DE2611089A1

DE2611089A1 - Thiazolinone, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende arzneipraeparate

Info

Publication number: DE2611089A1
Application number: DE19762611089
Authority: DE
Inventors: Michael Raymond Harnden; Nicholas David Wright
Original assignee: Beecham Group PLC
Current assignee: Beecham Group PLC
Priority date: 1975-03-24
Filing date: 1976-03-16
Publication date: 1976-10-14
Also published as: US4049816A; JPS51125383A; FR2313053A1; CH602719A5; FR2313053B1; BE839891A; DK127976A; NL7603102A; SE7603563L

Description

DiPL-CHEM. OR. ELiSAPETH „«UN« DlPL-PHYS. DR. JÜRGEN SCHiRDEWAHN DR.-IMG. GERHARD S C H M !TT-N 1 LS O N PATENTANWÄLTE

ύ MÖNCHEN 40,

CLEMENSSTRASSE 30 TELEFON 34 50 67

TELeGRAMM-ADRESSE: INVENT/MONCHEN TELEX 5-29 688

u.Z.: L 013 C (J/MK/or) Case BI56

16. Harz 1976

BEECHAM GROUP LIMITED

Brentford, Middlesex, Grossbritannien

"Thiazolinone, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneipräparate"

Beanspruchte Priorität: 24.März 1975, Grossbritannien, Nr.12147/75

Cndolmycin hat die Formel I

NHCH₃

0)

609842/10 7 3

und ist in der US-PS 862 685 und von Preobrazhenskay et al. in "Tetrahedron", Band 2k (1958),Seite 6131 und von Wittenau et al. in^T.Amer.ChenKSoc.^Bar.d 83 (1961X, Seite ^678 und Band 85 (19^3), Seite 3^25 beschrieben. Indolmycin hat zwar antibakter-xelle Wirkung aber keitie medizinisch brauchbare antivirale Aktivität.

Es wurde nun festgestellt, dass einige Thiazolinon-Analoga von Indolmyoin sowohl antivirale Aktivität als auch eine gewisse antibakterielle und antimycoplasmale Aktivität aufweisen.

Gegenstand der Erfindung sind somit Verbindungen der allgemeinen Formel II oder deren Tautomere

NHR²

(II)

1 2

in der R ein Wasserst off at oin oder die Ilethylgruppe, R ein Wasserst of fatorUj ein Alkylrest mit 1 bis U Kohlenstoffatomen oder ein gegebenenfalls mit 1 oder 2 Halogenatomen, Methoxy- oder Nitrogruppen substituierter Benzylrest ist.

Tautomere der Verbindungen der Formel.11 sind Verbindungen der Formel III

609842/1073

(Hi)

1 2 . '
in der R und R wie in Formel II definiert sind.

Im allgemeinen liegen die erfindungsgenassen Verbindungen der Formel II im Gemisch mit einer gewissen "enge von Verbindungen der Formel III vor.

Die erfindungsgemässen Verbindungen der Formel II haben die -in Formel IV dargestellte Raumstruktür oder deren Spiegelbild

(IV)

609842/1073

Die erfindungsgemässen Verbindungen der Formel II liegen entweder als einziges Enantiomer oder als Gemisch von zwei Enantiomere η vor.

In Formel II ist R - vorzugsweise die He thy!gruppe, da man vermutet, dass dieser Substituent zu einer besonders guten AktivilUnru

Für R besonders geeignet ist das Wasserstoffaton oder die

Methyl-, Äthyl-, Prony1- oder Butylgruppe. Bevorzugt für R ist die Methyl- oder Äthylgruppe.

Die Erfindung betrifft ferner ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel H₉ das dadurch gekennzeichnet ist, dass man eine Verbindung der Formel V cyclisiert

(V)

1 2
in der R und R wie in Formel.II definiert sind und Y ein Rest der Formel CO.OY¹ oder CO.SY¹ ist, in der Y¹ ein chemisch inerter Rest ist.

60 9 8 42/1073

Für Y in Formel V geeignet ist ein Alkyl-, Aryl- oder Arylalkylrest, insbesondere ein Alkylrest mit 1 bis ^ Kohlenstoffatomen, z.B. die Meuhy!gruppe.

Das erfindungsgemässe Verfahren wird im allgemeinen in einem organischen Lösungsmittel, wie eine^ niederer: Alkenol, ^εί nicht extremen Temperaturen durchgeführt. Geeignet ist eine Temperatur zwischen O bis 170⁰C ₃ z.B. 10 bis 80⁰C, insbesondere Rauntenneratur.

Die Verbindungen der Formel V können durch Umsetzen einer Verbindung der Formel VI

(VI)

in der R und Y wie in Formel V definiert sind und Z ein Rest ist, der durch eine Verbindung der Formel VII ersetzt werden kann

i» · CS , i»riR

(VII)

in der R wie in Formel II definiert ist.

Diese Umsetzung erfolgt im allgemeinen in einem geeigneten Lösungsmittel bei nicht extremen Temperaturen, wie niedrigen,Raum- oder

6 09842/1073

- ₆. 2811083

sehwach erhöhten Temperaturen«, Z₀B₀ O bis HO⁰C₀ Als Lösungsmittel geeignet ist ein niederes Alkanol₅ wie Äthanol.

Für· Z in Fo^ms! VI geeignet; ist die Πε-thansulfonyloxygruppa., Jas Chlor- oder Bvom^tcu, ■ Ist R" der- ;iethylrest₃ so ist .für Z das

'/opiugsweise setst neu in ei^;findungsgeinäss8n Verfahren zur Herstellung der 7-3i't.iriC.u.:iS-3n. der Fcrnsl II zuerst sine Verbindung der Formel 7*1 :::iu 3i;:sr "Verbindung der Pornai "711 zu einen 3:jisQhsnprcdu2:t α sr Po^nsl 7 um_: das darm in situ su einer Verbindung ds ρ FoL^iL ZIC cyclisisr'j ivird«

Biese ümsetsung srfoigt im allgsmainen bei einer Temperatur zwischen O und 17C⁰C;. vorzugsweise G bis 80⁰C _s z_e3. bei Rauntemperatur mehrere Tags lange

Erfindung^genässe Verbindungen der Fornel II können auch durch Isomerisierung von Verbindungen der Forinel VIII hergestellt vrsrden

(VIII)

609842/1073

1 2
in der R und R wie in Formel II definiert sind.

Diese Umsetzung erfolgt im allgemeiner in einen geeigneten Lösungsmittel in Gegenwart eine/¹ Base, wie Natriammethoxicl, bei nicht extremen Temperaturen, z.B. bei O bis 10O⁰C, vorzugsweise 50 bis 10O⁰C, Als Lösungsmittel g«eignet ist ein niederer Alkohol, wie Methanol.

Verbindungen der Formel VIII entstehen häufig bei der Cyclisierung der Verbindungen der Formel V zu Verbindungen der Formel II .

Die Verbindungen der Formel V und VI sind neu. Bevorzugte Zwischenprodukte im erfindungsgemässen Verfahren sind Verbindungen der _cFormel VI, in der Z ein Chloratom, R ein Wasserstoffatom oder die Methylgruppe und Y ein Rest der Formel CO„R ist, in der R ein Alkylrest mit 1 bis k Kohlenstoffatomen ist.

Die erfindungsgemässen Verbindungen der Formel II besitzen sowohl antivirale Aktivität wie auch eine gewisse antibakterielle und antimycoplasmale Aktivität. Die DL-Verbindung der Formel II, in der R und R je der üethylrest ist, hat eine Windesthemmkonzentration von etwa 2 yug/ml gegen Stämme von Staphylococcus aureus und Streptococcus faecalis und von etwa H yUg/ml gegen Stämme von Mycoplasmia pneumoniea.

Die Erfindung betrifft daher ferner Arzneipräparate, die durch einen Gehalt an einer Verbindung der Formel II oder deren Tautorceren als Wirkstoff in Kombination mit üblichen Trägerstoffen und/oder Ver-

" 609842/107 3 ·. ·

- ^ε - 2611083

dünnungsmitteln gekennzeichnet sind.

Die erf5.ndungsgemä?sen Arznei prä"c ar ate können lokal., oral, durch Injektion, Infusion j Insufflation cäer als Aerosol verabreicht werden.

Besonders geeignet ist die direkte Verabreichung in den Respirationstrakt durch Insufflation oder Inhalation, z.B. als Pulver, Aerosol oder als Nasentropfen. Auch die orale Verabreichung ist besonders geeignet.

Typische orale Verabreichungsformen sind Tabletten, Kapseln und Briefchen. Die erfindungsgemässen Arzneipräparate können auch noch Bindemittel, Dispergiermittel, Netzmittel, Gleitmittel oder überzugsmittel enthalten. Die erfindungsgemässen Arzneipräpara.te liegen entweder als Einzeldosen oder als I'ehrf achdosen in Behältern vor, aus denen die entsprechende Einzeldosis entnommen werden kann.

Für Injektionen geeignet sind z.B. wässrige oder nicht wässrige Lösungen in einer pharmakologisch verträglichen Flüssigkeit.

Für die Verabreichung in den Respirationstrakt geeignet sind Schnupfmittel oder Aerosole oder Kapseln, die mit einem Pulver gefüllt sind, das man insufflieren kann. Diese Pulver bestehen im wesentlichen aus einer Verbindung der Formel II oder einem Gemisch von Verbindungen der Formel II und einem inerten Trägermaterial, wie Lactose. Häufig ist die Verbindung der Formel II

609842/1073

an der Oberfläche der Trägerpartikel adsorbiert. Im allgemeinen
liegt die erfindungsgemässe Verbindung der Formel II in Teilchen von geringem Durchmesser, z.B. 5 p- oder darunter, vor. Die Kapseln können aus jedem geeigneten Material hergestellt werden, z.B.
harte Gelatinekap sein, .die zur Entleerung des Inhalts leicht geöffnet werden können.

Die tägliche Dosis an erfindungsgemässen Arzneipräparaten beträgt im allgemeinen 2,5 bis 100 mg/kg Körpergewicht, insbesondere
10 bis 80 mg/kg Körpergewicht, vorzugsweise 20 bis 50 mg/kg.
Im allgemeinen wird diese Dosis zwei-bis fünfmal verabreicht.

Einzeldosen enthalten im allgemeinen 50 bis 1000 mg, insbesondere 100 bis 500 mg, vorzugsweise 50 bis 300 ng Wirkstoff.

1 2

Die DL-Verbindung der Formel II, in der R und R je den Methy1-rest bedeuten, zeigt keine toxische Wirkung bei Mäusen. Den
Tieren wurde die erfindungsgemässe Verbindung entweder intrar>eritoneal in einer Einzeldosis von 6h0 mg/kg oder subkutan oder oral 100 ng/kg an drei aufeinanderfolgenden Tagen zweimal täglich

verabreicht.

Die Beispiele erläutern die Erfindung.

609842/1073

- ίο - 2611083

Beispiel 1 Γ— ff-In-Ίοϋmycinsöur-e und L-oC-Indolmycinsäure

33*8 g DL-oi-Indolmycinsäure werden in einem Gemisch von 300 ml Aceton und 300 ml Mäthvlenehlorid gelöst und mit einer Lösung von 18,7 g L-Of-Phenyl^hylamin in 75 r-1 Methylenchlorid versetzt ³ - -39°).

Die Lösung wird bei vermindertem Druck eingeengt und mit 250 ml Äthylacetat versetzt. Nach dem Stehenlassen bei 5 C über Nacht bilden sich weisse Kristalle, die abfiltriert und unter vermindertem Druck getrocknet werden. Ausbeute: 47_S7 g (91 %)· Das Produkt wird zweimal aus Aceton umkristallisiert, man erhält 16,92 g L-Of-Pheny]äfchylaminsalz der L-o(-Indolmycinsäure als weisse Kristalle, Pp. 173 bis 175°C, /0(7?°= 21,5° (c = 10 in Methanol)

Die Acetonlösungen werden vereint und zu einem gumreiartigen Produkt unter vermindertem Druck eingeengt. Dieses gummiartige Produkt wird in einem Liter A'thylacetat gelöst, mit 100 ml 0,1 η Salzsäure und 100 ml Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Der Peststoff wird aus 1,2 Liter Dichloräthan umkristallisiert, man erhält 1^,06 g rohe D-Of-Indolmycinsäure als weisslichen Feststoff. Dieser Feststoff wird in einem Gemisch von 100 ml Aceton und 100 ml Methylenchlorid gelöst und mit einer Lösung von 7,78 g D-0(-Iheny]ätaylamin in 20 ml Methylenchlorid i/jxj^ = + 39°) versetzt.

609842/1073

Die Lösung wird unter verminderten Druck eingeengt und mit 100 ml Äthylaeetat vorsetzt. Eeim Stehenlassen bei 5 C über Nacht erhält man weisse Kristalle, die abfiltriert, unter vermindertem Druck getrocknet und zweinal aus Aceton um^ristallisiert werden. Man erhält 13,7¹J S D-o(-p_nayiä:hylaminsalz von D-O^-Indolmycinsäure, Fp. 174 bis 176⁰C, p*fl° = + 21,6° ( c = 10 in Methanol).

16,8 g des O<-ihenylätiylaminsalze3 von o(-IndolmycinsMure werden in 200 ml Äthylacetat suspendiert und mit 100 ml 0,5 η Salzsäure geschüttelt. Die Xthylacetatlösung wird über Ma^_nssiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Man erhält einen weissen Peststoff, der mit 50 nl 1,2-Dichloräthan behandelt, filtriert und getrocknet wird, Man erhält in 93Orozentifer Ausbeute L-o(-Indolmycinsäure, Pp. 176 bis 177°C, Z^7q° = "9,3° (c = 10 in Methanol) bzw. in 90prozentiger Ausbeute D- c<-I_ndclmycinsäure, Pp. 176 bis 177°C, /fc*7p° = + 9,3° (c=10 in Methanol),

Die NMR- und IR-Spektren der beiden optisch aktiven<A-Indolmycinsäuren sind mit den Spektren von DL-o(-Indolmycin-

säure identisch.

Beispiel2 D- und L-oC-Indolmycinsäure-methylester

Eine Lösung von 4,6 g Of-Indolmycinsäure und 4,1g p-Toluolsulfonsäure in 100 ml Methanol wird 18 Stunden am Rückfluss erhitzt.

"609842/1073 ■·

Die Lösung wird abgekühlt und unter verminderten Druck eingeengt. Der Rückstand ttfird in 100 ml athylaeetat gelöst, mit HO ml
5prozentiger IJatriumcar-boi'.at lösung und sxoin'al mit. .je ^h0 ml
Wasser- gewaschen, über ilagnesiumoulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. !lan erhält ein klares öl, das in
30 ml Benzol· gelöst und 3 Stunden bei 5 C stehengelassen wird.
Man erhält iveisne Kristalle .der Methylester-Enantiomere.

L-of-Indolmycinsäure-methy!ester, Pp. 80 bis 8l°C_s /^/_D = -3»6° (c = 10 in Methanol), Ausbeute : 4,6 g (94 %).

D-Qo- Indolmycinsäure-me thy !ester, Pp. 80 bis 8l C, /"^TV) ^{= +}3j6° (c = 10 in Methanol), Ausbeute : 4,5 g (92 %).

Die IR- und ""'E-HMR-Spektren beider Enantiomeren sind identisch
mit den Spektren von DL-d<-Indolmycinsäure-

methy !ester, was darauf hindeutet, dass während der Veresterung keine Epimerisierung stattgefunden hat.

Be-ispiel3
DL-o(-2-Chlor-3-(3-Indolyl) -but tersäure-raethy !ester

Eine Lösung von 4,7 g DL-o(-Indolmycinsäure-me thy !ester in 50 ml trockenem Pyridin wird bei 0°C mit; 3₅1 ml Methansulfonylchlorid versetzt. Das Gemisch wird drei Tage bei 5°C stehengelassen, dann in 230 ml Eiswasser gegossen. Das Gemisch wird viermal mit je 200 ml Äther extrahiert, die vereinigten Ätherlösungen werden

609842/1073

dreimal mit je 200 ml 5 η Salzsäure und zweimal mit je 200 ml Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Nach dem Abziehen des Äthers unter vermindertem Druck erhält man 4,8 g eines gelben 0Is₅ das beim Kratzen kristallisiert. Das Produkt wird aus Äther umkristallisiert und filtriert, mit Äther/ Cyclohexan im Verhältnis 1:1 gewaschen und unter vermindertem Druck getrockner.. Man erhält 3,1 g DL-O(-2-Chlor-3-(3-indolyl)-buttersäure-methylester (60" %) als weisse Plättchen, Fp. 98 bis 100⁰C.

IR *>„ 3320 (NH), 1732 (C=O) cm"¹ (Nujol).

Beispiel 4

D-ff-2-Chlor-5-(3-indolyl) -but tersäu're-rce thy !ester ur.d Chlor-3-(3-indolyl)-buttersäure-iTiethylester

(Er.anticr.er) Eine Lösung von 2,3 g C^-Indolmycinsäure-methylester/in 20 ml trockenem Pyridin wird bei O⁰C mit einer Lösung von 0,24 g Benzylmethylammoniumchlorid in 2 ml Chloroform, dann tropfenweise mit 1,6 ml .!ethansulfonylchlorid versetzt. Das Gerdsch wird 3,5 Tage bei 0 bis 5°C stehengelassen, dann in 150 ml Eiswasser gegossen. liach dern dreimaligen Extrahieren mit je 50 r.l Chloroform werden die vereinigten organischen Lösungen mit etwa 50 ml 5 η Salzsäure 15 Minuten stark gerührt, zweimal mit je 50 rr.l Wasser gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. I<ach dem Entfernen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck erhält man ein gelbes öl, das zweimal mit je 100 ml trockenem

609842/1073

Äther extrahiert und filtriert wird. Die Lösung wird auf etwa 30 ml eingeengt und drei Stunden auf O bis 5°C abgekühlt. Man erhält ffeiä&e Plättchen der P-Cl-lorestii'-Insrsticner-an, uie aus zither umkrictallisiert w?.r-icn:

L-Of2-Chlor-3-(3-indolyl)-buttersäure-Eiethylester, Pp. 123 bis 12S^CC, l°L1%^J ⁼ "2,£° (c = ?C in Pioxan), Aasbeute: 1.2? g

D-o(-2-Chlor-3-i3-inäclyl}-butter&äure-mcthylester, Fp. 124 bis 126°C, EP0²? - + 2,6° (c = 10 in Dioxan), Ausbeute: 1,69 ε

Die IR- und H-HI-IR-Spektren beider Enantiomeren sind identisch mit den Spektren von DL-<4-2-Chlor-3-(3-indolyl)-

buttersäure-iaethylester, was darauf hindeutet, dass während der Reaktion keine Spinerisierung: stattgefunden hat.

Beispiel 5 DL~2-Me5yloxy-5''(3~inQolyl)~propion3äure-inethylester

Eine Lösung von 11 g DL-3-(3-Indolyl)-milchsäure-methylester in 250 ml trockenen Pyridin v/ird bei O⁰C mit 8 ml I-iethansulfonyl-Chlorid versetzt. Das ßemisch wird drei Tage bei 5 C stehengelassen_s aann in 1 Liter Eiswasser gegossen. Das Gemisch wird viermal mit je 500 ml Äther extrahiert, die vereinigten Ätherlösungen werden mit 500 ml 5 η Salzsäure und zweimal mit je 500 ml Wasser gewaschen,-über wasserfreiem natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zu einem öl eingeengt

609842/1073

(12,8 g). Nach dem Behandeln des Öls mit 150 ml Benzol erhält man weisse Kristalle. Das Gemisch wird zvei Stunden bei 5°C stehengelassen, dann werden die Frisc&~.lo Eer5fcar.ii.eit, und unter vermindertem Druck getrocknet. .Auebeute: 9,9 G (67 /O DL-?- Mesyloxy-3~(3~indolyl)-propionsäure-r.ethyleEter_J Pp. 89 bis 9O⁰C.

IR \?_mav (Nujoi): 3^30 (NH), 176O (Ester--C=0), 1368 (SO₅), II65

(SO₂) cm"¹

Beispielö DL-2-Amino-5-/T3-indolyl)-methyl7-2-thiazolin-^Ji-on

Eine Lösung von 2,97 S DL-2-Mesyloxy-3~(3~indolyl)-propionsäuremethylester und 0,76 g Thioharnstoff in 100 ml Äthanol wird sechs Stunden am Rückfluss erhitzt. Das Äthanol wird unter verminderten Druck entfernt, ^die Lösung wird mit einer Lösung· von 1,64 g Natriumacetat in 200 ml Wasser versetzt. Der aus- · fallende weisse Peststoff wird gesammelt, in Äthanol gelöst und auf 0 C abgekühlt. Die weissen Kristalle werden abfiltriert und unter vermindertem Druck getrocknet. Ausbeute: 1,73 ε (71 %) des gewünschten Produkts, Fp.' 220 bis 223°C (Zersetzung).

IR v> (Hujol): 3^30, 315Ο (NH), 1675 (C=O), I63O

IUaX

" 609842/1073

Beispiel?

Eine Lösung von 1,^9 E DI-2-Mesyloxy-3-(3-indolyl)-propionsäuremeühylestci'· und 0,^5 g H-Methy!thioharnstoff in 6G nl Äthanol wird drei iütanden an Rückfluss erhitzt, dann nit einer Lösung von Oj23 £ Natrium in 20 ml.Äthanol versetzt. Das Gemisch wird weitere drei Stunden am Rückfluss erhitzt. Nach dem Abkühlen wird die Lösung mit 2¹IO ml Wasser, das 0,6 g Eisessig enthält, versetzt. Der ausgefallene Niederschlag wird abfiltriert und unter vermindertem Druck getrocknet (1,12 g). Das Produkt wird in 2 ml Äthylacetat gelöst und auf 70 ml Kieselgel (Kieselgel H, Typ 60) mit Äthylacetat als Sluiermittel chromatographiert. Man erhält eine gelbe Fraktion, beim Eluieren mit Methanol eine zweite gelbe Fraktion. Mach den Entfernen des Lösungsmittels aus dieser zweiten Fraktion erhält man ein öl, das in 5 ml Äthylacetat gelöst und auf O⁰C abgekühlt wird. Die schvrach gelten

und
Kristalle werden abfiltriert/ mit Äthylacetat und Ligroin · (Siedebereich 40 bis 60⁰C) gewaschen; !fen erhält 0,315 g {2k %) des gewünschten Produkts, Fp. 181 bis 183°C.

IR v^ (Hujol): 3350-(IJH), 1680 (C=O), 1β20 (C=N) cn

-1

Beispiel 8

DL-2-Imino-5-/T3-indolyl-)-inethyl7-3-methyl-thiazolidin-¹l-on

609842/1073

Eine Lösung von 1,49 g DL-2-Mesyloxy-3-(3-indolyl)-nropior.s:'iuremethylester und 0,45 g N-Methyltüioharnstoff in .50 ml Methanol wird zwei Wochen bei 20 C stehengelassen. Das Methanol wird dann unter vermindertem Druck s-ntfernt, der Rückstand wird mit 100 ml

V.^r3.sser versetzt. Eine geringe Meng*; weissen Iliedorschlags wird aus der wässrigen Lösung, pH 3_S cbfiütriert, die Lösung wird dann durch Zugabe von 1 m Natriumcarbonatlösung auf pK 7 eingestellt. Der ausfallende weisse Niederschlag wird abfiltriert und unter vermindertem Druck getrocknet (0,64 g). In der Dünnschichtchromatographie auf Kieselgel und Xthylacetat als Eluiermittel zeigt sich, dass dieses Material aus einer liauptkomponente mit einem R„-Wert von 0,45 und einer kleineren Komponente mit einem R^-Wert von 0,10 besteht. (Mit dem gleichen System hat die Verbindung des Beispiels 12, DL-2-Methylamir.o-5-/T3-indolyl)-methyl7-2-thiazolin-H-cn, einen R_f-I\ert von 0,10.)

Der Peststoff wird auf Kieselgel (Kieselgel H, Typ 60) mit Äthylacetat als Eluiermittel chromatogranhiert. Nach dem Einengen und Abkühlen auf 0 C der Fraktionen mit der schneller wandernden Komponente erhält man 0,5 g (38,5 %) der reinen gewünschten Verbindung, Pp. 142 bis 1^°C.

IR ι? _v Ciujol): 3375, 3250 CIIi), 1^1 (C=O), I6l5 (C=.") cm"¹

Beispiel 9

Umwandlung von DL-2-Ir.ino-5-/T3~inGolyl)-r.eth:/l7-3~nethyl-thiazol din-*t-on in DL-2-Methylar.ino-5-/T3-ir.dolyl)-r:ethyl7-2-thiazolidin 4-on

609842/ 1 073

Eine Lösung von 0,10 g DL-2-Imino-5-/T3-indolyl)-methyl7"-3-methylthiazolidin-Ji-on in 5 ml Methanol wird mit 2 mg Natriumhydrid behandelt. Die Lcs-an* wird ^wei Stunden unter Stickstoffschutz schwach am Rückfluss erhitzt. :iach den Abkühlen wird das Gemisch mit 10 ml Wasser versetzt und mit verdünnter Salzsäure neutralisiert. Nach dem Abdampfen dor Lösungsmittel unter vermindertem Druck erhält man ein gelbes öl, das nach den Lösen in A'thylacetat auf Kieselgel H (Typ 60) mit Äthylacetat als Eluiermittel chromatographiert wird. Man erhält eine gelbe Fraktion, die eine Spur Ausgangsmaterial enthält, dann beim Eluieren mit Methanol eine zweite gelbe Fraktion. !lach dem. Abdampfen des Lösungsmittels aus dieser zweiten Fraktion erhält man 0,1 g eines gelben Öls, das in warmem Sthylacetat gelöst und auf 0 C abgekühlt wird. Die ausgefallenen weissen Kristalle werden abfiltriert, mit A'thylacetat und LigrGxn (Siedebereich 40 bis 60 C) gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. I-'an erhält 72 mg (72 %) der gewünschten Verbindung, Fp. l8l bis l83°C. (Diese Verbindung ist mit der Verbindung des Beispiels 7 identisch.)

Beispiel 10 DL-2-Ä*thyla_i7iino-5-_i/T3-indolyl)-methyl7-2-thiazolin-^-on

Sine Lösung von 1,^9 g DL-2-I-1esyloxy-3-(3-indolyl)-propionsäure-Ke thy !ester und 0,52 g N-A" thy !thioharnstoff in 50 ml Äthanol wird acht Tage bei Raumtemperatur stehengelassen. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck entfernt, man erhält ein gelbes

609842/1 073

öl, das mit 50 ml V/asser versetzt wird. Die Lösung wird dann rr.it 1 mtNatriumcarbonat alkalisch gemacht. Der ausgefallene weisse Niederschlag wird Pbfiltriert, in Chloroform gelöst und über ,Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Entfernen des Chloreforms unter vermindertem Druck erhält man ein schwach gelbes öl, das in etwa 8 ml Äthylacstat gelöst und auf 0⁰C abgekühlt wird. Die weissen Kristalle werden abfiltriert, mit Äther gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Man erhält 0,53 E (^l %) der gewünschten Verbindung, Pp. 173 bis 175°C. Bei der Chromatographie auf Kieselgel mit Äthylacetat als Eluiermittel hat die Verbindung einen R„-Wert von 0,13.

IR ^J _v (Nujol): 338o (NU), 1Ö92 (C=O), I6IO (C=II) cm"¹

ΙΠα Χ

,Beispiel 11 DL-C^-2-Amino-5-/I-(3-indolyl)-äth3/l7-2-thiazolin-ii-on

Eine Lösung von 0,5 g DL-o(-2-Chlor-3-(3-indolyl)-buttersäuremethylester und 0,15 £T Thioharnstoff in 50 nl Äthanol wird 2,5 Tage bei 20⁰C stehengelassen. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck entfernt, man erhält ein orangefarbenes öl, das mit 50 ml Wasser und 8 ml 1 rc. liatriuncarbonatlösung versetzt wird, bis die Lösung alkalisch ist. Der ausgefallene weisse Niederschlag wird abfiltriert, in 100 ml Äthylacetat gelöst und über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Abfiltrieren und Entfernen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck erhält man 2,4 g eines öligen Peststoffs, der in.8 ml Methanol gelöst,

- 609842/1073 . .

- 2C ~

filtriert und auf O C abgekühlt wird. Die weissen Kristalle werden abfiltriert und mit Äthylacetat und Ligroin (Siedebereich iiO bis 6Ο°Π) gewaschen. Han erhält 0,28 g (53 %) der gewünschten Verbindung, Fp, 228 bis 2jO°c.

Beispiel 12 DL-0(-2-I-lethylamino-5-/T-(3-indolyl)-äthyi7-2-thiazolin-i}-on

Eine Lösung von 0,5 g DL-^(-2-Chlor-3- (3-indolyl)-buttersäuremethy!ester und 0,18 g N-Methylthioharnstoff in 50 ml Äthanol wird acht Tage bei Raumtemperatur stehengelassen. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck entfernt_s man erhält ein gelbes öl, das mit 50 ml Wasser und 1 m Ilatriumcarbonatlösung versetzt wird, bis die Lösung alkalisch ist. Der gebildete weisse niederschlag (0,5 g) wird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. (Dieser Feststoff zeigt in der Dünnschichtchromatographie auf Kieselgel mit Sthylacetat als Eluiermittel zwei Komponenten mit einem R^-Wert von 0,^2 bzw. 0,10.)

Der Niederschlag xvird in 30 ml Methanol gelöst und nach der Zugabe von 0,1 ml 1 η natronlauge acht Tage am Rückfluss erhitzt. Nach dem Abkühlen wird die Lösung mit 20 ml Wasser versetzt und mit verdünnter Salzsäure auf einen pK-V.^Tert von 8 eingestellt. IJach dem Entfernen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck erhält man ein gelbes öl, das in einem Minimum eines warmen Gemisches von Methanol/Äthylacetat im Verhältnis 1:1 gelöst und auf 70 ml Kieselgel (Kiesel'gel H, Typ 60) mit Kthylacetat als Eluiermittel

609842/1073

chroraatographiert wird. Man erhält eine gelbe Fraktion, dann mit Methanol als Eluierinittel eine zweite gelbe Fraktion. Diese zweite Fraktion wird zu einem öl eingeengt, das in heissem Äthylacetat gelöst und auf O⁰C abgekühlt wird. Die weissen Kristalle werden abfiltriert, mit Äthyüacetat und Ligroin (Siedebereich 40 bis 60°C) gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Man erhält 0,25 g (^6 %) der gewünschten Verbindung, Fp. 20δ bis 210 C. Diese Verbindung hat bei der Chromatographie auf Kieselgel mit Äthylacetat als Eluiermittel einen R^-Wert von 0,10.

IR v/ (Nujol): 3200 (breit, UR), ΐβδΟ (C=O), 1590 (C=N) cm

Beispiel 13 DL-iX-2-Äthylanino-5-/T-(3-indolyl)-äthyl7-2-thiazolin-ü-on

Eine Lösung von 0,75 g DL-0(-2-Chlor-3-(3-indolyl)-buttersäuremethylester und 0,36 g N-Äthylthioharnstoff in 75 ml Äthanol wird sechs Tage bei Raumtemperatur stehengelassen. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck entfernt, die Lösung wird mit 3 ml ilatriumcarbonatlösung und 50 nl V/asser versetzt. IJach 10 Minuten wird das 'öl genügend fest, um aus der Lösung abfiltriert vrer de η zu können. Das Produkt wird mit V/asser gewaschen, in 50 nl warmem Äthylacetat relöst und über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Abfiltrieren und Entfernen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck erhält man 0,5 g eines gelben Öls, das bei der DünnschichtChromatographie auf Kieselgel mit Xthylacetat als Eluiermittel vier Komponenten mit R^-Werten von 0,59, 0,53,

609842/1073

0,31 bzw. 0,17 zeigt. Nach der Chromatographie auf 80 ml Kieselgel (Kieselgel K, Typ 60) mit Äthylacefcat als Eluiermittel erhält mar. eine schwach gelbe Fi-alrtion, -lie 0.12 5 (14 %) der gewünschten Vei'binciung als woisseh kristalliner Peststoff enthalt, Fp. 195 bis 197°C, R^,-Wert 0,17.

IR\) (IiUj"oi;: 3260 (breit, AR)₉ I67S (C=O), 1585 (C=N) onf¹

max

Beispiel I^ D- und L-2-Methylamino-5-_//J-(3-indolyl)-äthyl7-2-thiazolin-ⁱt-on

Eine Lösung von 0,68 g 0i^r-2-Chlor-3~ (3~indolyl)-buttersäuremethylester in 30 ml Methanol wird, mit einer Lösung von 0,25 E H-I-Ie thy !thioharnstoff in 20 nl Kethanol versetzt und drei Tage bei 20⁰C stehengelassen. Das Lösungsmittel wird unter verminderter. Druck entfernt, man erhält ein gelbes "1, das mit 50 ml Wasser und 3 r:.i 1 m Natriumcarbonat lösung versetzt v:ird. Der ausgefallene vxeisse Niederschlag v/ird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und unter verminderten Druck getrocknet.

Dieser niederschlag wird in 53 nil Methanol gelöst und nach der Zugabe von 0,1 ml 1 η natronlauge drei Stunden am Rückfluss erhitzt. Nach dem Abkühlen wird die Lösung mit 20 ml I-Jasser versetzt und mit 1 η Salzsäure auf einen pH-Wert von 8 eingestellt. Mach dem Entfernen des Lösungsmxttels unter vermindertem Druck erhält man ein gelbes öl, das in'einem Minimum an-warmem Methanol gelöst und nach dem Filtrieren auf 0 bis 5⁰C abgekühlt wird.

609842/1073

Im Falle des linksdrehenden Chlorecters erhält man hier weisse Kristalle, die abfiltriert und aus Methanol umkristallisiert werden. Man erhält 0,2? g (30 %) L-2-Met.hy 1εmino-5-/T-(3-indolyl)-äthyl7-2-chiazolin-^-on, Fp. 225 bis 227°C, ^⁰ =-100,7° (c - 0,3 in Methanol).

Nach der Chromatographie des Filtrats auf 70 ml Kieselgel (Kieselgel H, Typ 60) mit Äthylacetat als Eluiermittel erhält man eine Komponente, dann beim Eluieren mit Methanol eine zweite Komponente. Die diese zweite Komponente enthaltenden Lösungen werden zu einem öl eingeengt, das in heissem Äthylacetat gelöst und auf 0⁰C abgekühlt wird. Man erhält weitere 0,.l4 g "(19 %) des L-Enantiomeren, das mit dem Produkt aus der Mutterlauge identisch ist. -

Im Fall des rechtsdrehenden Chloresters erfolgt vor der Chromatographie keine Kristallisation. Bei der Chromatographie auf 100 ml Kieselgel H erhält man mit Methanol als Eluiermittel ein gelbes öl, das nach zweimaligem Umkristallisieren aus Methanol 0,18 g (25 %) D-2-Methylamino-5-/l-(3-indolyl)-äthyl7-2-thiazolin-ii-on als weisse Kristalle gibt, Fp. 226 bis 228°C, [pCJ^ = +· 101,If⁰ (c = 0,3 in Methanol).

Die IRt und H-NMR-Spektren beider Enantiomere sind mit den Spektren von DL-2-Methylamino-5-/l-(3-indolyl)-äthyl7-2-thiazolin-4-οη identisch, was darauf hindeutet, dass während der Reaktion keine Epimerisierung erfolgt ist.

" 609842/1073 ■ . . ·

" ^2h 2611083

Biologische Versuche

Die erfindungsgemässer. Verbindungen dc-r Forme] II '/.erden ge pen Coxsackie-BI-Virus und Rhir.cvirus Typ 2 in E.inzelschichten von Hela-Ohio-Zellen und gegen Influenza-Ao-NWS-Stämme in Einzelschichten von Baby-Ilainsrer-Hier-Cinsellen (BHK 21) untersucht. Die Hemmung der Virusplaquebildung in diesen Systemen wird bestimmt, die Ergebnisse- sind in Tabelle I und II susammengefasst.

% Plaqueverminderung =

Anzahl von Plaques in der Kontrolle -Anzahl von Plaques in infizierten Zellen _10Q Anzahl von Plaques in der Kontrolle

Die DL-Verbindung der Formel H₃ in der R und R ,je Methylreste bedeuten, wird gegen den Hongkong-Stamm des Influenza-A2-Virus (Ä/HK/1/C8; H3:i2) bei männlichen Albino-CDW-äusen bestimmt. Die Mäuse v/erden durch Behandeln mit einem Virusaerosol infiziert, die erfindungscenässe Verbindung: v;ird oral oder subkutan v/ährend drei Tagen an verschiedene Gruppen verabreicht, Acht Tage nach der Infektion werden die üäuse getötet, ihr Körpergewicht und ihr Lungengewicht v/erden bestimmt. Die Ergebnisse sind in Tabelle III zusammengefasst.

609842/1073

Tabelle I

Hemmung des Coxsackie-El-Stanir.es und des Rhinovirus Typ 2

Virus	Verbindung " - -	% Plaqueve^mirderunr; (pf/vl) bei einer Konzentration von	10	3
Coxsackie-Bl- 6oTCF-Stamm	Verbindung de-r Forr.el · II, R¹, R² = CH,	30	100	0
an Mäuse adaptierter Coxsackie-Bl- Stamm (G?- Starairi) Pool 40	ILy dr ο xy b e nzy Ib e nz iird - dazol	100	0	0
Rhinovirus Typ 2	Verbindung der Pornel II, R¹", R² V CH-	100	100	0
Hydroxybenzylbenzirr:i- dazol "-■ - -■-■ -":-~^——> ~-	100	17	0
Verbindung der_-Porr.el -I I j r\ R² = CH^ - j	91	85	0
Kydroxybenzylbenzini- ·>. dazol		23	0
50

χ Zellnetabolisnus und virale Replikation bei Konzentration

b0bö42/1073

V a b e l-.l e ΪΙ

Henir.un<~ des Inf luensa-Ao-ir.vS-Stanrnes bei einer bestirnten Konzentration

f'crr:.el χ Ι	Λ	' λ 'ι/..· , 1 ., .,,ί »· t. J- \.:. i -' - (,uc/ir.l) bei. einer Konzent·· rs tic-η von -	10	) 3	* 1
^Rl	H CH,	30	36 33	O O 80 96	O O 54 34.
H CH, CH, CH,	1-Arr.inoadanantan	46 if #	92 72 62 50

Zellr/ietabolisirxus und vif ale Replikation bei dieser · Konzentration gehenmt

Tabelle III In-vivo-HeriKiunr des Inf'luenza-A2-Virus

	Yerabrei cliunr	Dosierung 2 χ an Tag	Lunrenpevri cht /. K "rr-er r^e -^ri ^c ^ t χ 100
	—	-	l_f08
	■ s.c.	30	0_;97
Verbindung	s.c.	100	0.96
infizierte Kontroller.	P.O.	30	i_Too
Verbindung: der Formel Il j ii — i/n_	P.O.	100	Oj 89
nicht infizierte Kontrollen	-	-	0_; 72

609 8 42/1073

Claims

Patentansprüche

1 2

in der R ein V7ass erst off atom oder die lie thy lpr urine, R ein Wasserstoffatom, ein Alkylrest mit 1 bis k Kohlenstoffatomen oder ein gegebenenfalls mit einem oder zwei Halogenatomen Methoxy- oder Nitrogruppen substituierter Benzylrest ist.
2. Verbindungen nach Anspruch 1 der Formel II, in der R die Kethylgruppe und R das Wasserstoffatom oder die !!ethyl-, Äthyl-, Propyl- oder Butylgruppe ist.
3. Verbindungen nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet,
2
dass R die ilethyl- oder Kthylgruppe ist.
*J. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel V cyclisiert
6098 4-2/1073
HY
S-C-NHR'
1 2 in der R und R nach Anspruch 1 definiert sind und Y ein Rest
1 1.1

der Formel CO.OY oder CO.SY ist, in der Y ein chemisch inerter Rest ist.

5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel V verwendet, in der Y ein Alkylrest mit 1 bis h Kohlenstoffatomen ist.

6. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen nach Anspruch bis 3j dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Fornel VIII isomerisiert

(viii)

1 2 in der R und R wie in Anspruch 1 definiert sind.

C) 0 98 4-2/1 07 3

7. Arzneipräparate, gekennzeichnet durch einen Gehalt an einer Verbindung nach Anspruch 1 bis 3 als Wirkstoff in Kombination mit üblichen pharmakologisoh verträglichen Verdünnungsmitteln und/cder-Trägerstoffen.

8. Verbindungen der Formel V

CHY
S-C-NHR²

NH

(V)

1 2

in der R , R und Y nach Anspruch h definiert sind.

9. Verbindungen der Formel VI

(VI)

in der R^x das Wasserstoffatom oder die Methylgruppe, Y ein Rest

11 1

der Formel CO.OY oder CO.SY ist, in der Y ein chemisch inerter Rest und Z ein Rest ist, der mit einer Verbindung der Formel VII verdrängt werden kann

U. CS. NHR'

(VII)

60 98 42/1073

in de¹⁰ R das Wassers toff atom oder ein Alkylrest mit 1 bis H Kohlenstoffatomen oder ein gegebenenfalls mit einem oder zwei lialo^eriaronenj Ilethoxy- caer Nitrogruppen substituierter Benzyl-Tsst ist.

IQ. Verbindungen nach Anspruch 9 der Formel Vi, in der Y ein Rest der Formel CO₂R³ ist, in der R³ ein Alkylrest mit 1 bis H Kohlenstoffatomen und Z ein Chloratcm ist.

60 9 8 42/1073