DE1693040B2

DE1693040B2 - Hustenmittel

Info

Publication number: DE1693040B2
Application number: DE1693040A
Authority: DE
Inventors: Camillo Dr. Mailand Corvi-Mora (Italien)
Original assignee: LABORATORI BIOCHIMICI FARMACEUTICI CAMILLO CORVI PIACENZA (ITALIEN)
Current assignee: LABORATORI BIOCHIMICI FARMACEUTICI CAMILLO CORVI PIACENZA (ITALIEN)
Priority date: 1966-12-09
Filing date: 1967-12-05
Publication date: 1974-02-21
Also published as: GB1176817A; FR7542M; BE707312A; DE1693040A1; US3592908A; DE1693040C3; NL6617286A

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Hustenmittel.

Eine Pharmakologie von Terpentinölen aus verschiedenen Pinus-Arten ist bekannt (Gifte und Arzneipflanzen von Mitteleuropa, O. Gessner, Heidelberg, 1953, S. 362 bis 364). Terpentinöl aus verschiedenen Pinusarten führt bei innerlicher Einnahme jedoch zu einer starken Schleimhautreizung, wie sie mehr oder weniger ausgeprägt bei allen ätherischen ölen beobachtet werden kann. Diese SchJeimhautreizung führt zu einer verstärkten Bewegung des Flimmerepithels in den Bronchien und damit zu einer Verbesserung des Aushustens von zähflüssigem Bronchialsekret. Allerdings ist bereits seit über 50 Jahren ebenfalls bekannt, daß Terpentinöle in jedem Fall eine starke Nierenreiziing verursachen. Dies ist insbesondere auch bei Malern festgestellt worden., die auf Grund des Terpentingehaltes von Lacken diese Krankheitserscheinungen sehr deutlich zeigten. Daher ist die Verwendung von Terpentinöl als Arzneimittel seit einigen Jahren von den Fachleuten fast einstimmig abgelehnt worden.

Terpentinöl enthält bekanntlich, je nach Art der verwendeten Pinusarten, mehr oder weniger große Mengen von Sobrerol, dem Hydrat des «-Pinenoxids.

a-Pinenoxid ist bekannt (B e i 1 s t e i n, Handbuch der organischen Chemie, II, 17, S. 45). Es kann durch Behandeln von «-Pinen mit Oxydationsmitteln hergestellt werden. Mit den bekannten gaschromatographischen Verfahren ist ferner die Isolierung von reinem Λ-Pinenoxid aus den Oxydationsprodukten des Terpentinöls möglich. a-Pinenoxid kann durch Anlagerung von Wasser zu Sobrerol hydratisiert werden.

Überraschenderweise wurde nun festgestellt, daß von den Oxydationsprodukten des Terpentinöls nur zwei Verbindungen, nämlich «-Pinenoxid und dessen Hydratationsprodukt Sobrerol, eine hustenstillende Wirkung entfalten.

Somit betrifft die vorliegende Erfindung Hustenmittel, die durch einen Gehalt an «-Pinenoxid gekennzeichnet sind.

Die erfindungsgemäßen Hustenmittel enthalten die im wesentlichen reine Verbindung «-Pinenoxid als aktiven Bestandteil.

«-Pinenoxid hat überraschenderweise nicht nur eine Wirkung als Sekretolytikum oder Sekretomotorikum, d. h. also als Mittel, das eine Verflüssigung oder Verringerung des Bronchialsekretes verursacht, sondern auch eine Wirkung als zentralhustendämpfendes Mittel. Unter zentralhustenstillenden Mitteln werden Pharmaka verstanden, die zentral durch Dämpfung des Hustenreflexes und somit zu einer Linderung bei trockenem, reflektorisch bedingtem Husten führen. Daß eine Verbindung beider Eigenschaften, nämlich die zenlraldämpfende Wirkung des reflektorisch bedingten Hustens und die Verflüssigung des Bronchialsekretes aufweist, ist äußerst selten, so daß die meisten, heute verwendeten Hustenmittel eine Kombination von verschiedenen Verbindungen enthalten, die jeweils die zentrale oder die lokale Wirksamkeit aufweisen.

«-Pinenoxid hat folgende Eigenschaften:

Festpunkt unter —60^c C,

Siedepunkt 65°C (10 mm Hg),

Dichte bei 20^DC 0,963 g/cm³,

Refraktionsindex bei 20⁰C 1,4697.

Es handelt sich um eine farblose Flüssigkeit mit kampferähnlichem Geruch, die mit Wasser nicht mischbar, jedoch mit Methanol, Hexan, Benzol, Chloroform, Tetrachlorkohlenstoffen und Aceton mischbar ist. «-Pinenoxid läßt sich in Wasser durch Zugabe von oberflächenaktiven Substanzen dispergieren. a-Pinenoxid kann gaschromatographisch in verhältnismäßig reinem Zustand, d. h. mit einer Reinheit von 98 bis 99%, erhalten werden.

Die Aldehyde und Ketone, die in den Oxydationsprodukten des Terpentinöls vorhanden sind, sind im allgemeinen äußerst toxisch, und einige dieser Komponente beeinträchtigen die pharmakologische Wirkung des «-Pinenoxids.

Das a-Pinenoxid hat folgende pharmakologische Eigenschaften:

Toxizität

Orale Toleranzdosis für Ratten 0,6 mg/kg
Intraperitoneale Toleranzdosis

für Ratten 0,06 mg/kg

Inhalationsdosis für Ratten .. 9,7 mg/m³ je Std.

Bei den untersuchten Tieren konnte in einem Versuchszeitraum von 33 Tagen keine Mortalität und auch keine Wachstumsveränderung festgestellt werden.

«-Pinenoxid wurde in pharmazeutischer Dosierungsform, z. B. als Kapseln oder Suppositorien, diese in Gegenwart von Sobrerol, mit den folgenden Resultaten pharmakologisch untersucht:

Die akute Toxizität wurde nach dem Verfahren von Carrol S. W e i 11 gemäß »Biometrics«, 1952, festgestellt. Hierbei wurde der LD₅₀-Wert logarithmisch aus den Ergebnissen berechnet, die mit vier Gruppen Albinoratten mit einem Durchschnittsgewicht von 250 ± 21 g erhalten worden waren. Die Substanz wurde subkutan verabfolgt; die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle I wiedergegeben.

Tabelle I

Gruppe	Menge	Dosis (g/kg)	Mor talität	F	LD₆₀
1	10	1	0
2	10	1	0	1,0	5,8 g/kg
3	10	4	1/10
4	10	10	6/10

Die chronische Toxizität wurde mit jungen, gerade entwöhnten Rallen untersucht, wobei zwei Gruppen

i 693 040

mit 10 Ratten von gleichmäßigem Gewicht von etwa 50 g mit einer gleichmäßigen synthetischen Vollnahrung gefüttert wurden. Die Nahrung der ersten Gruppe enthielt a-Pinenoxid in einer solchen Menge, daß jede Ratte an einem Tag 0,6 g/kg aufnahm.

Die Ratten wurden vor der ersten Behandlung und dann anschließend jede zweite Woche gewogen. Der Gesamtversuch wurde zwei Monate durchgeführt. Die Tabellen II und III zeigen, daß das Wachstum der Ratten nicht durch *-Pinenoxid beeinflußt wird.

Tabelle Π
Gewicht von Ratten, die mit ct-Pinenoxid enthaltendem Futter gefüttert wurden

Ratte Nr.	Anfangsgewicht	2 Wochen	Gewicht nach	6 Wochen	8 Wochen
		68	4 Wochen	125	152
1	45	70	110	120	160
2	51	69	101	136	148
3	53	76	105	130	162
4	47	71	108	132	149
5	56	64	120	128	159
6	52	74	102	137	154
7	48	77	115	125	144
8	50	70	105	131	161
9	51	68	103	130	155
10	52	70 ±4	106	129 ± 5	154 ±6
Durchschnitt	50 ± 3	107 + 6

Tabelle III
Gewicht von Ratten, die mit einem kein «-Pinenoxid enthaltendem Futter gefüttert wurden

Ratte Nr.	Anfangsgewicht	2 Wochen	Gewicht nach	6 Wochen	8 Wochen
		70	4 Wochen	130	150
1	54	65	105	141	160
2	49	73	115	145	142
3	47	75	103	128	145
4	53	80	100	125	155
5	57	69	110	139	148
6	49	62	122	135	139
7	54	65	108	127	143
8	45	75	102	136	144
9	50	68	116	127	147
10	54	70 ± 5	108	133 ±7	147 ± 6
Durchschnitt	50 ±4	108 ±7

Die chronische Toxizität bei ausgewachsenen Ratten wurde an 15 Albinoratten mit einem Durchschnittsgewicht von 105 rh 19 g untersucht, welche während der gesamten Versuchszeit unter Standardbedingungen gefüttert und gehalten wurden. Jede Ratte erhielt subkutan eine Tagesdosis von 0,6 g/kg «-Pinenoxid. Nach 40 Tagen wurden die Ratten unter einem leichten Ätherrausch durch Durchschneiden der Carotis abgetötet, worauf unmittelbar Leber, Magen, Eingeweide, Lunge, Herz, Niere, Nebenniere, Schilddrüse und Gonaden untersucht wurden. Teile dieser Organe wurden in Formalin und Bouin (Fixierflüssigkeit mit Eosin und Hämatoxylin fixiert), die hieraus präparierten histologischen Schnitte wurden mit Hämatoxylin-Esosin, mit Sudan-Ill und mit Mallory gefärbt. Eine mikroskopische Untersuchung zeigte keine Änderung der normalen histologischen Struktur.

Zur Überprüfung des Einflusses des neuen Mittels auf den Blutkreislauf wurden 6 erwachsene Albinoratten mit einem Durchschnittsgewicht von 176 g vor der Behandlung und nach täglicher Verabfolgung einer Dosis von 0,6 g/kg a-Pinenoxid auf Blutdruck und Herzschlagfrequenz untersucht. Diese Werte wurden alle H) Tage im Verlaufe des Versuchszeitraums von einem Monat an der Schwanzarterie photoelektrisch und mit einem Manometer bestimmt, mit welchem die Herzfrequenz bzw. Blutdruck bestimmbar waren. Tabelle IV zeigt, daß der normale Blutkreislauf nicht durch Ä-Pinenoxid beeinträchtigt wird.

Tabelle IV

	Vor	Versuchsbeginn	Nach	10 Tagen	Nach	20 Tagen	Nach	30 Tagen
XV£4Llt I'll«	Blutdruck
	P		P		P		P
1	110		105		110		105
τ	115		105		120		120
3	105		110		115		90
4	90		85		100		110
5	100		95		110		115
6	95		100		90		110
Durchschnittswert	100		100		107		1OS
Herzfrequenz	F	F	F
F	350	355	370
340	360	350	360
370	370	370	350
360	340	360	370
350	360	370	375
360	350	355	350
375	355	360	362
359

Zur Bestimmung der Einwirkung des Mittels auf das Blut wurden 4 ausgewachsene Kaninchen mit einem Durchschnittsgewicht von 2,375 kg auf Änderungen der Erythrocyten untersucht, und zwar nach Verabfolgung einer Tagesdosis von 0,6 g/kg Λ-Pinenoxid. Die Blutentnahme erfolgte im Verlaufe eines Monats alle 10 Tage an der randständigen Ohrvene. Die folgende Tabelle V zeigt, daß «-Pinenoxid die Wirksamkeit der Hämatopoese nicht beeinträchtigt.

Tabelle V

Kanin	Menge der Erythrocyten · 10	nach	nach	nach
chen Nr.	vor der	10 Tagen	20 Tagen	30 Tagen
	Behandlung	48	50	49
1	45	50	47	50
2	47	48	49	49
3	50	51	50	51
4	49

Im folgenden wird die Erfindung an Hand von weiteren Beispielen und Versuchen näher erläutert.

Beispiel 1

Herstellung von Kapseln

Aus den folgenden Bestandteilen wurde ein homogenes Gemisch hergestellt:

a-Pinenoxid 100 g, einteiliges Kieselgel 305 g, Lactose 72 g und Magnesiumstearat 3 g.

Das homogene Gemisch wird in verschließbare Kapseln abgefüllt. Jede Kapsel enthält 0,480 g des Gemisches, d. h. 100 mg a-Pinenoxid.

Beispiel 2

Herstellung von Suppositorien

200 g Λ-Pinenoxid wurden mit Glyzeriden von gesättigten Fettsäuren ad 2500 g gemischt.

Die Mischung wurde bei 40⁰C geschmolzen, und das geschmolzene Gemisch wird in Suppositorien-Gießformen ausgegossen und abgekühlt. Jedes Suppositorium wiegt 2,5 g und enthält 200 mg Λ-Pinenoxid.

Beispiel 3

Herstellung einer Injektionslösung in Wasser

60 g Λ-Pmenoxid, 6 g Polyäthylenglykol-Sorbitanoleat und 150 g Glukose wurden mit doppeltdestilliertem Wasser ad 3000 ml aufgefüllt.

Die durch Auflösen der Bestandteile im Wasser bei 60° C erhaltene Lösung wird nach dem Abkühlen auf 3000 ml aufgefüllt und filtriert. Anschließend wird die Lösung in 3-ml-Ampullen abgefüllt, die 30 Minuten bei 120 C sterilisiert werden. Jede Ampulle enthält 60 ml Λ-Pinenoxid.

Beispiel 4

Herstellung einer öligen Injektionslösung

60 g Ä-Pinenoxid werden mit Äthyloleat ad 3000 ml aufgefüllt.

Die durch Auflösen des «-Pinenoxids in Äthyloleat

bei 40⁰C erhaltene Lösung wird nach Kühlung auf 3000 ml aufgefüllt und filtriert. Anschließend wird die Lösung in 3-ml-An?pullen abgefüllt und 30 Minuten bei 120⁰C sterilisiert. Jede Ampulle enthält 60 mg Λ-Pinenoxid.

Versuch 1

Zur Bestimmung der Wirkung des erfindungsgemäßen Hustenmittels auf die Bronchien wurden 3 Gruppen mit je 10 Meerschweinchen untersucht, wobei die erste Tiergruppe als Kontrolle ohne Behandlung blieb, während die zweite Tiergruppe parenteral 0,3 g/kg Λ-Pinenoxid erhielt; während die dritte Gruppe rektal 0,6 g/kg «-Pinenoxid 2 Stunden vor Versuchsbeginn erhielt. Die Tiere aller Gruppen wurden vorübergehend in einem luftdichten Behälter 3 Minuten einem Ammoniaksprühnebel ausgesetzt, der aus einer 0,5normalen wäßrigen Ammoniumhydroxidlösung erhalten wurde.

Die Ergebnisse zeigen, daß Λ-Pinenoxid eine stark dämpfende Wirkung bei Bronchospasmus und Reizung zeigt. In der folgenden Tabelle Vl sind die durchschnittlichen Hustenanfälle der untersuchten Tiere im Vergleich mit der entsprechenden Durchschnittszahl bei den Vergleichstieren aufgeführt.

Tabelle VI

Wirkung der Verabfolgung von a-Pinenoxid auf die Anzahl der Hustenanfälle von Meerschweinchen bei einer 3 Minuten dauernden Behandlung mit einem 0,5n-Ammoniakaerosol

Konlrolltiere, Gruppe I	Gewicht	Anzahl der	Gruppe	H (parenteral)	Anzahl der	Gruppe III (rektal)	Gewicht	Anzahl der
		Husten			Husten			Husten
Tier Nr.	390	anfälle	Tier Nr.	Gewicht	anfälle	Tier Nr.	375	anfälle
	350	14			2		350	3
1	410	8	1	380	6	1	380	5
2	385	10	2	345	5	2	400	2
3	405	12	3	400	4	3	410	7
4	365	9	4	390	1	4	370	4
5	335	7	5	340	2	5	355	9
6	320	13	6	405	3	6	395	3
7	450	15	7	410	8	7	410	2
8	315	10	8	370	7	8	360	8
9	8	9	385	3	9	1
10	10	360	10

Durchschnitt | 372 j

Durchschnitt j 378 j 4 | Durchschnitt

380

Versuch 2

Zur Bestimmung der sedativen Wirkung des erfindungsgemäßen Hustenmittels auf das Atmungszentium und der Aktivität bei einem Reflexreiz wurden 6 Kaninchen ohne Betäubung über eine Trachealkanüle an eine Mareylrommel angeschlossen. Die Refiexreizc des Atmungszentrums wurde bei allen Tieren durch eine intravenöse Injektion von 1 mg/kg Lobelin induziert.

3 Kaninchen dienten als Kontrolltiere und wurden nicht weiter behandelt, während die anderen 3 Tiere subkutan 0,3 g/kg a-Pinenoxid 1 Stunde vor der Lobelininjeklion erhielten. Die Ergebnisse zeigen, daß α-Pinenoxid teilweise den Anstieg der Atmungsabweichung und die durch die Lobelininjektion erhöhte Frequenz hindert.

Versuch 3

Die Wirksamkeit bei direktem Reiz wurde analog Versuch 2 durchgeführt, wobei jedoch jetzt der Reiz des Atemzentrums mit einer Dosis von 0,5 mg/kg Strychninnitrat induziert wurde. Das a-Pinenoxid zeigte keinen Einfluß bei diesem Versuch.

Versuch 4

Bei einer weiteren Bestimmung der Aktivität bei direktem Reiz wurde gemäß Versuch 2 gearbeitet, wobei jedoch die Anregung des Atemzentrums durch ei:;e CO₂-Inhalation erreicht wurde, die 60 Sekunden dauerte. Der Anstieg der Atmungsabweichung wurde durch α-Pinenoxid gehindert.

Die folgenden weiteren Versuche zeigen die Wirkung von a-Pinenoxid beim Menschen.

Versuch 5

Ein 69 Jahre alter Patient mit linkem tuberkulösem Fibrothorax, Husten und Expektoration und diffusem Thonchus wurde 20 Tage täglich mit einer Dosis in Form einer Kapsel und einem Suppositorium behandelt. Es wurde eine Abnahme des Hustens und Verringerung der Expektoralion sowie eine Verringerung der objektiven Symptome beobachtet. Nebenwirkungen wurden nicht festgestellt.

Versuch 6

Eine 61 Jahre alte Patientin mit einer linken oberen lokalen tuberkulösen Kavität in Verbindung mit einer chronischen Bronchitis und begleitet von Husten,

starker Expektoration und Atemnot wurde 10 Tage mit einer Tagesdosis von einer Kapsel und einem Suppositorium behandelt. Eine erhebliche Abnahme des Hustens und des Auswurfes konnte beobachtet werden. Es wurden keine Nebenwirkungen festgestellt.

35

Versuch 7

Eine 37 Jahre alte Patientin mit chronischer Tuberkulose (miliaris pulmonum) an dem oberen rechten Lappen zusammen mit Husten und starker Expektoration wurde 10 Tage mit einer Kapsel behandelt. Eine erhebliche Verringerung des Hustens und eine Verflüssigung der Expektoration konnte beobachtet werden; Nebenwirkungen wurden nicht festgestellt.

45

Versuch 8

Eine 64 Jahre alte Frau mit einer linken basalen Bronchopneumonie, verbunden mit chronischer Bron-

chitis und Myocardium Sclerosis sowie Husten und starkem gelben Auswurf, starker Hypophonie und Rasseln an der linken Lungenspitze, wurde 10 Tage mit einer täglichen Dosis von 2 Suppositorien behandelt. Die Symptome zeigten einen erheblichen Rück-

gang, wobei keine Nebenwirkungen beobachtet wurden.

Die Wirkung von a-Pinenoxid wurde auch in klinischen Versuchen an weiteren Patienten mit Pulmonartuberkulose, Silikose, Bronchialasthma, Emphysem,

Bronchektasie und akuter und chronischer Bronchitis untersucht. Patienten mit Atmungsschwäche wurden spirographisch bei Beginn und am Ende der Therapie untersucht, um etwaige Abweichungen festzustellen. Die mehrere Monate unter Behandlung stehender

Patienten wurden bezüglich Husten und Auswurf und deren Änderungen untersucht. Anschließend wurden die verschiedenen Auswirkungen der Atemnot beobachtet, wobei auch etwaige Unverträglichkeit berück-

ίο

sichtigt wurde. Die Ergebnisse und Rückschlüsse der Versuche sind:

1. Λ-Pinenoxid hat sich als therapeutisch ausgeprägt wirksam bei der konstanten Verringerung des Hustens gezeigt; in den meisten Fällen war der Auswurf verringert odci flüssiger.

2. Spirographische Tests bei Patienten mit Atemschwächc zeigten am Ende der Behandlung einen ständigen Anstieg der Kennwerte und insbesondere der Vitalkapazität und ferner eine maximale Luflerncue-

rung je Zeileinheit (Minute). Ferner wurde ein erheblicher Anstieg des Volumens je Minute des VEMS/CV-Wertes (Verhältnis der Ventilalionsmenge/min zur Vitalkapazität) und des Sauerstoffvcrbrauches je Minute festgestellt. Diese günstige Abwandlung des spirographischen Indizes ergibt sich deutlich aus der folgenden Tabelle VII.

3. Selbst bei längerer Behandlung zeigt Λ-Pincnoxid keine unerwünschten Ncbeneffcklc oder Unvcrträglichkcilscrsehcinungcn.

Tabelle VlI Änderung der spirographischen Indizes nach Behandlung mit v-Pincnoxid

I'll ifnt Nr	VolumiMiiindcrung	Änderung der	Änderung der	Änderung der	Ändcrimp des SaucrstolV-
1 ULIvIH INI ,	je Minute	Vilulkapazilät	*ΥΙΙίΙΙιϊΙΙ-1Π1* in Menge je Minute	VEMS/CV	vcrbrauchs je Mimilc
1	+ 10%	1-15%	H 15%,	"i-10%	I 10",,
2	+ 5%	H5%	! 15%	ί 10%	H- 5"„
3	ho",;	!15%	I 20%,		I 5"„
4	■ι io%	+ 20%	I 20%	ι- 5",;	H 10"„
5	H- 5%,	H 5%	I 20%	I- 5%
6	ι 5"',;	H-10",,	I 15%
7	.—.	110%	■ 10%	-I- 5%	H- 5",.
8	-1- 5%	I 10%	\ 15",,		•1- 5",
9	H- 5%	l 15%	I 20",,	I 5°;,
10	—	H 10%,	I 15%
11	I- 5%	H 10",;	i 25",,	! 5'V	-I- 5",.
12	-—	H 10%	I 10%	¹ U i 10%,
13		I 10",,	1-10%
14	I 10%	{ 15",,	ί 15%		I- 5",
15	-I- 5%	1-10%	i 20",,	H- 5%
16		I 15%	ι 5%
17	I- 5%	ns-,,	I 25%	-I io%	I- 5",
18		H- 5%	-I 10",,	ι 15%;
19	!-10%,	—	H 5"	ι 5",;	t 1 (V
20	H 10%	H 15%	-i 25"!.'	j in°-	.J. HV

Claims

Patentanspruch:

Hustenmittel, dadurch gekennzeichnet, daß es a-Pinenoxid enthält.

a-Pinenoxid kann in an sich bekannter Weise durch Oxydation von Terpentinöl hergestellt werden. Es ist in den Oxydationsprodukten des Terpentinöls in Mengen von weniger als 2% vorhanden; seine Existenz wurde neben anderen Komponenten, wie «- und /S-Pinen, Alkoholen, Ketonen und Aldehyden der Terpenreihe gaschromatographisch nachgewiesen.

«-Pinenoxid lagert sich in Gegenwart von Wasser teilweise in das bekannte Sobrerol um.