DE1233406B

DE1233406B - Verfahren zur Herstellung von 4, 6, 7-Triaminopteridinen

Info

Publication number: DE1233406B
Application number: DES91384A
Authority: DE
Inventors: Joseph Weinstock
Original assignee: Smith Kline and French Laboratories Ltd
Current assignee: Smith Kline and French Laboratories Ltd
Priority date: 1963-06-04
Filing date: 1964-06-04
Publication date: 1967-02-02
Also published as: FR3428M; US3219665A; GB1026929A; BE648743A

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLAND Int. CL:

C07d

DEUTSCHES

PATENTAMT

AUSLEGESCHRIFT

Deutsche Kl.: 12 ρ -10/10

Nummer: 1233 406

Aktenzeichen: S91384IVd/12p Anmeldetag: 4. Juni 1964 Auslegetag: 2. Februar 1967

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von 4,6,7-Triaminopteridinen der allgemeinen Formel

R₂RiN

NRiR₂

in der R eine Phenyl- oder Thienylgruppe und Ri und Ro Wasserstoffatome oder niedrigmolekulare Alkylgruppen bedeuten, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß man in an sich bekannter Weise ein 4,6,7-Trichlorpteridin der allgemeinen Formel

Cl

II

gegebenenfalls stufenweise, mit Aminen der allgemeinen Formel

-Ri

HN<

III

umsetzt.

Vorzugsweise wird die Umsetzung mit Ammoniak in Abwesenheit von Lösungsmitteln durch Erhitzen bei erhöhtem Druck, z. B. in einem Bombenrohr oder Autoklav, durchgeführt. Die Umsetzung mit primären oder sekundären aliphatischen Aminen kann in ähnlicher Weise in einem geschlossenen Druckbehälter durchgeführt werden, vorzugsweise in Gegenwart eines Lösungsmittels, wie Methanol oder Äthanol, oder anderen geeigneten Lösungsmitteln, welche an der Reaktion nicht teilnehmen.

Es gelingt, die Chloratome in den 4,6,7-Trichlorpteridinverbindungen selektiv zu substituieren. Die in 6- oder 7-Stellung stehenden Chloratome können durch Umsetzung mit einer Verbindung der allgemeinen Formel III bei Temperaturen bis zu etwa 100'C durch Amino- oder Mono- bzw. Dialkylaminogruppen ersetzt werden. Bei höheren Temperaturen bis zu etwa 200 ⁰C wird dann das in 4-Stellung stehende Chloratom durch eine Amino- oder Mono- bzw. Dialkylaminogruppe ersetzt.

Verfahren zur Herstellung von
4,6,7-Triaminopteridinen

Anmelder:

Smith Kline & French Laboratories,

Philadelphia, Pa. (V. St. A.)

Vertreter:

Dr. V. Vossius, Patentanwalt,
München 23, Siegesstr. 26

Als Erfinder benannt:

Joseph Weinstock, Phoenixville, Pa. (V. St. A.)

Beanspruchte Priorität:

V. St. v. Amerika vom 4. Juni 1963 (285 232)

Die erfindungsgemäß herstellbaren Triaminopteridinverbindungen sind blutdrucksenkende Mittel und auf Grund ihrer ausgezeichneten natriuretischen und chloruretischen Aktivität, die nur von einer geringen Erhöhung der Kaliumausscheidung begleitet ist, wertvolle Diuretika. Außerdem zeichnen sich die erfindungsgemäß herstellbaren Verbindungen besonders vorteilhaft durch ihre fehlende Antifolsäureaktivität aus.

Die diuretische Wirkung des 2-Phenyl-4,6,7-triaminopteridins (A) wurde mit der des bekannten 6-Phenyl-2,4,7-triaminopteridins (B) verglichen. Die Versuche wurden an männlichen Albinos von Wistar-Ratten (Körpergewicht 200 bis 350 g) durchgeführt, denen 18 Stunden vor Versuchsbeginn das Futter entzogen worden war.

Die Verbindungen A und B wurden oral Gruppen von jeweils acht Ratten verabfolgt, die mit 2,5 ml 0,9°/oiger Natriumchloridlösung je 100 g Körpergewicht ödematisiert worden waren. Die Wasserausscheidung in 5 Stunden wurde bestimmt. Unter diesen Bedingungen werden von Kontrolltieren 6O^ü/o der Wassermenge ausgeschieden. Eine Zunahme von 22% oder mehr über diesen Wert bedeutet eine statistisch signifikante Diurese. In Tabelle I sind die Ergebnisse der Wasserausscheidung zusammengestellt.

709 507/397

Tabelle I

	Prozentuale Zunahme der ausgeschiedenen	Verbindung B
Dosis mg/kg	Wassermenge	25
	Verbindung A	48
5	22	73
15	33	90
30	56
60	47

Ferner wurde die Natrium- und Kaliummenge bestimmt, die innerhalb von 6 Stunden nach Verabreichung der Verbindungen A bzw. B an 5 Tage natriumarm gefütterte Ratten ausgeschieden wurde. Die Ergebnisse sind in den folgenden Tabellen zusammengefaßt.

Tabelle II

Verbindung A

Dosis mg/kg	Na mg/kg	K mg/kg	Na/K
fControllversuch 15 30	0,78 6,94 5,86	4,94 6,31 7,13	0,34 1,85 1,36

Tabelle III

Verbindung B

Dosis mg/kg	Na mg/kg	K mg/kg	Na/K
fControllversuch 15 30	0,66 6,96 10,17	4,98 3,79 3,17	0,26 3,00 4,38

bei 37 ⁰C inkubiert. Die Gesamtreaktion des Analysenverfahrens ist folgende:

30

35

40

Aus den Werten ergibt sich, daß die Verbindung A eine gute diuretische und natriuretische Aktivität besitzt.

Außerdem wurden die Verbindungen A und B hinsichtlich ihrer Antifolsäureaktivität miteinander verglichen. Die Versuche wurden mit Folsäurereduktase aus leukämischen Mäusezellen (L-5178-Y) mit einer Aktivität von etwa 10 000 Einheiten je Milliliter durchgeführt. Zum Versuch wurden aliquote Teile des Enzyms im Verhältnis 1 : 4 mit 0,02molarem Phosphatpuffer (pH-Wert 6,0) kurz vor der Verwendung verdünnt. Reine Folsäure wurde zu 0,1 ml des Enzyms (250 Einheiten) zugegeben, so daß sich in der Gesamtlösung Substratkonzentrationen von 1 ■ 10 ^ß bis 1 · 10 ⁴ Mol ergaben. Die Konzentrationen an reduziertem Triphosphopyridinnucleotid (TPNH) in der Gesamtlösung wurden zwischen 7 · 10 ⁴ und 2,3-10⁴MoI variiert. Magnesiumchlorid wurde in einer Konzentration von 1,29 · 10 ^s Mol in der Gesamtlösung zugegeben.

Die Versuchsverbindungen wurden in 0,05molarem Phosphatpuffer (pH-Wert 6,0) in verschiedenen Konzentrationen zugesetzt. Phosphatpuffer wurde zugegeben, so daß ein Gesamtvolumen von 7,0 ml erhalten wurde, und die Versuchsröhren wurden Folsäure + 2 TPNH + 2H-
»■ Tetrahydrofolsäure

2 TPN-

In bestimmten Abständen entnommene aliquote Mengen wurden in 0,9 ml eines Gemisches aus Aceton und Salzsäure einpipettiert. Die Reaktionsgeschwindigkeit wurde aus der Menge an gebildetem diazotierbarem Amin mit den Reagenzien nach Bratton — Marshall bestimmt. Die Werte wurden mit einer Standardkurve verglichen, die aus bekannten Mengen von Tetrahydrofolsäure erhalten

15 worden war. Es wurden folgende Ergebnisse erhalten:

20

	(	Konzentration	% Folsäure reduktase
Vergleich	Verbindung A <		100
I	1 · 10~⁴ Mol	100
	5 · ΙΟ⁵ Mol	127
Verbindung B i	1 ■ ΙΟ⁵ _Moi	108
	1 · ΙΟ⁶ Mol	49
5 · ΙΟ"⁷ Mol	63
1 · ΙΟ"⁷ Mol	76

Es ergibt sich, daß Verbindung A die leukämische Folsäurereduktase der Mäuse bei Dosierungen bis hinauf zu 1 ■ 10 ⁴ Mol nicht hemmt, während Verbindung B eine starke Hemmung der Folsäurereduktaseaktivität bei Dosierungen bis herab zu 1 · ΙΟ⁷ Mol und etwa 50% Hemmung bei einer Dosierung von 1 · 10~⁶ Mol zeigt.

Die erfindungsgemäß erhältliche Verbindung A besitzt zwar schlechtere diuretische und natriuretische Wirksamkeit als die Verbindung B, doch ist sie der bekannten Verbindung B trotzdem durch ihre fehlende Antifolsäureaktivität überlegen.

Die nachstehenden Beispiele erläutern das erfindungsgemäße Verfahren.

Beispiel 1

0,40 g 2-Phenyl-4,6,7-trichlorpteridin in 50 ml flüssigem Ammoniak werden 6 Stunden auf 140 C in einem Bombenrohr erhitzt. Der feste Rückstand wird mit Äthanol versetzt, und unlösliches Material wird abfiltriert. Das Alkoholfiltrat wird unter vermindertem Druck eingedampft und der Rückstand in verdünnter Salzsäure gelöst, filtriert und beim pH-Wert 8 mit konzentrierter Ammoniaklösung ausgefällt. Das erhaltene 2-Phenyl-4,6,7-triaminopteridin wird aus Wasser umkristallisiert; F. 285 bis 287 C (Zersetzung); Ausbeute: 68% der Theorie.

Das als Ausgangsstoff benötigte 2-Phenyl-4,6,7-trichlorpteridin wird folgendermaßen hergestellt: 26,5 g 4,6,7-Trihydroxy-2-phenylpteridin werden 5 Stunden mit 300 ml Phosphoroxychlorid und 104 g Phosphorpentachlorid unter Rückfluß gekocht. Das Reaktionsgemisch wird vorsichtig mit Äther versetzt und extrahiert, der Ätherextrakt wird mit Aktivkohle behandelt und filtriert. Das Filtrat wird eingeengt und abgekühlt. Es fällt rohes 2-Phenyl-4,6,7-trichlorpteridin aus, das bei 187 bis 189 C sublimiert wird und bei 193 bis 195 C schmilzt.

Beispiel 2

In analoger Weise wie im Beispiel 1 angegeben wird 2-[Thienyl-(2')]-4,6,7-trichlorpteridin mit Ammoniak in 2-[Thienyl-(2')]-4,6,7-triaminopteridin übergeführt; F. oberhalb 250⁰C; Ausbeute: 65% der Theorie.

Das als Ausgangsstoff benötigte 2-[Th'ienyl-(2')]-4,6,7-trichlorpteridin kann folgendermaßen hergestellt werden:

Nach dem in Chemical Abstracts, Bd. 47, Spalte 12396, angegebenen Verfahren werden 0,1 Mol Thienyl-(2)-amidin mit Cyanessigsäureäthylester zum 2-[Thienyl-(2')]-4-hydroxy-6-aminopyrimidin kondensiert. Diese Verbindung wird mit Phenyldiazoniumchlorid zum 5-Phenylazoderivat gekuppelt, das zu 2-[Thienyl-(2')]-4-hydroxy-5,6-diaminopyrimidin reduziert wird. 0,1 Mol des erhaltenen 2-[Thienyl-(2')]-4-hydroxy-5,6-diaminopyrimidins wird mit 0,11 Mol Oxalsäure in Wasser 2 Stunden unter Rückfluß gekocht. Man erhält 2-[Thienyl-(2')]-4,6,7-trihydroxypteridin, das durch Behandlung mit Phosphoroxychlorid und Phosphorpentachlorid in das entsprechende 4,6,7-Trichlorpteridin umgesetzt wird.

25 Beispiel 3

Beispiel 5

a) 0,30 g 2-Phenyl-4,6,7-trichlorpteridin in 30 ml flüssigem Ammoniak werden 6 Stunden auf 50⁰C in einem Bombenrohr erhitzt. Nach dem Aufarbeiten, wie im Beispiel 1 angegeben, erhält man 2-Phenyl-4-chlor-6,7-diaminopteridin; F. oberhalb 250⁰C; Ausbeute: 70% der Theorie.

b) 0,2 g der nach Stufe a) erhaltenen Verbindung werden mit 25 ml einer 25%igen Lösung von Isopropylamin in Isopropanol 5 Stunden auf 140°C in einem Bombenrohr erhitzt. Nach dem Versetzen mit Wasser fällt 2-Phenyl-4-isopropylamino-6,7-diaminopteridin aus; F. oberhalb 255°C; Ausbeute: 63% der Theorie.

Claims

Patentanspruch:

Verfahren zur Herstellung von 4,6,7-Triaminopteridirien der allgemeinen Formel

R₂RiN
R2R1N

NRiR₂

8,0 g (0,02 Mol) 2-Phenyl-4,6,7-trichlorpteridin werden mit 75 ml einer etwa 25%igen Lösung von Methylamin in wasserfreiem Alkohol 4 Stunden in einem Bombenrohr auf etwa 140⁰C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Wasser behandelt, wobei das 2-Phenyl-4,6,7-tris-(methylamino)-pteridin ausfällt, das durch Umkristallisation gereinigt wird; F. oberhalb 255°C; Ausbeute: 70% der Theorie.

Beispiel 4

a) 8,0 g 2-Phenyl-4,6,7-trichlorpteridin werden mit 50 ml einer 25%igen Lösung von Dimethylamin in wasserfreiem Methanol 5 Stunden unter Rückfluß gekocht. Das Reaktionsgemisch wird eingeengt und abgekühlt. 2-Phenyl-4-chlor-6,7-bis-(dimethylamino)-pteridin fällt aus; F. oberhalb 250⁰C; Ausbeute: 65% der Theorie.

b) 0,2 g der nach Stufe a) erhaltenen Verbindung werden mit 25 ml flüssigem Ammoniak 6 Stunden bei 140^C in einem Bombenrohr in analoger Weise, wie im Beispiel 1 angegeben, zur Umsetzung gebracht. Nach dem Aufarbeiten erhält man 2-Phenyl-4-amino'-6,7-bis-(dimethylamino)-pteridin; F. oberhalb 250⁰C; Ausbeute: 70% der Theorie.

30

40

in der R eine Phenyl- oder Thienylgruppe und Ri und R2 Wasserstoffatome oder niedrigmolekulare Alkylgruppen bedeuten, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise ein 4,6,7-Trichlorpteridin der allgemeinen Formel

gegebenenfalls stufenweise, mit Aminen der allgemeinen Formel

HN^ III

umsetzt. Ra

In Betracht gezogene Druckschriften:
Deutsche Auslegeschrift Nr. 1 088 969;
bekanntgemachte Unterlagen des belgischen Patents Nr. 596 467;

Chemische Berichte, 95 (1962), S. 1597 bis 1604; (1961), S. 118 bis 124.