DE2332485C2

DE2332485C2 - Gentamicin C1-derivate, Verfahren zu deren Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel

Info

Publication number: DE2332485C2
Application number: DE2332485A
Authority: DE
Inventors: Masakata Yokohama Konishi; Hiroshi Mitaka Tokyo Tsukiura
Original assignee: Bristol Myers Co
Current assignee: Bristol Myers Co
Priority date: 1972-06-26
Filing date: 1973-06-26
Publication date: 1982-10-21
Also published as: JPS5012049A; GB1438188A; DE2332485A1; BE801419A; JPS5714354B2; US3780018A; FR2190416A1; FR2190416B1

Description

H₃C

H₃C-NH

OH

in der R oder R¹ L-( —)-4-Amino-2-hydroxybutyryl und der andere Rest Wasserstoff bedeuten, und deren Säureadditionssalze.

2. Mono- und Disulfatsalze der Verbindungen gemäß Anspruch 1.

3. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man jeweils in an sich bekannter Weise Gentamicin Ci mit einem Derivat der L-(-)-4-Amino-2-hydroxybuttersäure umsetzt und aus dem erhaltenen Reaktionsgemisch 1-N- sowie 2'-N-L-(-)-4-Amino-2-hydroxybutyrylgentamicin Ci gewinnt.

4. Arzneimittel enthaltend mindestens eine Verbindung der Ansprüche 1 und 2.

Die Erfindung betrifft Gentamicin-Ci-derivate, Verfahren zu deren Herstellung und sie enthaltende Arzneimittel.

Gentamicin und dessen Fermentierung sind Gegenstand der US-PS 30 91572 und 3136 704. Diese Patentschriften beschreiben die Fermentation von Gentamicinkomplexen aus Micromonospora purpurea, NNRL 2953 und Micromonospora echinospora, NNRL 2985. Varianten davon wurden auch bei der Stock Culture Collection of the United States Department of Agriculture, Northern Utilization Research and Development Division, Peoria, Illinois als M. echinospora var. ferruginea, NNRL 2995 und M. echinospora var. pallida, NNRL 2996, hinterlegt. .

Gentamicin ist außerdem im Merck Index, 8. Auflage, Seite 485 beschrieben. Darin sind die zwei Hauptkomponenten, Gentamicin Ci und C2 beschrieben..

Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind halbsynthetische Derivate von Gentamicin Ci, werden als 1-N- oder 2'-N-N-L-( — )-4-Amino-2-hydroxybutyryl-Gentamicin Ci bezeichnet und entsprechen der allgemeinen Formel I

(D

NH-R

OH

in der R oder R¹ L-(—)-4-Amino-2-hydroxybutyryl und der andere Rest Wasserstoff bedeuten, und deren Säureadditionssalze.

Bevorzugte Verbindungen sind die Mono- und Disulf atsalze der Verbindungen gemäß Anspruch 1.

Die Säureadditionssalze sind Mono-, Di-, Tri-, Tetraoder Pentasalze, die durch Umsetzen von 1 Molekül Verbindung der allgemeinen Formel I mit 1 bis 5 Mol einer nicht-toxischen, pharmazeutisch verträglichen Säure gebildet sind. Zu diesen Säuren gehören Essigsäure, Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Maleinsäure, Phosphorsäure, Salpetersäure, Bromwasserstoffsäure, Ascorbinsäure, Apfelsäure und Zitronensäure und die anderen Säuren, die allgemein zur Herstellung von Aminogruppen enthaltenden Pharmazeutika verwendet werden.

Zu den erfindungsgemäßen Verbindungen gehören auch die Mono- oder Polyhydrate der oben erwähnten Verbindungen.

Gentamycin wird als ein Komplex von drei eng verwandten Komponenten, die mit Cj, C2 und Cj_a bezeichnet werden, fermentativ erhalten. Zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen geht man von Gentamicin Ci aus, das die folgende Formel H besitzt:

CH₃

* 1

«CH —NH-CH₃
-O

30

35

40

H₃C-N

OH

50 OH O
W—NH- CH₂-CH₂-CH-C-M

worin W einen aus dem Stand der Technik als Schutzgruppe für die primäre Aminogruppe bekannten Rest bedeutet und M einen Rest, ausgewählt unter der Gruppe

NO₂

jedoch zweckmäßig

55

Das Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen ist dadurch gekennzeichnet, daß man jeweils in an sich bekannter Weise Gentamicin Ci mit einem Derivat der L-( — )-4-Amino-2-hydroxybuttersäure umsetzt und aus dem erhaltenen Reaktionsgemisch 1-N- sowie 2'-N-L-(-)-4-Amino-2-hydroxybutyryIgentamicin Ci gewinnt. .

Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden auf folgende Weise hergestellt:

(A) Acylieren von Gentamicin C, mit einem Acylierungsmittel der allgemeinen Formel III

60

65 bedeutet, in einem Verhältnis von mindestens 0,5 Mol Verbindung III pro Mol Verbindung II, jedoch zweckmäßig in einem Verhältnis von etwa 0,5 zu etwa 1,4 und höchst zweckmäßig in einem Verhältnis von etwa 0,8 zu etwa 1,1, in einem Lösungsmittel, ausgewählt unter Mischungen von Wasser mit Äthylenglykoldimethyläther, Dioxan, Dimethylacetamid, Dimethylformamid, Tetrahydrofuran, Propylenglykoldimethyläther oder dergleichen, jedoch zweckmäßig in Wasser-Äthylenglykoldimethyläther (1 :1), wobei man eine Verbindung der allgemeinen Formel IVa:

CH₃

CH-NH-CH₃ O

und/oder IVb

CH₃

CH-NH-CH₃ -O

H
W—Ν — CH₂- CH₂- CH- C = <

OH

NH,

HO

NH₂

H₃C-N

(B) Entfernen der Aminoschutzgruppe W auf an sich bekannte Weise.

Falls W eine Benzyloxycarbonylgruppe bedeutet, kann diese zweckmäßig durch Hydrieren mit H₂ in Gegenwart eines Metallkatalysators, zweckmäßig mit Palladium auf Aktivkohle in einem Lösungsmittelsystem aus Wasser und einem mit Wasser mischbaren Lösungsmittel wie Dioxan, THF, Äthylenglykoldimethyläther, zweckmäßig in 1 :1 Wasser-Dioxan und in Gegenwart einer katalytischer» Menge Eisessig, entfernt werden. Zur Einführung der Schutzgruppe »W« der Verbindungen der Formel III können alle Acylierungsmiitel verwendet werden, die labile Aminblockieri'ngsgruppen ergeben, wobei diese labilen Blockier^lmgsgruppen durch allgemein bekannte Methoden leicht entfernbar sein müssen [siehe Zusammenfassung von A. Kapoor, J. Pharm. Sciences 59, Seiten 1 -27 (1970)]. Zu funktioneilen Äquivalenten als Acylierungsmittel für primäre Amingruppen gehören entsprechende Carbonsäurechloride, -bromide, Säureanhydride, einschließlich gemischter Anhydride und insbesondere die gemischten Anhydride, die aus stärkeren Säuren, wie den niedrigaliphatischen Mor.oestern der Kohlensäure, von Alkyl- und Arylsulfonsäuren und von sterisch gehinderteren Säuren, wie Diphenylessigsäui e gebildet werden. Darüber hinaus kann ein Säureazid oder ein aktiver Ester oder Thioester (beispielsweise mit p-Nitrophenol, 2,4-Dinitrophenol, Thiophenol, Thioessigsäure) verwendet werden, oder die freie Säure selbst kann mit dem

Gentamicin Ci Derivat gekuppelt werden, nachdem man zuerst diese freie Säure mit N,N'-Dimethylchlorforminiumchlorid [vergleiche GB-PS 1008 170 und Novak und Weichet, Experientia XXI/6, 360 (1965)] umgesetzt hat, oder man verwendet ein Alkinylaminreagens [R. Buijile und H. G. Viehe, Angew. Chem., International Edition 3, 582 (1964)] oder ein Keteniminreagens [C. L Stevens and M. E. Munk, J. Amer. Chem. Soc. 80, 4065 (1958)] oder ein Isoxazoliumsalzreagens [R. B. Woodward, R. A. Olofson und H. Mayer, J. Amer. Chem. Soc, 83, 1010 (1961)]. Ein weiteres Äquivalent des Säurechlorids ist ein entsprechendes Azolid, nämlich ein Amid der entsprechenden

10

Säure, dessen Amidstickstoff ein Glied eines quasiaromatischen fünfgliedrigen Ringes ist, der mindestens zwei Stickstoffatome enthält, nämlich Imidazol, Pyrazol, die Triazole, Benzimidazol, Benzotriazol und deren substituierte Derivate. Die Herstellung eines Azolids wird beispielsweise in den US-PS 30 79 314, 31 17 126 und 31 29 224 und in den GB-PS 9 32 644, 9 57 570 und 9 59 054 beschrieben.

Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen wird anhand des nachfolgenden Schemas näher erläutert:

(A) Gentamicin C, (II)

N-Hydroxysuccinimidester von L-(-)-4-benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybuttersäure_-

CH

(Va)

OH

CH₂ O

CH₂-NH-C-O-CH₂-C₆H₅

l-N-L-(-H-Benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutyiylgentaniicin C₁

und/oder

CH₃ CH-NH-CH₃

CH₂—O—C—N—CH₂—CH₂-CH—C—NH

NH₂

C₆H₅

OH

H₃C

H₃C-N

(Vb)

NH₂

OH

9 10

2'-N-L-(-)-4-Benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybutyrylgentamicin C,

(B) Verbindungen Va + b
H₂ZPdZQ

H₃C

H,C —NH

CH₃

CH—NH-CH₃ -O

H₂N — CH₂-CH₂-CH-C—NH OH

HO

OH

H₃C

γ—ο

H₃C—N ^ ^

NH₂

-NH₂

l-N-L-(—)-4-Amino-2-hydroxybutyryl-gentamicin Ci Die nachstehende Tabelle zeigt die minimalen (Ia) und 2'-N-L-(—)-4-Amino-2-hydroxybutyryl-genta- Hemmkonzentrationen (MHK) von Gentamicin Ci und micin Ci (Ib) besitzen beide ausgezeichnete antibakte- 65 den Verbindungen. Ia und Ib gegenüber einer Vielzahl rielle Aktivität, die in verschiedener Hinsicht der von grampositiver und gramnegativer Bakterien, erhalten Gentamicin Ci gegen gewisse Organismen Oberlegen durch Steers Agar-Verdünnungs-Methode unter Verscheint wendung von Nähr-Agarmedium.

M
Έ

E. coli JR/W677

23 32

jegen die 55

1/4 bis V₈

wurden

wie Ia 65

pneumo-

485

1,6

12

0,8

Gent. C|

Aktivität

gegen Pseudomonas

Ia und Ib

von Pseudomonas

und sind besonders wertvoll bei

Ia und

Bakterien verursacht

H 11

K. pneumoniae D-Il

(E coli

der Aktivität von Gentamicin Ci gegenüber den 60

ausgenommen die fehlende Aktivität gegen die

1,6

0,2

Species, verglichen mit Gentamicin Ci. Gegen die

Infektionskrankheiten, die durch

■(l Tabelle

K. pneumoniae Type 22 No. 3038

A20683 und K. Pneumoniae A 20680), von denen

Gentamicin-empfindlichen Organismen, und die Genta-

Verbindung Ib, das andere Hauptreaktionsprodukt

Gentamicinresistenten Stämme E coli und K.

1,6

0,4

Gentamicin-resistenten Stämme

sind von Wert als

grampositive und gramnegative

Ib sind bei oraler

S. marcescens

Bristol

bekannt ist daß sie Gentamicin C durch 2"-Adenylie-

micinresistenten Stämme von Pseudomonas

zeigte ähnliche antibakterielle Aktivitäten

1,6

Ia

1,6

0,4

waren sie ebenfalls inaktiv.

als Futtermittelzusätze bei Tier-

sind.

Applikation zur präoperativen Darmbehandlung geeig

; ?: Stamm

P. aeruginosa D-15

No.

rung unwirksam machen. Jedoch hatte Ia etwa

durch Ia nicht inhibiert

Ib

0,8

0,4

0,2

Die Verbindungen

futter, als therapeutische Mittel bei Geflügel und Tieren

Die Verbindungen

net daher wird sowohl die aerobe als auch die anaerobe

β E. coli NlHJ

P. aeruginosa H9 D-113 KM-R*)

0,4

0,8

0,2

antibakterielle Mittel,

sowie beim Menschen

ύ- E. coli Juhl

P. aeruginosa

A15119

1,6

0,1

der Behandlung von

ΐϊ E. coli

R aeruginosa

A15169

1,6

0,2

|S E. coli KM-R*)

R aeruginosa

A2O363

0,8

0,2

ι E. coli

P. aeruginosa

A9844

0,4

0,8

0,1

P. aeruginosa GM-R***)

A20365

25

1,6

0,1

? E. coli KM-R*)

P. aeruginosa GM-R***)

0,4

12,5

fe E. coli K-12

R aeruginosa H6 D-Il

A20664

25

1,6

0,2

i E. coli K-12 KM-R*)

R vulgaris

A2O665

1,6

25

1 E. coli K-12 KM-R*)

P. vulgaris

A20684

100

0,4

ψ E. coli W677

P. mirabilis

A20683

>100

3,1

R mirabilis

>100

12,5

<

R morganii

A20680

1,6

3,1

12,5

P. morganii

A20019

>100

0.2

>100

12,5

>100

12,5

A9923

>100

100

A9930

>100

I

A15150

0,8

1,6

A15194

0,8

1,6

0,2

A20717

3,1

6,3

0,2

A20718

1,6

3,1

0,8

.

1,6

3,1

0,4

A9436

1,6

3,1

0,4

A9526

0,4

0,8

A9554

6,3

3,1

0,1

A9900

1,6

0,8

A9553

0,4

A2OO31

6,3

3,1

>100

1,6

>100

A20239

1,6

3,1

>100

A9506

3,1

1,6

0,8

Beide hauptsächlichen Acylierungsderivate zeigten

relativ verminderte

S. aureus Smith

Verbindung Ia, das Hauptacylierungsprodukt zeigte

S. aureus Smith 209P SM-R**)

eine viel höhere Aktivität als Gentamicin Ci j

S. aureus Smith KM-R*)

beiden. Gentamicin-resistenten Organismen

B. subtilis

Mycobacterium 607

Mycobacterium KM-R*)

Mycobacterium KM-R, SM-R**)

Mycobacterium phlei

Mycobacterium ranae

*) KM-R bedeutet Kanamycin-resistent.

**) SM-R bedeutet Streptomycin-resistent.

***) GM-R bedeutet Gentamicin-resistent.

Flora des Dickdarms reduziert.

Die Verbindungen Ia und Ib sind wirksam bei der Behandlung systemischer bakterieller Infektionen, wenn sie parenteral in dem Dosierungsbereich von etwa 250 mg bis etwa 3000 mg pro Tag in mehreren Dosen, drei oder viermal täglich, verabreicht werden. Im allgemeinen sind die Verbindungen wirksam, wenn sie in Dosierungen von etwa 5,0 bis 7,5 mg/kg Körpergewicht alle 12 Stunden verabreicht werden.

Gentamicin C ist ein Komplex von mindestens drei Hauplkomponenten, die sich nur durch den Substituenten R³ in 5-Stellung des Didesoxy-Zucker-Restes des Gentamicinkerns, wie nachstehend gezeigt, unterscheiden:

NH₂

Gentamicin C₁

Gentamicin C₂

Gentamicin C₁,

OH

R³
-CH-NH-CH₃

CH₃
-CH-NH₂

CH₃
-CH₂-NH₂

Fraktion Röhrchen Nr. Gewonnene
Menge

Identifikation (DC*)

I
II
III
IV

25-33
32-42
43-47
48-50

1,46 g
072
1,20
0,87

C| hauptsächlich

C₁C₂

C₂ + C₁₁

C,_a hauptsächlich

Gentamicin Ci erhält man aus dem Komplex durch folgendes Verfahren.

4,10 g Gentamicin C Komplex in Form der freien Base werden fraktioniert unter Verwendung einer präparativen Gegenstromverteilungs(CCD)-Vorrichtung (100 ml auf 50 Röhrchen) mit einem Lösungsmittelsystem CHCl₃-MeOH-17%ige wäßrige NH₄OH (2:1 :1), wobei sich die nachstehenden Fraktionen ergeben.

*) Dünnschichtchromatographie, Cellulose-Dünnschicht-Platte, Lösungsmittelsystem: untere Schicht aus CHOrMeOH-17 %ige NH₄OH (2:1:1), R_r: Gentamicin C, (0,69), C₂ (0,39), C,_a (0,23).

Fraktionen I und II werden vereinigt und erneut mit dem gleichen CCD-System verteilt wie oben, wobei sich 1,94 g der Gentamicin Ci Komponente ergeben, die durch eine Dowex® 1 χ 2 Kolonnen-Chromatographie weiter gereinigt werden, wobei sich 1,70 g im wesentlichen reines Gentamicin Ci ergeben. Die anderen Fraktionen werden ähnlich mittels CCD und Dowex® 1x2 Chromatographie gereinigt, wobei sich 1,13g Gentamicin C₂ und 0,62 g Gentamicin C_la ergeben.

Beispiel 1

Herstellung von 1 -N- sowie 2'-N-L-( — )-4-Amino-2-hydroxybutyrylgentamicin C)

Stufe A:

Herstellung von L-( — )-4-BenzyloxycarbonyIamino-2-hydroxybuttersäure (VI)

7,4 g (0,062 Mol) L-(-)-4-Amino-2-hydroxybuttersäure gibt man zu einer Lösung von 5,2 g (0,13 Mol) Natriumhydroxyd in 50 ml Wasser. Zu der gerührten Lösung gibt man tropfenweise bei Null bis 5°C während 0,5 Stunden 11,7 g (0,068 Mol) Carbobenzoxychlorid und rührt die Mischung 1 Stunde bei der gleichen Temperatur weiter. Man wäscht die Reaktionsmischung mit 50 ml Äther, stellt mit verdünnter Chlorwasserstoffsäure auf pH 2 ein und extrahiert mit vier 80-ml-Anteilen Äther. Man vereinigt die Äther-Extrakte, wäscht mit einer geringen Menge gesättigter Natriumchloridlösung, trocknet mit wasserfreiem Natriumsulfat und filtriert. Das Filtrat dampft man im Vakuum ein und kristallisiert den sich ergebenden Niederschlag aus Benzol, wobei sich 11,6g (74%) farblose Plättchen ergeben.

F 78,5 bis 79,5°C,[a]_D4,5 [(C= 2, CH₃OH).
IR-Spektrum(KBr^c.o 1740,1690 cm-'.
NMR-Spektrum (Aceton-De)* (in ppm aus TMS):
2,0 (2H,m), 3,29 (2H,d-d. J = 6,7 und 12 Hz),
4,16 (1H, d-d, ] = 4,5 und 8 Hz), 4,99 (2H,s),
6,2 (2H, breit), 7,2 i (5H,s).

„ Analyse C₁₂Hi₅NO₅

berechnet: C 56,91 H 5,97 N 5,53%
gefunden: C 56,66 H 537 N 5,47%

Stufe B

N-Hydroxysuccinimidester von L-(—)-4-Benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybuttersäure (VII)

Man kühlt eine Lösung von 10,6 g (0,042 Mol) Verbindung VI und 4,8 g (0,042 MoI) N-Hydrexysuccinimid [G. W. Anderson et al, J. Am. Chem. Soc, 86,1839 (1964)] in 200 ml Äthylacetat auf 0° C und gibt dann 8,6 g (0,042 Mol) Dicydohexylcarbodiimid zu. Man hält die Mischung über Nacht in einem Kühlschrank. Der Dicyclohexylharnstoff, der sich abscheidet wird abfil-

triert und das Filtrat wird unter verringertem Druck auf etwa 50 ml konzentriert, wobei sich farblose Kristalle von Verbindung VII ergeben, die durch Filtrieren gesammelt werden. Die Ausbeute beträgt 6,4 g, F 121 bis 122,5°C. Man dampft das Filtrat im Vakuum zur Trockne ein und wäscht den kristallinen Rückstand mit 20 ml einer Benzol-n-Hexan-Mischung, wobei sich eine zusätzliche Menge Verbindung VII ergibt Die Gesamtausbeute beträgt 13,4 g (92%).
[λ]ο 1,5V= 2, CHCI₃).
IR(KBr))-_c,o 1810,1755,1740,1680 cm-'.
NMR-Spektrum (Aceton-De)* (in ppam aus TMS):

2,0, (2H,m), 2,83 (2H,s),

3,37(2H,d-d,J=6,5und 12,5 Hz),

4,56 (1H, m), 4,99 (2H, s), 6,3 (2H, breit),

7,23 (5H,s).

Analyse Ci₆Hi₈N₂O₇

berechnet: C 54,85 H 5,18

gefunden: C 54,79 H 5,21

C 54,70 H 5,20

N 8,00%
N 8,14%
N 8,12%

Stufe C

Herstellung von l-N-L-( — )-4-Benzyloxycarbonyl-

amino-2-hydroxybutyryl-gentamicin Ci (Va)

und 2'-N-L-( — )-4-Benzyloxycarbonylamino-

2-hydroxybutyryl-gentamicin Ci (Vb)

Zu einer gerührten Lösung von 1,10 g (2,2 mMol) Gentamicin Ci in 50 ml einer 50%igen Tetrahydrofuran- und Wasserlösung gibt man 770 mg (2,2 mMol) N-Hydroxysuccinimidester von L-( —)-4-Benzyloxycarbonylamino-2-hydroxybuttersäure bei 5°C. Man rührt diese Mischung 20 Stunden bei der gleichen Temperatur

weiter und konzentriert im Vakuum zur Trockne. Das so erhaltene Produkt wird durch Verteilen zwischen 30 ml n-Butanol und 30 ml Wasser in zwei Fraktionen geteilt Die n-Butanolschicht, die acyliertes Gentamicin Ci enthält, wird im Bakuum konzentriert, wobei sich 697 mg eines weißen Feststoffs ergeben der als hauptsächlich eine Mischung von Verbindungen Va und Vb bestimmt wird. Eine Mischung von intaktem Gentamicin Ci und N-Hydroxysuccimid (1,052 g) wird aus der wäßrigen Schicht gewonnen.

Stufe D

Gewinnung von l-N-L-( —)-4-Amino-2-hydroxybutyrylgenlamicin Ci (Ia) und 2'-N-L-( — )-4-Amino-

2-hydroxybutyryI-gentamicin Ci (Ib)

680 mg des in Stufe C erhaltenen Rohgemisches der Verbindungen Ha und Hb löst man in 30 ml 50%igem Äthanol und hydriert unter atmosphärischem Druck in Gegenwart von 500 mg 10%-PaIladium auf Aktivkohle über Nacht bei Raumtemperatur. Man filtriert das Gemisch und konzentriert das klare Filtrat im Vakuum. Man gibt das Konzentrat auf eine Harz-Kolonne Amberlite CG-50® (NH₄ ⁺, 60 ml). Man wäscht die Kolonne mit Wasser und eluiert nacheinander mit 200 ml 0,1 η Ammoniak, 720 ml 0,5 η Ammoniak und schließlich 150 ml 1 η Ammoniaklösung. Man vereinigt die Eluate auf der Basis von Biotest-(B. subtilis und Dünnschichtchromatographie-(Silicagel, CHCl₃-MeOH-28% NH₄OH-H₂O, 1 :4 :2 :1) Ergebnissen. Die vereinigten Fraktionen im Vakuum wurden konzentriert und lyophilisiert, wobei sich die folgenden drei Produkte ergeben:

Fraktionen

Menge

F(Zeis.)

Ib	126-140	105 mg	159-160°C	1640 mm"¹	0,71
BB-K61	221-250	47 mg	168-171°C	1630 cm"¹	0,50
Ia	305-316	133 mg	153-155°C	1640 cm-'	0,41
Gentamicin	C₁ (Kontrolle)				0,81

*) Dünnschichtchromatographie: Silicagel-Platte, CHCl₃-MeOH- 28% NH₄OH-H₂O (1:4:2:1).

Analyse C₂₅H₅₀O₉N₆3/2H₂CO₃

berechnet: C 47,38 H 7,95 N 12,51%

gefunden,

für Ib: C 47,14 H 7,39 N 11,86%

gefunden,
für Ia: C 47,02 H 7,48 N 12,18%

Die Identität von BB-K61 konnte nicht festgestellt werden, obgleich bekannt ist, daß es ein monoacyliertes Gentamicin Ci Derivat mit dem L-(-)-4-Amino-2-hydroxybutyryl-rest an einer der Aminfunktionen mit Ausnahme der 1- oder 2'-StelIungen ist. Die Verbindung hat geringe antibakterielle Aktivität verglichen mit den Verbindungen Ia oder Ib.

Beispiel 2

Herstellung des Monosulfatsalzes von

1 -N-L-( - )-4-Amino-2-hydroxybutyryl-gentamicin Q

oder 2'-N-L-( — )-4-Amino-2-hydroxybutyryl-

gentamicinCj

1 Mol l-N-L-( — )-4-Amino-2-hydroxybutyryl-gentamicin Ci (Ia)oder 2'-N-L-(-)-4-Amino-2-hydroxybutyryl-gentamicin Ci (Ib) wird in 1 bis 3 Litern Wasser gelöst. Man filtriert die Lösung, um jegliche ungelösten Feststoffe zu entfernen. Zu der abgekühlten und gerührten Lösung gibt man 1 Mol Schwefelsäure gelöst in 500 ml Wasser. Die Mischung wird 30 Minuten

gerührt, wonach man kaltes Äthanol zu der Mischung gibt, bis Ausfällung eintritt. Die Feststoffe werden durch Filtrieren gesammelt und als das gewünschte Monosulfat bestimmt.

Beispiel 3

Herstellung des Disulfatsalzes von 1 oder
2'-N-L-( — )-4-Amino-2-hydroxybutyryl-gentamicin Ci

1 Mol entweder l-N-L-( — )-4-Amino-2-hydroxybutyryl-gentamicin Ci oder 2'-N-L-( — )-4-Amino-2-hydroxybutyryl-gentamicin Ci wird in 1 bis 3 Litern Wasser gelöst. Die Lösung wird filtriert, um jegliche ungelösten Feststoffe zu entfernen. Zu der gekühlten und gerührten Lösung gibt man 2 Mol Schwefelsäure, gelöst in 100 ml Wasser. Die Mischung wird 30 Minuten gerührt, wonach man kaltes Äthanol zugibt, bis Ausfällung eintritt. Die Feststoffe werden durch Filtrieren gesammelt und als das gewünschte Disulfatsalz bestimmt.

Die in den vorstehenden Beispielen verwendete L-(-)-4-Amino-2-hydroxybutlersäure kann gemäß der US-PS 35 41 078 gewonnen werden.

230 242/123

Claims

Patentansprüche:

1. 1-N- sowie 2'-Ν-Μ-)-4-Αΐωηο-2-ηγΰΓθχγουφΓγ1§βηΐ3ΐηϊαη C₁ der allgemeinen Formel I CH₃

CH—NH-CH₃
-O

(D

NH-R