DE2736517C2 - Triazinverbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung bei der Eisenbestimmung - Google Patents

Triazinverbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung bei der Eisenbestimmung

Info

Publication number
DE2736517C2
DE2736517C2 DE2736517A DE2736517A DE2736517C2 DE 2736517 C2 DE2736517 C2 DE 2736517C2 DE 2736517 A DE2736517 A DE 2736517A DE 2736517 A DE2736517 A DE 2736517A DE 2736517 C2 DE2736517 C2 DE 2736517C2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
iron
mixture
triazine
solution
ions
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
DE2736517A
Other languages
English (en)
Other versions
DE2736517A1 (de
Inventor
Jerry William Carmel Ind. Denney
Mark C. Indianapolis Ind. Outcalt
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
AMERICAN MONITOR CORP 68505 INDIANAPOLIS IND US
Original Assignee
AMERICAN MONITOR CORP 68505 INDIANAPOLIS IND US
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by AMERICAN MONITOR CORP 68505 INDIANAPOLIS IND US filed Critical AMERICAN MONITOR CORP 68505 INDIANAPOLIS IND US
Publication of DE2736517A1 publication Critical patent/DE2736517A1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE2736517C2 publication Critical patent/DE2736517C2/de
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/86—Hydrazides; Thio or imino analogues thereof
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/84—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving inorganic compounds or pH

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Die Erfindung betrifft neue Triazinverbindungen und e^n Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung als Indikator und Chelatbildner bei der Eisenbestimmung gemäß den vorstehenden Patentansprüchen.
Die erfindungsgemäßen Triazinverbindungen eignen sich für die Bestimmung von Eisen in biologischen oder anderen wäßrigen Systemen, und zwar selbst von Eisenspuren. Durch das erfindungsgemäße Herstellungsverfahren entfällt die Notwendigkeit der nachteiligen Ätherextraktion bei der Erzeugung von Zwischenprodukten und wird durch Verwendung eines neuen Lösungsmittelsystems in hohen Ausbeuten ein bislang unbekannter Eisen-Chelatbildner geschaffen. Die Verwendung des neuen Eisen-Chelatbildners erhöht die Empfindlichkeit der bekannten Nachweise für Eisen und der ungesättigten Eisenbindefähigkeit und vermindert Störungen durch andere Chromogene und Trübungen.
Außer der Bestimmung von natürlich auftretendem Serumeisen ist die Bestimmung des Gesamteisens (nach Sättigung mit überschüssigem exogenem Eisen) als indirekte Bestimmung der Menge an Transferrin, einem eisenbindenden Protein, das im Serum in unterschiedlichen Mengen vorhanden ist, möglich.
Ein besonderes Anwendungsgebiet der Bestimmung der Menge von anwesenden Eisenionen, liegt in der Medizin, speziell in der klinischen Untersuchung von biologischen Flüssigkeiten. Für den Arzt ist es wichtig, Serumeisen und die Eisenbindefähigkeit in biologischen Flüssigkeiten genau und zuverlässig bestimmen zu können.
Der normale Spiegel an im Plasma oder im Serum zirkulierendem Eisen ist relativ niedrig; er liegt in der Größenordnung von nur etwa 70 bis 165 Mikrogramm pro Deziliter; folglich muß jedes Nachweissystem eine solche Empfindlichkeit der Indikatorverbindung gewährleisten, daß auch die genaue und zuverlässige Messung dieses Spurenelements ermöglicht wird.
Es hat sich herausgestellt, daß die erfindungsgemäßen Triazinverbindungen außerordentlich vorteilhafte Eigenschaften als Chelatbildner bei der quantitativen Bestimmung von Eisen(Il)-ionen in wäßrigen Systemen aufweist
Aus den US-PS 37 70 735, 37 09 662 und 38 36 331 sind bereits Triazinverbindungen bekannt die ebenfalls
ίο bei der Eisenbestimmung eingesetzt werden. Diese bekannten Triazinverbindungen zeigen jedoch eine Absorbanz bei einer Wellenlänge von 562, während die erfindungsgemäße Verbindung eine solche von 610 nm aufweist Dies bedeutet, daß das Absorptionsmaximum der erfindungsgemäßen Verbindung weiter von der des Serums entfernt ist als das der bekannten Verbindung. Diese höhere Wellenlänge des Absorptionsmaximums der erfindungsgemäßen Verbindung erwiist sich als außerordentlich günstig, denn dadurch werden Interferenzen ausgeschaltet oder zumindest auf ein Minimum herabgesetzt weiche lange Zeit als das Problem bei dieser Art von Untersuchungen, das sich beim Ablesen der Absorption bei niedrigeren Wellenlängen stellt angesehen wurden. Diese Interferenzen werden durch Faktoren, wie endogene Serumchromogene und Trübungen, hervorgerufen.
Die erfindungsgemäße Verbindung mit ihrer maximalen Absorbanz bei so hoher Wellenlänge wie 610 nm macht sich das gut bekannte Prinzip zum Vorteil, daß
jo die Lichtstreuungswirkungen der Substanzen in der Prüflösung umgekehrt proportional sind zu der Wellenlänge der Ablesung. Somit wird durch die Erfindung eine genauere und zuverlässigere Messung als mit den bekannten Verbindungen gewährleistet
J5 Darüber hinaus hat sich gezeigt daß die erfindungsgemäße Verbindung einen Extinktionskoeffizienten von 28 000 (bei 610 nm) hat während die bekannte Verbindung einen Extinktionskoeffizienten von 27 800 'bei 562 nm) aufweist Dies zeigt, daß durch die Erfindung das vorteilhaft höhere Absorptionsmaximum von 610 nm erreicht wird, ohne daß Extinktion (molare Absorptivität) und/oder Empfindlichkeit oder Bindefähigkeit gegenüber Eisen(II)-ionen zum Opfer fallen, da nämlich Extinktion und Empfindlichkeit gegenüber
Eisen(II)-ionen bei der erfindungsgemäßen und der
bekannten Verbindung vergleichbar sind, aber die erfindungsgemäße Verbindung das sehr viel günstigere
Absorptionsmaximum hat Da außerdem das erfindungsgemäße Gemisch der
sulfonierten Derivate in wäßrigen Systemen gut löslich ist, werden durch Anwendung dieser Form in einem wäßrigen System einige der Probleme ausgeschaltet, die bei den bekannten Methoden auftreten, welche infolge der Unverträglichkeit von in der Probe vorhandenem
Protein mit den zum Solvatisieren des Chelatbildner
verwendeten Chemikalien die Proteinfällung erfordern.
Aufgabe der Erfindung ist es deshalb, die Nachteile
und Fehlerquellen der bekannten Eisen-Chelatbildner auszuschalten.
Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß gelöst durch die Bereitstellung der erfindungsgemäßen Triazinverbindungen, das Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung bei der Eisenbestimmung, z. B. durch die Verwendung der sulfonierten Derivate zum Bestimmen von Eisen in wäßrigen Systemen auf die Weise, daß die Wirkung von störenden Substanzen auf einem Minimum gehalten oder völlig ausgeschaltet wird.
C=NH
NHNH2
1) CISO2OH
2) H2O
(SO2OH),
IO
15
25
40
50
55
Herstellungsbeispiel 1. Gewinnung von 2- Pyridylhydrazidin
Eine Menge von 728,77 g (7 mol) 2-Cyanopyridin wird langsam unter Rühren in 1000 ml 95%iges Hydrazin gegossen. Wenn die schwach exotherme Reaktion beendet ist, was sich durch Absinken der Temperatur des Reaktionsgemisches anzeigt, werden die Reaktionsteilnehmer auf einem Wasserbad 5 Stunden lang auf 99±1°C erhitzt. Man läßt das Reaktionsgemisch auf 6> Raumtemperatur abkühlen, gießt es unter Rühren in 1500 ml kaltes Wasser und bewahrt es über Nacht (etwa 18 Stunden) bei 4°C auf. Die dabei gebildeten Kristalle werden vakuumfiltriert, mit Eiswasser gewaschen und bei Raumtemperatur vakuumgetrocknet. Man erhält 804,0 g trockenes Material (Fp, 950C, Ausbeute 84%),
2, Gewinnung von
9-(2-Pyridyl)-acenaphtho[l,2-e]-as-triazin
Einer Aufschlämmung von 1093 g (6 mol) Acenaphthochinon in 61 N^^-Dimethylformamid werden 820 g (6 mol) 2-Pyridylhydrazidin in kleinen Anteilen *<ei fortwährendem Durchmischen zugesetzt (der größte Teil der suspendierten Peststoffe hat sich bei Beendigung des Zusatzes aufgelöst). Wenn die anfänglich schwach exotherme Reaktion beendet ist, wird das Reaktionsgemisch durch Erhitzen 24 Stunden lang auf 105 bis 1100C gehalten.
Das Reaktionsgemisch wird dann auf 45° C abgekühlt und unter Rühren in 161 Eiswasser gegossen. Die gebildeten Feststoffe werden vakuumfiltriert und so trocken wie möglich ausgepreßt Dieser Stoff, der Wasser begierig festhält, wird einige Wochen lang an der Luft getrocknet und dann zu feinem Pulver vermählen. Dieses wird in 41 siedendem Benzol aufgeschlämmt und nach Abkühlen auf Raumtemperatur filtriert Die letzte Stufe wird noch dreimal wiederholt und der erhaltene Feststoff vakuumgetrocknet
Der erhaltene Stoff hat einen Schmelzpunkt von 198-2000C (unkorrigiert), ein grünlich-gelbes Aussehen und wiegt 1093 g, was einer theoretischen Ausbeute von 65% entspricht Ein kleiner Teil dieses Stoffes wird zweimal aus Benzol umkristallisiert, wobei ein Produkt mit dem Fp. 2010C (Zers.) erhalten wird.
Elementaranalyse fürCigHioN«:
Berechnet: C 76,58% H 3,57% N 1935%
Gefunden: C 76,18% H 3,74% N 20,10%
3. Sulfonierung von
9-{2-PyridyI)-acenaphthc{l,2-el-as-triazin
1000 g (2,54 mol) 9-(2-Pyridyl}-a,:enatf]t;io[1,2-e>astriazin werden in kleinen Anteilen unter Rühren zu 3000 g (1,71) Chlorsulfonsäure (eisenfrei) zugegeben. Während der exothermen Reaktion wird das Gemisch durch Eintauchen in ein Eisbad auf 5 bis 10° C gehalten. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur (etwa 18 Stunden lang) stehengelassen und dann 96 Stunden lang auf 1500C erhitzt Das Gemisch wird danach auf 5° C abgekühlt und die erhaltene viskose Flüssigkeit vorsichtig auf 4000 g gemahlenes Eis, das aus entionisiertem Wasser bereitet worden ist, gegossen (bei dieser lezteren Stufe muß extreme Vorsicht walten gelassen werden wegen der heftigen Reaktion zwischen Chlorsulfonsäure und Wasser und wegen der Entwicklung von Chlorwasserstoffgas).
Die gebildeten Feststoffe werden unter Vakuum auf einem Sinterglastrichter abfiltriert und dann in 31 Wasser suspendiert und 30 Minuten lang am Siedepunkt erhitzt. Der Feststoff wird erneut filtriert und viermal mit 500-ml-Anteilen Wasser gewaschen. Der feuchte Rückstand wird dann in einer minimalen Menge konz. Ammoniumhydroxid gelöst, und von der gebildeten dunkelbraunen Lösung werden nicht gelöste Bestandteile abfiltriert. Die Lösung wird mit konz. Salzsäure angesäuert, bis sich bei weiterer Säurezugabe keine Feststoffe mehr bilden. Die Feststoffe werden abfiltriert, erneut in 2 I warmem Wasser suspendiert und noch einmal filtriert.
Dieser Waschvorgang wird dreimal wiederholt;
jedesmal wird das Material so trocken wie möglich ausgepreßt. Nach dem letzten Waschen mit Wasser wird das Material in 21 Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt, auf Raumtemperatur abgekühlt und filtriert Die erhaltenen Feststoffe werden bei Raumtemperatur im Vakuum getrocknet, wobei 629 g eines Feststoffes erhalten werden.
Dieses Material ist ein Gemisch aus verschiedenen Sulfonsäureisomeren des Ausgangstriazins. Eine zufriedenstellende Analyse für eine Einzel verbindung mit 18 ι ο C-Atomen und 4 N-Atomen konnte nicht erhalten werden. Das etwas hygroskopische Material schmilzt bei 3500C unter Zersetzung und hat ein Molekulargewicht von 560, wie durch spektrophotometrische Titration mit Eisen(II)-ionen ermittelt wurde, unter Zugrundelegung eines Komplexes mit drei Molekülliganden pro Eisenatom.
Verwendungsbeispiel 1
Stufe I
Die Probe wird zu einem Dimelhylsuifoxid und grenzflächenaktive Mittel enthaltenden sauren Puffersystem zugesetzt In dieser Stufe wird nicht nur an Transferrin gebundenes Eisen freigesetzt; die Verwendung von Dimethylsulfoxid und der grenzflächenaktiven Mittel bewirkt auch eine erhöhte Proteinauflösung, ein erhöhtes Maß an Eisenfreisetzung und verhilft dazu, daß die Wirkung von Trübungen und/oder Blutfett die in dem Serum vorhanden sein können, auf einem Minimum gehalten werden.
Das Vorhandensein von Dimethylsulfoxid ist zu einer ordnungsgemäßen Durchführung bei den meisten Prüfsubstanzen nicht wesentlich, und sein Wegfall beeinträchtigt nicht die Durchführung des Versuches.
Es können aber auch andere Puffersysteme, wie Maleat, Succinat und Glycin, eingesetzt werden.
0,5 ml Serum oder Standard werden zu 2 ecm eines O^molaren Acetatpuffers mit dem pH-Wert 4,5 zugesetzt, enthaltend 10 Vol.-% Dimethylsulfoxid, 5 ml/l Polyoxyathylen-2^-Lauryläther, 3 ml/1 eines wasserlöslichen Isooctylphenoxypolyäthoxyäthanols (mit 10 MoI Äthylenoxid) und 0,384 g/l Magnesiumacetat, was eine Dimethylsulfoxidkonzentration in dem Endreaktionsgemisch von annähernd 7,0 Vol.-% ergibt. Das Reduktionsmittel besteht aus 0,1 ml einer 25gew.-%igen Lösung von Ascorbinsäure.
Nachdem man das Gemisch 5 Minuten stehengelassen hat wird die Extinktion bei 610 nm gemessen.
Wenn die Probe Hämoglobin enthält wurde festgestellt daß eine 5minütige Inkubation vor der ersten Extinktionsmessung die Störungen durch Hämoblobin wirkungsvoll ausschaltet
Stufe II
Nachdem die Extinktion des vorstehenden Gemisches aufgezeichnet worden ist wird in einer zweiten Stufe die Lösung eines Chromogens zugesetzt, das die in der Lösung vorhandenen Eisen(Ii)-ionen komplex bindet, wobei das Chromogen eine wäßrige Lösung des erfindungsgemäßen Gemischs der sulfonierten Derivate von 9-(2-Pyridyl)-acenaphtho[l,2-e]-as-triazin ist Zur Bereitung dieser Lösung wird eine geeignete Menge des Chelatbildner dem Wasser zugesetzt und der pH-Wert mit verdünntem Natriumhydroxid eingestellt, bis Auflösung eintritt, d. h. üblicherweise bei Erreichen eines pH-Wertes von 4,5. Gemäß einer besonders vorteilhaften Ausführungsform werden 0,1 ml einer 0,01 molaren Lösung (0,02 Gew,-% in dem Endreaktionsgemisch) des erfindungsgemäßen Gemischs der sulfonierten Derivate von 9-(2-Pyridyl)-acenaphthc{l,2-ej-as-triazin m der Lösung der vorstehenden Stufe I zugesetzt und etwa 5 Minuten lang reagieren gelassen. Schließlich wird die Endextinktion bei einer Wellenlänge von 610 nm abgelesen.
Stufe III
Das in der ursprünglichen Probe vorhandene Gesamteisen wird berechnet durch Subtrahieren der Exrinktionsmessung gemäß Stufe I von der gemäß Stufe II, wobei dieser Unterschied die Menge des Eisen-Chelat-Komplexes in der Lösung darstellt Dieser Extinktionsunterschied wird dann verglichen mit der Extinktion, die sich für eine Lösung mit bekanntem Eisengehalt ergibt die derselben Behandlung unterzogen worden ist
Verwendungsbeispiel 2
Quantitative Bestimmung .'ϊ-.τ ungesättigten Eisenbindcfähigke:«
Stufe I
Um die ungesättigte Eisenbindefähigkeit im Serum auszuwerten, wird das Transferrin enthaltende Serum mit einer gepufferten alkalischen Lösung von überschüssigem Eisen(II) kombiniert d. h. überschüssigen Eisen(II)-ionen in bezug auf die absolute Bindefähigkeit der Serumprobe. Diese Kombination wird mit einem Reduktionsmitte! versetzt Nachdem man ausreichend Zeit für die Sättigung des Transferrins mit Eisen(ll)-ionen gelassen hat wird eine anfängliche optische Dichte der Lösung bei 610 nm aufgezeichnet Diese Extinktionsmessung wird von der Endextinktionsmessung subtrahiert und dient zum Korrigieren der fehlerhaften Extinktionsmessungen, die auf die schwan-' kende Extinktion des Serums selbst zurückzuführen sind.
40
50
55
a) 03 ml Serum, das Transferrin enthält wird mit 2,0 ml eines gepufferten Eisen(II)-reagens kombiniert, das 150 mg/I Eisen und eine Menge Zitronensäure enthält die der Menge Eisen äquimolar ist das in einem Puffer aus
2-Amino-2-hydroxymethyl-1,3-propandiol zugesetzt wird. Der pH-Wert beträgt 8,4. Es wird gründlich durchmischt.
b) Zu diesem Gemisch wird eine 25gew.-%ige wäßrige Ascorbinsäurelösung zugesetzt, das Gemisch wird mindestens 5 Minuten stehengelassen, und die Extinktion bei 610 nm wird aufgezeichnet
Stufell
Das freie Transferrin sättigt sich mit Eisen, und der überschüssige Eisengehalt (d. h. nicht an Transferrin gebundenes Eisen) der zugesetzten Lösung wird ermittelt. Somit wird in dieser zweiten Stufe lediglich das nicht an Transferrin gebundene in dein Gemisch zurückgebliebene Eisen durch den Zusatz einer Lösung des erfindungsgemäßen Chelatbildner gemäß Anspruch 1 quantitativ bestimmt Man läßt durch 5minütige Inkubation bei Raumtemperatur die Chelatbildung sich vollziehen. Der meßbare Eisengehalt des Gemisches wird dann berechnet durch Ermitteln der
sich ergebenden Extinktion bei einer Wellenlänge von 610 nm.
0,1 ml einer 0,01 molaren Lösung des erfindungsgemäßen Gemiüchs der sulfonierten Derivate von 9-(2-Pyridyl)-acenaphtho[l,2-e]-as-triazin, pH-Wert 4,8, werden zu dem Gemisch der vorstehenden Stufe I zugesetzt, was zu einer Konzentration von 0,02 Gew.-% in dem Endreaktionsgemisch führt. Dann läßt man etwa 5 Minuten bei Raumtemperatur reagieren. Das entwickelte Chromophore wird dann bei 610 nm gemessen und die Extinktion aufgezeichnet.
Stufe III
Die ungesättigte Eisenbindefähigkeit im Serum wird dann berechnet durch Subtrahieren der Extinktion von Stufe I von der Extinktion von Stufe Il und Vergleichen des erhaltenen Wertes mit den Extinktionen von Lösungen mit bekannter Eisenmenge. Die erhaltene
Lösung vorblieben ist und nicht an Transferrin gebunden wurde.
Die Menge an Eisen, die anfänglich durch die Reagentiem bei dem Versuch zugesetzt wurde, wird gemessen, indem man eine Probe von eisenfreiem Wasser denselben vorstehend erläuterten Verfahrensstufen unterzieht, wie sie für einen unbekannten Gehalt in den Stufen I und Il vorgenommen wurden, wobei diese Messung nachstehend als »Wasserbezugsmessung« bezeichnet ist.
Die Subtraktion der Menge des nicht an Transferrin
ίο gebundenen Eisens von der zugesetzten Menge (wie durch die Wasserbezugsmessung bestimmt wird), ergibt, gemessen als ungesättigte Eisenbindefähigkeit in Werten für aufgenommenes Eisen, eine direkte Messung des ungesättigten Transferrins.
Wenn auch die Verwendung der Verbindungen gemäß Anspruch I vorstehend im Zusammenhang mit der Bestimmung von Eisen(ll)-ionen in Serum erläutert ist, so können die erfindungsgemäßen Verbindungen such rnit Ετίο!σ für die Bcstirnmun*1 von Eisen in anderen wäßrigen Systemen, wie Abwasser, Meerwasser verwendet werden.

Claims (1)

  1. Patentansprüche:
    l.Triazin, dadurch gekennzeichnet, daß es 9-{2-Pyridyl)-acenaphlho[l,2-e]-as-triazin oder ein Gemisch seiner sulfonierten Derivate vom Schmelzpunkt 3500C unter Zersetzung und einem durch spektrophotometrische Titration ermittelten Molekulargewicht von 560 ist
    Z Verfahren zur Herstellung der Verbindungen gemäß Anspruch !, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise Hydrazin und 2-Cyanopyridin in Gegenwart eines stöchiometrischen Oberschusses an Hydrazin als Lösungsmittel zu 2-PyridyIhydrazin umsetzt und das 2-Pyridylhydrazin mit Acenaphthochinon in Gegenwart von Ν,Ν-Dimethylformamid kondensiert und das Kondensationsprodukt gegebenenfalls sulfoniert
    3. Verwendung der Verbindungen gemäß Ansprach ! als Indikator und Chelatbildner für Eisen(H)-ionen bei der qualitativen oder quantitativen Bestimmung von Eisen(II)-ionen in einem wäßrigen oder organischen Medium.
DE2736517A 1976-08-16 1977-08-12 Triazinverbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung bei der Eisenbestimmung Expired DE2736517C2 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US05/714,481 US4154929A (en) 1976-08-16 1976-08-16 9-(2-Pyridyl)-acenaphtho[1,2-e]-as-triazines

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE2736517A1 DE2736517A1 (de) 1978-02-23
DE2736517C2 true DE2736517C2 (de) 1983-05-11

Family

ID=24870219

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2736517A Expired DE2736517C2 (de) 1976-08-16 1977-08-12 Triazinverbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung bei der Eisenbestimmung

Country Status (7)

Country Link
US (1) US4154929A (de)
JP (1) JPS5323977A (de)
BE (1) BE857724A (de)
CA (1) CA1089460A (de)
DE (1) DE2736517C2 (de)
FR (1) FR2362140A1 (de)
IT (1) IT1111665B (de)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4245041A (en) * 1977-12-07 1981-01-13 American Monitor Corporation Triglycerides assay and reagents therefor
IT1100475B (it) * 1978-11-08 1985-09-28 R C O Ricerche Di Chimica Clin Metodo e composizioni per la determinazione diretta del ferro mel stero ematico
IT1148745B (it) * 1980-12-11 1986-12-03 Sclavo Inst Sieroterapeut Metodo per la determinazione della transferrina e composizione adatta allo scopo
US5151370A (en) * 1990-10-11 1992-09-29 Synermed, Inc. Reagent and method for serum iron assay
CN112702996A (zh) * 2018-05-03 2021-04-23 积水诊断有限责任公司 乙酰氨基酚测定法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3770735A (en) * 1970-06-24 1973-11-06 Hach Chemical Co Ferroin reagent and method of making same
US3709662A (en) * 1970-07-20 1973-01-09 Hach Chemical Co Iron analysis reagent formulation
JPS5424444B2 (de) * 1975-01-21 1979-08-21
US4008232A (en) * 1975-06-23 1977-02-15 Eli Lilly And Company 3-Amino-5,6-diaryl-1,2,4-triazines

Also Published As

Publication number Publication date
FR2362140A1 (fr) 1978-03-17
BE857724A (fr) 1978-02-13
DE2736517A1 (de) 1978-02-23
IT1111665B (it) 1986-01-13
FR2362140B1 (de) 1982-06-25
US4154929A (en) 1979-05-15
JPS5323977A (en) 1978-03-06
CA1089460A (en) 1980-11-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69119410T2 (de) Reagenz und verfahren zur kalziumbestimmung
DE2943423C2 (de)
DE2644501B2 (de) Prüfmittel zur Bestimmung von Bilirubin in Urin
EP0250991A2 (de) Verfahren zur spezifischen Bestimmung des Serumfructosamingehalts sowie hierfür geeignetes Reagenzgemisch
EP0098562B1 (de) Verfahren zur Bestimmung von direktem und Gesamt-Bilirubin sowie hierfür geeignetes Reagens
DE2016555C3 (de) Verfahren zur kolorimetrischen oder photometrischen Bestimmung von Bilirubin
DE2533458C2 (de) Verfahren und Reagens zur Bestimmung des Gesamtcalciums in Körperflüssigkeiten
DE2736517C2 (de) Triazinverbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung bei der Eisenbestimmung
DE2812154C3 (de) Verfahren zur Bestimmung von a -Amylase
DE2751904C2 (de) Verfahren und Mittel zur Bestimmung von Kreatinin in biologischen Flüssigkeiten
DE2149763A1 (de) Verfahren zur Bestimmung des Haemglobingehalts im Blut
DE69119399T2 (de) Reagens und verfahren für serum eisenproben
DE2754944B2 (de) Verfahren und Reagens zur Bestimmung von Ascorbinsäure
EP0664454B1 (de) Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Eisen
EP0125513B1 (de) Verfahren und Reagens zur Bestimmung des Hämoglobin-Haptoglobin-Komplexes in Gegenwart von freiem Hämoglobin
DE2605221B1 (de) Verfahren zur herstellung eines diagnostischen mittels zum nachweis von ketonen
DE2921023C2 (de) Zusammensetzung, Testmittel und Verfahren zum Bestimmen von Urobilinogen in einer Probe unter Verwendung der Zusammensetzung, sowie Verfahren zum Herstellen des Testmittels
EP0309882A2 (de) Verfahren zur spezifischen Bestimmung des Serumfructosamingehalts sowie hierfür geeignetes Reagenzgemisch
DE2748857C2 (de) Verfahren zur quantitativen Bestimmung von Harnstoff
DE69534877T2 (de) Verfahren zur bestimmung von bilirubin
DE2855433C2 (de) Testmittel zum Nachweis von Harnsäure
EP0952453A1 (de) Verfahren und Reagenz zur störungsfreien Bestimmung von Eisen
EP0294714B1 (de) Verwendung von Polyvinylpyrrolidon (PVP) zur Trübungsminderung von Seren, Seren enthaltend PVP und Verfahren zu deren Herstellung
DE2504994A1 (de) Verfahren zur kreatininbestimmung
DE69111016T2 (de) Zusammensetzung von Agenzien zum Nachweis einer Redox-Reaktion.

Legal Events

Date Code Title Description
OD Request for examination
D2 Grant after examination
8364 No opposition during term of opposition
8328 Change in the person/name/address of the agent

Free format text: MUELLER-BOERNER, R., DIPL.-ING., 1000 BERLIN WEY, H., DIPL.-ING., PAT.-ANW., 8000 MUENCHEN

8339 Ceased/non-payment of the annual fee