DE3029806A1

DE3029806A1 - Purinderivate, verfahren zu deren herstellung und daraus hergestellte arzneimittel

Info

Publication number: DE3029806A1
Application number: DE19803029806
Authority: DE
Inventors: Takayuki Kawasaki Naito; Susumu Tokyo Nakagawa; Taka-aki Ichikawa Chiba Okita; Haruhiro Tokyo Yamahita; Tetsuro Ichikawa Chiba Yamasaki
Original assignee: Bristol Myers Co
Current assignee: Bristol Myers Co
Priority date: 1979-08-06
Filing date: 1980-08-06
Publication date: 1981-03-26
Also published as: DK337680A; YU197080A; NL8004466A; IT8049425A1; GR76109B; YU45101B; GB2056448A; FR2463142A1; SE8005558L; LU82694A1; FI802401A; IT8049425A0; IT1188987B

Description

PATE N TAN WA LT IS J. RBITSTÖTTBR - ({ - W. KINZBBACH

3023806

PROP. DH. DK. DIPL. ING.

W. BUNTE (1O38-1O7O)

DR. ING.

DR. PHIL. DIPU CMISM.

K. P. HOLLER

DR. RER. NAT. DIPL. CHBM.

TELEFON! (080) 37 BB B3 TKLBXi B31B2O8 IBAH U

BAUKHSTHASBU 22, Θ0ΟΟ MÖNCHEN

München, den 6- August 1980 M/21 196

BRISTOL-MYERS COMPANY 345, Park Avenue
New York, N.Y. 10022
U.S.A.

Purinderivate, Verfahren zu deren Herstellung und daraus hergestellte Arzneimittel

130013/1021

Die vorliegende Erfindung betrifft im allgemeinen heterocyclische Kohlenstoff-Verbindungen mit pharmazeutischen und biologisch wirksamen Eigenschaften. Insbesondere betrifft die Erfindung neue Bronchodilatoren mit nichtadrenergischenp. · die glatte Muskulatur entspannenden Eigenschaften, welche sie bei der Überwindung von akuten Brondhospasmen und als Hilfsmittel bei der symptomatischen Bekämpfung chronischer, obstruktiver Lungenkrankheiten (z.B. Asthma, Bronchitis, Emphysem) besonders wertvoll machen. Sie betrifft auch deren Verwendung als therapeutische Mittel und Mittel, in denen ein oder mehrere der erfindungsgemäßen Verbindungen verwendet werden.

Bei einigen, nicht-adrenergischen Bronchodilatoren, sticht die Theophyllin-Gruppe der Xanthin-Derivate besonders hervor. Beispielsweise ist Aminophyllin, das A'thylendiaminsalz von Theophyllin, ein wirksamer Bronchodilator, es kann parenteral, oral oder rektal verabreicht werden und ist für Patienten geeignet, bei denen eine direkte Entspannung der Bronchialmuskulatur erfolgen soll. Ungeachtet ihrer verbreiteten Anwendung hat die Klasse der Xanthine der nichtadrenergischen Bronchodilatoren beträchtliche Nachteile !'hinsichtlich Magenreizung und kardiovaskulären und das Zentralnervensystem betreffenden Nebenwirkungen. Es besteht somit ein Bedarf nach neuen und wirksamen Bronchodilatoren mit erhöhter Aktivität und/oder weniger oder verringerten unerwünschten Nebenwirkungen. Es wurde gefunden, daß repräsentative erfindungsgemäße Verbindungen bei pharmakologischen Standard-Tests im Vergleich zu Aminophyllin

130013/1021

M/21 196

Y-

-6-

überlegene bronchodilatorische Aktivität bei geringeren Nebenwirkungen kardiovaskulärer Art und das Zentralnervensystem betreffend, haben.

Der basische Purinkern enthält, wie in der nachstehenden ebenen Formel gezeigt, einen sechs-gliedrigen Pyrimidinring mit einem ankondensierten 5-gliedrigen Imidazolring, wobei die Numerierung wie hier angegeben ist.

Es sind verschiedene Arten von Purin-Derivaten bekannt, wobei die Grundsubstanz Purin an einer oder mehreren Stellungen 2, 6 und 9 substituiert ist. Adenin ist 6-Aminopurin. Die nachstehenden Referenzen veranschaulichen solche Verbindungen.

1. R.K. Robins et al., J. Am. Chem. Soc, 83^, 2574 (1961) beschreiben die Synthese der Verbindung

als potentielles Antitumormittel aus 6-Chlor-9-(tetrahydro- 2-pyranyl)-purin.

130013/1021

INSPECTED

M/21 196

X-

2. US-PS 3 228 937 offenbart die Verbindung 6-Benzylamino-9~ tetrahydropyran-2-yl-9H-purin

als Inhxbierungsmittel gegen Welken und Absterben von grünen Blattpflanzen.

3. R. Marumoto, et al., Chem. Pharm. Bull., 23(4), 759-774 (1973) beschreiben unter anderem Verbindungen der Formel !

OH OH

worin R für Niedrig-alkyl steht. Es heißt, daß diese Verbindungen vasodilatorische Wirkung auf die Koronargefäße haben.

130013/1021 ORIGINAL INSPECTED

M/21 196

j 4. H. J. Schaeffer, et al., J. Am. Chem. Soc, 8]_, 197-201 (1959) beschreiben die Synthese von Verbindungen der Formel

j worin R für Cyclohexyl oder 2-Cyclohexenyl steht, als i wirksame Antikrebsmittel.

i 5. U.S. PS 3 917 837 beschreibt die Verwendung der Verbindung

; als anti-inflammatorisches Mittel.

j 6. U.S.-PS 3 862 189 betrifft Verbindungen der allgemeinen i Formel

worin unter anderem R₁ für Amino, Alkylamino, Aralkylamine etc.; und R₂ für Phenylalkyl, substituiertes Phenylalkyl, Tetrahydro-

130013/1021

OHQINAL /KfSPECTPn

M/21 196

chinoylalkyl, etc. stehen

als brauchbare Anti-Angina- oder bronchodilatorische Mittel.

7. U.S.-PS 3 930 005 beschreibt Verbindungen der allgemeinen Formel:

worin R„ und R₃ unter anderem Wasserstoff bedeuten und R₁ auch Niedrigalkoxy bedeuten kann, als Verbindungen mit antiinflammatorischer Wirkung.

8. K. Kikugawa et al., Chem. Pharm. Bull., 25 (7), 1811-1821 (1977) beschreiben die Synthese verschiedener 2-Thioadenin-Derivate der allgemeinen Formel:

R-S

worin unter anderem R und R₁ für Alkyl, Cycloalkyl, etc. stehen, als die Blutplättchenaggregation inhibierende Mittel. Spezielle Beispiele für derartige Verbindungen,

130013/1021

ORIGINAL INSPECTED

M/21 196

Z-

40 -

sind solche, bei denen R für Propyl oder n-Hexyl steht und R₁ n-Hexyl bedeutet; R und R₁ sind Cyclopentyl. Die Autoren kommen in ihrer Untersuchung zu dem Schluß, daß der Ribosylrest des 2-Thioadenosin-Derivates für eine wirksame Inhibierung der Blutplättchenaggregation wesentlich ist und nicht durch andere Substituenten ersetzt werden darf.

9. Die japanische veröffentliche Patentanmeldung 52-71492 (Farmdoc 53190Y) beschreibt Verbindungen der allgemeinen Formel

Ä>

R₃

worin R₁ für geradkettiges oder verzweigtes

C₅-C₁₀ Ccyloalkyl, der Formel

-C₁₀ Alkyl, Aralkyl oder Piperazinoäthyl

v_ C₇-C₁₁ Aralkyl, mono-substituiertes Aralkyl,

steht, worin R,

Cinnamyl oder Fluorenyl bedeutet; R₃ geradkettiges oder verzweigtes C₁-C₁₀ Alkyl,'C₅-C₁^Cycloalkyl, C₇-C₁₁ Aralkyl oder Piperazinoäthyl ist, wie oben definiert, wobei jedoch Verbindungen,.worin R₁ und R₃ Methyl, R₁ Methyl und R₃ Äthyl und ^₁-C₅-C₁₀ Cycloalkyl .und R₃X₁-C₄ Alkyl, C₅-C₁₀ Cycloalkyl oder C₇-C₁₁ Aralkyl bedeuten, ausgenommen sind. Die Verbindungen zeigen nachgewiesernermaßen eine inhibierende Wirkung auf die Blutplättchenaggregation und haben eine dilatierende Wirkung auf die Koronargefaße.

130013/1021

ORIGINAL INSPECTED

M/21 196

- yr-

10. Die Britische Patentschrift 1 493 684 beschreibt S-substituierte 2-Thioadenosine der Formel

R-S

OH OH
worin unter anderem R für geradkettiges oder verzweigtes

C₁-C₁₀-AIlCyI steht,

welche die Blutplättchenaggregation hemmt und die

Koronargefäße erweitert.

11. J.A. Montgomery, et al. J. Am. Chem. Soc, 8£ 409-411 (1958) beschreiben Adenin-Derivate der allgemeinen Formel

worin R für η-Butyl, Cyclopentyl oder Cyclohexyl steht, als potentielle Antikrebsmxttel.

130013/1021

-A-

12. Das belgische Patent 853 086 (Farmdoc 70719Y) beschreibt Verbindungen der allgemeinen Formel .

worin

entweder X für C₁-C, Alkoxy oder -NHR steht; R für H oder Niedrigalkyl steht; Y für C.-Cg Alkyl, C₃-C^₀ Cycloalkyl oder

Hydroxycycloalkyl, Phenyl, Halophenyl, Trifluormethylphenyl, Bicycloalkyl oder Hydroxybi-

cycloalkyl mit bis zu 12 Kohlenstoffatomen

1
oder -AR steht;

A Methylen oder Äthylen bedeutet;

R₁ Phenyl, Halo-phenyl, Trifluormethyl-phenyl, Bicycloalkyl oder Hydroxybicycloalky1 mit bis zu 12 C-Atomen bedeutet;

Q für H, C₁-Cg Alkyl, C₃-C₁₀ Cycloalkyl oder Hydroxycycloalkyl, Bicycloalkyl oder Hydroxybicycloalkyl mit bis zu 12 C-Atomen, Phenyl, Halophenyl, Trifluormethyl-phenyl oder AR steht,

oder X Halogen oder Niedrig-dialkylamino bedeutet,

Y für Methyl, Äthyl, Cyclopentyl, Phenyl, Halophenyl, Trifluormethyl-phenyl oder Benzyl steht und ·

Q wie vorstehend definiert ist.

Von diesen Verbindungen wird berichtet, daß sie bei der Behandlung von Psoriasis brauchbar sind.

130013/1021

ORIGINAL INSPECTED

-Al-

Die vorliegende Erfindung betrifft neue Purine der allgemeinen Formel I:

worin: ^v

A für NH, S oder O steht;

R Cj-C^-Alkyl oder Niedrigalkoxy, odor Cyclohexyl bedeutet; R₁ Cyclohexyl, 2-Cyclohexenyl oder einen Pyranrest bedeutet,

wobei Voraussetzung ist, daß wenn

A für NH steht, R C₁-C₄ Niedrigalkyl bedeutet und

R₁ Cyclohexyl oder 2-Cyclohexenyl bedeutet, und wenn

A für 0 steht; R C₁-C₄ Alkoxy bedeutet und

R₁ für einen Pyranrest steht,

oder deren pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze.

130013/1021

M/21 196

Diese Verbindungen inhibieren wirksam durch Histamin induziert« Bronchialverkrampfungen, indem sie direkt auf die Trachealmuskulatur wirken und die Spasmen beseitigen, wobei nur minima kardiovaskuläre Nebenwirkungen eintreten. Diese Verbindungen gehören also zu der Klasse der nicht-adrenergischen Bronchodilatoren.

Unter den bei der Beschreibung der Erfindung verwendeten Begriff "Niedrigalkyl" fallen sowohl geradkettige als auch verzeigtkettige Gruppen mit 1 bis einschließlich 4 Kohlenstoff atomen, beispielsweise Methyl, Äthyl, Propyl, Isopropyl, 1-Butyl, 1 -Methylpropyl, 2-Methylpropyl und te'rt.-Butyl. Halogen bedeutet Chlor, Brom, Fluor und Jod.

Bei der Beschreibung der vorliegenden Erfindung steht die Bezeichnung "pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz" für die Salzform einer Verbindung der Formel I, welche durch Kombination mit einer nicht-toxischen anorganischen oder organischen Säure, welche in anionischer Form verhältnismäßig nicht-toxisch ist, erhalten wurde. Beispiele nicht-toxischer, pharmazeutisch verträglicher Säureadditionssalze der Verbindungen der Formel I sind diejenigen Salze, welche mit Schwefelsäure, Chlorwasserstoffsäure, Phosphorsäure, Bromwasserstoffsäure, Jodwasserstoffsäure, Sulfamidsäure, Methansulfonsäure. Benzolsulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure, Essigsäure, Milchsäure, Bernsteinsäure, Äpfelsäure, Maleinsäure* Weinsäure, Citronensäure, Gluconsäure, Benzoesäure, Zimtsäure, Isäthionsäure, Fumarsäure, Mucinsäu Laevulinsäure und verwandten Säuren gebildet werden.

Die Überführung der Verbindungen der Formel I in die ent-

nicht-toxischen

sprechenden pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalze erfolgt auf herkömmliche Weise durch Vermischen der Base mit mindestens einem Moläquivalent einer gewählten Säure in einem inerten, organischen Lösungsmittel, wie Äthanol, Benzol, Äthylacetat, Äther, halogenierten Kohlen-

130013/1021

-AS-

Wasserstoffen und dergleichen. Das Isolieren des Salzes erfolgt nach an sich bekannten Verfahren, wie

Ausfällung mit einem nicht-polaren Lösungsmittel (z.B. Äther) in dem das Salz begrenzte Löslichkeit hat.

Erfindungsgemäß können einige Verbindungen der Formel I nach einem Verfahren hergestellt werden, bei dem man ein 2-Halo-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-aden±n der Formel II:

(ID

worin X für Brom, Fluor, Jod oder vorzugsweise Chlor steht, mit einem Alkalimetallalkoholat der Formel ROM, worin R wie oben definiert ist und M Natrium oder Kalium bedeutet, in einem inerten Lösungsmittel, bevorzugt einem Niedrigalkanol, ROH, worin R wie oben definiert ist, umsetzt, wobei man die Verbindungen der Formel I in Form der freien Base erhält. Erhöhte Temperaturen von etwa 50 ⁰C bis 200 ⁰C werden bei der Durchführung der Reaktion verwendet, vorzugsweise arbeitet man bei der Rückflußtemperatur des inerten ι Lösungsmittels oder in einem verschlossenen Rohr.

Man erhält die 2-Halo-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin-Zwlschenprodukte der Formel II nach dem folgenden Reaktionsschema für die bevorzugte Verbindung 2-Chlor-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin (Ha) .

130013/1021

M/21 106

(III)

Im allgemeinen suspendiert man das 2,6-Dichlor-9-(tetrahydropyran-yl)-9H-adenin-Ausgangsmaterial (III) in einem inerten Lösungsmittel, (z.B. Wasser, Niedrigalkanolen, wie Methanol, Äthanol), sättigt die Suspension mit Ammoniakgas und erhitzt die gesättigte Reaktionsmischung in einem verschlossenen Rohr auf etwa 30 ⁰C bis etwa 150 ⁰C, um die Reaktion zu vervollständigen.

Die Verbindungen der Formel I können auch nach einem im folgenden Reaktionsschema dargestellten Verfahren hergestellt werden:

130013/1021

M/21 196

-/ft-

katalytische,

^Hydriermg

(ID

(III)

RNH-

katalytische I^dfierung

NH₂

ίο

(Ia)

(Ib)

Verbindungen der allgemeinen Formel I, worin A für NH steht/ können auch erhalten werden, indem man 2-Chlor-9~(2-cyclohexenyl)-9H-adenin (II) oder 2-Chlor-9-cyclohexyl-9H-adenin (III) mit RNH₂ in einem reaktionsinerten Lösungsmittel, vorzugsweise einem Niedrigalkanol, wie Methanol oder Äthanol, kondensiert, wobei man das gewünschte Produkt der Formeln (Ia) oder (Ib) in Form der freien Base erhält. Die Reaktion erfolgt vorzugsweise in einem geschlossenen Reaktionsgefäß, wie einem verschlossenen Rohr, bei erhöhten Temperaturen im Bereich von etwa 50 ⁰C bis 200 ⁰C.

130013/1021

M/21 196

-yr-

Verbindungen der allgemeinen Formel I, worin A für S steht, erhält man, wenn man 2-Chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin (II) oder 2-Chlor-9-cyclohexyl-9H-adenin (III) mit einem Alkalimetallmercaptid der Formel RS-alk, worin alk für ^: Natrium, Kalium oder Lithium steht, und R wie oben definiert ist, in einem inerten Lösungsmittel umsetzt, bis sich die gewünschte frei Base der Formel I bildet, und dieses Produkt, falls gewünscht, in an sich bekannter Weise und wie es hierin auch beschrieben wird, in ein pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz überführt. Die erforderlichen "RS-alk" Alkalimetall-mercaptide erhält man vorteilhaft, indem man das Mercaptan mit Alkalimetallhydroxiden (z.B. Natrium- oder Kaliumhydroxid) oder vorzugsweise Alkylimetallhydriden (z.B. Natrium- oder Kaliumhydrid) in einem inerten Lösungsmittel behandelt. Die bei der Beschreibung der vorliegenden Erfindung verwendete Bezeichnung "inertes Lösungsmitt umfaßt alle Lösungsmittel, (z.B. Dimethylformamid), welche gegenüber den 2-Chloradenin-Ausgangsmaterialien der Formeln II und III oder den RS-alk Mercaptiden chemisch inert sind. Erhöhte Temperaturen im Bereich von etwa 50 ⁰C bis 150 ⁰C verwendet man vorzugsweise bei der Reaktion, die in der Regel 0,5 bis 24 Stunden dauert.

Verbindungen der allgemeinen Formel I, worin R₁ für Cyclohexyl steht (d.h. Ib) erhält man auch einfach durch Hydrierung der entsprechenden Produkte der Formel Ia. Bei einem zufriedenstellenden Verfahren hydriert man beispielsweise eine Verbindung der allgemeinen Formel Ia in einem nicht-reduzierbaren, inerten Lösungsmittel (z.B. Methanol, Äthanol, Wasser, wäßrigem Methanol, wäßrigem Äthanol) unter Verwendung eines üblichen Hydrierkatalysators. Beispiele= geeigneter Katalysatoren sind Palladium-Schwarz, Pd-BaSO., PtO₀, Ru-C, Rh-C, Raney Nickel, CuCrO, RhCIiP(CcH₁.)-.], und RuCl[P(CgH₅)₃]₃. Bevorzugter Katalsator ist Palladium auf

130013/1021

Aktivkohle. Vorteilhafte Ergebnisse wurden bei Raumtemperatur
und Atmosphärendruck erzielt, wenngleich Temperaturen und
Drücke für die Hydrierungsstufe nicht kritisch sind.

Erfindungsgemäß sind die Verbindungen der allgemeinen
Formel I und deren pharmazeutisch verträgliche Salze
geeignet, bei Säugetieren einen bronchodilatorischen Effekt
zu bewirken, wobei man bei Bedarf eine wirksame Dosis von
etwa 0,1 bis 20 mg/kg Körpergewicht an Verbindung der Formel I
verabreicht. Besonders bevorzugte Verbindungen sind '■

2-n-Propoxy-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin,

2-n-Propylamino-9-cyclohexyl-9H-adenin und !

9- (2-Cyclohexyl>-2-n-propylthio-9H-adenin. ;

Die Verabreichung kann sowohl oral als auch parenteral■erfolgen, d.h. intramuskulär, intravenös, intraperitoneal oder subkutan.
Der aktive Bestandteil kann auch durch Inhalieren, unter
Verwendung eines geeigneten Aerosolpräparates verabreicht
werden. Orale Verabreichung wird bevorzugt.

Eine weitere Ausführungsform der Erfindung ist ein pharmazeutisches Mittel in Dosiseinheitsform, das zur Erleichterung
von Bronchialspasmen bei Säugetieren brauchbar ist. Das
Mittel enthält als aktiven Bestandteil eine bronchodilatorisch
wirksame Menge einer Verbindung der allgemeinen Formel I
oder eines pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalzes
davon in Mischung mit einem pharmazeutisch verträglichen

Träger oder Verdünnungsmittel. ;

Die erfindungsgemäßen pharmakologisch wirksamen Verbindungen :

! können entweder einzeln oder gemischt ^:

mit anderen therapeutischen Mitteln verabreicht

werden. Sie können als solche verabreicht werden, im allge- '■ meinen jedoch werden sie in Form von pharmazeutischen Mitteln |

gegeben. Beispiele für solche Mittel sind Tabletten, Lutschtabletten, Kapseln, Pulver, Aerosolsprays, wäßrige oder ölige ! Suspensionen, Sirupe, Elixiere und wäßrige Lösungen.

130013/1021

Die Art der pharmazeutischen Mittel und der pharmazeutischen Träger oder Verdünnungsmittel hängt jedoch von der gewünschten Verabreichungsart ab. Orale Mittel können in Form von Tabletten oder Kapseln vorliegen und herkömmliche Bestandteile, wie Bindemittel (z.B. Sirup, Acacia, Gelatine, Sorbit, Traganth oder Polyvinylpyrrolidon), Füllmittel (z.B. Lactose, Zucker, Maisstärke, Calciumphosphat, Sorbit oder Glycin), Schmiermittel (z.B. Magnesiumstearat, Talk, Polyäthylenglycol oder Siliqa., zerfallsfördernde Mittel (z.B. Stärke) oder Befeuchtungsmittel (z.B. Natriumlaurylsulfat) enthalten. Flüssige orale Präparate können in Form von wäßrigen oder öligen Suspensionen, Lösungen, Emulsionen, als Sirupe, Elixiere, etc. oder als Trockenprodukt, das mit Wasser oder anderen geeigneten Trägern vor der Anwendung wieder aufbereitet wird, vorliegen. Solche flüssigen Präparate können herkömmliche Zusätze, wie Suspensionsmittel, Geschmacksmittel, Verdünnungsmittel oder Emulgiermittel enthalten. Zur parenteralen Verabreichung oder zum Inhalieren können Lösungen oder Suspensionen einer Verbindung der Formel I mit herkömmlichen pharmazeutischen Trägern verwendet werden, z.B. Aerosolspray zum Inhalieren, wäßrige .Lösungen zur intravenösen Injektion oder ölige Suspensionen zur intramuskulären Injektion.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen, pharmazeutischen Mittel und deren Verwendung als Bronchodilatoren werden in den nachfolgenden Beispielen noch genauer beschrieben.

130013/1021

^M/21196 :£: 302980Θ

Beispiel 1

2-Chlor-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H~adenin

(a) 2,6-Dichlor-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-purin

Eine Lösung von 2,0 g (10,6 mMol) 2,6-Dichlorpurin und 2 ml 3,4-Dihydro-2H-pyran in 20 ml Äthylacetat stellt man mit wasserfreier p-Toluolsulfonsäure auf pH 2 ein. Man erhitzt die Reaktionsmischung 1 Sturide auf 60 C, neutralisiert mit konz. Ammoniumhydroxid, wäscht mit Wasser, trocknet über Na₃SO₄ und engt im Vakuum ein. Kristallisation des Rückstandsmaterials aus Äthylacetatn-Hexan ergibt 2,6 g (96 %) 2,6-Dichlor-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-purin, Fp. 119-121 °C.

IR(KBr): 3100, 1600, 1560, cm"¹.
UV:X^Me0H 273 nm (£.9900).

ΙΠ el X

NMR (CDCl₃): 6 1,6-2,4 (6H, m) , 3,5-4,4 (2H, xn) ,

5,6-5,9 (1H, m), 8,28 (1H, s). Analyse C₁₀H₁₀Cl₂N₄O:

berechnet: gefunden:

C	98	H	69	N	51	Cl	,96
43,	12	3,	45	20,	57	25	,44
44,	3,	20,	25

130013/1021

M/21 196

3023806

(b) 2-Chlor-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin

Eine Suspension von 2,0 g (7,3 mMol) 2,6-Dichlor~9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-purin in 50 ml Methanol sättigt man bei 0 ⁰C mit Ammoniak, wobei sich eine Lösung bildet. Man erhitzt die Lösung 4 Stunden in einem verschlossenen Rohr auf 100 ⁰C und kühlt dann. Einengen der gekühlten Reaktionsmischung ergibt 1,55 g (84 %) 2-Chlor-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin, Fp. 204-210 ⁰C (Zers.).
IR(KBR): 3350, 3180, 1670, 1605 cm"¹.

UV:/l^Me0H 263 nm (£14300).

ΙΏ3Χ

NMR (DMSO-dg): 61,4-2,2 (6H, m), 3,5-4,2 (2H, m),

5,13 (1H, dd, J=11 und 3Hz), 7,73 (2H, br, s), 8,28 (1H, s).

Analyse C _I

berechnet: gefunden:

C	,34	H	77	N	61	Cl	97
47	,84	4,	71	27,	17	13,	10
46	4,	27,	14,

Beispiel

2-Methoxy-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin

130013/1021

M/21 196

n-

3029306

Eine Lösung von 253 mg (1 mMol) 2-Chlor-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin in 10 ml 1 N Natriummethylat in Methanol erhitzt man in einem verschlossenen Rohr 16 Stunden lang auf 100 ⁰C, kühlt ab und filtriert, wobei man 154 mg I'rodukt erhält. Eine zweite Fraktion ( 49 mg) , ^die man aus dem Filtrat erhält ergibt dies eine Gesamtausbeute von 20 3 mg (87 %) 2-Methoxy-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin, Fp. 199 ⁰C (Zers.)

IR (KBr): 3300, 1640, 1600 cm"¹.

267 nm ( £ 12 100) .

NMR (DMSO-d₆):

δ 1>4-2,2 (6H, m), 3,80 (3H, s), 3,2-4,2 (2H,m), 4,47 (1H, dd, J= 12 und 3 Hz), 8,04 (1H,s).

Analyse C₁

berechnet: gefunden:

C	OO	H	07	N	10
53,	73	6,	13	28,	50
52,	6,	28,

Beispiel 3

2-n-Propoxy-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin

Q-C₃H₇-O

NH,

Eine Lösung von 253 mg, (1 mMol) 2-Ch]or-9-(tetrahydropyran-2-yl) -9H-adenin in 10 ml 1 N Natrium-n-propoxid in n-Propanol hält man unter Stickstoffaimosphäre 1 Stunde

130013/1021 ORIGINAL INSPECTED

am Rückfluß. Man neutralisiert die Reaktionsmischung mit Essigsäure und engt im Vakuum zur Trockne ein. Verreiben des Rückstandsmaterials mit Wasser ergibt 213 mg Produkt, welches nachKristallisation aus Äthylacetat-n-Hexan 147 mg (57 %) analytisch reines 2-n-Propoxy-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin ergibt, Fp. 138,5-140 °C.

IR(KBr): 3500, 1630, 1605 cm"¹.

UV:X ^Me0H 268 nm (£12600).
max

NMR(CDCl₃): 51,03 (3H, J=7,5 Hz), 1,4-2,3 (8H, m), 3,4-4,2

(2H, m) , 4,2 (2H, t, J=7,5Hz), 5,4-5,7 (111, m) , 5,81 (2H, br, s), 7,71 (1H, s).

Analyse C..-,H₁ „Ν	5°2^:	C	H	N	,25 %
	56,30	6,91	25	,26 %
berechnet:	56,05	6,93	25
gefunden:	Beispiel 4
	(tetrahydropyran-2-yl)	-9H-adenin
2-(2-Butoxy)-9-

Umsetzung von 2-Chlor-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin mit 1N Natrium-2-butylat in 2- Butanol nach dem Verfahren des Beispiels 3 ergibt die Titelverbindung.

130013/1021

M/21 196 - *4- -

3029Ü06

Beispiel 5

9- (2-Cyclohexenyl) -2-n-propylaInino-9H-adenin

Eine Mischung von 300 mg (1,2 itiMol) 2-Chlor-9- (2-cyclohexenyl) ■ 9H-adenin und 0,3 ml n-Propylamin in 3 ml trockenem Methanol erhitzt man 15 Stunden in einem verschlossenen Rohr / auf 110 C und engt im Vakuum ein, wobei man ein öl erhält. Dieses öl unterwirft man einer Säulenchromatographie an Silicagel (20 g) unter Verwendung von Chloroform-Methanol als Eluierungsmittel, wobei man ein öl erhält, das bei gleichzeitigem Einengen mit Äthylacetat 282 mg 9-(2-Cyclohexenyl)-2-n-propylamino-9H-adenin ergibt, Fp. 73-80 C.

IR(KBr): 3300, 3150, 2920, 2860, 1630, 1600, 1535, 1490, 1470, 1405, 1360, 1200 cm"¹.

UV: λ ^Et0H 259 nm U5 700), 290 nm ( 5 300). max ^

NMR (DMSO-dg): 6 0,90 (3H, t, J=4,5Hz), 1,3-2,2 (8H, m) ,

3,26 (2H, t, J=6 Hz), 4,6-5,1 (1H, m) , 5,5-6,2 (3H, m), 6,56 (2H, s), 7,50 (1H, s).

Analyse C₁₄H₂₀N^₁J CH₃CO₂C₂H₅-I H₃O:

berechnet:
gefunden:

C	60	H	59	N	97
59,	48	7,	16	28,	72
59,	7,	28,

130013/1021

ORIGINAL INSPECTED

M/21 196

Beispiel 6

9-(2-Cyclohexenyl)~2-cyclohexylamino-9H-adenin

Eine Mischung von 300 mg (1,2 mMol) 2-Chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin und 1 ml Cyclohexylamin in 3 ml Äthanol erhitzt man 89 Stunden in einem verschlossenen Rohr auf 120-125 ⁰C und engt dann im Vakuum ein, wobei man ein öl erhält. Reinigen des Rückstandsöls durch Säulenchromatographie an Silicagel ergibt 288 mg (77 %) 9- (2-Cyclohexenyl) ^-cyclohexylainino-gH-adenin, Fp. 108-111 ⁰C.

IR(KBr): 3315, 3170, 2925, 2845, 1630, 1600, 1530, 1470, 1405 cm"¹.

224 nm (£26 500), 259 nm (£11 100), 291 nm (£9 900).

NMR(CDCl₃): δ 0,9-2,3 (16H, m) , 3,75 (1H, br, s) , 4,95 '(1H, br,s 5,4-6,2 (2H, m), 7,42 (1H, s).

Analyse C₁ .,H₀ .N,.:

berechnet: gefunden:

C	36	H	74	N	90
65,	40	7,	95	26,	71
65,	7,	26,

130013/1021 __;; ORIGINAL INSPECTED

M/21 196

302GB06

Beispiel 7

9-Cyclohexyl-2-n-propy!amino-9H-adenin

Eine Lösung von 160 mg (0,59 mMol) 9-(2-Cyclohexenyl)~2~npropylamino-9H-adenin in 16 ml Methanol hydriert man über Nacht mit 160 mg 10 % Palladium-auf Aktivkohle und filtriert, um den Katalysator zu entfernen. Einengen des Filtrats im Vakuum ergibt 141 mg (88 %) g-Cyclohexyl-^-n-propylamino- , 9H-adenin, Fp. 155-156 ⁰C.

IR (KBr): 3310, 3160, 2930, 2850, 1635, 1535, 1485, 1475, 1410 cm"¹.

UVyl^Et0H 223 nm (i"24 100), 258,5 nm (E 8 800), max ^u

289,5 nm (£8 400) .
NMR (DMSO-d,): 6 0,89 (3H, t, J=7,5Hz), 1,1-2,2 (12H, m) ,

3,13 (2H, t, J=6Hz), 3,7-4,4 (1H, m), ■

6,06 (1H, t, J=6Hz), 6,52 (2H, s) , 7,19(1H, s) .'

Analyse C₁₄H-	₂Ν₆·₂Η₂Ο:	C	34	H	18	N	66
		59,	68	8,	98	29,	51
berechnet:		59,		7,		29,
gefunden:

130013/1021 ORIGINAL INSPECTED

M/21 196

Beispiel 8

9-Cyclohexyl-2-cyclohexylamino-9H-adenin

Eine Lösung von 180 mg (0,58 mMol) 9-(2-Cyclohexenyl)-2-cyclohexylamino-9H-adenin in 10 ml Äthanol hydriert man über Nacht mit 150 mg 10 % Palladium-auf-Aktivkohle und filtriert. Einengen des Filtrats im Vakuum ergibt 175 mg (97%) B-Cyclohexyl-^-cyclohexylamino-gH-adenih, Fp. 109-117 ⁰C.

IR(KBr): 3315, 3160, 2930, 2850, 1630, 1590, 1530, 1470, ^Et0H

1405 cm"¹.

UV: λ ^Et0H 224 nm (£25 600), 259 nm (£10 100), 290,5 nm(£9100)

NMR(CDCl₃): δ 0,9-2,4 (2OH, m), 3,43-4,9 (2H, m), 7,42 (1H, s). Analyse C₁₇H₂₆N₆-Ic₂H₅OH:

berechnet: gefunden:

C	06	H	66	N	90
64,	65	8,	59	24,	26
64,	8,	25,

130013/1021 ORIGINAL INSPECTED

M/21 196

Beispiel 9

9-Cyclohexyl-2-(2-butylamino)-9H-adenin

CH₃CH₂CHNH . CH,

Umsetzung.von 2-Chlor-9-cyclohexyl-9H-adenin mit sek.-Butylamin ; nach dem Verfahren des Beispiels 5 ergibt die Titelverbindung.

Beispiel 10

9-(2-Cyclohexenyl)-2-n-propylthio-9H-adenin

Eine Mischung von 159 mg (0,64 mMol) 2-Chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin, 223 mg (4,65 mMol) 50 %-igem Natriumhydrid und 2 ml n-Propyl-mercaptan in 10 ml N,N-Dimethylformamid erhitzt man 5 Stunden untei^Stickstof f am Rückfluß, gießt dann in Eiswasser und neutralisiert mit 1N HCl. überschüssiges Mercaptan entfernt man durch Eindampfen bei verringertem Druck, die zurückbleibende Lösung extrahiert man mit Chloroform, wäscht dann mit Wasser, trocknet über

130013/1021 . . ORIGINAL INSPECTED

M/21 196

- >er- -30-

3029C06

Na₂SO₄ und filtriert. Man engt das Filtrat ein, reinigt das Rückstandsmaterial durch Silicagel-Chromatographie (5 g) unter Verwendung von 1 % MeOH-CHCl₃ als Eluierungsmittel, wobei man 167 mg (90 %) 9-(2-Cyclohexenyl)-2-n-propylthio-9H-adenin erhält, Fp. 108-113 ⁰C.

IR(KBr): 3310, 3150, 2920, 1655, 1585, 1450, 1320, 1240 cm .

UV:^^Et0H 237 nm (£23 300), 278 nm (£13 750).

in α. χ

NMR (CDCl₃): 6 1,01 (3H, t, J=7Hz), 1,90 (8H, m), 3,07 (2H,t_r

J=7Hz), 5,10 (1H, m), 5,82 (2H, s), 5,92 (2H, m) 7,60 (1H, s).

Analyse C₁-I	3₁₉N₅S:	C	10	H	62	N	20	S	08
		58,	90	6,	01	24,	90	11,	41
berechnet:		57,		7,		23,		11,
gefunden:

Beispiel 11

9-Cyclohexyl-2-n-propylthio-9H-adenin

U-C₃H₇S

! Eine Mischung von 136 mg (0,54 mMol) 2-Chlor-9-cyclohexyl-9H-

adenin, 2,3 ml n-Propyl-mercaptan und Natriumhydrid (220 mg, ; 4,5 mMol) in 12 ml Ν,Ν-Dimethylformamid erhitzt man vorsichtig

130013/1021

• ' O¹FiIGlNAL INSPECTED

M/21 196 -

ο. _ 3020806

2,5Stunden am Rückfluß. Nach dem Abkühlen neutralisiert man die Mischung mit 1N HCl und engt ein, um überschüssiges Mercaptan zu entfernen. Das Rückstandmaterial wird mit Chloroform und Wasser geschüttelt und die organische Schicht wäscht man mit Wasser, trocknet über Natriumsulfat und engt im Vakuum ein, wobei man ein öl erhält. Die Reinigung des öligen Rückstands erfolgt durch Chromatographie an Silicagel unter Verwendung von MeOH-CHCl^. (1:99), wobei man ein Material erhält, das, kristallisiert aus Cycüohexan, 112 mg (70 %) 9-Cyclohexyl-2-n-propylthio-9H-adenin als farblose Prismen ergibt, Fp. 14 9-150 ⁰C.

IR(KBr): 3300, 3120, 2920, 1650, 1585, 1435, 1305, 1220 cm"¹. UV:/t^Et0H 237 nm (£23 900), 278 nm (£13 800).

C	10	II	62	N	20	S	08
58,	07	6,	27	24,	98	11,	83
58,	7,	23,	10,

NMR (CDCl₃): δ 1,06 (3H, t, J=7Hz), 1,80 (12H, m),

3,14 (2H, t, J=7Hz), 6,07 (2H, s), 7,70 (1H, s)

Analyse C₁-H₀₁N₁-S:

berechnet: gefunden:

Bei einem Alternativverfahren zur Herstellung der Titelverbindung verwendet man das Produkt gemäß Beispiel 10 als Ausgangsmaterial. So ergibt katalytische Hydrierung von 9-(2-Cyclohexenyl)-2-n-propylthio-9H-adenin in Äthanol mit 10 % Palladium-auf-Aktivkohle 9-Cyclohexyl-2-n-propylthio-9H-adenin.

130013/1021

ORIGINAL INSPECTED

M/21 196 -

3023806

Beispiel 12

. Pharmakologische Bewertung

A. Bronchodilator-Wirkung bei in vitro Versuchen

Trachea-Ketten von Meerschweinchen werden nach dem Verfahren von A. Akcasu, Arch. Int. Pharmocodyn. Ther., 122 _f201,

(1959) präpariert. Die Reaktion auf die jeweilige Testverbindung wird nach der Magnus-Methode aufgezeichnet und in % der mit 0,1 γ/ml Isoproterenol vor jedem Versuch erhaltenen maximalen Reaktion ausgedrückt. Die bronchodilatorische Wirkung (in vitro) von Aminopenicillin und der Testverbindungen nach den Beispielen 1 bis 3 wird nachstehend als EC---Wert ausgedrückt (Konzentration in γ/ml welche eine Relaxation bewirkt, die 50 % der maximalen Reaktion auf 0,1 γ/ml Isoproterenol entspricht.

In vitro Test-Ergebnisse

Verbindung gemäß Beispiel EC,-_n

(γ/ml)

1 0,45

2 >3

3 0,17

5 0,47

6 0,24

7 0,75

8 0,21

10 0,02

11 0,19 Aminophyllin 16,6

130013/1021
ORIGINAL INSPECTED

M/21 196 -

w 3020b06

B. Bronchodilatorische und hypotensive Wirkung in vivo

Die bronchodilatorische Wirkung in vivo von Aminophyllin und den Testverbindungen wurde nach einer Abwandlung des von L.G.W. James, in J. Pharm. Pharmac, 21, 379, (196 9) beschriebenen Verfahrens bestimmt, wobei die Abnahme des intratrachealen Druckes (ITP) beim Meerscheinchen gemessen wurde. Die Trachea eines anaesthetisierten Meerschweinchens wurde mit einer Kanüle versehen und der intratracheale Druck (ITP) bei künstlicher Beatmung auf einem Polygraph aufgezeichnet. Der arterielle Blutdruck (ABP; welcher hypothesive Wirkung anzeigt) wurde während des Experiments ebenfalls gemessen. Es wurde entweder intravenöse oder intraduodenale Verabreichung angewendet. Die nachstehenden Ergebnisse zeigen die bronchodilatorische Wirkung (ITP) als ED,.- Wert (Dosis in mg/kg welche eine 50 %-ige Abnahme des intratrachealen Druckes bewirkt) und die hypotensive Wirkung (ABP) als ED „-Wert (Dosis in mg/kg, die den arteriellen Blutdruck um 20 % senkt).

Das Verhältnis von hypotensivem ED~₀ Effekt / bronchodi latorischem ED^_n Effekt erlaubt eine Einschätzung der Trennung von gewünschter bronchodilatorischer Wirkung und unerwünschter (hypotensiver) kardiovaskulärer Wirkung bei den Verbindungen. Diejenigen Verbindungem welche die größten ABP/ITP Verhältniszahlen aufweisen, haben die größte Trennung bronchodilatorischer Wirkung von hypotensiver Nebenwirkung.

130013/1021

ORIGINAL INSPECTED

M/21 196	*~3H^:*	ABP ED₂₀	3029806
		>!
Verbindung gem. Beisp.	■ Intravenöse Testergebnisse	>1	Verhältnis ABP/ITP
1	(mg./kg) 2TP. ED₅₀	1.9	_
2	0.23	>3	-
3	2.2	2.4	7.3
5	0.26	2.8	>2.1
6	1.4	>3	<0.8
7	>3	>3	5-7
8	0.49	>3	>2
10	1.5	1.4	>9.7
11	0.31	ebnisse	>2.7
Aminophyllin	1.1	ABP ED^_n	2.4
	0.58	13.5
Verbindung · nach Beisp.	Intraduodenale Testerg	9.5	Verhältnis ABP/ITP
3	(mg. Ag) ITP ED₅₀	9.6
Aminophyllin	1.4	1.6
5.9

Beispiel

13

Pharmazeutische Mittel

A. Tabletten: Die Verbindungen der allgemeinen Formel I werden gemäß dem folgenden Beispiel zu Tabletten geformt:

Material

2-n-Propoxy-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin

Magne s iumstearat
Maisstärke

Maisstärke, vorgeliert Lactose

20,0 g

1,3 g

12,4 g

1,3 g

215,0 g

130013/1021

M/21 196 -

Die vorstehenden Materialien werden in einem Doppelmischer vermischt, dann granuliert und zu Tabletten gepreßt, wovon für jede 250 mg verwendet wird. Jede Tablette enthält etwa 20 mg aktiven Bestandteil. Die Tabletten können mit Teilungslinien versehen und geviertelt werden, so daß man leicht eine Dosierungseinhext von 5,0 mg aktivem Bestandteil erhalten kann.
B. Kapseln:

Die Purinderivate der allgemeinen Formel I werden nach dem folgenden Beispiel zu Kapseln formuliert:

Material Menge

2-n-Propoxy-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin 50,0 g

Lactose 221,0 g

Magnesxumstearat 4,0 g

Die vorstehenden Materialien werden in einem Doppelmischer gemischt und Hartgelatinekapseln Nr. 1 werden mit je 275 mg der Mischung gefüllt. Jede Kapsel enthält 50 mg aktiven Bestandteil.

130013/1021

Claims

Patentansprüche

1. Verbindungen der allgemeinen Formel:

worin:

A für NH, S oder O steht,

R für C₁-C₄-Al]CyI oder Niedrigalkoxy, oder Cyclohexyl

steht,

und
R₁ für Cyclohexyl, 2-Cyclohex;enyl oder einen Pyranrest

steht,

wobei Voraussetzung ist, daß

wenn A für NH steht, R Cj-C.-Alkyl oder Cyclohexyl ist

und
R₁ Cyclohexyl oder 2-Cyclohexenyl

bedeutet; wenn A für S steht, R C-C. Alkyl bedeutet und

R₁ Cyclohexyl oder 2- Cyclohexenyl ist;

130013/1021

und

wenn A für O steht, R C₁-C₄-AIkOXy bedeutet und

R. für einen Pyranrest steht,

sowie deren pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze.

2. Verbindungen nach Anspruch 1, nämlich:

2-Methoxy-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin / 2-n-Propoxy-9-(tetrahydropyran-2-yl)-9H-adenin; 9-(2-Cyclohexenyl)-2-n-propylthio-9H-adenin, 9-Cyclohex yl-2-n-propylth±or9H-adenin, 9-(2-Cyclohexenyl)-2-n-propylamino-9H-adenin; 9-(2-Cyclohexenyl)-2-cyclohexylamino-9H-aden-iⁿf 9-Cyclohexyl-2-n-propylamino-9H-adenin; 9-Cyclohexyl-2-cyclohexylamino-9H-adenin, oder deren pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze.

3. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man

i) wenn A für O steht, 2-Halo- ?- (tetrahydro-pyran-2-yl) -9H-adenin, eine Verbindung der allgemeinen Formel:

13 0 013/1021 ORIGINAL INSPECTED

M/21 196 - 3 -

worin X Halogen bedeutet,

mit einem Alkalimetallalkoholat der Formel ROM, worin R die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen besitzt und M für Natrium oder Kalium steht, in einem inerten Lösungsmittel umsetzt, wobei man die gewünschten Verbindungen als freie Base erhält;

ii) wenn A für NH steht,

2-Halo-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin oder 2-Halo-9-cyclohexyl-9H-adenin mit einem Amin der Formel RNH„ in einem inerten Lösungsmittel kondensiert, wobei man die gewünschten Verbindungen als freie Base erhält;
und

iii) wenn A für S steht,

2-Halo-9-(2~Cyclohexenyl)-9H-adenin oder 2-Chlor-9-cyclohexyl-9H-adenin mit einem Alkalimetallmercaptid der Formel RS-alk, worin alk für Natrium, Kalium oder Lithium steht, in einem inerten Lösungsmittel umsetzt, wobei man die gewünschten Verbindungen als freie Basen erhält.

4. Pharmazeutisches Mittel, enthaltend eine wirksame Dosis mindestens einer Verbindung nach Ansprüchen 1 oder 2 in einem pharmazeutisch verträglichen Träger und/oder mit weiteren, pharmazeutisch verträglichen Zusätzen.

130013/1021