CZ313495A3

CZ313495A3 - Compounds of secomacrolide and secoazalide class and process for preparing thereof

Info

Publication number: CZ313495A3
Application number: CZ953134A
Authority: CZ
Inventors: Gorjana Lazarevski; Gabrijela Kobrehel
Original assignee: Pliva Pharm & Chem Works
Priority date: 1995-03-27
Filing date: 1995-11-27
Publication date: 1997-08-13
Also published as: CN1133294A; BG100164A; RU2130936C1; SI9500358A; CA2164152C; PL312209A1; RO116017B1; CA2164152A1; BG62333B1; SK152195A3; EP0735041A1; HRP950145A2; CN1053911C; US5721346A; JPH08269078A

Description

Nové sloučeniny ^sekomakrolidové a sekoazalidové třídy a způsob jejich přípravy'’

Oblast techniky

Vynález se týká nových sloučenin sekomakrolidové a sekoazalidové třídy, potenciálních meziproduktů při přípravě nových makrolidových a azalidových antibiotik i způsobu jejich přípravy.

Dosavadní stav techniky

Erythromycin A je hodnotné makrolidové antibiotikum, jehož struktura je charakterizována čtrnáctičlenným laktonovým kruhem majícím ketoskupinu v poloze C-9 (McGuire, Antibíot. Chemother., 1952, 2:281). Po více než Čtyřicet let byl erythromycin A ceněn jako bezpečné a účinné antimikrobiální činidlo při léčení gram-pozitivních infekcí. Principiální nevýhodou pro používání erythromycinu A při léčení lidí je omezená oblast působení proti gram-negativním bakteriálním kmenům, u mnoha pacientů se projevovala špatná snášenlivost projevující se žaludečními potížemi a ztráta aktivity v kyselém prostředí spolu se vznikem inaktivního metábolitu anhydroerythromycinu. Spirocyklizace aglykonového kruhu erythromycinu A je úspěšně inhibována chemickou přeměnou C-9 ketonových nebo hydroxylových skupin v poloze C-6 a/nebo C-12. .Například .oximací. C-9. ketonu hydroxylaminhydrochloridem, po_ níž následuje Beckmannův přesmyk získaného 9(£)-erythromycin A oximu a redukcí utvořeného bicyklického 6,9-imino etheru še získá 9-deoxo-9a-aza-9a-homoerythromycin A, první makrolid mající patnáctičlenný azalaktonový kruh (Kobrehel G. a kol., US pat. 4,328,334,5/1982). Reduktivní methylací 9a-aminoskupiny Eschweiller-Clarkovým způsobem se získá 9-deoxo-9a-methyl-9a-aza-9a-homoerythromyc.in A (AZITHROMYCIN) (Kobrehel G. a kol., BE pat. 892 357,7/1982), prototyp nové azalidové třídy antibiotik. Kromě širokého antimikrobiálního rozmezí včetně gram-negativních bakterií a intracelulárních mikroorganismů, je azithromycin též charakterizován specifickým mechanismem transportu do místa aplikace, dlouhým biologickým poločasem a krátkým terapeutickým obdobím.

Nedávno byla popsána hydrolýza a alkoholýza C-l laktonu erytromycinu A a B, přičemž docházelo ke tvorbě odpovídajících lineárních seco-kyselin nebo esterů (Martin S. F., J. Am. Chem. Soc. , 113, 5478-5480). Dále byly popsány zásaditými látkami katalyzované přeměny, jež vedou k otevření makrolidového kruhu za tvorby C-l karboxylatu (Vaddel S. T. a Blizzard T. A., VO 94/15617, 7/1994). Dále byl také popsán vznik nových makrolidových a azalidových kruhů, a to spojením eašt 8a-aza-(C-l/C-8) a 9a-aza-(Cl/C-9) fragmentů 9-deoxo-8a-aza-8a-homoerythromycinu

A i 9-deoxo-9a-aza-9a-homoerythromycinu A s různými fragmenty, jež se stávají west částí molekuly. Důraz se pokládá na to, že výše uvedený získaný C-l/C-9 lineární fragment se liší od odpovídajícího azythromycinového fragmentu vzhledem k přídavné ethylenové skupině na uhlíkovém atomu C-9.

Podstata vynálezu

Podle naších znalostí v dané oblasti techniky nebyly dosud popsány lineární 9a-azalidové fragmenty makrolidových antibiotik azalidové třídy obecného vzorce I:

kde

R-£ a I?2 jsou stejné nebo znamenají H nebo CHj,

R₃ a R4 jsou stejné nebo znamenají H nebo CH₃,

Y je 0 nebo NH a

Z je CH₃ nebo CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅ skupinu nebo jejich farmaceuticky přijatelné přídavné soli s anorganickými nebo organickými kyselinami. Substituenty R₃a R^ charakterizují dvě epimerní formy uvedené sloučeniny Obecného vzorce I, jež se liší pouze strukturně v konfiguraci chirálního centra na uhlíku C-£í. Dokonce i když není uhlík C-Q stereochemického charakteru, se sloučeninám, kde R₃ znamená CH₃ skupinu, přisuzuje (R)-konfigurace na základě podobnosti chemických přeměn těchto sloučenin a výchozího 6,9-im.ino etheru majícího C-8(R)-konfiguraci.

Vynález se také týká způsobu a jejich dosud nepopsaných meziproduktů při přípravě sloučenin obecného vzorce I. Struktura meziproduktů je znázorněna obecným vzorcem II:

CH_} ^ox<

h£''^oot₃ kde

X je O nebo NOR?, kde Ry je H, acylová nebo arylsulfonová skupina,

R₃ a R₄ se liší a znamenají H nebo CH₃

R5 ^a Rg jsou stejné nebo se liší a znamenají H nebo acylovou skupinu,

Y je 0 nebo NH, a

Z je CH₃, CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHR₉ nebo

CH (CH₃)CH (OR₃q)COH (CH₃) CH (OR_1:L) C₂H₅ skupina,

Rg je H nebo acylová skupina,

Rg je H, acylová nebo arylosulfonová skupina, a

RlO a R^ jsou stejné a znamenají H nebo acylovou skupinu.

Vynález se též vztahuje na jejich farmaceuticky přijatelné soli s anorganickými nebo organickými kyselinami.

Obecně lze říci, že u těchto nových sloučenin obecných vzorců I a II, east část molekuly včetně obou cukrů je Strukturně identická s korespondujícím C-l/C-9 fragmentem makrolaktonového kruhu erythromyčinu A 6,9-iminoetheru nebo 9-deoxo-9a-aza-9a-homoerythromycinu A, kdežto vest část znamená C-l methylesterovou skupinu nebo nesubstituovaný nebo substituovaný C-10/C-15 fragment výchozího iminoetheru s terminální nesubstituovanou nebo substituovanou primární skupinou, nebo znamená stejný fragment inverzně vázaný na C-l atom, poskytující místo C-l laktonu, nové, dotud nepopsané C-l amidy.

Nové 9a-azalidové fragmenty obecného vzorce I:

kde

R^ a R2 jsou stejné nebo znamenají H nebo CH₃, a R4 se liší a znamenají H nebo CH₃ ,

Y je 0 nebo NH, a

Z je CH₃ nebo CH(CH₃)CH(0H)C0H(CH₃)CH(0H)C₂H₅ skupinu, a jejich farmaceuticky přijatelné přídavné soli se získávají způsobem, při němž se výchozí erythromycin A 6,9-iminoether obecného vzorce III:

A podrobí

A) působení kyseliny za podmínek hydrolýzy iminoskupiny a poté, pokud je to vhodné, N- a/nebo O-acylaci s anhydridy kyseliny nebo chloridy a dále, je-li to vhodné, solvolýze, nebo

B) reakci s hydroxylaminhydrochloridem za přítomnosti vhodných anorganických nebo organických zásaditých látek v jednom nebo ve dvou reakčních krocích, a dále pak, je-li to vhodné,

Bl) působení vhodných anorganických nebo organických kyselin za podmínek hydrolýzy hydroxyiminoskupiny a dále pak, pokud je to vhodné, N- a/nebo O-acylaci a pak solvolýze, jak je popsáno pod bodem A)..,., nebo, je-li ..to. vhodné

B2) N- a/nebo O-acylaci anhydridy kyselin a chloridy chloridy, poté pak, je-li to vhodné, solvolýze nebo, pokud je to vhodné, B3) působení vhodných organických nebo anorganických zásaditých látek za podmínek vnitřní aminové acylací a dále pak, je-li to vhodné, N- a/nebo O-acylaci anhydridy kyselin nebo chloridy a pak, je-li to vhodné, solvolýze, čímž se získají sloučeniny obecného vzorce II:

X kde

X je O nebo NOR-ý, kde Ry je H, acylová nebo arylsulf onová skupina,

R^ a R^ se liší a znamenají H nebo CH₃,

Rg a Rg jsou stejné nebo se liší a znamenají H nebo acylovou skupinu,

Y je 0 nebo NH, a

Z je CH₃, CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ nebo CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR_1:L)C₂H₅ skupinu,

Rg je H nebo acylová skupina, a

Rg je H, acylová nebo arylsulfonová skupina,

Rjq a R-q jsou stejné a znamenají H nebo acylovou skupinu, a jejich farmaceuticky přijatelné přídavné soli s anorganickými nebo organickými kyselinami, jež, pokud je to vhodné, se podrobují katalytické redukci a reduktivní N-alkylaci s vhodnými přítomnosti vhodných redukčních, činidel, přičemž se získají s-1 oučeniny obecného- vzorce. I, kde R^, R₂, R₃_, . R ^., Y a. Z mají výše uvedený význam. Přípravu těchto nových sloučenin I a II lze znázornit reakčními schématy 1 a 2.

Sloučenina obecného vzorce II, kde X a Y jsou stejné a znamenají 0, R₃ je CH₃ a R^ je H, R5 a Rg jsou stejné a znamenají H, Z je CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR₉, kde R_g a R₉ jsou stejné a znamenají H (schéma 1, 2a) se získá podle způsobu A) působením kyseliny, s výhodou ledové kyseliny pak, je-li alkylačními to vhodné, činidly za octové, na erythromycin A 6,9-iminoether obecného vzorce III za podmínek hydrolýzy iminu za teploty místnosti během třech dnů, čímž se rozštěpí vazba C-9/9a-N, nebo se působí anorganickými nebo organickými kyselinami za podmínek hydrolýzy hydroxyiminoskupiny na sloučeninu obecného vzorce II, získané podle způsobu B) , kde X je NOR-y, přičemž R-y je H, R₃ je CH-j a R4 je H, Rj a R^ jsou stejné a znamenají H, YjeO aZje CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHR₉, kde R_g a R₉ jsou stejné a znamenají H. S výhodou se provádí hydrolýza hydroxyiminové skupiny tak, že se směs methanolu a HC1 ponechá stát za teploty místnosti po dobu deseti dnů. Získaný produkt mající nový pětičlenný laktonový kruh se izoluje běžným gradientovým extrakčním způsobem (pH 5,5, 6,5 a 8,3) po němž následuje odpaření spojených organických extraktů při pH 8,3 a následně se podrobuje působení N- a/nebo O-acylaci anhydridy kyselin nebo chloridů.

Acylační reakce získaného laktonu s anhydridem kyseliny se provádí běžným způsobem (Jones a kol., J. Med. Chem. 1971, 5:631 a Banaszek a kol., Rocy. Chem., 1969, 43:763), za získání korespondujících tetraalkanoylových derivátů. Tak například acylací anhydridem kyseliny octové v inertním rozpouštědle při této reakci, s výhodou v pyridinu, za teploty místnosti po době sedmi dnů se získá 2',4,11-0,10-N-tetraacetat obecného vzorce II, kde X a Ϋ jsou stejné a znamenají 0, R₃ je CH₃ a je H, Rg a Rg jsou stejné a znamenají COCHg, Z je CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉, kde R_g a R_g jsou stejné a znamenají.COCHg (Sloučenina 2b). Ponechá-li se po. dobu třech -dnů -s-tá-t 2- , 4-^,/,-lL-O-N.--te-traacetat v methanolu za teploty místnosti a solvolýzy esterové skupiny v poloze 2', dochází ke vzniku 4, 11-0,10-N-triacetatu obecného vzorce II, kde Rg je H, a X, Y, Z, R₃, R^, Rg, R_g a Rg mají výše uvedený význam u tetraacetatu (Sloučenina 2c). Acylace chloridem kyseliny, s výhodou 4-brombenzoylchloridem, se provádí v inertním rozpouštědle při reakci, s výhodou v diethyletheru, za teploty od 0 °C do 5 °C během třech hodin, přičemž se získá

10-N-brombenzoyl derivát obecného vzorce II, kde X a Y jsou stejné a znamenají 0, Rj je CH₃ a R4 je H, Rg a Rg jsou stejné a znamenají H, Z je CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHR₉, kde ( Rg je H a Rg je 4-brom-benzoylová skupina (Sloučenina 2d) .

» Reakce erythromycínu A 6,9-imínoetheru obecného vzorce III s hydroxylaminhydrochloridem se provádí podle způsobu B) v inertním rozpouštědle při reakci, za přítomnosti anorganických nebo organických zásaditých látek, v jednom nebo dvou reakčních stupních při teplotě od 25 do 70 °C. Při provádění reakce v jednom stupni dochází k rozštěpení C-9/9a-N vazby za vzniku hydroxyliminové skupiny na C-9 atomu a primární aminoskupiny na C-10 atomu - získá se sloučenina obecného vzorce II, kde X je NORj, kde Ry je Η, Y je 0, R₃ je CH₃ a R4 je H, Rg a Rg jsou stejné a znamenají H, a Z je CH(C₂Hg)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHR₉, kde Rg a R₉ jsou stejné a znamenají H jako produkt (schéma 1, 3a). Reakce se provádí s 1,1 až 30ti molárním přebytkem hydroxyíaminhydrochloridu, s výhodou s 5,2 molárním přebytkem. Typická inertní rozpouštědla při této reakci jsou C1-C4 alkoholy, s výhodou methanol. Jako kyselé akceptory lze použít anorganické zásadité látky, jako uhličitany alkalických kovů nebo hydrogenuhličitany, s výhodou uhličitan sodný nebo uhličitan • draselný, nebo organické zásadité látky jako je pyridin, jež po £ - ...... ' -v _T... .... ...

* danou dobu působí též při reakci jako inertní rozpouštědla. Izolace se provádí za použití obvyklých extrakčních způsobů organickými rozpouštědly, s výhodou chlorovanými uhlovodíky, s výhodou methylenchloridem při pH 10. Provádí-li se reakce ve dvou s-t-upních, tj-. v- prvním -stupni se erythr.omycin A 6,9-iminoether obecného vzorce III podrobí působení alespoň 1,3 molárního přebytku výše popsaných anorganických nebo organických zásaditých látek v reakčním inertním rozpouštědle, s výhodou v C^-C₂ alkoholech, výhodně v methanolu, pod refluxním proudem reakční směsi, dokud nevymizí iminoether (TLC), poté se získaná směs produktu izoluje extrakčním způsobem, s výhodou pomocí chlorovaných uhlovodíků, s výhodou methylenchloridem při pH 8a pka se ve druhém reakčním stupni podrobí surový produkt působení hydroxylaminhydrochloridu za přítomnosti anorganických nebo organických zásaditáých látek, jak je výše popsáno, reakce není jednoznačná. Směs získaného produktu se izoluje gradientovou extrakcí organickými rozpouštědly, s výhodou methylenchloridem při pH 8 a 10. Koncentrováním spojených organických extraktů při pH 10 se získá směs dvou produktů, přičemž jeden z nich je identický se sloučeninou (3a) a druhý je jeho C-8 (S¹)-enantíomer obecného vzorce II, kde X je NOR?, kde Ry je Η, Y je 0, Rj je H a R| je CH^, R$ a Rg jsou stejné a znamenají H, a Z je skupina CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR₉, kde R_g a R₉ jsou stejné a znamenají H (schéma 2, 3b). Po odpaření spojených organických extraktů při pH 8 se kromě sloučenin (3a) a (3b) také získají dva izomerní C-8 oximy obecného vzorce II, kde X je NORy,. kde Ry je Η, Y je 0, R₃ a R4 se liší a znamenají H nebo CH₃skupinu, R5 a Rg jsou stejné a znamenají H, Z je CH₃ (schéma 2, 7a a 7b) jako výsledek, simultánního štěpení C-9/9a-N vazby a makrocyklického C-l laktonu za vzniku C-l metoxylatu. Získané sloučeniny (7a) a (7b) se oddělí chromatograficky na koloně se silikagelem za použití systému CHCI₃:CH₃OH:konc.NH^OH v poměru 6:1:0,1 a pak, pokud je to třeba, se podrobí katalytické redukci.

Oximy (3a) a (3b) s koncovými aminoskupinami se podrobí, je-li to třeba, N- a/nebo 0-acylaci anhydridy kyselin a chloridů jak je popsáno ve způsobu A) a poté, je-li to třeba, solvolýze. Tak např. acylací sloučeniny (3a) acetanhydridem se získá 2' ,4'' ,ll-0,10-N-tetraacetyl 9(£)-acetoxim obecného vzorce II, kde X je NORy, kde Ry je skupina C0CH₃, R₃ je CH₃a R4 je H, R^ a Rg jsou stejné a znamenají C0CH₃, YjeOaZje skupina CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHR₉, kde R_g a R₉ jsou stejné a znamenají COCHj (Sloučenina 3c), jež se, pokud je to třeba, podrobí solvolýze, s výhodou methanolýze, přičemž se získá sloučenina obecného vzorce II, kde X je NORy, kde Ry je H, R₃ je CH₃ a R₄ a Rj jsou stejné a znamenají H, Rg je COCH₃,

Y je'Ο 'Va Z -je ''skupina CH(C₂H₅)COH(C'H₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHRg\¹' k‘ďé .Rg· l*aif.Rp-θ’-jsou*« stejné ** a «‘žhainehaj í⁴d COCH^'/^; (Sloučenina3d)l ! Reagování ni *i->slt)učěnin <(3a) »á-5í'(3b)’' s-'“óhlb±i’dý^ při^w reakci v inertním' · rozpouštědle^’? za’ ' '‘přítomnosti* anorganických ^nebo organických, zásaditých látek“ při’’· teplotě-5 od’ 0 ' do'⁴ 25 °C še získají ^fmbrió-, dišubštitíiované· aeýlděriváty které’; jerli^tó :třeba, se separuj íi chromatografický na koloně se^ šilikágeléiíi^ža ipoužití -rozpouštědlového¹! systémů⁷ CH₂C1₂: ČH₃ÓH^J. “ Výhodné:' je (reagování* sloučeniny -.‘(3a)'- s·'- tóšylchloriděm, za přítomnosti

NaHCO₃ v acetonu po· dobu třech hodin, kdy? še¹* získajísloučeniny obecného vzorce II, kde X je NORy, kde Rý je’· tosyl , Ř₃ jé CH₃ a R4, Rg a Rg jsou stejné a znamenají Η·, Y je 0 a Z jé skupina CH(C2H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)ŇHR₉, kde Ř_g jé“H a R_g je tosyl (Sloučenina 3e) nebo kde X · je NOR?, kde Ry je H, R₃^je:CH₃a R4, Rg a Rg jsou stejné a znamenají Η, Y je Ó a Z je skupina CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉, kde R_g je Ha R_g je·tosyl (Sloučenina 3f) . '»

Pokud je to třeba, sloučeniny (3a) a (3b) se podrobí působení zásaditých látek za podmínek vnitřní aminové acylace a poté, je-li to třeba, katalytické redukci. Vnitřní acylační reakce’· s výše uvedenými primárními aminy’ se provádí za teploty místnosti v přítomnosti ahOlgánických a organických zásaditých látek.-···§; výhodou je₃tó hydroxid amonný, hydroxid sodný nebo draselný^1-' nebo tříethylamiríl- kdy doj dé k vnitřní migraci C-l acyloxyskupiny z’ kyslíku na koncovou aminoskupinu, dojde ke zvýšení' inverze C-10'/C-15 wést fragmentu molekuly a ke vzniku

C-lí'.amidu:, .o.běcňéhó. vzorce II, kde X je NORy, kde Ry je H, Rg -a-R-4-£—se—liší - á-žnamenají. Hi nebo CH₃, Rg a Rg jsou stejné a znamenají⁷ H,' 1 Y^f je NH a Y je skupina

CH(CH5)CH'(OR₁₀)COH(ČH₃)eH(ÓR₁₁)C₂H₅, kde R₁₀ a R_n jsou stejné a znamenají’?? H’ (schéma ”2·., 4a'¹ a 4b) , jež se, je-li to třeba, podrobíFN-? na/hěbó-O^!-acýÍacidanhydřidy kyselin, nebo, pokud je to-třeba; katalytické»redukci'.?/’

’. ,’^υ Reakce * ’N- a/ňebo O-acylace sloučenin (4a) a (4b) s ánhýdřidy ' kyselin * podle způsobu Á) poskytuje

2',4 -O-diacyl-lN-(2,4-0-díacyl)-9(£)acyloxim. Tak například acylací sloučeniny (4a) s acetanhydridem v pyridinu za teploty místnosti během deseti dnů, se získá sloučenina obecného vzorce II, kde X je NOR?, kde R? je COCH₃ skupina, R₃ je CH₃ a R₄ je H, R$ a Rg jsou stejné a znamenají COCHj, Y je NH a Z je skupina CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅, kde R_lo a R_u jsou stejné a znamenají COCH₃ (Sloučenina 4a). Je-li to třeba, sloučenina (4c) se podrobí solvolýze, s výhodou methanolýze, čímž dojde k deacylaci v poloze 2^Z nebo 2' - a utvoří se 9-oximesterová skupina, přičemž se získají sloučeniny obecného vzorce II, kde X je NOR?, kde R? je COCHj skupina, Rj je CH₃a R₄ je H, R5 je H, Rg znamená COCH?, Y je NH a Z je skupina CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅, kde R₁₀ a R_n jsou stejné a znamenají COCH₃ (Sloučenina 4d), nebo X je NOR? kde R? je H, R₃ je CH₃ a R^ je H, Rj je H, Rg je COCH₃, Y je NH a Z je skupina CH(CH₃)CH(OR-_L0)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅, kde R₁₀ a R_lt jsou stejné a znamenají C0CH₃ k tosylovým derivátům (3e) monosubstituované acylderiváty Výhodně se reakcí (4a) s (Sloučenina 4e). Analogicky a (3f) lze také získat reakcí s chloridy kyselin, tosylchloridem v acetonu za přítomnosti NaHCO₃ za teploty místnosti po dobu 12 hodin získají tosylderiváty obecného vzorce II, kde X je NOR?, kde R? je tosyl, R₃ je CH3, R^, Rg a Rg znamenají Η, Y je NH a Z je skupina CH(CH₃) CH(OR?q) COH(CH₃)CH(OR£jJ C₂'Hg , kde R?q a R-[ý’ jsou*⁴ stejné a znamenají H (Sloučenina 4f).

Katalytická redukce výše uvedených oximů (4a, 4b, 7a a 7b) se provádí v reakčním inertním rozpouštědle za přítomnosti vzácných kovů nebo jejich oxidů jako katalyzátorů za teploty místnosti a za tlaku vodíku od 5 x 10$ do 7 x 10^ Pa po dobu od 10 hodin do 3 dnů. S výhodou se reakce provádí v ledové kyselině octové za použití oxidu platičitého jako katalyzátoru po dobu 10 hodin ¹ za tlaku vodíku 7 x 10^ Pa. Produkt se pak izoluje obvyklým způsobem gradientově extrakce (pH 5,5, 9,0 a 10,5) s chlorovanými uhlovodíky, s výhodou s chloroformem, poté následuje odpaření spojených organických extraktů při pH 10,5. Získané aminy obecného vzorce I, kde a R2 jsou stejné a znamenají H, R₃ je CH₃, R4 je H, nebo R₃ je Ha R4 je CH₃, Y je O nebo NH a Z je CH₃ nebo skupina CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅ (schéma 2, 5a, 5b, 8a a 8b),se, je-li to třeba, podrobí reduktivní N-alkylaci.

S výhodou se reduktivní N-methylace provádí s 1 až 4 ekvivalenty formaldehydu (37 %) za přítomnosti stejného nebo dvojnásobného množství kyseliny mravenčí (98 až 100%ní) v reakčním inertním rozpouštědle jako jsou halogenované uhlovodíky, s výhodou chloroform při teplotě varu reakční směsi pod zpětným chladičem po dobu od 2 do 20 hodin, což závisí na použitém aldehydu nebo kyselině. Získaný produkt se izoluje obvyklým způsobem gradientově extrakce (pH 5,0 a 9,5) po níž následuje odpařeni spojených organických extraktů při pH 9,5 a pokud je to třeba, purifikuje se chromatograficky na silikagelové koloně za použití systému CHCI₃:CH₃OH:konc.NH^ OH v poměru 6:1:0,1, čímž se získají dimethylaminoderiváty obecného vzorce I, kde a R₂ jsou stejné a znamenají CH₃, R₃je CH₃ a R4 je H, nebo R₃ je H a R4 je CH₃, Y je 0 nebo NH a Z je CH₃ nebo skupina CH(CH₃)CH(0H)C0H(CH₃)CH(0H)C₂H^ (schéma 2, 6a, 6b, 9a a 9b).

Farmaceuticky přijatelné přídavné soli, jež jsou také předmětem tohoto vynálezu, se získají reakcí sekoderivátů obecných vzorců I a II, s alespoň ekvimolárním množstvím vhodných anorganických nebo organických kyselin jako je kyselina chlorovodíková, jodovodíková, sírová, fosforečná, octová., propionová, . trifluoroctová, maleinová, citrónová, stearová, -.-jantarová,- . ..ethyl jantarová.,. methansulfonová,.

benzensulfonová, p-toluensulfonová, laurylsulfonová atd., přičemž se při reakci používá inertního rozpouštědla. Tyto přídavné soli se izolují filtrací, a pokud jsou nerozpustné v reakčním inertním rozpouštědle, používá se k jejich izolaci srážení za pomoci nerozpustné látky, nebo se odpařuje rozpouštědlo, přičemž se většinou používá lyofilizačního způsobu.

Při provádění reakcí podle výše uvedených kroků se otevírá patnáctičlenný azalaktonový kruh erythromycinu A 6,9-iminoetheru a získávají se sekoderiváty s rozmanitými velmi reaktivními koncovými funkčními skupinami, jež také umožňují přípravu celé řady nových makrolidů nebo azalidů s modifikovaným makrocyklickým aglykonem. U sloučenin s inverzí west části molekuly (4, 5 a 6) reprezentuje skupina 2,3,4-trihydroxy-l,3-dimethyl-hexylová C-10/C-15 fragment erythromycinu A 6,9-iminoetheru, kde pro zjednodušení Označení polohy uhlíkových atomů při probíhající inverzi fragmentu se používají výchozí spektroskopická data. Označení se uvádí v následujících schématech 1 a 2.

SCHÉMA 1

(5a)Ri=R₂ = H (6a) R [ = R₂ = CHj

SCHÉMA 2

(7a) R₃=CHj,R4=H (7b) R₃=H.R4=CH3 (4») R₃=CH₃.R₄=H (4b) Rj = H.R* = CH]

l.PtO^Hý.HOAc '

T

Ri R.

1. PtOr H₂, HOAc

2. HCÓH.HCOOH, ,, ^OTa3

(3a) Rt =Ri=R»=H. Rj = CHj <8b) Rt = Rj = Rj = H. R* =CH₃(9i) Rt = Rj = R₃ = CH] , R* = H (9b) Rt » Ri sR* = CH] , Rj =H (5a) R, = Rj =Rí =H .Rj »06 (Sb) R, =¾ »Rj »H .34 =CHj (Sa) R, =Rj =R_{3 3}CHj ,Rt =H (5b) Rt = R2 u R* a CH) , Rj = H

Dále následují příklady provedení vynálezu, jež jej mají blíže ilustrovat, avšak nijak neomezují jeho obsah ani rozsah.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8(R)-methyl-10-amino-9,10-sekoerythro rr.ycin A 9(£j-oxim

Způsob A

K. roztoku erythromycinu A 6,9-iminoetheru (1) (36,0 g, 0,049 molu) v absolutním CH-jOH (750 ml) se přidá NHjOH.HCl (18 g, 0,259 molu) a Na2CO-3 (6,8 g, 0,0642 molu) a reakční směs se pak míchá za varu pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Reakční suspenze se pak odpaří za sníženého tlaku a k pevnému zbytku se přidá 240 ml vody a 240 ml CH7CI9 (pH 6,8). Hodnota pH se upraví na 10 přidáním 20%ního roztoku NaOH (hmotnosr/objem) a vodná část se opakovaně extrahuje CH2CI2. Po sušení nad K^CO^ , se . spojené organické extrakty vysuší do suchého odparku a získaný produkt se suší za podmínek vysokého vakua (6 hodin, 40 °C) přičemž se získá 34,3 g (91 %) TLC homogenní substance (3a).

IR (CHCL) cm'¹: 3425, 2970,1720,1690,1580,1455,1380,1300,1260,1165,1050. ^lH'NMR'(300MHz,'CDCL) S: 4-.98'(H-l”), 4.78 (H-13), 4.45 (H-T), 4.60 (H-3), 3.90 (H-5), 3.49 (H-ll), 3.28 (3”-OCH₃), 3.05 (H-10), 2.92 (H-8), 2.84 (H-2), 2.28 /3’N(CH₃)7, 2.08 (H-7a), 1.88 (H-7b), 1.87 (H-14a), 1.82 (H-4), 1.51 (H-14b), 0.87 (H-15).

^l3C NMR (75 MHz, CDCL) S: 175.5 (C-l), 161.1 (09), 103.1 (ΟΓ), 95.0 (C-l”),

88.5 (C-6), 81.9 (C-5), 78.1(013), 76.7 (03), 73.5(012), 72.5 (011), 48.7(3”OCH,), 46.7 (O10), 43.4 (02), 39.8/3’N(CH₃),/, 39.7 (04), 31.9 (C-8), 21.3 (014),

10.6 (015).

FAB (MH⁺> 764.4.

Způsob B

K roztoku erythromycinu A 6,9-iminoetheru (1) (46,0 g, 0,049 molu) v pyridinu (100 ml) se přidá NH2OH.HCI (18 g,. 0,259 molu) a rekční směs se pak míchá po dobu 3 hodiny za teploty místnosti. K reakčnímu roztoku se přidá voda (400 ml) a CH₂Cl2 a produkt se izoluje pomocí gradientově extrakce při pH 7,0 a 10,0. Odpařením spojených organických extraktů při pH 10,0 se získá 25,0 g (66,4 %) produktu (3a) se stejnými fyzikálně chemickými konstantami, jež jsou uvedeny u způsobu A.

Příklad 2 ', 4 ⁿ -11-0,10-N-tetraacetyl-9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8 (7?) -methyl -10-amino-9,10-sekoerythromycin A 9(£)-acetoxim (3c)

K roztoku (3a) (1,-0 g, 0,0013 molu) v pyridinu (40 ml) se přidá acetanhydrid (4 ml) a reakční směs se pak ponechá stát po dobu 7 dnů při teplotě místnosti. Po úplné acetylaci (TLC) se nalije do směsi vody a ledu (200 ml) a extrahuje se CHCl^ při pH 9,0. Spojené organické extrakty se odpaří za sníženého tlaku a získá se 1,3 g surového produktu, z něhož se po opakovaném srážení že' směsi” etheru a petroletheru získá 1,13 g TLC. homogenního produktu (3c).

^lH NMR .(300 MHz, CDCQ δ: 6.15 (CCWtf), 4.97 (H-13), 4.81 (H-2’), 4.78 (H-l”),

4.69 (H-4”),_; 4.67 (H-ll), 4.48 (H-10), 4.59 (Η-Γ), 4.11 (H-3), 3.79 (H-5), 3.30 (H3”-OCH₃), 3.14 (H-8), 2.75 (H-2), 2.27 /3’N(CH₃),/, 2.16, 2.13, 2.12, 2.05 a. 1.9ó (COCH₃), 1.90 (H-4), 1.52 (H-14), 0.90 (H-15).

Příklad 3

- 4 ,11-0,10-N-triacery1 -9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8(R)-methyl-10

-amino-9,10-sekoerythromycin A 9(£)-oxim (3d)

Roztok pentaacetatu (3c) (0,5 g, 0,0005 molu) v methanolu (20 ml) se nechá stát po dobu 3 dnů za teploty místnosti. Reakční směs se pak odpaří za sníženého tlaku a získaný surový produkt se purifikuje pomocí chromatografie na silikagelové koloně za použití systému CHC1₃:CH^OH:konc.NH4OH v poměru 90:9:1,5. Získá se 0,250 g 4 ,11-0,10-N-triacetatu (3d) s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

‘H NMR (300 MHz. CDCy δ: 6.31 (CCWtf), 4.95 (H-13), 4.85 (Η-Γ), 4.67 (H-4”),

4.65 (H-11), 4.49(H-10),4.49(Η-Γ), 4.21 (H-3), 3.79 (H-5), 3.29 (H-3”-OCH,), 3.28 (H-2’), 3.02 (H-8), 2.78 (H-2), 2.30 /3’N(ČH₃)₂/, 2.17/L13Ta Γ.96 (COC77₃), 2.07 (H-7a), 2.02 (H-4), 1.85 (H-14a), 1.49 (H-14b), 0.88 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1J δ: 175.0 (C-l), 172.0, 170.7 a 169.3 (CCCH₃, 162.1 (C-9), 103.5 (C-l’), 95.5 (C-l”), 89.6 (C-6), 81.2 (C-5), 78.3 (C-ll), 78.1 (C-3),

76.8 (C-13), 74.9 (C-12), 49.3 (3”-OCH₃), 45.0 (C-10), 42.5 (C-2), 40.1 /3’N(CH,),/;

39.5 (C-7), 38.4 (C-4), 32.7 (C-8), 23.1, 20.6 a 20.6 (COCtf₃), 21.9 (C-14), 10.7 (C15)·

Příklad 4

-0,10-N-dit-osy 1- 9 - deoxo- 6-deoxy- 6,9-epoxy-8 (R) -methyl-1-0—amino-9,10-sekoerythromycin A 9(R)-oxim (3e)

10-N-tosyl-9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8(R)-methyl-10-amino-9,10sekoerythromycin A 9(£)-oxim (3f)

Látka (3a) (2,0 g, 0,0026 molu) z Příkladu 1 se suspenzuje v 70 ml acetonu a ochladí se na 0 až - 5 °C. K reakční směsi se simultánně přikapávají roztoky rcsylchloridu (1,34 g, 0,007 molu) v acetonu (30 ml) a NaHCO^ (0,6 g, 0,007 molu) ve vodě (95 ml) za stálého míchání po dobu 30 minut. Reakční suspenze se pak míchá po další 3 hodiny za teploty místnosti, pak se odpaří aceton za sníženého tlaku a vodný zbytek se extrahuje CHCl^ při pH 5,0. Po sušení nad K2CO3 ^a odpaření CHCI3 se získá směs produktu (3e) a (3f). Chromatografií surového produktu (1,8 g) na silikagelové koloně za použití systému CH^Cl^CH^OH v poměru 85:15 se získá 0,250 g TLC čisté (CHCI3rCH^OH, 7:3) sloučeniny (3e) s R£ 0,63 a 1,1 g sloučeniny (3f) s Rý 0,43.

Sloučenina (3e):

IR (CHCL) cm'^!: 3460, 2975, 2940, 1730, 1660, 1600, 1455, 1370, 1190, 1180, 1160, 1090,1050, 1000, 975, 855, 815, 665.

Ή NMR (300 MHz, CDCy δ: 7.80 (p-Ph), 7.30 (p-Ph), 4.81 (H-13), 4.78 (H-l”), 4.48 (H-l’), 4.26 (H-3), 3.96 (H-5”), 3.76 (H-5), 3,68 (H-5’), 3.60 (H-ll), 3.50 (H-10), 3.41 (H-2’), 3.23 (3”-OCH₃), 3.09 (H-8), 3.03 (H-4”), 2.94 (H-2), 2.54 /3’N(CH.)₂/, 2.43 (p-Ph-CR), 2.41 (p-Ph-C/ř,), 2.24 (H-7a), 2.09 (H-7b), 1.91 (H-4), 1.83 (H-4’a), 1.68 (H-14a), 1.52 (H-2”b), 1.41 (H-14b), 1.49 (6-CH₃), 0.89 (H-15).

Sloučenina (3f) ^lH NMR (300 MHz, CDCy δ 7.43 (p-Ph), 7.14 (SOjVíf), 4.91 (H-13), 4.78 (H-l”), 4.60 (H-T), 4.3ó-(H-3), 4.00 (H-5.”), 3.82 (H-5),. 3.73 (H-10),. 3.68 (H-5^!), 3.64 (H-ll), 3.41 (H-2’), 3.28 (3”-OCH₃), 3.08 (H-8), 3.00 (H-4”), 2.79 (H-2), 2.39 (p-Ph-CH₃), 2.24 (H-2’h), 1.73 (H-14a), 1.52 (ó-CH,), 0.85 (H-15).

Příklad 5

6-deoxo-6, 9-epoxy-8 (/?) -methyl-10-amino-9,10-sekoerythromycin A (2a)

Způsob A

Roztok erythromycinu A 6,9-iminoetheru (1) (10,0 g, 0,014 molu) v ledové kyselině octové (60 ml) se nechá stát po dobu 3 dnů za teploty místnosti. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a pak se přidá k olejovému zbytku voda (100 ml) a reakční směs se extrahuje CHC1₃ při pH 5,5, 6,5 a 8,5. Po sušení nad K₂CO₃ se spojené organické extrakty při pH 8,3 odpaří do sucha a získaný produkt se suší za hlubokého vakua (6 hodin, 40 °C), přičemž se získá 8,2 g (80,0 %) TLC homogenního produktu (2a).

IR (CHCE) cm'¹:1740 (C-l, lakton ) a. 1710 (C-9, lakton ).

22.2 (C-14,11.6 (C-15).

EI-MS (M⁺) 748.

Způsob B

Roztok (3a) (2,0 g, 0,0026 molu) v methanolu (30 ml) se okyselí 1N-HC1 na pH 3,0 a nechá se stát po dobu 10 dnů za teploty místnosti. Pak se pH reakční směsi upraví na 7,0 pomocí l0%ního NaOH, methanol se odpaří za sníženého tlaku, k vodnému zbytku se přidá CHC1₃ a poté se extrahuje při pH 5,5, 6,5 a

8,3. Po sušení nad K₂CO₃ ^{se s}P°J^ené organické extrakty při pH

8,3 odpaří do sucha a získá se produkt (2a) se stejnými fyzikálně chemickými konstantami, jak je popsáno ve Způsobu A.

Příklad 6

2',4 ^/z, 11-0,10-N- tetraacetyl-6-deoxy-6,9-epoxy-8 (/?) -methyl -10-amino-9,10-sekoerythromycin A (2b)

K roztoku (2a) (3,4 g, 0,0045 molu) v pyridinu (45 ml), se přidá acetanhydríd (12 ml) a nechá se stár po dobu 7 dnů za teploty místnosti. Po úplném proběhnutí acetylační reakce (TLC), se reakční směs nalije do ledu (200 ml) a extrahuje se CHC1₃ při pH 9,0. Spojené organické extrakty se promyjí nasyceným roztokem NaHCO^ a vodou, suší se nad K₂CO₃ a odpaří se za sníženého tlaku,. Získaný surový zbytek se suší za velmi nízkého tlaku (vakua) po dobu 6 hodin a 40 °C. Získá se 4,10 g (98,0 %) chromatograficky homogenního produktu (2b).

IR (CHCy cm'¹: 1740 (C-l, lakton ), 1720 (C-6, lakton ), 1720 a 1240 (C=O, ester). 1655 (C=O, amid ).

^lH NMR (300 MHz·, CDCy 5: 6.35 (CONtf), 4.99 (H-13), 4.79 (Η-Γ), 4.79 (H-2’),

4.68 (H-ll), 4.62 (Η-Γ), 4.44 (H-10), 4.14 (H-3), 3.76 (H-5), 3.32 (H-3”-OCH₃), 2.74 (H-8), 2.65 (H-2), 2.28 /3’N(CH,),/, 2.10, 2.06, 2.03 a 1.92 (COCH,), 2.08 (H-7a),

1.96 (H-7b), 1.90 (H-4), 1.81 (H-14a), 1.60 (H-14b), 0.86 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDCy δ: 179.3 (C-l), 174.7 (C-9), 171.9 170.5, 169.9 a 169.2 (COCH₃).

EI-MS(M⁺) 916.

Příklad 7 ,11-0,10-N-triacetyl-6-deoxy-6,9-epoxy-8 (7?) -methyl-10-amino-9,10 -sekoerythromycin A (2c)

Roztok (2b) (1,5 g, 0,0016 molu) v methanolu (40 ml) se nechá stát po dobu 3 dny za teploty místnosti. Reakční směs se odpaří za sníženého tlaku a získaný olejový produkt se rozpustí v CH2CI2 (50 ml), poté se přidá 100 ml vody (pH 6,6) a pH reakční směsi se upraví na 9,0 pomocí 10%ního (hmotnost/objem) roztoku NaOH. Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se dvakrát extrahuje C^C^. Po sušení spojených organických extraktů nad ^2^θ3 ^a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 1,35 g surového produktu, který se čistí chromatograficky na koloně se silikagelem za použití systému CHCI3:CH^OH:konc.NH^OH v poměru 6:1:0,1 přičemž se získá TLC homogenní triacetat (2c) s následj ícími fyzikálně chemickými konstantami:

Ή NMR (300 MHz, CDCy δ: 6.39 (CCWtf), 4.99 (H-13), 4.79 (H-l”), 4.68 (H-4”),

Příklad 8

- ÍO^N^ (4-brombenzoyl) -6-deoxy-6 ,-9-epoxy-8 (Λ) -methyl-lO-ami-no-9,10-sekoerythromycín A (2d)

K roztoku 10 g (0,013 molu) (2a) v diethyletheru (60 ml)aNaHCOj (8,0 g, 0,095 molu)^ , 4-brombenzoylchloridu (4,0 g, 0,018 molu) v diethyleheru (20 ml) přide*. po kapkách po dobu 1 hodiny za stálého míchání při teplotě od 0 do 5 °C.

Reakční směs se míchá po další 2 hodiny při stejné teplotě, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, poté se k rakto získanému zbytku přidá CHClg (70 ml) a voda (50 ml) a následuje extrakce při pH 8,5. Reakční směs se odpaří za sníženého tlaku a získaný pevný zbytek (5,0 g) se purifikuje chromatografíčky na. silikagelové koloně za použití systému CH₂C1₂:CH^OH:konc. NH₄OH v poměru 90:9:1,5, získá se tak TLC homogenní 4-brombenzoat (2d) s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

IR (CHC1₃) cm⁴: 1740 (C-l, lakton ), 1710 (C-9, lakton ), 1640 a 1500 (C-10, amid ), 1580 (Ph).

^lH NMR (300 MHz, CDCL,) S: 7.60 (Ph), 7.05 (CON/7), 4.91 (H-13), 4.70 (H-l”), 4.35 (H-l’), 4.37 (H-10), 4.21 (H-3), 3.70 (H-5), 3.67 (H-ll), 3.27 (3”-OCH₃), 3.15 (H-2’)_; 2.91 (H-4”), 2.73 (H-8), 2.71 (H-2), 2.26 /3’N(CH₃)/ 2.21, (H-7a), 2.10 (H7b), 1.94 (H-4), 1.86 (H-14a), 1.57 (H-14b), 0.89 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDCL,) S: 179.6 (C-l), 176.7 (C-9), 165.4 (CCNH), 133.8, 131.6, 128.9 a 125.8 (Ph), 104.0 (C-l’), 95.0 C-l”), 86.4 (C-6), 81.7 (C-5), 79.9 (C-3), 75.6 (C-13), 73.4 (C-ll), 74.6 (C-12), 49.4 (3”-OCH₃), 47.3 (C-10), 43.2 (C-2), 40.0 /3’N(CH₃)₂/, 40.0 (C-4), 37.8 (C-7), 34.2 (C-8), 22.5 (C-14), 11.2 (C-15).

EI-MS (M⁺) 931.

Příklad 9

1-N-(2,3,4-tríhydroxy-l,3-dímethyl-hexyl)-amido-10,11,12,13,14,15hexanor-9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8(R)-methyl-9,10-sekoerythromycin A 9(£) oxim (4a)

Látka (3a) (31 g, 0,041 molu) z Příkladu 1 se rozpustí v CH₂C1₂:CH₃OH (1:1, 80 ml), k tomu se přidá konc. NH₄OH (350 ml) a reakční směs se míchá po dobu 6 hodin za teploty místnosti. Roztok se nechá stát po celou noc a pak se odpaří za sníženého tlaku a získaný pevný zbytek se suspenzuje v CH₂C1₂, filtruje a filtrát se následně odpaří do sucha za získání 29,5 g (95 %)

TLC (systém CHCI₃:CH₃OH:konc. NH^OH v poměru 6:1:0,1) homogenního produktu (4a) .

IR (CHCL) cm'¹: 3420, 2980,1690,1650, 1530,1455,1380,1260,1175,1050.

Ή NMR (300 MHz, CDCy 5: 7.53 (CCWff), 4.93 (H-l”), 4.45 (Η-Γ), 4.20 (H-3), 4.11 (H-10), 3.79 (H-ll), 3.66 . (H-5), 3.39 (3”-OCH₃), 3.22 (H-13), 3.04 (H-8), 2.53 (H-2), 2.29/3’N(CH₃)_;/, 2.10 (H-7a), 1.97 (H-4), 1.79 (H-7b), 1.59 (H-14a), 1.33 (H14b), 1.04 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDCL) 5:174.4 (C-l), 162.0 (C-9), 105.6 (C-l’), 96.2 (C-l”), 90.3 (C-6), 86.3 (C-5), 83.0 (C-13), 79.8 (C-3), 75.1 (C-ll), 74.9 (C-12) 49.3 (3”-OCH₃), 48.6 (C-10), 42.8 (C-2), 41.0 (C-7), 39.8 /3’N(CH₃)₂/, 38.6 (C-4), 32.9 (C-8), 24.8 (C14), 11.5 (C-15).

FAB (MH⁺) 764.4.

Příklad 10

1-N-(2,3,4-trihydroxy-l,3-dimethyl-hexyl)-amido-10,11,12,13,14,15 -hexanor-9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8(R)-methyl-9,10-sekoerythromy cin A 9(£) oxim (4a)

1-N-(2,3,4-trihydroxy-l,3-dimethyl-hexyl)-amido-10,11,12,13,14,15 -hexanor-9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8(5)-methyl-9,10-sekoerythromy cin A 9(£) oxim (4b)

Erythromycin A 6,9-iminoether (1) (30 g, 0,041 molu) se rozpustí v CH^OH (600 ml), přidá se Na₂C0₃ (5,6 g, 0,053 molu) a reakční směs se míchá za varu pod zpětným chladičem ýyrtójřfál., ; ' .výchůzíÍPiminoethert*· (8 hodin). Reakční suspenze se odpaří za sníženého tlaku, přidá se k ní CH₂C1₂ (130 ml) a voda (130 ml) (pH 11,1) a pak následuje extrakce při pH 8. Spojené organické extrakty se suší nad K₂CO₃ a odpaří se, čímž se získá 28 g pevného zbytku. Sraženina se rozpustí v CH^OH (600 ml), k tomu se přidá NH₂OH.HC1 (14 g) a Na₂CO₃ (5,1 g) a pak následuje míchání po dobu 3 hodiny. Reakční směs se odpaří do sucha, přidá se k ní CH₂C1₂ (150 ml) a voda (300 ml) (pH. 6,6) a pak se extrahuje gradientovou extrakcí při pH 8 a 10. Spojené organické extrakty s pH 10 se suší nad K₂C0₃ a odpaří se, přičemž se získá 15,6 g sraženiny. Sraženina se rozpustí ve směsi ČH₃OH-CH₂C1₂ (1:1,' 40 ml) a konc. NH^OH (170 ml)' a míchá se po dobu 12 hodin za teploty místnosti. Reakční směs se odpaří do sucha a získaná směs produktů se separuje chromatograficky na silikagelové koloně. Z 2,2 g surového produktu se za použití systému CHCl₃:CH₃OH:konc.NH₄ OH v poměru 6:1:0,1 získá 1,08 g chromatograficky homogenního produktu (4a) (Rf 0,38) s fyzikálně chemickými konstantami popsanými v Příkladu 9 a 0,80 g látky (4b) (Rf 0,26) s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

Sloučenina (4b):

IR (CHCI,) cm-¹:3340,2975,1685,1650,1530,1450,1380,1280,1240,1160,1040.

Ή NMR (300 MHz, CDCy 5: 7.30 (COAW), 4.88 (H-l”), 4.35 (H-l’), 4.23 (H-3), 4.15 (H-10), 3.82 (H-ll), 3.60 (H-5), 3.29 (3”-OCH,), 3.26 (H-13), 3.14 (H-8), 2.78 (H-7a), 2.52 (H-2), 2.29/3’N(CH₃)/ 2.06 (H-4), 1.61 (H-14a), 1.51 (H-7b), 1.37 (H14b), 1.04 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1,) 5:173.9 (C-l), 162.7 (C-9), 104.6 (C-l’), 95.4 (C-l”), 90.7 (C-6), 84.3 (C-5), 81.6 (C-13), 78.5 (C-3), 74.5 (C-ll), 74.4 (C-12) 48.8 (3”-OCH₃),

47.4 (C-10), 42.7 (C-2), 42.0 (C-7), 39.4 /3’N(CH₃),/, 38.7 (C-4), 33.8 (C-8), 24.1 (C14), 11.0 (C-15).

FAB (MH⁺) 764.5.

Příklad 11 ’ , 4^/z -O-diacetyl-l-N- (2,4-0-diačetyl-3-hydroxy-l, 3-dímethyl-hexyl) -amido-10,11,12,13,14,15-hexanor-9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8(R)-methyl-9,10-sekoerythromycin A 9(£) acetoxim (4c)

K roztoku látky (4a) (1,0 g, 0,0013 molu) z Příkladu 9 v pyridinu (40 ml) se přidá acetanhydrid (4 ml) a poté se nechá stát po dobu 10 dnů za teploty místnosti. Reakční směs se pak MO»?

nalije do směsi/vody a ledu ;___(pH 4,8) , alkalizuje_ se

20%ním NaOH a pak se extrahuje CHCl^ při pH 9,0. Spojené organické extrakty se suší nad K₂COg ^a odpařují se za sníženého tlaku. Získá se 1,25 g (98 %) pentaacetatu (4c) s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

Ή NMR (300 MHz, CDCy δ: 6.61 (CCWtf), 4.94 (H-13), 4.82 (H-l”), 4.80 (H-2’),

4.69 (H-4”), 4.58 (Η-Γ), 4.58 (H-10), 4.55 (H-ll), 4.04 (H-3), 3.79 (H-5), 3.32 (3”OCH₃), 3.13 (H-8), 2.59 (H-2), 2.27 /3’N(CH₃)₂/, 2.15, 2.12, 2.12, 2.06 a 2.01 (COCH₃), 2.07 (H-7a), 2.03 (H-4), 2.03 (H-7b), 1.82 (H-14a), 1.55 (H-14b), 0.90 (H15)· ^I3C NMR (75 MHz, CDCy δ: 173.4 (C-l), 171.8, 170.6, 170.2, 169.8, and 168.8 (CCCH₃), 167.2 (C-9), 100.6 (C-l’), 95.5 (C-l”), 91.7 (C-6), 79.8 (C-3), 79.6 (C-5),

78.6 (C-ll), 75.7 (C-13), 74.7 (C-12) 49.3 (3”-OCH₃), 45.1 (C-10), 42.6 (C-2), 40.2 /3’N(CH₃)₂/, 38.8 (C-7), 36.7 (C-4), 33.5 (C-8), 21.6 (C-14), 20.9, 20.5, 20.5, 20.4 a

19.4 (COCtf₃), 10.5 (C-15).

Příklad 12

4^Λ-O-acetyl-1-N-(2,4-O-díacetyl- 3-hydroxy-1,3-dimethyl-hexyl)-amido-10,11,12,13,14,l5-hexanor-9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8(R) -methyl-9,10-sekoerythromycin A 9(£) acetoxim (4d)

4-0-acetyl-1-N-(2,4-0-diacetyl-3-hydroxy-l,3-dimethy1-hexyl)-amido-10,11,12,13,14,l5-hexanor-9-deoxo-ó-deoxy-ó,9-epoxy-8(fí) -methyl-9.10-sekoerythromycin A 9(£) oxim (4e)

Roztok 0,5 g (0,0005 molu) látky (4c) z Příkladu 11 v methanolu (20 ml) se míchá po dobu 3 dnů za teploty místnosti. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získaná směs se purifikuje chromatograficky na silikagelové koloně za použití systému CHClg:CHgOH:konc.NH^OH v poměru.6:1:0,1. Po odpaření chromatograficky homogenní frakce s Rf 0,47 a Rf 0,34 se získá 0,213 g tetraacetatu (4d) a 0,151 g triacetatu (4e) s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

Sloučenina (4d):

^!Η NMR (300 MHz, CDCL,) δ: 7.38-(CONH), 4.94(H-13),-4.83 (H-1”), 4.66 (H-4”)? 4.Ó2 (H-ll), 4.55 (H40), 4.44 (Η-Γ), 4.10 (H-3), 3.80 (H-5), 3.32 (S^OCHJ, 3.35 (H-2’), 3.18 (H-8), 2.76 H-2), 2.30 /ST^CH,)/ 2.07 (H-7a), 2.13, 2.10, 2.09 a: 2.03 (COCtfJ, 1.90 (H-7b), 1.96 (H-4), 1.84 (H-14a), 1.53 (H-14b), 0.90 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDCy δ: 174.4 (C-l), 171.1, 170.7, 170.4 a 168.4 (CČ>CH₃),

167.2 (09), 105.2 (C-l’), 96.9 (C-l”), 92.9 (06), 84.5 (C-5), 81.3 (C-3), 78.5 (C-ll), 75.9 (C-13) 75.0 (012), 49.4 (S^OCHJ, 44.6 (C-10), 41.1 (C-2), 40.1 /3’N(CH₃)₂/,

.. 40.8 (C-7), 38.0 (C-4), 33.8 (08), 21.7 (014), 20.7, 20.5, 20.4 s 19.2 (COCtf₃), 10.5 (015).

Ή NMR (300 MHz, CDCy δ: 7.24 (CONtf), 4.88 (H-13), 4.81 (H-l”), 4.68 (H-4”),

Sloučenina (4e):

^I3C NMR (75 MHz, CDCy δ: 174.6 (C-l), 171.1,170.8,170.8 (C0CH₃), 162.5 (C-9), 104.2 (C-l’), 96.4 (C-l”), 90.4 (C-6), 83.9 (C-5), 79.6 (C-3), 78.7 (C-ll), 76.1 (C-13) 75.1 (C-12), 49.5 (3”-OCH₃), 44.7 (C-10), 43.7 (C-2), 40.1 /3’N(CH₃)₂/, 40.4 (C-7), 39.3 (C-4), 32.5 (C-8), 21.8 (C-14), 20.7,20.7 a. 20.6 (COCtf₃), 10.7 (C-15).

Příklad 13

1-N-(2,3,4-trihydroxy-l,3-dimethy1-hexyl)-amido-10,11,12,13,14,15 -hexanor-9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8 (/?) -methyl - 9,10-sekoerythromycin A 9(E) tosyloxim (4f)

Látka (4a) (0,5 g, 0,0007 molu) z Příkladu 9 se suspenzuje v acetonu (10 ml) a ochladí se na 0 až - 5 °C. Simultánně se k reakční směsi za stálého míchání přikapávají roztoky tosylchloridu (0,486 g, 0,0026 molu) v acetonu (10 ml) a NaHCO^ (0,425 g, 0,0051 molu) ve vodé (25 ml) po. dobu 30 minut. Reakční roztok se míchá po dalších 12 hodin za teploty místnosti, poté se aceton odpaří za sníženého tlaku, k vodnému zbytku se přidá CHC1₃ (30 ml) a pak. se extrahuje gradientovou extrakcí při pH 5,0 a 8,0. Odpařením spojených organických extraktů při pH 5,0 se získá 0,320 g surového produktu (4f) . Chromatografií na silikagelové koloně za použití systému CHC1₃.CH-jOH: konc.ΝΗ^ΟΗ se získá 0,260 g TLC homogenního produktu (4f).

Ή NMR (300 MHz, CDCy δ: 7.80 (CCWtf), 7.62 (Ph), 3.21 (H-13), 4.96 (H-l”),

Příklad 14 « 1-N-(2,3,4-trihydroxy-l,3 -dimethyl-hexyl)-amido-10,11,12,13,14,15-hexanor-9-deoxo-9-dihydro-9a-amino-8 (/?) -methyl-9a-homoerythromyjí cin A (5a)

Surový produkt (4a) (6,0 g, 0,008 molu) z Příkladu 9 se rozpustí v ledové kyselině octové (60 ml), přidá se PtO₂ (2,0 g, 83,0 %) a poté se hydrogenuje za tlaku vodíku 7 x 10^ Pa za stálého míchání po dobu 10 hodin. Reakční suspenze se filtruje, filtrát se odpaří za sníženého tlaku, dále se přidá voda (100 ml) a CHC1₃ (60 ml) a následuje extrahování gradientovou extrakcí při pH 5,5, 9,0 a 10,5. Spojené chloroformové extrakty při pH 10,5 se odpaří za sníženého tlaku a získá se 4,3 g (73 %) TLC homogenního produktu (5a) s následujícími fyzikálně chemickými konstantami:

IR (CHCLj) cm⁴: 3400, 2975,1650,1535,1450,1375,1165,1040.

*H NMR (300 MHz. CDCy δ: 7.52 (CCW), 4.94 (H-l”), 4.37 (H-l’), 4.26 (H-3),

4.17 (H-10), 3.76 (H-ll), 3.41 (H-5),. 3.28 (3”-OCH₃), 3.17 (H-13), 2.62 (H-9a), 2.52 (H-2), 2.27 /3’N(CHj)₂/, 2.20 (H-7a), 2.01 (H-4), 1.85 (H-8), 1.55 (H-14a). 1.34 (H -7b), 1.34 (H- 14b), 1.05 (H-15). _ . ¹³C NMR (75 MHz, CDCy δ: 174.1 (C-l), 106.7 (C-l’), 96.0 (C-l”), 92.3 (C-5), 83.8 (C-13). 79.7 (C-3), 75.1 (C-12), 74.8 (C-ll) 74.6 (C-6), 49.3 (3”-OCH₃), 49.2 (C-10),

49.1 (C-9), 42.8 (C-7), 41.6 (C-2),7§’N(CH₃)₂/, 37.5 (C-4), 31.0 (C-8), 25.0 (C-14),

11.5 (C-15).

FAB (NH⁺) 752.3.

Příklad 15

1-N-(2,3,4-trihydroxy-l,3-dimethyl-hexyl)-amido-10,11,12,13,14,15-hexanor-9-deoxo-9-dihydro-9a-amino-8(5j-methy1-9a-homoerythromycin A (5b)

Látka (4b) (0,71 g, 0,,í009 molu) se rozpustí v ledové kyselině octové (30 ml), přidá se PtC>2 (0,350 g, 83 % Pt) a hydrogenuje se za stálého míchání po dobu 10 hodin a tlaku z:

vodíku 7 x 10° Pa. Reakční směs se filtruje, filtrát se odpaří na silně olejový zbytek a produkt se izoluje pomocí gradientově extrakce při pH 5,5, 9,0 a 10,5, jak je popsáno v Příkladu 14, přičemž se po odpaření spojených organických extraktů pří pH

10,5 získá 0,260 g (38,0 %) TLC homogenního produktu (5b), uvedeného v titulu.

^lH NMR (300 MHz, CDCy 5: 7.63 (CONřf), 4.93 (H-l”), 4.40 (H-l’), 4.23 (H-3),

4.19 (H-10), 3.75 (H-ll), 3.53 (H-5), 3.29 (3”-OCH₃), 3.18 (H-13), 2.72 (H-9a), 2.57 (H-9b), 2.52 (H-2), 2.27 /S^CK)/ 1.93 (H-4), 1.78 (H-8). 1.57 (H-14a), 1.47 (H7a), 1.36 (H-14b), 1.23 (H-7b), 1.04 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDCy S: 174.3 (C-l), 107.2 (C-l’), 97.0 (C-l”), 92.3 (C-5), 83.8 (C-13), 80.7 (C-3), 75.7 (C-12), 75.2 (C-ll), 75.2 (C-6), 49.6 (3”-OCH₃), 49.2 (C-9),

49.2 (C-10), 43.7 (C-7), 42.1 (C-2), 39.8 /3’N(CH₃)₂/, 37.8 (C-4), 31.3 (C-8), 25.0 (C14), 11.7 (C-15). ..... ' ” ’ '

Příklad 16

1-N-(2,3,4-trihydroxy-l,3-dimethyl-hexyl)-amido-10,11,12,13,14,15-hexanor-9-deoxo-9-dihydro-9a-dimethylamino-8 (/?) -methyl-homoery thr o mycin A (6a) roztoku sloučeniny (5a) (lg, 0,0013 molu) z Příkladu 14 v CHCl^ (80 ml), se přidá 0,2 ml (0,005 molu) kyseliny mravenčí (98 až 100%ní) a 0,232 ml (0,003 molu) formaldehydu (36%ního).

Hodnota pH reakční směsi se upraví na pH 5,0 (pomocí 2%ního NaOH - hmotnost/objem) a poté se míchá za varu pod zpětným chladičem po dobu 9 hodin.. Následně se přidá voda (100 ml) , produkt se izoluje pomocí gradientově extrakce s CHCl^ při pH 5,0 a 9,5 a spojené organické extrakty se odpaří za sníženého tlaku. Chromatografíckým zpracováním produktu na silikagelové koloně za použití systému CHCI3:CH^OH:konc.NH4OH v poměru 6:1:0,1 se získá TLC homogenní produkt (6a).

IR (CHCy cm·¹: 3400, 2970,1650,1530,1450,1375,1165,1040.

Ή NMR (300 MHz, CDCL,) 3: 7.26 (CO/Vřf), 4.91 (H-l”), 4.37 (H-l'), 4.27 (H-3),

4.18 (H-10), 3.77 (H-ll), 3.41 (H-5), 3.29 (3”-OCH₃), 3.18 (H-13), 2.57 (H-2), 2.52 (H-9a), 2.30 /3^(^)/ 2.27 /fcN(CH₃)₂/, 2.20 (H-9b), 2.16 (H-4), 2.01 (H-8), 1.56 (H-14a), 1.50 (H-7a), 1.37 (H-14b), 1.15 (H-7b), 1.04 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDCy 5:174.7 (C-l), 106.1 (C-l’), 95.4 (C-l”), 90.5 (C-5), 83.3 (C-13), 79.8 (C-3), 74.8 (C-12), 74.6 (C-ll), 73.7 (C-6), 68.2 (C-9), 49.2 (3”-OCH₃),

48.6 (C-10), 45.3 ^NfCH,)/ 44.2 (C-7), 41.7 (C-2), 39.6 /3’Ν(^)/ 37.3 (C-4), 26.4 (C-8), 24.9 (C-14), 11.5 (C-15).

FAB (MH⁺) 780.6.

Příklad 17

1-N-(2,3,4-trihydroxy-1,3-dimethyl-hexyl)-amido-10,11,12,13,14,15-hexanor-9-deoxo-9-dihydro-9a-dimethylamino-8(S)-methyl-9a-homoerythromycin A (6b)

K roztoku sloučeniny (5b) (0,3 g, 0,0004 molu) z Příkladu 15 v CHCI3 (50 ml) se přidá 0,12 ml (0,0032 molu) kyseliny mravenčí (98 až 100%ní) a 0,13 ml (0,0016 molu) formaldehydu (36%ního). Hodnota pH reakční směsi se upraví na 5,0 (pomocí 2%ního NaOH - hmotnost/objem) a poté se míchá za varu úpod zpětným chladičem po dobu 4 hodin. Produkt se izoluje jak je popsáno v Příkladu 16, pak se chromatografuje na silikagelové koloně za použití systému CHCI3:CH^OH:konc.NH^OH v poměru 6:1:0,1 a získá se 0,150 g TLC homogenního produktu (6b).

Ή NMR (300 MHz, CDCy δ: 7.58 (CONH), 4.95 (H-l”), 4.41 (Η-Γ), 4.25 (H-3),

4.18 (H-10), 3.76 (H-ll), 3.43 (H-5), 3.28 (3”-OCH₃), 3.17 (H-13), 2.51 (H-2), 2.27 /3’N(CHj)₂/, 2.23 /9a-N(CHj)₂/, 2.06 (H-9b), 2.19 (H-4), 1.97 (H-8), 1.57 (H-14a), 1.47 (H-7a), 1.37 (H-14b), 1.16 (H-7b), 1.05 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDCy 5:173.5 (C-l), 106.0 (C-l’), 95.3 (C-l”), 91.9 (C-5), 83.2 (C-13), 79.0 (C-3), 74.4 (C-12), 74.1 (C-ll), 74.2 (C-6), 67.5 (C-9), 48.6 (3”-OCH₃), 48.4 (C-10), 44.9/9-N(CH₃),/, 43.1 (C-7), 40.8 (C-2), 38.9/3’N(CH₃)₂/, 36.7 (C-4), 25.8 (C-8), 23.9 (C-14), 10.4 (C-15).

Příklad 18

9-deoxo-ó-deoxy-6,9-epoxy-8 (/?) -methyl-10,11,12,13,14,15-hexanor -erythromycin A 9(£) oxim (7a)

9-deoxo-6-deoxy-6,9-epoxy-8(S)-methyl-10,11,12,13,14,15-hexanor -erythromycin A 9(£) oxim (7b)

Spojené chloroformové extrakty o pH 8 z Příkladu 10 se suší nad K₂COg a odpaří se za sníženého tlaku, přičemž se získá 8,0 g směsi (7a) a (7b). Chromatografií na silikagelové koloně za použití systému CHClg:CH^OH:konc.NH^OH v poměru 6:1:0,1 se ze 2,0 g surového produktu získá 0,530 g látky (7a) s Rf 0,44 a 0,880 g látky (7b) s Rf 0,30, identifikovaných spektroskopickými způsoby jako C-8 stereoizomery.

Sloučenina (7a):

ÍR (CHČy cm'¹: 3360,2980,2940,1730,1690,1650, 1455,1380,1245,1165,1040.

Ή NMR (3Ó0 MHz, ČDCy S: 4.72 (H-l”), 4.44 (H-1’), 4.11 (H-3), 3.84 (H-5), 3.67 (1-OCH₃), 3.29 (3”-OCH₃), 3.26 (H-2’), 3.03 (H-8), 3.01 (H-4”), 2.84 (H-2), 2.09 ((H-7a), 2.33 /3^(0^)/ 1.97 (H-4), 2.01 (H-7b)..

¹³C NMR (75 MHz, CDCy δ: 176.1 (C-l), 161.8 (C-9), 103.8 (C-l’), 95.8 (C-l”), 89.7 (C-6), 81.0 (C-5), 79.8 (C-3), 51.8 (1-OCFy, 49.4 (3”-OCH₃), 39.9 (C-7), 41.7 (C-2),

40.4 /ST^CH^/, 37.8 (C-4), 33.0 (C-8).

FAB (MH⁺) 619.4.

Sloučenina (7b):

IR (CHCy cm'¹: 3360,2980, 2940,1730,1690,1650, 1455,1380,1245,1165,1040.

Ή NMR (300 MHz, CDCy 5: 4.61 (Η-Γ), 4.43 (H-l’)_f 4.09 (H-3), 3,71 (H-5), 3.68 (1-OCH₃), 3.28 (3”-OCH₃), 3.17 (H-8)·, 2.89 (H-7a), 2.74 (H-2), 2.33 /3’N(CH₃)/, 2.16 (H-4), 1.47 (H-7b).

¹³C NMR (75 MHz, CDCy δ: 176.0 (C-l), 162.9 (C-9), 102.7 (C-l’), 95.1 (C-l”), 90.4(C-6), 80.1 (C-5), 79.0 (C-3), 51.6 (1-OCH₃), 49.2 (3”-OCH₃), 42.5 (C-7), 41.0 (C-2),

40.3 /3’N(CH₃)_;/, 38.1 (C-4), 34.5 (C-8).

Příklad 19

9-deoxo-9-dihydro-9a-amino-8 (/?) -methyl-10,11,12,13,14,15-hexanor-9a-homoerythromycín A (8a)

Látka (7a) (0,90 g, 0,0015 molu) se rozpustí v ledové kyselině octové (30 ml), přidá se PtO₂ (0,30 g, 83 %) a pak se hydrogenuje při tlaku vodíku 6 x 10^ Pa za stálého míchání po dobu 15 hodin. Reakční směs se filtruje, filtrát se odpaří, izoluje se silně olej ovitý zbytek a izoluje se produkt pomocí gradientově extrakce při pH 5,5, 9,0 a 10,5 jak je popsáno v Příkladu 14, přičemž se po odpaření spojených'organických extraktů při pH 10,5 získá 0,530 g (60 %) TLC homogenního produktu uvedeného v titulu (8á).

Ή NMR (300 MHz, CDCy 5: 4.64 (H-l”), 4.40 (Η-Γ), 4.14 (H-3), 3.67 (1-OCH₃),

3.54 (H-5), 3.29 (H-3”OCH₃), 2.85 (H-2), 2.74 (H-9a), 2.50 (H-9b), 2.30 /3’N(CH₃)₂/,

2.10 (H-4), 1.84 (H-8), 1.44 (H-7a), 1.22 (H-7b).

¹³C NMR (75 MHz, CDCy 5:176.4 (C-l), 104.4 (C-l’), 96.0 (C-l”), 85.9 (C-5), 80.3 (C-3), 73.8 (C-6), 51.5 (l-OCH,), 49.2 (3”-OCH₃), 49.1 (C-9), 42.9 (C-7), 41.2 (C-2)

40.2 /3’N(CH₃)₂, 37.3 (C-4), 31.1 (C-8).

Příklad 20

9-deoxo-9-dihydro-9a-amino-8(S)-methyl-10,11,12,13,14,15-hexanor-9a-homoerythromycin A (8b)

Látka (7b) (0,70 g, 0,0011 molu) se rozpustí v ledové kyselině octové (25 ml), přidá se PtO2 (0,23 g, 83 % Pt) a hydrogenuje se při tlaku vodíku 6 x 10^ Pa za stálého míchání po dobu 15 hodin. Reakční směs se.filtruje, filtrát se odpaří na silně olej ovitý zbytek a izoluje se produkt pomocí gradientově extrakce při pH 5,5, 9,0 a 10,5 jak je popsáno v Příkladu 14, přičemž se po odpaření spojených organických extraktů při pH 10,5 získá 0,350 g (52,4 %( TLC homogenního produktu uvedeného v titulu (8b) .

IR (CHCycm’¹: 3400, 2975, 2940,1735,1580,1455,1375,1260,1170,1050,1000.

Ή NMR (300 MHz, CDCy δ: 4.64 (H-l”), 4.37 (Η-Γ), 4.15 (H-3), 4.04 (H-5”). 3.67 (1-OCH₃, 3.60 (H-5’), 3.51 (H-5), 3.37 (H-2’), 3.28 (H-3”OCH₃), 2.98 (H-4”), 2.75 (H-2), 2.68 (H-9a), 2.56 (H-9b),. 2.54-(H-3’), 2.31 /3’N(CH,)₂/, 1.93 (H-4), 1.79 (H-8),

1.70 (H-4'a), 1.47 (H-2”b).

Příklad 21

9-deoxo-9-dihydro-9a-dimethylamino- 8(7?) -methyl -10,11,12,13,14,15-hexanor-9a-homoerythromycin A (9a)

K roztoku látky (8a) (0,3 g, 0,0005 molu) z příkladu. 19 v CHCI3 (50 ml), se přidá 0,05 ml (0,0013 molu) kyseliny mravenčí (98 až 100%ní) a 0,052 ml (0,0007 molu) formaldehydu (36%ního). Hodnota pH reakční směsi se upraví na 5,2 (pomocí 2%ního NaOH hmotnost/objem) a poté se míchá za varu pod zpětným chladičem po dobu 2,5 hodiny. Produkt se- izoluje jak je popsáno v Příkladu 16, získá se 0,280 g (89,0 %) TLC homogenního produktu (9a).

IR (CHČy cm⁴: 3450, 2975, 2940,1735, 1465,1375,1260,1200,1165,1000.

Ή NMR (300 MHz, CDC^) 5: 4.641 (H-l”), 4.43 (Η-Γ), 4.13 (H-3), 4.06 (H-5”), 3.65 (1-OCH₃), 3.64 (H-5), 3.53 (H-5’), 3.30 (H-3”-OCH₃), 3.27 (H-2’), 2.97 (H-2), 2.53 ((H-3’), 2.29 CTfCH,)/ 2.28 (H-2’a), 2.24 Z9a-N(CH₃)₂/, 2.10 (H-4), 1.96 (H8), 1.67 (H-ý/a).

Příklad 22

9-deoxo-9-dihydro-9á-dimethylamino-8(5)-methyl-10,11,12,13,14,15-hexanor-9a-homoerythromycin A (9b)

K roztoku látky (8b) (0,6 g, 0,001 molu) z Příkladu 19 v CHC1₃ (50 ml) se přidá 0,1 ml (0,0026 molu) kyseliny mravenčí (98 až 100%ní) a 0,104 ml (0,0014 molu) formaldehydu. (36%ního) . Hodnota pH reakční směsi se upraví na 5,2 (pomocí 2%ního NaOH hmotnost/objem) a pak se míchá za varu pod zpětným chladičem po dobu 2,5 hodiny. Produkt se izoluje jak je popsáno v Příkladu 16 a získá se 0,550 g (87,7 %) TLC homogenního produktu (9b).

Průmyslová využitelnost

Látky podle tohoto vynálezu - nové sloučeniny sekomakrolídové a sekoazalidové třídy , jsou potenciálními meziprodukty při přípravě odpovídajících druhů antibiotik a tedy mají velký význam pro farmaceutický průmysl.

Claims

Sloučenina obecného vzorce I:

Ri Hi kde

R-£ a R₂ jsou stejné a znamenají H nebo CH₃,

R₃ a R4 se liší a znamenají H nebo CH₃,

Y je 0 nebo NH,. a

Z je CH₃ nebo skupina CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅nebo jejich farmaceuticky přijatelné přídavné soli s anorganickými nebo organickými kyselinami,
2. Sloučenina podle nároku 1, kde R^, R₂ a R4 jsou stejné a znamenají H, R₃ je CH₃, Y je NH, aZje skupina

CH (CH₃) CH (OH) COH (CH₃) CH (OH) C₂H₅ .
3. Sloučenina podle nároku 1, kde R^, R₂ a R₃ jsou stejné a znamenají H, R4 je CH₃, Y je NH, a Z je skupina

CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅.
4. Sloučenina podle nároku 1, kde R^, R₂ a R₃ jsou stejné a znamenají CH₃, R^jeH, Y je NH, aZje skupina CH(CH₃)CH(0H)C0H(CH₃)CH(0H)C₂H₅.
5. Sloučenina podle nároku 1, kde Ry, R₂ a jsou stejné a znamenají CH₃, R₃ je Η, Y je NH, a Z je skupina

CH(CH₃)CH(OH)COH(CHj)CH(OH)C₂H₅.
6. Sloučenina podle nároku 1, kde Ry R₂ a R4 jsou stejné a znamenají H, R₃ je CH₃, Y je 0, a Z je CH₃.
7. Sloučenina podle nároku 1, kde Ry, R₂ a R₃ jsou stejné a znamenají H, R4 je CH₃, Y je 0, a Z je CH₃
8. Sloučenina podle nároku 1, kde Ry, R₂ a R₃ jsou stejné a znamenají CH₃, R4 je H, YjeOaZje CH₃.
9. Sloučenina podle nároku 1, kde Ry, R₂ a R4 jsou stejné a znamenají CH₃, R₃ je Η, Y je 0 aZ je CH₃.
10. Sloučenina obecného vzorce II:

kde

X je 0 nebo NOR7, kde Ry je H, acylová nebo arylsulfonylová skupina,

R₃ a R4 se liší a znamenají H nebo CH₃,

Rg a Rg jsou stejné nebo se liší a znamenají H nebo acylovou skupinu,

Y je 0 nebo NH, a

Z je CH₃, CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR nebo CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR_t3)C₂H₅ skupina,

Rg je H nebo acylová skupina,

Rg je acylová nebo arylsulfonová skupina, a R₁₀ a R^ jsou stejné a znamenají H nebo acylovou skupinu, nebo jejich farmaceuticky přijatelné přídavné soli s anorganickými nebo organickými kyselinami.
11. Sloučenina podle nároku 10, kde X a Y jsou stejné a znamenají 0, R₃ je CH₃, R₄, Rj a Rg jsou stejné a znamenaj H, Z je CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHR₉ skupina a Rg a Rg jsou stejné a znamenají H.
12. Sloučenina podle nároku 10, kde X a Y jsou stejné a znamenají O, R₃ je CH₃, R₄ je H, Rg a Rg jsou stejné a znamenají acetylovou skupinu, Z je skupina CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉, kde R_g a Rg jsou stejné a znamenají acetylovou skupinu.
13. Sloučenina podle nároku 10, kde X a Y jsou stejné a znamenají O, R₃ je CH₃, R^ a Rg jsou stejné a znamenají H, Rg je acetylová skupina a Z je skupina CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHRg, kde R_g a Rg jsou stejné a znamenají acetylovou skupinu.
14. Sloučenina podle nároku 10, kde X a Y jsou stejné a znamenají 0, R₃ je CH₃, , Rg a Rg jsou stejné a znamenají

H, a Z je skupina CH(C₂Hg)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHRg, kde Rg je H a Rg je p-brombenzoylová skupina.
15. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NOR-?, kde R7 je H, R₃ je CHg, R4, Rg a Rg jsou stejné a znamenají Η, Y je O a Z je skupina CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHRg, kde Rg a Rg j sou stej né a znamenaj i H.
16. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je acetyl, R₃ je CH₃, R₄ je H, Rg a Rg jsou stejné a znamenají acetylovou skupinu, Y je O a Z je skupina CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉, kde R_g a Rg jsou stejné a znamenaj í acetylovou skupinu.
17. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je H, R₃ je ČH₃, R₄ a Rg znamenají H, Rg je acetylová skupina,

Y je O a Z znamená CH(C₂Hg)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉skupinu, kde R_g a Rg jsou stejné a znamenají acetylovou skupinu.
18. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je tosylová skupina, R₃ je CH₃, R₄, Rg a Rg jsou stejné a znamenají Η, Y je O a Z je skupina CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ , kde R_g je Ha R_g je tosylová skupina.
19. Sloučenina podle nároku- 10, kde X znamená NORy, kde Ry je H, R₃ je CH₃, R₄, Rg a Rg jsou stejné a znamenají Η, Y je O a Z je skupina CH(C₂Hg)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉, kde Rg je H a R je tosylová skupina.
20. Sloučenina podlé nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je H, R₃ je H, R₄ je CH₃, Y jeO aZ je skupina CH(C₂Hg)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHRg, kde Rg a Rg jsou stejné a znamenaj i H.
21. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je H, R₃ je CH₃, R₄, Rg a Rg jsou stejné a znamenají Η, Y je NH a Z je CH(CH₃)CH(ORyQ)COH(CH₃)CH(ORyy)C₂Hg skupina, kde R^q a Rn jsou stejné a znamenají H.
22. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je acetyl, R₃ je CH₃, R₄ je H, Rg a Rg jsou stejné a znamenají acetyl, Y je NH a Z je CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂Hg skupina, kde R-^θ a R₃4 jsou stejné a znamenají acetyl.
23. Sloučenina podle nároku 10, kdé X znamená NORy, kde Ry je acetyl, R₃ je CH₃, R₄ a Rg jsou stejné a znamenají H, Rg je acetylová skupina, Y je NH a Z je skupina CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅, kde R₁₀ a R_tl jsou stejné a znamenají acetyl.
24. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je H, R₃ je CH₃, R₄ a Rg jsou stejné a znamenají H, Rg je acetylová skupina, Y je NH a Z je skupina CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅, kde R₁₀ a R_1:L jsou stejné a znamenají acetylovou skupinu.
25. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je tosyl, R₃ je CH₃, R₄, Rg a Rg jsou stejné a znamenají H,

Y je NH a Z je CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupina, kde R₁₀ a jsou stejné a znamenají H.
26. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je H, R₃, Rg , a Rg jsou stejné a znamenají H, R₄ je CH₃, Y je NH a Z je skupina CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂Hg, kde R_l0a R|-£ jsou stejné a znamenají H.
27. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je H, R₃ je CH₃, R^, Rg a Rg jsou stejné a znamenají Η, Y je 0 a Z je CH₃.
28. Sloučenina podle nároku 10, kde X znamená NORy, kde Ry je H, R₃, Rg a Rg jsou stejné a znamenají H, R₄ je CH₃, Y je O a Z je CH₃.
29. Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I:

Ri Ri ''Ν''' kde

Ry a R₂ jsou stejné a znamenají H nebo CHy,

R₃ a R4 se liší a znamenají H nebo CH₃,

Y je 0 nebo NH, a

Z je CH₃ nebo skupina CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅, nebo jejích farmaceuticky přijatelných přídavných solí s anorganickými nebo organickými kyselinami, vyznačující se tím, že erythromycin A iminoester obecného vzorce III;

se podrobí

A) působení kyseliny octové za podmínek hydrolýzy iminoskupiny a pak, je-li to třeba, N- a/nebo O-acylaci anhydridy kyselin chloridy a poté, pokud je třeba, methanolýze, nebo

B) reakci s hydroxylaminhydrochloridem za přítomnosti vhodných anorganických nebo organických zásaditých látek v inertním reakčním rozpouštědle, v jednom nebo ve dvou reakčních stupních a pak, je-li to třeba,

Bl) působení vhodných anorganických nebo organických kyselin za podmínek hydrolýzy hydroxyiminové skupiny pak, pokud je to třeba, N- a/nebo O-acylaci anhydridy nebo chloridy a poté, je-li to třeba, methanolýze jak je popsáno pod bodem A) nebo, pokud je třeba,

B2) N- a/nebo O-acylaci anhydridy kyselin nebo chloridy v reakčním inertním rozpouštědle a poté, je-li to třeba, methanolýze, nebo, pokud je to třeba,

B3) působeni vhodných. organických nebo anorganických zásaditých látek za. podmínek vnitřní aminové acylace a poté, je-li to třeba, N- a/nebo O-acylaci anhydridy kyselin nebo chloridy a pak, je-li to třeba, methanolýze, za získání sloučenin obecného vzorce II;

kde li.

X je O nebo NORy, kde Ry jé H, acylová nebo arylsulfonová skupina,

R₃ a R₄ se liší a znamenají H nebo CH₃,

R^ a Rg jsou stejné nebo se liší a znamenají H nebo acylovou skupinu,

Y je 0 nebo NH, a

Z je CH₃, CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHR₉ nebo CH(CH₃)CH(ORy_θ)COH(CH₃)CH(ORý_±)C₂H₅ skupina,

Rg je H nebo acylová skupina,

Rp je H, acylová nebo arylsulfonová skupina, a RýQ a Rýý jsou stejné a znamenají H nebo acylovou skupinu, a jejich farmaceuticky přijatelné přídavné soli s anorganickými nebo organickými kyselinami, které, pokud je to třeba, se podrobí katalytické redukci v reakčním inertním rozpouštědle a poté, je-li to třeba, reduktivní N-alkylací vhodnými alkylačními činidly za přítomnosti vhodných reduktivních činidel. Získají se sloučeniny obecného vzorce I, kde Ry, R₂, R₃, R₄, Y a Z mají výše uvedený význam.
30. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, že erythromycin A iminoether obecného vzorce III se podrobí působení kyseliny octové za podmínek hydrolýzy iminoskupiny za teploty místnosti během třech dnů.
31. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, že reaguje erythromycin A iminoether obecného vzorce III s hydroxylaminhydrochloridem za teploty od 25 do 70 °C.
32'. Způsob podle nároku 31, vyznačující se tím, že vhodnými anorganickými zásaditými látkami jsou uhličitan sodný, uhličitan draselný nebo pyridin.
33. Způsob podle nároku 31, vyznačující se tím, že reakčním inertním rozpouštědlem je methanol nebo pyridin.
34. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, že N- a/nebo O-alkylace sloučeniny obecného vzorce II:

X je 0 nebo NOR7, kde R7 je Η,

R₃ je CHj, a je H nebo R₃ je Ha R4 je CH₃,

Rg a Rg jsou stejné a znamenají H,

Y je 0 nebo NH, a

Z je CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ nebo CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H5 skupina, kdé Rg, R₉, R₁₀ a jsou stejné a znamenají H, se provádí s acetanhydridem v pyridinu za teploty místnosti, nebo s tosylchloridem za teploty od 0 do 5 °C nebo s 4-brombenzoylchloridem v diethyletheru za teploty od 0 do 5 °C.
35. Způsob podle nároku 34, vyznačující se tím, že sloučenina obecného vzorce II, kde

X je 0 nebo NOR?, kde Ry je acetylová skupina,

R₃ je CH₃, a R4 je H nebo R₃ je H a R₄ je CH₃,

Rg a Rg jsou stejné a znamenají acetylovou skupinu.

Y je O nebo NH, a

Z je CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR nebo CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupina, kde Rg, Rq, R₁₀ a R^? jsou stejné a znamenají acetylovou skupinu, se podrobí, je-li to třeba, methanolýze za získání sloučeniny obecného vzorce II, kde

X je 0 nebo NOR?, kde R? je H nebo acetylová skupina,

R₃ je CH₃ a R^ je H nebo R₃ je H a R4 je CH₃,

R₅ je H,

Rg je acetylová skupina,

Y je 0 nebo NH a

Z je CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHR₉ nebo CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupina, kde Rg, R?, R|q a R^? jsou stejné a znamenají acetylovou skupinu.
36. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, že vhodnými anorganickými nebo organickými kyselinami za podmínek hydrolýzy hydroxyiminoskupiny jsou HC1 nebo ch₃cooh.
37. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, že vhodnými anorganickými nebo organickými zásaditými látkami za podmínek vnitřní aminové acylace jsou hydroxid amonný, hydroxid Sodný, hydroxid draselný nebo triethylamin.
38. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, že katalytická redukce v inertním reakčním rozpouštědle se provádí za přítomnosti vcácných kovů nebo jejich oxidů jako katalyzátorů za teploty místnosti a za tlaku vodíku od 5 x 10⁵ Pa do 7 x 10⁶ Pa.
39. Způsob podle nároku 38, vyznačující se tím, že uvedený katalyzátor je oxid platičitý.

í 40. Způsob podle že reakčním octová. nároku 38, inertním vyznaču rozpouštědlem j i je c i se ledová tím, kyselina 41. Způsob podle nároku 29, vyznaču j í c í se tím,

že reduktivní N-alkylační sloučenina obecného vzorce I, kde a R₂ jsou stejné a znamenají H,

R₃ je CHg a R₄ je H nebo Rg je H a R₄ je CHg,

Y je NH a

Z je CH₃ nebo skupina CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅, nebo jejich farmaceuticky přijatelné přídavné soli s anorganickými nebo.organickými kyselinami, se používá s vhodnými alkylačními činidly za přítomnosti vhodných reduktívních činidel v inertním reakčním rozpouštědle při teplotě varu pod zpětným chladičem, přičemž se získají sloučeniny obecného vzorce I, kde

Rl a R₂ jsou stejné a znamenají CHg,

Rg je CHg a R₄ je H nebo R₃ je H a R₄ je CH₃,

Y je NH a

Z je CH₃ nebo skupina CH(CH₃)CH(OH)COH(CHg)CH(OH)C₂H₅, nebo jejich farmaceuticky přijatelné přídavné soli s anorganickými nebo organickými kyselinami,
42. Způsob podle nároku 41, vyznačující se tím, že vhodné alkylační činidlo pro daný způsob redukce je aldehyd.
43. Způsob podle nároku 42, vyznačuj ící se tím, že vhodný aldehyd je formaldehyd.

I
44. Způsob podle nároku 41, vyznačující se tím, že vhodným reduktivním činidlem je kyselina mravenčí.
45. Způsob podle nároku 41, vyznačující se tím, že inertním reakčním rozpouštědlem je chloroform.