DE2001305B2 - Cytostatisch wirksame Corticosteroid-21-ester, deren Herstellung sowie diese enthaltende Arzneimittel - Google Patents

Description

(I)

in der R¹ ein Wasserstoff- oder ein Halogenatom oder eine Alkyl- oder Alkoxygruppe mit höchstens 4 Kohlenstoffatomen bedeutet, X ein Sauerstoffoder Schwefelatom oder eine einwertige Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindung darstellt, A für eine Gruppe der Formel

R⁶
— (CH)₁₁. — (CH)₁ — (CH)_m — C -

_R4

_R5

steht, in der R², R³, R⁴, R⁶ und R⁶ gleich oder verschieden sind und Wasserstoffatome oder Alkylgruppen mit höchstens 4 Kohlenstoffatomen bedeuten, und R⁶ außerdem eine Aminogruppe oder eine Alkanoylaminogruppe mit höchstens 4 Kohlenstoffatomen sein kann, in welchem Fall R^B ein Wasserstoffatom darstellt, in der ferner k, I und m den Wert von Null oder 1 haben, oder A zusammen mit X eine einwertige Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindung bedeutet, und B für Prednison, Prednisolon, Cortison und Hydrocortison steht, dessen Bindungsstelle die 21-StelIung ist, und in der die Gruppe (C1CH₈CH₂)₂N- bezüglich X \u m- oder p-Stellung steht.

2. Hydrocortison-21-ρ-[N -bis -(/8-chloräthyl)-amino]-benzoat.

3. Prednison-21-p-[N-bis-(,0-chloräthyl)-amino]-benzoat.

4. Prednisolon-21-p-[N-bis-(/?-chloräthyl)-amino]-benzoat.

5. Prednisolon-21-m-[N-bis-(/?-chloräthyl)-amino)-benzoat.

6. Prednisolon-21-p-[N-bis-(/9-chloräthyl)-amino]-phenylacetat.

7. Prednisolon-21-4'-[p-/"N-bis-(/?-chloräthyl)-aminoy-phenyl]-butyrat.

8. Prednisolon-21-3'-[N-bis-Q9-chloräthyl)-amino]-4'-methylbenzoat.

9. Verfahren zur Herstellung von Corticosteroid-21-estern der allgemeinen Formel 1 nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise ein reaktionsfähiges Derivat einer Verbindung der Formel

Cortison oder Hydrpcortison oder einem reak- ^:;~ tioiisfähigen Ester davon umsetzt^ wobei in den Fällen, in denen zusätzliche Steroidiiydroxylgruppen vorbanden sind oder als Rest R* eine freie Aminogruppe vorhanden ist, diese Gruppen durch eine Schutzgruppe geschützt werden, die anschließend wieder entfernt wird.

10. Pharmazeutische Mittel, dadurch gekennzeichpet, daß sie etwa 0,01 bis etwa 75 Gewichtsprozent eines Corticosteorid-21-esters der allgemeinen Formel I nach Anspruch 1 als alleinigen Wirkstoff neben pharmazeutischen Träger- oder Hilfsstoffen enthalten.

Es ist bekannt, daß Corticosteroide auf verschiedene Tumoren von Lebewesen einwirken. Weiter ist bekannt, daß y-[p-(Bis-/?'-chloräthylamino)-phenyi]-buttersäure (Chlorambucil) oder die entsprechende Λ-Aminopropionsäure (Melphalan) die gleiche Wirkung ausüben. Es wurde nun gefunden, daß durch Veresterung von Corticosteroiden mit Säuren der genannten Typen Produkte erhalten werden, die den bisher bekannten Arzneimitteln vom Typ des Stickstofflost weit überlegen und so weitgehend nichttoxisch sind, daß sie z. B. auf oralem Wege oder durch intramuskuläre oder intraperitoneale Injektion verabfolgt werden können.
In »Angewandte Chemie«, 74 (1962), S. 876, ist zwar ein Cholesterinester der p-[Bis-(/?-chloräthyl)]-aminophenylessigsäure als cytostatisch wirksam beschrieben worden. Diese Verbindung ist jedoch, wie gefunden wurde, gegenüber Hepatoma 130 sowie gegen lymphatische Leukämie (L 1210) bei Ratten praktisch unwirksam.

Gegen die Verwendung und Wirksamkeit des ebenfalls bekannten Chlorambucilesters des Testosterons (J. Med. Chem. 11 [1968], S. 1106) spricht, daß die Testosteronwirkung im wesentlichen androgen und nicht corticoid ist. Eine vesentüche Vorbedingung für den Angriff an maligne Tumorzellen, die einen hohen Gehalt an Corticoidreceptoren aufweisen, scheint nach den der Erfindung zugrunde liegenden Erkenntnissen aber die Corticoidwirkung des Steroidbestandteils der erfindungsgemäßen Verbindungen zu sein. Außerdem macht eine androgene Wirkung von derartigen Verbindungen diese für den praktischen Einsatz als Arzneimittel wegen des hohen Nebenwirkungsrisikos praktisch unbrauchbar.

Die neuen Corticosteroid-21-ester gemäß der Erfindung entsprechen der allgemeinen Formel

CI-CH₂-CH₂,

>V ν"'
Cl-CH₂-CH₂ \ X-A-C.

OH (H)

in der R¹, X und A die oben angegebenen Bedeutungen haben, mit Prednison, Prednisolon,

Cl	-CH2	-CH2,	t.:'~-	X-A-C	O
Cl	-CH2	V- Γι2			OB
				(D

in der R¹ ein Wasserstoff- oder ein Halogenatom oder eine Alkyl- oder Alkoxygruppe mit höchstens 4 Kohlenstoffatomen bedeutet, X ein Sauerstoff- oder Schwefel-

atom oder eine einwertige Kohlenstoff-Kohlenstoff- meren und ebenso die Racemate dieser Verbindungen Bindung darstellt, A für eine Gruppe der Formel brauchbar.

R« Erfindungsgemäß erfolgt vorzugsweise die Um-

j Setzung des 21-Hydroxycorticosteroids, nämlich Pred-r

— (CH)fc (CH)/ (CH) C ^{5 n}k°ⁿ> Prednisolon, Cortison oder Hydrocortison,

ι ι ι . Das erfindungsgemäße Verfahren betrifft die Um-

_Rt I_{3 R4 RS} Setzung eines reaktionsfähigen Derivates einer Ver-

bindung der allgemeinen Formel (II) mit einem

steht, in der R², R³, R⁴, R^s und R* gleich oder ver- 21-Hydroxy-corticosteroid oder einem umsetzungsschieden sind und Wasserstoffatome oder Alkyl- ίο fähigen Esterderivat eines solchen. Eine derartige gruppen mit höchstens 4 Kohlenstoffatomen be- Arbeitsweise besteht vorzugsweise in der Umsetzung deuten und R* außerdem eine Aminogruppe oder eine des 21-Hydroxycorticosteroids mit einer Verbindung Alkanoylaminognippe mit höchstens 4 Kohlenstoff- der allgemeinen Formel (H) in Form ihres Säureatomen sein kann, in welchem Fall R^s ein Wasser- halogenide, z. B. des Chlorids oder Bromids, oder Stoffatom darstellt, in der ferner k, I und m den Wert 15 ihres Säureanhydrids oder in Form eines gemischten von Null oder 1 haben, oder A zusammen mit X eine Anhydrids aus der Verbindung der Formel (II) und einwertige Kohlenstoff-Kohlenstoff-Bindung bedeutet einer anderen Säure, z. B. einer niedermolekularen und B für Prednison, Prednisolon, Cortison und aliphatischen Säure, wie einer niedermolekularen Hydrocortison steht, dessen Bindungsstelle die 21-Stel- Alkancarbonsäure, z. B. Essigsäure. Diese Umsetzung lung ist, und in der die Gruppe (ClCH₂CHs)₂N- be- »α kann in einem Lösungsmittel, wie Pyridin, und bei rüglich X in p- oder m-Stellung steht. Hierzu gehören Zimmertemperatur oder einer nahe bei Zimmer- auch die Additionssalze der Verbindungen mit Säuren, temperatur liegenden Temperatur durchgeführt wersofern der Rest R⁶ eine Aminogruppe bedeutet. den. Abweichend hiervon kann in den Fällen, in denen

Die erfindungsgemäßen Ester haben sich als wirk- weniger milde Reaktionsbedingungen erwünscht oder sam zur Verhinderung des Wachstums von verschie- »5 zulässig sind, z. B. Temperaturen bis zu etwa 60^c C, denen Tumoren erwiesen, z. B. des Ehrlich-Ascites- beispielsweise solche von 45°C, und eine Reaktions-Tumors, des Hepatoma AH 130, der lymphatischen dauer bis zu etwa 2 Tagen od. dgl., ein reaktions-Leukämie (L 1210), des Walker 256-Carcinoms und fähiger Ester des Ausgangs-21-Hydroxycorticosteroids, des Harding-Passey-Melanoms, wenn man sie nach wie das Tosylat (Toluolsulfonat), Methylsulfonat der Arbeitsweise des Cancer Chemotherapy National 30 (Mesylat), Jodid, Bromid oder Chlorid, angewendet Service Center (Bezugsliteratur: Cancer Chemo- werden. Diese können bei der alternativen Ausfühtherapy Reports, Dezember 1962) prüfte. rungsform mit der Verbindung der Formel (11) in

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können zur Form eines Alkalisalzes, z. B. des Natrium- oder Behandlung von Krankheiten verwendet werden, die Kaliumsalzes, zur Umsetzung gebracht werden. In auf die Behandlung mit Antikrebsmitteln und mit 35 einem solchen Fall kann das Lösungsmittel vorzugsimmunosuppressiven Mitteln ansprechen, sie können weise aus Dimethylsulfoxyd, Dimethylformamid, Acein Kombination mit festen oder flüssigen Träger- ton od. dgl. bestehen. Besonders empfehlenswert ist stoffen oder Verdünnungsmitteln in verschiedenen eine rolche alternative Ausführungsform dann, wenn Dosierungen und Anwendungsformen zur Verfügung die Herstellung von Amino- oder niedermolekularen gestellt werden, z. B. als Tabletten, Kapseln, Puder 40 Alkanoylamino-Produkten gewünscht wird. Abwei- und wäßrige und nichtwäßrige Suspensionen und chend hiervon können reaktionsempfindliche Gruppen Lösungen. in dem 21-Hydroxysteroidmolekül oder in der Ver-

Die durch die allgemeine Formel (I) definierten bindung der Formel (II) oder in einem reaktionserfindungsgemäßen Verbindungen können dadurch fähigen Derivat derselben während der Umsetzung hergestellt werden, daß man in an sich bekannter 45 durch eine Schutzgruppe geschützt und die Schutz-Weise ein reaktionsfähiges Derivat einer Verbindung gruppe hernach in konventioneller Weise entfernt der allgemeinen Formel (II) werden, um die empfindliche Gruppe, die beispiels-

ru ru weise Hydroxygruppen im Steroidmolekül oder eine

Cl CH₂ CH_2x Aminogruppe R^e in der Verbindung der Formel (II)

N N,<^^X 5° ^se'ⁿ können, wieder herzustellen. So können z.B.

p. _Γττ pn ; ^v' x_A—C_v empfindliche Hydroxygruppen im Steroidmolekül

^{2 2} \ \ während der Veresterungsreaktion in 21 -Stellung durch

vorangehende Umwandlung in eine geschützte Grup-

(II) pe, die hernach in bekannter Weise, z. B. durch

55 Hydrolyse, wieder in eine Hydroxygruppe überführ-

in der R¹, X und A die oben angegebenen Bedeutungen bar ist, geschützt werden, beispielsweise durch Umhaben, mit Prednison, Prednisolon, Cortison oder Wandlung in eine konventionelle Schutzgruppe, wie Hydrocortison oder einem reaktionsfähigen 21-Ester eine Ketal- oder Acetal-Gruppe oder in eine niederdavon umsetzt, wobei in den Fällen, in denen zusatz- molekulare Alkanoyloxygruppe, wie eine Formyloxyliche Steroidhydroxylgruppen vorhanden sind oder als 60 oder Acetyloxygruppe. Zusätzlich — oder unabhängig Rest R^e eine freie Aminogruppe vorhanden ist, die von dem bisher Gesagten — kann der Substituent R⁶, Gruppen durch eine Schutzgruppe geschützt werden, sofern er in dem Endprodukt als freie Aminogruppe die anschließend wieder entfernt wird. oder ein Säure-Addilionssalz einer solchen vorhanden

Diejenigen Verbindungen der allgemeinen For- sein soll, während der Veresterungsreaktion in 21-Stelmel (II), die ein oder mehrere asymmetrische Kohlen- 65 lung in an sich bekannter Weise durch Umwandlung Stoffatome aufweisen, können in verschiedenen mög- in eine ausgewählte geschützte Gruppe, die leicht liehen stereoisomeren Formen existieren, und für die mittels einer der zahlreichen bekannten konventionelvorliegende Erfindung sind auch solche Stereoiso- len Arbeitsweisen wieder in eine Aminogruppe über-

führbar ist, geschützt werden. So kann der Substi- zahl von verfügbaren pharmazeutisch verträglichen

tuent R⁶ in geschützter Form z. B. als eine Benzyl- EBlfs- oder Trägerstoffen. Wird im Gemisch mit einm

oxycarbonylaminogruppe, als ein p-Chlor-, Methoxy- pharmazeutischen Hilfs- oder Trägerstoff formuliert,

oder Nkroderivat einer solchen Gruppe, oder als eine so soil der aktive Wirkstoff in der Regel etwa 0,01 bis

tert-Butoxycarbonylamino-, Triphenylmethylammo-. 5 etwa 75 Gewichtsprozent, normalerweise etwa 0,05

Trifluoracetylamino- oder Formylaminogruppe vor- bis etwa 15 Gewichtsprozent, bezogen auf die Mi-

liegen. Darüber hinaus kann die Fonnylgruppe oder schung, ausmachen. In solchen Formulierungen kön-

irgendeine andere niedermolekulare Alkanoylaraino- nen Trägerstoffe, wie Stärke, Zucker, Talk, die ge-

gruppe entweder lediglich als Schutzgruppe für die meinhin verwendeten synthetischen und natürlichen

Substituenten R* benutzt werden, oder diese Gruppe io Gummen, Wasser u. dgl. mitverwendet werden. Zum

kann in dem fertigen Produkt verbleiben, da sie — so- Formen der Tabletten können Bindemittel, wie PoIy-

fern sie in den Produkten der Formel (J) vorhanden vinylpyrrolidon, und Gleitmittel, wie Natriumstearat,

ist — die Antitumorwirkung offensichtlich nicht zu mitverwendet werden. In die Tabletten können auch

beeinträchtigen scheint Ist jedoch die Herstellung Zerfall-Hilfsstoffe, wie Natriumbicarbonat, eingear-

von Verbindungen erwünscht, bei denen der SuIj- 15 beitet werden.

stituentR* eine Aminogruppe oder eine niedermole- Wenn auch verhältnismäßig geringe Mengen der kulare Alkanoylaminogruppe darstellt, so können erfindungsgemäßen Wirkstoffe, nämlich Mengen bis diese vorteilhaft auch unter Abwendung verhältnis- herunter zu 5,0 mg, an Lebewesen, die ein verhältnis-Bräßig milder Bedingungen aus dem Anhydrid und mäßig niedriges Körpergewicht aufweisen, verabfolgt dem Steroid-21-alkohol oder dem sauren Kaliumsalz 20 werden können, so betragen doch die Dosierungsund dem Steroid-21-tosylat erhalten werden. einheiten vorzugsweise 5 mg oder mehr, noch besser Für die therapeutische Anwendung können die 25, 50 oder 100 oder noch mehr mg, was natürlich von Verbindungen der allgemeinen Formel (I), in denen dem Lebewesen, das zu behandeln ist und dem beder Substituent R^e eine Aminogruppe darstellt, ent- stimmten Ergebnis, das man zu erzielen wünscht, weder als solche oder in Form ihrer Säure-Additions- 25 abhängt, wie im übrigen dem Fachmann geläufig ist. talze verwendet werden, die Anionen enthalten, Breitere Anwendungsbereiche sind solche von 1 bis welche pharmazeutisch verträglich sind, wie die 3000 mg pro Dosierungseinheit. Die erfindungs-Hydrochloride, Hydrobromide, Phosphate, Nitrate, gemäßen Wirkstoffe können für die Applikation mit Sulfate, Hydrogenoxalate, Oxalate, Suecinate, Tar- anderen pharmakologisch wirksamen Mitteln, wie träte, Methansulfonate und Äthandisulfonate, so daß 30 Anagetica, Tranquilizern, Steroiden oder Hormonen die vorteilhaften physiologischen Eigenschaften nicht u. dgl., oder mit Puffern, der Acidität entgegendurch Nebenwirkungen, die man den Anionen zu- wirkenden Stoffen u. a. m. kombiniert werden, und schreiben müsste, aufgehoben werden. der Mengenanteil des Wirkstoffes oder der Wirk-Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind im stoffe in den Mitteln kann in weiten Grenzen variiert allgemeinen durch die pharmakologische Wirksamkeit, 35 werden. Es ist lediglich erforderlich, daß der erfindungsdie weiter oben bereits hervorgehoben ist, ausgezeich- gemäße Wirkstoff in einer wirksamen Menge vornet, und diese Wirkung macht sie zur Bekämpfung handen ist, d. h. in einer zweckentsprechenden wirkvon bestimmten physiologischen abnormalen Er- samen Dosierung vorliegt, die auf die Applikationsscheinungen im Körper eines Lebewesens gut ge- form abgestimmt ist. Es können auch mehrere Foreignet. Wirksame Mengen der pharmakologisch ak- 40 men der Dosierungseinheiten etwa gleichzeitig vertiven Verbindungen der vorliegenden Erfindung kön- abfolgt werden. Die im Einzelfall erforderliche exakte nen dem Körper eines Lebewesens auf verschiedenen Einzeldosierung und ebenso die Tagesdosis wird Wegen verabfolgt werden, z. B. oral in Form von natürlich nach üblichen fachmedizinischen und tier-Kapseln oder Tabletten oder parenteral in Form von medizinischen Richtlinien festgelegt. Als Regel sei sterilen Lösungen oder Suspensionen oder durch 45 bemerkt, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen Implantierung von Pellets, und in manchen Fällen für therapeutische Anwendungszwecke in Mengen von auch intravenös in Form von sterilen Lösungen. 10 bis 1000 mg pro Tag und Patient, die in 1 bis Andere geeignete Applikationsformen sind die kutane, 4 Dosen unterteilt werden können, innerhalb von subkutane, buccale, intramuskuläre und intraperi- Behandlungszeiten zwischen einem Tag und einem toneale Verabfolgung. 50 Jahr verabfolgt werden können.

Als Beispiele von Lebewesen, deren Körper mit den

erfindungsgemäßen Verbindungen oder Mitteln nach Beispiel 1
der Behandlungsmethode der vorliegenden Erfindung

und bzw. oder unter Anwendung ähnlicher Bedin- Eine Lösung von 12,5 g p-[N-Bis-(/9-chloräthyI)-gungen, wie sie hier beschrieben sind, zwecks Linde- 55 amino]-benzoylchlond in 135 ml wasserfreiem Pyridin rung der Leiden derselben behandelt werden können, wurde allmählich unter Rühren und unter wassersind außer den Menschen die folgenden Tiere anzu- freien Bedingungen zu einer Lösung von 12,5 g Hydrofl!^Kren: Haustiere, wie Hunde und Katzen, land- cortison in 120 ml wasserfreiem Pyridin, das in einem wirtschaftliche Nutztiere, wie Pferde, Kühe, Schafe Eisbad gekühlt wurde, zugegeben. Das Reaktionsund Ziegen. 60 gemisch wurde danach 40 bis 50 Stunden auf Zimmer-Pharmazeutische Formulierungen werden für ge- temperatur gehalten, und nach dieser Zeit wurde der wohnlich aus einer vorgegebenen Menge einer oder Überschuß an Säurechlorid mit zerkleinertem Eis mehrerer erfindungsgemäßen Verbindungen zubereitet. hydrolysiert und die entstandene Lösung in ein Ge-Solche Formulierungen können in Form von Pulvern, misch aus konzentrierter Salzsäure und zerkleinertem Elixieren, Lösungen, Pillen, Kapseln, Pellets oder 65 Eis gegossen.

Tabletten, Suspensionen, Öllösungen u.dgl. zube- Die abgeschiedene Ausfällung wurde gesammelt und

reitet werden, und zwar mit oder ohne (vorzugsweise in 500 ml Äthylacetat gelöst. Diese Lösung wurde

aber mit) Zusatz irgendeines Vertreters aus der Viel- mehrere Male mit kalter l,0-n-NaHCO₃-Lösung und

schließlich mit Wasser gewaschen. Nach dem Trock- äthyl)-amino]-3-methylbenzoylchlorid die folgenden

nen über wasserfreiem Natriumsulfat wurde das substituierten 21-Benzoate des Prednisolons herge-

Lösungsmittel im Vakuum entfernt. stellt:

Der Rückstand besteht aus dem Hydrocortison- . .. ,

21-p-[N-bis-03-chloräthyl)-amino]-benzoat, das nach 5 Predn_Isok)n-21-4-[N-b>s-(/S-chlorathyl)-

dem Umkristallisieren aus Aceton einen Schmelz- am.no]-2-chlorbenzoat;

punkt von 156 bis 158°C aufwies. Sein (λ)? ⁰C-Wert Prednisolon-21-4'-[N-bis-0S-chloräthyl)-

(c = 1,00 in Chloroform) betrug 212°. amino]-3'-methoxybenzoat und

. . Prednisolon-21-4'[N-bis-(/?-chloräthyl)-

Beispiel 2 io _amino]-3'-methylbenzoat.

Eine Lösung von 3,4 g p-[N-Bis-(/?-chloräthyl)-

amino]-benzoylchlorid in 50 ml wasserfreiem Tetra- Beispiel 6
hydrofuran wurde allmählich unter Rühren und unter

wasserfreien Bedingungen zu einer Lösung von 3,6 g 15 Nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise

Hydrocortison in 50 ml wasserfreiem Tetrahydro- wurde au« 3,0 g Prednisolon und 5,0 g m-[N-Bis-

fwran, die in einem Eisbad gekühlt wurden, gegeben. (/?-chloräthyl)-amino]-benzoylchlorid das Prednisolon-

Das Reaktionsgemisch wurde 70 Stunden auf Zimmer- 21-m-[N-bis-(/?-chloräthyl)-amino]-benzoat hergestellt,

temperatur gehalten, und hierauf wurde der Säure- Nach Umkristallisation aus Aceton-Hexan wies die

chloridüberschuß mit zerkleinertem Eis hydrolysiert ao Verbindung einen Schmelzpunkt von 150 bis 153° C

und die entstandene Lösung in ein Gemisch aus kon- auf. Ihr (.H)S¹⁰C-WeIt (c = 1,00 in Chloroform) betrug

zentrierter Salzsäure und zerkleinertem Eis gegeben 149°.

und mit 200 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthyl- In der gleichen Weise, wie oben angegeben, wurde

acetatlösung wurde mehrere Male mit kalter 1,0-n- bei Verwendung von 3-[N-Bis-(/?-chloräthyl)-amino]-

NaHCO₃-Lösung und letztlich mit Wasser gewaschen. »5 4-methylbenzoylchlorid das Prednisolon-21-3'-[N-bis-

Nach dem Trocknen über wasserfreiem Natrium- (/S-chloräthyl)-amino]-4'-methylbenzoat hergestellt (vgl.

sulfat wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. hierzu Beispiel 18).

Als Rückstand hinterblieb das Hydrocortison-21-p-[N-bis-(/?-chloräthyI)-amino]-henzoat, das nach

Umkristallisieren aus Aceton dieselben Kennzahlen 30 B e i s ρ i e 1 7
wie das im Beispiel 1 beschriebene Produkt aufwies.

Herstellung von in der Fachliteratur

Beispiel 3 noch nicht beschriebenen Säureanhydriden

Nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeits- 35 Diese Säurehydride werden mittels an sich bekannweise wurde aus 4,5 g Cortison und 5,65 g p-[N-Bis- ter Methoden hergestellt; so wurden z. B. 27,5 g (#-chloräthyi)-amino]-benzoylchlorid das Cortison- p-fN-Bis-ijS-chloräthylJ-aminol-phenylessigsäure in 2!-p-[N-bis-(/?-chloräthyl)-amino]-benzoat hergestellt. einem Gemisch aus 150 ml wasserfreiem Benzol und Die Verbindung wies nach Umkristallisation aus 8,04 ml wasserfreiem Pyridin gelöst. Die Lösung Chloroform-Hexan einen Schmelzpunkt von 228 bis 40 wurde in einem Lisbad gekühlt, und es wurde eine 231^c C am". Ihr (*)?°C-Wert (c = 1,03 in Chloroform) Lösung von 3,58 ml Thionylchlorid in 30 ml wasserbetrug 186^r. freiem Benzol allmählich unter Rühren und unter

wasserfreien Bedingungen zugegeben.

Beispiel 4 Das Reaktionsgemisch wurde dann eine Stunde auf

45 Zimmertemperatur gehalten und danach in ein Ge-

Nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise misch aus 5,0-n-HCl und zerkleinertem Eis gegossen,

wurde aus 11,8g Prednison und 11,8g p-[N-Bis- Die Benzollösung wurde sofort mit Wasser, kalter

(/3-chloräthyl)-amino]-benzoylchlorid das Prednison- l,0-n-NaHCO₃-Lösung und letztlich mit kaltem Was-

21-p-[N-bis-(/?-chloräthylVaTniTio]-bcr.7oat hergestellt. ser gewaschen. Nach dem Trocknen über wasser-

Nach Umkristallisation aus Äihanol wies die Ver- 50 freiem Natriumsulfat wurde das Benzol im Vakuum

bindung einen Schmelzpunkt von 214 bis 216"C auf. entfernt. Der Rückstand bestand aus dem p-[N-Bis-

Ihr (\)?"~C-Wert (c = 1.05 in Chloroform) betrug (ß-chloräthyl)-amino]-phenylessigsäureanhydrid. das

216". ohne weitere Reinigung verwendet werden konnte.

Nach Umkristallisation aus Äther-Aceton lag sein

B c i s ρ i e I 5 55 Schmelzpunkt bei 64 'C.

Nach der im Beispiel 1 beschriebenen Arbeitsweise Beispiel 8
wurde aus 12.5 g Prednisolon und 12,5 2 p-[N-Bis-

(j?-chloräthyl)-amino]-benzoylchlorid das Prednisolon- Zu einer Lösung von 27,5 g p-[N-Bis-(/?-chloräthyl)-

21-p-[N-bis-(^-chloräthyl)-amino]-benzoat hergestellt. 60 amino]-phenylessigsäureanhydrid in 500 ml wasser-

Nach Umkristallisation aus Aceton-Hexan wies die freiem Pyridin wurden 17.7 g Prednisolon gegeben.

Verbindung einen Schmelzpunkt von 198 bis 201 "C Das Reaktionsgemisch wurde 24 Stunden unter wasser-

auf. Ihr (λ)? C-Wert (r = 1,04 in Chloroform) be- freien Bedingungen auf Zimmertemperatur gehalten,

trug 204°. Es wurde dann in ein Gemisch aus konzentrierter

Mittels der vorbeschriebenen Arbeitsweise wurden 65 Salzsäure und zerkleinertem Eis gegossen und mit

unter Verwendung von 4-[N-Bis-(/?-chlotäthyl)-amino]- einem (1:1)-Äther-Äthylacetat-Gemisch extrahiert.

2-chlorbenzoylchlorid, 4-[N-Bis-(/?-chloräthyl)-ami- Die organische Phase wurde mehrere Male mit

no]-3-methoxybenzoyichIorid und 4-[N-Bis-(/?-chlor- kalter l,0-n-K₂CO_s-Lösimgtmd schließlich mit Waäer

gewaschen. Nach dem Trocknen über CaCl₂ wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt.

Der Rückstand bestand aus Prednisolon-21-p-[N-bis-(/S-chloräthyl)-amino]-phenylacetat, das nach Umkristallisieren aus Methanol einen Schmelzpunkt von 175 bis 177°C aufwies. Sein («)?°C-Wert (c = 1,02 in Chloroform) betrug 86,5°.

In der gleichen Weise, wie sie vorstehend beschrieben ist, wurde bei Verwendung von Hydrocortison das Hydrocortison - 21 - ρ - [N - bis -(/?-chloräthyl) - amino] phenylacetat hergestellt.

Beispiel 9

Nach der im Beispiel 8 angegebenen Arbeitsweise wurde aus 10,0 g Prednisolon und 18,8 g 3-[p-/N-Bis-(0-chioräthyl)-amino/-phenyl] - propionsäurearhydrid (das mittels der im Beispiel 7 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt worden war) das Prednisolon-21-3'- [p - /N - bis - (ß - chloräthyl) - amino/ - phenyl] - propionat hergestellt

Die Verbindung wies nach Umkristallisation aus Methanol-Wasser einen Schmelzpunkt von 175 ⁰C auf. Ihr (A)r°C-Wert (c = 1,03 in Chloroform) betrug 93,9^C.

In der gleichen Weise, wie sie oben angegeben ist, wurde bei Verwendung von Hydrocortison das Hydrocortison-2! -3'-{p-/N-bis-(/?-chloräthyl) - amino/ - phenylj-propionat hergestellt.

Beispiel 10

Nach der im Beispiel 8 angegebenen Arbeitsweise wurde aus 24,4 g Prednisolon und 42 g 4-[p-/N-Bis-(/? - chloräthyl) - amino/ - phenyl] - buttersäureanhydrid (das mittels der im Beispiel 7 beschriebenen Arbeitsweise hergestellt worden war) das Prednisolon-21-4'-[p-/N-bis-(/?-chloräÜiyl)-amino/-phenyl]-buryrat hergestellt.

Die Verbindung wies nach Umkristallisation aus Methanol-Wasser einen Schmelzpunkt von 163 bis 164^CC auf. Ihr (*)? X-Wert (c = 1,06 in Chloroform) betrug 92.9".

In der gleichen Weise, wie vorstehend angegeben, wurden bei Verwendung von Cortison, Hydrocortison bzw. Prednison das Cortison-21-4'-[p-/N-bis-(/J-chlortthyl)-amino/-phenyl] -butyrat, das Hydrocortison-21-4'-{p-/N-bis-(/3-chloräthyl)-amino/-phenyl]-butyrat und das Prednison-21-4'-[p-/N-bis-(/i-chloräthyI)-amino/-phenyl]-butyrat hergestellt.

Aus Prednisolon und 3-[p-/N-Bis-(/3-<:hloräthyI)-amino/-phenyl]-buttersäureanhydrid (das vermittels der im Beispiel 7 angegebenen Methode hergestellt worden war) wurde das Prednisolon-21-3'-[p-, N-bis-(/?-chloräthyl)-amino/-phenyl]-butvrat und aus Hydrocortison und 5-[p-/N-Bis-(/?-ch!oräthyB-amino/-phenyi]-valeriansäureanhydrid (das vermittels der im Beispiel 7 angegebenen Arbeitsmethode hergestellt worden war) das Hydrocortison-21-5'-[p-/N-bis-(/}-chloräthyl)-amino/-phenyl]-valerianat in analoger Weise hergestellt.

Beispiel 11

Nach der im Beispiele angegebenen Arbeitsweise wurde aus 6 g Prednisolon und 10 g p-jJJ_TBis-{/i-chloräthyl)-amino]-phenoxyessigsäureanhydrid (das gemäß der im Beispiel 7 beschriebenen Methode hergestellt worden war) das Prednisolon-21-p-[N-bis-Q?-chloräthyl)-amino]-phenoxyacetat erhalten.

Die Verbindung wies nach Umkristallisation aus Methanol-Wasser einen Schmelzpunkt von 177°C auf. Ihr («)?°C-Wert (c = 1,04 in Chloroform) betrug 98,1°.

Nach der gleichen Arbeitsweise, die vorangehend beschrieben ist, wurden bei Verwendung von Cortison,

ίο Hydrocortison, Prednison und Prednisolon einerseits und der (nach der im Beispiel 7 beschriebenen Methode hergestellten) Anhydride aus 3-[p-/N-Bis-0?-chlor äthyl) - amino/ - phenoxy] - propionsäure, 4- [ρ -/Ν - Bis (/S-chioräthyl)-amino/-phenoxy]-buttersäure, 5-[p-/N-Bis-(/?-chloräthyl)-amino/-phenoxy]-buttersäure und 5-[p-/N-Bis-(/?-chloräthyl)-amino/-phenoxy]-valeriansäure die folgenden Verbindungen hergestellt:

Cortison-21-3'-[p-/N-bis-(j8-chloräthylamino/-phenoxy]-propionat;
Hydrocortison-21-3'-[p-/N-bis-03-chloräthyl)-amino/-phenoxy]-propionat;
Prednison-21-3'-[p-/N-bis-0S-chloräthyi)-amino/-phenoxy ]-propionat;

Prednisolon-21-3'-[p-/N-bis-0S-chloräthyl)-amino/-phenoxy]-propionat;

Prednisolon-21-4'-[p-/N-bis-0?-chloräthyl)-amino/-phenoxy]-butyrat und

Hydrocortison-21-5'-[p-/N-bis-(/?-chloräthyl)-amino/-phenoxy]-valerat.

Beispiel 12

Zu einer Lösung von 20,8 g [p'/N-Bis-OS-chloräthyl) - amino/ - phenylthio] - essigsäureanhydrid (das nach der im Beispiel 7 beschriebenen Methode hergestellt worden war) in 400 ml wasserfreiem Pyridin wurden 11,5g Prednisolon zugegeben. Es wurde in der gleichen Weise, wie sie im Beispiel 8 beschrieben ist, ein roher Prednisolon-21 -ester erhalten. Der Rückstand, der nach Entfernung des Lösungsmittels im Vakuum hinterblieb, wurde in wasserfreiem Benzol gelöst und die Lösung an einer Silicagel-Säule chromatographiert und mit einem (9:1) Benzol-Aceton-Gemisch eluiert. Die Hauptfraktion wurde im Vakuum zur Trockne eingedampft, worauf der Rückstand durch Verrühren mit Hexan zur Kristallisation gebracht wurde.

Das so erhaltene Prednisoion-21-[p-/N-bis-(f>-chloräthyl)-amino/-phenylthio]-acetat wies keinen definierten Schmelzpunkt auf. Seine Identität wurde durch das kernmagnetische Resonanzspektrum und die llcmcntaranalyse auf S, N und Cl bestätigt.

Beispiel 13

Eine Lösung von 14,6 g p-[N-Bis-(^-chloräthyl>amino]-.x,A-dimethylphenylessigsäure in ISO ml wasserfreiem Benzol wurde unter Rühren und unter wasserfreien Bedingungen zu 40 ml Thionylchlorid, das in einem Eisbad gekühlt wurde, zugegeben, das Reaktionsgemisch wurde danach 3 bis 4 Stunden auf Zimmertemperatur gehalten, und die Ausfällung wurde durch Filtrieren entfernt und mehrere Male mit Benzol gewaschen und Ober P₈O₅ getrocknet.

Diese Verbindung besteht aus dem p-[N-Bis- (ß -chloräthyl) - amino] -ex,κ - dimethylphenylessigsäure chlorid, das ohne weitere Reinigung verwendet werden konnte.

9,8 g dieser Verbindung und 9,3 g Prednisolon wurden in 150 ml wasserfreiem Pyridin gelöst. Die Lösung wurde 50 Stunden auf Zimmertemperatur gehalten und danach in ein Gemisch aus konzentrierter Salzsäure und zerkleinertem Eis gegossen und mit einem (1:1) Äther-Äthylacetat-Gemisch extrahiert.

Die organische Phase wurde mehrere Male mit kalter l,0-n-K₂CO₃-Lösung und schließlich mit Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen über Natriumsulfat wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt und der Rückstand an einer Silicagel-Säule mit einem Gemisch aus Benzol-Aceton-Essigsäure chromatographiert. Durch Eindampfen zur Trockne im Vakuum und Umkristallisation aus einem Methanol-Wasser-Gemisch erhielt man das Prednisolon-21-[p-/N-bis-(/9-chloräthyl)-amino/-*, «-dimethyl] - phenylacetat vom Schmelzpunkt 117 bis 119°C. Sein (ix)?°C-Wert (c = 1,00 in Chloroform) betrug 69°.

In der gleichen Weise, wie sie vorstehend angegeben ist, wurde bei Verwendung von Prednison das Prednison-21-[p-/N-bis-03-chloräthyl)-amino/-!\,Ä-dimethyl]-phenylacetat hergestellt.

B e i s ρ i e 1 14 So

Tabletten von 10 mg

Prednisolon-21-4'-[p-/N-bis-(/?-chloräthyl)-amino/-phenyl]-butyrat 10 mg

Lactose 64 mg

Stärke 21,5 mg

Polyvinylpyrrolidon 1,5 mg

40

Destilliertes Wasser in der erforderlichen Menge Talkum 5 mg

Magnesiumstearat 0,5 mg

Das Prednisolon-21-4'-[p-/N-bis-(/?-chloräthyl)-amino/-phenyl]-butyrat, die Lactose und die Stärke wurden miteinander vermischt und das Ganze gesiebt. Das Polyvinylpyrrolidon wurde in einer geeigneten Menge Wasser gelöst und zu dem genannten Gemisch zugegeben, welches danach granuliert wurde. Das erhaltene Granulat wurde dann getrocknet und mit dem Talkum und dem Magnesiumstearat vermischt, und danach wurden Tabletten gepreßt.

Beispiel 15

Pellets von 100 mg

Prednisolon-21-p-[N-bis-(/?-chloräthyl)-amino]-benzoat 100 mg

Lactose 100 mg

Polyvinylpyrrolidon 4 mg

Destilliertes Wasser in der erforderlichen Menge.

Das Prednisolon-21-p-[N-bis-(/?-chloräthyl)-atnino]-benzoat, die Lactose und das Polyvinylpyrrolidon wurden miteinander vermischt und granuliert, und hierauf wurden Tabletten gepreßt.

B e i s ρ i e 1 16

Wäßrige Suspension mit 100 mg Wirkstoff
für Injektionszwecke

Predniso!on-21-p-[N-bis-(/?-chloräthyl)-amino]-benzoat 100 mg

Polyoxyäthylen-sorbitan-monostearat

(Tween 80, Hersteller: Atlas) 20 mg

Benzylalkohol 45 mg

Carboxymethylcellulose 15 mg

Destilliertes Wasser zum Auffüllen auf 5 ml

Die Carboxymethylcellulose wurde in Wasser geao löst. Das Tween 80 und der Benzylalkohol wurden in dieser Lösung gelöst, und danach wurde das Prednisolon - 21 - ρ - [N - bis - φ - chloräthyl) - amino] - benzoat zu diesem Gemisch zugegeben, und die Suspension wurde mit Wasser auf 5 ml aufgefüllt.
»5

Beispiel 17

Öllösung mit 50 mg Wirkstoff für
Injektionszwecke

Prednisolcn-21-4'-[p-/N-bis-Q3-chloräthyl)-amino/-phenyl]-butyrat 50 mg

Benzylbenzoat 0,8 g

Ricinusöl zum Auffüllen auf 2 ml

Prednisolon-21-4'-[p-/N-bis-(jS-chloräthyl)-amino/-phenyl]-butyrat wurde in dem Benzylbenzoat gelöst, dieses Gemisch wurde dem Ricinusöl zugesetzt, worauf die Lösung fertig zubereitet (dispensed) und sterilisiert wurde.

Beispiel 18

Zu einer Lösung von 7 g m-N-Bis-(/?-chloräthyl)-amino-p-toluylsäure in 90 ml wasserfreiem Benzol wurden 23 ml SOCl₂ tropfenweise unter Rühren zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde dann 45 Minuten unter wasserfreien Bedingungen zum Sieden erhitzt.

Die Lösung wurde nitriert und zur Trockne eingedampft. Das zurückbleibende öl bestand aus m-N-Bis-(ß-chloräthyD-amino-p-toluylsäurechlorid, das ohne weitere Reinigung verwendet werden konnte.

Die Verbindung wurde in 10 ml wasserfreiem Pyridin gelöst. Zu der Pyridinlösung wurden 7.1 g Prednisolon zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 24 Stunden auf Zimmertemperatur gehalten und danach in ein Gemisch aus konzentrierter Salzsäure und zerkleinertem Eis gegossen.

Der Niederschlag wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Durch Umkristallisation aus einem Aceton-Hexan-Gemisch wurde das Prednisolon-21-3'-[N-bis-03-chloräthyl)-amino]-4'-methylbenzoat, das die gewünschte Antitumorwirkung aufwies, erhalten. Das Produkt wies einen («)?°C-"Wert (c = 1,03 in CHCl₃) von +153° auf.

13 14

In der gleichen Weise, wie vorstehend beschrieben, tisonwurdedasHydrocortison-21-3'-[p-/N-bis-(/?-chlor

aber unter Verwendung von Hydrocortison wurde das äthyl)-amino/-phenyl]-2'-acetylaminopropionat her

Hydrocortison-21 -3'- [N - bis-(/9-chloräthyl)-amino]- gestellt und festgestellt, daß es die gleiche Wirkung auf

4'-methylbenzoat hergestellt, das, wie die Unter- wies.

suchung ergab, die gewünschte Antitumorwirkung auf- 5 In analoger Weise wurden die entsprechender

wies. N-Formyl-, N-Propionyl-, N-Butyryl- und N-Isobuty

. . ryl-Derivate hergestellt und festgestellt, daß auch sie

B e ι s ρ ι e 1 19 ^₆ g_ewUnschte Antitumorwirkung aufwiesen.

30,8 g Prednisolon-21-p-toluolsulfonat wurden in
600 ml Aceton gelöst und schnell mit einer Lösung io

von 18,2 g p-N-Bis-OS-chloräthyO-amino-phenylbutter- Beispiel 21 säure in 600 ml Aceton, die 60 ml 1,0-n-methanolische

KOH-Lösung enthielt, vermischt. Tierversuche

Das Gemisch wurde 50 Stunden auf +45° C gehalten, dann filtriert und zur Trockne eingedampft. 15 Die erfindungsgemäßen Ester wurden auf ihre Der hinterbleibende Feststoff wurde aus Methanol Wirksamkeit als Mittel zur Verhinderung des Wachs· umkristallisiert und ergab das Prednisolon-21-4'[p-/N- turns des Ehrlich-Ascites-Tumors, des Hepatoma 130, bis - iß - chloräthyl) - amino/ - phenyl] - butyrat vom der lymphatischen Leukämie (L 1210), des Harding· Schmelzpunkt 163 bis 164°C. Sein (cO^C-Wert Passey-Melanoms und des Walker-256-Tumors ge-(c = 1,06 in CHCl₃) betrug 92,9°. 20 testet. Sie wurden in jedem Falle auf intraperitonealem

In der vorstehend beschriebenen Weise wurde bei Wege verabfolgt.

Verwendung von p-N-Bis-0?-chloräthyl)-aminobenzoe- Einige der erhaltenen Ergebnisse sind in Tabellen 1.

säure das Prednisolon-21-p-[N-bis-(/?-chloräthyl)-ami- 2, 3 und 4 zusammengestellt. Gute Ergebnisse sind

no]-benzoat hergestellt, das, wie die Untersuchung er- auch bei Verabfolgung auf oralem Wege erhalten

gab, die gewünschte Antitumorwirkung aufwies. 25 worden, wie Tabelle 5 veranschaulicht. Die Ver-

Arbeitet man in der gleichen Weise, wie oben an- bindungen weisen auch eine Corticoid-Wirkung auf,

gegeben, verwendet jedoch das Hydrocortison-21-p-to- und zwar sowohl dann, wenn sie oral verabfolgt

luolsulfonat, so erhält man das Hydrocortison- werden, als auch dann, wenn sie parenteral appliziert

21-4'-[p-/N-bis-03-chloräthyl)-amino/-phenyl]-butyrat, werden.

das, wie die Untersuchung ergab, die gewünschte 30 Die Versuche wurden gemäß den Normen in Cancer

Antitumorwirkung aufweist. Chemotherapy Report, Januar 1959 und Dezember

In der gleichen Weise, wie sie oben angegeben ist, 1962, durchgeführt.

jedoch bei Verwendung von p-[N-Bis-(/?-ch!oräthyl)- Bei den Ehrüch-Ascites-Tumoren wurden Mäuse

aminoj-phenylalanin und Prednisolon- bzw. Hydro- vom Stamm SPF NMRI als Versuchstiere verwendet.

cortison-21-p-toluolsulfonat, wurde das Prednisolon- 35 Das intraperitoneale Implantat bestand aus 2 · 10⁶

21-3'-[p-/N-bis-(/?-chloräthyl)-amino/-phenyl]-2'-ami- Tumorzellen (ELD-hyperdiploide Zellen mit 48 Chro-

nopropionat und das Hydrocortison-21-3'-[p-/N-bis- mosomen). Die Behandlung bestand in einer Injektion

(/3-chloräthyl)-amino/-phenyl]-2'-aminopropionat her- am Tag nach dem Implantationstag. Am 8. Tag

gestellt und isoliert, und jede dieser Verbindungen wurden die Tiere getötet und das Tumorgewicht der

wies, wie die Untersuchung ergab, die gewünschte 40 Versuchstiere mit demjenigen von unbehandelten

Antitumorwirkung auf. Vergleichstieren verglichen. Die LD_S0 wurde als

Dosis ermittelt, bei der 50 °„ der Tiere starben. Als

Beispiel 20 ED₅₀ wurde die Dosis bestimmt, die eine 50°_oige

Verminderung der Tumorgröße verursachte.

Zu einer Lösung von 16,5 g des (nach der im Bei- 45 Beim Versuch mit dem Hepatoma AH 130 wurden

spiel 7 beschriebenen Methode gewonnenen) Anhydrids SPF Wistar-Ratten als Versuchstiere verwendet,

aus p-fN-Bis-OS-chloräthyty-aminoJ-N-acetyl-phenyl- denen 5 · 10⁶ Tumorzellen intraperitoneal implantiert

alanins (das im einzelnen aus p-N-Bis-(/?-chloräthyl)- wurden. Die Behandlung erfolgte durch eine Injektion

amino-phenylalanin unter Verwendung von Essig- am Tag nach dem Implantationstag. Am 8. Tag

säureanhydrid hergestellt worden war) in 200 ml 50 wurden die Tiere getötet und das Tumorgewicht mit

wasserfreiem Pyridin wurden 7,2 g Prednisolon zu- demjenigen unbehandelter Vergleichstiere verglichen,

gegeben. Es wurde ein roher PrednisoIon-21-ester in Die Bestimmung von LD₅₀ und ED₅₀ erfolgte wie Sei

derselben Weise, wie sie im Beispiel 8 beschrieben ist, den Ehrlich-Ascites-Tumoren.

erhalten. Er wurde in wasserfreiem Benzol gelöst und Bei Versuch mit dem Harding-Passey-Melanom die Lösung an einer Silicagel-Säule Chromatographien 55 wurden Mäuse vom Stamm CDF₁ ^3HxDBA)F₁ und mit einem (9: lVBenzoI-Aceton-Gemisch eluiert. verwendet. Es wurden subkutan 2 bis 4 mm große Die Hauptfraktion wurde im Vakuum zur Trockne Tumorstücke implantiert. Die Behandlung erfolgte eingedampft und der Rückstand durch Verrühren mit Il Tage lang durch täglich einmalige Injektion. beHexan zur Kristallisation gebracht. ginnend mit dem Tag nach dem Implantationstag.

Das >o erhaltene Prednisolon-21-3'-[p-/N-bis-(/i- 60 Am 14. Tag wurden die Tiere getötet. Die Auswertung

chloräth\l)-amino/-phenyl]-2'-acetylarninopropionat erfolgte wie vorher.

wies keinen definierten Schmelzpunkt auf. Die Ver- Beim Versuch mit dem Walker-Carcinosarcom 256

bindung envies sich als ein wirksames Antitumor- wurden Sprague-Dawley-Ratten verwendet. Es wurden

lucitel. 1. B. gegen Walker-256-Tumoren. subkutan 2 bis 4 mm große Tumorstücke implantiert.

Seine Identität wurde durch das kernmagnetische 65 Die Behandlung erfolgte am Tag nach dem lmplan-Resonamspekmim und die Elementaranalysc auf N tationstag, wobei 5 Tage lang je einmal eine Injektion und Cl bestätigt. In der gleichen Weise, wie oben an- erfolgte. Am 9. Tag wurden die Tiere getötet. Die Ausgesehen, jedoch unter Verwendung von Hydrocor- Wertung erfolgte wie vorher.

Tabelle 1
Ehrlich Ascites-Tumor

*) Therapeutischer Index =

ED₅₀

TabeUe 2
Hepatome-130-Tumor

*) Therapeutischer Index =

LD₅

ED₅I

Tabelle 3
Harding-Passey-Melanom-Tumor

*) Therapeutischer Index = ■

LD₅,

Verbindung	Letalität (mg/kg)	Wirkung (mg/kg)	Therapeutischer Index*)
PredEJsolon^l-p-lN-bis-OS-chloräthyl)	1-1000	EDW =1-13	>77
amino]-benzoat (I)	keine Toxizität
Prednison-21-p-[N-bis-(/3-chloräthyl)-	1-1000	ED50 = 1-12	>83
amino>benzoat	keine Toxizität
Hydrocortisoii-21-p-[N-bis-(/S-chloräthyl)- amino]-benzoat Prednisolon (Π)	LD50 > 1 · 500	ED50 = 1-15	>33
	1-1000	ED50 = 1-120	> 8,3
p-[N-Bis-(/5-chloräthyl)-amino3-	keine Toxizität
benzoesäure (ΠΓ)	LD50 = 1-125	1-63:	> 2
II + III (im selben Verhältnis wie in		keine Wirkung
Verbindung I)	LD50 = 1 · (218	1-(149+ 105):	> 1,5
+ 158)	keine Wirkung

Verbindung	Letalität (mg/kg)	Wirkung (mg/kg)	Therapeutischer Index·)
Predmsolon-21-p-[N-bis-0?-chloräthyl)-	LD50 =1-420	ED50 = 1-5,6	75
amino]-benzoat (I)
Prednison-21-p-[N-bis-09-chloräthyl)-	1-1000	ED50 = 1-58	>18
amino]-benzoat	keine Toxizität
Hydrocortison-21-p-[N-bis-03-chloräthyl)- aminoj-benzoat Prednisolon (II)	LD50 > 1 · 1000	ED50 =1-28	>36
p-[N-Bis-09-chloräthyl)-amino]-	LD50 = 1-780	ED50 = 1-118	6,6
benzoesäure (III)	LD50 = 1-125	ED50 = 1-20	6,3
II + III (im selben Verhältnis wie in
Verbindung I)	LD50 = I · (202	ED50 = 1 · (25,6	7,9
Prednisolon-21-p-[N-bis-(/?-chloräthyl)-	+ 147)	+ 18,7)
amino]-phenylbutyrat	LD50 =1-261	ED50 =1-5,8	45
Predniso)on-21-p-[N-bis-09-chloräthyl)-
amino]-phenylacetat	LD50 = 1-560	ED50 = 1-27	21
Chlorambucil
LD50 = 1-30	ED50 =1-4,3	7,1

Verbendung	Letalität (mg/kg)	Wirkung (mg/kg)	Therapeutischer Index»)
Prednisolon-21-p-[N-bis-(/9-chloräthyl)-	LD50 = 11-20	ED50 = 3,4	6,8
amino]-benzoat
Prednison-21-p-[N-bis-(/?-chloräthyl)- amino]-benzoat Hydrocortison-21-p-[N-bis-03-chloräthyl)-	LD60 =11-97	ED50 =11-18	5,4
amino]-benzoat	LD50 = 11-82	ED50 = 11-19	4,3
Prednisolon
	LD50 = 11-600	11-243:	<2,5
Prednisolon-21-p-[N-bis-09-chloräthyl)-		keine Wirkung
amino]-phenylbutyrat	LD50 =11-6,8	ED60 = U · 3,1	2,2

ED₅₁

QOl 305

Tabelle 4
Walker-256-Tumor

Verbindung	Letalität (mg/kg)	5-168	Wirkung (mg/kg)	Therapeutischer Index*)
Prednisolon-21-p-[N-bis-(/?-chlorätliyl)-	LD50 =		ED50 = 5-9,6	18
amino]-benzoat (I)		5-32
Prednisolon-21-p-[N-bis-((8-chloräthyl)-	LD50 =		ED90 = 5 · 1,1	29
amino]-piienylbutyrat		5-650
Prednisolon (Π)	LD50 =	5-89	ED50 = 5-214	3,0
p-[N-Bis-(/3-chloräthyl)-amino]-benzoe-	LD50 =		ED50 = 5 -13,4	6,6
säure(ÖI)		5 · (81 + 59)
II + ΠΙ (im selben Verhältnis wie in	LD50 =		ED50 = 5 - (10,7	7,5
Verbindung I)		+ 7,8)

*) Therapeutischer Index = ■

Tabelle 5

LDäo ED₅₀

	Verbindung	Letalität (mg/kg)	I	Wirkung (mg/kg)	Thera
Tumor	Chlorambucil	LD50 = 1-55	ED50 > 1 · 31	peutischer Index*)
Hepatoma 130	Prednisolon-21-4'-[p-n^J-bis-(/3-chlor-	LD50 = 1-380	ED50 = 1 · 155	< 1,8
Hepatoma 130	äthyl)-amino]-phenyl]-butyrat			2,5
	Chlorambucil	LD50 = 11 · 7,0	ED50 = 11-2,3
Harding-Passey-				3,0
Melanom	Prednisolon-21-4'-[p-/1N-bis-(/?-chlor-	LD50 = 11-40	ED50 = 11 · 6,0
Harding-Passey-	äthyl)-amino7-phenyl]-butyrat			6,7
Melanom	Chlorambucil	LD50 = 5 · 13,5	ED50 = 5 · 0,42
Walker 256	PrednisoloD-21-4'-[p-/"N-bis-0S-chlor-	LD50 =5-64	ED50 =5-1	32
Walker 256	äthyl)-amino7-phenyl]-butyrat			64
	Prednisolon-21-3'-[N-bis-0?-chlor-	LD50 = > 5 ·	ED50 = 5-4,5
Walker 256	äthyl)-amino]-4'-met:hylbenzoat	1000		>222

*) Therapeutischer Index =

LP₅₀

ED₅₀

Claims (1)

Patentansprüche:

1. Corticosteroid^l-tster der allgemeinen Formel Cl-CHjJ-CHg_x

^VN ^R1 /°

Cl-CH₈C-H₂^ <\3—X-A-C Z'

^XOB