CZ307433B6 - Deriváty částečně desulfátovaných glykosaminoglykanů jako inhibitory heparanázy mající antiangiogenní účinky a zabraňující antikoagulačnímu působení - Google Patents
Deriváty částečně desulfátovaných glykosaminoglykanů jako inhibitory heparanázy mající antiangiogenní účinky a zabraňující antikoagulačnímu působení Download PDFInfo
- Publication number
- CZ307433B6 CZ307433B6 CZ2004-255A CZ2004255A CZ307433B6 CZ 307433 B6 CZ307433 B6 CZ 307433B6 CZ 2004255 A CZ2004255 A CZ 2004255A CZ 307433 B6 CZ307433 B6 CZ 307433B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- heparin
- partially
- residues
- modified
- acetylation
- Prior art date
Links
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 title claims abstract description 19
- 108010037536 heparanase Proteins 0.000 title claims description 41
- 102100024025 Heparanase Human genes 0.000 title claims description 39
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title description 11
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 title description 7
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 title description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical class OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 92
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims description 76
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims description 74
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 claims description 19
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 15
- 150000002337 glycosamines Chemical group 0.000 claims description 14
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 12
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N glucosamine group Chemical group OC1[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 claims description 12
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 12
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 11
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 10
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 8
- IAJILQKETJEXLJ-LECHCGJUSA-N iduronic acid Chemical class O=C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-LECHCGJUSA-N 0.000 claims description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 claims description 7
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 6
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 6
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 claims description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 229940127215 low-molecular weight heparin Drugs 0.000 claims description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 claims description 3
- 108010022901 Heparin Lyase Proteins 0.000 claims description 3
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims description 3
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 claims description 3
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 claims description 3
- KZWHEHSUEBTKJM-SLPGGIOYSA-N [(2r,3r,4s,5r)-3,4,5,6-tetrahydroxy-1-oxohexan-2-yl]sulfamic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C=O)NS(O)(=O)=O KZWHEHSUEBTKJM-SLPGGIOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000012345 acetylating agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 claims description 3
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 3
- 150000002338 glycosides Chemical group 0.000 claims description 3
- 108010083213 heparitinsulfate lyase Proteins 0.000 claims description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- 150000003138 primary alcohols Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 3
- 208000002815 pulmonary hypertension Diseases 0.000 claims description 3
- FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N sulfanilamide Chemical group NC1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 claims description 3
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 claims description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 claims description 2
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims description 2
- 206010018366 Glomerulonephritis acute Diseases 0.000 claims description 2
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010038934 Retinopathy proliferative Diseases 0.000 claims description 2
- 231100000851 acute glomerulonephritis Toxicity 0.000 claims description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 claims description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 claims description 2
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 claims description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000012997 experimental autoimmune encephalomyelitis Diseases 0.000 claims description 2
- 230000000893 fibroproliferative effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000003055 low molecular weight heparin Substances 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 208000037803 restenosis Diseases 0.000 claims description 2
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 claims description 2
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 claims 1
- 208000024869 Goodpasture syndrome Diseases 0.000 claims 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims 1
- 208000013544 Platelet disease Diseases 0.000 claims 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 claims 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 claims 1
- 238000007142 ring opening reaction Methods 0.000 claims 1
- 229920002971 Heparan sulfate Polymers 0.000 description 30
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 26
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 17
- 101150021185 FGF gene Proteins 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000002001 anti-metastasis Effects 0.000 description 11
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 9
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 7
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 7
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 7
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 7
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 7
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 7
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- 150000001224 Uranium Chemical class 0.000 description 6
- 239000002628 heparin derivative Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 5
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 5
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 5
- JFALSRSLKYAFGM-UHFFFAOYSA-N uranium(0) Chemical group [U] JFALSRSLKYAFGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108091008794 FGF receptors Proteins 0.000 description 4
- 102000044168 Fibroblast Growth Factor Receptor Human genes 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229910052770 Uranium Inorganic materials 0.000 description 4
- -1 calcium or copper Chemical class 0.000 description 4
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 4
- 230000005747 tumor angiogenesis Effects 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000008055 Heparan Sulfate Proteoglycans Human genes 0.000 description 3
- 229940122588 Heparanase inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 230000006181 N-acylation Effects 0.000 description 3
- 108090000054 Syndecan-2 Proteins 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 description 3
- MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N beta-D-glucosamine Chemical compound N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 239000002634 heparin fragment Substances 0.000 description 3
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 description 2
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 2
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 2
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 241000872931 Myoporum sandwicense Species 0.000 description 2
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 2
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 2
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 2
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 125000001483 monosaccharide substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 102000053028 CD36 Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010045374 CD36 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108091016585 CD44 antigen Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 229920000855 Fucoidan Polymers 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-HNFCZKTMSA-N L-idopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-HNFCZKTMSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N adipic acid dihydrazide Chemical compound NNC(=O)CCCCC(=O)NN IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-DZOUCCHMSA-N alpha-D-Glcp-(1->4)-alpha-D-Glcp-(1->4)-D-Glcp Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O[C@@H]2[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-DZOUCCHMSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 229940121369 angiogenesis inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 239000002257 antimetastatic agent Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactopyranuronic acid Natural products OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O AEMOLEFTQBMNLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 229960002086 dextran Drugs 0.000 description 1
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 150000002301 glucosamine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 125000003104 hexanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000005597 hydrazone group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000017363 positive regulation of growth Effects 0.000 description 1
- 230000003334 potential effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 238000003797 solvolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
- A61K31/727—Heparin; Heparan
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
- C08B37/0078—Degradation products
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Immunology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Oncology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
Abstract
Jsou popsány deriváty částečně desulfátovaného heparinu, majícího antiangiogenní účinky.
Description
Oblast techniky
Zde popisovaný vynález se týká derivátů částečně desulfátovaných glykosaminoglykanů zvláště heparinů.
Dosavadní stav techniky
Studie provedené v Biologické výzkumné jednotce pro nádory nemocnice university HadassahHebrew v Izraeli (Isr. Med. Assoc. J„ 2, 37 - 45, 2000; J. Med. Chem., 43, 2591 - 2600, 2000; Invasion Metastasis, 14, 290-302, 1994-1995; Exp. Cell Res., 201, 208 - 215, 1992) se zaměřují na zapojení růstových faktorů vázajících heparin, heparan sulfát a enzymy degradující heparansulfát (heparanáza) při angiogenezi nádorů a metastázách. Tyto studie byly použity na prověřování a na identifikaci heparinových derivátů a mimetik heparin/heparan sulfátu s potenciálními účinky na inhibici heparanázy (Nátuře Med., 5, 735 - 736, 1999; Science, 285, 33 -34, 1999).
Nádorové buňky uvolňují enzym heparanázu, endo-p-D-glukuronidázu, která degraduje polysacharidový řetězec proteoglykanu heparan sulfátu na povrchu buňky a v extracelulámí matrici.
Zapojení heparanázy do angiogeneze nádoru bylo porovnáváno se schopností uvolnit bFGF (FGF-2) a další růstové faktory z jejich nahromadění v ECM (extracelulámí matrice). Tyto růstové faktory se starají o mechanismus navození neovaskularizace při normálních i patologických situacích.
Heparanáza tak může napomáhat nejen invazi nádorové buňky a metastáz, ale také angiogenezi nádoru, tedy obou kritických stupňů v progresi nádoru.
Specifické inhibitory enzymu heparanázy zabraňují uvolňování a aktivaci růstových faktorů nahromaděných heparan sulfátem, rovněž tak jako rozpadu ECM a pohlíží se na nějako na velmi slibné látky pro výrobu protirakovinových léčiv.
Jedním z možných terapeutických přínosů pro antiangiogenní léčiva je tak vývoj silného a selektivního inhibitoru heparanázy. Co se týká diskuse o angiogenezi, lze odkázat na WO 01/55221, náležející současnému přihlašovateli.
Další důležitou komplikací heparanázy je jak zánět, tak autoimunita. Účinky heparanázy mají také vztah k její schopnosti aktivovat buňky imunitního systému, aby opustily oběh a vyvolaly jak zánět, tak autoimunní odezvu. Interakce krevních destiček, granulocytů, T a B lymfocytů, makrofágů a žímých buněk se subendotheliální EMC je působením heparanázy spojena s degradací heparan sulfátu. Enzym se uvolňuje z nitrobuněčných tělísek (tj. lysosomů, specifických granulí) jakožto odezva na různé aktivační signály dávajíc tak podnět k jeho řídicí účasti a přítomnosti v zánětlivých místech a autoimunních lezích. Léčba pokusných zvířat heparanázovými inhibitory (tj. neantikoagulačními druhy nízkomolekulámího heparinů LMWH) značně omezila u pokusných zvířat výskyt pokusně vyvolané autoimunní encefalomyelitidy (EAE), adjuvantní arthritidy a odmítání transplantátů, což ukazovalo na to, že lze heparanázové inhibitory použít k inhibici autoimunních a zánětlivých onemocnění.
Heparin
Heparin je heterogenní směs přirozeně se vyskytujících se polysacharidů různé délky řetězce a různého stupně sulfatace, mající antikoagulační účinky, a je vylučován žírnými buňkami
- 1 CZ 307433 B6 pojivové tkáně přítomnými v játrech (odkud byl poprvé izolován), svalech, plicích, brzlíku a slezině.
V heparinu byla vedle normální sekvence identifikována navíc sekvence odpovídající aktivní poloze pro antithrombinové působení.
Protinádorový a antimetastatický účinek heparinu a jeho derivátů pochází od jeho schopnosti inhibovat heparanázu, schopnosti blokovat růstové faktory a regulovat angiogenezi.
Heparan sulfáty (HS)
Heparan sulfáty (HS) jsou všudypřítomné proteinové ligandy. Proteiny se vázají na řetězce HS při mnoha akcích od jednoduché imobilizace nebo ochrany proti účinkům proteolytické degradace až po specifickou modulaci biologických činností, jakou je angiogeneze.
Uhlohydrátový skelet jak heparinu, tak heparan sulfátů (HS) sestává ze střídajícího se Dglukosaminu (GlcN) a kyselin hexuronových (GIcA nebo IdoA).
V heparinu jsou GlcN zbytky ponejvíce N-sulfatované, zatímco v HS jsou jak N-sulfatované, tak N-acetylované, s malým počtem nesubstituovaných NH2 skupin.
HS je v průměru také méně O-sulfatovaný než heparin.
Používání heparinu při léčbě angiogenních poruch, jako jsou nádory, a zvláště metastázy, je podstatně omezováno jeho antikoagulačními účinky.
Byly prováděny takové úpravy heparinu, aby se omezila jeho antikoagulační mohutnost, a současně byly zachovány jeho ochranné protinádorové vlastnosti.
Otevření jednotky kyseliny glukuronové v antithrombinové poloze snižuje afinitu heparinu k antithrombinu: takto může být heparin použit jako látka se sníženými antikoagulačními účinky, ale stále ještě zachovávající si antiangiogenní vlastnosti.
Heparanázy
Heparanázy jsou enzymy náležející do skupiny endoglykosidáz (endo-fi-D-glukuronidáza), které hydrolyzují vnitřní glykosidovou vazbu řetězců heparan sulfátů (HS) a heparinu.
Tyto endoglykosidázy se angažují při proliferaci nádorových buněk, při metastázách a při neovaskularizaci nádorů. Tyto enzymy jsou biologickými cíly pro antiangiogenní působení. Ve vědecké literatuře existuje velký počet studií zabývajících se vztahem struktury a jejích účinků (viz například Lapierre, F., et al., Glycobiology, 6, (3), 355 — 366, 1996). I když ještě mnoho stránek věci musí být vyjasněno, byly uváděny studie týkající se inhibice heparanáz heparinem a jeho deriváty, za použití specifických zkoušek, které vedly k naléhavým úvahám o strukturních typech, které mohou sloužit jako vodítka k získání nových, selektivnějších derivátů.
Ve výše uvedené práci Lapierra, et al., jsou popisovány deriváty heparinu získané 2-0 desulfataci nebo rozštěpením glykolu (oxidace perjodátem a následnou redukcí borohydridem sodným). Těmto derivátům zde uváděným jako 2-O-desulfatovaný heparin a RO-heparin zůstává částečně zachován antiangiogenní účinek heparinu, což bylo prokázáno zkouškou CAM v přítomnosti kortikosteroidů (tamtéž, strana 360).
Byly popsány deriváty N-acylheparinu, které jsou bližšími mimetiky heparan sulfátu než heparin, které inhibují heparanázu jen o něco méně než N-sulfatované deriváty. (Irimira, T., Biochemistry, 25, 5322 - 5328, 1986; Ishai-Michaeli, R., et al., Biochemistry, 31, 2080 - 2088, 1992).
-2 CZ 307433 B6
Hepariny a FGF
FGF regulují četné fysiologické pochody, jako například růst buněk a jejich diferenciaci, ale také funkce týkající se patologických pochodů, jako je například nádorová angiogeneze.
FGF jsou růstové faktory (skupina více než 10 polypeptidů), jejichž kyselé (FGF-1) a bazické FGF (FGF-2) jsou jediné, které byly ponejvíce studovány, které vyžadují polysacharidový kofaktor, heparin nebo HS, aby se mohly navázat na FGF receptor (FGFR) a aktivovaly jej.
I když přesný mechanismus, kterým heparin a HS aktivoval FGF není znám, je přesto známo, že heparin, FGF a FGFR vytváří třímolekulový nebo ternámí komplex.
Jedním z předpokládaných mechanismů je ten, kde heparin a HS vyvolává tak zvanou sendvičovou dimerizaci FGF a potom, takto dimenzovaný vytváří s FGFR stabilní komplex.
Antimetastatické účinky heparinových derivátů
Schopnost primárního nádoru generovat metastázované buňky je patrně hlavním problémem, kterému protirakovinová terapie čelí.
Zdá se, že heparinové deriváty s velkou schopností blokovat heparanázu, jsou schopné rovněž inhibovat angiogenezi jak primárních nádorů, tak metastáz.
Inhibice heparanázy navíc snižuje schopnost nádorových buněk migrovat z primárního nádoru k dalším orgánům.
Na zvířecích modelech bylo zjištěno, že antimetastatický účinek koreluje s heparanázovou inhibiční schopností heparinu a jeho derivátů (Bitan, M., et al., Isr. J. Med. Sci., 31, 106 - 108, 1995), rovněž tak jako dalších sulfatovaných polysacharidů (Miao, H. Q., et al., Int. J. Cancer, 83, 424 - 431, 1999 a zde uvedené odkazy). Provedené studie závislosti antimetastatických účinků na molekulové hmotnosti ukazují, že i velmi nízkomolekulámí hepariny (Sciumbata, T., et al., Invasion Metastasis, 16, 132 - 143, 1996) a polysulfáty oligosacharidů (Parish, C. R., et al., Cancer Res., 59, 3433 - 3441, 1999) si udržují významné antimetastatické působení. I když globální odstranění N-sulfátových skupin (N-desulfatace) sníží antimetastatickou mohutnost heparinu, ta se částečně obnoví N-acylací (N-acetylace, N-hexanoylace) (Bitan, M., 1995) a Nsukcinylací (Sciumbata, T., 1996) výsledných volných skupin NH2. Bylo zjištěno, že antimetastatické účinky heparinu jsou nepřímo úměrné stupni jejich O-sulfatace (Bitan, M., 1995). Selektivní 2-O-desulfatace zbytku kyseliny iduronové nemá za následek výrazné snížení antimetastatických účinků heparinu (Lapierre, F., Glycobiology, 6, 355 - 366, 1996).
Obecně, jak heparanázová inhibice, tak antimetastatické účinky heparinu a dalších sulfatovaných polysacharidů se zmenšují se zmenšující se molekulovou hmotností a stupněm sulfatace (Bitan, M., 1995; Parish, C. R., 1999). Tyto účinky však také závisejí na karbohydrátovém skeletu polysacharidů (typ zbytků a poloha glykosidických vazeb) (Parish, C. R., 1999). Jelikož dosud není známa trojrozměrná struktura aktivních poloh heparanázy, je obtížné předpovídat, který polysacharidový skelet a které sulfatační polohy inhibují enzym nejůčinněji.
Na základě současných znalostí lze strukturální požadavky látek podobných heparinu, které by měly příznivé účinky na inhibici angiogeneze, rozdělit do dvou kategorií na základě cíle, který mají blokovat:
a) inhibici heparanázy: i když tento enzym rozpozná a rozštěpí heparinové a HS sekvence nejméně na osm monosacharidových jednotek skládajících se z kyseliny N-acyl-glukosaminglukuronové (nebo N-sulfatovaných zbytků glukosaminu, viz například Sandback-Pikas, D., et al., J. Biol. Chem., 273, 18777 - 18780, 1998 a citované odkazy), může být jeho inhibice účinně dosaženo heparinovými fragmenty delšími než jsou tetradekasacharidové (Bitan, M., 1995), nebo vysoce sulfatovanými kratšími oligosacharidy, jako je sulfát maltohexosy (MHS) a sulfát fosfomannopentosy (PI-88) (Parish, C. R., 1999). Přes to jsou jak dlouhé heparinové fragmenty, tak vysoce sulfatované oligosacharidy antikoagulanty, tedy látky s vlastností, které se má u potenciálních antimetastatických léčiv předcházet;
-3 CZ 307433 B6
b) inhibici angiogenních růstových faktorů (fibroblastového typu: FGF-1 a FGF-2; vaskulárního endotheliálního typu: VEGF; typu vaskulární permeability: VPF): až potud měly sloučeniny podobné heparinu sekvence dlouhé nejlépe alespoň pět monosacharidových jednotek, obsahující 2-sulfatovanou kyselinu iduronovou a N-6-sulfatovaný glukosamin (viz například Maccarana, M., et al., J. Biol. Chem., 268, 23989 - 23905, 1993).
Literatura uvádí malé peptidy (5 až 13 aminokyselin) s antiangiogenními účinky patent patent US 5,399,667 z University of Washington), které působí vazbou na thrombospondinový receptor, nebo delší peptidy (přibližně 50 aminokyselin).
Jsou známy i modifikované faktory krevních destiček - (EP 0589719, Lilly), schopné inhibovat endotheliální proliferaci s IC50 = 7 nM.
Oligosacharidové fragmenty s antiangiogenními účinky byly též popsány bohatě: bylo zjištěno, že změnami sekvence cukrů lze zvýšit interakční selektivitu.
Heparin může být navíc použit jako vehikulum pro látky, které samy o sobě jsou antiangiogenní, jakými jsou například některé steroidy, využívající afinitu heparinu k vaskulámím endotheliálním buňkám; viz například WO 93/18793 z University of Texas a Imperiál Cancer Research Technology, kde jsou hepariny nárokovány s látkami vazebně labilními na působení takových kyselin, jako je hydrazid kyseliny adipové vázaný na kortisol. Antiangiogenní účinek konjugovaných molekul je větší než účinek nekonjugovaných molekul, a to i pokud jsou podávány souběžně.
V Biochim. Biophys. Acta, 1310, 86 - 96, 1996 je popsána vazba heparinu vázaných na steroidy (např. kortisol) s hydrazonovou skupinou na C-20, která vykazuje větší angiogenní účinky než obě konjugované sloučeniny.
EP 0246654 od Daiichi Sc. popisuje sulfatované polysacharidy s angiogenními účinky se studiemi fáze II. EP 0394971 od Pharmacia & Upjohn - Harvard Coll. popisuje hexasacharidy s fragmenty heparinu o malé sulfataci, které jsou schopné inhibovat růst endotheliálních buněk a angiogenezi stimulovanou FGF-1. EP 0618234 od Alfa Wasserman popisuje metodu přípravy semisyntetických glykosaminoglykanů s heparinovou nebo heparanovou strukturou nesoucí nukleofilní skupinu. WO 95/05182 od Glycomed popisuje různé sulfatované oligosacharidy s antikoagulačními, antiangiogenními a protizánětlivými účinky. US 5,808,021 od Glycomed popisuje metodu přípravy v podstatě nedepolymerizovaného 2-O, 3-0 desulfatovaného heparinu s procentem desulfatace kyseliny iduronové v poloze 2 (I, 2-O) a poloze 3 glukosaminové jednotky (A, 3-O) přibližně od 99 do přibližně 75 % původní hodnoty. Tento způsob předpokládá desulfataci vedenou v přítomnosti kationtů dvojmocného kovu, jehož příkladem je vápník nebo měď, po níž následuje lyofilisace získaného produktu. Desulfátované hepariny mají antiangiogenní účinky. EP 0251134 od Yeda Res & Dev Co Ltd, et al., popisuje použití tak velké dávky heparinu nebo jeho derivátů, které jsou ještě pod hranicí koagulace, k prevenci odmítání aloimplantátu a k léčbě autoimunních onemocnění. Účinek heparinu je dán inhibici heparanázy. WO 88/05301 z Univ. Australian Nat., popisuje antimetastatické a/nebo protizánětlivé přípravky obsahující sulfatovaný polysacharid, který je inhibitorem heparanázy. Je použit heparin, fucoidan, pentosan sulfát a dextran sulfát. WO 92/01003 z Univ. Texas Systém popisuje použití derivátu heparinu, který zabraňuje antikoagulačnímu působení, jako inhibitoru heparanázy. Tyto deriváty mají sulfamino nebo O-sulfátové skupiny, m. hm. 1000 až 15000 a každá terminální monomemí jednotka je monomerní, opakováním jednotky s terminálním atomem O vázaným na blokovací skupinu. WO 94/14851 a WO 96/06867 od Glycomed používá 2-O, 3-0 desulfátovaný mukózní heparin nebo jeho fragmenty, které jsou alespoň z 96,7 % desulfátované v poloze 2-0 a alespoň ze 75 % desulfátované v poloze 3-0, které jsou vhodné jako neantikoagulační heparanázové inhibitory. WO 95/09637 a WO 96/09828 od Glycomed popisují vysoce sulfatované maltooligosacharidové sloučeniny s vlastnostmi podobnými heparinu. WO 95/30424 od Glycomed používá 6-O-desulfátovaný heparin nebo jeho fragmenty majícími heparanázové inhibiční účinky. WO 96/33726 z Univ. Australian Nat., popisuje sulfatované
-4CZ 307433 B6 oligosacharidy jako heparanová mimetika, mající heparanázové inhibiční účinky. WO 01/35967, od Knoll AG, uvádí metodu léčby srdeční nedostatečnosti a odpovídajících stavů podáváním heparanázových inhibitorů, mezi nimiž jsou zmiňovány heparin, který má částečně redukované skupiny COOH, nebo je alespoň částečně N-desulfátovaný a N-acylovaný, nebo je alespoň částečné Ν,Ο-desulfátovaný a N-resulfátovaný, neboje O-acetylovaný.
Požadavkem zde popisovaného vynálezu je nalezení optimální glykosaminoglykanové struktury vytvářející antiangiogenní působení založené na mechanismu inhibice heparanázy a/nebo inhibice růstového faktoru FGF. Dalším požadavkem zde popisovaného vynálezu je připravení léčiva s antiangiogenními účinky, které jsou nezbytné ke zbavení se typických vedlejších účinků heparinových derivátů, jakými jsou například antikoagulační účinky.
WO 01/55221 podaný jménem přihlašovatele popisuje glykosaminoglykany, a to zvláště desulfátovaný heparin, s desulfatačním stupněm ne vyšším než 60 % z celkového počtu uranových jednotek. Tyto deriváty jsou vybaveny antiangiogenními účinky a jsou zbaveny antikoagulačních účinků. Jmenované sloučeniny vykazují antiangiogenní účinky, které jsou založeny na inhibici FGF. Žádné účinky inhibice heparanázy nebyly předvídány.
Zcela obecně: WO 01/55221 uvádí také upravený heparin obsahující glykosaminové zbytky o různém stupni N-desulfatace a případné následné celkové nebo částečné acetylaci.
Obecně uvedené jmenované odkazy nepopisují jednoznačně N-desulfataci a případné následné kroky celkové nebo částečné acetylace.
Podstata vynálezu
Nyní bylo zjištěno, že vystavení takovémuto glykosaminoglykanů, jakým je například glykosaminoglykan podobný heparinu, heparin nebo modifikovaný heparin, obsahujícího glukosaminové zbytky o různém stupni N-desulfatace a případně následně celkově nebo částečně N-acylované (nejlépe N-acetylované), řízené 2-O-desulfataci iduronových jednotek, a to až do stupně desulfatace ne většího než 60 % z celkového počtu iduronových jednotek, zachová angiogenní vlastnosti zprostředkované růstovým faktorem.
2-O-Desulfatované hepariny uvedené výše ve WO 01/55221 jsou překvapivě také inhibitory heparanů. Bylo zjištěno, že tato vlastnost je u glykolového štěpení nesulfátovaných zbytků uranových kyselin dalším zlepšením. Bylo také zjištěno, že glykolové štěpení, tedy chemická úprava vedoucí k dramatické ztrátě antikoagulačního účinku (Času, B., etal., Arzneim. Forsch. (Drug Res.), 36,637 - 642, 1986), dramaticky zlepší heparanázové inhibiční vlastnosti částečně N-acetylovaných heparinu získaných 50 % N-desulfatací, po které následuje N-acetylace výsledných volných aminoskupin a 2-O-desulfátovaných sloučenin.
Desulfatace prováděná za podmínek popisovaných v předloženém vynálezu vytváří také iduronové jednotky s oxyranovým kruhem v poloze 2 a 3. Otevřením oxyranového kruhu za podmínek popisovaných v předloženém vynálezu vzniknou L-iduronové nebo L-galakturonové jednotky.
Předmětem zde popisovaného vynálezu je modifikovaný heparin obsahující glykosaminové zbytky o různém stupni N-desulfatace a následné N-acetylace připravitelný podrobením heparinu způsobu, který sestává z následujících kroků:
a) N-desulfatace pomocí solvolytické hydrolýzy sulfaminových zbytků ve směsi DMSO:H2O v objemovém poměru 95:5, při teplotě místnosti, po dobu v rozmezí od 0,5 do 8 hodin, čímž se dosáhne úplné nebo částečné eliminace sulfátových skupin v poloze 2 glukosaminových zbytků;
-5CZ 307433 B6
b) N-acetylace uvedených úplně nebo částečně desulfátovaných skupin v poloze 2 glukosaminových zbytků reakcí s acetylačním činidlem v alkalickém vodném roztoku o pH 8-9, čímž se získají úplně nebo částečně acetylované skupiny v poloze 2 glukosaminových zbytků;
c) oxidace diolů pomocí jodistanu sodného, čímž se dosáhne otevření glykosidového kruhu za vzniku dvou aldehydových skupin na každý modifikovaný zbytek;
d) redukce uvedených aldehydových skupin na primární alkohol;
e) případná hydrolýza sloučenin získaných v kroku d) za vzniku oligosacharidů odpovídajících pravidelným sekvencím;
nebo alternativně
f) podrobení produktů získaných v kroku d) parciální enzymatické hydrolýze pomocí enzymu vybraného ze skupiny sestávající z lyázy, heparinázy, heparitinázy nebo ekvivalentního enzymu, za vzniku oligosacharidů s neredukujícím koncovým zbytkem sestávajícím z nenasycené iduronové kyseliny, redukujícím zbytkem sestávajícím z N-sulfoglukosaminu a obsahujících alespoň jeden zbytek otevřené iduronové kyseliny.
Modifikovaný heparin, který je předmětem vynálezu, je charakterizován vysokou mohutností inhibice heparanázy se zajímavými antiangiogenními vlastnostmi, a je proto vhodný jako účinná složka při přípravě léčiv k léčbě patologických stavů prospěšných pro inhibici heparanázy, patologických stavů na základě abnormální angiogeneze a zvláště k léčbě metastáz. Modifikovaný heparin podle předloženého vynálezu inhibuje také FGF.
Modifikovaný heparin podle předloženého vynálezu vykazuje výhodně snížené, pokud ne zcela chybějící antikoagulační vlastnosti, a tak se předchází vedlejším účinkům typickým pro hepariny. Další výhodou modifikovaného heparinu podle předloženého vynálezu je, že může být charakterizován instrumentálními analytickými technikami, jakými jsou například NMR spektroskopie, což umožňuje kontrolu postupu, která je z průmyslového hlediska zcela nutná.
I v případě modifikovaných heparinu má molekulová hmotnost (m.hm.) velmi důležitou funkci při výrobě inhibitorů angiogeneze. Je dobře známo, že zmenšení molekulové hmotnosti (m. hm.) až k hodnotám odpovídajícím pentasacharidovým jednotkám nevede ke ztrátě antiangiogenního účinku. Na druhé straně však bylo stanoveno, že nad určitou délku heparinového řetězce, jsou lepšími inhibitory při srovnání s inhibici aktivace FGF, než kratší řetězce. Optimální délka řetězce pro inhibici heparanázy závisí na struktuře inhibitoru (charakter skeletu cukru, vazby v určité poloze, charakter sulfatace) a tu lze upravit pro každý nový typ potenciálního inhibitoru.
Jak již bylo uvedeno výše, předmětem tohoto vynálezu je modifikovaný heparin obsahující glykosaminové zbytky o různém stupni N-desulfatace a následné N-acetylace připravitelný podrobením heparinu způsobu, který sestává z následujících kroků:
a) N-desulfatace pomocí solvolytické hydrolýzy sulfaminových zbytků ve směsi DMSO:H2O v objemovém poměru 95:5, při teplotě místnosti, po dobu v rozmezí od 0,5 do 8 hodin, čímž se dosáhne úplné nebo částečné eliminace sulfátových skupin v poloze 2 glukosaminových zbytků;
b) N-acetylace uvedených úplně nebo částečně desulfátovaných skupin v poloze 2 glukosaminových zbytků reakcí s acetylačním činidlem v alkalickém vodném roztoku o pH 8-9, čímž se získají úplně nebo částečně acetylované skupiny v poloze 2 glukosaminových zbytků;
c) oxidace diolů pomocí jodistanu sodného, čímž se dosáhne otevření glykosidového kruhu za vzniku dvou aldehydových skupin na každý modifikovaný zbytek;
-6CZ 307433 B6
d) redukce uvedených aldehydových skupin na primární alkohol;
e) případná hydrolýza sloučenin získaných v kroku d) za vzniku oligosacharidů odpovídajících pravidelným sekvencím;
nebo alternativně
f) podrobení produktů získaných v kroku d) parciální enzymatické hydrolýze pomocí enzymu vybraného ze skupiny sestávající z lyázy, heparinázy, heparitinázy nebo ekvivalentního enzymu, za vzniku oligosacharidů s neredukujícím koncovým zbytkem sestávajícím z nenasycené iduronové kyseliny, redukujícím zbytkem sestávajícím z N-sulfoglukosaminu a obsahujících alespoň jeden zbytek otevřené iduronové kyseliny.
Sloučeniny podle vynálezu odvozené od heparinu, se připravují z výchozího heparinu například N-desulfatací, po které následuje N-acylace za využití technik známých odborníkům z oboru. Tak například N-desulfatace se provádí solvolýzou v roztoku DMSO a H2O v poměru 95 : 5 (obj./obj.) za laboratorní teploty po dobu sahající od 0,5 do 8 hodin, po ní následuje N-acylace v alkalickém prostředí, například acylanhydridy (tj. acetyl-, hexanoyl-, sukcinylpivaloylanhydrid).
Následující 2-O-desulfatace se provádí v přítomnosti alkalie, jakou je například hydroxid sodný, a to za teplot sahajících od teploty okolí do teploty 100 °C, přednostně však od 50 do 70 °C, například při 60 °C, a to po dostatečně dlouhou dobu, k získání požadovaného 2-Odesulfatovaného produktu. 2-O-desulfatace se reguluje působením na parametry postupu, jakými jsou například koncentrace reakčních látek, teplota a reakční doba. Jedním z příkladů, kterému se dává přednost spočívá v udržování stálé koncentrace substrátu (glykosaminglykanu) na 80 mg.ml ’ a koncentrace NaOH na 1M, stálé teploty 60 °C a řízení desulfatace reakční dobou od 15 do 60 minut. Odborníci znalí oboru mohou měnit podmínky, například zvýšením reakční teploty a zkrácením reakční doby na základě v praxi běžně pokusně používaného systému pokusomyl a na základě svých obecných znalostí věci.
Ve výhodném provedení je modifikovaný heparin podle tohoto vynálezu vybraný ze skupiny sestávající z
- částečně N-desulfatovaného a N-reacetylovaného heparinu s a molekulovou hmotností, MW, 11 200, polydisperzním indexem 1,3, stupněm desulfatace 1,6, vyjádřeným jako molámí poměr SO3-:COO-, procentuálním podílem modifikovaných uranových kyselin vzhledem k celkovému obsahu uranových kyselin 30 %, přičemž glykosaminové zbytky mají stupeň N-acetylace 50 %,
- částečně N-desulfatovaného a N—reacetylovaného heparinu o nízké molekulové hmotnosti, LMW, s molekulovou hmotností Mn=4780, Mw=10000, polydisperzním indexem 2,092, procentuálním podílem modifikovaných uranových kys, přičemž glykosaminové zbytky mají stupeň N-acetylace 50 %,
- částečně N-desulfatovaného a N-reacetylovaného heparinu, s procentuálním podílem modifikovaných uranových kyselin vzhledem k celkovému obsahu uranových kyselin 30 %, přičemž glykosaminové zbytky mají stupeň N-acetylace 27 %,
- částečně N-desulfatovaného a N-reacetylovaného heparinu, s procentuálním podílem modifikovaných uranových kyselin vzhledem k celkovému obsahu uranových kyselin 30%, přičemž glykosaminové zbytky mají stupeň N-acetylace 39 %;
- částečně N-desulfatovaného a N-reacetylovaného heparinu, s procentuálním podílem modifikovaných uranových kyselin vzhledem k celkovému obsahu uranových kyselin 30 %, přičemž glykosaminové zbytky mají stupeň N-acetylace 64 %.
-7 CZ 307433 B6
Dále se tento vynálezu týká použití modifikovaného heparinu podle tohoto vynálezu pro přípravu léčiva, které má inhibiční účinky na heparanázu, přičemž výhodně má toto léčivo antiangiogenní účinky aještě výhodněji je určeno pro léčbu zánětů a/nebo autoimunitních onemocnění.
Mezi uvedená onemocnění patří primární nádory, metastázy, diabetické retinopatie, psoriáza, retrolentikulámí fibroplázie, restenóza po angioplastice, koronární by-pass, zánět, artritida, autoimunintní onemocnění, odmítnutí aloimplantátu, kardiovaskulární onemocnění, fibroproliferativní onemocnění, onemocnění vyvolávaná abnormální agregací krevních destiček, onemocnění vyvolávaná proliferací hladkého svalu, Goodpasteureův syndrom, akutní glomerulonefritida, neonatální pulmonální hypertenze, astma, městnavé selhání srdce, puimonální hypertenze dospělých, renální vaskulární hypertenze, proliferativní retinopatie, roztroušená skleróza, experimentální autoimunitní encefalomyelitida, inzulín-dependentní diabetes, zánětlivé onemocnění střev, vředová kolitida, Crohnova nemoc.
V dalším aspektu je předmětem tohoto vynálezu farmaceutická kompozice obsahující jako aktivní složku alespoň jeden modifikovaný heparin podle tohoto vynálezu, ve směsi s farmaceuticky přijatelnými vehikuly a excipienty.
Sloučeniny podle předloženého vynálezu vydatně zabraňují vedlejším účinkům, typickým pro heparin. Sloučeniny podle předloženého vynálezu vydatně zabraňují antikoagulačnímu účinku. Vydatným zabráněním takovým účinkům musejí z pohledu klinického využití chápat odborníci z oboru buď žádný, nebo jen zanedbatelný účinek.
Účinek inhibující heparanázu byl stanoven metodou stanovenou skupinou Vlodavského (Bitan, M., et al., 1995). Metoda je založena na hodnocení nadbytečné fragmentace proteoglykanů heparan sulfátu řetězce heparan sulfátu (HSPG) způsobeného heparanázou. Jako zdroj HSPG se obvykle používá sulfátem značená extracelulární matrice (ECM). Sulfátem značená ECM se inkubuje s rekombinantní heparanázou při pH 6,2 v nepřítomnosti a v přítomnosti zvyšujících se koncentrací zkoušené sloučeniny.
K hodnocení nastalé degradace proteoglykanů se inkubační medium odebírá a pro gelovou filtraci nanáší na kolonu se Sepharosou 6B (0,9 x 30 cm). Frakce (0,2 ml) se eluují PBS při průtoku 5 ml.IT1 a měří se radioaktivita. Vyloučený objem (Vo) se obarví dextranovou modří a celkový nanesený objem (Vt) fenolčervení. Degradované fragmenty postranních řetězců HS se eluují ze Sepharosy 6B při 0,5 < Kav < 0,8 (peak II). Za uváděných pokusných podmínek dobré heparanázové inhibitory inhibují fragmentaci HS při koncentracích 10 pg.ml1 nebo nižších.
Výsledky jsou v níže uvedené tabulce 1.
Tabulka 1
Inhibice heparanázy v dávkách sahajících od 25 pg.mE1 do 5 pg.mF1
-8CZ 307433 B6
| inhbice | ||||
| dávka | 25 pg.mr1 | 10 pg.ml·1 | 5 pg.ml·1 | |
| heparin | 100% | nestanoveno | >100% | |
| ST 1516 | heparin 40 % RO | 100% | nestanoveno | >85 % |
| ST1514 | heparin ~50 % RO | 100% | 100% | >85 % |
| ST1515 | heparin 27,5 % RO | 100% | 100% | 100% |
| ST1518 | 50 % NAc heparin 30 % RO | 100% | 100% | >85 % |
Stojí za zmínku, že ST 1518 má velký inhibiční účinek i při koncentraci 1 pg.ml '.
Sloučeniny podle předloženého vynálezu a zvláště pak nové sloučeniny, byly zkoušeny na své účinky vzhledem k růstovým faktorům FGF podle stejného pokusného modelu, který byl popsán ve WO 01/55221, a vykazovaly účinky srovnatelné s účinky uvedenými v citovaném odkazu. Následující příklady ještě dále vynález objasní.
Příklady uskutečnění vynálezu
Příklad 1
ST 1518
K vodnému roztoku 1 g heparinu předem eluovanému z kolony s Amberlitem IR 120, byl přidán nadbytek pyridinu. Roztok byl za sníženého tlaku odpařen; výsledná pyridinová sůl heparinu byla rozpuštěna v 50 ml směsi DMSO/voda v poměru 95 : 5 a mícháno při 20 °C po dobu 2 hodin k získání desulfatačního stupně okolo 50 %.
Potom byl roztok zředěn stejně velkým objemem nasyceného roztoku NaHCO3. Tento roztok byl na membráně dialyzován proti destilované vodě (odebráno 1000 až 2000 D). Výsledný produkt byl izolován odpařením za sníženého tlaku.
N-acetylovaný heparin byl připraven N-acetylací 50 % N-desulfátovaného heparinu. 1 g heparinu bylo rozpuštěno v 10 ml destilované vody; roztok byl ochlazen na 4 °C a nasycen hydrogenuhličitanem sodným; k tomuto roztoku bylo přidáno 625 μΐ anhydridu kyseliny octové a směs míchána po dobu 2 hodin při 4 °C. Během reakce bylo pH sledováno a udržováno na hodnotě okolo 8 přidáváním hydrogenuhličitanu sodného. Potom byl získaný roztok dialyzován přes membránu proti destilované vodě (odebráno 2000 - 1000 D).
g 50 % N-acetylovaného heparinu bylo rozpuštěno ve 25 ml destilované vody a ochlazeno na 4 °C. Po přídavku 25 ml 0,2 M roztoku NalO4 byl roztok ponechán míchat v temnu 20 hodin a reakce byla zastavena přídavkem ethylenglykolu a sole byly odstraněny tangenciální ultrafiltrací. K odsolenému roztoku přidáváno 400 mg NaBH4 rozděleného na několik dávek. Roztok byl ponechán míchat po dobu 3 hodin při okolní teplotě, potom zneutralizován zředěnou HC1 a odsolen tangenciální ultrafiltrací. nC-NMR spektrum sloučeniny je znázorněno na obrázku 1.
-9CZ 307433 B6
Příklad 2
ST 2010 a ST 2184 g heparinu bylo rozpuštěno v 63 ml roztoku IN NaOH. Roztok byl ponechán míchat po dobu 45 minut při 60 °C, ochlazen a zneutralizován zředěnou HC1. Potom byl roztok míchán ještě 48 hodin při 70 °C, ochlazen a dialyzován přes membránu proti vodě (odebráno 2000 - 1000 D).
g 2-O-desulfátovaného heparinu bylo rozpuštěno v 50 ml destilované vody a ochlazeno na 4 °C. Po přídavku 50 ml 0,2 M roztoku NalO4 byl roztok ponechán míchat v temnu 20 hodin a reakce byla zastavena přídavkem ethylenglykolu a sole byly odstraněny tangenciální ultrafiltrací. Potom bylo k odsolenému roztoku přidáváno 800 mg NaBH4 rozděleného na několik dávek. Roztok byl ponechán míchat po dobu 3 hodin při okolní teplotě, potom zneutralizován zředěnou HC1 a odsolen tangenciální ultrafiltrací.
400 mg oxidovaného a redukovaného heparinu bylo rozpuštěno ve 25 ml destilované vody. Po přídavku 7 mg NaNO2 bylo pH nastaveno zředěnou HCI na hodnotu 2 a roztok ponechán míchat 17 minut při 4 °C. Reakce byla zastavena zneutralizováním. Potom bylo k odsolenému roztoku přidáváno 60 mg NaBH4 rozděleného na několik dávek. Roztok byl ponechán míchat po dobu 3 hodin při okolní teplotě, potom zneutralizován zředěnou HCI a frakcionován gelovou filtrací. Byly izolovány dvě frakce o rozdílné molekulové hmotnosti: ST 2010 mající Mw = 3050 a ST 2184 mající Mn = 5800 a Mw = 7520.
I3C-NMR spektrum sloučeniny ST 2010 je znázorněno na obrázku 2.
Příklad 3
ST 2041
K vodnému roztoku 2 g heparinu předem eluovanému z kolony s Amberlitem IR 120, byl přidán nadbytek pyridinu. Roztok byl za sníženého tlaku odpařen; výsledná pyridinová sůl heparinu byla rozpuštěna ve 100 ml směsi DMSO/H2O v poměru 95:5a mícháno při 20 °C po dobu 4 hodin k získání desulfatačního stupně okolo 64 %.
Potom byl roztok zředěn stejně velkým objemem nasyceného roztoku NaHCC^. Tento roztok byl na membráně dialyzován proti destilované vodě (odebráno 1000 až 2000 D). Výsledný produkt byl izolován odpařením za sníženého tlaku.
13C-NMR spektrum sloučeniny ST 2041 je znázorněno na obrázku 3.
Claims (8)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Modifikovaný heparin obsahující glykosaminové zbytky o různém stupni N-desulfatace a následné N-acetylace připravitelný podrobením heparinu způsobu, který sestává z následujících kroků:a) N-desulfatace pomocí solvolytické hydrolýzy sulfaminových zbytků ve směsi DMSO:H2O v objemovém poměru 95:5, při teplotě místnosti, po dobu v rozmezí od 0,5 do 8 hodin, čímž se dosáhne úplné nebo částečné eliminace sulfátových skupin v poloze 2 glukosaminových zbytků;b) N-acetylace uvedených úplně nebo částečně desulfatovaných skupin v poloze 2 glukosaminových zbytků reakcí s acetylační činidlem v alkalickém vodném roztoku o pH 8-9, čímž se získají úplně nebo částečně acetylované skupiny v poloze 2 glukosaminových zbytků;- 10CZ 307433 B6c) oxidace diolů pomocí jodistanu sodného, čímž se dosáhne otevření glykosidového kruhu za vzniku dvou aldehydových skupin na každý modifikovaný zbytek;d) redukce uvedených aldehydových skupin na primární alkohol;e) případná hydrolýza sloučenin získaných v kroku d) za vzniku oligosacharidů odpovídajících pravidelným sekvencím;nebo alternativněf) podrobení produktů získaných v kroku d) parciální enzymatické hydrolýze pomocí enzymu vybraného ze skupiny sestávající z lyázy, heparinázy, heparitinázy nebo ekvivalentního enzymu, za vzniku oligosacharidů s neredukujícím koncovým zbytkem sestávajícím z nenasycené iduronové kyseliny, redukujícím zbytkem sestávajícím z N-sulfoglukosaminu a obsahujících alespoň jeden zbytek otevřené iduronové kyseliny.
- 2. Heparin podle nároku 1 vybraný ze skupiny sestávající z:- částečně N-desulfatovaného a N-reacetylovaného heparinu s a molekulovou hmotností, MW, 11 200, polydisperzním indexem 1,3, stupněm desulfatace 1,6, vyjádřeným jako molámí poměr SC3-:COO-, procentuálním podílem modifikovaných uronových kyselin vzhledem k celkovému obsahu uronových kyselin 30 %, přičemž glykosaminové zbytky mají stupeň N-acetylace 50 %,- částečně N-desulfatovaného a N-reacetylovaného heparinu o nízké molekulové hmotnosti, LMW, s molekulovou hmotností Mn=4780, Mw=10 000, polydisperzním indexem 2,092, procentuálním podílem modifikovaných uronových kys, přičemž glykosaminové zbytky mají stupeň N-acetylace 50 %,- částečně N-desulfatovaného a N-reacetylovaného heparinu, s procentuálním podílem modifikovaných uronových kyselin vzhledem k celkovému obsahu uronových kyselin 30 %, přičemž glykosaminové zbytky mají stupeň N-acetylace 27 %,- částečně N-desulfatovaného a N-reacetylovaného heparinu, s procentuálním podílem modifikovaných uronových kyselin vzhledem k celkovému obsahu uronových kyselin 30%, přičemž glykosaminové zbytky mají stupeň N-acetylace 39 %;- částečně N-desulfatovaného a N-reacetylovaného heparinu, s procentuálním podílem modifikovaných uronových kyselin vzhledem k celkovému obsahu uronových kyselin 30 %, přičemž glykosaminové zbytky mají stupeň N-acetylace 64 %.
- 3. Použití heparinu podle nároku 1 nebo 2 pro přípravu léčiva, které má inhibiční účinky na heparanázu.
- 4. Použití podle nároku 3, kde léčivo má antiangiogenní účinky.
- 5. Použití podle kteréhokoli z nároků 3 až 4, kde uvedené léčivo je užitečné pro léčbu zánětů.
- 6. Použití podle kteréhokoli z nároků 3 až 5, kde uvedené léčivo je užitečné pro léčbu autoimunitních onemocnění.
- 7. Použití podle kteréhokoli z nároků 3 až 6, kde onemocnění, které má být léčeno, je vybrané ze skupiny, kterou tvoří primární nádory, metastázy, diabetické retinopatie, psoriáza, retrolentikulámí fibroplázie, restenóza po angioplastice, koronární by-pass, zánět, artritida, autoimunintní onemocnění, odmítnutí aloimplantátu, kardiovaskulární onemocnění, fibro- 11 CZ 307433 B6 proliferativní onemocnění, onemocnění vyvolávaná abnormální agregací krevních destiček, onemocnění vyvolávaná proliferací hladkého svalu, Goodpastureův syndrom, akutní glomerulonefritida, neonatální pulmonální hypertenze, astma, městnavé selhání srdce, pulmonální hypertenze dospělých, renální vaskulární hypertenze, proliferativní retinopatie, 5 roztroušená skleróza, experimentální autoimunitní encefalomyelitida, inzulín-dependentní diabetes, zánětlivé onemocnění střev, vředová kolitida, Crohnova nemoc.
- 8. Farmaceutická kompozice obsahující alespoň jednu sloučeninu podle nároku 1 nebo 2 jako aktivní složku ve směsi farmaceuticky přijatelnými vehikuly a excipienty.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/IT2001/000472 WO2003022291A1 (en) | 2001-09-12 | 2001-09-12 | Derivatives of partially desulphated glycosaminoglycans as heparanase inhibitors, endowed with antiangiogenic activity and devoid of anticoagulating effect |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2004255A3 CZ2004255A3 (cs) | 2004-11-10 |
| CZ307433B6 true CZ307433B6 (cs) | 2018-08-22 |
Family
ID=11133723
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2004-255A CZ307433B6 (cs) | 2001-09-12 | 2001-09-12 | Deriváty částečně desulfátovaných glykosaminoglykanů jako inhibitory heparanázy mající antiangiogenní účinky a zabraňující antikoagulačnímu působení |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20050137167A1 (cs) |
| EP (2) | EP2343077B1 (cs) |
| JP (1) | JP2005506326A (cs) |
| KR (1) | KR100855331B1 (cs) |
| CN (1) | CN1547477B (cs) |
| AT (1) | ATE511846T1 (cs) |
| AU (1) | AU2001292231B2 (cs) |
| BR (1) | BR0117124A (cs) |
| CA (1) | CA2457719C (cs) |
| CY (2) | CY1112551T1 (cs) |
| CZ (1) | CZ307433B6 (cs) |
| DK (1) | DK1427427T3 (cs) |
| ES (2) | ES2431362T3 (cs) |
| HU (1) | HU230385B1 (cs) |
| MX (1) | MXPA04002217A (cs) |
| PT (2) | PT1427427E (cs) |
| SI (1) | SI1427427T1 (cs) |
| SK (1) | SK288335B6 (cs) |
| WO (1) | WO2003022291A1 (cs) |
Families Citing this family (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20060293275A1 (en) * | 2004-03-29 | 2006-12-28 | Toshikazu Nakamura | Hgf production accelerator containing heparin-like oligosaccharide |
| JP5404406B2 (ja) * | 2006-10-20 | 2014-01-29 | ジ オーストラリアン ナショナル ユニバーシティ | 細胞外マトリクスの分解の阻害 |
| WO2009007224A1 (en) * | 2007-07-10 | 2009-01-15 | Sigma-Tau Industrie Farmaceutiche Riunite S.P.A. | Low molecular weight heparin derivatives having neuroprotective activity |
| US8592393B2 (en) | 2007-11-02 | 2013-11-26 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Polysaccharide compositions and methods of use for the treatment and prevention of disorders associated with progenitor cell mobilization |
| US8569262B2 (en) | 2007-11-02 | 2013-10-29 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Polysaccharide compositions and methods of use for the treatment and prevention of disorders associated with progenitor cell mobilization |
| US9351992B2 (en) * | 2007-11-02 | 2016-05-31 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Non-anticoagulant polysaccharide compositions |
| FI20085308A0 (fi) * | 2008-04-11 | 2008-04-11 | Polysackaridforskning I Uppsal | Heparanaasittomia ihmiskuntaan kuulumattomia nisäkkäitä |
| FR2949115B1 (fr) * | 2009-08-14 | 2012-11-02 | Sanofi Aventis | OLIGOSACCHARIDES N-SULFATES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE |
| WO2011109877A1 (en) * | 2010-03-12 | 2011-09-15 | The Australian National University | Heparan sulfate replacement therapy |
| US9387256B2 (en) | 2010-04-16 | 2016-07-12 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Tissue targeting |
| BR112012031906A2 (pt) | 2010-06-17 | 2016-08-23 | Momenta Pharmaceuticals Inc | métodos e composições para modular o crescimento de cabelo e pelos. |
| FR2970969B1 (fr) * | 2011-01-27 | 2013-10-18 | Sanofi Aventis | Oligosaccharides 3-o-alkyles activateurs des recepteurs des fgfs, leur preparation et leur application en therapeutique |
| KR101522604B1 (ko) * | 2013-03-21 | 2015-05-26 | 대한민국 | 곤충 글라이코자미노글라이칸 유래 헤파린 단편 및 이의 제조 방법 |
| KR102081267B1 (ko) * | 2013-05-16 | 2020-02-25 | 에이전시 포 사이언스, 테크놀로지 앤드 리서치 | 헤파란 설페이트 |
| JP2016520613A (ja) | 2013-05-28 | 2016-07-14 | モメンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 薬学的組成物 |
| ITLO20130005A1 (it) * | 2013-10-31 | 2015-05-01 | He E Biochimiche G Ronzonr S R | Derivati di glucosamminoglicani n-desolfatati e loro uso come farmaci |
| ITLO20130006A1 (it) | 2013-11-06 | 2015-05-07 | He E Biochimiche G Ronzoni S R | Derivati carbossilati di glucosamminoglicani e loro uso come farmaci |
| WO2016142814A1 (en) | 2015-03-06 | 2016-09-15 | Sigma-Tau Research Switzerland S.A. | Roneparstat combined therapy of multiple myeloma |
| RU2019121873A (ru) | 2016-12-13 | 2021-01-15 | БЕТА ТЕРАПЬЮТИКС ПиТиУай ЛТД | Ингибиторы гепараназы и их применение |
| US11787783B2 (en) | 2016-12-13 | 2023-10-17 | Beta Therapeutics Pty Ltd | Heparanase inhibitors and use thereof |
| CN108424474B (zh) * | 2017-02-15 | 2023-07-25 | 清华大学 | 去抗凝肝素衍生物及其用于炎症性肠病的治疗 |
| CN110612305B (zh) * | 2017-03-23 | 2023-11-28 | 维多利亚林克有限公司 | 硫酸乙酰肝素糖模拟化合物及其医药与化妆品用途 |
| EP3388439A1 (en) | 2017-04-11 | 2018-10-17 | Leadiant Biosciences SA | Biotin-conjugated n-acetyl glycol split heparin |
| WO2019149179A1 (zh) * | 2018-02-02 | 2019-08-08 | 深圳市海普瑞药业集团股份有限公司 | 糖胺聚糖衍生物及其制备方法和用途 |
| EP3705126A1 (en) | 2019-03-05 | 2020-09-09 | Leadiant Biosciences S.p.A. | Roneparstat for the treatment of amyloidosis |
| WO2021128253A1 (zh) * | 2019-12-27 | 2021-07-01 | 深圳市海普瑞药业集团股份有限公司 | 一种糖胺聚糖衍生物及其应用 |
| AU2021301259A1 (en) * | 2020-07-02 | 2023-02-02 | Fondation Sanfilippo Suisse | Marine bacterial exopolysaccharide derivatives and uses thereof in the treatment of mucopolysaccharidoses |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0254067A2 (en) * | 1986-06-26 | 1988-01-27 | Hadassa Medical Organization | Composition for metastasis prevention |
| WO1988001280A1 (en) * | 1986-08-21 | 1988-02-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Glycosaminoglycan derivatives and their use as inhibitors of tumor invasiveness or metastatic profusion |
| WO1992001003A1 (en) * | 1990-07-10 | 1992-01-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Glycosaminoglycan derivatives and their use as inhibitors of tumor invasiveness or metastatic profusion-ii |
| US5296471A (en) * | 1992-12-22 | 1994-03-22 | Glycomed Incorporated | Method for controlling o-desulfation of heparin and compositions produced thereby |
| WO1995002613A2 (en) * | 1993-07-12 | 1995-01-26 | Italfarmaco S.P.A. | Heparin derivatives having antimetastatic activity |
| WO1996006867A1 (en) * | 1994-09-01 | 1996-03-07 | Glycomed Incorporated | Method for controlling o-desulfation of heparin and compositions produced thereby |
| WO2001055221A1 (en) * | 2000-01-25 | 2001-08-02 | Sigma-Tau Industrie Farmaceutiche Riunite S.P.A. | Derivatives of partially desulphated glycosaminoglycans endowed with antiangiogenic activity and devoid of anticoagulating effect |
Family Cites Families (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62265998A (ja) * | 1986-03-10 | 1987-11-18 | ボ−ド オブ リ−ジエンツ ザ ユニヴア−シテイ オブ テキサス システム | ヘパラン硫酸エンドグリコシダーゼアッセイ |
| IE61758B1 (en) | 1986-05-23 | 1994-11-30 | Daiichi Seiyaku Co | Use of a sulfated polysaccharide |
| IL79254A0 (en) | 1986-06-26 | 1986-09-30 | Hadassah Med Org | Compositions for preventing graft rejection |
| IL85145A (en) | 1987-01-23 | 1994-08-26 | Univ Australian | Anti-metastatic pharmacological or veterinary preparations containing modified herpin with reduced anticoagulant activity |
| FR2614026B1 (fr) * | 1987-04-16 | 1992-04-17 | Sanofi Sa | Heparines de bas poids moleculaire, a structure reguliere, leur preparation et leurs applications biologiques |
| PT93847A (pt) | 1989-04-24 | 1990-11-20 | Harvard College | Processo para a preparacao de oligossacaridos de baixo peso molecular derivados de heparina ou de sulfato de heparano despolimerizados e de composicoes farmaceuticas que os contem |
| US5474765A (en) | 1992-03-23 | 1995-12-12 | Ut Sw Medical Ctr At Dallas | Preparation and use of steroid-polyanionic polymer-based conjugates targeted to vascular endothelial cells |
| ZA936925B (en) | 1992-09-25 | 1995-03-20 | Lilly Co Eli | Modified platelet factor-4. |
| US5399667A (en) | 1993-03-05 | 1995-03-21 | Washington University | Thrombospondin receptor binding peptides |
| IT1264101B1 (it) | 1993-03-29 | 1996-09-10 | Alfa Wassermann Spa | Processo per la sintesi di glicosaminoglicani semisintetici a struttura eparinica od eparanica modificati nella posizione 2 |
| WO1995005182A1 (en) | 1993-08-13 | 1995-02-23 | Glycomed Incorporated | Bridged oligosaccharides and sulfated derivatives thereof |
| US5739115A (en) | 1993-10-07 | 1998-04-14 | Glycomed Incorporated | Sulfated maltooligosaccharides with heparin-like properties |
| EP0722326A4 (en) | 1993-10-07 | 1999-10-06 | Glycomed Inc | HIGHLY SULFATED MALTOOLIGOSSACCHARIDES WITH HEPARIN-LIKE PROPERTIES |
| EP0758247A4 (en) | 1994-05-06 | 1997-08-20 | Glycomed Inc | O-DESULFATED HEPARIN DERIVATIVES, METHOD FOR THE PRODUCTION AND USE THEREOF |
| AUPN261895A0 (en) | 1995-04-28 | 1995-05-18 | Australian National University, The | Preparation and use of sulfated oligosaccharides |
| JP4051099B2 (ja) * | 1997-01-31 | 2008-02-20 | 生化学工業株式会社 | 低分子化ヘパリン、その製造法及び医薬組成物 |
| WO2001055521A1 (fr) * | 1998-09-22 | 2001-08-02 | Nippon Eisei Center Co., Ltd. | Raccord metallique de renforcement parasismique |
| DE19955803A1 (de) | 1999-11-19 | 2001-05-23 | Knoll Ag | Verwendung von Heparanase-Inhibitoren zur Behandlung von Hersinsuffizienz |
-
2001
- 2001-09-12 SK SK160-2004A patent/SK288335B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2001-09-12 WO PCT/IT2001/000472 patent/WO2003022291A1/en active Application Filing
- 2001-09-12 PT PT01972468T patent/PT1427427E/pt unknown
- 2001-09-12 MX MXPA04002217A patent/MXPA04002217A/es active IP Right Grant
- 2001-09-12 US US10/489,359 patent/US20050137167A1/en not_active Abandoned
- 2001-09-12 ES ES10183832T patent/ES2431362T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-12 ES ES01972468T patent/ES2367778T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-12 EP EP10183832.4A patent/EP2343077B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-12 BR BR0117124-0A patent/BR0117124A/pt active Search and Examination
- 2001-09-12 AU AU2001292231A patent/AU2001292231B2/en not_active Ceased
- 2001-09-12 CN CN018236324A patent/CN1547477B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 SI SI200130998T patent/SI1427427T1/sl unknown
- 2001-09-12 HU HU0401693A patent/HU230385B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2001-09-12 PT PT101838324T patent/PT2343077E/pt unknown
- 2001-09-12 KR KR1020047003203A patent/KR100855331B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 CA CA2457719A patent/CA2457719C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-12 JP JP2003526419A patent/JP2005506326A/ja active Pending
- 2001-09-12 EP EP01972468A patent/EP1427427B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-12 AT AT01972468T patent/ATE511846T1/de active
- 2001-09-12 DK DK01972468.1T patent/DK1427427T3/da active
- 2001-09-12 CZ CZ2004-255A patent/CZ307433B6/cs not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-08-29 CY CY20111100823T patent/CY1112551T1/el unknown
-
2013
- 2013-08-09 CY CY20131100685T patent/CY1114544T1/el unknown
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0254067A2 (en) * | 1986-06-26 | 1988-01-27 | Hadassa Medical Organization | Composition for metastasis prevention |
| WO1988001280A1 (en) * | 1986-08-21 | 1988-02-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Glycosaminoglycan derivatives and their use as inhibitors of tumor invasiveness or metastatic profusion |
| WO1992001003A1 (en) * | 1990-07-10 | 1992-01-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Glycosaminoglycan derivatives and their use as inhibitors of tumor invasiveness or metastatic profusion-ii |
| US5296471A (en) * | 1992-12-22 | 1994-03-22 | Glycomed Incorporated | Method for controlling o-desulfation of heparin and compositions produced thereby |
| WO1994014851A1 (en) * | 1992-12-22 | 1994-07-07 | Glycomed Incorporated | Method for controlling o-desulfation of heparin and compositions produced thereby |
| US5808021A (en) * | 1992-12-22 | 1998-09-15 | Glycomed Incorporated | Method for controlling O-desulfation of heparin |
| WO1995002613A2 (en) * | 1993-07-12 | 1995-01-26 | Italfarmaco S.P.A. | Heparin derivatives having antimetastatic activity |
| WO1996006867A1 (en) * | 1994-09-01 | 1996-03-07 | Glycomed Incorporated | Method for controlling o-desulfation of heparin and compositions produced thereby |
| WO2001055221A1 (en) * | 2000-01-25 | 2001-08-02 | Sigma-Tau Industrie Farmaceutiche Riunite S.P.A. | Derivatives of partially desulphated glycosaminoglycans endowed with antiangiogenic activity and devoid of anticoagulating effect |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| F. Lapierre a kol: "Chemical modification of heparin that diminish its anticoagulant but preserve its heparanase-inhibitory, angiostatic, antitumor and anti-metastatic propertis" Glycobiology 6(3) s. 355-366 (1996) * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2431362T3 (es) | 2013-11-26 |
| EP1427427A1 (en) | 2004-06-16 |
| SI1427427T1 (sl) | 2011-10-28 |
| CA2457719C (en) | 2012-01-03 |
| ATE511846T1 (de) | 2011-06-15 |
| EP1427427B1 (en) | 2011-06-08 |
| BR0117124A (pt) | 2004-09-28 |
| HUP0401693A3 (en) | 2009-06-29 |
| ES2367778T3 (es) | 2011-11-08 |
| MXPA04002217A (es) | 2004-07-08 |
| CY1112551T1 (el) | 2016-02-10 |
| PT1427427E (pt) | 2011-09-13 |
| EP2343077B1 (en) | 2013-07-17 |
| CZ2004255A3 (cs) | 2004-11-10 |
| CN1547477A (zh) | 2004-11-17 |
| US20050137167A1 (en) | 2005-06-23 |
| HK1069537A1 (en) | 2005-05-27 |
| WO2003022291A1 (en) | 2003-03-20 |
| EP2343077A1 (en) | 2011-07-13 |
| HUP0401693A2 (hu) | 2004-12-28 |
| CN1547477B (zh) | 2010-12-22 |
| SK1602004A3 (en) | 2004-08-03 |
| PT2343077E (pt) | 2013-08-29 |
| CA2457719A1 (en) | 2003-03-20 |
| KR20040048404A (ko) | 2004-06-09 |
| DK1427427T3 (da) | 2011-09-19 |
| SK288335B6 (sk) | 2016-02-02 |
| KR100855331B1 (ko) | 2008-09-04 |
| JP2005506326A (ja) | 2005-03-03 |
| CY1114544T1 (el) | 2016-10-05 |
| HU230385B1 (hu) | 2016-03-29 |
| AU2001292231B2 (en) | 2008-06-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ307433B6 (cs) | Deriváty částečně desulfátovaných glykosaminoglykanů jako inhibitory heparanázy mající antiangiogenní účinky a zabraňující antikoagulačnímu působení | |
| Caputo et al. | Design, synthesis, and biomedical applications of synthetic sulphated polysaccharides | |
| US8067555B2 (en) | Derivatives of partially desulphated glycosaminoglycans as heparanase inhibitors, endowed with antiangiogenic activity and devoid of anticoagulating effect | |
| Casu et al. | Non-anticoagulant heparins and inhibition of cancer | |
| Toida et al. | Structure and bioactivity of sulfated polysaccharides | |
| AU2001292231A1 (en) | Derivatives of partially desulphated glycogaminoglycans as heparanase inhibitors, endowed with antiangiogenic activity and devoid of anticoagulating effect | |
| EP2025687A1 (en) | Process for the preparation of heparanase-inhibiting sulfated hyaluronates and products obtained thereby | |
| JP6132302B2 (ja) | 抗血管新生活性を有し、抗凝血効果を有さない、ヘパラナーゼ阻害剤としての部分的に脱硫酸化されたグリコサミノグリカンの誘導体 | |
| ITMI970678A1 (it) | Glicosaminoglicani aventi elevata attivita' antitrombotica | |
| HK1254817B (en) | Derivatives of n-desulfated glucosaminoglycans and use as drugs | |
| Sampaio et al. | Heparins and heparan sulfates. Structure, distribution and protein interactions | |
| Wijnhoven et al. | Anti-proteinuric effects of glycosaminoglycan-based drugs | |
| KR20160106559A (ko) | 카르복실화된(carboxylated) 글루코스아미노글리칸 유도체 및 약물로서의 용도 | |
| US20080139503A1 (en) | Derivatives of partially desulphated glycosaminoglycans as heparanase inhibitors, endowed with antiangiogenic activity and devoid of anticoagulating effect | |
| AU2008202261B2 (en) | Derivatives of partially desulphated glycosaminoglycans as heparanase inhibitors, endowed with antiangiogenic activity and devoid of anticoagulating effect | |
| JP2016014148A (ja) | 抗血管新生活性を有し、抗凝血効果を有さない、ヘパラナーゼ阻害剤としての部分的に脱硫酸化されたグリコサミノグリカンの誘導体 | |
| PL212357B1 (pl) | Zmodyfikowana heparyna, jej zastosowanie i zawierająca ją kompozycja farmaceutyczna | |
| HK1069537B (en) | Derivatives of partially desulphated glycosaminoglycans as heparanase inhibitors, endowed with antiangiogenic activity and devoid of anticoagulating effect | |
| Garg et al. | Heparin as a potential therapeutic agent to reverse vascular remodeling | |
| Denton | Charing Cross Hospital Medical School |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20010912 |