DE2817085A1 - Derivate der 9-amino-desoxy-clavulansaeure, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende pharmazeutische praeparate - Google Patents

Description

Brentford, Middlesex, Grossbritannien

" Derivate der 9-Amino-desoxy-clavulansäure, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Präparate "

beanspruchte Prioritäten:

22. April 1977, Grossbritannien, Nr.16764/77,

6. September 1977, Grossbritannien, Nr. 37072/77, 2. Dezember 1977, Grossbritannien, Nr. 50229/77 und

23. Dezember 1977, Grossbritannien, Nr. 53866/77.

Die Erfindung betrifft antibakterielle ß-Lactam-Verbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Präparate.

In der BE-PS 847044 bzw. der DE-OS 26 46 003 sind unter anderem Verbindungen der allgemeinen Formel I und deren Ester beschrieben

309843/0910

817085

(D

X ^{2 2}

in der X.ein Wasserstoffatom, ein Alkyl-, Alkenyl- oder ein Hydroxyalkylrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen oder ein gegebenenfalls substituierter Phenylrest ist und Xp einen gegebenenfalls substituierten Phenylrest bedeutet. Diese Verbindungen sind als antibakteriell wirkende Substanzen und ß-Lactamase-Inhibitoren beschrieben.

Es ist jetzt gefunden worden, dass bestimmte sekundäre Amine hergestellt werden können, die ß-Lactamase-Inhibitoren sind, die die Wirksamkeit von Penicillinen oder Cephalosporinen zu steigern vermögen und die auch selbst antibakterielle Eigenschaften besitzen.

Gegenstand vorliegender Erfindung sind demnach Derivate der 9-Amino-desoxy-clavulansäure der allgemeinen Formel II

(H)

und deren Ester,· in der

R₁ ein Wasserstoffatom, einen Alkyl- oder Hydroxyalkylrest mit jeweils 1 bis 5 Kohlenstoffatomen, einen Cycloalkylrest

809843/0910

mit 5 oder 6 Kohlenstoffatomen oder einen Rest der allgemeinen Formel (a)

bedeutet, wobei

Rp ein Wasserstoff-, Fluor-, Chlor- oder Bromatom, die Hydroxylgruppe einen Alkyl-, Alkoxy- oder Acyloxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, einen Alkoxycarbonylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen im Alkoxyteil oder einen Rest -N(R₅)CO.R₆, -N(R₅)SO₂Rg oder -CO-NR₅R₆ bedeutet, in denen

R₁- ein Wasserstoff atom, die Phenyl- oder Benzylgruppe oder ein Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen ist und R₆ die Phenyl- oder Benzylgruppe oder einen Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen bedeutet,

Κ-, ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder einen Alkyl-, Alkoxy- oder Acyloxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen darstellt und

R. für ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder für einen Alkyl- oder Alkoxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen steht.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel II existieren per se in Form von Zwitterionen, d.h., dass sie gegebenenfalls in Form der allgemeinen Formel Ha vorliegen können :

B098 4 3/0910

817085

(Ha)

in der R. die bei der allgemeinen Formel II angegebenen Bedeutungen besitzt. Diese zwitterionischen Verbindungen stellen erfindungsgemäss bevorzugte Verbindungen dar, da sie gewöhnlich in kristallinier Form vorliegen und eine höhere Stabilität besitzen als die vorstehenden, die ß-Lactamasehemmenden Amine der allgemeinen Formel I.

Die Ester der Derivate der allgemeinen Formel II können in Form ihrer freien Base oder in Form von Säureadditionssalzen vorliegen.

Zweckmässigerweise ist R₁ ein Wasserstoffatom, ein Alkylrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen, ein Hydroxyalkylrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen oder ein Phenylrest, der durch Fluor-, Chlor- oder Bromatome oder durch Alkyl- oder Alkoxyreste mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann.

Beispiele für geeignete Reste R₁ sind die Methyl-, Äthyl-, Propyl-, Butyl-, Hydroxymethyl-, Hydroxyäthyl-, Hydroxypropyl-, Phenyl-, p-Methoxyphenyl- oder die p-Methylphenylgruppe. In bestimmter Weise bevorzugt sind die Methyl-, Äthyl-, Hydroxymethyl-, 2-Hydroxyäthyl-, Isopropyl- und die Phenylgruppe für den Rest R₁.

S098U/Q910

Eine andere Gruppe von geeigneten Derivaten vorliegender Erfindung sind solche der allgemeinen Formel II oder deren Ester, in der R^ ein Wasserstoffatom, ein Alkylrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen, ein Hydroxyalkylrest mit 1 bis Kohlenstoffatomen oder ein Rest der allgemeinen Formel (b)

/tV:

(b)

ist, wobei Rp ein Wasserstoff-, Fluor-, Chlor- oder Bromatom, die Hydroxylgruppe, einen Alkyl-, Alkoxy- oder Acyloxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen oder einen Alkoxycarbonylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen im Alkoxyteil bedeutet, R, ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder einen Alkyl-, Alkoxy- oder Acyloxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen darstellt und R^ für ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder für einen Alkyl- oder Alkoxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen steht. Wie angegeben, können diese Derivate in Form von Zwitterionen oder eines Esters oder eines Säureadditionssalzes dieses Esters vorliegen. Zweckmassige und geeignete Reste für R-. sind solche, die bei der allgemeinen Formel II angegeben sind.

Eine besonders vorteilhafte Untergruppe von Derivaten der allgemeinen Formel II sind solche der allgemeinen Formel III und deren Ester :

809843/0910

R,

in der Rp, R^ und R^ die vorstehend angegebenen Bedeutungen besitzen.

Diese Derivate der allgemeinen Formel III liegen vorteilhafterweise aus den vorstehend angegebenen Gründen in Form von Zwitterionen oder in Form von Estern oder in Form von Säureadditionssalzen dieser Ester vor.

Noch zweckmässiger bedeutet Rp ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methoxy-, Äthoxy-, Hydroxyl-, Acetoxy-, Propionyloxy-, Methyl-, Äthyl-, Methoxycarbonyl- oder die Athoxycarbonylgruppe.

Der Rest R, stellt noch zweckmässiger ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methoxy-, Äthoxy-, Acetoxy-, Propionoxy-, Methyl- oder Äthylgruppe dar.

Für den Rest R. steht noch zweckmässiger ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methoxy-, Äthoxy-, Acetoxy-, Propionoxy-, Methyl- oder Äthylgruppe.

Am zweckmässigsten bedeutet R^ ^ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methoxy-, Hydroxy- oder Methylgruppe.

809843/0910

R^, stellt am zweckmässigsten ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methoxy- oder Methylgruppe dar.

Für R/ steht am zweckmässigsten ein Wasserstoffatom oder die Methyl-' oder Methoxygruppe.

Vorzugsweise bedeutet R₂ ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methyl- oder Methoxygruppe.

Der Rest R^ stellt vorzugsweise ein Wasserstoffatom oder die Methoxygruppe dar.

Für den Rest R, steht vorzugsweise ein Wasserstoffatom.

Die erfindungsgemässen Derivate und insbesondere die Derivate der allgemeinen Formel III zeigen ein breites Spektrum einer ß-Lactamase-Hemmwirkung.

Unter die Derivate der allgemeinen Formel III fallen besonders vorteilhafte Derivate der allgemeinen Formel IV

-O CH₂-NH-CH₂-V^ (IV)

•N

O CO₂H

in der Q ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methyl-, Methoxy-, Äthyl- oder Äthoxygruppe ist.

Zweckmässigerweise ist Q ein Wasserstoff-, p-Fluor-, m-Fluor-, p-Chlor- oder ein m-Chloratom oder die p-Methyl-, m-Methyl-,

8098/_} 3/0910

p-Methoxy- oder die m-Methoxygruppe.

Am zweckmässigsten ist Q ein Wasserstoff-, p-Fluor- oder p-Chloratom oder die p-Methyl- oder p-Methoxygruppe.

Ein Derivat der allgemeinen Formel IV, das eine besonders gute synergistische Wirksamkeit in vivo zeigt, weist ein Wasserstoffatom für den Rest Q bei der allgemeinen Formel IV auf. Dieses Derivat kann die Wirksamkeit von Penicillinen, wie Ampicillin oder Amoxycillin, und von Cephalosporinen gegenüber zahlreichen ß-Lactamase erzeugenden Stämmen von gramnegativen Bakterien, einschliesslich Stämmen von Klebsiella aerogenes, Escherichia coli, Proteus mirabilis und dergleichen und insbesondere gegenüber ß-Lactamase erzeugenden Stämmen von grampositiven Bakterien, wie Staphylococcus aureus, erhöhen, wenn es oral verabreicht oder insbesondere wenn es injiziert wird. Die Derivate der allgemeinen Formel IV besitzen auch eine vorteilhafte niedrige akute Toxizität. So werden beispielsweise keine Todesfälle bei den zu Testzwecken eingesetzten Tieren beobachtet, wenn man therapeutisch wirksame Mengen des synergistischen Derivats verabreicht. Ausserdem sind die Derivate wirksam, wenn sie allein bei der Behandlung von Infektionen eingesetzt werden, die durch ß-Lactamase oder durch nicht ß-Lactamase erzeugende Stämme von Staphylococcus aureus hervorgerufen worden sind. So hat sich beispielsweise gezeigt, dass das Derivat der allgemeinen Formel IV, in der Q ein Wasserstoffatom ist, wirksamer als Ampicillin, Cloxacillin oder Cefa-

809843/0910

zolin bei der Behandlung bestimmter, durch Staphylococcus aureus Russell hervorgerufener Infektionen, ist.

Eine v/eitere vorteilhafte Untergruppe von Derivaten der allgemeinen Formel II zeigt die gleichen Eigenschaften wie die Derivate der Untergruppe der allgemeinen Formel IV und besitzt die allgemeine Formel V :

H
' ,0

in der Q ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methyl-, Äthyl-, Methoxy-, Äthoxy- oder die Hydroxylgruppe ist.

Zweckmässigerweise steht die Hydroxylgruppe bei den Derivaten der allgemeinen Formel V in m-. oder p-Stellung zu demjenigen Kohlenstoff, an den die -NH-CHp-Gruppierung gebunden ist.

Am zweckmässigsten ist Q ein Wasserstoffatom oder die Methyl- oder Methoxygruppe.

Die zwitterionischen Derivate der allgemeinen Formeln IV und V liegen gewöhnlich und vorzugsweise in kristalliner Form vor.

Eine v/eitere Untergruppe von bevorzugten Derivaten gemäss vorliegender Erfindung weist die allgemeine Formel II auf,

309843/0910

817085

in der R₂ der Rest -N(R₅)CO.Rg, -N(R₅)SO₂R₆ oder -CONR₅R₆ ist, wobei Rc und R₆ die bei der allgemeinen Formel II angegebenen Bedeutungen besitzen, und deren Ester. Zweckmässigerweise ist R₅ ein Wasserstoffatom oder ein Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, wie die Methylgruppe. Der Rest R₆ bedeutet zweckmässigerweise einen Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, insbesondere die Methylgruppe. Geeignete Reste R-2 und R^ bei diesen Derivaten sind solche, die in bezug auf die Derivate der allgemeinen Formel II aufgeführt worden sind. Derartige Derivate können in Form von Zwitterionen der Stammsäure vorliegen. Ester derartiger Derivate können in Form der freien Base oder in Form eines Säureadditionssalzes vorliegen.

Eine weitere besonders bevorzugte Untergruppe von Derivaten der allgemeinen Formel II weist die allgemeine Formel VI auf

/4=^N(R₅)CO.R₆

(VI)

-H

CO₂H

in der R-,, R^, R,- und R₆ die bei der allgemeinen Formel II angegebenen Bedeutungen besitzen.

Die Derivate der allgemeinen Formel VI fallen gewöhnlich in kristalliner Form und in einer höheren als der durchschnittlichen Ausbeute an und zeigen die gleichen Aktivitäten wie die Derivate der allgemeinen Formeln IV und V.

809843/0910

In bezug auf die Derivate der allgemeinen Formel VI ist es zweckmässiger, wenn der Rest Rc ein Wasserstoffatom oder ein Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, wie die Methylgruppe, ist, und am zweckmässigsten, wenn R,- ein Wassers to ff atom ist. In bezug auf die Derivate der allgemeinen Formel VI ist es weiterhin zweckmässiger, wenn der Rest Rg ein Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, wie die Methylgruppe, ist.

Vorteilhafte Reste für R, und R^ bei den Derivaten der allgemeinen Formel VI sind bei den allgemeinen Formeln II und III angegeben. Vorzugsweise sind die Reste R^ und R, Wasserstoffatome.

Zweckmässigerweise steht bei den Derivaten der allgemeinen Formel VI der Rest -N(Rc)CORg in para- oder in meta-Stellung zur -NH-CHp-Gruppierung.

Eine vorteilhafte Untergruppe von Derivaten der allgemeinen Formel VI weist die allgemeine Formel VII auf

(VII)

in der Rc und Rg die bei der allgemeinen Formel II angegebenen Bedeutungen besitzen. In besonders zweckmässiger Weise steht R_c für ein Wasserstoffatom oder einen Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, wie die Methylgruppe. Vorzugsweise ist Rc ein Wasserstoffatom. In besonders zweckmässiger V/eise

809843/0910

steht Rg für einen Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise für die Methylgruppe.

Es ist vorstehend bereits darauf hingewiesen worden, dass man die Herstellung und die Verwendung von kristallinen, zwitterionischen Derivaten der allgemeinen Formel II, wie diese der allgemeinen Formeln III, IV, V, VI und VII, bevorzugt. Jedoch bilden auch Ester der Derivate der allgemeinen Formeln II bis VII einen Teil vorliegender Erfindung, beispielsweise in Form der freien Base oder in Form des Säureadditionssalzes, da diese Derivate ebenfalls die Wirksamkeit von Penicillinen oder Cephalosporinen zu erhöhen vermögen.

Bestimmte zweckmässige Ester von Derivaten der allgemeinen Formeln II bis VII weisen die allgemeinen Formeln VIII und IX auf

CH₂-NH-CH₂-R₁

-N

CO₂CHA₂A₃

(VIII)

(IX)

in denen R₁ die bei der allgemeinen Formel II angegebenen Bedeutungen besitzt, oder ein substituierter Phenylrest ist, wie dies bei den Derivaten der allgemeinen Formeln III bis VII angegeben ist, A^ einen Alkylrest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen bedeutet, der durch Alkoxy- oder Acyloxyreste mit

30984370910

1 bis 7 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann, A₂ einen Alkenyl- oder Alkinylrest mit 2 bis 5 Kohlenstoffatomen oder einen Phenylrest darstellt, der durch Fluor-, Chlor- oder Bromatome, die Nitrogruppe oder Alkyl- oder Alkoxyreste mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann, und A-* für ein Wasserstoffatom, einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder einen Phenylrest steht, der durch Fluor-, Chloroder Bromatome, Nitrogruppen oder Alkyl- oder Alkoxyreste mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann.

Geeignete Ester der Derivate der allgemeinen Formel II sind der Methyl-, Äthyl-, n-Propyl-, η-Butyl-, Allyl-, Propargyl-, Methoxymethyl-, Acetoxymethyl-, Propionoxymethyl-, Trimethylacetoxyinethyl-, Athoxycarbonyloxymethyl-, Methoxycarbonyloxyäthyl-, Äthoxycarbonyloxyäthyl-, Dimethoxyphthalidyl-, Benzyl- , Methoxybenzyl-, Äthoxybenzyl-, Nitrobenzyl- oder der Chlorbenzylester.

Bestimmte bevorzugte Reste A^ sind die Methyl-, Methoxymethyl-, Acetoxymethyl-, Acetoxyäthyl-, Phthalidyl-, Athoxycarbonyloxymethyl- und die cC-Äthoxycarbonyloxyäthyl-rGruppe.

Als bevorzugt für den Rest A₂ sind die Phenyl- und die 4-Methoxyphenyl-Gruppen. Der Rest A-, ist vorzugsweise ein Wasserstoffatom.

Bestimmte andere vorteilhafte Reste A^ sind diejenigen der Untergruppen (c), (d) und (e) ;

809843/0910

-CHAc-OA-- (c) -CHA₅-COA₆ (d) -CHA₅-CO₂A₆ (e)

in denen der Rest A,- ein Wasserstoffatom oder die Methylgruppe ist, Ar einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder die Phenyl- oder Benzylgruppe bedeutet, die jeweils durch ein oder zwei Alkyl- oder Alkoxygruppen mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen oder durch Fluor-, Chlor- oder Bromatome oder durch die Nitro gruppe substituiert sein können, oder in denen A₁- zusammen mit Ag einen unsubstituierten gesättigten 5- oder 6-gliedrigen heteroalicyclischen Ring oder die o-Phenylengruppe ist, die durch ein oder zwei Alkyl- oder Alkoxyreste mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen oder durch ein Fluor-, Chlor- oder Bromatom oder durch die Nitrogruppe substituiert sein kann.

Ein geeigneter Acylrest für die Untergruppe der allgemeinen Formel (c) ist der Rest -CH₂-OAg, für die Untergruppe der allgemeinen Formel (d) der Rest -CH₂-CO-Ag und für die Untergruppe der allgemeinen Formel (e) der Rest -

Ein weiterer geeigneter Acylrest für die Untergruppe der allgemeinen Formel (e) ist der Rest -CH(CH₅)-

Bevorzugte Reste für Ag in den vorstehend genannten Acylresten sind die Methyl-, Äthyl-, Propyl-, Butyl-, Phenyl- und die Benzylgruppe.

Geeignete cyclische Reste für die Untergruppe der allgemeinen

Ö09843/0910

Formel (c) sind die Tetrahydropyranyl- und die Tetrahydrofuranylgruppe.

Ester der Derivate der allgemeinen Formel II, wie diejenigen der Derivate der allgemeinen Formeln IV oder V können gegebenenfalls in Form ihrer Säureadditionssalze vorliegen. Die zur Bildung derartiger Salze verwendete Säure ist zweckmässigerweise pharmakologisch verträglich, doch sind auch nichtpharmakologisch verträgliche Säureadditionssalze in Betracht gezogen worden, beispielsweise als Zwischenverbindungen bei der Herstellung von pharmakologisch verträglichen Salzen mittels Ionenaustauschverfahrens. Geeignete pharmakologisch verträgliche Säureadditionssalze sind solche von anorganischen oder organischen Säuren, wie von Chlorwasserstoffsäure, Phosphorsäure, Schwefelsäure, Methansulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Citronensäure, Apfelsäure, Essigsäure, Milchsäure, Weinsäure, Propionsäure oder Bernsteinsäure. Am zweckmässigsten wird das Säureadditionssalz als Feststoff, vorzugsweise als kristalliner Feststoff zur Verfügung gestellt.

Derivate vorliegender Erfindung in kristalliner Form können solvatisiert, beispielsweise hydratisiert vorliegen.

Einen weiteren Gegenstand vorliegender Erfindung bilden pharmazeutische Präparate mit einem Gehalt an mindestens einem Derivat einer 9-Amino-desoxy-clavulansäure der allgemeinen Formel II oder deren Ester. Diese Präparate können übliche pharmakologisch verträgliche Trägermaterialien, Verdünnungsmittel und/oder Excipientien enthalten.

809843/0910

Die erfindungsgemässen pharmazeutischen Präparate sind in Form für eine orale, äusserliche oder parenterale Anwendung geeignet und können zur Behandlung von Infektionen bei Säugern, einschliesslich Menschen, eingesetzt werden.

Beispiele geeigneter Formen der pharmazeutischen Präparate nach vorliegender Erfindung sind Tabletten, Kapseln, Kremes, Sirupe, Suspensionen, Lösungen, rekonstituierbare Pulver und sterile, für Injektions- oder Infusionszwecke geeignete Formen. Die pharmazeutischen Präparate können als Excipientien Bindemittel, Farbstoffe, Geschmackskorregentien, Konservierungsstoffe, Zerfallhilfsmittel und dergleichen gemäss der üblichen pharmazeutischen Praxis enthalten, wie sie dem Fachmann auf dem Gebiet der Formulierung von Antibiotika bekannt sind. '

Injizierbare oder infundierbare pharmazeutische Präparate von Derivaten gemäss vorliegender Erfindung sind besonders geeignet, weil nach einer Verabreichung mittels Injektion oder

werden Infusion hohe Blutspiegelwerte von den Derivaten erhalten/ können. Demzufolge enthält nach einer bevorzugten Ausführungsform vorliegender Erfindung ein pharmazeutisches Präparat ein Derivat der allgemeinen Formel II in steriler Form und am meisten bevorzugt in steriler kristalliner Form. Die zwitterionischen Derivate gemäss vorliegender Erfindung sind zur Verwendung in derartigen pharmazeutischen Präparaten besonders geeignet.

Eine injizierbare Lösung eines Derivats nach vorliegender Er-

809843/0910

findung kann in einer sterilen pyrogenfreien Flüssigkeit, wie Wasser, wässrigem Äthanol oder dergleichen, hergestellt werden.

Derivate vorliegender Erfindung in sehr reiner kristalliner Form neigen zu einer verhältnismässig niedrigen wässrigen Löslichkeit, so dass es erforderlich sein kann, wenn man wesentliche Mengen des pharmazeutischen Präparates verabreichen will, ziemlich hohe Mengen an Wasser zur Rekonstituierung zu verwenden. Unter diesen Umständen ist es häufig zweckmässig, die Lösung intravenös zu verabreichen.

Eine Alternativlösung zur Verabreichung der Derivate vorliegender Erfindung und insbesondere der zwitterionischen Derivate der allgemeinen Formeln III bis VII besteht in der Verwendung einer injizierbaren Suspension. Derartige Suspensionen können mit sterilem Wasser, steriler Kochsalzlösung oder dergleichen hergestellt werden und können auch Suspensionsmittel, wie Polyvinylpyrrolidon, Lecithin oder dergleichen enthalten, wie es beispielsweise für Amoxycillin-trihydrat in der BE-PS 839109 beschrieben ist. Gegebenenfalls können derartige pharmazeutische Präparate mit einem verträglichen Ölsuspensionsmittel, wie Erdnussöl oder äquivalenten Verbindungen, hergestellt werden. Die Verwendung von Suspensionen kann in vorteilhafter Weise langdauernde Blutspiegel des pharmazeutischen Präparats hervorrufen. Man kann die BE-PS 839109 für geeignete Verfahren und Substanzen tür Herstellung injizierbarer wässriger Suspensionen heranziehen. Zur Verwendung in

309843/0910

derartigen Suspensionen, sollten die zwitterionischen Derivate gemäss vorliegender Erfindung in Form von feinen Teilchen verwendet werden, wie es in der vorgenannten belgischen Patentschrift beschrieben ist.

Pharmazeutische Präparate in Einzeldosen mit einem Gehalt an einem Derivat gemäss vorliegender Erfindung für eine orale Verabreichung bildet einen weiteren geeigneten Gegenstand. Jedoch sind oral verabreichbare Formen wegen der verhältnismässig schlechten Absorption der Derivate aus dem Gastrointestinaltrakt im allgemeinen weniger bevorzugt. Trotzdem sind oral verabreichbare Präparate von Nutzen, weil ein synergistisch wirksamer Blutspiegel bei hohen Dosierungen erwartet werden kann und weil bei niedrigeren Dosierungen derartiger Arzneimittel zur Behandlung von lokalisierten Infektionen im Gastrointestinaltrakt verwendet werden können.

Pharmazeutische Präparate in Einzeldosen mit einem Gehalt an einem Derivat vorliegender Erfindung für eine äusserliche Verabreichung bilden ebenfalls e'inen Gegenstand vorliegender Erfindung. In diesem Falle umfasst eine "äusserliche Anwendung" auch die örtliche Verabreichung auf die inneren Oberflächen der Euter von Rindern, beispielsweise während der Behandlung von Mastitis durch intramammäre Verabreichung.

Die Derivate vorliegender Erfindung können in den pharmazeutischen Präparaten als einzige Wirksubstanz und auch zusammen mit anderen V/irksubstanzen, wie Penicillinen oder Cephalosporinen, vorliegen. Durch die Mitverwendung eines Penicillin?

S09843/0910

oder Cephalosporins entstehen beträchtliche Vorteile, da die so erhaltenen pharmazeutischen Präparate eine erhöhe Wirksamkeit (Synergismus) zeigen.

Beispiele von geeigneten Penicillinen, die in den pharmazeutischen Präparaten vorliegender Erfindung vorhanden sein können, sind Benzylpenicillin, Phenoxymethylpenicillin, Carbenicillin, Azidocillin, Propicillin, Ampicillin, Amoxycillin, Epicillin, Ticarcillin, Cyclacillin, Pirbenicillin, Azlocillin, Mezlocillin, Clebenicillin und andere bekannte Penicilline, einschliesslich deren Vorstufen und ihrer in vivo hydrolysierbaren Ester, wie die Acetoxymethyl-, Trimethylacetoxymethyl-, c^-Athoxycarbonyloxyäthyl- oder die Phthalidylester von Ampicillin, Benzylpenicillin oder Amoxycillin, ferner Aldehyd- oder Ketonaddukte von Penicillinen, die eine 6-cG-Aminoacetamid-Seitenkette aufweisen (wie Hetacillin, Metampicillin und analoge Derivate von Amoxycillin) oder schliesslich ©6-Ester von Carbenicillin oder Ticarcillin, wie deren Phenyl- oder Indanyl-oC-ester.

Beispiele geeigneter Cephalosporine, die in den pharmazeutischen Präparaten vorliegender Erfindung vorhanden sein können, sind Cefatrizin, Cephaloridin, Cephalothin, Cefazolin, Cephalexin, Cephacetril, Cephamandol-nafat, Cephapirin, Cephradin, 4-Hydroxycephalexin, Cefaparol, Cephaloglycin und andere bekannte Cephalosporine oder deren Vorstufen.

Derartige Verbindungen werden häufig in Form eines Salzes, Hydrats oder dergleichen eingesetzt.

503843/0910

Wenn das in dem pharmazeutischen Präparat vorliegende Penicillin oder Cephalosporin für eine orale Verabreichung nicht geeignet ist, wird das Präparat natürlich für eine parenterale Verabreichung angepasst werden. Wie vorstehend ausgeführt worden ist, sind derartige injizierbare oder infundierbare Präparate bevorzugt.

Sehr geeignete Penicilline' zum Einsatz in den pharmazeutischen Präparaten vorliegender Erfindung sind Ampicillin, Amoxycillin, Carbenicillin und Ticarcillin. Derartige Penicilline können in Form eines pharmakologisch verträglichen Salzes, wie des Natriumsalzes, eingesetzt werden.

Gegebenenfalls kann Ampicillin oder Amoxycillin in Form von feinen Teilchen der zwitterionischen Form (im allgemeinen als Ampicillin-trihydrat oder Amoxycillin-trihydrat) zur Verwendung in einer injizierbaren Suspension eingesetzt werden, beispielsweise in der für ein Derivat vorliegender Erfindung vorstehend beschriebenen Weise.

Das bevorzugte Penicillin zum Einsatz in den synergistischen pharmazeutischen Präparaten ist Amoxycillin, beispielsweise als Natriumsalz oder als Trihydrat.

Besonders geeignete Cephalosporine zum Einsatz in den pharmazeutischen Präparaten vorliegender Erfindung sind Cephaloridin und Cefazolin. Derartige Cephalosporine können in Form eines pharmakologisch verträglichen Salzes, beispielsweise des Natriumsalzes, verwendet werden.

809843/0910

£817085

Wenn ein Derivat vorliegender Erfindung zusammen mit einem Cephalosporin oder Penicillin vorliegt, kann das Verhältnis von dem Derivat zu Penicillin oder Cephalosporin über einen weiten Bereich schwanken, wie 10 : 1 bis 1 : 10 und beispielsweise etwa 3:1,2:1,1 : 1, 1 : 2, 1 : 3, 1 : 4, 1 : 5 oder 1 : 6 betragen, jeweils bezogen auf das Gewicht und das reine freie antibiotische Äquivalent. Oral verabreichbare pharmazeutische Präparate mit einem Gehalt an einem Derivat vorliegender Erfindung enthalten gewöhnlich eine verhältnismässig grössere Menge an dem Synergisten als entsprechende injizierbare Präparate. So kann das Verhältnis in einem oralen Präparat .beispielsweise etwa 3 : 1 bis etwa 1 : 1 betragen, während ein entsprechendes injizierbares Präparat ein Verhältnis von etwa 1 : 1 bis etwa 1 : 3 aufweist, jeweils bezogen auf das Verhältnis von Derivat der Erfindung zu Penicillin bzw. Cephalosporin.

Die Gesamtmenge an einem Derivat vorliegender Erfindung, die in einer Einzeldosierung vorliegen kann, liegt üblicherweise zwischen 25 und 100 mg, gewöhnlich zwischen 50 und 500 mg, beispielsweise bei etwa 62,5, 100, 125, 150, 200 oder 250 mg.

Die pharmazeutxschen Präparate vorliegender Erfindung können zur Behandlung von Infektionen von unter anderem der Atemwege, der Harnwege und der Weichteile beim Menschen und zum Behandeln von Rindermastitis eingesetzt werden.

Üblicherweise werden je Behandlungstag zwischen 50 und 1000 mg des erfindungsgemässen Derivats verabreicht, doch können ge-

S09843/0910

^817085

wohnlich täglich zwischen 100 und 750 mg des erfindungsgemässen Derivats verabreicht werden, beispielsweise in 1 bis 6 Dosen, im allgemeinen in 2, 3 oder 4 Dosen.

Das Penicillin oder Cephalosporin in den synergistischen Präparaten vorliegender Erfindung liegt gewöhnlich in etwa der Menge vor, die üblicherweise verwendet wird und die gewöhnlich etwa 62,5 bis 1000 mg je Dosis, noch zweckmässiger etwa 125» 250 oder 500 mg je Dosis beträgt.

Ein besonders vorteilhaftes Präparat gemäss vorliegender Erfindung enthält 150 bis 1000 mg Amoxycillin als Trihydrat oder Natriumsalz und 25 bis 500 mg eines Derivats vorliegender Erfindung.

Am zweckmässigsten enthält diese Art des Präparats ein Derivat der allgemeinen Formeln III bis VIII.

Ein weiteres besonders günstiges Präparat vorliegender Erfindung enthält 150 bis 1000 mg Ampicillin oder dessen Vorstufe und 25 bis 500 mg eines Derivats vorliegender Erfindung.

Am zweckmässigsten enthält diese Form des Präparats Ampicillintrihydrat, wasserfreies Ampicillin, das Natriumsalz des Ampicillins, Hetacillin, Pivampicillin-hydroChlorid, Bacampicillinhydrochlorid oder Talampicillin-hydrochlorid. Diese Form von Präparaten enthält am zweckmässigsten ein Derivat der allgemeinen Formeln III bis VIII.

S09843/0910

Die vorstehend genannten pharmazeutischen Präparate enthalten am zweckmässigsten 200 bis 700 mg an einer Penicillin-Verbindung und 50 bis 250 mg eines Derivats der allgemeinen Formeln III bis VIII, vorzugsweise in kristalliner Form.

Derartige pharmazeutische Präparate können für eine orale oder parenterale Verwendung angepasst sein, mit der Massgabe, dass bei einem Gehalt von einem in vivo hydrolysierbaren Ester des Ampicillins oder Amoxycillins die Präparate nicht für eine parenterale Verabreichung einsetzbar sind.

Andere besonders günstige pharmazeutische Präparate vorliegender Erfindung enthalten 200 bis 2000 mg Carbenicillin, Ticarcillin oder deren Vorstufen und 50 bis 500 mg eines Derivats vorliegender Erfindung.

Zweckmässigerweise enthalten derartige Präparate das Dinatriumsalz des Carbinicillins oder des Ticarcillins.

In zweckmässigerer Weise enthalten diese Formen von pharmazeutischen Präparaten 75 bis 250 mg eines Derivats der allgemeinen Formeln III bis VIII, vorzugsweise in kristalliner Form. Derartige Präparate mit den Dinatriumsalzen von Carbenicillin und Ticarcillin sind für eine parenterale Verabreichung einsetzbar.

Einen weiteren Gegenstand vorliegender Erfindung bildet ein Verfahren zur Behandlung von bakteriellen Infektionen bei Menschen und Haustieren mit dem Kennzeichen, dass man ein

809843/0910

pharmazeutisches Präparat nach vorliegender Erfindung verabreicht.

Gewöhnlich beruht die behandelte Infektion auf einem Stamm von Staphylococcus aureus, Klebsieila aerogenes, Escherichia coli, Proteus-Spezies oder dergleichen. Derjenige Mikroorganismus, der am einfachsten mittels einer antibakteriell wirksamen Menge eines Derivats vorliegender Erfindung zu behandeln sein scheint, ist Staphylococcus aureus. Die anderen genannten Mikroorganismen werden einfacher durch Anwendung einer synergistisch wirksamen Menge eines Derivats vorliegender Erfindung und eines Penicillins oder Cephalosporins behandelt. Die Verabreichung der beiden Bestandteile kann getrennt erfolgen, doch bevorzugt man gewöhnlich die Verwendung eines pharmazeutischen Präparats mit einem Gehalt an sowohl dem synergistisch wirkenden Derivat vorliegender Erfindung und von Penicillin oder Cephalosporin.

Die Indikationen für eine Behandlung umfassen Infektionen der Atmungswege und der Harnwege beim Menschen und der Mastitis bei Rindern.

Einen weiteren Gegenstand vorliegender Erfindung bildet ein Verfahren zur Herstellung eines Derivats der allgemeinen Formel II oder deren Ester mit dem kennzeichnenden Merkmal, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel X :

309843/0910

oder deren Ester, in der R^ die bei der allgemeinen Formel II angegebenen Bedeutungen besitzt und FU ein Rest der allgemeinen Formel (a) ist, wie er bei der allgemeinen Formel II definiert ist, hydriert und gegebenenfalls anschliessend das Zwitterion der allgemeinen Formel Ha verestert, wie es vorstehend beschrieben ist, und das durch Hydrieren eines Derivats der allgemeinen Formel X oder eines hydrolysierbaren Esters hergestellt worden ist.

Der hierin verwendete Ausdruck "hydrierbarer Ester" bedeutet einen Ester, der beim Hydrieren gespalten wird und .die Stammcarbonsäure liefert.

Die Hydrierung wird gewöhnlich in Gegenwart eines Übergangmetallkatalysators durchgeführt.

Der bevorzugt verwendete Katalysator ist Palladium, beispielsweise auf einem solchen Material, wie Aktivkohle (Tierkohle), Bariumsulfat, Calciumcarbonat oder dergleichen.

Bevorzugt ist als Katalysator Palladium auf Aktivkohle, wenn er beispielsweise 5 Prozent, 10 Prozent, 20 Prozent oder

30 Prozent Palladium auf Aktivkohle enthält.

Katalysatoren mit einem höheren Palladiumgehalt sind besonders geeignet, da man ein geringeres Gesamtgewicht an dem Katalysa- i

S 09843/09 1 0

tor einsetzen kann und dadurch mögliche Schwierigkeiten vermeidet, die mit einer Absorption des Endprodukts an die Kohle des Katalysators verbunden sind.

Bei der Hydrierung kann ein niedriger, normaler oder hoher Wasserstoff druck, beispielsweise von l,Olj525 bis 6,0795 bar angewendet werden. Wenn der verwendete Katalysator einen niedrigen Prozentsatz an Palladium, beispielsweise 5 oder 10 % Palladium, enthält, werden im allgemeinen bei Wasserstoffdrücken von 3*03975 bis 5,06625 bar, beispielsweise etwa 4,055 bar, bessere Ausbeuten an dem gewünschten Derivat erhalten. Wenn der verwendete Katalysator einen höheren Prozentsatz an Palladium, beispielsweise 20 oder J50 % Palladium, enthält, kann man auch bei niedrigen und normalen Wasserstoffdrücken, beispielsweise etwa 1,01525 bis 2,0265 bar, zufriedenstellende Ausbeuten an dem gewünschten Derivat erhalten. Es ist jedoch als zweckmäßig gefunden worden, Wasserstoffnormaldruck oder einen etwas darüber liegenden Wasserstoffdruck in Verbindung mit Katalysatoren mit einem höheren Palladiumgehalt zu verwenden.

Die Hydrierung wird gewöhnlich bei einer nicht-extremen Temperatur, beispielsweise von 0 bis 30°C, insbesondere bei Temperaturen von 12 bis 25⁰C, durchgeführt. Im allgemeinen ist es sehr zweckmäßig, die Hydrierung bei Raumtemperatur durchzuführen.

Beispiele für geeignete Lösungsmittel bei der Hydrierung sind Äthanol, n-Propanol, Isopropanol, Tetrahydrofuran, Dioxan, Äthylacetat oder Gemische dieser Lösungsmittel oder Gemische dieser Lösungsmittel mit Wasser. Bevorzugte Lösungsmittel sind wäßriges Tetrahydrofuran und ein Gemisch aus Isopropanol, Tetra-

809843/0310

hydrofuran und Wasser. ^av 2817085

Zweckmässigerweise ist R^ ein Rest der allgemeinen Formel(b), wie sie vorstehend definiert ist.

Venn R.. ein substituierter Phenylrest ist, dann bedeutet der Rest Ry in besonders zweckmässiger Weise einen gleichen substituierten Phenylrest oder die Phenylgruppe.

Am zweckmässigsten ist Ry die Phenylgruppe.

Vorteilhafterweise ist R₁ die Phenylgruppe oder ein substituierter Phenylrest, wie er bei den allgemeinen Formeln III bis VII angegeben ist.

Vorzugsweise wird die Hydrierung bei einem hydrierbaren Ester eines Derivats der allgemeinen Formel X durchgeführt, so dass sich bei der Hydrierung ein Derivat der allgemeinen Formel II per se bildet. Die Hydrierung derartiger Ester verläuft zumindest teilweise über die Bildung eines Derivats der allgemeinen Formel X. Bevorzugte hydrierbare Ester sind Benzyl- und substituierte Benzylester, wie die Methoxybenzyl-, Nitrobenzyl- (beispielsweise p-Nitrobenzyl-), Chlorbenzyl-'oder Brombenzylester. Ein besonders geeigneter hydrierbarer Ester ist der Benzylester. Ein weiterer besonders geeigneter hydrierbarer Ester ist der p-Methoxybenzylester.

Im allgemeinen kann das gewünschte Derivat aus dem Reaktionsgemisch durch Abfiltrieren der Feststoffe, d.h. des Katalysators, der gut gewaschen werden muss, um das Endprodukt zu entfernen, und dann durch Abdampfen des Lösungsmittels,

309843/0910

vorzugsweise unter vermindertem Druck, isoliert werden. Eine weitere Reinigung kann durch übliche Verfahren erfolgen, beispielsweise durch Chromatographieren an Cellulose oder einer anderen mild wirkenden stationären Phase und Eluieren mit einem Alkanol mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, gegebenenfalls in Gegenwart von Wasser und gegebenenfalls in Gegenwart von Tetrahydrofuran. Nach Eindampfen der vereinigten aktiven Fraktionen, deren Aktivität durch eine Besprühung mit einer wässrigen Kaliumpermanganatlösung auf eine Dünnschicht-Chromatographieplatte festgestellt worden ist, erhält man das gewünschte Derivat in reiner Form. Das gewünschte Derivat wird gewöhnlich in kristalliner Form erhalten, wenn es nicht in Form eines salzfreien Esters vorliegt. Zur Unterstützung bzw. Beschleunigung der Kristallisation kann man das Produkt mit Äthanol, Isopropanol oder ähnlichen Alkoholen mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder anderen üblichen Lösungsmitteln, wie Ketonen, Äthern oder Estern oder sonstigen üblichen Lösungsmitteln, beispielsweise mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen und insbesondere mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen, verreiben. Eine Umkristallisierung aus Äthanol kann ebenfalls angewendet werden. Das verwendete Lösungsmittel bei diesem Verfahren kann vorzugsweise feucht sein.

Zwitterionische Derivate , wie diese der allgemeinen Formeln III bis IV, kann man aus höhere Ausbeuten liefernden Reaktionen durch Zugabe eines Alkanols mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, wie kaltem Äthanol oder dergleichen, erhalten.

309843/0910

Ein Derivat aus mit niedrigeren Ausbeuten verlaufenden Reaktionen kann in erheblicher Menge Verunreinigungen enthalten, so dass es vorteilhaft sein kann, ein derartiges Derivat zu waschen, indem man es in einem mit Wasser nicht mischbaren organischen Lösungsmittel löst und in Wasser extrahiert. Ein Eindampfen der wässrigen Phase, vorzugsweise unter einem stark verminderten Druck, ergibt dann ein reineres Produkt, das dann gegebenenfalls noch weiter gereinigt werden kann, wie es vorstehend beschrieben worden ist.

Nicht in.Salzform vorliegende Ester der Derivate der allgemeinen Formel II können als Öle vorliegen, so dass es häufig aus Handhabungszwecken zweckmässiger ist, diese Ester in feste Säureadditionssalze zu überführen, beispielsweise durch Umsetzen mit einem Äquivalent einer Säure. Gegebenenfalls können nicht hydrierbare Ester von Derivaten der allgemeinen Formel X in Gegenwart eines Äquivalents einer Säure hydriert werden, d.h., dass sie in Form ihrer Säureadditionssalze hydriert werden.

Die Derivate der allgemeinen Formel II können in Form ihrer Säureadditionssalze mit einer starken Säure hydriert werden, doch stellt dies keine bevorzugte Ausführungsform vorliegender Erfindung dar.

Die vorliegende Erfindung stellt auch ein Verfahren zur Herstellung eines Esters eines Derivats der allgemeinen Formel II zur Verfügung, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man ein Derivat der allgemeinen Formel II mit einem Ver-

509843/0910

esterungsmittel umsetzt.

Das zwitterionische Derivat der allgemeinen Formel II kann in einem Lösungsmittel, wie Dimethylformamid, Hexamethylphosphoramid, Dichlormethan, Äthylacetat oder anderen nicht veresterbaren Lösungsmitteln, gelöst oder suspendiert und darin verestert werden. Zweckmässige Temperaturen für diese Vere-sterung liegen im Bereich von etwa 0 bis etwa 25⁰C Geeignete Veresterungsmittel sind reaktionsfähige Halogenide und ihre äquivalenten Verbindungen, ferner Alkyloxoniumsalze und dergleichen.

Wenn als Reaktionsmittel ein reaktionsfähiges Jodid, Chlorid, Bromid, Toxylat, Mesylat oder eine äquivalente Verbindung verwendet wird, liegt das erhaltene Salz gewöhnlich in einer für die Verwendung in den pharmazeutischen Präparaten vorliegender Erfindung geeigneten Form vor. Gegebenenfalls kann das Salz in die freie Base oder in ein anderes Salz umgewandelt werden. Wenn ein Alkyloxoniumsalz verwendet wird, ist es vorteilhaft,, das erhaltene Tetrafluorborat in die freie Base oder ein anderes Salz umzuwandeln. Die verschiedenen vorgenannten Salze können durch Neutralisieren in die freie Base umgewandelt werden, indem man beispielsweise eine Lösung des Salzes in Wasser mit einer organischen Phase in Berührung bringt, das Salz durch Zugeben einer Base neutralisiert und das freigesetzte Amin in die organische Phase extrahiert. Dieses Amin kann danach durch Umsetzen in einer geeigneten Säure, beispielsweise in einem wasserfreien orga-

309843/0910

SH

nischen Lösungsmittel, wieder in ein Salz überführt v/erden. Im allgemeinen bevorzugt man bei diesem Verfahren, nicht mehr als ein Äquivalent Säure einzusetzen. Gegebenenfalls kann das ursprünglich gebildete Salz in ein anderes Salz umgewandelt werden, indem man eine Ionenaustauschsubstanz verwendet, indem man beispielsweise eine wässrige Lösung des einen Salzes durch ein Bett eines Anionaustauschharzes in Form des gewünschten Salzes, wie der Chloridform, leitet.

Die Salze werden üblicherweise in fester Form erhalten, indem man sie in einem ziemlich polaren organischen Lösungsmittel, wie Äthanol, Tetrahydrofuran oder dergleichen, löst und sie dann unter Verwendung eines nicht polaren Lösungsmittels, wie Diäthyläther, Cyclohexan oder dergleichen, ausfällt.

Die Salze von Estern der Derivate der allgemeinen Formel II können im allgemeinen in kristalliner Form nach üblichen Verfahren, wie Verreiben mit oder Kristallisieren oder Umkristallisieren aus einem geeigneten organischen Lösungsmittel, wie Äther, Aceton, Acetonitril, Tetrahydrofuran oder dergleichen, erhalten werden.

Die vorliegende Erfindung stellt weiterhin ein Verfahren zur Herstellung eines Esters eines Derivats der allgemeinen Formel II zur Verfügung, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man ein Säureadditionssalz eines Derivats der allgemeinen Formel II mit einem Alkohol in Gegenwart eines Kondensationsbeschleunigungsmittels umsetzt.

309843/09 1 0

Geeignete Kondensationsbeschleunigungsmittel zur Anwendung bei diesem Verfahren schliessen Carbodiimide, wie Dicyclohexylcarbodiimid und dessen chemische Äquivalente, ein.

Das Säureadditionssalz kann in situ gebildet oder kann vorgebildet sein. Die eingesetzte Säure ist gewöhnlich eine starke Säure, wie die Methansulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure oder dergleichen oder Trifluoressigsäure oder dergleichen.

Die Umsetzung wird gewöhnlich in einem inerten organischen Lösungsmittel durchgeführt. Wenn der zu bildende Ester ein solcher eines flüssigen Alkohols ist, ist es zweckmässig, diesen Alkohol als Lösungsmittel oder als Teil des Lösungsmittelsystems zu verwenden. Die Veresterung wird gewöhnlich bei einer nicht extremen Temperatur, wie 0 bis 35⁰C, beispielsweise von etwa 10 bis 25⁰C, durchgeführt. Zweckmässigerweise wird das Reaktionsgemisch bei Raumtemperatur gehalten.

Die vorliegende Erfindung stellt auch ein Verfahren zur Herstellung eines Esters eines Derivats der allgemeinen Formel II zur Verfügung mit dem kennzeichnenden Merkmal, dass man einen entsprechenden Ester eines Derivats der allgemeinen Formel XI

_H CO-O-CH₂R₇

• 6' ■ CO₂H

309843/0910

hydriert, in der R^ die bei der allgemeinen Formel II angegebenen Bedeutungen besitzt und Ry die bei der allgemeinen Formel X angegebenen Bedeutungen aufweist.

Der Rest R₇ ist am zweckmässigsten die Phenylgruppe.

Der Ester eines Derivats der allgemeinen Formel XI ist zweckmässigerweise ein Ester, wie er in bezug auf die allgemeine Formel VIII definiert ist.

Besonders geeignete Ester von Derivaten der allgemeinen Formel XI sind Alkylester mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, insbesondere die Methyl- und Äthylester.

Die Hydrierung kann unter den gleichen allgemeinen Bedingungen durchgeführt werden, wie sie vorstehend in bezug auf die Hydrierung eines Derivats der allgemeinen Formel X angegeben worden sind.

Ein bevorzugtes Lösungsmittel ist Tetrahydrofuran, gegebenenfalls im Gemisch mit Wasser oder mit einem Alkohol mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, wie Äthanol. Zweckmässigerweise wendet man bei der Hydrierung Wasserstoff unter Normaldruck und bei Raumtemperatur an.

Ferner stellt die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Herstellung eines Esters eines Derivats der allgemeinen Formel XI zur Verfugung, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man ein Salz eines Derivats der allgemeinen Formel XI verestert.

309843/0910

Am zweckmässigsten erfolgt diese Veresterung durch Umsetzung eines Salzes eines Derivats der allgemeinen Formel XI mit einem reaktionsfähigen Halogenid oder dessen chemischem Äquivalent.

Geeignete Salze von Derivaten der allgemeinen Formel XI sind die Lithium-, Natrium- und Kaliumsalze. Zweckmässige Veresterungsmittel sind reaktionsfähige Chloride, Bromide, Jodide, Säureanhydride, Tosylate, Mesylate und dergleichen.

Die Veresterung kann in einem üblichen organischen Lösungsmittel, wie Aceton, Dimethylformamid oder dergleichen, durchgeführt werden. Die Umsetzung erfolgt gewöhnlich bei nicht extremen Temperaturen, wie O bis 35⁰C, beispielsweise 10 bis 25 C. Im wesentlichen wird die Umsetzung bei Raumtemperatur durchgeführt.

Es kann auch eine Säure der allgemeinen Formel XI verestert werden, indem man die Säure mit einem Alkohol in Gegenwart eines Kondensationsbeschleunigungsmittels, wie einem Carbodiimid, beispielsweise Dicyclohexylcarbodiimid, oder dessen chemischem Äquivalent, umsetzt. Derartige Umsetzungen finden unter ähnlichen Bedingungen statt, wie sie vorstehend für die gleiche Art einer Umsetzung beschrieben worden sind, wie sie bei einem Säureadditionssalz eines Derivats der allgemeinen Formel II durchgeführt wird.

Schliesslich stellt die vorliegende Erfindung noch ein Verfahren zur Herstellung eines Derivats der allgemeinen For-

309843/0910

mel XI oder dessen Salz zur Verfügung, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man ein Derivat der allgemeinen Formel II oder dessen Salz wie vorstehend beschrieben, mit einer Verbindung der allgemeinen Formel XII

Y-CO-O-R₇ (XII)

umsetzt, in der R₇ die bei der allgemeinen Formel X angegebene Bedeutung besitzt und Y ein leicht ersetzbarer Rest ist.

Vorteilhafte Reste Y' sind das Chloratom oder chemisch äquivalente Atome oder Reste, wie das Bromatom oder der Rest -OR₇.

Eine bevorzugte Verbindung der allgemeinen Formel XII ist der Chlorameisensäure -benzylester.

Die Umsetzung kann unter üblichen Acylierungsbedingungen, beispielsweise in einem nicht acylierbaren organischen Lösungsmittel, wie Aceton, in Gegenwart eines Säureakzeptors, wie Lithiumbicarbonat, Natriumcarbonat, Kaliumcarbonat oder dergleichen bei -nicht extremer Temperatur, wie 10 bis 3O⁰C, beispielsweise bei etwa 0 bis 10⁰C, erfolgen.

Es ist gefunden worden, dass es zweckmässig ist, die Acylierung bei einem Salz eines Derivats der allgemeinen Formel II, wie einem Alkalimetallsalz oder insbesondere dem Lithiumsalz, durchzuführen.

Aus den vorstehenden Ausführungen ist ersichtlich, dass hinsichtlich ihrer Breite die vorliegende Erfindung ein Verfah-

SQ9843/0910

ren zur Herstellung eines Derivats der vorstehend beschriebenen allgemeinen Formel II oder deren Ester zur Verfügung stellt, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man ein Derivat der vorstehend beschriebenen allgemeinen Formel X oder deren Ester hydriert, danach gegebenenfalls das Zwitterion der vorstehend beschriebenen allgemeinen Formel Ha, das durch Hydrieren eines Derivats der allgemeinen Formel X oder dessen hydrierbaren Ester hergestellt worden ist, hydriert oder danach gegebenenfalls das Zwitterion der vorstehend beschriebenen allgemeinen Formel Ha, das durch Hydrieren eines Derivats der allgemeinen Formel X oder dessen hydrierbaren Ester hergestellt worden ist, mit einer Verbindung der vorstehend angegebenen allgemeinen Formel XII acyliert, wobei sich ein Derivat der vorstehend beschriebenen allgemeinen Formel XI bildet, und danach das erhaltene Derivat der allgemeinen Formel XI oder dessen Salz verestert und den gebildeten Ester einer Hydrierung unterwirft, um den gewünschten Ester eines Derivats der allgemeinen Formel II zu erhalten.

Da die Derivate der allgemeinen Formel XI und ihre Salze und Ester als Zwischenprodukte verwendet werden, stellen sie einen Teil vorliegender Erfindung dar. Zweckmässigerweise liegen die Derivate der allgemeinen Formel XI in Form eines Esters vom vorstehend beschriebenen Typ vor. Die Derivate der allgemeinen Formel XI liegen geeigneterweise in Form eines Salzes, wie eines Alkalimetallsalzes, beispielsweise des Lithiumsalzes, vor.

SQ98A3/0910

Die Zwischenprodukte der allgemeinen Formel X und ihre Ester können nach dem in der DE-OS 26 46 003 beschriebenen Verfahren hergestellt werden.

Für die neuen Derivate vorliegender Erfindung mögen die neuen Verbindungen vorliegender Erfindung dem Begriff nach als Derivate der Desoxy-clavulansäure der nachstehenden Formel XIII bezeichnet werden :

³ (XIII)

Auf Grund dieses Systems ist der Amino-Substituent als an das Kohlenstoffatom in 9-Stellung gebunden definiert.

Die Verfahren vorliegender Erfindung können zur Herstellung der nachstehenden Verbindungen eingesetzt werden :'

9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure

9-N-(2-Methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(3-Methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(4-Methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(4-Hydroxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(3-Hydroxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure

9-N-(4-Hydroxy-3-methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(3-Hydroxy-4-methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure

9-N-(2-Fluorbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure

S098A3/0 910

(.4

9-N-(3-Fluorbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure

9-N-(4-Fluorbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(2-Methylbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N- (3-Methylbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(4-Methylbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(2-Acetaraidobenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(3-Acetamidobenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(4-Acetamidobenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(4-Propionamidobenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(4-Chlorbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(2-Hydroxyäthyl)-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-Äthyl-amino-desoxy-clavulansäure 9-N-(2-Hydroxypropyl)-amino-desbxy-clavulansäure und 9-N-Propyl-amino-desoxy-clavulansäure.

Die vorliegende Erfindung stellt auch Ester der vorstehenden Verbindungen zur Verfügung, die in Form eines Säureadditionssalzes vorliegen können. Geeignete Ester sind die Methyl-, Äthyl-, Methoxymethyl-, Benzoylmethyl-, Acetylmethyl-, Benzyl-, 4-Methoxybenzyl-, 2-Hydroxyäthyl- und die Carboxymethyl-Ester.

Geeignete Säureadditionssalze sind gewöhnlich und vorzugsweise mit pharmakologisch verträglichen Säuren gebildet.

Nachstehend werden Verfahren zur Herstellung der Zwischenverbindungen veranschaulicht. Die sekundären Amine, die zum Abspalten eines Acyloxyrestesaus di-acylierten Clavulansäure-Derivaten verwendet werden, können durch Hydrieren einer

S098/>3/0910

Schiff'sehen Base hergestellt werden, die durch Umsetzen eines Aldehyds und eines primären Amins in üblicher Weise gewonnen werden kann.

Herstellung von Zwischenverbindungen

A. 9-(N-benzyl-N~2-hydroxyäthyl)-amino-desoxy-clavulansäurebenzylester.

0,5 g Clavudien-benzylester in 10 ml Acetonitril werden auf O⁰C gekühlt und dann mit 0,36 g N-Benzyl-2-hydroxyäthylamin versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 150 Minuten gerührt. Dann fügt man 100 ml Äthylacetat hinzu und engt das Gemisch unter vermindertem Druck ein. Der Rückstand wird unter Verwendung von Äthylacetat als Eluierungsmittel chromatographiert. Die Verbindung, die in einer niedrigen Ausbeute isoliert wird, besitzt ein IR-Spektrum (Flüssigkeitsfilm) von 3400 (breit, OH-Gruppe), 1800 (ß-Lactam-C=O), 1740 (Ester-C=O), 1700 (C=C), 1695 cm (aromatische Protonen).·

B. 9-(N-Benzyl-N-2-hydroxyäthyl)-amino-desoxy-clavulansäurep-methoxybenzylester.

5,37 mMol Trichloracetyl-clavulansäure-p-methoxybenzylester in 75 ml wasserfreiem Dimethylformamid v/erden bei -10 C mit 1,55 ml N-Benzyl-N-2-hydroxyäthylamin behandelt und bei dieser Temperatur 5 Stunden gerührt. Das Gemisch wird in 150 ml Äthylacetat gegossen, dreimal mit je 100 ml Wasser gewaschen, getrocknet und zu einem Öl eingedampft. Ausbeute: 0,38 g.

809843/0910

Rf (SiO₂/Äthylacetat: Cyclohexan im Verhältnis 1 : 1) = 0,13. ^ (Film) : 3400, 1810, 1750, 1620 cm"¹.

C. 9-(N-Benzyl-N-äthyl)-amino-desoxy-clavulansäure- . benzylester.

9»2 mMol Trichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 30 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden bei -60⁰C mit 2,74 ml N-Benzyl-äthylamin behandelt und 210 Minuten bei dieser Temperatur gerührt. Das Gemisch wird in 150 ml Äthylacetat gegossen, dreimal mit je 100 ml Wasser gewaschen, getrocknet und unter vermindertem Druck zu einem Öl eingedampft. Ausbeute : 4,43 g.

Rf (SiO₂/Äthylacetat: Cyclohexan im Verhältnis 1 : 1).= 0,3. ^(FiIm) : 1804, 1750 cm"¹.

D. 9-(N-Benzyl-N-isopropyl)-amino-desoxy-clavulansäurebenzylester.

0,5 g Clavudien-benzylester in 10 ml Acetonitril werden in Eiswasser gekühlt. Dann fügt man unter Rühren 0,39 g (1»3 Mol) N-Isopropyl-benzylamin hinzu und lässt die Temperatur des Reaktionsgemisches auf Raumtemperatur ansteigen. Dann rührt man das Reaktionsgemisch 3 Stunden, fügt 100 ml Äthylacetat hinzu und engt die Lösung unter vermindertem Druck ein. Der Rückstand wird an Silicagel unter Verwendung von Cyclohexan und Äthylacetat als Eluierungsmittel chromatographiert. Nach dem nicht umgesetzten Dien wird die in der Überschrift genannte Verbindung eluiert.

3098 4 3/0310

E. 9-(N,N-Dibenzyl)-amino-desoxy-clavulansäurebenzylester.

0,8 g Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester werden in wasserfreiem Dimethylformamid gelöst und auf O⁰C gekühlt und dann im Verlauf von 15 Minuten mit 7,68 /ul (0,004 Mol) Dibenzylamin in 4 ml wasserfreiem Dimethylformamid behandelt, wobei die Temperatur auf O⁰C gehalten wird. Die erhaltene gelbe Lösung wird 150 Minuten bei O⁰C und dann 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Dann fügt man 100 ml Äthylacetat hinzu und wäscht die Lösung dreimal mit je 25 ml Wasser, trocknet sie und dampft sie ein. Der Rückstand wird durch Chromatographieren an Silicagel unter Verwendung eines Gemisches von Äthylacetat und Cyclohexan als Eluierungsmittel mittels einer rasch verlaufenden Elution gereinigt. Ausbeute : 0,33 g.

Rf (SiO₂/Äthylacetat : Cyclohexan im Verhältnis 1 : 1)= 0,76. IR-Spektrum (Film) : ^ = 1810, 1755, 1700 cm"¹.

NMR-Spektrum in CDCl₃: S= 2_f80 (1H, d", JVI 6Hz,

6ß-CH);3_fO5 (2H, d, J=THz, 9-CH₂)J 3,17-3,37 (1H, m, 6a-CH)_;3,32 (4H,"s, 2 χ NCH₂C₆H₅); 4_;59 (1H, t, JVTHz, 8-CH); 4,90 (1H, s, 3-CH); 5,03 (2H, s, OCH₂C₆H₅); 5_f 57 (1H, d, JV₅Hz, 5«-CH) ; 7,20 (15H, s, 3 x C₆H₅).

S098A3/0910

GS

F. 9-(N,N-Dibenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure-benzylester.

271 mg Clavudien-benzylester in 4 ml wasserfreiem Acetonitril werden im Verlauf von 5 Minuten bei O⁰C mit 197 mg Dibenzylamin in 2 ml wasserfreiem Acetonitril behandelt. Dann rührt man das Reaktionsgemisch zwei weitere Stunden bei O⁰C und anschliessend 2 Stunden bei Raumtemperatur. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels wird der Rückstand in Äthylacetat gelöst, mit Wasser gewaschen, getrocknet, eingedampft und an Silicagel fraktioniert. Man erhält die gewünschte Verbindung, die chromatographisch gereinigt ist.

G. 9~i_ N-Benzyl-N-(dl-2-hydroxypropyl27-amino-desoxyclavulansäure-benzylester.

0,8 g Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 20 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden auf 0 C gekühlt und dann mit einer Lösung von 0,65 g dl-i-Benzylamino-2-propanol in wasserfreiem Dimethylformamid langsam versetzt. Das Rühren wird noch 4 Stunden bei O⁰C fortgesetzt. Es wird eine polare Verbindung gebildet (Dünnschichtchromatographie) und wie unter E. beschrieben aufgearbeitet. Nach dem Chromatographieren erhält man 0,16 g der gewünschten Verbindung.

H. 9-/~N-Benzyl-N-(dl-2-hydroxypropyl)_7-amino-desoxyclavulansäure-benzylester.

2,5 g (5,8 mMol) Trichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 50 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden bei -10⁰C

S098A3/0910

tropfenweise mit 1,9 Äquivalenten N-Benzyl-N-(dl-2-hydroxypropyl)-amin in 20 ml Dimethylformamid behandelt. Das Reaktionsgemisch rührt man 270 Minuten bei -1O⁰C, giesst es in Äthylacetat von 0 C und wäscht die organische Schicht 5 mal mit je 75 ml Wasser. Nach dem Trocknen leitet man die Äthylacetat-Lösung durch eine Säule mit Silicagel der Abmessungen 0,5 x 2,5 cm und eluiert mit 75 ml Äthylacetat, bis das Eluat nicht mehr gefärbt ist. Die Äthylacetatlösung wird dreimal mit je 50 ml verdünnter Essigsäure extrahiert. Die wässrigen Extrakte werden vereinigt und in Gegenwart von 80 ml frischem Äthylacetat unter kräftigem Rühren mit Natriumbicarbonat behandelt, bis der pH-Wert die wässrigen Phase 8 beträgt,, Dann wird die Äthylacetatphase getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 700 mg eines gelben Öls»

Rf (SiO₂/Äthylacetat : Cyclohexan im Verhältnis 1 : 1) =0,28 (Feststellung durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlösung.

(KBr) 3410 (breit), 1795, 1740, 1700 cm"¹; ί[(CTu)₂ 0,98 (3H, d, J=6Hz, CHCH₃)*, 2,28,2,30 (2H, 2 χ d, J=6Hz, NCH₂-CH(OH)); 2,91,2,94 (1H, 2 χ d, J>17Hz, 6ß-CH)j 3,15 (2H, d, J> 7Hz, 9-CH₂); 3,2-3,9 (5H, m, NCH₂C₆H₅, -CH₂CH(OH)CH₃, βα-CH, CHOjp', 4_;72 (1H, t, J=7Hz, 8-CH); 5_fO6 (1H, s, 3-CH).

S09843/0910

J. 9-N-Benzyl-N-(4-methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure benzylester.

4,8 g (12 mMol) Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 50 ml Dimethylformamid werden bei O C tropfenweise mit 5,2g (1,9 Äquivalenten) N-Benzyl-N-4-methoxybenzylamin behandelt. Das Reaktionsgemisch wird 60 Minuten bei O⁰C und danach 5 Stunden bei 20⁰C gerührt. Dann giesst man das Reaktionsgemisch in Äthylacetat von O⁰C und wäscht die organische .Schicht dreimal mit je 75 ml Wasser und dann 5 mal mit je 75 ml gesättigter Natriumchloridlösung. Die Äthylacetatphase wird getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 6,6 g eines gefärbten Öls, das an Silicagel chromatographiert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 2,24 g der in der Überschrift genannten Verbindung als farbloses Öl.

Rf (SiO₂/Äthylacetat : Cyclohexan im Verhältnis 1:1) = 0,70.

V^^Film)i1805, 1750, 1690, 1610, 1510, 1300, 1250,'1175, 740, cm"¹. . ·

.(CDCl₃); 2,87 (1H, d, J*17Hz, 6ßCH); 3,10 (2H, d, JV/Ήζ, 9CH₂); 3,33 (1H, dd, J>17 Hz und 3Hz, 6aCH); 3,38, 3,43 (4H, 2 χ s, NCH₂C₆H₅ und NCH₂C₆H₄OCH₃)', 3_f70 (3H, s, OCH₃); 4,71 (1H, t, Jc 7Hz, 8CH)', 5,00 (1H, s, 3CH); 5,10 (2H, s, OCH₂C₆H₅); 5,51 (1H, d, J=3Hz, 5aCH)·, 6,75 (2H, d, J= 8Hz, aromatische., H, o-Stellg.zu

Methoxy); 7j09-7,20 (12H, m,aromat.H, m-Stellg.ssu Methoxy und 2xCgH₅).

309843/0910

K. 9-j/ N-Benzyl-N-(4-fluorbenzyl)_7-amino-desoxy-clavulansäure-benzylester.

8,5 g (21 mMol) Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 75 ml Dimethylformamid werden bei O⁰C tropfenweise mit 8,1 g (1,9 Äquivalenten) N-Benzyl-N-4-fluorbenzylamin behandelt. Das Reaktionsgemisch wird 60 Minuten bei O⁰C und dann 5 Stunden bei 20⁰C gerührt. Dann gießt man das Reaktionsgemisch in 150 ml Äthylacetat von O⁰C und wäscht die organische Schicht dreimal mit je 75 ml Wasser und 4 mal mit je 75 ml gesättigter Natriumchloridlösung. Die Äthylacetatphase wird getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 10 g eines gefärbten Öls. 3 g dieses Rohproduktes werden an Silicagel chromatographiert und mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1 eluiert. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 1 g der in der Überschrift genannten Verbindung als farbloses Öl.

Rf (SiO₂/Äthylacetat : Cyclohexan im Verhältnis 1:1) = 0,70 (festgestellt durch Besprühen mit Kaliumpermanganatlösung).

·>> (Film); 1805, 1750, 1690, 1508, 1305/1220, 820, 740, 700 cm"¹.

$ (CDCl₃); 2,90 (1H, d, Jd7Hz, 6ßCH); 3,09 (2H, d, Je? Hz, 9CH₂); 3,-38 (1H, dd, J>17Hz und 3Hz, 6ocCH)', 3_r39, 3,42 (4H, 2 χ s, NCH₂-C₆H₅UiId NCH₂C₆H₄F); 4,70 (1H, t, J₅7Hz, 8CH); 5,02 (1H, s, 3-CH)·, 5,12 (2H, s, OCH₂C₆H₅); 5,54 (1H, d, J-=3Hz, 5ocCH)j 6,80 7_f25 (14H, m, 2 χ CH₂C₅H₅,und CH₂C₆H₄F).

309843/0910

L. 9-/"~N-Benzyl-N~ (4-me thy Ib enzyl)_7-amino-des oxy-clavulansäure-benzylester.

8»5 g (21 mMol) Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 75 ml Dimethylformamid werden bei O C tropfenweise mit 8,40 g (1,9 Äquivalenten) N-Benzyl-N-(4-methylbenzyl)-amin behandelt und 1 Stunde bei O⁰C und 3 Stunden bei 20⁰C, gerührt. Das Reaktionsgemisch wird dann in 150 ml Äthylacetat von O⁰C gegossen, und die organische Phase wird dreimal mit je 75 ml Wasser und viermal mit je 75 ml gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen. Die Äthylacetatphase wird getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 11 g eines gefärbten Öls. 1 g dieses Rohprodukts wird an Silicagel chromatographiert und mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1 eluiert. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 250 mg (= 25 Prozent der Theorie) eines farblosen Öls. Rf (SiOp/Äthylacetat: Cyclohexan im Verhältnis 1:1) = 0,70 (Feststellung durch Besprühen mit wässriger KaIiumpermanganatlösung).

Es werden weitere Fraktionen mit einem Gehalt an der in der Überschrift genannten Verbindung von einem annähernd 80 prozentigen Reinheitsgrad in einer Ausbeute von 0,6 g gesammelt.

309843/0910

-)K Film) Produkts^ ¹⁸°⁵' ¹⁷⁵°' ^{1β90> 1510> 1495> 145}°' 1300, 1230, 1175, 1120, 1080, 1040, 1020, 965, 890, 800, 740,

(CDCl₃)I 2,28 (3H, s, -C₆H₄CH₃); 2,88 (1H, d, J=17 Hz, 66CH); · 3.10 (2H, d, J=7 Hz, 9CH_O)*, 3.35 (1H, dd, Js17 Hz und 3Hz, 6aCH)? 3,42 (4H, s, NCH₂C₆H₅ und NCH₂C₆H₄CH₃); 4,71 (1H, t, J=7 Hz, 8CH)-, 5,00 (1H, s, 3CH); 5,10 (2H, s, OCH₂C₆H₅)' 5,52 (1H, d, Jp3Hz, 5aCH)', 6_f95 - 7_;27 (14H, m, 2 χ CH₂C₅H₅ und CH₂C₆H₄CH₃).

M. 9-/~N-Benzyl-N- (4-benzoxy-3-methoxybenzyl]y^r-aminodesoxy-clavulansäure-benzylester.

1,9 g (4,7 mMol) Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 50 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden bei O⁰C tropfenweise mit 3 g (1,9 Äquivalenten) N-Benzyl-N-(4-benzoxy-3-methoxybenzyl).-amin behandelt. Das Reaktionsgemisch wird 1 Stunde bei O⁰C und dann 5 Stunden bei 2O⁰C gerührt. Dann giesst man das Reaktionsgemisch in Äthylacetat von O⁰C und wäscht die organische Schicht dreimal mit je 75 ml Wasser und 5 mal mit je 75 ml gesättigter Natriumchloridlösung. Die Äthyl acetatphase wird getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält ein gefärbtes Öl, das an Silicagel chromatographiert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 0,1 g der in der Überschrift genannten Verbindung als farbloses Öl.

Rf (SiO₂/Äthylacetat : Cyclohexan im Verhältnis 1:1) = 0,70.

809843/0910

ΊΑ

l> (Film)ϊ 1800, 1750, 1675, 1590, 1510., 1450, 1380, 1300, 1260, 1225, 1160, 1140, 1080, 1015, 805, 740, 700 cm"¹.

ί (CDCl₅).' 2_r90 (1Η, d, JrITHz, 6ßCH); 3,03 (2H, d, J₌7 Hz, 3,37 (1H, dd, Jyi7und 3 Hz, 6ocCH); 3,37, 3,42 (6H, 2 χ s, NCH₂C₆H₅ UWdNCH₂C₆H₃ OCH₃, OCH₂C₆H₅); 3,80 (3H, s,OCH₃); 4,72 (1H₁ t, J=7 Hz, 8CH)·, 5,01 (1H, s, 3CH)-, 5,54 (1H, d, J>3 Hz, 5«CH); 6,70 - 7,34 (18H, m, 3 x CH₂C₆H₅UiId 2H, o-Stellung zu CH₂ von CH₂(C₆H₃)(OCH₃)OCH₂C₆H₅.

N. 9-/_ N-(4-Benzyloxybenzyl)-N-benzyl7-amino-desoxyclavulansäure-benzylester.

7,2 g (18 mMol) Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 75 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden "bei 0 C mit 1,9 Äquivalenten N-(4-Benzoxybenzyl)-N-benzylamin "behandelt. Die Lösung wird 3 Stunden bei O⁰C gerührt und dann in 150 ml Äthylacetat gegossen. Die Lösung wird 5 mal mit je"50 ml Wasser und dann 3 mal mit je 50 ml Natriumchloridlösung gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält ein gefärbtes Öl, das an SiOp chromatographiert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung (Feststellung durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlösung) werden gesammelt. Rf (SiO₂/Äthylacetat : Cyclohexan im Verhältnis 1:1) = 0,81. Die vereinigten Fraktionen werden zu einem Öl eingedampft. Man erhält

309 8 43/0910

2,7 g einer annähernd 70 Prozent reinen Verbindung. Die reinen Fraktionen v/erden für Spektroskop is ehe Zwecke gesammelt.

^(FiIm)J 1800, 1745, 1690, 1600, 1595, 1510,

1450, 1380, 1300, 1230, 1170, 1129, 1080, 1045, 1020, 830, 740, cm"¹; J(CDCl₃): 2,87 (1H, d, J-17Hz, 6ßCH); 3,09 (2H, d, J> 7Hz 9CH₂); 3,33 (2H, dd, J=17Kz und 3Hz, 6aCH); 3,37, 3,42 (4H, χ s, NCH₂C₆H₅ und NCH₂C₆H₄OCH₂C₆H₅); 4,70 (1H, ti J-*7Hz, SCH); 4,97 (3H₁ breit.S, C₆H₄OCH₂C₅H₅ und 3CH); 5,10 (2H, S, CO₂CH₂C₆K₅) 5,51 (1H, d, J= 3 Hz, 5*-CH)', 6,80 (2H, d, J=9Hz aromatische H, Stellg.zu Benzyloxy);7,0 - 7,30 (17H₁ m, N-CH₂C₅H₅, OCH₂C₅H₅, aromatische H, m-Stellung zu Benzyloxy).

0. 9-/ N-3,4-Dimethoxybenzyl)-N-benzyJL7-amino-desoxyclavulansaure-benzylester.

6,56 g (16 mMol) Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 50 ml v/asserfreiem Dimethylformamid werden mit 8 g (1,9 Äquivalenten) N-(3,4-Dimethoxybenzyl)-N-benzylamin in 30 ml Dimethylformamid bei O⁰C behandelt. Das Reaktionsgemisch wird 2 Stunden bei O⁰C und dann 2 Stunden bei 10⁰C gerührt. Dann giesst man das Reaktionsgemisch in 150 ml kaltes Äthylacetat und wäscht das Gemisch 5 mal mit je 50 ml Wasser und 5 mal mit je 50 ml gesättigter Natriumchloridlösung, trocknet es über wasserfreiem Magnesiumsulfat und dampft es unter vermindertem Druck ein. Man erhält 10,1 g eines Öls. 1,2 g dieses Rohproduktes wird an Silicagel

3 C 9 8 /> 3 / 0 9 1 0

chromatographiert. Man eluiert mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt. Rf = 0,74 (SiO₂/Äthylacetat : Cyclohexan im Verhältnis 1 : 1), Feststellung durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlösung. Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 0,35 g eines Öls.

V(FiIm): 1804, 1750,

1690, 1510, 1480, 1305, 1260, 1235, 1175, 1155, 1145, 1120, 1030, 1015, 807, 740, 700 cm"¹.

j)^,^ (1H, d, Jä17Hz, 6ßCH)·, 3,12 (2H, d, Jc7Hz,
3₍38 (1H, dd, J-M Hz und 3Hz, 6*-CH); 3,39, 3,43 (4H, 2 χ s ,
χ NCH₂); 3,83 (6H, S, 2 χ OCH^)·, 4,73 (1H, dt, <H7Hz und< 1Hz, 8CH)·, 5,01 (1H, d, J* 1Hz, 3CH); 5,12 (2H, S, OCH₂C₆H₅),' 5,55
(1H, d, J*3Hz, 5ok-CH)·, 6,73 - 6,83 (3H, m,aromatische H, o-Stellg

; 7_f23 (1OH, m, 2 χ

SG9843/ÜU10

P. 9-/~~Ν- (4-Acetylaminobenzyl) -N-b enzyl7- amino -des oxyclavulansäure-benzylester.

^,4 g (11 mMol) Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 50 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden bei O⁰C tropfenweise mit 5,3 g (1,9 Äquivalenten) N-(4-Acetamidobenzyl)-benzylamin in 20 ml Dimethylformamid unter Rühren behandelt. Man setzt das Rühren 4 Stunden bei O⁰C fort und giesst dann das Reaktionsgemisch in 200 ml Äthylacetat und wäscht es 5 mal mit je 50 ml Wasser und 3 mal mit je 50 ml Natriumchloridlösung, trocknet es über wasserfreiem Magnesiumsulfat und dampft es zu einem Schaum ein. Das Rohprodukt wird an SiO chromatographiert. Man eluiert mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1 : 1 mit allmählich ansteigendem Gehalt an Äthylacetat bis 100 Prozent. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt (Feststellung durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlösung). Rf (SiOp/Äthylacetat : Cyclohexan im Verhältnis 1 : 1) =0,30. Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft und liefern 2,51 g eines knusprigen Schaums.

V(NuJoI Mull): 3300, 1800, 1745, 1690, 1665,

1600, 1530, 1510, 1450, 1410, 1370, 1310, 1260, 1170, 1120, 1040, 1015, 740, 700 cm"¹. S(CDCl₃): 2_f 10 (1H, S, CH₃COM); 2,91 (1H, d, J=17Hz, 6ßCH); 3,10 (2H, d, J= 7Hz, 9CH~); 3,37 (1H, dd, J^17 und Hz, 6aCH); 3,40, 3,43 (4H, 2 χ s, 2 χ NCH₂)-, 4,69 (1H, t, J=7Hz, 8CH)·, 4,98 (1H, s, 3CH); 5,11 (2H, s, CO₂CH₂C₆H₅); 5,33 (1H, d, J= 3Hz, 5aCH)j 7_f12 - 7_f41 (15H, m, 2 χ C₅H₅,

CONH).

809843/0910

Q. 9-/,""N- (2-Fluorbenzyl) -N-benzylJ-amino-desoxy-clavulansäure-benzylester.

8 g (0,02 Mol) Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 100 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden bei O⁰C tropfenweise mit 1,9 Äquivalenten des N-(2-Fluorbenzyl)-ber.zylamins in 30 ml Dimethylformamid behandelt und 4 Stunden bei O⁰C und dann 2 Stunden bei 2O⁰C gerührt. Man giesst das Gemisch in 200 ml Äthylacetat, wäscht es 4 mal mit je 50 ml Wasser und 5 mal mit je 50 ml gesättigter Natriumchloridlösung, trocknet es über wasserfreiem Magnesiumsulfat und dampft es zu einem Öl ein. Ausbeute : 10 g. 2g dieses Rohprodukts werden an SiOg chromatographiert und mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1 : 2 eluiert. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt. Rf (SiOp/Äthylacetat : Cyclohexan im Verhältnis 1:1)= 0,78 (Feststellung durch Besprühen mittels wässriger Kaliumpermanganatlösung)* Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft und liefern ein Öl in einer Ausbeute von 0,4 g..

): 1800, 1745, 1690, 1490, 1450, 1305, 1230, 1180, 1120, 1045, 1020, 760, 700 cm"¹. S (CDCl₃ )j 2,94 (1H, d, J> 17HZ, 6ßCH)·, 3,13 (2H, d, J= 7HZ, 9CH₂); 3,41 (1H, dd, J=17 und 3HZ, 6«CH); 3,50, 3,55 (4H, 2 χ s, 2 χ NCH₂); 4,75 (1H, t, JV7HZ, 8CH); 5,02 (1H, s, 3CH); 5,14 (2H, s, CO₂CH₂C₆H₅); 5,57 (1H, d, J=3HZ, 5-a-CH); 6,94 - 7,47 (4H, m, CH₂C₆H₄F); 7,24, 7,26 (1OH, 2 χ s, 2XCH₂C₆H₅).

809843/0910

2817C85

R. 9-/~N-(2-Methoxybenzyl)-N-benzyl7-amino-desoxy-clavulansäure-benzylester.

21 mMol Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 70 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden mit 1,9 Äquivalenten N-(2-Methoxybenzyl)-N-benzylamin in 30 ml Dimethylformamid behandelt und 210 Minuten bei 0 C und dann 90 Minuten bei 20⁰C gerührt. Man giesst das Gemisch in 200 ml Äthylacetat, wäscht es 5 mal mit je 50 ml Wasser und 5 mal mit je 50 ml gesättigter Natriumchloridlösung, trocknet es über wasserfreiem Magnesiumsulfat und dampft es unter vermindertem Druck zu einem Öl in einer Ausbeute von 13 g ein. 5 g dieses Rohproduktes werden an SiO₂ chromatographyert und mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1 : 1 eluiert. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt. Rf (SiOp/Äthylacetat : Cyclohexan im .Verhältnis 1 : 1) =0,74. Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft und ergeben 1,2g eines Öls.

V (Film); 1805, 1745, 750, 700 cm""¹. ζ (CDCl₃):

2,93 (1H, s, JdTHz^ßCH)·, 3,17 (2H, d, £7Hz, 9CH₂); 3,40 (1H," dd, .j=17 und3Hz, 6 aCH); 3,54, 3,57 (4H, 2 χ s, 2 χ NCH₂)J 3,75 (3H, s, OCH₃); 4,86 (1H, t, J>7Hz, 8CH); 5,02 (1H, s, 3CH); 5,14 (2H, s,-CO₂CH₂C₆H₅); 5_;57 (1H, d, J>3Hz, 5-aCH); 6,75 - 7,45 (14H, m, 2 χ CH C₆H^, CH₂C₆H₄OCH₃).

809843/0910

S. Trichloracetyl-clavulansäure-benzylester.

5,78 g (20 mMol) Clavulansäure-benzylester in 100 ml wasserfreiem Methylenchlorid werden auf -30⁰C gekühlt und mit 1,61 ml Pyridin behandelt. Dann tropft man während 10 Minuten 2,23 ml (20 mMol) Trichloracetylchlorid in 10 ml wasserfreiem Methylenchlorid hinzu. Nach weiteren 10 Minuten bei -30⁰C giesst man das Reaktionsgemisch in 100 ml 2-m Salzsäure. Die organische Phase wird mit Wasser, Natriumbicarbonatlösung und Natriumchloridlösung gewaschen, getrocknet und eingedampft. Man erhält 7,81 g (= 90 Prozent der Theorie) der in der Überschrift genannten Verbindung.

(Film) : 1800, 1750 und 1680 cm"¹.

009843/0910

T. Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester.

20,2 g (70 mMol) Clavulansäure-benzylester in 100 ml Dichlormethan werden mit 1 Äquivalent wasserfreiem Pyridin behandelt und auf -2O⁰C gekühlt. Dann tropft man 10,3 g (1 Äquivalent) Dichloracetylchlorid in 20 ml Dichlormethan hinzu und rührt das Reaktionsgemisch 20 Minuten. Dann wäscht man das Gemisch 5 mal mit je 100 ml Wasser und 5 mal mit je 100 ml gesättigter Natriumchloridlösung, trocknet es über wasserfreiem Magnesiumsulfat und dampft es unter vermindertem Druck zu einem Öl in einer Ausbeute von 27,5 g (= 98 Prozent der Theorie) ein.

V(EiIm).'1800, 1745, 1690, 1295, 1170, 1120, 1085, 1042, 1020, 1000, 955, 890, 815, 742, 700cm~¹. ί (CDCl₃),' 3,05 (1H, d, J=17Hz, 6ßCH); 3,50 (1H, dd, £17 und 3Hz, 6<x CH); 4,82 (3H₁ s, 8CH und 9CH₂)', 5,10 (1H, s, 3CH)j 5,17 (2H, s, CH₂C₅H₅)', 5,70 (1H, d, J>3Hz, 5a CH); 5,90 (1H, s, CHCl₂); 7,32 (5H, s, CHpCz-H₁-).

309843/0910

U. Monochloracetyl-clavulansäure-benzylester.

2,51 g (8,7 mMol) Clavulansäure-benzylester werden in 30 ml Methylenchlorid gelöst und mit 0,775 ml (9,60 mMol) Pyridin bei Raumtemperatur behandelt. Dann kühlt man das Reaktionsgemisch auf -3O⁰C und "versetzt es tropfenweise im Verlauf von 10 Minuten mit 0,69 ml (8,7 mMol) Chloracetylchlorid in 10 ml Methylenchlorid. Nach weiterem 10 minütigem Rühren bei -30⁰C giesst man das Reaktionsgemisch in verdünnte Salzsäure und extrahiert mit Methylenchlorid. Die organische Phase wird nacheinander mit verdünnter Salzsäure, mit Natriumbicarbonatlösung und mit Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Eindampfen unter vermindertem Druck erhält man 3,10 g eines blassgelben Öls, das auf Grund der Dünnschbhtchromato'graphie homogen ist.

^m*_v (CHCl,) : 1803, 1755 (breit) und 1700 cm"¹.

Ö09843/O910

V. Dichloracetyl-clavulansäure-methylester.

1>03 g (4,8 mMol) Clavulansäure-methylester in 30 ml Dichlormethan werden mit 1 Äquivalent Pyridin behandelt und auf -20⁰C gekühlt, dann mit 1 Äquivalent Dichloracetylchlorid behandelt und 10 Minuten gerührt. Dann wäscht man die Lösung 2 mal mit je 50 ml Wasser und 5 mal mit je 50 ml gesättigter Natriumchloridlösung, trocknet sie über wasserfreiem Magnesiumsulfat und dampft sie unter vermindertem Druck zu einem Öl in einer Ausbeute von 1,31 g ein.

-V (Film); 1805, 1750, 1690, 1300, 1240, 1165, 1045, 1010, 960, 890, 820cm~¹. § (CDCl₃); 3,08 (1H, d, Jd7Hz, 6ßCH); .3 ₅₁ (1H₁ dd, J-17 und3HZ, 6aCH); 3_t77 (3H, s, CO₂CH₃); 4,85 (3H, β,-eCH und9CH₂); 5,08 (1H, s, 3CH); 5,72 (1H, d, J>3HZ, 5wx-CH); 5_f91 (1H, s, CHCl₂).

W. 9-/~~N-(4-Acetamidobenzyl)-N-benzyl7-amino-desoxyclavulansäure-methylester.

1,25 g (3»86 mMol) Dichloracetyl-clavulansäure-methylester in 30 ml Dimethylformamid werden bei O⁰C mit 1,9 Äquivalenten N-(4_Acetamidobenzyl)-benzylamin behandelt und 4 Stunden gerührt. Dann giesst man das Gemisch in 200 ml Äthylacetat, wäscht es 5 mal mit je 50 ml Wasser und 5 mal mit je 50 ml gesättigter Natriumchloridlösung, trocknet es über wasserfreiem Magnesiumsulfat und dampft es unter vermindertem Druck zu einem Öl ein. Das Öl wird an Siliciumdioxid chromatogra-

809843/0910

phiert und mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1 : 1 mit allmählich ansteigendem Gehalt an Äthylacetat bis 100 Prozent eluiert. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt. Rf (SiOp/Äthylacetat) = 0,60. Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck zu einem Öl in einer Ausbeute von 0,61 g eingedampft.

V(F.ilm): 3300 (breit), 1800, 1750, 1690, 1670,

750, 700cm"¹. V(KBr): (3650-3150), 1800, 1750, 1690, 1665, 1600, 1530, 1515, 1412, I37O, 1312, 1265, 1240, 1200, 1180,1120, 1010, 745, 700cm""¹.

S (CDClJ: 2,13 (3H, s, COCH,) ·, 2 95 (1H, d, Ja17Hz, 60CH),' 3.14 (2H, d, J=7Hz, 9CH₂)*, 3,41 (IH, dd, J = 17 und 3Hz, 6<xCH); 3,48, 3,52 (4H, 2 χ s, 2 χ NCH₂)', 3,73 (3H, s, CO₂CH₃); 4,74 (1H, t, J^ 7Hz, 8CH)', 4j97 (1H, s, 3CH); 5_f57 (1H, d₃ J>3Hz, 5aCH); 7,17 7,45 (9H, m, ⁰H₂C₆H₅ und CH₂C₆H₄NHCOCH₃).

X. 9-N-Benzyl-N-(4-hydroxy-3-methoxy-benzyl)-amino-desoxyclavulansäure-benzylester.

4,07 g (10,2 mMol) Dichloracetyl-clavulansäure-benzylester in 75 ml Dimethylformamid werden bei O⁰C tropfenweise mit 4,7 g (1,9 Äquivalenten) N-Benzyl-N-(4-hydroxy-3-methoxy-

in 20 ml Dimethylformamid _o

benzyl)-amin/behandelt und 30 Minuten bei 0 C und danach 90 Minuten bei 2O⁰C gerührt. Dann giesst man das Reaktionsgemisch in 200 ml Äthylacetat und wäscht die organische Phase 3 mal mit je 75 ml Wasser und 4 mal mit je 75 ml gesättigter Natriumchloridlösung. Die Äthylacetatphase wird getrocknet und unter vermindertem Druck zu einem gefärbten Schaum eingedampft. Dieser Schaum wird an Silicagel chromatographiert. Man eluiert mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 2,32 g (= 44 Prozent der Theorie) eines farblosen Öls. Rf (SiO₂/Äthylacetat : Cyclohexan im Verhältnis 1 : 1) = 0,66, festgestellt durch Besprühen mittels wässriger Kaliumpermanga-

natlösung.

v(Film): 3500 breit,

1800, 175o) 1695, 1610, 1602, 1512, 1450, 1430, 1380, 1302, 1270, 1230, 1180, 1155, 1120, 1080, 1032, 1015, 820, 800, 750, 700 cm"¹. 6(CDCl₃)J 2,85 (IH, d, J-17Hz, 6ßCH) ,' 3,10 (2H, d, J=7Hz, 9CH₂); 3,31 (IH, dd, 30.7 und 31Hz, 6aCH); 3^35, 3,41 (4H, 2 χ s, NCH₂CgH₅ und NCH₂CgH₃(OHfOCH₃)),

509843/0910·

3.74 (3H, s, OCH₃); 4_;8O (IiI, t, J₌7Hz, 8CH) ', 5,00 (IH, s, 3-CH); 5_fO9 (2H, s, OCH₂C₆H₅)/

5,25 (IH,"breit.s,tauscht aus mit D₂O-C₆H₃(OH, OCH₃); 5.51 (IH, d, J:r3Hz, 5aCH) ; 6j7l - 6^78 (3H, m, Protonen im trisubstituierten Phenylrest) « 7 20 (1OH, breites s,

2 χ CH₂C₆H₅). ■

Die nachstehenden Beispiele veranschaulichen die Erfindung.

Beispiel 1 9-N-(2-Hydroxyäthyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

0,38 g 9-/""N-Benzyl-N-(2-hydroxyäthyl_i}_7-amino-desoxy-clavulansäure-p-methoxybenzylester in 100 ml eines Gemisches aus Äthanol und Tetrahydrofuran im Verhältnis 1 : 1 werden 23 Stunden in Gegenwart von 0,15 g eines 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysators hydriert. Man filtriert das Gemisch durch Kieselgur und dampft das klare Filtrat unter vermindertem Druck zu einem gefärbten Öl ein. Man löst das Öl in 100 ml Äthylacetat und extrahiert es mit 50 ml Wasser. Der wässrige Extrakt wird unter vermindertem Druck eingedampft und ergibt ein blassgelbes Öl, das an einer Cellulosesäule chromatographiert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus 7 Teilen Butanol, 7 Teilen Propan-2-ol und 5 Teilen Wasser. Die Fraktionen, die lediglich die in der Überschrift genannte

S0384 3/0310

- 28Ί7085 ty

Verbindung enthalten, werden gesammelt.

Rf (Si0₂/Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7:6)= 0,20 (Feststellung durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlösung). Die vereinigten Fraktionen, die nur die in der Überschrift genannte Säure enthalten, werden unter vermindertem Druck eingedampft und ergeben 50 mg eines weissen Feststoffes.

NMR-Spektrum : S(D₂ ⁰^ 3,1 (1H, d,

JVI7HZ, 6ß-CH); 3,05-3,17 (2H₁ m, NCH₂CH₂OH); 3,57 (1H, dd, Ja 17Hz und 3Hz, 6a-CH)-, 3,7-0-3 _; 84 (4H, m, NCH₂CH₂OH, 9-CH₂); 4,80 (1H, t, J=8Hz, 8CH) j 4,99 (1H, s, 3-CH); 5,76 (1H, d, J=3Hz,. 5PC-CH).. .[CH₃CN ™^rde als interner Standard^ _S CH₃CN = 2,00];

IR-Spektrum :

"V (KBr): 3000-3600, 1785, 1620Cm"¹.

Beispiel 2 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure.

0,43 g 9-(N,N-Dibenzyl-amino)-desoxy-clavulansäure-benzylester in 75 ml eines Gemisches aus Äthanol und Tetrahydrofuran im Verhältnis 1 : 1 mit 1 ml V/asser werden in Gegenwart von 0,43 g 5 Prozent Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Man hydriert 5 Stunden bei einem Druck von 3>85 kg/ cm . Dann filtriert man das Gemisch durch Kieselgur und dampft das klare Filtrat unter vermindertem Druck ein. Man erhält ein gefärbtes Öl, das in 80 ml Äthylacetat gelöst wird.

8 0 9 81_} 3/0910

Die Lösung wird 3 mal mit je 30 ml Wasser gewaschen. Die vereinigten wässrigen Extrakte werden unter vermindertem Druck eingedampft und liefern ein blassgelbes öl, das an einer Cellulosesäule Chromatograph!ert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Butanol, Propan-2-ol und Wasser im Verhältnis 4:4:1. Die Fraktionen, die auf Grund der Feststellung durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlosung die in der Überschrift genannte Säure enthalten, werden gesammelt. Rf (Si0₂/Butanol:Propan-2-ol:Wasser im Verhältnis 7:7:6)= 0,45. Die vereinigten Fraktionen v/erden unter vermindertem Druck eingedampft und ergeben einen Feststoff, der mit Äthanol gewaschen und dann getrocknet wird. Man erhält 36 mg der in der

. Überschrift genannten Säure.

V(KBr): (3680-3150),

(3100-2900), (2900-2300), 1800, 1694, 1610, 1460, 1400, 1305, " 1190, 1020, 895, 755, 700 cm"¹; S(D₂O + 5% DMSO D-6); 3,13 (1H, ■ d, Ji17Hz,'6ß-CH); 3,62 (1H, bd, J:17Hz, 6<x-CH); 3,77 (2H, d, Js 8Hz, 9-CH₂); 4,22 (2H, s, CH₂C₆H₅); 4,84 (1H, t, J= 8Hz,- 8-CH); 5,01 (1H, s, 3-CH); 5,77 (1H, bs, 5a-CH); 7,48 (5H, 3,

Das erfindungsgemässe Derivat wird in Form feiner Nädelchen erzeugt, d.h. in kristalliner Form. Kristalline 9-N-Benzylamino-desoxy-clavulansäure ist normalerweise farblos. Die Analyse der Verbindung zeigt einen Gehalt von Kristallwasser.

S098A3/0910

Beispiel 3 g-N-Äthyl-amino-desoxy-clavulansäure.

3»44 g S-CN-Benzyl-N-äthylJ-amino-desoxy-clavulansäurebenzylester, der durch Umsetzen von 3 g Trichloracetyl-clavulansäure-benzylester mit 2 Äquivalenten N-Benzyl-äthylamin erhalten worden ist, in 100 ml eines Gemisches aus Äthanol und Tetrahydrofuran im Verhältnis 1 : 1 mit 1 ml Wasser werden in Gegenwart von 1 g 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Man hydriert 16 Stunden bei Normaldruck. Dann filtriert man das Gemisch durch Kieselgur und dampft das klare Filtrat unter vermindertem Druck zu einem Öl ein, das in 100 ml Äthylacetat gelöst wird. Man extrahiert die Lösung 3 mal mit je 40 ml Wasser. Die vereinigten wässrigen Extrakte werden unter vermindertem Druck zu einem blassgelben Öl eingedampft, das an einer Cellulosesäule chromatographiert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Butanol, Propan-2-ol und Wasser im Verhältnis 4:4:1. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Säure werden gesammelt. Rf (SiOp/Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7:6) = 0,17, wie durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlösung festgestellt wird. Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft und liefern die in der Überschrift genannte Säure als farblose Kristalle. Gesamtausbeute: 13 Prozent, bezogen auf Trichloracetyl-clavulansäure-benzylester.

809843/0910

2817Q85

V(KBr): (3700-3250), (3200-2900),

(2900-2600), (2600-2400), 1790, 1695, 1625, 1460, 14OO, 1305, 1190, 1120, 1045, 1020, 900, 800, 745 cm""¹; S(D₂ ⁰)'¹/²² (3H, t, J₂ 7Hz, -CH₂CH₃); 2,89 - 3,20 (3H, m, -CH₂CH₃ und 6ß-CH); 3,57 (1H, br.eit. d, Js17Hz, 6a-CH); 3,68 (2H, d, J=8Hz, 9-CH₉); 4.78 (1H, t, Jr8Hz, 8-CH)', 5,00 (1H, s, 3-CH)*, 5_f73 (1H,breit._s, 5a-CH)

Beispiel 4 9-N-(dl-2-Hydroxypropyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

3,5 mMol 9-/~N-Benzyl-N-(dl-2-hydroxypropyl][7-amino-desoxyclavulansäure-benzylester in 75 ml eines Gemisches aus Äthanol und Tetrahydrofuran im Verhältnis 1:1 mit 1 ml Wasser werden in Gegenwart von 0,9 g 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysätor hydriert. Man hydriert 21 Stunden bei Normaldruck Die Dünnschichtchromatographie zeigt einen grösseren Fleck bei Rf (SiOp/Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7:6) = 0,24, festgestellt durch Besprühen mit Kaliumpermanganatlösung. Man filtriert das Gemisch durch Kieselgur und dampft das klare Filtrat unter vermindertem Druck zu einem Öl ein, das in 100 ml Äthylacetat gelöst wird. Die Lösung extrahiert man 3 mal mit je 50 ml Wasser. Die vereinigten wässrigen Extrakte werden unter vermindertem Druck eingedampft und ergeben ein blassgelbes Öl, das an einer Cellulosesäule chromatographyert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Butanol, Propan-2-ol und Wasser im Verhältnis

809843/031.0

A:4:1. Die Fraktionen mit einem Gehalt an der in der Überschrift genannten Säure werden gesammelt. Rf (SiOp/Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7:6) = 0,24. Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft und ergeben in 12 prozentiger Ausbeute die in der Überschrift genannte Säure als farbloses Öl.

, S (D₂O): 1,21 (3H₁ d, Jz

6Hz, -CH₂CH(OH)CH₃); 2,7.- 3,2 (3H, m, 6ß-CH, CH₂CH(OH)CH₃); 3,57 (1H, breit, d, Jt=17Hz, βα-CH); 3,76 (2H, d,J=OHz, 9-CH₂); 3_f83 - 4_f21 (1H, m, -CH₂CH(OH)CH₃); 4,80 (1H, t, J=8Hz, 8-CH); 5,01 (1H, s, 3-CH); 5,75 (1H, breit, s, 5cc-CH).

Beispiel 5 9-(4-Fluorbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

7 g S-N-Benzyl-N-iA-fluorbenzylJ-amino-desoxy-clavulansäurebenzylester von 50 prozentiger Reinheit in 100 ml eines Gemisches aus Tetrahydrofuran und Äthanol im Verhältnis 1:1 und 4 ml Wasser werden 21 Stunden bei einem Druck von 3,85 kg/cm in Gegenwart von 4 g 10 Prozent Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Man filtriert das Gemisch durch Kieselgur und dampft das klare Filtrat zu einem gefärbten Öl ein, das in 80 ml Äthylacetat gelöst wird. Man extrahiert die Lösung 3 mal mit je 30 ml Wasser und dampft die vereinigten wässrigen Extrakte unter vermindertem Druck zu einem gefärbten Öl ein, das an einer Cellulosesäule chromatographiert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Butanol, Propan-2-ol

809843/0910

und Wasser im Verhältnis 4:4:1. Die Fraktionen, die auf Grund eines Besprühens mit wässriger Kaliumpermanganatlösung die in der Überschrift genannte Säure enthalten, werden gesammelt. Rf (Si0₂/Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7:6)= 0,63.

Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck zu einer farblosen Substanz eingedampft, die bei Zugabe von Äthanol und nach Kühlen kristallisiert. Die Kristalle werden mit Äthanol von O⁰C gewaschen und getrocknet. Man erhält 367 mg der in der Überschrift genannten Säure.

V (KBr); (3700 - 3120), (3120 - 2900), (2900 - 2650), (2650 - 2500), (2500 - 2300), 1805, 1695, 1580, 1515, 1470, 1410, 1340, 1303, 1283, 1230, 1185, 1165, 1045, - 1008, 992, 895, 858, 835, 773 cm"¹.

SC9843/0910

Beispiel 6 9-N-(4-Methylbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

10,6 g g-N-Benzyl-N-^-methylbenzylJ-amino-desoxy-clavulansäure-benzylester von annähernd 50 prozentiger Reinheit in 100 ml eines Gemisches aus Tetrahydrofuran und Äthanol und 4 ml Wasser werden 21 Stunden bei einem Druck von 3,85 kg/cm in Gegenwart von 5 g eines 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysators hydriert. Man filtriert das Gemisch durch Kieselgur und dampft das klare Eiltrat unter vermindertem Druck zu einem gefärbten Öl ein, das an Cellulose chromatographiert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Butanol, Propan-2-ol und Wasser im Verhältnis 4:4:1. Die Fraktionen, die auf Grund eines Besprühens mit wässriger Kaliumpermanganatlösung die in der Überschrift genannte Säure enthalten, werden gesammelt. Rf (SiO₂/ Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7:6)= 0,60. Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft und ergeben ein Öl, das mit Äthanol versetzt wird. Beim Kühlen scheiden sich farblose Kristalle ab, die abfiltriert, mit kaltem Äthanol gewaschen und getrocknet werden. Man erhält 85 mg der zwitterionischen 9-N-(4-Methylbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure als feine Nädelchen.

V (KBr); (3670 -3150), (3150 - 2870), (2870 - 2500), (2500 - 2250), 1790, 1690, 1590, 1460, 1395, 1300, 1195, 1110, 1035, 1015, 1000, 990, 940, 892, 805, 748, 555, 485, 435 cm"¹.

309843/0910

a*

Beispiel 7 9-N-(4-Methoxy"benzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

1*4- g 9-N-Benzyl-N-(4-methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure-benzylester in 100 ml eines Gemisches aus Tetrahydrofuran und Äthanol im Verhältnis 1:1 und 2 ml Wasser werden 21 Stunden bei einem Druck von 3,85 kg/cm in Gegenwart von 1 g 10 Prozent Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Man filtriert das Reaktionsgemisch durch Kieselgur und dampft das Filtrat unter vermindertem Druck zu einem farblosen Schaum ein, der an Cellulose chromatographiert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Butanol, Isopropanol und Wasser im Verhältnis 4:4:1. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Säure werden gesammelt. Rf (SiOp/Butanol : Isopropanol : Wasser im Verhältnis 7:7:6) = 0,60 auf Grund der Feststellung durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlösung. Diese Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft und liefern einen farblosen Rückstand, der beim Verreiben mit kaltem Äthanol 33 mg der zwitterionischen 9-N-(4-Methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure als feine Nädelchen liefert.

ν (KBr)I (3600), (3500 - 3150), (3150 - 2880), (2880 - 2780), (2780 - 2680), (2680 - 2520), (2520 - 2250), 1790, 1695, 1600, 1517, 1470, 1400, 1305, 1255, 1200, 1184, 1125, 1030, 995, 950, 900, 840, 820, 767, 760, 575, 545, 445 cm"¹.

5098^3/0910

Beispiel 8 9-N-(4-Hydroxy-3-methoxytienzyl)-amino-desoxy-clavxilansäure.

0,7 g 9-N-(4-Benzoxy-3-methoxybenzyl)-benzyl-amino-desoxyclavulansäure-benzylester von annähernd 50 prozentiger Reinheit werden in 50 ml eines Gemisches aus Tetrahydrofuran und Äthanol im Verhältnis 1:1 und 2 ml Wasser 15 Stunden bei einem Druck von 3,85 kg/cm in Gegenwart von 0,5 g 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Man filtriert das Reaktionsgemisch durch Kieselgur und dampft das Filtrat unter vermindertem Druck zu einem gefärbten Öl ein, das in 50 ml Äthylacetat gelöst wird. Man extrahiert die Lösung zweimal mit je 25 ml Wasser. Die vereinigten wässrigen Extrakte werden unter vermindertem Druck eingedampft und ergeben einen gefärbten Schaum, der an einer Cellulosesäule chromatographiert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Butanol, Propan-2-ol und Wasser im Verhältnis 4:4:1. Die Fraktionen mit einem Gehalt an der in der Überschrift genannten Verbindung werden gesammelt und unter vermindertem Druck eingedampft und liefern 30 mg der in der Überschrift genannten Säure als farblosen Feststoff.

Rf (Si0₂/Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7:6)= 0,56. Das PMR-Spektrum stimmt mit dem der gewünschten Säure überein.

S098/,3/0910

Beispiel 9 9-N-(4-Hydroxy-3-methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

2,27 g 9-N-(4-Hydroxy-3-methoxybenzyl)-benzyl-amino-desoxyclavulansäure-benzylester in 80 ml eines Gemisches aus Tetrahydrofuran und Äthanol im Verhältnis 1:1 und 2 ml Wasser werden 6 Stunden bei einem Druck von 3»85 kg/cm in Gegenwart von 2 g 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Man filtriert das Gemisch durch Kieselgur und dampft das klare Filtrat unter vermindertem Druck zu einem blassgelben Schaum ein, der mit 5 ml Methanol versetzt wird. Dann gibt man zu der Lösung 70 ml wasserfreies Aceton, filtriert den ausgefallenen weissen Feststoff ab und trocknet ihn. Ausbeute: 0,88 g. Man chromatographiert 0,83 g dieser Rohsubstanz an Cellulose und eluiert mit einem Gemisch aus Butanol, Propan-2-ol und Wasser im Verhältnis 4:4:1. Die Fraktionen mit einem Gehalt an der in der Überschrift genannten Säure werden gesammelt und unter vermindertem Druck zu einem weissen Feststoff eingedampft. Man versetzt ihn zunächst mit 20 ml Propan-2-ol und anschliessend mit 10 ml Methanol und kühlt die Lösung auf O⁰C. Die abgeschiedenen Kristalle v/erden abfiltriert und mit Methanol von O⁰C gewaschen und dann getrocknet. Man erhält 102 mg der in der Überschrift genannten Säure als feine Nädelchen.

Rf (SiOp/Butanol : Propan-2-ol : V/asser im Verhältnis 7:7:6) = 0,60.

309843/0910

Beispiel 10 Oy-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure.

13 g S-N^N-Dibenzyl-amino-desoxy-clavulansäure-benzylester werden in 60 ml Tetrahydrofuran und 50 ml eines Gemisches aus 2 Teilen Wasser und 5 Teilen Propan-2-ol gelöst. Die Lösung versetzt man mit 6 g eines 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysators, der vorher mit Wasser gewaschen worden ist, bis das Filtrat neutral reagiert. Das Reaktionsgemisch wird

390 Minuten bei einem Druck von 3,85 kg/cm hydriert, dann durch Kieselgur filtriert (pH-Wert des Filtrats ist 5,37) und mit 150 ml 50 prozentigem wässrigem Tetrahydrofuran und anschliessend mit 200 ml 50 prozentigem wässrigem Äthanol gewaschen. Das Filtrat aus dem letzten Waschwasser wird getrennt gesammelt und zu einem weissen Feststoff eingedampft, den man mit 20 ml Äthanol versetzt und auf 0⁰C kühlt, dann filtriert und mit eiskaltem Äthanol wäscht und dann unter vermindertem Druck trocknet. Man erhält 0,32 g der in der Überschrift genannten Säure als feine Kristalle. Das Hauptfiltrat wird eingedampft und mit 50 ml Äthanol versetzt, wobei eine rasche Kristallisation eintritt. Der Feststoff wird abfiltriert, mit eiskaltem Äthanol gewaschen und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 1,57 g der in der Überschrift genannten Säure als fast ganz weisse Kristalle. Das Filtrat wird wiederum eingedampft, jedoch diesmal mit 50 ml Äthanol versetzt. Beim Kühlen erhält man feine Kristalle, die abfiltriert und mit eiskaltem Methanol gewaschen und unter vermindertem Druck

309843/0910

getrocknet werden. Man erhält 0,25 g der in der Überschrift genannten Säure als Kristalle. Die Gesamtausbeute beträgt 2,14 g. (beijeiner angeno ranenen 90 prozentigen Reinheit der Dibenzylamino-Ausgangsverbindung entspricht dies einer 30-prozentigen Ausbeute). Der gefärbte Rückstand wird eingedampft und wiederum in Äthanol gelöst. Die Lösung wird auf eine Cellulosesäule von 180 χ 4,5 cm aufgebracht und teilweise mit 50 bis 70 ml Äthanol und anschliessend mit einem Gemisch aus Butanol, Isopropanol und Wasser im Verhältnis 4:4:1 eluiert. Man sammelt die Fraktionen, die tatsächlich nur die in der Überschrift genannte Säure enthalten, dampft sie ein und versetzt sie mit Methanol. Die erhaltenen feinen Kristalle der gewünschten Säure werden abfiltriert und mit kaltem Methanol gewaschen. Man erhält weitere 67 mg.

V max CNidol): 3620, 3540, 3400 breit, 3200 breit, 2800-2500, 2500-2300, 1810, 1690, 1610, 1575, 1395, 1185, 1145, 1115, 1080, 1060, 1040, 1030, 1015, 1005, 990, 945, 895, 865, 850, 815, 790,

755, 700 cm""¹

Cu-Ko^-Strahlung, 36 kV, 26 mA, Abtastgeschwindigkeit 0,5° 2G/min, abgetastet 33° —> 20° 2Θ: Reflektionen bei den folgenden angenäherten Winkeln 2Θ: 11,5, 13,5, 15,2, 15,8, 16,4, 17,25, 18,2, (breit), 19,5, 21,0, 21,8, 22,5, 23,1, 24,1, 24,3, 25,2, 25,5,/27,5, 28,4, 28,9, 29,6, 32,6 (Hauptreflektionen sind unterstrichen).

S 0 9 8 k 3 / 0 9 1 0

Beispiel 11 9-N-(4-Hydroxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

4 g 9-N-(4-benzoxybenzyl)-benzyl-amino-desoxy-clavulansäurebenzylester von annähernd 50 prozentiger Reinheit in 60 ml Tetrahydrofuran und 50 ml eines Gemisches aus einem Teil

Wasser und einem Teil Propan-2-ol werden 390 Minuten bei βίο

nem Druck von 3,85 kg/cm in Gegenwart von 2 g 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Man filtriert das Gemisch durch Kieselgur, wäscht den Katalysator mit 200 ml wässrigem Äthanol und dampft das Filtrat unter vermindertem Druck zu einem gefärbten Schaum ein, der in 10 ml Äthanol gelöst und mit 100 ml wasserfreiem Äther versetzt wird. Man filtriert den Niederschlag ab, trocknet ihn und löst ihn in einem geringen Volumen Äthanol und chromatographiert die Lösung an Cellulose. Man eluiert zuerst mit 60 ml Äthanol und dann mit einem Gemisch aus Butanol, Propan-2-ol und Wasser im Verhältnis 4:4:1. Die Fraktionen, die auf Grund der Feststellung durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlösung die in der Überschrift genannte Säure enthalten, werden gesammelt. Rf (Si0₂/Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7ί6) = 0,67. Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft und ergeben ein Öl, das beim Verreiben mit kaltem Methanol 4,7 mg der in der Überschrift genannten Säure als feine Kristalle liefert.

V(NlJ Ol Mull>3575, 3350, 3175, 1780, 1695, 1620, 1580, 1520, 1310, 1200, 1125, 1105, 1075, 1050, 1020, 1005, 985, 895, 840, 750, 720 cm" .

S09843/0910

Beispiel 12 9-N- (3,4-Dimethoxyt>enzyl) -amino-desoxy-clavulansäure.

Man wiederholt die Verfahrensschritte des Beispiels 11 und erhält beim Hydrieren von 9-N-(3»4-Dimethoxybenzyl)-aminodesoxy-clavulansäure-benzylester die in der Überschrift genannte zwitterionische Säure.

Beispiel 13 9-N-(4-Acetamidobenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

0,9 g 9-N-(4-Acetamidobenzyl)-'benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-benzylester in 50 ml Tetrahydrofuran und 10 ml Wasser werden 40 Minuten bei Normaldruck in Gegenwart von 0,3g 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Man filtriert das Gemisch durch Kieselgur und wäscht den Katalysator mit 100 ml eines Gemisches aus Wasser und Tetrahydrofuran im Verhältnis 1:1 und dann mit 150 ml eines Gemisches aus Wasser und Äthanol im Verhältnis 1:1. Man dampft das klare Filtrat unter vermindertem Druck ein, versetzt den Rückstand mit 20 ml Äthanol, filtriert die nach dem Abkühlen abgeschiedenen farblosen Kristalle ab und trocknet sie. Man erhält 309 mg der in der Überschrift genannten Säure. Man dampft das Filtrat unter vermindertem Druck ein und erhält nach Zugabe von kaltem Methanol weitere 37 mg der in der Überschrift genannten Säure. Rf (SiO^/Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7:6) = 0,45 (Feststellung durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlösung).

309843/0910

Mull): (3600-3440), 3380, (3350-3200), 3180, 3120, 2720, (2670-2520), 2450, (1805-1785), 1690, 1670, 1600, 1530, 1310, 1200, 1110, 1070, 1050, 1035, 1020, 1000, 990, 940, 895, 840, 750 cm"¹.

(DgO/DMSO): 2,01 (3H, s, CH₃CONH); 2,88 (1H, d, JVI7Hz, 6ßCH)', 3_;38 - 3,53 (3H, m, 6aCH, 9CH₂); 3,95 (2H, s, NCH₂); 4,61-4,75 (2H, m, 3CH, 8CH); 5,62 (1H,breit. _s, 5aCH); 7,30- 7,56 (4H, ABq, J=9Hz, CH₂C₆H₄-P-NHCOCH₃).

Beispiel 14 9-N-(2-Methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

8 g roher 9-N-(2-Methoxybenzyl)-benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-benzylester in 100 ml Tetrahydrofuran und 10 ml Wasser werden 90 Minuten bei Normaldruck in Gegenwart von 1 g 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Man filtriert das Gemisch und wäscht den Katalysator mit 100 ml wässrigem Tetrahydrofuran. Man dampft das FiItrat unter vermindertem Druck ein, versetzt den Rückstand mit 150 ml Äthylacetat und wäscht die Lösung zweimal mit je 75 ml Wasser. Die vereinigten wässrigen Extrakte werden unter vermindertem Druck eingedampft und liefern 3 g eines Schaums, der an Cellulose chromatographiert wird. Man eluiert mit einem Gemisch aus Butanol, Propan-2-ol und Wasser im Verhältnis 8:8:1. Die Fraktionen mit der in der Überschrift genannten Säure werden gesammelt. Rf (Si0₂/Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7:6) = 0,60 (auf Grund der Feststellung durch Besprühen

S098 43/0910

mit wässriger Kaliumpermanganatlösung). Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft. Bei Zugabe von kaltem Äthanol bilden sich farblose Kristalle, die abfiltriert und mit kaltem Äthanol gewaschen und getrocknet werden. Man erhält 140 mg der in der Überschrift genannten Säure.

^(Nujol Mull) :

(3320-3220), (2750-2100), 1800, 1685, 1610, 1300, 1260, 1185, 1120, 1085, 1070, 1055, 1030, 1020, 1005, 935, 900, 775, 755, 745 cm""¹.

Beispiel 15 9-N-(2-Fluorbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

0,35 g 9-N-(2-Fluorbenzyl)-benzyl-amino-desoxy-clavulansäurebenzylester in 30 ml Tetrahydrofuran und 3 ml Wasser werden 4 Stunden bei Normaldruck in Gegenwart von 40 mg 30 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Nach weiterer Zugabe von 40 mg des gleichen Katalysators wird das Gemisch weitere 15 Stunden hydriert. Man filtriert das Gemisch und wäscht den Katalysator mit 50 ml wässrigem Äthanol. Nach dem Eindampfen unter vermindertem Druck und Zugabe von kaltem Äthanol erhält man 47 mg der in der Überschrift genannten Säure als farblose Kristalle.

Rf (SiOp/Butanol : Propan-2-ol : Wasser im Verhältnis 7:7:6) = 0,51 (auf Grund der Feststellung durch Besprühen mit wässriger Kaliumpermanganatlösung).

SQ9843/0910

V(KBr)* (3680-3140), (3140-2880), (2880-2500), (2500-2200), 1785, 1694, 1615, 1496, 1457, 1380, 1308, 1240, 1193, 1110, 1043, 1020, 900, 865 cm"¹.

(D₂O); 3;O5 (1H, d', J>17Hz, 6ßCH); 3,54 (1H, dd, J>17und 3H2. 6aCH); 3,72 (2H, d, Jj= 7Hz, 9CH₂); 4,23 (2H, s, NCH₂C₆H₄F),- 4,77 (1H, t, J=7Hz, 8CH); 4,95 (1H, s, 3CH); 5,70 (1H, d, J-3Hz, 5aCHh 7,05-7,48 (4H, m,

Beispiel 16 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-carboxymethylester.

279 mg 9-N-Benzyloxycarbonyl-N-benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-benzyloxycarbonylmethylester werden in 20 ml Tetrahydrofuran und 2 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird bei Normaltemperatur und Normaldruck in Gegenwart von 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Nach beendeter Reaktion,.was durch Dünnschichtchromatographie festgestellt worden, ist, filtriert man den Katalysator ab, wäscht ihn gut mit wässrigem Tetrahydrofuran aus, dampft die vereinigten Filtrate unter vermindertem Druck ein und erhält die in der Überschrift genannte Verbindung als Rückstand, der mit einem Gemisch aus Aceton und Äther verrieben wird. Hierbei bildet sich ein weisser Feststoff, der abfiltriert und im Exsückator getrocknet wird.

^Λ (Nujol) : 1795, 1745, 1690 und 1610 cm"¹.

309843/0910

Beispiel 17

Das L-Äpfelsäureadditionssalz des 9-N-(4-Acetamidobenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure-methylesters.

0,5 g 9-N-(4-Acetamidobenzyl)-benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-methylester in 15 ml Tetrahydrofuran und 5 ml Wasser werden 150 Minuten bei Normaldruck in Gegenwart von 0,1 g

30 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator und 0,155 g (1 Äquivalent) Apfelsäure hydriert. Man filtriert das Gemisch und wäscht den abfiltrierten Katalysator mit 10 ml wässrigem Tetrahydrofuran. Man dampft das Filtrat unter vermindertem Druck ein und erhält ein Öl, das in 10 ml Äthanol gelöst und mit Äther verrieben wird. Der gebildete Feststoff wird mit Äther gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet, und man erhält 343 mg des in der Überschrift genannten Säureadditionssalzes .

V) (Nujol) : 1800, 1745, I690, I670, I600 cm"¹

Beispiel 18 g-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-methoxymethylester.

162 mg 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure in 10 ml Dimethylformamid werden bei 20⁰C mit 42 ml (1 Äquivalent) Chlordimethyläther behandelt und 4 bis 5 Minuten gerührt, bis die DUnnschichtchromatographie keine weitere Änderung anzeigt. Zu diesem Zeitpunkt enthält die Lösung das Hydro-

S098/> 3/0910

chloridsalz des 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-methoxymethylesters, dessen Rf-Wert 0,8 bei Verwendung von SiOp und von einem Gemisch aus Butanol, Propanol und Wasser im Verhältnis 7:7:6 beträgt. Das Gemisch wird in 100 ml Äthylacetat und 50 ml Wasser gegossen und lebhaft gerührt, während man festes Natriumbicarbonat zufügt, bis ein pH-Wert von 9,5 erreicht ist. Die organische Phase wird β mal mit je 50 ml Wasser und 3 mal mit je 50 ml gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Man erhält 154 mg der in der Überschrift genannten Verbindungals Öl. Rf (SiO₂/Äthylacetat) = 0,17.

^_m-,_v (Film) : 3325 (breit), 1800, 1750, 1700, 745 und

705 cm"¹.

Beispiel 19

Hydrochlorid des 9-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-methoxymethylesters.

0,4 g 9-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure in 15 ml Dimethylformamid werden bei Raumtemperatur mit 1 Äquivalent Chlordimethyläther behandelt und 5 Minuten gerührt. Beim Eindampfen unter vermindertem Druck erhält man ein Öl, das in 5 ml Äthanol gelöst und tropfenweise mit 250 ml Diäthyläther unter lebhaftem Rühren versetzt wird. Der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert, mit wasserfreiem Diäthyläther gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Man erhält 320 mg des Hydrochlorids des 9-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-

8098A3/0910

methoxymethylesters als weissen Feststoff.

■V (Nujol): 2800-2460, 2460-2300, 1800, 1750, 1695, 750, 700 cm"¹.

S(CD₃OD) : 3,10 (1H, d, J, 17Hz, 6ß-CH); 3,43 (3H,

s, OCH₃); 3,74 (2H, d, J=7Hz, 9-CH₂); 4,15 (2H, s, CH₂C₆H₅); 5,27 (2H, s, CH₂OCH₃)', 5_f77 (1H, d, J;«3Hz, 5 -CH); 7,40 (5H, s,

Beispiel 20 g-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-äthylester,-

Eine Suspension von 576 mg 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure in 20 ml Methylenchlorid werden mit einer Lösung von 380 mg Triäthyloxonium-tetrafluorborat in 20 ml Methylenchlorid behandelt. Die Suspension wird 3 Stunden "bei Raumtemperatur gerührt, bis auf Grund der DünnschichtChromatographie keine Änderung mehr festgestellt wird. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck erhält man das Tetrafluorborat des 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-äthylesters, das in wässriger Natriumbicarbonatlösung (etwa 1 Äquivalent) gelöst wird. Man extrahiert die Lösung zweimal mit je 20 ml Methylenchlorid, wäscht die organische Phase mit 20 ml Natriumchloridlösung, trocknet sie über wasserfreiem Magnesiumsulfat und dampft sie ein. Man erhält 250 mg des in der Überschrift genannten Esters als Öl. Rf = 0,2 auf SiO₂ unter Verwendung von Äthylacetat.

(Film) : 3300 (breit), 1800, 1745 und 1695 cm"¹. 3098/> 3/0910

AOH

Beispiel 21

Hydrochloric! des 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäurebenzyloxymethylesters.

288 mg 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansaure werden in 15 ml wasserfreiem Dimethylformamid bei Raumtemperatur gelöst. Die Lösung wird mit 157 mg Benzyloxymethylchlorid in 1 ml Dimethylformamid versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, bis sich auf Grund der Dünn-

die Schichtchromatographie zeigt, dass/Veresterung vollständig ist. Dann dampft man das Lösungsmittel unter vermindertem Druck ab, löst den Rückstand in Aceton, filtriert die Lösung durch Kieselgur und fügt wasserfreien Äther hinzu. Beim Kühlen und Reiben kristallisiert das in der Überschrift genannte Hydro-Chlorid aus und wird abfiltriert. Ausbeute: 220 mg.

.[a] = ₊15,6

1',Oj CH₃OH); Vmax (Nujol): 2725 (b), 1795, 1766, 1700cm"¹; (KBr); 2940 (b), 2700-2840 (b), 1795, 1767, 1698 cm"¹; S(CD₃OD): 3,08 (1H, d, J=17Hz, 6ß-CH); 3,57 (1H, dd, J*3,5 ynd 17Hz, 6a-CH)·, 3,68 (2H, breit, d, 9CH₂); 4,11 (2H, s, NH₂CH₂C₆H₅); 4,69 (2H, s, ^VerdUnke^_SS ^derp^Ceak, CH₂OCH₂C₆H₅); 4,85 (1H,

t, «£=7Hz, 8CH); 5_f23 (1H, s, 3-CH); 5,38 (2H, s, CO₂CH₂O); 5,71 (1H, d, J>3Hz, 5-CH); 7,23 (5H, s, aromat. -H); 7<37 (5H, s, aromat· -H).

S09843/0910

/OS"

Beispiel 22

Hydrochlorid des 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-(4-nitrobenzyl) -oxymethyles t ers.

0*4- g 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure in 15 ml wasserfreiem Dimethylformamid werden bei Raumtemperatur mit 1 Äquivalent 4-Nitrobenzyloxymethylchlorid behandelt. Nach 7 minütigem Rühren der Lösung dampft man sie unter vermindertem Druck ein und versetzt den Rückstand mit 20 ml Aceton und anschliessend mit 200 ml eines Gemisches aus Petroläther vom Siedebereich 80 bis 100⁰C und Diä-thyläther-im Verhältnis 1:1. Man kühlt das Gemisch über Nacht, filtriert den abgeschiedenen Feststoff ab und wäscht ihn mit Äther. Nach dem Trocknen unter vermindertem Druck erhält man 0,41 g des in der Überschrift -genannten Hydrochlorids als fast weissen Feststoff. Rf (Si0₂/Äthanol : Chloroform im Verhältnis 1:4) = 0,58.

V (Film): 1305, 1755, 1700 cm"¹. S(DMSO): 3,15 (1H, d, J«.

17Hz, 6ßCH); 3,62 (1H, dd, J*17 und 3 Hz, 6-α-CH); 3,5 (2H, -breit, m, 9-CH₂)", 4,03 (2H,breit. s,scharf ,beim Schütteln mit D₂O, NCH₂C₆H₅)-, 4_f86 (2H, s, CH₂OCH₂C₆H₅NO₂); 4,96 (1H, t, J» 7Hz, SCH); 5_f37 (1H, s, 3CH)-, 5,45 (2H, s, CH₂OCH₂C₆H₄NO₂);-5,70 (1H, d, J=3Hz, 50L-CH); 7,27 - 7,60 (7H, m, CH₂C₆H₅UiId Protonen in m-Stellg. g^ppe^on Nitrotenzyl)·, 8,12 (2H, d, J₅ 9Hz, protons ortho to nitro group of nitrobenzyl); 9,72 (2H, breit, s,tauscht aus mit D₂O, NH

S-O 9843/0910

/OG

Beispiel 23

p-Toluolsulfonsäuresalz der 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure.

288 mg 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure werden in 15 ml Benzylalkohol suspendiert und mit 190 mg p-Toluolsulfonsäure versetzt. Man erhält die in der Überschrift genannte Verbindung .

Beispiel 24

p-Toluolsulfonsäuresalz des 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-benzylesters.

206 mg Dicyclohexylcarbodiimid werden zu der nach Beispiel 23 erhaltenen Lösung gegeben. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird auf eine Säule mit Silicagel aufgebracht. Man eluiert mit Gemischen aus Chloroform und Äthanol in ansteigenden Mengen von Chloroform bis schliesslich zu einem Verhältnis von 10:1. Bei Verreiben mit einem Gemisch aus Aceton und Äther erhält man die in der Überschrift genannte Verbindung als weissen Feststoff.

^{: 1810}> ¹?50, 1700 cm"¹.

S-O 9843/0910

Beispiel 25

p-Toluolsulfonsäuresalz des 9-N-Benzyl-amino-desoxyclavulansäure-äthylesters.

288 mg 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure werden in 15 ml Äthanol suspendiert und mit 190 mg p-Toluolsulfonsäure zur Bildung des Säureadditionssalzes versetzt. Dann fügt man 206 mg Dicyclohexylcarbodiimid zur Lösung hinzu und rührt das Reaktionsgemisch mehrere Stunden bei Raumtemperatur. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels reinigt man die erhaltene Verbindung mittels Säulenchromatographie an Silicagel unter Verwendung eines Gemisches aus Butanol, Propan-2-ol und Wasser im Verhältnis 4:4:1 als Eluierungsmittel.

genannte Verbindung Die die in der Überschrift/enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und eingedampft. Bei der Zugabe von Äthanol und Äther zum Rückstand erhält man die gewünschte Verbindung als weissen Feststoff, der abfiltriert und getrocknet wird.

Ο (Nujol Mull) : 1810, 1750 und 1700 cm"¹.

Beispiel 26

Hydrobromid des 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäurephenacylesters. .

288 mg 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure in 15 ml Dimethylformamid werden mit 199 mg Phenacylbromid behandelt. Die erhaltene Lösung rührt man 90 Minuten bei Raumtemperatur. Dann dampft man das Dimethylformamid unter vermindertem

509843/0910

J(Of

Druck ab, chromatographiert den Rückstand an Silicagel und

eluiert die in der Überschrift genannte Verbindung mit einem Gemisch aus Chloroform und Äthanol im Verhältnis 10:1. Nach dem Eindampfen der Fraktionen und anschliessendem Verreiben mit einem Gemisch aus Aceton und Äther erhält man das gewünschte Salz als blassgelben Feststoff.

^ mo_V (KBr) : 1798, 1755 und 1698 cm"¹.

* ZIIcLjC

Beispiel 27

Hydrojodid des 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäurephenacylesters.

Man löst 199 mg Phenacylbromid in 2 ml Aceton und versetzt die Lösung mit 1,1 Äquivalenten Natriumiodid in 2 ml Aceton. Man erhält eine sofortige Ausfällung von Natriumbromid. Nach 10 minütigem Rühren des Gemisches filtriert man den Niederschlag ab und gibt das Filtrat zu einer Suspension von 288 mg 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure in 15 ml Dimethylformamid. Man rührt die Lösung 2 Stunden bei Raumtemperatur und dampft dann das Lösungsmittel ab. Nach einem Fraktionieren des Rohproduktes an Silicagel und Eluieren mit einem Gemisch aus Chloroform und Äthanol im Verhältnis 10:1 erhält man die in der Überschrift genannte Verbindung. Nach dem Aufarbeiten und Verreiben mit einem Gemisch aus Aceton und Äther erhält man diese Verbindung als blassgelben Feststoff.

>* _v (Nujol) : 1800, 1750 und 1695 cm"¹.

309843/0910

Beispiel 28

Lithiumsalz der 9-N-Carboxybenzoxy-N-benzyl-amino-desoxyclavulansäure.

1,15 g 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure in 20 ml Dimethylformamid mit einem Gehalt von 1 Äquivalent-Lithiumbicarbonat (544 mg; 10,8 ml einer 5 proζentigen Lösung) wird bei O⁰C tropfenweise mit einer Lösung von 684 mg Chlorameisensäure-benzylester in 10 ml Aceton behandelt. Das Reaktionsgemisch wird 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Dann dampft man das Lösungsmittel ab und verreibt den Rückstand mit einem Gemisch aus Aceton und Äther. Der erhaltene weisse Feststoff des Lithiumsalzes wird abfiltriert und unter vermindertem Druck im Exsikkator getrocknet. Ausbeute: 1,6 g. Rf (Si0p/n-Butanol, Isopropanol und Wasser im Verhältnis 7:7:6) = 0,66.

@jf " ⁺ 28/3°

(C=1,6; Wasser); V_max (Kujöl): 1778, 1682, i620cm"¹j S ((CD^)₂ SO); 2,68 (1H, d, J₃17,5Hz, 6ß-CH); 3,42 (1H, dd, dunkelt d.Wasserpeack 6a-CH); 3,8 (2H, d, «3>7,5Ηζ, 9-CH₂)-, 4,32 (2H, s, NCH₂C₆H₅),* 4,52 (2H, m, 3-CH und 8-CH); 5,07 (2H, s, N.CO.0.CH₂)-, 5,52 (1H, d, J>3Hz, 5-CH); 7_;21 (5H, s, aromat. -H)', 7|28 (5H, s, aromat .-H).

809843/0910

Beispiel 29

9-N-Carbobenzoxy-N-benzyl-amino-desoxy-clavulansäuremethylester.

428 mg des Lithiumsalzes der 9-N-Carbobenzoxy-N-benzylamino-desoxy-clavulansäure werden in 10 ml Dimethylformamid gelöst und mit 710 mg Methyljodid versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Dann dampft man das Lösungsmittel ab und chromatographiert den Rückstand an Silicagel unter Verwendung eines Gemisches aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1 als Eluierungsmittel. Nach dem Abdampfen der Lösungsmittel erhält man 244 mg der in der Überschrift genannten Verbindung als farbloses Öl.

Rf (Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1) = 0,75.

Wj». ₊.15,21°

(c=1.12;CH,0H); V (Film): 1805, 1750, 1690 cm"¹; S(CDCl,); 2,86 (1H, d, J-17,5Hz, 6ß-CH)', 3,42 (1H, dd, J>17,5und 3Hz, 6a-CH); 3,72 (3H, s, CO₂CH₃)I 3,96 (2H, d, JV7_;5Hz, CH.CH₂N)-,

4j44 (2H, s, NCH₂Ph)* 4,67 (1H, bt, Jx7_;5Hz, CHCH₂); 4,94 (1H, d, J=1,5Hz, 3-CH)', 5,16 (2H, s, CO₂CH₂Ph)-, 5,53 (1H, d, J^ 5-CH); 7,22, 7_;3 (10H, 2 χ s, Ar-H).

809843/0910

Mn -^

Beispiel 30

9-N-Carbobenzoxy-N-benzyl-amino-desoxy-clavulansäureäthylester.

780 mg Äthyljodid werden zu einer Lösung von 428 mg des Lithiumsalzes der 9-N-Carbobenzoxy-N-benzyl-amino-desoxyclavulansäure in 10 ml Dimethylformamid mit einem Gehalt von etwa 2 Tropfen Wasser gegeben. Die Lösung wird 7 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Dann dampft man das Lösungsmittel ab und chromatographyert den Rückstand an Silicagel. Man eluiert mit einem Gemisch aus Äthylacetat und Cyclohexan . im Verhältnis 1:1. Nach dem Abdampfen der Lösungsmittel erhält man 307 mg der in der Überschrift genannten Verbindung als farbloses Öl.
Rf (Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1) = 0,78.

[_a]20_{= t 9j6}o (C=^₃₈. CH₃OH); -V_max (Film); 1802, 1745, 1695 cm"¹; S (CDCl₃); 1_f25 (3H, t, J=SHz, CH₂CH₃); 2,86 (1H, d, J>17,5Hz, 6ß-CH); 3,41 (1H, dd, J>17,5Hzund 3Hz, 6a-CH); 3,96 (2H, d, J= 8Hz, CHCH₂N); 4,17 (2H, q, J-SHz, CH₂CH₃)', 4,43 (2H, s, NCH₂-C₆H₅); 4,92 (IH, d, Jyi,5Hz, 3-CH); 4,67 (1H, bt, J=8Hz, 8-CH); 5,17 (2H, s, CO.0.CH₂C₆H₅)-, 5_r53 (1H, d, J^3Hz, 5-CH); 7,23, 7,30 (10H, 2 χ s, Ar-H).

809843/0910

Beispiel 31

L-Apfelsäureadditionssalz des 9-N-Benzyl-amino-desoxyclavulansäure-methylesters.

218 mg 9-N-Benzyloxycarbonyl-N-benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-methylester in 15 ml Tetrahydrofuran und 1 ml Wasser werden bei Normaldruck und Raumtemperatur in Gegenwart von 67 ml L-Apfelsäure und 73 mg 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator 2 Stunden hydriert. Nach dem Abfiltrieren des Katalysators wird das Filtrat zur Trockne eingedampft. Beim Verreiben mit einem Gemisch aus Propan-2-ol und Äther erhält man die in der Überschrift genannte Verbindung als fast weissen Feststoff.

J (Nujol) : 1800, 1745, 1695 und 1625 cm"¹.

Beispiel 32

L-Apfelsäureadditionssalz des 9-N-Benzyl-amino-desoxyclavulansäure-äthylesters.

Eine Lösung von 140 mg 9-N-Benzyloxycarbonyl-N-benzyl-aminodesoxy-clavulansäure-äthylesters und 42 mg L-Apfelsäure in 15 ml Tetrahydrofuran und 1 ml Wasser werden 2 Stunden bei Raumtemperatur und Normaldruck in Gegenwart von 45 mg 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Man filtriert den Katalysator ab, wäscht ihn mit Wasser und dampft das Filtrat ein. Nach dem Verreiben des Rückstands mit einem Gemisch aus Propan-2-ol und Äther erhält man die in der Überschrift genannte Verbindung als fast weissen Feststoff.

V (Nujol) : 1800, 1745, 1695 und 1630 cm"¹.

Iu S. X

80984 3/0910

Beispiel 33

g-N-Benzyloxycarbonyl-N-benzyl-amino-desoxy-clavulansäurebenzyloxycarbonylmethylester.

428 mg des Lithiumsalzes der 9-N-Benzyloxycarbonyl-N-benzylamino-desoxy-clavulansäure werden in 15 ml Dimethylformamid suspendiert und mit 3 Tropfen Wasser versetzt. Dann fügt man 343 mg Bromessigsäure-benzylester zu der erhaltenen Lösung und rührt das Reaktionsgemisch 5 Stunden bei Raumtemperatur. Wenn durch die Dünnschichtchromatographie die Beendigung der Umsetzung ersichtlich ist, dampft man das Lösungsmittel ab und chromatographiert den Rückstand an Silicagel unter Verwendung eines Gemisches aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1 als Eluierungsmittel. Die vereinigten Fraktionen werden unter vermindertem Druck eingedampft und ergeben 384 mg eines farblosen Öls.
Rf (SiO₂/Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1) =0,71.

[«}*> = + 12,2° (c = 1,16;CE (Elm); 1805, 1750 (b), 1705 (sh), 1690 cm"¹; S(CDCl₃)J 2_;86 (1H, d, J=:17_r5Hz, 6ß-CH)', 3,38 (1H, dd, J=17,5 und 3Hz, 60C-CH); 3|94 (2H,

d, Jr8Hz, 9-CH₂); 4,44 (2H, s, NCg₂Ph)-, 4,65 (2H, s, CO₂CH₂CO₂);

tr nt (Λτχττ,*- teilweise verdunkelt , r^. _{ς n}#, /_{1H H T}_ 4,74 (1H,bt, _{durch Signal bei} 4,65), 5,04 (1H, d, J^

I₁5Hz, 3-CH)', 5,15 (4H, s, NCO₂CH₂Ph und CH₂CO₂CH₂PIi); 5_r52 (1H, d, Js:3Hz, 5-CH); 7,22, 7_f29 (15H, 2 χ s, aromat. -H).

S09843/0910

Beispiel 34

g-N-Benzyloxycarbonyl-N-benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-2-hydroxyäthylester.

860 mg 2-Jodäthanol werden zu einer Lösung von 428 mg des Lithiumsalzes der 9-N-Benzyloxycarbonyl-N-benzyl-aminodesoxy-clavulansäure in 15 ml Dimethylformamid und 3 Tropfen Wasser gegeben. Man rührt die Lösung 14 Stunden bei Raumtemperatur und dampft dann das Lösungsmittel ab. Der Rückstand wird durch Säulenchromatographie an Silicagel unter Verwendung eines Gemisches aus Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1 als Eluierungsmittel gereinigt. Man erhält ein farbloses Öl.
Rf (SiOp/Äthylacetat und Cyclohexan im Verhältnis 1:1)= 0,29.

^_m„_v (Film) : 1800, 1745 und 1700 cnf¹.

Beispiel 35

Bernsteinsäureadditionssalz des 9-N-Benzyl-amino-desoxyclavulansäure-methylesters.

109 mg des 9-N-Benzyloxycarbonyl-N-benzyl-amino-desoxyclavulansäure-methylesters werden in 10 ml eines Gemisches aus Tetrahydrofuran und Methanol gelöst. Die Lösung wird bei Normaldruck und bei Raumtemperatur in Gegenwart von 38 mg 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysator hydriert. Nach dem Abfiltrieren des Katalysators dampft man das Lösungsmittel ab. Man erhält die in der Überschrift genannte Verbindung als

gummiartige Substanz.

809843/0910

^_max(Film) : 1800, 1740, 1695 und 1615 cm"¹.

Beispiel 36

L-Weinsäureadditionssalz des 9-N-Benzyl-amino-desoxyclavulansäure-methylesters.

87 mg g-N-Benzyloxycarbonyl-N-benzyl-amino-desoxy-clavulansäure-methylester in 10 ml Tetrahydrofuran und 1 ml Wasser
werden 30 Minuten bei Normaldruck in Gegenwart von 30 mg
(+)-Weinsäure und 30 mg eines 10 Prozent-Palladium-Kohle-Katalysators hydriert. Man filtriert das Gemisch durch
Kieselgur, wäscht den Katalysator mit Wasser und dampft das Piltrat zur Trockne ein. Nach Verreiben des Rückstandes mit einem Gemisch aus Aceton und Äther erhält man die in der
Überschrift genannte Verbindung als weissen Feststoff.

\) (Nu₁JoI) : 1797, 1743, 1700 und 1620 cm"¹.

HIcLX

Beispiel 37 Pharmazeutische Präparate.

(a) Man löst 100 mg sterile 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure in 5 ml sterilem Wasser zu Injektionszwecken und erhält eine injizierbare Lösung.

(b) Man löst 100 mg sterile 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure und steriles Natriumsalz des Amoxycillins, das zu

250 mg der reinen freien Säure äquivalent ist, in 8 ml sterilem Wasser für Injektionszwecke und erhält eine injizierbar e Lösung.

"509843/0310

(c) Man löst 50 mg sterile 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure und steriles Natriumsalz des Amoxycillins, das zu 250 mg reiner freien Säure äquivalent ist, in 5 ml sterilem Wasser für Injektionszwecke und erhält eine injizierbare Lösung.

Analoge pharmazeutische Präparate werden mit einem Gehalt von 9-N-(4-Acetamidobenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure, mit 9-N-(4-Hydroxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure oder mit 9-N-(4-Methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure anstelle von 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure hergestellt.

Nachstehend werden die Aktivitäten der Derivate vorliegender Erfindung veranschaulicht.

A. In-vitro-Aktivität

Es werden nach der Mikrotitermethode die Mindesthemmkonzentrationswertefür Ampicillin allein oder in Verbindung mit 1/Ug/ml oder mit 5/ug/ml von Derivaten der vorstehenden Beispiele bestimmt. Man erhält die folgenden Ergebnisse :

S098A3/0910

O CD CO

	Mindesthemmkonzentrationen ( von O/Ug/ml, 1 /ug/ml oder	/Ug/ml) von 5/Ug/ml des	+ 1	+ 5	Ampicillin in Gegenwart Synergisten	C889	sp.	E.	+ 0	coli	+5
Verbindung des	. Staphylococcus	Klebsiella	V	V	Proteus	+ 1		JT	>500	3^	8
.ns ex sp ie j. s Nr. ■	aureus Russell	aerogenes E70	1,6	0,4		125	+ 5	2000	+ 1	/5
			6,2	6,2	+ 0	2	4	>500	8	4
1	+ 0 +1 +5	+ 0	V	1,6	>500	62	0,5	2000	2 0	4
2	62,5 0.3 0,01	>500	V	0.8	2000	31	16	2000	8	4
3	500 0,08 0,01	1000	6;25	3,12	>500	62	2	>500	16	4
4	62 0,2	>500	12,5	3^2	2000	125	4	>500	31	4
Natriumsalz der Clavulansäure	500 0;6 0,04	1000	Λ1	•1,5	2000	62;5	8	>500	4	2
5	500 0.6 0.02	100		>500	4·	2	8
7	>62,5 0^3 <0f01	>500	>500	2	8
13	>62.5 O1OKO1OI	>500	>500
>62.5 0,08 -	>500

B. In-vivo-Aktivität

Es wird die synergistische Wirkung von Derivaten vorliegender Erfindung bei Tieren durch eine gleichzeitige Verabreichung der Verbindung des Beispiels 2 und von Amoxycillin als Natriumsalz an die zu untersuchenden Tiere, die mit Escherichia coli JT 39 infiziert worden sind, gezeigt. Dieser Mikroorganismus erzeugt erhebliche Mengen einer ß-Lactamase, die Amoxycillin abbaut, so dass dessen antibakterielle in-vivo-Wirksamkeit herabgesetzt wird. Wenn jedoch die Verbindung des Beispiels 2 an das zu untersuchende Tier gleichzeitig wie Amoxycillin verabreicht wird, vermag das Amoxycillin die ß-Lactamase zu hemmen und seine antibakterielle Wirksamkeit zu zeigen. Die nachstehenden Werte werden erhalten, wenn Amoxycillin allein oder zusammen mit der Verbindung des Beispiels 2 oder mit dem Natriumsalz der Clavulansäure subkutan Mäusen verabreicht wird, die mit Escherichia coli JT 39 infiziert worden sind :

Test-Verbindungen

Natriumsalz des Amoxycillins allein

Natriumsalz des Amoxycillins + 2 mg/kg der Verbindung des Beispiels 2

Natriumsalz des Amoxycillins + 1 mg/kg der Verbindung des Beispiels 2

Natriumsalz des Amoxycillins + 2 mg/kg des Natriumsalzes der Clavulansäure

Natriumsalz des Amoxycillins + 1 mg/kg des Natriumsalzes der Clavulansäure

Das Natriumsalz des Amoxycillins wird durch Lösen von Amoxycillin- trihydrat in einer Natriumcarbonat/Natriumbicarbonat-Pufferlösung hergestellt.

S098A3/0910

(mg/kg;	χ 2)
200
3	,3
8	,7
14	,5
58

Die Verbindung des Beispiels 2 ist auch zum Schützen von Amoxycillin vor der ß-Lactamase von Escherichia coli JT in vivo wirksam, wenn sie oral verabreicht wird, doch weniger wirksam, bezogen auf das gegebene Gewicht, wenn sie subkutan verabreicht wird.

Während dieser Untersuchungen wird beobachtet, dass die Verbindung des Beispiels 2 keine toxischen Wirkungen hervorruft.

C. Wirksamkeit als synergistische Verbindung.

Man erhält die nachstehenden ungefähren CD^Q-Werte für Amoxycillin in Gegenwart von Verbindungen bestimmter Beispiele vorliegender Erfindung, wenn diese Verbindungen eine bzw. fünf Stunden nach der Infektion verabreicht werden, die durch peritoneales Infizieren mit Escherichia coli JT hervorgerufen worden ist.

Test 1 CD.-Q

Amoxycillin allein 1000mg/kg χ 2

Amoxycillin + Verbindung von

Beispiel 2 mit 2 mg/kg 4,5 mg/kg χ 2

Amoxycillin + Verbindung von

Beispiel 2 mit 1. mg/kg 6,3 mg/kg χ 2

Amoxycillin + Verbindung von

Beispiel 7 mit 2 mg/kg 6,4 mg/kg χ 2

Amoxycillin + Verbindung von

Beispiel 7 mit 1 mg/kg 7,5 mg/kg χ 2

Amoxycillin + Verbindung von

Beispiel 9 mit 2 mg/kg 4,5-8 mg/kg χ 2

Amoxycillin + Verbindung von

Beispiel 9 mit 1 mg/kg 12 mg/kg χ 2

Cefazolin allein 10,5 mg/kg χ 2

S098A3/0910

2250	mg/kg	X	2
1000	mg/kg	X	2
3,1	mg/kg	X	2
8	mg/kg	X	2
4,5	mg/kg	X	2
8,5

Test 2

Amoxycillin allein

Amoxycillin + Verbindung von Beispiel 6 mit 2 mg/kg

Amoxycillin + Verbindung von Beispiel 6 mit 1 mg/kg

Amoxycillin + Verbindung von Beispiel 2 mit 2 mg/kg

Amoxycillin + Verbindung von Beispiel 2 mit 1 mg/kg

Test 3

————— —j\j

Amoxycillin allein 1000 mg/kg χ 2

Amoxycillin + Verbindung von

Beispiel 13 mit 2 mg/kg 4,4 mg/kg χ 2

Amoxycillin -f Verbindung von

Beispiel 2 mit 2 mg/kg 5,8 mg/kg χ 2

D. Wirksamkeit als antibakterielle Substanz.

Man infiziert Mäuse in den Oberschenkel intramuskulär mit
0,2 ml Staphylococcus aureus Rüssel. Dann injiziert man eine, drei und fünf Stunden nach der Infektion subkutan eine Lösung der zu untersuchenden Verbindung.

Man erhält die nachstehenden Ergebnisse :

3098A3/0910

Verbindung

9-N-Benzyl-amino-de soxyclavulansäure

9-N-p-Methoxybenzyl-aminodesoxy-clavulansäure

Dosis (mg/kg)	Schutz (Prozent)
VJl	69,8
10	89,7
20	99,3
5	28,0
10	80,8
20	87,6
20	61,6
50	91,7
20	39,0
50	71,2

Cloxacillin

Cefazolin

Der ID₅₀-¥ert der 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure liegt bei Mäusen über 1000 mg/kg Körpergewicht bei intraperitonealer Injektion und über 500 mg/kg Körpergewicht bei der subkutanen Verabreichung.

a09843/091

Claims (128)

Patentansprüche

1. Derivate der 9-Amino-desoxy-clavulansäure der allgemeinen Formel II

und deren Ester, in der

R^ ein Wasserstoffatom, ein Alkyl- oder Hydroxyalkylrest mit (jeweils 1 °i^s 5 Kohlenstoffatomen, ein Cycloalkylrest mit 5 oder 6 Kohlenstoffatomen oder ein Rest der allgemeinen Formel (a)

(a)

ist, wobei

Rp ein Wasserstoff-, Fluor-, Chlor- oder Bromatom, die Hydroxylgruppe, einen Alkyl-, Alkoxy- oder Acyloxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, einen Alkoxycarbonylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen im Alkoxyteil oder einen Rest

-N(R₅)CO.R₆, -N(R₅)SO₂R₆ oder -CO-NR₅R₆

809843/0910

bedeutet, in denen

Rc ein Wasserstoffatom, die Phenyl- oder Benzylgruppe oder ein Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen ist und

Rß die Phenyl- oder Benzylgruppe oder einen Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen bedeutet,

R-2 ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder einen Alkyl-, Alkoxy- oder Acyloxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen darstellt und

Ri für ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder für einen Alkyl- oder Alkoxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen steht.

2. Derivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (II) R₁ ein Wasserstoffatom ist.

3. Derivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (II) R₁ ein Alkylrest mit

1 bis 5 Kohlenstoffatomen ist.

4. Derivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (II) R₁ ein Hydroxyalkylrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen ist.

5. Derivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (II) R₁ ein Phenylrest ist,

309843/0910.

der durch Fluor-, Chlor- oder Bromatome oder Alkyl- oder Alkoxyreste mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann.

6.' Derivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in'der allgemeinen Formel (II) R^ die Methyl-, Äthyl-, Propyl-, Butyl-, Hydroxymethyl-, Hydroxypropyl-, Phenyl-, p-Methoxyphenyl- oder die p-Methylphenylgruppe ist,

7. Derivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (II) R-i ein Wasserstoffatom, ein Alkyl- oder Hydroxyalkylrest mit jeweils 1 bis 5 Kohlenstoffatomen oder ein Rest der allgemeinen Formel (b)

ist, in der

-R₂ -ein Wasserstoff-, Fluor-, Chlor- oder Bromatom, die Hydroxylgruppe, einen Alkyl-, Alkoxy- oder Acyloxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen oder einen Alkoxycarbonylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen im Alkoxyteil bedeutet,

R-z ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder einen Alkyl-, Alkoxy- oder Acyloxyrest mit jeweils 1 bis 3 Koh-

509843/0910

lenstoffatomen darstellt und

R^ für ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder für einen Alkylrest oder Alkoxyrest mit jeweils 1 bis 3 Kohlenstoffatomen steht.

8. Derivate nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel (III)

^R4

und deren Ester, in der Rp₉ R^ und R^ die in Anspruch angegebenen Bedeutungen besitzen.

9. Derivate nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(III)Rp ein Wasserstoff-, Fluoroder Chloratom oder die Methoxy-, Äthoxy-, Hydroxyl-, Acetoxy-, Propionoxy-, Methyl-, Äthyl-, Methoxycarbonyl- oder die Äthoxycarbonylgruppe ist.

Ί0. Derivate nach den Ansprüchen 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(III) R-, ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methyl-, Äthyl- oder die Methoxygruppe ist.

11. Derivate nach mindestens einem der Ansprüche 8 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(lll) Rr ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Meth-

809843/0910

oxy-, Äthoxy-, Acetoxy-, Propionoxy-, Methyl- oder Äthylgruppe ist.

12. Derivate nach mindestens einem der Ansprüche 1 bis 11.in Form von Zwitterionen.

13. Derivate nach wenigstens einem der Ansprüche 1 bis 11 in Form eines Esters eines Derivats der allgemeinen Formeln (II) oder (III).

14. Derivate nach Anspruch 13 in Form von Säureadditionssalzen.

15. Derivate nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel (IV)

.Q

(IV)

CH₂-NH-CH₂ ,

in der Q ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methyl-, Methoxy-, Äthyl- oder Äthoxygruppe ist.

16. Derivate nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (IV) Q ein Wasserstoff-, p-Fluor- oder p-Chloratom oder die p-Methyl- oder p-Methoxygruppe ist.

17. Derivate nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel (V)

S09843/0910

CH--NH-CH _of Cj ι

2 2 X^AqI _(v)

in der Q ein Wasserstoff-, Fluor- oder Chloratom oder die Methyl-, Äthyl-, Methoxy-, Äthoxy- oder Hydroxylgruppe ist.

18. Derivate nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (V) Q ein Wasserstoffatom oder die Methyl- oder Methoxygruppe ist.

19· Derivate nach den Ansprüchen 17 oder 18, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (V) die Hydroxylgruppe in p- oder meta-Stellung zu demjenigen Kohlenstoffatom steht, an das die -NH-CHp-Gruppierung gebunden ist.

20. Derivate nach mindestens einem der Ansprüche 1 und 12 bis 14, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (II) R₂ der Rest -N(R₅)CO.Rg, -N(R₅)SO₂Rg oder -CO-NR₅Rg ist, wobei R₅ und Rg die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen besitzen.

21. Derivate nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, dass der Rest R₅ ein Wasserstoffatom oder die Methylgruppe ist.

309843/0910

22. Derivate nach den Ansprüchen 20 oder 21, dadurch gekennzeichnet, dass der Rest Rg ein Alkylrest mit 1 Ms 3 Kohlenstoffatomen ist.

23. Derivate nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass Rg die Methylgruppe ist.

24. Derivate nach mindestens einem der Ansprüche 20 bis 23, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(ll) R, die in Anspruch 10 angegebene Bedeutung besitzt.

25. Derivate nach mindestens einem der Ansprüche 20 bis 24, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(Il) R^ die in Anspruch 11 angegebenen Bedeutungen besitzt.

26. Derivate nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel (VI)

(VI)

in -der R,, R^, R₅ und Rg die bei der allgemeinen Formel (II) angegebenen Bedeutungen besitzen.

27. Derivate nach Anspruch 26, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (VI) R,- ein Wasser stoff atom ist.

28. Derivate nach Anspruch 26, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (VI) R,- ein Alkylrest mit 1 bis

3 Kohlenstoffatomen ist.

803843/0910

29. Derivate nach Anspruch 28, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (VI) Rc die Methylgruppe ist.

30. Derivate nach wenigstens einem der Ansprüche 26 bis 29_} dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(Vl) Rg ein Alkylrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen ist.

31. Derivate nach Anspruch 30, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (VI) Rg die Methylgruppe ist.

32. Derivate nach wenigstens einem der Ansprüche 26 bis 31> dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(VI) R-, die in Anspruch 10 angegebenen Bedeutungen besitzt.

33. Derivate nach mindestens einem der Ansprüche 26 bis 32, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(VI) Rr die in Anspruch 11 angegebenen Bedeutungen besitzt.

34. Derivate nach mindestens einem der Ansprüche 26 bis 31» dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(Vl) R-2 und R^ Wasserstoffatome sind.

35. Derivate nach wenigstens einem der Ansprüche 26 bis 34, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(Vl) der Rest -N(R₅)CORg in p-Stellung zur -NH-CH₂-Gruppierung steht.

36. Derivate nach Anspruch 1 der allgemeinen Formeln (VIII) oder (IX) :

309843/0910

CH₂-NH-CH₂-R₁

(VIII)

in denen

FL die in den Ansprüchen 1 bis 7 angegebenen Bedeutungen

besitzt,

A₁ ein Alkylrest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist, der durch Alkoxy- oder Acyloxyreste mit 1 bis 7 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann,

Ap einen Alkenyl- oder Alkinylrest mit 2 bis 5 Kohlenstoffatomen oder die Phenylgruppe bedeutet, die durch Fluor-, Chlor- oder Bromatome, Nitrogruppen oder Alkyl- oder Alkoxyreste mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann, und

A, ein Wasserstoffatom, einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder die Phenylgruppe bedeutet, die durch Fluor-, Chlor- oder Bromatome, Nitrogruppen oder Alkyl- oder Alkoxyreste mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann.

37. Derivate nach Anspruch 36 in Form der Methyl-, Äthyl-, n-Propyl-, η-Butyl-, Allyl-, Propargyl-, Methoxymethyl-, Acetoxymethyl-, Propionoxymethyl-, Trimethylacetoxy-. methyl-, Äthoxycarbonyloxymethyl-, Methoxycarbonyloxy-

S09843/0910

äthyl-, Athoxycarbonyloxyäthyl-, Dimethoxyphthalidyl-,
Benzyl-, Methoxybenzyl-, Athoxybenzyl-, Nitrobenzyl-
oder Chlorbenzylester.

38. Derivate nach Anspruch 36, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (VIII) A^ die Methyl-, Methoxymethyl-, Acetoxymethyl-, Acetoxyäthyl-, Phthalidyl-,
Athoxycarbonyloxymethyl- oder die C^-Äthoxycarbonyloxyäthylgruppe ist.

39. Derivate nach Anspruch 36, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel(lX) Ap die Phenyl- oder
4-Methoxyphenylgruppe ist.

40. Derivate nach den Ansprüchen 36 bis 39 > dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (IX) A^ ein
Wasserstoffatom ist.

41. Derivate nach Anspruch 36, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (VIII) A^ eine der nachstehenden Formeln (c), (d) oder (e) aufweist :

-CHA_C-OA_C
0 0 Cc) -CHA₁.-COA,-
5 0 Cd) -CHA₅-CO₂Ag Ce)

in denen Aj- ein Wasserstoff atom oder die Methylgruppe ist und

Ag ein Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder die

S098 43/0910

Phenyl- oder Benzylgruppe bedeutet, die jeweils durch eineioder zwei Alkyl- oder Alkoxyreste mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen oder durch Fluor-, Chlor- oder Bromatome oder Nitrogruppen substituiert sein können, wobei auch Ac und Ag unter Bildung eines unsubstituierten gesättigten 5- oder 6-gliedrigen heteroalicyclischen Rings oder einer o-Phenylengruppe verbunden sein können, die durch 1 oder 2 Alkyl- oder Alkoxyreste mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen oder durch Fluor-, Chlor- oder Bromatome oder Nitrogruppen substituiert sein kann.

42. "Derivate nach Anspruch 41, dadurch gekennzeichnet, dass

Ag die Methyl-, Äthyl-, Butyl-, Phenyl- oder Benzylgruppe ist.

43. Derivate nach Anspruch 41, dadurch gekennzeichnet, dass der Rest der Formel (c) die Tetrahydropyranyl- oder Tetrahydrofuranylgruppe ist.

44. Derivate nach einem der Ansprüche 41 bis 43 in Form eines Säureadditionssalzes.

45. 9-N-Benzyl-amino-desoxy-clavulansäure.

46. 9-N-(2-Methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

47. 9-N-(3-Methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

48. 9-N-(4-Methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

309843/0910

AX

49. 9-N-(4-Hydroxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

50. 9-N-(3-Hydroxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

51. 9-N-(4-Hydroxy-3-methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

52. 9-N-(3-Hydroxy-4-methoxybenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

53· 9-N-(2-Fluorbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

54. 9-N-(3-Fluorbenzyl)-aniino-desoxy-clavulansäure.

55· 9-N-(4-Fluorbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

56. 9-N-(2-Methylbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

57· 9-N-(3-Methylbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

58. 9-N-(4-Methylbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

59 · 9-N- ( 2-Acetamidobenzyl) -amino-desoxy-clavulansäure'.

60. 9-N-(3-Acetamidobenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

61. 9-N-(4-Acetamidobenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

62. 9-N-(4-Propionamidobenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

63· 9-N-(4-Chlorbenzyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

64. 9-N-(2-Hydroxyäthyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

8098 4 3/

65. 9-N-Äthyl-amino-desoxy-clavulansäure.

66. 9-N-(2-Hydroxypropyl)-amino-desoxy-clavulansäure.

67. 9-N-Propyl-amino-desoxy-clavulansäure.

68. Methyl-, Äthyl-, Methoxymethyl-, Benzoylmethyl-, Acetylmethyl-, Benzyl-, 2-Methoxybenzyl-, 2-Hydroxyäthyl- oder die Carboxymethylester der Verbindungen der Ansprüche 45 bis 67.

69.. Säureadditionssalze mit Chlorwasserstoff säure, Bromwasserstoff säure, Jodwasserstoffsäure, Bernsteinsäure, L-Weinsäure, L-Apfelsäure oder p-rToluolsulfonsäure der Derivate der allgemeinen Formel (II) nach Anspruch 1.

70. Verfahren zur Herstellung der Derivate der allgemeinen Formel (II) nach den Ansprüchen 1 bis 69 oder deren Ester, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel (X)

^CH2"^R7

CO₂H

oder deren Ester, in der R^ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen besitzt und Ry ein Rest der allgemeinen Formel (a) wie in Anspruch 1 ist, hydriert und danach gegebenenfalls das Zwitterion verestert, das sich durch

S09843/0910

Hydrieren einer Verbindung der allgemeinen Formel (X) oder deren hydrierbaren Ester bildet, oder danach gegebenenfalls das Zwitterion, das sich bei der Hydrierung einer Verbindung der allgemeinen Formel (X) oder deren hydrierbaren Ester bildet, mit einer Verbindung der allgemeinen Formel (XII)

Y-CO-O-R₇ (XII)

verestert, in der R^ die bei der allgemeinen Formel (X) angegebenen Bedeutungen besitzt und Y einen leicht abspal tbaren Rest bedeutet, und danach die gebildete Verbindung der allgemeinen Formel (Xl)

.CO-O-CH₂R₇

(XI)

CO₂H

in der R^ und Ry die bei der allgemeinen Formel (X) angegebenen Bedeutungen besitzen, verestert und den gebildeten Ester unter Bildung des gewünschten Esters eines Derivats der allgemeinen Formel (II) einer Hydrierung unterwirft,

71. Verfahren zur Herstellung eines Derivats der allgemeinen Formel (II) oder dessen Salzes nach Anspruch 70, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen

309843/0910

Formel (X) oder deren Ester hydriert und gegebenenfalls danach das Zwitterion, das durch Hydrieren einer Verbindung der allgemeinen Formel (X) oder deren hydrierbaren Esters gebildet wird, verestert.

72. Verfahren nach Anspruch 71> dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel (X) oder deren hydrierbaren Esters hydriert.

73. Verfahren nach Anspruch 72, dadurch gekennzeichnet,

dass man den Benzyl- oder 4-Methoxybenzylester oder einen anderen substituierten Benzylester einer Verbindung der allgemeinen Formel (X) verwendet.

74. Verfahren nach mindestens einem der Ansprüche 70 bis 73 ₃ dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel (X) verwendet, in der R~ die Phenylgruppe ist.

75. Verfahren nach mindestens einem der Ansprüche 70 bis 73» dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel (X) verwendet, in der R^ ein substituierter Phenylrest ist und Ry einen in gleicher Weise substituierten Phenylrest bedeutet.

76. Verfahren nach mindestens einem der Ansprüche 70 bis 75, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel (X) verwendet, in der R^ ein Rest der allgemeinen Formel (b) des Anspruchs 7 ist.

509843/0910

77. Verfahren nach mindestens einem der Ansprüche 70 bis 76, dadurch gekennzeichnet, dass man die "Hydrierung in Gegenwart eines Palladium-Katalysators durchführt.

78. Verfahren nach Anspruch 77» dadurch gekennzeichnet, dass man als Katalysator Palladium auf Aktivkohle, Tierkohle, Bariumsulfat oder Calciumcarbonat verwendet.

79. Verfahren nach Anspruch 77» dadurch gekennzeichnet, dass man einen 5 Ms 30 Prozent Palladium enthaltenden Kohle-Katalysator verwendet.

80. Verfahren nach Anspruch 79» dadurch gekennzeichnet, dass man einen 20 bis 30 Prozent Palladium enthaltenden Kohle-Katalysator verwendet.

81. Verfahren nach wenigstens einem der Ansprüche 70 bis 80, dadurch gekennzeichnet, dass man die Hydrierung bei einem Wasserstoffdruck von 1,01325 bis 6,0795 bar durchführt.

82. Verfahren nach mindestens einem der Ansprüche 70 bis 79» dadurch gekennzeichnet, dass man bei der Hydrierung einen Wasserstoffdruck von 3,03975 bis 5»06625 bar anwendet und einen 5 bis 10 Prozent Palladium-Kohle-Katalysator verwendet.

83. Verfahren nach mindestens einem der Ansprüche 70 bis 79» dadurch gekennzeichnet, dass man die Hydrierung bei einem Druck von 1,01325 bis 3,03975 bar durchführt und einen 20 bis 30 Prozent Palladium-Kohle-Katalysator verwendet, j

S09843/091Ö

84. Verfahren nach mindestens einem der Ansprüche 70 bis 83, dadurch gekennzeichnet, dass man die Hydrierung bei einer Temperatur von O bis 3O⁰C durchführt.

85. Verfahren nach Anspruch 84, dadurch gekennzeichnet, dass man die Hydrierung bei einer Temperatur von 12 bis 25 C durchführt.

86. Verfahren nach mindestens einem der Ansprüche 70 bis 85, dadurch gekennzeichnet, dass man die Hydrierung in Äthanol, n-Propanol, Isopropanol, Tetrahydrofuran, Dioxan,

' Äthylacetat oder in Gemischen dieser Lösungsmittel oder in Mischungen mindestens eines der genannten Lösungsmit-■ tel in Gegenwart von Wasser durchführt.

87. Verfahren nach Anspruch 86, dadurch gekennzeichnet, dass -man als Lösungsmittel wässriges Tetrahydrofuran oder ein Gemisch von Isopropanol, Tetrahydrofuran und Wasser verwendet .

88. Verfahren zur Herstellung eines Esters eines Derivats der allgemeinen Formel (II) nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man ein Derivat der allgemeinen Formel(II) mit einem Veresterungsmittel umsetzt.

89. Verfahren zur Herstellung eines Esters eines Derivats der allgemeinen Formel (II) nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man einen Ester einer Verbindung der allgemeinen Formel (XI) gemäss Anspruch 70 hydriert.

809843/0910

90. Verfahren nach Anspruch 89, dadurch gekennzeichnet, dass man einen Ester der allgemeinen Formel (VIII) gemäss Anspruch 36 verwendet.

91. Verfahren zur Herstellung eines Esters einer Verbindung der allgemeinen Formel (Xl) nach Anspruch 70, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel (XI) oder deren Salz verestert.

92. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der allgemeinen Formel (Xl) oder deren Salz, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel (X) gemäss Anspruch 70 mit einer Verbindung der allgemeinen Formel (XIl) gemäss Anspruch 70 umsetzt.

93. Verfahren nach Anspruch 92, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel (XII) verwendet, in der Y ein Chlor- oder Bromatom oder ein Rest -ORy ist, wobei Rj die in Anspruch 70 angegebenen Bedeutungen besitzt.

94. Verfahren nach Anspruch 92, dadurch gekennzeichnet, dass man als Verbindung der allgemeinen Formel (XII) ChIorameisensäure-benzylester verwendet.

95. Pharmazeutische Präparate, gekennzeichnet durch einen Gehalt an mindestens einem Derivat der 9-Amino-desoxyclavulansäure der allgemeinen Formel (II) und/oder deren Ester nach den Ansprüchen 1 bis 69.

809843/0910

96. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 95 mit einem zusätzlichen Gehalt an Trägerstoffen, Verdünnungsmitteln und/oder Excipientien.

97. Pharmazeutische.Präparate nach Anspruch 95 in einer oral verabreichbaren Form.

98. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 95 in einer äusserlich anwendbaren Form.

99· Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 95 in einer - parenteral vera"breichbaren Form.

100. Pharmazeutische Präparate nach mindestens einem der Ansprüche 95 "bis 99 mit einem Gehalt an einem Derivat gemäss den Ansprüchen 12, 15 "bis 19 und/oder 26 Ms

101. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 99 in Form einer injizierbaren Suspension.

102. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 101, gekennzeichnet durch einen Gehalt an mindestens einem Derivat der Ansprüche 12, 15 Ms 19 und 26 Ms 34.'

103· Pharmazeutische Präparate nach mindestens einem der Ansprüche 95 Ms 102 in Einzeldosierungsformen.

104. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 103» gekennzeichnet durch einen Gehalt von 25 Ms 1000 mg eines Derivats der allgemeinen Formel (II).

8Q9843/0910

105. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 104, gekennzeichnet durch einen Gehalt von 50 bis 500 mg eines Derivats der allgemeinen Formel (II).

106. Pharmazeutische Präparate nach mindestens einem der Ansprüche 95 bis 105, gekennzeichnet durch einen zusätzlichen Gehalt an mindestens einem Penicillin oder Cephalosporin.

107. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 106, gekennzeichnet durch einen Gehalt an Benzylpenicillin, Phenoxymethyl-

- penicillin, Carbenicillin, Azidocillin, Propicillin, Ampicillin, Amoxycillin, Epicillin, Ticarcillin, Cyclacillin, Pirbenicillin, Azlocillin, Mezlocillin, Celbenicillin oder den Acetoxymethyl-, Trimethylacetoxymethyl-, oC-Athoxycarbonyloxyäthyl- oder Phthalidylester von Ampicillin, Benzylpenicillin oder Amoxycillin sowie Aldehyd- oder Ketonaddukte von Penicillinen mit einer S- st—Aminoacetamid-Seitenkette oder von Phenyl- oder Indanyl-cd-estern von Carbenicillin oder Ticarcillin als Penicillin.

108. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 106, gekennzeichnet durch einen Gehalt an Cefatrizin, Cephaloridin, Cephalothin, Cefazolin, Cephalexin, Cephacetril, Cephamandol-nafat, Cephapirin, Cephradin, 4-Hydroxy-cephalexin, Cefaparol oder Cephaloglycin als Cephalosporin.

309843/0910

109. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 106, gekennzeichnet durch einen Gehalt an Ampicillin, Amoxycillin, Carbenicillin oder Ticarcillin.

110. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 109, gekennzeichnet durch einen Gehalt der Penicilline in Form ihres Natriumsalzes.

111. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 109, gekennzeichnet durch einen Gehalt an Ampicillin-trihydrat oder Amoxycillin-trihydrat.

112. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 108, gekennzeichnet durch einen Gehalt an Cephaloridin oder Cefazolin. oder eines Natriumsalzes eines Cephalosporins.

113. Pharmazeutische Präparate nach mindestens einem der Ansprüche 106 bis 112, bei denen das Verhältnis von Derivat der allgemeinen Formel (II) zu Penicillin oder Cephalosporin 10:1 bis 1:10 beträgt.

114. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 113 in einer oral verabreichbaren Form, bei der das Verhältnis von Derivat der allgemeinen Formel (II) zu Penicillin oder Cephalosporin 3:1 bis 1:1 beträgt.

115. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 113 in einer injizierbaren Form, wobei das Verhältnis von Derivat der allgemeinen Formel (II) zu Penicillin oder Cephalosporin 1:1 bis 1:3 beträgt.

309843/0910

116. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 106, gekennzeichnet durch einen Gehalt von 150 bis 1000 mg Amoxycillin als Trihydrat oder Natriumsalz und 25 "bis 500 mg eines Derivats der allgemeinen Formel (II).

117. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 106, gekennzeichnet durch einen Gehalt von 150 bis 1000 mg Ampicillin oder dessen Vorstufe und 25 bis 500 mg eines Derivats der allgemeinen Formel (II).

118. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 117, gekennzeichnet durch einen Gehalt an Ampicillin-trihydrat, wasserfreiem Ampicillin, dem Natriumsalz des Ampicillins, Hetacillin, Pivampicillin-hydrochlorid, Bacampicillinhydrochlorid oder Talampicillin-hydrochlorid.

119. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 106, gekennzeichnet durch einen Gehalt von 200 bis 2000 mg des Dinatriumsalzes des Carbenicillins oder des Dinatriumsalzes des Ticarcillins und von 50 bis 500 mg eines Derivats der allgemeinen Formel (II).

120. Pharmazeutische Präparate nach mindestens einem der

Ansprüche 106 bis 119, gekennzeichnet durch einen Gehalt

der
an einem/in Anspruch 100 genannten Derivate .

121. Pharmazeutische Präparate mit zur Behandlung von bakteriellen Infektionen bei Haustieren geeigneten Wirkstoffen nach den Ansprüchen 95 bis 120.

B09843/0910

122. Pharmazeutische Präparate mit zur Behandlung von durch Staphylococcus aureus, Klebsiella aerogenes, Escherichia coli oder Proteus-Spezies hervorgerufenen Infektionen geeigneten Wirkstoffen nach Anspruch 121.

123. Pharmazeutische Präparate mit zur Behandlung von Rindermastitis geeigneten Wirkstoffen nach Anspruch 121.

124-, Verbindungen der allgemeinen Formel (XI) nach Anspruch oder deren Salze oder Ester.

125. Verbindungen nach Anspruch 124, dadurch gekennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel (XI) Ry die Phenylgruppe ist.

126. Verbindungen nach den Ansprüchen 124 oder 125 in Form eines Esters.

127. Verbindungen nach den Ansprüchen 124 oder 125 in Form eines Alkalimetallsalzes.

128. Verbindungen nach den Ansprüchen 124 oder 125 in Form des Lithiumsalzes.

S09843/091Ö