KR20070085496A - 알코올 남용, 간염, 췌장염의 예후의 치료 제제 - Google Patents

Abstract

알코올 남용, 바이러스성 간염, 지방 간염, 급성 및 만성 췌장염, 알츠하이머병, 파킨슨병, 독성 신장병, 급성 신부전증, 화학요법제의 투여 시 독성 부작용, 당뇨병, 윌슨병, 철침착증 및/또는 허혈성 재관류 손상, 동맥경화증의 예후의 예방, 치료 및 완화를 위한 및 약물 중독 및 환경 독소에 대한 해독제로서의 제제가 설명된다. 제제는 유효성분으로서 일반식이 R-A-X인 적어도 하나의 화합물을 포함하는데, 여기에서 -R은 치환될 수 있는, 이중결합 또는 삼중결합을 가지며, 곧은 사슬 또는 곁가지 사슬인 C₅-C₂₇-알킬 잔기이며, -A-는 -CO-, -COO-, -PO_x ^2--, -NH_y-, -O- 및/또는 -S-이고 ,여기에서 x는 2, 3 또는 4이고 y는 1 또는 2이며, -X는 수소 원자, 폴리올, 아미노산, 알킬아민, C₁- 내지 C₃-알킬아민, C₁- 내지 C₃-히드록시알킬 및/또는 C₁- 내지 C₃-카르복실산이다.

Description

알코올 남용, 간염, 췌장염의 예후의 치료 제제{TREATMENT OF THE CONSEQUENCES OF ALCOHOL ABUSE, HEPATITIS, PANCREATITIS}

본 발명은 제제의 제조를 위하여 친지질성 알킬기 및 친수성 잔기(Rest; radical)를 포함하는 물질의 사용에 관한 것이다.

과도한 지속적 알코올 남용은 소위 지방간이라 불리는 간질환을 발생시키는데, 이러한 간질환은 간의 염증 또는 간염 및 후기에는 간경화로 발전될 수 있다. 각각의 간 손상의 위험 및 정도는 알코올 섭취의 기간 및 양에 직접적인 연관성이 있고 위험은 개인에 따라 다르게 나타난다. 알코올에 의한 간의 염증(알코올 간염)은 경우에 따라서 열, 황달 및 백혈구의 증가가 동반될 수 있는 생명을 위협하는 질병이다. 이러한 유형의 알코올에 의한 간염은 완전한 금주를 통해 치유될 수 있지만 간경화에서 반흔형성은 예외이다. 대개 알코올 남용은 강한 중독성 행동과 관련되어 있으므로, 실제로 완전한 금주는 쉽게 달성할 수 없다. 이러한 소위 알코올로 인한 지방간염 또는 알코올성 지방 간염(alcoholic steato-hepatitis; ASH) 외에도 알코올을 남용하지 않은 사람 또는 전혀 알코올을 음용하지 않는 사람에게도 감염이 발생한다. 예를 들어 이러한 간염은 예를 들어 도색 공장에서의 작업 시 환경 독소 및/또는 약품에 의해 발생할 수도 있다.

알츠하이머병은 진행성 치매병의 일종으로 마지막에는 기억력 및 인격의 완전한 상실로 이어진다. 이 병은 신경세포 내에 단백질 침착물인 노인 성반으로 인해 발생하는데, 이는 β 아밀로이드 단백질 또는 소위 τ 단백질로 인해 형성된다. 근본적 원인은 현재까지 밝혀지지 않았지만, 대사장애, 유전자변이 및 소위 슬로우 바이러스 감염(slow-virus infections) 또는 프리온(prions)이 그 원인으로 거론되고 있다.

알츠하이머병에서는, 유전자 이전 마우스의 뇌에서 노인성반 형성의 유발인자가 지질 산화라는 것이 알려져 있는데, 이는 알려진 노인성반을 형성하는 G 아밀로이드 전구 단백질을 발생시킨다. 이러한 지질 산화는 반응성 산소종(reactive oxygen species, ROS)에 의해 유발된다.

파킨슨병은 뇌의 흑색질에서 도파민 신경세포가 퇴화되는 질병이다. 이 질병은 노령 환자에게서 흔히 나타나는 신경질환이다. 초기 증상은 특히 떨림 증상(tremors), 우울증, 무감동 및 느린 사고이다.

시토크롬을 통한 대사에서 산화 과정이 이루어지는 것이 알려져 있다. 시토크롬은 다양한 효소들의 집합체로서, 그 활성중심은 혈액 구조를 갖는다. 시토크롬은 복수의 산화 반응에서 수용체로의 전자 운반을 촉진하는데, 이러한 수용체는 예를 들어 시토크롬 c에서 분자 산소이며, 이로 인해 라디칼성 초과산화물 음이온(O₂ㆍ^-)이 형성된다. 시토크롬 c 자체는 실제 미토콘드리아 호흡사슬을 갖는 모든 유기체, 즉 모든 식물 및 동물 및 진핵미생물에 존재한다. 흥미로운 것은 시토크롬 c가 15억년 전 그 발생 이후 진화 과정에서 거의 변하지 않았다는 것이다. 시토크롬 c 외에도 다른 일련의 시토크롬이 존재하는데, 이러한 시토크롬은 시토크롬 c와 현저히 구별되며 대사에서 완전히 다른 산화반응 또는 히드록실화 반응을 수행한다. 중요한 그룹으로는 시토크롬 P450을 들 수 있는데, 이는 다시 복수의 완전히 다른 형태 즉 1A1, 2B1, 2C9, 2J2, 2E1, 3A1 등으로 구분된다.

예를 들어 쥐의 시토크롬 P 450 2B1과 인간의 시토크롬 P 450 2E1은 그 아미노산 서열에서 약 60%의 차이를 나타낸다. 즉 활성 중심과 촉매 중심의 구조 뿐 아니라 기질의 접근 채널의 크기 및 형태에서도 상당한 차이를 나타낸다. 이는 최종적으로, 이 두 가지 효소가 완전히 다른 기질 계급을 대사시키는 결과를 초래한다. 즉 아이소형 2E1은 예를 들어 에탄올, 아세톤 또는 p-니트로페놀과 같은 주로 작은 분자와 반응한다. 이는 P 450 헴단백질의 모든 아이소형에 대해 특징적이다. 즉 아이소형이라는 이유에서 다른 아이소형으로 결론지을 수 없다. 따라서 쥐의 아이소형 2B1에서 얻은 소견을 인간의 2E1 아이소형에 그대로 적용할 수 없다.

알코올성 지방간염 뿐 아니라 비알코올성 지방간염에서도 시토크롬 P450-2E1의 합성이 유도되는 것은 이미 알려져 있다. 다른 시토크롬과 현저하게 구별되는 이 아이소형의 기능 및 작용기전은 예를 들어 Archives of Biochemistry and Biophysics(1995)의 제317권, 299-304 페이지에 M. H. Wang et al에 의해 설명되어 있다. 그에 따르면 이 효소는 약 15 Å 길이의 결합 포켓(binding pocket)을 가지며, 그 단부에는 중앙 철 원자를 포함하는 헤모링(hemoring)을 구비한 활성 중심이 존재한다.

뮐러 에노흐(Mueller-Enoch) 등은 Z. Naturforsch.(2001) 56c, 1082-1090 쪽에 die Inhibierung von Cytochrom-P450 2B1 der Ratte mittels 리소포스파티딜콜린(lysophosphatidylcholines),리소포스파티딜이노시톨(lysophosphatidylinositol) 및 아라키돈산 및 올레산 또는 모노아실글리세롤, 모노올레일글리세롤, 및 모노팔미토일글레세롤을 이용한 시토크롬 P450 2B1의 억제를 설명했다.

이외에도 T. Haehner, D. Mueller-Enoch 등은 Z. Naturforschung(2004) 59c, 599-605 페이지에서 단일 사슬 지질 분자가 쥐의 시토크롬 아이소형 P 450 2B1의 활성도에 미치는 영향을 설명했다.

본 발명의 목적은, 알코올성 및 비알코올성 간질환, 바이러스성 간염, 1형 및 2형 당뇨병의 바이러스성 간염, 췌장염, 급성 신부전증, 독성 신장병, 화학요법제 투여 시 부작용, 알츠하이머성 및 파킨슨성 질환, 윌슨병, 철침착증 및 동맥경화증의 발생 및 예후를 억제하거나 및/또는 그 진행을 완화 및/또는 완전히 중단시키는 것이다. 또한 본 발명의 목적은 허혈상태에서의 조직 손상, 즉 예를 들어 재관류 손상을 완화하거나 및/또는 억제하는 것이다. 마지막으로 본 발명의 목적은 환경 독소 및 의약품의 조직 독성을 치료하는 것이다.

이 목적은 청구항에 명시한 특징을 통해 달성된다.

놀랍게도, 시토크롬 P 450에서, 특히 2그룹의 아이소형, 더욱 상세하게는 2E1 및 2C9에서 반응성 산소종(ROS), 특히 직접적인 산화환원반응에서 소비되지 않는 히드록실 라디칼(ㆍOH) 및 초과산화물 음이온과 같은 산소 라디칼의 형성이 소수성 알킬 사슬 및 친수성 말단기를 포함하는 물질의 투여를 통해 억제된다는 사실이 발견되었다. 이러한 물질은 적어도 6개의 탄소원소 길이의 소수성 및 친수성 구역을 포함한다. 이 구역은 예를 들어 알킬포스포콜린(alkylphosphocholines), 알킬쿠마린(alkylcoumarins)과 같은 단일 사슬성 합성 지질 뿐 아니라 상응하는 지방산, 지방산 에스테르 또는 스핑고신(sphingosine) 또는 리소포스파티딜이노시톨과 같은 단일 사슬성 천연 지질일 수 있다. 더욱 놀랍게도, 이러한 아이소형이 그 본래의 기능에서 에탄올 및 아세톤과 같은 작은 분자의 산화에 관여한다는 사실이 알려져 있다.

제제의 제조를 위해 본 발명에서 사용되는 물질은 특히 일반식 R-A-X를 포함한다. 여기에서 R은 바람직하게도 7 내지 27개의 탄소 원자를 포함하는 알킬 잔기(Alkylrest; alkyl radical)이다. 적어도 8개의 탄소 원자 길이를 갖는 알킬 잔기가 더욱 바람직한데, 이 경우 적어도 10개, 특히 적어도 11 또는 12개의 탄소 원자 길이다 더욱 바람직하다. 또한 탄소 원자의 수가 최대 20개인 알킬 잔기가 바람직한데, 이 경우 최대 18개, 특히 최대 17 또는 16개의 탄소 원자 크기가 더욱 바람직하다. 알킬 잔기는 경우에 따라서 곧은 사슬 또는 곁가지 사슬일 수도 있으며 하나 또는 복수의 탄소 이중 결합 및/또는 삼중 결합을 포함한다. 하지만 바람직하게도 알킬 잔기는 7개 이상의 이중 결합, 특히 5개 이상의 이중 결합을 갖지 않으며, 바람직하게도 3개 이상의 삼중 결합, 특히 2개 이상의 삼중 결합을 갖지 않는다. 경우에 따라서 알킬 잔기는, 그가 잔기 R의 소수성 거동에 영향을 미치지 않는 조건 하에서 다른 기(group)와 치환될 수 있다. 바람직한 치환기는 C₁-C₆- 알킬 잔기, 바람직하게는 자체적으로는 분기될 수 있지만 바람직하게는 곧은 사슬인 C₁- 내지 C₄ - 알킬 잔기이다.

A는 카르보닐산, 카르복실산, 인산, 아미노, 에테르 또는 메르캅토에테르기(mercaptoether group)이며, 각각의 일반식은 -CO-, -COO-, PO_x ²-, NH_Y- 및/또는 -S-이다.

X는 수소 원자, 다환, 방향족 또는 지방족 수용성 탄화수소인데, 이런 탄화수소는 적어도 하나의 이종원자를 포함하며, 경우에 따라서는 고리 닫힘(ring closure) 하에서 알킬 잔기 R과 결합되고 수용성의 개선을 위해 산소, 질소 및/또는 황 이종원자를 포함하며 특히 고리에서 및/또는 고리로서 또는 치환기에서 포함한다. 또한 x는 폴리올, 아미노산, 당, 알킬아민, C₁- 내지 C₃-아킬아민, C₁- 내지 C₃-히드록시알킬 및/또는 C₁- 내지 C₃-카르복실산이다. 하나 또는 복수의 C₅-당 또는 C₆-당일 수 있는 당 잔기 및 올리고사카라이드 및 당 및 이노시톨과 같은, 예를 들어 글리콜, 글리세린 및 고리모양 알코올과 같은, 모든 다중 히드록시기를 포함하는 알킬 잔기가 폴리올로서 적합하다.

본 발명에서는 계면활성 특성을 가지며 알킬 또는 알킬렌 잔기를 포함하는 모든 물질도 사용할 수 있다. 이런 물질은 비이온성, 이온성 계면활성제 뿐 아니라 양성이온성 계면활성제일 수도 있고 특히 0.5*10^-2 M 내지 0.5*10^-6 M의 최저미셀형성농도(critical micelle concentration, CMC)를 갖는다.

또한 본 발명에 따른 바람직한 물질은 지방산, 인산 에스테르, 특히 인산 디에스테르, 특히 알킬아민 및 아미노산을 포함하는 지방산 에스테르, 스핑고신 및 스핑고신 유도체 및 일반식이 CH₃-R-X인 알킬렌 유도체 및 고리형 알킬을 포함한다.

일반식이 H₃C-R-COOH인 본 발명에 따라 사용 가능한 지방산은 불포화 지방산 뿐 아니라 포화 지방산도 포함하며, 여기에서 R은 26개 미만의 탄소원자를 갖는 임의의 탄화수소 사슬이다. 바람직한 사슬 R은 다음과 같다.

(CH₂)_{5 내지 7} CH=CH (CH₂)₇-, -(CH₂)₇CH=CH(CH₂)₁₃-, -(CH₂)₃(CH₂CH=CH)_{2 내지 4} (CH₂)_{7 내지 3}-, -(CH₂CH=CH)_{3 내지 6} (CH₂)_{7 내지 2}-

본 발명에 따라 사용 가능한 인산 디에스테르는 H₃C-R-PO₄ ^- -X의 일반식을 가지며, 여기에서 R은 바람직하게도 곧은 사슬이며 4 내지 26개의 탄소원자를 포함하는 알킬 잔기이다. 더욱 바람직하게는 잔기 R이(CH₂)_{4 내지 24}-, -(CH₂)_{5 내지 7}CH=CH(CH₂)₇-, -(CH₂)₃(CH₂CH=CH)_{2 내지 4} (CH₂)_{7 내지 3} -, -(CH₂CH=CH) _{3 내지 6} (CH₂)_{7 내지 2}- 이며, 여기에서 X는 수용성을 매개하는 친수성 잔기 또는 기이며, 이는 특히 N, S, 0와 같은 이종 원자를 포함하며 특히 아미노, 암모니움 및 히드록시 기를 포함한다. 경우에 따라서 X는 수소일 수 있으며, 따라서 인산 모노에스테르가 발생한다.

바람직한 잔기 X는 아미노산, 특히 α, β, γ 및/또는 ω 아미노산 및 다음이다.

바람직한 지방산 아미노산 에스테르는 특히 일반식이 다음과 같은 카르니틴 에스테르로서,

여기에서 R은 다음과 같다: -(CH₂)₆-내지-(CH₂)₂₂-, -(CH₂)_{5 내지 7}CH=CH(CH₂)₇-, -(CH₂)₃(CH₂CH=CH)_{2 내지 4}(CH₂)_{7 내지 3}-, -(CH₂CH=CH)_{3 내지 6}(CH₂)_{7 내지 2}-.

본 발명에 따라 사용 가능한 다른 물질은 일반식이 R-Pi-Y인 스핑고신 및 스핑고신 유도체로서, 여기에서 R은 일반식이 다음과 같은 스핑고신 잔기이며

여기에서 Pi는 인산 잔기이다. 스핑고신 유도체로는 기본 구조의 임의의 상응하는 모든 구조적 변형물로서 이해해야 하는데, 이러한 변형으로는 예를 들어 탄화수소 사슬의 단축 또는 연장, 추가적인 이중 결합, 히드록시기 및/또는 아미노기의 추가 또는 H 잔기를 통한 이런 기의 교체가 있다. 바람직한 잔기 Y기는 수소, 콜린, 글루코스, 갈락토스 및 올리고사카라이드와 같은 당 잔기 및 이노시톨 특히 미오 이노시톨과 같은 고리형 폴리알코올을 포함한다.

이외에도 본 발명에 따른 바람직한 실시 형태에서는, 그 친수성 기가 수용성, 고리형 또는 다환형 방향족 및/또는 지방족 탄화수소 잔기로 이루어진 그러한 물질도 사용할 수 있는데, 이러한 탄화수소 잔기는 이종 원자의 용해성을 증가시키기 위해 특히 O, N 또는 S를 포함하며, 더욱 상세하게는 고리에서 및/또는 그의 치환기에서 또는 치환기 자체로서 그를 포함한다.

또한 본 발명에 따라 사용 가능한 물질로는 일반식이 다음과 같은 고리형 알킬 유도체 및 알킬렌 유도체가 포함되며

H₃C - (R) - X

여기에서 R은 C₄ 내지 C₂₅ 알킬 잔기 및 특히

-(CH₂)_{4 내지 24} -, -(CH₂)_{5 내지 7} CH=CH(CH₂)₇-, -(CH₂)₃(CH₂CH=CH)_{2 내지 4} (CH₂)_{7 내지 3}-, -(CH₂CH=CH)_{3 내지 6}CH_{2 7 내지 2}-이며,

여기에서 X는 수용성 고리형 탄화수소 잔기, 지방족 또는 방향족일 수 있고, 특히 O, N 및/또는 S를 포함하는 이종 원자이다. 이때 고리형 탄화수소는 그 소수성 특성이 변하지 않는 조건으로 고리 닫힘 하에서 잔기 R과 결합될 수 있다. 바람직하게도 이때, 이러한 고리형 탄화수소를 통해 미셀 구조의 형성이 억제된다. 바람직한 화합물은 인산콜린기 외데 에스테르, 히드록시기 또는 아미노기 또는 아미도기 또는 그 유도체를 포함하지 않는 인산콜린이다. 특히 바람직한 실시 형태에서는 X는 인산콜린 잔기 및 특히 -PO₄ ^- -R'-N⁺R₃''이며, 여기에서 R'는 C₁ - C₆-알킬 잔기, 특히 C₁ - C₃ 잔기이며 R''는 각각 독립적인 수소, 메틸, 에틸 및/또는 프로필 잔기일 수 있다.

특히 바람직한 이러한 물질은 헥사데실포스포콜린(hexadecylphosphocholine)이다. 마지막으로 1-O-옥타데실-2-O-메틸-sn-글리세롤-3-포스포콜린도 특히 바람직한 물질이다. 이러한 물질은 European Journal of Cell Biology 80, (2001), 1-10에 설명되어 있다.

놀랍게도 이러한 물질을 이용해 알코올 남용의 예후를 억제하거나 및/또는 완화시킬 수 있다는 것이 발견되었다. 이는 특히 간 손상 또는 기타 알코올성 염증유발 과정이다. 순수한 알코올성 간 손상 외에도 예를 들어 비만증, 당뇨병 및 고지질혈증과 같은 내분비성 및 섭생에 기인한 요인도 알코올과 무관하게 심각한 간 손상을 발생시킬 수 있는데, 이러한 간 손상은 지방간염(비알코올성 지방간염(non-alcoholic steato-hepatitis) = NASH) 뿐 아니라 간경화에까지 이를 수 있다. 이러한 알코올성 및 비알코올성 지방간 질병은 대개 간의 바이러스성 감염과 동반된다. 이러한 질병은 매우 신속하게 진행될 수 있다. 이는 반응성 산소종(ROS)의 생성 및 그와 결부된 세포 손상이 그 원인으로 밝혀졌다. 전술한 모든 질병 또는 그 원인 또는 예후는 본 발명에 따른 수단을 통해 치유가 가능하다.

이외에도 알코올 남용은 예를 들어 췌장, 심장 또는 신경계와 같은 다른 기관의 손상을 유발한다.

또한 이런 물질이 췌장의 염증을 치유하는데 특히 적합한 것으로 밝혀졌다. 이러한 유형의 염증 또는 췌장염은 알코올 남용 외에도 독성 물질을 통해서도 유발될 수 있다. 이런 독성 물질로는 직업상 접하게 되는 화학물질과 같은 환경 독소 또는 의약품을 들 수 있다. 바이러스 감염 또는 대사 내분비성 요인도 이러한 췌장염을 발생시킬 수 있으며, 모든 경우에서 반응성 산소종이 발병 및 질병의 진행에 관여한다.

당뇨병 2형 뿐 아니라 1형을 포함하는 당뇨병의 치료에서도 본 발명에 따른 제제가 적합한 것으로 입증되었다. β 섬세포가 산화 과정에 민감하며 증가된 산화 스트레스에서 신속하게 감소하는 것을 밝혀졌다. 이 산화 스트레스는 본 발명에 따른 제제를 통해 억제 또는 적어도 상당히 완화시킬 수 있다.

알츠하이머병 및 파킨슨병의 치료에서 본 발명에 따른 제제가 효과적인 것으로 입증되었다. 예를 들어 본 발명에 따른 물질로 파괴를 약화시킴으로써 도파민의 농도가 증가되는 것으로 나타났다.

독성 신장병, 및 예를 들어 화학요법제의 투여 시 독성 부작용, 시스플라틴, 카르보플라틴, 티타노신 디클로라이드(titanocene dichloride) 또는 금 복합체와 같은 금속 복합체로 인한 세포 독소로 인해 유발되는 기타 질병도 본 발명에 따른 의약품으로 치료할 수 있다. 또한 할로겐화 탄화수소 및 모노 및 폴리할로겐화 탄화수소, 그에 포함되는 할로테인 유형의 흡입 마취제 및 상응하는 방향성 탄화수소, 니트로스아민, 아크릴아민, 또는 파라세타몰, 메토트렉세이트, 이소지아니트 또는 아미노글리코시드 항생제 또는 엑스레이 조영제와 같은 기타 독성 매체 및 금속 복합체의 조직 독성이 억제되는 것으로 밝혀졌다. 따라서 본 발명에 따른 의약품은 환경 독소의 해독제로서 간, 신장, 중추신경계, 췌장 등의 조직에서 환경 독소의 조직 독성의 치료에 적합하다.

또한 본 발명에 따른 제제는 급성 신부전증, 특히 약물 중독, 용혈질환, 용혈성 요독증후군(Gasser's syndrome), 순환허혈 과정으로 인한 유발된 횡문근융해(횡문골격근 쇠약) 및/또는 및/또는 바이러스 감염으로 유발된 그러한 신부전증의 치료에 적합하다. 이외에도 이 제제는 횡문근의 압착(crush syndrome)에 의한 손상 및/또는 의약품(예를 들어 리포바이/Lipobay와 같은 CSE 억제제)의 투여 시 그 융해의 치료에서 그 효능이 입증되었다.

특히 이 제제는 예를 들어 특히 심장 경색 및 뇌 경색(심근경색증, 뇌졸증)과 같은 조직 경색증 후와 같은 생물학적 조직의 재관류 손상을 억제하는데 매우 적합한 것으로 입증되었다. 예를 들어 동물 시험에서는 이러한 재관류 손상이 조직파괴에 60-80%에 달하며 또한 이 비율만큼 조직 괴사의 확산을 방지 할 수 있는 것으로 나타났다. 이로써 본 발명에 따른 제제는 특히 이식한 조직에서 재관류 손상을 억제하는데도 매우 적합하다. 이러한 조직은 새로운 수용자의 체내에 이식될 때까지 냉각된 영양체액배지(nutrient solution)에서 유지된다. 이식 후에는 조직은 수용자의 순환계에 연결된 후에 다시 체액이 흐르게 되는데, 이는 재관류 손상을 유발시킨다. 보관 전 및 보관 중에 그리고 수용자 기관으로의 이식 직전에 본 발명에 따른 제제를 투여함으로써 이런 중요한 이식 문제를 해결할 수 있다.

본 발명에 따른 물질은 특히 시토크롬 P450의 유전자 패밀리 2의 인간 아이소형, 더욱 상세하게는 아이소형 2E1 및 2C9의 억제제 및 그로 유발되는 질병의 억제제로서 그 효능이 입증되었다.

실시예 1:

효소 준비:

시토크롬 P450 2EI 유도를 달성하기위해, M. H. Wang 등이 Arch. Biochem. Biophys. 317: 299-304, 1995에 저술한 바와 같이, 8마리의 수컷 Sprague-Dawley 쥐에게 7일 동안 5% 아세톤(v-v)을 식수를 통해 투여했다. 마이크로솜 분획의 준비는 Wang P., Mason P.S., Guenderich FG가 Arch. Biochem. Biophys. 1999: 206 1980에 공개한 방식으로 이루어졌다. 대조군 쥐와 비교하여 p-니트로페놀-수산화효소 활성도가 5배 증가한 것을 확인할 수 있었다.

효소 활성도 측정:

p-니트로페놀은 시토크롬 P450 2E1을 위한 특수 물질로서 유효하다. p-니트로페놀-수산화효소 활성도의 측정은 Anal. Biochem. 219, 49-52, 1994에 발표된 J.W. Allison 및 B.L. Robinson의 논문의 내용에 따라 이루어졌다.

여기에서 다음과 같은 억제상수가 측정되었다:

- 도데실포스포릴콜린 K_i = 0.45 μm

- 헥사데실포스포콜린(밀테포신) K_i = 0.60 μm

- rac-1-O-포스포콜린-2-아미노-옥타데칸-히드로클로라이드

K_i = 2.25 μm

모든 경우에서 경쟁 억제가 확인되었다.

산소 라디칼의 검출:

이를 위해 M.H. Wang 등이 전술한 논문에서 설명한 바와 같이 마이크로솜 분획을 사람의 간에서 채취했다. 시토크롬 P450 매개된 산소 생성물이 디클로로플루오래세인(dichlorofluorescein) 방법에 따라 형광측정 방식으로 측정되었다(BASF B.A. et al., Journal of Immunology 130 (4) P. 1910, 1983). 검출은 유전자 패밀리 2, 예를 들어 ChIP 2C9: 디클로페낙, ChIP 2C1: ρ-디니트로페놀) 아이소형의 다양한 특수한 물질에 따라 및 다양한 억제성 선도물질(예를 들어 알킬포스포콜린, 스핑고리피드, 리소포스포리피드)에 따라 이루어졌다. 모든 경우에서 ROS 매개된 디클로로플루오래세인 형광물질의 농도별 감소가 나타났다(5-15 μm의 범위에서 완전한 억제).

본 발명은 알코올 남용, 간염, 췌장염 등의 예후의 치료 제제에 이용될 수 있다.

Claims (6)

1. 알코올 남용, 바이러스성 간염, 지방 간염, 급성 및 만성 췌장염, 알츠하이머병, 파킨슨병, 독성 신장병, 급성 신부전증, 화학요법제의 투여 시 독성 부작용, 당뇨병, 윌슨병, 철침착증 및/또는 허혈성 재관류 손상, 동맥경화증의 예후의 예방, 치료 및 완화를 위한 및 약물 중독 및 환경 독소에 대한 해독제로서의 제제의 제조를 위한 일반식 R-A-X인 화합물의 사용에 있어서, 일반식이

   R - A - X이며, 여기에서

   -R은 치환될 수 있는, 이중결합 또는 삼중결합을 가질 수 있는, 곧은 사슬 또는 곁가지 사슬인 C₅-C₂₇-알킬 잔기를 나타내며

   - A-는 -CO-, -COO-, -PO_x ^{2 -}-, -NH_y-, -O- 및/또는 -S- 이며 x는 2, 3 또는 4이고 y는 1 또는 2를 의미하고

   - X는 수소 원자, 폴리올, 아미노산, 알킬아민, C₁- 내지 C₃-아킬아민, C₁- 내지 C₃-히드록시알킬 및/또는 C₁- 내지 C₃-카르복실산인 것을 특징으로 하는 사용.
2. 제1항에 있어서, X는 콜린, 미오-이노시토릴-, 글루코실-, 갈락토실 잔기 또는 올리고사카라이드인 것을 특징으로 하는 사용.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, X가 α-, β-, γ- 및/또는 Ω-아미노산인 것을 특징으로 하는 사용.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, X가 α-, β- 또는 γ-히드록시아미노산인 것을 특징으로 하는 사용.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 억제제가 0.5*10^-2 M 내지 0.5*10^-6 M의 임계미셀형성농도를 갖는 비이온성, 이온성 및 양성이온성 계면활성제인 것을 특징으로 하는 사용.
6. 일반식이 R - A - X 인 적어도 하나의 물질을 포함하는 제제로서,

   -R은 치환될 수 있는, 이중결합 또는 삼중결합을 가질 수 있는, 곧은 사슬 또는 곁가지 사슬인 C₅-C₂₇-알킬 잔기를 나타내며

   - A는 -CO-, -COO-, -PO_x ^{2 -}-, -NH_y-, -O- 및/또는 -S- 이며 x는 2, 3 또는 4이고 y는 1 또는 2를 의미하고

   - X는 수소 원자, 폴리올, 아미노산, 알킬아민, C₁- 내지 C₃-아킬아민, C₁- 내지 C₃-히드록시알킬 및/또는 C₁- 내지 C₃-카르복실산이며 경우에 따라서는 다른 부형제와 함께 사용되는 것을 특징으로 하는 제제.