DE04254370T1 - Vorrichtung und Verfahren zur Aufnahme von Tierzellenkolonien - Google Patents
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Abstract
Verfahren
für das
automatisierte Aufnehmen von Tierzellkolonien unter Verwendung einer
Vorrichtung, wobei das Verfahren folgendes umfaßt:
a) Bereitstellen eines Aufnahmekopfs (18), welcher eine Mehrzahl hohler Nadeln (26) umfaßt, wobei der Aufnahmekopf unter Verwendung von Positionierungsmotoren (20, 22, 24) über die Vorrichtung bewegt werden kann,
b) Anordnen eines Probenbehälters (13), welcher eine Mehrzahl von in einem Medium gehaltenen Tierzellkolonien (74) beinhaltet, sowie eines Abgabebehälters (29) auf der Vorrichtung,
c) Verwendung einer Bilderkennung (40) und einer Bildverarbeitung (90), um Stellen von Tierzellkolonien in der Probe zu identifizieren,
d) Bewegen des Aufnahmekopfs über den Probenbehälter,
e) Aufnehmen einer Tierzellkolonie durch Ausrichten einer der hohlen Nadeln an einer der Stellen der Tierzellkolonien, Einführen eines distalen Endes der hohlen Nadel in das Medium, und Einsaugen der Tierzellkolonie an dieser Stelle in die hohle Nadel und
f) Absetzen der aufgenommenen Tierzellkolonie durch Bewegen des Aufnahmekopfs über den Abgabebehälter und...
a) Bereitstellen eines Aufnahmekopfs (18), welcher eine Mehrzahl hohler Nadeln (26) umfaßt, wobei der Aufnahmekopf unter Verwendung von Positionierungsmotoren (20, 22, 24) über die Vorrichtung bewegt werden kann,
b) Anordnen eines Probenbehälters (13), welcher eine Mehrzahl von in einem Medium gehaltenen Tierzellkolonien (74) beinhaltet, sowie eines Abgabebehälters (29) auf der Vorrichtung,
c) Verwendung einer Bilderkennung (40) und einer Bildverarbeitung (90), um Stellen von Tierzellkolonien in der Probe zu identifizieren,
d) Bewegen des Aufnahmekopfs über den Probenbehälter,
e) Aufnehmen einer Tierzellkolonie durch Ausrichten einer der hohlen Nadeln an einer der Stellen der Tierzellkolonien, Einführen eines distalen Endes der hohlen Nadel in das Medium, und Einsaugen der Tierzellkolonie an dieser Stelle in die hohle Nadel und
f) Absetzen der aufgenommenen Tierzellkolonie durch Bewegen des Aufnahmekopfs über den Abgabebehälter und...
Claims (16)
- Verfahren für das automatisierte Aufnehmen von Tierzellkolonien unter Verwendung einer Vorrichtung, wobei das Verfahren folgendes umfaßt: a) Bereitstellen eines Aufnahmekopfs (
18 ), welcher eine Mehrzahl hohler Nadeln (26 ) umfaßt, wobei der Aufnahmekopf unter Verwendung von Positionierungsmotoren (20 ,22 ,24 ) über die Vorrichtung bewegt werden kann, b) Anordnen eines Probenbehälters (13 ), welcher eine Mehrzahl von in einem Medium gehaltenen Tierzellkolonien (74 ) beinhaltet, sowie eines Abgabebehälters (29 ) auf der Vorrichtung, c) Verwendung einer Bilderkennung (40 ) und einer Bildverarbeitung (90 ), um Stellen von Tierzellkolonien in der Probe zu identifizieren, d) Bewegen des Aufnahmekopfs über den Probenbehälter, e) Aufnehmen einer Tierzellkolonie durch Ausrichten einer der hohlen Nadeln an einer der Stellen der Tierzellkolonien, Einführen eines distalen Endes der hohlen Nadel in das Medium, und Einsaugen der Tierzellkolonie an dieser Stelle in die hohle Nadel und f) Absetzen der aufgenommenen Tierzellkolonie durch Bewegen des Aufnahmekopfs über den Abgabebehälter und Ausstoßen der aufgenommenen Tierzellkolonie in den Abgabebehälter. - Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Stufe des Aufnehmens das Wiederholen der Stufen des Ausrichtens und des Einsaugens für mehrere der hohlen Nadeln umfaßt, um mehrere der Tierzellkolonien aufzunehmen.
- Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, wobei der Abgabebehälter eine Anordnung von Wells beinhaltet, die durch einen charakteristischen Abstand voneinander getrennt sind, und auch die hohlen Nadeln mit dem charakteristischen Abstand angeordnet sind, so daß die Stufe des Ausstoßens für alle hohlen Nadeln parallel ausgeführt werden kann.
- Verfahren nach Anspruch 1, 2 oder 3, wobei die Tierzellkolonien an dem Probenbehälter anhaften und wobei nach der Stufe des Einführens das distale Ende der Nadel relativ zu dem Probenbehälter bewegt wird, um vor der Stufe des Einsaugens die Tierzellkolonie an dieser Stelle abzulösen.
- Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei die Tierzellkolonien mit einem kontrastverstärkenden Mittel eingefärbt werden, um die Bildverarbeitung zu unterstützen.
- Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei die Tierzellkolonien mit einem fluoreszierenden Mittel eingefärbt werden, um die Bildverarbeitung zu unterstützen.
- Verfahren nach einem der vorangegangenen Ansprüche, wobei die Mehrzahl der Tierzellkolonien ein interessierendes biologisches Molekül enthält oder exprimiert.
- Verfahren nach Anspruch 7, wobei das interessierende biologische Molekül aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einem Peptid, einem Polypeptid, einer Nukleinsäure oder einem glycosylierten oder unglycosylierten Protein.
- Verfahren nach Anspruch 8, wobei das interessierende Protein ein biopharmazeutisches Protein ist.
- Vorrichtung zum Aufnehmen von Tierzellkolonien, welche folgendes umfaßt: ein Vorrichtungsbett (
10 ) zum Anordnen eines Probenbehälters (13 ), welcher eine Mehrzahl von in einem Medium (72 ) gehaltenen Tierzellkolonien (74 ) umfaßt, eine Kamera (40 ) zum Aufnehmen von Bildern der Tierzellkolonien, einen Bildprozessor (90 ) zum Identifizieren von Stellen von Tierzellkolonien anhand von aufgenommenen Bildern und einen Aufnahmekopf (18 ), der unter Verwendung von Positionierungsmotoren (20 ,22 ,24 ) auf dem Vorrichtungsbett zu Stellen von Tierzellekolonien, die durch den Bildprozessor identifiziert wurden, bewegt werden kann, wobei der Aufnahmekopf eine Mehrzahl von hohlen Nadeln (26 ) beinhaltet, die durch Fluidleitungen (28 ) mit einer Drucksteuerung (84 ) verbunden sind, die so betreibbar ist, daß sie Mengen des Mediums aus dem Probenbehälter in die hohlen Nadeln einsaugt, das Medium hält und es ausstößt, wenn dies erforderlich ist, wodurch eine Aufnahme von Tierzellkolonien aus dem Medium ermöglicht wird. - Vorrichtung nach Anspruch 10, wobei der Aufnahmekopf weiterhin einen Antriebsmechanismus (
60 ,66 ) aufweist, um eine seitliche Oszillation distaler Enden der Nadeln zu bewirken, um das Ablösen anhaftender Tierzellkolonien zu vereinfachen. - Vorrichtung nach Anspruch 11, wobei der Antriebsmechanismus so ausgestaltet ist, daß er eine Drehbewegung der distalen Enden der Nadeln bewirkt.
- Vorrichtung nach Anspruch 10, 11 oder 12, wobei die hohlen Nadeln in einem charakteristischen Abstand angeordnet sind, der zu dem Standardabstand einer Wellplatte paßt.
- Verwendung der Vorrichtung nach einem der Ansprüche 10 bis 13 zum Identifizieren einer Tierzellkolonie, die ein interessierendes biologisches Molekül umfaßt oder exprimiert.
- Verwendung nach Anspruch 14, wobei das interessierende biologische Molekül aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einem Peptid, einem Polypeptid, einer Nukleinsäure oder einem glycosylierten oder unglycosylierten Protein.
- Verwendung nach Anspruch 14, wobei das interessierende glycosylierte oder unglycosylierte Protein ein biologisches Molekül ist.
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