DE2905844A1 - Verfahren zur abtrennung der isoenzyme von kreatinkinase und mittel zur durchfuehrung des verfahrens - Google Patents
Verfahren zur abtrennung der isoenzyme von kreatinkinase und mittel zur durchfuehrung des verfahrensInfo
- Publication number
- DE2905844A1 DE2905844A1 DE19792905844 DE2905844A DE2905844A1 DE 2905844 A1 DE2905844 A1 DE 2905844A1 DE 19792905844 DE19792905844 DE 19792905844 DE 2905844 A DE2905844 A DE 2905844A DE 2905844 A1 DE2905844 A1 DE 2905844A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- exchange resin
- resin
- bed
- mixture
- anion exchange
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/12—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/814—Enzyme separation or purification
- Y10S435/815—Enzyme separation or purification by sorption
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Superconductors And Manufacturing Methods Therefor (AREA)
- Coupling Device And Connection With Printed Circuit (AREA)
- Auxiliary Devices For Music (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
DR.-ING. WALTER ABITZ DR. DIETER P. MORF
DIPL.-PHYS» Mo GBITSCHNEDEB
Patentanwälte
15- Februar 1979
Poatanachrift / Postßl Adtirooc
Postfach 8SO 1OB, SOOO München 8β
PlensenauerßtraßQ 28 Ό· Π
Telefon 98 33 22 tä
Telogrammo: Chomindua München
: CO) 523992
XP-0147
E. Ι» DU PONT DE NEMOURS AND COMPANY
Wilmington, Delaware, VOSt.A.
Verfahren zur Abtrennung der Isoenzyme von Kreatinhinase und
Mittel sur Durchführung des Verfahrens
• c. / r ρ c η
-^ j ι .- c- ο ./
IP-Ol47
Il 2SQ5844
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Isolierung von MB-Kreatinkinase.
Sie betrifft ein Verfahren zur Isolierung von MB-Kreatinkinase von dem MM-Isoenzym und mit einer gewissen Modifikation auch
von dem Isoenzym BB. Kreatinkinase, die in manchen Literaturstellen
auch als Kreatinphosphokinase bezeichnet wird, wird abgekürzt zu CK. Es gibt drei bekannte CK-Isoenzyme, wobei
das MM vorwiegend in dem Skelettmuskelgewebe, das BB vorwiegend im Gewebe des Gehirns und das MB vorwiegend im Herzgewebe gefunden
werden. Die Anwesenheit erhöhter CK-MB Gehalte im Serum zeigt einen Myocardinfarkt an.
Es gibt verschiedene Methoden zur Trennung der CK-Isoenzyme, einschließlich der Elektrophoresen, wie sie in American Journal
of Cardiology 33, Seite 650 (1974) beschrieben werden und der Ionenaustaucher-Chromatographie,
die in Clinical Chemistry 20, Seite 36 (1974) beschrieben wird. Einige Forscher haben die
Anwendung eines handelsüblichen Anionenaustauscherharzes mit ■
Diäthylaminoäthyl-Substituenten, DEAE Sephadex, für die Trennung durch Ionenaustauscher-Chromatographie vorgeschlagen; Clin. Chem.
Acta, 38, Seiten 285-9o (1972) ; Clin. Chem. 21, Seite 1O88 (1975). Andere haben empfohlen, diese Verfahrenweise zu.modifizieren
durch Anwendung von DEAE Cellulose, Clin.Chem. 21, Seite 392 (1975, DEAE Glasperlen, Clin. Chem. 21, Seite 844,
(1975) und eines anderen handelsüblichen Harzes, eines starken Anionenaustauschers, dem Handelsprodukt AG MP-I der Bio-Rad
Laboratories, Clin. Chem. 22, Seite 92 (1976). Bei allen diesen chromatographischen Verfahren handelt es sich bei dem zuerst zu
eluierenden Isoenzym um das allgemein vorwiegende CK-MM. Bei diesem handelt es sich gewöhnlich nicht um das Isoenzym,an dem das
Hauptinteresse besteht. So erfordern diese Methoden einen zusätzlichen Zeitaufwand und eine zusätzliche Stufe zur Isolierung
des CK-MB. ■
9 03833/0853
Durch die Erfindung wird ein Verfahren zum Eluieren von CK-MB
als erste Fraktion aus einem Ionenaust'auscherharzbett bereitgestellt, wodurch die Analyse beschleunigt und vereinfacht wird
und die CK-MB-Analyse leichter automatisiert werden kann.
Beim erfindungsgemässen Verfahren handelt es.sich bei dem
zur chromatographischen Trennung der CK-Isoenzyme verwendeten Ionenaustauscherharz um ein Gemisch von Kationen- und Anionenaustauscherharzen.
Bei geeigneter Wahl des Harzes und der EIutionsbedingungen ist das zuerst aus dem gemischten .Harzbett zu
eluierende Isoenzym das CK-MB. Bei dem bevorzugten gemischten Harzbett handelt es sich um ein Gemisch aus einem schwach basischen
Anionenaustauscherharz und einem schwach sauren Kationenaustauscherharz
.
Es ist ersichtlich, dass die Wahl eines Harzgemisches sowie der verschiedenen Elutionsparameter, wie dem pH-Wert, der Grosse des
Harzbetts und der Probe, der Elutionsgeschwindigkelt und dergleichen
miteinander in Beziehung stehen. In der folgenden Beschreibung bevorzugter Ausführungsformen werden spezielle Harze
und Bedingungen aufgeführt. Bei diesen Parametern handelt es sich um bevorzugte Parameter, jedoch werden hierdurch nicht andere
Kombinationen von Harzen oder Harzgemischen und Elutionsparametern
aus dem Rahmen der vorliegenden Erfindung ausgeschlossen.
Ist einmal ein spezielles gemischtes Harzbett gewählt, so kann die Bestimmung der optimalen Elutionsparameter leicht vom
Fachmann vorgenommen werden.
Das erfindungsgemäss bevorzugte Bett aus gemischtem Harz stellt
ein Gemisch aus einem DEAE-substituierten quervernetzten Dextran-Anionenaustauscherharz
und einem Kationenaustauscherharz dar, in dem ein Acrylpolymergitter mit einer sauren fraktionellen
Gruppe substituiert ist. Derartige Harze sind im Handel erhältlich, wobei das Anionenaustauscherharz unter dem Namen DEAE
"Sephadex" A-25 und das Kationenaustauscherharz unter dem Namen "Bio-rex 70" vertrieben werden. Bevorzugt ist ein Verhältnis von
909833/0853
5 bis 10 abgesetzten Bettvolumina des Kationenaustauscherharzes pro abgesetztes Bettvolumen des Anionenaustauscherharzes, wobei
ein Volumenverhältnis von etwa 6:1 besonders bevorzugt ist.
Präparatsätze bzw. Kits, die die vorstehenden Harzgemische enthalten, insbesondere Kits, in denen das Harz in Säulen gepackt
bzw. gefüllt ist, werden ebenfalls von der Erfindung umfasst. Bei der Anwendung werden die erfindungsgemässen gemischten
Harze im allgemeinen in einen Puffer eingetaucht. Der bevorzugte pH-Wertbereich für die bevorzugten erfindungsgemässen
Harze liegt bei etwa 6,0 bis etwa 6,4. Am unteren Ende dieses Bereichs werden CK-MM und CK-BB leichter durch das Harz zurückgehalten.
Am oberen Ende des pH-Wertbereiches wird CK-MB leichter eluiert, jedoch tritt auch eine gewisse Elution von
CK-BB auf. Erhöhte Ausbeuten an CK-MB und CK-BB erhält man aus der Säule, wenn die Grosse der Probe erhöht wird.
Bei der bestmöglichen Durchführungsform für die Erfindung wird das gemischte Harzbett wie folgt hergestellt. DEAE-Sephadex A-25
wird in einem Puffer, vorzugsweise Morpholinäthylsulfonsäure, eingestellt auf. den pH-Wert 6,0, während 48 Stunden hydratisiert.
Am Ende dieses Zeitraums wird der pH-Wert mit HCl wieder auf 6,O eingestellt. Bio-Rex 70 (Korngrösse 0,149-0,074 mm bzw.
100-200 mesh) wird in dem gleichen Puffer vom pH-Wert 6,0 während des gleichen Zeitraums hydratisiert, worauf der pH-Wert
erneut mit Natriumhydroxid auf 6,0 eingestellt wird. Kleine Teilchen werden von beiden Harzen entfernt und ein abgesetztes
Bettvolumen Sephadex wird zu 6 abgesetzten Bettvolumen Bio-Rex unter leichtem Rühren gefügt. Man vermischt weitere
15 Minuten vorsichtig und der pH-Wert wird auf 6,0 eingestellt. Schliesslich wird das Harzbett mit drei Bettvolumina des Puffers,
eingestellt auf den pH-Wert 6,0, gewaschen. Man belässt das Harz eingetaucht in dem auf den pH-Wert 6,0 eingestellten
Puffer. Unter diesen Bedingungen ist das zum Eluieren von CK-MB von der Säule verwendete Eluiermittel entionisiertes Wasser.
909833/0853 "ORIGINAL INSPECTED
Diese Bedingungen lassen sich bevorzugt der. Trennungsverfahrensweise mittels einer Testpackung anpassen, die auf einem
automatischen klinischen Analysator, aca,(Handelsprodukt der E. I. du Pont de Wemours and Company) verwendet wird.
Säulen in aca-Testpackungsköpfen bzw. -Rohrverbindern mit einem
Volumen von 1,7 ml können mit dem wie vorstehend beschrieben hergestellten Gemisch von Bio-Rex 70 und DEAE Sephadex A-25
gepackt bzw. gefüllt werden. Jede Testpackung kann eine einzige Probe von 0,34 ml Volumen aufnehmen, die auf die Harzsäüle aufgespritzt
wird. Die Proben werden mit 2,0 ml entionisiertem Wasser in die Reaktionskammer der Packung in einer Geschwindigkeit
von 1,0 ml/Min, eluiert. ■
Die Anwesenheit von Kreatinkinase in dem Eluiermittel bestimmt man durch Modifikation der UV-enzymatischen Untersuchung, die
von Oliver, I.T. Biochem J., 61, Seite 116 (1955) und Rosalki,
S„B., J. Lab. Clin. Med., 69, Seite 696 (1967) beschrieben wird.
Die Bildungsgeschwindigkeit von NADH2, das bei 340 nm absorbiert,
ist proportional zur Konzentration der Kreatinkinase.
Die Methode von Oliver-Rosalki unterscheidet nicht zwischen den CK-Isoenzymen, jedoch kann die Wirksamkeit der chromätographischen
Trennung der Isoenzyme wie folgt gezeigt werden.
.Die Gewinnung der drei CK-Isoenzyme kann durch Messung ihrer
Einzelaktivität vor und nach dem Eluieren durch die Säule mit dem gemischten Harzbett bestimmt werden. Bei der Isoenzymquelle,
die für diese Bestimmungen verwendet wird, handelt es sich um menschliches Gewebe. Die nachstehende Tabelle zeigt typische
Isoenzymgewinnungen, unter Anwendung der vorstehend beschriebenen Säule mit dem gemischten Harzbett.
9 O9JL3 3/ 0 8 5 3·
IP-0147
TABELLE I
(Säulenelution der CK-Isoenzyme)
(Säulenelution der CK-Isoenzyme)
CK-Isoenzym | Aktivität | Aktivität | Prozent |
(in menschlichem | (IE bzw.IU/1) | (IE bzw.IU/1) | Gewinnung |
Serum) | ohne Säule | mit Säule | |
MM | 134 | 1 | -il % |
MB | 286 | 196 | 69 % |
MM | 197 | 2 | 1 % |
BB | 785 | 361 | 46 % |
Beispiel 2 |
Unter Verwendung des gleichen Gemischs der Ionenaustauscherharze und der gleichen Säulengrösse mit einer Probengrösse
von 0,20 ml und Eluieren der Säule mit 2,0 ml entionisiertem Wasser in einer Geschwindigkeit von 0, 5 ml/Min, werden im
wesentlichen das gesamte CK-MM und CK-BB zurückgehalten, wobei lediglich das CK-MB-Isoenzym gewonnen wird. Die Wirkung
des pH-Wertes des Harzes auf die Leistungsfähigkeit der Säule mit dem gemischten Harzbett unter diesen Bedingungen wird in
der folgenden Tabelle gezeigt:
(Säulenelution | 107 | der CK-Isoenzyme) | der Säule |
CK-Isoenzym | 297 | Aktivität (IE bzw. IU/1) | ,4 |
124 | Säule mit Säule | ||
(in menschlichem ohne | pH-Wert des Harzes | ||
Serum) | 6,1 6,25 6 | ||
0 2 84 | |||
MM | 120 241 283 | ||
MB | 0 13 95 | ||
BB | |||
909833/0853 ORIGiNAL INSPECTg0
Zusammenfassend kann erfindungsgemäss das MB-Isoenzym der
Kreatinkinase aus einem Gemisch von Kreatinkinase-Isoenzymen durch Ionenaustauscher-Chromatographie abgetrennt werden. Die
Anwendung eines Gemischs von Kationen- und Anionenaustauscher^-
harz ermöglicht bei dieser Verfahrensweise die Elution des MB-Isoenzyms aus dem gemischten Harz, wohingegen die anderen
Isoenzyme gänzlich oder teilweise zurückgehalten werden. Gemäss
einer bevorzugten Ausführungsform handelt es sich bei dem
gemischten Harz um ein Gemisch eines schwach basischen Anionenaustauscherharzes und eines schwach sauren Kationenaustauscherharzes.
Ende der Beschreibung
909833/0853
Claims (1)
- Patentansprüche1« Verfahren zur Abtrennung der Isoenzyme von Kreatinkinase
aus einem Gemisch der Isoenzyme durch Kontakt des Gemischs mit einem lonenaustauscherharz und selektives Eluieren der Isoenzyme von dem Harz, dadurch gekennzeichnet, dass man das Gemisch mit einem Bett gemischter Harze in Kontakt bringt und zuerst
das MB-Kreatinkinaseisoenzym eluiert«,2„ Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man als Bett aus gemischten Harzen ein Gemisch eines schwach basischen Anionenaustauscherharzes und eines schwach sauren Kationenaustauscherharzes einsetzt»3» Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass man als Anionenaustauscherharz ein Diäthylaminoäthyl-substituiertes quervernetztes Dextran und als Kationenaustauscherharz ein
Acrylpolymergitter, das durch eine saure funktioneile Gruppe
substituiert ist, einsetzt.4. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass man ein Verhältnis von Kationenaustauscherharz zu Anionenaustauscherharz von 5:1 bis 10:1 einsetzt.5. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, dass man ein Verhältnis von Kationenaustauscherharz zu Anionenaustauscherharz von etwa 6:1 einsetzt.909833/0853IP-014723058446. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass man das Bett aus dem gemischten Harz auf einen pH-Wort von etwa 6,0 bis etwa 6,4 puffert.7. Mittel zur Durchführung des Verfahrens nach einem der Ansprüche 1 bis 6, bestehend im wesentlichen aus einem Bett gemischter Harze.8. Mittel nach Anspruch 7, in dem das Harz in einer Pufferlösung in eine Säule gepackt ist.9. Mittel nach Anspruch 8, in dem das Bett aus gemischtem Harz ein Gemisch aus einem Diäthylaminoäthyl-substituierten quervernetzten Dextran-Anionenaustauscherharz und einem Kationenaustauscherharz mit einem Acrylpolymergitter, substituiert durch eine saure funktionelle Gruppe ist, worin das Verhältnis von Kationenaustauscherharz zu Anionenaustauscherharz 5:1 bis 10:1 beträgt.10. Mittel nach Anspruch 9, in dem das Verhältnis von Kationenaustauscherharz zu Anionenaustauscherharz etwa 6:1 beträgt und der pH-Wert des Puffers etwa 6,0 bis etwa 6,4 beträgt.— 2 —&-...-. -J i 3 / 0 8 5 3
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US05/878,001 US4200691A (en) | 1978-02-15 | 1978-02-15 | Method for isolating MB creatine kinase |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE2905844A1 true DE2905844A1 (de) | 1979-08-16 |
DE2905844C2 DE2905844C2 (de) | 1990-06-21 |
Family
ID=25371174
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE19792905844 Granted DE2905844A1 (de) | 1978-02-15 | 1979-02-15 | Verfahren zur abtrennung der isoenzyme von kreatinkinase und mittel zur durchfuehrung des verfahrens |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4200691A (de) |
JP (1) | JPS54163886A (de) |
AT (1) | AT368186B (de) |
AU (1) | AU521650B2 (de) |
BE (1) | BE874153A (de) |
CA (1) | CA1130229A (de) |
CH (1) | CH640267A5 (de) |
DE (1) | DE2905844A1 (de) |
DK (1) | DK64079A (de) |
FI (1) | FI65629C (de) |
FR (1) | FR2417769A1 (de) |
GB (1) | GB2014582B (de) |
IE (1) | IE47917B1 (de) |
IT (1) | IT1113442B (de) |
LU (1) | LU80927A1 (de) |
NL (1) | NL7901181A (de) |
NO (1) | NO152514C (de) |
SE (1) | SE431229B (de) |
SU (1) | SU1135431A3 (de) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4360413A (en) * | 1980-12-29 | 1982-11-23 | Beckman Instruments, Inc. | Creatine kinase isoenzyme electrophoretic technique and improved creatine kinase isoenzyme reagent for use therein |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SE7408786L (de) | 1973-12-19 | 1975-06-23 | Donald William Mercer | |
US4013513A (en) * | 1976-01-30 | 1977-03-22 | E-C Apparatus Corporation | Ion exchange chromatographic isoenzyme separation and isolation |
US4049496A (en) * | 1976-05-27 | 1977-09-20 | Henry Philip D | Rapid separation of plasma creatine kinase isoenzymes |
US4105499A (en) * | 1976-10-06 | 1978-08-08 | Kiyasu John Y | Heart attack screening method, apparatus and kit for same |
-
1978
- 1978-02-15 US US05/878,001 patent/US4200691A/en not_active Expired - Lifetime
-
1979
- 1979-01-24 SE SE7900648A patent/SE431229B/sv not_active IP Right Cessation
- 1979-02-13 CA CA321,385A patent/CA1130229A/en not_active Expired
- 1979-02-14 NL NL7901181A patent/NL7901181A/xx unknown
- 1979-02-14 IE IE291/79A patent/IE47917B1/en unknown
- 1979-02-14 FR FR7903733A patent/FR2417769A1/fr active Granted
- 1979-02-14 DK DK64079A patent/DK64079A/da not_active Application Discontinuation
- 1979-02-14 FI FI790487A patent/FI65629C/fi not_active IP Right Cessation
- 1979-02-14 BE BE0/193448A patent/BE874153A/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-02-14 AU AU44241/79A patent/AU521650B2/en not_active Ceased
- 1979-02-14 NO NO790482A patent/NO152514C/no unknown
- 1979-02-14 CH CH143779A patent/CH640267A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-02-14 AT AT0114379A patent/AT368186B/de not_active IP Right Cessation
- 1979-02-14 IT IT20195/79A patent/IT1113442B/it active
- 1979-02-15 GB GB7905449A patent/GB2014582B/en not_active Expired
- 1979-02-15 DE DE19792905844 patent/DE2905844A1/de active Granted
- 1979-02-15 SU SU792728597A patent/SU1135431A3/ru active
- 1979-02-15 LU LU80927A patent/LU80927A1/xx unknown
- 1979-02-15 JP JP1554779A patent/JPS54163886A/ja active Granted
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
RÖMPP: Chemie-Lexikon, 1973, S.1616 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA1130229A (en) | 1982-08-24 |
NO790482L (no) | 1979-08-16 |
IT1113442B (it) | 1986-01-20 |
SE7900648L (sv) | 1979-08-16 |
GB2014582B (en) | 1983-03-30 |
IE47917B1 (en) | 1984-07-25 |
NO152514B (no) | 1985-07-01 |
DK64079A (da) | 1979-08-16 |
AT368186B (de) | 1982-09-27 |
ATA114379A (de) | 1982-01-15 |
NO152514C (no) | 1985-10-09 |
LU80927A1 (fr) | 1979-10-29 |
DE2905844C2 (de) | 1990-06-21 |
JPS5724754B2 (de) | 1982-05-26 |
IT7920195A0 (it) | 1979-02-14 |
SE431229B (sv) | 1984-01-23 |
FR2417769B1 (de) | 1985-02-08 |
FI65629B (fi) | 1984-02-29 |
GB2014582A (en) | 1979-08-30 |
JPS54163886A (en) | 1979-12-26 |
US4200691A (en) | 1980-04-29 |
SU1135431A3 (ru) | 1985-01-15 |
CH640267A5 (de) | 1983-12-30 |
FI790487A (fi) | 1979-08-16 |
FI65629C (fi) | 1984-06-11 |
AU521650B2 (en) | 1982-04-22 |
BE874153A (fr) | 1979-08-14 |
AU4424179A (en) | 1980-08-21 |
NL7901181A (nl) | 1979-08-17 |
FR2417769A1 (fr) | 1979-09-14 |
IE790291L (en) | 1979-08-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE3316452A1 (de) | Verfahren zum eliminieren des glucoseabhaengigen schiff'schen basen-effektes aus dem haemoglobin a(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)-assay | |
DE2156604A1 (de) | Kontrollstandard für flüssiges Blutserum | |
DE1814028B2 (de) | Verfahren zur bestimmung des gehalts an freiem und gebundenem hydroxyprolin von koerperfluessigkeiten | |
DE3312380C2 (de) | Verfahren zur Abtrennung von Hämoglobin A↓1↓↓C↓ | |
DE3137668A1 (de) | Verfahren zum testen auf vitamin b(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts) und testsatz zu seiner durchfuehrung | |
DE3205301A1 (de) | Immunochemische enzymbestimmung | |
DE1102973B (de) | Verfahren zur Herstellung von hoch gereinigten Kallikrein-Praeparaten | |
DE3625266A1 (de) | Mittel zur verwendung in einem zwei- oder mehrphasensystem | |
DE3231628C2 (de) | Elektrophoresegel | |
DE2536713A1 (de) | Verfahren zur bestimmung von vitamin-b-12 mit radioisotopen | |
DE2828392A1 (de) | Kompetitivbindungsassay fuer serumfolat | |
DE2905844A1 (de) | Verfahren zur abtrennung der isoenzyme von kreatinkinase und mittel zur durchfuehrung des verfahrens | |
EP0131606A1 (de) | Verfahren und reagenz zur differenzierten bestimmung von isoenzymen der alkalischen phosphatase. | |
DE2722380A1 (de) | In-vitro-verfahren zur raschen trennung der mm- und mb-kreatin-kinaseisoenzyme in blutplasma oder -serum | |
Dahlstedt et al. | Observations on the Distribution and Action of Substance P in Marine Animals1 | |
DE2517545A1 (de) | Verfahren zur spektrometrischen bestimmung von anorganischem phosphat und waessrige loesung zur durchfuehrung desselben | |
DE3220331C2 (de) | ||
DE2424118B2 (de) | Verfahren zur herstellung von hochreinem kallikrein | |
DE1913817C3 (de) | Verwendung eines Verfahrens zur Vorbereitung, Konservierung und zum Transport von Blut- und Serumproben | |
DE2539219A1 (de) | Radioimmunologisches untersuchungsverfahren zur in-vitro-bestimmung der renin-aktivitaet und besteck zur durchfuehrung dieses verfahrens | |
DE2150819A1 (de) | Verfahren zur Reinigung konjugierter OEstrogene | |
DE3511199A1 (de) | Verfahren zur immunologischen bestimmung von heparansulfat-proteoglykan, verfahren zur herstellung bzw. reinigung von dafuer geeignetem heparansulfat-proteoglykan aus basalmembran-haltigen geweben | |
DE2327893A1 (de) | Verfahren zur waermefraktionierung von lactatdehydrogenase in die isoenzymkomponenten | |
DE2437785A1 (de) | Verfahren zur bestimmung von aus dem menschlichen koerper stammenden proteinen mit unterschiedlicher elektrischer ladung | |
AT235804B (de) | Trennung eines in mindestens zwei Komponenten trennbaren flüssigen Gemisches |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
8110 | Request for examination paragraph 44 | ||
D2 | Grant after examination | ||
8364 | No opposition during term of opposition | ||
8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |