DE3213786A1 - Farbindikator-zusammensetzung zum hydrogenperoxid-nachweis und ein diese in einer reagensschicht enthaltender film fuer die quantitative analyse - Google Patents

Farbindikator-zusammensetzung zum hydrogenperoxid-nachweis und ein diese in einer reagensschicht enthaltender film fuer die quantitative analyse

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DE3213786A1 DE19823213786 DE3213786A DE3213786A1 DE 3213786 A1 DE3213786 A1 DE 3213786A1 DE 19823213786 DE19823213786 DE 19823213786 DE 3213786 A DE3213786 A DE 3213786A DE 3213786 A1 DE3213786 A1 DE 3213786A1
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Description

Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis und ein diese in einer Reagensschicht enthaltender Film für die quantitative Analyse
Die vorliegende Erfindung betrifft eine eine Peroxidase enthaltende Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis mit verbesserter Lagerbeständigkeit sowie einen eine solche Zusammensetzung enthaltenden
Film für die quantitative Analyse zum Hydrogenperoxid-Nachweis, der ein Arbeiten mittels eines trocken durchzuführenden Verfahrens ermöglicht. Insbesondere betrifft die vorliegende Erfindung eine Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis mit ver-
besserter Lagerbeständigkeit, in die zur Verhinderung der Inaktivierung eines Peroxidas-Titers ein spezielles Pyrogallol-Derivat eingearbeitet wurde, ohne die quantitative Analyse einer chemisch nachweisbaren chemischen Species nennenswert zu stören oder gar zu verhindern, die durch Wechselwirkung zwischen einer Peroxidase und einer zur Bildung eines Farbstoffs durch oxidative Kupplung befähigten Verbindung unter Verwendung von Hydrogenperoxid als Substrat gebildet wurde. Sie betrifft ebenso einen eine solche Zusammensetzung mit
verbesserter Lagerbeständigkeit enthaltenden Film für die quantitative Analyse zum Hydrogenperoxid-Nachweis, der ein Arbeiten mittels eines trocken durchzuführenden Verfahrens ermöglicht.
Verschiedene Filme für die quantitative Analyse, insbesondere aus mehreren Schichten bestehende Analysenfilme, die eine kolorimetrische Analyse von Hydrogenperoxid mittels trocken arbeitender Verfahren ermöglichen
- wobei eine Peroxidase beteiligt ist oder der Prozeß durch eine Peroxidase katalysiert wird - , wurden vorgeschlagen, und einige von ihnen sind auch zum praktischen Einsatz gelangt. Unter ihnen gibt es Filme für
die quantitative Analyse von Glucose, Harnsäure, Cholesterin, Cholinesterase, Kreatin etc. im lebenden Organismus mittels eines trocken arbeitenden Verfahrens, das, in dieser Reihenfolge, die Schritte der Umsetzung des betreffenden Stoffes mit dem geeigneten oxydieren-
den Enzym oder der Umsetzung eines in einer Enzymreaktion gebildeten Reaktionsprodukts mit dem geeigneten oxydierenden Enzym, der Reaktion des dabei freigesetzten Hydrogenperoxids mit einem Farbindikator zur Bildung einer Färbung und schließlich der Messung der ge-
bildeten Färbung umfaßt. Wegen der Ziele der Erhöhung der Untersuchungsgeschwindigkeit, der Vermeidung komplizierter Arbeitsgänge und der Kostensenkung hat eine verstärkte Nachfrage nach Filmen des trocken arbeitenden Typs für die quantitative Analyse eingesetzt, ins-
besondere auf dem Gebiet der klinischen Analyse. Infolgedessen wurden nach der Art von Test-Papierblättern aus einer oder mehreren Schichten bestehende Filme für die quantitative Analyse mit einer hohen Analysengenauigkeit entwickelt.
Aus mehreren Schichten zusammengesetzte Filme des integrierten Typs für die quantitative Analyse, die im Vergleich zu den herkömmlichen Filmen nach der Art von Test-Papierblättern mit einer einzigen oder zwei Schichten für die quantitative Analyse eine deutlich
verbesserte Analysengenauigkeit aufweisen, sind insbesondere in der JP-OS 53888/74 (entsprechend der US-PS 3 992 158) offenbart. Zur Erzielung einer weiteren Verbesserung der Analysengenauigkeit und unter Berücksich-
tigung des zu untersuchenden Analyten wurden auch Hydrogenperoxid-Indikatoren mit hoher Nachweisempfindlichkeit in Form solcher aus mehreren Schichten aufgebauter Filme des integrierten Typs für die quantitative· Analyse verfügbar gemacht; Beispiele für solche Indikatoren zum Hydrogenperoxid-Nachweis und " für Schichtstrukturen für derartige mehrschichtige Analysenfilme sind in den JP-OSen 40191/76 (entsprechend der US-PS 4 042 335), 131089/78, 29700/79 (entsprechend der US-PS 4 166 093), 124499/80 etc. offenbart.
Die Indikatoren zum Hydrogenperoxid-Nachweis, die für diese trocken arbeitenden Filme eingesetzt werden, basieren auf denen, die zum Hydrogenperoxid-Nachweis bei der herkömmlichen quantitativen Analyse mittels trocken arbeitender Verfahren verwendet werden, und die Prinzipien sind die gleichen.
Insbesondere auf dem Gebiet der klinischen Untersuchungen wird eine Mannigfaltigkeit von Bestandteilen des lebenden Organismus durch chemische Reaktionen mit hoher Spezifität in gemeinsame Zwischenprodukte überführt, wobei im allgemeinen eine Enzymreaktion mit besonders hoher Spezifität zur Anwendung gelangt, um dadurch eine quantitative Bestimmung durchzuführen. Als ein derartiges gemeinsames Zwischenprodukt wird Hydrogenperoxid in vielen Bestimmungsmethoden herangezogen. Weiterhin wurden viele kolorimetrische Verfahren, die wenig aufwendig sind und hohe Genauigkeit erwarten lassen, in Verbindung mit Hydroperoxidasen - deren Substrat Hydrogenperoxid ist - und verwandten Reagentien entwickelt.
- Ii -
Als Hydroperoxidase wird häufig Katalase oder Peroxidase (POD) verwendet, und es sind insbesondere viele Kombinationen mit Indikatoren zum Hydrogenperoxid-Nachweis bekannt, die sich der Peroxidation mittels Peroxidase
bedienen. Indikatoren zum Nachweis von Hydrogenperoxid werden in zwei Gruppen eingeteilt:
(a) Reduzierbare Chromogene und
(b) Kombinationen aus einem Wasserstoff-Donator
(Entwickler) und einem Kuppler.
Erstere wurden von A.S. Keston et al (A.S. Keston, Specific Colorimetric Enzymatic Analytical Reagents for Glucose, Abstracts of Papers, 129th Meeting Amer:Chem. Soc., page 31C, April 1956) und letztere von P. Trinder (Ann.Clin.Biochem. §_, 24 (1969) und J.Clin.Pathol. 22,
246 (1969)) vorgeschlagen. Verbesserungen solcher reduzierbaren Chromogene, Wasserstoff-Donatoren und Kuppler werden u.a. in den JP-PSen 33798/72, 16235/79, 37555/76, 44834/78, 12360/79, 24879/80 und 3394/79 sowie den JP-OSen 86392/77, 26188/78, 50991/74, 11892/75, 40585/78, 110897/80, 25892/79, 20471/80 und 101861/80, der JP-PS 2960/80 etc. offenbart.
Analytische Zusammensetzungen, Testpapiere und mehrschichtige Analysenfilme, die sich solcher enzymologischer Methoden bedienen, bringen Vorteile und Nachteile mit sich, die durch die als Reagentien dienenden Enzyme bedingt werden.
Ein Hauptgrund dafür, daß eine Mannigfaltigkeit von Enzymen komplizierte Lebensvorgänge vollkommen und fehlerfrei steuert, liegt in der Substratspezifität eines
Enzyms. Vermittels seiner Substratspezifität kann ein Enzym eine bestimmte ausgewählte chomijsche Substanz (eine zu untersuchende Verbindung) aus einer kompli-
zierten Zusammensetzung selektiv ihrem Reaktionssystem zuführen. Eine solche hohe Selektivität ist einer der außerordentlichen Vorteile, die gewöhnliche chemische Reagentien nicht haben können.
Auf der anderen Seite bedingen Enzyme jedoch auch Nachteile, die darauf beruhen, daß Enzyme Proteine sind und nicht den Katalysatoren ähneln, die in der chemischen Industrie, Fertigungsindustrie etc. eingesetzt werden, wenngleich Enzyme viele Reaktionen in vivo unter milden Bedingungen katalysieren. Ein besonders schwerwiegender Nachteil besteht in der Gefahr, daß eine Inaktivierung der Enzymwirkung aufgrund einer Denaturierung von Proteinen, in Form thermischer Denaturierung oder infolge einer irreversiblen Reaktion einer aktiven chemischen Species, eintreten kann. Die Enzymaktivität wird nämlich durch die Anwesenheit eines empfindlichen aktiven Zentrums an einer primären, sekundären oder hoch-dimensionierten Struktur eines komplizierten Proteins erzeugt; ein Enzym wird dadurch inaktiviert, daß eine Deformation der Struktur des Proteins stattfindet, die durch eine chemische Reaktion mit einer reaktionsfähigen chemischen Species aus einer äußeren Quelle, eine physikalische Adsorption oder dergleichen herbeigeführt wird. Wenn ein in einer Zusammensetzung für die quantitative Analyse enthaltenes Enzym inaktiviert wird, wird die erwartete Reaktion langsam, und die ursprünglich geplante Wirkung wird nicht erzielt. Als Folge davon wird ein falsches Analysenergebnis erhalten.
Boi analytischen Zusammensetzungen, Testpapieren, mehrschichtigen Analysenfilmen und dergleichen, in denen ein oder mehrere Enzyme als Reagentien verwendet werden, ist die thermische Beständigkeit gering; weiterhin
bestimmen diejenigen Eigenschaften, die ein Enzym prinzipiell besitzt, die jedoch der Gefahr einer Inaktivierung durch eine chemisch aktive Species unterliegen, die Leistungsfähigkeit dieser analytischen Zusammensetzungen, so daß es im allgemeinen schwierig ist, sie während längerer Zeiträume aufzubewahren. Die Lagerbeständigkeit für einen Einsatz als Analysenelemente wird im allgemeinen allenfalls aufgrund einer Aufbewahrung unter Kühlung, Einfrieren, Feuchtigkeitsausschluß etc.
aufrechterhalten.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist eine Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis unter Verwendung einer Peroxidase, die eine verbesserte Lagerfähigkeit besitzt.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist weiterhin ein eine Wirksamkeitsabnahme der Peroxidase verhinderndes Mittel, das ein Pyrogallol-Derivat enthält, welches die Enzymreaktion nicht nennenswert stört oder hemmt.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist weiterhin eine Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis, die ein Pyrogallol-Derivat enthält, welches eine Farbbildungsreaktion zum Hydrogenperoxid-Nachweis nicht hemmt.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist außerdem ein Film für die quantitative Analyse zum Hydrogenperoxid-Nachweis, der die vorgenannte verbesserte Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis enthält, die eine verbesserte Lagerfähigkeit bewirkt.
Die vorliegende Erfindung betrifft:
(1) Eine Farbindikator-Zusaramensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis, enthaltend eine Substanz mit Peroxidase-Aktivität und eine Substanz, die zur Verursachung einer nachweisbaren Veränderung in Gegenwart von Hydrogenperoxid und der Substanz mit Peroxidase-Aktivität befähigt ist, die dadurch gekennzeichnet ist, daß die Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis ein Pyrogallol-Derivat der nachstehenden Formel (1)
enthält, in der
Q eine Nitro-Gruppe, Cyano-Gruppe, Alkyl-Gruppe, substituierte Alkyl-Gruppe, Aryl-Gruppe, substituierte Aryl-Gruppe, Aralkyl-Gruppe, Carb-
2 oxyl-Gruppe oder eine Gruppe -COOQ bezeichnet,
2
worin Q für eine Alkyl-Gruppe, substituierte
Alkyl-Gruppe, Aryl-Gruppe, substituierte Aryl-Gruppe oder eine Aralkyl-Gruppe steht.
(2) Eine Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis wie in (1) beschrieben, in der die zur Verursachung einer nachweisbaren Veränderung befähigte Substanz eine Kombination aus einem Wasserstoff-Donator und einem Kuppler ist.
(3) Einen Film für die quantitative Analyse mit
einer Reagensschicht mit einer Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis, die eine Substanz mit Peroxidase-Aktivität und eine Substanz
enthält, die zur Verursachung einer nachweisbaren Veränderung in Gegenwart von Hydrogenperoxid und der Substanz mit Peroxidase-Aktivität befähigt ist, in der die Zusammensetzung ein Pyrogallol-Derivat der nachstehenden Formel (1)
■ ■■ c "
enthält, in der
Q eine Nitro-Gruppe, Cyano-Gruppe, Alkyl-Gruppe, substituierte Alkyl-Gruppe, Aryl-Gruppe, substituierte Aryl-Gruppe, Aralkyl-Gruppe, Carb-
2
oxyl-Gruppe oder eine Gruppe -COOQ bezeichnet,
2
worin Q für eine Alkyl-Gruppe, substituierte
Alkyl-Gruppe, Aryl-Gruppe, substituierte Aryl-Gruppe oder eine Aralkyl-Gruppe steht.
(4) Einen Film für die quantitative Analyse wie in
(3) beschrieben, in dem die zur Verursachung einer nachweisbaren Veränderung befähigte Substanz eine Kombination aus einem Wasserstoff-Donator und einem Kuppler ist.
(5) Einen Film für die quantitative Analyse wie in (3) oder (4) beschrieben, in dem die Reagensschicht weiterhin aus einer Farbbildungsreaktionsschicht und einer Farbstoff-Fixierschicht zusammengsetzt ist.
(6) Einen Film für die quantitative Analyse wie in (3) oder (4) beschrieben, in dem die Reagensschicht eine einzelne Schicht ist.
Bevorzugte Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung sind:
(7) Die in (2) beschriebene Zusammensetzung, in der der Wasserstoff-Donator mindestens eine Verbindung ausgewählt aus einem 4-Aminoantipyrin, einem 2-Hydrazinobenzothiazolin, einem p-Halogenophenol und einem Ν,Ν-disubstituierten p-Phenylendiamin der Formel (2)
ist, in der
R und R gleich oder verschieden sein können und jeweils eine Alkyl-Gruppe, Alkoxyalkyl-Gruppe, Hydroxyalkyl-Gruppe, Cyanoalkyl-Gruppe, HaIo-
genoalkyl-Gruppe oder Acylaminoalkyl-Gruppe bezeichnen und
R für ein Wasserstoff-Atom, eine Alkyl-Gruppe, AIkoxy-Gruppe oder ein Halogen-Atom steht.
- 17 -
(8) Die in (2) beschriebene Zusammensetzung, in der der Kuppler mindestens eine Verbindung ausgewählt aus einem Naphthol, einem Phenol, einem Pyrazolon und einem Ν,Ν-disubstituierten Anilin der Formel (3)
.B, C a
ist, in der
1 2
R und R gleich oder verschieden sein können und
jeweils ein Wasserstoff-Atom, eine Alkyl-Gruppe
oder eine Alkoxy-Gruppe bezeichnen und
3 4
R und R gleich oder verschieden sein können und
jeweils eine Alkyl-Gruppe, Alkoxyalkyl-Gruppe, Hydroxyalkyl-Gruppe, Aminoalkyl-Gruppe, Cyanoalkyl-Gruppe, Halogenoalkyl-Gruppe oder eine Acylaminoalkyl-Gruppe bezeichnen.
(9) Die in (7) beschriebene Zusammensetzung, in der der Wasserstoff-Donator 4-Aminoantipyrin ist.
(10) Der in (4) , (5) oder (6) beschriebene Film für die quantitative Analyse, in dem der Wasserstoff-Donator mindestens eine Verbindung ausgewählt aus einem 4-Aminoantipyrin, einem 2-Hydrazinobenzothiazolin, einem p-Halogenophenol und einem Ν,Ν-disubstituierten p-Phenylendiamin der Formel (2)
C 2
„ M · · W
- 18 -
ist, in der
R und R gleich oder verschieden sein können und jeweils eine Alkyl-Gruppe, Alkoxyalkyl-Gruppe, Hydroxyalkyl-Gruppe, Cyanoalkyl-Gruppe, Halogenoalkyl-Gruppe oder Acylaminoalkyl-Gruppe be
zeichnen und
R für ein Wasserstoff-Atom, eine Alkyl-Gruppe, AIkoxy-Gruppe oder ein Halogen-Atom steht.
(11) Der in (4), (5) oder (6) beschriebene Film für die quantitative Analyse, in dem der Kuppler mindestens eine Verbindung ausgewählt aus einem Naphthol, einem Phenol, einem Pyrazolon und einem N,N-disubstituierten Anilin der Formel (3)
R1
p~
ist, in der
2
R und R gleich oder verschieden sein können und
jeweils ein Wasserstoff-Atom, eine Alkyl-Gruppe
oder eine Alkoxy-Gruppe bezeichnen und
4
R und R gleich oder verschieden sein können und jeweils eine Alkyl-Gruppe, Alkoxyalkyl-Gruppe,
Hydroxyalkyl-GruppejAminoalkyl-Gruppe, Cyanoalkyl-Gruppe, Halogenoalkyl-Gruppe oder eine Acylaminoalkyl-Gruppe bezeichnen.
(12) Der in (4), (5) oder (6) beschriebene Film für die quantitative Analyse, in dem der Wasserstoff-Donator 4-Aminoantipyrin ist.
(13) Der in (4) , (5) oder (6) beschriebene Film für die quantitative Analyse, in dem die Reagensschicht zwischen einem Träger und und einer porösen Schicht angebracht ist und die poröse Schicht sich in fließfähiger Berührung mit der Reagensschicht befindet, so daß die beiden Schichten in integrierter Form vorliegen.
(14) Der in (4) , (5) oder (6) beschriebene Film für die quantitative Analyse, in dem die Zusammensetzung in einem polymeren Bindemittel enthalten ist.
(15) Der in (4), (5) oder (6) beschriebene Film für die quantitative Analyse, in dem die Reagensschicht weiterhin ein ein anionisches Polymerisat oder ein kationisches Polymerisat enthaltendes Beizmittel
enthält. ,
(16) Der in (5) beschriebene Film für die quantitative Analyse, in dem die Farbstoff-Fixierschicht weiterhin ein ein anionisches Polymerisat oder ein kationisches Polymerisat enthaltendes polymeres
Beizmittel enthält.
(17) Der in (1) beschriebene Film für die quantitative Analyse, in dem ein poröser Träger mit der Zusammensetzung imprägniert ist.
Die Abbildungen Fig. 1 bis Fig. 8 zeigen Querschnitte
repräsentativer Ausführungsformen der Filme für die quantitative Analyse gemäß der vorliegenden Erfindung. In den Fig. 1 bis Fig. 8 bedeuten die Bezugszahlen:
- 20 -
10: Träger
20: Reagensschicht
21: Farbstoff-Fixierschicht
22: Farbbildungsreaktions-Schicht
23: Mit Reagentien imprägnierter Träger
31: Poröse Spreitungsschicht
32: Poröse Schicht mit definierter Flächengröße
40: Lichtreflektierende Schicht.
In der vorliegenden Beschreibung wird der Begriff "Reagensschicht" zur Bezeichnung einer solchen Schicht verwendet, in der ein Analyt in eine mit Hilfe von sichtbarem, nahem UV- oder nahem IR-Licht chemisch nachweisbare Species umgewandelt wird und die grundsätzlich
eine Substanz mit Peroxidase-Aktivität und eine Substanz, die zur Verursachung einer nachweisbaren Veränderung in Gegenwart von Hydrogenperoxid und der Substanz mit Peroxidase-Aktivität befähigt ist, enthält.
Der Begriff "Farbbildungsreaktions-Schicht" bezeichnet eine Schicht, in der ein Analyt in eine chemisch nachweisbare Species umgewandelt wird.
Der Begriff-"Farbstoff-Fixierschicht" bezeichnet eine Schicht, die zur Verbesserung der Nachweisbarkeit der
chemisch nachweisbaren Species beiträgt.
Die Reagensschicht kann eine Farbbildungsreaktions- und Farbstoff-Fixierschicht sein, wenn diese Reagensschicht aus einer einzigen Schicht besteht; die Reagensschicht kann jedoch auch in mindestens zwei Schichten unterteilt sein, von denen eine eine Farbbildungsreaktions-
Schicht und eine andere eine Farbstoff-Fixierschicht
ist. Mit anderen Worten können eine Farbbildungsreaktions-Schicht und eine Farbstoff-Fixierschicht auch gemeinsam als "Reagensschicht" bezeichnet werden.
Die chemisch nachweisbare Species ist direkt oder indirekt eine Nachweisgröße für die Anwesenheit und/oder Konzentration eines interessierenden Analyten oder eines Reaktions- oder Zersetzungsproduktes des Analyten.
Der Begriff "Substanz mit Peroxidase-Aktivität" ist so zu verstehen, daß er eine Substanz bezeichnet, die die Oxidation eines Wasserstoff-Donators mit Hydrogenperoxid (als Substrat) katalysiert, und in der Fachwelt wohlbekannt (I. Yamazaki et al, Molecular & Cellular Biochemistry, Band 2(1), Seiten 39-52 (1973)). Die Substanz mit Peroxidase-Aktivität nimmt an der Oxidation
eines Wasserstoff-Donators mit Hydrogenperoxid nach dem folgenden Reaktionsschema teil:
Peroxidase
H-O2 + Wasserstoff-Donator »·
oxydierter Wasserstoff-Donator (OHD) + 2 H3O
Der Begriff "Wasserstoff-Donator" bezeichnet eine Verbindung, die ein Sauer stoff-Akzeptor ist, der im oxydierten Zustand mit einem Kuppler wie einem Naphthol, einem Phenol, einem Pyrazolon oder den Ν,Ν-disubctituierten Anilinen der Formel (3) kuppelt. Von diesen Was-
25· serstoff-Donatoren werden die Pyrazolone und die N,N-disubstituierten Aniline der Formel (3) besonders bevorzugt.
Die Farbindikator-Zusammensetzung zum Nachweis dos Hydrogenperoxids (im Folgenden gelegentlich einfach als
"Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis" bezeichnet) , ist eine Zusammensetzung, die zur Erzeugung einer mit Hilfe von sichtbarem, nahem UV- oder nahem IR-Licht nachweisbaren Verbindung befähigt ist, die als Ergebnis einer chemischen Wechselwirkung in Gegenwart von Hydrogenperoxid gebildet wird (im Folgenden als "Farbstoff" bezeichnet). Der Indikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis gemäß der vorliegenden Erfindung kann nicht nur eine von Hydrogenperoxid erzeugte Färbung nachweisen oder dieses quantitativ bestimmen, sondern auch dessen Vorstufen, indem eine Reagens-Zusammensetzung verwendet wird, die zur Erzeugung von Hydrogenperoxid infolge einer chemischen Wechselwirkung mit einer solchen Verbindung befähigt ist, die ihrerseits Hydrogenperoxid bilden kann, erforderlichenfalls in Kombination (im Folgenden als "Vorstufe" bezeichnet).
Beispiele für Substanzen mit Peroxidase-Aktivität sind unter anderen Peroxidase, die aus verschiedenartigen Organismen extrahiert wurde, synthetisierte Peroxidase sowie andere, aus Organismen extrahierte chemische Sub-. stanzen, die eine Aktivität zeigen, die derjenigen der Peroxidase ähnlich ist, wie sie in der JP-OS 137192/75 offenbart ist. Von diesen wird Peroxidase bevorzugt.
Als Indikator-Zusammensetzungen zum Hydrogenperoxid-Nachweis, die eine Substanz mit Peroxidase-Aktivität und eine Substanz enthalten, die zur Verursachung einer nachweisbaren Veränderung in Gegenwart von Hydrogenperoxid und der Substanz mit Peroxidase-Aktivität befähigt ist, können in der vorliegenden Erfindung Chromogene, die durch Oxidation ihrer selbst nachweisbare gefärbte Verbindungen liefern, wie Benzidin oder Phenylendiamin, die seit langem bekannt sind, 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidin, wie in der JP-OS 89491/76 (entsprechend der US-
PS 4 019 747) offenbart ist, Triarylimidazole, wie in der JP-OS 26188/78 (entsprechend der US-PS 4 019 747) offenbart ist, und ähnliche, eine Kombination aus einem Wasserstoff-Donator und einem Kuppler, die aufgrund
einer oxidativen Kupplungsreaktion zwischen beiden eine nachweisbare gefärbte Verbindung liefert, und dergleichen eingesetzt werden.
Als Wasserstoff-Donatoren, die in den Farbindikatoren enthalten sind, können 4-substituierte Antipyrine (4-
substituierte 2,3-Dimethyl-l-phenyl-3-pyrazolin-5-one), wie sie in der JP-OS 50991/74 (entsprechend der US-PS 3 983 005) offenbart wurden, sowie andere bekannte 4-substituierte Antipyrine, Ν,Ν-disubstituierte o- oder p-Phenylendiamine, wie sie in der JP-OS 137192/75
(entsprechend der US-PS 3 886 045) offenbart wurden, sowie andere bekannte Ν,Ν-disubstituierte o- oder p-Phenylendiamine, 2-Hydrazonobenzothiazoline, wie sie in der JP-OS 20471/80 offenbart wurden, und andere bekannte 2-Hydrazonobenzothiazoline, p-Halogenophenole,
wie sie in der JP-OS 148100/80 offenbart wurden, sowie andere p-Halogenophenole und Ν,Ν-disubstituierte Phenylendiamine der vorstehenden Formel (2) eingesetzt werden.
Spezielle Beispiele für einsetzbare 4-substituierte
Antipyrine sind'(in Klammern ist die CAS-Registriernummer angegeben):
4-Aminoantipyrin ' (83-07-8),
4-(Dimethylamine)antipyrin (Pyramidon) (58-15-1),
4-Ethylaminoantipyrin (15166-10-6),
4-Methylaminoantipyrin (Noramidopyrin) (519-98-2),
4-(Natriumsulfonatomethylamino)antipyrin
(Sulphamipyrine) (129-89-5) ,
4-(Natriumsulfonatomethyl)(isobutyl)aminoantipyrin
(Dibupyrone) (1046-17-9), 4-Natriumsulfonatomethyl)(methyl)aminoantipyrin
(Methampyrone) (5907-38-0) und 4-Isopropylantipyrin (Propiphenazon)(479-92-5). Als andere Verbindungen mit ähnlicher Struktur kommen 4-Amino-2,S-dimethyl-l-p-tolyl-S-pyrazolin-S-on
(56430-10-5)
und 4-Amino-l,3-diphenyl-2-methyl-3-pyrazolin-5-on (52744-73-7) in Betracht. Auch
2-Dimethylamino-5~phenyl-2-oxazolin-4-on
(Tozalinone) (1046-17-9) kann verwendet werden.
In den Fällen, in denen ein oder beide Substituenten R und R in den durch die Formel (2) dargestellten N,N-disubstituierten p-Phenylendiaminen Alkyl-Gruppen sind, können diese Alkyl-Gruppen geradkettige oder kettenverzweigte niedere Alkyl-Gruppen mit 1 bis 5 Kohlenstoff-Atomen sein; spezielle Beispiele hierfür sind eine Methyl-Gruppe, Ethyl-Gruppe, Propyl-Gruppe, Butyl-Gruppe, Pentyl-Gruppe, Isopropyl-Gruppe, Isobutyl-Gruppe, Isoamyl-Gruppe, t-Butyl-Gruppe und Neopentyl-Gruppe. Im Falle einer Substitution durch Alkoxyalkyl-Gruppen besteht die betreffende Alkoxyalkyl-Gruppe aus einer nie-5 deren Alkyl-Gruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoff-Atomen, die durch eine niedere Alkoxy-Gruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoff-Atomen substituiert ist; spezielle Beispiele hierfür sind eine Methoxymethyl-Gruppe, 2-Methoxyethyl-Gruppe, 1-Methoxyethyl-Gruppe, 3-Methoxypropyl-Gruppe, 2-Methoxypropyl-Gruppe, Ethoxypropyl-Gruppe und 2-Ethoxyethyl-Gruppe. Im Falle einer Substitution durch Hydroxyalkyl-Gruppen besteht die betreffende Hydroxyal-
kyl-Gruppe aus einer geradkettigen oder kettenverzweigten niederen Alkyl-Gruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoff-Atomen, die durch eine Hydroxy-Gruppe substituiert ist; spezielle Beispiele hierfür sind eine Hydroxymethyl-Gruppe, 2-Hydroxyethyl-Gruppe, 1-Hydroxyethyl-Gruppe, 3-Hydroxypropyl-Gruppe, 2-Hydroxypropyl-Gruppe, 4-Hydroxybutyl-Gruppe und 5-Hydroxypentyl-Gruppe. Im Falle einer Substitution durch eine Cyanoalkyl-Gruppe besteht die betreffende Cyanoalkyl-Gruppe aus einer geradket-
tigen oder kettenverzweigten niederen Alkyl-Gruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoff-Atomen, die durch eine Cyano-Gruppe substituiert ist; spezielle Beispiele hierfür sind eine Cyanomethyl-Gruppe, 2-Cyanoethyl-Gruppe, ■1-Cyanoethyl-Gruppe, 3-Cyanopropyl-Gruppe, 2-Cyanopropyl-Gruppe und
5-Cyanopentyl-Gruppe.Im Falle einer Substitution durch eine Halogenoalkyl-Gruppe besteht die betreffende HaIogenoalkyl-Gruppe aus einer geradkettigen oder kettenverzweigten niederen Alkyl-Gruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoff-Atomen, die durch ein Fluor-, Chlor-, Brom- oder
Iod-Atom als Halogen-Atom substituiert ist; spezielle Beispiele hierfür sind eine Fluoromethyl-Gruppe, ChIoromethy1-Gruppe, Bromomethyl-Gruppe, 2-Fluoroethyl-Gruppe, 1-Chloroethyl-Gruppe, 2-Chloroethyl-Gruppe, 2-Bromoethyl-Gruppe und 3-Chloropropyl-Gruppe. Im Falle einer Substitution durch eine Acylamino-Gruppe besteht die betreffende Acylamino-Gruppe aus einer geradkettigen oder kettenverzweigten niederen Alkyl-Gruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoff-Atomen, die durch eine Acetamido-Gruppe, Propionamido-Gruppe, Benzamido-Gruppe, Toluamido-Gruppe, Methansulfonamido-Gruppe, Benzolsulfonamido-Gruppe oder Toluolsulfonamido-Gruppe als Acylamino-Gruppe mit 1 bis 10 Kohlenstoff-Atomen substituiert ist; spezielle Beispiele hierfür sind eine Acetamidomethyl-Gruppe, Propionamidomethyl-Gruppe, Benzamide-
methyl-Gruppe, p-Toluamidomethyl-Gruppe, Methansulfonamidomethy1-Gruppe, Ethansulfonamidomethyl-Gruppe, Benzolsulf onamidomethyl-Gruppe , p-Toluolsulfonamidomethyl-Gruppe, 2-Acetaraidoethyl-Gruppe, 2-Propionamidoethyl-Gruppe, 2-Benzamidoethyl-Gruppe, 2-p-Toluamidoethyl-Gruppe, 2-Methansulfonamidoethyl-Gruppe, 2-(Ethansul~ fonamido)ethyl-Gruppe, 2-(Benzolsulfonamido)ethyl-Gruppe, 2-(p-Toluolsulfonamido)ethyl-Gruppe, 3-Acetamidopropy.l-Gruppe und 3-Benzamidopropyl-Gruppe.
1 2
In dem Fall, in dem die Substituenten R und R in dem durch die Formel (1) dargestellten N,N-disubstituierten Anilin eine Alkyl-Gruppe oder Alkoxy-Gruppe bezeichnen, sind spezielle Beispiele dafür die gleichen Gruppen, die als spezielle Beispiele für Alkyl- bzw. Alkoxy-Gruppen bei den Substituenten R und R des durch die vorerwähnte Formel (2) dargestellten N,N-disubstituierten p-Phenylendiamins angeführt wurden.
3 4 In dem Fall, in dem die Substituenten R und R eine Alkyl-Gruppe, Alkoxyalkyl-Gruppe, Hydroxyalkyl-Gruppe, Cyanoalkyl-Gruppe, Halogenoalkyl-Gruppe oder Acylaminoalkyl-Gruppe bezeichnen, sind spezielle Beispiele dafür die gleichen Gruppen, die als spezielle Beispiele für Alkyl-, Alkoxyalkyl-, Hydroxyalkyl-, Cyanoalkyl-, HaIogenoalkyl- bzw. Acylaminoalkyl-Gruppen bei den vorgenannten Substituenten R und R angeführt wurden. In
3 4
dem Fall, in dem R und R eine Aminoalkyl-Gruppe bezeichnen, besteht die Aminoalkyl-Gruppe aus einer geradkettigen oder kettenverzweigten niederen Alkyl-Gruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoff-Atomen, die durch eine Amino-Gruppe substituiert ist; spezielle Beispiele hierfür sind eine Aminomethyl-Gruppe, 2-Aminoethyl-Gruppe, 1-Aminoethyl-Gruppe, 3-Aminopropyl-Gruppe und 2-Aminopropyl-Gruppe.
1 2
Als Substituenten R und R bevorzugt werden ein Wasserstoff-Atom, eine Alkyl-Gruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoff-Atomen, eine Alkoxy-Gruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoff-Atomen; spezielle Beispiele für die Alkyl-Gruppen sind Methyl, Ethyl und Propyl, und spezielle Beispiele für Alkoxy-Gruppen sind Methoxy und Ethoxy.
3 4
Als Substituenten R und R bevorzugt werden eine Alkyl-Gruppe, eine Alkoxyalkyl-Gruppe, eine Hydroxyalkyl-Gruppe, eine Cyanoalkyl-Gruppe und eine Halogenoalkyl-
Gruppe; zu den speziellen Beispielen hierfür zählen Methyl, Ethyl, Propyl, Methoxymethyl, 2-Methoxyethy1, 3-Methoxypropyl, Ethoxymethyl, 2-Ethoxyethyl, Hydroxymethyl, 1-Hydroxyethyl, 2-Hydroxyethyl, 2-Hydroxypropyl, 3-Hydroxypropyl, Cyanomethyl, 2-Cyanoethyl, ChIo-
romethyl, 1-Chloroethyl, 2-Chloroethyl, 2-Chloropropyl, 3-Chloropropyl, Bromomethyl, 2-Bromoethyl, Fluoromethyl und 2-Fluoroethyl.
Spezielle Beispiele für die durch die Formel (2) dargestellten "Ν,Ν-disubstituierten Aniline sind die folgenden Verbindungen:
N,N-Dimethylanilin,
N,N-Diethylanilin,
N-Methy1-N-hydroxymethylanilin,
N-Methyl-N-(2-hydroxyethyl)anilin,
N-Ethyl-N-(2-hydroxyethyl)anilin,
N-Methyl-N-(2-methoxyethyl)anilin,
N-Ethyl-N-(2-methoxyethyl)anilin,
N-Ethyl-N-(2-ethoxyethyl)anilin,
N,N-Dimethy1-m-toluidin,
N,N-Diethy1-m-toluidin,
Ν,Ν-Bis(hydroxymethyl)-m-toluidin,
Ν,Ν-Bis(2-hydroxyethyl)-m-toluidin,
Ν,Ν-Bis(2-hydroxypropy1)-m-toluidin, Ν,Ν-Bis(3-hydroxypropyl)-m-toluidin, N-Methyl-N-hydroxymethy1-m-toluidin, N-Ethyl-N-(2-hydroxyethyl)-m-toluidin, N-Ethyl-N-hydroxymethyl-m-toluidin, N-Me thy1-N-me thoxyme thy1-m-toluidin, N-Ethyl-N-methoxymethyl-m-toluidin, N-Ethyl-N-(2-methoxyethyl)-m-toluidin, N-Cyanomethy1-N-hydroxymethy1-m-toluidin, N-Methyl-N-(2-chloroethyl)-m-toluidin, N-Ethyl-N-(2-chloroethyl)-m-toluidin, N-(2-Cyanoethyl)-N-(2-hydroxyethyl)-m-toluidin, N,N-Dimethy1-m-anisidin,
Ν,Ν-Diethyl-m-anisidin.
Von diesen Verbindungen sind bevorzugte Ν,Ν-disubstituierte Aniline die folgenden:
Ν,Ν-Bis(2-hydroxyethyl)-m-toluidin, N-Ethyl-N-(2-hydroxyethyl)-m-toluidin, N-(2-Cyanoethyl)-N-(2-hydroxyethyl)-m-toluidin, N,N-Dimethy1-m-anisidin,
N,N-Diethy1-m-anisidin.
Kuppler des Phenol-, Naphthyl- und 5-Pyrazolon-Typs, die als Kuppler in der vorliegenden Erfindung verwendet werden, sind in der photographischen Technik wohlbekannt und werden beispielsweise in T.H. James, "The Theory of the Photographic Process", 4. Aufl., Kapitel 12, Seiten 335-372, überschrieben "Principles and Chemistry of Color Photography", erschienen bei Macmillan Publishing Co., Inc., New York (1977) beschrieben.
Spezielle Beispiele für solche Kuppler sind nachstehend aufgeführt:
Kuppler des Phenol- und Naphthol-Typs:
Phenol,
2,4-Dichlorophenol, 2,6-Dichlorophenol, p-Hydroxybenzoesäure, m-Hydroxybenzoesäure, o-Bromophenol,
4,6-Dichloro-o-kresol, 2,4-Dibromophenol, N-Octyl-4-methoxysalicylamid, 4-Acetamino-N-hydroxyethylsalicylamid, C3(-Naphthol,
ß-Naphthol,
1,7-Dihydroxynaphthalin, Ν,Ν-Dimethyl-l-hydroxynaphthamid, N-Propyl-l-hydroxynaphthamid, l-Naphthol-2-sulfonsäure, 1,8-Dihydroxynaphtalin-3,6-disulfonsäure, l-Naphthol-3-sulfonsäure, l-Naphthol-8-sulfonsäure, 2,3-Dihydroxynaphthalin-6-sulfonsäure, p-Hydroxydiphenyl-1,5-dihydroxynaphtalin, 3,5-Dihydroxynaphthoesäure etc..
Kuppler des 5-Pyrazolon-Typs;
3-Methyl-l-phenyl-5-pyrazolon, 3-Methyl-l-(p-sulfophenylj-5-pyrazolon, 1,3-Diphenyl-5-pyrazolon, 3-Acetamino-l-(2',4",6·-trichlorophenyl)-5-pyrazo-
lon,
3-Anilino-l-(p-sulfophenyl)-5-pyrazolon.
Der Mechanismus der vorliegenden Erfindung wird zwar noch nicht eindeutig verstanden, jedoch folgendermaßen angenommen:
Es ist bekannt, daß die Oxidationsprodukte bestimmter Verbindungen, insbesondere die Produkte einer Einelektronen-Oxidation stickstoffhaltiger Verbindungen oder dergleichen, Peroxidase inaktivieren; insbesondere besitzt ein Oxidationsprodukt eines Wasserstoff-Donators eine ausgeprägte Inaktivierungswxrkung auf Peroxidase.
So wurden die verschiedenartigsten Antioxidationsmittel Wasserstoff-Donatoren zugesetzt, um zu versuchen, die Oxidation des betreffenden Wasserstoff-Donators zu verhindern, und es wurde gefunden, daß 1,2-Dihydroxynaphthalin- und Naphthol-Derivaten die Tendenz eigen ist, Peroxidase nicht zu inaktivieren und gleichzeitig auch die Oxidation des Wasserstoff-Donators zu verhindern, und daß unter ihnen Pyrogallol-Derivate eine ausgeprägte Wirkung zeigen.
Unter den Pyrogallol-Derivaten zeigen diejenigen Pyrogallol-Verbindungen, die mit Wasserstoff-Donatoren nicht oxidativ kuppeln, d.h. Pyrogallol-Verbindungen, die einen nicht freisetzbaren Substituenten in ihrer 5-Stellung tragen, eine außerordentlich ausgeprägte Peroxidase-stabilisierende Wirkung.
Es wird angenommen, daß die Wirkung der Peroxidase-Stabilisierung, die durch in der Peroxidase-haltigen Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis enthaltene Pyrogallol-Derivate erzielt wird, auf der Verhinderung der Bildung des Oxidationproduktes - das die Peroxidase inaktiviert - beruht, das infolge der Wechselwirkung zwischen Sauerstoff und Luftfeuchtig-
keit, Peroxidase., einem Wasserstoff-Donator und der in der Zusammensetzung enthaltenen Restfeuchtigkeit und dergleichen während der Aufbewahrung der Zusammensetzung gebildet wird. Einzelheiten des Mechanismus, aufgrund dessen Pyrogallol-Derivate eine derart spezifische Wirkung der Verhinderung einer Oxidation zeigen, sind nicht bekannt, jedoch wird vermutet, daß eine dahingehende Spezifität gegeben ist, daß das Oxidationsprodukt des Pyrogallol-Derivats die Peroxidase nicht
. inaktiviert.
Die Pyrogallol-Derivate, die gemäß der vorliegenden Erfindung eingesetzt werden können, stören die kolorimetrische Bestimmung nicht und werden durch die im Vorstehenden angegebene Formel (1) bezeichnet. In den Fällen, in denen der Substituent Q eine Alkyl-Gruppe ist, ist die Alkyl-Gruppe geradkettig oder kettenverzweigt und enthält 1 bis 20 Kohlenstoff-Atome; spezielle Beispiele hierfür sind eine Methyl-Gruppe, Ethyl-Gruppe, Propyl-Gruppe, Buty1-Gruppe, Pentyl-Gruppe, Hexyl-Gruppe, Octyl-Gruppe, Nonyl-Gruppe, Decyl-Gruppe, Dodecyl-Gruppe, Octadecyl-Gruppe, Eicosyl-Gruppe, Isopropyl-Gruppe, Isobutyl-Gruppe, Isoamyl-Gruppe, 4-Methylpentyl-Gruppe, 6-Methylheptyl-Gruppe etc..
In den Fällen, in denen der Substituent Q eine substituierte Alkyl-Gruppe darstellt, enthält die Alkyl-Gruppe eine gerade oder verzweigte Kette mit 1 bis 5 Kohlenstoff-Atomen, die mindestens einen Substituenten, bestehend aus Hydroxyl-Gruppen, Cy'ano-Gruppen und/oder Halogen-Atomen (Fluor-, Chlor-, Brom- oder Iod-Atom)
trägt. Spezielle Beispiele für die substituierten Alkyl-Gruppen sind die Gruppen Hydroxymethyl, 2-Hydroxyethyl, 1-Hydroxyethyl, 3-Hydroxypropyl, 2-Hydroxypropyl, 4-Hydroxybutyl, 5-Hydroxypentyl, Cyanomethyl,
2-Cyanoethyl, 1-Cyanoethyl, 3-Cyanopropyl, 5-Cyanopentyl, Fluoromethyl, Chloromethyl, Bromomethyl, 2-Fluoroethyl, 1-Chloroethyl, 2-Chloroethyl, 2-Bromoethyl, 3-Chloropropyl etc..
Die durch den Substituenten Q dargestellte Aryl-Gruppe enthält vorzugsweise 6 bis 14 Kohlenstoff-Atome. Bevorzugte Beispiele für solche ArylrGruppen sind die Gruppen Phenyl, 1-Naphthyl, 2-Naphthyl, 2-Indenyl, 4-Biphenyl etc.
Die durch den Substituenten Q dargestellte substituierte Aryl-Gruppe enthält vorzugsweise 6 bis 14 Kohlenstoff-Atome als Aryl-Struktureinheit. Bevorzugte Beispiele für solche substituierten Aryl-Gruppen sind die vorgenannten Aryl-Gruppen, die einen Substituenten wie etwa ein Halogen-Atom (Fluor-, Chlor-, Brom- oder Iod-Atom), eine Cyano-Gruppe, Nitro-Gruppe oder eine geradkettige oder kettenverzweigte Alkyl-Gruppe mit 1 bis 5 Kohlenstoff-Atomen tragen. Spezielle Beispiele für solche substituierten Aryl-Gruppen sind die Gruppen p-Fluorophenyl, p-Chlorophenyl, m-Bromophenyl, p-Cyanophenyl, m-Nitrophenyl, p-Tolyl, m-Tolyl, p-Ethylphenyl, m-Cumenyl, Mesityl, 4-Chloro-l-naphthyl, 5-Methylnaphthyl etc..
Die durch den Substituenten Q dargestellte Aralkyl-Gruppe enthält vorzugsweise 7 bis 20 Kohlenstoff-Atome. Spezielle Beispiele für solche Aralkyl-Gruppen sind die Gruppen Benzyl, Phenethyl, 1-Naphthylmethyl, 2-Naphthylmethyl etc..
In den Fällen, in denen der Substituent Q die Gruppe
2 2
-COOQ darstellt, worin Q eine Alkyl-Gruppe, substituierte Alkyl-Gruppe, Aryl-Gruppe, substituierte Aryl-
Gruppe oder eine Aralkyl-Gruppe bezeichnet, sind bevorzugte Beispiele für solche Gruppen -COOO** die gleichen wie auch in den Fällen, in denen der Substituent Q
eine Alkyl-Gruppe, substituierte Alkyl-Gruppe, Aryl-Gruppe, substituierte Aryl-Gruppe bzw. eine Aralkyl-Gruppe ist.
2 Bevorzugte Beispiele für einen Substituenten -COOQ
sind die Gruppen Carboxyl, Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, Propoxycarbonyl, Butoxycarbonyl, Pentyloxycar-
bonyl, Octyloxycarbonyl, Decyloxycarbonyl, Octadecyloxycarbonyl, Isopropoxycarbonyl, Isobutoxycarbonyl, Isoamyloxycarbonyl, 2-Chloroethoxycarbonyl, 3-Chloropropoxycarbonyl, Phenoxycarbonyl, p-Tolyloxycarbonyl, Benzyloxycarbonyl, Phenethyloxycarbonyl, Cyano, Nitro,
Methyl, Ethyl, Propyl, Butyl, Pentyl, Isopropyl, Isobutyl und Isoamyl.
Bevorzugte Beispiele für die Pyrogallol-Derivate. sind Gallussäure, Methylgallat, Ethylgallat, Propylgallat, Isopropylgallat, Pentylgallat, Isoamylgallat, Octylgallat, Stearylgallat, ß-Chloroethylgallat, Phenylgallat, p-Tolylgallat, Benzylgallat, Phenethylgallat, 5-Cyanopyrogallol, 5-Nitropyrogallol, 5-Methylpyrogallol, 5-Ethylpyrogallol, 5-Propy!pyrogallol, 5-Buty!pyrogallol, 5-Pentylpyrogallol, 5-Isopropylpyrogallol, 5-Isobutyl-
pyrogallol, 5-Isoamy!pyrogallol etc..
Die Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis oder der Film für die quantitative Analyse gemäß der vorliegenden Erfindung kann weiterhin ein Beizmittel enthalten. Als solche Beizmittel können kationische Polymerisate, wie sie in den JP-OSen 40191/76 (entsprechend der US-PS 4 042 335), 89796/78 (entspre-
chend der US-PS 4 069 017) und 131089/78 (entsprechend der US-PS 4 144 306) sowie in "The Theory of the Photographic Process", vgl. vorstehend, Seiten 366-372, beschrieben sind, sowie auch anionische Polymerisate, wie sie im Folgenden beschrieben werden, eingesetzt werden. Wenn der in der vorliegenden Erfindung verwendete Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis aufgrund der chemischen Wechselwirkung in Gegenwart von Hydrogenperoxid .einen zur Bildung eines Anions befähigten Farbstoff erzeugt, werden kationische Verbindungen wie etwa kationische Polymerisate verwendet; es erübrigt sich festzustellen, daß bei Bildung kationischer Farbstoffe anionische Verbindungen wie etwa anionische Polymerisate verwendet werden. Es erübrigt sich weiter die Feststellung, daß Beizmittel eingesetzt werden, die nicht absorbieren, d.h. die kolorimetrische Analyse nicht stören. Im folgenden wird vorliegende Erfindung hinsichtlich weiterer Einzelheiten in bezug auf solche Fälle beschrieben, in denen ein Beizmittel aus einem anionischen Polymerisat oder ein Beizmittel aus einem kationischen Polymerisat als Beizmittel eingesetzt werden, wobei der Ausdruck "Beizpolymerisat" hier als Sammelbezeichnung für kationische und anionische Polymerisate verwendet wird.
Das in der vorliegenden Erfindung eingesetzte anionische Polymerisat ist ein Polymerisat, das die im Vorstehenden definierte anionische Gruppierung in dem Polymerengerüst selbst oder in der organischen Gruppe (Org in der folgenden Formel (AP)), die an das Polymerengerüst gebunden ist, enthält. Neben den üblichen anionischen Polymerisaten können auch Kationenaustauschharze des Säure-Typs als anionische Polymerisate eingesetzt werden; vorzugsweise sind die üblichen anio-
nischen Polymerisate oder Kationenaustauschharze wasserlösliche Polymere oder solche Polymere, die mit Wasser quellbar sind. Die anionischen Polymerisate können einzeln oder in Form einer Kombination aus zweien oder mehreren verwendet werden. Es können sowohl anionische Polymerisate mit der Fähigkeit zur Filmbildung als auch solche ohne diese Fähigkeit eingesetzt werden, jedoch wird bevorzugt, Polymerisate ohne die Fähigkeit zur Filmbildung in Kombination mit als Bindemitteln wirkenden Polymerisaten einzusetzen, die die · Fähigkeit zur Filmbildung besitzen.
Zu speziellen Beispielen für derartige anionischen Polymerisate zählen Polymerisate oder Copolymerisate mit einer Struktur, an der eine Carboxylat-Gruppe (-COO ), eine Sulfonat-Gruppe (-SO, ) oder eine Phosphonat-Grup-
2- ■ '
pe (-PO,' ) als anionische Atomgruppierung gebunden ist, oder aber die genannte anionische Atomgruppierung ist zusammen mit einem Gegen-Kation an sämtliche der sich wiederholenden Struktureinheiten (im folgenden als "CRU" bezeichnet) der hochmolekularen Kette oder einen Teil der CRU gebunden (wobei die Anordnung eine geordnete oder zufällige sein kann). Gegen-Kationen sind Alkalimetall-Ionen (z.B. Li , Na , K , Cs ), Erdalkali-
2+ 2+ 2+ 2+ metall-Ionen (z.B. Mg ,Ca ,Sr ,Ba ) und Ammonium-Ionen (NH4 ).
Diese anionischen Polymerisate werden durch die Formel (AP) dargestellt
Org - CB - Z~ A+ (AP),
in der Org eine organische Gruppe bezeichnet, die einen Teil des Polymerengerüsts bildet, CB für eine (oder
mehrere) chemische Bindung(en) oder eine chemische Gruppe steht, die Z mit Org verbindet, Z eine Carboxylat-Gruppe (-COO ), eine Sulfonat-Gruppe (-SO, ) oder eine
2- +
Phosphonat-Gruppe (-PO, ) bezeichnet und A ein Gegen-Kation wie oben erwähnt ist.
Zu speziellen Beispielen für die anionischen Polymerisate, die die vorgenannten CRU enthalten, zählen die folgenden:
Alkali-Hydrolysate eines Methylvinylether-Maleinsäureanhydrid-Copolymerisats (wobei das Copolymerisat Dilithium-, Dinatrium oder Dikalium-ethylen-1,2-dicarboxylat als CRU enthält);
Alkalimetall- oder Erdalkalimetallsalz einer Polyacrylsäure;
Alkalimetall- oder Erdalkalimetallsalz eines PoIy-N-(ß-sulfo-o^oi-dimethylethyl) äcrylamids;
Alkalimetall- oder Erdalkalimetallsalz einer PoIystyrol-p-sulfonsäure;
Alkalimetall- oder Erdalkalimetallsalz eines Copolymerisats aus Styrol-p-sulfonsäure und einem hydrophilen Vinyl-Monomeren; Beispiele für solche hydrophilen Vinyl-Monomeren sind:
Acrylsäure, Acrylsäure-alkylester (z.B. Methacrylat), Acrylsäure-hydroxyalkylester (z.B. ß-Hydroxyethylacrylat), Acrylamide (z.B. Acryl
amid, N-Methylacrylamid, N-Isopropylacrylamid, N- (ß-Sulfonato-oi,o(-dimethylethyl) acrylamid, N-Ethy 1-N-isopropyl-acrylamid, Acrylmorp'holid ( H2C=CH-CO-N v / ) 0 ), N-Acryloy!piperidin,
- 37 -
N-Acryloylpiperadin, N-Acryloylpiperazin), Methacrylsäure-hydroxyalkylester (z.B. ß-Hydroxyethyl-methacrylat), Methacrylamide (z.B. Methacrylamid, Methacrylmorpholid);
Alkalimetallsalze einer Polyvinylphosphonsäure der Formel
CRU,- CH - CH2
O = P - (P
in der M Lithium, Natrium oder Kalium ist;
Carboxymethylcellulose;
Carboxyethylcellulose;
Alginsäure und ihre Alkalisalze.
Typische Beispiele für bevorzugte anionische Polymerisate sind die folgenden:
Kalium-Polystyrol-p-sulfonat;
Kalium-Styrol-p-sulfonat-Acrylmorpholid-Copoly-
merisat;
Kalium-Styrol-p-sulfonat-Acrylamid-Copolymerisat;
Kalium-Styrol-p-sulfonat-N-Isopropylacrylamid-Copolymerisat
Kalium-Styrol-p-sulfonat-N-Ethyl-N-isopropylacrylamid-Copolymerisat;
Kalium-Poly-N- (ß-sulfonato-oi,o(-dimethylethyl) acrylamid,
Kalium-N- (ß-Sulfonato-o^ct-dimethylethyl) acrylamidß-Hydroxyethylacrylat-Copolymerisat;
Kalium-N- (ß-Sulfonato-o^oC-dimethylethyl) acrylamid-N-Ethylacrylamid-Copolymerisat.
Von diesen anionischen Polymerisaten werden anionische Polymere des Polystyrol-Typs (bei denen in der Formel (AP) CB eine Phenylen-Gruppe darstellt) besonders bevorzugt.
Das anionische Polymerisat kann in eine Schicht, die den Farbindikator zum Nachweis des Hydrogenperoxids enthält, eingearbeitet werden, oder eine Farbstoff-Fixierschicht, die das anionische Polymerisat - jedoch keinen anderen Reagens-Bestandteil - enthält, kann auch in Form einer getrennten Schicht von derjenigen Schicht, die den Farbindikator zum Nachweis des Hydrogenperoxids enthält, eingesetzt werden. Weiterhin kann das anionische Polymerisat auch sowohl in eine den Farbindikator zum Nachweis des Hydrogenperoxids enthaltende Schicht als auch in die Farbstoff-Fixierschicht eingearbeitet werden. Das anionische Polymerisat kann auch, falls erwünscht oder erforderlich, als eine Kombination zweier oder mehrerer Schichten eingesetzt werden, obwohl nur eine solche im allgemeinen ausreichend ist.
In dem Falle, in dem das anionische Polymerisat sowohl in die den Farbindikator zum Nachweis des Hydrogenperoxidfi enthaltende Schicht als auch in die Farbstoff-Fixierschicht eingearbeitet ist, können die betreffenden anionischen Polymerisate gleich oder voneinander verschieden sein. Weiterhin kann das anionische Polymerisat, falls dies erwünscht oder nötig ist, auch in
cine? andere Schicht als eine den Farbindikator zum Nachweis des Hydrogenperoxids enthaltende Schicht oder eine Farbstoff-Fixierschicht eingearbeitet werden.
Manche oder sämtliche der den Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis und das Beizpolymerisat enthaltenden Reagensschichten, eine den Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis enthaltende Farbreaktions-Schicht und die das Beizpolymerisat enthaltende Farbstoff-Fixierschicht des Films für die quantitative Analyse
gemäß der vorliegenden Erfindung können ein Bindemittel-Polymerisat enthalten. Als Bindemittol-PolymorinaLo können bekannte hydrophile Polymerisate wie Gelatine, Casein, Agarose, Stärke, Polyvinylalkohol, Polyvinyl-■ pyrrolidon, Polyacrylamid, Polyethylenglycol etc. ein-
gesetzt werden, und übliche Härter (Härtungsmittel oder Vernetzungsmittel) können ebenfalls zusammen mit diesen hydrophilen Polymeren verwendet werden.
Die Reagensschicht, die Farbbildungsreaktions-Schicht oder die Farbstoff-Fixierschicht werden entweder durch
0 Dispergieren oder Auflösen einer Mischung des Farbindikators zum Hydrogenperoxid-Nachweis und des Beizpolymerisats bzw. des Farbindikators zum Hydrogenperoxid-Nachweis und des anionischen Polymerisats jeweils für sich in einem Bindemittelpolymerisat und anschließendes Beschichten eines Trägers mit der Dispersion oder Lösung mittels eines, üblichen Beschichtungsverfahrens und nachfolgende Trocknung hergestellt, oder aber durch Imprägnieren der Oberfläche oder des Inneren eines porösen Trägers mit der betreffenden Dispersion oder Lö-
sung. Wenn die Reagensschicht, Farbbildungsreaktions-Schicht oder Farbstoff-Fixierschicht durch Beschichten auf einen Träger aufgetragen wird, liegt die Schicht-
dicke joder Schicht im Bereich von 1 μπα bis 100 um, vorzugsweise von 2 um bis 50 μπι. Wenn die Farbstoff-Fixierschicht nur aus dem Beizpolymerisat, frei von einem Bindemittel-Polymerisat, besteht, liegt die Schichtdicke im Bereich von 1 μΐη bis 50 μΐη, vorzugsweise von 3 μΐη bis 30 μΐη.
Die vorliegende Erfindung wird im Folgenden unter Bezug auf die beigefügten Zeichnungen näher erläutert, die Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung darstellen.
Fig. 1 zeigt einen Film für die quantitative Analyse, der aus einem mit dem Reagens imprägnierten Träger 23 besteht, der durch Imprägnieren der Oberfläche und des Inneren eines selbsttragenden porösen Trägers mit einer den Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis enthaltenden Reagens-Zusammensetzung erhalten wurde.
Als selbsttragende poröse Träger können bekannte film-, folien- oder blattartige Träger wie Filterpapier, gewöhnliches Papier, Vliestuch, Membranfilter, poröse Kunststoffolie etc. eingesetzt werden. Wenn der Film für die quantitative Analyse mit einem Diapositiv-Rahmen eingefaßt werden soll, wie dies in den JP-OSen 156079/79 und 160296/79, der JP-GBM-Anmeldung 41787/80 und der JP-Patentanmeldung 131800/80 etc. offenbart wurde, können neben den oben genannten Materialien auch biegsame Materialien wie Textilstoffe als poröse Träger verwendet werden. Ein derartiger Film für die quantitative Analyse kann in der Weise verwendet werden, daß er an einem film-, folien- oder blattartigen Träger unter Verwendung eines Heißschnielzklebers oder eines Klebebandes haftend befestigt wird, und die Schichtstruktur
ist in diesem Falle ähnlich derjenigen eines in Fig. 2 dargestellten Films für die quantitative Analyse, wie er im Folgenden beschrieben wird.
Fig. 2 zeigt einen Film für die quantitative Analyse
mit einer solchen Struktur, bei der die Reagensschicht 20, die den Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis und das Beizpolymerisat enthält, auf einem film-, folien- oder blattartigen Träger 10 vorliegt. Der Träger 10 kann entweder durchsichtig oder lichtundurchlässig
sein.
Fig. 3 zeigt einen Film für die quantitative Analyse mit einer solchen Struktur, bei der die Farbstoff-Fixierschicht 21, die das Beizpolymerisat enthält, und die Farbbildungsreaktions-Schicht 22, die den Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis enthält, in dieser Reihenfolge auf einen film-, folien- oder blattartigen Träger aufgebracht vorliegen. Der Träger kann entweder durchsichtig oder lichtundurchlässig sein, ist jedoch vorzugsweise ein durchsichtiger Träger.
Bei den Filmen für die quantitative Analyse, wie sie in den Fig. 4 bis 8 dargestellt sind, werden eine Reagensschicht, eine Farbbildungsreaktions-Schicht oder eine Farbstoff-Fixierschicht zwischen einem Träger und einer porösen Schicht aufgebracht, und die poröse Schicht
wird in fließfähige Berührung (die Definition dieses Begriffs wird in der im Vorstehenden erwähnten JP-OS 40191/76, der EPC-Anmeldung 0013156 etc. gegeben, d.h. eine Berührungsform, bei der die Substanzen die Eigenschaft, nach Art von Fluiden, ob flüssig oder gasför-
mig, besitzen, von jeweils einer Schicht in die andere überzutreten) mit der Reagensschicht, der Farbbildungs-
Schicht, der Farbstoff-Fixierschicht gebracht; vorzugsweise besitzt der Analysenfilm eine solche Struktur, daß diese Schichten in Form einer Einheit oder integriert aneinander haften.
Die poröse Schicht wird in Form einer porösen Spreitungpsohicht (porous spreading layer) oder einer porösen Schicht definierter Fläche (definite area porous layer) eingesetzt, die die nachstehende Funktion besitzen: Wenn eine flüssige Probe aufgetüpfelt wird, wird diese Flüssigkeitsprobe einer darunter liegenden Schicht zugeführt, und die Funktion besteht vorzugsweise darin, daß die Menge der Flüssigkeitsprobe pro Flächeneinheit annähernd konstant gehalten wird (im Falle der porösen Spreitungsschicht), oder daß sie bis auf die gleiche Fläche ihrer Form ausgebreitet wird und dadurch die Menge der Flüssigkeitsprobe pro Flächeneinheit annähernd konstant gehalten wird (im Falle der porösen Schicht mit definierter Fläche), wobei in beiden Fällen die Flüssigkeitsprobe einer darunter liegen-
l!0 den Schicht zugeführt wird. Im einzelnen wird die Fläche der porösen Schicht so festgelegt, daß die Menge einer
- in der porösen Schicht gehaltenen Flüssigkeitsprobe durch die definierte Fläche festgelegt wird, und die auf diese Weise festgelegte Menge der Flüssigkeitsprobe wird, in der gleichen Menge und auf der gleichen Fläche wie in der porösen Schicht, auf die darunter befindliche Schicht (gewöhnlich eines Reagensschicht) übertragen, da eine mögliche Ausdehnung der porösen Schicht infolge des Gehalts der Flüssigkeitsprobe in Richtung ihrer Breite, im Vergleich zu ihrer Dicke, vernachlässigbar ist.
Es genügt, wenn die poröse Schicht Leerräume besitzt, um den Transport der Flüssigkeitsprobe zu ermöglichen, jedoch wird im allgemeinen bevorzugt, daß das Leerraum-Vo.l union der porösen Schicht in einem Boro ich von etw.i
30 % bis etwa 85 % liegt. Das Leerraum-Volumen kann mittels einer von Chalkley, Journal of the National Cancer Institute Α., S. 47 (1943) , beschriebenen Arbeitsweise berechnet werden und durch direkte Wägung und Bestimmung des Verhältnisses des tatsächlichen Gewichts der betreffenden Struktur und des Gewichts eines gleichen Volumens des kompakten festen Stoffes.
Fig. 4 zeigt einen Film für die quantitative Analyse mit einer Struktur, die aus einem film-, folien- oder blattartigen Träger 10 besteht, auf den, in dieser Reihenfolge, die den Farbindikator zum Hydrögenperoxid-Nachweis und das Beizpolymerisat enthaltende Reagensschicht 20 und die poröse Spreitungsschicht 31 aufgebracht sind.
Fig. 5 zeigt einen Film für die quantitative Analyse,
der aus einem film-, folien- oder blattartigen Träger 10 besteht, auf den, in dieser Reihenfolge, die das Beizpolymerisat enthaltende Farbstoff-Fixierschicht 21, die den Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis enthaltende Farbbildungsreaktions-Schicht 22, eine lichtreflektierende Schicht 40 und die poröse Spreitungsschicht 31 aufgebracht sind.
Als poröse Spreitungsschicht des in Fig. 4 oder Fig. 5 dargestellten Films für die quantitative Analyse können verschiedenartig aufgebaute poröse Schichten Verwendung 0 finden, so eine poröse Schicht, in der in einem als Bindemittel wirkenden Polymerisat feinteilige poröse
Pulver wie allgemein sogenannte "Trübpolymerisate" (blush polymers, Membranfilter) , wie sie in der JP-OS 53888/74 (entsprechend der US-PS 3 992 158) offenbart sind, Diatomeenerde, mikrokristalline Stoffe (z.B. mikrokristalline Cellulose wie "Avicel", Handelsbezeichnung der FMC Corporation) dispergiert sind, poröse Aggregate, die dadurch gebildet werden, daß man kleine kiHjo I förnii.go Perlon aus Glas oder Polymeren dazu bringt, in Punkt-zu-Punkt-Berührung aneinander zu haften, eine nicht-faserförmige isotrope poröse Schicht wie eine aggregierte dreidimensionale Teilchen-Gitterstruktur, die dadurch gebildet wird, daß man kleine kugelförmige Teilchen aus' in Wasser nicht-quellbaren organischen Polymerisaten unter Verwendung eines wasserunlöslichen Klebstoffs dazu bringt, in Punkt-zuPunkt-Berührung aneinander zu haften etc., wie sie in der JP-OS 90589/80 (US-PS 4 258 001) offenbart wurde, eine faserförmige anisotrope Schicht aus hydrophil gemachten Textilstoffen, wie sie in der JP-OS 164356/80 (US-PS 4 292 272) offenbart wurde, Textilstoffe, die auf" physik al ir. c hem Wege hydrophil gemacht wurden (z.B. durch Glimmentladung, Plasma-Behandlung, Corona-Entladung, Ultraviolett-Bestrahlung, Flammenbehandlung etc., wie sie in der JP-OS 140532/80 offenbart wurden, FiI-5 terpapier etc..
Das Aufbringen einer nicht-faserförmigen isotropen porösen Schicht als poröse Spreitungsschicht auf die Reagensschicht 20 oder die lichtreflektierende Schicht 40 kann mittels einer Arbeitsweise erfolgen, wie sie in den oben erwähnten JP-OSen 53888/74 (entsprechend der US-PS 3 992 158) und 90589/80 (entsprechend der US-PS 4 258 001) etc. beschrieben wurde, oder das Aufbringen der faserförmigen anisotropen porösen Spreitungsschicht
auf die Reagensschicht 20 oder die lichtreflektierende Schicht 40 kann mittels einer Arbeitsweise erfolgen, wie sie in der oben erwähnten JP-OS 164356/80 und der genannten JP-Patentanmeldung
140532/80 beschrieben wurde.
Die poröse Schicht mit definiert or Flüche k.inn unter Verwendung von Materialien (z.B. Textilstoffen, Papier, Membranfiltern) und mittels der Arbeitsweise hergestellt werden, die für die poröse Schicht in der JP-
GBM-Anmeldung 120299/80 offenbart wurden. Als Materialien für die poröse Schicht mit definierter Fläche können die gleichen Materialien wie für die poröse Spreitungsschicht verwendet werden, und darüber hinaus kann jedes Material verwendet werden, dessen Inneres porös
ist und eine Flüssigkeit wie etwa Wasser zurückhalten kann und dessen Poren sich durchgehend von der einen Hauptoberfläche zu der anderen Hauptoberfläche hin erstrecken. Das Aufbringen der porösen Schicht mit definierter Fläche auf eine Reagensschicht, eine lichtre-
flektierende Schicht oder dergleichen kann mittels des Verfahrens erfolgen, das in der JP-GBM-Anmeldung 120299/80 offenbart wurde, oder mittels des oben beschriebenen Verfahrens zum Aufbringen der porösen Spreitungsschicht.
Als licht-reflektierende Schicht 40 (Dicke 2 bis 15 um) können verschiedene Schichten eingesetzt werden, so etwa eine Schicht, in der in einem hydrophilen Bindemittel-Polymerisat ein oder mehrere weiße Pigmente wie feinteiliges Titandioxid-Pulver, feinteiliges Barium-
sulfat-Pulver oder dergleichen dispergiert sind, wie sie in den JP-OSen 53888/74 (entsprechend der US-Pi'. ί <)9 2 158), 40191/76, 164356/80 (entsprechend der US-[1S
4 292 272) etc. offenbart wurde, eine Trübpolymerisat-Schicht (Membranfilter) , in der ein oder mehrere weiße Pigmente wie feinteiliges Titandioxid, feinteiliges Bariumsu]fat oder dergleichen dispergiert sind, wie sie in dor JP-OS 53888/74 (entsprechend der US-PS 3 992 158)· etc. offenbart wurde, eine Trübpolymerisat-Schicht, wie sie in der JP-OS 53888/74 (entsprechend der US-PS 3 992 158) etc. offenbart wurde, eine wasserdurchlässige, aus einer porösen Metallschicht bestehende Schicht, wie sie in der JP-OS 26428/80 offenbart wurde, oder eine wasserdurchlässige, ein oder mehrere Metallpulver enthaltende Schicht, wie sie in der JP-OS 26429/80 . etc. offenbart wurde; die Arbeitsweisen zur Herstellung dieser Schichten können den Verfahren entsprechen, die in den vorgenannten Veröffentlichungen beschrieben wurden.
Fig. 6 zeigt einen Film für die quantitative Analyse mit einer .Struktur, die auf einem Träger 10, in dieser Reihenfolge, die den Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis enthaltende Farbbildungsreaktions-Schicht 22, ■ die das Beizpolymerisat enthaltende Farbstoff-Fixierschicht 21, die lichtreflektierende Schicht 40 und die poröse Spreitungsschicht 31 umfaßt, wobei in dieser Struktur die relative Lage der Farbbildungsreaktions-Schicht zu der Farbstoff-Fixierschicht umgekehrt ist wie die in dem in Fig. 5 dargestellten Film für die quantitative Analyse. Die relative Lage dieser beiden Schichten zueinander ist frei wählbar, wobei jedoch nicht eine solche kationische Verbindung verwendet werden sollte, die in dem Wollenlängonbereich, im allgemeinen von etwa 400 bis etwa 700 nm, absorbiert, in dem der von dem Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis gebildete kationische Farbstoff absorbiert, und die die
kolorimetrische Analyse stört. Dementsprechend ist die relative Lage der Schichten in dem Falle von Bedeutung, in dem es erwünscht ist, daß die Farbbildungsreaktions-Schicht als untere Schicht vorliegt, so daß sie nicht
mit der Luft in Berührung gelangt, z.B. wenn ein Bestandteil des Farbindikators zum Hydrogenperoxid-Nachweis durch Luft etc. oxydiert werden könnte.
Fig. 7 zeigt einen Film für die quantitative Analyse mit einer Struktur, die auf einem Träger 10, in dieser
Reihenfolge, die das Beizpolymerisat enthaltende Farbstoff-Fixierschicht 21, die den Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis enthaltende FarbbiLdungsroaktions-Schicht 22, sowie weiterhin darauf, eine poröse Schicht 32, die porös ist und eine definierte Flächen-
größe besitzt, umfaßt; diese definierte Fläche ist so bemessen, daß ihr eine Flüssigkeitsprobe in einer Menge zugeführt werden kann, die größer ist als die Wassermenge, die in der porösen Schicht gehalten und in die Farbbildungsreaktions-Schicht 22, die sich in enger
Berührung mit der porösen Schicht 32 definierter Fläche befindet, auf der gleichen Breite, wie sie die Schicht 32 besitzt, überführt werden kann. Ein Film für die quantitative Analyse mit einer porösen Schicht definierter Fläche ist für die Analyse äoa Hydrogcnporoxid-Gehalts einer flüssigen wäßrigen Probo besondere geeignet, wenn diese nur eine kleine Menge Hydrogenpcroxid enthält. Zwischen der Farbbildungsreaktions-Schicht und der porösen Schicht mit definierter Fläche kann eine lichtreflektierende Schicht angebracht sein. Weiterhin
kann die relative Lage der Farbbildungsreaktions-Schicht und der Farbstoff-Fixierschicht zueinander umgekehrt werden (wie im Falle des in Fig. 6 dargestellten Films für die quantitative Analyse).
Fig. 8 zeigt einen Film für die quantitative Analyse mit einer Struktur, die auf einem Träger 10, in dieser Reihenfolge, die den Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis und das Beizpolymerisat enthaltende Reagens-Schicht 20, die licht-reflektierende Schicht 40 und die poröse Schicht 32 definierter Flächengröße umfaßt. In den Fig. 7 und 8 ist die poröse Schicht definierter Flächengröße so dargestellt, daß sie kleiner ist als die übrigen Schichten. Es ist jedoch ausreichend, wenn die Schicht definierter Flächengröße nach Form und Größe so beschaffen ist, daß sie nicht größer als die Farbbildungsreaktions-Schicht oder die Reagensschicht ist; dementsprechend kann die poröse Schicht definierter Flächengröße die gleiche Form und Größe wie die Farbbildungsreaktions-Schicht und die Reagensschicht besitzen, wie in Fig. 8 dargestellt ist.
Als Träger können für die Filme für die quantitative Analyse, wie sie in den Fig. 2 bis 8 dargestellt sind, Filme oder Folien aus einer Vielzahl von Polymerisaten verwendet werden, wie etwa Polyethylenterephthalat, Celluloseester (Cellulosediacetat, Cellulosetriacetat, Celluloseacetat-propionat etc.), Polycarbonate (Polycarbonate des Bisphenols A etc.), Polymethylmethacrylat, Polystyrol etc.; die Dicke dieser Folien beträgt etwa 25 um bis 0,3 mm, vorzugsweise etwa 50 μΐη bis etwa 0,2 mm.
Träger, die farblos und durchsichtig sind oder für Licht der betreffenden Wellenlängen durchlässig sind, . bei denen der aus dem Farbindikator zum Hydrogenperoxid-Nachweis gebildete kationische Farbstoff absorbiert, können verwendet werden. Außerdem können auch
Träger verwendet werden, die durch Einarbeiten von Pigmenten (z.B. feinteiliges Titandioxid-Pulver, feinteiliges Bariumsulfat-Pulver, feinteiliges Zinkoxid-Pulver, Ruß etc.) licht-blockierend gemacht worden sind.
Wenn licht-blockierende Träger verwendet werden, kann die kolorimetrische Messung durchgeführt werden, nachdem der Träger im Anschluß an die kolorimetrische Bestimmung des von der trägerfreien Seite reflektierten Lichts abgestreift und entfernt wurde. Die Verwendung
eines licht-blockierenden Trägers ist von Vorteil in denjenigen Fällen, in denen Reagensbestandteile, die der Gefahr unterliegen, durch Licht zersetzt zu werden, in eine Reagensschicht, eine Farbbildungsreaktions-Schicht oder eine Farbstoff-Fixierschicht eingearbeitet sind.
Die Reagensschicht, die Farbbildungsreaktions-Schicht oder die Farbstoff-Fixierschicht des Films für die quantitative Analyse gemäß der vorliegenden Erfindung können eine Analyt-Komponente, die von Hydrogenperoxid
verschieden ist (im Folgenden als "Analyt-Vorstufenkomponente" bezeichnet), und ein System einer Reagens-Zusammensetzung enthalten, das zur Bildung von Hydrogenperoxid durch eine chemische Reaktion befähigt ist (im Folgenden als "Hydrogenperoxid-bildendes Reagenssystem" bezeichnet). Alternativ hierzu kann getrennt von der Reagensschicht, der Farbbildungsreaktions-Schicht oder der Farbstoff-Fixierschicht eine das Hydrogenperoxidbildende Reagenssystem enthaltende Reagensschicht (im Folgenden als "Hydrogenperoxid-bildende Reagensschicht" bezeichnet) vorgesehen werden. Die Hydrogenperoxid-bildende Reagensschicht kann aus einem beliebigen System einer Reagens-Zusammensetzung bestehen, in dem Hydrogenperoxid aus der Analyt-Vorstufenkomponente in einer
einstufigen chemischen Reaktion gebildet wird, oder aus einem solchen System, in dem Hydrögenperoxid aus der Analyt-Vorstufenkomponente durch eine mehrstufige, kontinuierliche Enzymreaktionen umfassende chemische Reaktionsfolge gebildet wird, z.B.
Cholesterin- Cholesterinesterase oxidase
Cholesterinester ►> Cholesterin *· H3O2.
Je nach Art des Hydrogenperoxid-bildenden Reagenssystems kann dieses in die Reagensschicht, in die Farbbildungsreaktionsschicht oder in die Farbstoff-Fixierschicht eingearbeitet sein, oder aber es kann in Form einer oder mehrerer, von den vorerwähnten Schichten verschiedenen Hydrogenperoxid-bildenden Reagensschicht(en) eingesetzt werden. Solche Verfahrensweisen sind Fachleuten wohlbekannt.
Zu Beispielen für Analyt-Vorstufenkomponenten und Hydrogenperoxid-bildenden Reagensssystemen zählt ein System, das Cholesterinester und Cholesterin (als Analyt-Vorstufen) und Cholesterinesterase und Cholesterinoxidase (als Hydrogenperoxid-bildendes Reagenssystem) enthält, wie es in den JP-OSen 137192/75 (entsprechend der US-PS 3 983 005) , 131588/75 (entsprechend der US-PS 3 869 349) und 124499/80 (entsprechend der US-PS 4 269 938) offenbart wurde; weitere Beispiele (Analyt-Vorstufe - Hydrogenperoxid-bildendes Reagenssystem) sind ein Glucose - Glucoseoxidase enthaltendes System, wie es in den JP-OSen 53888/74 (entsprechend der US-PS
3 992 158) , 40191/76 (entsprechend der US-PS
4 042 335) , 124499/80 (entsprechend der US-PS
4 .269 938) und 164356/80 offenbart wurde, ein Glycerin, Triglyceride - Lipase, Glycerin-Kinase, ol-Glycerophosphat-Oxidäse etc. enthaltendes System, wie es in den
JP-OSen 24892/78 (entsprechend der US-PS 4 241 178), 24893/78 und 26382/78 (entsprechend der US-PS 4 179 334) offenbart wurde, ein Milchsäure-Salza und Milchsäure - Lactat-Dehydrogenase und Lactat-Oxidase
enthaltendes System, wie es in den JP-OSen 105292/78, 73096/79 (entsprechend der US-PS 4 184 923) etc. offenbart wurde, ein Urikase und ein Hydrogenperoxid-bildendes Reagens, das eine der vorgenannten Substanzen enthält oder zur Reaktion mit ihr befähigt ist, enthal-
tendes System, wie es in der US-PS 4 062 731 und den JP-OSen 50393/79 (entsprechend der US-PS 4 283 491), 124499/80 (entsprechend der US-PS 4 26.9 938) etc. offenbart wurde. Es erübrigt sich festzustellen, daß die Analyt-Vorstufenkomponenten und Hydrogenperoxid-bildenden Reagenssysteme nicht auf die vorgenannten beschränkt sind und daß andere Hydrogenperoxid-bildenden Reagenssysteme für entsprechende Analyt-Vorstufenkomponenten ebenfalls eingesetzt werden können.
In den Fällen, in denen der Film für die quantitative
Analyse gemäß der vorliegenden Erfindung, einschließlich der in den Fig. 2 bis 8 dargestellten Ausführungsformen, aus einer mehrschichtigen Verbundstoff-Struktur besteht, können zur Herstellung derselben die Verfahren eingesetzt werden, die in den vorerwähnten
JP-OSen 53888/74 (entsprechend der US-PS 3 992 158) , 40191/76 (entsprechend der US-PS 4 042 335), 90859/80 (entsprechend der US-PS 4 258 001) und 164356/80, der JP-Patentanmeldung 140352/80, den JP-OSen 26428/80 und 26429/80, der JP-GBM-Anmeldung 120299/80 etc. beschrieben wurden. Andernfalls kann der Film für die quantitative Analyse auch mit Hilfe der verschiedenen Beschichtungsverfahren hergestellt werden, die zur Herstellung gebräuchlicher lichtempfindlicher Materialien für die
Farbphotographie oder lichtempfindlicher Materialien für die Schwarzweiß- oder Color-Sofortbildphotographie eingeführt sind, wobei diese Verfahren als solche oder mit geringfügigen Abänderungen eingesetzt werden.
Ein Verfahren zur quantitativen analytischen Bestimmung von Hydrogenperoxid unter Verwendung'des Films für die quantitative Analyse gemäß der vorliegenden Erfindung wird nachstehend erläutert. Die Arbeitsgänge der quantitativen Analyse mit dem hierfür vorgesehenen Film gemäß der vorliegenden Erfindung umfassen das Auftropfen einer zu untersuchenden flüssigen Probe auf den Film für die quantitative Analyse, die Messung der optischen Dichte einer auf der Farbstoff-Fixierschicht gebildeten Färbung sowie, je nach Bedarf, eine Inkubation nach dem Auftropfen. Das Auftropfen und die Inkubation einer zu untersuchenden Flüssigkeitsprobe können unter üblichen Bedingungen durchgeführt werden (im allgemeinen bei Temperaturen von etwa 150C bis etwa 400C während Zeitspannen von 2 bis 20 min), wobei Geräte zum Auftropfen und Meßgeräte wie bei den Verfahren verwendet werden, die in den vorgenannten PSen oder den JP-OSen 81292/78 (entsprechend der US-PS 4 224 032), 76044/78 (entsprechend der US-PS 4 119 381) und 76095/78 (entsprechend der US-PS 4 152 390), der JP-Patentanmeldung 154313/79, den JP-GBM-Anmeldungen 45527/80 und 103204/80 etc. offenbart wurden. Bei Einsatz von Filmen für die quantitative Analyse mit solchen Strukturen, wie sie in den Fig. 4 bis 8 dargestellt sind, kann die quantitative Analyse mit außer-0 ordentlich hoher Genauigkeit in der Weise durchgeführt werden, daß eine Spurenmenge einer Flüssigkeitsprobe im Bereich von 5 |il bis 50 μΐ auf getropft wird. Wenn andererseits die in den Fig. 1 bis 3 dargestellten Filme
für die quantitative Analyse verwendet werden, kann die quantitative Analyse in der Weise durchgeführt werden, daß die Filme für die quantitative Analyse in eine zu untersuchende Probe eingetaucht, wieder aus ihr entfernt, erforderlichenfalls inkubiert und anschließend der kolorimetrischen Messung unterzogen werden. In diesem Fall können Geräte für die kolorimetrische Analyse verwendet werden, wie sie in den JP-OSen 82685/76 und 144293/76, der JP-GBM-Anmeldung 134381/77 etc. offenbart sind.
Im Anschluß an die vorstehende allgemeine Beschreibung wird die vorliegende Erfindung anhand der folgenden Beispiele weiter erläutert.
- 54 Beispiel 1
Eine Lösung nachstehender Zusammensetzung für eine Farbstoff-Fixierschicht wurde auf einen als photographischer Film dienenden farblosen transparenten PET-Film mit einer Dicke von 180 μΐη aufgetragen, so daß die Dicke der trockenen Schicht 5 μΐη betrug, und danach getrocknet, wodurch die Farbstoff-Fixierschicht erhalten wurde.
Zusammensetzung der Lösung für die
Farbstoff-Fixierschicht;
Kalium-polystyrol-p-sulfonat 5g
Gelatine . 10 g
Oberflächenaktives Mittel 10GR 1 g
(50 gew.-proz. wäßrige Lösung
von
Wasser 100 ml
Danach wurde eine Beschichtungslösung der nachstehenden Zusammensetzung für eine Reagensschicht auf die Farbstoff-Fixierschicht aufgetragen, sodaß die Dicke der trockenen Schicht 10 um betrug, und getrocknet, wodurch die Reagensschicht erhalten wurde.
Zusammensetzung der Beschichtungslösung für die
Reagensschicht: 100 mg
Ν,Ν-Bis(ß-hydroxyethyl)-m-toluidin 120 mg
4-Aminoantipyrin-hydrochlorid 50 mg
Propylgallat 3 ,2 g
Gelatine 100 mg
Oberflächenaktives Mittel 10 GR 1100 Einheiten
Peroxidase 15 ml
Wasser
Auf den so hergestellten mehrschichtigen Film wurde ein
R
Membranfilter {Fuji Microfilter-500 , hergestellt von der Fuji Photo Film Co., Ltd., Japan) aus Cellulosetriacetat, das feinteiliges Titandioxid enthielt, mittels Naßpressens auflaminiert, wodurch ein aus mehreren
Schichten zusammengesetzter Analysenfilm (E 1) zum Hydrogenperoxid-Nachweis gemäß der vorliegenden Erfindung erhalten wurde.
Dieser Film wurde in Stücke mit einer Flächengröße von 0,5 cm2 zerschnitten. Auf das auf der Oberseite befindliehe Membranfilter wurden jeweils 8 μΐ wäßriger Hydrogenperoxid-Lösungen verschiedener Konzentrationen, die nach einem Standardverfahren hergestellt worden waren, aufgetropft, und danach wurde 5 min bei 300C inkubiert. Die optischen Dichten der dabei gebildeten
Färbungen wurden als optische Reflexionsdichten gemessen. Die erhaltenen Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle aufgeführt.
32Ί3786
Tabelle 1
Hydrogenperoxid- Optische Reflexionsdichte 0,17
Konzentration einer (gemessen durch ein Grün 1,50
wäßrigen Lösung der filter) 2,20
Substanz (mol/1) 2,8.0
0 (Blindprobe)
ΙΟ"3
5 χ 10"3
ίο"2
Vergleichsbeispiel 1
Ein mehrschichtiger Film für die quantitative Analyse (C 1) zum Hydrogenperoxid-Nachweis wurde in ähnlicher Weise wie in Beispiel 1 hergestellt, jedoch mit der Ausnahme, daß hierbei in der Beschichtungslösung für die Reagensschicht, bei sonst gleicher Zusammensetzung wie in Beispiel 1, das Propylgallat fortgelassen wurde.
Unter Verwendung wäßriger Hydrogenperoxid-Lösungen wurden auf den Filmen für die quantitative Analyse (E 1) und (C 1) in- ähnlicher Weise Färbungen gebildet. Die optischen Dichten dieser Färbungen waren fast gleich. Im einzelnen betrugen die optischen Dichten bei Verwen-
_2 dung von 8 μΐ einer wäßrigen Lösung mit 10 mol/1 Hydrogenperoxid bei Messung durch ein Grünfilter für den Analysenfilm (E 1) 2,80 bzw. für den Analyenfilm (C 1) 2,83.
Die Filme für die quantitative Analyse (E 1) und (C 1) wurden anschließend Prüfungen einer forcierten Wertminderung mit der Zeit unterworfen, und zwar unter folgenden Bedingungen:
(a) Trockenlagerung bei 450C:
Hierzu wurden die AnaIysenfilme in einem dicht verschlossenen Behälter gelagert, in dem eine ausreichende Menge Trockenmittel (Silicagel-PuIver) vorhanden war.
(b) Lagerung bei 250C und 50 % relativer Feuchtigkeit.
Nach Verstreichen gewisser Zeitabstände wurden auf den AnaIysenfilmen durch Auftropfen einer wäßrigen Lösung mit 10 mol/1 Hydrogenperoxid wie oben beschrieben
Färbungen erzeugt. Die (durch ein Grünfilter) beobachteten optischen Reflexionsdichten nach Einwirkung des Tests der forcierten Wertminderung werden angegeben als prozentuale Anteile der Werte der optischen Reflexionsdichten der frischen Filme vor Testbeginn und sind in
den Tabellen 2 und 3 aufgeführt.
- 58 -
Tabelle 2
Optische Reflexionsdichte (frisch) und
Anteile der Reflexionsdichte nach forcierter Trockenlagerung bei 450C:
Tag 2 Analysenfilm ,80 100 C 1 2,83 100
Tagen E 1 99 63
frisch Tagen 95 34
nach 1 Tagen 95 30
nach 2 Tabelle
nach 10 3
nach 20
Optische Reflexionsdichte (frisch) und Anteile der Reflexionsdichte
nach forcierter Lagerung bei 250C und 50 % relativer Feuchtigkeit:
Tagen Analysenfilm 2,80 100 C 1 2,80 22
Tagen E 1 99 13
frisch Tagen 97 10
nach 10
nach 30
nach 60
Wie aus den in den Tabellen angegebenen Ergebnissen zu ersehen ist, zeigten die Analysenfilme gemäß der vorliegenden Erfindung auch nach dem Wertminderungstest noch eine ausgezeichnete Farbbildung.
- 59 Beispiel 2
Ein Film für die quantitative Analyse zum Hydrogenperoxid-Nachweis wurde wie in Beispiel 1 hergestellt, jedoch mit der Abänderung, daß die verschiedenen, in Tabelle 4 aufgeführten Antioxidationsmittel an Stelle des Propylgallats eingearbeitet wurden. Mit den auf diese Weise hergestellten Analysenfilmen wurde der Test der forcierten thermischen Trockenlagerung bei 450C durchgeführt. Die Auswertung erfolgte wie in Beispiel 1. Die erhaltenen Ergebnisse sind in der Tabelle 4 dargestellt, wobei die Bewertungssymbole folgende Bedeutungen haben:
ο : außerordentlich geringe Verminderung der optischen Reflexionsdichte (vorliegende Erfindung); s : geringe Verminderung der optischen Reflexionsdichte (vorliegende Erfindung);
χ : schwerwiegende Verminderung der optischen Reflexionsdichte, d.h. praktischer Einsatz unmöglich (Vergleichsverbindungen).
- 60 Tabelle 4
Wirkung verschiedener Antioxidationsmittel auf die Verhinderung einer Abnahme der POD-Aktivität
Abnahme der optischen Reflexionsdichte (%) Antioxida- 1 Tag 6 Tage 10 Tage Beurtionsmittel teilung
2,6-Di-t-butyl- 66 90 92 X
4-methylphenol
2,5-Dihexyl- 64 84 86 X
hydrochinon 72 88 91 X
Bisphenol A 0 2 3 O
Methylgallat 0 15 25 O
Isoamylgallat 0 15 25 ο bis s
5-Ethy!pyrogallol
1,7-Dihydroxy- 0 11 52 X
naphthalin
(bildete zusätzlich eine rötliche Färbung) Isobutylgallat 0 1 2 ο
Aus den vorstehenden Ergebnissen ist zu entnehmen, daß Pyrogallol-Derivate in wirksamer Weise eine Abnahme der POD-Aktivität verhindern.
Beispiel 3
Ein mehrere Schichten umfassender Film für die Analyse von Glucose wurde wie in Beispiel 1 beschrieben hergestellt, jedoch mit der Abänderung, daß Isobutylgallat an Stelle des Propylgallats in der Zusammensetzung der Beschichtungslösung für die Reagensschicht des Beispiels 1 verwendet und außerdem noch 1500 Einheiten Glucoseoxidase in diese eingearbeitet wurden.
Dieser Analysenfilm wurde in Quadrate von 1,5 cm χ 1,5 cm zerschnitten. Auf die Membranfilter-Schicht (poröse Spreitungsschicht) dieses Analysenfilms wurden je 10 μΐ eines im Handel erhältlichen Kontrollserums, das
durch Zusatz von Glucose zu diesem Serum auf Glücose-Gehalte von 100, 200, 300 bzw. 500 mg/dl eingestellt worden war, aufgetropft, und anschließend wurde zur Bildung der Färbung 5 min bei 370C inkubiert·
Bei Verwendung von 50 mg Isobutylgallat wurden die in
der nachstehenden Tabelle 5 aufgeführten Ergebnisse erhalten.
Tabelle 5
Wäßrige Glucose-Lösung Optische Reflexionsdichte einer Konzentration (gemessen bei einer WeI-lenlänge von 600 nm)
100 0,73
200 1,14
300 1,48
500 1,97
Diese Analysenfilm wurde anschließend der Prüfung einer forcierten Wertminderung mit der Zeit unter den Bedingungen der Trockenlagerung bei 450C unterworfen. Der gleiche Farbbildungstest wurde 20 Tage später durchgeführt. Die Abnahme der optischen Reflexionsdichten im
Bereich der Glucose-Gehalte von 100 mg/dl bis 500 mg/dl in wäßriger Lösung betrug 0 %. Das heißt, daß die optischen Dichten auch 20 Tage später überhaupt nicht vermindert waren.
I Ö I 00
In ähnlicher Weise wurde der Test der forcierten Wertminderung mit der Zeit unter den Bedingungen der Trockenlagerung bei 450C auch unter Verwendung anderer Gallussäureester durchgeführt. Derselbe Farbbildungstest wurde ebenfalls 20 Tage später durchgeführt. Die Abnahmen der optischen Reflexionsdichten im Bereich der Glucose-Gehalte von 100 mg/dl bis 500 mg/dl in Form der prozentualen Mittelwerte sind in der nachstehenden Tabelle 6 aufgeführt.
Tabelle 6
Gallussäureester Abnahme der optischen
Reflexionsdichte (%)
Isobutylgallat Beispiel 4 0
Propylgallat 0
Butylgallat 1
Isoamylgallat 1
Methylgallat 3
Octylgallat 5
Zusammensetzung der Beschichtungslösung für die
Färbstoff-Fixierschicht:
Wäßrige Latex-Lösung (30 %) von
Poly(Ν,Ν,Ν-trimethyl-N-(vinylbenzyl)-ammoniumchlorid
Gelatine
Oberflächenaktives Mittel 10GR Wasser
15 g
10 g
1 g
80 g
Zusammensetzung der Beschichtungslösung für die
Reagensschicht: 80 mg
1,7-Dihydroxynaphthalin 120 mg
4-Aminoantipyrin-hydrochlorid 20 mg
Ethylgallat 3 ,2 g
Gelatine • 100 mg
Oberflächenaktives Mittel 10 GR .1100 Einheiten
Peroxidase 15 ml
Wasser
Auf einen farblosen transparenten PET-FiIm mit einer Dicke im trockenen Zustand von 180 μΐη wurden, in dieser Reihenfolge, die Beschichtungslösung für die Farbstoff-Fixierschicht und die Zusammensetzung der Beschichtungslösung für die Reagensschicht wie in Beispiel 1 aufgetragen (Dicken der Farbstoff-Fixierschicht 5 um, der Reagensschicht 10 um, jeweils im trockenen Zustand) .
Danach wurde eine Beschichtungslösung der ·folgenden Zusammensetzung für eine lichtblockierende Schicht (lichtabschirmende oder -reflektierende Schicht) auf die Reagensschicht aufgetragen, so daß die Dicke der trockenen Schicht 7 um betrug, und anschließend wurde getrocknet.
Zusammensetzung der Beschichtungslösung für die lichtblockierende Schicht:
feinteiliges TiO^-Pulver 19,5 g
Gelatine 6,8 g
Natrium-dioctylsulfosuccinat 1,0 g
Wasser 8 7 g
Baumwollpopeline mit einer Garnnummer 100 und einer Dicke von 180 um wurde anschließend auf das so hergestellte Laminat aus mehreren Schichten aufgepreßt, wodurch ein mehrschichtiger Analysenfilm (E 4) zum Hydrogonperoxid-Nachweis erhalten wurde.
Vergleichsbeispiel 2
Ein mehrschichtiger Analysenfilm (C 2) zum Hydrogenperoxid-Nachweis wurde wie in Beispiel 4 hergestellt, jedoch mit der Ausnahme, daß hierbei in der Beschichtungslösung für die Reagensschicht, bei sonst gleicher Zusammensetzung wie in Beispiel 4, das Ethylgallat fortgelassen wurde.
Nachdem die Analysenfilme (E 4) und (C 2) 2 Wochen lang einem forcierten Test der Trockenlagerung bei 450C unterworfen worden waren, wurden wäßrige Hydrogenperoxid-Lösungen auf die betreffenden Analysenfilme aufgetropft, und anschließend wurde 5, min bei 3O0C inkubiert. Danach wurden die optischen Reflexionsdichten der jeweils gebildeten Färbungen gemessen. Die Abnahmen der optischen Reflexionsdichten zeigten die folgenden Mittelwerte:
Analysenfilm (E 4) 2 %
Analysenfilm (C 2) 50 %.

Claims (1)

  1. VON KREISLER SCHONWALD EISHOLD FÖES VON KREISLER KELLER SELTING WERNER
    Fuji Photo Film Co., Ltd. Kanagawa, Japan
    PATENTANWÄLTE Dr.-Ing. von Kreisler 11973
    Dr.-Ing. K. Schönwald, Köln Dr.-Ing. K. W. Eishold, Bad Soden Dr. J. F. Fues, Köln Dipl.-Chem. Alek von Kreisler, Köln Dipl.-Chem. Carola Keller, Köln Dipl.-Ing. G. Setting, Köln Dr. H.-K. Werner, Köln
    DEICHMANNHAUS AM HAUPTBAHNHOF
    D-5000 KÖLN 1
    14.April 1982
    W/GF 815
    Patentansprüche
    1.^Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis, enthaltend eine Substanz mit Peroxidase-Aktivität und eine Substanz, die zur Verursachung einer nachweisbaren Veränderung in Gegenwart von Hydrogenperoxid und der Substanz mit Peroxidase-Aktivität befähigt ist,
    dadurch gekennzeichnet, daß die Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis ein Pyrogallol-Derivat der nachstehenden Formel (1)
    OH
    enthält, in der
    Q eine Nitro-Gruppe, Cyano-Gruppe, Alkyl-Gruppe, substituierte Alkyl-Gruppe, Aryl-Gruppe, substituierte Aryl-Gruppe, Aralkyl-Gruppe, Carboxyl-Gruppe oder
    2 2
    eine Gruppe -COOQ bezeichnet, worin Q für eine Alkyl-Gruppe, substituierte Alkyl-Gruppe, Aryl-Gruppe, substituierte Aryl-Gruppe oder eine Aralkyl-Gruppe steht.
    2. Farbindikator-Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die zur Verursachung einer nachweisbaren Veränderung befähigte Substanz eine Kombination aus einem Wasserstoff-Donator und einem Kuppler ist.
    3. Farbindikator-Zusammensetzung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß der Wasserstoff-Donator mindestens eine Verbindung ausgewählt aus einem 4-substituierten Antipyrin, einem 2-Hydrazinobenzothiazolin, einem p-Halogenophenol und einem Ν,Ν-disubstituierten p-Phenylendiamin der Formel (2)
    R7
    ist, in der
    R und R gleich oder verschieden sein können und jeweils eine Alkyl-Gruppe, Alkoxyalkyl-Gruppe, Hydroxyalkyl-Gruppe, Cyanoalkyl-Gruppe, Halogenoalkyl-Gruppe oder Acylaminoalkyl-Gruppe bezeichnen und
    R für ein Wasserstoff-Atom, eine Alkyl-Gruppe, Alkoxy-Gruppe oder ein Halogen-Atom steht.
    4. Farbindikator-Zusammensetzung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß der Kuppler mindestens eine Verbindung ausgewählt aus einem Naphthol, einem Phenol, einem Pyrazolon und einem Ν,Ν-disubstituierten Anilin der Formel (3)
    R1
    4 (3)
    J
    ist, in der
    1 2
    R und R gleich oder verschieden sein können und jeweils ein Wasserstoff-Atom, eine Alkyl-Gruppe oder eine Alkoxy-Gruppe bezeichnen und
    3 4
    R und R gleich oder verschieden sein können und jeweils eine Alkyl-Gruppe, Alkoxyalkyl-Gruppe, Hydroxyalkyl-Gruppe, Aminoalkyl-Gruppe, Cyanoalkyl-Gruppe, Halogenoalkyl-Gruppe oder eine Acylaminoalkyl-Gruppe bezeichnen.
    5. Farbindikator-Zusammensetzung nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet-, daß der Wasserstoff-Donator 4-Aminoantipyrin ist.
    6. Film für die quantitative Analyse mit einem Träger und einer Reagensschicht' mit einer Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis, die eine Substanz mit Peroxidaser-Aktivität und eine Substanz enthält, die zur Verursachung einer nachweisbaren Veränderung in Gegenwart von Hydrogenperoxid und der Substanz mit Peroxidase-Aktivität befähigt ist,
    dadurch gekennzeichnet, daß die Farbindikator-Zusammensetzung zum Hydrogenperoxid-Nachweis in dem Film für die quantitative Analyse ein Pyrogallol-Derivat der nachstehenden Formel (1)
    OH
    enthält, in der '
    Q eine Nitro-Gruppe, Cyano-Gruppe, Alkyl-Gruppe, substituierte Alkyl-Gruppe, Aryl-Gruppe, substituierte Aryl-Gruppe, Aralkyl-Gruppe, Carboxyl-Gruppe oder
    2 2
    eine Gruppe -COOQ bezeichnet, worin Q für eine Alkyl-Gruppe, substituierte Alkyl-Gruppe, Aryl-Gruppe, substituierte Aryl-Gruppe oder eine Aralkyl-Gruppe steht.
    7. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß die zur Verursachung einer nachweisbaren Veränderung befähigte Substanz eine Kombination aus einem Wasserstoff-Donator und einem Kuppler ist.
    8. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 6 oder 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Reagensschicht weiterhin aus einer Farbbildungsreaktionsschicht und einer Farbstoff-Fixierschicht zusammengsetzt ist.
    φ «t "ϊ
    9. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 6 oder 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Rea,gensschicht eine einzelne Schicht ist.
    10. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 7, 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Wasserstoff-Donator mindestens eine Verbindung ausgewählt aus einem 4-Aminoantipyrxn, einem 2-Hydrazinobenzothiazolin, einem p-Halogenophenol und einem N,N-disubstituierten p-Phenylendiamin der Formel (2)
    R7
    ist, in der
    R und R gleich oder verschieden sein können und jeweils eine Alkyl-Gruppe, Alkoxyalkyl-Gruppe, Hydroxyalkyl-Gruppe, Cyanoalkyl-Gruppe, Halogenoalkyl-Gruppe oder Acylaminoalkyl-Gruppe bezeichnen und
    R für ein Wasserstoff-Atom, eine Alkyl-Gruppe, Alkoxy-Gruppe oder ein Halogen-Atom steht.
    11. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 7, 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Kuppler mindestens eine Verbindung ausgewählt aus einem Naphthol, einem Phenol, einem Pyrazolon und einem N,N-disubstituierten Anilin der Formel (3)
    X=/ V (3)
    τ/
    int, in der
    1 2
    R und R gleich oder verschieden sein können und jeweils ein Wasserstoff-Atom, eine Alkyl-Gruppe oder eine Alkoxy-Gruppe bezeichnen und
    3 4
    R und R gleich oder verschieden sein können und jeweils eine Alkyl-Gruppe, Alkoxyalkyl-Gruppe, Hydroxyalkyl-Gruppe, Aminoalkyl-Gruppe, Cyanoalkyl-Gruppe, Halogenoalkyl-Gruppe oder eine Acylaminoalkyl-Gruppe bezeichnen.
    12. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 7, 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, daß der Wasserstoff-Donator 4-Aminoantipyrin ist.
    13. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 7, 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Reagensschicht zwischen einem Träger und und einer porösen Schicht angebracht ist und die poröse Schicht sich in fließfähiger Berührung mit der Reagensschicht befindet, so daß die beiden Schichten in integrierter Form vorliegen.
    14. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 7, 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Farbindikator-Zusammensetzung in einem polymeren Bindemittel enthalten ist.
    15. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 7, 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Reagensschicht weiterhin ein ein anionisches Polymerisat oder ein kationisches Polymerisat enthaltendes Beizmittel enthält.
    16. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß die Farbstoff-Fixierschicht
    weiterhin ein ein anionisches Polymerisat oder ein kationisches Polymerisat enthaltendes polymeres Beizmittel enthält.
    17. Film für die quantitative Analyse nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß der Träger porös und mit der Farbindikator-Zusammensetzung imprägniert ist.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0243125A2 (de) * 1986-04-19 1987-10-28 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. Verfahren zur Messung von Phenol und alpha-Naphthol, sowie ein Verfahren zur Messung der Aktivität von Enzymen
EP0243126A2 (de) * 1986-04-19 1987-10-28 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. Verfahren zur Messung von Wasserstoffperoxid oder zur Messung eines peroxidfreimachenden Enzyms oder biochemischen Substrats

Families Citing this family (91)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4562148A (en) * 1981-11-06 1985-12-31 Miles Laboratories, Inc. Analytical element and method for preventing reagent migration
US4521511A (en) * 1982-09-22 1985-06-04 Enzyme Technology Company Catalyzed colorimetric and fluorometric substrates for peroxidase enzyme determinations
US4556636A (en) * 1983-06-09 1985-12-03 Eastman Kodak Company Composition, analytical element and method for the detection of bacteria
JPS6014141A (ja) * 1983-07-06 1985-01-24 Kyoto Daiichi Kagaku:Kk 多層一体化分析用具
JPS61124393A (ja) * 1984-11-20 1986-06-12 Konishiroku Photo Ind Co Ltd 過酸化水素検出用分析素子
US4672029A (en) * 1984-12-06 1987-06-09 Eastman Kodak Company Color-forming couplers and their use in the analytical determination of hydrogen peroxide or other analytes
US4737457A (en) * 1986-02-26 1988-04-12 Eastman Kodak Company Analytical composition, element and method for the determination of hydrogen peroxide
US4828983A (en) * 1986-07-10 1989-05-09 Eastman Kodak Company Use of phenols and anilines to increase the rate of peroxidase catalyzed oxidation of leuco dyes
US4935346A (en) 1986-08-13 1990-06-19 Lifescan, Inc. Minimum procedure system for the determination of analytes
JPH0619346B2 (ja) * 1986-11-17 1994-03-16 コニカ株式会社 過酸化水素定量用分析素子
US4971918A (en) * 1988-05-25 1990-11-20 Boehringer Mannheim Corporation Reducible indicator compositions containing pyrogallol derivatives
US5084395A (en) * 1988-05-25 1992-01-28 Boehringer Mannheim Gmbh Reducible indicator compositions containing pyrogallol derivatives
GB8922049D0 (en) * 1989-09-29 1989-11-15 Medical Instrumentation Consul Carbon dioxide monitor
US5264886A (en) * 1992-09-28 1993-11-23 Byrd Ima J Film exposure indicator and process
US5518891A (en) * 1993-03-25 1996-05-21 Actimed Laboratories, Inc. Dye forming composition and detection of hydrogen peroxide therewith
US6777243B2 (en) * 1995-10-30 2004-08-17 Arkray Inc. Method for measuring substance and testing piece
CN1103919C (zh) * 1995-10-30 2003-03-26 株式会社京都第一科学 物质的测定方法及试片
US6391005B1 (en) 1998-03-30 2002-05-21 Agilent Technologies, Inc. Apparatus and method for penetration with shaft having a sensor for sensing penetration depth
JP2000262298A (ja) * 1999-03-15 2000-09-26 Fuji Photo Film Co Ltd 全血中のグルコース濃度もしくはコレステロール濃度の定量方法
US6458326B1 (en) 1999-11-24 2002-10-01 Home Diagnostics, Inc. Protective test strip platform
US6540675B2 (en) 2000-06-27 2003-04-01 Rosedale Medical, Inc. Analyte monitor
US8641644B2 (en) 2000-11-21 2014-02-04 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Blood testing apparatus having a rotatable cartridge with multiple lancing elements and testing means
US6635439B2 (en) 2000-12-21 2003-10-21 Ethicon, Inc. Hydrogen peroxide indicator employing enzyme and dye
US6562625B2 (en) 2001-02-28 2003-05-13 Home Diagnostics, Inc. Distinguishing test types through spectral analysis
US6525330B2 (en) 2001-02-28 2003-02-25 Home Diagnostics, Inc. Method of strip insertion detection
US6541266B2 (en) 2001-02-28 2003-04-01 Home Diagnostics, Inc. Method for determining concentration of an analyte in a test strip
DE60238119D1 (de) 2001-06-12 2010-12-09 Pelikan Technologies Inc Elektrisches betätigungselement für eine lanzette
US7749174B2 (en) 2001-06-12 2010-07-06 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for lancet launching device intergrated onto a blood-sampling cartridge
US9795747B2 (en) 2010-06-02 2017-10-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Methods and apparatus for lancet actuation
US9226699B2 (en) 2002-04-19 2016-01-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Body fluid sampling module with a continuous compression tissue interface surface
US7316700B2 (en) 2001-06-12 2008-01-08 Pelikan Technologies, Inc. Self optimizing lancing device with adaptation means to temporal variations in cutaneous properties
US9427532B2 (en) 2001-06-12 2016-08-30 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
US7981056B2 (en) 2002-04-19 2011-07-19 Pelikan Technologies, Inc. Methods and apparatus for lancet actuation
US8337419B2 (en) 2002-04-19 2012-12-25 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
US7025774B2 (en) 2001-06-12 2006-04-11 Pelikan Technologies, Inc. Tissue penetration device
DE60330647D1 (de) * 2002-01-16 2010-02-04 Kao Corp Additiv für asphalt vom erwärmungstyp
US7004928B2 (en) 2002-02-08 2006-02-28 Rosedale Medical, Inc. Autonomous, ambulatory analyte monitor or drug delivery device
US8360992B2 (en) 2002-04-19 2013-01-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US8579831B2 (en) 2002-04-19 2013-11-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US7976476B2 (en) 2002-04-19 2011-07-12 Pelikan Technologies, Inc. Device and method for variable speed lancet
US7909778B2 (en) 2002-04-19 2011-03-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7901362B2 (en) 2002-04-19 2011-03-08 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7491178B2 (en) 2002-04-19 2009-02-17 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US9314194B2 (en) 2002-04-19 2016-04-19 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
US7547287B2 (en) 2002-04-19 2009-06-16 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7297122B2 (en) 2002-04-19 2007-11-20 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7232451B2 (en) 2002-04-19 2007-06-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7175642B2 (en) 2002-04-19 2007-02-13 Pelikan Technologies, Inc. Methods and apparatus for lancet actuation
US9248267B2 (en) 2002-04-19 2016-02-02 Sanofi-Aventis Deustchland Gmbh Tissue penetration device
US7674232B2 (en) 2002-04-19 2010-03-09 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8372016B2 (en) 2002-04-19 2013-02-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
US8702624B2 (en) 2006-09-29 2014-04-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Analyte measurement device with a single shot actuator
US8267870B2 (en) 2002-04-19 2012-09-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for body fluid sampling with hybrid actuation
US7331931B2 (en) 2002-04-19 2008-02-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7892183B2 (en) 2002-04-19 2011-02-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
US7713214B2 (en) 2002-04-19 2010-05-11 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for a multi-use body fluid sampling device with optical analyte sensing
US9795334B2 (en) 2002-04-19 2017-10-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US8784335B2 (en) 2002-04-19 2014-07-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Body fluid sampling device with a capacitive sensor
US7229458B2 (en) 2002-04-19 2007-06-12 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8221334B2 (en) 2002-04-19 2012-07-17 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US8574895B2 (en) 2002-12-30 2013-11-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus using optical techniques to measure analyte levels
US7052652B2 (en) 2003-03-24 2006-05-30 Rosedale Medical, Inc. Analyte concentration detection devices and methods
US8262614B2 (en) 2003-05-30 2012-09-11 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for fluid injection
US7850621B2 (en) 2003-06-06 2010-12-14 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
WO2006001797A1 (en) 2004-06-14 2006-01-05 Pelikan Technologies, Inc. Low pain penetrating
WO2005033659A2 (en) 2003-09-29 2005-04-14 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for an improved sample capture device
EP1680014A4 (de) 2003-10-14 2009-01-21 Pelikan Technologies Inc Verfahren und gerät für eine variable anwenderschnittstelle
US7822454B1 (en) 2005-01-03 2010-10-26 Pelikan Technologies, Inc. Fluid sampling device with improved analyte detecting member configuration
US8668656B2 (en) 2003-12-31 2014-03-11 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for improving fluidic flow and sample capture
WO2006011062A2 (en) 2004-05-20 2006-02-02 Albatros Technologies Gmbh & Co. Kg Printable hydrogel for biosensors
EP1765194A4 (de) 2004-06-03 2010-09-29 Pelikan Technologies Inc Verfahren und gerät für eine flüssigkeitsentnahmenvorrichtung
US9775553B2 (en) 2004-06-03 2017-10-03 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for a fluid sampling device
US8652831B2 (en) 2004-12-30 2014-02-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for analyte measurement test time
US20060281187A1 (en) 2005-06-13 2006-12-14 Rosedale Medical, Inc. Analyte detection devices and methods with hematocrit/volume correction and feedback control
EP3461406A1 (de) 2005-09-30 2019-04-03 Intuity Medical, Inc. Kassette zur entnahme und analyse von körperflüssigkeiten mit mehreren stellen
US8801631B2 (en) 2005-09-30 2014-08-12 Intuity Medical, Inc. Devices and methods for facilitating fluid transport
EP2265324B1 (de) 2008-04-11 2015-01-28 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Integriertes System zur Messung von Analyten
JP5816080B2 (ja) 2008-05-30 2015-11-17 インテュイティ メディカル インコーポレイテッド 体液採取装置及び採取部位インターフェイス
US9636051B2 (en) 2008-06-06 2017-05-02 Intuity Medical, Inc. Detection meter and mode of operation
ES2907152T3 (es) 2008-06-06 2022-04-22 Intuity Medical Inc Medidor de glucosa en sangre y método de funcionamiento
US9375169B2 (en) 2009-01-30 2016-06-28 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cam drive for managing disposable penetrating member actions with a single motor and motor and control system
EP3106871B1 (de) 2009-11-30 2021-10-27 Intuity Medical, Inc. Verfahren zum verifizieren der genauigkeit des betriebs einer analyt-überwachungsvorrichtung
US8965476B2 (en) 2010-04-16 2015-02-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
EP2584964B1 (de) 2010-06-25 2021-08-04 Intuity Medical, Inc. Analytüberwachungsvorrichtungen
US9782114B2 (en) 2011-08-03 2017-10-10 Intuity Medical, Inc. Devices and methods for body fluid sampling and analysis
CA2859167C (en) 2011-12-12 2021-03-16 Step Ahead Innovations, Inc. Submerged chemical indicator and holder
US9784686B2 (en) 2013-06-19 2017-10-10 Step Ahead Innovations, Inc. Aquatic environment water parameter testing systems and methods
WO2014205412A1 (en) 2013-06-21 2014-12-24 Intuity Medical, Inc. Analyte monitoring system with audible feedback
TWI718504B (zh) * 2019-03-22 2021-02-11 台灣奈米碳素股份有限公司 氣敏式紋身貼紙
TWI703325B (zh) * 2019-03-22 2020-09-01 台灣奈米碳素股份有限公司 呈色氣體感測晶片
TWI705412B (zh) * 2019-03-22 2020-09-21 台灣奈米碳素股份有限公司 基於氣體評價食材風味的系統及方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4247631A (en) * 1979-01-31 1981-01-27 Millipore Corporation Reagent and method for the analytic determination of hydrogen peroxide
US4251629A (en) * 1977-07-29 1981-02-17 Wako Pure Chemical Industries, Ltd. Determination of hydrogen peroxide
US4260679A (en) * 1978-08-01 1981-04-07 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Method and reagent for the quantitative determination of hydrogen peroxide and precursors thereof

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2981606A (en) * 1955-06-20 1961-04-25 Lilly Co Eli Glucose indicator and method
JPS49131197A (de) * 1973-04-19 1974-12-16
US4098574A (en) * 1977-08-01 1978-07-04 Eastman Kodak Company Glucose detection system free from fluoride-ion interference
US4119405A (en) * 1978-02-13 1978-10-10 Miles Laboratories, Inc. Test means and method for interference resistant determination of oxidizing substances
DE2906732C2 (de) * 1979-02-21 1981-10-01 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren und Reagenz zur Bestimmung der Peroxidase

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4251629A (en) * 1977-07-29 1981-02-17 Wako Pure Chemical Industries, Ltd. Determination of hydrogen peroxide
US4260679A (en) * 1978-08-01 1981-04-07 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Method and reagent for the quantitative determination of hydrogen peroxide and precursors thereof
US4247631A (en) * 1979-01-31 1981-01-27 Millipore Corporation Reagent and method for the analytic determination of hydrogen peroxide

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0243125A2 (de) * 1986-04-19 1987-10-28 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. Verfahren zur Messung von Phenol und alpha-Naphthol, sowie ein Verfahren zur Messung der Aktivität von Enzymen
EP0243126A2 (de) * 1986-04-19 1987-10-28 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. Verfahren zur Messung von Wasserstoffperoxid oder zur Messung eines peroxidfreimachenden Enzyms oder biochemischen Substrats
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EP0243125A3 (en) * 1986-04-19 1989-01-18 Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. Method of measuring phenol and alpha-naphthol, and method of measuring the activity of enzymes

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