FI65629C - Foerfarande foer isolering av mb-kreatinkinas och testfoerpackning foer detta aendamaol - Google Patents
Foerfarande foer isolering av mb-kreatinkinas och testfoerpackning foer detta aendamaol Download PDFInfo
- Publication number
- FI65629C FI65629C FI790487A FI790487A FI65629C FI 65629 C FI65629 C FI 65629C FI 790487 A FI790487 A FI 790487A FI 790487 A FI790487 A FI 790487A FI 65629 C FI65629 C FI 65629C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- exchange resin
- resin
- mixture
- anion exchange
- substituted
- Prior art date
Links
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 34
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 34
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 claims description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 14
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 claims description 10
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 claims description 7
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 claims description 7
- 108010051884 MB Form Creatine Kinase Proteins 0.000 claims description 5
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 3
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 claims description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 125000000129 anionic group Chemical class 0.000 claims 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 5
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 5
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 4
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 2
- -1 diethylaminoethyl substituents Chemical group 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- MIDXCONKKJTLDX-UHFFFAOYSA-N 3,5-dimethylcyclopentane-1,2-dione Chemical compound CC1CC(C)C(=O)C1=O MIDXCONKKJTLDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 1
- 101100080807 Drosophila melanogaster mt:ND2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150016680 MT-ND2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100028488 NADH-ubiquinone oxidoreductase chain 2 Human genes 0.000 description 1
- 101150102231 ND2 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000013736 caramel Nutrition 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- GXQVLPBSPGNULM-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonic acid;morpholine Chemical compound CCS(O)(=O)=O.C1COCCN1 GXQVLPBSPGNULM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000011342 resin composition Substances 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/12—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/814—Enzyme separation or purification
- Y10S435/815—Enzyme separation or purification by sorption
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Superconductors And Manufacturing Methods Therefor (AREA)
- Coupling Device And Connection With Printed Circuit (AREA)
- Auxiliary Devices For Music (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
I55F71 ΓβΙ ««.KUULUTOSJULKAISU
£&& L J ( ) UTLÄCGNINCSSICRIPT 65629 C (45) uj< Λ -6 19^4 ' Patent iicddelat * (51) Kt.«k?/ht.a3 c 12 N 9/12 SUOMI—FINLAND (21) HtmttllMkMm-Pttmtnrtknlni 790487 (22) HtkcmtepUvft—Arw6knlng*d«g 14.02.79 ^ ' (23) AlkupiM—Glitlghutsdag 14.02.79 (41) Tullut |ulkl»*<c*i—Mhrlt offamK· 16.08.79 2902-84 (32)(33)(31) Pyydattx «ueMum—Bugs* priorftuc 15.02.78 USA(US) 878001 (71) E.l. du Pont de Nemours and Company, 1007 Market Street, Wilmington,
Delaware 19898, USA(US) (72) John Arthur Buege, Newark, Delaware, Michael Edwin Hickey, Newark,
Delaware, Gopal Singh Rautela, Newark, Delaware, USA(US) (74) Oy Kolster Ab (54) Menetelmä MB-kreatiinikinaasin eristämiseksi ja testipakkaus tätä tarkoitusta varten - Förfarande för isolering av MB-kreatinkinas och testförpackning för detta ändamäl
Keksinnön kohteena on menetelmä MB-kreatiinikinaasin eristämiseksi kreatiinikinaasiisoentsyymien seoksesta saattamalla seos kosketukseen ioninvaihtohartsin kanssa ja eluoimalla. Kreatiini-kinaasi, josta käytetään joissakin kirjallisuusviitteissä myös nimitystä kreatiinifosfokinaasi, lyhennetään merkinnällä CK. On olemassa kolme tunnettua CK-isoentsyymiä, joista MM tavataan etupäässä luurankolihaskudoksesta, BB tavataan etupäässä aivokudoksesta ja MB tavataan etupäässä sydänkudoksesta. Kohonneiden CK-MB-määrien läsnäolo seerumissa on osoitus sydänlihaksen salpautumisesta.
On olemassa useita menetelmiä CK-isoentsyymien erottamiseksi, joihin kuuluu elektroforeesi, kuten on selostettu julkaisussa American Journal of Cardiology 33, s. 650 (1974), ja ioninvaihto-kromatografia, kuten on selostettu julkaisussa Clinical Chemistry 20, s. 36 (1974). Useat tutkijat ovat ehdottaneet kaupallisen anioninvaihtohartsin käyttöä, jossa on dietyyliaminoetyylisubsti- 2 65629 tuentteja, DEAE Sephadex-tuotetta, ioninvaihtokromatografiseen erotukseen; Clin. Chem. Acta, 38, sivut 285-90 (1972); Clin. Chem. 21, s. 1088 (1975). Toiset ovat ehdottaneet muunnoksia tästä menettelystä käyttäen DEAE-selluloosaa, Clin, Chem. 21, s. 392 (1975), REAE-lasipallosia, Clin. Chem. 21, S. 844 (1975) ja toista kaupallista hartsia, vahvaa anioninvaihtajaa, jota Bio-Rad Laboratories myy nimellä AG MP-1, Clin. Chem. 22, s. 92 (1976). Kaikissa näissä kromatografisissa menettelyissä ensimmäinen eluoitava isoentsyymi on yleensä vallitseva CK-MM. Tämä ei tavallisesti ole mielenkiintoisin isoentsyymi. Näin ollen nämä menetelmät vaativat lisäaikaa ja lisävaiheen CK-MB:n eristämiseksi.
Tämä keksintö tarjoaa käytettäväksi menetelmän CK-MB:n eluoi-miseksi ensimmäisenä jakeena ioninvaihtohartsikerroksesta, analyysin nopeuttamiseksi ja yksinkertaistamiseksi ja CK-MB-analyysin tekemiseksi helpommin automatioon soveltuvaksi.
Tämän keksinnön menetelmässä CK-isoentsyymien kromatografisen erotuksen toteuttamiseen käytetty ioninvaihtohartsi on kationin- ja anioninvaihtohartsien seos. Hartsin ja eluointiolosuhteiden sopivalla valinnalla ensimmäinen sekahartsikerroksesta eluoitava iso-entsyymi on CK-MB. Suositeltava sekahartsikerros on heikosti emäksisen anioninvaihtohartsin ja heikosti happaman kationinvaihtohart-sin seos.
On todettava, että hartsiseoksen ja eri eluointiparametrien, kuten pH:n, hartsikerroksen ja näytteen koon, eluointinopeuden yms. valinta ovat toisistaan riippuvia. Seuraavassa suositeltavampien toteutusmuotojen kuvauksessa selostetaan erikoishartseja ja -olosuhteita. Vaikka nämä parametrit ovat suositeltavia, myös muita hartsien ja hartsiseosten yhdistelmiä ja eluointiparametreja voidaan käyttää. Kun tietyn sekahartsikerroksen valinta on tehty, alaan perehtyneet voivat helposti määrätä optimi eluointiparametrit.
Tämän keksinnön suositeltava sekakerroshartsi on seos, joka koostuu DEAE-substituoidusta, silloitetusta dekstraanianioninvaih-tohartsista ja kationinvaihtohartsista, jossa akryylipolymeerihila on substituoitu happamalla funktionaalisella ryhmällä. Tällaisia hartseja on kaupallisesti saatavissa ja anioninvaihtohartsia myydään nimellä DEAE "Sephadex" A-25 valmistaja Pharmacia AB, Ruotsi ja kationinvaihtohartsia myydään nimellä "Bio-Rex 70”(valmistaja 3 65629
Bio-Rad/ Inc., USA). Suhde, jossa on 5-10 laskeutunutta kerrostila-vuutta kohti anioninvaihtohartsia, on suositeltava tilavuussuhteen noin 6:1 ollessa vielä suositeltavampi.
Testipakkaukset, jotka sisältävät yllä kuvattuja hartsiseoksia, erityisesti sellaiset, joissa hartsi on esipakattu kolonneihin, ovat myös tämän keksinnön suojapiirin puitteissa. Käytössä tämän keksinnön sekahartsit upotetaan yleensä puskuriin. Suositeltava pH-alue tämän keksinnön suositeltaville hartseille on noin 6,0-6,4. Tämän alueen alapäässä hartsi pidättää helpommin CK-MM:n ja CK:BB:n. pH-alueen yläpäässä CK-MB eluoituu helpommin, mutta jonkin verran myös CK-BB:n eluoitumista tapahtuu. Kolonnista saadaan kasvaneet CK-MB:n ja CK-BB:n talteenotot, kun näytteen koko kasvaa.
Keksinnön parhaassa toteutusmuodossa sekakerroshartsi valmistetaan seuraavasti. DEAE-Sephadex A-25 hydratoidaan puskurissa, mieluummin morfoliinietyylisulfonihapossa, joka on säädetty pH-arvoon 6,0 48 tunnin ajan. Tämän ajan kuluttua pH säädetään uudelleen arvoon 6,0 HCl:n avulla. Bio-Rex 70 (100-200 mesh) hydratoidaan samassa puskurissa pH-arvossa 6,0 sama aika, minkä jälkeen pH säädetään uudelleen arvoon 6,0 natriumhydroksidilla. Hienojakoiset hiukkaset poistetaan molemmista hartseista ja yksi laskeutunut kerros-tilavuus Sephadex-hartsia lisätään kuuteen laskeutuneeseen kerros-tilavuuteen Bio-Rex-hartsia kevyesti sekoittaen. Kevyttä sekoitusta jatketaan 15 minuuttia ja pH säädetään arvoon 6,0. Lopuksi hartsi-kerros pestään kolmella kerrosilavuudella puskuria, joka on säädetty pH-arvoon 6,0. Hartsi jätetään upoksiin pH-arvoon 6,0 säädettyyn puskuriin. Näissä olosuhteissa eluantti, jota käytetään CK-MB:n eluoimiseen kolonnista, on ionivaihdettu vesi. Nämä olosuhteet ovat suositeltavat erotusmenettelyn sovittamiseksi testipakkaukseen, jota käytetään ACA-laitteessa, Automatic Clinical Alalyzer, jota myy E.I. du Pont de Nemours and Company.
ESIMERKKI I
ACA-testipakkausten kokoojaputkissa olevat kolonnit, joiden tilavuus on 1,7 ml, voidaan pakata seoksella, jossa on "Bio Rex 70" (valmistaja Bio-Rad, Inc., USA) ja "DEAE Sephadex A-25" (valmistaja Pharmacia AB, Ruotsi), ja joka on valmistettu yllä kuvatulla tavalla.
4 65629
Jokainen testipakkaus on sovitettu vastaanottamaan yksi näyte» tilavuudeltaan 0,34 ml, joka ruiskutetaan hartsikolonniin. Näytteet eluoidaan 2,0 ml:11a ionivaihdettua vettä pakkauksen reaktiokarami-oon nopeudella 1,0 ml/min.
Kreatiinikinaasin läsnäolo eluaatissa määritetään sen UV-entsymaattisen analyysin muunnoksella, jota ovat kuvanneet Oliver, I.T., Biochem J. 61, s. 116 (1955) ja Rosalki, S.B., J. Lab. Clin. Med., 69, s. 696 (1967). Aallonpituudella 340 nm absorboivan NADH2~ yhdisteen muodostumisnopeus on verrannollinen kreatiinikinaasin konsentraatiooon.
Oliver-Rosalki-menetelmä ei tee eroa eri CK-isoentsyymien välillä, mutta isoentsyymien kromatografisen erotuksen teho voidaan osoittaa seuraavasti.
Kolmen CK-isoentsyymin talteenotto voidaan määrittää mittaamalla erikseen kunkin entsyymin aktiivisuus ennen ja jälkeen eluoin-nin sekakerroshartsikolonnin läpi. Näiden määritysten tekemiseen käytetty isoentsyymien lähde on ihmiskudos. Alla oleva taulukko esittää tyypillistä isoentsyymin talteenottoa käyttäen edellä kuvattua sekakerroshartsikolonnia.
TAULUKKO I
(CK-isoentsyymien kolonnieluointi) CK-isoentsyymi Aktiivisuus (IU/1) Aktiivisuus Talteenotto % (ihmisseeru- ennen eluointia (IU/1) missä) eluoinnin _jälkeen_ MM 134 1 1 MB 286 196 69 MM 197 2 1 BB 785 361 46
ESIMERKKI II
Käyttäen samaa ioninvaihtohartsien seosta ja samaa kolonni-kokoa 0,20 ml:n näytekoolla ja eluoimalla kolonni 2,0 ml:11a ioni-vaihdettua vettä nopeudella 0,5 ml/min, oleellisesti kaikki CK-MM ja CK-BB jää jäljelle samalla, kun vain CK-MB-isoentsyymi saadaan talteen. Hartsin pH-arvon vaikutus sekakerroshartsikolonnin suorituskykyyn näissä olosuhteissa esitetään seuraavassa taulukossa: 5 65629 TAULUKKO II (CK-i soentsyymien kolonn ieluo int i) CK-isoentsyymi___Aktiivisuus (IU/1)_ (ihmisseerumissa) __ , .
ennen eluointia _eluoinnin jälkeen _Kolonnihartsin pH_ 6,1 6,25 6,4 MM 107 02 84 MB 297 120 241 283 BB 124 0 13 95
Claims (7)
1. Menetelmä MB-kreatiinikinaasin eristämiseksi kreatiinikinaa-si-isoentsyymien seoksesta saattamalla seos kosketukseen ioninvaihto-ehtohartsin kanssa ja eluoimalla, tunnettu siitä, että iso-entsyymi seos saatetaan kosketukseen sekakerroshartsin kanssa, joka on heikosti emäksisen anioninvaihtohartsin ja heikosti happamen kationinvaihtohartsin seos, jossa kationinvaihtohartsin suhde anio-nivaihtohartsiin on välillä 5:1 ja 10:1, ja että MB-kreatiinikinaa-si-isoentsyymi eluoidaan selektiivisesti.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että anioninvaihtohartsi on dietyyliaminoetyylillä substi-tuoitua, silloitettua dekstraania ja kationinvaihtohartsi on akryy-lipolymeeriä, jonka yksiköt on substituoitu happamella funktionaalisella ryhmällä.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kationinvaihtohartsin suhde anioninvaihtohartsiin on noin 6:1.
4. Patenttivaatmuksen 1 mukainen menetelmä, /tunnettu siitä, että sekakerroshartsi on puskuroitu pH-arvoon noin 6,0-6,4.
5. Testipakkaus MB-kreatiinikinaasin eristämiseksi kreatiini-kinaasi-isoentsyymien seoksesta, tunnettu siitä, että se koostuu oleellisesti sekakerroshartsista, joka on seos, joka koostuu dietyyliaminoetyylillä substituoitua, silloitettua dekstraania olevasta anioninvaihtohartsista ja kationinvaihtohartsista, joka on akryylipolymeeriä, jonka yksiköt on substituoitu happamella funktionaalisella ryhmällä, ja jossa seoksessa kationinvaihtohartsin suhde anioninvaihtohartsiin on välillä 5:1 ja 10:1.
6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen testipakkaus, tunnettu siitä, että se koostuu oleellisesti sekakerroshartsista, joka on pakattu kolonniin puskuriliuoksessa ja joka on seos, joka koostuu dietyyliaminoetyylillä substituoitua, silloitettua dekstraania olevasta anioninvaihtohartsista ja kationinvaihtohartsista, joka on akryyli-polymeeriä, jonka yksiköt on substituoitu happamella funktionaalisella ryhmällä, ja jossa seoksessa kationinvaihtohartsin suhde anioninvaihtohartsiin on välillä 5:1 ja 10:1.
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen testipakkaus, tunnettu siitä, että kationinvaihtohartsin suhde anioninvaihtohartsiin on noin 6:1 ja että puskuriliuoksen pH-arvo on noin 6,0-6,4.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US87800178 | 1978-02-15 | ||
| US05/878,001 US4200691A (en) | 1978-02-15 | 1978-02-15 | Method for isolating MB creatine kinase |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI790487A7 FI790487A7 (fi) | 1979-08-16 |
| FI65629B FI65629B (fi) | 1984-02-29 |
| FI65629C true FI65629C (fi) | 1984-06-11 |
Family
ID=25371174
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI790487A FI65629C (fi) | 1978-02-15 | 1979-02-14 | Foerfarande foer isolering av mb-kreatinkinas och testfoerpackning foer detta aendamaol |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4200691A (fi) |
| JP (1) | JPS54163886A (fi) |
| AT (1) | AT368186B (fi) |
| AU (1) | AU521650B2 (fi) |
| BE (1) | BE874153A (fi) |
| CA (1) | CA1130229A (fi) |
| CH (1) | CH640267A5 (fi) |
| DE (1) | DE2905844A1 (fi) |
| DK (1) | DK64079A (fi) |
| FI (1) | FI65629C (fi) |
| FR (1) | FR2417769A1 (fi) |
| GB (1) | GB2014582B (fi) |
| IE (1) | IE47917B1 (fi) |
| IT (1) | IT1113442B (fi) |
| LU (1) | LU80927A1 (fi) |
| NL (1) | NL7901181A (fi) |
| NO (1) | NO152514C (fi) |
| SE (1) | SE431229B (fi) |
| SU (1) | SU1135431A3 (fi) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4360413A (en) * | 1980-12-29 | 1982-11-23 | Beckman Instruments, Inc. | Creatine kinase isoenzyme electrophoretic technique and improved creatine kinase isoenzyme reagent for use therein |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE7408786L (fi) | 1973-12-19 | 1975-06-23 | Donald William Mercer | |
| US4013513A (en) * | 1976-01-30 | 1977-03-22 | E-C Apparatus Corporation | Ion exchange chromatographic isoenzyme separation and isolation |
| US4049496A (en) * | 1976-05-27 | 1977-09-20 | Henry Philip D | Rapid separation of plasma creatine kinase isoenzymes |
| US4105499A (en) * | 1976-10-06 | 1978-08-08 | Kiyasu John Y | Heart attack screening method, apparatus and kit for same |
-
1978
- 1978-02-15 US US05/878,001 patent/US4200691A/en not_active Expired - Lifetime
-
1979
- 1979-01-24 SE SE7900648A patent/SE431229B/sv not_active IP Right Cessation
- 1979-02-13 CA CA321,385A patent/CA1130229A/en not_active Expired
- 1979-02-14 IE IE291/79A patent/IE47917B1/en unknown
- 1979-02-14 BE BE0/193448A patent/BE874153A/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-02-14 NL NL7901181A patent/NL7901181A/xx unknown
- 1979-02-14 NO NO790482A patent/NO152514C/no unknown
- 1979-02-14 CH CH143779A patent/CH640267A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-02-14 DK DK64079A patent/DK64079A/da not_active Application Discontinuation
- 1979-02-14 FI FI790487A patent/FI65629C/fi not_active IP Right Cessation
- 1979-02-14 FR FR7903733A patent/FR2417769A1/fr active Granted
- 1979-02-14 IT IT20195/79A patent/IT1113442B/it active
- 1979-02-14 AU AU44241/79A patent/AU521650B2/en not_active Ceased
- 1979-02-14 AT AT0114379A patent/AT368186B/de not_active IP Right Cessation
- 1979-02-15 GB GB7905449A patent/GB2014582B/en not_active Expired
- 1979-02-15 LU LU80927A patent/LU80927A1/xx unknown
- 1979-02-15 DE DE19792905844 patent/DE2905844A1/de active Granted
- 1979-02-15 SU SU792728597A patent/SU1135431A3/ru active
- 1979-02-15 JP JP1554779A patent/JPS54163886A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IT1113442B (it) | 1986-01-20 |
| DK64079A (da) | 1979-08-16 |
| NL7901181A (nl) | 1979-08-17 |
| JPS5724754B2 (fi) | 1982-05-26 |
| GB2014582B (en) | 1983-03-30 |
| NO790482L (no) | 1979-08-16 |
| IE47917B1 (en) | 1984-07-25 |
| DE2905844A1 (de) | 1979-08-16 |
| CH640267A5 (de) | 1983-12-30 |
| SU1135431A3 (ru) | 1985-01-15 |
| DE2905844C2 (fi) | 1990-06-21 |
| AT368186B (de) | 1982-09-27 |
| FR2417769A1 (fr) | 1979-09-14 |
| FR2417769B1 (fi) | 1985-02-08 |
| NO152514C (no) | 1985-10-09 |
| FI65629B (fi) | 1984-02-29 |
| IT7920195A0 (it) | 1979-02-14 |
| AU521650B2 (en) | 1982-04-22 |
| NO152514B (no) | 1985-07-01 |
| JPS54163886A (en) | 1979-12-26 |
| AU4424179A (en) | 1980-08-21 |
| SE431229B (sv) | 1984-01-23 |
| BE874153A (fr) | 1979-08-14 |
| US4200691A (en) | 1980-04-29 |
| CA1130229A (en) | 1982-08-24 |
| GB2014582A (en) | 1979-08-30 |
| ATA114379A (de) | 1982-01-15 |
| IE790291L (en) | 1979-08-15 |
| SE7900648L (sv) | 1979-08-16 |
| LU80927A1 (fr) | 1979-10-29 |
| FI790487A7 (fi) | 1979-08-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Smiley et al. | An improved purification, crystallization, and some properties of rabbit muscle 5'-adenylic acid deaminase | |
| Colburn et al. | Sites phosphorylated in myosin light chain in contracting smooth muscle. | |
| Soderling et al. | Inactivation of glycogen synthetase and activation of phosphorylase kinase by muscle adenosine 3', 5'-monophosphate-dependent protein kinases | |
| Steers et al. | The purification of β-galactosidase from Escherichia coli by affinity chromatography | |
| Murad et al. | A simple, sensitive protein-binding assay for guanosine 3′: 5′-monophosphate | |
| Uzunov et al. | Separation of multiple molecular forms of cyclic adenosine-3′, 5′-monophosphate phosphodiesterase in rat cerebellum by polyacrylamide gel electrophoresis | |
| Dedman et al. | [1] Calmodulin purification and fluorescent labeling | |
| Ogasawara et al. | Isozymes of rat AMP deaminase | |
| Dills Jr et al. | Purification of rabbit skeletal muscle protein kinase regulatory subunit using cyclic adenosine-3′: 5′-monophosphate affinity chromatography | |
| US4260678A (en) | Determining creatine kinase isoenzmes via immobilized antibody-isoenzyme complexes | |
| Ichikawa et al. | Purification and characterization of rat liver nuclear thyroid hormone receptors. | |
| Schrohenloher | The degradation of human γ-globulin by trypsin | |
| FI65629C (fi) | Foerfarande foer isolering av mb-kreatinkinas och testfoerpackning foer detta aendamaol | |
| Moudgil et al. | Interaction of progesterone receptor with immobilized adenosine triphosphate | |
| Yoshida et al. | Two kinds of myosin phosphatases with different enzymatic properties from fresh chicken gizzard smooth muscle. Purification and characterization | |
| Flanders et al. | Pyruvate kinase isozymes in adult tissue and eggs of Rana pipiens. II. Physical and kinetic studies of purified skeletal and heart muscle pyruvate kinases | |
| Banerjee et al. | A convenient procedure for purification of thymidylate synthase from L1210 cells | |
| Tojo et al. | Purification of intracellular phospholipase A2 from rat spleen supernatant by reverse-phase high-performance liquid chromatography | |
| Kuwano et al. | PURIFICATION OF BOVINE PINEAL HYDROXYINDOLE O‐methylTRANSFERASE BY IMMUNOADSORPTION CHROMATOGRAPHY | |
| Moudgil et al. | ATP-PPi exchange activity of progesterone receptor. | |
| Thomas et al. | Affinity chromatography of neuropathy target esterase | |
| O'Carra et al. | Further studies on the bioaffinity chromatography of NAD+-dependent dehydrogenases using the locking-on effect | |
| Bondar et al. | Improved separation of creatine kinase isoenzymes by use of DEAE-Sepharose Cl-6B. | |
| Izui et al. | Phosphoenolpyruvate Carboxylase of Escherichia coli Hydrophobic Chromatography Using Specific Elution with Allosteric Inhibitor | |
| Black | [133b] Reduction of sulfoxide and disulfides |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: E.I. DU PONT DE NEMOURS AND CO |