakt nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, dass das Gemisch aus Wasser und Aceton ein Gemisch ist, das 70 bis 90 % Aceton und 30 bis 10 Wasser, vorzugsweise 80 % Aceton für 20 % Wasser, enthält,
Extrakt nach einem der Ansprüche 6 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass das Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch ein Gemisch aus Wasser und Propylenglycol ist.
Extrakt nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet, dass das Gemisch aus Wasser und Propylenglycol ein Gemisch ist, das 40 bis 60 % Propylenglycol und 60 bis 40 % Wasser, vorzugsweise 50 % Propylenglycol für 50 % Wasser, enthält.
Extrakt nach einem der Ansprüche 6 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass das Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch ein Gemisch aus Wasser und Butylenglycol ist.
Extrakt nach Anspruch 19, dadurch gekennzeichnet, dass das Gemisch aus Wasser und Butylenglycol ein Gemisch ist, das 40 bis 60 % Butylenglycol und 60 bis 40 % Wasser, vorzugsweise 50 % Propylenglycol für 50 % Wasser, enthält.
Kosmetische Zusammensetzung, insbesondere mit einer Wirkung zur Differenzierung von Keratinocyten, was die Funktion der Wasserbarriere der Epidermis verbessert, mit hydratierender Wirkung, mit alterungshemmender Wirkung, wobei die Zusammensetzung dazu bestimmt ist, das Aussehen und die Beschaffenheit der Haut zu verbessern und deren Hydratierung durch Regulierung der Wasserströme und die Wiederaufnahme von Wasser in der Epidermis zu verbessern, dadurch gekennzeichnet, dass sie eine für das angestrebte Ziel kosmetisch wirksame Menge eines Ajuga turkestanica Extrakts enthält, wie in einem der Ansprüche 1 bis 20 definiert.
Kosmetische Zusammensetzung, insbesondere mit einer Wirkung zur Differenzierung von Keratinocyten, was die Funktion der Wasserbarriere der Epidermis verbessert, mit hydratierender Wirkung, mit alterungshemmender Wirkung, wobei die Zusammensetzung dazu bestimmt ist, das Aussehen und die Beschaffenheit der Haut zu verbessern und deren Hydratierung durch Regulierung der Wasserströme und die Wiederaufnahme von Wasser in der Epidermis zu verbessern, dadurch gekennzeichnet, dass sie eine für das angestrebte Ziel kosmetisch wirksame Menge einer Verbindung enthält, die einen Gewichtsanteil von mindestens einem Ecdysteroid und 2 bis 4 Gewichtsanteile, vorzugsweise 3 Gewichtsanteile, von mindestens einem Iridoid umfasst.
Zusammensetzung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass das Ecdysteroid ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Ecdysteron, 2,3-Ecdysteron-Monoacetonid, Turkesteron, Cyasteron, 22-Acetyl-Cyasteron und Alpha-Ecdyson.
Zusammensetzung nach Anspruch 22 oder 23, dadurch gekennzeichnet, dass das Iridoid ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Harpagid und seinem Derivat 8-O-Acetyl.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 22 bis 24, dadurch gekennzeichnet, dass die in der Verbindung enthaltenen Ecdysteroide zusammengesetzt sind aus 30 bis 35 Gew.-% Ecdysteron, 20 bis 25 Gew.-% Turkesteron, 20 bis 24 Gew.-% 22-Acetyl-Cyasteron, 11 bis 15 Gew.-% 2,3-Ecdysteron-Monoacetonid, 6 bis 7 Gew.-% Alpha-Ecdysteron, 2 bis 4 Gew.-% Cyasteron.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 22 bis 25, dadurch gekennzeichnet, dass die in der Verbindung vorhandenen Iridoide zusammengesetzt sind aus 60 bis 70 Gew.-% 8-O-Acetyl-Harpagid und 30 bis 40 Gew.-% Harpagid.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 21 bis 26, dadurch gekennzeichnet, dass sie 0,005 bis 10 Gew.-%, vorzugsweise 0,01 bis 2 Gew.-% in Bezug auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung eines Extrakts, wie er in einem der Ansprüche 1 bis 20 definiert ist, oder einer Verbindung, wie sie in einem der Ansprüche 22 bis 26 definiert ist, enthält.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 21 bis 27, dadurch gekennzeichnet, dass sie außerdem mindestens eine Substanz enthält, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Vitamin A und seinen Estern, insbesondere Vitamin-A-Palmitat und -Acetat, Vitamin E und seinen Estern, insbesondere Vitamin-E-Phosphat und -Acetat, Vitamin C und seinen Derivaten, insbesondere Magnesium-Ascorbylphosphat, Xanthinen, insbesondere Cafein, asiatischer Säure, madekassicher Säure, Asiaticosiden, Madekassosiden, Centella asiatica- Extrakten, Ellaginsäure, Sojasaponinen, Bertholletia-Extrakten, Panax-Ginseng-Extrakten, Meerquellwasser, Magnesiumaspartat, Manganchlorid, cyclischem AMP, D-Xylose, Hyaluronsäure, Calciumgluconat, Isoflavonen, Ammoniumglycyrrhizinat, Corticosteroiden, Phellodendron amurense-Extrakten, Resveratrol und Piceiden.
Nicht-therapeutische Verwendung eines Extrakts nach einem der Ansprüche 1 bis 20 oder einer Verbindung wie in einem der Ansprüche 22 bis 26 definiert als kosmetischer Wirkstoff zur Verbesserung der Differenzierung der Keratinocyten.
Nicht-therapeutische Verwendung eines Extrakts nach einem der Ansprüche 1 bis 20 oder einer Verbindung wie in einem der Ansprüche 22 bis 26 definiert als kosmetischer Wirkstoff zur Regulierung der Wasserströme und der Wiederaufnahme von Wasser in der Epidermis.
Nicht-therapeutische Verwendung eines Extrakts nach einem der Ansprüche 1 bis 20 oder einer Verbindung wie in einem der Ansprüche 22 bis 26 definiert, als kosmetischer Wirkstoff zur Hydratierung der Epidermis.
Verfahren zur kosmetischen Behandlung der Haut, dadurch gekennzeichnet, dass man auf die Haut eine kosmetisch wirksame Menge eines Extrakts nach einem der Ansprüche 1 bis 20 oder einer Verbindung wie in einem der Ansprüche 22 bis 26 definiert aufträgt.