DE4318235A1 - Verfahren zur Herstellung von hochreinen Deferoxamin-Salzen - Google Patents
Verfahren zur Herstellung von hochreinen Deferoxamin-SalzenInfo
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Description
Diese Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur
Herstellung von hochreinen Deferoxaminsalzen, vorzugsweise
von Methansulfonatsalz, aus filtrierten Fermentierungs-
Flüssigkeiten, die Deferoxamin B als aktives Ingrediens
enthalten.
Unter der großen Zahl der in der Literatur bekannten
Deferoxamine ist Deferoxamin B das wertvollste; es ist ein
selektiver Eisenmobilisator und kann in einer Therapie zur
Behandlung von Anaemie und Eisenvergiftungen verwendet
werden. Zur Produktion von Deferoxamin B in indistriellem
Maßstab wird der Stamm Streptomyces pilosus eingesetzt, der
am meisten Deferoxamin in einem eisenarmen-Medium produziert
(s. Beschreibung der Belgischen Patentschrift Nr. 619 532).
Im Verlauf der Herstellung von reinem Deferoxamin B-
Ingrediens wird eine Lösung von 8-Hydroxychinolin in
Methanol zu der Fermentierungsflüssigkeit gegeben, um den
Ferrioxamin-Komplex zu zerstören, der durch die Eisen-(III)-
Ionen des Kulturmediums mit Deferoxamin gebildet wurde. Die
Fermentierungsflüssigkeit wird dann filtriert, und der
Überschuß an 8-Hydroxychinolin wird mit Hilfe von Amberlite
IR-45-Ionenaustauscherharz aus der filtrierten Flüssigkeit
entfernt. Das aktive Ingrediens wird an Amberlite IRC-50-
Ionenaustauscherharz adsorbiert und mit 0,2 M Salzsäure
eluiert. Auf diese Weise wird ein großes Volumen an
verdünntem Eluat erhalten. Zur Konzentrierung und Reinigung
des aktiven Ingrediens im Eluat wird die Lösung bei pH 5 mit
Benzylalkohol oder einem Gemisch von Chloroform und Phenol
im Verhältnis 1 : 1 extrahiert. Der Extrakt wird erneut mit
8-Hydroxychinolin behandelt, es wird Methylisobutylketon
zugesetzt und die Mischung mit Wasser extrahiert. Der
Überschuß an 8-Hydroxychinolin wird durch Extraktion mit
Chloroform entfernt. Zur Isolierung von Deferoxamin B-
Hydrochlorid wird die wäßrige Lösung im Vakuum konzentriert
und die abgetrennten Kristalle aus den Gemischen von Wasser
und Methanol sowie Wasser und Aceton umkristallisiert
(Belgische Patentschrift Nr. 619 532).
Aus dem Vorstehenden ist zu erkennen, daß der
Isolierungsprozeß eher umständlich ist. Zur Extraktion
werden bei drei Arbeitsgängen drei verschiedene organische
Lösungsmittel eingesetzt, zur Umkristallisierung werden zwei
verschiedene Lösungsmittel angewendet. Die Trennung der
Lösungsmittel, ihre Rückführung in den Isolierungsvorgang,
die Entfernung der in der Lösungsmittelphase angesammelten
Verunreinigungen, die Behandlung der Abfallmaterialien, dies
sind alles problematische Arbeitsgänge, die das
technologische Verfahren erschweren.
Deferoxamin B wird im allgemeinen in der Form des
Methansulfonatsalzes verwendet, welches in Wasser leicht
löslich ist. Das Methansulfonat wird aus Deferoxamin B-
Hydrochlorid in der Weise hergestellt, daß eine wäßrige
Lösung des letztgenannten durch ein Anionenaustauscherharz
in der Hydroxylform geleitete wird, um zuerst in eine Base
übergeführt zu werden, dann eine Lösung, die eine
äquivalente Menge Methansulfonsäure enthält, zu der wäßrigen
Lösung der Deferoxamin B-Base gegeben wird, die Lösung wird
eingeengt, und das so erhaltene Deferoxamin B-methansulfonat
wird aus einem wäßrigen Alkohol oder aus einem wäßrigen
Gemisch von Methanol und Aceton umkristallisiert (Belgische
Patentschrift Nr. 616 139).
Die vorliegende Erfindung ist auf die Bereitstellung eines
Verfahrens zur Herstellung von hochreinen Deferoxamin B-
Salzen, insbesondere von Methansulfonat, aus
Fermentierungsflüssigkeiten, die Deferoxamin B als aktives
Ingrediens enthalten, gerichtet, wobei dieses Verfahren
einfacher und wirtschaftlicher als die bisher bekannten
Verfahren durchgeführt werden kann.
Die Erfindung basiert auf der Erkenntnis, daß
Deferoxaminsalze, und insbesondere das Hydrochlorid, durch
Aussalzen aus wäßrigen Lösungen oder aus Gemischen von
Wasser und organischen Lösungsmitteln abgetrennt werden
können. Nach unseren Erfahrungen bei der Isolierung des
aktiven Ingrediens kann Deferoxamin B-Hydrochlorid nach dem
Ionenaustausch der filtrierten Fermentierungsflüssigkeit und
der anschließenden Konzentrierung des Eluats, das das aktive
Ingrediens enthält, direkt durch den Vorgang des Aussalzens
abgetrennt werden. Demnach kann die Extraktion mit einem
organischen Lösungsmittel und die oben beschriebene erneute
Extraktion aus dem Aufarbeitungsverfahren der
Fermentierungsflüssigkeit gestrichen werden. Das so
erhaltene rohe Deferoxamin B-Hydrochlorid kann durch
Wiederholen des Aussalzvorgangs oder durch ein anderes
bekanntes Verfahren wie z. B. Umkristallisation,
wiederholter Ionenaustausch usw. gereinigt werden. Danach
gestaltet die Anwendung des Aussalzens den Isolierungsprozeß
viel einfacher und viel wirtschaftlicher.
Es war auch bekannt, daß die Herstellung von Deferoxamin B-
methansulfonat mit für pharmazeutische Zwecke geeigneter
Qualität aus einem reinen Deferoxamin B-Salz, vorzugsweise
aus dem Hydrochlorid, leicht durchgeführt werden kann, indem
eine konzentrierte wäßrige Lösung des Salzes durch ein
schwach basisches Ionenaustauscherharz in der
Methansulfonatform geführt wird und indem die Lösung, die
das Methansulfonatsalz von Deferoxamin B enthält,
lyophilisiert wird. Dieses Verfahren ist besonders
vorteilhaft, da sowohl die Herstellung der eher labilen
Deferoxamin B-Base und die Salzbildung, die von der
letztgenannten Verbindung ausgeht, ausgeklammert werden.
Außerdem kann die Trennung des Methansulfonatsalzes durch
Konzentrierung einer verdünnten Lösung desselben und
Umkristallisieren ebenfalls gestrichen werden, da das gemäß
den Verfahren der Erfindung isolierte und gereinigte
Deferoxamin B-Hydrochlorid so rein ist, daß der Ausfluß des
Ionenaustauschs, der Deferoxamin B-methansulfonat enthält,
direkt lyophilisiert werden kann.
Im Verlauf unserer Versuche wurden
Fermentierungsflüssigkeiten, die vom Stamm Streptomyces
101/87 (Hinterlegungsnummer: MIMNG 1143) gewonnen wurden und
die Deferoxamin B als aktives Ingrediens enthielten,
verarbeitet.
Die Fermentierungsflüssigkeit wird bei saurem oder neutralem
pH in Gegenwart von Sulfat- und/oder Chlorid-Salzen
filtriert, um die Zersetzung des aktiven Ingrediens bei
einem schwach sauren pH zu verhindern. Zu diesem Zweck wird
vorzugsweise Ammoniumchlorid angewendet.
Aus der filtrierten Flüssigkeit wird Deferoxamin an ein
schwach saures Kationenaustauscherharz in der Wasserstofform
gebunden. Nach unseren Erfahrungen kann die
Adsorptionskapazität des Harzes erhöht werden, indem
geeignete Bedingungen sichergestellt werden, um die Menge
der an das Harz gebundenen Verunreinigungen zu senken. Dies
kann erreicht werden, indem die Fermentierungsflüssigkeit
bei einem schwach sauren pH filtriert wird, wie oben
ausgeführt wurde, und indem die filtrierte Flüssigkeit
verdünnt wird. Es ist sogar noch vorteilhafter, den pH der
filtrierten Flüssigkeit mit einer Pufferlösung, vorzugsweise
mit Ammoniumacetat oder Ammoniumchlorid bei einem Wert
zwischen 5 und 8 zu halten.
Der reinigende Effekt des Ionenaustausch-Verfahrens kann
erhöht werden, indem eine vorgeschaltete Säule verwendet
wird, die ein schwach saures Ionenaustauscherharz in
Ammoniumform, welche ungeeignet ist, Deferoxamin zu
adsorbieren, enthält, um einen Teil der in der filtrierten
Flüssigkeit vorliegenden Verunreinigungen zu binden.
Nach dem Ionenaustausch kann das aktive Ingrediens in einem
weiten pH-Bereich von 2 bis 12 hinsichtlich des pH-Wertes
des Eluats eluiert werden, allerdings ist es vorzuziehen,
die Elution mit einer verdünnten alkalischen Lösung, z. B.
0,05 bis 1,5 M Natriumhydroxid- oder Ammoniumhydroxid-Lösung
durchzuführen. Bei Durchführung der Elution bei einem
alkalischen pH-Wert wird ein beträchtlicher Teil der
Verunreinigungen vor dem Erscheinen der Fraktionen, die das
aktive Ingrediens enthalten, ausgewaschen, und das
letztgenannte wird - im Vergleich zur filtrierten
Flüssigkeit - konzentriert erhalten.
Die Zersetzung des aktiven Ingrediens kann durch Anwendung
einer niedrigen Temperatur (0-5°C) verhindert werden.
Vorzugsweise wird auch eine Gradientenelution durchgeführt.
Vor der Abtrennung von Deferoxamin B wird das Eluat mit
einer Säure, vorzugsweise mit einer verdünnten Salzsäure,
auf einen neutralen oder einen schwach sauren pH eingestellt
und schonend konzentriert, z. B. durch Einengung im Vakuum
oder durch Hyperfiltration. Das rohe Deferoxamin B-Salz wird
durch Aussalzen und Kühlen aus dem wäßrigen Konzentrat
abgetrennt. Zum Aussalzen wird vorzugsweise Ammoniumchlorid
oder Ammoniumsulfat verwendet.
Die Reinigung des rohen Produktes, das wie oben beschrieben
erhalten wurde, kann nach verschiedenen Methoden
durchgeführt werden, beispielsweise durch Wiederholen des
Arbeitsschrittes des Aussalzens aus einer wäßrigen Lösung
oder durch Umkristallisieren der Substanz aus einem Gemisch
von Wasser und einem Alkohol. Wenn die letzte Methode
angewendet wird, kann die Leistungsfähigkeit des
Umkristallisierens durch Zusatz von Ammoniumchlorid zu dem
Gemisch verbessert werden. Um verunreinigende färbende
Mittel und andere Verunreinigungen zu entfernen, können
Sorptionsmittel wie z. B. Silicagel oder Aktivkohle oder ein
Kationenaustauscherharz, vorzugsweise ein schwach saures
Kationenaustauscherharz in Wasserstofform angewendet werden.
Die Reinigung kann mit hoher Wirksamkeit vollendet werden,
indem wiederholtes Aussalzen aus einer wäßrigen Lösung oder
aus einer Lösung in einem Gemisch von Wasser und Alkohol
durchgeführt wird.
Durch die oben dargestellten Arbeitsgänge und
Reinigungsverfahren werden hochreine Deferoxaminsalze, z. B.
reines Deferoxamin B-Hydrochlorid erhalten, welches direkt
ohne irgendeine weitere Reinigung in das Methansulfonat
übergeführt werden kann, indem es in Wasser gelöst wird und
die Lösung zu einem Ionenaustauscherharz, das
Methansulfonat-Gegenionen enthält, geleitet wird. Wenn das
rohe Deferoxamin B-Hydrochlorid in einem
Ionenaustauschverfahren gereinigt wird, kann der Auslauf,
der das aktive Ingrediens enthält, direkt, nachdem der pH
eingestellt wurde, zu einem Ionenaustauscherharz in der
Methansulfonatform gebracht werden.
Die Ionenaustausch-Operation wird unter Verwendung eines
schwach basischen Anionenaustauscherharzes durchgeführt, und
zwar um die Zersetzung des Deferoxamin B-methansulfonats zu
verhindern, unter Kühlung, vorzugsweise bei einer Temperatur
zwischen 5°c und 10°C. Das aktive Ingrediens kann durch
Lyophilisation aus der Lösung isoliert werden.
Ein Vorteil des Verfahrens gemäß der vorliegenden Erfindung
besteht in der Tatsache, daß das gewünschte Deferoxamin B-
methansulfonat in einem Schritt aus einem reinen
Deferoxaminsalz erhalten werden kann, ohne daß es in eine
Base umgewandelt wird. Dadurch kann sowohl die Herstellung
der kaum wasserlöslichen Base, die zur Zersetzung neigt,
und die Salzbildung aus der so erhaltenen verdünnten Lösung
eliminiert werden.
Ein weiterer Vorteil des erfindungsgemäßen Verfahrens
besteht darin, daß kein Lösungsmittel zur Isolierung und
Reinigung des aktiven Ingrediens weder während der
Kristallisation aus Wasser, die auf dem Aussalzen basiert,
noch während des Umkristallisierens aus Wasser verwendet
wird. Die Extraktionsvorgänge werden ausgeschaltet, das
Isolierungsverfahren ist folglich wirtschaftlich, einfach
und sicher; darüber hinaus kann das aktive Ingrediens in
hoher Reinheit und bei guter Effizienz aus der
Fermentierungsflüssigkeit isoliert werden.
Die Erfindung soll durch die folgenden Beispiele näher
erläutert, allerdings nicht beschränkt werden. Die
Fermentierungsflüssigkeiten, die in den Beispielen
verarbeitet werden, wurden vom Stamm Streptomyces 101/87
(Hinterlegungsnummer: MIMNG 1143) gewonnen.
250 kg Fermentierungsflüssigkeit (Gehalt an aktivem
Ingrediens: 800 g) wurden mit Schwefelsäure auf einen pH-
Wert zwischen 5,8 und 6,2 eingestellt. Die
Fermentierungsflüssigkeit wurde durch eine vorgeschaltete
Perlitschicht unter Waschen in Wasser filtriert. Die so
erhaltenen 450 kg filtrierte Flüssigkeit wurden zunächst
durch 12,6 l Lewatit CNP 80-Harz in Ammoniumform, dann durch
18 l Amberlite IRC 50-Harz in der Wasserstofform geführt.
Die Harze wurden mit Wasser gewaschen, und das aktive
Ingrediens wurden mit 0,3 M Ammoniaklösung bei 0 bis 5°C
gewaschen. Die Fraktion des Eluats, die das aktive
Ingrediens enthielt, enthielt 679 g Deferoxamin B, was einer
Ausbeute von 85% bezogen auf die Fermentierungsflüssigkeit
darstellt. Die 76 l Volumen der Fraktion wurden mit
verdünnter Salzsäure auf pH 6,0 bis 6,3 eingestellt und
schonend auf ein Zehntel ihres ursprünglichen Volumens
eingeengt. Dann wurden dem Konzentrat 700 g Ammoniumchlorid
zugesetzt, nach vollständigem Lösen wurde das Gemisch unter
Kühlung zur Kristallisation gebracht, wobei 877 g rohes
Deferoxamin B-Hydrochlorid erhalten wurden, welche aus einer
1 : 4-Mischung aus Wasser und Methanol umkristallisiert
wurden, getrocknet und als 5%ige wäßrige Lösung gelöst
wurden. Diese wurde in Portionen mit einer Gesamtmenge von
37 g Aktivkohle behandelt und zunächst durch 400 ml
Amberlite IRC 50-Harz in Wasserstofform, dann durch 400 ml
Amberlite IRA 900-Harz in der Chloridform geführt. Die so
erhaltene Lösung wurde schonend zu einer Konzentration von
20% konzentriert, und Deferoxamin B-Hydrochlorid setzte sich
bei -10°c nach Zusatz einer vierfachen Menge an Methanol ab,
wurde filtriert und getrocknet. Auf diese Weise wurden 385 g
Hydrochloridsalz erhalten, die sich für die Bildung des
Methansulfonatsalzes eigneten. Der Gehalt an aktivem
Ingrediens wurde auf photometrischem Wege mit 99,8%
bestimmt.
Von dem reinen Deferoxamin B-Hydrochloridsalz wurde eine
5%ige wäßrige Lösung hergestellt, welche auf 5°c gekühlt
wurde und durch 1400 ml Amberlite IRA 68-Harz in der
Methansulfonatform geführt wurde. Die dabei erhaltene Lösung
wurde der Lyophilisation unterworfen, wobei 396 g
Deferoxamin B-methansulfonat erhalten wurden. Der Gehalt an
aktivem Ingrediens wurde photometrisch mit 99,6% bestimmt.
Zu 8000 ml filtrierter Flüssigkeit, die nach Beispiel 1
erhalten worden waren, wurden 1,28 g Ammoniumacetat
zugegeben. Nach vollständigem Auflösen wurde die filtrierte
Flüssigkeit durch 700 ml Amberlite IRC 50-Harz in
Wasserstofform geführt. Das Gemisch wurde mit Wasser
gewaschen, mit einer 1 M Ammoniaklösung eluiert, wobei
1100 ml einer Hauptfraktion erhalten wurden, die 23 g
Deferoxamin B enthielt, was einer Ausbeute von 90% bezogen
auf die Fermentierungsflüssigkeit darstellte.
Das Eluat wurde mit 1 M Salzsäure auf pH 6,0 bis 6,2
eingestellt und im Vakuum auf ein Fünftel seines
ursprünglichen Volumens konzentriert. Das Konzentrat wurde
auf 5°c gekühlt, die ausgefallene Substanz wurde nach 24
Stunden filtriert und getrocknet. Auf diese Weise wurden
30 g rohes Deferoxamin B-Hydrochlorid erhalten, welches dann
in 250 ml eines Gemischs aus Wasser und Ethanol gelöst
wurde, die Lösung wurde mit 1,3 g Aktivkohle behandelt. Die
geklärte Lösung wurde 24 Stunden lang bei -10°C gehalten,
das abgesetzte Deferoxamin B-Hydrochlorid wurde filtriert,
mit einer geringen Menge des Lösungsmittelgemisches
gewaschen und getrocknet. Die so erhaltenen 18,8 g
Deferoxamin B-Hydrochlorid wurden in 290 ml entionisiertem
Wasser gelöst, durch 10 ml Varion KCO-Harz in der
Wasserstofform geleitet, das Harz wurde mit 10 ml
entionisiertem Wasser gewaschen. Die Lösung wurde mit Varion
ADM-Harz in der Hydroxylform auf pH 5,5 eingestellt,
filtriert, auf 2°C gekühlt und durch 70 ml Amberlite IRA 68-
Harz in der Methansulfonatform geführt. Die Fraktionen des
Ionenaustauscher-Ausflusses, die Deferoxamin B-
methansulfonat enthielten, wurden zusammengegeben, filtriert
und einer Lyophilisation unterworfen. Auf diese Weise wurden
18 g Deferoxamin B-methansulfonat erhalten. Der Gehalt an
aktivem Ingrediens wurde photometrisch mit 99,4% bestimmt.
Reines Deferoxamin B-Hydrochlorid, das 75 g aktives
Ingrediens enthielt, wurde unter Rühren in 1100 ml
entionisiertem Wasser bei 40°C gelöst. Die Lösung wurde dann
auf 5°C gekühlt und bei einer Fließgeschwindigkeit von
150 ml pro Stunde zu einem Festbett aus 300 ml Amberlite
IRA68-Ionenaustauscherharz in Methansulfonatform, das in
eine Säule gefüllt war, geführt. Nach dem Ionenaustausch
wurde das Harz mit 200 ml vorgekühlten entionisiertem Wasser
gewaschen. Die Fraktionen wurden vereinigt, die so erhaltene
Lösung faserfrei filtriert und lyophilisiert. Auf diese
Weise wurden 86 g Deferoxamin B-methansulfonat erhalten. Der
photometrisch bestimmte Gehalt an aktivem Ingrediens betrug
99,5%. Die Leistungsfähigkeit der Herstellung beträgt 97%
bezogen auf das reine Hydrochlorid.
660 g rohes Deferoxamin B-Hydrochlorid, das nach Beispiel 1
erhalten worden war, wurden bei 5°C in 990 ml 20%igem
Ammoniumchlorid suspendiert. Die Suspension wurde 24 Std.
lang bei der gleichen Temperatur gehalten und filtriert. Das
so erhaltene filternasse Produkt wurde bei 60°C in 1300 ml
entionisiertem Wasser gelöst. Nach vollständigem Lösen wurde
die Lösung auf 5°C abgekühlt, und die abgetrennte Substanz
wurde 48 Std. abfiltriert. Das dabei erhaltene
Deferoxamin B-Hydrochlorid wurde in 2000 ml einer Mischung
(1 : 3) aus Wasser und Methanol bei 45°C gelöst und auf -10°C
gekühlt. Das ausgefallene Produkt wurde nach 24 Std.
filtriert und im Vakuum-Exsikkator getrocknet. So wurden
195 g reines Deferoxamin B-Hydrochlorid erhalten.
Photometrisch wurde ein Gehalt an aktivem Ingrediens von
99,6% bestimmt.
25 kg Fermentierungsflüssigkeit wurden mit 1 M Salzsäure auf
einen pH-Wert zwischen 6,0 und 6,3 eingestellt; dann wurde
die Fermentierungsflüssigkeit filtriert. Die filtrierte
Flüssigkeit wurde mit einer Durchflußrate von 4,5 l/Stunde
durch 3 l LEWATIT CNP 80 geleitet. Nach dem Ionenaustausch
wurde das Harz mit 6 l entmineralisiertem Wasser gewaschen.
Das aktive Ingrediens wurde mit 0,2 M Salzsäure eluiert. Die
so erhaltenen 30 l Eluat wurden auf einen pH-Wert zwischen
5,0 und 5,2 eingestellt und auf 500 ml konzentriert. Zu dem
Konzentrat wurden unter Rühren 500 ml Methanol und 30 g
Ammoniumchlorid gegeben. Das Gemisch wurde auf 0°C gekühlt
und 24 Std. stehen gelassen. Nach dem Filtrieren und
Trocknen wurde ein Rohprodukt mit einem Gehalt von 59 g
aktivem Ingrediens erhalten.
Der Gehalt an aktivem Ingrediens von 5 kg filtrierter
Fermentierungsflüssigkeit wurde an 550 ml Amberlite IRC 50-
Harz in der Wasserstofform gebunden, dann mit 0,5 M
Ammoniaklösung eluiert. Das aktive Eluat (1,4 l) wurde mit
einer verdünnten Schwefelsäure auf einen pH-Wert zwischen
5,5 und 5,7 eingestellt, das Eluat wurde auf 100 ml
eingedampft und unter Rühren auf 5°C gekühlt. Die Mischung
wurde 24 Stunden stehen gelassen, das abgetrennte Produkt
wurde filtriert und getrocknet. Auf diese Weise wurden
14,4 g rohes Deferoxaminsalz in einer Reinheit von 66%
erhalten.
Aus dem rohen Produkt wurde das reine Deferoxaminsulfat nach
dem in Beispiel 4 spezifizierten Verfahren mit dem
Unterschied, daß das Aussalzen mit Ammoniumsulfat erfolgte,
hergestellt. Das Deferoxaminsulfat-Salz wurde nach dem in
Beispiel 3 spezifizierten Verfahren in 6,5 g reines
Deferoxamin B-methansulfonat übergeführt. Der auf
photometrischem Weg bestimmte Gehalt an aktivem Ingrediens
war 99,4%.
Claims (5)
1. Verfahren zur Herstellung von hochreinen Deferoxamin-
Salzen aus filtrierten Fermentierungs-Flüssigkeiten,
die Deferoxamin B als aktives Ingrediens enthalten,
durch Adsorption des aktiven Ingrediens an einem
Ionenaustauscher-Harz und anschließendes Lösen und
Reinigen desselben, umfassend
- - Durchführen der Abtrennung des Deferoxamin-Salzes im Anschluß an die Konzentrierung des Eluats durch Aussalzen aus einer wäßrigen Lösung oder aus einer Mischung aus Wasser und einem organischen Lösungsmittel; und
- - Reinigung desselben durch wiederholtes Aussalzen
und/oder durch per se bekannte Methoden, und wahlweise
- a) Herstellung des Methansulfonatsalzes nach bekannten Verfahren, oder
- b) Durchführen einer wäßrigen Lösung des Deferoxamin- Salzes durch ein Ionenaustauscher-Harz, das Methansulfonat-Anionen als Gegenionen enthält, und Isolierung des Methansulfonat-Salzes aus dem Ausfluß, vorzugsweise durch Lyophilisierung.
2. Verfahren nach Anspruch 1, bei dem der pH der
filtrierten Flüssigkeit vor dem Ionenaustausch mit
einer Pufferlösung auf einem Wert zwischen 5 und 8
gehalten wird.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, bei dem die Elution
mit einer 0,05 bis 1,5 M Ammoniak- oder
Natriumhydroxid-Lösung durchgeführt wird.
4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, welches das
Aussalzen unter Verwendung von Mischungen aus Wasser
und einem organischen Lösungsmittel, Mischungen aus
Wasser und Methanol oder Wasser und Ethanol oder Wasser
und Aceton umfaßt.
5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, bei dem die
Methansulfonat-Salzbildung in einem Ionenaustausch-
Verfahren bei einer Temperatur unter 25°C bei Kühlung
durchgeführt wird.
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