DD149015A6 - Verfahren und mittel zur konservierung und aufwertung von gruenpflanzen - Google Patents

Verfahren und mittel zur konservierung und aufwertung von gruenpflanzen Download PDF

Info

Publication number
DD149015A6
DD149015A6 DD80218995A DD21899580A DD149015A6 DD 149015 A6 DD149015 A6 DD 149015A6 DD 80218995 A DD80218995 A DD 80218995A DD 21899580 A DD21899580 A DD 21899580A DD 149015 A6 DD149015 A6 DD 149015A6
Authority
DD
German Democratic Republic
Prior art keywords
complex
bacteria
activity
bacterial
plants
Prior art date
Application number
DD80218995A
Other languages
English (en)
Inventor
Louis Ostre
Original Assignee
Ceva Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from FR7903499A external-priority patent/FR2448299A2/fr
Priority claimed from FR7915887A external-priority patent/FR2459006A2/fr
Application filed by Ceva Sa filed Critical Ceva Sa
Publication of DD149015A6 publication Critical patent/DD149015A6/de

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K30/00—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs
    • A23K30/10—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder
    • A23K30/15—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder using chemicals or microorganisms for ensilaging
    • A23K30/18—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs of green fodder using chemicals or microorganisms for ensilaging using microorganisms or enzymes

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Verfahren zur Konservierung von Gruenpflanzen durch Milchsaeure-Saeuerung, bei dem zu den Gruenpflanzen vor dem Silieren ein Wirkzusatz fuer den Abbau von hoeheren Kohlenhydraten zu vergaerbaren Kohlenhydraten, die von den Milchsaeuregaerung hervorrufenden Bakterien ausgenutzt werden koennen, hinzugegeben wird, der aus einem Enzymkomplex und/oder einem Bakterienkomplex besteht. Der Enzymkomplex enthaelt einen cellulolytischen Komplex pilzlichen Ursprungs, der gegebenenfalls zusammen mit bekannten Enzymkomplexen eingesetzt wird. Der Bakterienkomplex enthaelt gramnegative Bakterien aus der Familie der Enterobacteriaceae, die gegebenenfalls mit bekannten Bakterien, insbesondere mit grampositiven Bakterien, die eine Fermentierung von Staerke bewirken, jedoch nicht zur Fermentierung von Maltose befaehigt sind, eingesetzt werden. Dieses Mittel auf Basis v. Enzymen und/oder Bakterien, auf einem Traeger auf Getreidebasis aufgebracht, fuehrt im Fall von Pflanzen, die arm an Kohlenhydraten sind, zu besonders vorteilhaften Ergebnissen.

Description

Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren und ein Mittel zur Konservierung und Aufwertung von frischen bzw. Grünpflanzen nach Hauptpatent Nr. 132 102, wodurch es ermöglicht wird, daß die Pflanzen je nach Bedarf zu einem späteren Zeitpunkt, d. h. nach ihrer Ernte, in appetitanregender Form konsumiert bzw. verfuttert werden können.
Charakteristik der bekannten technischen Lösungen
Verfahren zur Konservierung von Grünpflanzen sind mit einer Anzahl von Schwierigkeiten verbunden.
Dae Silieren beruht auf dem Prinzip, daß frische bzw. Grünpflanzen über einen längeren oder kürzeren Zeitraum in einem geschlossenen, dichten Behalter aufbewahrt werden, und zwar unter sauren Bedingungen, damit die Entwicklung von fäulniserregenden, alkalisch machenden und gasentwickelnden Keimen verhindert wird, wae darauf beruht, daß sich diese Keime unter sauren Bedingungen nicht entwickeln. Die Erzielung eines guten Silierens ist schwferig und mit zahlreichen Problemen verbunden. Das Hauptproblem ist diefaögliche Bildung von Gärungsprodukten, die für die Tiere, an die das Silofutter verfüttert wird, ja sogar für die Menschen, die das Fleisch dieser Tiere und die Milchprodukte verzehren, gesundheitsgefährlich sind.
Die Erforschung des Siliermechanismus ergab folgendes: Den im Siliermedium enthaltenen Milchsäurebakterien wird die Erzeugung von Milchsäure aus zur Verfügung stehenden, löslichen Zuckern ermöglicht, damit der pH des Siliermediums auf einen
Wert in der Nähe von 4 sinken kann. Es kommt jedoch relativ häufig vor, daß die zu silierenden Pflanzen nicht genügend vergärbare Zucker enthalten, daß die Vermehrung der
218995
einzelnen in dem Siliermedium enthaltenen Milchsäurebakterien unzureichend ist, daß der pH nicht schnell
, genug auf einen Wert von 4 herabsinkt, daß sich Buttersäurebakterien und anaerobe Bakterien entwickeln, durch c die die restlichen Zucker in Buttersäure, Essigsäure, Kohlendioxid und Wasserstoff umgewandelt werden, und daß die Proteine bis zur Stufe des Ammoniaks und anderer Metaboliten abgebaut werden.
jQ Zur Beseitigung dieser Probleme sind verschiedene Lösungen vorgeschlagen worden. Es ist insbesondere bekannt, durch Zugabe verschiedener Säuren eine chemische Säuerung zu bewirken, jedoch sind diese Verfahren nicht ungefährlich. Es ist auch bekannt, durch Zugabe von
}5 in hohem Maße zur Spaltung von Kohlenhydraten befähigten Bakterien eine biologische Säuerung zu bewirken, jedoch ist die Verwirklichung der biologischen Säuerung mit Schwierigkeiten verbunden.
20 Es sind auch Verfahren bekannt, bei denen man
in den Silo ein an Kohlenhydraten reiches Grundmaterial, z. B. Melasse, hineingibt, jedoch sind diese Verfahren kostspielig, und man erzielt damit keine gleichmäßigen Ergebnisse.
Aus der FR-PS 2 361 828 ist ein Verfahren zur Konservierung und Aufwertung von Grünpflanzen durch Milchsäure-Säuerung bekannt, bei dem zu den Pflanzen vor dem Silieren Bakterien hinzugegeben werden, die
30 zum Hervorrufen der Milchsäuregärung befähigt sind, und bei dem auch ein Wirkzusatz für den Abbau von höheren Kohlenhydraten zu vergärbaren Zuckern, die von den Milchsäuregärung verursachenden Bakterien ausgenutzt werden können, hinzugegeben wird. Dieser
Abbau-Wirkzusatz besteht aus grampositiven Bakterien,
218995
die eine Fermentierung von Stärke, Glucose, Mannit, Rhamnose, Saccharose, Amygdalin und/oder Arabinose bewirken, jedoch zur Fermentierung von Maltose, Inosit oder Sorbit nicht befähigt sind. Diese Bakterien haben folgende Eigenschaften: VP +; Oxidase +; Catalase +; Nitrate +; Harnstoff -; Citrate -; Indol -; H2S - . Der Abbau-Wirkzusatz kann auch ein Enzym oder mehrere Enzyme enthalten, die zum Spalten von Polysacchariden, insbesondere zum Spalten der Stärken, der Pentosane und anderer komplexer Polysaccharide in Vergärbare Zucker, befähigt sind. Insbesondere kann nach der FR-PS 23 61 828 zu den zu silierenden Pflanzen ein hemicellulolytischer Komplex pilzlichen Ursprungs hinzugegeben werden, der als hauptsächliche Aktivität eine -Galactomannanase-Aktivitnt. und sekundäre Aktivstoffe wie Xylanasen, Amylasen, Pectinasen und eine Amy läse zur Gewährleistung der Bildung der für die Erzeugung der Milchsäure durch die Bakterien notwendigen Maltose aufweist.
Das Verfahren der FR-PS 2 390 908 stellt gegenüber dem Verfahrender FR-PS 23 61 828 eine Verbesserung dar. Während bei dem Verfahren der FR-PS 23 61 828 als Amylase eine Exoamylase pilzlichen Ursprungs eingesetzt wird, durch die Stärke nicht vollständig abgebaut wird, handelt es sich bei der in dem Verfahren der FR-PS 23 90 908 eingesetzten Amylase um eine Amylase bakteriellen Ursprungs. Dieses Enzym (Endoamylase) wirkt auf die verflüssigten Stärken und erzeugt hauptsächlich α -D-Maltose und etwas ob -D-Glucose. Diese Endoamylase wirkt in einem pH-Bereich zwischen 5 und 8. In der FR-PS 23 90 908 wird auch die Verwendung von Amyloglucosidase beschrieben, die gegenüber den Ketten der Amylose und des Amylopectins in bezug auf die Erzielung
OJ von CL -D-Glucose eine viel stärkere V7irkung entfaltet.
AP A 23 K/ 218 57 007 18
218995 Λ-
Die Enzymzusammensetzung gemäß der FR-PS 23 90 908 enthält auch einen hemicellulolytischen Komplex pilzlichen Ursprungs, der auf die Polysaccharid-Bestandteile der Zellmembranen und auf die Dextrine wirkt, und zwar in pH-Bereichen zwischen 5,5 und 2.
Ziel der Erfindung
Ziel der Erfindung ist die Bereitstellung eines verbesserten Verfahrens für die Konservierung und Aufwertung von Grünpflanzen·
Darlegung dos Wesens der Erfindung
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, das Verfahren zum Silieren von Pflanzen zu verbessern durch Verbesserung des Enzymkomplexes als auch des Bakterienkomplexes .
Diese Aufgabe wird gelöst durch ein Verfahren zur Konservierung und Aufwertung von Grünpflanzen durch Milchsäure-Säuerung, bei dem zu den Grünpflanzen vor dem Silieren ein Wirkzusatz für den Abbau von höheren Kohlenhydraten zu vergärbaren Kohlenhydraten, die von den Milchsäuregärung verursachenden Bakterien ausgenutzt werden können, hinzugegeben wird, der aus einem Enzymkomplex und/oder aus einem Bakterienkomplex besteht. Das erfindungsgemäße Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, daß der Enzymkomplex gegebenenfalls in Verbindung mit einer Pilz-Amylase, einer Bakterien-Amylase, einer Amyloglucosidase und/oder einem hemicellulolytischen Komplex pilzlichen Ursprungs, der als hauptsächliche Aktivität eine Galactomannanase-Aktivität aufweist, eine Cellulase oder einen cellulolytischen Komplex pilzlichen Ursprungs enthält, wobei der cellulolytische Komplex pilz-
AP A 23 K/ 218 57 007 18
218995
lichen Ursprungs dazu befähigt ist, die native Cellulose zu Glucose abzubauen, eine Aktivität C1 von 50 bis 0,005 IE und eine Aktivität C von 500 bis 0,05 IE pro 100 g der frischen bzw. Grünpflanzen hat und unter den Silierbedingungen mindestens 30 % dieser Aktivität nach Ablauf von 10 Tagen beibehält, und daß der Bakterienkomplex gramnegatiye Bakterien enthält, die zur Familie der Entero· bacteriaceae, Gattung Erwinia oder Pectobacterium, Gruppe Herbicola, gehören, mit Enterobacter agglomerans bezeichnet werden und eine Fermentierung von Stfirke bewirken, jedoch zur Fermentierung von Maltose nicht befähigt sind.
Erfindungsgemäß werden die Bakterien aus der Familie der Enterobacteriaceae zusammen mit bekannten Bakterien eingesetzt, die zum Abbau der höheren Kohlenhydrate zu vergärbaren Kohlenhydraten befähigt 3ind.
Besonders vorteilhaft wird derart verfahren, daß man die Bakterien aus der Familie der Enterobacteriaceae mit grampositiven Bakterien einsetzt, die eine Vergärung von Stärke, Glucose, Mannit, Rhamnose, Saccharose, Amygdalin und/öder Arabinose bewirken, Jedoch nicht zur Fermentierung von Maltose, Inosit oder Sorbit befähigt sind.
Die Bakterien werden auf einem Getreidemehle enthaltenden Träger gezüchtet·
Enzyme und Bakterienkultur mit deren Träger werden den zu silierenden Pflanzen im trockenen Zustand hinzugefügt, und zwar pro t 10 bis 15 kg. Dieser Zusatzstoff enthält 10 bis 10 lebende Keime pro g.
- 9h - '
AP A 23 K/ 218 995 57 007 18
218995
Die Erfindung bezieht sich auch auf ein Mittel zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens.
Der im erfindungsgemäßen Verfahren eingesetzte Enzymkomplex ist dadurch gekennzeichnet, daß er, gegebenenfalls unter zusätzlicher Verwendung von an sich bekannten Enzymen, einen cellulolytischen Komplex oder eine Cellulase enthält, der oder die zur Spaltung der fb -glykosidischen 1,3- und 1,4-Bindungen der Polysaccharide befähigt ist, die durch die bekannte Enzymzusammensetzung nicht angegriffen werden.
Bei dem im erfindungsgemäßen Verfahren eingesetzten cellulolytischen Komplex handelt es sich um einen cellulolytischen Komplex pilzlichen Ursprungs, durch den die natürliche Cellulose und die anderen Polysaccharide, die in allen Zellmembranen enthalten sind, abgebaut werden.
Das erfindungsgemäße Mittel ist insbesondere dadurch gegekennzeichnet, daß die gramnegativen Bakterien aus der Familie der Enterobacteriacae in Verbindung mit Bakterien enthalten sind, die dazu befähigt sind, die höheren Kohlenhydrate zu vergärbaren Zuckern abzubauen, insbesondere in Verbindung mit grampositiven Bakterien, die eine Fermentierung von Stärke, Glucose, Mannit, Rhamnose, Saccharose, Amygdalin und/oder Arabinose bewirken, jedoch zur Fermentierung von Maltose, Inosit oder Sorbit nicht befähigt sind.
218995
Dieses Enzym wirkt in einem pH-
Bereich zwischen 2 und 5.. Hinsichtlich des Abbaus der pflanzlichen Strukturen besteht eine synergistische Zusammenwirkung zwischen dem cellulolytischen Komplex
5 und dem hemicellulolytischen Komplex.
Wegen der Umgebung der Cellulose in der Pflanze werden für die Hydrolyse der Cellulose mehrere Enzyme oder ein einzelnes Enzym benötigt, die mehrere Funktionen erfüllen, die nachstehend angegeben werden:
- Hydrolyse der amorphen Zonen,
- Quellung der kristallinen Bereiche und Spaltung der Wasserstoffbindungen zwecks
15 Bildung von linearen Molekülen,
- Hydrolyse der Cellobiose zu Glucose,
- Transglucosylierung der Di- und Oligosaccharide sowie Spaltung der unregelmäßigen Bindungen der Cellulose und ihrer primären Hydrolyse-
20 produkte.
Der cellulolytische Komplex ist entsprechend den vorstehend angegebenen Kriterien nach einer großen Anzahl von Versuchen mit verschiedenen Pflanzen ausgewählt worden.
Eine Cellulase wird durch ihre Aktivität definiert, die in Internationalen Einheiten (IE) pro Gramm des Produkts ausgedrückt wird, wobei eine IE die Enzymmenge ist, durch die auf einem gegebenen Cellulosesubstrat pro Minute das Äquivalent von einem Mikromol Glucose in Form von reduzierendem Zucker freigesetzt wird.
218995 ·
] Die Aktivitäten variieren in Abhängigkeit von . dem verwendeten Substrat: ·
- Wenn die Aktivität auf Papierpulver
5 aus Whatman CC 31-Papier getestet wird,
erhält man die Aktivität C.;
- wenn die Aktivität auf Carboxymethylcellulose getestet wird, erhält man die Aktivität C .
Der im erfindungsgemäßen Verfahren eingesetzte
Komplex weist eine sehr hohe cellulolytische Aktivität auf und besitzt auch sekundäre Aktivitäten vom hemicellulolytischen Typ. Die starke cellulolytische Wirkung äußert sich in einer sehr starken Aktivität C1, einer sehr starken Aktivität C und einer Cellobiase-Aktivität (ß-Glucosidase-Aktivität).
Die Aktivität C. des Enzymkomplexes,'die gemäß hypothetischen Annahmen aus einer Aktivität C besteht, zu der ein unbekannter Faktor hinzunecreten ist, äußert sich insbesondere in einer iösbarmachenden Wirkung auf die Celiuiose.
c. ist zum Abbau der nativen Cellulose (kristaiiine Ceiiuiose mit einem Poiymerisationsgrad von mehr als 3500 Giucoseeinheiten) in amorphe Ceiiuiose befähigt.
Die Aktivität C des Enzymkomplexes äußert sich ^O insbesondere in der reduzierenden Wirkung der Endo- und Exogiucanasen. Diese Enzyme wirken hauptsächlich auf die Ceiiulosefasern in den Zonen mit schwacher Kristaiiinität und zerlegen die langen Verkettungen
der Giucose in kleinere Einheiten. 35
218995 _ £ _
Die Aktivität der Ö-Glucosidase äußert sich in einer Wirkung auf die nach der Wirkung des Cx erhaltenen Cellobiose-Einheiten.
5. Diese unterschiedlichen Aktivitäten können nicht getrennt betrachtet werden. In bezug auf den Abbau dieser Homopolymeren existiert ein synergistischer Mechanismus zwischen C1 und C . Die enzymatischen Mechanismen der Aktivitäten C1 und Cx führen zur Bildung von Cellobiose, die anschließend unter Bildung von zwei Glucoseeinheiten durch eine yJ-Giucosidase hydrolysiert wird.
Die Hydrolysereaktionen der Cellulose sind anscheinend gemäß dem nachstehenden Schema aufgeteilt:
C1
Native Cellulose ) reaktive Cellulose
C (hydrolytisch). Reaktive Cellulose > Cellobiose
/3-Giucosidase (hydrolytisch)
Cellobiose —: : ;—> 2 iMoieküie Glucose
Der Komplex C1 macht die kristalline Cellulose (Cellulose mit einem Polymerisationsgrad, der mehr als 3500 Glucosemonomeren entspricht) löslich und erzeugt reaktive Cellulose (amorphe Cellulose). 30
Unter der Wirkung des Enzymkomplexes Cx (Endo- und Exoglucanasen) werden die Ketten der reaktiven • ' Cellulose zerteilt, und zwar entweder im Inneren der Kette und zufällig im Falle der Endoglucanasen oder von den nicht reduzierenden Enden ausgehend im Falle der
218995 _ ·
• Exoglucanasen.
Diese Reaktionen führen insgesamt zur Bildung von Cellobiose-Einheiten
5
Die Cellobiose-Einheiten werden durch eine y3-Glucosidase hydrolysiert, wodurch zwei Moleküle Glucose gebildet werden.
10 Im Falle der erfindungsgemäß eingesetzten PiIz-Ceilulasen ist der Enzymkomplex C1 und C in der Lage/ die native, unlösliche Cellulose unter Bildung von Glucose zu hydrolysieren.
Die erfindungsgemäß eingesetzten Cellulasen
wurden nicht nur im Hinblick auf die vorstehend angegebenen, allgemeinen Kriterien ausgewählt. Ihre Auswahl wurde vielmehr auch unter Berücksichtigung des Siliermediums getroffen, das in Abhängigkeit von dem
™ poiysaccharoiytischen Verhalten dieser Cellulasen besonderer Art ist.
Dieses poiysaccharoiytische Verhalten wurde
auf zwei Typen von Substraten bestimmt: 25
a) auf reinen Substraten;
b) auf dehydratisieren Substraten.
Reine Substrate:
Man bestimmte die Aktivität der Cellulasen A, B, C, D, E und F auf verschiedenen Substraten bei einer gegebenen Konzentration in einem mit 0,1 m
Acetat gepufferten Medium.
18995 Ά
Die Aktivität wurde gemäß den üblichen Vorschriften getestet, d. h. bei pH 4,8 und 50 0C nach 20-minütiger Hydrolyse. Die reduzierende Wirkung wurde unter Anwendung des Hexacyanoferrat-Verfahrens bestimmt.
Substrat ^Konzentration) Whatman- Papier Carboxymethyl cellulose Pectin Xylan Arabino- galactan Stärke Johannis brot
1 % 1 % 0,25 % 0,25 % 0,10 % 0,25 % 0,25 %
Enzyme (Aktivität) IE/g (C1) IE/g <Cx> IE/g IE/g IE/g IE/g IE/g
A 400 6444 356 511 22 394 544
B 211 5660 322 611 33 100 300
C 266 1999 411 311 0 244 389
D 52 6440 255 511 0 120 132
E 372 8500 305 605 0 0 . 0
F 960 7666 1030 1200 0 0 140
218995
1 Dehydratisierte Substrate
Auch die Aktivität der Enzyme A, B, C, D, E und F auf verschiedenen dehydratisieren pflanzlichen Subs' straten wurde bestimmt.
Die Aktivität wurde bei den pH-Werten 3,8; 4,8 und 5,8 und 30 0C nach einer Hydrolyse von 24 h getestet. Die reduzierende Wirkung wurde unter Anwendung 10 des Dinitrosalicylsäure-Verfahrens bestimmt.
218995
4*
Getestete pH Luzerne Englisches. Mais 1560 Rüben- Stroh
Substrate 3,8 Raigras ^/ 4 2080 pülpe
4,8 1690 bzw.
5,8 1530 schnitzel
Getestete^ 3,8 1670
Cellulasen 4,8 1940
5,8 1390
3,8 2810 1530 1810 1560
A 4,8 2440 1170 1530 16 90
5,8 1560 1470 1500 1530
3,8 1560 1390 1220 1390
B 4,8 1280 1530 1220 1500
5,8 8 90 Aktivität (IE/g) 1111 8 90 1280
3,8 1280 2280 1250 1110 1110
C 4,8 1280 2560 1278 1110 1290
5,8 940 2220 500 720 1110
3,8 1390 1670 1222 1278 1167
D 4,8 1190 2060 560 1111 1306
5,8 890 1680 972 1223
611 1530 556 694
E 972 1750 0 694
0 1560 0 69 1
1306 , 1440 694 556
F . 889 ' 2060 610 444
' 750 1720 550 333
1190
1528
1167
1306
972
1000
218995
AS
Die Analyse dieser verschiedenen Verhaltensweisen erlaubte eine Bestimmung der Aktivität des bei der Silierung nach dem erfindungsgemäßen Verfahren einzusetzenden cellulolytischen Komplexes:·
So wurde gefunden, daß die Cellulase oder der cellulolytische Komplex, die beim erf indungsgemä'ßen Verfahren zu frischen Pflanzen für die Silierung hinzuzugeben sind, einer Aktivität C1 von 50 bis 0,005 IE und einer Aktivität C von 500 bis 0,05 IE pro 100 g der Pflanzen entsprechen müssen, wobei diese Aktivitäten bei pH 4,8 und 50 0C nach 20-minütiger Hydrolyse bestimmt werden.
Außerdem muß die ausgewählte Cellulase selbst nach einem langen Verweilen in dem Silo eine bedeutende Aktivität beibehalten.
Wie durch Versuche gezeigt wurde, muß der cellulolytisch'e Komplex unter Bedingungen, die a^ die Bedingungen der Siiierung angenähert sind, nach 10 Tagen mindestens 30 % seiner anfänglichen Aktivität beibehalten
Konservierungszeit (Tage) O 5 10 - ι 15 20
pH 4,8 100 % 97 % -61 % 26 % 3 %
pH 5,8 100 % 85 % 58 % 27 % O %
218995 *
Die Geschwindigkeit des enzymatischen Abbaus der pflanzlichen Struktur ist eine Funktion der Beseitigung der Glucose. Diese Verschiebung des enzymatischen Gleichgewichts wird durch Verwendung von Bakterien mit einem hohen Fermentiervermögen erzielt; die Säuerung des Mediums erfolgt sehr rasch. Wenn die pflanzliche Masse stabilisiert ist, werden die Vermehrung der Bakterien sowie die Bildung von Milchsäure angehalten, und zwar im Gegensatz zur cellulolytischen Aktivität der Cellulase, die mehr als 10 Tage länger andauert.
Diese Aktivität verursacht im Inneren des Gärfutters eine Erzeugung und Ansammlung von Glucose und erhöht dadurch den Nährwert der silierten Pflanzen.
- . '
Der im erfindungsgemäßen Verfahren eingesetzte Enzymkomplex enthält daher eine Cellulase oder einen celiuiolytischen Komplex mit den vorstehend beschriebenen Eigenschaften, gegebenenfalls in Verbindung mit den in der FR-PS 23 90 908 beschriebenen Enzymen,
d. h. mit einer Piiz-Amylase, einer Dakterien-Amyiase, einer Amyiogiucosidase und einem hemiceliuloiytischen Komplex.
Die in dem Enzymkomplex vorhandenen Enzyme haben demnach eine komplementäre Wirkung hinsichtlich ihrer Aktivität gegenüber den Kohlenhydraten, von den komplizierteren bis. den einfacheren, und zwar in pH-Bereichen, die zwischen den Werten 7 und 2 liegen können.
3v Die maximalen Werte der Aktivität für jedes Enzym wechseln sich ab entsprechend der Herabsetzung des pH-Wertes, der in dem Silo nicht unter 3,5 herabsinkt, und in den von 10 bis 30 0C variierenden Temperaturintervallen, die mit den Bedingungen des Silos verträg-
lieh sind.
218995 *
_ 39 _
Der im erfindungsgemäßen Verfahren eingesetzte Bakterienkomplex ist gekennzeichnet durch die Verwendung neuer, für die Silierung von Pflanzen geeigneter Bakterienstämme, die für sich oder im Gemisch mit den Bakterienstämmen und/oder den Enzymen eingesetzt werden können, die nach dem Stand der Technik bekannt und erfindungsgemäß beschrieben worden sind. Der neue Bakterienkomplex führt zu in hohem Maße verbesserten Ergebnissen der Silierung. Bei dem im erfindungsgemäßen Verfahren und in dem erfindungsgemäßen Mittel eingesetzten, neuen Bakterienstämmen handelt es sich um gramnegative Bakterien, die zur Familie der Enterobacteriaceae, Gattung Erwinia oder Pectobacterium, Gruppe Herbicola, gehören und als Enterobacter agglomerans bezeichnet werden ^(Klassifizierung gemäß Bergey, Manual of Bacteriology, 8. Auflage).
In Tabelle I werden die Eigenschaften dieser Bakterien aufgeführt: 20
218995 _«_ I
Tabelle
Enterobacter agglomerans Arabinose +
Gram Maltose
Verwendung von Malonat + Trehalose +
Glucose + Xylose
Phenylalanin- desaminase '- Stärke . +
ONPG (/?-Gaiacto- sidase) + Oxidase
Indol Gelatine +
H2S Amygdalin +
LDC (Lysindecarboxylase) - Melibiose
ODC VP (Vöges- + Proskauer)
Urease Rhamnose
Saccharose +
Arginindihydrolase •
Saiicin
Adonit
Inosit
Sorbit
Der Einsatz dieser für sich oder in Verbindung mit anderen Bakterienstämmen und/oder mit Enzymen verwendeten, neuen Bakterienstämme zum Silieren von Pflanzen erfolgt in der nach dem Stand der Technik bekannten Art und Weise. Die Bakterien können auf einem Getreidemehle enthaltenden Nährsubstrat gezüchtet werden. Uer erfindungsgemäß in das Silo einzuführende Bakterienkomplex enthält eine Mischung der benötigten Bakterien, die auf einem löslichen oder nichtlöslichen Träger aufgebracht sind, gegebenenfalls zusammen mit dem erfindungsgemäß empfohlenen Enzymkomplex.
218995
ι Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die Enzyme und die Bakterien auf einen /Träger auf Getreidebasis (Weizen, Gerste, gekeimte Gerste) aufgebracht, der vorzugsweise in fein gemahlener bzw. fein zerriebener Form eingesetzt wird.
Bei einer anderen bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die Bakterien und die Enzyme auf einen Träger vom Typ der vorgelierten Stärke, der Maltohexose usw. aufgebracht, d. h. auf einen Träger, der in kaltem Wasser leicht löslich ist.
Die Stärke und die anderen in den Trägern enthaltenen Polysaccharide kommen zu den Kohlenhydraten •5 der Pflanzen hinzu und. erhöhen so den Nährwert des Gärfutters. Das erfindungsgemäße Mittel aus der Mischung der auf einem Träger befindlichen Bakterien und dem Enzymkompiex, der auf einem Träger auf Getreidebasis aufgebracht ist oder nicht, kann jeden dieser
*w Bestandteile in verschiedenen Anteilen enthalten.
Die trockene Mischung bzw. das trockene Mittel enthält pro Gramm eine Kokkenmenge in der Größenordnung von 100000 bis zu einer Million und eine Bazillenmenge
in einer Größenordnung von 100000 bis zu einer Million. 25
Die Mengen der Cellulase, des hemicellulolytischen Komplexes, der Amylase und der Amyloglucosidase können variabel sein; sie v/erden in Abhängigkeit von der Art des zu behandelnden Futters berechnet.
Die Menge der Cellulase, die zu den frischen, zu silierenden Pflanzen hinzuzufügen ist, muß einer Aktivität C. von 50 bis 0,005 IE pro 100 g Pflanzen entsprechen. Die Cellulase muß daher in einer Menge von 2 bis 2 χ 10 o/oo, bezogen auf das.Gewicht der frischen Pflanzen, eingesetzt werden, wenn die Cellulase einen Titer bzw. einen Gehalt von 250 IE/g
218995 f?
hat. Die anderen Enzyme werden in den folgenden Mengen eingesetzt:
Bakterien-Amylasen mit einem Gehalt von 250 Einheiten/g in einer Menge von 0,05 bis 0,20 o/oo, auf das Gewicht der Pflanzen bezogen,
Pilz-Amylasen mit einem Gehalt von 50000 PS 50-Einheiten/ g in einer Menge von 0,10 bis 0,20 o/oo, auf das Gewicht der Pflanzen bezogen,
Amyioglucosidase mit einem Gehalt von 200 AG-Einheiten/ g in einer Menge von 0,10 bis 0,70 o/oo, auf das Gewicht der Pflanzen bezogen, und ein 15
hemicelluloiytischer Komplex mit einem Gehalt von 35000 iE/g in einer Menge von 0,05 bis 0,20 o/oo, auf das Gewicht der Pflanzen bezogen.
*0 Wenn die Enzyme gemäß der bevorzugten Ausführungsform der Erfindung auf einen Träger auf Getreidebasis aufgebracht werden, kann das in das Silo bzw. zürn Silieren einzumischende, erfindungsgemäße Mittel etwa 1 kg Enzyme pro kg Träger enthalten. Im Falle eines
iJ löslichen Trägers ändert sich das Konzentrationsverhältnis von Enzym und Träger; es kann zwischen 1/1,5 und 1/4 variieren.
Durch das Einmischen von Ceiluiase in den Träger
wird die Menge der zur Verfügung stehenden, vergärbaren Zucker erhöht, wodurch eine stärkere und schnellere Bildung von Milchsäure hervorgerufen wird. Auf diese Weise wird das pflanzliche Protein besser konserviert. Andererseits wird der Nährwert des Mediums dadurch nur
erhöht.
218995
Zur Veranschaulichung der Vorteile beim Einsatz eines cellulolytischen Komplexes und von Bakterien aus der Familie der Enterobacteriaceae wurden Versuche in Mikrosilos und Minisilos durchgeführt.'Die verschiedenen Konservierungsparameter sowie die Parameter, durch die die pflanzliche Struktur verändert wird/ wurden untersucht. >
1- In Hikrosilos durchgeführte Versuche
Eine erste Reihe von Versuchen wurde im Labor in Mikrosilos durchgeführt, und zwar im Mai unter Verwendung von Luzerne. Die Mikrosilos hatten ein Fassungsvermögen von 1 kg. Die. Luzerne wurde fein .15 zerhackt und dann entsprechend der nachstehenden Versuchsvorschrift siliert:
A- Eine Reihe von Mikrosilos wurde unter Verwendung des Konservierungs-Zusatzstoffes mit"der nachstehenden allgemeinen Zusammensetzung behandelt:
Träger auf Getreidebasis:. 90 I Vormischung: 10 %
25 Di6 vormischung bestand aus:
- einem Bakterienkomplex (5 Milchsäurebakterien auf Lactose als Träger);
- einem Enzymkomplex mit folgenden Bestandteilen:
21899 5 »
-ΑΙ . einer Amylase pilzlichen Ursprungs;
4
. einer Amylase bakteriellen Ursprungs; . einer Amyloglucosidase und . einem hemicellulolytischen Komplex 5 pilzlichenUrsprungs mit einer galacto-
mannanasischen bzw. Galactomannanase-Aktivität als Hauptaktivität und
- einem energiereichen Träger (fein gemahlene 10 Gerste + Lactoserum)
wobei der Bakterienkomplex und der Enzymkomplex
jeweils in einer Menge von 1 % in die Zusammensetzung der Vormischung eingingen. .
Der Konservierungs-Zusatzstoff wurde in einem Anteil von 2 % zu der Luzerne hinzugegeben, was einer Einmischung der Vormischung in einer Menge von 0,2 % entspricht, und auch 1 % Gerste wurde zu der Luzerne hinzugegeben.
B- Eine Reihe von Mikrosilos wurde mit dem gleichen Konservierungs-Zusatzstoff wie bei A behandelt, wobei jedoch eine Celluiase pilziichen Ursprunges, die von Trichoderma viride herrührte, dazu hinzugegeben wurde. Diese Celiulase hatte eine Aktivität C1 von 250 Einheiten/g und eine Aktivität C von 2500 Einheiten/g. (Diese Aktivitäten waren bei pH 4,8 und 50 0C bei einer Reaktionszeit von 20 min bestimmt worden). Diese
Celiulase wurde in einer Menge von 2 g/t, d. h. in einer
-4 Menge von 2 χ 10 Gew.-%, bezogen auf das Gewicht
der frischen Pflanzen (Versuch B)/ bzw. in einer Menge von 200 g/t (d. h. von 0,02 %), bezogen auf das Gewicht der frischen Pflanzen, (Versuch B1) eingemischt.
218995 _ **_'
C- Vergleichs-Mikrosilos:
Zum Vergleich wurde eine Reihe von Mikrosiios mit Luzerne herangezogen, die keinen Konservierungs-Zusatzstoff enthielten: T=O.
Nach 100-tägigem Silieren wurden die Mikrosilos geöffnet. Folgende Parameter wurden bestimmt: pH, Milchsäuregehalt und HL^ /N qesamt · °ie Ergebnisse
/N qesamt · ° werden in der nachstehenden Tabelle gezeigt:
pH Milchsäure (g/kg Trockenmaterial) 1W^ gesamt
Vergleichs- Mikrosilos: T = O 5,66 26 25,15 %
Luzerne + 0,2 % der Vor mischung (A) 4,13 143,68 16,33 %
Luzerne +0,2 % der Vormischung + 2 g/t Ceilu- iase piizlichen Ursprungs (B) 4,32 l 144,75 16,20 %
Luzerne + 0,2 % der Vormischung + 200 g/t Cellul pilziichen Urspr (B1) 169,47 15,02 %
ase ungs
3,73
218995 _ *_
• Man stellt fest, daß die Zugabe einer Cellulase zu dem Bakterien- und Enzymkomplex gemäß der FR-PS 23 90 908 zu einer Verbesserung der Gebrauchsleistung des Konservierungs-Zusatzstoffes führt. Man erzielt eine bessere Konservierung der Pflanzen, die sich beim Vergleich von A und B' in folgendem äußert:
in einer Verminderung des pH-Wertes von 4,13 auf
3/73 (Verminderung um 10 %); 10
in einem Anstieg der Erzeugung von Milchsäure um 15 % und
in einer relativen Verminderung des Verhältnisses
NNH ^N mt um ^ *' ^as zu einer besseren Konservierung des pflanzlichen Proteins führt und auf eine schnelle Säuerung des Siliermediums zurückzuführen ist.
2- In Minisiios durchgeführte Versuche
Diese Versuche wurden im Juni unter Verwendung von Luzerne in Minisilos mit einem Fassungsvermögen
von 150 kg durchgeführt. 25
Die Luzerne wurde fein zerhackt und dann einer Siiierung entsprechend der nachstehenden Versuchsvorschrift unterzogen.
A - Eine Reihe von Minisilos wurde unter Verwendung
des gleichen Konservierungs-Zusatzstoffes· wie bei den Mikrosiios (unter Punkt A) behandelt, wobei die Vormischung in einer Menge von 0,2 % eingemischt wurde.
2 18 99
.«
- 2a -
B- Eine Reihe von Minisilos, wurde unter Verwendung der bei A angegebenen Zusammensetzung und Dosismenge behandelt, wozu die gleiche Celluiase pilzlichen Ursprungs in einer Menge von 2 g/t hinzugegeben wurde.
Nach 100-tägigem Silieren wurden die Minisilos geöffnet. Die Analyse des Gärfutters führte zu folgenden Ergebnissen:
Silos mit 0,2 % Vormischung
Trockenmateriai (IM; %)
E.N.A. (g/kg TM)
pH
23,67
51,25'
4,20
Milchsäure (g/kg TM)
80,62
Essigsäure (g/kg TM)
17,42
esamt
(g/kg IM)
18,40
21,70
3,87
Silos mit 0,2 % Vormischung + Celluiase (2 g/t)
27,27
48,97
3,94
114,40
20,04
13,31
23,12
3,09
AP A 23 K/ 218 995 57 007 18
21899 5
Aus den vorstehenden Ergebnissen geht der Vorteil der Zugabe einer Cellulase zu dem aus der FR-PS 23 90 908 bekannten Bakterien- und Enzymkomplex deutlich hervor»
Die Zugabe der Cellulase führt zu folgenden Ergebnissen:
zu einem geringeren pH-Wert (3,94 gegenüber 4,20, d. h. eine Verminderung um 6 %);
zu einer bedeutenderen Menge an Milchsäure (Zunahme um 41,9 %) und
zu einer viel besseren Konservierung des Proteinanteils des Gärfutters, was durch die Analyse bestätigt wird. In diesem Fall erhält man folgende Ergebnisse:
ein geringeres N.,,, /N -Verhältnis (relative Verminderung um 27,6 %), 3
einen um 6 % erhöhten Proteingehalt und
einen um 20,1 % verminderten Gehalt an ammoniakalischem Stickstoff.
Diese größere Säuerungsgeschwindigkeit kann dadurch erklärt werden, daß die Bakterien schneller über eine bedeutende Menge an leicht in Milchsäure umwandelbaren, vergärbaren Zuckern verfugen können. In dieser Verfügbarkeit von vergärbaren Zuckern findet man die Wirkung der in das Siliermedium eingeführten Cellulase wieder.
Ausführunqsbeispiel
Die Erfindung wird nachstehend an einigen AusfUhrungsbeispielen näher erläutert.
21899 5
In den nachstehenden Beispielen besteht die Mischung auf dem Träger entsprechend dem erfindungsgemäßen Verfahren aus dem in der FR-PS 23 61 828 und/ oder der FR-PS 23 90 908 beschriebenen Komplex, dem in der Erfindung beschriebenen Enzymkomplex, zu dem gramnegative Bazillen aus der Familie der Entere— bacteriaceae, Gattung Erwinia oder Pectobacterium, Gruppe Herbicola/in einer Menge hinzugefügt werden, die einer Einmischung von 10 bis 10 Bazillen/g in die Mischung entspricht.
Beispiele
In Silos mit einem Fassungsvermögen von 4 m3 wurden mit im Juni zu Beginn der Xhrenbildung geerntetem Knäuelgras "Lucifer" Versuche durchgeführt. Die fein gehackten Futterpflanzen wurden unter vier Bedingungen eingelagert:
20 A: Siiierung ohne Behandlung
B: Durchführung der Silierung mit 4 i Ameisensäure/t in bekannter Weise
C: Durchführung der Silierung mit der Vormischung, deren Zusammensetzung in den FR-PSS
25 23 61 828 und 23 90 908 angegeben wird,
wobei zu dem zu .silierenden Futter 7 kg der Kultur von sieben Bakterien auf einem Träger hinzugegeben wurden, deren Eigenschaften in der FR-PS 23 61 828, Seite 7,
Nrn. 1 bis 7, angegeben werden, und wobei
Enzyme in einer Menge von 10 kg/t eingemischt wurden.
218995
1 D: Durchführung der Silierung mit der Vormischung gemäß C unter Zugabe von Bazillen gemäß der Erfindung, d. h. von gramnegativen Bakterien aus der Familie der Enterobacteriäceae,
5 Gattung Erwinia oder Pectobacterium, Gruppe
Herbicola, die mit Enterobacter agglomerans bezeichnet werden. Die Einmischung des Komplexes erfolgte in einer Menge von 10 kg/t.
10 Nach 90 bis 100 Tagen wurden die verschiedenen Silos geöffnet, und die silierten Pflanzen (Gärfutter) wurden analysiert. Man erhielt die nachstehend (in Tabelle II) aufgeführten Ergebnisse.
PH \ Tabelle II «löslich (%) Organische Säuren (g/kg TM) Milch-, säure Propion säure Essig säure Butter säure
Parameter 5,28 gesamt 23 1,38 29,46 Spuren
weisen N. 4,05 Nnh3 r%) 63,80 41,36 Spuren 14,95 0
A: nicht behandelt 4,02 N . W gesamt 45,43 90 0 14,20 0
B: Behandlung mit Ameisensäure (0,4 %) 3,70 17,76 48,10 112 0 18,28 * 0
C: Behandlung geir.äC der FR-PS 23 90 908 7,10 44
D: Erfindungs gemäße Be handlung (C + erfin dungsgemäße Bakterien- " stamme) 14
8
218995
1 Aufgrund der vorstehenden Ergebnisse kann festgestellt werden, daß die Mischung gemäß den FPv-PSS 23 61 828 und 2'3 90 908 schon zu einer Verbesserung bei der Konservierung des Gärfutters führt, wobei sich die
Verbesserung in folgendem äußert:
- in einer Verminderung des pH-Wertes von 5,28 auf 4,o2,
- in einer Erhöhung des Gehalts an Milchsäure von 23 auf 90 g/kg Trockenmaterial und
- in einem besseren Schutz des Proteins, der sich aus einer Verminderung des Verhältnisses N.,„ /N , von 17,7C auf
NH-, gesamt
14 % und aus einer Verminderung des Ver-
haitnisses Nlöslich/Ngesamt VOn 63'80 auf 48,10 % ergibt.
Diese Mischung hat den Vorteil, daß weder Propion-2Q säure noch Buttersäure gebildet wird.
Das erfindungsgemäße Mittel führt zu einer weiteren Verbesserung, die sich in folgendem äußert:
- in einer Verringerung des pH-Wertes von 4,02 auf 3,70,
- in einer Erhöhung des Gehalts an Milchsäure von 90 auf 112 g/kg Trockenmaterial und
- in einem verbesserten Schutz des Proteins, der sich aus einer Verminderung des Verhältnisses Ν..., /N' , von 14 auf 8 % und NH~ gesamt
aus einer Verminderung des Verhältnisses N,«A-,4„u/N fc von 48,10 auf 44 %
löslich/Ngesamt
21899 5 _« _
Auch diese Mischung, d. h. das erfindungsgemäße Mittel, hat den Vorteil, daß weder Propionsäure noch Buttersäure durch Vergärung gebildet wird.
Die Verdaubarkeit und die Aufnahme der Gär-. futterbereitungen wurden bei Schafen geraessen.
Nach Verabreichung der verschieden behandelten Gärfutterbereitungen fand man folgende Ergebnisse:
10 B: Behandlung mit Ameisensäure: 0,64 UF/kg C: Behandlung entsprechend den FR-PSS
23 61 828 und 23 90 908: 0,74 UF/kg D: Erfindurgsgemäße Behandlung: 0,82 UF/kg.
Wie aus Tabelle III ersichtlich ist, führt die Stickstoffbilanz bei im Wachstum befindlichen Tieren zu Ergebnissen, aus denen der Vorteil der Verabreichung von Gärfuttern, die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren hergestellt worden sind, hervorgeht.
21899 5
Tabelle III
Parameter Verfütter ter N N im Kot 3,76 N im Harn Zurückbe haltener N Anteil (%)*
Behandiungs-\ weisen \ (g/Tag) (g/Tac)/Anteil I (%)* 38,8 (g/Tag) Anteil (%)* (cj/Tacr 0,50
A: nicht behan delt 21 7,90 41,6 13 61,9 0,10 5,88
B: Behandlung irit Ameisen säure (0,4 %) 18,9 7,34 38,8 10,4 55 V1 10,5
C: Behandlung ent sprechend"den FR-PSS 23 61 828 und 23 90 908 v 7,07 8,12 47,7 1,8 14,5
D: Erfindungs gemäße Beliand- lung 16,5 5,4 7,70 47 2,40
* auf den verfütterten N bezogen
Im Falle des erfindungsgemäßen Verfahrens beträgt die zurückbehaltene Stickstoffmenge mehr als das Doppelte der Stickstoffmenge, die nach der Behandlung des Silofutters mit Ameisensäure zurückbehalten wird.

Claims (10)

1· Verfahren zur Konservierung und Aufwertung von Grünpflanzen durch Milchsäure-Säuerung nach Hauptpatent Nr. 132 102, bei dem zu den Grünpflanzen vor dem Silieren ein Wirkzusatz für den Abbau von höheren Kohlenhydraten zu vergärbaren Kohlenhydraten, die von den Milchsäuregärung verursachenden Bakterien ausgenutzt werden können, hinzugegeben wird, der au3 einem Enzymkomplex und/oder einem Bakterienkomplex besteht, gekennzeichnet dadurch, daß der Enzymkomplex, gegebenenfalls in Verbindung mit einer Pilz-Amyiase, einer Bakterien-Amylase, einer Amylogluco3idase und/oder einem hemicellulolytischon Komplex pilzlichen Ursprungs, der als hauptsächliche Aktivität eine Galactomannanase-Aktivität aufweist, eine CeI-lulase oder einen cellulolytischen Komplex pilzlichen Ursprungs enthält, wobei der cellulolytische Komplex pilzlichen Ursprungs dazu befähigt ist, die native Cellulose zu Glucose abzubauen, eine Aktivität C1 von 50 bis 0,005 IE und eine Aktivität Cv von 500 bis 0,05 IE pro 100 g der frischen bzw. Grünpflanzen hat und unter den Silierbedingungen mindestens 30 % dieser Aktivität nach Ablauf von 10 Tagen beibehält, und daß der Bakterienkomplex gramnegative Bakterien enthält, die zur Familie der Enterobacteriaceae, Gattung Erwinia oder Pectobacterium, Gruppe Herbicola, gehören, mit Enterobacter agglomerans bezeichnet werden und eine Fermentierung
AP A 23 K/218 57 007 18
218995
von Stärke bewirken, jedoch zur Fermentierung von Maltose nicht befähigt sind.
2 χ 10 bis 2 0/00 Cellulase mit einem Gehalt von 250 IE der Aktivität C1Zg,
0,05 bis 0,20 o/oo Bakterien-Amylase mit einem Gehalt von 250 Einheiten/g,
0,10 bis 0,20 o/oo Pilz-Amylase mit einem Gehalt von 5000 PS 50-Einheiten/g,
0,10 bis 0,70 o/oo Amyloglucosidase mit einem Gehalt von 200 AG-Einheiten/ g und
AP A 23 K/ 218 57 007 18
218995
0,05 bis 0,20 o/oo hemicellulotytischem Komplex mit einem Gehalt von 3500 IE/g
besteht, wobei sich die Angaben in o/oo auf das Gewicht der silierten Pflanzen beziehen.
2« Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß man die Bakterien aus der Familie der Enterobacteriaceae zusammen mit bekannten Bakterien einsetzt, die zum Abbau der höheren Kohlenhydrate zu vergärbaren Kohlenhydraten befähigt sind.
3» Verfahren nach Punkt 1 oder 2, gekennzeichnet dadurch, daß man die Bakterien aus der Familie der
Enterobacteriaceae zusammen mit grampositiven Bakterien einsetzt, die eine Vergärung von Stärke,
Glucose, Mannit, Rhamnose, Saccharose, Amygdalin
und/oder Apabinose bewirken, jedoch nicht zur Fermentierung von Matose, Inosit oder Sorbit befähigt sind.
4. Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß der Enzymkomplex aus
5· Verfahren nach Punkt 1 oder 2, gekennzeichnet dadurch, daß man die Enzyme auf/einem Träger auf Getreidebasis in einer Menge von etwa 1 kg Enzyme pro 9 kg Träger einmischt.
6· Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch,daß die Bakterien auf einem Getreidemehlo enthaltenden Träger gezüchtet werden.
7. Verfahren nach Punkt 1 oder 2, gekonnzeichnet da durch, daß die Bakterien und die Enzyme auf einem aus Getreidestärke, vorgelierter Stärke und Maltohe- xoso ausgewählten, in kaltem V/asser löslichen Träger in einer Menge von 1 kg Bakterien und Enzymen pro 1,5 bis 4 kg Träger eingemischt werden.
8. Verfahren nach einem der Punkte 1 bis 5, gekennzeichnet dadurch, daß die Mengen an Enzymen und Bakterienkultur mit deren Träger im trockenen Zustand, die pro t der zu silierenden Pflanzen hinzugefügt werden, 10 bi3 15 kg betragen und daß dieser Zusatzstoff 10D bis 10 lebende Keime pro g enthält.
AP A 23 K/ 218 57 007 18
218995 .*.
9. Mittel zur Konservierung und Aufwertung von Grünpflanzen, enthaltend Milchsäure erzeugende Bakterienstämme und einen Wirkzusatz für den Abbau von höheren Kohlenhydraten zu vergärbaren Kohlenhydraten, der aus einem Enzymkomplex und/oder einem Bakterienkomplex besteht, gekennzeichnet dadurch, daß der Enzymkomplex, gegebenenfalls in Verbindung mit einer Pilz-Amylase, diner Bakterien-Amylase, einer Amyloglucosidase und/oder einem hemicellulolytischen Komplex pilzlichen Uraprungs, der als hauptsächliche Aktivität eine Galactomannanase-Aktivität aufweist, eine Cellulase oder einen cellulolytischen Komplex pilzlichen Ursprungs enthält, wobei der cellulolytische Komplex pilzlichen Ursprungs dazu befähigt i3t, die native Cellulose zu Glucose abzubauen, eine Aktivität C1 von 50 bis 0,005 IE und eine Aktivität C von bis 0,05 IE pro 100 g der frischen bzw. Grünpflanzen hat und unter den Silierbedingungen mindestens 30 % dieser Aktivität nach Ablauf von 10 Tagen beibehält, und daß der Bakterienkomplex gramnegative Bakterien enthält, die zur Familie der Enterobacteriaceae, Gattung Erwinia oder Pectobacterium, Gruppe Herbicola, gehören, mit Enterobacter agglomeran3 bezeichnet werden und eine Fermentierung von Stärke bewirken, jedoch zur Fermentierung von Maltose nicht befähigt sind.
10« Mittel nach Punkt 9, gekennzeichnet dadurch, daß die gramnsgativen Bakterien.aus der Familie der Enterobacteriaceae in Verbindung mit Bakterien
AP A 23 K/ 218 57 007 18
218995 Λ
enthalten sind, die dazu befähigt sind, die höheren Kohlenhydrate zu vergärbaren Zuckern abzubauen, insbesondere in Verbindung mit grampositiven Bakterien, die eine Fermentierung von Stärke, Glucose, Mannit, Rhamnose, Saccharose, Amygdalin und/oder Arabinose bewirken, jedoch zur Fermentierung von Maltose, Inosit oder Sorbit nicht befähigt sind.
DD80218995A 1979-02-12 1980-02-11 Verfahren und mittel zur konservierung und aufwertung von gruenpflanzen DD149015A6 (de)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR7903499A FR2448299A2 (fr) 1979-02-12 1979-02-12 Conservation et valorisation de vegetaux en vert et de sous-produits humides des industries agro-alimentaires
FR7915887A FR2459006A2 (fr) 1979-06-21 1979-06-21 Procede et produit pour la conservation et la valorisation de vegetaux en vert et de sous-produits humides des industries agro-alimentaires

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DD149015A6 true DD149015A6 (de) 1981-06-24

Family

ID=26221011

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DD80218995A DD149015A6 (de) 1979-02-12 1980-02-11 Verfahren und mittel zur konservierung und aufwertung von gruenpflanzen

Country Status (21)

Country Link
AR (1) AR219435A1 (de)
AT (1) AT368842B (de)
AU (1) AU537458B2 (de)
BG (1) BG48331A3 (de)
CA (1) CA1127101A (de)
CH (1) CH643988A5 (de)
DD (1) DD149015A6 (de)
DE (1) DE3005020A1 (de)
DK (1) DK57980A (de)
ES (1) ES488462A2 (de)
GB (1) GB2046567B (de)
GR (1) GR74002B (de)
HU (1) HU185784B (de)
IT (1) IT1212401B (de)
LU (1) LU82150A1 (de)
NL (1) NL8000876A (de)
PL (1) PL122629B1 (de)
PT (1) PT70817A (de)
RO (1) RO85921B (de)
SE (1) SE452244B (de)
YU (1) YU43215B (de)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0108568A1 (de) * 1982-11-02 1984-05-16 Suomen Sokeri Oy Zusammensetzung und Verfahren für das Silieren von Futter und Korn

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2159388A (en) * 1984-06-01 1985-12-04 Pan Britannica Ind Ltd Preservation of silage
DE3916563A1 (de) * 1989-05-20 1990-11-22 Atochem Werke Gmbh Kombinationspraeparat und verfahren zum einsaeuern von gruenfutter und verhindern von aeroben abbauvorgaengen in gaerfutter
WO1991015966A1 (en) * 1990-04-18 1991-10-31 Ssv-Development Oy Enzyme treated forage for silage
LT3208B (en) * 1992-04-10 1995-03-27 Ssv Dev Oy Enzyme products for use in the improvement of feed value and conservation of fibrous crops
US5981835A (en) * 1996-10-17 1999-11-09 Wisconsin Alumni Research Foundation Transgenic plants as an alternative source of lignocellulosic-degrading enzymes
US6818803B1 (en) 1997-06-26 2004-11-16 Wisconsin Alumni Research Foundation Transgenic plants as an alternative source of lignocellulosic-degrading enzymes

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE302239B (de) * 1960-03-29 1968-07-08 N Nilsson
FR2390908A2 (fr) * 1977-05-18 1978-12-15 Deral Sa Procede et produit pour la conservation et la valorisation de vegetaux en vert et de sous-produits humides des industries agro-alimentaires
IT1109471B (it) * 1976-08-17 1985-12-16 Deral Sa Procedimento e prodotto per la conservazione e la valorizzazione di vegetali a verde e dei sotto prodotti umidi delle industrie agro alimentari
FR2361828A1 (fr) * 1976-08-17 1978-03-17 Deral Sa Conservation et valorisation de vegetaux en vert et de sous-produits humides des industries agro-alimentaires
GB1547063A (en) * 1977-07-07 1979-06-06 Salen Interdevelop Ab Process for the biological ensiling of vegetable and/or animals materials

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0108568A1 (de) * 1982-11-02 1984-05-16 Suomen Sokeri Oy Zusammensetzung und Verfahren für das Silieren von Futter und Korn

Also Published As

Publication number Publication date
DE3005020C2 (de) 1991-08-01
CA1127101A (fr) 1982-07-06
IT1212401B (it) 1989-11-22
RO85921A (ro) 1985-01-24
DE3005020A1 (de) 1980-08-28
AT368842B (de) 1982-11-10
SE452244B (sv) 1987-11-23
DK57980A (da) 1980-08-13
AU537458B2 (en) 1984-06-28
GB2046567A (en) 1980-11-19
YU34980A (en) 1983-02-28
ES488462A2 (es) 1980-10-01
HU185784B (en) 1985-03-28
PL122629B1 (en) 1982-08-31
AU5541280A (en) 1980-08-21
BG48331A3 (en) 1991-01-15
RO85921B (ro) 1985-01-30
GR74002B (de) 1984-06-06
LU82150A1 (fr) 1980-05-07
AR219435A1 (es) 1980-08-15
PL221935A3 (de) 1980-10-20
NL8000876A (nl) 1980-08-14
GB2046567B (en) 1983-11-30
IT8019844A0 (it) 1980-02-11
CH643988A5 (fr) 1984-07-13
YU43215B (en) 1989-06-30
PT70817A (fr) 1980-03-01
ATA74580A (de) 1982-04-15
SE8001062L (sv) 1980-08-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP3037437B2 (ja) 反芻動物飼料用酵素添加物
US5432074A (en) Formulation for treating silage containing β-1,4-xylanase and β-1,3-xylosidase but essentially free of β-1,4-glucanase and β-1,4-cellobiohydrolase, and one or more lactic acid-producing bacteria
DE112012005586B4 (de) Verzuckernde Enzymzusammensetzung und Verfahren zur Herstellung einer verzuckerten Lösung unter Verwendung der selbigen
DE69634756T2 (de) Neue xylanaseverbindung und verfahren zu deren herstellung
DE2736880A1 (de) Verfahren zur konservierung und aufwertung von gruenpflanzen und dafuer geeigneter zusatz
DE2308596A1 (de) Enzyme und verfahren zu ihrer herstellung
DE2453111A1 (de) Verfahren zur herstellung von neuen enzymen
EP0942654B1 (de) Verfahren zur herstellung von frischhalte-backwaren
DD149015A6 (de) Verfahren und mittel zur konservierung und aufwertung von gruenpflanzen
DE3443204A1 (de) Biochemisches verfahren und zusammensetzung
EP0268575A2 (de) Mittel zur Aktivierung fermentativer Prozesse sowie Verfahren zum Beschleunigen des fermentativen Abbaues von Naturstoffen
DE2261177C3 (de) Behandeltes Pflanzenmaterial
Stewart et al. The implications of the loss and regain of cotton‐degrading activity for the degradation of straw by Ruminococcus flavefaciens strain 007
EP0456033B1 (de) Verfahren zur Herstellung von Xylanase
DE3005365A1 (de) Verfahren zur verarbeitung von tabak
DE3137534A1 (de) Verfahren zur herstellung von zuckersirup und von daraus stammenden produkten aus pflanzlichen cellulose-substraten
LU505277B1 (de) Ein verfahren zur herstellung von hitzebeständiger xylanase und deren anwendung
WO1997005235A1 (de) Verfahren zur herstellung eines kombinationspräparats zum silieren von grünfutter
DD296407A5 (de) Verfahren zur trockenfutterverarbeitung
DE4034749A1 (de) Kombinationspraeparat und verfahren zum einsaeuern von gruenfutter und verhindern von aeroben abbauvorgaengen in gaerfutter
RU2705002C2 (ru) Композиция для получения высококачественных кормов из козлятника восточного и бобово-злаковых травосмесей на его основе
DD291688A5 (de) Verfahren zur anwendung eines spezifischen enzymkomplexes zur silierung von gruenfutter
DE19508871C2 (de) Verwendung eines wäßrigen Nährmediums zur Vermehrung von Propionsäurebakterien oder eines Gemisches von Propionsäurebakterien und Milchsäurebakterien unter unsterilen Bedingungen zum Einsatz als Siliermittel
DE1767737A1 (de) Verfahren zur Herstellung von Cellulase
RU1799395C (ru) Штамм бактерий BacILLUS acIDocaLDaRIUS, используемый дл силосовани соломы

Legal Events

Date Code Title Description
ENJ Ceased due to non-payment of renewal fee