DE2166813A1 - Pyridoxinchondroitinsulfate, verfahren zu ihrer herstellung und arzneimittel, die diese verbindungen enthalten - Google Patents

Description

Patentanwälte:
Dr. Ing. Waiter AbItZ
Dr. Dieter F. U ο rf
Dr. Hans-A. Brauns . . 8. September 1975

SOCIETE D'ETUDES DE PRODUITS CHIMIQUES |

16, rue Kleber, 92 ISSY-LES-MOULINEAUX, Prankreich

Pyridoxinchondroitinsulfate, Verfahren zu ihrer Herstellung und Arzneimittel, die diese Verbindungen enthalten

Unter den unterschiedlichen Formen der Chondroitinschwefel- | säuren finden die A- und C-Pormen wegen ihrer hohen therapeutischen Wirksamkeit den Vorzug.

Der Gegenstand der Erfindung ist in den Ansprüchen charakterisiert. Das optische Drehvermögen von Pyridoxinchondroitinsulfat (A) beträgt -14,8 °, von der Form (C) -6,9 °.

Die erfindungsgemässen Verbindungen können durch direkte Umsetzung der Chondroitinschwefelsäuren, die nach irgendeiner geläufigen Methode, beispielsweise auf dem Weg

509886/1097

PC cas 57-Div. ^ .

über einen Ionenaustausch, erhalten worden sind, mit Pyridoxin hergestellt werden. Die Umsetzung verläuft in wässriger Lösung bei Raumtemperatur.

Die A- und C-Porm der Chondroitinschwefelsäuren sind ' als Natriumsalze im Handel erhältlich. Diese Produkte sind jedoch im allgemeinen nicht sehr rein und sollten vorzugsweise gereinigt werden. Das Reinigungsverfahren setzt sich aus folgenden Schritten zusammen:

a) Das Natriumchondroitinsulfat wird unter Rühren in Wasser bei etwa 60 ⁰C bis zu einer Konzentration von etwa 100 g je Liter aufgelöst. Die so erhaltene warme Lösung wird unter Druck filtriert.

b) Das Natriumchondroitinsulfat wird ausgefällt. Dazu wird die zuvor erhaltene Lösung auf 90 C erwärmt und dann unter Rühren mit dem 1 1/2-fachen Volumen an warmem Äthylalkohol versetzt. Das Rühren wird einige Stunden lang und auch während des Abkühlens des Gemisches, das sehr langsam erfolgen muss (10/12 Stunden), fortgesetzt.

c) Das Natriumchondroitinsulfat wird durch direkte Sedimentation, die etwa 95 % des gesamten Ausfällungsproduktes ergibt, und durch Zentrifugieren des oben schwimmenden Teils, das die anderen 5 % liefert, abgetrennt.

Die zwei Fraktionen werden gesammelt und in warmem V/asser wieder aufgelöst. Man lässt die Lösung sich abkühlen; sie kann entweder unmittelbar für die erfindungsgemässe Reaktion verwendet oder lyophilisiert werden; wenn sie nicht sogleich benutzt werden soll. Dieses Verfahren ist auf die A- und die C-Porm gleichermassen anwendbar.

509886/1037
- 2 -

PC cäs 57-Div.

Diese neuen Verbindungen sind auf therapeutischem Gebiet als hochwirksame und verlässliche Anti-Atherom-Mittel von Interesse.

Toxizität

Die Toxizität wurde für die zwei Verbindungen an Mäusen per os und durch intraperitoneale Injektion bestimmt.

Per os trat kein Todesfall bei 4,5 g/kg auf, welche Menge " die höchste Dosis ist, die einer Maus verabreicht werden kann. Intraperitoneal konnte für die Verbindungen der Beispiele 1 und 2, mit denen bei 2,10 g/kg kein Todesfall eintrat, kein LD™-Wert bestimmt werden.

Pharmakologie

1) Die Anti-Atherom-Wirkung wurde nach der Methode der experimentellen Herbeiführung von Myocardinfarkt und Neerose-Degeneration in Ratten durch Isoproterenol nachgewiesen. Die Experimente wurden an 60 Wistar-Ratten ausgeführt (10 Kontrolltiere, die mit Isoproterenol be- i handelt wurden, 10 Kontrolltiere, die überhaupt nicht behandelt wurden; je 10 Tiere, die mit den synthetisierten Verbindungen behandelt wurden; 10 Tiere, die mit Natriumchondroitinsulfat» Form A, behandelt wurden; und 10 Tiere, die mit Uatriumchondroitinsulfat, Form C, behandelt wurden). Die Kontrolltiere erhielten 100 mg je kg an Isoproterenol allein. Die vier übrigen Lose wurden jeweils mit 1 g/kg der zwei erfindungsgemässen Verbindungen bzw. der beiden Formen des Natriumchondroitinsulfat-Ausgangsmaterials zu Vergleichszwecken behandelt.

0 9 8 8 6/1097

PC cas 57-Div.

Die Ratten jedes Loses wurden getötet, und zwar die Hälfte nach 2k Stunden und die übrige Hälfte nach 48 Stunden. Aufgrund einer makroskopischen Untersuchung der Tiere liess sich feststellen, dass die Kranzarterien in den mit Isoproterenol behandelten Kontrolltieren dünner waren als in den Kontrolltieren, die überhaupt nicht behandelt worden waren, und dass ihr Myocard blutleer war. Die mit Isoproterenol plus irgendeinem der vier geprüften Verbindungen behandelten Tiere sahen ähnlich aus wie die nicht-behandelten Tiere. Aus diesen Versuchen lässt sich schliessen, dass die vier geprüften Verbindungen dieselbe günstige Anti-Atherom-Wirkung bieten.

2) Mit den vier bei den vorhergehenden Versuchen verwendeten Verbindungen wurden weitere Versuche hinsichtlich der Agglomerierung von Blutplättchen angestellt. Bezüglich der inhibierenden Wirkung auf die Herbeiführung der Agglomerierung von Blutplättchen durch Collagen wurde bei einer Dosis von 1 mg je ml festgestellt, dass die zwei erfindungsgemässen Verbindungen die Agglomerierung von Blutplättchen inhibieren; eine Dosis von H mg je ml war für die Natriumchondroitinsulfat-Form A oder C notwendig. Wenn man sich nun der Agglomerierung zuwendet, die durch die anderen drei Faktoren (ADP, Adrenalin und Fibrinogen) herbeigeführt wird, so zeigt es sich, dass nur die zwei erfindungsgemässen Verbindungen Aktivität besitzen. Aus diesen Versuchen folgt, dass die zwei erfindungsgemässen Verbindungen eine weit bessere Wirksamkeit zeigen als die gut bekannte Natriumchondroitinsulfat-Form A und -Form C.

509886/1097

PC cas 57-Div.

Für die Behandlung, im Bereich der Humanmedizin" betragen die per-os-zu verwendenden Dosen 1,5 g bis 10 g per diemj 10 g per diem stellen eine Einsatzdosis bei Beginn der Behandlung dar, und 1,5 g ist die normale, routinemässige Verabreichungsmenge.

Die erfindungsgemässen Verbindungen können in Gelatinekapseln oder in Tabletten dosiert werden, die 0,5 g des aktiven Materials zusammen mit einem geeigneten inerten "

Träger enthalten. .

Für die Verabreichung auf dem Injektionswege wird die ausgewählte Verbindung in Ampullen, die 0,5 g der Ver^ bindung enthalten, lyophilisiert. Dosen, die intraperitoneal nach der Auflösung in einem geeigneten Lösungsmittel zu verabreichen sind, betragen 0,5 g bis 3 g per* diem.

Beispiel Pyridoxinchondroitinsulfat (C)

20 g Natriumchondroitinsulfat (Form C) wurden in 150 ml Wasser aufgelöst und langsam durch eine mit Amberlite IR gefüllte Ionenaustausch-Einheit geleitet. Sobald die austretende Lösung, welche Chondroitinschwefelsäure enthielt, einen sauren pH-Wert zeigte, wurde sie unter Rühren direkt in eine wässrige Lösung von 60 g Pyridoxin-Base in 0,5 1 Wasser gegossen. Diese Lösung wurde bei einer Temperatur, die 50 C nicht überstieg, unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wurde mit Methanol behandelt. Nach

5098 86/1097

PC cas 57-Div. £

dem Waschen mit Methanol und dann mit Äther erhielt man 26,3 g Pyridoxinchondroitinsulfat (C) (Ausbeute: 67 %). Bei etwa 210 - 220 C zersetzte sich das Material; ein Schmelzpunkt konnte nicht bestimmt werden.

Beispiel 2 Pyridoxinchondroitinsulfat (A)

Es wurde dieselbe Methode wie in Beispiel 1 angewandt, nur wurde Natriumchondroitinsulfat (C) durch Natriumchondroitinsulfat (A) ersetzt. Die Ausbeute betrug 69 Gew.-%. Das Material zersetzte sich bei etwa 210/220 ⁰C, so dass der Schmelzpunkt nicht bestimmt werden konnte.

509886/1097

Claims (2)

1. PC cas 57-Di.v. 8. September 1975

   Pat entansprüche

   ij Pyrxdoxinchondroxtinsulfat (A) und Pyrxdoxinchondroxtinsulfat (C).
2. 2. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man Chondroitinschwefelsäure (Form A) oder (Form C) mit Pyridoxin um- " setzt.

   3· Arzneimittel, bestehend aus einem Salz gemäss Anspruch 1 und üblichen Inert- und/oder Trägerstoffen.

   - 7 509886/109 7