DE2350672A1 - Ester von erythromycinoxim - Google Patents

Description

-ING.

DIETEK F. iVlORF HAMS-A=

München, 5»· Okbobex- 1973 Posfanschrift / Posfai Address 8 München 86, Postfach 860109

Pienzenauersfraße. 28 Telefon 48.3225 und 480415 Telegramme: Chemindus München

2947

IBBOTO? LABORATORIES Chicago_s Illinois _v ¥oSt_oA<

Ester von Erythromycinoxim

Die vorliegende Erfindung betrifft Oximester von Erytiiromycinoxinia Im besonderen "betrifft die Erfindung Oximester von Erythromycin A- -oxim waä Erytliromycin B-oxiffl_s welche solvolysebeständig sind und die nachste&ende allgemeine Formel aufweisen

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in der E^ ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet land II einen voluminösen (sperrigen) Alkylrest ader· einen substituierten Arylrest darstellt^ wo "bei der substituierte- Arylrest die nächst eilende allgemeine Formel besitzt

in der E_n und R, Jeweils einen Nieder-alkylrest bedeuten und R* eine Oarboxamid- oder Carbonsäuregruppe oder einen Alkyl·=, Carboxyalkyl™ j, Aminoalkyl-_f substituierten Amino alkyl- _P Garboxyaryl» oder Carbo2tyaminoalkylrest darstellt_p sowie die Salse aller vorgenannten

Oximester.

Oximester von Erythromycinoxim sind bekannt_o Biese Ester sind jedoch iron einfacher Art xmd unterliegen im wässrigen Medium weitgehend der Hydrolyse (Yerseifmig) _o

Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung bestellt somit, hauptsächlich darin^ stabile Erythromycinoximester dadurch zu. schaffen», daß man in den Esteranteil fraktionelle Gruppen einführt _f welche die therapeutische Wirkung des Stammantibioticums abwandeln und verbessern»

Es wurde gefunden, daß'die Erythromycinderivate der Erfindung gegenüber der Solvolyse besonders beständig sind und daß diese Stabilität ferner mit ansteigender sterischer Hinderung des vorstehend definierten Restes H erhöht wird»

Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden durch Umsetzung eines Säurelialogenids mit Erythroraycinoxim hergestellt«. Die Umsetzung kann in einem inerten Lösungsmittel, d«h_e einem L-ösungsmittelj, welches mit den Reaktionskomponenten oder dem Unsetzungsprodukt in einem nicht wesentlichen Ausmaß reagiert,, durchgeführt werden.

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2947

Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden im allgemeinen dadurch -hergestellt, daß man ein Säurehalogenid der allgemeinen Formel RCOX, wobei R die vorstehend angegebene Bedeutung hat und X ein Halogenatom (vorzugsweise ein Ghloratom) bedeutet, mit Erythromyeinoxim umsetzt. Erythromycinoxim ist in der USA-Patentschrift 3 478 014 beschrieben. Die Umsetzung wird am "besten vorgenommen, indem man die Reaktionskomponenten bei einer temperatur im Bereich von etwa 20 bis 30°C etwa 2 bis 12 Stunden durchmischt, nach welcher Zeitspanne die Reaktion als im wesentlichen "beendet anzusehen ist. Man führt die Umsetzung, wie erwähnt, am besten in einem inerten Lösungsmittel, z.B. Dichlomethan, sowie in Gegenwart eines Protonenacceptors, z.B. Triäthylamin, durcho

Die folgenden Beispiele sollen Verbindungen näher beschreiben, die nach dem vorgenannten Verfahren hergestellt 'werden. Die der chemischen Bezeichnung folgenden Zahlen (in Klammer) dienen dazu, die betreffende Verbindung in den darauffolgenden Beispielen durch bloße Bezugnahme auf die jeweilige Zahl zu identifizieren«

Beispiel T 9-(0)-Trimethylacetylerythromycin B-oxim (J[)

Man versetzt eine Lösung von 2 g (2,73 mMol) Erythromycin B-oxim in 50 ml wasserfreiem Aceton unter Rühren mit 1 g (11,9 mMol) Natriumbicarbonat und danach mit 0,365 g (3,02 mMol) Trimethylacetylchlorid. Man. rührt die Mischung 6 Stunden bei 25⁰C und gießt sie dann in 350 ml Wasser, welches 30 ml konzentriertes Na₄OH enthält. Das Produkt wird viermal mit jeweils 30 ml Chloroform extrahiert. Die vereinigten Chloroformextrakte werden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Es verbleiben 2,05 g Rohprodukt, welches man aus einem Gemisch von 20 ml Aceton und 5 ml Wasser zur Kristallisation bringt. Man erhält 1,24 g des Esters I_- vom Fp. 133 bis 135⁰C

C HNO

C₄₂H₇₆N₂O₁₃ (817,079); ber.: 61,74 9,38 3,43 25,64

gef.; 61,83 9,54 θ,39 25,27

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2947 . Cf-

Das Reaktionsschema für Beispiel 1 ist folgendes:

CH₃

CH₃

CH₃ OCH₃

Eb

Beispiel 2 9-(O)-(2,4,6-Trimethyl)-benzoylerythr.omycin A-oxim. (2) Man versetzt eine Lösung von 7 g (9,35 nMol) Erythromycin A-oxim und 2,84 S (28 mMol) Triäthylamin in 150 ml Methylendichlorid bei 25°C unter Rühren mit 1,83 g (10,2 mMol) 2,4,6-Trimeth.yrbenzoylchlorid. Die Mischung wird nach kurzem Durchrühren 4 Stunden bei 25 C stehen gelassen. Danach gießt man sie in einen Scheidetrichter und wäscht sie mit 80 ml Wasser, welches 7 ml konzentriertes Na₄OH enthält. Die Methylendichloridschicht wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Der Rückstand wird aus einem Gemisch von 70 ml Chloroform und 70 ml Hexan zur Kristallisation gebracht. Man erhält 4 g des Esters 2 vom Fp. 132 bis 135

C H NO

C₄₇H₇₈N₂O₁₄ (895,151); ber.: 63,06 8,78 3,13 25,02

gef.: 62,89 8,91 3,10 24,96

Beispiel 3

9-(0)-(2,4_y6-Trimethyl)-benzoylerythromycin B-oxim Q) 1 g Erythromycin B-oxim wird in einer Beispiel 2 analogen Weise mit 2,4,6-Trimethylbenzoylchlorid umgesetzt. Das Rohprodukt wird aus 10 ml Aceton und 5,5 ml Wasser zur Kristallisation gebracht.

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Dabei erhält man 0,55 g der Verbindung _3 vom Fp. 126 bis 129⁰C.

CHN O

C₄₇H₇₈N₂O₁₃ (879,199)-; ber.ζ 64,21 8,95 3,19 23,66

gef.s 64,13 8,96 3,20 23,67

Das Reaktionsschema für die Beispiele 2 und 3 ist folgendes:

".-.-■ CHo

• CH₃

Beispiel 4
9—(θ)-(2,6—Dimethyl—4-carbomethoxy)-benzoylerythromycin A-oxim (4) 8 g Erythromycin A-oxim werden in einer Beispiel 2. analogen Weise mit (2,6—Dirnethyl-4-carbomethoxy)-benzoylchlorid umgesetzt. Das Rohprodukt wird aus einem Gemisch von 40 ml Aceton und 32 ml Wasser zur Kristallisation gebracht. Dabei erhält man 4,1 g der Verbindung _4 vom Fp. 137 bis 141⁰C.

,CHN 0

C₄₈H₇₈N₂O₁₆ (939,160); ber.: 61,39 8,37 2,98 27,26

gef.: 61,25 8,54 2,95 27,10

■ Beispiel 5 ■

9-(0)-( 2 , e-Dimethyl^-carbomethoxy) -benzpylerythromycin B-cxim (5.) 2 g Erythromycin B-oxim werden in einer Beispiel 2 analogen Weise mit (2,6-Dimethyl-4-carbomethoxy)-benzoyichlorid umgesetzt. Das Rohprodukt wird aus einem Gemisch von 20 ml Äthanol und 18 ml Wasser zttr 'Kristallisation gebracht. Dabei erhält man 1,27 g der Verbindung^5^vvom: Fp^^; 132 bis 136⁰C. "'

— 5 —

817/1-175

2947

(923,161); ber.: - gef.:

CHN
62,45 8,52 3,03
62,31 8,60 2,91

26,00 25,76

Das Reaktionsschema für die Beispiele 4 und 5 ist folgendes:

O₂CH₃

CO2CH3

CH3 I CH3
COCl

CH2CI2'

Ea (b)

Ea (b)

4, 5

Beispiel 6
(2,6-Dimethyl-4-benzyloxycarbonyl) -benzoylchlorid (6)

Man stellt eine Methylendichloridlösung des Säurechlorids J5 in der nachstehenden Weise heri

Man trägt 0,67 ml (6,7 mMol) Benzylalkohol und 3,04 ml (22,2 mMol) Triäthylamin in 100 ml Methylendichlorid ein. Die Mischung wird gerührt und am Eisbad auf O⁰C abgekühlt. Anschließend fügt man 1,09 ml (6,1 mMol) 2,6-Dimethylterephthaloylchlorid (2,6-Dimethylterephthalsäuredichlorid) hinzu. 10 Minuten später wird das Eisbad entfernt. Man läßt die Mischung 2 Stunden bei 25°C stehen. An einer danach entnommenen Probe ergibt die IR-Analyse Banden bei 1795 cm" (Säurechlorid) und bei 1729 cm~ (Ester). Derartige Lösungen sind mehrere Stunden stabil, werden jedoch gewöhnlich sofort verwendet.

Beispiel 7 9-(0)-(2,6-Dimethyl-4-benzylo:x:ycarbonyl)-benzoylerythromycin B-

-oxim

Man versetzt die Methylendichloridlösung der Verbindung j5 (Bei spiel 6) mit 4 g (5,55 mMol) Erythromycin B-oxim. Die Mischung

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wird zur Auflösung des Oxims kurz gerührt und anschließend 4 Stunden bei 25°C stehen gelassen. Nach der Überführung in einen Scheidetrichter wird die Mischung mit 50 ml Wasser, das 3 ml konzentriertes NH.OH enthält, gewaschen. Die Methylendichloridlösung wird dann über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Man erhält 5,44 g rohe Verbindung J_.

Das Rohprodukt wird chromatographisch gereinigt. Eine Säule von 100 g Florisil (Magnesiumsilikatgel-Adsorbens; etwa 84 % SiO₂, 15,5 f° MgO und 0,5 i* Na₂SO,) wird mittels Benzol präpariert und durch Elution mit 1 Liter Benzol/0,3 $ Triäthylamin konditioniert (alkalisch gemacht). Die Probe wird dann in 15 ml dieses Lösungsmittels auf die Säule gegeben und letztere nach dem folgenden Schema eluiert, wobei man 125 ml-Fraktionen auffängt? Fraktionen 1 bis 4: Benzol/0,3 ^ Triäthylamin; Fraktionen 4 bis 8: Benzol/1 i° Methanol/0,3 i° Triäthylamin; Fraktionen 9 bis 12: Benzol/2 <fo Methanol/0,3 1° Triäthylaminj Fraktionen 13 bis 16: Benzol/4"# Methanol/0,3 1° Triäthylamin* Die Fraktionen 3 bis 14 erweisen sich aufgrund der Dünnschichtchromatographie als rein und werden vereinigt; sie liefern 4,44 g einer glasigen Substanz. Eine Probe von 2,56 g wird aus 15 ml Aceton und 6 ml Wasser ζμΓ.Kristallisation gebracht; dabei erhält man 1,96 g der Verbindung 7 vom Fp. 118 bis 122⁰C.

	259);	ber.:	C	91	H	27	N	O	02
(999,		gef.:	64,	22	8,	44	2,80	24,	70
		65,	8,	2,84	23,

- 7

409817/117S

2947 *~ ° ¹^ ^{w u} ' ^ J?

Das R eakt ions schema für die Beispiele 6 und 7 ist folgendes:

I ₃ C COCl I

OH

Cig COCX

Eb

Beispiel 8 /2,6-Dimethyl-4-(NHa-butylcarbamyll/-benzoylchlorid (&)

Man stellt eine Methylendichloridlösung des Säure Chlorids Ί3 in der folgenden Weise her:

Man trägt in 150 mllethylendichlorid 0,835 ml (8,18 mMol) n-Butylamin und 4»58 ml (32»8 mMol) Triäthylamin ein. Die Mischung wird gerührt und am Eisbad auf 0⁰C abgekühlt. Anschließend fügt man 1,48 ml (8,18 mMol) 2,6-Dimethylterephthaloylchlorid hinzu. Nach 20 Minuten entnimmt man eine Probe für die IR-Analyse; diese ergibt Banden bei 1795 cm" (Säurechlorid) und bei 1668 cm" (Amid). Die Lösung wird direkt ohne Reinigung verwendet.

Beispiel 9

9-(0) -/2,6-Dimethyl-4-(N-n-butylcarbamyl)/-benzoylerythromycin B-oxim (_9)

Man versetzt die Methylendichloridlösung der Verbindung _8 (Beispiel 8) bei 0⁰C mit 6 g (8,18 mMol) Erythromycin B-oxim. Die Mischung wird zur Auflösung des Oxims kurz gerührt und anschließend 4 Stunden bei 25⁰C stehen gelassen. Anschließend wäscht man die Lösung mit 80 ml Wasser, welches 5 ml konzentriertes NH^OH enthält» Dann wird die Methylendichloridlösung über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampfte Dabei erhält man 7,46 g

έ_; O'-9 8-IT/

■-.-,-.,.■■ ■ ■ ■ .

Rohprodukt.

Die Reinigung des Rohprodukts wird chromatographisch durchgeführt. Zu, diesem Zweck wird· eine Säule von 140 g Kieselgel mittels Methylendichlor-id präpariert und mit 1,5 Liter Methylendiehlorid/1 fo Triäthylamin alkalisch gemacht. Die Probe, der rohen Verbindung 9
(7,46 g) wird in 20 ml M.ethylendichlorid/1 $> Triäthylamin auf die
Säule gegeben. Man beginnt dann die Elution mit dem genannten lösungsmittel. Mail fängt 125 ml-Fraktionen auf und erhöht die Methano!konzentration im Elutionsmittel nach jeder Fraktion um 0,025 #. Insgesamt werden 16 Fraktionen aufgefangen. Die Fraktionen 3 bis 9 erweisen sich aufgrund der Dünnschicht Chromatographie als- rein und werden vereinigt. Dabei erhält man 3,9 g einer glasigen Substanz,
welche aus der Verbindung 9, besteht. Die Probe kann nicht zur Kristallisation gebracht werden. Die IR-Änalyse zeigt Banden bei
1750 cm"¹ (Oximester), 1730 cm"¹ (lacton) und 1.660 cm" (Amid).

G H N 0

C₅₁H₈₅N₃O₁₄ (964,257); ber.: 63,53 8,88 4,36 23,23

gef.: 63,62, 9,16 4,48 23,45

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Das Reaktionsscliema für die Beispiele 8 und 9 ist folgendes;

COCl

+ CH₃ CH₂ ^CH₂'

CH₃

COCl

ρ	?■ ι	,CH2	/CH3
	Ύ		Eb-oxim v
k
CH3	T XCH3 COCl

Et₃N CH₂Cl₂

^CH₃

Eb

- 10 -

409817/ 1 175

' ■^:"^: ""''■""■' ^: -'*" ' B e i- s jp i e 1 10 ,-.. · -.-. ■ . ■■■■; /2, 6-Dimethyl-4-(N-morpholinylcarbonyl)7-benzoylchlorid (10) Man stellt eine Methylendiehloridlösung des Säurechlorids J_-O in der nachstehenden Weise her:

Man trägt in 100 ml Methylendichlorid 0,471 ml (5,55 mMol) Morpholin und· 3,05 ml (-22,2 mMol) Triethylamin ein. Die Mischung wird gerührt und am Eisbad auf 0 C abgekühlt. Anschließend fügt man 1 ml (5,55 mMol) 2,6-Dimethylterephthaloylchlorid hinzu und entnimmt nach. 30 Minuten eine Probe für die IR-Analyse; diese ergibt

—1 1

Banden bei 1795 cm"" (Säurechlorid) und bei 1638 cm" (Amid). Die

Lösung wird direkt ohne Reinigung verwendet.

Beispiel 11

9-( 0) —/2. , 6—Dime■thyl-4-(Iⁱl'-morpholinylcarbonyl·^l7-benzoylerythromycin B-oxim (JM_)

Die Methylendichloridlösung der Verbindung J_0 (Beispiel 10) wird bei O⁰C mit 4 g (5,55 mMol) Erythromycin B-oxim ,versetzt. Die Mischung wird zur Auflösung des Oxims kurz gerührt und anschließend 4 Stunden bei 25⁰C stehen gelassen. Danach wäscht man die Lösung mit 50 ml Wasser, welches 3 ml konzentriertes NH,OH enthält. Dann wird die Methylendichloridlösung über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und hierauf eingedampft. Dabei erhält man 5,24 g Rohprodukt.

Die Reinigung des Rohprodukts wird chro mat ο graphisch durchgeführt. Zu diesem Zweck wird eine Säule von 140 g Kieselgel mittels Methylendichlorid präpariert und durch Elution mit 1,5 Litejr-Methylendichlorid/0,3 % Triäthylamin alkalisch gemacht-* Die Probe der rohen Verbindung 21 (5»24 g) wird in 15 ml Methyl.endichlorid/0,3 $> Triäthylamin auf die Säule gegeben. Man beginnt die"';Elution mit dem genannten Lösungsmittel. Man fängt 125 ml-Fraktionen auf und erhöht die Methanolkonzentration im Elutionsmittel.. nach jeder Fraktion um 0,025 fo. Insgesamt werden 48 Fraktionen ^aufgefangen. Die Fraktionen 16 bis 28 erweisen sich aufgrund der Dünnschicht Chromatographie als rein und werden vereinigt. Dabei erhält man 2,52 g der Verbindung j_1_. Die Probe kann nicht zur Kristallisation gebracht werden. Die IR-Analyse ergibt Banden bei 1750 cm~ (Oxim-

- 11 -

'H 7 5

ft

ester), 1730 cm (Lacton) und 1628 cm ¹ (Amid). Zur Analyse wird die Probe zweimal durch Eindampfen von Äthanollösungen konzentriert und anschließend getrocknet.

CHNO

C₅₁H₃₃N₃O₁₅ (978,240); ber.: 62,62 8,55 4,30 24,53

: 62,70 8,80 4,44 24,39

Das Reaktionsschema für die Beispiele 10 und 11 ist folgendes:

COCl

CH₃ j CH3 COCl

Et₃N

CH2C12

Eb-oxitn

CH₃ I CH₃ COCl ^J

Beispiel 12

9-(0) -/2,6-Mmethyl-4-(N-methylpiperazinylcarbonyl)7-'benzoylerythromycin B-oxim (J_2)

Ein Gemisch von 50 ml wasserfreiem Methylendichlorid und 1,52 ml (10,9 mMol) Triäthylamin wird mit Hilfe eines Drierite-Trockenröhrchens (Drierite = thermisch regenerierbares !Trockenmittel aus

- 12 -

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wasserfreiem Calciumsulfat) vor Feuchtigkeit geschützt und am Eisbad auf O⁰C abgekühlt« Anschließend fügt man 0,592 ml (3,31 mfflbl) 2,6-Dimethyltereplrihaloylehlorid hinzu« Einige Minuten später werden 0,42 ral (3,84 eMoI) H-Methylpiperazin innerhalb von 3 Minuten zugetropft. Man entfernt das Eisbad. Nach 40 Minuten werden 2 g (2,73 niMol) Erythromycin B-oxim zugesetzte 24 Stunden später verdünnt man die Mischung mit 50 ml Methylendichloridund wäscht sie zweimal mit jeweils 50 ml Iprozentiger Natriumbicarbonatlösung. Die Methylendiehloridlosung wird dann über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft;. Man erhält 2,87 g Rohprodukt.

Vor der Reinigung wird ein Reaktionsnebenprodukt, d.tu der Bis- -(erythromycin B-oxim)-ester von 2,6-Dimethylterephthaloylchlorid, zu einem Gemisch von Erythromycin B-oxim und der Verbindung j> abgebaut. Dies erreicht man dadurch, daß man das Rohprodukt in 50 ml Methanol bei 25⁰C stehen läßt und anschließend 1 Stunde unter Rückfluß kocht. Man gewinnt das Produkt aus der Methanollösung durch Eindampfen, Auflösen des Rückstands in 150 ml Methylendichlorid, Waschen der Lösung mit 50 ml Iprozentiger Natriumbicarbonatlösung, Trocknen über Natriumsulfat und Abdampfen des Methylendichlorids. Es verbleiben schließlich 2,69 g Rohprodukt. Man erhält auf diese Weise insgesamt eine Produktmenge von 8 g.

Die Dünnschicht Chromatographie zeigt, daß das Rohprodukt 6 Komponenten enthält. Das gewünschte Produkt wird mit Hilfe von zwei Säulenchromatographiesystemen abgetrennt. Das erste System arbeitet mit Kieselgel, wobei anfangs Methylendichlorid/0,9 % Triäthylamin verwendet und. danach dasselbe Elutionsmittel mit steigenden (2, 4, 8 und 12 #) Anteilen von Acetonitril eingesetzt wird. Die Fraktionen, welche die Haaptmenge des gewünschten Produkts (5,61 g) enthalten, werden mit CH₂C1₂/12 -fl ΟΗ,ΟΝ/Ο,Β. i» Triäthylamin eluiert.. Dieses Material, wird heuerlich in Anteilen von jeweils 2,8 g an 200 g Kieselgel unter Verwendung von Äthylacetat/15 $ Methanol/ 1 fo "Triätfcylamn als Elutionsmittel ch#b'Matographiert. Alle .30 Minuten werden Fraktionen (12 ml) entnommen ----und auf Basis der Dünnschichtclironiatographieergebnisse vereinigt _a Fraktionen von geeigneter Reinheit werden gesammelt und eingedampft. Man löst den ver-

- 13 -

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einigten Rückstand in Benzol ₉ wäscht die Lösung mit Iprozentiger

Natriumbicarbonatlösung und trocknet sie über Natriumsulfat. Nach

dem Abdampfen des Benzols erhält man 3,44 g der Verbindung J_2 in Form einer glasigen Substanz«

C H N O

C₅₂H₈₆N₄O₁₄ (991,283)1 ber.s 63,01 8,74 5,65 22,60

gef.s 62,71 8,71 5,49 22,36

Das Reaktionsschema für Beispiel 12 ist folgendes:

COCl

Eb-öxim

COCl

X'

SH₃ J CH₃ COCl

CH₃T CH₃

Beispiel 13

9-(O) --{2 ,6-Dimethyl-4--/N-( 2-hydroxypropyl) -N-piperaainylcarbonyl/}~benzoylerythromycin B-oxim (13)

Ein Gemisch von 100 ml Methyl endichlo rid und 1,09 ml (6 mMol) 2,6-Dimethylterephthaloylchlorid wird am Eisbad auf 0 C abgekühlt. In einen 50 ml fassenden Zugabetrichter wird eine Mischung von 3,04 ml (21,8 mMol) Triäthylamin, O_s85 ml (6 nfflfol) 1 -(2-Hydro:xypropyl)-piperazin und 10 ml Methyl endichlo rid gegeben« Man läßt

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4 0 9 817/117 S

die Ατηχτιτηίschung so rasch wie möglich (innerhalb etwa 5 Sekunden) in die Säurechloridlösung einlaufen, wobei man letztere schnell rührt. Nach 5 Minuten fügt man 4 g (5,45 mMol) Erythromycin B-oxim hinzu. Nach kurzem Rühren wird die Mischung vom Eisbad genommen und 24 Stunden bei 25°C stehen gelassen. Anschließend verdünnt man die Mischung mit 50 ml Methylendichlorid. Die Lösung wird mit 70 ml 1 prozentiger Natriumbicarbonatlösung gewaschen* getrocknet und eingedampft. Nach dem Absaugen mit der Ölpumpe hinterbleibt ein Rückstand von 5,75 g.

Die Reinigung von 4 g dieses Rückstands wird durch Chromatographie von 2 g-Proben an 200 g-Säulen von Kieselgel unter Verwendung von Äthylacetat/15 i° Methanol/1 $ Triäthylamin als Elutionsmittel vorgenommen. Die Fraktionen werden auf der Basis der dünnseiiielitchromatographischen Analyse vereinigt. Nach dem Abdampfen des BXutionsmittels löst man den Rückstand in 80 ml Benzol und wäscht die lösung mit 40 ml Iprozentiger Natriumbiearbonatlösung und 40 ml Wasser. Die Benzollösung wird dann über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Nach 24stündigem Trocknen in einem Vakuumofen bei 65⁰C erhält man 3,04 g der Verbindung J_3, die eine glasige Substanz darstellt.

C HN O

C₅₄H₉₀N₄O₁₅ (1035,337); ber.: 62,65 8,76 5,41 23,18

•gef.: 62,74 8,87 5,34 23,15

- 15 -

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Das Reaktionsschema für Beispiel 13 ist folgendes:

COCl

,CH₂ CH₃ ^NCH'

⁺ „ö °"

CH₃ I CH₃ ^J COCl · Et₃N

CH₃ I CH₃ COCl

CJH Eb-oxlm y

-

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■"·■■"■ Beispiel 14

9-(O)-/2,6-Dimethyl-4-( 4-methyl-1 -pentyloxycart)onyl)/-benzoylerythromycin B-oxim (J_4) -

Ein Gemisch, von 100 ml Methylendichlorid, 1,52 ml (21,8 mMol) Triäthylamin und 0,9 :ώ1 (7,07 mMol) 4-Methyl-l-pentanol wird bei 25°G gerührt, wobei Ί-, 18-ml (7,07 mMol) 2,6-Dimethylterephthaloylchlorid innerhalb von einigen Minuten zugesetzt werden. Nach 2 Stunden bei 25°C ergibt die IR-Analyse einer Probe Maxima bei 1792 cm" (Säurechlorid) und 1718 cm~ (Ester). Man versetzt die vorgenannte Lösung von 2,6-Dimethyl-4-( 4-methyl-i -pentyloxyearbonyl) -benzoylchlorid mit 4 g (5,45 mMol) Erythromycin B-oxim. Man rührt die Mischung kurz und läßt sie dann über Nacht bei 25°C stehen. Anschließend wäscht man die Mischung zweimal mit jeweils 50 ml Iprozentiger Natriumbicarbonatlösung und trocknet sie dann über Natriumsulfat. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels* erhält man 6,19. g Rohprodukt.

Zwei 2 g-Proben des vorgenannten Produkts werden an 200 g-Kieselgelsäulen unter Verwendung von Benzol/50 f° Äthylacetat/1 fo Triäihylamin als Elutionsmittel chromatographiert. Alle 8 Minuten werden Fraktionen von 8 bis 10 ml entnommen und auf Basis der Dünnschichtchromatographieergebnisse vereinigt. Nach dem Abdampfen des EIutionsmittels wird der. Rückstand in Benzol gelöst und die Lösung mit Iprozentiger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Dann trocknet man die Benzollösung über Natriumsulfat und dampft sie ein.' Dabei erhält man 2,34 g der Verbindung JA in Form einer glasigen Substanz. Die Probe wird 24 Stunden in einem Vakuumofen bei 65 C getrocknet. ■"'_..-

C₅₃H₈₈N₂O₁₅ (993,296); ber.: 64,09 8,93 2,82 24,16

gef.: 64,31 9,13 2,76 23,76

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if

Das Reaktionsschema für Beispiel H ist folgendes:

COCl

CH3 j CH3 COCl

CH2CI2

Eb-oxim

CH3 j CH3 COCl

Eb

Beispiel 15

9-(O)- 2,6-Dimethyl-4-/3-(N ,N-dimethylamino) -propyloxycarbonyl/ — -benzoylerythromycin B-oxim (15)

Eine Mischung von 50 ml Methyl endi chlor id, 1,52 ml (21,8 mMol) Triäthylamin und 0,416 ml (3,54 mMol) 3-Dimethylamino-i-propanol wird bei 25°C gerührt, wobei 0,592 ml (3,26 mMol) 2,6-Dimethylterephthaloylchlorid innerhalb von 15 Sekunden zugesetzt werden. Man rührt die Mischung 1 Stunde bei 25°C. Die IR-Analyse einer

' —1 —1

Probe ergibt Banden bei 1792 cm (Säurechlorid) und 1719 cm (Ester). Man versetzt die vorgenannte Lösung von 2,6-Dimethyl-4- -/^-(NjN-dimethylaminJ-propyloxycarbony^-benzoylchlorid mit 2 g (2,72 mMol) Erythromycin B-oxim. Nach 5 Stunden bei 25°C verdünnt man die Mischung mit 50 ml Methylendichlorid und wäscht dann mit

- 18 -

40981 7/1175

25 ml Iprozentiger Natriumbicarbonatlösung. Die -Waschflüssigkeit wird abgetrennt und mit 30 ml Methylendichlorid extrahiert. Die vereinigten Meth'ylendichloridphasen werden über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Es verbleiben 3,21 g Rohprodukt.

Die Probe wird in 2 Anteilen auf einer 200 g-Säule von Kieselgel unter Verwendung von Äthylacetat/15 ?° Methanol/1 fo Triäthylamin als Elutionsmittel chromätographiert. Alle 8 Minuten werden Fraktionen von 8 bis 10ml aufgefangen und auf Basis der Dünnschichtchromatographieergebnisse vereinigt. Man dampft das Elutionsmittel ab und löst den Rückstand in 100 ml Benzol. Die Benzollösung wird mit 25 ml Iprozentiger Natriumbicarbonatlösung und danach mit 10 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen über Natriumsulfat wird das Benzol abgedampft. Man erhält 2,42 g der Verbindung _1_5 in Form einer glasigen Substanz, die man 3 Tage in einem Vakuumofen bei 73⁰C trocknet.,

C₅₂H₃₇N₃Oj₅ (994,283) J'ber.: 62,82 8,82 4,23 24,14 -..,'" gef.: 62,98 9,05 4,22 24,01

Das Reaktioaisschema für Beispiel 15 ist folgendes:

COCl

COCl

CH₃

CH3

CH₂Cl₂ Et₃N

CH₃ I CH₃ COCl

Eb-öxim

CH₃

CH₃ J, CH₃

°* ^X? CH₃

N · ³

HC-..

Eb

Beispiel 16

9-(O) —Γ2,6-Dimethyl-4-^f--( 4-metIiyl-i -pentyl) -carTjamyl/J-'-benzoylerythromyc in. B -o xim (16)

Nach, dem Verfahren der Beispiele 8 und 9» wobei man jedoch 1-Amino-4-methylpentan anstelle von n-Butylamin einsetzt, erhält man die Verbindung Jij5.

C H FO

C₅₃H₈₉N₃O₁₄ (992,312); ber.: 64,15 9,04 4,23 22,57

gef.r 64,00 9,24 4,17 22,36

- 20 -

409817/1175

Das Reaktionsschema für Beispiel 16 ist folgendes:

COCl

CH₃ I CH3 ^J COCl

P^H3 CH₃

Et₃N

CH2C12

H CH₃

CH₃

j Eb-oxim

CH₃ f CH₃ COCl

Eb

Beispiel .17

9-(O) -{2,6-Dimethyl-4-Z3-(N ,N-dimethylainino) -propylcarbamyl/)— —benzoylerythromycin B-oxim (17)

Eine am Eisbad gekühlte Mischung von 125 ml Methylendichlorid und 3,82 ml (27,3 mMol) IDriäthylamin wird mit 1,36 ml (7,5 mlol) 2,6-Dimethylterephthaloylchlorid versetzt. Unmittelbar darauf fügt man 0,93 ml (7,5 mMol) 3-Dimethylamino-i-propylamin hinzu. Man entfernt das Eisbad und rührt die Mischung 45 Minuten bei 25⁰C. Eine Probe zeigt IR-Banden bei 1780 cm~ (Säurechlorid) und 1655 cm" (Amid). Anschließend versetzt man die lösung des 2,6-Dimethyl-4- -^3-(N,N-dimethylamino)-propylcarbamyl7-benzoylchlorid mit 5 g (6,82 mMol) Erythromycin B-oxim. Das Gemisch wird 5,5 Stunden bei 25⁰C gerührt und hierauf dreimal mit jeweils 50 ml Iprozentiger. Natriumbicarbonatlösüng gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Man erhält 7,04 g Rohprodukt.

- 21 -

0 981771 175

2947

Die Probe wird in 2 Teilmengen an einer 2OG g-Kieselgeisäuie unter Verwendung von Äthylacetat/50 f» Methanol/1 fo Triäthylamin als EIutionsmittel chromatοgraphierf. Alle 24 Minuten werden Fraktionen von 10 bis 14 ml aufgefangen und auf Basis der Dünnschichtchromatographie ergebni sse vereinigt. Nach dem Eindampfen des Elutionsmittels erhält man insgesamt 5,47 g der gereinigten Verbindung J_7.

. . CHNO

C₅₂H₈₈N₄O₁₄ (993,299)? ber.: 62,88 8,93 5,64 22,56

gef.: 63,15 9,17 5,56 22,70

Das Reaktionsschema für Beispiel 17 ist folgendes: COCl

CH₃ I CH₃

coci

CH₃ I CH₃ COCl

Eb

Beispiel

9-(0)-(2,6-Dimethyl-4-carboxy)-benzoylerythromycin B-oxim (18) Man löst eine Probe von 1 g der Verbindung 2 in 135 ml Äthanol, in welches zuvor Wasserstoff eingeleitet wurde. Die Mischung wird in Gegenwart von 0,5 g 5 $> Pd-CaCO^. in einer Wasser stoff atmosphäre gerührt. Nach 2 Stunden ist das theoretische Wasserstoffvolumen verbraucht. Das Gemisch wird filtriert und das Äthanol

- 22 -

409 81 7/1 17.5

abgedampft. Man erhält 0,9 g der Verbindung 18 in. Form einer gla sigen Substanz. Die Probe wird in 18 ml warmem Methylendichlorid gelöst und die lösung" mit 10 ml Amylacetat versetzt. Beim Stehen bilden sich Kristalle; man erhält 0,73 g der reinen Verbindung JH vom Fp. 157 bis 168⁰C.

CH NO-

C₄₇H₇₆N₂O₁₅ (909,134),· ber.: 62,09 8,43 3,08 26,40

gef.: 62,23 8,67 3,06 26,77

Das Reaktionsschema für Beispiel 18 ist folgendes:

, Äthanol

5% Pd.-CaC03 '

Eb

Eb

Beispiel 19 Chlorierung von Mesitoylchlorid

Eine Probe von 19,66 g (0,108 Mol) Mesitoylchlorid wird in einen mit Kühler, Gaseinlaßrohr und Magnetrührstab ausgestatteten Dreihalskolben gegeben. Die Flüssigkeit wird gerührt und am Ölbad auf 130 bis 140⁰C erhitzt. Man bestrahlt den Kolben mit einer 150 Watt -Flutlichtlampe und leitet indessen Chlorgas in die Flüssigkeit ein. Nach 45 Minuten beträgt der Gewichtsanstieg 3,96 g (theoretischer Wert für die Mono Chlorierung 3,74 g) · Die Chloreinleitung wird dann unterbrochen und die Flüssigkeit durch eine 50 cm-Podbielniak-Kolonne bei 12,5 Torr (Kp. 147 bis 149°C) destilliert.

- 23 -

40 9817/1175

Vl

Man erhält 11,2 g Produkt.

	(217	,097)1	ber.s	C	33	H	32	Cl
C10H10°2Cl2			gef.:	55,	07	4,64	32	,66
			55,	4,68	,52

Die IR-Analyse zeigt eine Bande bei 1795 cm (Säurechlorid). Die Untersuchung der Probe durch Kernresonanz ergibt, daß das Produkt ein Gemisch aus etwa gleichen Teilen 2-Chloraethyl-4,6-dimethylbenzoylchlorid und 4-Chlormethyl—2,6-dimethylbenzoylchlorid darstellt.

Beispiel 20

9-(O) -/2,6-Dimethyl-4-(N ,N-dimethylaminomethyl)_7-benzoylerythromycin B-oxim (20)

Ein Gemisch von 200 ml Methylendiehlorid, 8 g (10,9 mMol) Erythromycin B-oxim und 6,1 ml (43,6 mMol) Triäthylamin wird bei 25 C unter Rühren mit 2,33 ml (13,1 mMol) des Gemisches des 2- und des 4-Chlormethylisomeren von Beispiel 19 versetzt. Nach 5stündigem Stehen bei 25⁰C wäscht man die Mischung zweimal mit Jeweils 70 ml Iprozentiger Natriumbicarbonatlösung. Anschließend trocknet man über Natriumsulfat und dampft ein. Dabei erhält man 10 g der rohen isomeren Oximester. Dieses Gemisch wird ohne Reinigung weiterverwendet.

Die Probe der isomeren Oximester wird in einem Gemisch von 500 ml Methanol und 20 g Dimethylamin gelöst. Man läßt die Lösung 6 Stunden bei 25⁰C stehen. Anschließend engt man die Methanollösung unter Verwendung eines Rotationsverdampfers und eines Wasserbades von 35°C bis zu einem Volumen von 50 ml ein. Der Rückstand wird mit 250 ml Benzol vermischt und das Gemisch einmal mit 100 ml und dreimal mit jeweils 50 ml Iprozentiger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Die vereinigten Waschflüssigkeiten werden mit 100 ml Benzol rückextrahiert. Man trocknet die vereinigten Benzolextrakte über Natriumsulfat. Nach dem Eindampfen erhält man 8,16 g eines Gemisches aus der Verbindung _20 und Erythromycin B-oxim. Man löst die Probe in 25 ml Chloroform und fügt 70 ml Hexan hinzu. Beim Stehen scheiden sich 3,72 g kristallines Erythromycin B-oxim ab,

- 24 -

409817/1175

2947

die abfiltriert werden. Das Filtrat wird eingedampft; man erhält 5,28 g eines Rückstands, der hauptsächlich aus der Verbindung _20 "besteht. Die weitere Reinigung wird durch Säulenchromatographie von 2,6 g-Proben an 200 g-Eieselgelsäulen unter Verwendung von Äthylaeetat/10 fo Methanol/1 $ Triäthylamin als Elutionsmittel vorgenommen. Fraktionen von 6 Ms 8 ml, die man alle 8 Minuten entnimmt," werden auf Basis der Dünnschichtchromatographieergebnisse vereinigt. Das Elutionsmittel wird abgedämpft und der Rückstand in 100· ml Benzol gelöst. Man wäscht die Benzollösung dreimal mit jeweils 50 ml Natriumbicarbonatlösung, trocknet dann über Natriumsulfat und dampft ein. Dabei erhält man 1,67 g der Verbindung _20_, welche frei von Erythromycin B-oxim ist. Eine abschließende Reinigung wird dadurch erreicht, daß man eine geringe Menge 2,4-Dimethyl-6-dimethylaminomethyl~lf ,N-dimethylbenzamid durch Chromatographie an einer 84 χ 1,5 em-Säule von Sephädex LH-20 unter Verwendung von Methanol als Elutionsmittel abtrennt. -Das Elutionsmittel wird^: aus den vereinigten Fraktionen abgedampft und der Rückstand in 80 ml Benzol gelöst. Man wäscht die Benzollösung mit 30 ml verdünnter wässriger Natronlauge, trocknet dann über Natriumsulfat und dampft ein. Dabei erhält man 0,82 g der reinen Verbindung 20* ■ ,

■ C H NO

O₄₉Hg₃N₃Q₁₃ (922,219); ber.i 63,82 9,07 4,56 22,55

gef.t 63,90 9,31 4,42 22,66

- 25 -

409817/1175

Das Reaktionsscliema für die Beispiele 19 und 20 ist folgendes:

CH₃

,Cl

CH₃ I CHf COCl

CH₃ j CH₃ COCl

Et₃N

CH2CI2 Eb-oxim

Cl

CH₃ I CH₃ .C.

Eb

HN(Me)₂, MeOH

25⁰C

Me = Methyl

CH₃

N. CH₂^ CH₃

CH₃

+ Eb-oxim

CH2^X"^SCH₃

Eb

- 26 409817/1175

Tt

Beispiel 21

9-( O)-( 2,4 1 6-Trimethyl)-ben.zoylerythromycin A-oxim-hydrochlorid (21) Man löst eine Probe von 3 g der Verbindung 2 in 50 ml Methanol und versetzt die Lösung mit 6,7 ml 0,5 η methanolischer Salzsäure. Das Lösungsmittel wird abgedampft und der Rückstand 2 Stunden in einem Vakuumofen bei 65⁰C getrocknet.

Cl

C₄₇H₇₉N₂O₁₄Cl (931,612); ber.: 3,92

gef.: 3,38

Beispiel 22

Essigsäuresalz von 9-(Q) -(2,4,6-Trimethyl) -benzoylerythromycin A-oxim (22) :

Man löst eine Probe von 3 g der Verbindung 2 in einem Gemisch aus 40 ml Benzol und 10 ml Methanol. Anschließend fügt man 0,195 ml Essigsäure hinzu und dampft die Mischung ein. Der Rückstand wird unter Anwendung einer Ölpumpe getrocknet. Die Untersuchung der Probe durch Kernresonanz ergibt ein mit dem Essigsäuresalz im Einklang stehendes Drei-Protonen-Singulett bei 0,000201 f» (2,01 ppm.)·

Beispiel 23

9-(0)-/2_>6-Dimethyl-4-(n-butyloxycarbonyll7-benzoylerythromycin B-oxim (23)

Gemäß der Arbeitsweise von Beispiel 14, wobei man jedoch n-Butanol anstelle von 4-Methyl-1—pentanol einsetzt, erhält man die Verbindung 23«

C H N O

C₅₁H₈₄N₂O₁₅ (965,241); ber.: 63,46 8,77 2,90 24,86

gef.: 63,00 8,83 2,90 24,63

Die Aktivität der Verbindungen gegenüber-grampositiven und gramnegativen Bakterien wird anhand eines Agar-Verdünnungstests geprüft. In den Tabellen I bis IV sind die Testergebnisse in Form der MHK- -Werte (MHK = minimale Hemmkonzentration), ausgedrückt in Mikrogramm (Anteil der Verbindungen verschiedener Bei spiele)/ml, wiedergegeben. In Klammern sind die Ergebnisse weiterer Tests angegeben, bei denen die Verdünnungsreihe auf logarithmischer Basis beruht.

- 27 -

409817/1 "175

Der powert des Agar-Verdünnungsmediums beträgt 7,4.

Die Ergebnisse eines in-vivo-Tests sind aus Tabelle V ersichtlich,

- 28

409817/1175

2947'

Bakterien

Ergebnisse des "biologischen in-vitro-Tests
Tabelle I

Staph. aureus 9144 Staph. aureus Smith Staph. aureus Smith ER Staph. aureus Quinones S-fcaph. aureus Wise 155 Strep, faecalis 10541

E. coli Juhl

Klebsiella pneumoniae IOO3I Proteus vulgaris Abbo.tt JJ Proteus mirabilis Pinnland Nr.9 Salmonella typhimurium ED Nr.9 Pseudomonas aeruginosa BMH Nr.10 Strep, pyogenes Roper Strep, pyogenes Scott

Pilze

C. globosum
M. verrucaria
A. versicolor
P. citrinum
P. oxysporum
Alternaria
Rhizopus nigricans

Weitere Mikroorganismen

Myco. gallisepticum S6 Myco. granularura 19168 Myco. hyorhinis 17981

Eryi	A	Ery	. B	Vbdg.1	•Vbdg.3
0,	39 .	0	,39	1,56	0,78
0,	39.	0	,39	1,56	0,78
>100		>100		>100	>100
>100.		MOO		>100	25 ·
>100		>100		>100	50
0, 100	1	0 100	,05	0,39 >100(>1000]	0.2 ) >100(1000)
6.	2	6	.2	>100	25
>100(	1000)	>100	(1000)	>100(>10001	> >100(1000)
>100(	1000)	>100	(1000)	>100(>1000	>100(>1000)
50		100		>100(>1000	100
50		100		>100(>1000	100
>100		>100		>ioo ■	25
>100		>100		>100	25
>100		>100		>100	>100 - '
>100		>100		>100	>100
>100		>100		>100	>100
>100		>100		>100	>100
>100		■>.100		>100	>100
>100		>100		>100	>1Ö0
/100		>100		>100	>100
0,	02	0	,02	0,02	0,02
0,	05	0	,02	0,05	0,05
100		100		>100	10

- 29 -

CJJ O CD

2947

Weitere Mikroorganismen

Myoo. pneumoniae PH Pan. redivivus Static Pan. redivivus Cidal Trichomonas vaginalis GlMl Crithidia fasciculata Hemophilus influenzae 9334

Ergebnisse des biologischen in-vitro-Tests

Tab	ell	e I	(Fortsetzung)	Vbd^.1	Vbd*.3
Ery.	A	Ery.	B	0,005	0,01
O,	02	o,	02	^100	>100
>100		>100		>100	>100
>100		>100		>100	100
>100		>100		MOO	>Ί00
>100		>100		>100	25
2,	5	5,	0

30 -

2947

Bakterien

Ergebnisse des biologischen in-vitro-Tests Tabelle II

Ery. A 0,3.9 0,39

>100

>100

>100

Ery. B 0,39 0,39

MOO

>100

>100 Vbdg.5
0,78

0,39
>100
25
50

Vbdg.7,

100

100
MOO
MOO
MOQ

0,2
100

25
MOO(MOOO)

> 100

Vbdg.9 1,56

3,1 >100 50 100 0,39

100

Staph. aureus 9144

Staph. aureus Smith

Staph. aureus Smith ER Staph. aureus Quinones Staph. aureus Wise 155 Strep.faecalis

10541 0,1 0,1

E.coli Juhl 100 Klebsiella pneu-

moniae 10031 6,2 ' 3,1 Proteus Yulgaris

Abbott JJ >100(1000) 7100(1000) >100(1000) >100(M000) > 100(MOOO)

Proteus mirabilis

Finnland Nr.9 >100(1000) 7100(1000) 7100(1000) MOO(MOOO) >100(M000)

Salmonella typhi-

'""' " MOO(MOOO) MOO(IOOO)

>100 >100

MOO(MOOO) y

. 100 100

100

- 31 -

murium ED Nr.9	50.	100	50
Shigella sonnei
9290	25	'25,	50
Pseudomonas aeru-
ginosa BMH Nr. 10	50	100	100
S t r ep.pyo gene s
Roper	>100	>100	50
Strep.pyogenes
Scott	>100	>100	50

Vbdg.11 1,56 1,56 >100 50

>100 1,56

y\ 00(1000)

50

> 100(MOOO) >100(>1000) >100(1000) >100

>100(1000) MOO 7100

σ co oo

2947

Pilze Ery. A

CgIobo sum >100

M.verrucaris >100

A.versicolor >100

P.citrinum >100

F.oxysporum >.1OO

Alternaria >100

R.nigricans MOO

Weitere Mikroorganismen

Mycö.galli-

septicum S6 · 0,05 Myco.granu-

larum 19168 0,05

Myc ο. hyo rhini s

17981 100

Myco .pneumoniae

FH 0,02

Panagrellus re-

divivus Static M 00 Pariagrellus re-

divivus Cidal >100 Tricliomonas

vaginali s ClMl MOO Crithidia

fasciculata >100 Haemophilus

influenzae 9334 2,5

Ergebnisse des biologischen in-vitro-Tests T a b e 1 1 e II (Fortsetzung)

Ery. B

>100 >100 >100 >100 >100 >100 >100

, 0,1

100

0,05 >100 >100 >100 MOO 5,0 VMg. >100

>100 MOO MQO >100 >100

0,05 0,05 5,00 0,02

>100 10,0

Vbdg.7

100

5,0 >100

1,0 >100 >1OO >100 MOO MOO

- 32 -

Vbdg.9

Vbdg.11

25	10
0,25	0,25
50	10
0,25	0,05
>100	>10Ö
>100	>100
>100	>100
>100	>100
25	10

2947

Bakterien

Ergebnisse des bio logischen in-yitro-Tests
labe 11 β III

Staph;aureus 9144 Staph.aureus Smith. Staph.aureus Smith ER Staph.aureus Quinones Staph.aureus Wise 155 Strep.faecalis 10541 E.coli Juhl

Klebsiella pneumoniae 1003.1 Proteus vulgaris Abbott JJ Proteus mirabilis Pinnland Kr.9 Salmonella typhimurium ED Nr.9 Shigella sonnei 9290 Pseudomonas aeruginosa BlH Nr, Strep»pyogenes Roper■ Strep.pyogenes Scott.

Weitere Mikroorganismen

Myco.gallisepticum S6 Myco.granularum 19163 Myco.hyorhinis 17981 Mycο „ pneumoniae FH Pan.redivivus Static Pan.redivivus Cidal Trichomonas -vaginalis GUI Crithidia fasciculata Haemophilus influenzae 9334

Ery. A	Ery. B	Vbdg.2	Vbdg.4
0,2 '	0,39	0,78	0,39
0,2	0,39	0,39	0,39
>100	>100	>100 ?	>100
>100	>100	>100·	MOO
>1Ö0	>100	25	25
0,05 50	0,05 100	0,39 ■.. >100(1000)	0,1 . MOO(IOOO)
6,2	3,1	50	25
>100(1000)	>100(1000)	>100(>1000)	>100(1000)
>100(1000)	>100(1000)	>100(>1000)	. MOQ(IOOO)
50	•too	>100(1000)	50
25	25	100	25
100	100	100 .	100
>100	>100	100	100
>100	MOO	100	100
0,05	0,1	2,5	1,0
0,02	0,02	0,25	0,25
25	100	2,5	10
0,01	0,02 .	0,02	0,02
>100	>100	>100	MOO
MOO	>100	>100	>100
>100	>100	>100	>100
>100	>100	>100	>1OO
2,5	5,0	25	25

- 33 -

CZ) CD

.{S CS

co

co

—J.

-J

cn

2947

Bakterien Staph. aureus 9144

Staph. aureus Smith

Staph. aureus Smith BR

Staph. aureus Quinones

Staph. aureus Wise

Strep. faecalis 10541

E.coli 'Juhl

Klebsiella pneumoniae 10031

Proteus vulgaris Abbott JJ

Ery. Ergebnisse des biologischen in-vitro-Tests Tabelle IV

Ery. B Vbdg.12 Vbdg.18 Vbdg»14 Vbdg.17 Vbdg.20 Vbdg.13 Vbdg.15

0,39 0,39 1,56 1.2,5 12,5 6,2 0,39 6,2

0,39 0,39 1,56 12,5 12,5 3,1 0,39 6,2

>100 >100 >100

>100 >100

>100 >100 >100

>100

>100

?Ί00

>100 >100 >100

12,5 >100

12,5 >100

>100

12,5 MOO

>100

0,05 0,05 1,56 12,5 3,1 6,2 0,2 3,1 0,39

>100 >100 >100 . . >100 >100 MOO

50 100 (1000) (>1000) (>1000) (>1000) >100 (1000) (1000)

6,2 6,2 100

>100 >100 >100

12,5 100

>100 >«100 >100 >100 MOO >100 . >100 MOO MOO

(1000) (1000) (yiooo) (>iooo) (>iooo) (>iooo) (yiooo) (>iooo) (>iooo)

- 34 -

Ui

2947

-

Ery .A

Ergebnisse des bj

a b- e 1 1

Lologischei

Vbdg.14

Vbdg.17

Vbdg.2O

Vbdg,13

Vbd^.15

CO

>100 . 9 (1000)

Vbdg.12

■χ m-vitro-Tests

>100 (>1000)

(>1000)

>100 ■ (>1000)

>100 (>1000)

>100 . (>1000)

cn CD CJ) -J NJ

Bakterien

50

Ery. B

>100 (?1000)

e IV (Fortsetzung)

>100 Oiooo)

100

25

100

12,5

Proteus mirabilis Filmland. Nr.

25'

>100 (1000)

100

Vbdg.18

>100

100

12,5

100 .

, "»2,5

Salmonella typhimurium ED Nr.9

50

50

50

>100 (>1000)

>100 Oiooo)

>100 (1000)

50

>100 (1000)

>100 (1000)

Shigella sonnei 9290

25

>100 (1000)

> 100 . Oiooo)

-P- CD CO

Pseudomonas aerugino sa BlIH Nr. 10

>100

' 50

>100

3,1

>100

100

>100

>100

00

Strep.

>100

>100 (>1000)

pyogenes Roper

>100

>100

6,2

> 100

100

>100

>100 1^

3.

Strep.

6,2

>100

>100

>100

>100

12,5

100

25

-a cn

pyogenes Scott

3,1

>100

50.

>100

>100

6,2

50

12,5

Haemophilus influenzae 9334

3,1

■12,5

. 12,5

>100"

>100

>100

6,2

25

25

Haemophilus influenzae Brimm GSF

3,1

25

100

Haemophilus influenzae' Illinois

3,1

100

100

- 35 -

	2947	Ery. A	Ergebnisse des biologischen in-vitro-Tests	a b e 1 1	e IV	(Fortsetzung)	—	% H Vbd£.17	Vbdff,20	Vbdg.13	Vbd,	i.15	•	,02	2350672
		3,1	T	Vbdg.12	Vbdg.	18 Vbd£	>100	12,5	50	25		,02
	Bakterien	3,1	Ery. B	25	100	>100	>100	6,2	25	25		,0-
	Haemophilus influenzae Patterson	3,1	6,2	25	100	>100	>ioo	6,2	25	t 25		,01
	Haemopliilus influenzae Shemwell		6,2	25	100	>100
	Haemophilus influenzae Terry		6,2
O	Weitere Mikro	0,05					,5 0,25	0,005	0,05	0
(O . OO	organismen	0,02		0,02	2,5	0,	,0 0,02	0,005	0,25	0
	Myco.galli- septicuni S6	50	0,05	0,05	2,5	5,	>100	0,25	25	1
	Mycο.granula- rura 19168	0,01	0,02	5,0	>100	100	,25 0,02	0,005	0,02	0
-Jf cn	Myco .hyorhinis I798I	>100	100	0,05	1,0	O1	>10O	>100	>100	>100
	Myco.pneu- moniae · PH	>100	0,01	>100	>100	25	>100	>100	>100	>100
	Trichomonas vaginal!s ClMl		>100	>100	>100	>100
	Crithidia fasciculata	>100		- 36

Die E:rythromycinder,ivate werden auch einem in-vivo-Test unterzogen. Sie werden Mäusen oral verabfolgt, um eine künstliche Infektion mit Staphylococcus aureus zu behandeln. Die Ergebnisse sind aus Tabelle V ersichtlich:

'V. .': Tabelle V

Verbindung ungefährer CD^-Wert

Nr. ' - .;. ; (mg/kg) ^

1 . ' - ' . 100-200

3 50-100 5 ' 100

7 ■..'-":-"■ 200-400

9 .:, ■: 200-400

11 100-200

2 150-300

4 - ' 300 ^:...^: '■

12 ■; : 150-300: ' :■; 18 ' >300 , " 14 ■- I5O-3OO -. ;

17 . ' ..: >3oo :_

13 · >300 .-: .15 ■ >300

21 ' 150

22 ■ . 200

Die bekannten Ester von Erythromycineximen weisen, wie erwähnt, eine unerwünschte Hydrolyseanfälligkeit auf. Diese Ester besitzen eine beachtliche Reaktionsfähigkeit gegenüber nuklepphilen Substanzen, .wie Wasser, Alkoholen und primären sowie sekundären Aminen einschließlich der endständigen NHp-Gruppe von Amj.no säureestern und Peptiden. In vielen Fällen findet eine derartige Hydrolysereaktion leicht und rasch bei Raumtemperatur statt.

Was die erfindungsgemäßen Verbindungen betrifft, wurde gefunden, daß die Hydrolysegeschwindigkeit dieser Ester wesentlich herabgesetzt ist. Dies ist zweifellos auf die Verstärkung der sterischen Hinderung um die Estercarbonylgruppe zurückzuführen.

- 37 -

409817/1175

2947

Zur Veranschaulichung des unterschiedlichen Solvolyaeverhaltens
der herkömmlichen Ester bzw. .der Ester der Erfindung werden typische erfindungsgemäße Ester sowie ein bekannter Ester von Erythromycinoxim der Solvolyse durch Methanol unterworfen. Die Solvolyse-Reaktionsgeschwindigkelten werden dabei dünnschichtchromatographisch untersucht und die Ms zur Halb-Solvolyse der Ester erforderlichen Zeitspannen bestimmt« Die Ergebnisse sind aus Tabelle VI ersichtlich.

Tabelle

VI

Vergleich der Methanolysegeschwindigkeiten verschiedener	(herkömmlich)	Halbwertszeit bei 25°C
Erythromycinoximester Verbindung	(Beispiel 1)	1 Tag
0 B=N-O-C-/ \		10 Tage
O CHv Ii / 3 B=N-O-C-C-CH3 CH3	(Beispiel 2)
CH3	keine Reaktion nach 40 Tagen
B=N-O-C-/ /^σΗ3

- 38 -

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Claims (20)

1. Ester von Erythromycin A-oxim und Erythromycin B-oxim mit der nachstehenden allgemeinen Formel

N(CII₃) ₂

(Desosamin)

(Cladinose)

CH₃ OCH₃

(Erythronalid)

in der R^ ein Wasserstoff atom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet und R einen voluminösen Alkylrest oder einen substituierten Arylrest darstellt, wobei der substituierte Arylrest die
nachstehende allgemeine Formel aufweist

in der Rp ^²¹^ ^R^ jeweils einen Niederalkylrest bedeuten und
R, eine Carboxamid- oder Carbonsäuregruppe oder einen Alkyl-, Carboxyalkyl-, Aminoalkyl-, substituierten Aminoalkyl-, Garboxyaryl- oder Carboxyaminoalkylrest¹ darstellt, sowie die Salze aller vorgenannten Verbindungen.

- 39 -

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2. Verbindung nach. Anspruch. 1 mit der Bezeichnung 9-(O)-Trimethylacetylerythromycin B-oxim. . .

3. Verbindung nach. Anspruch 1 mit der Bezeichnung 9-(O)-(2,4,6- -Trimethyl)-benzoylerythromyein A-oxim.

4. Verbindung nach Anspruch 1 mit der Bezeichnung 9-(0)-(2,4,6- -Trimethyl)-benzoylerythromycin B-oxim. ...

5. Verbindung nach Anspruch. 1 mit der Bezeichnung _r9-(0).-( 2,6- -Dimethyl-4-carbomethoxy) -benzoylerythromycin A-oxim.

6. Verbindung nach Anspruch 1 mit der Bezeichnung 9-(O)-(2,6- -Dimethyl-4-carbomethoxy)-benzoylerythromycin B-oxim.

7. Verbindung nach. Anspruch 1 mit der .Bezeichnung 9-(0)-(2,6- -Dimethyl-4-benzyloxycarbonyl)-benzoylerythromycin B-oxim.

8. Verbindung-nach Anspruch 1 mit der Bezeichnung .9-(O)-^2.^6- -Dimethyl-4-(N-n-butylcarbamyl)_7-benzoylerythroraycin B-oxim.

9. Verbindung ,nach Anspruch 1 mit der.Bezeichnung. 9-(Q)-^2^6— -Dimethyl-4-(N-morphQlinylcarbonyll7-benzoylerythromycin B-oxim.

10. Verbindung nach Anspruch 1 mit der Bezeichnung.. 9-(0)rZ2j&~

- -Dimethyl-4-(N-methylpiperazinylcarbonyll7-benzoyleryth.romycin B-oxim.

11. Verbindung nach Anspruch. 1 mit der Bezeichnung 9-(O)-{2,6- -Dimethyl-4-2^-( 2-hydroxypropyl) -N-piperazinylcarbonyl/j—
-benzoylerythromycin B-oxim.

12. Verbindung nach Anspruch 1 mit der Bezeichnung 9-(0)-/2,6- -Dimethyl-4-( 4-methyl-1 -p ent yloxy carbonyl )/-benzoyl erythromycin B-oxim.

13.. Verbindung nach Anspruch 1 mit _rder Bezeichnung 9-(O)-{2,6-

- 40 -

2947 ty

-Dimet]iyl-4-Z3-(N,N-dimetliylamino) -propyloxycärbonyl/^-
-benzoylerythromycin B-oxim. ;

14. Verbindung nach. Anspruch 1 mit der Bezeichnung 9-(0)-«(2,6- -Mmethyl-4-/N-{ 4-methyl-1 -pentyl) -carbamyl/^-benzoylerythromycin B-oxim.

15·"Verbindung nach Anspruch 1 mit dei* Bezeichnung 9-{0)-

-Dimethyl-4-/3-(N ,N-dimetnylamino ) -propylcarbamyl/}—benzoyl erythromycin B-oxim. ■

16. Verbindung nach. Anspruch 1 mit der Bezeichnung 9-{0)-(2,6- -Dimethyl—4-carboxy)-benzoylerythromycin B-oxim. ■ ■

17." Verbindung nach Anspruch 1 jnit der Bezeichnung S-{0)-/2,6- -Dimethyl-4-(N
-ein B-oxim.

18. Verbindung nach. Anspruch 1 mit der Bezeichnung g^ -Trimethyl) -benzoylerythromycin A-oxim-hydrochlorid

19. Verbindung nach Anspruch 1 mit der Bezeichnung 9-{Q')-(2^4»6 -Trimethyl) -benzoylerythromycin A-dxim-essigsaure salz.

20. Verbindung nach Anspruch 1 mit der Bezeichnung 9-(0)-/2,6- -Dimethyl-4- (n-butyloxycarbonyl )/-benzoylery thromyc in B-öxim.