DE1698180C3 - Verfahren zur Herstellung eines Blutserum-Bezugsnormals - Google Patents

Verfahren zur Herstellung eines Blutserum-Bezugsnormals

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DE1698180C3 DE1698180A DEB0096171A DE1698180C3 DE 1698180 C3 DE1698180 C3 DE 1698180C3 DE 1698180 A DE1698180 A DE 1698180A DE B0096171 A DEB0096171 A DE B0096171A DE 1698180 C3 DE1698180 C3 DE 1698180C3
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Description

3 4
gestellt werden, wobei das Serum aus dem gefrorenen An Hand des nachfolgenden Beispiels wird die
Zustand unter Einfluß eines Hochvakuums und Eis Erfindung erläutert.
oder eines anderen gefrorenen Lösungsmittels durch .
schnelles Sublimieren getrocknet wird, um einen Beispiel
porösen Feststoff zu erhalten. 5 Eine Lösung aus Ammoniumbicarbonat wurde her-
Die Verwendung der getrennten wäßrigen Lösung gestellt, indem 426,6 g Ammoniumbicarbonat (analydes Ammoniumbicarbonats für die Wiederaufberei- senrein) in 180 1 destilliertem Wasser gelöst wurden, tung des gefriergetrockneten Serums wurde gemäß Die Lösung wurde geklärt, indem sie durch Membradieser Erfindung als notwendig befunden, um ein nen mit 1,2 und 0,45 μ Forengrößen filtriert wurde, stabiles Blutserum-Bezugsnormal zu erhalten. Es wur- »o Dann wurde die Lösung in 50 ml-Gefäße abgefüllt, de gefunden, daß beim Gefriertrocknen des Blutserums verschlossen und hermetisch abgedichtet und schließein wesentlicher Anteil des Kohlendioxydgehalts des lieh in Autoklaven bei 255° F 30 min lang sterilisiert. Serums in Form von gasförmigem CO2 verlorengeht. Gefriergetrocknetes menschliches Blutserum ent-Um die Enzyme in dem Serum zu bewahren, wird Sau- sprechend einem Originalvolumen von 50 ml flüssigem re zugesetzt und damit der optimale pH-Wert aufrecht- 15 Ser.:m wurde auf dessen ursprüngliches Volumen durch erhalten, bei dem die Enzyme aktiv bleiben. Diese den Zusatz von 50 ml der oben beschriebenen Ammo-Ansäuerung hat sogar noch weitere Verluste des Koh- niumbicarbonatlösung wiederaufbereitet. Die Milendioxydgehalts des Serums zur Folge. schung wurde etwas gerührt, indem das Gefäß gedreht
Eine wäßrige Ammoniumbicarbonat-Lösung ist wurde, bis das Serum vollständig mit der wäßrigen
hervorragend zor Wiederaufbereitung von gefrier- ao Lösung benetzt war. Dann wurde die Mischung in
getrocknetem Blutserum geeignet, und zwar dadurch, einen Kühlschrank eingegeben, bis das Serum voll-
daß sie: ständig aufgelöst war. Die Probe des wiederaufberei-
. . ,., . . . -.. teten Serums zeigte folgende Analyse:
1. in Losung stabil ist, wenn sie hermetisch abge- Bestandteil
dichtet und sterilisiert ist; „
Bestandteil Mittelwert
2. eine Zusammensetzung hat, die nicht die Messung . ,,„_,
eines der Bestandteile des Bluts stört, die ge- A bumin, g/100 mi 3,9
wohnlich bei mehrfachautomatisierten analyti- Alkalische Phosphatase, Einheiten*... 18,0
sehen Verfahren bestimmt werden; Bilirubin, mg/100 ml* 1,8
30 Calcium, mg/100 ml 9,0
3. eine Zusammensetzung ohne solche unerwünsch- Chlorid, mÄq./l 101,0
ten Bestandteile aufweist, die einen der üblichen Kohlendioxyd, mÄq./l 25,0
Zielwerte für das Blutserum-Btzugsnormal stören Glucose, mg/100 ml* 230,0
würde, d. h. Werte, die im wesentlichen dieselben Kalium, mÄq./l 5,0
wie in dem normalen menschlichen Blutserum 35 Natrium, mÄq./l 140,0
und/oder Werte, die ideal für die mehrfachauto- Gesamtprotein, g/100 ml 6,8
matisierte analytische Verfahrensweise geeignet Transaminase (GOT), Einheiten* 100,0
sind; Harnstoff-Stickstoff, mg/100 ml* 68,0
4. einen pH-Wert in einem Bereich hat, der dem Das oben aufgeführte wiederaufbereitete Serum End-pH-Wert (d. h. pH 7,5±0,5) des wiederauf- «° kan„ fQr die Normierung und steuerung von mehrbereiteten Serums innerhalb eines annehmbaren fachautomatisierten analytischen Verfahren für Blut-Bereichs für die Versuchssysteme sowie für die KTum verwendet werden, z. B. für den »12 Channel Stabilität der Komponenten, insbesondere der Aut0 Ana|yzer<<i der VOn der Technicon Instruments Enzyme entspricht; hergestellt wird.
5. zu dem Carbonat-Bicarbonat-System beiträgt,
wenn sie dem Serum zugesetzt ist, um einen . . . . „ . . , „
KnhlenHinxvHnrhalf 711 crrpiiaon <lpr fiir Hi* ·) Diese Werte werden in einem erhöhten Bereich festgestellt. K.ohlen(iioxydgehalt zu erzeugen, der fur die „as flüssige Serum wurde vorher eingestellt (vor der Gefrier- Standardisierung und Steuerung des Versuchs trocknung) indem reine Verbindungen und andere Substanzen
geeignet ist; , zugesetzt wurden, um Werte in bestimmten idealen Bereichen
-..„,, ι .... ι. . für die Standardisierung oder Normierung von mchrkanaligen
6. keine Farbe hat und filtriert werden kann, um eine automatischen Instrumenten, wie z. B. dem »12 Channel Auto wasserklare Lösung zu ergeben. Anal.-zer« zu ergeben.

Claims (16)

16 98 ISO 1 2 Da Blut ein komplexer Stoff ist, der zahlreiche Patentansprüche: Substanzen enthält, sind mehrfach automatisierte Ver fahren ideal für die Analyse des Bluts. Eine wichtige
1. Verfahren zum Herstellen eines Blutserum- Funktion unter den vielen Funktionen des Bluts ist Bezugsnormals mit einem Kohjendioxydgehalt- 5 Rohstoffe zu den Geweben zu transportieren und standard oder einem Kohlendioxydnormalgehalt Abbauprodukte daraus abzuführen. Einer der wesentfür die Verwendung in mehrfachautomatisierten lichsten dieser Rohstoffe ist Sauerstoff und ein wichanalytischen Verfahren, dadurch gekenn- tiges Abbauprodukt ist Kohlendioxyd, das das Hämozeichnet, daß gefriergetrocknetes Blutserum globin der roten Blutkörperchen aus dem Gewebe mit einer wäßrigen Lösung von Ammoniumbicar- 10 abtransportiert, zu dem Sauerstoff geliefert wurde, bonat wiederaufbereitet wird, so daß der Kohlen- Weiter befindet sich das Kohlendioxyd im normalen dioxydgehalt des wiederaufbereiteten Serums auf Blut im Gleichgewicht mit H1CO3 und HCO3" als ein vorbestimmtes Niveau angehoben wird. wichtiges Puffersystem zum Steuern des pH-Werts
2. Verfahren nach Anspruch I, dadurch gekenn- des Bluts. Deshalb ist die Bestimmung des Kohlenzeichnet, daß das gefriergetrocknete Blutserum mit 15 dioxydgehalts des Blutserums bei vielen klinischen einer so ausreichenden Menge an Ammonium- Untersuchungen von großer Wichtigkeit. Ein mehrfach carbonat-Lösung wiederaufbereitet wird, daß der automatisiertes Verfahren, das eine genau: Bestim-Kohlendioxydgehalt des aufbereiteten Serums etwa mung des Kohlendioxydgehalts des Bluts einschließt, 12 bis 35 Milliäquivalent pro Liter beträgt. würde deshalb in klinischen Laboratorien sehr nütz-
ao liehe Dienste tun.
Die Aufgabe der Erfindung besteht darin, ein Ver-
fahren zum Herstellen eines stabilen Blutserum-Bezugsnormals mit einem Kohlendioxidnormalgehalt, das für die Eichung und Steuerung von mehrfachauto-
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Herstellen as matisierten analytischen Verfahren geeignet ist, anzueiries Blutserum-Bezugsnormals mit einem Kohlen- geben.
dioxidgehaltstandard oder einem Kohlendioxidnor- Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß durch ein
malgehalt für die Verwendung in mehrfachautomati- Verfahren zum Herstellen eines Blutserum-Bezugssie r ten analytischen Verfahren. normals mit einem Kohlendioxidgehaltstandard oder
Die schnelle Messung oder Bestimmung von ver- 30 einem Kohlendioxidnormalgehalt für die Verwendung schiedenen Komponenten des Blutserums ist ein wert- in mehrfachautomatisierten analytischen Verfahren voller Beitrag für die klinische Krankheitsdiagnose gelöst, das dadurch gekennzeichnet ist, daß gefriergevorden. In den letzten Jahren wurden eine Anzahl getrocknetes Blutserum mit einer wäßrigen Lösung von von komplizierten elektronischen Vorrichtungen ent- Ammoniumbicarbonat wiederaufbereitet wird, so daß wickelt, um analytische Messungen am Blutserum und 35 der Kohlendioxidgehalt des wiederaufbereiteten Seanderen biologischen Proben schnell und genau durch- rums auf ein vorbestimmtes Niveau angehoben wird, zuführen. Ein automatisierter Analysator, der als Der Begriff »Kohlendioxidgehalt« wird auf die
»Robot Chemist« bekannt ist und von der Warner- gesamt äquivalente Menge an Kohlendioxid in Form Chilcott Laboratories hergestellt wird und verschiedene von CO1, H1CO3 und HCO3- angewandt.
Instrumente, die durch den Namen »Auto-Analyzer« 40 Der Begriff »mehrfachautomatisiertes Verfahren« bekannt sind und von der Tcchnicon Instruments steht für ein automatisiertes chemisch-analytisches hergestellt werden, sind Beispiel solcher elektronischer Verfahren, in dem zwei oder mehrere Analysen glcich-Einrichtungen, mit denen schnell und genau analy- zeitig an einer Probe durchgeführt werden,
tische Bestimmungen vorgenommen werden können. Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren werden ein
Einige der verschiedenen biochemischen Bestim- 45 gefriergetrocknetes Serum, das aus menschlichem Blut mungen, die mit den oben genannten und ähnlichen hergestellt wurde, und eine getrennte wäßrige Lösung elektronischen Einrichtungen zur Zeit anwendbar aus Ammoniumcarbonat für die Wiederaufbereitung sind, sind z. B. Bestimmungen von Albumin, saure des gefriergetrockneten Serums verwendet.
Phosphatase, alkalische Phosphatase, Bilirubin, CaI- Gefriergetrocknetes Serum, das ge-xäß dieser Erfin-
ciiim. Kohlendioxid, Chlorid, Cholesterin, Glucose, So dung verwendet wird, ist wenigstens 2 Jahre bei Hämoglobin, LDH, Kalium, Natrium, Gesamtpro- Temperaluren im Bereich von etwa 2 bis etwa 1O0C tein, Transaminase, Harnstoff-Stickstoff und 2,6,8- stabil. Gemäß <hm erfindungsgemäßen Verfahren wird Trioxypurin. , gefriergetrocknetes Serum mit genügend wäßriger
Ein besonderes Instrument, das sich zur Zeit auf Ammoniumbicarbonatlösung aufbereitet, um den dem Markt befindet (und das als »12 Channel Auto SS Kohlendioxydgehalt des wiederaufbereiteten Serums Analyzer« bekannt ist) kann gleichzeitig 12 verschie- auf ein vorbestimmtes Niveau in Abhängigkeit von der dene Analysen mit einer einzigen Probe durchführen. jeweiligen analytischen Untersuchung, die durchge-
Bei der Durchführung der analytischen Untersu- führt werden soll, anzuheben. Vorzugsweise soll der chungen am Blutserum und anderen biologischen Kohlendioxydgehalt des wiederaufbereiteten Serums Proben mit den oben genannten elektronischen Ein- *° etwa 12 bis 35 Milliäquivalent pro Liter betragen. Das ri( htungen ist es notwendig, Laboratoriums-Standard- aufbereitete Serum ist wenigstens 3 Tage lang bei oder -Norm-Materialien oder sogenannte »Bezugs- Temperaturen im Bereich von etwa 2 bis etwa IO°C normale« zum Zwecke der Eichung und Steuerung des stabil und kann direkt für die Eichung und Steuerung Instruments zu verwenden. Genaue Ergebnisse bei der der Instrumente, die für die mehrfachautomatisierten Verwendung dieser Instrumente, insbesondere von 6S analytischen Verfahren verwendet werden, benützt mchrfach-automatisiert ablaufenden Verfahren sind werden.
von der festen und konstanten Normung der biolo- Das zu verwendende gefriergetrocknete Serum kann
giüchen Bestimmungen abhängig. durch irgendein übliches Gefriertrockenverfahren her-
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