WO1981002343A1 - Unit system for use in medical analysis and process for preparing same - Google Patents

Unit system for use in medical analysis and process for preparing same Download PDF

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WO1981002343A1
WO1981002343A1 PCT/JP1981/000022 JP8100022W WO8102343A1 WO 1981002343 A1 WO1981002343 A1 WO 1981002343A1 JP 8100022 W JP8100022 W JP 8100022W WO 8102343 A1 WO8102343 A1 WO 8102343A1
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WO
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antigen
antibody
polymerizable monomer
immobilized
medical analysis
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PCT/JP1981/000022
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French (fr)
Japanese (ja)
Inventor
M Kumakura
M Suzuki
I Kaetsu
M Adachi
Original Assignee
Japan Atomic Energy Res Inst
Otsuka Pharma Co Ltd
M Kumakura
M Suzuki
I Kaetsu
M Adachi
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Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F2/00—Processes of polymerisation
    • C08F2/44—Polymerisation in the presence of compounding ingredients, e.g. plasticisers, dyestuffs, fillers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone

Definitions

  • the present invention relates to a medical analysis cutout system and a method for producing the same. More specifically, the present invention relates to a medical analysis cut system in which a physiologically active substance, in particular, an antigen or an antibody is immobilized on a specific polymer, and a method for producing the same.
  • biologically active substance in the specification of the present application is a generic term for an antigen, an antibody such as a complement, or an active substance having an ability to react with an antibody such as an antibody reaction. There are cases.
  • Radioimmunoassay uses radioisotopes that can be measured as markers.
  • Enzymes can be immobilized by radiation polymerization as an art town
  • the present invention relates to antigens and antibodies.
  • the present invention provides various conditions by radiation polymerization of antigens and antibodies.
  • the first medical analysis unit system of the present invention is
  • This system for medical analysis uses a solution or aqueous solution of an antigen or antibody, which is a mixture of a glass-forming monomer selected from the following group [A] or a monomer selected from the groups [A] and [B]. It is mixed with the monomer and molded at a temperature below room temperature into a shape suitable for a pharmaceutical analysis unit system. Thereafter, it is kept at a temperature below room temperature and irradiated with light or ionizing radiation to polymerize the monomer. It is produced by dispersing and immobilizing an antigen or an antibody in a polymer matrix.
  • This medical analysis unit system can travel the desired processing such as cutting and grinding as required. For example, by making a microtome into several to ten thin sections, a highly reactive unit system having a large porous surface area and immobilized antigen / antibody on the surface is produced.
  • the polymerizable monomers used in this unit system belong to the following group [A].
  • advantages due to the monomer supercooling's the but often lose monomer polymerization reactivity and crystallized at a low temperature ⁇ monomers becomes cooled state polymerized at a rate greater even at low temperatures 1 ⁇ 2 molecular weight size c :::- ⁇
  • the polymer in the supercooled state has a high viscosity and can easily be formed into a desired shape, and can be polymerized without breaking or deforming the formed shape.
  • Supercooled monomers are less likely to impair the antigen or antibody activity when they come into contact with antigens or antibodies than non-cooled monomers.
  • HIROSHEXIL METAL RATE HITO * ⁇ HICHER acrylate
  • HITO * PROXY Lumetacylate, hydroxy * propyl propylate, hydroxy * mouth xybutylmethacrylate, hydroxybutylacrylate, hydroxypentylmethacrylate, hydroxy * mouth pentylacrylate , Hydroxyhexylmethacrylate, human * Hexoxyhexylmethacrylate, hydroxyheptylmethacrylate, hydroxyheptylmethacrylate, glycidylmethacrylate, glycidyl Diethylene glycol dimethacrylate, tetraethylene glycol dimethacrylate, ethylene glycol dimethacrylate, ethylen glycol dimethacrylate, prophylaxis.
  • [B] group monomers used together with [A] group monomers in this unit system include:
  • the first target system of the present invention uses the vitrifying monomer alone or as a mixture as described above to rapidly fix an antigen or an antibody at a large polymerization rate even at a low temperature below ordinary temperature. That the antigen or antibody can be immobilized in perfect form without separation by polymerizing at low temperature using light or electro-magnetic radiation, and the heat of the antigen or antibody can be fixed by polymerizing at low temperature. There is an advantage that it is possible to prevent a forgotten dismissal.
  • antigen-antibody any type of antigen-antibody is used in this unit system, it is specifically anti-protein, anti-human protein, anti-human ⁇ &, anti-DNP, anti-human cinaminotransferase, 0 wellbore Nshuri down, anti-ferritin, and the like
  • the polymerizable monomer has a total amount of 5 to 80% by weight, and the antigen or antibody collision solution or aqueous solution has the same amount of 20 to 80% by weight. Used in a range of 5 weights.
  • ⁇ - ⁇ ' In the production of the first cut system, the following are used: visible / ultraviolet light from low or high pressure mercury lamps, sunlight, light from factories, X ⁇ , gamma ⁇ , beta ⁇ . , Electron beam, a-ray, mixed radiation from a chemical reactor, r- ⁇ from spent messenger or fission products. If the irradiation dose is too large, it is desirable to reduce the irradiation dose by at least 1 x 10 2 H in order to polymerize and cure the monomer. It is.
  • the polymerization temperature that is, the irradiation temperature is in the range of room temperature or lower to 1196C, preferably 01000C.
  • the second system for medical analysis has a bioactive substance dispersed and fixed in a copolymer composed of at least two or more different polymerizable monomers.
  • a mixture consisting of a collision solution or aqueous solution of a biologically active substance selected from the group [G] and two or more different polymerizable monomers of the group [D] is added at a low temperature below room temperature.
  • the monomer is copolymerized by irradiating light or ionizing radiation, and the bioactive substance is dispersed and fixed in the copolymer.
  • bioactive substances of group [G] used in this second unity system include inulin, chorionic gonato, tropine, Placental lactogen, thyroid hormone, estradio
  • the butyl polymerizable monomers of the present invention are hydroxyshetyl metal acrylate, hydroxy * cyclethyl, and hydroxypropyl.
  • the polymerizable monomer of group [D] used in this second medical analysis unit system is a polymer having a large molecular weight even at a low temperature because of its cooling property.
  • the cooling monomer since the cooling monomer has a high viscosity, it can be easily formed into a desired shape and can be polymerized without breaking or deforming the formed shape.
  • the supercooled monomer when a bioactive substance is coexisted with a monomer and is drawn at a low temperature, the supercooled monomer is less likely to impair the activity of the bioactive substance than the monomer that does not.
  • the polymerizable monomer of the bead type is used for the weight of the system with a collision solution or a permanent solution of the bioactive substance.
  • ⁇ 80 usually used in an amount of 20-5D.
  • the radiation source, irradiation dose, and polymerization temperature (that is, irradiation temperature) employed in the implementation are the same as in the case of implementing the first medical analysis cutout system.
  • the second system for medical analysis is a polymerizable system in which unstable biologically active substances such as antigens and antibodies are polymerized in the form of two or more different vinyl-type polymerizable monomers. It is covered by the copolymer thus obtained, and can be subjected to desired treatment such as cutting, pulverizing, etc. as necessary.
  • desired treatment such as cutting, pulverizing, etc. as necessary.
  • Microto By producing a thin section of several tens to several tenths of a mil, a highly reactive unit system with a large porous surface area and exposed bioactive substances on the surface can be produced.
  • the bioactive substance can be immobilized efficiently even in a small amount, and the activity of the thin-film unit system obtained by the present invention is hardly reduced even if it is freeze-dried in a vacuum. Since it can be handled, it can be stored at room temperature, and it is very easy to store and transport.
  • the cut-out system obtained by the present invention When the thin-film cut-out system obtained by the present invention is actually used in an immunological immunoassay, the cut-out system should be used in order to further facilitate the handling of the unit for clinical examination. Is fixed to the tip of a support such as plastic or glass with an adhesive or the like. This is a major advantage of this method in that the time for the immunoreaction and washing steps is greatly reduced, and handling is simplified.
  • the third system for medical analysis comprises a complex in which a biologically active substance is immobilized on a surface of a support by a polymer substance, and comprises an antigen selected from the following group [E].
  • a mixture of an anti-buffer or aqueous solution and a polymerizable monomer selected from the group (F) is applied to the surface of the support carrier selected from the group (&), and light or Ionizing radiation
  • ⁇ irradiating ⁇ to polymerize the monomer and fix the antigen or antibody, it is produced as a complex having a porous structure.
  • this cut system is that the aqueous solution or buffer solution of the biologically active substance can be coated together with the monomer in one box on the surface of a support carrier with a large surface area such as male or small particles.
  • the polymerization and immobilization in step (1) allow the immobilization to be strong and also allow the physiologically active substance to be exposed on the surface of the support carrier.
  • the degree of exposure of the biologically active substance can be freely adjusted by changing the concentration of the monomer.
  • the binding reaction between an antibody and an antigen which is a basic reaction of a nitrogen immunoassay, and the binding process between an enzyme-labeled antibody or an antigen can be easily performed on the surface of a carrier.
  • Another major feature of this cut system is that it is very easy to store and operate because its activity hardly decreases even when it is frozen and vacuum-dried.
  • Examples of the biologically active substance of the group [E] used in the third medical analysis unit of the present invention include those described in the second medical analysis unit, that is, insulin. , Chorionic gonatotropin, prenatal lactogen, thyroid stimulating hormone, estradiol, estriol, progesterone, testosterone, cortisol, thyroxine, immunoglobulin, anti-Do - Hue door professional tee down, ⁇ 2 _ ⁇ Gros yellowtail down, hubs door globin, ⁇ ⁇ antigen, Do - Makuroguroburi down, ⁇ children antigen, anti-DN ⁇ antibody, monkey c: ' ⁇ ⁇ Monet La 0 antigen preparative Kiso plasma, Application Benefits yo one silo - down, luteinizing hormone, complement components growth hormone, I Nfuru Enzawi Angeles,] 3 ⁇ 4 ⁇ body, kanamycin, Toburamai Singh, HB S antibody, G EA, ferritin, gastrin,-microphone ⁇
  • [F] group polymerizable monomers used in this cut system include hydroxyshetyl methacrylate, hydroxyshetyl acrylate, hydroxypropyl methacrylate, Hydroxypropyl acrylate, ethylene glycol methacrylate, ethylene diol glycol acrylate, methoxy ⁇ ethylene glycol methacrylate, meth oxyethylene glycol acrylate, Acrylamide, ⁇ -bil-2-pyrrolitol, glycidyl acrylate, glycidyl methacrylate, triethylene glycol, butandiol mono-ethylene acrylate, ethylene glycol diacrylate And hexane diol, hexanediol monochloride , Styrene Ren and the like.
  • the above-mentioned polymerizable monomer is polymerizable at a high rate even at a low temperature because of its cooling property, and produces a polymer having a large molecular weight. It is easy to mold into the shape of It can be polymerized without performing.
  • the monomer in a tightly cooled state is less likely to impair the activity of the bioactive substance than a monomer that does not.
  • Group support carriers used in the third cut system of the present invention include cellulosic fibers, synthetic fibers, sulphones, synthetic fibers, plastic films, glass beads, glass fibers, glass fibers. Examples include a lath plate, plastic beads, cormorants, metal particles, metal meshes, metal powders, natural polymer substances, metal oxides, porous plastics, raw polymer substances, silicate substances, and the like.
  • the bead-based polymerizable monomer is used in the form of a system with an aqueous solution of a poorly bioactive substance or an aqueous solution. Usually used in an amount of 20 to 30.
  • the impact solution or aqueous solution is applied to the surface of the support by any means such as immersion, spraying, or brushing.
  • the radiation, irradiation dose, and polymerization temperature (ie, irradiation temperature) used in manufacturing this cut system are the same as those used in manufacturing the first and second medical analysis cut systems described above. It is.
  • the fourth medical unit of the present invention is an immobilized product in which the production activity of antigens and complements is supported on the surface of a small particulate polymer, and the following [H] It has a biologically active substance carried from the group and a tight cooling property selected from the [I] group A mixture of highly hydrophobic, polymerizable monomers
  • the biologically active substance When manufactured, the biologically active substance may be in the form of an aqueous solution, buffer solution, etc.
  • the polymerizable monomer has a concentration of 30-70 *
  • a particulate immobilized product can be obtained in the range of
  • the fog radiation ⁇ is a ⁇ , r, neutron, X-ray
  • Polymerization (irradiation) temperature is below room temperature.
  • One 1 D0C is used.
  • This size is also controlled by adjusting the stirring time of the mixture before irradiation.
  • CMrl ⁇ h'D ⁇ The diameter is freely adjustable in the range of 1-500-. Generally, in the case of immunochemical analysis, a particle size of about 100 to 500 is suitable.
  • the monomer has hydrophobicity as a main component, but by partially mixing a hydrophilic monomer, it is also possible to control the hardness of the particles, and under conditions where suspension polymerization proceeds. If so, a particulate immobilized product can be obtained.
  • This immobilized product is used not only for one immunoreaction in enzyme immunoassay, fluorescence immunoassay, radioimmunoassay, etc. but also for clinical measurement using all binding reaction systems such as receptor reaction and lectin reaction. It can be used for the separation and preparation of a physiologically active substance utilizing these reactions.
  • the bioactive substances used in the fourth cut system of the present invention include insulin, hairy gonato * toebin, and discotic Lac Togen, thyroid ⁇ teaching hormone, estradiol, Est Rio one le, pro Gesute ⁇ emissions, testosterone, cortisol, rhino Rokishin, immune Gros yellowtail down, anti Do - Hue DOO Buroti emissions, lambda 2 - Eta globulin down, haptoglobulin globin, HB S antigen, a - macro globulin down, ⁇ infants antigen, anti-D NA antibodies, Salmo Nera 0 antigens, Toxoplasma, Application Benefits Yoto * Sai Ronin, luteinizing Mormon, complement components, growth hormone, inflationary Ruenzau i Angeles, wind ⁇ body, kanamycin, Topurama Lee Shin, HB S antibody, G EA, Fueri Ken, gas extraction Li down, 2 - micro grayed
  • hydrophobic monomer of group [I] used in this unit system has the following general formula:
  • X represents -H or -GH 3 ;
  • R 2 is -0H, -GH 3 or
  • Examples include methylene glycol diacrylate, diethylene glycol diacrylate, and the like.
  • a mixture of 1 part of anti-a-phytobrotin, 50 parts of phosphoric acid buffer solution and 50 parts of hiroxityl methacrylate was cooled to 178 C, and kept at this concentration to reduce cobalt ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ 0.
  • the irradiated r ⁇ was irradiated at a dose rate of 1 ⁇ 10 6 R / hr for 1 hour to polymerize.
  • the immobilized product thus obtained was cut to a thickness of 20 with a microtome to obtain a film-shaped immobilized product.
  • One immobilized product was added to 1 cc of the prepared protein solution prepared in advance by dilution, and the mixture was reacted at 351: 1: for 1 hour.
  • the immobilized product purified with 1 cc of peroxidase-labeled anti-a-phytoprotein was reacted at 35 C for 1 hour.
  • the immobilized substance was washed three times with a buffer solution.
  • the immobilized material was added to 0-phenylenedihydrochloride cc and allowed to react for 50 minutes.
  • 3 cc of 1 ⁇ - ⁇ was added and trapped, and then the absorbance (492 ⁇ ) was measured. From the obtained calibration curve, it was possible to obtain an absorbance proportional to the concentration of na-phytoprotein.
  • the immobilized product was washed twice with a buffer solution, and then the immobilized product was added to 1 ⁇ 1 cc of anti-human labeled with peroxidase, and reacted at 55 C for 1 hour. After the reaction, the immobilized product was washed three times with a buffer solution. Then, the immobilized material was added to 1 cc of 0-fermented amine height, chloride, and reacted for 50 minutes. After stopping the reaction with 1 N-HC, the absorbance (492 >>) was measured. The absorbance was proportional to human I ⁇ G, and a good linear calibration curve was obtained. Inquiry 5
  • CL1M Phosphate buffer solution
  • This immobilized product was freeze-dried. Then, adjust it by diluting it in advance A-photoprotein standard solution (53 ⁇ 4 ⁇ , 203 ⁇ 43 ⁇ 4 ⁇ , 200 and 50 o3 ⁇ 4w) were taken as ⁇ 1 cc, respectively, placed in a test tube, and one of the immobilized materials was placed in each of the tubes and reacted at 25 C for 1 hour. After the reaction, the immobilized product was removed and washed twice with a phosphate buffer solution 2, and then reacted with peroxidase-labeled anti-a-phytoprotein (a2W) for 1 hour. After the reaction, warts were performed three times with phosphoric acid mouth liquid 2. Next, pressurized hydrogen a 1
  • the immobilized product was added to 0.3 W of a mixed solution of 0-phenylenediamine salt ⁇ salt ⁇ i and reacted at 251: 50 for 50 minutes.
  • reaction was stopped with 1N hydrochloric acid 3 ⁇ , and colorimetric analysis was performed.
  • Gi 1 X10 one 4 parts obtained by made wait, phosphoric acid ⁇ solution containing human serum (CL1 M) 50 parts, N - bi - Lu 2 - pyro Li down 50 And 20 parts of ethylene glycol methacrylate, put them in a glass container (5 « « # x100 »), cool the whole to 110 ° C, and use an electron beam accelerator (2MeV, 2 ⁇ ). ) Was irradiated at a mass ratio of 1 ⁇ 10 5 R e for 10 transfer to polymerize. After polymerization, remove the polymer from the glass container and remove it.
  • a nitrogen reaction was performed using the slaughtered anti-human I, and a calibration curve was generated.
  • Anti-x-fetoprotein 1 X1CT 3 parts including human blood
  • Linn buffer ( ⁇ 50 parts and 2-hydroxy ⁇
  • the immobilized product was used to measure the concentration of n-fetoprotein in the serum of patients with primary liver cancer.
  • the medical analysis kit system of the present invention collects and analyzes antigens and antibodies in blood or body fluids, and can be widely used for new medical examinations, clinical tests, and separation and purification of biological activities. it can.

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Abstract

A unit system for use in medical analysis comprising a particular polymer having a physiologically active material, particularly antigen or antibody, fixed thereto by radiation-induced polymerization, and a process for preparing the unit system. Since an antigen or antibody can be fixed in various forms in the unit without spoiling its activity, this unit system can be widely used for collection and analysis of antigens or antibodies in blood or body fluid, and therefore for diagnosis, clinical tests, and separation or purification of physiologically active materials.

Description

明 細 騫  Mei Feng
医学分析用ュ-ッ ト システム及びその製造方法  Cutout system for medical analysis and method for producing the same
技 衛 分 野  Technical branch
本発明は医学分析用ュ-ッ ト システム及びその製造方 法に関するものである。 更に詳しく言えば本発钥は生理 活性物質特に抗原あるいは抗体が特定の重合体に固定さ れた医学分析用ュ-ッ ト システム及びその製造方法に関 するものである。  The present invention relates to a medical analysis cutout system and a method for producing the same. More specifically, the present invention relates to a medical analysis cut system in which a physiologically active substance, in particular, an antigen or an antibody is immobilized on a specific polymer, and a method for producing the same.
本出願の明細書における用語"生物活性物質" は抗原 抗体、 補体等抗原 ·抗体反応等の接能を有する活性物質 の総称として兩いられるが、 便宜上抗原 ·抗体で代表さ せて略する場合がある。  The term "biologically active substance" in the specification of the present application is a generic term for an antigen, an antibody such as a complement, or an active substance having an ability to react with an antibody such as an antibody reaction. There are cases.
背 景 技 街  Background technology city
免疫グロブリ ン * イ ンシュ リ ン * ホルモン等の抗原性 を有する物質は、 これら物質の抗体とその抗原抗体反応 が特異的で、 鋭敏であるため、 きわめて低滠度において も抗原，抗体反応が起こるのでこれを利用して血液ある いは体液中の抗原あるいは抗体を捕集分析し. 診新や臨 床検査に用いることが可能であり fc すでにいくつかの実 用例や多くの研究例が報告されている。 例えばゲル内沈 降法、 放射免疫分析法、 酵素免疫分析法、 螢光度免疫分 析法等があるが * これらの中で放射免疫分析法、 餑素免 疫分析法及び瑩光度免疫分析法が他の方法に比べ感度が 高く、 定量分析性に優れている。 しかし放射免疫分析法 はマーカーとして徽量測定が可能な放射性同位元素を用 Substances with antigenicity, such as immunoglobulin * insulin * hormone, have specific and sharp antigen-antibody reactions with the antibodies of these substances, so antigen-antibody reactions occur even at extremely low levels. because have in using this blood is reported actual examples and many research examples of antigens or antibodies was collected analyzed. it is possible to use a sewing machine or clinical examination fc already some body fluids ing. For example, in-gel precipitation, radioimmunoassay, enzyme immunoassay, fluorescence immunoassay, etc. * Among these, radioimmunoassay, oxygen immunoassay, and Yihe immunoassay are available. Higher sensitivity than other methods and excellent quantitative analysis. However, radioimmunoassay uses radioisotopes that can be measured as markers.
、 いるため. 使用後の廃棄物の処理. 人体の釤眢、 環境污 染の問題、 放射性同位元素の測定に必要な特殊な測定機 器が必要である。 さらに標識した放射性同位元素の放射 能が «衰するため * 長期間使用できないなどの問題があ る。 これ K:対して， 酵素反応を利用した酵素免疫分析法 は放射免疫分析法に匹敏しうる感度と精度もあり、 安全 に遂行しうるので、 有力な分析方法となりつつある。 こ の方法はマーカーとして餑素を使用するため铵量でも容 易に検出が可能で臨床化学分析に要求される高感度， 再 現性. 迅速性などを潢足させることが可能である。 餑素 免疫分析法においてはー玆に抗原および抗体などを不溶 性担侓の表面に固定化し、 抗原 ·抗体反応および反応後 の未反応抗原 ·抗体の除去を容易にする試みがなされて いる。 すなわち， 餑素免疫分析法においては担体の表面 に抗原および抗体などを固定化することが必要条件にな る。 それゆえ、 最近、 触媒を使用担体表面に抗体および 抗原を固定化する技街が開発されてきているが、 これら. 抗原抗体など生物活性物質は熱や化学改質により活性低 下や変化をきたすためこれらの物質の活性を低下あるい は変性させることなく担体表面に固定化することが困難 であった。 また * 担体に、 抗原および抗体等をより多く 固定し、 抗原および抗体等と接鲑反応しやすくするため の表面積を増大させたり * 操作を箇便 ·効率的でかつ精 度よく正確にするための形状（たとえば未反応物を疣い やすく洗浄によってもれなく十分に除去しうるよ うな形 , Disposal of waste after use. Problems of human body and environmental contamination, special measuring equipment required for measurement of radioisotope are required. In addition, the radioactivity of the labeled radioisotope deteriorates. * There is a problem that it cannot be used for a long time. K: On the other hand, enzyme immunoassays utilizing enzyme reactions have the sensitivity and accuracy comparable to radioimmunoassays and can be performed safely, so they are becoming a promising analysis method. Since this method uses nitrogen as a marker, it can be easily detected even in a small amount, and can improve the high sensitivity, reproducibility, and rapidity required for clinical chemistry analysis. In immunoassays, attempts have been made to immobilize antigens and antibodies on the surface of an insoluble carrier to facilitate the removal of antigen-antibody reaction and unreacted antigen-antibody after the reaction. That is, in nitrogen immunoassay, it is necessary to immobilize antigens and antibodies on the surface of the carrier. Therefore, in recent years, technology areas for immobilizing antibodies and antigens on the surface of carriers using catalysts have been developed. However, these biologically active substances such as antigens and antibodies are reduced in activity or changed by heat or chemical reforming. Therefore, it has been difficult to immobilize these substances on the carrier surface without reducing or denaturing the activity. Also, * Immobilize more antigens and antibodies on the carrier to increase the surface area to facilitate the contact reaction with antigens and antibodies, etc. * To make the operation easier, more efficient and more accurate Shape (for example, a shape that is easy to wart unreacted substances and can be sufficiently removed by washing.
OI.IFIOI.IFI
、 - :0 状）を付与するための成形や加工にも制約があり， 所望 ,- : 0 There is also a restriction on the molding and processing to give
の多様な形状や表面積を自由かつ容易に与えることがで  Can freely and easily give various shapes and surface areas
きなかった o  Didn't come o
要するにこれまでの固定化技痏では、 多量の抗原およ  In short, conventional immobilization technology requires a large amount of antigen and
び抗体等を 活性を損ねることなく， 強固に ¾ 広い表面 Fine antibody or the like without impairing the activity, strongly ¾ broad surface
積で 多様な形状と性質を与えられた担体表面に有効に Effective on carrier surface given various shapes and properties
固定化することが困難であった。 It was difficult to immobilize.
先に本出願の発明者等は放射線重合により種々の医案  First, the inventors of the present application have proposed various medical plans by radiation polymerization.
を固定化して特にその溶出速度を制御することに関連す Immobilization of
る発明につき出顦をしているが（オランダ出願公開第 Of the invention (Dutch Application Publication No.
7 9 0 1 9 1 9号；英国出願公開第 2 0 1 7 1 1 3号参照） 、 本発明者等は更にこの発明を抗原 ·抗体等に応用すべく  No. 790 1919; see UK Patent Application Publication No. 2101713), and the present inventors have further applied this invention to antigens and antibodies.
鋭意研究を重ねた結果. ここに前述の従来技衛の欠点を As a result of intensive research.
解消して本発明を完成したものである。 なお他の関連先 Thus, the present invention has been completed. Other related destinations
行技街として酵素を放射線重合により固定化することが Enzymes can be immobilized by radiation polymerization as an art town
開示されているが（特開昭第 5 0 - 1 5 7 5 8 7号及び同 It is disclosed (Japanese Patent Laid-Open No. 50-1575787 and
5 2 - 1 2 0 1 8 7号参照） 、 本発明は抗原 ·抗体に関連 The present invention relates to antigens and antibodies.
する医学分析用ュニッ トシステムである点において相違 In that it is a medical analysis unit system
するものである。 Is what you do.
発 明 の 開 示  Disclosure of the invention
本発明は抗原 ·抗体を放射線重合により種々の彤状ぁ  The present invention provides various conditions by radiation polymerization of antigens and antibodies.
るいは状態に固定化することからなる医学分析用ュ-ッ Or a medical analysis kit consisting of
ト並びにその製造方法である。  And its manufacturing method.
本発明の第一の医学分析用ュニッ トシステムは抗原あ  The first medical analysis unit system of the present invention is
るいは抗体を重合体マ ト リ ッ クス中に分散固定したもの .:？ I ヽOr antibody dispersed and fixed in a polymer matrix.:? I ヽ
、u 丄。—く である。 , U 丄. — It is.
この医学分析用ュ-ッ ト システムは抗原あるいは抗体 の瑗衝液または水溶液を下記の〔 A 〕群より選ばれたガ ラス化性モノマーあるいは〔A〕群と 〔B〕 群から選ばれ たものの混合モノマーと混合し， これを常温以下の温度 において医薬分析用ュニッ ト システムとして適した形状 に成形加工し、 しかるのち常温以下の温度に保って光も しくは電離性放射線を照射してモノマーを重合せしめ抗 原あるいは抗体を重合体マト リ ックス中に分散固定させ ることによって製造される。 この医学分析甩ユニッ トシ ステムは切断、 粉砕等必要に応じて所望の処理を旅すこ とが出来る。 例えばミ クロ トームで数 乃至数 1 0 の 薄切片にすることにより多孔性の表面積が広く且つ表面 に抗原 ·抗体が固定化されている極めて反応性に富むュ ニッ ト システムが製造される。  This system for medical analysis uses a solution or aqueous solution of an antigen or antibody, which is a mixture of a glass-forming monomer selected from the following group [A] or a monomer selected from the groups [A] and [B]. It is mixed with the monomer and molded at a temperature below room temperature into a shape suitable for a pharmaceutical analysis unit system. Thereafter, it is kept at a temperature below room temperature and irradiated with light or ionizing radiation to polymerize the monomer. It is produced by dispersing and immobilizing an antigen or an antibody in a polymer matrix. This medical analysis unit system can travel the desired processing such as cutting and grinding as required. For example, by making a microtome into several to ten thin sections, a highly reactive unit system having a large porous surface area and immobilized antigen / antibody on the surface is produced.
このユニッ トシステムに用いられる重合性単量体は次 の〔A〕 群に属する， 単独で低温においても結晶化せず 安定な過冷却状態をとり'得る 1種又は 2種以上の重合性 単量体： もしくはそれ自身は逼冷却性を有しない（非逼 冷却性）力 〔A〕群モノマーと混合比 2 0重量 以下で混 合するとき混合モノマ一全体として逼冷却性を与える様 な〔B〕群のモノマーである。 ここでモノマーを過冷却性 にすることによる利点は、 低温で結晶化するとモノマー は重合反応性を失う場合が多いが 逼冷却状態になった モノマーは低温でも大きい速度で重合し ½ 分子量の大き c:：：-ιThe polymerizable monomers used in this unit system belong to the following group [A]. One or two or more polymerizable monomers that can stand alone and do not crystallize even at low temperature and maintain a stable supercooled state. The monomer: or itself does not have tight cooling (non-tight cooling). [A] When mixed with a group monomer at a mixing ratio of 20 weight or less, the mixed monomer as a whole gives tight cooling. B] group of monomers. Here advantages due to the monomer supercooling's the but often lose monomer polymerization reactivity and crystallized at a low temperature逼monomers becomes cooled state polymerized at a rate greater even at low temperatures ½ molecular weight size c :::-ι
、 い重合体を生成すること、 および過冷却状態のモノマー は粘度が大きいので所望の形状に成 ¾し易くまた成形し た形を崩したり変形したりすることなく重合出来るとい う点である。 また抗原あるいは抗体をモノマーと共存さ せて低温で扱う場合. 過冷却状態のモノマーはそうでな いモノマーに比べて抗原あるいは抗体と接触しても抗原 あるいは抗体の活性を損ねることが少いという利点もあ る o , This is because the polymer in the supercooled state has a high viscosity and can easily be formed into a desired shape, and can be polymerized without breaking or deforming the formed shape. When handling antigens or antibodies at low temperatures in the presence of monomers. Supercooled monomers are less likely to impair the antigen or antibody activity when they come into contact with antigens or antibodies than non-cooled monomers. Some benefits o
このュニッ ト システムで使用される〔A〕群モノマーと しては，  As the [A] group monomer used in this unit system,
ヒ ロキシェチルメ タク リ レー ト 、 ヒ ト * πキシェチルァ ク リ レー ト 、 ヒ ト *ロ キシプロ ヒ。ルメ タク リ レー ト 、 ヒ ト * ロ キシプロ ピル了ク リ レー ト 、 ヒ ト *口 キシブチルメ タク リ レー ト 、 ヒ ロキシブチルァク リ レー ト 、 ヒ ロキシ ペンチルメ タク リ レー ト 、 ヒ ト *口キシペンチルァク リ レ ー ト 、 ヒ ド ロキシへキシルメ タク リ レー ト 、 ヒ ト *口キシ へキシル了ク リ レー ト 、 ヒ ロキシヘプチルメ タク リ レ ー ト 、 ヒ ロ キシヘプチル了ク リ レー ト 、 グリ シジルメ タク リ レート、 グリ シジル了ク リ レー ト 、 ジエチレング リ コ ールジメ タク リ レー ト 、 テ ト ラエチレングリ コール ジメ タク リ レー ト 、 リ エチレングリ コールジメ タク リ レー ト、 エチ レングリ コールジメ タク リ レート 、 プロ ヒ。 HIROSHEXIL METAL RATE, HITO * π HICHER acrylate, HITO * PROXY. Lumetacylate, hydroxy * propyl propylate, hydroxy * mouth xybutylmethacrylate, hydroxybutylacrylate, hydroxypentylmethacrylate, hydroxy * mouth pentylacrylate , Hydroxyhexylmethacrylate, human * Hexoxyhexylmethacrylate, hydroxyheptylmethacrylate, hydroxyheptylmethacrylate, glycidylmethacrylate, glycidyl Diethylene glycol dimethacrylate, tetraethylene glycol dimethacrylate, ethylene glycol dimethacrylate, ethylen glycol dimethacrylate, prophylaxis.
レングリ コールジメ タク リ レー ト 、 ジブロ ビレングリ コ ールジメ タク リ レート、 ^ リ ブロ ビレングリ コールジメ タク リ レー ト 、 ブチレングリ コ ールジメタ ク リ レー ト 、 c:.:?iLenglycol dimethacrylate, dibrovirene glycol dimethacrylate, ^ librovirenglycol dimethacrylate, butylene glycol dimethacrylate, c:.:? I
\パ■ 一、 ペンタ ンジオールジメ タク リ レート、 へキサンジォール ジメ タク リ レート、 ヘプタンジ才一ルジメ タク リ レート ネオペンチルグリ コールジメ タク リ レート、 ト リ メチロ ールェタ ン ト リ メタク リ レート、 ト リ メチロ一ルプロパ ン ト リ メ タク リ レート 、 グリ セロールモノメ タク リ レー ト 、 グリ セ ロ ールジメ タク リ レー ト 、 グリ セ ロ ール ト リ メ タク リ レート、 ジェチルア ミ ノエチルメ タク リ レート， ジェチルアミ ノブチルメ タク リ レート、 ジメチルアミ ノ ェチルメ タタ リ レート、 ジメチル了ミ ノ ブチルメ タク リ レート 、 ペンジルメ タク リ レー ト 、 メ トキシ^リ エチレ ングリ コールメ タク リ レート 、 エ ト キシ^リ エチレング リ コールメ タク リ レー ト 、 メ トキシプロ ビレングリ コー ルメ タク.リ レート、 ジエチレングリ コールジ了ク リ レー ト 、 テト ラエチレングリ コールジ了ク リ レート、 リエ チ レングリ コールジァク リ レート等が例示される。 \ Part one, Pentanediol dimethacrylate, hexanediol dimethacrylate, heptane dimethacrylate, neopentylglycol dimethacrylate, trimethylol methacrylate, trimethylol propane methacrylate, trimethylolpropane methacrylate Rate, glycerol monomethacrylate, glycerol dimethacrylate, glycerol trimethacrylate, getylaminoethyl methacrylate, getylaminobutyl methacrylate, dimethylaminomethyl methacrylate, Dimethyl methyl butyl methacrylate, pentyl methacrylate, methoxy ^ ethylene glycol methacrylate, ethoxy ^ ethylene glycol methacrylate, methoxypropyl Nguri code Rume Tak. Li rate, diethylene glycidyl Koruji Ryouku Li rate, Tet Raechirenguri Koruji Ryouku Li rate, is Rie Ji Renguri Korujiaku Li rate, etc. are exemplified.
又、 このユニッ ト システムで〔A〕群モノマーと共に使 用される 〔B〕群モノマーとしては、  [B] group monomers used together with [A] group monomers in this unit system include:
酢酸ビュル、 プロ ヒ。オン酸ビュル、 餡酸ビ -ル、 メチル メ タク リ レート、 メチルァク リ レート 、 ェチルメ タク リ レート 、 ェチルァク リ レート 、 プロ ビルメ タク リ レート 、 プロ ピル了ク リ レー ト 、 ブチルメ タク リ レー ト 、 ブチル アタ リ レー ト 、 ペンチルメ タク リ レート 、 ペンチルァク リ レー ト、 へキ シルメ タ ク リ レート 、 へキシル了ク リ レ ー ト 、 ラ ウ リ ルメ タク リ レー ト 、 ラ ウ リ ルアタ リ レー ト 、 ステアリ ルメ タク リ レー ト 、 ステアリ ルァク リ レー ト 、 スチ レン、 ビエル ト ルエン、 スルフォン 匕スチレン、 ァ ク リ ル酸、 メ タク リル酸、 ア ミ ノスチレン、 ビニルビ口 リ ン、 アク リ ルア ミ 、 メ タク リ ルア ミ ト *、 メチレン ビスアク リルア ミ ト *、 メチロールアク リル了ミ 、 ァク リ ロ - ト リ ル、 メ タク リ ロニ ト リ ル、 ジァ リ ルフタ レー ト、 ィタ コン麼、 無永マレイ ン酸、 ジァリ ルイ ソ フタ レ ー ト 、 コハク酸ジ了リ ル、 ィ タ コ ン酸ジァリ ル、 ジビ- ルベンゼン、 ト リ ァ リ ルシア ヌ レー ト等が例示される。 Bull acetate, phenol. Onyl bean, bean jam bean, methyl methacrylate, methyl acrylate, ethyl methacrylate, ethyl acrylate, propyl methacrylate, propyl acrylate, butyl methacrylate, butyl methacrylate, butyl Atarilate, Pentylmethacrylate, Pentylacrylate, Hexylmethacrylate, Hexyl-Complete Rate, Raurilume Takurate, Rauriluaterelate, Steari Lume Tak Relate, Steal Luk Relate, Styrene, Biertoluene, Sulfone-Shaped Styrene, Acrylic acid, Methacrylic acid, Aminostyrene, Vinyl vinyl, Acrylami, Methacrylamit *, Methylenebisacrylyl Amit * , Methylol acryl, acrylonitrile, methacrylonitrile, gallyl phthalate, itacon, uninhabited maleic acid, garyluiso phthalate, Examples include diyl succinate, diaryl itaconate, divinylbenzene, and triaryl cyanurate.
本発明の第一のュ- 'ク ト システムは上述した如き単独 としてあるいは混合物としてのガラス化性モノマーを使 甩することによって、 常温以下の低温においても大きい 重合速度で速やか ^抗原あるいは抗体を固定できること、 光又は電餱性放射鎳を用いて低温で重合するこ とによつ て说離がなく完全な形で抗原あるいは抗体を固定できる こと、 又低温で重合することによって抗原あるいは抗体 の熱的な失括を防ぐことができることという利点がある。  The first target system of the present invention uses the vitrifying monomer alone or as a mixture as described above to rapidly fix an antigen or an antibody at a large polymerization rate even at a low temperature below ordinary temperature. That the antigen or antibody can be immobilized in perfect form without separation by polymerizing at low temperature using light or electro-magnetic radiation, and the heat of the antigen or antibody can be fixed by polymerizing at low temperature. There is an advantage that it is possible to prevent a forgotten dismissal.
このユニッ ト システム では如何なる種類の抗原 - 抗体でも使用されるが、 具侓的には抗な -フエトプロテ イ ン、 抗ヒ ト ί ^&、抗 DNP、抗チ口 シンア ミ ノ ト ラ ンス フェラーゼ、 抗イ ンシュリ ン、 抗フェリ チン等が例示さ れる 0 Although any type of antigen-antibody is used in this unit system, it is specifically anti-protein, anti-human protein, anti-human ^ &, anti-DNP, anti-human cinaminotransferase, 0 wellbore Nshuri down, anti-ferritin, and the like
この第一の医学分析用ュ-ッ ト システムを実施するに 当って、 重合性単量体は総量の 5〜 8 0重量 ί、 抗原あ るいは抗体の瑗衝溶液あるいは水溶液は同じく 2 0〜5 重量 の範囲で使用される。  In carrying out this first medical analysis cut system, the polymerizable monomer has a total amount of 5 to 80% by weight, and the antigen or antibody collision solution or aqueous solution has the same amount of 20 to 80% by weight. Used in a range of 5 weights.
Ο:Λ?ΙΟ: Λ? Ι
' 7. ΤΓΰ-ο ' 第一のュ-ッ ト システムを製造するにあたって採用さ れる鎵漯は低圧または高圧水銀灯からの可視 · 紫外光、 太陽光、 フ才 ト ンファク ト リイからの光、 X鎳、 ガンマ 鎳、 ベータ鎳、 電子線、 a線、 化学原子炉からの混合放 射線、 使用ずみ愁料又は核分裂生成物からの r -鎳のい ずれでもよい。 照射線量は大線量になると固定化工程中 に抗原 ·抗体を失活させるので搔カ少ない方が望ましい が、 モノマーを 100 56重合硬化させるには、 1 X 1 02 H 以上の照射線量が必要である。 従って、 放射線の場合線 量率 1 X 102 〜 1 X 10SHノ時で 1 X 102 〜 1 X 107 H、 好ましくは 1 X 1 04 〜 1 X 107 R の照射線量が必要であ る o ' 7. ΤΓΰ-ο' In the production of the first cut system, the following are used: visible / ultraviolet light from low or high pressure mercury lamps, sunlight, light from factories, X 鎳, gamma 鎳, beta 鎳. , Electron beam, a-ray, mixed radiation from a chemical reactor, r- 鎳 from spent messenger or fission products. If the irradiation dose is too large, it is desirable to reduce the irradiation dose by at least 1 x 10 2 H in order to polymerize and cure the monomer. It is. Therefore, when the radiation ray dose rate 1 X 10 2 ~ 1 X 10 S H Roh time at 1 X 10 2 ~ 1 X 10 7 H, preferably 1 X 1 0 4 requires irradiation dose ~ 1 X 10 7 R O
また、 重合温度、 即ち照射温度は室温以下〜一 1 9 6 C、 好ましくは 0 1 0 0 Cの範囲である。  Further, the polymerization temperature, that is, the irradiation temperature is in the range of room temperature or lower to 1196C, preferably 01000C.
本発钥の第二の医学分析用ュ-ッ ト システムは生物活 性物質が少くとも 2種類以上の異なったビ-ル系重合性 単量体から成る共重合体に分散固定された 記の〔G〕群 よ り選ばれた生物活性物質の锾衝溶液または水溶液と 〔D〕群より選ばれた 2種類以上の異つたビ-ル系重合性 単量侔から成る混合物に室温以下の低温において光また は電離性放射線を照射して該単量体を共重合せしめ生物 活性物質を該共重合体に分散固定させることによって製 造される。  The second system for medical analysis according to the present invention has a bioactive substance dispersed and fixed in a copolymer composed of at least two or more different polymerizable monomers. A mixture consisting of a collision solution or aqueous solution of a biologically active substance selected from the group [G] and two or more different polymerizable monomers of the group [D] is added at a low temperature below room temperature. In this method, the monomer is copolymerized by irradiating light or ionizing radiation, and the bioactive substance is dispersed and fixed in the copolymer.
この第二のュニッ ト システムで使 される〔G〕群の生 物活性物質は、 ィ ンシユリ ン、 絨毛性ゴナト， ト ロ ピン、 胎盤性ラク トゲン、 甲状鎳莉徵ホルモン、 ェス ト ラジオ The bioactive substances of group [G] used in this second unity system include inulin, chorionic gonato, tropine, Placental lactogen, thyroid hormone, estradio
ール、 エス ト リ 才ール、 プロ ゲステロ ン、 テス ト ステロ  , Esther, Testosterone, Testosterone
ン、 コーチゾール、 サイ ロキシン、 免疫グロ ブリ ン、 抗  , Cortisol, thyroxine, immunoglobulin, anti-
な 一フエ ト プ πティ ン、 βクー H グロ ブリ ン、 ハプ ト グ π ビン、 HBS抗原、 な -ュク ロ グロ ブリ ン、 癌胎児抗原、 抗 DNA抗体、 サルモネ ラ 0抗原、 ト キ ソ プラズマ、 ト リ One Hue door-flops π tee down such, β Koo H Gros yellowtail down, hubs door grayed π bottle, HB S antigen, Do - Interview click Russia Gros yellowtail down, carcinoembryonic antigen, anti-DNA antibody, Sarumone La 0 antigen, door key So plasma, Tri
ョー サイ ン、 黄体形成ホルモン、 補体各成分、 成 長ホルモン、 イ ンフルエンザウイ ルス、 風 抗体、 カナ マイ シン、 トプラマイ シン、 HBS抗体、 G E A、 フェ リ ® over-sign, luteinizing hormone, complement components, growth hormones, influenza virus, wind antibody, Kana My Shin, Topuramai Singh, HB S antibody, GEA, Fe Li
チン、 ガス ト リ ン、 2 -マイ ク ロ グロ ブリ ン、 ジゴキシ Tin, gastrin, 2- microglobulin, digoxy
ン、 免疫グ π ブリ ン - E 、 C - ぺプチ ド、 グルカ ゴン、  Immunoglobulin π-brin-E, C-peptide, glucagon,
G末端グルカ ゴン、 モチ リ ン、 セク レチン、 レニン、 プ  G-terminal glucagon, motilin, secretin, renin,
ロ ラクチン、 卵遐刺激ホルモン、 副胥皮質剌漦ホルモン  Lactin, egg stimulating hormone, auxiliar cortex stimulating hormone
等が例示される。 Etc. are exemplified.
第二の医学分析用ュ-ッ ト システムで使用する〔D〕群  [D] group used in the second medical analysis cutout system
のビュル系重合性単量体は、 ヒ ドロ キシェチルメ タク リ レー ト 、 ヒ ト * ロキシェチル了ク リ レー ト 、 ヒ ド ロ キシプ The butyl polymerizable monomers of the present invention are hydroxyshetyl metal acrylate, hydroxy * cyclethyl, and hydroxypropyl.
ロ ヒ。ルメ タク リ レー ト 、 ヒ ド ロキシプロ ビル了ク レー Lo hee. Lume Takurelate, Hydroxypro Building
ト 、 リ エチレン グリ コールメ タ ク リ レー ト 、 リ ェチ  , Ethylene glycol methacrylate, lithiate
レングリ コールァク リ レー ト 、 メ ト キシ ^ リ エチレング Wrenglycol acrylate, methoxy ^ ethylene glycol
リ コールメ タク リ レー ト 、 メ ト キシ リ エチレン グリ コ  Recall metal acrylate, methoxy ethylene glycol
—ルァク リ レート 、 アク リ ル了 ミ ト *、 N - ビ ル - 2 - ヒ。口 リ ン、 グリ シジルァク リ レー ト 、 グリ シジルメ タ —Lack rate, Acknowledgment *, N-Bill-2-H. Mouth ring, glycidyl acrylate, glycidyl meter
ァク リ レー ト 、 ト リ エチレン グリ コール、 ブタ ンジォー Acrylate, triethylene glycol, butanediol
ルモ ノ了ク リ レート 、 エチレングリ コールジァ ク リ レー Lumino acrylate, ethylene glycol dichloride
C:,PI一C:, PI
、 、 V ：。 、v ト 、 才クチルメ タ ク リ レー ト 、 へキサンジオールモノア クリ レー ト 、 スチレン等が例示される。 実施に当っては これら〔D〕群から 2種類以上の異なる単量体を遘択して 使用する。 ,, V :. , V And octyl methacrylate, hexanediol monoacrylate, styrene and the like. In practice, two or more different monomers are selected from these [D] groups and used.
この第二の医学分析用ュニッ トシステムで使甩する〔D〕 群のビ-ル系重合性単量体は遏冷却性であるので低温で も大きい速度で重合し、 分子量の大きい共重合体を生成 し、 また遏冷却性モノマーは粘度が大きいので所望の形 ^に成形し易くまた成形した形を崩したり変形したりす ることなく重合出来る。 また生物活性物質を単量体と共 存させて低温で拔う場合過冷却状態のモノマーはそうで ないモノマーに比べて生物活性物質の活性を損ねること が少い。  The polymerizable monomer of group [D] used in this second medical analysis unit system is a polymer having a large molecular weight even at a low temperature because of its cooling property. In addition, since the cooling monomer has a high viscosity, it can be easily formed into a desired shape and can be polymerized without breaking or deforming the formed shape. In addition, when a bioactive substance is coexisted with a monomer and is drawn at a low temperature, the supercooled monomer is less likely to impair the activity of the bioactive substance than the monomer that does not.
本凳明の第二の医学分析 ¾ュ-ッ トシステムを実施す るに当って、 ビ-ル系重合性単量体は生物活性物質の瑷 衝溶液あるいは永溶液との系の重量当り 5 〜 8 0 ¾、 通常 2 0〜5 D の量で使用される。 また実施にあたつ て採用される鎳源、 照射線量及び重合温度（即ち照射温 度）は前記の第一の医学分析用ュ- ッ ト システムを実施 する場合と同じである。  In carrying out the second medical analysis cut system of the present invention, the polymerizable monomer of the bead type is used for the weight of the system with a collision solution or a permanent solution of the bioactive substance. ~ 80 0, usually used in an amount of 20-5D. The radiation source, irradiation dose, and polymerization temperature (that is, irradiation temperature) employed in the implementation are the same as in the case of implementing the first medical analysis cutout system.
本発明の第二の医学分析用ュ-ッ トシステムは抗原 · 抗体の様に不安定な生物活性物質を 2種類以上の異なつ たビニル系重合性単量体をマイ ル Ρな状態で重合させた 共重合体により包括したもので、 切新、 粉砕等必要に応 じて所望の処理を施すことが出来る。 例えば、 ミクロ ト ームで数 1乃至数 1 0 #の薄膜切片にすることにより多 孔性の表面積が広く且つ表面に生物活性物質が露出して いる極めて反応性に富むュニグ ト システムが製造される, これにより酵素免疫分析法の基本反応である抗体と抗原 との結合、 また酵素標讒抗体又は抗原との結合プロ セス をュ-ッ トシステムの表面で容易に行わせることが可能 となる。 さらに生物活性物質は少量でも効率よ く固定化 でき、 また、 本発钥によって得られた薄膜ユニ ッ ト シス テムは真空凍結乾漦しても活性はほとんど低下しないの で、 乾燥した固定化物として取扱うことができるので保 存が室温でも可能であり、 保存、 運搬などが非常に容易 である。 The second system for medical analysis according to the present invention is a polymerizable system in which unstable biologically active substances such as antigens and antibodies are polymerized in the form of two or more different vinyl-type polymerizable monomers. It is covered by the copolymer thus obtained, and can be subjected to desired treatment such as cutting, pulverizing, etc. as necessary. For example, Microto By producing a thin section of several tens to several tenths of a mil, a highly reactive unit system with a large porous surface area and exposed bioactive substances on the surface can be produced. It is possible to easily carry out the binding reaction between an antibody and an antigen, which is a basic reaction of an enzyme immunoassay, and the binding process with an enzyme-labeled antibody or an antigen on the surface of a cut system. Furthermore, the bioactive substance can be immobilized efficiently even in a small amount, and the activity of the thin-film unit system obtained by the present invention is hardly reduced even if it is freeze-dried in a vacuum. Since it can be handled, it can be stored at room temperature, and it is very easy to store and transport.
本発明によって得られた薄膜状ュ-ッ ト システムを餑 素免疫分析法で実際使用する場合には、 臨床検査上ュニ ッ ト システムの取扱いを一層容易にするため、 このュ- ッ ト システムをプラスチックあるいはガラス等の支持捧 の先端に接着剤などによ り固定して使用する。 これによ り免疫反応および洗浄工程時間が非常に短縮され取扱い が簡便になることも、 この方法の大きな特長である。  When the thin-film cut-out system obtained by the present invention is actually used in an immunological immunoassay, the cut-out system should be used in order to further facilitate the handling of the unit for clinical examination. Is fixed to the tip of a support such as plastic or glass with an adhesive or the like. This is a major advantage of this method in that the time for the immunoreaction and washing steps is greatly reduced, and handling is simplified.
本発明の第三の医学分析用ュ-ッ ト システムは生物活 性物質が高分子物質により支持担体表面に固定化された 複合体から成るもので、 下記の〔E〕群より選ばれた抗原 あるいは抗侔の緩衝液または水溶液と 〔F〕群より選ばれ たビ-ル系重合性単量体との混合物を〔&〕群より選ばれ た支持担体の表面に塗布し、 とれに光または電離性放射 鎵を照射してモノマーを重合せしめ抗原あるいは抗体を 固定させることによって多孔性に富んだ構造を有する複 合体として製造される。 The third system for medical analysis according to the present invention comprises a complex in which a biologically active substance is immobilized on a surface of a support by a polymer substance, and comprises an antigen selected from the following group [E]. Alternatively, a mixture of an anti-buffer or aqueous solution and a polymerizable monomer selected from the group (F) is applied to the surface of the support carrier selected from the group (&), and light or Ionizing radiation By irradiating 鎵 to polymerize the monomer and fix the antigen or antibody, it is produced as a complex having a porous structure.
このュ-ッ ト システムの特徵は生物活性物質の水溶液 又は緩衝溶液を単量体と一箱に鲮雄状あるいは小粒子状 等表面積の大きい支持担体表面にもコーティングするこ とができ、 低温下で重合し固定化するため固定も強固で しかも支持担体表面に生理活性物質を露出させることが できることである。 生物活性物質の露出の程度は単量体 の濃度を変えることにより自由に調節することも可能で ある。 のようにして餑素免疫分析法の基本反応である 抗体と抗原との結合、 また酵素標識抗体または抗原との 結合プロセスを担体の表面で容易に行わせることが可能 となった。 更にこのュ-ッ トシステムは凍結真空乾操し ても活性は殆んど低下しないので保存、 運掇が非常に容 易であることも大きな特徵である。  The feature of this cut system is that the aqueous solution or buffer solution of the biologically active substance can be coated together with the monomer in one box on the surface of a support carrier with a large surface area such as male or small particles. The polymerization and immobilization in step (1) allow the immobilization to be strong and also allow the physiologically active substance to be exposed on the surface of the support carrier. The degree of exposure of the biologically active substance can be freely adjusted by changing the concentration of the monomer. As described above, the binding reaction between an antibody and an antigen, which is a basic reaction of a nitrogen immunoassay, and the binding process between an enzyme-labeled antibody or an antigen can be easily performed on the surface of a carrier. Another major feature of this cut system is that it is very easy to store and operate because its activity hardly decreases even when it is frozen and vacuum-dried.
本発明の第三の医学分祈用ュニッ ト システムで使用さ れる〔E〕群の生物活性物質としては前記の第二の医学分 析用ュ =ッ トシステムにおいて記载したもの、 すなわち イ ンシュリ ン、 絨毛性ゴナ ト ロ ピン、 胎整性ラク トゲ ン、 甲状籙剌激ホルモン、 エストラジオール、 エス ト リ オール、 プロ ゲステ ロ ン、 テス ト ステロ ン、 コーチゾー ル、 サイ ロキシン、 免疫グロ ブリ ン、 抗な - フエ ト プロ ティ ン、 β2 _Ηグロ ブリ ン、 ハプ ト グロ ビン、 ΗΒβ抗原、 な -マクログロブリ ン、 瘙胎児抗原、 抗 DN Α抗体、サル c: 'Π Τν モネ ラ 0抗原ト キ ソ プラズマ、 ト リ ヨ 一 サイ ロ -ン、 黄体形成ホルモン、 補体各成分成長ホルモ ン、 ィ ンフル ェンザウィ ルス、 ]¾疹抗体、 カナマイシン、 トブラマイ シン、 HBS抗体、 G EA、 フェ リ チン、 ガス ト リ ン、 - マイク πグロブリ ン、 ジゴキシン、 免疫グロブリ ン - E 、 G -ぺプチド、 グルカ ゴン、 G末竭グルカ ゴン、 モチリ ン、 セク レチン、 レニン、 プロ ラクチン、 卵 刺激ホル モン、 副胥皮質剌漦ホルモン等が例示される。 Examples of the biologically active substance of the group [E] used in the third medical analysis unit of the present invention include those described in the second medical analysis unit, that is, insulin. , Chorionic gonatotropin, prenatal lactogen, thyroid stimulating hormone, estradiol, estriol, progesterone, testosterone, cortisol, thyroxine, immunoglobulin, anti-Do - Hue door professional tee down, β 2 _Η Gros yellowtail down, hubs door globin, ΗΒ β antigen, Do - Makuroguroburi down,瘙胎children antigen, anti-DN Α antibody, monkey c: 'Π Τν Monet La 0 antigen preparative Kiso plasma, Application Benefits yo one silo - down, luteinizing hormone, complement components growth hormone, I Nfuru Enzawi Angeles,] ¾疹抗body, kanamycin, Toburamai Singh, HB S antibody, G EA, ferritin, gastrin,-microphone π-globulin, digoxin, immunoglobulin-E, G-peptide, glucagon, G-end glucagon, motilin, secretin, renin, prolactin, Examples include egg stimulating hormones, cortex-stimulating hormones, and the like.
このュ-ッ ト システムで使用する 〔F〕群ビュル系重合 性単量体としては、 ヒ ド ロキシェチルメ タ ク リ レー ト 、 ヒ ロキシェチルァク リ レー ト 、 ヒ ト *ロ キシプロ ビルメ タ ク リ レー ト 、 ヒ ト *ロ キシプロ ピル了ク リ レー ト 、 リ エチレングリ コールメタク リ レー ト 、 リエチレンダリ コ ールァク リ レー ト 、 メ ト キシ^ リ エチ レン グリ コール メタクリレート、 メ トキシ リエチレングリ コール了ク リ レー ト 、 アク リ ルア ミ ド、 Ν - ビ ル - 2 - ピロ リ ト， ン グリ シジルァク リ レー ト 、 グリ シジルメ タァク リ レー ト 、 ト リ エチレングリ コール、 ブタ ンジオールモノ了ク リ レー ト 、 エチレングリ コールジァク リ レー ト 、 才クチ ルメ タク リ レー ト 、 へキサンジオールモノ了ク リ レー ト 、 スチ レン等が例示される。  [F] group polymerizable monomers used in this cut system include hydroxyshetyl methacrylate, hydroxyshetyl acrylate, hydroxypropyl methacrylate, Hydroxypropyl acrylate, ethylene glycol methacrylate, ethylene diol glycol acrylate, methoxy ^ ethylene glycol methacrylate, meth oxyethylene glycol acrylate, Acrylamide, Ν-bil-2-pyrrolitol, glycidyl acrylate, glycidyl methacrylate, triethylene glycol, butandiol mono-ethylene acrylate, ethylene glycol diacrylate And hexane diol, hexanediol monochloride , Styrene Ren and the like.
前記のビ-ル系重合性単量体は遏冷却性であるので低 温でも大きい速度で重合し、 分子量の大きい重合体を生 成し、 また逼冷却性モ ノ マーは粘度が大きいので所望の 形状に成形し易くまた成形した形を崩したり変形したり することなく重合できる。 また生物活性物質をモノマー と共存させて低温で扱う場合逼冷却状態のモノマーはそ うでないモノマーに比べて生物活性物質の活性を損ねる ことが少ぃ。 The above-mentioned polymerizable monomer is polymerizable at a high rate even at a low temperature because of its cooling property, and produces a polymer having a large molecular weight. It is easy to mold into the shape of It can be polymerized without performing. In addition, when a bioactive substance is used at low temperature in the presence of a monomer, the monomer in a tightly cooled state is less likely to impair the activity of the bioactive substance than a monomer that does not.
本発阴の第三のュ-ットシステムで使用する〔&〕群支 持担体としてはセルロ ース鎩維、 合成钹維、 菘、 合成羝、 ブラスチックフィ ルム、 ガラス ビーズ、 ガラス鐵維、 ガ ラス板、 プラスチックビーズ、 鵜、 金属粒子、 金属メッ シュ、 金属祖、 天然高分子物質、 金属酸化物、 多孔性プ ラスチック、 生侔高分子物質、 ケィ酸塩物質、 等が例示 される。  [&] Group support carriers used in the third cut system of the present invention include cellulosic fibers, synthetic fibers, sulphones, synthetic fibers, plastic films, glass beads, glass fibers, glass fibers. Examples include a lath plate, plastic beads, cormorants, metal particles, metal meshes, metal powders, natural polymer substances, metal oxides, porous plastics, raw polymer substances, silicate substances, and the like.
本発钥の第三のュ-ッ トシステムを実施するに当って、 ビ-ル系重合性単量体は生物活性物貧の瑗衝溶液あるい は水溶液との系の 5 〜 8 0 56通常 2 0〜3 0 の量で 使用される。 該瑗衝溶液あるいは水溶液は浸潦、 スプレ 一噴霧、 はけ塗り等任意の手段により支持担体表面に塗 布される  In implementing the third cut system of the present invention, the bead-based polymerizable monomer is used in the form of a system with an aqueous solution of a poorly bioactive substance or an aqueous solution. Usually used in an amount of 20 to 30. The impact solution or aqueous solution is applied to the surface of the support by any means such as immersion, spraying, or brushing.
またこのュ-ッ トシステムを製造するにあたって採用 される線篛、 照射線量及び重合温度（すなわち照射温度） は前述の第一及び第二の医学分析用ュ-ッ トシステムを 製造する場合と同じである。  The radiation, irradiation dose, and polymerization temperature (ie, irradiation temperature) used in manufacturing this cut system are the same as those used in manufacturing the first and second medical analysis cut systems described above. It is.
更に本発钥の第四の医学分柝埒ュニッ トシステムは抗 原抗侔および補体などの生钕活性钕貧を小粒子状重合体 表面に担持した固定化物であり、 下記の〔H〕群より運ば れた生物活性物質と 〔I〕群より選ばれた逼冷却性を有す る疎水性の、 ビ -ール重合性単量体よりなる混合物を援 Furthermore, the fourth medical unit of the present invention is an immobilized product in which the production activity of antigens and complements is supported on the surface of a small particulate polymer, and the following [H] It has a biologically active substance carried from the group and a tight cooling property selected from the [I] group A mixture of highly hydrophobic, polymerizable monomers
拌し、 低温下で光または電齄性放射線を照射することに Stirring and irradiating light or electrical radiation at low temperature
よって表面に生物活性物質が固定化された粒子状の固定  Therefore, immobilization of particles with bioactive substance immobilized on the surface
化物を得るものである。 この第四のユニッ ト システムを To obtain a compound. This fourth unit system
製造する場合、 生物活性物質は水溶液、 緩衝溶液等の形 When manufactured, the biologically active substance may be in the form of an aqueous solution, buffer solution, etc.
態で使用されるが、 重合性単量体の瀵度は 3 0 - 7 0 * The polymerizable monomer has a concentration of 30-70 *
の範囲で粒子状の固定化物を得ることができるが、 好ま A particulate immobilized product can be obtained in the range of
しくは、 3 0〜 5 0 の濃度が良い。 この方法で粒子状 Specifically, a concentration of 30 to 50 is good. Particulate in this way
固定化物を得るために最も重要な点は琼水性単量体を用 The most important point for obtaining the immobilized product is
いることと、 単量体瀵度と照射温度の設定である。 本発 And setting of the monomer temperature and irradiation temperature. Departure
明で用いる鎳原は前述のュ-ッ ト システムの場合と同様 The fields used in the lighting are the same as in the case of the above-mentioned cut system.
であり、 高圧もしくは低圧水銀灯から可視紫外領域の光、 また電籬性放射籙は a鎳、 、 r線中性子線、 X線、 Light from the high or low pressure mercury lamp in the visible ultraviolet range, and the fog radiation 籙 is a 鎳, r, neutron, X-ray,
電子鎳、 原子炉からの混合放射線などでその線量範囲は The dose range for electron beams, mixed radiation from reactors, etc.
1 x 102〜 1 x 107 Rで、 好 ¾には 1 X 1 G4〜 1 X 107 R 1 x 10 2 to 1 x 10 7 R, preferably 1 X 1 G 4 to 1 X 10 7 R
の範囲である。 重合（照射）温度は室温以下一 1 9 ό C Range. Polymerization (irradiation) temperature is below room temperature.
に至るまで、 いかなる温度でもよいが好適には 0で乃至 Can be at any temperature, but preferably from 0 to
一 1 D 0 Cが用いられる。 One 1 D0C is used.
このュ-ッ ト システムの特長は低温下で固定化を行う  The feature of this cut system is that it is immobilized at low temperatures.
ため、 生物活性物質の活性を低下させることなく、 また Therefore, without reducing the activity of the biologically active substance,
— Sの固定化プロセスで表面に固定化された粒子状の固 — Particulate solids immobilized on the surface by the S immobilization process
定化物を得ることでありさらに、 単量体の濃度を変える Is to get the stabilization, and also to change the monomer concentration
ことによって、 粒子の大きさを調節することができる。 This allows the particle size to be adjusted.
またこの大きさは照射前の混合物の攪绊時間の調節によ This size is also controlled by adjusting the stirring time of the mixture before irradiation.
つても粒径を大巾に変えることができ、 この方法で粒子 In this way, the particle size can be greatly changed.
CMrl \ h'D Λ 径は 1 〜 5 0 0 -の範囲で自由に調節可能である。 一般 に免疫化学分析法の場合には 1 0 0〜 5 0 0 の程度の粒 子径が好適である。 本発明において単量体は疎水性を主 成分とするが親水性単量体を一部混合することにより、 粒子の硬さを詞節することも可能であり、 サスペンジョ ン重合が進行する条件であれば、 粒子状固定化物を得る ことができる。 この固定化物は酵素免疫分析法、 螢光度 免疫分析法及び放射免疫分析法等における一 ¾の免疫反 応だけでなくレセプター反応、 レクチン反応等の全ての 結合反応系を利用した臨床測定に使用することができ、 又これらの反応を利 ¾しての生理活性物質の分雜及び瘥 製に使用することができる。 CMrl \ h'D Λ The diameter is freely adjustable in the range of 1-500-. Generally, in the case of immunochemical analysis, a particle size of about 100 to 500 is suitable. In the present invention, the monomer has hydrophobicity as a main component, but by partially mixing a hydrophilic monomer, it is also possible to control the hardness of the particles, and under conditions where suspension polymerization proceeds. If so, a particulate immobilized product can be obtained. This immobilized product is used not only for one immunoreaction in enzyme immunoassay, fluorescence immunoassay, radioimmunoassay, etc. but also for clinical measurement using all binding reaction systems such as receptor reaction and lectin reaction. It can be used for the separation and preparation of a physiologically active substance utilizing these reactions.
本発 の第四のュ-ッ ト システムで使用される〔H〕群 の抗原抗体および補体などの生物活性物質としてはィン シュ リ ン、 弒毛性ゴナト * ト e ビン、 跆盤性ラク トゲン、 甲状鎳刺敎ホルモン、 エストラジオール、 エスト リオ一 ル、 プロ ゲステ π ン、 テス トステロン、 コーチゾール、 サイ ロキシン、 免疫グロ ブリ ン、 抗な -フエ ト ブロティ ン、 Λ2 - Ηグロブリ ン、 ハプト グロ ビン、 HBS抗原、 a -マクロ グロブリ ン、 瘙跆児抗原、 抗 D NA抗体、サルモ ネラ 0抗原、 トキソプラズマ、 ト リ ョート *サイ ロニン、 黄体形成モルモン、 補体各成分、 成長ホルモン、 イ ンフ ルェンザウ ィ ルス、 風褒抗体、 カナマイ シン、 トプラマ イ シン、 HBS抗体、 G EA、フエリ ケン、 ガス ト リ ン、 2 -マイクロ グ π ブリ ン、 ジゴキシン、 免疫グロ ブリ ン - E、 ペプチ 、 グルカ ゴン、 C末端グルカ ゴン、 モチ リ ン、 セク レチン、 レニン、 ブロ ラクチン、 郛跑萌 致ホルモン、 副胥皮質剌漦ホルモン、 等が具体的に例示 される。 The bioactive substances used in the fourth cut system of the present invention, such as antigens and antibodies of group [H] and complement, include insulin, hairy gonato * toebin, and discotic Lac Togen, thyroid鎳刺teaching hormone, estradiol, Est Rio one le, pro Gesute π emissions, testosterone, cortisol, rhino Rokishin, immune Gros yellowtail down, anti Do - Hue DOO Buroti emissions, lambda 2 - Eta globulin down, haptoglobulin globin, HB S antigen, a - macro globulin down,瘙跆infants antigen, anti-D NA antibodies, Salmo Nera 0 antigens, Toxoplasma, Application Benefits Yoto * Sai Ronin, luteinizing Mormon, complement components, growth hormone, inflationary Ruenzau i Angeles, wind褒抗body, kanamycin, Topurama Lee Shin, HB S antibody, G EA, Fueri Ken, gas extraction Li down, 2 - micro grayed π yellowtail down, Jigoki Down, immune glow yellowtail down -Specific examples thereof include E, pepti, glucagon, C-terminal glucagon, motilin, secretin, renin, brolactin, new stimulating hormone, and secondary X-cortical stimulating hormone.
又このユニッ ト システムで甩いる 〔I〕群の疎水性童合 性単量体は下記の一般式  The hydrophobic monomer of group [I] used in this unit system has the following general formula:
C
Figure imgf000019_0001
C
Figure imgf000019_0001
〔上式中、 Xは- H又は- GH3を表わし、 [In the above formula, X represents -H or -GH 3 ;
-β3Η20Η20¾ ( 7*> 2)又は -β3Η 2 0Η 2 0¾ (7 *> 2) or
表わし、 R2は- 0H, -GH3 又はR 2 is -0H, -GH 3 or
Figure imgf000019_0002
Figure imgf000019_0002
- G -CX = CH2 を表わす。 〕 - represents a G -CX = CH 2. ]
II  II
0 で示される。  Indicated by 0.
そして具侔的にはヒ ロキシブチル了ク リ レート、 ^ リ エチレングリ コールメ タク リ レー ト 、 グリ シジル了ク リ レー ト 、 ト リ エチレングリ コール了ク リ レー ト 、 へキ サメチレングリ コールメ タク リ レー ト 、 才クチルメ タク リ レー ト 、 ト リ メチロ ールプロパン ト リ アク リ レート、 テ ト ラメチロールメ タンテ ト ラァク リ レート、 へキサン '*1 More specifically, hydroxybutyl acrylate, ethylene glycol methacrylate, glycidyl methacrylate, triethylene glycol methacrylate, hexamethylene glycol methacrylate , Octylmethacrylate, trimethylolpropane triacrylate, tetramethylol methacrylate, hexane '* 1
、 メチレングリ コ一ルジ了ク リ レート、 ジエチレングリ コ ールジァクリ レート、 等が例示される。 , Examples include methylene glycol diacrylate, diethylene glycol diacrylate, and the like.
発明の実施をするための最良の形態  BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
以下実施例を掲げて本発钥をより具体的に^説する。 尚、 ，部" は重量基隼のそれである。 Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to examples. In addition, ", part" is that of Kutsuki Hayabusa.
_ 例 1  _ Example 1
抗 a -フエト ブロティン 1部、 リン酸瑗衝液 5 0部、 ヒ ロキシェチルメタクリ レート 5 0部を混合し、 これ を一 7 8 Cに冷却し、 この濃度に保ってコバルト ό 0よ り故射される r鎳を毎時 1 X 106R の線量率で 1時間照 射して重合せしめた。 このよ うにして得られた固定化物 を厚さ 2 0 にミクロ ト 一ムでカッ トし、 膜状固定化物 を得た。 あらかじめ希釈して調製したな - フエトプロテ イン標举液の 1 ccに固定化物 1枚ずつを入れ、 3 5 1：で 1時間反応させた。 ついで緩衝液で 2回洗浄した後パー ォキシダーゼで標識した抗 a - フエ ト プロテイ ン 1 ccに ¾浄した固定化物を人れ 3 5 Cで 1時間反応させた。 反 応後緩衝液で 3回固定化物を洗浄した。 ついで 0 -フエ 二レンジ了ミ ンジハイ ドロク ロ ライ ccに固定化物を 入れ、 5 0分間反応させた。 反応は 1 Ν - ΗΟί 3 ccを加 え俘止させた後吸光度（ 4 9 2 《) を測定した。 得られ た検量線はな - フエ トプロティ ンの濃度に比例した吸光 度を得ることができた。 A mixture of 1 part of anti-a-phytobrotin, 50 parts of phosphoric acid buffer solution and 50 parts of hiroxityl methacrylate was cooled to 178 C, and kept at this concentration to reduce cobalt コ バ ル ト 0. The irradiated r 鎳 was irradiated at a dose rate of 1 × 10 6 R / hr for 1 hour to polymerize. The immobilized product thus obtained was cut to a thickness of 20 with a microtome to obtain a film-shaped immobilized product. One immobilized product was added to 1 cc of the prepared protein solution prepared in advance by dilution, and the mixture was reacted at 351: 1: for 1 hour. Then, after washing twice with a buffer, the immobilized product purified with 1 cc of peroxidase-labeled anti-a-phytoprotein was reacted at 35 C for 1 hour. After the reaction, the immobilized substance was washed three times with a buffer solution. Then, the immobilized material was added to 0-phenylenedihydrochloride cc and allowed to react for 50 minutes. In the reaction, 3 cc of 1Ν-Ν was added and trapped, and then the absorbance (492 <<) was measured. From the obtained calibration curve, it was possible to obtain an absorbance proportional to the concentration of na-phytoprotein.
実 施 例 2 Example 2
抗ヒ ト I G 1 部、 リン酸緩衝液 ό 0部、 ヒ ロキシェ  Anti-human IG 1 part, phosphate buffer ό 0 part, Hirokishe
C-"rI チルァク リ レート 4 0部、 これを一 24 Cに冷却し、 こ の温度に保ってコパルト ό 0より放射される r線を毎時 1 X 106R の鎳量率で 1時間照射し重合せしめた。 この よ うにして得られた固定化物をミクロ トームで厚さ 1 0 にカッ トして膜状固定化物を得た。 あらかじめ調製し たヒ ト I G標準液の 1ccに固定化物 1枚ずつを入れ、 5 5 Cで 1時間反応させた。 ついで瑗衝液で 2回固定化 物を ¾浄した後、 パーォキシダーゼで標識した抗ヒ ト 1^ 1 ccに固定化物を入れ、 55 Cで 1時間反応させた。 反応後緩衝液で 3回固定化物を疣浄した。 ついで 0 - フ ェ-レンジアミ ンジハイ ト，ク ロ ライ ド 1 ccに固定化物を 入れ、 5 0分間反応させた。 1 N-HC で反応を停止し た後、 吸光度（ 492 》) を測定した。 ヒ ト I^G に 比例した吸光度を示し、 直線状の良い検量線が得られた。 実 施 伺 5 C- "rI Chillacrylate 40 parts, cooled to 124 C, kept at this temperature and irradiated with r-rays emitted from Copart パ ル 0 at a rate of 1 X 10 6 R / hr for 1 hour to polymerize . The immobilized material thus obtained was cut to a thickness of 10 with a microtome to obtain a film-shaped immobilized material. One immobilized product was placed in 1 cc of the previously prepared human IG standard solution, and reacted at 55 C for 1 hour. Subsequently, the immobilized product was washed twice with a buffer solution, and then the immobilized product was added to 1 ^ 1 cc of anti-human labeled with peroxidase, and reacted at 55 C for 1 hour. After the reaction, the immobilized product was washed three times with a buffer solution. Then, the immobilized material was added to 1 cc of 0-fermented amine height, chloride, and reacted for 50 minutes. After stopping the reaction with 1 N-HC, the absorbance (492 >>) was measured. The absorbance was proportional to human I ^ G, and a good linear calibration curve was obtained. Inquiry 5
抗 a - フエ ト プロテイ ン 1 X1CT3部、 ヒ ト盥清を含む リ ン酸緩衝液（ CL1 M ) 50部、 ヒ ロキシェチルメタク リ レー ト 4 0部および才クチルメタク リ レート 1 0部を 混合し、 この 2 を、 1 0«# x 150«のガラス 容器 にいれ攙拌後一 7 8 C 冷却し、 この温度下でコバルト — ό 0より放射される r鎳を 1 X 106R/ふ r の鎳量率で 1時間照射して重合せしめ固定化物を得た。 このよ う に して得られた固定化物を一 2 0 Cに冷却し厚さ 1 0 に ミク π トームで切り 薄膜状固定化物を得た。 この固定 化物を凍結乾燥した。 ついで、 あらかじめ希 して調整 した a -フヱ ト プロテイ ン標準液（5¾^ ， 20¾¾^,
Figure imgf000022_0001
200 , 50 o¾ w)をそれぞれ α 1 ccと り、 これを試験管にとり、 これに固定化物の 1枚をそれ ぞれ入れ、 25 Cで 1時間反応させた。 反応後固定化物 をと りだしリン酸瑷衝液 2 で 2回洗浄し、 ついでこれ をパーォキシダーゼで標識した抗 a -フエ ト プロテイ ン ( a2W) と で 1時間反応させた。 反応後、 リン 漦瑷銜液 2 で 3回疣浄した。 次に逼漦化水素 a 1 ίとAnti-a-phytoprotein 1 X1CT 3 parts, Phosphate buffer solution (CL1M) containing human basin 50 parts, Hiroxetil methacrylate 40 parts, and octyl methacrylate 10 parts , Mixed in a glass container of 10 «# x 150«, stirred and cooled at 1 78 C, and at this temperature, the r さ れ る emitted from cobalt — ό 0 was 1 X 10 6 R Irradiation was performed for 1 hour at a mass ratio of / f to obtain a polymerized product. The immobilized material thus obtained was cooled to 120 C and cut to a thickness of 10 with a Mic π tome to obtain a thin film-shaped immobilized material. This immobilized product was freeze-dried. Then, adjust it by diluting it in advance A-photoprotein standard solution (5¾ ^, 20¾¾ ^,
Figure imgf000022_0001
200 and 50 o¾w) were taken as α 1 cc, respectively, placed in a test tube, and one of the immobilized materials was placed in each of the tubes and reacted at 25 C for 1 hour. After the reaction, the immobilized product was removed and washed twice with a phosphate buffer solution 2, and then reacted with peroxidase-labeled anti-a-phytoprotein (a2W) for 1 hour. After the reaction, warts were performed three times with phosphoric acid mouth liquid 2. Next, pressurized hydrogen a 1
0 - フエ-レンジアミ ン塩羧塩 ό iとの混合溶液の 0.3 Wに固定化物を入れ 251：で 5 0分間反応させた後、 The immobilized product was added to 0.3 W of a mixed solution of 0-phenylenediamine salt 羧 saltόi and reacted at 251: 50 for 50 minutes.
1 Nの塩酸 3 ^で反応を停止させ、 比色分析を行った。  The reaction was stopped with 1N hydrochloric acid 3 ^, and colorimetric analysis was performed.
このよ うにして 1 0 以下の誤差內で直線性のよい検量 線が作成できた。 次に原発性肝癌の患者の血清中のな - フエ ト プロテイ ン濃度をこの検量線を用い、 前述した方 法に従い測定したところ 1 250¾> ^と決定された。 In this way, a calibration curve with good linearity was created with an error 內 of 10 or less. Next, the concentration of naphthoprotein in the serum of a patient with primary liver cancer was measured using this calibration curve according to the method described above, and was determined to be 1250¾> ^.
実 ½ 例 4 Example 4
ヒ ト新鲜血清より抽出し、 待製して得た Gi? 1 X10一4 部、 ヒ ト血清を含むリン酸瑗衡液 （ CL1 M) 50部、 N - ビ-ルー 2 - ピロ リ ン 50部および^リエチレングリ コールメタク リ レート 20部を炱く混合し、 これをガラ ス容器（ 5««# x100»)に 3 入れ、 全体を一 1 0 C に冷却し、 電子線加速器（ 2MeV, 2ΛΑ) からの電子籙 を 1 X 105Rノ eの籙量率で 1 0移間照射して重合せし めた。 重合後ガラス容器から重合物をと りだしこれを ? Extracted from human new鲜血Qing, Gi 1 X10 one 4 parts obtained by made wait, phosphoric acid瑗衡solution containing human serum (CL1 M) 50 parts, N - bi - Lu 2 - pyro Li down 50 And 20 parts of ethylene glycol methacrylate, put them in a glass container (5 «« # x100 »), cool the whole to 110 ° C, and use an electron beam accelerator (2MeV, 2ΛΑ). ) Was irradiated at a mass ratio of 1 × 10 5 R e for 10 transfer to polymerize. After polymerization, remove the polymer from the glass container and remove it.
— 20 Cでミクロ トームを用いて厚さ 1 0 Aに切り、 薄 — Cut to a thickness of 10 A with a microtome at 20 C, thin
C' "I ·--" 嫫状固定化物を得た。 この固定化物をリ ン酸緩衝液中に C '"I ·-" A 嫫 -shaped immobilized product was obtained. This immobilized product is placed in a phosphate buffer.
入れ、 固定化物を膨潤させた後、 真空凍結した。 Gigの After putting, the immobilized material was swollen and vacuum-frozen. Gig
検量籙の作成にあたっては aggr IgGを用い、 2 ン k、 In preparing the calibration 籙, aggr IgG was used.
1 50¾ ^、 100« 15 ^9/*i、 200  1 50¾ ^, 100 «15 ^ 9 / * i, 200
« 500¾ w の湊度につ 、てパー； ί·キシダーゼ標 «500¾ Minato degree, per par;
讒した抗ヒ ト I を使甩し、 餑素反応を行い、 検量線を A nitrogen reaction was performed using the slaughtered anti-human I, and a calibration curve was generated.
作成した。 実験誤差は 5 ^6の範囲内で直線性の良い齒線 Created. Experimental error is within 5 ^ 6, with good linearity
が得られた。 was gotten.
実 旅 例 5 Real trip example 5
抗 x -フエトプロティ ン 1 X1CT3部、 ヒ ト血请を含む Anti-x-fetoprotein 1 X1CT 3 parts, including human blood
り ン羧緩衝液（ αι 50部および 2 -ヒ ロキシプ π  Linn buffer (αι 50 parts and 2-hydroxy π
ピルメタクリ レー ト 1 0部を混合し、 これを 0.1 βの厚  Mix 10 parts of pill methacrylate.
さの合成羝の表面に塗布しこれを密封ガラス容器に入れ、 It is applied to the surface of the composite of sano and put in a sealed glass container.
一 78 Cに冷却し、 この温度下でコバル ト ό 0より放射 Cooled down to 78 C, radiated from cobalt ό 0 at this temperature
される r鎳を 1 X ICTR/Arの線量率で 1時間照射して重 Irradiated for 1 hour at a dose rate of 1 X ICTR / Ar
合せしめた。 照射によって得られた固定化合成菘は凍結 I combined. Immobilized synthetic Suzu obtained by irradiation is frozen
乾燥した。 ついで、 あらかじめ希^して詞整した a -フ Dried. Then, a-f
エ トブ πティン標準液（ 5 ^/m£t 26 n^ Ut 80 n^/ i , Etob π-tin standard solution (5 ^ / m £ t 26 n ^ U t 80 n ^ / i,
200
Figure imgf000023_0001
300 k をそれぞれ CL 1 試験管にと 200
Figure imgf000023_0001
300 k in each CL 1 test tube
り これに 10«2に切った固定化合成紙の 1枚をそれぞれ Each of the immobilized synthetic paper cut into 10 « 2
入れ、 25 Cで 1時間反応させた。 反応後、 固定化合成 And reacted at 25 C for 1 hour. After reaction, immobilized synthesis
羝をとりだし、 リ ン羧緩衝液 2 で 2回洗浄し、 ついで Take out the shaver and wash it twice with Ringer's buffer 2.
これを t 0 -ォキシダーゼで標霞した抗な -プロテイン This is an anti-protein that is hazed with t0-oxidase
( 0.2« ) と 37 Cで 1時間反応させた。 反応後、 リ ン  (0.2 «) and 37 C for 1 hour. After the reaction,
酸瑷衝液 2 で 5回洗浄した。 次に過酸化水素 α 1 ίと Washed 5 times with acid buffer 2. Next, hydrogen peroxide α 1 ί
し' 人 •Pr, ノ 0 - フエ-レンジアミ ン塩酸塩る <$との混合液の 0.3 W に固 化合成羝を入れ 2 5 Cで 3 8分間反応させた後、 1規定の塩酸（ 5^ )で反応を停止させ比色分析を行つ た。 このようにして 5 ^下の誤差内で直線性の良い検 量籙が作成できた。 次に原癸性肝癌の患者の血清中のな - フエトプロテイ ンの濃度をこの検量線を用い、 前述し た方法に従い分析したところ 840 と決定された。 実 _施 例 6 'Pr, ノ Pour the solidified mixture into 0.3 W of a mixture of 0-phenylenediamine hydrochloride and <$, react at 25 C for 38 minutes, and stop the reaction with 1N hydrochloric acid (5 ^). Colorimetric analysis was performed. In this way, a calibration 良 い with good linearity was created within an error of 5 ^. Next, the concentration of na-fetoprotein in the serum of patients with prototypic liver cancer was analyzed using this calibration curve according to the method described above and determined to be 840. Actual _ Example 6
癌胎児性抗原 1 X 10_3 部、 牛アルブミ ンを含むリ ン 酸緩衝液（ αι M ) 8 0部および^リエチレングリ コー ルメタクリ レー ト 2 0部を混合し、 これをプラスチック ビーズ表面に塗布し、 ガラス容器に人れ、 一 45 Cに冷 却し、 この温度下でコバルト 0より放射される r鎳を 1 X 10§R/Ar の線量率で 2時間照射して、 得られたビ —ズを真空凍結乾燥した。 このよ うにして得られたビー ズを用い 5 ηψ/τ&1〜 300 ノ の渙度範囲の GEA の検 量線の作成をしたところ、 直線性の良い、 曲鎳を得るこ とができた。 1 X 10_ 3 parts carcinoembryonic antigen, mixed-phosphate buffer (αι M) 8 0 parts and ^ Riechirenguri Coat Rumetakuri rate 2 0 parts containing bovine albumin, which was applied to a plastic bead surface In a glass container, cool to a temperature of 45 ° C and irradiate r さ れ る radiated from cobalt 0 at this temperature at a dose rate of 1 X 10§R / Ar for 2 hours. Was vacuum lyophilized. Using the beads obtained in this way, a calibration curve of GEA in the range of 5 ηψ / τ & 1 to 300 lysate was prepared, and a curve with good linearity was obtained.
実 施 例 7 Example 7
抗イ ンシュ リ ン 1 X 1 CT4部、 リ ン酸緩衝液 30部、 お よび 2 - ヒ ロ キシェチルァク リ レー ト 7 0部の混合液 をアク リルプラスチック膜（ CL 2«厚） の表面に塗布し た。 これを一 7 8 Cに冷却し、 電子籙加速器からの電子 線を 1 X I OSR/S の鎳量率で 1 0秒間照射し固定化膜 を得た。 この固定化膜を使用し、 イ ンシュ リ ンの検量線 を作成した。 操作手願は実施例 1 と同様にして行った。 A mixture of 4 parts of anti-insulin 1X1 CT, 30 parts of phosphate buffer, and 70 parts of 2-hydroxyl acrylate was applied to the surface of an acrylic plastic membrane (CL2 «thick). Coated. This was cooled to 178 C, and an electron beam from the electron accelerator was irradiated for 10 seconds at a mass rate of 1 XI OSR / S to obtain an immobilized film. Using this immobilized membrane, an insulin calibration curve It was created. The operation was performed in the same manner as in Example 1.
5 下の誤差内で 2 » /W〜500 n^ Wのィ ンシュリ ン濃度範囲で良い直線性の曲線が得られた。  5 A good linearity curve was obtained in the insulin concentration range from 2 »/ W to 500 n ^ W within the lower error.
¾ 一 8_  ¾ 1 8_
抗イ ンシュリ ン 1 X 10"*3部、 牛アルブミ ンを含む、 リ ン酸瑷衝液 80部、 ト リメチロールプロパント リァク リ レート 20部の混合液をガラス容器に入れ、 これをす ばやく拫と うし溶液をサスペンジョン状態にする。 つい で容器全体を一 78 Cに冷却し、 その温度下でコパルト ー00より放射される r線を 1 x106R/^r の線量率でAnti-insulin 1 x 10 "* 3 parts, including bovine albumin, 80 parts of phosphoric acid buffer, 20 parts of trimethylolpropane acrylate in a glass container拫 Bring the solution to a suspension state, then cool the whole vessel to 1 78 C, and at that temperature, radiate r-rays emitted from Copalto 00 at a dose rate of 1 x 10 6 R / ^ r.
1時間照射して重合せしめた。 照射重合後、 約 2 0 0 « の粒状固定化物を得た。 この粒拔固定化物の一定量をと り、 イ ンシュ リ ン測定用の検量線を作成した。 すなわち、 あらかじめ調整したィンシユリ ン標準液（ 5 ^/ml, 10 、 20 / π&, 30 η /isJi t 50 n^/ni t 80 n^ mit 100 r^/wit 150 ， 200 をそれぞれ 0.20Irradiated for 1 hour to polymerize. After the irradiation polymerization, about 200% of the particulate immobilized product was obtained. An aliquot of this fixed immobilized product was used to prepare a calibration curve for measuring insulin. That is, previously prepared Inshiyuri emissions standard solution (5 ^ / ml, 10, 20 / π &, 30 η / isJi t 50 n ^ / ni t 80 n ^ mi t 100 r ^ / wi t 150, 200 , respectively 0.20
^とり、 これに一定量の抗イ ンシュ リ ン固定化物を加え、 25 Cで 1時間反応せしめた。 反応後、 リ ン酸瑗衝液に て固定化物を 3回攪拌した。 ついでパーォキシダーゼで 標識した抗ィンシユリ ン溶液（ 0.2 ） を3 7 で 1時 間反応せしめた。 反応後、 リ ン酸緩衝液で 5回洗浄し、 次に過酸化水素 ι と 0 - フエ-レンジアミ ン塩漦塩 ό ί溶液との混合物の 0，5 に固定化物を入れ、 2 5 C で 5 0分間反応せしめた。 反応を 0.1 Ν塩酸 を 加え停止させた後、 492 » で比色分析を行い吸光度を 入.一 求めた。 これにより検量線を作成した結果、 インシユリ ン濃度が 5 » ^から 200 濃度範囲で良い直線 性が得られた。 Then, a fixed amount of the immobilized anti-insulin was added thereto, and reacted at 25 C for 1 hour. After the reaction, the immobilized product was stirred three times with a phosphoric acid buffer solution. Then, an anti-inulin solution (0.2) labeled with peroxidase was reacted with 37 for 1 hour. After the reaction, the mixture is washed 5 times with a phosphate buffer, and then the immobilized substance is added to 0,5 of a mixture of hydrogen peroxide l and 0-phenylenediamine saltίsalt solution at 25 C. The reaction was carried out for 50 minutes. After stopping the reaction by adding 0.1 Ν hydrochloric acid, perform colorimetric analysis with 492 »and enter the absorbance. I asked. As a result, a calibration curve was prepared. As a result, good linearity was obtained when the concentration of inulin was in the range of 5 »^ to 200.
実 施 例 9 Example 9
抗な -フエ ト プロテイ ン 1 X 1CT4部、 ヒ ト血淸を含 むリ ン酸瑗衝液（ 0·1Μ) 50部、 ト リメチロールプロパ ン ト メタクリ レー ト 20部の混合液をガラス容器に入 れ、 これを振とうし、 すばやく容器を一 78 Cに冷却し その温度下でセシユウムー 1 57より放射される r鎳を 2 X 105R/A の線量率で 4時間照射し重合せしめた。 この方法により約 1 0 の粒状固定化物を得た。 この固 定化物を用い、 原発性肝癌の患者の血清中のな -フエト プロテイ ン濃度を測定した。 A glass container containing a mixture of 4 parts of anti-phytoprotein 1 X 1CT, 50 parts of phosphoric acid buffer solution containing human blood (0.1 ·), and 20 parts of trimethylolpropane methacrylate And shake it, quickly cool the container to 1 78 C and irradiate the r 鎳 emitted from the Cesium-157 at that temperature for 4 hours at a dose rate of 2 X 10 5 R / A to polymerize. Was. By this method, about 10 granular immobilized products were obtained. The immobilized product was used to measure the concentration of n-fetoprotein in the serum of patients with primary liver cancer.
あらかじめ作成した検量線を用い、 1200 π と求め られた 。この値は他の放射免疫分析法により求めた値 1 170 » メ とよい一致を示した。 Using a previously prepared calibration curve, it was determined to be 1200π. This value was in good agreement with the value determined by another radioimmunoassay, 1 170 »me.
産業上の利用可能性  Industrial applicability
以上説明したように本発明の医学分析甩ュ -ッ トシス テムは血液あるいは体液中の抗原や抗体を捕集分析し、 診新や臨床検査並びに生理活性の分餻精製等に広く利用 することができる。  As described above, the medical analysis kit system of the present invention collects and analyzes antigens and antibodies in blood or body fluids, and can be widely used for new medical examinations, clinical tests, and separation and purification of biological activities. it can.

Claims

請 求 の 範 囲 The scope of the claims
1. 重合体マト リ グクスおよび該マト リ ックス中に分 ¾ 固定された抗原あるいは抗体から成る医学分析用ュ-ッ  1. A medical analytical kit consisting of a polymeric matrix and an antigen or antibody immobilized in the matrix.
ト システム 0 G System 0
2. 重合性単量体と抗原あるいは抗体とを混合し、 常温 以下の温度にて所望の形状に成形加工し、 常温以下の温 度に保って光もしくは電離性放射線を照射して重合性単 量 を重合せしめ抗原あるいは抗体を重合体に固定させ ることを特徴とする医学分析用ュ-タ ト 5 ステムの製造 方法。  2. Mix the polymerizable monomer with the antigen or antibody, mold it into a desired shape at room temperature or lower, and irradiate it with light or ionizing radiation at room temperature or lower to polymerize it. A method for producing a tuft 5 stem for medical analysis, comprising polymerizing an amount and immobilizing an antigen or an antibody on a polymer.
3. 重合性単量体がビ-ル系重合性举量体である請求の 範囲第 2項記载の方法。  3. The method according to claim 2, wherein the polymerizable monomer is a polymerizable polymer monomer.
4. ル系重合性単量体が遏冷却性重合性単量体と非 遏冷却'重合性卑量铱との混合単量体である請求の範囲第  4. The polymerizable monomer according to claim 1, wherein the polymerizable monomer is a mixture of a cooling polymerizable monomer and a non-cooling polymerizable base.
3項記載の方法。 The method according to item 3.
5. 重合性举量体が遏^却性ビュル系重合性单量体と非  5. The polymerizable monomer is not compatible with the controllable bullet polymerizable monomer.
遏冷却性重合性単量体との混合単量体である請求の範囲 第 2項記載の方法 0 The method of mixing claims second term, wherein the monomer of the遏cooling polymerizable monomer 0
6. 抗原あるいは抗体を緩衝溶液あるいは水 液の形態 で使 ffiする請求の範囲第 2項記載の方法。  6. The method according to claim 2, wherein the antigen or antibody is used in the form of a buffer solution or an aqueous solution.
7. 少くとも 2種類以上のビ- 系熏合性単量体から成 る共重合体に分散固定された抗原あるいは抗体から成る 医学分析用ュ-プ ト システム。  7. A medical analysis system consisting of an antigen or antibody dispersed and immobilized on a copolymer composed of at least two types of bead-free monomers.
8. 抗原あるいは抗体を 2種類以よの異つたビュル系重 合性卑量体と混合し光または ¾ 性放射線を照射して該  8. Mix the antigen or antibody with two or more different polymer-based polymer bases and irradiate them with light or actinic radiation.
，？、 EA · ·- '■ '' ， 単量体を共重合せしめ抗原あるいは抗体を該共重合体に 分散固定させることを特徵とする医学分析用ュ-ッ トシ ステムの製造方法。 ,? , EA · ·-'■'', A method for producing a medical analysis cut system, comprising copolymerizing monomers and dispersing and fixing an antigen or an antibody to the copolymer.
9. 抗原あるいは抗体を瑷衝溶液または水溶液の彤態で 使用する請求の範囲第 8項記載の方法。  9. The method according to claim 8, wherein the antigen or antibody is used in the form of a collision solution or an aqueous solution.
10. 光または電離性放射線の照射を室温乃至一 1 9 6 C、 好ましくは 0 C乃至一 1 0 0 Cで行う請求の範囲第 2項 12载の方法。  10. The method according to claim 2, wherein the irradiation of light or ionizing radiation is performed at room temperature to 110 C, preferably at 0 C to 110 C.
11. ミクロ トームで数 1〜数 1 0 »の厚さの薄切片の 形杖にされた請求の範囲第 7項記載の医学分析用ュ-ッ ト システム 0 11. The medical analysis kit system 0 according to claim 7, wherein the microtome is formed into a thin section shaped stick having a thickness of 1 to 10 ».
12. 重合性単量体および抗原あるいは抗体から成る混 合物を支持担侓表面に塗布し光または電離性放射線を照 射して重合性単量体を重合せしめ抗原あるいは抗体を支 持担体表面に固定することを特徵とする医学分析用ュ- ッ トシステムの製造方法。  12. A mixture consisting of a polymerizable monomer and an antigen or antibody is applied to the support surface, and irradiated with light or ionizing radiation to polymerize the polymerizable monomer and the antigen or antibody is supported on the carrier surface. A method for producing a medical analysis cut-out system, which is characterized in that it is fixed to a medical device.
13， 重合性単量侔がビ-ル系重合性単量体である請求- の範囲第 1 2項記载の方法。  13. The method according to claim 12, wherein the polymerizable monomer is a polymerizable monomer.
14. ビ-ル系重合性単量体が遏冷却性重合性単量体で ある請求の範囲第 1 3項記載の方法。  14. The method according to claim 13, wherein the polymerizable monomer is a cooling polymerizable monomer.
15. 抗原あるいは抗体を緩衝溶液あるいは水溶液の形 態で使用する請求の範囲第 1 2項記載の方法。  15. The method according to claim 12, wherein the antigen or antibody is used in the form of a buffer solution or an aqueous solution.
16. 光または電離性放射線の照射を室温乃至一 1 9 6 Cで行う請求の範囲第 1 2項記载の方法。  16. The method according to claim 12, wherein the irradiation of light or ionizing radiation is performed at room temperature to 1196 C.
17. 光または電雜性放射線の照射を 0 C乃至一 1 0 0 でで行う請求の範囲第 1 2項記載の方法。 17. Irradiation of light or electrical radiation from 0 C to 1 100 The method according to claim 12, wherein the method is performed by:
18 . 重合性举量体の量が混合物の重量当り 5〜8 0 ίί， 好ましくは 2 0 〜る 0 である請求の範囲第 1 2項記载 の方法。  18. The process according to claim 12, wherein the amount of polymerizable monomer is from 5 to 80, preferably from 20 to 0, per weight of the mixture.
δδ
19 . 抗原あるいは抗体を固定した球状重合体固定化称 19. Spherical polymer immobilized antigen or antibody
から成る医学分柝用ュ二ッ ト システム。  A unit system for medical analysis consisting of:
20 . 抗原あるいは抗体と遏冷却性葳水性重合性単量体 から成るサスペンジョ ンに低温で光または電雔性放射線 を照射して球钛重合体表面 抗原あるいは抗体を固定化  20. Irradiation of the suspension consisting of the antigen or antibody and the cooling / water-based polymerizable monomer at low temperature with light or electric radiation to immobilize the antigen / antibody on the spherical polymer surface
10 することを特徴とする抗原あるいは抗体を固定した球状  10 A spherical shape on which an antigen or antibody is immobilized.
重合体固定化 ¾からなる医学分析用ュ-ッ ト システムの 製造方法。  A method for producing a medical analysis cutout system comprising a polymer immobilized ¾.
21 . 重合性単量体の溱度 サスペン 'ジョンの重量当り δ 0〜7 0 ーセン トである請求の範囲第 2 0項記载の  21. The method according to claim 20, wherein the concentration of the polymerizable monomer is δ 0 to 70-cent per weight of the suspension.
15 方法。  15 ways.
22 . 光または電離性放射線の照射を室温乃至一 1 9 6 でで実施する請求の範囲第 2 0項記載の方法。  22. The method according to claim 20, wherein the irradiation with light or ionizing radiation is carried out at room temperature to 1196.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5998534A (en) * 1998-06-19 1999-12-07 Ppg Industries Ohio, Inc. Water-soluble or water-dispersible addition copolymer

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS50157587A (en) * 1974-06-15 1975-12-19
JPS5170811A (en) * 1974-10-16 1976-06-18 Sjoholm Ingvar Goesta Holger
JPS5417116A (en) * 1977-05-11 1979-02-08 Chandon Investment Planning Polymer base for immobilizing antibody

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS50157587A (en) * 1974-06-15 1975-12-19
JPS5170811A (en) * 1974-10-16 1976-06-18 Sjoholm Ingvar Goesta Holger
JPS5417116A (en) * 1977-05-11 1979-02-08 Chandon Investment Planning Polymer base for immobilizing antibody

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5998534A (en) * 1998-06-19 1999-12-07 Ppg Industries Ohio, Inc. Water-soluble or water-dispersible addition copolymer

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