DE3717913A1 - Trockenes analytisches element fuer die enzymanalyse - Google Patents
Trockenes analytisches element fuer die enzymanalyseInfo
- Publication number
- DE3717913A1 DE3717913A1 DE19873717913 DE3717913A DE3717913A1 DE 3717913 A1 DE3717913 A1 DE 3717913A1 DE 19873717913 DE19873717913 DE 19873717913 DE 3717913 A DE3717913 A DE 3717913A DE 3717913 A1 DE3717913 A1 DE 3717913A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- group
- analytical element
- layer
- dry analytical
- hydrogen atom
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/40—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving amylase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/42—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving phosphatase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/805—Test papers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
- Y10S436/808—Automated or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
- Y10S436/81—Tube, bottle, or dipstick
Description
Die Erfindung betrifft eine trockenes analytisches Element,
welches für die Bestimmung bzw. Analyse der enzymatischen
Aktivität in einer Flüssigkeit geeignet ist.
Es sind trockene analytische Elemente, insbesondere integrale
mehrschichtige trockene analytische Elemente, bekannt
und werden beispielsweise in der US-Patentschrift 39 92 158
und in der japanischen Patentanmeldung (OPI) Nr. 1 643/81
beschrieben (der Ausdruck "OPI", wie er in der vorliegenden
Anmeldung verwendet wird, bedeutet "nichtgeprüfte veröffentlichte
Anmeldung"). In Analytical Chemistry, Bd. 55, Nr. 4,
498A-514A (1983) wird beschrieben, daß ein integrales mehrschichtiges
trockenes analytisches Element für die Analyse
von Enzymen in Serum verwendet werden kann.
Das integrale mehrschichtige trockene analytische Element
enthält im allgemeinen eine poröse, eine Flüssigkeit ausbreitende
Schicht mit einer Flüssigkeitsmeßfunktion als
alleroberste Schicht. Wird eine Flüssigkeit in einer Menge
V in der flüssigkeitsausbreitenden Schicht entwickelt, ist
die entwickelte Fläche a proportional zu V (V = ka). Da die
Menge an Flüssigkeit per Einheitsfläche durch die Proportionalitätskonstante
k zwischen der Ausbreitungsfläche a und der
Flüssigkeitsmenge V bestimmt wird, hängt die analytische
Empfindlichkeit von dem Proportionalitätskonstante k ab. Wenn
die Proportionalitätskonstante k geringer wird, wird die Menge
an Flüssigkeit pro Einheitsfläche größer, so daß die
enzymatische Aktivität pro Einheitsfläche höher wird und
die Empfindlichkeit des analytischen Elements steigt.
Ein integrales mehrschichtiges trockenes analytisches Element,
bei dem die poröse, die Flüssigkeit ausbreitende
Schicht Fasern, die Wasser nicht absorbieren, enthält, wird
in den japanischen Patentanmeldungen (OPI) Nrn. 1 64 356/80
und 2 22 769/85 beschrieben. Wasser nicht absorbierende, lange
Fasern, wie Polyester, Polyamide (beispielsweise Nylon)
etc., halten wenig Wasser zurück, und wenn sie gewebt oder
gestrickt oder gewirkt sind, ergeben sie eine einheitliche
Ausbreitungsschicht und können daher in trockenen analytischen
Elementen verwendet werden, bei denen ein Verfahren
ausgenutzt wird, bei dem die Reaktionsgeschwindigkeit eine
Rolle spielt. Jedoch besitzt eine poröse, eine Flüssigkeit
ausbreitende Schicht, die aus Fasern, die Wasser nicht absorbieren,
besteht, eine große Proportionalitätskonstante
k, so daß man keine hohe analytische Empfindlichkeit erhält.
Der vorliegenden Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein
integrales mehrschichtiges trockenes analytisches Element
für die Analyse enzymatischer Aktivitäten zur Verfügung
zu stellen, wobei das Reaktionsgeschwindigkeitsverfahren
ausgenutzt wird. Das trockene analytische Element soll eine
hohe Empfindlichkeit und bevorzugt eine hohe Empfindlichkeit
zusammen mit einer hohen Reproduzierbarkeit aufweisen.
Es wurde jetzt gefunden, daß die obige Aufgabe durch ein
trockenes analytisches Element für die Enzymanalyse in einer
Flüssigkeit gelöst werden kann, welches mindestens eine
poröse, eine Flüssigkeit ausbreitende Schicht umfaßt, die
aus Fasern, welche Wasser nicht absorbieren, besteht, wobei
die poröse, die Flüssigkeit ausbreitende Schicht ein Substrat
für das zu analysierende Enzym und ein wasserlösliches
Polymeres in einer Menge enthält, die ausreicht, die Ausbreitungsfläche
um mindestens 20% zu verringern.
Gemäß einer bevorzugten erfindungsgemäßen Ausführungsform
ist das oben beschriebene Polymere ein hydrophiles Polymeres,
ausgewählt aus der Gruppe Homo- oder Copolymere, das
eine Monomereneinheit der folgenden Formeln (I) oder (II)
enthält, einem Copolymeren, welches diese Monomereneinheiten
und eine andere copolymerisierbare Monomereneinheit
enthält, und einem Cellulosederivat.
Die Formel (I) wird wie folgt dargestellt
worin R1 ein Wasserstoffatom oder eine Niedrigalkylgruppe
bedeutet und R2 und R3 je ein Wasserstoffatom, eine substituierte
oder unsubstituierte aliphatische Kohlenwasserstoffgruppe,
eine substituierte oder unsubstituierte aromatische
Kohlenwasserstoffgruppe oder eine substituierte oder
unsubstituierte heterocyclische Gruppe bedeuten oder worin
R2 und R3 zusammen einen Ring bilden.
Die Formel (II) wird wie folgt dargestellt
worin R4 die gleiche Bedeutung wie R1 besitzt und Q
worin q eine ganze Zahl von 2 bis 4 bedeutet, -NR5-CO-R6,
worin R5 eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet
und R6 ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe mit
1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet, oder
bedeutet,
worin Z1 eine Atomgruppierung bedeutet, welche einen Lactamring,
einen Oxazolidonring oder einen Pyridonring ergibt.
In der Formel (I) enthält die durch R1 dargestellte Alkylgruppe
bevorzugt 1 bis 4 Kohlenstoffatome und besonders bevorzugt
ist sie ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe.
Der durch R2 oder R3 dargestellte aliphatische Kohlenwasserstoffrest
ist bevorzugt eine Alkyl- oder Cycloalkylgruppe
mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Der aliphatische Kohlenwasserstoffrest
kann mit einer Arylgruppe, beispielsweise einer
Phenylgruppe, einer Hydroxylgruppe, einer Alkoxygruppe
mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, beispielsweise einer Methoxygruppe,
einem Halogenatom, beispielsweise einem Chloratom,
einer Alkylamino- oder Dialkylaminogruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen
in dem Alkylmolekülteil davon, beispielsweise
einer Dimethylaminogruppe, und durch ähnliche Gruppen
substituiert sein. Wenn R2 oder R3 einen aroamtischen Kohlenwasserstoffrest
bedeuten, enthält dieser bevorzugt 6 bis
7 Kohlenstoffatome. Der aromatische Kohlenwasserstoffrest
kann durch eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen,
beispielsweise eine Methylgruppe, eine Hydroxylgruppe, eine
Alkoxygruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, beispielsweise
eine Methoxygruppe, ein Halogenatom, beispielsweise ein
Chloratom, eine Alkylamino- oder Dialkylaminogruppe mit
1 bis 4 Kohlenstoffatomen in dem Alkylmolekülteil davon,
beispielsweise eine Dimethylaminogruppe, und durch ähnliche
Gruppen substituiert sein. Wenn R2 oder R3 eine heterocyclische
Gruppe bedeuten, kann diese beispielsweise ein 5- oder
6gliedriger Ring sein, welche mindestens ein Stickstoff-,
Sauerstoff- oder Schwefelatom enthält. Spezifische Beispiele
von bevorzugten Gruppen für R2 oder R3 sind ein Wasserstoffatom,
eine Methylgruppe, eine Ethylgruppe, eine Benzylgruppe,
eine Hydroxyethylgruppe, eine Cyclohexylgruppe,
eine Phenylgruppe, eine Piperidinogruppe und eine Morpholinogruppe.
Die Gesamt-Kohlenstoffzahl, die in R2 und R3 vorhanden ist,
beträgt bevorzugt bis zu 12 und besonders bevorzugt bis zu
6.
Das Polymere, welches die durch die Formel (I) dargestellte,
sich wiederholende Einheit enthält, kann ein Homopolymeres
mit der sich wiederholenden Einheit der Formel (I), ein Copolymeres,
welches mindestens zwei sich wiederholende Einheiten
der Formel (I) enthält, und ein Copolymeres, welches
mindestens eine sich wiederholende Einheit der Formel (I)
und eine andere Monomereneinheit, die sich von einer ungesättigten
Verbindung, die durch Addition polymerisierbar
ist, ableitet, sein.
Spezifische Beispiele für Monomere, welche die sich wiederholende
Einheit der Formel (I) aufweisen, sind Acrylamid,
N-Methylacrylamid, N-Ethylacrylamid, N-(n-Propyl)-acrylamid,
N-Isopropylacrylamid, N-(n-Butyl)-acrylamid, N-(t-Butyl)-
acrylamid, N-(n-Octyl)-acrylamid, N-(Isoamyl)-acrylamid,
N-(t-Octyl)-acrylamid, N-Laurylacrylamid, N-Cyclohexylacrylamid,
N-Benzylacrylamid, N-(β-Dimethylaminoethyl)-
acrylamid, N-Phenylacrylamid, N-(1,1-Dimethyl-3-hydroxy-
butylacrylamid), N,N-Dimethylmethacrylamid, N,N-Diethylacrylamid,
N,N-Dioctylacrylamid, N-(1,1-Dimethyl-3-oxobutyl)-
acrylamid, N-Acryloylmorpholin, N-Methyl-N′-acryloylpiperazin,
N-Ethyl-N′-acryloylpiperazin, N-Acryloylpiperidin,
N-(β-Morpholinoethyl)-acrylamid, N-(3,5-Dimethylmorpholinoethyl)-
acrylamid, Methacrylamid, N-Methylmethacrylamid,
N-Ethylmethacrylamid, N-(t-Butyl)-methacrylamid, N-(t-Octyl)-
methacrylamid, N-Benzylmethacrylamid, N-Cyclohexylmethacrylamid,
N-Phenylmethacrylamid, N,N-Dimethylmethacrylamid,
N,N-Diethylmethacrylamid, N,N-Dipropylmethacrylamid,
N-Methyl-N-phenylmethacrylamid, N-Methacryloyl-N′-methylpiperazin,
N-Methacryloylpiperidin, 4-Methacryloyl-2,6-dimethylmorpholin,
N-Methacryloyl-N′-ethylpiperazin etc.
Die durch Addition polymerisierbaren ungesättigten Verbindungen,
welche mit den Monomeren, die die sich wiederholende
Einheit der Formel (I) ergeben, verwendet werden können,
sind Acrylsäure, Methacrylsäure, Maleinsäure, Fumarsäure,
Itaconsäure, Crotonsäure, Acrylester (beispielsweise Methylacrylat,
Ethylacrylat, n-Propylacrylat, Isopropylacrylat,
n-Butylacrylat, Octylacrylat, 2-Chlorethylacrylat, 2-Cyanoethylacrylat,
N-(β-Dimethylaminoethyl)-acrylat, Benzylacrylat,
Cyclohexylacrylat, Phenylacrylat etc.), Methacrylester
(beispielsweise Methylmethacrylat, Ethylmethacrylat,
n-Propylmethacrylat, Isopropylmethacrylat, n-Butylmethacrylat,
Octylmethacrylat, Cyclohexylmethacrylat, Benzylmethacrylat,
3-Sulfopropylmethacrylat etc.), Allylverbindungen
(beispielsweise Allylbutylether, Allylphenylether etc.),
Vinylether (beispielsweise Methylvinylether, Butylvinylether,
Octylvinylether, Methoxyethylvinylether, 2-Chlorethylvinylether,
2-Hydroxyethylvinylether, (2-Dimethylaminoethyl)-
vinylether, Vinylphenylether, Vinyltollylether, Vinylchlorphenylether
etc.), p-Vinylbenzoesäure, Vinylester
(beispielsweise Methyl-p-vinylbenzoat, etc), heterocyclische
Vinylverbindungen (beispielsweise Vinylpyridin, N-Vinylimidazol,
N-Vinylcarbazol, N-Vinylpyrrolidon, N-Vinyloxazolidon
etc.), Methylvinylketon, Phenylvinylketon,
Styrol oder Derivate davon (beispielsweise Chlormethylstyrol,
p-Methylstyrol etc.), Maleinsäureester (beispielsweise
Ethylmaleat, Butylmaleat, Dibutylmaleat, Octylmaleat
etc.), Fumarsäureester (beispielsweise Ethylfumarat, Dibutylfumarat,
Octylfumarat etc.), Itaconsäureester (beispielsweise
Methylitaconat, Ethylitaconat, Diethylitaconat
etc.), Crotonamid, Crotonsäureester (beispielsweise Butylcrotonat,
Glycerinmonocrotonat etc.), Methylsorbat, Olefine
(beispielsweise Ethylen, Propylen, 1-Buten, Dicyclopentadien,
4-Methyl-1-hexen, 4,4-Dimethyl-1-penten etc.),
halogenierte Olefine (beispielsweise Vinylchlorid, Vinylidenchlorid,
Isopren etc.), ungesättigte Nitrile (beispielsweise
Acrylnitril, Methacrylnitril etc.) und ähnliche Verbindungen.
Diese Comonomeren können einzeln oder als Gemisch
aus zwei oder mehreren verwendet werden.
In der Formel (II) kann, wenn Q -NR5-CO-R6 bedeutet, R5
eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und bevorzugt
eine Methylgruppe oder eine Ethylgruppe bedeuten. R6
bedeutet ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe mit 1
bis 4 Kohlenstoffatomen und bevorzugt ein Wasserstoffatom,
eine Methylgruppe oder eine Ethylgruppe.
Bevorzugt unter den sich wiederholenden Einheiten der Formel (II)
sind solche, worin R4 ein Wasserstoffatom bedeutet
und Q
bedeutet, worin R5 eine Methylgruppe oder eine Ethylgruppe
bedeutet und R6 ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder
Ethylgruppe bedeutet, oder
bedeutet, worin Z1 eine Atomgruppierung bedeutet, welche
einen 5- oder 6gliedrigen Lactamring oder Oxazolidonring
bildet.
Die am meisten bevorzugte Einheit unter diesen ist eine
sich wiederholende Einheit, worin Q den Rest einer Pyrrolidongruppe
oder den Rest einer Oxazolidongruppe bedeutet.
Das Polymere, welches sich wiederholende Einheiten der Formel (II)
enthält, kann ein Homopolymeres oder ein Copolymeres
sein, welches mindestens zwei sich wiederholende Einheiten
der Formel (II) enthält, oder es kann ein Copolymeres
sein, welches mindestens eine sich wiederholende Einheit
der Formel (I) und eine weitere sich wiederholende
Einheit enthält, die sich von ungesättigten Verbindungen,
die durch Addition polymerisierbar sind, ableitet.
Monomere, welche die sich wiederholende Einheit der Formel
(II) ergeben, werden durch die Formel (III)
dargestellt, worin R4 und Q die zuvor gegebenen Definitionen
besitzen.
Spezifische Beispiele für Monomere, die durch die Formel
(III) dargestellt werden, sind Vinylacetat, N-Vinylsuccinimid,
N-Vinylglutaramid, N-Vinyladipimid, N-Methyl-N-methyl-
N-vinylformamid, N-Methyl-N-vinylacetamid, N-Ethyl-N-vinylacetamid,
N-Methyl-N-vinylpropionamid, N-Vinylpyrrolidon,
N-Vinylpiperidon, N-Vinyl-ε-caprolactam, N-Vinyloxazolidon,
N-Vinylmorpholin, N-Vinyl-2-pyridon etc. Bevorzugt unter
diesen sind Vinylacetat, N-Vinylsuccinimid, N-Vinylglutarimid,
N-Methyl-N-vinylacetamid, N-Ethyl-N-vinylacetamid,
N-Vinylpyrrolidon, N-Vinylpiperidon und N-Vinyloxazolidon.
Das darunter am meisten bevorzugte Monomere ist N-Vinylpyrrolidon.
Die durch Addition polymerisierbaren ungesättigten Verbindungen,
die mit dem Monomeren der Formel (III) polymerisierbar
sind, schließen die Monomeren ein, die die wiederkehrende
Einheit der Formel (I) liefern und die damit copolymerisierbaren
Monomeren ein. Bevorzugte Beispiele sind Acrylsäure,
Methacrylsäure, Maleinsäureanhydrid, Acrylamid, N-
Methylacrylamid, N,N-Dimethylacrylamid, N-Ethylacrylamid,
N-(β-Hydroxyethyl)-acrylamid, Methacrylamid, N-Methylmethacrylamid
und ähnliche Verbindungen. Vom Standpunkt der
hydrophilen Eigenschaften des gebildeten Polymeren aus sind
bevorzugte Comonomere unter diesen Acrylsäure, Methacrylsäure,
2-Hydroxyethylacrylat, 2-Methoxyethylacrylat, Sulfopropylacrylat,
Acrylamid, Dimethylacrylamid, 2-Acryloylamino-
2-methylpropansulfonsäure, Hydroxyethylacrylamid, Methacrylamid,
Methylvinylether, Natriumstyrolsulfonat, N-Vinyl-3,5-dimethyltriazol
und Maleinsäureanhydrid.
Das Copolymerisationsverhältnis des Copolymeren, welches
die sich wiederholende Einheit der Formeln (I) oder (II) aufweist,
ist nicht besonders beschränkt, aber der Gehalt an sich wiederholender
Einheit der Formeln (I) oder (II) in dem Copolymeren
liegt bevorzugt im Bereich von 20 bis 100 Mol.-% und
besonders bevorzugt im Bereich von 50 bis 100 Mol.-%.
Das Polymere, welches eine sich wiederholende Einheit der
Formeln (I) oder (II) aufweist, kann nach den Verfahren
synthetisiert werden, wie sie in den britischen Patentschriften
12 11 039 und 9 61 395, der japanischen Patentpublikation
Nr. 29 195/72, den japanischen Patentanmeldungen
(OPI) Nrn. 76 593/73, 92 022/73, 21 134/75 und 1 20 634/75,
den US-Patentschriften 26 81 897, 32 27 672, 32 90 417,
32 62 919, 32 45 932 und 32 30 275, John C. Petropoulosu
et al., Official Digest, Bd. 33, 719-736 (1961), Schunsuke
Murahashi et al. (ed.), Gosei Kobunshi, Bd. 1, 246-290,
ibid, Bd. 3, 1-108 etc. beschrieben werden. Die Polymerisation
wird im allgemeinen bei einer Temperatur von 20 bis
180°C und bevorzugt von 40 bis 120°C unter Verwendung von
0,05 bis 5 Gew.-% eines Radikal-Polymerisationsinitiators,
bezogen auf die Monomeren, durchgeführt. Die Initiatoren,
die beispielsweise verwendet werden können, sind Azobisverbindungen,
Peroxide, Hydroperoxide, Redox-Katalysatoren,
wie Kaliumpersulfat, t-Butylperoctoat, Benzoylperoxid, Azobisisobutylonitril etc.
Typische Beispiele für Polymere mit einer sich wiederholenden
Einheit der Formel (I) sind:
- (1) Poly(N-ethylacrylamid),
(2) Polyacrylamid,
(3) Poly(N,N-dimethylacrylamid),
(4) Polymethacrylamid,
(5) Acrylamid/Ethylacrylat-Copolymeres (40 : 60, ausgedrückt als Mol),
(6) N,N-Dimethylacrylamid/Methylacrylat-Copolymeres (50 : 50, ausgedrückt als Mol),
(7) Acrylamid/Butylacrylat-Copolymeres (60 : 40, ausgedrückt als Mol),
(8) N-Acrylamid/Ethylacrylat-Copolymeres (50 : 50, ausgedrückt als Mol),
(9) N,N-Dimethylacrylamid/Maleinsäure-Copolymeres (70 : 30, ausgedrückt als Mol),
(10) Acrylamid/Ethylacrylat-Copolymeres (40 : 60, ausgedrückt als Mol),
(11) Acrylamid/Ethylacrylat-Copolymeres (50 : 50, ausgedrückt als Mol),
(12) N-Methylacrylamid/Ethylacrylat-Copolymeres (50 : 50, ausgedrückt als Mol),
(13) N-Ethylacrylamid/Acrylsäure-Copolymeres (30 : 70, ausgedrückt als Mol),
(14) N-Methylmethacrylamid/Ethylacrylat-Copolymeres (50 : 50, ausgedrückt als Mol),
(15) N,N-Dimethylmethacrylamid/Propylacrylat-Copolymeres (35 : 65, ausgedrückt als Mol),
(16) N-Acryloylmorpholin/Ethylacrylat-Copolymeres (40 : 60, ausgedrückt als Mol),
(17) Poly[N-(3-dimethylaminopropyl)acrylamid] und
(18) Poly(N-methacryloylpiperazin).
Typische Beispiele für ein Polymeres, welche die sich wiederholende
Einheit der Formel (II) enthält, sind:
- (19) Poly(N-vinylpyrrolidon),
(20) Poly(N-vinyloxazolidon),
(21) Poly(N-vinylsuccinimid),
(22) Poly(N-vinylglutarimid),
(23) Poly(N-vinylpiperidon),
(24) Poly(N-vinyl-ε-caprolactam),
(25) Poly(N-methyl-N-vinylacetamid),
(26) Poly(N-ethyl-N-vinylacetamid),
(27) Vinylalkohol/N-Vinylpyrrolidon-Copolymeres (30 : 70, ausgedrückt als Mol),
(28) N-Vinylpyrrolidon/Vinylacetat-Copolymeres (70 : 30, ausgedrückt als Mol),
(29) N-Vinylpyrrolidon/2-Hydroxyethylacrylat-Copolymeres (80 : 20, ausgedrückt als Mol),
(30) N-Vinylpyrrolidon/Acrylsäure-Copolymeres (90 : 10, ausgedrückt als Mol),
(31) N-Vinylpiperidon/2-Methoxyethylacrylat-Copolymeres (70 : 30, ausgedrückt als Mol),
(32) N-Vinylpiperidon/Methylvinylether-Copolymeres (90 : 10, ausgedrückt als Mol),
(33) N-Vinyloxazolidon/Vinylalkohol-Copolymeres (65 : 35, ausgedrückt als Mol),
(34) N-Vinyloxazolidon/Acrylsäure-Copolymeres (80 : 20, ausgedrückt als Mol),
(35) N-Vinylpyrrolidon/N-Vinylpiperidon/Hydroxyethylacrylat- Copolymeres (40 : 30 : 30, ausgedrückt als Mol),
(36) Vinylalkohol/Vinylacetat/N-Vinyl-2-pyridon-Copolymeres (70 : 25 : 5, ausgedrückt als Mol),
(37) N-Vinylpyrrolidon/2-Hydroxyethylacrylat/Vinylacetat- Copolymeres (70 : 20 : 10) und
(38) N-Vinylpyrrolidon/Vinylalkohol/Vinylpropionat/ Natriumstyrolsulfonat-Copolymeres (40 : 40 : 5 : 15, ausgedrückt als Mol).
Spezifische Beispiele für Copolymere, die eine sich wiederholende
Einheit der Formel (II) und andere, durch Addition
polymerisierbare ungesättigte Comonomere enthalten, sind:
- (39) N-Vinylpyrrolidon/Acrylamid-Copolymeres
(60 : 40, ausgedrückt als Mol),
(40) N-Vinylpyrrolidon/2-Acryloylamino-2-methylpropansulfonsäure- Copolymeres (75 : 25, ausgedrückt als Mol),
(41) N-Vinylpyrrolidon/2-Methacrylamid-Copolymeres (60 : 40, ausgedrückt als Mol),
(42) N-Vinyloxazolidon/N-(2-Hydroxyethyl)-acrylamid- Copolymeres (60 : 40, ausgedrückt als Mol),
(43) N-Vinyloxazolidon/N-(2-Hydroxyethyl)-acrylamid- Copolymeres (70 : 30, ausgedrückt als Mol),
(44) N-Vinylpyrrolidon/N-Vinylmorpholin/Acrylamid- Copolymeres (50 : 20 : 30, ausgedrückt als Mol),
(45) N-Vinylsuccinimid/N-Vinyl-ε-caprolactam/Acrylamid- Copolymeres (40 : 20 : 40, ausgedrückt als Mol),
(46) N-Vinyloxazolidon/Acrylamid/Acrylsäure-Copolymeres (60 : 20 : 20, ausgedrückt als Mol),
(47) N-Vinylpyrrolidon/Acrylamid/Vinylacetat/Acrylsäure- Copolymeres (60 : 20 : 10 : 10, ausgedrückt als Mol) und
(48) N-Vinylpyrrolidon/Dimethylacrylamid-Copolymeres (70 : 30, ausgedrückt als Mol).
Die Polymeren, welche die sich wiederholenden Einheiten,
die durch die Formeln (I) oder (II) dargestellt werden, enthalten,
besitzen normalerweise ein Molekulargewicht von
2000 oder mehr und bevorzugt von 8000 bis 700 000.
Jedes der Polymeren mit den sich wiederholenden Einheiten,
die durch die Formeln (I) oder (II) dargestellt werden,
besitzt relativ hohe hydrophile Eigenschaften. Die Einarbeitung
dieser Polymeren in eine Ausbreitungsschicht kann
erfolgen, indem man das Polymere in Wasser oder in einem
mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel löst, die
wäßrige oder organische Lösungsmittellösung auf die Ausbreitungsschicht
durch Aufstreichen oder Eintauchen aufbringt
und trocknet. Als organische Lösungsmittel kann man
beispielsweise Methylacetat, Ethylacetat, Butylacetat,
Methylisobutylketon, β-Ethoxyethylacetat, Methylcarbitol,
Dioxan, Cyclohexan, Cyclohexanon, Dipropylenglykol, N,N-
Dimethylformamid, Propanol, Isopropanol, Methanol, Butanol,
sec-Butanol, Ethylenglykolmonomethylether, Ethylenglykolmonobutylether
und ähnliche Verbindungen verwenden.
Diese Polymeren werden zu der Ausbreitungsschicht in einer
Menge zugegeben, die ausreicht, um die Ausbreitungsfläche
um mindestens 20% zu verringern. Eine solche Menge liegt
bevorzugt im Bereich von 2 bis 15 g/m2.
Beispiele für Cellulosederivate, die bei der vorliegenden
Erfindung verwendet werden können, sind bevorzugt Hydroxyalkylcellulose
mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen in dem Alkylmolekülteil
davon, beispielsweise Hydroxypropylcellulose),
ein gemischter Cellulosealkylether (beispielsweise Hydroxypropylmethylcellulose)
und ähnliche Verbindungen.
Das zuvor erwähnte Cellulosederivat wird zu der Ausbreitungsschicht
in einer Menge zurückgegeben, die ausreicht,
die Ausbreitungsfläche um mindestens 20% zu verringern. Eine
solche Menge liegt bevorzugt im Bereich von 0,5 bis
15 g/m2 und besonders bevorzugt im Bereich von 0,7 bis 10 g/m2.
Das Substrat für ein Enzym ist ein solches, das irgendeine
Wirkung des spezifischen Enzyms aufnimmt, z. B. Alanin für
Alanin-Aminotransferase, Aspartat für Aspartat-Aminotransferase,
γ-Glutamyl-p-nitroanilid für γ-Glutamyltransferase,
Lactat für Lactat-Dehydrogenase, Pyrophosphat (ATP, ADP),
Monophosphat und p-Nitrophenylphosphate für alkalische Phosphatase,
Stärke für L-Amylase etc.
Die vorliegende Erfindung kann bei einer großen Vielzahl
bekannter trockener analytischer Elemente verwendet werden
und insbesondere bei Elementen, die einen festen Träger enthalten,
der sowohl gegenüber dem Nachweisreagenssystem als
auch der zu analysierenden Flüssigkeit permeabel ist. Die
Elemente enthalten im allgemeinen einen Träger, eine Nachweisschicht
und/oder eine reaktive Reagensschicht und eine
poröse Flüssigkeitsausbreitungsschicht. Die Elemente können
weiter eine Reflexionsschicht, eine Klebstoffschicht,
eine Filterschicht, eine wasserabsorbierende Schicht, eine
Unterschicht und andere bekannte Schichten enthalten. Beispiele
solcher analytischer Elemente werden in den US-Patentschriften
39 92 158 und 40 42 335 und in der japanischen
Patentanmeldung (OPI) Nr. 1 64 356/80 beschrieben.
Wenn das erfindungsgemäße trockene analytische Element einen
Träger enthält, sind praktische Ausführungsformen eines
solchen Elements (1) eine Struktur, die einen Träger umfaßt,
der darauf eine Nachweisschicht und weiter darauf eine eine
Flüssigkeit ausbreitende Schicht aufweist, (2) eine Struktur,
die einen Träger mit darauf einer reaktiven Reagensschicht
und weiter einer eine Flüssigkeit ausbreitende Schicht darauf
aufweist, (3) eine Struktur, die einen Träger und darauf
einer Nachweisschicht, einer reaktiven Reagensschicht und
einer eine Flüssigkeit ausbreitende Schicht, in dieser Reihenfolge,
aufweist und (4) eine Struktur, die einen Träger,
darauf eine Nachweisschicht, eine zweite reaktive Reagensschicht,
eine erste reaktive Reagensschicht und eine eine
Flüssigkeit ausbreitende Schicht, in dieser Reihenfolge,
aufweist.
In den Strukturen (1) bis (4) können eine Lichtabschirmungsschicht
und/oder eine Filterschicht zwischen der Nachweisschicht
und der reaktiven Reagensschicht oder der eine
Flüssigkeit ausbreitenden Schicht, zwischen der reaktiven
Reagensschicht und der die Flüssigkeit ausbreitenden Schicht
oder zwischen der zweiten reaktiven Reagensschicht und der
ersten reaktiven Reagensschicht vorhanden sein.
Bei der vorliegenden Erfindung können das hydrophile Polymere,
welches die sich wiederholenden Einheiten der Formeln (I)
oder (II) enthält, und das Cellulosederivat nicht nur
in die Flüssigkeitsausbreitungsschicht, sondern ebenfalls
in andere Schichten, beispielsweise in einer Reagensschicht,
eingearbeitet sein.
Es ist bevorzugt, daß jede der zuvor erwähnten Schichten
und eine wasserabsorbierende Schicht auf einem Träger vorgesehen
sind, der gegenüber Licht permeabel ist, jedoch gegenüber
Wasser nicht permeabel ist, und der gegebenenfalls
eine Unterschicht etc. aufweist.
Die wasserabsorbierende Schicht ist eine Schicht, welche
gegenüber Wasser permeabel ist, die aber im wesentlichen
für die Verbindung, die schließlich nachgewiesen werden soll,
undurchlässig ist. Diese Schicht wird bevorzugt zwischen
dem Träger und einer Nachweisschicht oder einer Reagensschicht
in den Fällen vorgesehen, wo die Substanz, die
schließlich nachgewiesen werden soll, eine kaum diffusionsfähige
hochpolymere Substanz ist. Eine solche wasserabsorbierende
Schicht enthält bevorzugt ein filmbildendes hydrophiles
Polymeres, welches durch das absorbierte Wasser
quillt.
Die Nachweisschicht ist eine Schicht, welche im wesentlichen
für die Substanz, die schließlich nachgewiesen werden soll,
permeabel ist und die kein reaktives Reagens enthält. Diese
Schicht enthält ein hydrophiles Polymeres als Hauptbestandteil
und gegebenenfalls ein oberflächenaktives Mittel
(kationisch, amphoter oder nichtionisch), einen Härter, ein
Puffermittel etc.
Das hydrophile Polymere, welches für die wasserabsorbierende
Schicht oder Nachweisschicht verwendet werden kann, ist ein
natürliches oder synthetisches hydrophiles Polymeres, welches
normalerweise einen Quellgrad von etwa 1,5 bis etwa 20 und
bevorzugt von etwa 2,5 bis etwa 15 aufweist, wenn es in
Wasser absorbiert. Beispiele solcher hydrophiler Polymeren
sind Gelatine (beispielsweise mit Säure verarbeitete
bzw. behandelte Gelatine, entionisierte Gelatine etc.), ein
Gelatinederivat (beispielsweise mit Phthalsäure oder einem
ihrer Derivate umgesetzte Gelatine etc.), Agarose, Pluran,
Pluranderivate, Polyacrylamid, Polyvinylalkohol, Polyvinylpyrrolidon etc.
Eine geeignete Trockendicke der Nachweisschicht oder der
wasserabsorbierenden Schicht liegt im Bereich von etwa 1
bis etwa 100 µm und bevorzugt von etwa 3 bis etwa 30 µm.
Eine Klebstoffschicht kann gebildet werden, um die Ausbreitungsschicht
an die Nachweisschicht oder die wasserabsorbierende
Schicht entweder direkt oder über eine Lichtabschirmungsschicht,
eine Filterschicht, eine reaktive Reagensschicht
etc. anzuheften. Die Klebstoffschicht enthält
vorzugsweise ein hydrophiles Polymeres, welches bei der Benetzung
oder Quellung mit Wasser an der Ausbreitungsschicht
haftet. Ein solches hydrophiles Polymeres kann eines von
denen sein, die für die wasserabsorbierende Schicht oder
für die Nachweisschicht aufgezählt wurden. Bevorzugt von
diesen sind Gelatine, Gelatinederivate, Polyacrylamid und
ähnliche. Die Klebstoffschicht besitzt üblicherweise eine
Trockendicke von etwa 0,5 bis etwa 20 µm und bevorzugt von
etwa 1 bis etwa 10 µm. Die Klebstoffschicht kann nicht nur
auf der Nachweisschicht oder wasserabsorbierenden Schicht
vorgesehen sein, sondern sie kann ebenfalls zwischen anderen
benachbarten Schichten, beispielsweise zwischen einer
reaktiven Reagensschicht, welche eine benachbarte Schicht
ist, vorgesehen sein, um eine Haftung zwischen den Schichten
sicherzustellen. Die Klebstoffschicht kann durch Beschichten
einer wäßrigen Lösung, welche das zuvor erwähnte
hydrophile Polymere und gegebenenfalls ein oberflächenaktives
Mittel etc. enthält, auf der Nachweisschicht, der
reaktiven Reagensschicht etc. nach irgendeinem gut bekannten
Beschichtungsverfahren hergestellt werden.
Die reaktive Reagensschicht des erfindungsgemäßen trockenen
analytischen Elements enthält ein reaktives Reagens, das
eine erfaßbare Komponente, z. B. eine Substanz, die eine
Farbe bildet oder verändert, eine fluoreszierende Substanz
erzeugt, was z. B. durch Umsetzung mit einem Produkt geschehen
kann, das durch eine Enzymreaktion mit einem Substrat
gebildet wird und das erforderlichenfalls ein hydrophiles
Polymeres, ein Puffermittel, lichtabschirmende feine
Teilchen (entweder reflektierend oder absorbierend) und
dergleichen enthalten kann.
Beispiele für hydrophile Polymere, welche in der reaktiven
Reagensschicht verwendet werden können, sind Stärke, Cellulose,
Agarose, Gelatine und ihre Derivate (beispielsweise
die hydroxymethylierten Derivate, hydroxypropylierten Derivate
etc.), Acrylamid-Polymere, Copolymere von Acrylamid
und verschiedenen Vinylmonomeren, Polyvinylalkohol, Copolymere
von Vinylpyrrolidon und verschiedenen Vinylmonomeren,
Acrylat-Polymere, Copolymere von Acrylaten und verschiedenen
Vinylmonomeren und ähnliche. Von diesen hydrophilen
Polymeren sind Polyvinylalkohol, Vinylpyrrolidon-Polymere,
Acrylamid-Polymere und Cellulosederivate bevorzugt.
Die Puffermittel, welche in der reaktiven Reagensschicht
verwendet werden können, sind übliche, und Beispiele hierfür
sind Carbonate, Borate, Phosphate, Good's-Puffermittel
etc. Die Auswahl des Puffermittels, welches verwendet wird,
kann entsprechend der Literaturstelle, beispielsweise
Takeichi Horio et al., Tanpakushitsu Kiso no Kisojikkenho,
Nankodo (1981), erfolgen.
Die Lichtabschirmungsschicht ist bevorzugt eine wasserpermeable
Schicht, welche ein hydrophiles Polymeres als Bindemittel
und darin dispergiert lichtreflektierende feine Teilchen
enthält. Wenn in der Nachweisschicht eine nachweisbare
Änderung erzeugt wird, wie eine Farbänderung, Farbentwicklung
usw., wird diese durch Reflexionscolorimetrie von
der Seite des Trägers, der Lichtdurchlässigkeitseigenschaften
besitzt, gemessen, wobei die Lichtabschirmungsschicht,
welche feine reflektierende Teilchen enthält, dazu dient,
die Farbe eines wäßrigen Flüssigkeitsflecks, der aufgetragen
wurde und in der Ausbreitungsschicht entwickelt wurde,
abzuschirmen. Dieses wäre die rote Farbe des Hämoglobins
bei der Analyse von Gesamtblut. Diese Schicht wirkt ebenfalls
als Lichtreflexionsschicht oder als Hintergrundschicht.
Beispiele für feine lichtreflektierende Teilchen, die in
der Lichtabschirmungsschicht verwendet werden können, sind
feine Pigmentteilchen, wie feine Titandioxidteilchen (des
Rutiltyps, Anatastyps oder Brookit-Typs, feine Kristallkörner
mit einer Korngröße von etwa 0,1 bis etwa 1,2 µm), feine
Bariumsulfatteilchen, feine Aluminiumteilchen etc., wobei
feine Titandioxidteilchen und feine Bariumsulfatteilchen
bevorzugt sind.
Die oben beschriebenen feinen Lichtabschirmungsteilchen können
ebenfalls in der reaktiven Reagensschicht oder in der
Ausbreitungsschicht verwendet werden.
Das hydrophile Polymere, das als Bindemittel in der Lichtabschirmungsschicht
verwendet wird, kann beispielsweise eines
von denen sein, wie sie für die Nachweisschicht aufgezählt
wurden, und zusätzlich kann man schwach hydrophile regenerierte
Cellulose, Celluloseacetat und ähnliche Verbindungen
verwenden. Unter diesen sind Gelatine, Gelatinederivate und
Polyacrylamid bevorzugt. Von diesen können Gelatine und
Gelatinederivate an sich bekannte Gelatinehärter enthalten.
Die oben beschriebene Lichtabschirmungsschicht kann hergestellt
werden, indem man eine wäßrige Dispersion, die die
feinen Lichtabschirmungsteilchen und das hydrophile Polymere
enthält, auf die Nachweisschicht, die reaktive Reagensschicht
oder eine ähnliche Schicht in an sich bekannter Weise
aufträgt und anschließend trocknet.
Als Fasern, welche Wasser nicht absorbieren, können in der
erfindungsgemäßen Ausbreitungsschicht Polyesterfasern, wie
Polyethylenterephthalat, Polyamidfasern, wie Nylon, Acrylfasern,
Polyethylenfasern, Polypropylenfasern, Celluloseacetatfasern
und ihre Gemische verwendet werden. Die Ausbreitungsschicht
kann aus irgendeinem nichtgewebten bzw.
nichtgewirkten Flächengebilde bzw. Textilmaterial aus gewebtem
bzw. gewirktem Textilmaterial und gestricktem bzw.
gewirktem Textilmaterial bzw. Flächengebilden, die aus diesen
Fasern hergestellt worden sind, bestehen. Das Flächengebilde
oder Textilmaterial, welches verwendet wird, wird
bevorzugt einer Entwachsungsstufe unterworfen, wie einem
Waschen mit Wasser, damit im wesentlichen die Fette und Öle,
die an ihm, bedingt durch die Herstellung der Garne oder
des gewebten oder gestrickten bzw. gewirkten Textilmaterials,
haften, entfernt werden. Erfindungsgemäß wird ein hydrophiles
Polymeres, ausgewählt unter den Polymeren, welche die
sich wiederholenden Einheiten der Formeln (I) oder (II) enthalten,
und den Cellulosederivaten, in die Hohlräume bzw.
Leerstellen der faserhaltigen Ausbreitungsschicht in Form
eines Gels eingearbeitet.
Das trockene analytische Element für die Analyse enzymatischer
Aktivitäten gemäß der vorliegenden Erfindung zeigt
eine hohe analytische Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit.
Diese Effekte sind insbesondere in analytischen Elementen
mit einer Ausbreitungsschicht ausgeprägt, die ein
selbstentwickelbares Substrat enthält, welches eine gefärbte
Substanz bei der enzymatischen Reaktion freisetzt, wie
bei einem Element für die Analyse der GGT-Aktivität unter
Verwendung von γ-Glutamyl-p-nitroanilid, bei der Analyse der
Amylaseaktivität unter Verwendung von p-Nitrophenyloligosaccharid,
bei der Analyse der ALP-Aktivität unter Verwendung
von p-Nitrophenylphosphat und bei ähnlichen Analysen.
Das analytische erfindungsgemäße Element ist ebenfalls in
Analysesystemen mit anderen Substraten, wie bei der Analyse
von ALT, AST, LDH etc., unter Verwendung von Alanin,
Asparaginsäure, α-Ketoglutarsäure, Milchsäure etc. als Substrat
nützlich.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung. In diesen
Beispielen sind, sofern nicht anders angegeben, alle Prozentgehalte
durch das Gewicht ausgedrückt.
Eine wäßrige Lösung mit der Zusammensetzung (a-i), die im
folgenden angegeben wird, wird auf einen 180 µm dicken farblosen
transparenten und glatten Polyethylenterephthalat-
Film, der eine Gelatineunterschicht aufweist, bis zu einer
Trockendicke von 7 µm aufgetragen. Anschließend wird unter
Bildung einer Nachweisschicht getrocknet.
Gelatine 300 g
Oberflächenaktives Mittel 10G
(oberflächenaktives Mittel, hergestellt von der Olin Corp.;
p-Nonylphenoxypolyglycidol; Polymerisationsgrad: etwa 10) 5 g 15%ige Latexlösung von
Poly-co(styrol-N-methylmorpholinium- methylstyrol-divinylbenzol)
(55 : 43 : 2, ausgedrückt als Mol) 280 g Wasser2150 g Wäßrige verdünnte Natriumhydroxidlösung zur Einstellung des pH-Werts fürpH = 7,0
(oberflächenaktives Mittel, hergestellt von der Olin Corp.;
p-Nonylphenoxypolyglycidol; Polymerisationsgrad: etwa 10) 5 g 15%ige Latexlösung von
Poly-co(styrol-N-methylmorpholinium- methylstyrol-divinylbenzol)
(55 : 43 : 2, ausgedrückt als Mol) 280 g Wasser2150 g Wäßrige verdünnte Natriumhydroxidlösung zur Einstellung des pH-Werts fürpH = 7,0
Eine wäßrige Lösung mit der folgenden Zusammensetzung (b-i)
wird dann auf die so gebildete Gelatineschicht bis zu einer
Trockendicke von 5 µm aufgetragen und unter Bildung einer
reaktiven Reagensschicht getrocknet.
Gelatine 200 g
Oberflächenaktives Mittel 10G 5 g
α-Glucosidase3 500 000 IU
Wasser 2600 g
Verdünnte wäßrige Natriumhydroxidlösung zur Einstellung
des pH-WertspH = 7,0
Eine wäßrige Lösung mit der Zusammensetzung (c-i), die im
folgenden angegeben ist, wird weiterhin darauf bis zu einer
Trockendicke bis zu 3 µm aufgetragen und dann wird unter
Bildung einer Lichtabschirmungsschicht getrocknet.
Gelatine 30 g
Oberflächenaktives Mittel 10G 4 g
Titanoxid (Anatastyp) 20 g
Wasser950 g
Verdünnte wäßrige Natriumhydroxidlösung zur Einstellung
des pH-WertspH = 7,0
Die Lichtabschirmungsschicht hatte eine spiegelnde Dichte
von etwa 1,3 (vgl. The Theory of the Photographic Process
(Third Edition), S. 421, veröffentlicht von der The Macmilian
Company).
Danach werden etwa 30 g/m2 Wasser einheitlich auf die Lichtabschirmungsschicht
zur Quellung der Schicht aufgetragen
und dann wird ein gestricktes bzw. gewirktes Polyester-
Flächengebilde (40 Gauge) unter geringem Druck darauf laminiert
und anschließend wird getrocknet. Eine wäßrige Lösung
mit der Zusammensetzung (d-i), die im folgenden angegeben
ist, wird einheitlich auf das Flächengebilde in einer Menge
von 150 ml/m2 aufgetragen und dann wird zur Entfernung des
Lösungsmittels unter Bildung einer Ausbreitungsschicht getrocknet.
Man erhält so ein integrales mehrschichtiges analytisches
Element für die Analyse von Amylase.
p-Nitrophenyl-α-D-maltopentaosid 34 g
Wasser1600 g
Kaliumphosphat 60 g
Polyvinylpyrrolidon (durchschnittliches Molekulargewicht: 100 000) 140 g
Verdünnte wäßrige Natriumhydroxidlösung zur Einstellung des pH-WertspH = 7,3
10 µl von jeweils im Handel erhältlichem Kontrollserum (Kontrollserum I)
und einem Kontrollserum mit Amylaseaktivität,
welche durch Zugabe von humaner Speichelamylase variiert
wurde (Kontrollserum II), wurden in einem Flecken auf das
entstehende analytische Element aufgetragen. Das Element
wurde bei 37°C stehengelassen und die Reflexionsdichte des
Elements wurde jede Minute zwischen 3 bis 6 min vom Beginn
des Stehenlassens bei einer Wellenlänge von 400 nm geprüft.
Die Amylasekonzentration der Kontrollsera I und II werden
aus der Änderung in der Reflexionsdichte unter Verwendung
einer zuvor hergestellten Eichkurve bestimmt. Die erhaltenen
Ergebnisse sind in Tabelle I angegeben.
KontrollserumErfindungsgemäß
KontrollserumErfindungsgemäß
I 72 U/l
II238 U/l
Es wurde der gleiche Polyethylenterephthalat-Film wie in
Beispiel 1 verwendet. Er wurde mit einer wäßrigen Lösung
der Zusammensetzung (a-ii) beschichtet. Dann wurde eine wäßrige
Lösung der Zusammensetzung (b-ii) aufgetragen. Beide
Zusammensetzungen sind im folgenden angegeben. Die Auftragung
erfolgte in einer Trockendicke von 10 µm bzw. 3 µm.
Nach jedem Auftragen wurde getrocknet.
Gelatine
(alkalibehandelte entionisierte
Gelatine) 100 g
Oberflächenaktives Mittel 10G 5 g
1,2-Bis(vinylsulfonylacetamido)-
ethan 1,5 g
Wasser1000 g
Verdünnte wäßrige Natriumhydroxidlösung
zur Einstellung des
pH-WertspH = 7,0
Gelatine 120 g
Oberflächenaktives Mittel
(Nonylphenoxypolyglycidol) 13 g
Wasser2600 g
Verdünnte wäßrige Natriumhydroxidlösung
zur Einstellung des
pH-WertspH = 7,0
Danach wurde die Gelatineschicht mit 30 g/m2 einer 0,4%igen
wäßrigen Lösung von Nonylphenoxypolyglycidol gequollen,
ein 230 µm dickes gestricktes bzw. gewirktes Polyester-
Flächengebilde (36 Gauge, 50 Denier) wurde darauf unter geringem
Druck laminiert und anschließend wurde getrocknet.
Getrennt wurden vier Arten einer wäßrigen Lösung (c-ii)
hergestellt, indem man eine Lösung von 22,8 g γ-Glutamyl-
p-nitroanilid in 10 ml 2 N Chlorwasserstoffsäure und 10 ml
Ethanol in einer homogenen Lösung der folgenden Zusammensetzung
dispergierte und dann den pH-Wert mit verdünnter
Chlorwasserstoffsäure auf 8,3 einstellte.
Tris(hydroxyethyl)aminomethan 30,3 g
Gylcylglycin 6,5 g
Cetyltrimethylammoniumbromid 5 g
Oberflächenaktives Mittel
(Nonylphenoxypolyglycidol) 0,8 g
Wasser200 g
Polyacrylamid (Viskosität:
2500 cps bei 25°C)angegeben in Tabelle II
Die entstehende wäßrige Lösung (c-ii) wird einheitlich auf
ein Flächengebilde in einer Menge von 120 ml/m2 aufgetragen
und unter Herstellung integraler mehrschichtiger analytischer
Elemente A, B, C und D getrocknet.
Jedes der Elemente wurde zu einem 15 × 15 mm2-Quadrat geschnitten
und an einem Kunststoffrahmen befestigt, wie es
in der japanischen Patentanmeldung (OPI) Nr. 63 452/62 beschrieben
wird. Man erhält einen Objektträger für die GGT-
Analyse.
10 µl von 7%igem humanem Serum Albumin (HSA), die 197, 382
oder 889 IU/l GGT enthalten, werden auf einem Flecken auf
den entsprechenden Objektträger aufgetragen. Der Objektträger
wurde in einem geschlossenen Behälter bei 37°C
stehengelassen und die optische Reflexionsdichte wurde bei
410 nm nach 2 und 5 min gemessen und die Änderung ist in
der folgenden Tabelle II angegeben.
10 µl einer 0,83 mM Lösung von Rot Nr. 106 (Nahrungsmittelfarbstoff)
werden auf das Element aufgetragen, und das Element
wird bei 37°C stehengelassen. Die Ausbreitungsfläche auf
der Ausbreitungsschicht nach 6 min Stehenlassen ist in der
folgenden Tabelle III angegeben.
ProbeEntwickelte Fläche (cm2)
ProbeEntwickelte Fläche (cm2)
A 1,50
B 1,34
C 1,18
D 1,90
Es wurde wie im Beispiel 2 verfahren, um ein trockenes analytisches
Element zur Bestimmung von GGT herzustellen, jedoch
mit der Ausnahme, daß der aus der Lösung (a-ii) hergestellte
getrocknete Film eine Dicke von 15 µm hatte,
daß die Wassermenge in der Lösung (b-ii) 2900 g betrug,
daß 2,5 g Polyacrylamid in die Lösung (c-ii) anstelle des
oberflächenaktives Mittels eingearbeitet wurden und daß
eine Lösung (d-ii) mit folgender Formulierung zusätzlich
nach dem Aufschichten der Lösung (c-ii) in einer Menge von
112 ml/m2 aufgeschichtet wurde.
Hydroxyethylcellulose100 ml
TiO2 5 g
10 µl von 7%igem Human-Serum-Albumin (HSA), enthaltend
1900 IU/l GGT, wurden als Fleck auf das resultierende analytische
Element aufgebracht. Das Element wurde in einem
geschlossenen Behälter bei 37°C stehengelassen und die reflektierende
optische Dichte wurde bei 400 nm 2 und 5 min
nach dem Beginn des Stehenlassens gemessen. Die Veränderung
zwischen den zwei Dichten wurde als 0,223 festgestellt.
Wie im Beispiel 3 wurde ein trockenes analytisches Element
für die GGT-Bestimmung hergestellt, jedoch mit der Ausnahme,
daß aus der Zusammensetzung (c-ii) das Polyacrylamid weggelassen
wurde.
10 µl HSA, enthaltend 1900 IU/l GGT, wurden als Fleck auf
das resultierende analytische Element aufgebracht. Das
System wurde bei 37°C in einem geschlossenen Behälter gehalten.
2 min und 5 min nach dem Beginn des Stehenlassens
wurde die Veränderung der optischen Dichte gemessen. Sie
wurde als 0,164 festgestellt.
Ein 180 µm dicker transparenter Polyethylenterephthalat-
Film wurde einer Behandlung unterworfen, um seine Oberfläche
hydrophil zu machen. Auf die hydrophile Oberfläche des Films
wurde eine Beschichtungslösung mit folgender Zusammensetzung
aufgeschichtet und getrocknet, um eine Farbentwicklungsschicht
mit einer Trockendicke von 10 µm zu bilden.
Gelatine100 g
Wasser900 g
Nitroblau-Tetrazolium
(3,3′-(3,3′-Dimethoxy-4,4′-
biphenylen)-bis[2-(p-nitro- phenyl)-5-phenyl-tetrazolium- chlorid]) 6 g
biphenylen)-bis[2-(p-nitro- phenyl)-5-phenyl-tetrazolium- chlorid]) 6 g
Nachdem die Farbentwicklungsschicht mit etwa 30 g/m2 Wasser
befeuchtet worden war, wurde ein gewebter Stoff, bestehend
aus einem versponnenen Polyethylenterephthalat-Garn (36 Gauge,
50 Denier), unter Druck aufgebracht, um eine Ausbreitungsschicht
zu bilden.
Auf die Ausbreitungsschicht wurde eine Beschichtungslösung
mit folgender Zusammensetzung zu einer Bedeckung von
120 ml/m2 aufgeschichtet und getrocknet.
Wasser180 g
Imidazol 4 g
Dinatriumcreatinphosphat 6 g
Adenosin-Diphosphat 2,4 g
Adenosin-5′-phosphat 4 g
Dinatrium-ethylendiamintetraacetat 1,6 g
Magnesiumacetat 4 g
Glucose 2 g
NAD 2 g
N-Acetylcystein 0,6 g
Diadenosin-pentaphosphat 80 mg
Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase30000 U
Hexokinase40000 U
Diaphorase30000 U
Ascorbinsäure-Oxidase30000 U
Polyacrylamid (20%ige wäßrige
Lösung, durchschnittliches
Molekulargewicht: 37 000)200 g
Molekulargewicht: 37 000)200 g
10 µl 70%iges HSA (37°C), enthaltend 0, 149, 383, 656 oder
1560 IU/l von CPK (Creatin-Kinase), wurden als Fleck auf
die Ausbreitungsschicht des so hergestellten analytischen
Elements aufgebracht. Das System wurde auf einer thermostatierten
Platte mit 37°C stehengelassen, wobei das Verdampfen
von Wasser in genügender Weise verhindert wurde. Nach 2 und
5 min wurden die reflektierenden optischen Dichten bei
540 nm gemessen. Die erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle IV
zusammengestellt.
Ein 180 µm dicker transparenter Polyethylenterephthalat-
Film wurde einer Behandlung unterworfen, um seine Oberfläche
hydrophil zu machen. Auf die hydrophile Oberfläche des Films
wurde eine Beschichtungslösung mit folgender Zusammensetzung
aufgeschichtet und getrocknet, um eine Farbentwicklungsschicht
mit einer Trockendicke von etwa 10 µm zu bilden.
Gelatine100 g
Wasser900 g
Oberflächenaktives Mittel
(Octylphenylpolyglycidol) 4 g Nitroblau-Tetrazolium 6 g Bisvinylsulfon (2,7%ige Lösung 74 g in Wasser : Aceton = 1 : 1, auf das Volumen bezogen) (pH = 6,5)
(Octylphenylpolyglycidol) 4 g Nitroblau-Tetrazolium 6 g Bisvinylsulfon (2,7%ige Lösung 74 g in Wasser : Aceton = 1 : 1, auf das Volumen bezogen) (pH = 6,5)
Nach dem Befeuchten der Farbentwicklungsschicht mit etwa
30 g/m2 Wasser wurde ein gewirkter Stoff, bestehend aus
versponnenem Polyethylenterephthalat-Garn (36 Gauge,
50 Denier), unter Druck darauf aufgebracht, um eine Ausbreitungsschicht
zu bilden.
Auf die Ausbreitungsschicht wurde eine Substratlösung mit
folgender Zusammensetzung zu einer Bedeckung von 110 ml/m2
aufgeschichtet und getrocknet, um ein integrales vielschichtiges
analytisches Element zur Bestimmung von CPK zu bilden.
Wasser180 g
Imidazol 4 g
Dinatriumcreatinphosphat 6 g
Adenosin-diphosphat 2,4 g
Adenosin-5′-phosphat 4 g
Dinatrium-ethylendiamintetraacetat 1,6 g
Magnesiumacetat 4 g
Glucose 2 g
NAD 2 g
N-Acetylcystein 0,6 g
Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase14000 U
Hexokinase14000 U
Diaphorase14000 U
Oberflächenaktives Mittel
(Triton X-100; p-t-Octylphenoxypolyethoxyethanol;
Polymerisationsgrad: etwa 10) 3 g Acrylamid/Vinylpyrrolidon-Copolymeres
(Molverhältnis: 50 : 50,100 ml/100 ml 15%ige wäßrige Lösung)der obigen Zusammensetzung
(Triton X-100; p-t-Octylphenoxypolyethoxyethanol;
Polymerisationsgrad: etwa 10) 3 g Acrylamid/Vinylpyrrolidon-Copolymeres
(Molverhältnis: 50 : 50,100 ml/100 ml 15%ige wäßrige Lösung)der obigen Zusammensetzung
10 µl 7%iges HSA, enthaltend 10 oder 950 IU/l (37°C), wurden
auf die Ausbreitungsschicht fleckförmig aufgebracht.
Das System wurde auf einer thermostatierten Platte bei
37°C stehengelassen, wobei das Verdampfen von Wasser in genügendem
Maße verhindert wurde. Die reflektierenden optischen
Dichten wurden bei 510 nm nach 2 und 5 min gemessen.
Die erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle V zusammengestellt.
Die optische Dichte des analytischen Elements vor
der Aufbringung der CPK enthaltenden Lösung war 0,43.
Der gleiche Polyethylenterephthalat-Film, wie in Beispiel 1
verwendet, wurde mit einer wäßrigen Lösung mit der Zusammensetzung
(a-iii) und sodann mit einer wäßrigen Lösung
mit der Zusammensetzung (b-iii) beschichtet. Beide Zusammensetzungen
werden nachstehend angegeben. Die Aufbringung
erfolgte zu einer Trockendicke von 10 µm bzw. 3 µm und
jeweils anschließendem Trocknen.
Gelatine
(alkalibehandelte deionisierte
Gelatine) 100 g
Oberflächenaktives Mittel 10G 5 g
1,2-Bis(vinylsulfonylacetamido)-ethan 1,5 g
Wasser1000 g
Wäßrige verdünnte Natriumhydroxidlösung
zur EinstellungpH = 7,0
Gelatine 120 g
Oberflächenaktives Mittel
(Nonylphenoxypolyglycidol) 13 g
Wasser2600 g
Wäßrige verdünnte Natriumhydroxidlösung
zur EinstellungpH = 7,0
Nachdem die Gelatineschicht mit 30 g/m2 einer 0,4%igen wäßrigen
Lösung von Nonylphenoxypolyglycidol aufgequollen war,
wurde darauf unter geringem Druck ein 230 µm dicker gewirkter
Polyester-Stoff (36 Gauge, 50 Denier) auflaminiert.
Danach wurde getrocknet.
Es wurden gesondert vier Arten einer wäßrigen Lösung (c-iii)
hergestellt, indem eine Lösung von 2,28 g γ-Glutamyl-p-
nitroanilid in 10 ml 2 N Chlorwasserstoffsäure und 10 ml
Ethanol in homogener Lösung mit folgender Zusammensetzung
dispergiert wurden. Der pH-Wert wurde mit verdünnter Chlorwasserstoffsäure
auf 8,3 eingestellt.
Tris(hydroxyethyl)aminomethan 30,3 g
Glycylglycin 6,5 g
Cetyltrimethylammoniumbromid 5 g
Oberflächenaktives Mittel
(Nonylphenoxypolyglycidol) 0,8 g
Wasser200 g
Hydroxypropylmethylcellulosegemäß Tabelle IV
Die resultierende wäßrige Lösung (c-iii) wurde gleichförmig
auf den Stoff in einer Menge von 100 ml/m2 aufgeschichtet
und getrocknet, um integrale vielschichtige analytische
Elemente E, F, G und H zur Bestimmung der GGT-Aktivität
herzustellen.
Ein Streifen für die GGT-Analyse wurde unter Verwendung
der einzelnen analytischen Elemente E bis H in der gleichen
Weise wie im Beispiel 2 hergestellt.
10 µl 7%iges HSA, enthaltend 172 oder 1110 IU/l GGT, wurden
fleckförmig auf den resultierenden Streifen aufgebracht.
Der Streifen wurde in einem geschlossenen Behälter bei
37°C stehengelassen und die reflektierende optische Dichte
wurde bei 640 nm nach 2 und 5 min gemessen. Ihre Veränderung
ist in Tabelle VI-1 angegeben.
Die entwickelte Fläche auf jedem der GGT-Analyseelemente
wurde in der gleichen Weise wie im Beispiel 2 gemessen. Die
Ergebnisse sind in Tabelle VI-2 zusammengestellt.
ProbeEntwickelte Fläche (cm2)
ProbeEntwickelte Fläche (cm2)
E 2,30
F 1,61
G 1,27
H 1,10
Claims (10)
1. Trockenes analytisches Element für die Analyse einer
enzymatischen Aktivität in einer Flüssigkeit, dadurch gekennzeichnet,
daß es einen Träger und darauf mindestens
eine poröse, eine Flüssigkeit ausbreitende Schicht,
die aus Fasern, welche Wasser nicht absorbieren, besteht,
umfaßt, wobei die poröse, eine Flüssigkeit ausbreitende
Schicht ein Substrat für das zu analysierende Element und
ein hydrophiles Polymeres in einer Menge enthält, die ausreicht,
die Ausbreitungsfläche um mindestens 20% zu verringern.
2. Trockenes analytisches Element nach Anspruch 1, dadurch
gekennzeichnet, daß das hydrophile
Polymere ausgewählt wird aus der Gruppe eines Polymeren,
welches eine sich wiederholende Einheit der Formel (I)
enthält, worin R1 ein Wasserstoffatom oder eine Niedrigalkylgruppe
bedeutet und R2 und R3 je ein Wasserstoffatom,
eine substituierte oder unsubstituierte aliphatische Kohlenwasserstoffgruppe,
eine substituierte oder unsubstituierte
aromatische Kohlenwasserstoffgruppe oder eine substituierte
oder unsubstituierte heterocyclische Gruppe
bedeuten oder worin R2 und R3 zusammen einen Ring bilden,
einem Polymeren, welches eine sich wiederholende Einheit der Formel (II) enthält, worin R4 ein Wasserstoffatom oder eine Niedrigalkylgruppe bedeutet und Q worin q eine ganze Zahl von 2 bis 4 bedeutet,
-NR5-CO-R6, worin R5 eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und R6 ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeuten, oder bedeutet, worin Z1 eine Atomgruppierung bedeutet, welche einen Lactamring, einen Oxazolidonring oder einen Pyridonring bildet,
und einem Cellulosederivat.
einem Polymeren, welches eine sich wiederholende Einheit der Formel (II) enthält, worin R4 ein Wasserstoffatom oder eine Niedrigalkylgruppe bedeutet und Q worin q eine ganze Zahl von 2 bis 4 bedeutet,
-NR5-CO-R6, worin R5 eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und R6 ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeuten, oder bedeutet, worin Z1 eine Atomgruppierung bedeutet, welche einen Lactamring, einen Oxazolidonring oder einen Pyridonring bildet,
und einem Cellulosederivat.
3. Trockenes analytisches Element nach Anspruch 2, dadurch
gekennzeichnet, daß R1 ein Wasserstoffatom
oder eine Methylgruppe bedeutet und R2 und R3
je ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe, eine Ethylgruppe,
eine Benzylgruppe, eine Hydroxyethylgruppe, eine Cyclohexylgruppe,
eine Phenylgruppe, eine Piperidinogruppe oder
eine Morpholinogruppe bedeuten, wobei die Gesamt-Kohlenstoffzahl
in R2 und R3 bis zu einschließlich 12 beträgt.
4. Trockenes analytisches Element nach Anspruch 2, dadurch
gekennzeichnet, daß R4 ein Wasserstoffatom
bedeutet und Q
bedeutet, worin R5 eine Methylgruppe oder eine Ethylgruppe
und R6 ein Wasserstoffatom, eine Methylgruppe oder eine
Ethylgruppe bedeuten, oder
bedeutet, worin Z1 eine Atomgruppierung bedeutet, welche
einen 5- oder 6gliedrigen Lactamring oder einen Oxazolidonring
bildet.
5. Trockenes analytisches Element nach Anspruch 4, dadurch
gekennzeichnet, daß Q den Rest einer
Pyrrolidongruppe oder den Rest einer Oxazolidongruppe bedeutet.
6. Trockenes analytisches Element nach Anspruch 2, dadurch
gekennzeichnet, daß das Polymere,
welches die sich wiederholende Einheit der Formeln (I)
oder (II) enthält, mindestens 20 Mol-% der sich wiederholenden
Einheit der Formeln (I) oder (II) enthält.
7. Trockenes analytisches Element nach Anspruch 2, dadurch
gekennzeichnet, daß das Polymere,
welches die sich wiederholende Einheit der Formeln (I)
oder (II) enthält, in einer Menge von 2 bis 15 g/m2 der
flüssigkeitsausbreitenden Schicht vorhanden ist.
8. Trockenes analytisches Element nach Anspruch 2, dadurch
gekennzeichnet, daß das Cellulosederivat
Hydroxypropylcellulose oder Hydroxypropylmethylcellulose
ist.
9. Trockenes analytisches Element nach Anspruch 2, dadurch
gekennzeichnet, daß das Cellulosederivat
in einer Menge von 0,5 bis 15 g/m2, bezogen auf
die flüssigkeitsausbreitende Schicht, vorhanden ist.
10. Trockenes analytisches Element nach Anspruch 9, dadurch
gekennzeichnet, daß das Cellulosederivat
in einer Menge von 0,7 bis 10 g/m2, bezogen auf die
flüssigkeitsausbreitende Schicht, vorhanden ist.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP12287586A JPS63219397A (ja) | 1986-05-28 | 1986-05-28 | 酵素活性測定用乾式分析要素 |
JP12287686A JPS63112999A (ja) | 1986-05-28 | 1986-05-28 | 酵素活性測定用乾式分析要素 |
JP61143754A JPS62182652A (ja) | 1985-06-20 | 1986-06-19 | 酵素活性測定用乾式分析要素 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE3717913A1 true DE3717913A1 (de) | 1987-12-03 |
DE3717913C2 DE3717913C2 (de) | 1997-10-23 |
Family
ID=27314538
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE3717913A Expired - Fee Related DE3717913C2 (de) | 1986-05-28 | 1987-05-27 | Trockenes analytisches Element für die Enzymanalyse |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4889797A (de) |
DE (1) | DE3717913C2 (de) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0272518A2 (de) * | 1986-12-22 | 1988-06-29 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Analytisches Element für die Vermessung von enzymatischer Aktivität |
EP1947191A1 (de) | 2007-01-17 | 2008-07-23 | FUJIFILM Corporation | Verfahren zur Messung tierischer Alpha-Amylase |
WO2008073255A3 (en) * | 2006-12-08 | 2009-01-08 | Opti Medical Systems | Spreading layer and humidity control layer for enhancing sensor performance |
EP2141180A1 (de) | 2008-06-30 | 2010-01-06 | Fujifilm Corporation | Antikörpererkennung von CRP im Hund und Menschen |
EP2336158A1 (de) | 2009-12-21 | 2011-06-22 | Fujifilm Corporation | Trockenes Analyseelement zur Messung von CRP bei Hunden |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5096812A (en) * | 1989-06-08 | 1992-03-17 | Osborn Laboratories, Inc. | Assay method for gamma glutamyltransferase (GGT) in liquid blood and dried blood |
US5082771A (en) * | 1989-06-27 | 1992-01-21 | Eastman Kodak Company | Detecting cells using tellurapyrylium dihydroxides |
DE69020496T2 (de) * | 1989-11-08 | 1996-01-25 | Unitika Ltd | Vermessung von Diaphoraseaktivität und Reagenz dazu. |
JP2618727B2 (ja) * | 1990-01-19 | 1997-06-11 | 富士写真フイルム株式会社 | 全血中の被検成分の定量方法 |
JP2611890B2 (ja) * | 1991-07-19 | 1997-05-21 | 富士写真フイルム株式会社 | 乾式分析要素を用いた測定方法及び乾式分析要素 |
WO1994000595A1 (en) * | 1992-06-25 | 1994-01-06 | Diversey Corporation | Phosphate analysis |
US5429931A (en) * | 1993-05-24 | 1995-07-04 | Eastman Kodak Company | Multilayer analytical element containing crosslinked binder and method for the determination of ethanol |
US5429932A (en) * | 1993-05-24 | 1995-07-04 | Eastman Kodak Company | Multilayer analytical element containing niacinamide and method for the determination of ethanol |
US5447689A (en) * | 1994-03-01 | 1995-09-05 | Actimed Laboratories, Inc. | Method and apparatus for flow control |
EP1133571B1 (de) | 1998-11-23 | 2006-06-28 | Proteome Sciences, Inc. | Verfahren und zusammensetzungen zur schmerzbehandlung |
JP3756007B2 (ja) * | 1999-01-28 | 2006-03-15 | 富士写真フイルム株式会社 | 乾式分析方法及び乾式分析要素 |
AUPQ826500A0 (en) * | 2000-06-21 | 2000-07-13 | Novapharm Research (Australia) Pty Limited | Enzyme detection and measurement |
Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2332760A1 (de) * | 1972-06-30 | 1974-01-17 | Eastman Kodak Co | Mehrschichtiges analytisches element fuer die quantitative spektrophotometrische analyse |
US3992158A (en) * | 1973-08-16 | 1976-11-16 | Eastman Kodak Company | Integral analytical element |
DE2717817A1 (de) * | 1976-04-26 | 1977-11-03 | Eastman Kodak Co | Analytisches element |
US4258001A (en) * | 1978-12-27 | 1981-03-24 | Eastman Kodak Company | Element, structure and method for the analysis or transport of liquids |
DE3332144A1 (de) * | 1982-09-06 | 1984-03-08 | Konishiroku Photo Industry Co., Ltd., Tokyo | Analytisches element |
US4486537A (en) * | 1981-09-29 | 1984-12-04 | Konishiroku Photo Industry Co., Ltd. | Analytical element and method of use |
EP0158993A2 (de) * | 1984-04-16 | 1985-10-23 | EASTMAN KODAK COMPANY (a New Jersey corporation) | Analytisches Element mit verbesserter Ausbreitzone und Verfahren zu dessen Verwendung |
EP0159638A2 (de) * | 1984-04-16 | 1985-10-30 | EASTMAN KODAK COMPANY (a New Jersey corporation) | Mehrschichtiges analytisches Element und Verfahren zur Bestimmung von Analyten |
EP0162302A1 (de) * | 1984-04-19 | 1985-11-27 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Integrierendes mehrschichtiges analytisches Element |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3867258A (en) * | 1973-11-08 | 1975-02-18 | American Cyanamid Co | Lactate dehydrogenase test material |
DE2819645A1 (de) * | 1978-05-05 | 1979-11-08 | Merck Patent Gmbh | Mittel und verfahren zur durchfuehrung kolorimetrischer oder photometrischer bestimmungen |
JPS5782766A (en) * | 1980-11-11 | 1982-05-24 | Konishiroku Photo Ind Co Ltd | Amynological measuring element |
JPS6329246A (ja) * | 1986-07-10 | 1988-02-06 | イ−ストマン コダツク カンパニ− | 展開調節域を有する分析要素 |
-
1987
- 1987-05-26 US US07/054,432 patent/US4889797A/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-05-27 DE DE3717913A patent/DE3717913C2/de not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2332760A1 (de) * | 1972-06-30 | 1974-01-17 | Eastman Kodak Co | Mehrschichtiges analytisches element fuer die quantitative spektrophotometrische analyse |
US3992158A (en) * | 1973-08-16 | 1976-11-16 | Eastman Kodak Company | Integral analytical element |
DE2717817A1 (de) * | 1976-04-26 | 1977-11-03 | Eastman Kodak Co | Analytisches element |
US4258001A (en) * | 1978-12-27 | 1981-03-24 | Eastman Kodak Company | Element, structure and method for the analysis or transport of liquids |
US4486537A (en) * | 1981-09-29 | 1984-12-04 | Konishiroku Photo Industry Co., Ltd. | Analytical element and method of use |
DE3332144A1 (de) * | 1982-09-06 | 1984-03-08 | Konishiroku Photo Industry Co., Ltd., Tokyo | Analytisches element |
EP0158993A2 (de) * | 1984-04-16 | 1985-10-23 | EASTMAN KODAK COMPANY (a New Jersey corporation) | Analytisches Element mit verbesserter Ausbreitzone und Verfahren zu dessen Verwendung |
EP0159638A2 (de) * | 1984-04-16 | 1985-10-30 | EASTMAN KODAK COMPANY (a New Jersey corporation) | Mehrschichtiges analytisches Element und Verfahren zur Bestimmung von Analyten |
EP0162302A1 (de) * | 1984-04-19 | 1985-11-27 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Integrierendes mehrschichtiges analytisches Element |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0272518A2 (de) * | 1986-12-22 | 1988-06-29 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Analytisches Element für die Vermessung von enzymatischer Aktivität |
EP0272518A3 (en) * | 1986-12-22 | 1990-07-25 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Analytical element for measuring enzyme activity |
WO2008073255A3 (en) * | 2006-12-08 | 2009-01-08 | Opti Medical Systems | Spreading layer and humidity control layer for enhancing sensor performance |
US8158259B2 (en) | 2006-12-08 | 2012-04-17 | Opti Medical Systems | Spreading layer and humidity control layer for enhancing sensor performance |
EP1947191A1 (de) | 2007-01-17 | 2008-07-23 | FUJIFILM Corporation | Verfahren zur Messung tierischer Alpha-Amylase |
EP2141180A1 (de) | 2008-06-30 | 2010-01-06 | Fujifilm Corporation | Antikörpererkennung von CRP im Hund und Menschen |
EP2336158A1 (de) | 2009-12-21 | 2011-06-22 | Fujifilm Corporation | Trockenes Analyseelement zur Messung von CRP bei Hunden |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US4889797A (en) | 1989-12-26 |
DE3717913C2 (de) | 1997-10-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE3717913A1 (de) | Trockenes analytisches element fuer die enzymanalyse | |
DE2801476C2 (de) | Kolorimetrisches Verfahren für die Bestimmung von Bilirubin | |
DE19945828B4 (de) | Analysenelement und Verfahren zur Bestimmung eines Analyten in Flüssigkeit | |
CN1143132C (zh) | 可用肉眼观察的血糖检测条 | |
DE2735690C2 (de) | ||
EP0154839B1 (de) | Testvorrichtung und Methode zum Nachweis einer Komponente einer flüssigen Probe | |
US4557901A (en) | Analytical element | |
DE3922495A1 (de) | Analyseverfahren fuer substanzen aus biologischen fluessigkeiten, insbesondere vollblut | |
DE3240463A1 (de) | Integriertes mehrschichtiges analytisches element zur analyse von ammoniak oder ammoniak bildenden substraten und verfahren zum nachweis von ammoniak oder ammoniak bildenden substraten | |
DE3206659A1 (de) | Film fuer die quantitative analyse und verfahren zur kolorimetrischen analyse unter verwendung desselben | |
DE2900136C2 (de) | Analytisches Element zur Bestimmung eines vorgegebenen Analyten in einer wäßrigen Flüssigkeit | |
DE2548279B2 (de) | Diagnostischer Teststreifen zur qualitativen und halbquantitativen Bestimmung von Blut und Hämoglobin in biologischem Material | |
DE3206723C2 (de) | ||
DE3012368A1 (de) | Diagnostische mittel und verfahren | |
DE2644501B2 (de) | Prüfmittel zur Bestimmung von Bilirubin in Urin | |
US4478944A (en) | Analytical element containing a barrier zone and process employing same | |
DE3133218A1 (de) | Mehrschichtiges chemisches analysen-element | |
DE3116044C2 (de) | Photographisches Aufzeichnungsmaterial nach dem Diffusionsübertragungsverfahren | |
DE3235658C2 (de) | ||
DE3109259C2 (de) | ||
DE3222707C2 (de) | ||
DE4015157A1 (de) | Asymetrische sandwich-membranen fuer diagnose-teststreifen | |
WO1992015879A1 (de) | Testträger zur bestimmung eines analyten aus vollblut | |
DE3332144A1 (de) | Analytisches element | |
DE4311252A1 (de) | Bestimmung eines Analyten in einer Probeflüssigkeit |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
8110 | Request for examination paragraph 44 | ||
D2 | Grant after examination | ||
8364 | No opposition during term of opposition | ||
8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |