SI9500358A

SI9500358A - New compounds of the secomacrolide and secoazalide class and a process for the preparation thereof

Info

Publication number: SI9500358A
Application number: SI9500358A
Authority: SI
Inventors: Gorjana Lazarevski; Gabrijela Kobrehel
Original assignee: Pliva Pharm & Chem Works
Priority date: 1995-03-27
Filing date: 1995-11-21
Publication date: 1996-10-31
Also published as: SK152195A3; CZ313495A3; BG100164A; CN1133294A; CA2164152A1; HRP950145A2; EP0735041A1; CA2164152C; CN1053911C; RU2130936C1; PL312209A1; US5721346A; BG62333B1; RO116017B1; JPH08269078A

Description

PLIVA farmaceutska, kemijska, prehrambena i kozmetička industrija, d.d.

Nove spojine iz vrst sekomakrolidov in sekoazalidov ter postopek za njihovo izdelavo

Področje tehnike, v katero spada izum

A 61K 31/70, C 07 H17/08.

Tehnični problem

Predloženi izum se nanaša na nove spojine iz vrst sekomakrolidov in sekoazalidov, potencialnih intermediatov pri pripravi novih makrolidnih in azalidnih antibiotikov, kot tudi na postopek za njihovo izdelavo.

Stanje tehnike

Eritromicin A je pomemben makrolidni antibiotik, katerega strukturo karakterizira 14-členski laktonski obroč s keto skupino v C-9 položaju (McGuire; Antibiot. Chemother., 1952; 2:281). Že več kot 40 let se šteje za zanesljivo in aktivno antimikrobno sredstvo pri zdravljenju gram-pozitivnih infekcij. Osnovno pomanjkljivost pri uporabi eritromicina A v humani terapiji predstavlja omejen spekter delovanja proti gram-negativnim bakterijskim sevom, gastrična intoleranca pri mnogih pacientih ter izguba aktivnosti v kislem mediju ob nastajanju inaktivnega metabolita anhidroeritromicin. Spirociklizacijo aglikonskega obroča eritromicina A uspešno inhibirajo s kemijsko transformacijo C-9 ketona oz. hidroksilnih skupin v C-6 in/ali C-12 položaju. Tako npr. z oksimiranjem C-9 ketona s hidroksilaminhidrokloridom, z Beckmannovim pregrajevanjem dobljenega 9(£')-eritromicin A oksima in z redukcijo nastalega bicikličnega 6,9-imino etra dobimo 9-deokso-9a-aza-9a-homoeritromicin A, prvi makrolid s 15-členskim azalaktonskim obročem (Kobrehel G. et al. US Pat. 4,328,334 5/1982). Z reduktivnim metiliranjem 9a-amino skupine po EschweilerClarkovem postopku so sintetizirali 9-deokso-9a-metil-9a-aza-9a-homoeritromicin A (AZITROMICN) (Kobrehel G. in sodel.; BE Pat. 892 357 7/1982), prototip nove vrste azalidnih antibiotikov. Poleg širokega antimikrobnega spektra, ki vključuje gram-negativne bakterije in intracelularne mikroorganizme, azitromicin karakterizira specifičen mehanizem transporta do mesta uporabe, dolgo biološko polživljenje ter kratek čas terapije.

Nedavno je bila opisana hidroliza in alkoholiza C-l laktona eritromicina A in B, pri katerem nastanejo ustrezne linearne sekokisline ali estri (Martin S. F.; J. Am. Chem. Soc., 1991,113, 5478-5480). Nadalje so opisane bazno katalizirane transformacije, pri katerih pride do odprtja makrocikličnega obroča ob nastanku C-l karboksilata (Waddel S.T in Blizzard T.A.; PCT, WO 94/15617, 7/1994). Opisana je prav tako tvorba novih makrolidnih in azalidnih obročev, s kombinacijo vzhodnih 8a-aza-(Cl/C-8) in 9a-aza-(C-l/C-9) fragmentov 9-deokso-8a-aza-8a-homoeritromicina A in 9-deokso-9a-aza-9a-homoeritromicina A z različnimi fragmenti, ki postanejo zahodni del molekule. Poudariti je treba, da se zgoraj dobljeni C-l/C-9 linearni fragment razlikuje od ustreznega fragmenta v azitromicinu po dodatni etilni skupini na C-9 atomu ogljika.

Opis rešitve tehničnega problema

Glede na poznano in ugotovljeno stanje tehnike linearni 9a-azalidni fragmenti makrolidnih antibiotikov iz vrste azalidov s splošno formulo (I)

kjer sta

Rj in R₂ medsebojno enaka in pomenita H ali CH₃,

R₃ in R₄ medsebojno različna in pomenita H ali CH_y

Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni CHg ali CHCCH^CHCOHKnHia^CHiOHjCjHj skupino, ali njihove farmacevtsko sprejemljive, adicijske soli z anorganskimi ali organskimi kislinami, do sedaj niso bili opisani. Substituenta R₃ in R₄ označujeta dve epimemi obliki navedene spojine s splošno formulo (I), ki se strukturno razlikujeta samo v konfiguraciji kiralnega centra na C-8 ogljiku. Čeprav stereokemija na C-8 ogljiku ni določena, na osnovi podobnosti kemijskih premikov teh spojin in izhodnega 6,9imino etra, ki ima C-8 (R) konfiguracijo, je spojina, kjer Rg pomeni CHg skupino, pripisana (R) konfiguracija.

Predloženi izum vključuje tudi postopek in dosedaj neopisane intermediate za pripravo spojin s splošno formulo (I). Struktura intermediata je prikazana s splošno formulo (II),

kjer

X pomeni O ali NOR_?, kjer R_? pomeni H, acilno ali arilsulfonilno skupino, Rg in R₄ sta medsebojno različna in pomenita H ali CHg,

R₅ in R₆ sta medsebojno enaka ali različna in pomenita H ali acilno skupino, Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni OHg, CH(C₂H₅)COH(CHg)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ ali CH(CH₃)ČH(OR₁₀)COH(CHg)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupino,

R_g pomeni H ali acilno skupino,

R₉ pomeni H, acilno ali arilsulfonilno skupino, in sta R₁₀ in R_n medsebojno enaka in pomenita H ali acilno skupino.

Predloženi izum se prav tako nanaša na njihove farmacevtsko sprejemljive adicijske soli z anorganskimi ali organskimi kislinami.

Na splošno lahko rečemo, da je pri novih spojinah s splošno formulo (I) in (II) vzhodni del molekule, ki vključuje oba sladkorja, strukturno identičen ustreznemu C-l/C-9 fragmentu makrolaktonskega obroča eritromicina A 6,9-imino etra oz. 9-deokso-9a-aza-9a-homoeritromicina A, medtem ko zahodni del pomeni C-l metilestrsko skupino, ali nesubstituirani oz. substituirani C-10/C-15 fragment izhodnega imino etra s terminalno nesubstituirano ali substituirano primarno amino skupino, ali pa pomeni inverzno vezani isti fragment na C-l atomu, ki daje namesto C-l laktona nove, do danes neopisane C-l amide.

Novi 9a-azalidni fragmenti s splošno formulo (I)

kjer sta

Rj in R^ medsebojno enaka in pomenita H ali CH^,

R₃ in R₄ medsebojno različna in pomenita H ali CH₃,

Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni CH₃ ali CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅ skupino, in njihove farmacevtsko sprejemljive adicijske soli z anorganskimi ali organskimi kislinami, dobimo izhajajoč iz eritromicina A 6,9-imino etra s formulo (III):

Η,(

HO

^OCHj (III)

A) z delovanjem kislin pri pogojih hidrolize imino skupine, in zatem po potrebi z Nin/ali O-aciliranjem z anhidridi ali kloridi kislin, in nato po potrebi s solvolizo, ali

B) z reakcijo s hidroksilamin hidrokloridom v prisotnosti ustreznih anorganskih ali organskih baz v eni ali dveh reakcijskih stopnjah in zatem po potrebi

BI) z delovanjem ustreznih anorganskih ali organskih kislin pri pogojih hidrolize hidroksiimino skupine in nato po potrebi z N- in/ali O-aciliranjem in nato s solvolizo kot je opisana pod A), ali po potrebi

B2) z N- in/ali O-aciliranjem z anhidridi ali kloridi kislin in nato po potrebi s solvolizo ali po potrebi

B3) z delovanjem ustreznih anorganskih ali organskih baz pri pogojih inertnega aciliranja amina in nato po potrebi z N- in/ali O-aciliranjem z anhidridi ali kloridi kislin in nato po potrebi s solvolizo, pri čemer dobimo spojine s splošno formulo (II)

x.

kjer

X pomeni O ali NOR_?, kjer R_? pomeni H, acilno ali arilsulfonilno skupino,

R₃ in R₄ sta medsebojno različna in pomenita H ali CH₃,

R_s in R₆ sta medsebojno enaka ali različna in pomenita H ali acilno skupino,

Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni CH^ CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ ali

CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR_n)C₂H₅ skupino,

Rg pomeni H ali acilno skupino,

R₉ pomeni H, acilno ali arilsulfonilno skupino, in sta R₁₀ in R_n medsebojno enaka in pomenita H ali acilno skupino, in njihove farmacevtsko sprejemljive adicijske soli z anorganskimi ali organskimi kislinami, katere po potrebi izpostavimo katalitični redukciji in nato po potrebi reduktivnemu N-alkiliranju z ustreženimi alkflimimi sredstvi v prisotnosti ustreznega reduktivnega sredstva, pri čemer dobimo spojino s splošno formulo (I), kjer imajo R_pR₂, R₃, R₄, Y in Z zgoraj navedene pomene. Pripravo novih spojin s splošno formulo (I) in (II) lahko prikažemo z reakcijskima shemama 1 in 2.

Spojino s splošno formulo (II), kjer sta X in Y enaka in pomenita O, R₃ je CHg in je R₄ H, R₅ in R₆ sta medsebojno enaka in pomenita H,

Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR₉, kjer sta Rg in R₉ enaka in pomenita H (shema 1,2a) dobimo po postopku A) z delovanjem kisline, prednostno ledocetne kisline na eritromicin A 6,9-imino eter s formulo (III) pri pogojih hidrolize imina ob cepljenju C-9/9a-N vezi, pri sobni temperaturi v teku treh dni ali z delovanjem anorganskih ali organskih kislin pri pogojih hidrolize hidroksiimino skupine na spojino, ki jo dobimo po postopku B) s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR_?, kjer je R_? H, R₃ je Ct^ in je R₄ H, R₅ in R₆ sta medsebojno enaka in pomenita H, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer sta Rg in R₉ enaka in pomenita H. Prednostno hidrolizo hidroksiimino skupine izvedemo tako, da jo pustimo v zmesi metanola/HG pri sobni temperaturi 10 dni. Dobljeni produkt z novim 5-členskim laktonskim obročem izoliramo z običajnim postopkom gradientne ekstrakcije (pH 5,5, 6,5 in 8,3) ter uparjenjem združenih organskih ekstraktov pri pH 8,3 in nato po potrebi izpostavimo N- in/ali O-aciliranju s kislinskimi anhidridi ali kloridi.

Reakcijo aciliranja dobljenega laktona s kislinskimi anhidridi izvedemo z običajnim postopkom (Jones et al., J. med. Giem. 1971; 5:631 in Banaszek et al., Rocy. Giem., 1969; 43: 763), pri čemer dobimo ustrezne tetraalkanoil derivate. Tako npr. z aciliranjem z anhidridom ocetne kisline v reakcijsko inertnem topilu, prednostno piridinu, pri sobni temperaturi v teku 7 dni nastane 2’,4”,ll-O,10-N-tetraacetat s splošno formulo (II), kjer sta X in Y enaka in pomenita O, R₃ je CH₃, R₄ je H, R₅ in R₆ sta medseboj enaka in pomenita COCH₃, Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉, kjer sta R_g in R₉ enaka in pomenita COCH₃ (spojina 2b). S tem, da 2’,4”,ll-O,10-N-tetraacetat pustimo v metanolu pri sobni temperaturi tri dni, pride do solvolize estrske skupine v 2’-položaju, pri čemer nastane 4”,ll-O,10-N-tetraacetat s splošno formulo (II), kjer je R₅ H ter X, Y, Z, R₃, R₄, R₆, R_g in R₉ pomenijo isto kot je navedeno zgoraj za tetraacetat (spojina 2c). Aciliranje s kislinskimi kloridi, prednostno s 4-brombenzoil kloridom izvedemo v reakcijsko inertnem topilu, prednostno dietiletru pri temperaturi od 0 do 5°C v treh urah, pri čemer dobimo 10-N-brombenzoil-derivat s splošno formulo (II), kjer sta X in Y enaka in pomenita O, R₃ je CH₃ in je R₄ H, R₅ in R₆ sta meseboj enaka in pomenita H, Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR₉, kjer je R_g H in R₉ pomeni 4-brombenzoilno skupino (spojina 2d).

Reakcijo eritromicina A 6,9-imino etra s formulo (III) s hidroksilamin hidrokloridom izvedemo po postopku B) v reakcijsko inertnem topilu v prisotnosti anorganskih ali organskih baz v eni ali dveh reakcijskih stopnjah pri temperaturi od 25 do 70°C. Pri vodenju reakcije v eni stopnji pride do pretrganja C-9/9a-N vezi, pri čemer nastaneta hidroksilimino skupina na C-9 atomu in primarna amino skupina na C-10 atomu, tako da dobimo spojino s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR_? skupino, kjer je R_? H, Y je O, R₃ pomeni CH₃ in je R₄ H, R_s in R₆ sta medsebojno enaka in pomenita H, Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR₉, kjer sta R_gin R₉ enaka in pomenita H, kot edini produkt (shema 1, 3a). Reakcijo izvedemo z 1,1 do 30 molamim prebitkom hidroksilamin hidroklorida, prednostno s 5,2 molarnim prebitkom. Prednostna reakcijsko inertna topila so alkoholi, prednostno metanol. Kot akceptorje kislin uporabimo anorganske baze, kot so alkalni kovinski karbonati ali hidrogenkarbonati, prednostno natrijev karbonat oz. kalijev karbonat ali organske baze, kot je piridin, ki istočasno lahko rabijo tudi kot reakcijsko inertna topila. Izolacijo izvedemo z običajnim postopkom ekstrakcije z organskimi topili, prednostno s kloriranimi ogljikovodiki, prednostno z metilenkloridom pri pH 10. V primeru, da reakcijo vodimo v dveh stopnjah, v prvi reakcijski stopnji eritromicin A 6,9-imino eter s formulo (III) izpostavimo delovanju najmanj 1,3 molarnega prebitka zgoraj opisanih anorganskih ali organskih baz, v reakcijsko inertnem topilu, prednostno Cj-C₄ alkoholi, prednostno metanolu, ob refluktiranju reakcijske zmesi do nastanka imino etra (TLC) in nato dobljeno zmes produkta izoliramo s postopkom ekstrakcije, prednostno s kloriranimi ogljikovodiki, prednostno z metilenkloridom pri pH 8 in v drugi stopnji surovi produkt izpostavimo delovanju hidroksilamin hidroklorida v prisotnosti anorganskih ali organskih baz, kot je opisano zgoraj, potem reakcija ni nedvoumna. Dobljeno zmes produkta izoliramo z gradientno ekstrakcijo z organskimi topili, prednostno z metilenkloridom pri pH 8 in 10. S koncentriranjem združenih organskih ekstraktov pri pH 10 dobimo zmes dveh produktov, od katerih je eden identičen spojini (3a), drugi pa je njegov C-8(S) enantiomer s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR_? skupino, kjer je R_? H, Y je O, R₃ pomeni H in je R₄CH₃, R₅ in R₆ sta medsebojno enaka ter pomenita H in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer sta R_g in R₉ enaka in pomenita H (shema 2, 3b). Z uparjenjem združenih organskih ekstraktov pri pH 8 v prisotnosti spojin (3a) in (3b) dobimo dva izomerna C-8 oksima s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR_? skupino, kjer je R_? H, Y je O, R₃ in R₄ sta različna in pomenita H ali CH₃ skupino, R₅ in R₆ sta medsebojno enaka in pomenita H in Z pomeni CH₃ (shema 2, 7a in 7b), kot rezultat istočasnega cepljenja C-9/9a-N vezi in makrocikličnega C-l laktona, pri čemer nastane C-l metoksilat. Dobljeni spojini (7a) in (7b) ločimo s kromatografijo na stolpcu silikagela, pri čemer uporabimo sistem CHCl₃-CH₃OH-konc.-NH₄OH, 6:1:0,1, in nato po potrebi izpostavimo katalitični redukciji.

Oksima (3a) in (3b) s terminalno amino skupino izpostavimo po potrebi N- in/ali O-aciliranju z anhidridi kislin ali kislinskimi kloridi, kot je opisano v postopku A) in nato po potrebi solvolizi. Tako npr. z aciliranjem spojine (3a) z anhidridom ocetne kisline dobimo 2’,4”,ll-O,10-N-tetraacetil 9(E)-acetoksim s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR_?, kjer je R_? COCH₃ skupina, R₃ je CH₃ in R₄ je H, R₅ in R₆ sta medseboj enaka in pomenita COCH₃, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer sta R_g in R₉ enaka in pomenita COCH₃ (spojina 3c), katero po potrebi izpostavimo solvolizi, prednostno metanolizi, da dobimo spojino s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR_?, kjer je R_? H, R₃ je CH₃, R₄ in R₅ sta medsebojno enaka in pomenita H, R₆ je COCH₃, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer sta R_gin R₉ enaka in pomenita COCH₃ (spojina 3d). Z reakcijo spojin (3a) in (3b) s kislinskimi kloridi v reakcijsko inertnem topilu v prisotnosti anorganskih ali organskih baz pri temperaturi od 0 do 25°C nastanejo mono- in disubstituirani acilni derivati, katere po potrebi ločimo s kromatografijo na stolpcu silikagela, pri čemer uporabimo sistem topil CH₂C1₂-CH₃OH, 85:15. Prednostno z reakcijo spojine (3a) s tozilkloridom v prisotnosti NaHCO₃ v acetonu v treh urah nastanejo spojine s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR_?, kjer je R_? tožil, R₃ je CH₃, R₄, R₅ in R₆so medsebojno enaki in pomenijo H, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer je R_g H, R₉ pomeni tožil (spojina 3e), oz. kjer X pomeni NOR_?, kjer je R_? je H, R₃ je CH₃, R₄, R₅ in R₆so medseboj enaki in pomenijo H, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer je R₈ H in R₉ tožil (spojina 3f).

Spojini (3a) in (3b) po potrebi izpostavimo delovanju baze pri pogojih internega aciliranja amina in zatem po potrebi katalitični redukciji. Reakcija internega aciliranja zgoraj navedenih primarnih aminov izvedemo pri sobni temperaturi v prisotnosti anorganskih ali organskih baz, prednostno z amonijevim hidroksidom, kalijevim ali natrijevim hidroksidom ali trietilaminom, pri čemer pride do interne migracije C-l aciloksi skupine od kisika na terminalno amino skupino, kar povzroči inerzijo C-10/C-15 zahodnega fragmenta molekule in nastanek C-l amida s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR₇, kjer je R_? H, R₃ in R₄ sta medsebojno različna in pomenita H ali CH₃, R₅ in R₆ sta medsebojno enaka in pomenita H, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupino, kjer sta R₁₀ in R_nenaka in pomenita H (shema 2, 4a in 4b), katerega po potrebi izpostavimo N- in/ali O-aciliranju z anhidridi kislin ali kislinskimi kloridi in po potrebi izpostavimo katalitični redukciji.

Z reakcijo N- in/ali O-aciliranja spojin (4a) in (4b) z anhidridi kislin po postopku A) dobimo 2’,4”-O-diacil-lN-(2,4-O-diacil)-9-(£) aciloksim. Tako npr. z aciliranjem spojine (4a) z anhidridom ocetne kisline v piridinu pri sobni temperaturi v desetih dneh dobimo spojino s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR_?, kjer je R_? COCH₃skupina, R₃ je CH₃ in je R₄ H, R₅ in R₆ sta medsebojno enaka in pomenita COCH₃, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupino, kjer sta R_J0 in R_n enaka in pomenita COCH₃ (spojina 4c). Spojino (4c) po potrebi izpostavimo solvolizi, prednostno metanolizi, pri čemer pride do deaciliranja 2’-položaja oz. 2’- in 9-oksimestrske skupine, pri čemer dobimo spojine s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR_?, kjer je R_? COCH₃ skupina, R₃ je CH₃ in je R₄ H, R₅ je H, R₆pomeni C O C H ₃ , Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupino, kjer sta R₁₀ in R_n enaka in pomenita COCH₃ (spojina 4d) oz. kjer X pomeni NOR_?, kjer je R_? H, R₃ je CH₃ in je R₄ H, R₅ je H, R₆ pomeni COCH₃, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR_n)C₂H₅ skupino, kjer sta R₁₀ in R_n enaka in

Ifr pomenita COCH₃ (spojina 4e). Z reakcijo s kislinskimi kloridi analogno pripravi tozil-derivatov (3e) in (3f) dobimo monosubstituirane acilne derivate. Prednostno z reakcijo (4a) s tozilkloridom v acetonu v prisotnosti NaHCO₃ pri sobni temperaturi v dvanjastih urah dobimo tožil derivat s splošno formulo (II), kjer X pomeni NOR_?, kjer je R_? tožil, kjer je R₃ CH₃ in R₄, R₅ in R₆ pomenijo H, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR_W)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupino, kjer sta R₁₀ in R_n enaka in pomenita H (spojina 4f).

Katalitično redukcijo zgoraj navedenih oksimov (4a, 4b, 7a in 7b) izvedemo v reakcijsko inertnem topilu v prisotnosti plemenitih kovin ali njihovih oksidov kot katalizatorjev pri sobni temperaturi in tlaku vodika od 5xl0⁵ do 7xl0⁶ Pa v Času od deset ur do treh dni. Prednostno redukcijo izvedemo v ledocetni kislini ob uporabi platinovega(IV) oksida kot katalizatorja v desetih urah pri tlaku vodika 7xl0⁶ Pa in produkt izoliramo z običajnim postopkom gradientne ekstrakcije (pH 5,5, 9,0 in 10,5) s kloriranimi ogljikovodiki, prednostno kloroformom, ter uparjanjem združenih organskih ekstraktov pri pH 10,5. Dobljene amine s splošno formulo (I), kjer sta Rj in R₂ medseboj enaka in pomenita H, R₃ pomeni CH₃ in R₄ je H ali R₃ pomeni H in je R₄ C H ₃ , Y pomeni O ali NH, Z je C H ₃ ali CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅ skupina (shema 2, 5a, 5b, 8a in 8b), po potrebi izpostavimo reduktivnemu N-alkiliranju.’ Prednostno reduktivno N-metiliranje izvedemo z 1-4 ekvivalenti formaldehida (37%) v prisotnosti enake ali dvojne količine mravljinčne kisline (98 do 100%), v reakcijsko inertnem topilu, kot so halogenirani ogljikovodiki, prednostno v kloroformu pri temperaturi refluksa reakcijske zmesi v 2 do 20 urah, odvisno od količine uporabljenega aldehida in kisline. Dobljeni produkt izoliramo z običajnim postopkom gradientne ekstrakcije (pH 5,0 in 9,5) ter uparjanjem združenih organskih ekstraktov pri pH 9,5 in po potrebi očistimo s kromatografijo na stolpcu silikagela, pri čemer uporabimo sistem CHCL^-CHjOHkonc.NH₄OH, 6:1:0,1, da dobimo dimetilamino derivate s splošno formulo (I), kjer sta R₂ in R₂ medsebojno enaka in pomenita CH₃, R₃ pomeni CH₃ in je R₄ H, ali R₃pomeni H in je R₄ CH₃, Y pomeni O ali NH, Z pomeni CH₃ ali CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅ skupino (shema 2, 6a, 6b, 9a in 9b).

Farmacevtsko sprejemljive adicijske soli, ki prav tako predstavljajo predmet predloženega izuma, dobimo z reakcijo seko derivatov s splošnima formulama (I) in (II) z najmanj ekvimolarno količino ustrezne anorganske ali organske kisline, kot so npr.: klorovodikova, jodovodikova, žveplova, fosforna, ocetna, propionska, trifluorocetna, maleinska, citronska, stearinska, jantarna, etiljantarna, metansulfonska,

11benzensulfonska, p-toluensulfonska, lavrilsulfonska ipd., v reakcijsko inertnem topilu. Adicijske soli izoliramo s filtracijo, v kolikor so netopne v reakcijsko inertnem topilu, z obarjanjem z netopilom ali z uparjanjem topila, navadno s postopkom liofilizacije.

Z navedenim nizom reakcij se odpre 15-členski azalaktonski obroč eritromicin A 6,9-imino etra, pri čemer nastanejo seko derivati z različnimi zelo reaktivnimi terminalnimi funkcionalnimi skupinami, kar daje možnost priprave celotnega niza novih makrolidov oz. azalidov z modificiranim makrocikličnim aglikonom. Pri spojinah z inverzijo zahodnega dela molekule (4, 5 in 6), 2,3,4-trihidroksi-l,3dimetil-heksilna skupina predstavlja C-10/C-15 fragment eritromicina A 6,9-imino etra, pri katerem smo zaradi enostavnosti navajanja spektroskopskih podatkov ohranili oznake položajev atomov ogljika kot so jih ti atomi imeli pred inverzijo fragmenta. Te oznake so tudi na shemah 1 in 2.

SHEMA 1

12a

SHEMA 1 - nadaljevanje

1. PtO2, H₂.HOAc

2. HCOH, HCOOH, CHCI3

(5a)Rj =R₂ = H (6a)R, = R₂ = CH₃

SHEMA 2

1. Na2CC>3,MeOH

2. NH₂OH, Na₂CO-j, pH = 8

(7a) R₃ = CH3,R4=H (7b) R₃ =H,R4=CH3 (4a) R₃ =CH₃ ,R₄=H (4b) R₃ = H, R₄ = CH₃

13a

SHEMA 2 - nadaljevanje

1. PtO₂, H₂, HOAc ’ r

Ri R_:

1. PtO₂, H₂. HOAc

2. HCOH.HCOOH, _r CHC1₃

(8a)R| = R₂ = Kt = H,R₃ = CH₃(8b) Ri =R₂ = R₃ = H.R₄ = CH₃(9a)R| =R₂ =R₃ = CH₃ . R₄ = H (9b)Ri = R₂ = IL = CH₃ . R₃ =H (5a) R, = R₂ = R, =H .R3 = CHi (5b) R, = R₂ = r₃ = h . Ri = CKi (6a) R, =r₂ = R₃ = CH₃ ,R4 =H (6b) R, =R₂ =R4 =CH3 . R3 =H

Postopek ponazarjajo naslednji primeri, ki nikakor ne omejujejo obsega predloženega izuma.

Primer 1

9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-10-amino-9,10-sekoeritromicin A 9(£’)-oksim: (3a)

Postopek A.

V raztopino eritromicina A 6,9-imino etra (1) (36.0 g, 0.049 mol) v CH₃OH abs. (750 ml) dodamo NH₂OH HC1 (18 g, 0.259 mol) v Na₂CO₃ (6,8 g, 0.0642 mol), in nato reakcijsko zmes mešamo ob refluksu 3 ure. Reakcijsko suspenzijo uparimo pri znižanem tlaku, trdnemu ostanku dodamo 240 ml H₂O in 240 ml CH₂C1₂ (pH 6,8), pH naravnamo na 10 z 20% mas/vol NaOH in vodni del ponovno ekstrahiramo s CH₂C1₂. Po sušenju nad B/CC/ združene organske ekstrakte uparimo do suhega in dobljeni produkt sušimo v visokem vakuumu (6 ur, 40°C), pri čemer dobimo 34.3 g (91.0%) TLC homogene substance (3a).

IR (CHCf ) cm'¹ 3425, 2970,1720,1690,1580,1455,1380,1300,1260,1165,1050.

Ή NMR (300 MHz, CDC/) δ 4.98 (H-l”), 4.78 (H-13), 4.45 (H-l’), 4.60 (H-3), 3.90 (H-5), 3.49 (H-ll), 3.28 (3”-OCH₃), 3.05 (H-10), 2.92 (H-8), 2.84 (H-2), 2.28 /3’N(CH₃)₂/, 2.08 (H-7a), 1.88 (H-7b), 1.87 (H-14a), 1.82 (H-4), 1.51 (H-14b), 0.87 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC/) δ 175.5 (C-l), 161.1 (C-9), 103.1 (C-l’), 95.0 (C-l”),

88.5 (C-6), 81.9 (C-5), 78.1 (C-13), 76.7 (C-3), 73.5 (C-12), 72.5 (C-ll), 48.7 (3”OCH₃), 46.7 (C-10), 43.4 (C-2), 39.8 /3’N(CH₃)₂/, 39.7 (C-4), 31.9 (C-8), 21.3 (C-14),

10.6 (C-15).

FAB (MH⁺⁾ 764.4.

Postopek B

V raztopino eritromicina A 6,9-imino etra (1) (36.0 g, 0.049 mol) piridinu (100 ml) dodamo NH₂OH HC1 (18 g, 0.259 mol), nato reakcijsko zmes mešamo 3 ure pri sobni temperaturi. Reakcijski raztopini dodamo 400 ml H₂O in 140 ml CH₂C1₂ in produkt izoliramo z gradientno ekstrakcijo pri pH 7.0 in 10.0. Z uparjanjem združenih organskih ekstraktov pri pH 10.0 dobimo 25.0 g (66.4%) produkta (3a) z identičnimi fizikalno-kemijskimi konstantami, kot je opisano v postopku A.

:

Primer 2

2’,4”,ll-0,10-N-tetraacetil-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-10-amino-9,10sekoeritromicin A 9(£')-acetoksim: (3c)

V raztopino (3a) (1.0 g, 0.0013 mol) v piridinu (40 ml) dodamo acetanhdrid (4 ml) in nato reakcijsko raztopino pustimo, da stoji 7 dni pri sobni temperaturi. Po končanem acetiliranju (TLC) zlijemo reakcijsko zmes v zmes vode in ledu (200 ml) in ekstrahiramo s CH₂C1₃ pri pH 9.0. Združene organske ekstrakte uparimo pri znižanem tlaku, pri čemer dobimo 1.3 g surovega produkta, iz katerega s ponovnim obarjanjem iz zmesi etra-petroletra dobimo 1.13 g TLC homogenega produkta (3c).

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.15 (COMf), 4.97 (H-13), 4.81 (H-2’), 4.78 (H-l”), 4.69 (H-4”), 4.67 (H-ll), 4.48 (H-10), 4.59 (H-l’), 4.11 (H-3), 3.79 (H-5), 3.30 (H3”-OCH₃), 3.14 (H-8), 2.75 (H-2), 2.27 /3’N(CH₃)₂/, 2.16, 2.13, 2.12, 2.05 in 1.96 (COCH₃), 1.90 (H-4), 1.52 (H-14), 0.90 (H-15).

Primer 3

4”,ll-0,10-N-triacetil-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-10-amino-9,10-sekoeritromicin A 9(£)-oksim: (3d)

Raztopino pentaacetata (3c) (0.5 g, 0.0005 mol) v metanolu (20 ml) pustimo, da stoji 3 dni pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo pri znižanem tlaku, dobljeni surovi produkt očistimo s kromatografijo na stolpcu silikagela, pri čemer uporabimo sistem CH₂Cl₂-CH₃OH-konc.NH₄OH, 90:9:1,5, pri čemer dobimo 0.250 g 4”,ll-O,10-N-triacetata (3d) z naslednjimi fizikalno-kemijskimi konstantami.

Ή NMR (300 MHz, CDCL,) δ 6.31 (CONH), 4.95 (H-13), 4.85 (H-l”), 4.67 (H-4”), 4.65 (H-ll), 4.49 (H-10), 4.49 (H-l’), 4.21 (H-3), 3.79 (H-5), 3.29 (H-3”-OCH₃), 3.28 (H-2’), 3.02 (H-8), 2.78 (H-2), 2.30 /3’N(CH₃)₂/, 2.17, 2.13, in 1.96 (COCH₃), 2.07 (H-7a), 2.02 (H-4), 1.85 (H-14a), 1.49 (H-14b), 0.88 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 175.0 (C-l), 172.0,170.7 in 169.3 (COCH₃,162.1 (C-9),

103.5 (C-l’), 95.5 (C-l”), 89.6 (C-6), 81.2 (C-5), 78.3 (C-ll), 78.1 (C-3), 76.8 (C13), 74.9 (C-12), 49.3 (3”-OCH₃), 45.0 (C-10), 42.5 (C-2), 40.1 /3’N(CH₃)₂/, 39.5 (C7), 38.4 (C-4), 32.7 (C-8), 23.1, 20.6 in 20.6 (COCH₃), 21.9 (C-14), 10.7 (C-15).

Primer 4

9- 0,10-N-ditozil-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-10-ainmo-9,10-sekoeritromicin A 9(£)-oksim: (3e)

10- N-tozil-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-10-amino-9,10-sekoeritromicin A 9(£)-oksim: (3f)

Substanco (3a) (2.0 g, 0.0026 mol) iz primera 1 suspendiramo v 70 ml acetona in ohladimo na 0 do 5 °C. V reakcijsko zmes dokapavamo ob mešanju 30 minut istočasno raztopino tožil klorida (1.34 g, 0.007 mol) v acetonu (30 ml) in NaHCO₃ (0.6 g, 0.007 mol) v vodi (95 ml). Reakcijsko suspenzijo mešamo nadaljnje 3 ure pri sobni temperaturi, aceton odparimo z uparjanjem pri znižanem tlaku in vodni ostanek ekstrahiramo s CHC1₃ pri pH 5.0. Po sušenju nad K₂CO₃ in uparevanjem CHC1₃dobimo 2.58 g zmesi produkta (3e) in (3f). S kromatografijo 1.8 g surovega produkta na stolpcu silikagela, pri čemer uporabimo sistem CH₂C1₂-CH₃OH 85:15, dobimo 0.250 g TLC čiste CHC^-CHgOH, 7:3) spojine (3e) z Rf 0.63 in 1.1 g (3f) z Rf 0.43.

Spojina (3e):

IR (CHC1₃) cm'¹ 3460, 2975, 2940, 1730, 1660, 1600, 1455, 1370, 1190, 1180, 1160, 1090,1050,1000, 975, 855, 815, 665.

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) S 7.80 (p-Ph), 7.30 (p-Ph), 4.81 (H-13), 4.78 (H-l”), 4.48 (H-l’), 4.26 (H-3), 3.96 (H-5”), 3.76 (H-5), 3,68 (H-5’), 3.60 (H-ll), 3.50 (H-10), 3.41 (H-2’), 3.23 (3”-OCH₃), 3.09 (H-8), 3.03 (H-4”), 2.94 (H-2), 2.54 /3’N(CH₃)₂/, 2.43 (p-Ph-CH₃), 2.41 (p-Ph-Ctf₃), 2.24 (H-7a), 2.09 (H-7b), 1.91 (H-4), 1.83 (H-4’a), 1.68 (H-14a), 1.52 (H-2”b), 1.41 (H-14b), 1.49 (6-CH₃), 0.89 (H-15).

Spojina (3f):

Ή NMR (300 MHz, CDCf,) δ 7.43 (p-Ph), 7.14 (SO/ZH), 4.91 (H-13), 4.78 (H-l”),

4.60 (H-l’), 4.36 (H-3), 4.00 (H-5”), 3.82 (H-5), 3.73 (H-10), 3.68 (H-5’), 3.64 (H-ll), 3.41 (H-2’), 3.28 (3^00^), 3.08 (H-8), 3.00 (H-4”), 2.79 (H-2), 2.39 (p-Ph-C#₃),

2.24 (H-2”a), 1.73 (H-14a), 1.52 (6-CH₃), 0.85 (H-15).

Primer 5

6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-10-amino-9,10-sekoeritromicin A: (2a)

Postopek A

Raztopino eritromicina A 6,9-imino etra (1) (10,0 g, 0.014 mol) v ledocetni kislini (60 ml), pustimo, da stoji 3 dni pri sobni temperaturi. Topilo odstranimo z uparevanjem pri znižanem tlaku, oljnemu ostanku dodamo H₂O (100 ml) in nato reakcijsko zmes ekstrahiramo s CHC1₃ pri pH 5.5, 6.5 in 8.3. Po sušenju nad Κ^Ο₃ združene organske ekstrakte pri pH 8.3 uparimo do suhega in dobljeni produkt sušimo v visokem vakuumu (6 ur, 40°C), pri čemer dobimo 8.2 g (80.0%) TLC homogenega produkta (2a).

IR (CHC1₃) cm’¹ 1740 (C-l, lakton) in 1710 (C-9, lakton).

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 4.77 (H-l”), 5.00 (H-13), 4.39 (H-l’), 4.18 (H-3), 3.74 (H-5), 3.35 (H-ll), 3.29 (H-3”-OCH₃), 3.16 (H-10), 2.76 (H-8), 2.72 (H-2), 2.29 /3’N(CH₃)₂/, 2.22 (H-7a), 2.10 (H-7b), 2.00 (H-4), 1.85 (H-14a), 1.55 (H-14b), 0.88 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 179.6 (C-l), 176.1 (C-9), 103.9 (C-l’), 95.7 (C-l”),

86.1 (C-6), 81.2 (C-5), 78.8 (C-13), 77.9 (C-3), 75.7 (C-ll), 74.5 (C-12), 49.5 (3”OCH₃), 47.9 (C-10), 43.2 (C-2), 40.4 /3’N(CH₃)₂/, 39.7 (C-4), 38.0 (C-7), 34.1 (C-8),

22.2 (C-14,11.6 (C-15).

EI-MS (M⁺) 748

Postopek B

Raztopino (3a) (2.0 g, 0.0026 mol) v metanolu (30 ml) nakisamo z IN HC1 na pH 3.0 in pustimo, da stoji 10 dni pri sobni temperaturi. Reakcijski zmesi naravnamo pH z 10% NaOH na 7.0, uparimo metanol pri znižanem tlaku in vodnemu ostanku dodamo CHC1₃ ter ekstrahiramo pri pH 5.5, 6.5 in 8.3. Po sušenju nad Κ£Ο₃združene organske ekstrakte pri pH 8.3 uparimo do suhega, pri čemer dobimo produkt (2a) z identičnimi fizikalno-kemijskimi konstantami, kot je opisano v postopku A.

Primer 6

2’,4”,ll-0,10-N-tetraacetil-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-10-amino-9,10-sekoeritromicin A: (2b)

V raztopino (2a) (3.4 g, 0.0045 mol) v piridinu (45 ml) dodamo acetanhidrid (12 ml) in pustimo, da stoji 7 dni pri sobni temperaturi. Po končani reakciji acetiliranja (TLC) zlijemo reakcijsko zmes na led (200 ml) in ekstrahiramo s CHC1₃ pri pH 9.0. Združene organske ekstrakte izperemo z nasičeno raztopino NaHCO₃ in vodo, sušimo nad Κ^Ο₃ ter uparimo pri znižanem tlaku. Dobljeni trdni ostanek posušimo v visokem vakuumu (6 ur, 40°C), pri čemer dobimo 4.10 g (98.0%) kromatografsko homogenega produkta (2b).

IR (CHClg) Cm'¹ 1740 (C-l, lakton), 1720 (C-6, lakton), 1720 in 1240 (C=O, ester), 1655 (C=O, amid).

Ή NMR (300 MHz, CDCL,) δ 6.35 (CONH), 4.99 (H-13), 4.79 (H-l”), 4.79 (H-2’),

4.68 (H-ll), 4.62 (H-l’), 4.44 (H-10), 4.14 (H-3), 3.76 (H-5), 3.32 (H-3”-OCH₃), 2.74 (H-8), 2.65 (H-2), 2.28 /3^(0^)/ 2.10, 2.06, 2.03 in 1.92 (COCH₃), 2.08 (H-7a),

1.96 (H-7b), 1.90 (H-4), 1.81 (H-14a), 1.60 (H-14b), 0.86 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 179.3 (C-l), 174.7 (C-9), 171.9 170.5, 169.9 in 169.2 (COCHf)

EI-MS (M⁺) 916

Primer 7

4”,ll-0,10-N-triacetil-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-10-amino-9,10-sekoeritromicin A: (2c)

Raztopino (2b) (1.5 g, 0.0016 mol) v metanolu (40 ml) pustimo, da stoji 3 dni pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo pri znižanem tlaku, dobljeni oljni ostanek raztopimo v CH₂C1₂ (50 ml) in mu dodamo 100 ml vode, (pH 6.6), nato pH reakcijske zmesi naravnamo na 9.0 z 10% mas/vol NaOH. Plasti se ločijo, vodni del ekstrahiramo še 2-krat s CH₂C1₂. Po sušenju združenih organskih ekstraktov nad K^CC^ in uparevanju topila pri znižanem tlaku dobimo 1.35 g surovega produkta, katerega čistimo s kromatografijo na stolpcu silikagela, pri čemer uporabimo sistem CHCl₃-CH₃OH-konc.NH₄OH, 6:1:0.1, da dobimo TLC homogeni triacetat (2c) z naslednjimi fizikalno-kemijskimi konstantami.

^JH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6.39 (CONH), 4.99 (H-13), 4.79 (H-l”), 4.68 (H-4”), 4.66 (H-ll), 4.48 (H-l’), 4.46 (H-10), 4.21 (H-3), 3.76 (H-5), 3.30 (3”-OCH₃), 3.23 (H-2’), 2.75 (H-8), 2.70 (H-2), 2.29 /3’N(CH₃)₂/, 2.26 (H-7a), 2.16, 2.12 in 1.96 (COCH₃), 2.02 (H-7b), 1.94 (H-4), 1.83 (H-14a), 1.56 (H-14b), 0.86 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 179.2 (C-l), 174.7 (C-9), 171.7, 170.3 in 169.0 (C6>CH₃), 102.9 (C-l’), 94.9 (C-l”), 85.6 (C-6), 80.5 (C-5), 78.3 (C-3), 78.2 (C-ll),

76.7 (C-13), 74.7 (C-12), 49.2 (3^00^), 45.1 (C-10), 42.4 (C-2), 40.0 /3^(0^)/,

39.3 (C-4), 37.3 (C-7), 33.9 (C-8), 21.9 (014), 21.1, 20.9 in 20.6 (COCtf₃), 10.7 (C15).

Primer8

10-N-(4-brombenzoil)-6-deoksi-6,9-epoksi-8(7?)-metil-10-amino-9,10-sekoeritromicin A: (2d)

V raztopino (2a) (10 g, 0.013 mol) v 60 ml dietiletra in NaHCO₃ (8.0 g,

0.095 mol) postopno 1 uro dokapavamo ob mešanju pri temperaturi od 0 do 5°C raztopino 4-brombenzoilklorida (4.0 g, 0.018 mol) v 20 ml dietiletra. Reakcijsko zmes mešamo nadaljnji 2 uri pri enaki temperaturi, topilo uparimo pri znižanem tlaku ter dobljenemu trdnemu ostanku dodamo CHC1₃ (70 ml) in vodo (50 ml) in ekstrahiramo pri pH 8.5. Reakcijsko zmes uparimo pri znižanem tlaku in dobljeni trdni ostanek (5.0 g) očistimo s kromatografijo na stolpcu silikagela, pri čemer uporabimo sistem CH₂Cl₂-CH₃OH-konc.NH₄OH, 90:9:0.5, da dobimo TLC homogeni 4-brombenzoat (2d) z naslednjimi fizikalno-kemijskimi konstantami.

IR (CHC1₃) cm¹ 1740 (C-l, lakton), 1710 (C-9, lakton), 1640 in 1500 (C-10, amid), 1580 (Ph).

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.60 (Ph), 7.05 (CONtf), 4.91 (H-13), 4.70 (H-l”), 4.35 (H-l’), 4.37 (H-10), 4.21 (H-3), 3.70 (H-5), 3.67 (H-ll), 3.27 (3”-OCH₃), 3.15 (H-2’), 2.91 (H-4”), 2.73 (H-8), 2.71 (H-2), 2.26 /3^((¾)^ 2.21, (H-7a), 2.10 (H7b), 1.94 (H-4), 1.86 (H-14a), 1.57 (H-14b), 0.89 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDCy δ 179.6 (C-l), 176.7 (C-9), 165.4 (CONH), 133.8,131.6, 128.9 in 125.8 (Ph), 104.0 (C-l’), 95.0 C-l”), 86.4 (C-6), 81.7 (C-5), 79.9 (C-3), 75.6 (013), 73.4 (C-ll), 74.6 (C-12), 49.4 (3”-OCH₃), 47.3 (C-10), 43.2 (C-2), 40.0 /SNiCHg)/ 40.0 (C-4), 37.8 (C-7), 34.2 (C-8), 22.5 (C-14), 11.2 (015).

EI-MS (M⁺) 931

Primer 9 l-N-(2,3,4-trihidroksi-l,3-dimetil-heksil)-amido-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-9,10-sekoeritromicin A 9(£) oksim (4a)

Substanco (3a) (31 g, 0,041 mol) iz primera 1 raztopimo v 80 ml zmesi CH^OHCHjC^ (1:1), dodamo 350 ml konc. NH₄OH in nato reakcijsko zmes mešamo 6 ur pri sobni temperaturi. Raztopino pustimo, da stoji preko noči, nato pa jo uparimo pri znižanem tlaku, dobljeni trdni ostanek suspendiramo v CF^C^, prefiltriramo in filtrat uparimo do suhega, pri čemer dobimo 29.5 g (95%) TLC (CHC1₃-CH₃OHkonc. NH₄OH, 6:1:0.1) homogenega produkta (4a).

IR (CHClj) cm¹ 3420, 2980,1690,1650,1530,1455,1380,1260,1175,1050.

Ή NMR (300 MHz, CDCf,) δ 7.53 (CONH), 4.93 (H-l”), 4.45 (H-l’), 4.20 (H-3),

4.11 (H-10), 3.79 (H-ll), 3.66 (H-5), 3.39 (3”-OCH₃), 3.22 (H-13), 3.04 (H-8), 2.53 (H-2), 2.29 /3’N(CH₃)₂/, 2.10 (H-7a), 1.97 (H-4), 1.79 (H-7b), 1.59 (H-14a), 1.33 (H14b), 1.04 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 174.4 (C-l), 162.0 (C-9), 105.6 (C-l’), 96.2 (C-l”), 90.3 (C-6), 86.3 (C-5), 83.0 (C-13), 79.8 (C-3), 75.1 (C-ll), 74.9 (C-12) 49.3 (3”-OCH₃),

48.6 (C-10), 42.8 (C-2), 41.0 (C-7), 39.8 /3’N(CH₃)₂/, 38.6 (C-4), 32.9 (C-8), 24.8 (C14), 11.5 (C-15).

FAB (MH⁺) 764.4

Primer 10 l-N-(2,3,4-trihidroksi-l,3-dimetil-heksil)-amido-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-9,10-sekoeritromicin A 9(£) oksim (4a) l-N-(2,3,4-trihidroksi-l,3-dimetil-heksil)-amido-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(5)-metil-9,10-sekoeritromicin A 9(E) oksim (4b)

Eritromicin A 6,9-imino eter (1) (30 g, 0.041 mol) raztopimo v CH₃OH (600 ml), dodamo Na₂CO₃ (5.6 g, 0.053 mol) in reakcijsko zmes mešamo (8 ur) ob refluksu, da izgine izhodni imino eter. Reakcijsko suspenzijo uparimo pri znižanem tlaku, dodamo 130 ml CH₂C1₂ in 130 ml H₂O, (pH 11.1), ter ekstrahiramo pri pH 8. Združene organske ekstrakte sušimo nad K^COg in uparimo, da dobimo 28 g trdnega ostanka. Oborino raztopimo v CH₃OH (600 ml), dodamo 14 g NH₂OH HCI in 5.1 g Na₂CO₃ ter mešamo ob refluksu 3 ure. Reakcijsko zmes uparimo do suhega, dodamo 150 ml CH₂C1₂ in 300 ml H₂O, (pH 6.6), ter ekstrahiramo z gradientno ekstrakcijo pri pH 8 in 10. Združene organske ekstrakte pri pH 10 sušimo nad K^COg in uparimo, da dobimo 15.6 g oborine. Oborino raztopimo v 40 ml zmesi CH₃OH-CH₂C1₂ (1:1) in 170 ml konc. NH₄OH ter mešamo 12 ur pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo do suhega in dobljeno zmes produktov ločimo s kromatografijo na stolpcu silikagela. Iz 2.2 g surovega produkta z uporabo sistema topil CHC1₃-CH₃OHkonc.NH₄OH, 6:1:0.1, izoliramo 1.08 g kromatografsko homogenega produkta (4a) (Rf 0.38) s fizikalno-kemijskimi konstantami, kot je opisano v primeru 9 in 0.80 g substance (4b) (Rf 0.26) z naslednjimi fizikalno-kemijskimi konstantami.

Spojina (4b):

IR (CHC1₃) cm⁴ 3340, 2975,1685,1650,1530,1450,1380,1280,1240,1160,1040.

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.30 (CONH), 4.88 (H-l”), 4.35 (H-l’), 4.23 (H-3),

4.15 (H-10), 3.82 (H-ll), 3.60 (H-5), 3.29 (3^00^), 3.26 (H-13), 3.14 (H-8), 2.78 (H-7a), 2.52 (H-2), 2.29 /3’N(CH₃)₂/, 2.06 (H-4), 1.61 (H-14a), 1.51 (H-7b), 1.37 (H14b), 1.04 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 173.9 (C-l), 162.7 (C-9), 104.6 (C-l’), 95.4 (C-l”), 90.7 (C-6), 84.3 (C-5), 81.6 (C-13), 78.5 (C-3), 74.5 (C-ll), 74.4 (C-12) 48.8 (3”-OCH₃),

47.4 (C-10), 42.7 (C-2), 42.0 (C-7), 39.4 /3’N(CH₃)₂/, 38.7 (C-4), 33.8 (C-8), 24.1 (C14), 11.0 (C-15).

FAB (MH⁺) 764.5

Primer 11

2’-4”-O-diacetil-l-N-(2,4-O-diacetil-3-hidroksi-l,3-dimetil-heksil)-amido-10,ll,12,

13,14,15-heksanor-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-9,10-sekoeritromicin A 9(£) acetoksim: (4c)

V raztopino substance (4a) (1.0 g, 0.0013 mol) iz primera 9 v piridinu (40 ml) dodamo acetanhidrid (4 ml) in nato reakcijsko zmes pustimo, da stoji 10 dni pri sobni temperaturi. Reakcijsko raztopino zlijemo v zmes vode in ledu (200 ml), (pH 4.8), in po naalkaljenju z 20% NaOH ekstrahiramo s CHCL^ pri pH 9.0. Združene organske ekstrakte sušimo nad I^COg in uparimo pri znižanem tlaku, pri čemer dobimo 1.25 g (98%) pentaacetata (4c) z naslednjimi fizikalno-kemijskimi konstantami.

Ή NMR (300 MHz, CDCL,) δ 6.61 (CONH), 4.94 (H-13), 4.82 (H-l”), 4.80 (H-2’),

4.69 (H-4”), 4.58 (H-l’), 4.58 (H-10), 4.55 (H-ll), 4.04 (H-3), 3.79 (H-5), 3.32 (3”OCH₃), 3.13 (H-8), 2.59 (H-2), 2.27 /3’N(CH₃)₂/, 2.15, 2.12, 2.12, 2.06 in 2.01 (COCH₃), 2.07 (H-7a), 2.03 (H-4), 2.03 (H-7b), 1.82 (H-14a), 1.55 (H-14b), 0.90 (H15)· ¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 173.4 (C-l), 171.8, 170.6, 170.2, 169.8 in 168.8 (COCHJ, 167.2 (C-9), 100.6 (C-l’), 95.5 (C-l”), 91.7 (C-6), 79.8 (C-3), 79.6 (C-5),

78.6 (C-ll), 75.7 (C-13), 74.7 (C-12) 49.3 (3”-OCH₃), 45.1 (C-10), 42.6 (C-2), 40.2 /3’N(CH₃)₂/, 38.8 (C-7), 36.7 (C-4), 33.5 (C-8), 21.6 (C-14), 20.9, 20.5, 20.5, 20.4 in

19.4 (COCH₃), 10.5 (C-15).

22?

Primer 12

4”-O-acetil-l-N-(2,4-O-diacetil-3-hidroksi-l,3-dimetil-heksil)-amido-10,ll,12,

13.14.15- heksanor-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-9,10-sekoeritromicin A 9(£) acetoksim: (4d)

13.14.15- heksanor-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(7?)-metil-9,10-sekoeritromicin A 9(£) oksim: (4e)

Raztopino substance (4c) (0.5 g, 0.0005 mol) iz primera 11 v 20 ml metanola mešamo 3 dni pri sobni temperaturi. Z uparjanjem pri znižanem tlaku odstranimo topilo, dobljeno zmes pa očistimo s kromatografijo na stolpcu silikagela z uporabo sistema topil CHCl₃-CH₃OH-konc.NH₄OH, 6:1:0.1. Po uparjanju kromatografskih homogenih frakcij z Rf 0.47 in Rf 0.34 dobimo 0.213 g tetraacetata (4d) in 0.151 g triacetata (4e) z naslednjimi fizikalno-kemijskimi konstantami.

Spojina (4d):

Ή NMR (300 MHz, CDCf ) δ 7.38 (CONH), 4.94 (H-13), 4.83 (H-l”), 4.66 (H-4”), 4.62 (H-ll), 4.55 (H-10), 4.44 (H-l’), 4.10 (H-3), 3.80 (H-5), 3.32 (3”-OCH₃), 3.35 (H-2’), 3.18 (H-8), 2.76 H-2), 2.30 /3’N(CH₃)₂/, 2.07 (H-7a), 2.13, 2.10, 2.09 in 2.03 (COCtf₃), 1.90 (H-7b), 1.96 (H-4), 1.84 (H-14a), 1.53 (H-14b), 0.90 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC^) δ 174.4 (C-l), 171.1, 170.7, 170.4 in 168.4 (COCH₃),

167.2 (C-9), 105.2 (C-l’), 96.9 (C-l”), 92.9 (C-6), 84.5 (C-5), 81.3 (C-3), 78.5 (C-ll), 75.9 (C-13) 75.0 (C-12), 49.4 (3”-OCH₃), 44.6 (C-10), 41.1 (C-2), 40.1 /3’N(CH₃)₂/,

40.8 (C-7), 38.0 (C-4), 33.8 (C-8), 21.7 (C-14), 20.7, 20.5, 20.4 in 19.2 (COCHJ, 10.5 (C-15).

Spojina (4e):

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.24 (CONH), 4.88 (H-13), 4.81 (H-l”), 4.68 (H-4”), 4.62 (H-ll), 4.50 (H-10), 4.45 (H-l’), 4.07 (H-3), 3.75 (H-5), 3.34 (3”-OCH₃), 3.26 (H-2’), 2.98 (H-8), 2.56 (H-2), 2.30 /3’N(CH₃)₂/, 2.09 (H-7a), 2.14, 2.09 in 2.03 (COCHJ, 1.92 (H-7b), 1.89 (H-4), 1.83 (H-14a), 1.51 (H-14b), 0.89 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 174.6 (C-l), 171.1,170.8, 170.8 (C6>CH₃), 162.5 (C-9),

104.2 (C-l’), 96.4 (C-l”), 90.4 (C-6), 83.9 (C-5), 79.6 (C-3), 78.7 (C-ll), 76.1 (C-13)

75.1 (C-12), 49.5 (3”-OCH₃), 44.7 (C-10), 43.7 (C-2), 40.1 /3’N(CH₃)₂/, 40.4 (C-7),

39.3 (C-4), 32.5 (C-8), 21.8 (C-14), 20.7, 20.7 in 20.6 (COCHJ, 10.7 (C-15).

Primer 13 l-N-(2,3,4-trihidroksi-l,3-dimetil-heksil)-amido-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-9,10-sekoeritromicin A 9(£) toziloksim (4f)

Substanco (4a) (0.5 g, 0,0007 mol) iz primera 9 suspendiramo v 10 ml acetona in ohladimo na 0 do 5 °C. V reakcijsko zmes dokapavamo ob mešanju 30 minut istočasno raztopino tožil klorida (0.486 g, 0.0026 mol) v acetonu (10 ml) in NaHCO₃(0.425 g, 0.0051 mol) v vodi (25 ml). Reakcijsko suspenzijo mešamo nadaljnjih 12 ur pri sobni temperaturi, z uparjanjem pri znižanem tlaku odparimo aceton in vodnemu ostanku dodamo 30 ml CHC1₃ ter ekstrahiramo z gradientno ekstrakcijo pri pH 5.0 in 8.0. Z uparjanjem združenih organskih ekstraktov pri pH 5.0 dobimo 0.320 g surovega produkta (4f). S kromatografijo na stolpcu silikagela z uporabo sistema CHCl₃-CH₃OH-konc.NH₄OH, 6:1:0.1 dobimo 0.260 g TLC homogenega produkta (4f).

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.80 (CONH}, 7.62 (Ph), 3.21 (H-13), 4.96 (H-l”), 4.41 (H-l’), 4.17 (H-3), 4.11 (H-10), 3.79 (H-ll), 3.58 (H-5), 3.39 (H-2’), 3.25 (3”OCH₃), 3.10 (H-8), 2.94 (H-4”), 2.55 (H-2), 2.29 /3’N(CH₃)₂/, 2.08 (H-7a), 1.86 (H-4), 1.64 (H-7b), 1.56 (H-14a), 1.43 (H-14b), 1.05 (H-15).

Primer 14 l-N-(2,3,4-trihidroksi-l,3-dimetil-heksil)-amido-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9-de okso-9-dihidro-9a-amino-8(R)-metil-9a-homoeritromicin A (5a)

Surovi produkt (4a) (6.0 g, 0,008 mol) iz primera 9 raztopimo v ledocetni kislini (60 ml), dodamo 2.0 g PtO₂ (83.0% Pt) in nato hidriramo ob mešanju 10 ur pri tlaku H₂ 7x10⁶ Pa. Reakcijsko suspenzijo filtriramo, filtrat uparimo pri znižanem tlaku in dodamo H₂O (100 ml) in CHCLj (60 ml) in ekstrahiramo z gradientno ekstrakcijo pri pH 5.5, 9.0 in 10.5. Združene organske ekstrakte pri pH 10.5 uparimo pri znižanem tlaku, pri čemer dobimo 4.3 g (73%) TLC homogenega produkta (5a) z naslednjimi fizikalno-kemijskimi konstantami.

IR (CHC1₃) cm⁴ 3400, 2975,1650,1535,1450,1375,1165,1040.

'H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.52 (CONH}, 4.94 (H-l”), 4.37 (H-l’), 4.26 (H-3),

4.17 (H-10), 3.76 (H-ll), 3.41 (H-5), 3.28 (3”-OCH₃), 3.17 (H-13), 2.62 (H-9a), 2.52 (H-2), 2.27 /3’N(CH₃)₂/, 2.20 (H-7a), 2.01 (H-4), 1.85 (H-8), 1.55 (H-14a), 1.34 (H7b), 1.34 (H-14b), 1.05 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDCy δ 174.1 (C-l), 106.7 (C-l’), 96.0 (C-l”), 92.3 (C-5), 83.8 (C-13), 79.7 (C-3), 75.1 (C-12), 74.8 (C-ll) 74.6 (C-6), 49.3 (3”-OCH₃), 49.2 (C-10),

49.1 (C-9), 42.8 (C-7), 41.6 (C-2), 39.6/3’N(CH₃)₂/, 37.5 (C-4), 31.0 (C-8), 25.0 (C-14),

11.5 (C-15).

FAB (NH⁺) 752.3

Primer 15 l-N-(2,3,4-trihidroksi-l,3-dimetil-heksil)-amido-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9-de okso-9-dihidro-9a-amino-8(S)-metil-9a-homoeritromicin A (5b)

Substanco (4b) (0.71 g, 0,009 mol) raztopimo v ledocetni kislini (30 ml), dodamo 0.350 g PtO₂ (83.0% Pt), nato hidriramo ob mešanju 10 ur pri tlaku H₂ 7xl0⁶ Pa. Reakcijsko suspenzijo filtriramo, filtrat uparimo do gostega oljnatega ostanka in nato produkt izoliramo z gradientno ekstrakcijo pri pH 5.5, 9.0 in 10.5, kot je opisano v primeru 14, pri čemer z uparjanjem združenih organskih ekstraktov pri pH 10.5, dobimo 0.260 g (38.0%) TLC homogenega naslovnega produkta (5b).

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.63 (CONH), 4.93 (H-l”), 4.40 (H-l’), 4.23 (H-3), 4.19 (H-10), 3.75 (H-ll), 3.53 (H-5), 3.29 (3”-OCH₃), 3.18 (H-13), 2.72 (H-9a), 2.57 (H-9b), 2.52 (H-2), 2.27 /3’N(CH₃)₂/, 1.93 (H-4), 1.78 (H-8). 1.57 (H-14a), 1.47 (H7a), 1.36 (H-14b), 1.23 (H-7b), 1.04 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 174.3 (C-l), 107.2 (C-l’), 97.0 (C-l”), 92.3 (C-5), 83.8 (C-13), 80.7 (C-3), 75.7 (C-12), 75.2 (C-ll), 75.2 (C-6), 49.6 (3^00^), 49.2 (C-9),

49.2 (C-10), 43.7 (C-7), 42.1 (C-2), 39.8 /3^(0^/, 37.8 (C-4), 31.3 (C-8), 25.0 (C14), 11.7 (C-15).

Primer 16 l-N-(2,3,4-trihidroksi-l,3-dimetil-heksil)-amido-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9-deokso-9-dihidro-9a-dimetilamino-8(R)-metil-9a-homoeritromicin A(6a)

V raztopino spojine (5a) (1 g, 0.0013 mol) iz primera 14 v CHC^ (80 ml) dodamo 0.2 ml (0.005 mol) mravljinčne kisline (98-100%) in 0.232 ml (0.003 mol) formaldehida (36%). Reakcijski zmesi naravnamo pH na 5.0 (2% mas/vol NaOH) in nato mešamo ob refluksu 9 ur. Po dodatku H₂O (100 ml) produkt izoliramo z gradientno ekstrakcijo s CHC1₃ pri pH 5,5 in 9.5. Združene organske ekstrakte pri pH 9.5 uparimo pri znižanem tlaku in dobljeni produkt kromatografiramo na stolpcu silikagela z uporabo sistema CIICl₃-CH₃OH-konc.NH₄OH, 6:1:0.1, pri čemer dobimo 0.63 g TLC homogenega produkta (6a).

2-5

IR (CHC^) cm'¹ 3400, 2970,1650,1530,1450,1375,1165,1040.

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.26 (CONH), 4.91 (H-l”), 4.37 (H-l’), 4.27 (H-3),

4.18 (H-10), 3.77 (H-ll), 3.41 (H-5), 3.29 (3”-OCH₃), 3.18 (H-13), 2.57 (H-2), 2.52 (H-9a), 2.30 /3’N(CH₃)₂/, 2.27 /9a-N(CH₃)₂/, 2.20 (H-9b), 2.16 (H-4), 2.01 (H-8), 1.56 (H-14a), 1.50 (H-7a), 1.37 (H-14b), 1.15 (H-7b), 1.04 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDC^) δ 174.7 (C-l), 106.1 (C-l’), 95.4 (C-l”), 90.5 (C-5), 83.3 (C-13), 79.8 (C-3), 74.8 (C-12), 74.6 (C-ll), 73.7 (C-6), 68.2 (C-9), 49.2 (3”-OCH₃),

48.6 (C-10), 45.3 /9a-N(CH₃)₂/, 44.2 (C-7), 41.7 (C-2), 39.6 /3^(0^)/ 37.3 (C-4),

26.4 (C-8), 24.9 (C-14), 11.5 (C-15).

FAB (MH⁺) 780.6

Primer 17 l-N-(2,3,4-trihidroksi-l,3-dimetil-heksil)-amido-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9-deokso-9-dihidro-9a-dimetilamino-8(5)-metil-9a-homoeritromicin A(6b)

V raztopino spojine (5b) (0.3 g, 0.0004 mol) iz primera 15 v CHC^ (50 ml) dodamo 0.1/ml (0.0032 mol) mravljinčne kisline (98-100%) in 0.13 ml (0.0016 mol) formaldehida (36%). Reakcijski zmesi naravnamo pH na 5.0 (2% mas/vol NaOH) in mešamo ob refluksu 4 ure. Izolacijo produkta izvedemo tako, kot je navedeno v primeru 16, pri čemer po kromatografiji na stolpcu silikagela z uporabo sistema CHCl₃-CH₃OH-konc.NH₄OH, 6:1: 0.1, dobimo 0.150 g TLC homogenega produkta (6b).

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7.58 (CONHj, 4.95 (H-l”), 4.41 (H-l’), 4.25 (H-3),

4.18 (H-10), 3.76 (H-ll), 3.43 (H-5), 3.28 (3”-OCH₃), 3.17 (H-13), 2.51 (H-2), 2.27 /3’N(CH₃)₂/, 2.23 /9a-N(CH₃)₂/, 2.06 (H-9b), 2.19 (H-4), 1.97 (H-8), 1.57 (H-14a),

1.47 (H-7a), 1.37 (H-14b), 1.16 (H-7b), 1.05 (H-15).

¹³C NMR (75 MHz, CDCL,) δ 173.5 (C-l), 106.0 (C-l’), 95.3 (C-l”), 91.9 (C-5), 83.2 (C-13), 79.0 (C-3), 74.4 (C-12), 74.1 (C-ll), 74.2 (C-6), 67.5 (C-9), 48.6 (3”-OCH₃),

48.4 (C-10), 44.9 /9-N(CH₃)₂/, 43.1 (C-7), 40.8 (C-2), 38.9 /3’N(CH₃)₂/, 36.7 (C-4),

25.8 (C-8), 23.9 (C-14), 10.4 (C-15).

Primer 18

9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(R)-metil-10,ll,12,13,14,15-heksanor-eritromicin A 9(£')-oksim: (7a)

9-deokso-6-deoksi-6,9-epoksi-8(5)-metil-10,ll,12,13,14,15-heksanor-eritromicin A 9(£)-oksim: (7b)

Združene kloroformske ekstrakte pri pH 8 iz primera 10 sušimo nad Κ^Ο₃ in uparimo pri znižanem tlaku, da dobimo 8 g zmesi (7a) in (7b). S kromatografijo na stolpcu silikagela iz 2.0 g surovega produkta z uporabo sistema topil CHC1₃CH₃OH-konc.NH₄OH, 6:1:0.1, izoliramo 0.530 g substance (7a) z Rf 0.44 in 0.880 g substance (7b) z Rf 0.39, ki jih s spektroskopskimi postopki identificiramo kot C-8 stereoizomeri.

Spojina (7a):

IR (CHC1₃) cm'¹ 3360, 2980, 2940,1730,1690,1650, 1455,1380,1245,1165,1040.

Ή NMR (300 MHz, CDCf,) δ 4.72 (H-l”), 4.44 (H-l’), 4.11 (H-3), 3.84 (H-5), 3.67 (1-OCH₃), 3.29 (3”-OCH₃), 3.26 (H-2’), 3.03 (H-8), 3.01 (H-4”), 2.84 (H-2), 2.09 ((H-7a), 2.33 /3’N(CH₃)₂/, 1.97 (H-4), 2.01 (H-7b).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 176.1 (C-l), 161.8 (C-9), 103.8 (C-l’), 95.8 (C-l”), 89.7 (C-6), 81.0 (C-5), 79.8 (C-3), 51.8 (1-OCH₃), 49.4 (3”-OCH₃), 39.9 (C-7), 41.7 (C-2),

40.4 /3’N(CH₃)₂/, 37.8 (C-4), 33.0 (C-8).

FAB (MH⁺) 619.4

Spojina (7b):

IR (CHC1₃) cm'¹3360,2980,2940,1730,1690,1650, 1455,1380,1245,1165,1040.

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 4.61 (H-l”), 4.43 (H-l’), 4.09 (H-3), 3.71 (H-5), 3.68 (1-OCH₃), 3.28 (3”-OCH₃), 3.17 (H-8), 2.89 (H-7a), 2.74 (H-2), 2.33 /3’N(CH₃)₂/,

2.16 (H-4), 1.47 (H-7b).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 176.0 (C-l), 162.9 (C-9), 102.7 (C-l’), 95.1 (C-l”), 90.4 (C-6), 80.1 (C-5), 79.0 (C-3), 51.6 (1-OCH₃), 49.2 (3”-OCH₃), 42.5 (C-7), 41.0 (C-2),

40.3 /3’N(CH₃)₂/, 38.1 (C-4), 34.5 (C-8).

Primer 19

9-deokso-9-dihidro-9a-amino-8(R)-metil-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9a-homoeritromicin A (8a)

Substanco (7a) (0.90 g, 0.0015 mol) raztopimo v ledocetni kislini (30 ml), dodamo 0.30 g PtO₂ (83% Pt) in zatem hidriramo ob mešanju 15 ur pri tlaku H₂ 6xl0⁶ Pa. Reakcijsko zmes filtriramo, filtrat uparimo do gostega oljnega ostanka in produkt izoliramo z gradientno ekstrakcijo pri pH 5.5,9.0 in 10.5, kot je opisano v primeru 14,

2,7 pri čemer z uparjanjem združenih organskih ekstraktov pri pH 10.5, dobimo 0.530 g (60%) TLC homogenega naslovnega produkta (8a).

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 4.64 (H-l”), 4.40 (Η-Γ), 4.14 (H-3), 3.67 (1-OCH₃),

3.54 (H-5), 3.29 (H-3”OCH₃), 2.85 (H-2), 2.74 (H-9a), 2.50 (H-9b), 2.30 /3’N(CH₃)₂/,

2.10 (H-4), 1.84 (H-8), 1.44 (H-7a), 1.22 (H-7b).

¹³C NMR (75 MHz, CDC1₃) δ 176.4 (C-l), 104.4 (C-l’), 96.0 (C-l”), 85.9 (C-5), 80.3 (C-3), 73.8 (C-6), 51.5 (1-OCH₃), 49.2 (3”-OCH₃), 49.1 (C-9), 42.9 (C-7), 41.2 (C-2)

40.2 /3’N(CH₃)₂, 37.3 (C-4), 31.1 (C-8).

Primer 20

9-deokso-9-dihidro-9a-amino-8(S)-metil-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9a-homoeritromicin A (8b)

Substanco (7b) (0.70 g, 0.0011 mol) raztopimo v ledocetni kislini (25 ml), dodamo 0.23 g PtO₂ (83% Pt) in nato hidriramo ob mešanju 15 ur pri tlaku H₂ 6xl0⁶ Pa. Reakcijsko zmes filtriramo, filtrat uparimo do gostega oljnega ostanka in produkt izoliramo z gradientno ekstrakcijo pri pH 5.5,9.0 in 10.5, kot je opisano v primeru 14, pri čemer z uparjanjem združenih organskih ekstraktov pri pH 10.5 dobimo 0.350 g (52.4%) TLC homogenega naslovnega produkta (8b).

IR (CHCl₃)cm⁴ 3400,2975,2940,1735,1580,1455,1375,1260,1170,1050,1000.

*H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 4.64 (H-l”), 4.37 (H-l’), 4.15 (H-3), 4.04 (H-5”), 3.67 (1-OCH₃, 3.60 (H-5’), 3.51 (H-5), 3.37 (H-2’), 3.28 (H-3”OCH₃), 2.98 (H-4”), 2.75 (H-2), 2.68 (H-9a), 2.56 (H-9b), 2.54 (H-3’), 2.31 /3’N(CH₃)₂/, 1.93 (H-4), 1.79 (H-8),

1.70 (H-4’a), 1.47 (H-2”b).

Primer 21

9-deokso-9-dihidro-9a-dimetilamino-8(R)-metil-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9a-homoeritromicin A (9a)

V raztopino substance (8a) (0.3 g, 0.0005 mol) iz primera 19 v CHC1₃ (50 ml) dodamo 0.05 ml (0.0013 mol) mravljinčne kisline (98-100%) in 0.052 ml (0.0007 mol) formaldehida (36%). pH reakcijske zmesi naravnamo na 5.2 (2% mas/vol NaOH) in nato mešamo ob refluksu 2.5 ure. Izolacijo produkta izvedemo tako, kot je opisano v primeru 16, pri čemer dobimo 0.280 g (89.0%) TLC homogenega produkta (9a).

IR (CHClg) cm⁴ 3450, 2975, 2940,1735, 1465,1375,1260,1200,1165,1000.

Ή NMR (300 MHz, CDCf,) δ 4.641 (H-l”), 4.43 (H-l’), 4.13 (H-3), 4.06 (H-5”),

3.65 (1-OCH₃), 3.64 (H-5), 3.53 (H-5’), 3.30 (H-3”-OCH₃), 3.27 (H-2’), 2.97 (H-2),

2.53 ((H-3’), 2.29 /3’N(CH₃)₂/, 2.28 (H-2’a), 2.24 /9a-N(CH₃)₂/, 2.10 (H-4), 1.96 (H8), 1.67 (H-7a).

Primer 22

9-deokso-9-dihidro-9a-dimetilamino-8(5)-metil-10,ll,12,13,14,15-heksanor-9a-homoeritromicin A (9b)

V raztopino substance (8b) (0.6 g, 0.001 mol) iz primera 19 v CHC/ (50 ml) dodamo 0.1 ml (0.0026 mol) mravljinčne kisline (98-100%) in 0.104 ml (0.0014 mol) formaldehida (36%). pH reakcijske zmesi naravnamo na 5.2 (2% mas/vol NaOH) in nato mešamo ob refluksu 2.5 ure. Izolacijo produkta izvedemo tako, kot je opisano v primeru 16, pri čemer dobimo 0.550 g (87.7%) TLC homogenega produkta (9b).

Claims

1. Spojina, prikazana s splošno formulo (I), označena s tem, da sta

R₁ in R₂ medsebojno enaka in pomenita H ali CH₃,

R₃ in R₄ medsebojno različna in pomenita H ali CH₃,

Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni CH₃ ali CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅ skupino, ali njene farmacevtsko sprejemljive adicijske soli z anorganskimi ali organskimi kislinami.

2. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da so R_p R₂ in R₄ enaki in pomenijo H, R₃je CH₃, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅.

3. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da so R_p R₂ in R₃ enaki in pomenijo H, R₄je CH₃, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅.

4. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da so R_p R₂ in R₃ enaki in pomenijo CH₃, R₄ je H, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅.

5. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da so R_p R₂ in R₄ enaki in pomenijo CH₃, R₃ je H, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅.

6. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da so R_p R₂ in R₄ enaki in pomenijo H, R₃je CH₃, Y je O in Z pomeni CH₃.

7. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da so R_p R₂ in R₃ enaki in pomenijo H, R₄je CH₃, Y je O in Z pomeni CH₃.

8. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da so R_p R₂ in R₃ enaki in pomenijo CH₃, R₄ je H, Y je O in Z pomeni CH_y

9. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da so R_p R₂ in R₄ enaki in pomenijo CH₃, R₃ je H, Y je O in Z pomeni CH₃.

10. Spojina, prikazana s splošno formulo (II),

R₃ označena s tem, da

X pomeni O ali NOR_?, kjer R_? pomeni H, acilno ali arilsulfonilno skupino,

R₃ in R₄ sta medsebojno različna in pomenita H ali CH₃,

R₅ in R₆ sta medsebojno enaka ali različna in pomenita H ali acilno skupino,

Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni CH₃, CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ ali

CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupino,

R_g pomeni H ali acilno skupino,

R₉ pomeni H, acilno ali arilsulfonilno skupino, ali sta R₁₀ in R_n medsebojno enaka in pomenita H ali acilno skupino, ali njene farmacevtsko sprejemljive adicijske soli z organskimi ali anorganskimi kislinami.

11. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da sta X in Y enaka in pomenita O, R₃je CH₃, R₄, R₅ in R₆ so medsebojno enaki in pomenijo H, Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer sta R_g in R₉ enaka in pomenita H.

12. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da sta X in Y enaka in pomenita O, R₃je CH₃, R₄ je H, R₅ in R₆ sta medsebojno enaka in pomenita acetilno skupino, Z pomeni CH(C₂H_s)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer sta R₈ in R₉enaka in pomenita acetilno skupino.

13. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da sta X in Y enaka in pomenita O, R₃je CH₃, R₄ in R₅ sta medsebojno enaka in pomenita H, R₆ je acetil, Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer sta R_g in R₉ enaka in pomenita acetilno skupino.

14. Spojina po zahtevku 10, označena s tem,, da sta X in Y enaka in pomenita O, R₃je CH₃, R₄, R₅ in R₆ so medsebojno enaki in pomenijo H, Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer je R_g H in R„ pomeni p-brombenzoilno skupino.

15. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR_?, kjer je R_? H, R₃ je CH₃, R₄, R_s in R₆ so enaki in pomenijo H, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer sta R_g in R₉ enaka in pomenita H.

16. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR_?, kjer je R₇ acetil, R₃ je CH₃, R₄ je H, R₅ in R₆ sta enaka in pomenita acetilno skupino, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer sta R_g in R₉enaka in pomenita acetilno skupino.

17. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR_?, kjer je R_? H, R₃ je CH₃, R₄ in R₅ pomenita H, R₆ je acetilna skupina, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR_g skupino, kjer sta R_g in R_g enaka in pomenita acetilno skupino.

18. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR₇, kjer je R_? tozilna skupina, R₃ je CH₃, R₄, R₅ in R₆ so enaki in pomenijo H, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer je R_g H in R₉ pomeni tozilno skupino.

19. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR₇, kjer je R_? H, R₃ je CH₃, R₄, R₅ in R₆ so enaki in pomenijo H, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ skupino, kjer je R_g H in R₉ pomeni tozilno skupino.

20. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR₇, kjer je R_? H, R₃ je H, R₄ je CH₃, Y je O in Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR_g)CH(CH₃)NHR₉skupino, kjer sta R_g in R₉ enaka in pomenita H.

21. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR_?, kjer je R_? H, R₃ je CH₃, R₄. R₅ in R₆ so enaki in pomenijo H, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR_u)C₂H₅ skupino, kjer sta R₁₀ in R_n enaka in pomenita H.

22. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR_?, kjer je R₇ acetil, R₃ je CH₃, R₄ je H, R₅ in R₆ sta enaka in pomenita acetil, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR_n)C₂H₅ skupino, kjer sta R₁₀ in R_n enaka in pomenita acetil.

23. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR_?, kjer je R_? acetil, R₃ je CH₃, R₄ in R₅ sta enaka in pomenita H, R₆ je acetilna skupina, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR_n)C₂H_s skupino, kjer sta R₁₀ in R_nenaka in pomenita acetil.

24. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR_?, kjer je R_? H, R₃ je CH₃, R₄ in R₅ sta enaka in pomenita H, R₆ je acetil. Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR_n)C₂H₅ skupino, kjer sta R₁₀ in R_n enaka in pomenita acetil.

25. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR_?, kjer je R_? tožil, R₃je CH₃, R₄, R₅ in R₆ so enaki in pomenijo H, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR_n)C₂H₅ skupino, kjer sta R_J() in R_n enaka in pomenita H.

26. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR_?, kjer je R_? H, R₃, R₅ in R₆ so enaki in pomenijo H, R₄ je CH₃, Y je NH in Z pomeni CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR_n)C₂H₅ skupino, kjer sta R₁₀ in R_n enaka in pomenita H.

27. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR_?, kjer je R_? H, R₃ je CH₃, R₄, R₅ in R₆ so enaki in pomenijo H, Y je O in Z pomeni CH₃.

28. Spojina po zahtevku 10, označena s tem, da X pomeni NOR₇, kjer je R_? H, R₃, R₅ in R₆ so enaki in pomenijo H, R₄ je CH₃, Y je O in Z pomeni CH₃.

29. Postopek za pripravo spojine s splošno formulo (I), kjer sta Rj in R₂ medsebojno enaka in pomenita H ali CH₃, sta R₃ in R₄ medsebojno različna in pomenita H ali CH₃,

Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni CH₃ ali CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅ skupino, ali njihovih farmacevtsko sprejemljivih adicijskih soli z anorganskimi ali organskimi kislinami, označen s tem, da eritromcin A imino eter s formulo (III)

H,Cf ^OCH,

C«, (ΠΙ) izpostavimo

A) delovanju ocetne kisline pri pogojih hidrolize imino skupine, in nato po potrebi Nin/ali O-aciliranju z anhidridi ali kloridi kislin, in nato po potrebi metanolizi, ali

B) reakciji s hidroksilamin hidrokloridom v prisotnosti ustreznih anorganskih ali organskih baz v reakcijsko inertnem topilu v eni ali dveh reakcijskih stopnjah, in nato po potrebi

BI) delovanju ustreznih anorganskih ali organskih kislin pri pogojih hidrolize hidroksiimino skupine, in nato po potrebi N- in/ali O-aciliranju z anhidridi ali kloridi kislin, in nato po potrebi metanolizi, kot je opisano pod A), ali po potrebi izpostavimo B2) N- in/ali O-aciliranju z anhidridi ali kloridi kislin v reakcijsko inertnem topilu, in nato po potrebi metanolizi, ali po potrebi

B3) delovanju ustreznih organskih ali anorganskih baz pri pogojih internega aciliranja amina, in nato po potrebi N- in/ali O-aciliranju z anhidridi ali kloridi kislin, in nato po potrebi metanolizi, pri čemer dobimo spojine s splošno formulo (II)

R

CH (Π) kjer

X pomeni O ali NOR_?, kjer R_? pomeni H, acilno ali arilsulfonilno skupino,

R₃ in R₄ sta medsebojno različna in pomenita H ali CH₃,

Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni CH₃, CHCC^COHCCH^CHCOR^CHCCHjjNHR, ali

CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupino,

R_g pomeni H ali acilno skupino,

R₉ pomeni H, acilno ali arilsulfonilno skupino, in sta R₁₀ in R_n medseboj enaka in pomenita H ali acilno skupino, ali njihove farmacevtsko sprejemljive adicijske soli z anorganskimi ali organskimi kislinami, ki jih po potrebi izpostavimo katalitični redukciji v reakcijsko inertnem topilu in nato po potrebi reduktivnemu N-alkiliranju z ustreznim alkilirnim sredstvom v prisotnosti ustreznega reduktivnega sredstva, pri čemer dobimo spojine s splošno formulo (I), kjer imajo R_p R₂, R₃, R₄, Y in Z zgoraj navedene pomene.

30. Postopek po zahtevku 29, označen s tem, da eritromicin A imino eter s formulo (III) izpostavimo delovanju ocetne kisline pri pogojih hidrolize imino skupine pri sobni temperaturi, 3 dni.

31. Postopek po zahtevku 29, označen s tem, da reakcijo eritromicina A imino etra s formulo (III) s hidroksilamin hidrokloridom izvedemo pri temperaturi od 25 do 70°C.

32. Postopek po zahtevku 31, označen s tem, da so ustrezne anorganske ali organske baze natrijev karbonat, kalijev karbonat ali piridin.

33. Postopek po zahtevku 31, označen s tem, daje reakcijsko inertno topilo metanol ali piridin.

34. Postopek po zahtevku 29, označen s tem, da N- in/ali O-aciliranje spojine s splošno formulo (II) χ<

HjC* ^OCHj (Π) kjer

X pomeni O ali NOR_?, kjer R_? pomeni H,

R₃ pomeni CH₃ in R₄ pomeni H ali

R₃ pomeni H in R₄ pomeni CHg,

R₅ in R₆ sta medsebojno enaka in pomenita H,

Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(ORg)CH(CH₃)NHR₉ali

CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupino, kjer so

Rg, R₉, R₁₀ in R_n medsebojno enaki in pomenijo H, izvedemo z acetanhidridom v piridinu pri sobni temperaturi ali s tozilkloridom v acetonu pri 0 do 5°C ali s 4-brombenzoilkloridom v dietiletru pri 0 do 5°C.

35. Postopek po zahtevku 34, označen s tem, da spojino s splošno formulo (II), kjer X pomeni O ali NOR^ kjer R_? pomeni acetilno skupino,

R₃ pomeni CH₃ in R₄ pomeni H ali

Rg pomeni H in R₄ pomeni CH_y

R₅ in R₆ sta medsebojno enaka in pomenita acetilno skupino,

Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ ali ^(CI^jCHiOR^COHiCH^CHCORj^C^ skupino, kjer so

Rg, R₉, R₁₀ in R_u medsebojno enaki in pomenijo acetilno skupino,

3Ί izpostavimo po potrebi metanolizi, pri čemer dobimo spojino s splošno formulo (II), kjer

X pomeni O ali NOR_?, kjer R₇ pomeni H ali acetilno skupino,

R₃ pomeni CH₃ in R₄ pomeni H ali

R₃ pomeni H in R₄ pomeni CH₃,

R₅jeH,

R₆ je acetil,

Y pomeni O ali NH, in

Z pomeni CH(C₂H₅)COH(CH₃)CH(OR₈)CH(CH₃)NHR₉ ali

CH(CH₃)CH(OR₁₀)COH(CH₃)CH(OR₁₁)C₂H₅ skupino, kjer so

R_g, R₉, R₁₀ in R_n medsebojno enaki in pomenijo acetilno skupino.

36. Postopek po zahtevku 29, označen s tem, da sta ustrezni anorganski ali organski kislini pri pogojih hidrolize hidroksiimino skupine HCI ali CH₃COOH.

37. Postopek po zahtevku 29, označen s tem, da so ustrezne anorganske ali organske baze pri pogojih internega aciliranja amina amonijev hidroksid, natrijev hidroksid, kalijev hidroksid ali trietilamin.

38. Postopek po zahtevku 29, označen s tem, da katalitično redukcijo v reakcijsko inertnem topilu izvedemo v prisotnosti plemenitih kovin ali njihovih oksidov kot katalizatorjev pri sobni temperaturi in tlaku vodika od 5xl0⁵ do 7xl0⁶ Pa.

39. Postopek po zahtevku 38, označen s tem, da je navedeni katalizator platinov(IV) oksid.

40. Postopek po zahtevku 38, označen s tem, da je reakcijsko inertno topilo ledocetna kislina.

41. Postopek po zahtevku 29, označen s tem, da reduktivno N-alkiliranje spojine s splošno formulo (I), kjer sta R_t in R₂ medsebojno enaka in pomenita H,

R₃ pomeni CH₃ in R₄ pomeni H, ali R₃ pomeni H in R₄ pomeni CH₃,

Y pomeni NH, in

Z pomeni CH₃ ali CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅ skupino, ali njene farmacevtsko sprejemljive adicijske soli z anorganskimi ali organskimi kis38 linami, izvedemo z ustreznim alkilirnim sredstvom v prisotnosti ustreznega reducirnega sredstva v reakcijsko inertno topilo pri temperaturi refluksa, pri čemer dobimo spojine s splošno formulo (I), kjer sta Rj in R₂ medsebojno enaka in pomenita CH₃,

R₃ pomeni CH₃ in R₄ pomeni H, ali

R₃ pomeni H in R₄ pomeni CH₃,

Y pomeni NH, in

Z pomeni CH₃ ali CH(CH₃)CH(OH)COH(CH₃)CH(OH)C₂H₅ skupino, ali njihove farmacevtsko sprejemljive adicijske soli z anorganskimi ali organskimi kislinami.

42. Postopek po zahtevku 41, označen s tem, da je v postopku reduktivnega N-alkiliranja ustrezno alkilirno sredstvo aldehid.

43. Postopek po zahtevku 42, označen s tem, daje ustrezni aldehid formaldehid.

44. Postopek po zahtevku 41, označen s tem, da je ustrezno reduktivno sredstvo mravljinčna kislina.

45. Postopek po zahtevku 41, označen s tem, da je reakcijsko inertno topilo kloroform.