DE102004052697A1

DE102004052697A1 - Pharmazeutische Zubereitungen zur Behandlung von Folgen des Alkoholmissbrauchs, Hepatitis, Pankreatitis, Alzheimererkrankung, Morbus Parkinson, Diabetes, toxischen Nierenerkrankungen, Reperfusionsschäden, der Arteriosklerose sowie als Antidote gegen Umweltgifte und Medikamentenintoxikation

Info

Publication number: DE102004052697A1
Application number: DE102004052697A
Authority: DE
Inventors: Thomas Haehner; Dieter Mueller-Enoch
Original assignee: Mueller-Enoch Dieter Prof Dr
Current assignee: Mueller-Enoch Dieter Prof Dr
Priority date: 2004-10-29
Filing date: 2004-10-29
Publication date: 2006-05-04
Also published as: DE112005003310A5; EP1814533A2; US20090036400A1; KR20070085496A; NO20072712L; AU2005299148A1; WO2006045298A3; WO2006045298A2; RU2007119712A

Abstract

Es wird eine pharmazeutische Zubereitung zur Vorbeugung, Behandlung und Linderung von Folgen des Alkoholmissbrauchs, der viralen Hepatitis, der Steato-Hepatitis, der akuten und chronischen Pankreatitis, der Alzheimererkrankung, Morbus Parkinson, toxischen Nierenerkrankungen, akutem Nierenversagen, toxischen Nebenwirkungen bei der Verabreichung von Chemotherapeutika, Diabetes mellitus, Morbus Wilson, Siderosen und/oder von Ischämie-Reperfusionsschäden, der Arteriosklerose sowie als Antidote gegen Umweltgifte und Medikamentenintoxikation beschrieben. Die Zubereitung enthält als Wirkstoff mindestens eine Verbindung der allgemeinen Formel DOLLAR A R - A - X DOLLAR A - R einen C¶5¶-C¶27¶-Alkylrest darstellt, der geradkettig oder verzweigt ist, der Doppel- und/oder Dreifachbindungen aufweisen und der substituiert sein kann und DOLLAR A - A - eine -CO-, -COO-, -PO¶x¶·2-·, -NH¶y¶-, -O- und/oder -S- ist und x 2, 3 oder 4 und y 1 oder 2 bedeutet und DOLLAR A - X ein Wasserstoffatom, ein Polyol, eine Aminosäure, ein Alkylamin, ein C¶1¶- bis C¶3¶-Alkylamin, ein C¶1¶- bis C¶3¶-Hydroxyalkyl und/oder eine C¶1¶- bis C¶3¶-Carbonsäure ist.

Description

Die Erfindung betrifft die Verwendung von lipophilen Alkylgruppen auf sowie hydrophile Reste aufweisenden Substanzen zur Herstellung von pharmazeutischen Zubereitungen.

Übermäßiger dauerhafter Alkoholkonsum führt zu einer Lebererkrankung, der so genannten Fettleber, die sich zu einer Leberentzündung bzw. Hepatitis und im Spätstadium zu einer Leberzirrhose entwickeln kann. Dabei hängt das Risiko und das Ausmaß des jeweiligen Leberschadens direkt von der Menge und der Dauer des Alkoholkonsums ab, wobei das Risiko individuell unterschiedlich ist. Eine alkoholbedingte Entzündung der Leber (Alkoholhepatitis) stellt eine ggf. lebensbedrohliche Erkrankung dar, die mit Fieber, Gelbsucht sowie einer Erhöhung der weißen Blutkörperchen einhergehen kann. Derartige alkoholbedingte Leberentzündungen sind durch völlige Alkoholabstinenz ausheilbar, Vernarbungen bei der Leberzirrhose ausgenommen. Da jedoch Alkoholmissbrauch häufig von einem starken Suchtverhalten geprägt wird, ist in der Praxis eine vollständige Alkoholabstinenz nicht ohne weiteres erreichbar. Neben dieser alkoholinduzierten so genannten Fettleberhepatitis oder alkoholischen Steato-Hepatitis (ASH) entstehen auch Hepatiden bei Personen, welche keinen Alkoholmissbrauch betreiben oder überhaupt keinen Alkohol zu sich nehmen. Solche Hepatiden werden beispielsweise durch Umweltgifte, beispielsweise bei Arbeiten in Lackierwerken und/oder auch durch Medikamente induziert.

Die Alzheimersche Erkrankung ist eine fortschreitende Demenzerkrankung, welche letztlich zum völligen Verlust des Gedächtnisses und der Persönlichkeit führt. Hervorgerufen wird sie durch Proteinablagerungen in Nervenzellen, den Plaques, welche aus β-Amyloid- bzw. so genannten τ-Proteinen gebildet werden. Die eigentliche Ursache ist bislang unbekannt, wobei sowohl metabo lische Störungen, Genmutationen, sowie so genannte Slow-Virus-Infektionen bzw. Prionen diskutiert werden.

Bei der Alzheimerschen Erkrankung ist bekannt, dass im Gehirn von transgenen Mäusen ein Auslöser der Plaquebildung eine Lipidoxidation ist, die zu einem G-Amyloid-Vorläuferprotein führt, welches die bekannten Plaques ausbildet. Eine solche Lipidoxidation wird durch reaktive Sauerstoffspezies (ROS) hervorgerufen.

Bei der Parkinsonschen Erkrankung handelt es sich um eine Degeneration dopaminerger Neurone in der Substantia Nigra des Gehirns. Dabei handelt es sich um die häufigste neurologische Erkrankung im höheren Lebensalter. Beginnende Anzeichen sind hier insbesonders zitternde Bewegungen (Tremor), eine depressive Grundstimmung, Apathie sowie verlangsamtes Denken.

Es ist bekannt, dass Oxidationsprozesse im Stoffwechsel mit Hilfe von Cytochromen erfolgen. Bei den Cytochromen handelt es sich um eine Vielzahl verschiedener Enzyme, deren aktives Zentrum eine Hämstruktur aufweist. Sie katalysieren bei einer Vielzahl von Oxidationsreaktionen den Transfer von Elektronen auf einen Akzeptor, der beispielsweise beim Cytochrom c molekularer Sauerstoff ist, wodurch ein radikalisches Superoxidanion (O₂•^–) gebildet wird. Das Cytochrom c selbst kommt in praktisch allen Organismen vor, die eine mitochondriale Atmungskette aufweisen, d. h. in sämtlichen Pflanzen und Tieren sowie in eukariotischen Mikroorganismen. Interessant hierbei ist, dass sich Cytochrom c während der Evolution seit seiner Entstehung vor über 1,5 Milliarden Jahren kaum verändert hat. Neben dem Cytochrom c existieren eine Reihe weiterer Cytochrome, die sich sehr stark vom Cytochrom c unterscheiden und die völlig verschiedene Oxidierungs- bzw. Hydroxilierungsreaktionen im Stoffwechsel durchführen. Eine wichtige Gruppe hierbei ist das Cytochrom-P450, wel ches wiederum in einer Vielzahl völlig verschiedener Formen vorliegt, wie 1A1, 2B1, 2C9, 2J2, 2E1, 3A1 etc.

So unterscheiden sich beispielsweise das Cytochrom P 450 2B1 der Ratte und humanes Cytochrom P 450 2E1 in ihrer Aminosäurensequenz zu circa 60%, d.h. dass sich sowohl die Strukturen der aktiven und katalytischen Zentren sowie die Größe und Form der Zugangskanäle für das Substrat ganz erheblich unterscheiden. Dies führt letztlich auch dazu, dass beide Enzyme völlig verschiedene Substratklassen metabolisieren, d. h. die Isoform 2E1 reagiert mit wesentlich kleineren Molekülen, beispielsweise Ethanol, Aceton oder auch p-Nitrophenol. Dies ist für sämtliche Isoformen der P 450-Hämproteine geradezu charakteristisch, d. h. es kann deshalb von einer Isoform nicht auf die andere geschlossen werden. Diese mit der Isoform 2B1 der Ratte gewonnenen Erkenntnisse sind somit nicht auf die 2E1 Isoform des Menschen übertragbar.

Es ist bekannt, dass sowohl bei Alkoholkonsum als auch bei der nichtalkoholischen Fettleberhepatitis die Synthese des Cytochroms P450-2E1 induziert wird. Die Funktion und Wirkungsweise dieser von anderen Cytochromen stark verschiedenen Isoform ist beispielsweise von M. H. Wang et al in Archives of Biochemistry and Biophysics, (1995) Vol. 317, Seite 299 bis 304 beschrieben. Danach weist das Enzym eine ca. 15 A lange Bindungstasche auf, an deren Ende das reaktive Zentrum mit einem ein zentrales Eisenatom aufweisenden Hämring sitzt.

Müller-Enoch et al. beschreiben in Z. Naturforsch. (2001) 56c, Seite 1082-1090 die Inhibierung von Cytochrom-P450 2B1 der Ratte mittels Lysophosphatidylcholinen, Lysophosphatidylinositol sowie Arachidon- und Oleinsäuren bzw. mittels Monoacylglycerolen, Monooleylglycerolen, und Monopalmitoylglycerolen.

Des weitern beschreiben T. Haehner, D. Müller-Enoch et al in Z. Naturforschung (2004) 59c, Seite 599-605 den Einfluss von einkettigen Lipidmolekülen auf die Aktivität der Isoform Cytochrom P 450 2B1 der Ratte.

Die Erfindung hat zum Ziel, die Entstehung und die Folgen von alkoholischen und nichtalkoholischen Lebererkrankungen, von viraler Hepatitis von Diabetes mellitus Typ 1 und Typ 2, Pankreatitis, von akutem Nierenversagen, von toxischen Nierenerkrankungen, Nebenwirkungen beim Einsatz von Chemotherapeutika, der Alzheimerschen sowie der Parkinsonschen Erkrankung, Morbus Wilson, Siderosen sowie der Arteriosklerose zu vermeiden und/oder deren Verlauf abzumildern und/oder ganz zu stoppen. Die Erfindung hat auch zum Ziel, Organschäden bei ischämischen Zuständen, z. B. bei der Reperfusion zu mildern und/oder zu vermeiden. Schließlich hat die Erfindung auch zum Ziel, die Organotoxizität von Umweltgiften und Arzneistoffen zu behandeln.

Dieses Ziel wird durch die in den Ansprüchen definierten Merkmale erreicht.

Es wurde nämlich überraschenderweise gefunden, dass am Cytochrom P 450, insbesonders an den Isoformen der Gruppe 2, speziell 2E1, sowie 2C9, die Bildung von reaktiven Sauerstoffspezies (ROS), insbesonders Sauerstoffradikale wie das Superoxidanion sowie das Hydroxylradikal (•OH), die nicht in einer direkten Redoxreaktion verbraucht werden, durch Verabreichung einer Substanz verhindern lässt, die eine hydrophobe Alkylkette sowie ein polares hydrophiles Ende aufweist. Solche Substanzen weisen einen mindestens sechs Kohlenstoffatome langen hydrophoben und einen hydrophilen Bereich auf. Dies können sowohl synthetische einkettige Lipide wie beispielsweise Alkylphosphocholine, Alkylcumarine oder auch Alkylsulfonsäuren sein als auch natürlich einkettige Lipide wie entsprechende Fettsäuren, Fettsäureester oder Sphingosin oder Lysophosphatidylinositol. Dies ist umso überraschender als bekannt ist, dass diese Isoform in ihrer natürlichen Funktion für die Oxidation von kleinen Molekülen, wie Ethanol und Aceton verantwortlich ist.

Die erfindungsgemäß verwendeten Substanzen zur Herstellung eines Pharmazeutikums weisen insbesonders die allgemeine Formel R-A-X auf. Dabei stellt R einen Alkylrest dar, der vorzugsweise 7 bis 27 C-Atome aufweist. Besonders bevorzugt sind Alkylreste mit einer Länge von mindestens 8 C-Atomen, wobei eine Länge von mindestens 10, insbesonders mindestens 11 bzw. 12 C-Atomen ganz besonders bevorzugt ist. Des weiteren sind Alkylreste mit einer maximalen Anzahl von 20 C-Atomen bevorzugt, wobei eine Größe von maximal 18, insbesonders maximal 17 bzw. 16 C-Atomen ganz besonders bevorzugt ist. Der Alkylrest kann ggf. auch sowohl geradkettig als auch verzweigt sein und kann ein oder mehrere Kohlenstoff-Doppel- und/oder auch Dreifachbindungen enthalten. Vorzugsweise weist der Alkylrest jedoch nicht mehr als 7, insbesonders nicht mehr als 5 Doppelbindungen, auf und enthält vorzugsweise nicht mehr als 3, insbesonders 2 Dreifachbindungen. Der Alkylrest kann ggf. mit weiteren Gruppen substituiert sein, solange diese das hydrophobe Verhalten des Restes R nicht beeinflussen. Bevorzugte Substituenten sind C₁-C₆-Alkylreste, vorzugsweise C₁- bis C₄-, die selbst zwar ebenfalls verzweigt sein können, jedoch vorzugsweise geradkettig sind.

A stellt eine Carbonyl-, Carbonsäure-, Phosphorsäure-, Amino-, Äther- oder Mercaptoäthergruppe dar, mit der jeweils allgemeinen Formel -CO- , -COO- , PO_x ^2–- , NH_Y- und/oder -S-.

X ist ein Wasserstoffatom, ein polycyclischer, aromatischer oder aliphatischer wasserlöslicher Kohlenwasserstoff, der mindestens ein Heteroatom enthält und, der ggf. unter Ringschluss mit dem Alkylrest R verbunden ist und der zur Verbesserung der Wasserlöslichkeit Sauerstoff-, Stickstoff- und/oder Schwefelheteroato me enthält und zwar im Ring und/oder als bzw. im Substituent. Des weiteren steht x für ein Polyol, eine Aminosäure, einen Zucker, ein Alkylamin, ein C₁- bis C₃- Alkylamin, ein C₁- bis C₃-Hydroxyalkyl und/oder eine C₁- bis C₃-Carbonsäure. Als Polyol eignen sich sämtliche mehrfache Hydroxygruppen aufweisende Alkylreste, wie beispielsweise Glycol, Glycerin und zyklische Alkohole, wie beispielsweise Inositol, Zucker sowie Oligosaccharide und Zuckerreste, die sowohl ein oder mehrere C₅- oder auch C₆-Zucker sein können.

Erfindungsgemäß sind auch sämtliche Substanzen verwendbar welche Detergenzeigenschaften aufweisen und die einen Alkyl- bzw. Alkylenrest enthalten. Die Substanzen können sowohl nichtionische, ionische als auch zwitterionische Detergenzien sein und weisen insbesonders eine kritische Micellenkonzentration (CMC) zwischen 0,5·10^–2 M und 0,5·10^–6 M auf.

Bevorzugte erfindungsgemäße Substanzen umfassen auch Fettsäuren, Phosphorester, insbesonders Phosphordiester, Fettsäureester, insbesonders mit Alkylaminen und Aminosäuren, Sphingosin und Sphingosinderivate sowie cyclische Alkyle und Alkylenderivate der allgemeinen Formel CH₃-R-X.

Erfindungsgemäß verwendbare Fettsäuren der allgemeinen Formel H₃C-R-COOH können sowohl ungesättigt als auch gesättigte Fettsäuren enthalten, wobei R eine beliebige Kohlenwasserstoffkette mit bis zu 26 C-Atomen darstellt. Bevorzugte Ketten R sind -(CH₂)_{5 bis 7}CH=CH(CH₂)₇-, -(CH₂)₇CH=CH(CH₂)₁₃-, -(CH₂)₃(CH₂CH=CH)_{2 bis 4}(CH₂)_{7 bis 3}-, -(CH₂CH=CH)_{3 bis 6}(CH₂)_{7 bis 2}-

Erfindungsgemäß verwendbare Phosphodiester weisen die allgemeine Formel H₃C-R-PO₄ ^–-X auf, wobei R ein Alkylrest mit 4 bis 26 Kohlenstoffatomen aufweist, der vorzugsweise geradkettig ist. Besonders bevorzugte Reste R sind -(CH₂)_{4 bis 24}-, -(CH₂)_{5 bis 7}CH=CH(CH₂)₇-, -(CH₂)₃(CH₂CH=CH)_{2 bis 4}(CH₂)_{7 bis 3}- -(CH₂CH=CH)_{3 bis 6}(CH₂)_{7 bis 2}-
wobei X ein die Wasserlöslichkeit vermittelnder hydrophiler Rest bzw. Gruppe ist, die insbesonders Heteroatome wie N, S, O aufweist und insbesonders Amino-, Ammonium- sowie Hydroxygruppen enthält. Gegebenenfalls kann X auch Wasserstoff darstellen, so dass ein Phosphormonoester entsteht.

Bevorzugte Reste X sind Aminosäuren, insbesonders α,β,γ und/oder ω Aminosäuren, sowie

Bevorzugte Fettsäure-Aminosäureester sind insbesonders Carnitinester der allgemeinen Formel

wobei R
-(CH₂)₆- bis -(CH₂)₂₂-, -(CH₂)_{5 bis 7}CH=CH(CH₂)₇-, -(CH₂)₃(CH₂CH=CH)_{2 bis 4}(CH₂)_{7 bis 3}-, -(CH₂CH=CH)_{3 bis 6}(CH₂)_{7 bis 2}-

Weitere bevorzugt erfindungsgemäß verwendbare Substanzen umfassen Sphingosine und Sphingosinderivate der allgemeinen Formel R-Pi-Y, wobei R ein Sphingosyl-Rest der allgemeinen Formel

darstellt und Pi ein Phosphatrest ist. Als Sphingosyl-Derivate sind alle beliebigen strukurell analogen Veränderungen der Grundstruktur zu verstehen, wie beispielsweise eine Verkürzung oder Verlängerung der Kohlenwasserstoffkette, die Hinzufügung zusätzlicher Doppelbindungen, Hydroxy- und/oder Aminogruppen bzw. der Austausch dieser Gruppen durch H-Reste. Bevorzugte Reste Y-Gruppen umfassen Wasserstoff, Cholin, Zuckerreste wie Glukose, Galaktose sowie Oligosaccharide und cyclische Polyalkohole wie Inositol, insbesondere myo-Inositol.

Des weiteren sind in einer bevorzugten erfindungsgemäßen Ausführungsform auch solche Substanzen verwendbar, deren hydrophile Gruppe aus einem wasserlöslichen, cyclischen oder polycyclischen aromatischen und/oder aliphatischen Kohlenwasserstoffrest besteht, der zur Erhöhung der Löslichkeit der Heteroatome, insbesonders O, N und oder S enthält und zwar im Ring und/oder in einem Substituent davon oder als Substituent selbst.

Zu den erfindungsgemäß verwendbaren Substanzen zählen auch zyklische Alkyl- und Alkylenderivate der allgemeinen Formel H₃C-(R)-X wobei R ein C₄ bis C₂₅ Alkylrest und insbesonders
-(CH₂)_{4
bis 24}- -(CH₂)_{5
bis 7}CH=CH(CH₂)₇- -(CH₂)₃(CH₂CH=CH)_{2 bis 4}(CH₂)_{7 bis 3}-, -(CH₂CH=CH)_{3 bis 6}CH_{2 7 bis 2}- ist,
und X ein wasserlöslicher cyclischer Kohlenwasserstoffrest ist, der aliphatisch oder aromatisch sein kann und der Heteroatome, insbesonders O, N und/oder S aufweist. Dabei können die cyclischen Kohlenwasserstoffe mit dem Rest R unter Ringschluss verbunden sein, solange sich deren hydrophobe Eigenschaften dabei nicht ändern. Besonders bevorzugt ist es dabei, mittels derartiger cyclischer Kohlenwasserstoffe die Ausbildung von micellaren Strukturen zu unterdrücken. Bevorzugte Verbindungen sind Phosphocholine, die neben ihrer Phosphocholingruppe keine Ester, Hydroxy- oder Amino- bzw. Amidogruppen bzw. Derivate davon aufweisen. In einer besonders bevorzugten Ausführungsform ist X ein Phosphocholinrest und insbesonders ein -PO₄ ^–-R' -N⁺R₃'', wobei R' ein C₁-C₆ Alkylrest, insbesonders C₁-C₃ Rest und R'' jeweils unabhängig ein Wasserstoff, Methyl-, Ethyl- und/oder Propylrest sein kann.

Eine derartige, ganz besonders bevorzugte Substanz ist Hexadecylphosphocholin. Schließlich ist auch noch 1-O-octadecyl-2-O-methyl-sn-glycerlo-3-phosphocholin ganz besonders bevorzugt. Derartige Substanzen sind beispielsweise bei Matzke et al. im European Journal of Cell Biology 80, (2001) 1-10 beschrieben.

Es wurde nun überraschenderweise gefunden, dass sich mit diesen Substanzen die Folgen von Alkoholmissbrauch vermeiden und/oder vermindern lassen. Dies sind insbesonders Leberschäden oder auch andere alkoholbedingte, entzündliche Prozesse. Neben den rein alkoholisch bedingten Leberschäden können auch ernährungsbedingte und endokrine Faktoren, wie z. B. Adipositas, aber auch Diabetes Mellitus und Hyperlipidämie ebenfalls alkoholunabhängig eine schwere Leberschädigung verursachen, die über eine Fettleberhepatitis (nicht-alkoholische Steato-Hepatitis = NASH) bis hin zur Leberzirrhose reichen kann. Derartige alkoholische und nicht-alkoholische Fettlebererkrankungen gehen häufig mit einer viralen Infektion der Leber einher. Dabei kann es zu einem sehr schnellen Fortschreiten der Erkrankung kommen. Es hat sich gezeigt, dass dies z. B. auch auf eine synergistische Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) und den damit verbundenen Zellschäden zurückzuführen ist. Alle vorgenannten Erkrankungen bzw. deren Ursachen oder Folgen sind mit den erfinderischen Mitteln behandelbar.

Darüber hinaus führt Alkoholmissbrauch auch zur Schädigung weiterer Organe, wie beispielsweise der Bauchspeicheldrüse, dem Herz oder dem Nervensystem.

Es wurde auch gefunden, dass diese Substanzen sich auch besonders gut zur Behandlung von Entzündungen der Bauchspeicheldrüse eignen. Derartige Entzündungen bzw. Pankreatitiden können neben Alkoholmissbrauch auch durch toxische Substanzen hervorgerufen werden. Hierzu zählen insbesonders Umweltgifte, wie Berufschemikalien oder auch Medikamente. Auch virale Infektionen oder metabolisch-endokrine Faktoren können derartige Pankreasentzündungen verursachen, wobei in allen Fällen reaktive Sauerstoffspezies an der Krankheitsentstehung und am Fortschreiten der Erkrankung beteiligt sind.

Auch bei der Behandlung von Diabetes mellitus, sowohl bei Diabetes mellitus Typ 2 als auch Typ 1, hat sich das erfindungsgemäße Pharmazeutikum als geeignet erwiesen. Es hat sich nämlich gezeigt, dass β-Inselzellen gegenüber oxidativen Prozessen besonders empfindlich sind und dass diese bei erhöhtem oxidativen Stress rapide abnehmen. Dieser oxidative Stress lässt sich mit dem erfindungsgemäßen Pharmazeutikum vermeiden, zumindestens jedoch massiv verringern.

Auch bei der Behandlung der Alzheimer-Erkrankung, sowie beim Morbus Parkinson hat sich das erfindungsgemäße Pharmazeutikum als wirksam erwiesen. Dabei hat es sich beispielsweise gezeigt, dass sich mit den erfindungsgemäßen Substanzen die Konzentration von Dopamin durch verminderten Abbau erhöhen lässt.

Auch toxische Nierenerkrankungen, sowie andere Erkrankungen, wie sie z. B. durch Nebenwirkungen bei der Verabreichung von Chemotherapeutika, insbesondere Zellgiften, wie Metall-Komplexe wie Cisplatin, Carboplatin, Titanocendichlorid oder Goldkomplexe hervorgerufen werden, sind mit dem erfindungsgemäßen Arzneimittel zu behandeln. Hierbei hat es sich insbesonders gezeigt, dass sich die Organotoxizität von Metall-Komplexen oder auch anderen toxischen Mitteln, wie halogenierten Kohlenwasserstoffen und zwar sowohl mono- wie auch polihalogenierte Kohlenwasserstoffe darunter auch Dampfnarkotika vom Halothan-Typ, sowie entsprechende aromatische Kohlenwasserstoffe, Nitrosamine, Acrylamid oder Arzneimittel, wie Paracetamol, Methotrexat, Isoniazid oder Aminoglykorid-Antibiotika oder Röntgen-Kontrastmittel verhindern lässt. Das erfindungsgemäße Arzneimittel ist somit auch zur Behandlung der Organotoxizität von Umweltgiften, insbesonders als Antidot hierfür an Organen, wie Leber, Niere, zentrales Nervensystem, Pankreas etc. geeignet.

Ebenso geeignet ist die erfindungsgemäße pharmazeutische Zubereitung zur Behandlung des akuten Nierenversagens, insbesonders solchen Nierenversagen, die durch medikamentöse Intoxikation, hämolytische Erkrankungen, das hämolytisch-urämische Syndrom (Gasser Syndrom), die Rhabdomyolyse (Untergang der quergestreiften Skelettmuskulatur), durch zirkulatorisch-ischämische Prozesse und/oder eine virale Infektion hervorgerufen wurde. Darüber hinaus hat sie sich zur Behandlung von Schäden erwiesen, die durch Quetschung der quergestreiften Muskulatur (Crush-Syndrom) und/oder deren Untergang bei Verabreichung von Medikamenten (wie z. B. CSE Inhibitoren, z. B. Lipobay) erwiesen.

Ganz besonders hat es sich als geeignet erwiesen, Schäden zu vermeiden, die durch Reperfusion von biologischen Geweben entstehen, wie beispielsweise nach Organinfarkten, insbesonders dem Herzen, sowie dem Hirn (Herzinfarkt, Schlaganfall). So konnte beispielsweise in Tierexperimenten gezeigt werden, dass derartige Reperfusionsschäden zu 60-80 % der Gewebszerstörung beitragen bzw. dass die Ausbreitung des Gewebstodes um diesen Faktor verringert werden kann. Das erfindungsgemäße Mittel ist somit auch besonders geeignet zur Vermeidung von Reperfusionsschäden bei transplantierten Organen. Derartige Organe werden bis zu ihrer Transplantation in den Körper eines neuen Empfängers in einer gekühlten Nährlösung gehalten. Nach der Transplantation werden diese dann nach Anschluss an das Kreislaufsystem des Empfängers wieder mit Körperflüssigkeiten durchströmt, was zu Reperfusionsschäden führt. Durch eine Verabreichung des erfindungsgemäßen Mittels vor und während der Lagerung, sowie kurz vor dem Implantieren in den Empfängerorganismus, kann auch dieses wichtige Transplantationsproblem gelöst werden.

Die erfindungsgemäßen Substanzen haben sich insbesonders als Inhibitoren der humanen Isoformen der Genfamilie 2 des Cytochroms P450 und zwar insbesonders der Isoformen 2E1 und 2C9 und durch diese verursachten Erkrankungen erwiesen.

Beispiel 1:
Enzym-Präparationen:
8 männlichenSprague-Dawley Ratten wurden wie bei M. H. Wang et al. in Arch. Biochem. Biophys. 317: 299-304, 1995 beschrieben, 7 Tage lang 5% Aceton (v-v) im Trinkwasser verabreicht, um eine Cytochrom P450 2E1-Induktion zu erzielen. Die Präparation der mikrosomalen Fraktion erfolgt in Anlehnung an die von Wang P., Mason PS, Günderich FG, in Arch. Biochem. Biophys. 1999: 206 1980 publizierte Methode. Im Vergleich zu Kontrollratten konnte dabei eine Steigerung der p-Nitrophenol-Hydroxylaseaktivität um den Faktor 5 ermittelt werden.
Enzymaktivitätsbestimmungen:
p-Nitrophenol gilt als spezifisches Substrat für Cytochrom P450 2E1. Die Bestimmung der p-Nitrophenol-Hydroxylaseaktivität wurde in Anlehnung an die Arbeit von J.W. Allison und B.L. Robinson, Anal. Biochem. 219, 49-52, 1994 durchgeführt.
Dabei wurden folgende Hemmkonstanten ermittelt:

– Dodecylphosphorylcholin K_i = 0,45 μm

– Hexadecylphosphocholin (Miltefosin) K_i = 0,60 μm

– rac-1-O-Phosphocholin-2-amino-octadecan-Hydrochlorid K_i = 2,25 μm
In allen Fällen ließ sich eine kompetitive Hemmung feststellen.
Detektion von Sauerstoffradikalen:
Hierzu wurde eine mikrosomale Fraktion aus einer humanen Leber gewonnen wie von M.H. Wang et al. in der zuvor erwähnten Arbeit beschrieben ist. Die Cytochrom P450 vermittelte Sauerstoffproduktion wurde fluorimetrisch mit Hilfe der Dichlorofluorescein-Methode bestimmt (BASF B.A. et al., Journal of Immunology 130 (4) S. 1910, 1983). Die Detektion erfolgt in Abhängigkeit verschiedener spezifischer Substrate der Isoform der Genfamilie 2, z. B. ChIP 2C9: Diclofenac, ChIP 2C1: p-Nitrophenol) und in Abhängigkeit verschiedener inhibitorischer Leitsubstanzen (z. B. Alkylphosphocholine, Sphingolipide, Lysophospholipide). In allen Fällen trat eine konzentrationsabhängige Abnahme der ROS-vermittelten Dichlorofluorescein-Fluoreszenz auf (komplette Unterdrückung im Bereich von ca. 5-15 μm).

Claims

Verwendung von Verbindungen der allgemeinen Formel R-A-X zur Herstellung einer pharmazeutischen Zubereitung zur Vorbeugung, Behandlung und Linderung von Folgen des Alkoholmissbrauchs, der viralen Hepatitis, der Steato-Hepatitis, der akuten und chronischen Pankreatitis, der Alzheimererkrankung, Morbus Parkinson, toxischen Nierenerkrankungen, akutem Nierenversagens, toxischen Nebenwirkungen bei der Verabreichung von Chemotherapeutika, Diabetes mellitus, Morbus Wilson, Siderosen und/oder von Ischämie-Reperfusionsschäden, der Arteriosklerose sowie als Antidote gegen Umweltgifte und Medikamentenintoxikation dadurch ge kennzeichnet, dass in der allgemeinen Formel R-A-X – R einen C₅-C₂₇-Alkylrest darstellt, der geradkettig oder verzweigt ist, der Doppel- und/oder Dreifachbindungen aufweisen und der substituiert sein kann und – A- eine -CO-, -COO-, -PO_x ^2–-, -NH_y-, -O- und/oder -S- ist und x 2, 3 oder 4 und y 1 oder 2 bedeutet und – X ein Wasserstoffatom, ein Polyol, eine Aminosäure, ein Alkylamin, ein C₁- bis C₃- Alkylamin, ein C₁- bis C₃-Hydroxyalkyl und/oder eine C₁- bis C₃-Carbonsäure ist.
Verwendung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass X ein Cholin, myo-Inositolyl-, Glucosyl-, Galactosylrest oder ein Oligosaccharid ist.
Verwendung nach einem der vorhergehenden Ansprüche dadurch gekennzeichnet, dass X eine α-, β-, γ- und/oder Ω-Aminosäure ist.
Verwendung nach einem der vorhergehenden Ansprüche dadurch gekennzeichnet, dass X eine α-, β- oder γ-Hydroxyaminosäure ist.
Verwendung nach einem der vorhergehenden Ansprüche dadurch gekennzeichnet, dass der Inhibitor ein nichtionisches, io nisches oder zwitterionisches Detergens mit einer kritischen Micellenkonzentration von 0,5·10^–2 M bis 0,5·10^–6 M ist.
Pharmazeutische Zubereitung enthaltend mindestens eine Substanz der in der allgemeinen Formel R-A-X – R einen C₅-C₂₇-Alkylrest darstellt, der geradkettig oder verzweigt ist, der Doppel- und/oder Dreifachbindungen aufweisen und der substituiert sein kann und – A eine -CO-, -COO-, -PO_x ^2–-, -NH_y-, -O- und/oder -S- ist und x 2, 3 oder 4 und y 1 oder 2 bedeutet und – X ein Wasserstoffatom, ein Polyol, eine Aminosäure, ein Alkylamin, ein C₁- bis C₃- Alkylamin, ein C₁- bis C₃-Hydroxyalkyl und/oder eine C₁- bis C₃-Carbonsäure ist ggf. zusammen mit anderen pharmazeutischen Exzipienten.