DE2721267A1 - Polymermatrix auf der basis von acrylamid - Google Patents

Polymermatrix auf der basis von acrylamid

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Description

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Patentanwälte KadorA Klunker Knoebelstr. 36 8 München 22 DR. INC. H. F. KLUNKER (DIPL INC.) DR. RER. NAT. U. KADOR (DIPL. CHF.M.)
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Dipl.-Chem. Dr. Hans A. Thoma
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8000 München 40
Polymermatrix auf der Basis von Acrylamid
809847/0117
Die Erfindung bezieht sich auf eine Polymermatrix auf der Basis von Acrylamid zur Immobilisierung von Antikörpern bei der radioimmunologischen Bestimmung von Hormonen und Pharmaka.
Bei der radioimmunologischen Bestimmung von Hormonen und Pharmaka erfolgt eine Reaktion der Hormone oder Pharmaka mit einem Antikörper. Die Spezifität der Reaktion ist abhängig von der immunologischen Komplementärität, d.h. es kann eine Kreuzreaktivität mit Substanzen bestehen, die eine ähnliche chemische Konfiguration aufweisen. Bei einem Östriol-Cg-Konjugat liegt das östriol in einer immundeterminaten Konfiguration vor, in der fast alle wichtigen funktioneilen Gruppen des östriols dem Bindungsbereich des Antikörpers exponiert sind. Trotzdem werden Östriol-Konjugate, deren Sulfat- oder Glucuronidrest die Position am phenolischen C- einnehmen, vom Antikörper in beträchtlichem Maße gebunden. Dies ist für die Bestimmung der freien Steroide besonders dann nachteilig, wenn die Konjugat-Konzentration der Proben die Steroidkonzentration um Zehnerpotenzen übersteigt, wie es bei den östrogenen im Schwangeren-Serum der Fall ist.
Aus vorstehenden Gründen wurden bisher im wesentlichen Verfahren angewandt, bei denen die Spezifität durch Lö sungsmittelextraktion vor dem Radioimmunoassay sichergestellt wurde. Lösungsmittelextraktionen stehen aber einer seriellen und maschinellen Probenbearbeitung im Wege.
Bei Versuchen, die radioimmunologischen Methoden über Festphasen-Techniken zu vereinfachen, wurden Antikör per an verschiedene Matrices kovalent gebunden, wie z.B.
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an Agarose, Zellulose, Glaspartikel, Polyamide und Polyacrylamide. Die Vorteile der in einer Matrix eingeschlossenen Antikörper liegen im Ausschluß von störenden Molekülen höheren Molekulargewichts, der Einsparung von Pipettier- und Zentrifugierschritten und der langen Haltbarkeit des immobilisierten Antikörpers bei Raumtemperatur .
Es hat sich gezeigt, daß die Bindungsspezifität des Antikörpers, wenn er in einer Matrix in bekannter Weise
immobilisiert wird, nicht den gewünschten Anforderungen entspricht.
Aufgabe der Erfindung ist es daher, eine Polymermatrix
zu schaffen, mit der die Bindungsspezifität des eingeschlossen Antikörpers erhöht und unerwünschte Kreuzreaktionen verhindert werden können.
überraschenderweise hat sich gezeigt, daß eine Variation und Erhöhung der Bindungsspezifität des Antikörpers durch Polymermatrices erzielt werden kann, die Copolymerisate des Acrylamide darstellen.
Gegenstand der Erfindung ist eine Polymermatrix auf der Basis von Acrylamid zur Immobilisierung von Antikörpern bei der radioimmunologischen Bestimmung von Hormonen und Pharmaka, die dadurch gekennzeichnet ist, daß sie aus
einem Copolymerisat des Acrylamid besteht.
Besonders werden Copolymerisate aus Acrylamid und einer oder mehreren der Verbindungen Acrylsäure, Methacrylsäure» Methacrylamid, deren Derivaten und Salzen der Acrylsäure oder Methacrylsäure bevorzugt.
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Durch die Copolymerisation des Acrylamide mit damit copolymer isierbaren Verbindungen kann die Mikroumgebung der Polymermatrix beeinflußt werden. Die Wirkung beruht im wesentlichen auf hydrophoben und hydrophilen sowie elektrostatischen Effekten.
Durch die Variation der Polymermatrix mittels Copolymerisation ist eine wesentliche Erhöhung der Bindungsspezifität des Antikörpers und eine Unterdrückung unerwünschter Kreuzreaktivitäten möglich. Die Polymermatrix wird durch geeignete Copolymerisation variiert, um einerseits eine spezifische Reaktion der Haptene mit dem immobilisierten Antikörper zu gewährleisten und andererseits kreuzreagierende Haptene abzuhalten.
Aufgrund der erhöhten Spezifität gestatten es die PoIymermatrices gemäß der Erfindung, direkt im nicht-extrahierten Serum zu messen.
Mit Hilfe der erfindungsgemäßen Polymermatrices ist eine sehr genaue radioimmunologische Bestimmung von Hormonen und Pharmaka möglich, da die Schwankung der Bestimmungswerte aufgrund von unspezifischen Bindungen zwischen den Steroidmolekülen und der Matrix durch die Copolymerisation minimiert wird.
Der Anteil des Acrylamids im Copolymerisat kann zwischen 1 und 99 Mol%, vorzugsweise 5 bis 95 Mol% und insbesondere 20 bis 80 Mol% betragen.
Besonders geeignet sind Copolymerisate aus Acrylamid und Methacrylsäure und insbesondere solche, bei denen der Methacrylsäureanteil 20 bis 60 Mol% ausmacht. Die Meth acrylsäure hydrophobiert einerseits die Matrix und führt
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andererseits zu einem Ladungseffekt, wodurch unspezifische Bindungen der zu bestimmenden Substanzen weitgehend ausgeschaltet werden können.
Durch den erfindungsgemäßen Einsatz von Copolymerisaten, die Acrylsäure oder Methacrylsäure oder deren Salze enthalten, läßt sich ferner ein Neutralisationseffekt oder eine Pufferwirkung für saure bzw. alkalische Lösungen
erzielen. Dies ist für zahlreiche Bestimmungen von wesentlichem Vorteil.
Als Salze der Acrylsäure bzw. Methacrylsäure werden die Alkali- und/oder Erdalkalisalze bevorzugt. Insbesondere kommen Natrium- oder Kalziumsalze in Betracht.
Als Derivate der Acrylsäure und Methacrylsäure kommen insbesondere deren Ester, beispielsweise die Methyl- und Äthylester, in Betracht.
Geeignete Derivate des Methacrylamids sind beispielsweise am Stickstoff substituierte Verbindungen, wie N-Hydroxymethylmethacrylamid.
Weitere geeignete mit Acrylamid copolymerisierbare Verbindungen sind die Derivate des Acrylamide, insbesondere am Stickstoff substituierte Verbindungen, wie N-Hydroxymethylacrylamid·
Ein Beispiel für andere mit Acrylamid copolymerisierbare Verbindungen ist N,N'-Diallyltartardiamid.
Die Immobilisierung des Antikörpers erfolgt durch Einschluß in der Polymermatrix und/oder durch kovalente
Fixierung an der Polymermatrix.
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Eine ausführliche Beschreibung des Radioimmunoassays findet sich beispielsweise in Clinical Chemistry, Bd. 19, Nr. 2, 1973, S. 145. In Clinical Chemistry, Vol. 19, Nr. 12, 1973, S. 1339 und Clinical Chemistry, Vol. 21, Nr. 7, 1975, S. 829 sind radioimmunologische Techniken beschrieben, bei denen ein immobilisierter Antikörper verwendet wird.
Die erfindungsgemäßen Polymermatrices eignen sich zur Bestimmung der verschiedenen Hormone und Pharmaka, die im Serum oder Plasma zum Teil an spezifische oder nichtspezifische Bindungsproteine gebunden vorliegen. In Betracht kommen die Schilddrüsenhormoe, insbesondere Thyroxin und Trijodthyronin, die Steroidhormone wie Cortisol, Testosteron, Progesteron, östron, östradiol und östriol und die Herzglycoside, wie Digitoxin und Digoxin. Ferner können bestimmt werden Vitamine, besonders Vitamin B12 und Folsäure, sowie Pharmaka mit starker Proteinbindung, wie beispielsweise Antikoagulantien, Dicumarol, Anaigetika und Salyzilate.
Neben der radioimmunologischen Bestimmung kommen gegebenenfalls auch alternative Bestimmungsmethoden, wie die fluoroimmunologische Bestimmung oder die Bestimmung mittels enzymatischer Markierung, in Betracht.
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Die Synthese der Antigene, die Gewinnung von Antiseren, beispielsweise durch Immunisierung von Kaninchen und die Isolierung sowie Immobilisierung der Antikörper sind bekannt (vgl. beispielsweise Clinical Chemistry, Bd. 19, Nr. 2, 1973, S. 146 ff.).
Die Herstellung der erfindungsgemäßen Polymermatrices mit dem immobilisierten Antikörper kann beispielsweise in der Art erfolgen, daß eine Lösung des Antikörpers dem Monomergemisch zugegeben wird. Der Ansatz wird beispielsweise radikalisch polymerisiert und das erhaltene Polymerisat zerkleinert, gewaschen und getrocknet.
Die Auswahl und die Mengenanteile der dem Acrylamid zugesetzten Copolymere richtet sich nach den gewünschten Eigenschaften der Polymermatrix bezüglich der Spezifität. Die Spezifität kann durch Änderung der Hydrophobizität und der Ladung der Matrix in weiten Grenzen beeinflußt werden. Der Zusatz von Methacrylamid erhöht die Hydrophob!zitat. Durch den Einsatz von Acrylsäure oder Methacrylsäure oder deren Salzen wird die Ladung der Matrix variiert. Es besteht sowohl die Möglichkeit, die Salze der Acrylsäure oder Methacrylsäure direkt dem Monomergemisch zuzusetzen oder alternativ können die Säuren polymerisiert werden und anschließend durch Ionenaustausch die Salze in der Polymermatrix gebildet werden.
Zur Erzielung einer geeigneten Porengröße der Polymermatrix wird die Monomerkonzentration variiert. Eine Monomerkonzentration im Bereich von etwa 20 % führt zu einer Porengröße von etwa 7 bis 10 Ä.
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Ein vorteilhaftes Copolymerisat besteht beispielsweise aus Acrylamid und 20 bis 60 Mol% Acrylsäure und/oder Methacrylsäure, hergestellt aus einer etwa 20 %igen Monomerlösung, wobei zumindest ein Teil der Säuregruppen in die entsprechenden Alkali- oder Erdalkalisalze überführt ist.
Die Erfindung wird nachstehend anhand von Beispielen näher erläutert.
Beispiel 1
In diesem Beispiel ist der Einfluß der Polymermatrix auf die Kreuzreaktivität (K) von östriol-3-Glucuronid und östriol-3-Sulfat gezeigt.
Die Kreuzreaktivität K berechnet sich aus der hundertfachen Menge der benötigten Masse des korrespondierenden Haptens für y = 50 geteilt durch die benötigte Masse des kreuzreagierenden Haptens für y = 50. Die Werte sind auf der Basis von IDr0 berechnet.
Der ausgewählte Antiöstriolantikörper zeigte eine hohe Kreuzreaktivität der 3-Glucuronid-Konjugate bzw. der 3-Sulfat-Konjugate.
Für jeden Polymerisationsansatz wurde die Konzentration so eingestellt, daß die totale Monomerkonzentration 2,9 Mol/l betrug. Für einen Ansatz wurden z.B. 5 g Acrylamid und 1,25 g N,N'-Methylenbisacrylamid in einem Becherglas in 24 ml Phosphatpuffer mit einem pH-Wert von 7,2 gelöst. Nach Zumischen des Antikörpers in 1 ml Phosphatpuffer wurde die Reaktion mit 0,15 mg Ribo-
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flavin und 0,10 ml Ν,Ν,Ν1,N'-Tretramethyläthylendiamin gestartet und mit UV-Licht bestrahlt. Während der Bestrahlungszeit von 45 min wurde die Temperatur unter 500C gehalten. Der Gelblock wurde anschließend zerkleinert, mit destilliertem Wasser gewaschen und getrocknet.
In kleinen Säulchen wurden 22 mg trockenes Antiöstriolantikörpergel eingewogen und 0,150 ml Inkubationslösung aufgezogen. Diese Inkubationslösung enthielt H-Östriol und nicht markiertes Hapten (östriol, östriol-3-Glucuronid oder östriol-3-Sulfat)· Die Reaktionstemperatur wurde bei O0C konstant gehalten. Nach 30 min Inkubationszeit erfolgte die Trennung des freien vom antikörpergebundenen Haptens durch Elution mit albuminhaltigem Phosphatpuffer. Das Eluat wurde in Szintillationsgläschen aufgefangen, mit 15 ml Szintillationsflüssigkeit versetzt und die Radioaktivität im Flüssigkeitsszintillator gemessen. Aus den Impulsen wurde die Konzentration des freien Indikatorhaptens H-Östriol errechnet.
Die Ergebnisse für Bestimmungen im wässrigen System und unter Verwendung von Polymermatrices aus Acrylamid und Acrylamidcopolymeren sind in der nachstehenden Tabelle zusammengefaßt. Die angegebenen Werte sind die vorstehend definierten Werte der Kreuzreaktivität.
- 11 -
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wässriges
System		 Acrylamid Natriumsalz der
Acrylsäure/Acrylamid		 30:70 50:50 Natriumsalz der
Methacrylsäure/Acrylamid		 40:60 60:40
östriol-3-
Glucuronid 		100 10:90 10 14 20:80 4 21
östriol-3-
Sulfat 		61 29 19 12 24 14 6 23
47 33 30 27
fs) σ>
- 12 -
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Die Ergebnisse zeigen, daß mit den Copolymerisaten gegenüber wässrigen Systemen und Acrylamidhomopolymerisaten eine bedeutende Erhöhung der Bindungsspezifität erzielt wird. Durch geeignete Auswahl des Copolymerisats kann eine Erhöhung der Spezifität um den Faktor 15 gegenüber wässrigen Systemen und um den Faktor 7 gegenüber Acrylamidhomopolymeren erzielt werden. Dies zeigt ein Vergleich der Werte des wässrigen Systems und von Acrylamidhomopolymerisat mit einem 40/60 Copolymerisat aus Methacrylsäure und Acrylamid.
Beispiel 2
Dieses Beispiel zeigt den Einsatz der erfindungsgemäßen Polymermatrix bei der Gesamtbestimmung von Thyroxin durch enzymatische Hydrolyse mit Pepsin.
Die Polymermatrix des Antikörpergels bestand aus einem Copolymerisat aus Acrylamid und 40 Mol% des Natriumsalzes der Methacrylsäure, hergestellt aus einer 20 %igen Monomerlösung.
Es wurden 10 μΐ Serum mit einem Gehalt von 18 ug Thyroxin je 100 ml mit 160 ul einer Enzymlösung versetzt, die aus 2 mg/ml Pepsin gelöst in 0,1 η Salzsäure bestand.
Die Reaktion mit dem Enzym wurde bei Raumtemperatur 30 min durchgeführt.
Zu diesen 170 μΐ wurden anschließend 150 μΐ Tracer lösung mit einem Gehalt von 5,2 ng/ml radioaktiv markiertem Thyroxin zugegeben.
- 13 -
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Die gesamte Lösung wurde danach auf 60 mg Antikörpergel aufgebracht. Die Inkubationszeit betrug 30 min, die Temperatur 22°C.
Die Auswertung zeigte eine außerordentlich hohe Wiederfindung von 98 %.
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Claims (4)

  1. Patentansprüche
    Polymermatrix auf der Basis von Acrylamid zur Immobilisierung von Antikörpern bei der radioimmunologischen Bestimmung von Hormonen und Pharmaka, dadurch gekennzeichnet , daß die Polymermatrix aus einem Copolymerisat des Acrylamide besteht.
  2. 2. Polymermatrix nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet , daß sie aus einem Copolymerisat des Acrylamids und einer oder mehreren der Verbindungen Acrylsäure, Methacrylsäure, Methacrylamid, deren Derivaten und Salzen der Acrylsäure oder Methacrylsäure besteht.
  3. 3. Polymermatrix nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet , daß sie aus einem Copolymerisat aus Acrylamid und 20 bis 60 Mol% Methacrylsäure besteht.
  4. 4. Polymermatrix nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet , daß sie aus einem Copolymerisat aus Acrylsäure und einem Alkali- oder Erdalkalisalz der Acrylsäure oder Methacrylsäure besteht.
    809847/0117 ORIGINAL INSPECTED
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Priority Applications (24)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2721267A DE2721267C2 (de) 1977-05-11 1977-05-11 Antikörpergel
GR56025A GR64474B (en) 1977-05-11 1978-04-19 Polymeric complex basing in acrylamid
IL54558A IL54558A (en) 1977-05-11 1978-04-20 Immobilized antibody on an acrylamide copolymer matrix for immunoassay techniques
FI781220A FI781220A (fi) 1977-05-11 1978-04-20 Polymermatrix som baserar sig pao akrylamid
AU35364/78A AU519148B2 (en) 1977-05-11 1978-04-21 Immunoassay with acrylamide copolymer
US05/899,744 US4235867A (en) 1977-05-11 1978-04-24 Acrylamide copolymer matrix for radioimmune assay techniques
AT0290978A AT364856B (de) 1977-05-11 1978-04-24 Antikoerpergel
ZA00782358A ZA782358B (en) 1977-05-11 1978-04-25 Acrylamide copolymer matric for radioimmune assay techniques
FR7812344A FR2390731A1 (fr) 1977-05-11 1978-04-26 Matrice polymere a base d'acrylamide
SE7804801A SE7804801L (sv) 1977-05-11 1978-04-26 Polymermatris pa basis av akryl
BR7802600A BR7802600A (pt) 1977-05-11 1978-04-26 Matriz de polimero a base de acrilamida
CH454178A CH637218A5 (de) 1977-05-11 1978-04-26 Polymermatrix auf der basis von acrylamid.
NL7804466A NL7804466A (nl) 1977-05-11 1978-04-26 Polymeermatrix op basis van acrylamide.
NZ187071A NZ187071A (en) 1977-05-11 1978-04-26 Acrylamide copolymer with immobilized antibodies
DK181478A DK181478A (da) 1977-05-11 1978-04-26 Polymermatrix paa basis af acrylamid
LU79535A LU79535A1 (de) 1977-05-11 1978-04-26 Polymermatrix auf der basis von acrylamid
NO78781473A NO781473L (no) 1977-05-11 1978-04-26 Polymermatriks basert paa akrylamid.
DD78205046A DD136185A5 (de) 1977-05-11 1978-04-27 Polymermatrix auf der basis von acrylamid
ES469830A ES469830A1 (es) 1977-05-11 1978-04-27 Matriz de polimero basada en acrilamida.
PL1978206415A PL121950B1 (en) 1977-05-11 1978-04-27 Method of radioimmunological determination of hormones and drugsekarstv
HU78CA424A HU178485B (en) 1977-05-11 1978-04-27 Process for the immobilisation of antibodies in polymeric matrix on acrylamide base in the course of the radio-immunological determination of hormones and pharmaceutical compositions
BE187209A BE866491A (fr) 1977-05-11 1978-04-27 Matiere polymere a base d'acrylamide
JP5072678A JPS5417116A (en) 1977-05-11 1978-04-27 Polymer base for immobilizing antibody
GB16822/78A GB1603772A (en) 1977-05-11 1978-04-27 Antibody immobilized in a acrylamide copolymer matrix

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DE2721267A DE2721267C2 (de) 1977-05-11 1977-05-11 Antikörpergel

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Publication Number Publication Date
DE2721267A1 true DE2721267A1 (de) 1978-11-23
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PL (1) PL121950B1 (de)
SE (1) SE7804801L (de)
ZA (1) ZA782358B (de)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2579757A1 (fr) * 1985-04-02 1986-10-03 Takara Shuzo Co Procede de determination de l'hemoglobine dans les matieres fecales

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2458070A1 (fr) * 1979-05-28 1980-12-26 Compiegne Inst Technol Surf Ac Dispositif pour l'identification et le dosage de substances biochimiques antigeniques dans les fluides biologiques
WO1981002343A1 (en) * 1980-02-05 1981-08-20 Japan Atomic Energy Res Inst Unit system for use in medical analysis and process for preparing same
JPS5729949A (en) * 1980-07-30 1982-02-18 Nippon Koutai Kenkyusho:Kk Determination of sugar branch related to cancer and diagnostic technique of cancer
US4540660A (en) * 1983-04-07 1985-09-10 Daryl Laboratories, Inc. Substrate for fluoroimmunoassay of biological fluids
JPS63503150A (ja) * 1986-04-30 1988-11-17 サウスウェスト・ファウンデーション・フォー・バイオメディカル・リサーチ ポリアミド樹脂及び免疫診断用試薬の調整法
DE3921498A1 (de) * 1988-09-28 1990-03-29 Bayer Ag Polymer-gebundene-farbstoffe, verfahren zu deren herstellung und verwendung
US5147777A (en) * 1990-06-18 1992-09-15 Eastman Kodak Company Biologically active reagents prepared from carboxy-containing polymer, analytical element and methods of use
US5262297A (en) * 1990-06-18 1993-11-16 Eastman Kodak Company Specific binding analytical and separation methods using carboxy containing polymers
US5210289A (en) * 1990-06-18 1993-05-11 Eastman Kodak Company Carboxy containing monomers
US5149737A (en) * 1990-06-18 1992-09-22 Eastman Kodak Company Carboxy containing monomers and polymers and latices prepared from same
US5424219A (en) * 1991-10-25 1995-06-13 Cytech Biomedical, Inc. Method of performing assays for biomolecules and solid supports for use in such methods
EP2192409B1 (de) * 2008-11-26 2014-04-23 Corning Incorporated Biosensorzusammensetzung zur Marker-unabhängigen Erkennung und Verfahren dafür

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2546379A1 (de) * 1974-10-16 1976-04-22 Sjoeholm Immobilisierte biologisch aktive substanz und deren verwendung
US3970429A (en) * 1973-05-01 1976-07-20 Wisconsin Alumni Research Foundation Method for immunological determinations

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3970429A (en) * 1973-05-01 1976-07-20 Wisconsin Alumni Research Foundation Method for immunological determinations
DE2546379A1 (de) * 1974-10-16 1976-04-22 Sjoeholm Immobilisierte biologisch aktive substanz und deren verwendung

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Chem. Abstr., Vol. 75, 1971, S. 266 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2579757A1 (fr) * 1985-04-02 1986-10-03 Takara Shuzo Co Procede de determination de l'hemoglobine dans les matieres fecales

Also Published As

Publication number Publication date
HU178485B (en) 1982-05-28
ES469830A1 (es) 1978-12-16
ZA782358B (en) 1979-04-25
JPS5417116A (en) 1979-02-08
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DK181478A (da) 1978-11-12
SE7804801L (sv) 1978-11-12
NL7804466A (nl) 1978-11-14
FR2390731B1 (de) 1984-05-04
ATA290978A (de) 1981-04-15
DE2721267C2 (de) 1985-05-02
BE866491A (fr) 1978-08-14
CH637218A5 (de) 1983-07-15
AU3536478A (en) 1979-10-25
GR64474B (en) 1980-03-27
IL54558A0 (en) 1978-07-31
NO781473L (no) 1978-11-14
US4235867A (en) 1980-11-25
LU79535A1 (de) 1978-09-29
JPS6229747B2 (de) 1987-06-27
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IL54558A (en) 1982-01-31
FR2390731A1 (fr) 1978-12-08
NZ187071A (en) 1980-12-19
FI781220A (fi) 1978-11-12
AU519148B2 (en) 1981-11-12
AT364856B (de) 1981-11-25

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