DE2712786C2

DE2712786C2 -

Info

Publication number: DE2712786C2
Application number: DE2712786A
Authority: DE
Inventors: Robert James Tadworth Surrey Gb Bywater
Original assignee: BEECHAM GROUP Ltd BRENTFORD MIDDLESEX GB
Current assignee: BEECHAM GROUP Ltd BRENTFORD MIDDLESEX GB
Priority date: 1976-03-27
Filing date: 1977-03-23
Publication date: 1989-05-18
Also published as: NL184666C; AU510209B2; NZ183492A; DK134377A; ZA771409B; NL184666B; FR2345155B1; IE45026B1; DE2712786A1; FR2345155A1; IE45026L; AU2361977A; CA1075157A; US4164568A; HK62984A; NL7703128A; DK166430B1

Description

Die Erfindung betrifft ein Veterinärpräparat für die Behandlung von Diarrhöe, z. B. Rinderruhr, in Haustieren.

Eine verbreitete und sehr schwächende Krankheit bei jungen Haustieren, wie Kälbern und Ferkeln, ist die Diarrhöe, die zu schwerer Dehydration führt, die wiederum für einen beträchtlichen Gewichtsverlust des Tieres und in schweren Fällen zu dessen Tod führen kann. Sehr häufig sind für die Diarrhöe-Symptome Toxine bakeriellen Ursprungs verantwortlich, so daß man zur Behandlung der Diarrhöe antibakterielle Mittel verabreicht. Beachtliche Erfolge erhält man durch Verabreichung von antibakteriellen Mitteln, wie Ampicillin oder Amoxycillin; in einigen Fällen jedoch ist eine andere Therapie notwendig. Gemäß der US-PS 38 98 328 ist ein Präparat, das Glycin als Aminosäure, Glukose und gegebenenfalls Elektrolyte, wie z. B. ein Citrat, enthält, bei der Behandlung der Rinderruhr durch Rehydratation des befallenen Tieres sehr erfolgreich.

Bei einem solchen Präparat ist es wesentlich, daß es Glycin und Glukose in bestimmten Mengenbereichen enthält, während die Art der gegebenenfalls mitverwendeten Elektrolyte nicht festgelegt ist und es nur auf den Gehalt an Ionen an sich ankommt.

Es hat sich jedoch in der Praxis gezeigt, daß der mittels des bekannten Präparates erzielbare Rehydratationsgrad nicht immer zufriedenstellend ist.

Aufgabe der Erfindung war es daher, ein Präparat zur Verfügung zu stellen, welches eine erhöhte Rehydratation ermöglicht.

Es war weiterhin Aufgabe der Erfindung, ein neues Präparat zur Verfügung zu stellen, das nicht nur bei der Behandlung der Diarrhöe, z. B. der Rinderruhr, sehr wirkungsvoll ist, sondern auch noch leicht zu konfektionieren, von gutem Geschmack und stabil ist.

Die Erfindung betrifft daher ein Veterinärpräparat, das durch einen Gehalt an 40 bis 80 Gewichtsprozent eines aktiv absorbierbaren Monosaccharids, 7,5 bis 30 Gewichtsprozent einer aktiv absorbierbaren, natürlich vorkommenden Aminosäure und 0,5 bis 10 Gewichtsprozent Zitronensäure oder deren Salz, jeweils bezogen auf die Gesamtmenge, gekennzeichnet ist, mit der Maßgabe, daß bei Anwesenheit eines Zitronensäuresalzes die Menge an Aminosäure 13% nicht übersteigt.

Es ist überraschend, daß durch das Zusammenwirken von Zitronensäure und/oder einem Citrat mit in engen Konzentrationsgrenzen gehaltenen Mengen an einer Aminosäure ein besonderer technischer Effekt erzielt wird (vgl. den nachstehenden Versuchsbericht).

Die aktive Absorption (oder aktiver Transport) ist an sich bekannt und in Standardwerken, wie Guyton "Medicinal Physiology", Seiten 769 bis 771, 4. Auflage, W. B. Saunders and Company, Philadelphia, V.St.A., beschrieben. Ob ein bestimmtes Monosaccharid oder eine bestimmte Aminosäure aktiv absorbiert werden, kann man leicht durch Versuche feststellen, z. B. gemäß T. H. Wilson in "Intestinal Absorption", Saunders and Company, Philadelphia, V.St.A., 1962.

Um aktiv absorbierbar zu sein, müssen Monosaccharide a) mindestens 6 Kohlenstoffatome, b) eine D-Pyranose-Ringstruktur und c) eine intakte Hydroxylgruppe am Kohlenstoff 2 haben. Geeignete Monosaccharide für das erfindungsgemäße Präparat sind natürlich vorkommende D-Pyranosen, wie Glukose und Galactose, sowie natürlich vorkommende D-Pyranosen, die chemisch verändert wurden, die Strukturbedingungen a), b) und c) jedoch noch besitzen, wie D-Pyranosen, die mit Acylresten mit 2 bis 7 Kohlenstoffatomen acyliert oder mit Alkylresten mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen alkyliert worden sind, z. B. Acetyl-, Methyl-, Äthyl-, n-Propyl- und Isopropylderivate. Spezielle Beispiele sind α-Methylglukosid, 3-O-Methylglukose und 6-Desoxygalaktose.

Für das erfindungsgemäße Präparat bevorzugt sind Glukose oder Galaktose, insbesondere Glukose, z. B. Dextrose. Die Stabilität des erfindungsgemäßen Präparats wird durch die Verwendung eines wasserfreien Monosaccarids, z. B. wasserfreier Glukose, erhöht.

Geeignete Beispiele für aktiv absorbierbare, natürlich vorkommende Aminosäuren sind neutrale Aminosäuren, wie Glycin und Alanin, und basische Aminosäuren, wie Arginin. Bevorzugt ist Glycin.

Normalerweise enthält das erfindungsgemäße Veterinärpräparat 10 bis 25 Gewichtsprozent Elektrolyte, z. B. Salze, die Natrium-, Kalium-, Calcium-, Magnesium-, Chlorid-, Phosphat-, Glukonat-, Sulfat-, Bicarbonat und Carbonationen enthalten. Bevorzugte Elektrolyte sind Kaliumdihydrogenphosphat, Dikaliumhydrogenphosphat, Trikaliumphosphat und Kaliumchlorid, wobei Kaliumdihydrogenphosphat besonders geeignet ist.

Als Elektrolyt besonders bevorzugt ist Natriumchlorid, das im allgemeinen in einer Menge von 7 bis 20 Gewichtsprozent, z. B. 10 bis 16 Gewichtsprozent, jeweils bezogen auf die Gesamtmenge, verwendet wird.

Zweckmäßigerweise beträgt die Menge an Monosaccharid im erfindungsgemäßen Präparat 50 bis 75 Gewichtsprozent, z. B. 60 bis 65 Gewichtsprozent, insbesondere mindestens 65 Gewichtsprozent. Entsprechend beträgt die Menge an Aminosäure 7,5 bis 20 Gewichtsprozent, z. B. 8 bis 15 Gewichtsprozent. Eine Menge von 8 bis 12 Gewichtsprozent Aminosäure ist besonders geeignet.

Die Menge an Zitronensäure im erfindungsgemäßen Präparat beträgt zweckmäßigerweise 0,5 bis 5 Gewichtsprozent, vorzugsweise 0,5 bis 2 Gewichtsprozent, z. B. 0,6 bis 1,2 Gewichtsprozent. Häufig enthält das erfindungsgemäße Arzneipräparat sowohl Zitronensäure als auch deren Salz, wobei jedoch die Kombination von Zitronensäure und deren Salz nicht über 10% der Gesamtmenge ausmachen darf. Geeignete Zitronensäuresalze sind Natrium- und Kaliumsalze, wie Mono-, Di- oder Trinatrium- oder Mono-, Di- oder Trikaliumcitrat. Oft enthält das Präparat 0,1 bis 5 Gewichtsprozent, vorzugsweise 0,1 bis 0,5 Gewichtsprozent, Zitronensäuresalz.

Ein besonders geeignetes erfindungsgemäßes Veterinärpräparat enthält daher 50 bis 75 Gewichtsprozent Glukose oder Galaktose, 7,5 bis 20 Gewichtsprozent Glycin, Alanin oder Arginin, 0,5 bis 10 Gewichtsprozent Zitronensäure und 7 bis 20 Gewichtsprozent Natriumchlorid sowie gegebenenfalls 0,5 bis 5 Gewichtsprozent, vorzugsweise 0,1 bis 0,5 Gewichtsprozent, Zitronensäuresalz.

Ein weiteres geeignetes erfindungsgemäßes Veterinärpräparat ist durch einen Gehalt an 40 bis 80 Gewichtsprozent eines aktiv absorbierbaren Monosaccharids, 7,5 bis 13 Gewichtsprozent einer aktiv absorbierbaren, natürlich vorkommenden Aminosäure und 0,5 bis 10 Gewichtsprozent eines Zitronensäuresalzes, jeweils bezogen auf die Gesamtmenge, gekennzeichnet.

Die Menge an Zitronensäuresalz beträgt zweckmäßigerweise 0,5 bis 5 Gewichtsprozent, vorzugsweise 0,5 bis 2 Gewichtsprozent, z. B. 0,6 bis 1,2 Gewichtsprozent. Geeignete Zitronensäuresalze sind Natrium- und Kaliumsalze, wie das Mono-, Di- oder Trinatrium- oder Mono-, Di- oder Trikaliumcitrat.

Besonders geeignet ist somit ein Präparat, das 50 bis 75 Gewichtsprozent Glukose oder Galaktose, 7,5 bis 13 Gewichtsprozent Glycin, Alanin oder Arginin, 0,5 bis 10 Gewichtsprozent, insbesondere 0,5 bis 5 Gewichtsprozent eines Zitronensäuresalzes und 7 bis 20 Gewichtsprozent Natriumchlorid enthält.

Bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Präparat, das 60 bis 75 Gewichtsprozent Glukose, 8 bis 12 Gewichtsprozent Glycin, 0,5 bis 2 Gewichtsprozent Zitronensäuresalz, 10 bis 16 Gewichtsprozent Natriumchlorid und gegebenenfalls 5 bis 10 Gewichtsprozent Kaliumdihydrogenphosphat enthält.

Auch diese Präparate enthalten zweckmäßig mindestens 65 Gewichtsprozent Monosaccharid.

Gegebenenfalls können die erfindungsgemäßen Veterinärpräparate in herkömmlicher Weise noch andere Substanzen enthalten, wie Vitamine, Mineralstoffe, puffernde Substanzen und Excipientien.

Im allgemeinen liegt das erfindungsgemäße Präparat in Form eines trockenen Pulvers vor, das z. B. leicht in Wasser löslich ist. Gelegentlich liegt das erfindungsgemäße Präparat jedoch auch als wäßrige Lösung vor.

Das erfindungsgemäße Veterinärpräparat wird durch Vermischen der einzelnen Bestandteile in herkömmlicher Weise hergestellt. Nach dem Vermischen wird das Präparat in Sachets oder andere herkömmliche Behälter eingefüllt. Häufig ist es günstig, das Monosaccharid von den andern Bestandteilen des Präparats zu trennen, z. B. durch Verwendung von Doppelsachets oder anderen Doppelbehältern. Die Bestandteile des Präparats, außer dem Monosaccharid, werden gemischt und in die eine Hälfte des Doppelsachets und das Monosaccharid in die andere Hälfte des Doppelsachets eingefüllt. In dieser Form ist das erfindungsgemäße Präparat besonders stabil.

Im allgemeinen wird das erfindungsgemäße Präparat dem mit Diarrhöe befallenen Tier in Form einer wäßrigen Lösung oral verabreicht. Diese Lösungen enthalten das erfindungsgemäße Präparat in einer Menge von 20 bis 45 g/Liter, insbesondere 25 bis 35 g/Liter, z. B. 30 g/Liter. Kälber erhalten im allgemeinen mindestens 2 bis 4 Liter pro Tag, wogegen man an Ferkel 250 bis 1000 ml pro Tag verabreicht. Die Lösungen können entweder ad libitum, in zwei bis vier oder mehr gleichen Dosen pro Tag oder in jeder anderen herkömmlichen Weise verabreicht werden.

Bei schwer erkrankten Tieren ist es oft angebracht, zusätzlich zu dem erfindungsgemäßen Präparat ein antibakterielles Mittel zu verabreichen. Beispiele für diesen Zweck geeigneter antibakterieller Mittel sind Ampicillin, Amoxycillin und Tetracycline.

Die guten Absorptionseigenschaften der erfindungsgemäßen Präparate in flüssiger Form gestatten ihre Verwendung auch dort, wo die Flüssigkeitsabsorption bei Tieren ein Problem ist. So kann man das erfindungsgemäße Präparat auch zur Behandlung der allgemeinen Dehydratation nach Operationen bei Tieren, wie Hunden und Katzen, verwenden. Auch bei gestreßten Tieren, wie gerade gekauften Kälbern, ist das erfindungsgemäße Präparat von Vorteil. Seine größte Wirkung jedoch zeigt das erfindungsgemäße Veterinärpräparat bei der Behandlung von Diarrhöe bei Kälbern.

Die Beispiele erläutern die Erfindung.

Beispiel 1

Durch Vermischen der folgenden Bestandteile in Form eines trockenen Pulvers wird 1 kg erfindungsgemäßes Präparat hergestellt:

Bestandteile
Menge (%)
Glycin
10,3
Dextrose (wasserfrei)	67,6
Natriumchlorid	14,3
Kaliumdihydrogenphosphat	6,8
Zitronensäure	0,8
Trikaliumcitrat	0,2

60 g dieses Präparats werden dann in 2 Liter Wasser aufgelöst.

Beispiel 2

Aus den folgenden Bestandteilen wird gemäß der Arbeitsweise von Beispiel 1 ein Präparat hergestellt:

Bestandteile
Menge (%)
Glycin
10
Dextrose (wasserfrei)	72
Natriumchlorid	10
Zitronensäure	5
Trikaliumcitrat	3

60 g dieses Präparats werden dann in 2 Liter Wasser aufgelöst.

Beispiel 3

Für die Lagerung wird das Präparat des Beispiels 1 hergestellt, die Dextrose (676 g) wird jedoch in einen Behälter und die übrigen Bestandteile (324 g) werden in einen zweiten Behälter eingefüllt.

Beispiel 4 (Vergleichsbeispiel)

Die akute Absorption des Präparats des Beispiels 1 (im folgenden als Präparat J bezeichnet) wird mit einem Handelspräparat X der folgenden Zusammensetzung verglichen:

Bestandteile
Menge (Gewichtsprozent)
Natriumchlorid
11,6
Calciumgluconat	2,2
Magnesiumsulfat	0,6
Kaliumdihydrogenphosphat	8,7
Glycin	21,2
Dextrose (wasserfrei)	55,7

Das Präparat X entspricht dem Präparat 1 des Beispiels 2 der US-PS 38 98 328. Die Präparate J und X werden zu isotonischen wäßrigen Lösungen mit einer Konzentration von etwa 300 mMol/kg aufgelöst. Als Kontrolle wird isotonische Natriumchloridlösung verwendet.

Kälber mit Rinderruhr werden anästhesiert. Entlang des Dünndarms werden bei verschiedenen Punkten, z. B. bei etwa 10, 30, 50, 70 und 90% der Distanz vom pylorischen Schließmuskel zur ileozäkalen Klappe Ligaturen angebracht. In diese Schlingen werden die zu untersuchenden Lösungen eingespritzt. Die Bewegung des Wassers wird anhand von Phenolrot-Konzentrationsbestimmungen verfolgt.

Die Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle 1 zusammengefaßt.

Tabelle 1

Diese Ergebnisse zeigen, daß Kälber mit Rinderruhr das Wasser aus dem Präparat J deutlich schneller aufnehmen als aus der Natriumchloridlösung (p < 0,01) oder aus Präparat X (p < 0,05, Varianzanalyse).

Beispiel 5

Durch Vermischen der folgenden Bestandteile wird 1 kg Präparat in Form eines trockenen Pulvers hergestellt:

Bestandteile
Menge (%)
Glycin
10,3
Dextrose (wasserfrei)	67,6
Natriumchlorid	14,3
Kaliumdihydrogenphosphat	6,8
Trikaliumcitrat	1,0

60 g dieses Präparats werden in 2 Liter Wasser aufgelöst.

Beispiel 6

Gemäß der Arbeitsweise von Beispiel 5 werden folgende Bestandteile miteinander vermischt:

Bestandteile
Menge (%)
Glycin
10
Dextrose (wasserfrei)	72
Natriumchlorid	10
Trikaliumcitrat	8

60 g dieses Präparats werden in 2 Liter Wasser aufgelöst.

Beispiel 7

Für die Lagerung wird ein Präparat gemäß Beispiel 5 hergestellt, die Dextrose (676 g) wird jedoch in den einen Behälter, die übrigen Bestandteile (324 g) werden in einen zweiten Behälter eingefüllt.

Beispiel 8

Zu 60 g des Präparats des Beispiels 1 werden 400 mg Amoxycillin zugesetzt.

Beispiel 9

Durch Vermischen der folgenden Bestandteile in trockener Pulverform werden jeweils 1 kg der Präparate D, I und G hergestellt:

Versuchsbericht

Es wurden zunächst jeweils 100 g Trockenpräparat von den in Tabelle 2 angegebenen Zusammensetzungen hergestellt, wobei es sich um zwei erfindungsgemäße Zusammensetzungen und zwei Vergleichszusammensetzungen gemäß dem Stand der Technik handelt.

Tabelle 2

Die in der Tabelle angegebenen Mengen der Trockenpräparate wurden jeweils in 1 Liter Wasser gelöst.

Die Dosierungsmengen für die beiden erfindungsgemäßen Zusammensetzungen ergeben sich aus den vorstehenden Angaben in der Beschreibung als Mittelwerte der dort genannten Bereiche. Die Dosierungsmenge für Präparat X ergibt sich aus der Anweisung auf der in Großbritannien vertriebenen Verkaufspackung der Inhaberin des US-Patentes Nr. 38 98 328.

Die Dosierungsmenge für die "Test Diet Composition" ergibt sich aus den Angaben in Beispiel 1 der US-PS.

Kälber mit Rinderruhr wurden anästhetisiert, und längs des Dünndarms wurden in gleichen Abständen an 5 Punkten zwischen dem pylorischen Schließmuskel und der ileozäkalen Klappe Ligatoren angebracht, und dadurch entstanden 4 Schlingen von jeweils etwa 12 cm Länge.

In diese Schlingen wurden jeweils 11 ml je einer der Testlösungen zusammen mit nicht absorbierbarem Polyäthylenglykol 4000 als Markierungsmittel eingespritzt. Unmittelbar nach jeder Einspritzung wurde der Schlingeninhalt durchgemischt und 1 ml zur Bestimmung der Konzentration des Markierungsmittels entnommen.

Nach 30 Minuten wird jede Schlinge entleert und die Veränderung des Flüssigkeitsvolumens durch Vergleich der Konzentration des Markierungsmittels sofort nach dem Einspritzen und nach Ablauf der 30 Minuten bestimmt. Außerdem wurden die Volumina der Schlingeninhalte auch direkt gemessen.

Die Ergebnisse sind nachstehend in Tabelle 3 zusammengestellt, und zwar anhand der Zahlenwerte für die mittlere Wasserabsorption im Dünndarm (ml/30 min/cm) ± Standardabweichung. Ein negativer Absorptionswert entspricht einer Sekretion in den Dünndarm.

Tabelle 3

Die in Klammern gesetzten Zahlenwerte geben die Anzahl der Messungen an.

Die Ergebnisse wurden bezüglich ihrer Signifikanz mittels gepaartem Student "t"-Test analysiert.

Es zeigte sich dabei, daß die erfindungsgemäßen Präparate signifikant höhere Wasserabsorptionswerte ergaben als die beiden Vergleichspräparate (Präparat Spalte 1 im Vergleich zu Präparat Spalte 3: p < 0,001 - Präparat Spalte 1 im Vergleich zu Präparat Spalte 4: p < 0,005 - Präparat Spalte 2 im Vergleich zu Präparat Spalte 3: p < 0,02 und Präparat Spalte 2 im Vergleich zu Präparat Spalte 4: p < 0,01).

Hierdurch wird die Überlegenheit der erfindungsgemäßen Präparate gegenüber den Präparaten der US-PS 38 98 328 unter Beweis gestellt, unabhängig davon, in welcher Salzform die letzteren die Metallionen enthalten (als Citrat oder nur als Chlorid und als Sulfat).

Außerdem wurden in einem weiteren Versuch die Wirksamkeit des Präparats von Beispiel 1 (wie vorstehend) im Vergleich mit Präparat X (Tabelle 2, Sp. 3, bzw. Vergleichsbeispiel 4) bei oraler Verarbreichung zusammen mit Tränkflüssigkeit geprüft.

61 an Rinderruhr erkrankte Kälber wurden willkürlich auf 3 Gruppen verteilt, welche den in der nachstehenden Tabelle 4 aufgeführten Behandlungsweisen unterworfen wurden.

Tabelle 4

Die einzelnen Gruppen wurden dann bezüglich der folgenden Parameter untersucht:

i) Sterblichkeitsziffer
ii) Dauer der Ruhrerkrankung bei den überlebenden Tieren
iii) Körpergewicht bei den überlebenden Tieren

Die dabei erzielten Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle 5 zusammengefaßt, wobei die Signifikanz wiederum mittels des Student "t"-Tests analysiert wurde.

Tabelle 5

Aus den Versuchsergebnissen und ihrer statistischen Auswertung ergeben sich folgende Sachverhalte:

a) Sterblichkeit

Diese liegt bei Gruppe 3 praktisch ebenso hoch wie bei der Kontrollgruppe, während sie in Gruppe 2 wesentlich niedriger ist.

b) Dauer der Erkrankung

Im Vergleich zur Kontrollgruppe 1 zeigte sich bei Gruppe 3 keine signifikante Verkürzung, ganz im Gegensatz dazu war die Verkürzung bei Gruppe 2 sowohl beim Vergleich mit der Kontrollgruppe als auch mit Gruppe 3 signifikant.

c) Körpergewicht

Es fällt auf, daß die orale Verabreichung des Vergleichspräparats X zu einer größeren Veränderung des Körpergewichts führt als die Kontrollgruppe erleidet. Im Gegensatz hierzu war der Verlust an Körpergewicht bei Gruppe 2 signifikant niedriger als im Vergleich zu Gruppe 3 und auch zahlenmäßig niedriger als bei der Kontrollgruppe.

Auch diese per os-Untersuchungen bestätigen daher die Überlegenheit der erfindungsgemäßen Präparate gegenüber den aus der US-PS 38 98 328 bekannten Präparaten, welche wesentlich mehr an aktiver Aminosäure (Glycin) enthalten müssen.

Eine Erklärung für diesen überraschenden therapeutischen Effekt kann derzeit nicht gegeben werden.

Claims

1. Veterinärpräparat, gekennzeichnet durch einen Gehalt an 40 bis 80 Gewichtsprozent eines aktiv absorbierbaren Monosaccharids, 7,5 bis 30 Gewichtsprozent einer aktiv absorbierbaren, natürlich vorkommenden Aminosäure und 0,5 bis 10 Gewichtsprozent Zitronensäure oder deren Salz, jeweils bezogen auf die Gesamtmenge, mit der Maßgabe, daß bei Anwesenheit eines Zitronensäuresalzes die Menge an Aminosäure 13% nicht übersteigt.

2. Präparat nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß als Monosaccharid Glukose verwendet wird.

3. Präparat nach Anspruch 1 und 2, gekennzeichnet durch einen zusätzlichen Gehalt an 7 bis 20 Gewichtsprozent Natriumchlorid, bezogen auf die Gesamtmenge.

4. Präparat nach Anspruch 1, gekennzeichnet durch einen Gehalt an 60 bis 75 Gewichtsprozent Glukose, 8 bis 12 Gewichtsprozent Glycin, 0,5 bis 2 Gewichtsprozent Zitronensäuresalz und 10 bis 16 Gewichtsprozent Natriumchlorid, jeweils bezogen auf die Gesamtmenge.