CZ301944B6 - Zpusob enzymatického delení enantiomeru 3[R]- a 3[S]-hydroxy-1-methyl-4-[2,4,6-trimethoxyfenyl]-1,2,3,6-tetrahydropyridinu, poprípade esteru karboxylových kyselin - Google Patents

Zpusob enzymatického delení enantiomeru 3[R]- a 3[S]-hydroxy-1-methyl-4-[2,4,6-trimethoxyfenyl]-1,2,3,6-tetrahydropyridinu, poprípade esteru karboxylových kyselin Download PDF

Info

Publication number
CZ301944B6
CZ301944B6 CZ20003223A CZ20003223A CZ301944B6 CZ 301944 B6 CZ301944 B6 CZ 301944B6 CZ 20003223 A CZ20003223 A CZ 20003223A CZ 20003223 A CZ20003223 A CZ 20003223A CZ 301944 B6 CZ301944 B6 CZ 301944B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
carbon atoms
formula
compounds
substituted
Prior art date
Application number
CZ20003223A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ20003223A3 (cs
Inventor
Holla@Wolfgang
Original Assignee
Sanofi - Aventis Deutschland GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanofi - Aventis Deutschland GmbH filed Critical Sanofi - Aventis Deutschland GmbH
Publication of CZ20003223A3 publication Critical patent/CZ20003223A3/cs
Publication of CZ301944B6 publication Critical patent/CZ301944B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/62—Carboxylic acid esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/68—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D211/72—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/74—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C12P41/001—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by metabolizing one of the enantiomers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/814—Enzyme separation or purification
    • Y10S435/816—Enzyme separation or purification by solubility

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)

Abstract

Zpusob prípravy opticky cistých sloucenin 3/R/- a 3/S/-hydroxy-1-methyl-4-/2,4,6-trimethoxyfenyl/-1,2,3,6-tetrahydropyridinu, poprípade esteru karboxylových kyselin, stereospecifickou premenou smesí enantiomeru pomocí enzymu.

Description

Způsob enzymatického dělení enantiomerů 3/R/- a 3/S/-hydroxy-l-methyl-^t-/2,4,6-trimethoxyfenyl/-l,2,3,6-tetrahydropyridinu, popřípadě esterů karboxylových kyselin
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu přípravy opticky čistých sloučenin obecného vzorce I stereospecifickou přeměnou směsí enantiomerů pomocí enzymu.
Dosavadní stav techniky
3/S/-, popřípadě 3/R/-hydroxy-l-methyl-4-/2,4,6-trimethoxyfenyl/-l ,2,3,6-tetrahydropyridin/sloučeniny obecného vzorce I, kde R značí atom vodíku/, popřípadě jeho estery /sloučeniny obecného vzorce I, kde R značí zbytek COR1/jsou ústředními stavebními kameny či předstupni syntézy flavopiridolu /BYR 1275 nebo L 86 8275/, popsané v patentové přihlášce HMR 98/L 001/ ,/působ přípravy /-/cis-3-hydroxy-l-methyl-4/R/-/2,4,6-trimethoxyfenyl/piperidinu“/, prvního účinného inhibitoru protein-kinázy /viz například Sedlaček, Hans Herald; Czech, Joerg; Naik, Ramachandra; Kaur, Gurmeet; Worland, Peter, Losiewicz, Michael; Parker,
Bernard; Carlson, Bradley; Smith, Adaline; se sp. Flavopiridol /L 86 8275; NSC 649890/, a new kinase inhibitor for tumor therapy. Int. J. Oncol. /1996/, 9/6/, 1143-1168; nebo Czech, Joerg; Rottmann, Dieter; Naft, Ramachandra; Sedlaček, Rans-Harald; Antitumoral activity of flavone L 86 8275. Int. J. Oncol. /1996/, 6/1/,31-36.
Štěpení racemátů, popřípadě dělení enantiomerů sloučenin obecného vzorce I není známé.
Nyní bylo nalezeno, že sloučeniny obecného vzorce I lze získat ze směsí enantiomerů v opticky čisté formě enzymatickým štěpením esterů /hydrolýzou nebo aíkoholýzou/.
Podstata vynálezu
Předmětem tohoto vynálezu je tedy způsob kinetického štěpení racemátů sloučenin obecného vzorce I
který se vyznačuje tím, že se směsi enantiomerů, popřípadě racemické směsi sloučenin obecného vzorce I, ve kterém
R značí zbytek. COR1, ve kterém R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 16 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až 16 atomy uhlíku, popřípadě alkinylovou skupinu se 3 až 16 atomy uhlíku, C„H2n-cykloalkylovou skupinu, kde n je I až 6, které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor, brom, jod, trifluormethylovou skupinu, kyanovou sku-1 CZ 301944 B6 pinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, methoxylovou skupinu, ethoxylovou skupinu a skupinu COOR2, kde R2 znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a alkenylovou skupinu se 2 až 4 atomy uhlíku, které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor, brom nebo tri fluormethy lovou skupinu, podrobují v homogenních nebo nehomogenních, vodných, vodně-organických nebo organických prostředích, za přítomnosti enzymu, například lipázy nebo esterázy, například z jater nebo pankreatu savců, nebo mikrobiálního původu, jako je například Candida, Pseudomonas a Aspergilio lus, popřípadě proteázy, například z Bacillus, stereoselektivní hydrolýze nebo alkoholýze, při teplotě 10 až 80 °C, popřípadě za přítomnosti pomocných rozpouštědel a pufru, přičemž reakční směs obsahuje s výhodou 2 až 50 % hmotn. esteru a po proběhnutí reakce se oddělí nezreagovaný ester /sloučenina obecného vzorce I, ve kterém R značí zbytek COR1/ a vzniklý alkohol /sloučenina obecného vzorce I, ve kterém R značí atom vodíku/ a tedy i oba enantiomery.
Způsob podle vynálezu je ekonomický, jednoduchý a rychlý. Reakce nevyžaduje ekvimolámí množství opticky čistých pomocných látek, ani drahá reakční činidla, ani nepřiměřeně velká množství rozpouštědel a ani nákladné pracovní stupně. Po ukončení reakce lze dělení produktů, popřípadě enantíomerů, realizovat jednoduchými postupy, například extrakcí.
S výhodou značí ve sloučeninách obecného vzorce I
R zbytek COR1, ve kterém R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až 12 atomy uhlíku, popřípadě alkinylovou skupinu se 3 až 12 atomy uhlíku, C„H2n-cykloalkylovou skupinu, kde n je 1 až 12, které mohou být rozvětvené, nebo nerozvětvené a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor, brom, tri fluormethy lovou skupinu, kyanovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, methoxylovou skupinu, ethoxylovou skupinu a skupinu COOR2, kde R2 znamená methylovou skupinu, ethylovou skupinu a vinylovou skupinu, které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor a tri fluormethy lovou skupinu.
Se zvláštní výhodou značí ve sloučeninách obecného vzorce I
R zbytek COR1 ve kterém R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až 10 atomy uhlíku, popřípadě alkinylovou skupinu se 3 až 10 atomy uhlíku, CnH2n-cykloalkýlovou skupinu, kde n je 1 až 10, které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor, brom, trifluormethylovou skupinu, kyanovou skupinu, nitroskupi40 nu, methoxylovou skupinu a skupinu COOR2, kde R2 znamená methylovou skupinu, ethylovou skupinu a vinylovou skupinu, které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor a trifluormethylovou skupinu.
S mimořádnou výhodou značí ve sloučeninách obecného vzorce I
R zbytek COR1, ve kterém R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až 10 atomy uhlíku, popřípadě alkinylovou skupinu se 3 až 10 atomy uhlíku, které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor, brom, trifluormethylovou skupinu a methoxylovou skupinu.
Při způsobu podle vynálezu se s výhodou postupuje tak, že se ester obecného vzorec I, kde například Rje zbytek COR1, ve kterém R1 znamená alkylovou skupinu C3H7 nebo CgHp, nechá za míchání reagovat ve vodném nebo vodně-alkoholickém roztoku s lipázou, esterázou nebo proteá55 zou, Může být účelné uvedený roztok pufrovat, například fosfátovým pufrem nebo TRIS-pufrem
-2CZ 301944 B6 /= tris-/hydroxymethyl/-methylaminovým/. Přídavek může být například 0,01 až 1,0 molámí. Vhodný je pufr s hodnotou pH v rozmezí 5 až 9.
Dále může být výhodný přídavek pomocných rozpouštědel. Jako pomocné rozpouštědlo je 5 vhodný například dimethoxyethan, aceton, tetrahydrofuran, dioxan, hexan, terc-butylmethy lether a terc-butanol. Podíl pomocných rozpouštědel v roztoku činí s výhodou 10 až 80 %.
Jako enzymy se přednostně používají lipázy a esterázy, jako je například Cholesterol-esteráza /EC 3. 1. 1. 13/ z hovězího pankreatu /Sigma Chemical Co./, esteráza z vepřových jater IPLE, io porcine liver esterase, Sigma Chemical Co/., pankreatin /Fluka a Sigma Chemical Co./, enzym z hovězího pankreatu vysrážený acetonem /Sigma Chemical Co./ a enzym z koňských jater vysrážený acetonem /Sigma Chemical Co./ a lipáza z vepřového pankreatu IPPL, porcine pancreas lipase, /Sigma Chemical Co./, lipáza OF zCandida rugosa /Meito Sangyo/ a lipáza AP-6 z Aspergillus niger /Amano Phamnaceuticals/.
Každý ze jmenovaných enzymů se může používat ve volné nebo imobi 1 izované formě /Immobilized Biocatalysts, W. Hartmeier, Springer Verlag Berlin, 1988/. Množství enzymu se volí libovolně v závislosti na reakční rychlosti, popřípadě na žádaném trvání reakce a na druhu enzymu /například volného nebo imobilizovaného/ a lze je snadno stanovit jednoduchými předběžnými pokusy,
Reakční směs obsahuje účelně 2 až 50 % hmotn. esteru, obzvláště výhodně 5 až 20 % hmotn. Reakční teplota se volí v rozmezí 10 až 80 °C, s výhodou 20 až 60 °C, s obzvláštní výhodou 20 až 40 °C.
Příprava esterů /sloučenin obecného vzorce I, kde R je zbytek COR1/ lze realizovat účelně z alkoholu /sloučeniny obecného vzorce I, kde R je atom vodíku/ známými esterifikačními metodami /Haslam, Tetrahedron 1980, 36, 2 409; Hofle, Steglich, Vorbriiggen, Angew. Chem. 1978, 90, 602/ nebo tak, jak je to popsáno v patentové přihlášce RMR 98/L 001/. „Způsob výroby /30 /cis-3-hydroxy-l-methyM/R/-/2,4,6-trimethoxyfenyl/piperidinu<7.
Produkty, které vznikají, popřípadě zbývají při způsobu výroby podle vynálezu, lze snadno rozdělit, například extrakcí nebo chromatografickými metodami, Zbývající ester se získá například rozdělením reakčního roztoku mezi vodu a n-heptan a zahuštěním organické fáze. Získaný alko35 hol se potom může extrahovat z vodné fáze ethylesterem kyseliny octové. Enzym lze regenerovat lyofilizaci. Oddělení /a případné pozdější opakované použití/ enzymu lze usnadnit imobilizací.
Při vhodném vedení reakce se vždy podaří získat alespoň jeden opticky čistý enantiomer. Je-li žádoucí opticky čistý aster, měla by konverze přesahovat /nebo se rovnat/ 50 %, je-li žádoucí opticky čistý alkohol, měla by konverze být nižší /nebo se rovnat/ 50 %. Stanovení konverze enzymatické hydrolýzy nebo alkoholýzy se provádí HPLC /RP 18 LiChrosorb*/, stanovení optické čistoty též pomocí HPLC /Chiralpak AD/. Estery, které vznikají, popřípadě zbývají pri způsobu štěpení racemátů, lze známými metodami štěpení esterů /S. J. Salomon, E. G. Mata, O. A. Mascaretti, Tetrahedron 1993, 49, 3 691-3 748/ bez inverze nebo racemizace převést v odpovídající ester. Opačně lze vznikající alkohol známými metodami esterifikace /Haslam, Tetrahedron 1980, 36,2 409/ bez inverze nebo racemizace převést v odpovídající ester.
Produkty, které pri způsobu vznikají, popřípadě zbývají, se mohou známými metodami racemizovat, například přesmyky, které lze katalyzovat kovy /L. E. Overman, Angew. Chem. 1984, 96,
565-573 a jíž drive citovaná literatura/ a opět použít pri štěpeni racemátů. Tím se zvyšuje výtěžek nad 50 %. Je například možné racemizovat sloučeniny obecného vzorce I, kde R je zbytek COR1, přímo a sloučeniny obecného vzorce I, kde R je atom vodíku, po převedení ve vhodné deriváty, které jsou popsány v práci L. E. Overmana, Angew. Chem. 1994, 96, 565-573. Jako kovové katalyzátory mohou být použity sloučeniny, popřípadě soli rtuťnaté, Pd/O/ nebo palad55 natě.
-3CZ 301944 B6
Následující příklady provedeni tento vynález blíže ilustrují.
Příklady provedení vynálezu
Všechny izolované produkty, popřípadě směsi surových produktů, byly identifikovány 'H NMRspektrem a hmatovými spektry, popřípadě HPLC.
Optická čistota produktů byla stanovena pomocí HPLC, jako je například Chiralpak AD 250X 4.6/Daicel/.
Příklad 1 mg esteru kyseliny octové /sloučenina obecného vzorce I, kde R značí zbytek COR1 a R1 zbytek CH3/ se vloží do směsi 1 ml fosfátového pufru /0,1 M, pH = 7,0/ s dimethoxyethanem /5:1/. Přidá se 5 mg pankreatinu. Míchá se pri teplotě 20 až 25 °C tak dlouho, až konverze dosáhne asi 40 % /BPLC/. Potom se zfíltruje, odpaří k suchu a získaná směs se zkontroluje pomocí
HPLC /Chiralpak AD 250 x 4,6, n-hexan + ethanol 5 + 1, průtok 1 ml/min, 25 °C, 220/240 nm/: ee zbývajícího /R/-esteru kyseliny octové: 63 %; ee /S/-alkoholu: 85 %.
Příklad 2 mg esteru kyseliny máselné /sloučenina obecného vzorce I, kde R značí zbytek COR1 a R1 zbytek /CH2/2CH3/ se vloží do směsi 1 ml fosfátového pufru /0,1 M, pH = 7,0/ s dimethoxyethanem /5:1/. Přidá se 5 mg PPL /lipáza z vepřového pankreatu, Sigma Chemical Co./. Míchá se při teplotě 30 °C tak dlouho, až konverze dosáhne asi 48 % /EPLC/. Potom se zfíltruje, odpaří k suchu a získaná směs se zkontroluje pomocí HPLC /Chiralpak AD 250 x 4,6, nhexan + ethanol 6 + 1, průtok 1 ml/min, teplota 25 °C, 220/240 nm/: ee /R/-esteru kyseliny máselné: 90 %; ee /S/-aIkoholu: 97 %.
Příklad 3
1,0 g /2,86 mmol/ esteru kyseliny máselné /sloučenina obecného vzorce I, kde R značí zbytek COR1 a R1 zbytek /CH2/2CH3/ se vloží do směsi 8 ml d i methoxy ethanu a 40 ml fosfátového pufru /0,1 M, pH = 7,0/. Přidá se 90 mg pankreatinu. Míchá se při teplotě 22 až 25 °C tak dlouho, až konverze přesáhne 50 %. Potom se zahustí ve vakuu, odparek se rozmíchá s vodou a extrahuje se šestkrát asi po 50 ml n-heptanu. Po vysušení síranem sodným se odpaří ve vakuu. Získá se 450 mg /45 %/ /R/-esteru kyseliny máselné; ee /HPLC: > 99 %. Po extrakci zbývající vodné fáze ethylesterem kyseliny octové, vysušení síranem sodným a odpaření ve vakuu se získá 190 mg /23,8 %/ /S/-alkoholu; ee /HPLC/: 97 %.
Příklad 4 mg esteru kyseliny máselné /sloučenina obecného vzorce I, kde R značí zbytek COR1 a R1 50 zbytek /CH2/2CH3/ se vloží do směsi 1 ml fosfátového pufru /0,1 M, pH = 7,0/ a dimethoxyethanu.Přidá se 5 mg PPL, Míchá se při teplotě 30 °C tak dlouho, až se dosáhne konverze asi
48% /HPLC/. Potom se zfíltruje, odpaří k suchu a zbývající směs se zkontroluje HPLC /Chiralpak AD 250 x 4,6, n-hexan + ethanol 6+1, průtok 1 ml/min, teplota 25 °C, 220/240 nm/: ee /R/-esteru kyseliny máselné: 90 %; ee /S/-alkoholu: 97 %.
-4CZ 301944 B6
Příklad 5 mg esteru kyseliny máselné /sloučenina obecného vzorce I, kde R značí zbytek COR1 a R1 zbytek /CH2/2CH3/ se vloží do směsi 1 ml fosfátového pufru /0,1 M, pH - 7,0/ a dimethoxyethanu /5:1/, Přidá se 5 mg PLE /esteráza z vepřových jater, Sigma Chemical Co./. Míchá se při teplotě 30 °C tak dlouho, až se dosáhne konverze asi 47 % /HPLC/. Potom se zfiltruje, odpaří k suchu a zbývající směs se.zkontroluje HPLC /Chiralpak AD 250 x 4,6, n-hexan + ethanol 6+1, průtok 1 ml/min, teplota 25 °C, 220/240 nm/:
ee /R/-esteru kyseliny máselné: 88 %; ee /S/-alkoholu: 97 %.
Příklad 6 mg esteru kyseliny máselné /sloučenina obecného vzorce Ϊ, kde R značí zbytek COR1 a R1 zbytek /CH2/4CH3/ se vloží do směsi 1 ml fosfátového pufru /0,1 M, pH = 7,0/ a dimethoxyethanu /5:1/. Přidá se 5 mg PLE. Míchá se při teplotě 30 °C tak dlouho, až se dosáhne konverze asi 40 % /HPLC/. Potom se zfiltruje, odpaří k suchu a získaná směs se zkontroluje HPLC /Chiralpak AD 250 x 4,6, n-hexan + ethanol 6 + 1, průtok 1 ml/kin, 25 °C, 220/240 nm/:
ee /R/-esteru kyseliny kapronové: 66 %; ee /S/-alkoholu: 96 %.
Příklad 7 mg esteru kyseliny máselné /sloučenina obecného vzorce I, kde R značí zbytek COR1 a Rl zbytek /CH2/4CH3/ se vloží do směsi 1 ml fosfátového pufru /0,1 M, pH = 7,0/ a dimethoxyethanu /5:1/. Přidá se 5 mg cholesterolesterázy z hovězího pankreatu. Míchá se při teplotě 30 °C tak dlouho, až se dosáhne konverze asi 50 % /HPLC/. Potom se zfiltruje, odpaří k suchu a získaná směs se zkontroluje HPLC /Chirapak AD 250 x 4,6, n-hexan + ethanol 6+1, průtok 1 ml/min, teplota 25 °C, 220/240 nm/:
ee /R/-esteru kyseliny kapronové: > 99,8 %; ee /S/-alkoholu: 99,8 %.
Příklad 8 mg esteru kyseliny máselné /sloučenina obecného vzorce I, kde R značí zbytek COR1 a Rl zbytek /CH2/gCH3/ se vloží do směsi 1 ml fosfátového pufru /0,1 M, pH = 7,0/ a dimethoxyethanu /5:1/. Přidá se 5 mg PPL. Míchá se při teplotě 30 °C tak dlouho, až se dosáhne konverze asi 10 % /HPLC/. Potom se zfiltruje, odpaří k suchu a získaná směs se zkontroluje HPLC /Chiralpak AD 250 x 4,6, n-hexan + ethanol 6 + I, průtok 1 ml/min, teplota 25 °C, 220/240nm/: ee /R/—esteru kyseliny kaprinové: >11%; ee /S/-alkoholu: 95 %.
Příklad 9 mg esteru kyseliny máselné /sloučenina obecného vzorce I, kde R značí zbytek COR1 a R1 zbytek /CH2/2CH3/ se vloží do směsi 1 ml fosfátového pufru /0,1 M, pH = 7,0/ a dimethoxyethanu /5:1/. Přidá se 5 mg práškového enzymu z koňských jater, vysráženého acetonem. Míchá se při teplotě 30 °C tak dlouho, až se dosáhne konverze asi 46 % /HPLC/, Potom se zfiltruje, odpaří k suchu a získané směs se zkontroluje HPLC /Chiralpak AD 250 x 4,6, n-hexan + ethanol 6+1, průtok 1 ml/min, teplota 25 °C, 220/240 nm/:
ee /R/-esteru kyseliny máselné: 82 %; ee /S/-alkoholu: 96%.
-5CZ 301944 B6
Průmyslová využitelnost
Způsob podle vynálezu nově řeší štěpení racemátů, popřípadě dělení enantiomerů sloučenin 5 obecného vzorce I, významných výchozích produktů pro syntézy sloučenin použitelných při prevenci, popřípadě pri terapii nádorů. Novost vynálezů spočívá v použití enzymů, například lipázy, esterázy apod., získávaných z orgánů savců nebo z mikroorganismů. Nová metoda je jednoduchá, rychlá a ekonomická.

Claims (4)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1 Způsob kinetického štěpení racemátů sloučenin obecného vzorce Ϊ
    OMe
    OR /1/.
    20 vyznačující se tím, že se směsi enantiomerů, popřípadě racemické směsi sloučenin obecného vzorce I, ve kterém
    R značí zbytek COR1, ve kterém R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 16 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až 16 atomy uhlíku, popřípadě alkinylovou skupinu se 3 až
    25 16 atomy uhlíku, CnH2n-cykloalkylovou skupinu, kde n je 1 až 16, které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor, brom, jod, tri fl uormethy lovou skupinu, kyano vou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, methoxylovou skupinu, ethoxylovou skupinu a skupinu COOR2, kde R2 znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a alkeny30 lovou skupinu se 2 až 4 atomy uhlíku, které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor, brom nebo tri fl uormethy lovou skupinu, podrobují v homogenních nebo heterogenních, vodných, vodně-organických nebo organických
    35 prostředích, za přítomnosti enzymu, stereoselektivní hydrolýze nebo alkoholýze, při teplotě 10 až 80 °C, popřípadě v přítomnosti pomocných rozpouštědel a pufru, přičemž reakční směs obsahuje s výhodou 2 až 50 % hmotn. esteru a po proběhnutí reakce se oddělí nezreagovaný ester, sloučenina obecného vzorce I, ve kterém R značí zbytek COR1, a vzniklý alkohol, sloučenina obecného vzorce I, ve kterém R značí atom vodíku, a tedy i oba izomery,
  2. 2. Způsob kinetického štěpení racemátů sloučenin obecného vzorce I podle nároku 1, vyznačující se tím, že
    R značí zbytek COR1, ve kterém R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy uhlíku,
    45 alkenylovou skupinu se 2 až 12 atomy uhlíku, popřípadě alkinylovou skupinu se 3 až
    -6CZ 301944 B6
    12 atomy uhlíku, CnH2n-cykloalkylovou skupinu, kde n je 1 až 12, které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor, brom, trifluormethylovou skupinu, kyanovou skupinu, nitroskupinu, hydroxylovou skupinu, methoxylovou skupinu, ethoxylovou skupinu a
    5 skupinu COOR2, kde R2 znamená methylovou skupinu, ethylovou skupinu a vinylovou skupinu a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor a trifluormethylovou skupinu.
  3. 3. Způsob kinetického štěpení racemátů sloučenin obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2, io vyznačující se tím, že
    R značí zbytek COR1, ve kterém R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až 10 atomy uhlíku, popřípadě alkinylovou skupinu se 3 až 10 atomy uhlíku, CnH2n-cykloalkylovou skupinu, kde n je 1 až 10, které mohou být roz15 větvené nebo nerozvětvené a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor, brom, trifluormethylovou skupinu, kyanovou skupinu, nitroskupinu, methoxylovou skupinu a skupinu COOR2, kde R2 znamená methylovou skupinu, ethylovou skupinu a vinylovou skupinu a které mohou být substituovány l až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor a trifluormethylovou skupinu.
  4. 4. Způsob kinetického štěpení racemátů sloučenin obecného vzorce I podle nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že
    R značí zbytek COR1, ve kterém R1 znamená alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku,
    25 alkenylovou skupinu se 2 až 10 atomy uhlíku, popřípadě alkinylovou skupinu se 3 až 10 atomy uhlíku, které mohou být rozvětvené nebo nerozvětvené a které mohou být substituovány 1 až 3 substituenty, vybranými ze skupiny obsahující fluor, chlor, brom, trifluormethylovou skupinu a methoxylovou skupinu.
    30 5. Způsob kinetického štěpení racemátů sloučenin obecného vzorce I podle nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že se jako enzym používá lipáza, esteráza nebo proteáza.
CZ20003223A 1998-03-06 1999-02-20 Zpusob enzymatického delení enantiomeru 3[R]- a 3[S]-hydroxy-1-methyl-4-[2,4,6-trimethoxyfenyl]-1,2,3,6-tetrahydropyridinu, poprípade esteru karboxylových kyselin CZ301944B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19809649A DE19809649A1 (de) 1998-03-06 1998-03-06 Verfahren zur enzymatischen Enantiomeren-Trennung von 3(R)- und 3(S)-Hydroxy-1-methyl-4-(2,4,6-trimethoxyphenyl)-1,2,3,6-tetrahydro-pyridin bzw. der Carbonsäureester

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20003223A3 CZ20003223A3 (cs) 2000-11-15
CZ301944B6 true CZ301944B6 (cs) 2010-08-11

Family

ID=7859957

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20003223A CZ301944B6 (cs) 1998-03-06 1999-02-20 Zpusob enzymatického delení enantiomeru 3[R]- a 3[S]-hydroxy-1-methyl-4-[2,4,6-trimethoxyfenyl]-1,2,3,6-tetrahydropyridinu, poprípade esteru karboxylových kyselin

Country Status (23)

Country Link
US (1) US6406912B1 (cs)
EP (1) EP1071807B1 (cs)
JP (1) JP4344089B2 (cs)
KR (1) KR100779864B1 (cs)
CN (1) CN1230554C (cs)
AR (1) AR018574A1 (cs)
AT (1) ATE474061T1 (cs)
AU (1) AU758106B2 (cs)
BR (2) BR9908557A (cs)
CA (1) CA2322842C (cs)
CY (1) CY1110919T1 (cs)
CZ (1) CZ301944B6 (cs)
DE (2) DE19809649A1 (cs)
DK (1) DK1071807T3 (cs)
ES (1) ES2348394T3 (cs)
HK (1) HK1035001A1 (cs)
HU (1) HU227994B1 (cs)
ID (1) ID27000A (cs)
PL (1) PL195006B1 (cs)
PT (1) PT1071807E (cs)
RU (1) RU2241040C2 (cs)
TR (1) TR200002576T2 (cs)
WO (1) WO1999045133A1 (cs)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002544367A (ja) 1999-05-13 2002-12-24 シエル・インターナシヨネイル・リサーチ・マーチヤツピイ・ベー・ウイ 炭化水素変換法
CA2445014C (en) 2001-05-15 2011-10-11 Speedel Pharma Ag Process for the preparation of substituted carboxylic acid esters by enzymatic hydrolysis
CN104232700A (zh) * 2014-10-01 2014-12-24 青岛科技大学 一种生物法生产(2r,3s)羟基丙酸甲酯的方法
CN104278061A (zh) * 2014-10-01 2015-01-14 青岛科技大学 一种生产氟苯基甲基丙酸甲酯的产朊酵母还原法
RU2717829C2 (ru) 2015-04-20 2020-03-26 Толеро Фармасьютикалз, Инк. Прогнозирование ответа на альвоцидиб с помощью анализа профиля митохондрий
DK3298021T3 (da) 2015-05-18 2019-08-05 Tolero Pharmaceuticals Inc Alvocidib-prodrugs, der har øget biotilgængelighed
KR20180034538A (ko) 2015-08-03 2018-04-04 톨레로 파마수티컬스, 인크. 암의 치료를 위한 병행 요법
WO2018094275A1 (en) 2016-11-18 2018-05-24 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Alvocidib prodrugs and their use as protein kinase inhibitors
US10132797B2 (en) 2016-12-19 2018-11-20 Tolero Pharmaceuticals, Inc. Profiling peptides and methods for sensitivity profiling
US11497756B2 (en) 2017-09-12 2022-11-15 Sumitomo Pharma Oncology, Inc. Treatment regimen for cancers that are insensitive to BCL-2 inhibitors using the MCL-1 inhibitor alvocidib
CA3119807A1 (en) 2018-12-04 2020-06-11 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Cdk9 inhibitors and polymorphs thereof for use as agents for treatment of cancer
JP2022525149A (ja) 2019-03-20 2022-05-11 スミトモ ダイニッポン ファーマ オンコロジー， インコーポレイテッド ベネトクラクスが失敗した急性骨髄性白血病（ａｍｌ）の処置
CN110577974B (zh) * 2019-09-10 2021-07-20 杭州澳赛诺生物科技有限公司 手性3-羟基-1,2,3,6-四氢吡啶的合成方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0321918A2 (de) * 1987-12-23 1989-06-28 Hoechst Aktiengesellschaft Verfahren zur enzymatischen Racematspaltung von racemischen Alkoholen mit/in vinylestern durch Umesterung
US4971909A (en) * 1987-08-28 1990-11-20 Chisso Corporation Process for producing optically active compounds having pyridine skeletons
EP0474129A2 (en) * 1990-09-01 1992-03-11 Kazuo Achiwa 1,4-Dihydropyridine derivatives and process for preparing the same
EP0507278A2 (de) * 1991-04-02 1992-10-07 Hoechst Aktiengesellschaft Immobilisierter Biokatalysator, dessen Herstellung und Verwendung zur Estersynthese in einem Säulenreaktor
JPH0690790A (ja) * 1992-09-08 1994-04-05 Mercian Corp 光学活性１，４−ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸・モノエステル誘導体の製造方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19802449A1 (de) * 1998-01-23 1999-07-29 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Verfahren zur Herstellung von (-)cis-3-Hydroxy-1-methyl-4-(2,4,6-trimethoxypyhenyl)-piperidin

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4971909A (en) * 1987-08-28 1990-11-20 Chisso Corporation Process for producing optically active compounds having pyridine skeletons
EP0321918A2 (de) * 1987-12-23 1989-06-28 Hoechst Aktiengesellschaft Verfahren zur enzymatischen Racematspaltung von racemischen Alkoholen mit/in vinylestern durch Umesterung
EP0474129A2 (en) * 1990-09-01 1992-03-11 Kazuo Achiwa 1,4-Dihydropyridine derivatives and process for preparing the same
EP0507278A2 (de) * 1991-04-02 1992-10-07 Hoechst Aktiengesellschaft Immobilisierter Biokatalysator, dessen Herstellung und Verwendung zur Estersynthese in einem Säulenreaktor
JPH0690790A (ja) * 1992-09-08 1994-04-05 Mercian Corp 光学活性１，４−ジヒドロピリジン−３，５−ジカルボン酸・モノエステル誘導体の製造方法

Also Published As

Publication number Publication date
PT1071807E (pt) 2010-09-29
BRPI9908557B8 (pt) 2021-05-25
CA2322842C (en) 2011-04-05
HUP0101795A3 (en) 2004-03-01
KR20010041643A (ko) 2001-05-25
JP4344089B2 (ja) 2009-10-14
AU2927599A (en) 1999-09-20
ATE474061T1 (de) 2010-07-15
JP2002505112A (ja) 2002-02-19
CA2322842A1 (en) 1999-09-10
ES2348394T3 (es) 2010-12-03
ID27000A (id) 2001-02-22
KR100779864B1 (ko) 2007-11-27
CN1230554C (zh) 2005-12-07
BRPI9908557B1 (pt) 2018-09-18
US6406912B1 (en) 2002-06-18
PL342877A1 (en) 2001-07-16
BR9908557A (pt) 2000-11-21
WO1999045133A1 (de) 1999-09-10
HUP0101795A2 (hu) 2001-09-28
AR018574A1 (es) 2001-11-28
RU2241040C2 (ru) 2004-11-27
HK1035001A1 (en) 2001-11-09
HU227994B1 (en) 2012-08-28
TR200002576T2 (tr) 2000-11-21
DE19809649A1 (de) 1999-09-09
CN1292034A (zh) 2001-04-18
DE59915183D1 (de) 2010-08-26
DK1071807T3 (da) 2010-11-08
EP1071807A1 (de) 2001-01-31
AU758106B2 (en) 2003-03-13
CZ20003223A3 (cs) 2000-11-15
EP1071807B1 (de) 2010-07-14
PL195006B1 (pl) 2007-07-31
CY1110919T1 (el) 2015-06-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5219506B2 (ja) ３−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチルピロリジン化合物を調製するための改良法
EP0206436B1 (en) Enzymatic production of optical isomers of 2-halopropionic acids
CZ301944B6 (cs) Zpusob enzymatického delení enantiomeru 3[R]- a 3[S]-hydroxy-1-methyl-4-[2,4,6-trimethoxyfenyl]-1,2,3,6-tetrahydropyridinu, poprípade esteru karboxylových kyselin
AU717771B2 (en) The bioresolution of n-acylazetidine-2-carboxylic acids
BG61511B1 (bg) Ензимен метод за стереоселективно получаване на енантиомер на хетеробицикличен алкохол
US5010012A (en) Process for the enzymatic preparation of optically active phosphorus containing functional acetic acid derivatives
US5493063A (en) Process for optical resolution of 1,2-diol derivatives
JP2004525086A (ja) 鏡像異性体的に純粋なヒドロキシエステルおよび酸の製造方法
AU2572495A (en) Chiral compounds and their resolution
Matsumoto et al. Preparation of optically active α-hydroxy ketone derivatives by Enzyme-Mediated Hydrolysis of Enol Esters
MXPA00007811A (en) Method for enzymatic enantiomer-separation of 3(r)- and 3(s)-hydroxy-1- methyl-4-(2,4, 6-trimethoxyphenyl)-1, 2,3,6- tetrahydro-pyridine or its carboxylic acid esters
US5661014A (en) Chiral compounds and their resolution synthesis using enantioselective esterases
US5861304A (en) Process for the enzymatic separation of enantiomers of rac-2-oxotricyclo 2.2.1.0 3,5! heptane-7-carboxylic acid and of rac-2-oxotricyclo 2.2.1.0 3,5! heptane-7-carboxylic esters
US5677168A (en) Enantiomeric separation of (RS)1-(4-chlorophenyl)-2-chloroethanol by lipase catalyzed hydrolysis of its acetate
JP2022096487A (ja) Ｓ体のアリルアシロキシ誘導体の製造方法
JP2006328021A (ja) ピリジル酢酸化合物またはその光学活性体
EP0537921A2 (en) Enzymatic synthesis of chiral alpha-hydroxyketones and derivatives
JPH06500458A (ja) ４―ヒドロキシ―２―シクロペンテン―１―オン及び２′，２′―ジメチルプロパン―１′，３′―ジオールとのケタールのｓ（−）―及びｒ（＋）―エステルの酵素によるエナンチオ選択的合成
EP0599959A1 (en) Chiral glutarate esters, their resolution and derived glutarimide compounds
Wei et al. Chemoenzymatic synthesis of Ro 25-8210 and Ro 25-6630
JPH05192188A (ja) 光学活性な置換酪酸またはそのエステル誘導体の製造法

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Effective date: 20190220