DE1698180B2 - Verfahren zur herstellung eines blutserum-bezugsnormals - Google Patents

Verfahren zur herstellung eines blutserum-bezugsnormals

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DE1698180B2 DE1968B0096171 DEB0096171A DE1698180B2 DE 1698180 B2 DE1698180 B2 DE 1698180B2 DE 1968B0096171 DE1968B0096171 DE 1968B0096171 DE B0096171 A DEB0096171 A DE B0096171A DE 1698180 B2 DE1698180 B2 DE 1698180B2
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Description

Die Aufgabe der Erfindung besteht dann, ein Ver-
fahren zum Herstellen eines stabilen Blutserum-Bezugsnormals mit einem Kohlendioxidnormalgehalt, das für die Eichung und Steuerung von mehrfachauto-Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Herstellen a5 matisierten analytischen Verfahren gee.gnet .st, anzu-
^ά^Ζ^^^Γ\^Ζί^ 8^ Aufgabe-i^,^^^ ma,geh8alt für die Verwendung in mehrfachautomati- ^^^
"STSSrSÄE Bestimmung von ver- 30 eÄ^^^
schiedenen Komponenten des Blutserums ist ein wert- in niehrfechautomatisiertenanalyusc^ Verfaß voller Beitrag für die klinische Krankheitsdiagnose gelöst das dadurch g<*ennze£hnet ^ |aß gefriergeworden. In den letzten Jahren wurden eine Anzahl getrockneter Blutserum mit e.ner wäßrigen Lösung von von komplizierten elektronischen Vorrichtungen ent- Ammoniumbicarbonat "^*™^*^^ di? wickelt, um analytische Messungen am Blutserum und 35 der Kohlend.ox.dgehalt ?« "^«"^J^JT anderen biologischen Proben schnell und genau durch- rums auf ein *or^'m"^ "1^" f^rd auf dt ttuführen. Ein automatisierter Analysator, der als Der Begriff »Kohlendioxid^ha t« wird auf d«
»Robot Chemist« bekannt ist und von der Warner- gesamt äqu.va'ente Menge an Kohlendioxid in Form Chilcott Laboratories hergestellt wird und verschiedene von CO2, H4CO3 und HCO3- anSe^ndt· Instrumente, die durch den Namen »Auto-Analyzer« 40 Der Begriff »mehrfachautomatisiertes Verfahren« bekannt sind und von der Technicon Instruments steht für ein automat.siertes chemisch-analytisches hergestellt werden, sind Beispiel solcher elektronischer Verfahren, in dem zwei oder mehrere Analysen gleich· Einrichtungen, mit denen schnell und genau analy- zeitig an einer Probe durchgeführt we™en· tische Bestimmungen vorgenommen werden können. Bei dem erfmdungsgemaßen Verfahren werden em
Einige der verschiedenen biochemischen Bestim- 45 gefriergetrocknetes Serum, das aus menschlichem Blut mungen, die mit den oben genannten und ähnlichen hergestellt wurde, und eine getrennte wäßrige Losung elektronischen Einrichtungen zur Zeit anwendbar aus Ammoniumcarbonat fur die Wiederaufbereitung sind, sind z. B. Bestimmungen von Albumin, saure des gefriergetrockneten Serums verwendet. Phosphatase, alkalische Phosphatase, Bilirubin, CaI- Gefriergetrocknetes Serum, das gemäß dieser Erfin-
cium, Kohlendioxid, Chlorid, Cholesterin, Glucose, 5» dung verwendet wird, ist wenigstens 2 Jahre bei Hämoglobin, LDH, Kalium, Natrium, Gesamtpro- Temperaturen im Bereich von et** 2 *%εί.™ !°.£ tein, Transaminase, Harnstoff-Stickstoff und 2,6,8- stabil. Gemäß dem erfmdungsgemaßen Verfahren wird Trioxypurin gefriergetrocknetes Serum mit genügend wäßriger
Ein besondres Instrument, das sich zur Zeit auf Ammoniumbicarbonatlösung aufbereitet, um den dem Markt befindet (und das als »12 Channel Auto 55 Kohlendioxydgehalt des wiederaufbereiteten Serums Analyzer« bekannt ist) kann gleichzeitig 12 verschie- auf ein vorbestimmtes Niveau in Abhängigkeit von der dene Analysen mit einer einzigen Probe durchführen. jeweiligen analytischen Untersuchung, die durchße-
Bei der Durchführung der analytischen Untersu- führt werden soll, anzuheben Vorzugsweise soll der chungen am Blutserum und anderen biologischen Kohlendioxydgehalt des wiederaufbereiteten Serums Proben mit den oben genannten elektronischen Ein- «<· etwa 12 bis 35 Milliäquivalent pro Liter betragen. Das richtungen ist es notwendig, Laboratoriums-Standard- aufbereitete Serum ist wenigstens 3 Tage lang bei oder -Norm-Materialien oder sogenannte »Bezugs- Temperaturen im Bereich von etwa 2 bis etwa 10 C normale« zum Zwecke der Eichung und Steuerung des stabil und kann direkt für die Eichung und Steuerung Instruments zu verwenden. Genaue Ergebnisse bei der der Instrumente, die für die mehrfachautomatisierten Verwendung dieser Instrumente, insbesondere von «5 analytischen Verfahren verwendet werden, benutzt mehrfach-automatisiert ablaufenden Verfahren sind werden.
von der festen und konstanten Normung der biolo- Das zu verwendende gefriergetrocknete Serum kann
gischen Bestimmungen abhängig. durch irgendein übliches Gefriertrockenverfahren her-
gestellt werden, wobei das Serum aus dem gefrorenen An Hand des nachfolgenden Beispiels wird die
Zustand unter Einfluß eines Hochvakuums und Eis Erfindung erläutert.
oder eines anderen gefrorenen Lösungsmittels durch
schnelles Sublimieren getrocknet wird, um einen Beispiel
porösen Feststoff zu erhalten. 5 Eine Lösung aus Ammoniumbicarbonat wurde her-
Die Verwendung der getrennten wäßrigen Lösunf gestellt, indem 426,6 g Ammoniumbicarbonat (anaiydes Ammoniumbicarbonats für die Wiederaufberei- senrein) in 180 1 destilliertem Wasser gelöst wurden, tung des gefriergetrockneten Serums wurde gemäß Die Lösung wurde geklärt, indem sie durch Membradieser Erfindung als notwendig befunden, um ein nen mit 1,2 und 0,45 μ Porengrößen filtriert wurde, stabiles Blutserum-Bezugsnormal zu erhalten. Es wur- i» Dann wurde die Lösung in 50 ml-Gefäße abgefallt, de gefunden, daß beim Gefriertrocknen des Blutserums verschlossen und hermetisch abgedichtet und schließein wesentlicher Anteil des Kohlendioxydgehalts des lieh in Autoklaven bei 255° F 30 min lang sterilisiert. Serums in Form von gasförmigem COS verlorengeht Gefriergetrocknetes menschliches Blutserum ent-Um die Enzyme in dem Serum zu bewahren, wird Sau- sprechend einem Originalvolumen von 50 ml flüssigem re zugesetzt und damit der optimale pH-Wert aufrecht- 15 Serum wurde auf desseu ursprüngliches Volumen durch erhalten, bei dem die Enzyme aktiv bleiben. Diese den Zusatz von 50 ml der oben beschriebenen Ammo-Ansäuerung hat sogar noch weitere Verluste des Koh- niumbicarbonatlösung wiederaufbereitet. Die Milendioxydgehalts des Serums zur Folge. schung wurde etwas gerührt, indem das Gefäß gedreht
Eine wäßrige Ammoniumbicarbonat-Lösung ist wurde, bis das Serum vollständig mit der wäßrigen
hervorragend zur Wiederaufbereitung von gefrier- »0 Lösung benetzt war. Dann wurde die Mischung in
getrocknetem Blutserum geeignet, und zwar dadurch, einen Küh'schrank eingegeben, bis das Serum voll-
daß sie: ständig aufgelöst war. Die Probe des wiederaufberei-
. . . _ .... . , . , , teten Serums zeigte folgende Analyse:
1. in Losung stabil ist, wenn sie hermetisch abge- Bestandteil
dichtet und sterilisiert ist;
s Bes-ancLei! Mittelwert
2. eine Zusammensetzung hat, die nicht die Messung . .._. , , n
eines der Bestandteile des Bluts stört, die ge- A ^Tudv. "ΐ"" " π" κ V '* '' ,η
wohnlich bei mehrfachautomatisierten analyti- Alkalische Phosphate, Einheiten*... 18,0
sehen Verfahren bestimmt werden; Bilirubin, mg/100 ml* 1,8
30 Calcium, mg/100 ml 9,0
3. eine Zusammensetzung ohne solche unerwünsch- Chlorid, mÄq./I.._ 101,0
ten Bestandteile aufweist, die einen der üblichen Kohlendioxyd, mÄq./l 25,0
Zielwerte für das Blutserum-Bezugsnormal stören Glucose, mg/100 ml* 230,0
würde, d. h. Werte, die im wesentlichen dieselben Kalium, mÄq./l 5,0
wie in dem normalen menschlichen Blutserum 35 Natrium,mÄq./l ·.··· 140.0
und/oder Werte, die ideal für die mehrfachauto- Gesamtprotein, g/100 ml 6,8
matisierte analytische Verfahrensweise geeignet Transaminase (GOT), Einheiten* 100,0
sind; Harnstoff-Stickstoff, mg/100 ml* 68,0
4. einen pH-Wert in einem Bereich hat, der dem Das oben aufgeführte wiederaufbereitete Serum End-pH-Wert (d. h. pH 7,5 ±0,5) des wiederauf- 4° kann für ^j6 Normierung und Steuerung von mehrbereiteten Serums innerhalb eines annehmbaren fachautomatisierten analytischen Verfahren für Blut-Bereichs für die Versuchssysteme sowie für die serum verwendet werden, z. B. für den »12 Channel Stabilität der Komponenten, insbesondere der Auto Analyzer«, der von der Technicon Instruments Enzyme entspricht; ^ hergestellt wird.
5. zu dem Carbonat-Bicarbonat-System beiträgt,
wenn sie dem Serum zugesetzt ist um einen "~T^~~^erte werden in einem erhöhten Bereich festgestellt.
Kohlendioxydgehalt zu erzeugen, der fur die Das flüssige Serum wurde vorher eingestellt (vor der Gefrier-
Standardisierung und Steuerung des Versuchs trocknung) indem reine Verbindungen und andere Substanzen
geeignet ist' eo zugesetzt wurden, um Werte in bestimmten idealen Bereichen
5 für die Standardisierung oder Normierung von mehrkanaligen
6. keine Farbe hat und filtriert werden kann, um eine automatischen Instrumenten, wie z. B. dem »12 Channel Auto wasserklare Lösung zu ergeben. Analyzer« zu ergeben.

Claims (2)

Da Blut ein komplexer Stoff ist, der zahlreiche «Jnhstanzen enthält, sind mehrfach automatisierte VerPatentansprüche: WJ^n jdea] för dkAnalyse des Bluts. Eine wichtige c.nHinn unter den vielen Funktionen des Bluts ist
1. Verfahren zum Herstellen eines Blutserum- ™'™U™e den Geweben zu transportieren und Bezugsnormals mit einem Kohlendioxydgehalt- s Koüsto*« ^ abzuführen. Einer der wesentstendard oder einem Kohlendioxydnormalgehalt Abbauproau ffe jst Sauerstoff und ein wich. für die Verwendung in mehrfachautomatisierten ^*n br_:._rodukt ist Kohlendioxyd, das das Hämoanalytischen Verfahren, dadurch gekenn- *9*£a 'Da p t Blutkörperchen aus dem Gewebe zeichnet, daß gefriergetrocknetes Blutserum f°*™?£tk£™ dem Sauerstoff geliefert wurde, mit einer wäßrigen Lösung von *™™™™h™- 10 ^SeTbSS sich das Kohlendioxyd im normalen bonat wiederaufbereitet wird, so daß der Kohlen- J^ im GWchaewicht rait H2CO3 und HCO3- als dioxydgehalt des wiederaufbereiteten Serums auf 9g™ ^^ggL, zum Steuern des pH-Werts ein vorbestimmtes Niveau angehoben wird. T=E. Deshalb ist die Bestimmung des Kohlen-
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekenn- des BIu J DeshalD * * klinischen zeichnet, daß das gefriergetrocknete Blutserum mit x5 J ^^ungen^vongroßer Wichtigkeit. Ein mehrfach einer so ausreichenden Menge an Ammonium- ^rsu^ungenvongr B^
carbonat-Lösung wiederaufbereitet wird, daß der ^ °m£ SlenaioTydgehalts des Bluts einschließt, ^Se"ÄT wÄÄ.inLnen Laboratorien sehr nütz-
ao liehe Dienste tun.
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