CZ303045B6 - Deriváty dolastatinu 15 - Google Patents

Abstract

Peptidové slouceniny obecného vzorce A-B-D-E-F-(G).sub.r.n. -(K).sub.s.n. -L, kde substituenty a promenné mají význam uvedený v popise, jsou inhibitory rustu bunek. Proto nacházejí použití pro výrobu léciva pro lécení rakoviny u savcu, úcelne pokud savcem je clovek.

Description

Deriváty dolastatinu 15

Oblast techniky

Vynález se týká derivátů dolastatinu 15, popisuje se jejich výroba a využití.

Dosavadní stav techniky

Velký počet peptidů s krátkým řetězcem s výraznou aktivitou jako inhibitory růstu buněk byl izolován z mořského živočicha, který žije v Indickém oceánu. Dolabella auricularia (Bai et al., Biochem. Farmacology, 40: 1859-1864 (1990); Beckwith et al., J. Nati. Cancer Inst., 85: 483488 (1993) reference citové v těchto publikacích). Patří mezi ně dolastatiny 1—10 (Patent US 4 816 444, udělený autorům Pettit et al.) a dolastatin 15 (EP-398558). Například dolastatin 15, výrazně inhibuje růst buněk lymfocytové leukémie (PS systém) buněčné linie P388 sbírky v National Cancer Institute, což je dobrá předpověď účinnosti proti různým typům lidských maligních rakovin.

Mimořádně malá množství různých dolastatinových peptidů v organismu Dolabella auricularia (problémy při čištění množství dostatečných pro posouzení účinnosti použitelnosti, vedly ke snaze o syntézu těchto sloučenin (Roux et al., Tetrahedron 50: 5345-5360 (1994); Shioiri et al., Tetrahedron 49: 1913-24 (1993); Patino et al., Tetrahedron 48: 4115-4122 (1992) a reference citové v těchto publikacích). Nicméně syntetický dolastatin 15 má nevýhodné vlastnosti, mezi které patří špatná rozpustnost ve vodních systémech a potřeba drahých výchozích látek pro jejich syntézy. Tylo problémy vedly zase k syntéze a testování strukturně modifikovaných derivátů dolastatinu 15 [srovn. Biorg. Med. Chem. Lett. 4: 1947 - 1950 (1994); WO 93/03054; JP-A06234790; WO 93/23424].

Nicméně existuje potřeba syntetických sloučenin s biologickou aktivitou dolastatinu 15, které mají vhodnou rozpustnost ve vodě a dají se efektivně a ekonomicky vyrábět.

Podstata vynálezu

Předmětem tohoto vynálezu je sloučenina obecného vzorce

A B-D-E-F-(G)_r-(K)_s-L, kde

A je derivát prolinu obecného vzorce II_a, derivát α-aminokyseliny obecného vzorce IV_a, V_a, VI_a, VII_a nebo VIII_a nebo derivát 2-azabicyklo[2.2.1]heptan-3-karboxylové kyseliny obecného vzorce IX_a nebo derivát α-aminokyseliny obecného vzorce X_a

ου.

- 1 CZ 303045 B6

<ιν₃),

(Vlij.

II o

(vmj.

(IXa).

I

Ra kde 3-karbonylová část je v endo nebo exo poloze,

kde n_a má hodnotu 0 až 3;

R_a je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný lineární, větvený nebo cyklický i» Ci-C-r-alkyl;

R'_a je vodík, C|-C₃-alkyl, fenyl nebo substituovaný fenyl; kde fenylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu, C|-C₄alkýlových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových nebo nitroskupin; nebo R_a a R'_a společně tvoří propy lenový můstek; a

R²a, R³a, R⁴a a R⁵a jsou každý nezávisle vodík, methyl, ethyl nebo propyl;

R⁷a je vodík, methyl, ethyl nebo propyl;

X_a je hydroxy, methoxy, ethoxy nebo fluor, a Z_a je jednoduchá vazba nebo dvojná vazba,

B je valylový, isoleucylový, allo-isoleucylový, norvalylový, 2-terc-butylglycylový nebo 225 ethylglycylový zbytek; nebo zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce ll_b,

OW.

kde

R'_b je vodík, a R²b je methyl, ethyl, propyl, lineární nebo větvený butyl, cyklopropyl, alkoxyalkyl, kde alkoxy je methoxy nebo ethoxy a alkyl je methyl, ethyl nebo propyl; nebo l-methylvinyl; nebo R‘_b a R²b společně tvoří isopropylidenovou skupinu;

D je N-alkylvalylový, N-alkyl-2-ethylgíycylový,

-3CZ 303045 B6

N-a 1 kyl-2-terc-buty Iglycy lový, N-alkylnorleucylový, N-alkylisoleucylový, N-alkyl-allo-isoleucylový nebo N-alkylnorvalylový zbytek; kde N-alkylová skupina je methylová nebo ethylová skupina; nebo zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce II_d,

l II

R_d O kde

Rj je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný C|-Cr-alkyl; R'_d je vodík; a R²d je methyl, ethyl, propyl, lineární nebo větvený butyl, cyklopropyl, methoxymethyl, 1-methoxyethyl nebo l-methylvinyl; nebo R‘_d a R²d společně tvoří isopropylidenovou skupinu; nebo is zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce UI_d,

(IIW.

kde n_d je 1 nebo 2; R³d je vodík, C|—C₃—alkyI nebo fluorem substituovaný C]--C₃-alkyl; a X_d je vodík; nebo n_dje 1 a X_d je fluor, hydroxy, methoxy nebo ethoxy;

E je prolylový, thiazolidinyl-4-karbonylový, homoprolylový, nebo hydroxyprolylový zbytek; 2? nebo zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce II_C,

II o

-4CZ 303045 B6 kde n_e je 0, 1 nebo 2, R'_c je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný C|-C₃-alkyl; R_e a R³e jsou každý nezávisle vodík nebo methyl, ethyl nebo propyl; R⁴e je vodík, hydroxy, methoxy, ethoxy nebo fluor; a R^se je vodík nebo fluor; nebo n_e je 1 a R³e a R⁴e společně tvoří dvojnou vazbu; nebo n_e je 1 a R⁴e a R⁵C tvoří společně atom kyslíku vázaný dvojnou vazbou; nebo n_e je l nebo 2 a R'_e a R²C společně tvoří dvojnou vazbu; nebo zbytek aminocyklopentankarboxylové kyseliny obecného vzorce lll_e,

(lil.).

kde

R^. je methyl nebo ethyl a R'_e je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný C[C₃-alkyl;

F je prolylový, thiazolidinyl-4-karbonylový, homoprolylový nebo hydroxyprolylový zbytek; nebo zbytek a-aminokyseliny obecného vzorce ll_f,

(Ilf).

kde n_f je 0, 1 nebo 2, R'_f je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný C, C_?- alkyl; R², jsou každý nezávisle vodík nebo methyl; R⁴f je vodík, hydroxy, methoxy, ethoxy nebo fluor; R⁵f je vodík nebo fluor; nebo n_f je 1 a R³f a R⁴f společně tvoří dvojnou vazbu; nebo nf j e 1 a R⁴f a

R^Sf tvoří společně atom kyslíku vázaný dvojnou vazbou; nebo nf je 1 nebo 2 a R'f a R²f společně tvoří dvojnou vazbu; nebo zbytek 2- nebo 3-aminocyklopentankarboxylové kyseliny obecného vzorce lllf,

-5CZ 303045 B6

(IIW.

kde

Rf je methyl, ethyl nebo propyl a R*r je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný Ci-Ci-alkyl; nebo N-alkylglycylový nebo N-alkylalanylový zbytek; přičemž alkylovou skupinou vázanou na atom dusíku je methyl nebo ethyl,

G je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce II_e,

(V kde

R'_gje vodík, methyl, ethyl nebo n-propyl a R²tí je vodík, ethyl, isopropyl, terc-butyl, isobutyl, 2methylpropyl, cyklohexylmethyl, benzyl, thiazolyl-2-methyl, pyridyl-2-methyI, n-butyl, 2,2dimethylpropyl, naftylmethyl nebo n-propyl, fenyl nebo substituovaný fenyl, přičemž fenylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu, C|-C₄-alkýlových skupin, methoxy, ethoxy, nitro nebo trifluormethylových skupin, nebo dioxomethylenovou skupinu; nebo R'_g a R²g, společně α-uhlíkovým atomem, tvoří C₅-C_ň kruh nebo C5 kruh s nakondenzovaným s benzenovým jádrem;

Kje α-aminokyselina obecného vzorce Il_k,

(Ilk).

kde

R‘k je vodík, methyl, ethyl nebo n-propyl; a R\ je vodík, ethyl, isopropyl, terc-butyl, isobutyl, 2-methylpropyl, cyklohexylmethyl, benzyl, thiazolyl-2-methyl, pyridyl-2-methyl, n-butyl, 2,2dimethylpropyl, naftylmethyl nebo n-propyl, fenyl nebo substituovaný fenyl, přičemž fenylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu, C,X?₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, nitro nebo trifluormethylových skupin, nebo dioxomethy lenovou skupinu; nebo R‘_k a R společné s α-uhlíkovým atomem, tvoří cyklopentanový kruh nebo cyklopentanový kruh s nakondenzovaným benzenovým jádrem;

r a sjsou nezávisle 0 nebo 1; a

-6CZ 303045 B6

L je β-hydroxy laminová skupina obecného vzorce IIIj, kde •NR⁹ •ch₂ / CH

OH

V, (Mi),

R⁹, je atom vodíku nebo C|~C₆~alkyl, arylová skupina nebo substituovaná arylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C|-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifl uormethy lových skupin, nitroskupín, dioxymethy lenovou io skupinu; a

R'°, je atom vodíku, methylová skupina nebo fenylová skupina, nebo

L je aminoskupina obecného vzorce IV_b

R²i

N-CH ^{H X}R\ (IV,).

kde R², a R⁴| jsou každý nezávisle vodík nebo C_t-C^-alkyl; nebo R²b R⁴| a α-uhlík společně tvoří C₅-C₆-uhlíkový kruh, nebo L je hydrazidoskupína obecného vzorce V_b

N—

M).

R¹¹,

R¹², kde

R'², je atom vodíku, lineární nebo větvená C,-C_x-alkýlová skupina, ÍVCg- cykloalkýlová skupina, C-·.—Cg—cykloalkyl—C |—C₄—alkylová skupina, arylová skupina, aryl-C|-C₄--alkvlová skupina nebo substituovaná arylová nebo aryl-Ci~C₄-alkylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více methoxy, ethoxy, trifl uormethy lových skupin, dioxymethylenových skupin, nitroskupín; nebo heteroaryl-C j-C₄-alkylová skupina, kde heteroarylová skupina je odvozená od imidazolu, pyrrolu, thiofenu, furanu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, oxadiazolu, thiadiazolu, isoxazolu, isothiazolu, pyrazinu, pyridazinu, pyrimidinu, pyridinu, benzofuranu, benzothiofenu, benzimidazolu, benzoth iazo lu, benzopyranu, indolu, isoindolu, indazolu nebo chinolinu a heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C|-C₆-alkylových, hydroxy nebo fenylových skupin; a

R^lli je vodíkový atom; nebo rje l, sje 1 nebo obarasjsou 1, a R¹¹] je lineární nebo větvenáC, Cs-alkylová skupina, C_:-Cg-cykloalkylová skupina, C₃-C₈-cyk]oalkyl-C]-C₄-alky1ová skupina, aryl-Ci- C'4-alkýlová skupina, arylová skupina nebo substituovaná aryl-Ci-C₄-alkylová nebo arylová skupina; kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C_t-C₄-alky lových skupin, methoxy, ethoxy, trifl uormethy lových skupin, nitroskupinu

-7CZ 303045 Β6 nebo dioxymethy lenovou skupinu; heteroarylová skupina, heteroaryl-Ci C₄ alkýlová skupina nebo substituovaná heteroarylová nebo heteroaryf-C|-C₄-alkýlová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu; indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylová substituenty zahrnují jednu nebo více C]-C₆-alky lových, hydroxy nebo feny lových skupin; nebo

Ri a R¹²] společně tvoří propylenový můstek nebo butylenový můstek a dále

L představuje aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu obecného vzorce II i

ow.

kde

R^Jτ je atom vodíku, lineární nebo větvená, nasycená nebo nenasycená Ci-Cjg-alkoxyskupina, substituovaná nebo nesubstituovaná aryloxyskupina, substituovaná nebo nesubstituovaná arylC]-C₆-alkoxyskupina, a substituovaná nebo nesubstituovaný aryloxy-Ci-Có-alkoxyskupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C!-C₄alkylových, methoxy, ethoxy, trifl uormethy lových, dioxymethylenových skupin nebo nitroskupin; nebo heteroaryl-C_t-C₆-alkoxyskupina; a

R²i je atom vodíku, lineární nebo větvená Ci-C_]8~alkylová skupina, lineární nebo větvená C_tC|g-alkenylová skupina, Cj-Cio-cykloalkylová skupina, arylová skupina nebo substituovaná arylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C|=C₄-alkylových, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, kyano- nebo nitroskupinu, C|-Cr~alkoxykarbonylovou skupinu, dioxymethy lenovou skupinu, C]-C7-alkylsulfonylovou skupinu, aminoskupinu nebo Ci-C₆-dialkylaminoskupinu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4— nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadíazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C]-C₆-aI kýlových, hydroxy lových nebo fenyl ových skupin, dále

L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu svrchu uvedeného obecného vzorce IIi, ve kterém

R²i jejednovazný radikál obecného vzorce IV_r,

4CH₂)_bl-Z, dV_r) kde b| je 2, 3 nebo 4 a Z| je formy lová, aminokarbonylová, hydrazinokarbonylová, cyklická, acetalová, cyklická thioacetalová, acyklická acetalová nebo acyklická thioacetalová skupina, dále

L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu svrchu uvedeného obecného vzorce lf, ve kterém

R²t je skupina obecného vzorce II_r,

- 8 CZ 303045 B6

(CHáa—R⁴, l (Ur) kde a! je 0, 1, 2, 3, 4 nebo 5; R³) je methyl, ethyl, lineární propyl nebo isopropyl; R⁴i je nasycený nebo částečně nenasycený karbocyklický systém zahrnující od 3 do 10 atomů uhlíku, arylová skupina nebo substituovaná arylová skupina, kde ary lově substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více Ci-Cj-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trífluorio methylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4-nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindotu, indazolu, chinolinu, pyrazidinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové subis stituenty zahrnují jednu nebo více Ci-Có-alkylových, hydroxy nebo fenylových skupin, dále

L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu svrchu uvedeného obecného vzorce II,, ve kterém

R²i je skupina obecného vzorce III_r,

-(CHílrWrR⁵, (UI_r) kde

Wi je N(R\) skupina, atom kyslíku nebo atom síry,

R\ a R⁶] jsou každý, nezávisle atom vodíku nebo C|-C₄-alkylová, C₃-Cτ-cykloalkylová, arylová, aryl methylová, substituovaná arylová nebo substituovaná arylmethylová skupina, kde arylové io substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více Cj-Cj-alkvIovýeh skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenskupinu;

nebo R⁶| je C₁-C_l8-alkanoylová skupina nebo benzoylová skupina, dále

L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu svrchu uvedeného obecného 35 vzorce II,, ve kterém

R²] je skupina obecného vzorce V_r,

N R| _(Vr) kde b| je 2, 3 nebo 4; a

R⁷i je polyglykolová skupina obecného vzorce -O-ÁCkLCFLOjdi-CHa, kde d, je mezi 2 a 4 nebo mezi 40 a 90; nebo dále

-9CZ 303045 B6

L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu svrchu uvedeného obecného vzorce fb, ve kterém

R²| je skupina obecného vzorce VI_r,

a R⁸, je atom vodíku nebo C|-C₄ alkanoylová, Cj-C₄-alkylová, benzoylová nebo benzylová skulo pina; a dále ve svrchu uvedené sloučenině obecného vzorce A-BD-E-F-(G)_r{K)_sL, kde A je derivát aaminokyseliny obecného vzorce IV_a, V_a, Vl_a, VI1₃ nebo VIII_a, jak je definován svrchu a B, D, E, F, G, K, r a s mají svrchu definovaný význam,

L je také alkoxy-, thioalkoxy-, aminoxy- nebo oximatoskupina, které jsou vybrány ze souboru, kde

- L je jednovazný radikál obecného vzorce - W-R¹³], kde

W je kyslík nebo síra;

Rⁿi je C₃-Cio-cykloalkyl, C₂-C_]6-alkenylmethyl s lineárním nebo větveným řetězcem, Ci-Obálky lová nebo halogenem substituovaná C|-C₁₆-alkýlová skupina nebo

R¹³i je jednovazný radikál obecného vzorce -(CH2)c-R^,4i, e je 1, 2 nebo 3 a R¹⁴| je nasycená nebo částečně nenasycená C3-Gio-karbocyklická skupina; nebo

R^,3i je jednovazný radikál obecného vzorce -[CH₂42H=C(CH₃)43H2]í-H, a f je 1, 2, 3 nebo 4;

nebo

R¹³, je jednovazný radikál obecného vzorce -[CH2-CH₂-O]_q4^H₃, a q je 1, 2, 3, 4 nebo 5; nebo

R¹³i je jednovazný radikál obecného vzorce -(CH₂)_h-X, kde h je 0, 1,2 nebo 3, Xje arylová sku35 pina nebo substituovaná arylová skupina, kde arylová substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C|-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluoromethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; nebo X znamená heteroarylovou skupinu nebo substituovanou heteroarylovou skupinu odvozenou od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thtazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C,-C₆-alkylových, hydroxy nebo fenylových skupin, aryl-C|-C₄ alkylovou skupinu nebo heteroaryl4?i-C₄-aIkylovou skupinu; nebo

-10CZ 303045 B6

R¹³i jejednovazný radikál obecného vzorce -(CH2)b-W]-R^Si, Wi je atom kyslíku, atom síry nebo skupina NR⁶], b je 2, 3 nebo 4; R\ je nasycený nebo částečně nenasycený karbocyklický systém, který obsahuje od 3 do 10 atomů uhlíku, arylová nebo substituovaná arylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C[-C₄~alky lových skupin, methoxy, ethoxy, tri fluormethy lových, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triažalu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo io pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více Cj-<?_ó-alky lových, hydroxy nebo fenylových skupin; R⁶, je atom vodíku nebo C]-C₄-alkýlová, C₃-Cr-cykloalkyiová, C|Cis-alkanoylová, benzoylová, arylová nebo arylmethylová skupina nebo substituovaná arylová nebo arylmethylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C'i C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu;

- L je ami noxy skupina obecného vzorce -O-N(R^I5|)(R¹⁶|), kde R¹⁵j aR¹⁶] jsou každý, nezávisle atom vodíku, lineární nebo větvená Ci-Cg-alkyiová skupina, halogenem substituovaná lineární nebo větvená C^-Cg-alkylová skupina, C₃-C8-cykloalkylová skupina, C₃-Cít-cykloalkyl-Ci-C₄2o alkylová skupina, arylová skupina, arykC|-C₄—alkylová skupina nebo substituovaná arylová nebo aryl-C|-C₄-alkylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C|-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethy lových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina, heteroaryl-C j-C₄alkylová skupina nebo substituovaná heteroarylová nebo heteroaryl-C]-C₄-alkylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C]-C₆-alkýlových, hydroxy nebo fenylových skupin; nebo R¹⁵) a R¹⁶] společně s atomem dusíku tvoří heterocyklickou kruhovou strukturu zahrnující 5, 6 nebo 7 atomů;

- L je oximatoskupína obecného vzorce -O-N=C(R^I5])(R¹⁶i), kde R¹⁵] a R¹⁶| jsou každý, nezávisle atom vodíku, lineární nebo větvená C]-C₈-alkylová skupina, halogenem substituovaná lineární nebo větvená Ci-Cg-alkylová skupina, C₃-Cř-cykloalkylová skupina, C₃-Cr-cykloalkyl35 C|-C₄-alkylová skupina, arylová skupina, aryI-Ci-C₄-alkýlová skupina nebo substituovaná arylová nebo aryl-C|-C₄-alkylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C|-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C|-C₆-alkylových, hydroxy nebo fenylových skupin; nebo R^I5i a R¹⁶i tvoří společně s atomem uhlíku cyklický systém se 3 až 7 atomy uhlíku, přičemž tento cyklický systém může být dále nakondenzován k aromatickému cyklickému systému, přičemž ve svrchu uvedených definicích skupiny L „aryl“ nebo „arylová skupina“ znamená vždy fenyl nebo nafty 1 či fenylovou nebo naftylovou skupinu;

s podmínkou, že L může představovat pouze aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu obecného vzorce IV] pouze v případě, že alespoň jeden z obecných symbolů r a s je roven 1. Předmětem tohoto vynálezu jsou také výhodná provedení svrchu uvedených sloučenin.

Předmětem tohoto vynálezu je rovněž použití svrchu uvedených sloučenin pro výrobu léčiva proti rakovině u savců. Účelně podle tohoto vynálezu je savcem člověk.

Dále je uveden podrobnější popis předmětného vynálezu a jeho jednotlivých aspektů, stejně jako srovnávací údaje a údaje, které mají ukázat obecně Šíři nalezeného řešení, na kterém je založen předmětný patent. Shodně jsou koncipovány také příklady provedení.

Svrchu popsané sloučeniny patří mezi inhibitory růstu buněk, kterými jsou peptidy vzorce I A-B-D-E-F4G)_r4K)_s-L (I), a jejich soli s kyselinami, kde A, B, D, E, F, G a Kjsou α-aminokyselinové zbytky, sa rjsou každý nezávisle 0 nebo 1 a L je jednovazný radikál, jako je například aminoskupina, N-substituovaná aminoskupina, β-hydroxylaminoskupina, hydrazidová skupina, alkoxyskupina, thioalkoxyskupina, aminoxyskupina nebo oximatová skupina.

Dalším aspektem vynálezu je farmaceutická kompozice, obsahující sloučeninu vzorce I a farmaceuticky přijatelný nosič.

Vynález umožňuje způsob léčení rakoviny u savců, jako je člověk, přičemž tento způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny vzorce I tomuto savci ve farmaceuticky přijatelné kompozici.

Tento vynález se tedy týká peptidů, které mají antineoplastickou aktivitu. Také poskytuje farmaceutické kompozice obsahující tyto sloučeniny a umožňuje způsoby léčení rakoviny u savců, včetně lidí, podáváním této kompozice savcům.

Dolastatin 15, peptid isolovaný z mořského živočicha Dolabella auricularia, je potenciální inhibitor růstu buněk. Tato sloučenina, bohužel, je přítomna v organismu uvedeného živočicha v nepatrných množstvích a je tudíž obtížně izolovatelná. Dolastatin 15 je také drahý pokud se syntetizuje a jeho nevýhodou je špatná rozpustnost ve vodě. Nicméně, jak je zde ukázáno, Dolastatin 15 může sloužit jako výchozí bod pro vývoj sloučenin, které nebudou mít tyto nevýhody, a při tom si podrží antineoplastickou aktivitu nebo budou dokonce vykazovat větší antineoplastickou aktivitu než přírodní produkt. Přihlašovatelé objevili, že určité změny ve struktuře dolastatinu 15 poskytují sloučeniny s překvapivě zlepšeným terapeutickým potenciálem pro léčení neoplastických chorob, ve srovnání s dolastatinem 10 a dolastatinem 15. Dále bylo zjištěno, že sloučeniny podle vynálezu mohou být syntetizovány, jak je dále popsáno podrobně, obvyklými metodami.

Pro účely vynálezu, termín Jednovazný radikál“ znamená elektricky neutrální molekulární fragment, schopný tvořit jednu kovalentní vazbu s druhým neutrálním molekulárním fragmentem. Jednovazné radikály jsou, mimo jiné, vodíkový atom, alkylové skupiny, jako je methyl, ethyl a propyl, halogenové atomy, jako je fluor, chlor a brom, arylové skupiny, jako je fenyl a naftyl a alkoxylové skupiny, jako je methoxylová a ethoxylová skupina. Dva jednovazné radikály na sousedních, sigma-vázaných atomech, mohou také spolu tvořit π-vazbu mezi sousedními atomy. Dva jednovazné radikály mohou také být spolu spojeny, například póly methy lenovým členem, a tím tvořit cyklickou strukturu. Například člen -N(R)R', kde R a R' jsou každý jednovazný radikál, může spolu s dusíkovým atomem tvořit heterocyklický kruh. Dále, dva jednovazné radikály vázané ke stejnému atomu mohou spolu tvořit dvoj vazný radikál jako je kyslíkový atom nebo alkylidenová skupina, například, propylidenová skupina.

Pro účely tohoto vynálezu, termín „lineární alkyl“ znamená alkylovou skupinu s nerozvětveným či přímým řetězcem, například -CH2CH7CH3 = n-propyl (zkratka podle „normal-propyl“) Sloučeniny podle vynálezu mohou být vyjádřeny vzorcem I,

- 12 CZ 303045 B6

A-B-D-E-F-(G)r-{ K)s-L (I) kde A, B, D, E, F,Ga K jsou aaminokyselinové zbytky, s a r jsou každý nezávisle 0 nebo 1; a 5 L je jednovazný radikál jako je aminoskupina, N-substituovaná aminoskupina, β-hydroxy lamino skupina, hydrazidová skupina, alkoxyskupina, thioalkoxyskupina, amin oxy skup i na nebo oximatová skupina.

Peptidy vzorce I se obecně skládají z Laminokyselin, ale mohou také obsahovat jednu nebo více io D-aminokyselin. V následujících specifikacích, pokud se odkazuje na konkrétní aminokyseliny, jde o oba enantiomery, pokud není výslovně uvedeno jinak. Sloučeniny mohou také být přítomny jako soli s fyziologicky kompatibilními kyselinami, včetně kyseliny chlorovodíkové, kyseliny citrónové, kyseliny vinné, kyseliny mléčné, kyseliny fosforečné, kyseliny methan sulfonové, kyseliny octové, kyseliny mravenčí, kyseliny maleinové, kyseliny fumarové, kyseliny jablečné, i5 kyseliny jantarové, kyseliny malonové, kyseliny sírové, kyseliny L-glutamové, kyseliny L-asparagové (jinde též kyselina L-aspartová), kyseliny pyrohroznové, kyseliny slizové, kyseliny benzoové, kyseliny glukuronové, kyseliny šťavelové, kyseliny askorbové a acetylglycinu.

Následuje popis vynálezu, včetně podrobného popisu jednotlivých složek a způsobů použití chrá20 něných sloučenin. Také jsou obsaženy srovnávací a další údaje, jak bylo vysvětleno výše.

Význam A

V jednom provedení A znamená prolinový derivát vzorce II_a,

kde n_a je celé číslo, výhodně 0, 1, 2 nebo 3. R_a jejednovazný radikál, jako je vodíkový atom nebo substituovaná nebo fluorem substituovaná alkylová skupina, například lineární, rozvětvená nebo cyklická Cp-CT-alkýlová skupina, která je popřípadě substituovaná 1 až asi 3 fluorovými atomy; mezi vhodné příklady patří methyl, ethyl, isopropyl, 2-fluorethyl, 2,2,2-trifluorethyl, 1-methyi2-fluorethyl, l-fluormethyl-2-fluorethyl nebo cyklopropyl; přičemž methyl, ethyl nebo isopropyl jsou výhodné.

V tomto provedení, R*_a je jednovazný radikál, jako je vodíkový atom, alkylová skupina, jako je methyl, ethyl nebo propylová skupina, nebo fenylová skupina. Fenylová skupina může být substituovaná; vhodné substituenty jsou, mimo jiné, jeden nebo více halogenových atomů, výhodně s fluor, chlor a brom, Ci-C₄--alkýlové skupiny, methoxy, ethoxy, trifluormethyl nebo nitro skupiny. R_a a R^la mohou také společně tvořit propylenový můstek.

R²a, R³a> R⁴a^a R⁵a jsou každý nezávisle, jednovazný radikál, jako je vodíkový atom nebo alkyl, výhodně, methylová skupina.

V dalším provedení znamená A substituovaný glycinový derivát vzorce III_a,

-13CZ 303045 B6

kde R_a má význam uvedený pro R_a ve vzorci II_a a, R'_a je jednovazný radikál, například vodíkový atom nebo Ci-C₆-alkýlová skupina, výhodně methyl, ethyl nebo propylová skupina.

V tomto provedení, R⁶a je jednovazný radikál, jako je alkyl, substituovaný alkyl, alkenyl, fenyl nebo substituovaný fenyl. Mezi vhodné příklady patří methoxymethyl, 1-methoxyethyl, i.Ι ό i methy Ι-hydroxy methyl, 1-trifluormethyl ethyl, l-trifluormethyl-2,2,2-trifluorethyl, vinyl, a 1methylvinyl. Fenylové substituenty mohou obsahovat jeden nebo více halogenových atomů, výhodně fluorových, chlórových nebo bromových atomů a alkyl, methoxy, ethoxy, trifluormethyl, a nitro skupiny.

Pokud R‘_a je alkylová skupina, R^óa může také být C|-C₆~alkyl, cykloalkyl, nesubstituovaná benzylová nebo substituovaná benzylová skupina. Vhodné benzylové substituenty jsou, mimo jiné, jeden nebo více halogenových atomů, jako je fluor, chlór nebo brom, C|~C₄-alkylové skupiny, a methoxy, ethoxy, trifluormethyl a nitro skupiny.

R⁷a je jednovazný radikál, výhodně methyl, ethyl nebo isopropylová skupina. V jiném provedení, A je α-aminokyselinový derivát vzorce IV₃, (CH2)_m

II

N

kde m_a je celé číslo, výhodně 1 nebo 2, a R_a a R⁷a mají významy, uvedené pro tyto substituenty ve vzorci IIl_a.

V jiném provedení, A je α-aminokyselinový derivát vzorce V_a,

N

C (V_a)

II kde R_a a R⁷a mají významy uvedené pro R_a a R⁷a ve vzorci 11 l_a.

- 14CZ 303045 B6

V dalším provedení, A je substituovaný prolinový derivát vzorce VI_a;

s kde R_a a R'_a mají významy uvedené pro R_a a R^la ve vzorci II_a, a X_a je jednovazný radikál, výhod ně hydroxy 1 či alkoxy radí kál, například, methoxy nebo ethoxy, skupina nebo fluorový atom.

V jiném provedení, A je thiaprolylový derivát vzorce Vila,

kde R_a, R'_a, R²a, R³a, R⁴a a R⁵a mají významy uvedené pro stejné substituenty ve vzorci II_a.

V jiném provedení, je A 1,3—dihydroisoíndolový derivát vzorce VIII_a

kde R_a má význam uvedený pro R_a pro vzorec II_a.

V jiném provedení, A je derivát 2-azabicyklo[2,2, l]heptan-3-karboxylové kyseliny vzorce IX_a,

- 15 CZ 303045 B6 kde Za je jednoduchá nebo dvojná vazba a R_a má význam uvedený pro vzorec II_a. 3-Karbony lový substituent může mít bud’ exo nebo endo orientaci.

V jiném provedení, Aje aaminokvselinový derivát vzorce X₃,

kde n_a má význam, uvedený pro n_a pro vzorec ll_a, a R⁷a a R_a mají ty významy, které jsou uvedeny pro R⁷a a R_a pro vzorec 11 I_a.

Význam B

B je valyl, isoleucyl, allo-isoleucyl, norvalyl, 2-terc-butylglycyl nebo 2-ethylglycylový zbytek. B může také být α-aminokyselinový zbytek vzorce II_b,

(lib)

II o

ve kterém R'_b a R²b jsou každý jednovazný radikál. R'_b je, výhodně, vodíkový atom a R²b je například alkyl, alkoxyalkyl nebo alkenyI. Ve výhodných provedeních R²b znamená cyklopropylovou skupinu, lineární nebo rozvětvený butylovou, výhodně terčiámí-butylovou skupinu, methoxymethylovou skupinu, 1-methoxyethy lovou skupinu nebo 1-methyl viny lovou skupinu. Kromě toho R'_b a R²b mohou společně tvořit isopropylidenovou skupinu.

Výhodně D

D je N-alkylvalyl, N-a 1 ky 1-2-ethylglycyl, N-alkyl-2-terc-butyl glycyl, N-alkyl-norleucyl, N-alkylisoleucyl, N-alkyl-allo-isoleucyl nebo N-alkyl-norvalyl, přičemž uvedená N-alkylová skupina je výhodně methylová skupina nebo ethylová skupina.

V jiném provedení, D je α-aminokyselinový zbytek vzorce Il_d,

kde Rd má význam uvedený pro R_a ve vzorci III_a, R'_d je jednovazný radikál, výhodně vodíkový atom, a R²d je jednovazný radikál, například alkyl, alkoxyalkyl nebo alkeny lová skupina. Ve výhodných provedeních je R²d cyklopropylová skupina, lineární nebo rozvětvený butyl, výhodně

- 16CZ 303045 B6 terciární butylová skupina, methoxy methylová skupina, 1-methoxyethylová skupina nebo 1methylvinylová skupina. Kromě toho, R^ld a R²a společně může tvořit isopropylidenovou skupinu.

Alternativně, D může být prolinový derivát vzorce III_d,

O (Hld) kde n_d je celé číslo, například, 1 nebo 2, a R'\ má význam uvedený pro R*_a ve vzorci IIl_a. X_d je jednovazný radikál, výhodně vodíkový atom, a, v případě kde n_d je rovno I, může také být hydroio xy nebo alkoxy, například, methoxy nebo ethoxy skupina nebo atom fluoru.

Význam E

E je prolyl, thiazolidinyl--4-karbonyl, homoprolyl nebo hydroxyprolylový zbytek nebo zbytek is cyklické a—aminokarboxylové kyseliny vzorce Ile,

kde n_c je celé číslo, výhodně 0, 1 nebo 2. R*_e má význam uvedený pro R’_a ve vzorci IIl_a, R²e a R³e 20 jsou každý jednovazný radikál a mohou být nezávisle vodíkový atom nebo alkyl, výhodně methylová skupina. R⁴c je jednovazný radikál, výhodně vodíkový atom, hydroxyskupina, alkoxyskupina, například, methoxy nebo ethoxy skupina nebo fluorový atom. R⁵e je jednovazný radikál, výhodně vodíkový atom nebo fluorový atom. V případě, kdy n_e je 1, R\ a R⁴e mohou společně tvořit dvojnou vazbu nebo R⁴C a R⁵e může společně být dvojnou vazbou připojený kyslík radikál.

V případě, že n_e má hodnotu 1 nebo 2, R‘_e a R²e mohou společně tvořit dvojnou vazbu.

V jiném provedení, E je zbytek 2- nebo 3-aminocyklopentankarboxylové kyseliny vzorce II I_e,

- 17CZ 303045 B6 kde R_e je aikylová skupina, jako je methyl nebo ethyl, a R'_e má význam uvedený pro R'_a ve vzorci III_a.

Význam F

F je prolyl, thiazolidinyl-4- karbonyl, homoprolyl nebo hydroxyprolylový zbytek. F může také být cyklický α-aminokyselinový zbytek vzorce Ilf,

kde n_f je celé číslo, výhodně 0, 1 nebo 2. R'_f má význam uvedený pro R'_a ve vzorci llí_a. R'_f a R\ jsou každý jednovazný radikál, a mohou být, nezávisle, vodíkový atom nebo alkyl, výhodně methylová skupina. R⁴f je jednovazný radikál, výhodně vodíkový atom, hydroxy, alkoxy, například methoxy nebo ethoxy, skupina nebo atom fluoru. R^Sf je jednovazný radikál, výhodně vodíkový atom nebo atom fluoru. V případě kde nf má hodnotu 1, R^Jf a R⁴f společně mohou tvořit dvojnou vazbu nebo R⁴f a R⁵f mohou společně znamenat kyslík připojený dvojnou vazbou. V případě, kde nf má hodnoty t nebo 2, R'fa R²f mohou společně tvořit dvojnou vazbu.

2» V jiném provedení, F je zbytek 2- nebo 3-aminocyklopentankarboxylové kyseliny vzorce 11 l_f

kde R_f je jednovazný radikál, jako je methyl nebo ethylová skupina, a R‘_f má význam uvedený 25 pro R*_a ve vzorci III_a.

V jiném provedení, Fje N-alkylglycyl nebo N-alkylalylový zbytek a aikylová skupina je výhodně methylová skupina nebo ethylová skupina.

Význam G

G je α-aminokyselinový zbytek vzorce II_g,

- 18CZ 303045 B6

II

O kde R’_g je vodíkový atom nebo alkylová skupina, například methyl, ethyl nebo n- propyl. R~_g může být například vodíkový atom nebo alkyl, arylalkyl, heteroary laiky I nebo arylová skupina.

Výhodně, R ζ je ethyl, isopropyl, terc-butyl, isobutyl, 2-methyl propyl, cyklohexy lmethy l, benzyl, thiazolyl-2-methyl, pyridyl-2-methyl, n-butyl, 2,2-dimethylpropyl, naftylmethyl nebo npropylová skupina nebo může být substituovaná nebo nesubstituovaná fenylová skupina. Vhodné fenylové substituenty jsou, mimo jiné, jeden nebo více halogenů, výhodně fluorových, chlórových, nebo bromových atomů, C₍-C₄-alkylové skupiny, methoxy, ethoxy, nitro nebo trifluorio methyl skupiny nebo dioxomethylenová skupina. Alternativně, R'_g a R²g mohou společně s atomem uhlíku tvořit cy klopen táno vý nebo cyklohexanový kruh nebo cyklopentanový kruh s nakondenzovaným benzenovým jádrem, příkladem Čehož může být indanylová skupina.

Význam K

Rje α-aminokyselinový zbytek vzorce IIj<,

II

O kde R'_k má význam uvedený pro R'_g ve vzorci II_g, a R²k má význam uvedený pro R²g ve vzorci II_g.

Význam L

V jednom provedení je L aminoskupina nebo substituovaná aminoskupina vzorce II μ z^{Rl _N}v, ^(lll) kde R¹1 je jednovazný radikál jako je vodíkový atom, lineární nebo rozvětvená, nasycená nebo

3o nenasycená C|-C| g-alkoxy skupina, substituovaná nebo nesubstituovaná ary loxy skupina, substituovaná nebo nesubstituovaná aryl-Ci-C₆-alkoxy skupina nebo substituovaná nebo nesubstituovaná aryloxy-Ci-Cfi-alkoxy nebo heteroary 1-C,-C₆ alkoxy skupina. Arylová skupina je výhodně fenyl nebo naftyl. Heteroarylová skupina je 5- nebo 6-členný, kruhový systém, výhodně obsahující dusík, kyslík nebo síru, jako je například heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrolu, 1,2,4nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu. Vhodné arylové substituenty jsou, mimo jiné, jeden nebo více halogenů, výhodně fluor, brom nebo chlor, Ci-C₄-aIkyl skupiny, methoxy, ethoxy nebo trifluormethyl sku40 piny, dioxymethylenová skupina nebo nitro skupiny.

- 19CZ 303045 B6

R²i je jednovazný radikál, jako je vodíkový atom, lineární nebo rozvětvená, nasycená nebo nenasycená C|-C|g-alkylová skupina, C-, -Cio cykloalkýlová skupina, substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, nebo substituovaná nebo nesubstituovaná heteroarylová skupina. Arylová skupina je výhodně fenyl nebo naftylová skupina. Heteroarylová skupina je 5 nebo 6členný, výhodně dusík, kyslík nebo síru obsahující, kruhový systém, jako je například heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu.

Vhodné arylové substituenty jsou, mimo jiné, jeden nebo více halogenů, výhodně fluorových, bromových nebo chlorových atomů, C[-C₄-alkylové skupiny, methoxy, ethoxy nebo trifluormethyl skupiny, dioxymethylenová skupina nebo nitro skupiny.

R²] může, alternativně, být skupina vzorce II_r, _(||)

R³, kde a_t je celé číslo, jako je 0, 1, 2, 3, 4 nebo 5. R³] je jednovazný radikál, výhodně nižší alkylová skupina, jako je methyl, ethyl, propyl nebo isopropylová skupina. R⁴| je jednovazný radikál, kterým může být nasycený nebo částečně nenasycený karbocyklický systém, obsahující od asi 3 do asi 10 uhlíkových atomů, substituovaná nebo nesubstituovaná arylová nebo heteroarylová skupina nesoucí aryl nebo heteroaryi nebo výhodné substituenty, vyjmenované ve významu, uvedeném pro R²| ve vzorci II].

R²i může také být substituent vzorce III_r, <CH,),-Wi-R^s, (III_r), kde W] je atom kyslíku nebo síry nebo skupina N-R⁶|. R⁵| je jednovazný radikál, jako je vodíkový atom, C]-C4-alkyI nebo Cv-C7-eykloalkylová skupina nebo substituovaná nebo nesubstituovaná aryl nebo arylmethylová skupina, s ary lem ajeho výhodné substituenty, které mají význam, uvedený pro R²( ve vzorci II]. R^ót je jednovazný radikál, výhodně vodíkový atom, C1-C4alkylová skupina nebo Cs-Cr-cykloalkýlová skupina, Ci-Cig-alkanoylová skupina, benzoylová skupina nebo substituovaná nebo nesubstituovaná aryl nebo arylmethylová skupina, s arylem a jeho výhodné substituenty, které mají význam, uvedený pro R_2] ve vzorci II_b

R²] může, alternativně, být substituent vzorce lV_r,

4CH₂)br-Z, (IV_r) kde b] je celé číslo; výhodně 2, 3 nebo 4. Z] může být jednovazný radikál jako je formyl, aminokarbonyl nebo hydrazinkarbonylová skupina; nebo cyklická nebo acyklická acetalová nebo thioacetalová skupina.

R²i může také být substituent vzorce V_r,

O

II —(CHa)»—lf R⁷,

Π (Vr)

-20CZ 303045 B6 ve kterém b_t má shora uvedený význam. R⁷| může být jednovazný radikál, jako je polyglykolová skupina vzorce -CHCH2-CH?-O)dr-CÍ-l·, kde d| je celé číslo, výhodně v rozsahu od asi 2 do asi 4 nebo od si 40 do asi 90.

R²i může být dále sacharid vzorce VI_r,

kde R^Si je jednovazný radikál, jako je vodíkový atom, Ci C₄-alkanoví nebo alkylová skupina, benzoylová skupina nebo benzylová skupina.

L může také být β-hydroxytaminoskupina vzorce III|, /

CH \

.OH

R¹⁰i (llh) kde R⁹| je jednovazný radikál jako je vodík atom, C, -C_ó-alkýlová skupina nebo substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, s navázaným arylem a jeho výhodnými substituenty, které mají význam, uvedený pro R². R\ je jednovazný radikál, výhodně vodíkový atom, alkyl, například, methyl, nebo fenylová skupina.

Pokud r a/nebo s je l, L může také být aminoskupina vzorce IV],

(iv,), kde R²| ti R⁴] jsou každý jednovazný radikál. R²i a R⁴i může také být navázaný vazbou uhlík uhlík.

Další podtřída sloučenin podle vynálezu zahrnuje peptidy vzorce l kde L je hydrazido skupina vzorce V| (V,)

R¹²,

-21 CZ 303045 B6 a R^lli je jednovazný radikál, výhodně vodíkový atom. R¹²] může být jednovazný radikál jako je vodíkový atom, lineární nebo rozvětvené Ci-Cg-alkylová skupina, cykloalkylová skupina, CrCg-cykloalkyl-C^^-alkylová skupina nebo substituovaná nebo nesubstituovaná aryl, heteroaryl, aryl-Cj-Cj-alkyl nebo heteroaryl-C]^C₄-alkýlová skupina, kde aryl, heteroaryl a jejich výhodné substituenty mohou být zvoleny z možností, vyjmenovaných pro R²].

Pokud r a/nebo sje 1, R| může také být zvolen z možností, vyjmenovaných shora pro R¹²t a dva radikály společně mohou kromě toho tvořit propylenový nebo butylenový můstek.

io Mezi další podtřídy sloučenin podle vynálezu patří peptidy vzorce 1, kde L, je jednovazný radikál vzorce -O -R¹ \ nebo vzorce -S-R^|J|, kde R¹³] je jednovazný radikál, jako je CJ-Cio-cykloalkylová skupina, lineární nebo rozvětvená C₂-C₁₆-alkenyl methylová skupina nebo Ci-C,₆-alkýlová skupina která může být substituovaná 1 až asi 5 halogenovými, výhodně fluorovými, atomy.

is R^I3i může také být radikál -(CH₂)_e-R^l4i, kde e je celé číslo, výhodně 1, 2 nebo 3. R^l4| je jednovazný radikál, výhodně nasycený nebo částečně nenasycený C3-C10-uhlíkatý kruh.

R¹ i může dalším být jednovazný radikál LCH2-CH^_C(CH,)-CH2]f-H, kde f je celé číslo, výhodně 1,2, 3 nebo 4.

R^k'i může také být radikál -(Ol·-CH₂-O]g-Cfh, kde g je celé číslo, výhodně v rozmezí od 1 do asi 5.

R^,3i může také být radikál -(CH₂)-aryl nebo -(CH₂)_tl -heteroaryl, kde aryl a heteroaryl může také být substituovaný a může spolu s jejich výhodnými substituenty, znamenat skupinu, vybranou ze skupin, vyjmenovaných pro R²|. h je celé číslo, výhodně 0, 1, 2 nebo 3.

R¹³i může dále být radikál -(CH^jb-W^R⁵,, ve kterém b, Wj a R⁵| může každý být vybrán z možností, vyjmenovaných pro vzorec IV1.

Další podtřída sloučenin podle vynálezu zahrnuje peptidy vzorce I, ve kterém L je aminoxyskupina vzorce -O-NÍR^XR¹⁶]), kde R¹⁵| a Rⁱ⁶| jsou každý jednovazný radikál; který může nezávisle být vodíkový atom, lineární nebo rozvětvená Ci-Cg-alkylová skupina, která může být substituovaná halogenem, výhodně fluorem, Cj-Cg-cykloalkýlová skupina, Cs-Cg-cykloalkyl-C,35 C4-alkylová skupina, substituovaná nebo nesubstituovaná arylová nebo heteroarylová skupina nebo substituovaná nebo nesubstituovaná aiyl-Cl-^jC4-alkylová skupina. Arylové a heteroarylove skupiny a jejich výhodné substituenty mohou být zvoleny z možností, vyjmenovaných pro R²]. R^I6i může být zvoleno z možností, vyjmenovaných pro R¹⁵b Kromě toho, R^,5t a R^,6i mohou společně tvořit 5-, 6- nebo 7-členný heterocyklus. Mezi sloučeniny podle vynálezu dále patří soli sloučenin, popsaných shora, s fyziologicky snášitelnými kyselinami.

Mezi další podtřídy sloučenin podle vynálezu patří peptidy vzorce l, kde L je oximatová skupina vzorce -O-N-C (Rⁱ⁵|)(R^l6j), R¹⁵( a R^ló| může být zvoleno z možností, uvedených shora a, kromě toho, mohou společně tvořit cyklický systém obsahující výhodně od asi 3 do asi 7 atomů kruhu.

Tento cyklický systém může být dále kondenzován k jednomu nebo několika aromatickým kruhům. Zejména výhodné cyklické systémy jsou znázorněny dále.

-22 CZ 303045 B6

V jednom provedení vynález řeší sloučeniny vzorce I, kde A je aminokyselinový derivát vybraný ze souboru, do kterého patří N-alkyl-D-prolyl, N-alkyl-L-prolyl, N-alkyl-D-piperidin-2-kar5 bonyl, Nalkyl-Lpiperidin-2-karbonyl, N-dialkyl-D-2-ethyl--2-fenylglycyl a Ν,Ν-dialkyl-L2-ethyl-2-feny Iglycyl, v nichž alkyl je methyl, ethyl nebo isopropyl; a B je valyl, isoleucyl nebo 2 -t- butyl-L-glycylový zbytek.

Výhodné sloučeniny podle vynálezu jsou, mimo jiné, sloučeniny vzorce I kde r a sjsou každý 0. io A je aminokyselinový derivát vybraný ze souboru, do kterého patří:

D-N~methyl-piperidin-2-karbonvl, L-N-methyl-piperidin-2-karbonyl, N,N-dimethylaminoisobutyryl, N-methyl-L-prolyl, N-methyl-L-thiazolidin-4-karbonyl, N,N-di methy Iglycyl, Lprolyl, L-piperidin-2-karbonyl, N-prolyl-D-piperidin-2-karbonyl, D-pipertdin-2-karbonyl,

N-ethyi-D-piperidin-2-karbonyl, N-methyl-[2,2,5,5-tetramethyl]-L-thiazolidin-2-karbonyl, N-isopropyl-D-piperidin-2-karbonyl, N,N-d i methy t-2-cyklopropy Iglycyl, N.N-dimethvI-L2-ethyl~2-fenylglycyl, N,N-dimethyl-D-2-ethy l-2-fenyIglycyl, D-prolyl, N-methyl-D-prolyl, N,N-dimethyl-2-{2~fluorfenyl)glycyl, l-aza--[3,3,OJbicyklooktyl-5-karbonyL N-methyl-[2,2,5.5-tetramethylj-thiazolidin-2-karbonyl, 2 (R,S)—ethyl-2-fenyIglycyl, D,L-l-aminoindan-l-23CZ 303045 B6 karbonyl, N,N-dimethyl-2-(R,S)-methyl-2-fenylglycyl, 2-jN,N-dimethylaminoindan-2karbonyl, 5-[N,N-dimethylamino]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen~5-karbonyl, N-isopropyl-2(R,S)-ethy 1-2-fenylglycyl, l~[N,N-dimethylamino]indan-2-karbonyl, N,N—dimethyl-2propyl-2-fenylglycyt, N,N—dimethyl-2-[4-methoxyJfenyl-glycyl, N-methy l-3-hydroxy-D,L5 valyl, N,N-d i methy 14)1-2isopropy 1-2-fenylglycyl, N-methy lpiperid i n-2-karbonyl, Nmethyl-L-prolyl, N-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-l-karbonyl, N-methylazetídin-2karbonyl, N-i sopropy lazetidin-2-karbonyl, N,N-dimethyl-[O-methyl]seryl, N,N-dimethyl-[Omethyljthreonyl, N-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-3-karbonyl, l-[N,N-dimethylamino]cyklohexyl-1-karbonyl, l-[N,N-dimethylamino]cyklopentyl-l-karbonyl a 1,2,3,4-tetrahydroio isochinolin-3-karbonyl. B je valyl, isoleucyl nebo 2-terc-butylglycyl. Dje N-methyl valyl, Nmethyl-2-t-butylglycyl nebo N-methyl isoleucyl. E a F jsou každý nezávisle, prolyl, thiaprolyl, homoprolyl, hydroxyprolyl, 3,4-didehydroprolyl, 4-fluorprolyl, a 3-methylprolyl. L je alkoxy skupina nebo aminoskupina vzorce R^ll-N-R²l, kde R^ll a R²! jsou nezávisle vybrány ze souboru, do kterého patří vodík, alkoxy, hydroxy, alkyl a alkylarylskupina.

Ve zvláště výhodném podsouboru sloučenin podle vynálezu ras znamenají každý 0, A je aminokyselinový derivát vybraný ze souboru, do kterého patří

D-N-methyl—piperidin-2-karbonyl, N-ethyl-D-piperidin-2-karbonyl, N-isopropyl-D-piperi20 din-2-karbonyl, N,N-dimethyl-2-cyklopropyl-glycyl, N-methyl-D-prolyl, I-aza-[3,3,0]bicyklooktyl-5-karbonyl, N-methy l-[2; 2,5,5-tetramethyl ]—th iazo lidi n-2-karbony 1,2-( R,S)~ ethy 1-2-fe ny lg lycy 1, D, L-1 -am i no indan-1 -karbony 1, N ,N-d i methy 1-2-( R, S )-methy 1-2-feny 1glycyl, 5-[N,N-dimethylamino]-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-5-karbonyl, l-[N,N-dimethylamino]indan-2-karbonyl, N,N-dimethyl-2-propyl-2-fenylglycyl, N,N-dimethyl-L2-ethyl-225 fenylglycyl, N,N-d i methy l-D-2-ethy 1-2-fenylglycyl, N-methy l-3-hydroxy-D,L-valyl, N,Nd i methy l-D,L-2-i sopropy 1-2-fenyl glycyl, N-methy lp i peridin-2-karbonyl, N-methy 1-D,Lprolyl, N-methyl-1,2,3,4—tetrahydroisochinolin-2,-karbonyl, N-methy lazetid i n-2-karbonyl, NÍ sopropy lazetid i n-2-karbony I, N ,N-d i methy l-[O-methy I ] séry 1, 1 -[N,N-d i methy lam i no] cyk lohexy 1-1-karbonyl a l-[N,N-dimethylamino]cyklopentyl-l-karbonyl. B je valyl; Dje N-methylϊο valyl; a E a F jsou každý prolyl. L je Ci-C₆-alkoxy skupina nebo aminoskupina vzorce R^l 1-NR²1, kde R^ll a R²1 jsou každý nezávisle zvoleny ze souboru, do kterého patří vodík, Cj-Cóalkoxy, hydroxy, lineární, cyklický nebo rozvětvený Ci-C_[2-alkyl a fenylalkyl.

Způsoby syntézy

Sloučeniny podle vynálezu se mohou připravovat známými způsoby pro syntézu peptidů. Tak peptidy mohou být sestavovány postupně z jednotlivých aminokyselin nebo napojováním vhodných malých peptidových fragmentů. Při postupném sestavování se peptidový řetězec prodlužuje od C-zakončení postupně, po jedné aminokyselině v jednom stupni. Při spojování fragmentů se mohou spolu spojovat fragmenty různých délek a tyto fragmenty se mohou získat postupným sestavováním z aminokyselin nebo opět spojováním fragmentů ještě kratších peptidů.

Při jednotlivých i fragmentovém napojování je nutné spojovat jednotky vytvářením amidické vazby, což se může dosáhnout řadou enzymatických a chemických metod. Chemické způsoby tvorby amidické vazby jsou popsány v standardní literatuře o peptidové chemii, včetně Míiller, Methoden der organischen Chemie Vol. XV/2, 1-364, Thieme Verlag, Stuttgart, (1974); Stewart a Young, Solid Phase Peptide Synthesis, 31-34 a 71-82, Pierce Chemical Company, Rockford, IL (1984); Bodanszky et al., Peptide Synthesis 85-128, John Wiley & Sons, New York, (1976). Výhodné způsoby jsou, mimo jiné, azidová metoda, při které se používají symetrické a smíšené hydridy, vyrobené in sítu nebo předem připravené aktivní estery, dále použití uretanem chráněných N-karboxy anhydridů aminokyselin a vytváření amidické vazby pomocí kondenzačních činidel jako jsou aktivátory karboxyiové kyseliny, zejména dicyklohexylkarbodiimid (DCC), diisopropylkarbodiimid (DIC) l-ethoxykarbonyl-2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin (EEDQ), pivaloylchlorid, l-ethyl-3-{3-dÍmethylaminopropyl)karbodiimid hydrochlorid (EDCI), anhydrid kyseliny n-propefosfonové (PPA), N,N-bis(2-oxo-oxazolÍdinyl)amidofosforylchlorid (BOP-24CZ 303045 B6

Cl), brom-tris(pyrrolidino)fosfonium hexafluorfosfát (PyBrop), difeny 1 fosfory 1 azid (DPPA), Castrovo činidlo (BOP, PyBop), O-benzotriazolyl-Ν,Ν,Ν',Ν -tetramethyl uraniové soli (HBTU), O-azabenzotriazolyl-N,N,N',N'-tetramethyluroniové soli (HATU), diethylfosforyl kyanid (DEPCN), 2,5~difenyl-2,3-dihydro_3-oxo-4~hydroxythiofen, dioxid (Steglichovo činidlo;

HOTDO); a 1,1-karbonyldiimidazol (CDI). Spojovací činidla se dají používat samotná nebo v kombinaci s přísadami jako je N,N-dimethyaminopyridin (DMAP), N-hydroxybenzotriazol (HOBt), N-hydroxyazabenzotriazol (HOAt), N-hydroxybenzotriazin (HOOBt), N-hydroxysukcinimid (HOSu) nebo 2-hydroxypyridin.

io Použití chránících skupin obecně není při enzymatické syntéze peptidu nutné, ale pri chemické syntéze je pro obě reakční složky tato ireversibilní ochrana reaktivních skupin nutná pro vytvoření amidické vazby. Pro chemickou syntézu peptidů jsou výhodné tři obvyklé metody použití chránících skupin: benzyloxy karbony lová (Z), t-butoxy karbony lová (Boc) a 9-fIuorenylmethoxykarbony lová (Fmoc). Uváděna je pro každý případ chránící skupina na a-aminoskupině jednotky, kterou se prodlužuje řetězec. Podrobný přehled chránících skupin pro aminokyseliny je uveden Míillerem v Methoden der organischen Chemie Vol. XV/1, pp 20-906, Thieme Verlag, Stuttgart (1974). Jednotky, které se používají při sestavování peptidového řetězce mohou reagovat v roztoku, v suspenzi nebo metodou podobnou té, která je popsána v publikaci Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 85:(1963) 2149.

Mezi rozpouštědla vhodná pro syntézu peptidů patří, mimo jiné, jakékoliv rozpouštědlo, které je inertní za reakčních podmínek, zejména voda, N,N~dimethylformamid (DMF), dimethylsulfoxid (DMSO), acetonitril, dichlormethan (DCM), 1,4-dioxan, tetrahydrofuran (THF), N-methyl-2pyrrolidon (NMP) a směsi těchto rozpouštědel.

Syntéza peptidu na polymemím podkladu se může provádět ve vhodném inertním organickém rozpouštědle, ve kterém jsou výchozí aminokyselinové deriváty rozpustné. Nicméně, výhodná rozpouštědla kromě toho mají schopnost bobtnat pryskyřice, jako je DMF, DCM, NMP, acetonitril a DMSO, a směsi těchto rozpouštědel. Po syntéze peptidu se produkt odstraní z polymemí30 ho podkladu. Podmínky, za kterých se tohoto odštěpení dosahuje, jsou různé pro různé typy pryskyřic ajsou uvedeny v literatuře. Odštěpující reakce, které se nejčastěji používají,jsou katalyzované kyselinou nebo palladiem, přičemž první z nich se provádí například v kapalném bezvodém fluorovodíku, vodné kyselině trifluormethansulfonové, ve zředěné nebo koncentrované trifluoroctové kyselině, a ve směsích, obsahujících kyselinu octovou, dichlormethan a trifluorethanol.

Druhá z nich se může provádět v THF nebo ve směsích THF-DCM za přítomnosti slabé zásady jako je morfolin. Určité chránící skupiny se také za těchto podmínek odštěpují.

Před provedením určitých reakcí, při kterých se připravují deriváty, může také být nutné částečné odstranění chránících skupin peptidů. Například, peptidy dialkylováné na N-zakončení se mohou připravit navázáním vhodné N,N-di-alkyIaminokyseliny na peptid v roztoku nebo na polymerním podkladu redukční alkylací peptidu, vázaného na pryskyřici ve směsi DMF/1% kyselina octová s NaCNTBH₃ a příslušného aldehydu nebo hydrogenaci peptidu v roztoku za přítomnosti příslušného aldehydu nebo ketonu a Pd na uhlíku.

Různé aminokyseliny, nevyskytující se v přírodě, stejně jako různé neaminokyselinové sloučeniny, zde popsané, se mohou získat z komerčních zdrojů nebo syntetizovat z komerčně dostupných výchozích materiálů pomocí způsobů, které jsou v oboru známé. Například vytvoření aminokyselinových bloků, které nesou skupiny R¹ a R², může být provedeno metodou popsanou v publikaci Wuensch a Weyl, Methoden der Organischen Chemie, vol. XV, Springer Verlag; Stuttgart, p.

so 306 (1974) v odkazech citovaných v této publikaci.

Způsoby použití chráněných sloučenin

V dalším provedení tento vynález zahrnuje způsob částečné nebo úplné inhibice (například obrá55 cení nebo inhibice jejich dalšího vývoje) tvorby tuhých nádorů, nebojiné léčení těchto nádorů,

-25 CZ 303045 B6 (například nádorů plic, prsu, střeva, prostaty, ledvin, konečníku nebo dě ložní sliznice) nebo hemato logických malignit (například leukémií, lymfomů) u savců, například lidí, podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny nebo kombinací sloučenin vzorce I. Sloučeninu(y) lze podávat samostatně nebo v farmaceutické kompozicí obsahující sloučen i nu(y) a přijatelný nosič nebo ředidlo. Podávat se může způsoby, které jsou obvyklé pro farmaceutické, výhodně onkologické, účinné látky, včetně orálních a parenterálních způsobů jako subkutánně, intravenózně, intramuskulárně a intraperitonálně, nasálně nebo rektálně. Sloučeniny mohou být podávány samotné nebo ve formě farmaceutické kompozice, obsahující sloučeninu nebo sloučeniny vzorce I společně s farmaceuticky přijatelným nosičem, vhodným pro danou cestu podávání. Tyto farmaceutické kompozice mohou být kombinované výrobky, tj. mohou také obsahovat terapeuticky aktivní přísady.

Dávkování, které je třeba podávat savcům, jako je člověk, obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny zde popsané. Jak je zde užíván, výraz „terapeuticky účinné množství“ je množství dostatečné k inhibici (částečné nebo úplné) tvorby nádoru nebo hematologické malignity nebo k obrácení vývoje pevného nádoru nebo jiné malignity nebo prevenci nebo zmenšení jeho dalšího rozvoje. Za určitých podmínek nebo pri určitých metodách léčení je dávkování determinováno empiricky, pomocí známých způsobů, a závisí na faktorech jako je biologická aktivita určité konkrétně použité sloučeniny; metoda podávání; věk, zdraví a tělesná váha pacienta; povaha a rozsah příznaků; frekvence léčebných úkonů; používání jiných léčebných metod a požadovaném účinku. Obvyklá denní dávka může být od asi 0,05 do asi 50 miligramů na kilogram tělesné hmotnosti pri orálním podávání a od asi 0,01 do asi 20 miligramů na kilogram tělesné hmotnosti při parenterálním podávání.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být podávány v běžné pevné nebo kapalné farmaceutické formě, například ve formě nepovlečených nebo filmem povlečených tablet, kapslí, prášků, granulí, supositorií nebo roztoků. Tyto formy se vyrábějí obvyklým způsobem. Účinné látky se mohou k tomuto účelu zpracovat s obvyklými farmaceutickými přísadami jako jsou tabletová pojivá, plnidla, stabilizační a ochranné přísady, tabletové desintegrační přísady, regulátory tečení, plastifíkátory, zvlhčovači přísady, dispergační přísady, emulgátory, rozpouštědla, kompozice s trvalým uvolňováním, antioxidanty a/neb hnací plyny (cf. H. Sucker et al.: Farmazeutísche Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, 1978). Podávači formy, získané touto cestou obvykle obsahují od asi 1 do asi 90 % hmotnostních účinné látky.

Tento vynález může být ilustrován následujícími příklady, které však nejsou omezující.

Příklady provedení vynálezu

Próteinogenní aminokyseliny jsou uváděny v příkladech pomocí zkratek, které tvoří známé tri hláskové kódy. Další použité zkratky jsou: TFA = trifluoroctová kyselina, Ac = kyselina octová, DC M = dichlormethan, DMSO - dimethyl sul foxid, Bu = butyl, Et = ethyl, Me = methyl, Bzl = benzyl. Ve sloučeninách, které se uvádějí, jsou všechny proteinogenní aminokyseliny L-aminokyseliny, pokud není uvedeno jinak. Další používané zkratky jsou: Me₂Val = N,N-dimethylvalin, MeVal = N-methylvalin, Bn = benzyl, Me₂Aib - [2-N,N dirnethylamino]-isomáselná kyselina.

Obecné postupy

Peptidy podle vynálezu se syntetizují buď klasickou syntézou v roztocích s použitím standardní Z a Boc—metodiky, jak je popsáno shora, nebo standardními způsoby syntézy v pevné fázi s použitím metod využívajících Boc a Fmoc chránících skupin.

V případě syntézy v pevné fázi se Ν,Ν-dialkyl-penta- nebo hexapeptidové kyseliny uvolňují z pevného podkladu a dalším navazováním odpovídajících C-terminálních aminů v roztoku. Pro

-26CZ 303045 B6 navázání na N-methylaminokyseliny byly jako reakční činidla používány BOP-C1 a PyBrop. Reakční doby byly odpovídajícím způsobem zvětšeny. Pro redukční alkylaci N—zakončení byl peptid, navázaný na pryskyřici, zbaven chránící skupiny na N-zakonČení a pak uveden do reakce s trojnásobným molámím přebytkem aldehydu nebo ketonu vDMF/1% kyselina octová s přísadou 3 ekvivalentů NaCNBH₃. Poté co byla reakce ukončena (negativní Kaiserův test), byla pryskyřice několikrát promyta vodou, isopropanolem, DMF a dichlormethanem.

Při řešení syntézy se používá buď Boc-chráněné aminokyseliny NCA (N-terc—butyloxykarbonyl-aminokyselina-N-karboxyanhydridů), Z-chráněné aminokyseliny NCA (N-benzyloxykarbonyl-aminokyselina-N-karboxy-anhydridů), nebo se používá pivaloylchloridů jako kondenzačního činidla, které je nej výhodnější pro navazování aminokyseliny následující po Nmethylaminokyselině. Redukční alky láce N-zakončení může například být dosažena reakcí Nezakončení peptidů zbavených chránící skupiny nebo aminokyseliny s odpovídajícími aldehydy nebo ketony a použitím NaCNBH₃ nebo vodíku a Pd/C.

Valyl—N—methyl valyl—prolyl—prolylbenzy lamid hydrochlorid byl například připraven podle způsobů, popsaných v patentové přihlášce DE 19527575 Al.

Čištění a ověření struktury peptidů

Čistění peptidů bylo prováděno gelovou chromatografii (SEPHADEX G-10, G-l5/10% HOAc, SEPHADEX LH₂O/MeOH), středotlakou chromatografii (stacionární fáze: HD-SIL C-l8, 20 až 45 mikronů, 100 Angstromů; mobilní fáze: gradient s použitím A = 0,1% TFA/MeOH, B = 0,1 % TFA/voda), preparativní HPLC (stacionární fáze: Waters Delta-Pak C-l8, 15 mikronů, 100 Angstromů; mobilní fáze: gradient s A = 0,1 % TFA/MeOH, B = 0,1 % TFA/voda) nebo krystalizací.

Čistota výsledných produktů byla stanovena analytickou HPLC (stacionární fáze: 100 2,1 mm VYDAC C—18, 5 mikronů, 300 A; mobilní fáze: gradient acetonitril—voda, pufrován pomocí 0,1 % TFA, 40 °C; nebo 3,9 mm VYDAC C-l 8, 30 °C). Potvrzení složení bylo provedeno bombardováním atomů při hmotnostní spektroskopii a NMR-spektroskopii.

Příklad 1 Syntéza [N-Methyl-L-piperidin-2-karbonyl]-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn (Sloučenina 1) a [N-Methyl-D-piperidin-2-karbonyl]-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn (Sloučenina 2)

Příprava N-methyl-piperidin-2-karbonylová kyseliny

Ethyl ester N-Methyl-piperidin—2-karboxylové kyseliny (5,1 g) byl rozpuštěn ve směsi 100 ml methanolu a 10 ml vody. NaOH (8 g) byl přidán a reakční směs byla míchána při pokojové teplotě přes noc. Roztok byl pak neutralizován kyselinou chlorovodíkovou, odpařen do sucha a odpařen čtyřikrát s toluenem. Výsledný práškovitý zbytek byl použit přímo v dalším stupni. Příprava [N-M ethy 1-p i perid in-2-kar bony 1 ]-V al-M e V al-Pro-Pro-N Η B n

Zbytek připravený jak je popsáno shora (5,05 g) a H-Val-MeVal-Pro~Pro-NHBn x HCI (4,88 g) byly rozpuštěny v 50 ml suchého DMF. Po ochlazení roztoku v ledové lázni bylo přidáno 1,52 g DEPCN a 2,66 ml triethylaminu. Reakční směs byla míchána při 0 °C po dobu 2 h a pak při pokojové teplotě přes noc. DMF byl odstraněn odpařením za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v dichlormethanu a organická fáze byla promyta vodnou kyselinou chlorovodíkovou (pH=2) a vodou, sušen nad síranem sodným a odpařen do sucha. Diastereomemí směs byla pak

-27CZ 303045 B6 dělena mžikovou chromatografii s gradientem s použitím elučních směsí heptan/ethylacetát a dichlormethan/methanol. Z podmínek HPLC, popsaných v úvodní části (C-18 reversní fáze) má isomer 1 dobu zdržení 14,9 minut a isomer 2 má dobu zdržení 15,8 minut. Oba isomery byly po stránce složení potvrzeny atomovým bombardováním hmotnostní chromatografii ([M+H]+ = 639).

Příklad 2 Příprava Me^Aib-Val MeVal-Pro-Pro-NHBn (Sloučenina 3)

Příprava 2- [N.N-dimethylamino]- isomáselné kyseliny

2-Amino-isomáselná kyselina (10,3 g) byla rozpuštěna v 200 ml methanolu. Po přidání 25 ml vodného formaldehydu a 1 g 10% Pd/C byla reakční směs hydrogenována přes noc při pokojové teplotě. Katalyzátor byl filtrován a filtrát byl odpařen do sucha. Zbytek byl krystalizován z isopropanolu, což poskytlo 4,8 g požadovaného produktu.

Příprava Me₂Aib-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn x HCl

2-[N,N-Dimethylamino]-isomáselná kyselina (1,3 g, 10 mmol) a 5,5 g (10 mmol) H-ValMeVal-Pro-Pro—NHBn x HCl byly rozpuštěny v 50 ml suchého DMF. Po ochlazení na 0 °C, bylo přidáno k reakční směsi 1,6 h DEPCN (10 mmol) a 2,9 ml triethyíaminu. Výsledná směs byla míchána při 0 °C po dobu 2 h a při pokojové teplotě přes noc. Pak byla přidána ledová voda (50 ml) a výsledná směs byla extrahována dvakrát diethyletherem: Etherové extrakty byly promyty 1 N NaOH (lx) a vodným NaCl (3x), pak sušeny nad síranem sodným a odpařeny do sucha za sníženého tlaku. Produkt byl krystalizován z 100 ml diethyletheru s HCl/ether a rekrystalizován z acetonu, což poskytlo 1,2 g požadovaného produktu, který byl potvrzen rychlým bombardováním atomů při hmotnostní spektrometrii ([M+H) + = 627),

Příklad 3 Příprava [N,N—dimethyl—2--ethyl-2-fěnylglycylJ-Val-MeVal-Pro-Pro-NI IBn x HCl (Sloučenina 4)

Příprava [N,N—dimethyl l-2-ethyl-2-ťenylglycyl-7-Val-MeVal-Pro-ProNHBn x HCl

2,07 g (10 mmol) N,N-Di methy l-2-ethyl-2-fenylglycin a 5,5 g (10 mmol) H-Val-MeVal-ProPro-NHBn x HCl byly rozpuštěny v 100 ml suchého DMF. Po ochlazení na 0 °C bylo přidáno 1,6 g DEPCN (10 mmol) a 2,9 ml triethyíaminu. Reakční směs byla míchána při 0 °C po dobu 2 h a při pokojové teplotě pres noc, pak zpracována, jak je popsáno shora. Surový produkt byl krystalizován z diethyletheru s přísadou HCl/ether, což poskytlo 4 g požadovaného produktu, který byl potvrzen hmotnostní spektrometrií ([M+H] + = 703).

Příklad 4 Příprava [N-Methyl-D-Pro]-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn (Sloučenina 5)

Příprava Z-D-Pro-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn

3,74 g Z-D-Pro-OH (15 mmol, BACHEM) a 8,25g H-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn x HCl (15 mmol) bylo rozpuštěno v 80 ml suchého DMF. Po ochlazení na 0 °C bylo přidáno 2,4 g DEPCN (2,25 ml, 15 mmol) a 4,2 ml triethyíaminu (30 mmol). Reakční směs byla míchána při

-28CZ 303045 B6 °C po dobu několika hodin a teplotě místnosti přes noc, pak byl DMF odpařen za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ethylacetátem a opatrně promyt rozpuštěnou vodnou HCl (pH=2), vodou, vodným roztokem NaOH (pH-9 až 10) a vodou. Organická fáze byla sušena nad síranem sodným a odpařena do sucha což vyneslo 9,2 g požadovaného chráněného pentapeptidu.

Příprava D-Pro-Val-MeVal-Pro^Pro-NHBn x HCl

8,2 g (11 mmol) Z-D_Pro-Val~MeVal-Pro-Pro-NHBn byl rozpuštěn v 70 ml methanolu. Po přidání 0,7 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a 0,3 g 10 % Palladium/dřevěném uhlí k roztoku byla výsledná směs hydrogenována. Filtrace a odpaření rozpouštědla poskytly zbytek, který byl rozpuštěn ve vodě, jeho pH bylo upraveno na pH-2 a extrahován dvakrát ethylacetátem. Vodná fáze byla upravena na pH 9 až 10 a extrahována dvakrát dichlormethanem. Organické extrakty byly odpařeny a zbytek byl znovu rozpuštěn v diethyletheru a krystalizován s přídavkem HCl/ether jako hydrochloridová sůl, což poskytlo 6,5 g požadovaného produktu. Příprava [N-methyl-D-Pro]-Val- MeVaI-Pro-Pro-NHBn x HCl

1,94 g (3 mmol) D-Pro-Val-MeVal-Pro-ProNHBn x HCl byl rozpuštěn v 30 ml methanolu. K tomuto roztoku bylo pak přidáno 0,3 g 10% Pd/dřevěném uhlí a 1,5 ml vodného roztoku formaldehydu a reakční směs byla hydrogenována. Následná filtrace a odpaření rozpouštědel poskytly výsledný zbytek, který byl rozpuštěn ve vodě, jeho pH bylo upraveno na pH~2 a poté byl extrahován dvakrát diethyletherem a dále několikrát dichlormethanem. Vodná fáze byla upravena na pH 9 až 10 a extrahována dvakrát dichlormethanem. Organické extrakty byly sušeny nad síranem sodným a odpařeny do sucha. Zbytek byl krystalizován jako hydrochloridová sůl, což poskytlo 0,5 g požadovaného produktu, který byl potvrzen hmotnostní spektrometrií ([M+H)+ = 625).

Sloučeniny vyjmenované v tabulce 1 byly připraveny podle způsobů popsaných v Příkladech 1 až 4. Pokud jsou sloučeniny uváděny s poznámkou „ísomer 1“ nebo „isomer 2“, tak isomer 1 je diastereomer s kratší dobrou zdržení na reversní fázi analytické HPLC soustavy. Výsledky hmotnostní spektrometrie jsou uvedeny v tabulce 2.

-29CZ 303045 B6

Tabulka 1

Sloučenina

č.

6	Xah	Val	Xaa	Pro	Xab
7	Xai	Val	Xaa	Pro	Xab
8	Xae	Va1	Xaa	Pro	Xab
9	Xad	Val	Xaa	Pro	Xbr
10	Xam	Val	Xaa	Pro	Xab
11	Xaw	Ile	Xaa	Pro	Xbx
12	Xao	Val	Xaa	Pro	Xab
13	Xad	Val	Xaa	Pro	Xap
14	Xaq	Val	Xaa	Pro	Xab
15	Xar	Val	Xaa	Pro	Xab
16	Xas	Val	Xaa	Pro	Xab
17	Xat	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
18	Xat	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
19	Xaf	Val	Xaa	Pro	Xab

30CZ 303045 B6

Tabulka 1 - pokračování

Sloučenina

č.

20	Xav	Val	Xaa	Pro	Xab
21	Xag	Val	Xaa	Pro	Xab
22	Xax	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
23	Xax	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
24	Xay	Val	Xaa	Pro	Xab
25	Xaz	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
26	Xaz	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
27	Xba	Val	Xaa	Pro	Xab
28	Xbb	Val	Xaa	Pro	Xab
29	Xbc	Val	Xaa	Pro	Xab
30	Xbd	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
31	Xbd	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
32	Xbe	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
33	Xbe	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
34	Xbf	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
35	Xbg	val	Xaa	Pro	Xab
36	Xbh	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
37	Xbh	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
38	Xbi	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
39	Xbi	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
40	Xbk	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
41	Xbk	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
42	Xbi	Val	Xaa	Pro	Xab
43	Xbf	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
44	Xbm	Val	Xaa	Pro	Xab
45	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xbn
46	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbn	isomer 1
47	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbn	isomer 2

-31 CZ 303045 B6

Tabulka I - pokračování

Sloučenina

č.

48	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xbp
49	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbp isomer I
50	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbp isomer 2
51	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xbq
52	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xbr
53	Xbs	Val	Xaa	Pro	Xbt isomer 1
54	Xbl	Val	Xaa	Pro	Xab isomer 1
55	Xbl	Val	Xaa	Pro	Xab isomer 2
56	Xbu	Val	Xaa	Pro	Xab isomer 1
57	Xbv	Val	Xaa	Pro	Xab
58	Xbw	Val	Xaa	Pro	Xab isomer 1
59	Xbw	Val	Xaa	Pro	Xab isomer 2
60	Xbs	Val	Xaa	Pro	Xbt isomer 2
61	Xbu	Val	Xaa	Pro	Xab isomer 2
62	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbr isomer 1
63	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbr isomer 2
64	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbq isomer 1
65	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbq isomer 2
66	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xbx
67	Xby	Val	Xaa	Pro	Xab
68	Xbz	Val	Xaa	Pro	Xab
69	Xca	Val	Xaa	Pro	Xab isomer 7
70	Xca	Val	Xaa	Pro	Xab isomer 2
71	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbx isomer 1
72	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbx isomer 2
73	Xau	Val	Xaa	Pro	Xbp
74	Xau	Val	Xaa	Pro	Xbx
75	Xbi	Val	Xaa	Pro	Xbx isomer 2

-32 CZ 303045 B6

Tabulka 1 - pokračování

Sloučenina w

c.

76	Xau	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
77	Xau	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
78	Xau	Val	Xaa	Pro	Xcb
79	Xbi	Val	Xaa	Pro	Xcb	isomer 1
80	Xbi	Val	Xaa	Pro	Xcb	isomer 2
81	Xbi	Val	Xaa	Pro	Xcc	isomer T
82	Xbi	Val	Xaa	Pro	Xcc	isomer 2
83	Xbi	Val	Xaa	Pro	Xcd
84	Xbk	Val	Xaa	Pro	Xcc	isomer 1
85	Xbk	Val	Xaa	Pro	Xcc	isomer 2
86	Xax	Val	Xaa	Pro	Xbp	isomer 1
87	Xax	Val	Xaa	Pro	Xbp	isomer 2
88	Xbk	Val	Xaa	Pro	Xcb	isomer 1
89	Xbk\Val	Xaa	Pro	Xcb	isomer 2
90	Xau	Val	Xaa	Pro	Xcc
91	Xau	Val	Xaa	Pro	Xcd
92	Xba	Val	Xaa	Pro	Xcb	isomer 1
93	Xba	Val	Xaa	Pro	Xcb	isomer 2
94	Xbo	ValxXaa	Pro	Xbp	isomer 1
95	Xbo	Val	Xaa	Pro	Xbp	isomer 2
96	Xau	Val	Xaa	Pro	Xbp	isomer 1
97	Xau	Val	Xaa	Pro	Xbp	isomer 2
98	Xbi	Val	Xaa	Pro	Xcd	isomer 2
99	Xbk	Val	Xaa	Pro	Xcd
100	Xba	Val	Xaa	Pro	Xbp	isomer I
101	Xba	Val	Xaa	Pro	Xbp	isomer 2
102	Xba	Val	Xaa	Pro	Xcc	isomer 1

-33CZ 303045 B6

Tabulka 1 - pokračování

Sloučenina

č.

103	Xba	Val	Xaa	Pro	Xcc	isomer 2
104	Xba	Val	Xaa	Pro	Xcd
205	Xce	Val	Xaa	Pro	Xab
106	Xcf	Val	Xaa	Pro	Xab
107	Xcg	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 1
108	Xcg	Val	Xaa	Pro	Xab	isomer 2
109	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xch
110	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xci
111	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xck
112	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xcl
113	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xcm
114	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xcn
115	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xco
116	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xcp
117	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xcq
118	Xaw	Val	Xaa	Pro	Xcr
119	Xad	Val	Xaa	Pro	Xch
120	Xad	Val	Xaa	Pro	Xci
121	Xad	Val	Xaa	Pro	Xck
122	Xad	Va1	Xaa	Pro	Xcl
123	Xad	Val	Xaa	Pro	Xcm
124	Xad	Val	Xaa	Pro	Xcn
125	Xad	Val	Xaa	Pro	Xco
126	Xad	Val	Xaa	Pro	Xcp
127	Xad	Val	Xaa	Pro	Xcq
128	Xad	Val	Xaa	Pro	Xcr
129	Xad	Val	Xaa	Pro	Xbx
130	Xau	Val	Xaa	Pro	Xch
131	Xau	Val	Xaa	Pro	Xci

Tabulka 1 - pokračování

Sloučenina

č.

1 32	Xau	Val	Xaa	Pro	Xck
133	Xau	Val	Xaa	Pro	Xcl
134	Xau	Val	Xaa	Pro	Xcm
135	Xau	Val	Xaa	Pro	Xcn
136	Xau	Val	Xaa	Pro	Xco
137	Xau	Val	Xaa	Pro	Xcp
138	Xau	Val	Xaa	Pro	Xcq
139	Xau	Val	Xaa	Pro	Xcr
140	Xau	Val	Xaa	Pro	Xbr
1^1	Xad	Val	Xaa	Xal	Xbx
142	Xau	Val	Xaa	Xal	Xbx
143	Xaw	Val	Xaa	Xal	Xbx
144	Xad	Val	Xaa	Xal	Xch
145	Xau	Val	Xaa	Xal	Xch
146	Xaw	Val	Xaa	Xal	Xch
147	Xad	Val	Xaa	Xal	Xcr
148	Xau	Val	Xaa	Xal	Xcr
149	Xaw	Val	Xaa	Xal	Xcr
150	Xad	Val	Xaa	Xan	Xbx
151	Xau	Val	Xaa	Xan	Xbx
152	Xaw	Val	Xaa	Xan	Xbx
153	Xad	Val	Xaa	Xan	Xch
154	Xau	Val	Xaa	Xan	Xch
155	Xaw	Val	Xaa	Xan	Xch
156	Xad	Val	Xaa	Xan	Xcr
157	Xau	Val	Xaa	Xan	Xcr
158	Xaw	Val	Xaa	Xan	Xcr
159	Xau	tle	Xaa	Pro	Xbx

-35CZ 303045 B6

Tabulka 1 - pokračování

160	Xad	Ile	Xaa	Pro	Xbx
161	Xaw	Ile	Xaa	Pro	Xch
162	Xad	Ile	Xaa	Pro	Xch
163	Xau	Ile	Xaa	Pro	Xch
164	Xaw	Xcs	Xaa	Pro	Xch
165	Xad	Xcs	Xaa	Pro	Xch
166	Xau	Xcs	Xaa	Pro	Xch
167	Xaw	Xcs	Xaa	Pro	Xbx
168	Xad	Xcs	Xaa	Pro	Xbx
169	Xau	Xcs	Xaa	Pro	Xbx
170	Xaw	Val	Xct	Pro	Xch
171	Xad	Val	Xct	Pro	Xch
172	Xau	Val	Xct	Pro	Xch
173	Xaw	Val	Xct	Pro	Xbx
174	Xad	Val	Xct	Pro	Xbx
175	Xau	Val	Xct	Pro	Xbx

Symboly Xaa v tabulce 1 představují následující aminokyseliny nebo jejich zbytky:

Xaa: N-methyl-valin

Xab: Prolyl-N-benzylamid

Xac: L-N-methyl-piperidin-2-karboxylová kyselina

Xad: D-N-methyl-piperidin-2-karboxylová kyselina

Xae: N-methyl-L-prolin

Xaf: N-methyl-L-thiazolidin-4-karboxylová kyselina

Xag: N, N-dimethylglycin

Xah: L-prolin

Xai: L-piperidin-2-karboxytová kyselina

-36CZ 303045 B6

Xak:

Xal:

Xam;

Xan:

Xao:

Xap:

Xaq:

Xar:

Xas:

Xat:

Xau:

Xav:

Xaw:

Xax:

Xay:

Xaz:

Xba:

Xbb:

Xbc:

Xbd:

Xbe:

Xbf:

Xbg:

Xbh:

Xbi:

Xbk:

Xbi:

Xbm:

Xbn:

2-[N, N-d i methyl amino]-iso másel ná kyselina L-thiazolidin-4-karboxylová kyselina N-propyl-D-piperidin-2-karboxylová kyselina L-3,4-didehydroprolin

D-piperidin-2-karboxylová kyselina prolin-terc/butylester

N-ethyl-D-piperidin-2-karboxylová kyselina N-methyl-[2,2,5,5-tetramethyl]-L-thiazolidin-2-karboxylová kyselina

N-isopropyl-D-piperidin-2-karboxylová kyselina N, N-dimethyl-2-cyklopropyl-glycin N, N-dimethyl-2-ethyl-2-fenyl-glycin D-prolin

N-methyl-D-prolin

N,N-dimethyl-2-[2-fluor]fenyl-glycín

-aza-[3,3,0]bicyklooktyl-5-karboxylová kyselina N,N-dimethyl-2-[4-fluor]fenyl·glycin N-methy l-[2,2,5,5-tetramethyf ]-thiazol idi n-2-karboxylová kyselina

2-(R,S)-ethyl-2-fenyl-glycin

D,L-1 -aminoindan-l-karboxylová kyselina

N, N-d i methy (-2-( R, S)-methyl-2-fenyl-glycin

2-[N,N-dÍmethylamino]indan-2-karboxylová kyselina 5-[ N, N-d i methy lamin o]-5,6,7,8-tetrahydro-naftalen-5-karboxyIová kyselina

N-isopropyl-2-(R,S)-ethyl-2-fenyl-glycin

-[N,N-dimethylamino]indan-2-karboxylová kyselina

N,N-dimethyl-2-propyl-2-fenyl-gfycin

N,N-dimethyl-2-[4-methoxy]fenyi-glycin

N-methyl-3-hydroxy-D,L-valin

N, N-d imethy l-D,L-2-isopropyl-2-fenyl-glycin prolin -N-methoxy-N-methyl-amid

-37CZ 303045 B6

Xbo:	N-m ethyl-piperidin-2-karboxy lová kyselina
Xbp:	prolin-isopropylamid
Xbq:	prolin-isoxazolidinyl
Xbr:	prolin-N-methoxy-N-benzylamid
Xbs:	N-methyl-D,L-prolin
Xbt :	prolin-[5- fenyl] isoxazolidinyl
Xbu:	N-m ethyl-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-1 -karboxylové kyselina
Xbv:	N-methyl-azetidin-2-karboxylová kyselina
Xbw:	N-isop ropy l-azetidin-2-karboxy lová kyselina
Xbx:	prolin -terc-butylamid
Xby:	N,N-dímethyl-[O-methyl]serin
Xbz:	N.N-dimethyl-tO-methyllthreonin
Xca:	N-methy 1-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-3-karboxylová kyselina
Xcb:	prolin -pentyl(3)amide
Xcc:	prolin -(R)-fenethylamid
Xcd:	prolin -(S)-fenethylamid
Xce:	1 -[Ν, N-d i methyl a minojcyklohexy 1-1 -karboxylové kyselina
Xcf:	1-[ N, N-d i meth ylam i no]cyklopentyl-1-karboxylové kyselina
Xcg:	1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-3-karboxylová kyselina

-38CZ 303045 B6

Sek:

-39CZ 303045 B6

Xcq

XCR

Xcs: L-2-terc.butyl-glycin Xct: N-methyI- L--Isoleucin

Tabulka 2: Výsledky FAB-MS analýzy vybraných sloučenin

Sloučenina č.	Změřená mol. hmotnost
1	639
2	639
3	627
4	703
5	625
6	611
7	625
8	625
10	667
12	625
13	606
14	653
15	699
16	667
17	639
18	639
19	643
20	611
21	599
22	693
23	693

-40CZ 303045 B6

Tabulka 2 - pokračování

Sloučenina č.	Změřená mol. hmotnost
24	651
25	693
26	693
27	699
28	675
29	673
30	689
31	689
32	701
33	701
34	715
35	717
36	701
37	701
38	717
39	717
40	705
41	705
42	643
43	715
44	703
45	579
46	593
47	593
48	577
49	591
50	591
51	591
52	655
53	667
54	657
55	657
56	687
57	611
58	639
59	639
60	667
61	687
62	669
63	669
64	605
65	605

-41 CZ 303045 B6

Tabulka 2 - pokračování

Sloučenina č.	Změřená mol. hmotnost
66	591
67	643
68	657
69	687
70	687
71	605
72	605
73	655
74	669
75	683
76	703
77	703
78	683
79	697
80	697
81	731
82	731
83	731
84	719
85	719
86	645
87	645
88	.685
89	685
90	717
91	717
92	679
93	679
94	591
95	591
96	655
97	655
98	731
99	719
100	651
101	651
102	713
103	713
104	713
105	666
106	653
107	687
108	687

-42CZ 303045 B6

Příklad 5 Hodnocení biologické aktivity

Metodika testů in vitro

Cytotoxicita byla měřena pomocí standardní metodiky pro adherentní buněčné linie, jako je test $ mikrokulturou tetrazolium (MTT). Přesný postup při tomto testu je popsán v publikaci Alley, M. C. et al., Cancer Research 48: 589-601, (1988). Pro získání mikrotitru destičkové kultury byly použity exponenciálně rostoucí buňky HT-29 karcinomu střeva. Buňky byly naočio kovány v množství 5000 až 20 000 buněk na jamku v 96jamkových destičkách (v 150 ml media) a kultivovány přes noc při 37 °C. Testované sloučeniny byly přidány v 10-ti násobném zředění přičemž byla koncentrace měněna z 10’⁴M až 10^_,° M. Buňky pak byly inkubovány po dobu hodin. Za účelem stanovení počtu životaschopných buněk v každé jamce bylo přidáno barvivo MTT (50 ml roztoku o koncentraci 3 mg/mL 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyl-tetrazoi5 tium bromidu v solance). Tato směs byla inkubována při 37 °C po dobu 5 hodin, a pak bylo do každé jamky přidáno 50 ml 25% SDS, pH=2, Po inkubaci přes noc byla stanovena u každé jamky absorbance při 550 nm pomocí přístroje ELISA. Z výsledků opakování stejných podmínek v různých jamkách byly vypočteny hodnoty středních +/- odchylek dat pomocí vzorce % T/C (% životaschopných ošetřeno/kontrola). Pro každou testovanou sloučeninu byla stanovena koncent20 race testované sloučeniny, při které se dosahuje T/C - 50% inhibice růstu, označovaná jako 1C_5O.

-43CZ 303045 B6

Tabulka 3 Uvádí hodnoty IC₅₀ stanovené testem HT29 pro řadu sloučenin podle vynálezu.

Sloučenina č.	HT-29 [IC50]
1	4,7 x 10'8
2	6,8 x 10-'u
3	3,5 x 10”
4	1,2 x 10'“
5	5,0 x 10'9
8	5,1 x IO’7
10	1,3 x IO’'
12	3,7 x 10·'
13	1,0 x 10’s
14	1,5 x 10’8
15	1,7 x IO’'
16	7,3 x IO’’0
17	6,3 x 10’11
18	8,8 x 10'9
22	6,4 x IO-'
24	2,8 x IO’*
27	3,7 x 10’8
28	4,9 x 10 e
29	3,6 x 10’8
30	6,1 x 10’s
31	2,0 x 10’’
32	8,5 x 10·'
33	1,2 x 10‘e
34	5,0 x 10’s

-44CZ 303045 B6

Tabulka 3 - pokračování

Sloučenina č.	HT-29 [ICsol
35	1,4 x 10·'
36	6,2 x 10·’
37	1,9 x IO-'
38	7,3 x 10
39	2,5 x 10”
40	5,6 x IO-'
41	7,3 x 10’e
42	3,4 x 10·'
43	5,9 x 10·
44	4,8 x 10’’
45	5,6 x 1O’B
46	7,2 x 10·'
47	2,3 x 10·β
48	2,5 x IO’“
49	8,8 x 1O’B
50	8,9 x 1O’B
51	4,6 x 10-
52	3,4 x 10·'
53	5,0 x 10’s
54	4,2 x 10’9
55	5,6 X 1O’B
57	2,5 x 10’“
58	6,3 x 10·Β
59	1,9 x 10·'
60	1,8 x 10’a

-45CZ 303045 B6

Tabulka 3 - pokračování

Sloučenina č.	HT-29 [ICso]
62	9,9 x 10’“
63	5,6 x 10’°
64	1,7 x 1O’e
65	9,7 x 10’“
66	3,4 x 10’'
67	3,4 x IO''
68	4,2 x IO''
70	7,1 x 10'“
72	1,2 x IO''
73	1,4 x 10'9
74	5,1 x 10’“
75	8,5 x 10’ř
76	2,3 x 10lu
77	7,2 X 10’9
78	4,3 x 10’9
79	1,7 x 10’e
80	6,7 x 10’“
81	1,3 x 10'7
82	1,1 x 10“
83	1,3 x 10’'
84	1,2 X 10°
85	9,5 x 10’“
90	9,3 x IO'10
91	8,3 x 1O’1U
92	1,5 x 10'“

-46CZ 303045 B6

Tabulka 3 - pokračování

Sloučenina č.	HT-29 [ICso]
93	1,8 x 10’®
94	3,0 x 10'®
95	1,1 x 10’®
96	1,7 X 10’s
97	3,2 x 10'“
98	6,0 x 10‘9
99	3,8 x 10 ®
100	2,3 x 10'®
101	2,1 x 10‘®
102	1,2 x 10’7
103	1,1 x W'
104	3,5 x 1O‘®
105	1,8 x 10’®
106	9,7 x IO’“
108	7,1 X 10’®

Metodika testů in vivo

Sloučeniny podle vynálezu mohou být dále testovány různými předklinickými testy na aktivitu in vivo, která je indikativní pro klinické použití. Tyto testy se provádějí s holými myšmi, kterým se transplantuje nádorová tkáň, výhodně lidského původu („xenograft“), jak je v tomto oboru io dobře známo. Testované sloučeniny jsou hodnoceny podle jejich protinádorové účinnosti, která se projeví po podání příslušné testované látky těmto myším, nesoucím xenograft.

Konkrétněji, lidské nádory, narostlé u holých athymických myší, mohou být transplantovány jinému zvířeti, přičemž se používají fragmenty nádoru, které mají hmotnost asi 50 mg. Den transplantace se označuje jako den 0. Šest až deset dní poté se myší ošetří testovanými sloučeninami, které se podávají jako intravenosní nebo intraperitoneální injekce, ve skupinách po 5 až 10 myších na každou dávku. Sloučeniny se podávají denně po dobu 5 dnů, 10 dnů nebo 15 dnů, při dávkách 10 100 mg/kg tělesné hmotnosti. Dvakrát týdně se měří průměr nádoru a tělesná hmotnost, Hmotnost nádoru se vypočítá z měřených tři kolmých rozměrů, a vzorce:

(délka x šířka²) /2 = hmotnost nádoru v mg

Střední hmotnosti nádorů se pak vypočítají pro každou ošetřenou skupinu a stanoví se pro každou z nich hodnoty T/C v poměru k neošetřeným kontrolním nádorům.

Sloučeniny uváděné jako příklady zde v popisu odpovídají následujícím číslům SEQ ID NO:

-47CZ 303045 B6

SEQ ID NO 1: sloučeniny 1-^4, 7, 9, 10, 12-19, 22-44, 46, 47, 49, 50, 54-59, 61-65, 67-108, 119-142, 144, 145, 147, 148, 150, 151, 153, 154, 156, 157, 159, 160, 162, 163, 165, 166, 168, 169, 171, 172, 174, 175;

SEQ ID NO: 2: sloučeniny 5, 6, 8-20, 45, 48, 51-53, 60, 66, 109-118, 143, 146, 149, 152, 155, 5 158, 161, 167, 170, 173; SEQ ID NO: 3: sloučenina 11; SEQ ID NO: 4: sloučenina 21.

Ekvivalenty

Odborníci v oboru rozpoznají nebo budou schopni uskutečnit pomocí pouhé rutiny experimenty, io které jsou ekvivalenty provedení podle vynálezu, který byl zde popsán. Tyto ekvivalenty jsou v rámci vynálezu a následujících nároků.

Claims (32)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Sloučenina obecného vzorce

   A-B-D-E-F-(G)_r—(K)_s-L, kde

   25 A je derivát prolinu obecného vzorce II_a, derivát α-aminokyseliny obecného vzorce IV_a, V_a, VI_a, VII_a nebo VlII_a nebo derivát 2-azabicyklo[2.2J]heptan-3-karboxylové kyseliny obecného vzorce IX_a nebo derivát α-aminokyseliny obecného vzorce X_a ου.

   35 kde m_a má hodnotu 1 nebo 2;

   -48CZ 303045 B6 kde n_a má hodnotu 0 až 3;

   io

   49CZ 303045 B6

   R_a je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný lineární, větvený nebo cyklický C,-C₃-alkyl;

   R^]3 je vodík, Ci-C₃-alkyl, fenyl nebo substituovaný fenyl; kde fenylové substituenty zahrnují s jeden nebo více atomů halogenu, Ci~C4-aIkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových nebo nitroskupin; nebo a R'_a společně tvoří propylenový můstek; a R²a, R\, R\ a R⁵a jsou každý nezávisle vodík, methyl, ethyl nebo propyl;

   io R‘_a je vodík, methyl, ethyl nebo propyl;

   X_a je hydroxy, methoxy, ethoxy nebo fluor, a

   Z_a je jednoduchá vazba nebo dvojná vazba,

   B je valylový, isoleucylový, allo-isoleucylový, norvalylový, 2-terc-butylglycylový nebo 2ethylglycylový zbytek; nebo zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce lib,

   R*b .R¹»

   X l'W·

   HN C ll o

   kde

   R'b je vodík, a R²b je methyl, ethyl, propyl, lineární nebo větvený butyl, cyklopropyl, alkoxyalkyl, kde alkoxy je methoxy nebo ethoxy a alkyl je methyl, ethyl nebo propyl; nebo 1 -methy 125 vinyl; nebo R*_b a R²b společně tvoří isopropylidenovou skupinu;

   D je N-alkylvalylový, N-alkyl-2-ethylglycyIový, N-alkyl-2-terc-butylglycylový, N—alkylnorleucylový, N-alkyl isoleucylový, N-alkyl-allo-isoleucylový nebo N-alkylnorvalylový zbytek; kde N-alkylová skupina je methyl nebo ethyl; nebo zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce II_d,

   R% Fi \Z bT >= (lid).

   I II

   R<i O

   35 kde

   R_d je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný C]-C₃-alkyi; R*_d je vodík; a R²d je methyl, ethyl, propyl, lineární nebo větvený butyl, cyklopropyl, methoxy methyl, 1-methoxyethyl nebo 1-methylvinyl; nebo R'_d a R²d společně tvoří isopropylidenovou skupinu; nebo zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce III_d,

   - 50CZ 303045 B6

   II o

   kde

   5 rid je 1 nebo 2; R³d je vodík, CiQalkyl nebo fluorem substituovaný Ci-C₃-alkyl; a X_d je vodík; nebo n_d je 1 a X_d je fluor, hydroxy, methoxy nebo ethoxy;

   E je prolylový, thiazolidinyl-4—karbonylový, homoprolylový, nebo hydroxyprolylový zbytek; nebo zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce II_e,

   II o

   15 kde n_e je 0, I nebo 2, R*_e je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný Ci^C,-alkyl: R²e a R³e jsou každý nezávisle vodík nebo methyl, ethyl nebo propyl; R\ je vodík, hydroxy, methoxy, ethoxy nebo fluor; a R⁵e je vodík nebo fluor; nebo n_e je I a R³C a R⁴C společně tvoří

   20 dvojnou vazbu; nebo n_e je 1 a R⁴C a R⁵C tvoří společně atom kyslíku vázaný dvojnou vazbou; nebo n_e je 1 nebo 2 a R^le a R²e společně tvoří dvojnou vazbu; nebo zbytek aminocyklopen tan karboxylové kyseliny obecného vzorce III_e, kde

   R¹.

   II o

   (I»,).

   -51 CZ 303045 B6

   Re je methyl nebo ethyl a R'_e je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný C]C₃-alkyl;

   F je prolylový, thiazolidinyl-4-karbonylový, homoprolylový nebo hydroxyprolylový zbytek; 5 nebo zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce II_f, io kde li o

   flW.

   nf je 0, 1 nebo 2, R^lf je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný Ci-C₃-alkyI; R²r a R³f jsou každý nezávisle vodík nebo methyl; R⁴f je vodík, hydroxy, methoxy, ethoxy nebo

   15 fluor; R⁵rje vodík nebo fluor; nebo nf je 1 a R³f a R⁴r společně tvoří dvojnou vazbu; nebo n_f je 1 a R⁴f a R⁵f tvoří společně atom kyslíku vázaný dvojnou vazbou; nebo n_f je 1 nebo 2 a R‘_f a R²f společně tvoří dvojnou vazbu; nebo zbytek 2- nebo 3-aminocyklopentankarboxylové kyseliny obecného vzorce Illf, (ilk).

   kde

   25 Rf je methyl, ethyl nebo propyl a R*_f je vodík nebo nesubstituovaný nebo fluorem substituovaný C|-C₃-alkyl; nebo N-alkylglycylový nebo N-al kýla lany lový zbytek; přičemž N-alkylovou skupinou je methyl nebo ethyl;

   G je zbytek «-aminokyseliny obecného vzorce II_g, (Hg)» kde

   - 52 CZ 303045 B6

   R^!g je vodík, methyl, ethyl nebo n-propyl a R²g je vodík, ethyl, isopropyl, terc-butyl, isobutyl, 2-methylpropyl, cyklohexylmethyl, benzyl, thiazolyl-2-methyI, pyridy 1-2-methyl, n~butyl, 2,2dimethylpropyl, naftylmethyl nebo n-propyl, fenyl nebo substituovaný fenyl, přičemž fenylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu, C₍-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, nitro nebo trifluormethylových skupin, nebo dioxomethylenovou skupinu; nebo R'_g a R²g, společně s α-uhlíkovým atomem, tvoří C5—C₆ kruh nebo C5 kruh s nakondenzováným benzenovým jádrem;

   K je a—aminokyselina obecného vzorce Il_k, kde

   R'_k je vodík, methyl, ethyl nebo n-propyl; a R²k je vodík, ethyl, isopropyl, terc-butyl, isobutyl, 2-methylpropyl, cyklohexylmethyl, benzyl, thiazoly 1-2-methyl, pyridyl-2-methyl, n-butyl, 2,2dimethylpropyl, naftylmethyl nebo n—propyl, fenyl nebo substituovaný fenyl, přičemž fenylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu, C i-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, nitro nebo trifluormethylových skupin, nebo dioxomethy lenovou skupinu; nebo R^lk a R²k, společně s α-uhlíkovým atomem, tvoří cyklopentanový kruh nebo cyklopentanový kruh s nakondenzovaným benzenovým jádrem;

   ras jsou nezávisle 0 nebo 1; a

   L je β-hydroxylaminová skupina obecného vzorce III

   ΌH₂

   Z CH

   OH (H«, kde

   R⁹i je atom vodíku nebo C|-Có-alkyl, arylová skupina nebo substituovaná arylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C_t-C₄alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin, dioxymethylenovou skupinu; a

   R¹⁰i je atom vodíku, methylová skupina nebo fenylová skupina, nebo

   L je aminoskupina obecného vzorce IVi,

   R^zi •N—CH ^H \

   -53 CZ 303045 B6 kde R²| a R\ jsou každý, nezávisle vodík nebo Cp-Cio-alkyl; nebo R²i, R⁴] a α-uhlík společně tvoří C₅-C₆-uhlíkový kruh, nebo L je hydrazidoskupina obecného vzorce V],

   M>.

   kde

   R¹²! je atom vodíku, lineární nebo větvená C]-C₈-alkylová skupina, C₃-Cs-cykloalkylová skupina, C₃-C₈-cykloalkyl-Ci-C₄-al kýlová skupina, arylová skupina, ary l-C_t-C₄-alky lová skupina nebo substituovaná arylová nebo ary l-C]-C₄-alky lová skupina, kde ary lově substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, dioxymethylenových skupin, nitroskupin; nebo heteroaryl-Ci-C₄-alkylová skupina, kde heteroarylová skupina je odvozená od imidazolu, pyrrolu, thiofenu, furanu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, 1,2,4— nebo 1,2,3-triazolu, oxadiazolu, thiadiazolu, isoxazolu, isothiazolu, pyrazinu, pyridazinu, pyrimidinu, pyridinu, benzofuranu, benzothiofenu, benzimidazolu, benzothiazolu, benzopyranu, indolu, isoindolu, indazolu nebo chinolinu a heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více Ci-C₆-alkýlových, hydroxy nebo fenylových skupin; a

   R¹¹] je vodíkový atom; nebo rje 1, sje 1 nebo oba r a s jsou 1, a Rⁿ i je lineární nebo větvená Ci~ Cg-alkylová skupina, C₃-C₈-cykloalkylová skupina, C₃-C₈-cykloalkyl-C|-C₄-alkylová skupina, aryl-C|-C₄-alkylová skupina, arylová skupina nebo substituovaná aryl-C_t-C₄-alkylová nebo arylová skupina; kde ary lově substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více Ci-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina, heteroaryl-Ci~C₄-aIkylová skupina nebo substituovaná heteroarylová nebo heteroaryl-C|-C₄-alkylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu; indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazoiu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více Ci-C₆-alkylových, hydroxy nebo fenylových skupin; nebo

   R i a R¹²i společně tvoří propylenový můstek nebo butylenový můstek a dále

   L představuje aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu obecného vzorce II _t

   w.

   kde

   R'i je atom vodíku, lineární nebo větvená, nasycená nebo nenasycená Ci-Cig-alkoxyskupina, substituovaná nebo nesubstituovaná aryloxyskupina, substituovaná nebo nesubstituovaná arylC [-C₆-alkoxyskupina, a substituovaná nebo nesubstituovaná ary loxy-C|-C₆-alkoxy skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C_l-C₄-alkylových, methoxy, ethoxy, trifluormethylových, dioxymethylenových skupin nebo nitroskupin; nebo heteroanl C| C,, -alkoxyskupina; a

   -54CZ 303045 B6

   R?[ je atom vodíku, lineární nebo větvená Ci-C|^-alkylová skupina, lineární nebo větvená CiC_t8-alkenyÍová skupina, C₃-C₁₀-cykloaIkylová skupina, arylová skupina nebo substituovaná arylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C|-C₄~alkylových, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, kyano-- nebo nitroskupin, Ci-C7-alkoxykarbonylovou skupinu, dioxymethy lenovou skupinu, C|-C7-alkylsulfonylovou skupinu, aminoskupinu nebo C|-C₆-dialkylaminoskupínu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C]-C₆-alkylových, hydroxylových nebo fenylových skupin, dále

   L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu svrchu uvedeného obecného vzorce II), ve kterém

   R²i je jednovazný radikál obecného vzorce IV_r,

   -(CH^-Z, (IV_r) kde bi je 2, 3 nebo 4 a Z| je formylová, aminokarbonylová, hydrazinokarbonylová, cyklická acetalová, cyklická thioacetalová, acyklická acetalová nebo acyklická thioacetalová skupina, dále

   L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu svrchu uvedeného obecného vzorce lij, ve kterém

   R³i je skupina obecného vzorce II_r, (Ur) kde ai je 0, 1, 2, 3, 4 nebo 5; R³| je methyl, ethyl, lineární propyl nebo isopropyl; R⁴| je nasycený nebo částečně nenasycený karbocyklický systém zahrnující od 3 do 10 atomů uhlíku, arylová skupina nebo substituovaná arylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C|-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethy lenovou skupinu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4— nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyrazidinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C|-C₆-alkyIových, hydroxy nebo fenylových skupin, dále

   L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu svrchu uvedeného obecného vzorce II], ve kterém

   R², je skupina obecného vzorce III_r,

   -(CH₂)r-Wi-R⁵, (III_r)

   -55CZ 303045 B6 kde

   W, je N(R⁶,) skupina, atom kyslíku nebo atom síry, lV i a R^ói jsou každý, nezávisle atom vodíku nebo C|- C₄ alkylová, C^-Cj-cykloalkýlová, arylová, arylmethylová, substituovaná arylová nebo substituovaná arylmethylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C|-C₄~alkýlových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenskupinu;

   io nebo R⁶] je Ci-CiR-alkanoylová skupina nebo benzoylová skupina, dále

   L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu svrchu uvedeného obecného vzorce II _h ve kterém i? R², je skupina obecného vzorce V_r,

   O —(CHáb—N R⁷, kde bi je 2, 3 nebo 4; a

   R⁷i je polyglykolová skupina obecného vzorce -O-(CH2CH2O)dr~CH3, kde di je mezi 2 a 4 nebo mezi 40 a 90; nebo dále

   L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu svrchu uvedeného obecného vzorce lh, ve kterém

   8 · a R i je atom vodíku nebo C|-C₄ alkanoylová, C|-C₄-alkýlová, benzoylová nebo benzylová skupina; a dále ve svrchu uvedené sloučenině obecného vzorce A-B-D-E-F-(G)_r-(K)_s-L, kde A je derivát a aminokyseliny obecného vzorce IV_a, V_a, VI_a, VII_a nebo VIII_a, jak je definován svrchu a B, D, E, F, G, K, r a s mají svrchu definovaný význam,

   - 56 CZ 303045 B6

   L je také alkoxy—, thioalkoxy-, aminoxy— nebo oximatoskupina, které jsou vybrány ze souboru, kde

   - L je jednovazný radikál obecného vzorce -W-R^,3b kde

   W je kyslík nebo síra;

   R¹³i je C₃-Cio-cykloalkyl, C₂-Ci₆-alkenylmethyl s lineárním nebo větveným řetězcem, C|-C_I6alkylová nebo halogenem substituovaná C]-Ci₆-alkylová skupina nebo

   R^I3i je jednovazný radikál obecného vzorce -(CH2)c-R^l4b e je 1, 2 nebo 3 a R¹^ je nasycená nebo částečně nenasycená C₃-C₎₀-karbocyklická skupina; nebo

   R¹³i je jednovazný radikál obecného vzorce -[CH₂-CH=C(CH₃)-CH2]r-H, a f je 1, 2, 3 nebo 4; nebo

   R^1ji je jednovazný radikál obecného vzorce -[CH2-CH2-O]_g-CH₃, a g je 1, 2, 3,4 nebo 5; nebo

   R^t3i je jednovazný radikál obecného vzorce-(CH₂)h-X, kde h je 0, 1, 2 nebo 3, X je arylová skupina nebo substituovaná arylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C]-C₄-alky lových skupin, methoxy, ethoxy, trifluoromethylových skupin, nitroskupín nebo dioxymethy lenovou skupinu; nebo X znamená heteroarylovou skupinu nebo substituovanou heteroarylovou skupinu odvozenou od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyrídazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více Ci-Có-alkylových, hydroxy nebo fenylových skupin, aryl-Ci-C₄ alkylovou skupinu nebo heteroaryl—C]-C₄-a I kýlovou skupinu; nebo

   R¹³i je jednovazný radikál obecného vzorce -(CH2)b-W|-R⁵|, Wt je atom kyslíku, atom síry nebo skupina NR⁶b b je 2, 3 nebo 4; R^Si je nasycený nebo částečně nenasycený karbocyklický systém, který obsahuje od 3 do 10 atomů uhlíku, arylová nebo substituovaná arylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C|-C4-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifl uormethy lových skupin, nitroskupín nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazalu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzoth iazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C|-C6-alkýlových, hydroxy nebo fenylových skupin; R⁶] je atom vodíku nebo C|-C4-alkýlová, Ci-Cr-cykloalkylová, Cj-Ci»—alkanoylová, benzoylová, arylová nebo arylmethylová skupina nebo substituovaná arylová nebo arylmethylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více Ci-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupín nebo dioxymethylenovou skupinu;

   - L je aminoxy skupí na obecného vzorce -O-N(R¹⁵i)(R¹⁶i), kde R^I5i a R^,6i jsou každý, nezávisle atom vodíku, lineární nebo větvená Cj-Cj-alkylová skupina, halogenem substituovaná lineární nebo větvená C_t-Ca-alkylová skupina, C₃-C8-cykloalkýlová skupina, C₃-C₈-cykloalkyl-C|-C₄alkylová skupina, arylová skupina, aiyl-C]-C₄—alkylová skupina nebo substituovaná arylová nebo ary 1-C]-C₄_alkylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C_l-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifl uormethy lových skupin, nitroskupín nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina, heteroaryl-C]—C₄alkylová skupina nebo substituovaná heteroarylová nebo heteroaryl-C j-C₄-alkylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu,

   -57CZ 303045 B6 pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C|-C₍,al kýlo vých, hydroxy nebo fenylových skupin; nebo R¹⁵j a R^lf>| společně s atomem dusíku tvoří heterocykličkou kruhovou strukturu zahrnující 5, 6 nebo 7 atomů;

   - L je oximatoskupina obecného vzorce -O-N=C(R^I5|)(R¹⁶,), kde R^,5j a R¹⁶| jsou každý, nezávisle atom vodíku, lineární nebo větvená Ci T/g-alkýlová skupina, halogenem substituovaná lineární nebo větvená Cj-Ce-alkylová skupina, C^-Cg-cykloalkylová skupina, C₃-Cg-cykloalkyi-C,-C₄-alkyiova skupina, arylová skupina, aryl-C|^C₄-alkýlová skupina nebo substituovaná arylová nebo aryl-Ci-C₄-alkýlová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více Ci-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C_t-C₆-alkylových, hydroxy nebo fenylových skupin; nebo R¹⁵i a R¹⁶, tvoří společně s atomem uhlíku cyklický systém se 3 až 7 atomy uhlíku, přičemž tento cyklický systém může být dále nakondenzován k aromatickému cyklickému systému, přičemž ve svrchu uvedených definicích skupiny L „aryl“ nebo „arylová skupina“ znamená vždy fenyl nebo naftyl či fenylovou nebo naftylovou skupinu;

   s podmínkou, že L může představovat pouze aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu obecného vzorce IVi pouze v případě, že alespoň jeden z obecných symbolů r a s je roven 1.
2. 2. Sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce

   A-B-D-E-F-(G)_r—(K)_s-L, kde A je derivát α-aminokyseliny obecného vzorce IV_a, V_a, VI_a, VII_a nebo VlII_a, jak je definován v nároku 1,

   B, D, E, F, G, K., r a s jsou jako je definováno v nároku l a

   L je alkoxy- thioalkoxy-, aminoxy- nebo oximatoskupina, které jsou vybrány z

   - L je jednovazný radikál obecného vzorce -W-R¹³i, kde

   W je kyslík nebo síra;

   R¹³] je C₃-C₁₀-cykloalkyl, C₂-C|_Ď-alkenylmethyl s lineárním nebo větveným řetězcem, Cr^Cióalkylová nebo halogenem substituovaná Ci^C_]6-alkylová skupina nebo

   Rⁱ³i je jednovazný radikál obecného vzorce -(CH2)e—R¹⁴], e je 1,2 nebo 3 a R^l4i je nasycená nebo částečně nenasycená C3-Cio-karbocyklická skupina; nebo

   R¹³i je jednovazný radikál obecného vzorce -[CH2-CH-C(CH₃)-GH2]f-H, a f je 1, 2, 3 nebo 4; nebo

   R^{i 3}] je jednovazný radikál obecného vzorce -[CH2-CH₂-O]_g-CH₃, a g je 1, 2, 3, 4 nebo 5; nebo

   R^,3i je jednovazný radikál obecného vzorce -(CH₂)h-X, kde h je 0, 1, 2 nebo 3, X je arylová skupina nebo substituovaná arylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více

   -58CZ 303045 B6 atomů halogenu nebo jednu nebo více C]-C₄-alky lových skupin, methoxy, ethoxy, trifluoromethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; nebo X znamená heteroarylovou skupinu nebo substituovanou heteroarylovou skupinu odvozenou od imidazolu. isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnuji jednu nebo více Ci-C₆-alkylových, hydroxy nebo fenylových skupin, aryl-Ci-C₄ alkylovou skupinu nebo heteroaryl-C |-C₄-alky lovou skupinu; nebo

   R'\ je jednovazný radikál obecného vzorce -CCH₂)b-W]-R⁵|, W] je atom kyslíku, atom síry nebo skupina NR^ót, b je 2, 3 nebo 4; R⁵t je nasycený nebo částečně nenasycený karbocyklický systém, který obsahuje od 3 do 10 atomů uhlíku, arylová nebo substituovaná arylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C]-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethy lových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3triazalu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C|-C₆-alkýlových, hydroxy nebo fenylových skupin; R⁶i je atom vodíku nebo C_t-C₄-alkylová, Ci-Cr-cykloalkylová, Ci-Cis-alkanoylová, benzoylová, arylová nebo arylmethylová skupina nebo substituovaná arylová nebo arylmethylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více Ci-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu,

   - L je aminoxyskupina obecného vzorce -O-N(R¹⁵!)(R¹⁶i), kde R¹⁵| a R¹⁶i jsou každý, nezávisle atom vodíku, lineární nebo větvená Ci-Cy~alkylová skupina, halogenem substituovaná lineární nebo větvená Ci-Cg-alkylová skupina, C3-Cg-cykloalkylová skupina, C3-Cg-+:ykloalkyt-Ci-C4alkylová skupina, arylová skupina, aryi-C|-C4-alkylová skupina nebo substituovaná arylová nebo aryl-Ci-C4-aIkýlová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C]~C4-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluoromethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina, heteroarylCi-C4-alkylová skupina nebo substituovaná heteroarylová nebo heteroaryl-C i-C4—alkylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4-nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více Ct-CŘ-alkylových, hydroxy nebo fenylových skupin; nebo R¹⁵t a R^ló( společně s atomem dusíku tvoří heterocyklickou kruhovou strukturu zahrnující 5, 6 nebo 7 atomů,

   - L je oximatoskupína obecného vzorce -O-N-C(R^l5i)(Rⁱ⁶|), kde R¹⁵[ a R^l\ jsou každý, nezávisle atom vodíku, lineární nebo větvená Ci-Cg-alkylová skupina, halogenem substituovaná lineární nebo větvená Cj-C«- alkylová skupina, C₃-C8-cykloalkytová skupina, C₃-C₈-cykloalkyl-Ci-C₄-alkylová skupina, arylová skupina, aryl-Ci-C₄-alkylová skupina nebo substituovaná arylová nebo ary l-C|-C₄-al kýlová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více Ci-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethy lových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenovou skupinu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, isoxazolu, isothiazolu, thiazolu. oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4— nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzofuranu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyridazinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více Ci-C₆-alkylových, hydroxy nebo fenylových skupin; nebo R^t5i a R^l6| tvoří společně s atomem uhlíku cyklický systém se 3 až 7 atomy uhlíku, přičemž tento cyklický systém může být dále nakondenzován k aromatickému cyklickému systému.

   -59CZ 303045 B6 přičemž ve svrchu uvedených definicích skupiny L „aryl“ nebo „arylová skupina“ znamená vždy fenyl nebo nafty l či fenylovou nebo nafty lovou skupinu.
3. 3, Sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce

   A__B-D-E-F-(G)_r-<K)_s-L, kde

   A je derivát α-aminokyseliny obecného vzorce Il_a, IV_a, V_a, VI_a, VII_a, VlII_a, IX_a nebo X_a, jak je definován v nároku 1,

   B, D, E, F, G a K jsou jako je definováno v nároku 1,

   L je jak je definováno v nároku 1 nebo 2, r a sjsou každý nezávisle 0 nebo 1; přičemž alespoň jeden z r a s je 1.
4. 4. Sloučenina podle nároku 1 nebo 3, kde A je derivát prolinu obecného vzorce Ií_a; R_a je vodík, methyl, ethyl, lineární propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluorethyl, 2,2,2-trifluorethyl, 1-fluormethyl-2-fluorethyl nebo l-methyl-2-fluorethyl; R*_a je vodík, methyl, ethyl, propyl, fenyl nebo substituovaný fenyl, kde fenylové substituenty obsahují jednu nebo více C]-C₄-alkylových skupin, methoxyskupin, ethoxyskupin, trifluormethylových skupin nebo nitroskupin; nebo R_a a R'_a společně tvoří propylenový můstek; a R²a, R³a, R⁴a a R⁵a jsou každý nezávisle vodík nebo methyl.
5. 5. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde A je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce IV_a, kde R⁷a je methyl, ethyl nebo isopropyl; a R_a je vodík, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluorethyl, 2,2,2-trifluorethyl, l-fluormethyl-2-fluorethyl nebo 1methyI-2-fluorethyl.
6. 6. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde A je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce V_a, kde R⁷a je methyl, ethyl nebo isopropyl a R_a je vodík, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluorethyl, 2,2,2-trifluorethyl, l-fluormethyl-2-fluorethyl nebo 1-methyl2-fluorethyl.
7. 7. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde A je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce VI_a, kde R_a je vodík, methyl, ethyl, lineární propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluorethyl,

   2,2,2-trifluorethyl, l-fluormethyl-2-fluorethyl nebo l-methyl-2-fluorethyl; R‘_a je vodík, methyl, ethyl, propyl, fenyl nebo substituovaný fenyl, kde fenylové substituenty obsahují jednu nebo více C|-C₄-alkylových skupin, methoxyskupin, ethoxyskupin, trifluormethylových skupin nebo nitroskupin; nebo R_a a R'_a společně tvoří propy lenový můstek; a X_a je hydroxy, methoxy nebo ethoxyskupina nebo atom fluoru.
8. 8. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde A je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce VII_a, kde R_a je vodík, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluorethyl, 2,2,2trifluorethyl, l-fluormethyl-2-fluorethyl nebo l-methyl-2-fluorethyl; R*_a je vodík, methyl, ethyl, propyl, fenyl nebo substituovaný fenyl, kde fenylové substituenty obsahují jednu nebo více Cj-C,-alkylových skupin, methoxyskupin, ethoxyskupin, trifluormethylových skupin nebo nitroskupin; nebo R_a a R^la společně tvoří propylenový můstek; a R²a, R³a, R⁴a a R⁵a jsou každý, nezávisle vodík nebo methyl.

   -60CZ 303045 B6
9. 9. Sloučenina podle jednoho z nároků I, 2 nebo 3, kde A je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce VIII_a, kde R_a je vodík, methyl, ethyl, lineární propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluorethyl,

   2,2,2-trifluorethyl, 1-fluormethy 1-2-fluorethyl nebo 1-methy 1-2-fluorethyl.

   5
10. 10. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde A je zbytek aminokyseliny obecného vzorce IX_a, kde R_a je vodík, methyl, ethyl, lineární propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluorethyl,

    2,2,2-trifluorethyl, 1-fluormethy 1-2-fluorethyl nebo 1 -methy 1-2-fluorethyl.
11. 11. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde A je zbytek α-aminokyseliny obecného io vzorce X_a, kde R⁷a je methyl, ethyl nebo isopropyl a R_a je vodík, methyl, ethyl, lineární propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluoroethyl, 2,2,2-trifluorethyl, 1-fluormethy 1-2-fluorethyl nebo 1methy 1-2-fl uorethy I.
12. 12. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde B je zbytek obecného vzorce II_b, kde

    15 R^lb je vodík a R²b je cyklopropyl, n-butyl, isobutyl, terc-butyl, methoxy methyl, 1-methoxy ethyl nebo 1-methy lvinyl.
13. 13. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde D je N-alkylvalylový zbytek, N-alkyl2-ethylglycylový zbytek, N-alkyl-2-terc-butylglycylový zbytek, N-alkylnorleucylový zbytek,

    2o N-alkylisoleucylový zbytek, N-alkyl-allo-isoleucylový zbytek nebo N-alkylnorvalyl zbytek, kde N-alkylová skupina je methyl nebo ethyl.
14. 14. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde D je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce IU kde R^ld je vodík a R²d je cyklopropyl, methoxymethyl, l-methoxyethyl nebo 125 methylvinyl.
15. 15. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde D je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce III_d, kde R³d je vodík, methyl, ethyl, lineární propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluorethyl.

    2,2,2-trifluorethyl, 1-methy 1-2-fluorethyl nebo 1-fluormethy 1-2-fl uorethy I; a X_d je atom vodí30 ku; nebo n_d je 1 a X_d je atom fluoru nebo hydroxy, methoxy nebo ethoxyskupina.
16. 16. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde E je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce II_C, a R^!e je vodík, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluorethyl, 2,2,2trifluorethyl, 1 -methy 1-2-fl uorethy 1 nebo l-fluormethyl-2-fluorethyl; R²e a R³e jsou každý,

    35 nezávisle vodík nebo methyl; R⁴e je atom vodíku nebo hydroxy, methoxy nebo ethoxyskupina; R⁵e je vodík nebo fluor; nebo n_e je 1 a R³e a R⁴e společně tvoří dvojnou vazbu; nebo n_e je 1 a R⁴C a R⁵e tvoří společně atom kyslíku vázaný dvojnou vazbou; nebo n_c je 1 nebo 2 a R'_e a R²C společně tvoří dvojnou vazbu.

    40
17. 17. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde E je zbytek aminocyklopentankarboxylové kyseliny obecného vzorce III_e, kde Reje methylová nebo ethylová skupina a R*_e je vodík nebo methyl, ethyl, lineární propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2-fluorethyl, 2,2,2-trifluorethyl, 1methy 1-2-fluorethyl nebo 1 -fluormethy 1-2-fl uorethy 1.

    45
18. 18. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde F je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce Uf, kde R^lf je atom vodíku nebo methyl, ethyl, lineární propyl, isopropyl, cyklopropyl, 2fluorethyl, 2,2,2-trifluorethyl, 1-methy 1-2-fluorethyl nebo l-fluormethyl-2-fluorethyl; R²f je atom vodíku nebo methylová skupina; R³f je atom vodíku nebo methylová skupina; R⁴f je atom vodíku, hydroxy, methoxy, ethoxy nebo atom fluoru; R⁵fje atom vodíku nebo atom fluoru; nebo

    50 nf je 1 a R³f a R⁴f společně tvoří dvojnou vazbu; nebo n_f je 1 a R⁴f a R\ tvoří společně atom kyslíku vázaný dvojnou vazbou; nebo n_f je 1 nebo 2 a R^k a R'_f společně tvoří dvojnou vazbu.
19. 19. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde F je zbytek 2- nebo 3-aminocyklopentankarboxylové kyseliny obecného vzorce II If, kde R_f je methyl nebo ethyl a R*f je vodík.

    -61 CZ 303045 B6 methyl, ethyl, lineární propyl, isopropy 1, cyklopropyl, 2-fluorethyl, 2,2,2-trifluorethyl, 1methyl-2-fluorethyl nebo l-fluormelhyl-2-fluorethyl.
20. 20. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde F je N-alkylglycylový zbytek nebo Nalkylalanylový zbytek a N-alkylová skupina je methyl nebo ethyl.
21. 21. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde G je zbytek α-aminokyseliny obecného vzorce II_g, kde R^lg je vodík, methyl, ethyl nebo n-propyl, a R²g je vodík, ethyl, isopropyl, tercbutyl, isobutyl, 2-m ethyl propyl, cyklohexylmethyl, benzyl, thiazolyl-2-methyl, pyridyl-2methyl, n-butyl, 2,2-dimethylpropyl, naftyImethyl, n-propyl, fenyl nebo substituovaný fenyl; kde fenylové substituenty jsou jeden nebo více atomů halogenu, jedna nebo více C]-C₄alkylových, methoxy, ethoxy, nitro nebo trifluormethylových skupin nebo dioxomethylenová skupina.
22. 22. Sloučenina podle jednoho z nároků 1, 2 nebo 3, kde K je α-aminokyselina obecného vzorce ll_k, kde R^lk je vodík, methyl, ethyl nebo lineární propyl, a R²k je vodík, ethyl, isopropyl, tercbutyl, isobutyl, 2-methylpropyl, cyklohexylmethyl, benzyl, thiazolyl-2-methyl, pyridyl-2methyl, lineární butyl, 2,2-dimethylpropyl, naftylmethyl, n-propyl, fenyl nebo substituovaný fenyl, kde fenylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C|-C4-alky lových, methoxy, ethoxy, nitro nebo trifluormethy lových skupin nebo R'_k a R²k tvoří dohromady s α-uhlíkovým atomem cyklopentanový kruh nebo cyklopentanový kruh s nakondenzovaným benzenovým jádrem.
23. 23. Sloučenina podle nároku 1, ve kterém L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu obecného vzorce ll_h kde R²] je skupina obecného vzorce II_r,

    -C-(CHj)—R*,

    I, κ I (Ur) kde ai je 0, 1, 2, 3, 4 nebo 5; R³, je methyl, ethyl, lineární propyl nebo isopropyl; R⁴) je nasycený nebo částečně nenasycený karbocyklický systém zahrnující od 3 do 10 atomů uhlíku, arylová skupina nebo substituovaná arylová skupina, kde ary lově substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C]-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin nebo dioxy methy lenovou skupinu; heteroarylová skupina nebo substituovaná heteroarylová skupina odvozená od imidazolu, tsoxazolu, isothiazolu, thiazolu, oxazolu, pyrazolu, thiofenu, furanu, pyrrolu, 1,2,4- nebo 1,2,3-triazolu, pyrazinu, indolu, benzolů ránu, benzothiofenu, indolu, isoindolu, indazolu, chinolinu, pyrazidinu, pyrimidinu, benzimidazolu, benzopyranu, benzothiazolu, oxadiazolu, thiadiazolu nebo pyridinu, kde heteroarylové substituenty zahrnují jednu nebo více C]-C₆-al kýlových, hydroxy nebo feny lových skupin, přičemž ve svrchu uvedených definicích skupiny L „aryl“ nebo „arylová skupina“ znamená vždy fenyl nebo naftyl či fenylovou nebo naftylovou skupinu.
24. 24. Sloučenina podle nároku 1, ve kterém L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu obecného vzorce II,, kde R²] je skupina obecného vzorce III_r,

    -62 CZ 303045 B6

    4CH₂)₂-W_i-R⁵i (III_r) kde

    Wi je N(R⁶|) skupina, atom kyslíku nebo atom síry,

    R⁵i a R⁶] jsou každý, nezávisle atom vodíku nebo Ci-C₄-alkylová, C₃-Cτ-cykloalkylová, arylová, arylmethylová, substituovaná arylová nebo substituovaná arylmethylová skupina, kde arylové substituenty zahrnují jeden nebo více atomů halogenu nebo jednu nebo více C_t-C₄-alkylových skupin, methoxy, ethoxy, trifluormethylových skupin, nitroskupin nebo dioxymethylenskupinu; nebo R⁶| je Ci-Cjg-alkanoylová skupina nebo benzoylová skupina, přičemž ve svrchu uvedených definicích skupiny L „aryl“ nebo „arylová skupina“ znamená vždy fenyl nebo nafty 1 či fenylovou nebo nafty lovou skupinu.
25. 25. Sloučenina podle nároku 1, ve kterém L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu obecného vzorce Ift, kde R²i je skupina obecného vzorce V_r,

    O il ’—(CHářpN R i kde bi je 2, 3 nebo 4; a

    R⁷, je polyglykolová skupina obecného vzorce -O- <CH?CH₂O)d|-C'H₄, kde dj je mezi 2 a 4 nebo mezi 40 a 90.
26. 26, Sloučenina podle nároku 1, ve kterém L znamená aminoskupinu nebo substituovanou aminoskupinu obecného vzorce IIj, kde R²] je skupina obecného vzorce VI_n a R⁸] je atom vodíku nebo C_t-C₄ alkanoylová, Ci-C₄-alkylová. benzoylová nebo benzylová skupina.

    -63CZ 303045 B6
27. 27. Sloučenina podle nároku 3, kde L je oximatoskupina obecného vzorce -O-N=C(R^l5i)(R^lť’i), kde R¹⁵, a R^Íť>( tvoří společně s atomem uhlíku cyklický systém se 3 až 7 atomy uhlíku, přičemž tento cyklický systém může být dále nakondenzován k aromatickému cyklickému systému, přičemž cyklický systém je vybrán ze souboru sestávajícího z

    -O θ^Μ ·'o io
28. 28. Sloučenina podle jednoho z nároků 1 nebo 3, kde

    A je derivát aminokyseliny vybraný ze skupiny zahrnující N-alkyl-D-prolyl, N-alkyl-L-prolyl, N-alkyl-D-piperidin-2-karbonyl a N-alkyl-L-piperidin-2-karbonyl, kde alkyl je methyl, ethyl nebo isopropyl; a

    B je valyl, isoleucyl nebo 2-terc-butyl-L-gIycyl.
29. 29. Sloučenina podle nároku 1, obecného vzorce

    20 A-B-D-E-F-L, kde

    A je derivát aminokyseliny vybraný ze skupiny zahrnující D-N-methylpiperidin-2-karbonyl,

    25 L-N-methyípiperidin-2-karbonyl, N-methyl-L-p roly 1. N -methyl-L thiazolidin-4-karbonyk L -prolyL L-piperidín-2-karbonyl, N-proIyl-D-piperidin-2-karbonyl, D-piperidin-2-karbonyl, N-ethyl-D-piperidin-2-karbonyl, N-isopropy l--D--piperidin-2-karbony 1, D-prolyl, N-methylD-proIyl, I -aza-[3,3,0]bicyk1ooktyl-5-karbonyl, D.L-l-aminoindan--i -karbonyl, 2-<N,Ndimethylamino)indan-2-karbonyl, 5- (N.Ndimethvlamino)-5,6,7,8-tetrahydronaftalen-5- 30 karbonyl, N-methylpiperidin-2-karbonyl, N-methylazetidin-2-karbonyl, N-ethylazetidin-2karbonyl, N-isopropylazetidin-2-karbonyl, 1 -(N,N-di methy lam i no)cyklohexy 1-1 -karbonyl a 1(N,N-dimethylamino)cyklopentyl-l -karbonyl;

    B je zbytek aminokyseliny vybraný ze skupiny zahrnující valyl, isoleucyl a 2-terc-butylglycyl;

    -64CZ 303045 B6

    D je zbytek aminokyseliny vybraný ze skupiny zahrnující N-methyl vály 1, N-methyl i soleucyl a N-methyl-L-2-terc-butylglycyl;

    5 E a F jsou každý zbytek aminokyseliny nezávisle vybraný ze skupiny zahrnující prolyl, thiaprolyl, homoprolyl, hydroxyprolyl, 3,4-didehydroprolyl, 4-fluorprolyl a 3-methylprolyl; a

    L je alkoxyskupina nebo aminoskupina obecného vzorce R^-N-R²!, kde R¹] a R²j jsou nezávisle vybrané ze skupiny zahrnující vodík, alkoxy, hydroxy, alkyl a alkylaryl.
30. 30. Sloučenina podle nároku 29, obecného vzorce

    A-B-D-E-F-L,

    15 kde

    A je derivát aminokyseliny vybraný ze skupiny zahrnující D-N-methylpiperidin-2-karbonyl. N-ethyl-D-piperidin-2-karbonyl, N-isopropyl-D-piperidin-2-karbonyl, N-methyl-D-prolyl, l-aza-[3,3,0]bicyk!ooktyl-5-karbonyl, D.Ll-aminoindan-1 -karbonyl, 5-(N,N-dimethyl20 amino)-5,6,7,8-tetrahydronaftaIen-5-karbonyI, N-methyípiperidin-2-karbonyl, N-methyl D,L-prolyl, N-ethylazetidin-2-karbonyl, N-isopropylazetidin-2-karbonyl, 1-(N,N-dimethy 1amino)cyklohexyl-l-karbonyl a l-(N,N-dimethyIamino)cyklopentyl-l-karbonyl;

    B jevalyl;

    D je N-methylvalyl;

    E a F jsou každý prolyl; a

    30 L je a Ci-C₆-alkoxyskupina nebo aminoskupina obecného vzorce R'_r-N-R²r, kde R^lr a R²r jsou nezávisle vybrány ze souboru zahrnujícího vodík, C|-C₆-alkoxy, hydroxy, lineární, cyklický nebo rozvětvený C|-C|₀-alkyl a fenylalkyl.
31. 31. Použití sloučeniny jak je definována v jakémkoli z nároků 1 až 30 pro výrobu léčiva pro

    35 léčení rakoviny u savců.
32. 32. Použití podle nároku 31, kde savcem je člověk.