CZ298586B6 - Deriváty aminokyselin se zlepšenou úcinností vucimnohocetné lékové rezistenci, zpusob jejich prípravy a farmaceutické prostredky s jejich obsahem - Google Patents

Deriváty aminokyselin se zlepšenou úcinností vucimnohocetné lékové rezistenci, zpusob jejich prípravy a farmaceutické prostredky s jejich obsahem Download PDF

Info

Publication number
CZ298586B6
CZ298586B6 CZ0149197A CZ149197A CZ298586B6 CZ 298586 B6 CZ298586 B6 CZ 298586B6 CZ 0149197 A CZ0149197 A CZ 0149197A CZ 149197 A CZ149197 A CZ 149197A CZ 298586 B6 CZ298586 B6 CZ 298586B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
pyr
group
phch
compound
formula
Prior art date
Application number
CZ0149197A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ149197A3 (en
Inventor
E. Zelle@Robert
W. Harding@Matthew
Original Assignee
Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/377,285 external-priority patent/US5543423A/en
Application filed by Vertex Pharmaceuticals Incorporated filed Critical Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Publication of CZ149197A3 publication Critical patent/CZ149197A3/cs
Publication of CZ298586B6 publication Critical patent/CZ298586B6/cs

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/36Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms
    • C07D213/40Acylated substituent nitrogen atom
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07CACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/36Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms
    • C07D213/38Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms having only hydrogen or hydrocarbon radicals attached to the substituent nitrogen atom
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/44Radicals substituted by doubly-bound oxygen, sulfur, or nitrogen atoms, or by two such atoms singly-bound to the same carbon atom
    • C07D213/46Oxygen atoms
    • C07D213/50Ketonic radicals
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/12Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/56Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached to ring carbon atoms
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/64Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms, e.g. histidine
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/081,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Deriváty aminokyselin obecného vzorce I nebo obecného vzorce II, ve kterých J a K znamenají prímou nebo rozvetvenou (C1-C6)-alkylovou skupinu, prípadne substituovanou skupinou Ar; kde každá skupina Ar je nezávisle vybrána ze souboru sestávajícího z fenylové, 2-, 3-, 4-pyridylové a imidazolylové skupiny, pricemž uvedená skupina Ar muže obsahovat jeden nebo více substituentu, které jsou nezávisle vybrány ze souboru sestávajícího z vodíku, hydroxylové skupiny, nitroskupiny, trifluormehtylové skupiny, prímé nebo rozvetvené (C1-C6)-alkylové skupiny, prímé nebo rozvetvené O-(C1-C6)-alkylové skupiny, halogenu, skupiny SO.sub.3.n.H a skupiny NR.sub.3.n.R.sub.4.n.; a každé w znamená 1 nebo 2. Tyto slouceniny udržují, zvyšují nebo obnovují citlivostbunek na terapeutická nebo profylaktická cinidla.Vynález se rovnež týká zpusobu prípravy techto sloucenin a farmaceutických prostredku, které tyto slouceniny obsahují. Slouceniny a farmaceutické prostredky jsou zejména vhodné pro lécení nebo prevenci mnohocetné lékové rezistence.

Description

Deriváty aminokyselin se zlepšenou účinností vůči mnohočetné lékové rezistenci, způsob jejich přípravy a farmaceutické prostředky s jejich obsahem
Oblast techniky
Vynález se týká derivátů aminokyselin, které udržují, zvyšují nebo obnovují citlivost buněk na terapeutická nebo proíylaktická činidla. Vynález se rovněž týká způsobu přípravy těchto sloučenin a farmaceutických prostředků, které tyto sloučeniny obsahují. Sloučeniny a farmaceutické prostředky podle vynálezu jsou zejména vhodné pro ošetření buněk rezistentních vůči více léčivům (multi-drug resistant cells), pro prevenci vzniku rezistence vůči více léčivům a pro použití k léčení rakoviny rezistentní vůči více léčivům.
Dosavadní stav techniky
Hlavním problémem, který ovlivňuje účinnost chemoterapie je vznik buněk, které se po vystavení chemoterapeutickému činidlu stávají rezistentní vůči řadě strukturně nepříbuzných léčiv a terapeutických činidel. Ke vzniku takovéto rezistence vůči více léčivům (mnohočetné lékové rezistence) často dochází v přítomnosti nadměrné exprese 170-kDa membránového P-glykoproteinu (gp—170). Protein gp-170 je kromě rakovinných buněčných linií přítomen v plazmatických membránách některých zdravých tkání a je homologický s bakteriálními transportními proteiny (Hait a kol., Cancer Communications, svazek 1 (1), 35 (1989); West TIBS, svazek 15, 42 (1990)). Tento protein působí jako exportní pumpa, přičemž způsobuje rezistenci vůči léčivům pomocí aktivního vylučování toxických látek. Ačkoliv je mechanismus pumpy neznámý, předpokládá se, že protein gp-170 působí tak, že vylučuje látky, které mají společné určité chemické nebo fyzikální vlastnosti, jako je hydrofobičnost, přítomnost karbonylových skupin nebo existenci konjugátu s glutathionem (viz West).
V poslední době, další protein, který vyvolává rezistenci vůči více léčivům, MRP (multidrug resistance associated protein) byl identifikován v buňkách H69AR, MDR buněčné linii, která postrádá zjistitelný P-glykoprotein [S. P.C. Cole a kol., Science, 258, str. 1650 - 54 (1922)]. MRP byl také stanoven v jiných non-P-glykoproteinových MDR buněčných liniích, jako jsou rakovinové buňky karcinomu prsu HL60/ADR a MCF-7 [E. Schneider a kol., Cancer Res., 54, str. 152-58 (1994), a N. Krishnamachary a kol., Cancer Res., 53, str. 3658-61 (1993)].
Gen MRP kóduje 190 kD membránový protein, což je další člen rodiny schopné vázat ATP. MRP plní stejnou funkci jako P-glykoprotein, působící jako pumpa pro odstranění přírodních léčiv z buňky. Možná fyziologická funkce MRP může být na ATP závislý transport glutathiono40 vých S-konjugátů [G. jedlitschky a kol., Cancer Res., 54, str. 4833 - 36 (1994), I. Leier a kol., J. Biol. Chem. 269, str. 27807 - 10 (1994) a Muller a kol. Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 91, str. 13033-37(1995)].
Úloha MRP v klinické rezistenci léčiv není jasně definována, ale je zřejmé, že MRP může být další protein který vyvolává širokou rezistenci vůči protirakovinovým léčivům.
Pro potlačení rezistence vůči více léčivům a obnovení citlivosti vůči léčivům byla podávána různá chemická činidla. Ačkoliv některá léčiva zlepšila odpověď buněk rezistentních vůči více léčivům (MDR-buněk, multi-drug resistant cells) na chemoterapeutická činidla, bylo jejich působení často spojeno s nežádoucími klinickými vedlejšími účinky (viz Hait a kol.). Například, ačkoliv může cyklosporin A („CsA“), široce akceptované imunosupresivní činidlo, zvýšit citlivost některých rakovinových buněk na chemoterapeutická činidla (Slater a kol., Br., J. Cancer, Svazek 54, 235 (1986)), způsobují koncentrace nutné pro dosažení tohoto účinku podstatnou imunosupresi u pacientů, jejichž imunitní systémy jsou již ohroženy chemoterapií (viz Hait a kol.). Dále, použití CsA je často doprovázeno nežádoucími postranními účinky, zahrnující nefro-1 CZ 298586 B6 toxicitu, hepatotoxicitu a poruchy centrálního nervového systému. Podobně jak látky blokující transport vápníku tak inhibitory kalmodulinu zvyšují citlivost MDR-buněk, ale způsobují nežádoucí fyziologické účinky (viz Hait a kol.; Twentyman a kol., Br. J. Cancer, svazek 56, 55 (1987)).
Posledním vývojem byla získána činidla u kterých se uvádí vyšší klinická hodnota pro zcitlivěn MDR-buněk. Mezi tato činidla paří analogy CsA, která nevykazují imunosupresivní účinky jak 11-methyl-leucincyklosporin (11-met-leu CsA) (viz Hait a kol.; Twentyman a kol.), nebo činidla, která mohou být účinná v nižších dávkách, jako jsou imunosupresivní činidlo FK-506 (Epand a Epand, Anti-Cancer Drug Design 6, 189 (1991)). PCT publikace WO 94/07858 se týká nové skupiny MDR modifikujících činidel, která jsou strukturálně podobná imunosupresivním činidlům FK-506 a rapamycinu. I přes tento vývoj jsou stále potřeba účinná činidla, která lze použít pro obnovení citlivosti MDR-buněk na terapeutická nebo profylaktická činidla nebo pro prevenci vzniku rezistence vůči více léčivům.
Podstata vynálezu
Vynález popisuje nové sloučeniny, které jsou použitelné pro udržování, zvyšování nebo obnovo20 vání citlivosti na léčiva u buněk rezistentních vůči více léčivům (multi-drug resistance cells, MDR cells), prostředků, které tyto sloučeniny obsahují a způsobů jejich použití. Sloučeniny podle vynálezu lze použít samotné nebo v kombinaci s jinými terapeutickými nebo profylatickými činidly pro udržování, zvyšování nebo obnovování terapeutických nebo profylaktických účinků léčiv na buňky, zejména MDR-buňky nebo pro prevenci vzniku MDR buněk. Podle jed25 noho provedení vynálezu se tyto nové sloučeniny, respektive prostředky výhodně používají k podpoření nebo rozšíření režimů chemoterapie pro léčení nebo prevenci rakoviny a jiných chorob.
Vynález rovněž popisuje způsoby výroby sloučenin podle vynálezu.
Podrobný popis vynálezu
Vynález se týká nové skupiny sloučenin, derivátů aminokyselin obecného vzorce I nebo obec35 ného vzorce II
ve kterých 40
J a K znamenají přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo skupinou Ar substituovanou přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku;
přičemž každá skupina Ar je nezávisle vybrána ze skupiny sestávající z fenylové skupiny, 2pyridylové skupiny, 3-pyridylové skupiny, 4-pyridylové skupiny a imidazolylové skupiny,
-2CZ 298586 B6 přičemž uvedená skupina Ar může obsahovat jeden nebo více substituentů, které jsou nezávisle vybrány ze souboru sestávajícího z atomu vodíku, hydroxylové skupiny, nitroskupiny, trofluormethylové skupiny, přímé nebo rozvětvené alkylové skupiny obsahující 1 až 6 atomy uhlíku, přímé nebo rozvětvené O-alkylové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, atomu halogenu, skupinu SO3H a skupiny NR3R4, kde R3 a R4 jsou nezávisle vybrány ze souboru sestávajícího z přímé nebo rozvětvené alkylové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, přímé nebo rozvětvené alkenylové skupiny obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, atomu vodíku a benzylové skupiny; nebo kde R3 a R4 jsou nezávisle vybrány ze souboru sestávajícího z přímé nebo rozvětvené alkylové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, přímé nebo rozvětvené alkenylové skupiny obsahu10 jící 3 až 6 atomů uhlíku, atomu vodíku a benzylové skupiny; nebo kde R3 a R4 společně mohou tvořit pěti- až šestičlenný heterocyklický kruh; a kde w znamená 1 nebo 2.
Tabulka I udává některé příklady výhodných sloučenin podle vynálezu, obecného vzorce Γ
ve kterém B, D, J, K a R] mají významy definovaný v tabulce I.
Tabulka I
Slouč. 8‘ D* J K R,
6 4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-(CH,b- CH, PhCH, 4-F-PhCH,-
7 .........4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-{CH,),- CH, PhCH, PhCH,-
8 4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-(CH,),- CH, PhCH, 4-CI-PhCH,-
9 4-PyKCH,),- 4-Pyr-(CH,),- CH, 4-Cl-PhCH, PhCH,-
10 H- Ph{CH,)s CH, PhCH, 4-Pyr-CH,
12 3-Pyr-(CH,)r 3-Pyr-(CH,},- CH, PhCH, PhCH,-
16 4-Pyr-(CH,)r 4-Pyr-(CH,),- CH, <CH,),CHCH,- PhCH,-
17 4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-{CH3),- CH, (CH,),CHCH,- 4-F-PhCH,-
18 4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-íCH,),- CH, (CH,),CHCH>- 4-CI-PhCH,-
19 4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-(CH,b- CH, 4-CI-PhCH, 4-F-PhCH,-
21 H- ........3-lm-(CH,}3 CH, PhCH, PhCH,-
23 Ph(CH,),- .........PhíCHJr CH, PhCH, 1H-lm-CH,
Pyr znamená pyridylovou skupinu, Ph znamená fenylovou skupinu a Im znamená imidazolylovou skupinu.
Nejvýhodnější sloučeniny podle vynálezu jsou vybrány ze souboru, který sestává z:
-3CZ 298586 B6 (5)-V-(4-fluorbenzyl)-2-(methyl-(2-oxo-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl-A(3-pyridin-4-yl)-l-(2-pyridin-4-yl)ethyl)propyl)propionamidu, tj. sloučeniny 6; 0S)-A-(4-chlorbenzyl)-2-(methyl-(2-oxo-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl-V(3-pyridin^l-yl)-l-(2-pyridin-4-yl)ethyl)propyl)propionamidu, tj. sloučeniny 8;
(S)-A-benzyl)-3-(4-chlorfenyl-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)jV-(3-pyridin^-yl)-l-(2-pyridin-4-yl)ethyl)propyl)propionamidu, tj. sloučeniny 9; a (ó)-A'-(4-fluorbenzyl)-3-(4-chlorfenyl)-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-A-(3-pyridin-M-yl)-l-(2-pyridin-4-yl)ethyl)propyl)propionamidu, tj. sloučeniny 19.
Sloučeniny podle vynálezu zahrnují farmaceuticky přijatelné deriváty. Termín „farmaceuticky přijatelný derivát“ označuje jakoukoliv farmaceuticky přijatelnou sůl, ester nebo sůl takového esteru, sloučeniny podle vynálezu, nebo libovolnou jinou sloučeninu, která je po podání pacientovi schopná přímo nebo nepřímo poskytovat sloučeninu podle vynálezu nebo její metabolit nebo zbytek, vyznačující se schopností udržovat, zvyšovat nebo obnovovat citlivost MDR-buněk na terapeutická nebo proíylaktická činidla nebo zabraňovat vzniku rezistence vůči více léčivům.
Sloučeniny podle vynálezu lze získat za použití libovolného běžného způsobu. Výhodně se tyto sloučeniny chemicky syntetizují ze snadno dostupných výchozích materiálů, jako jsou alfa-aminokyseliny. Pro syntézu těchto sloučenin jsou rovněž výhodné modulární a konvergentní způ20 soby. U konvergentního způsobu jsou například v koncových stupních syntézy spojovány velké části konečného produktu, což je lepší než přírůstkové přidávání malých částí k rostoucímu řetězci molekuly.
Schéma 1 znázorňuje reprezentativní příklad konvergentního způsobu syntézy sloučenin obecné25 ho vzorce I, II, resp. Γ, které jsou reprezentovány obecným vzorcem I*, kde B je atom vodíku nebo -CH2-(CH2)w-Ar; D je -CH2-(CH2)W-Ar; X je Ar; Rj je -CH2-Ar; m je 0; a J, K a Ar mají význam definovaný výše. Tento způsob zahrnuje kopulaci chráněné aminokyseliny obecného vzorce IV, kde P představuje chránící skupinu, s aminem obecného vzorce V, za vzniku aminoamidu obecného vzorce VI. Chráněné alfa-aminokyseliny jsou v oboru velmi dobře známé a mnohé z nich jsou komerčně dostupné. Například běžné chránící skupiny a vhodné způsoby chránění aminokyselin jsou popsány v práci T. W. Greene, P, G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, druhé vydání, John Wiley and Sons, New York, (1991). Pro chránění dusíkového atomu ve sloučeninách obecného vzorce IV jsou výhodné alkoxykarbonylové skupiny, přičemž výhodnější jsou Zere-butoxykarbonylová skupina (Boc), benzyloxykarbonylová skupina (Cbz), allyloxykarbonylová skupina (Alloc) a trimethylsilylethoxykarbonylová skupina (Teoc).
Po kopulaci se ze sloučenin obecného vzorce IV odstraní chránící skupiny za podmínek vhodných pro odstranění chránících skupin (viz Greene, shora) a volná aminoskupina sloučeniny obecného vzorce VII se potom acyluje za použití acylchloridu obecného vzorce VIII' nebo akti40 vovaného derivátu sloučeniny obecného vzorce VIII. Halogenová chlorová skupina ve sloučenině obecného vzorce VIII' může být nahrazena jinými odstupujícími skupinami nebo aktivačními skupinami známými v oboru, jako jsou jiné atomy halogenu, imidazolylová skupina nebo pentafluorfenoxylová skupina.
Aminy obecného vzorce V, kde m znamená O (vzorec V') se mohou konvenčně připravit například tak, jak je ilustrováno ve schématu 2, 3 a 4. Reakcí organokovového činidla obecného vzorce XV a karboxylové kyseliny obecného vzorce XVI nebo jejího ekvivalentu (například Weinrebova amidu) se získají ketony obecného vzorce XVII.
-410
Schéma 1
Schéma 2
B-kev (XV) o 0 MBKi ’ o ” ο'Τ, „Jk, (XVI) (XVU) (V)
Schéma 3
Kovový
A^-h«lo<«i UttlvzáKx
PWIH)
Aq < Ai^isco neiivíílř Ai stopin v í»k íe definováno v texit) (XDQ te
H^Ocattlyutci
(XX) (XVIT)
J (V)
Schéma 4
-5 CZ 298586 B6
Tyto ketony se mohou snadno převést na aminy obecného vzorce V' za použití postupů známých v oboru, například reduktivní aminací (schéma 2).
Alternativně (schéma 3) lze l,6-heptadiin-4-ol kopulovat pomocí reakce katalyzované kovem s aromatickými halogenidy obecného vzorce XVIII, čímž se získá alkohol obecného vzorce XIX. Následující hydrogenací se získá alkohol obecného vzorce XX. Oxidací na keton obecného vzorce XVII' a následnou aminací se získá žádaný amin obecného vzorce V'.
ίο V dalším provedení podle vynálezu (schéma 4) se ketodien obecného vzorce XXII, odvozený od aldehydu obecného vzorce XXI redukuje na keton obecného vzorce XVII Opět, standardní aminací se získá amin obecného vzorce V.
Vynález tedy rovněž zahrnuje způsob výroby derivátů aminokyselin obecného vzorce I, II nebo 15 Γ, který zahrnuje následující stupně, při nichž se (a) kopuluje aminokyselina obecného vzorce IV s aminem obecného vzorce V:
(IV) (V) za zisku amidu obecného vzorce VI:
(VI) , kde P je běžná chránící skupina, (b) odstraní chránící skupina amidu obecného vzorce VI za zisku aminoamidu obecného vzorce VII:
K Ri B
(VII), (c) acyluje aminoamid obecného vzorce VII sloučeninou obecného vzorce VIII:
-6CZ 298586 B6
kde:
B je atom vodíku nebo -CH2-(CH2)W-Ar;
D je-CH2-(CH2)W-Ar;
X je Ar;
Ri je -CH2-Ar;
m je 0; a
J, K a Ar mají význam definovaný výše.
Odborníkovi v oboru je zřejmé, že podle způsobů znázorněných ve schématech 1 až 4 lze snadno vyrobit jakoukoliv sloučeninu podle vynálezu. Stejné způsoby lze použít pro syntézu mnoha rozličných koncových produktů, s tím, že se mění významy symbolů ve výchozích materiálech.
Za použití opticky aktivních výchozích materiálů lze rovněž připravit opticky aktivní sloučeniny podle vynálezu, čímž je možné se vyhnout štěpení enantiomerů nebo separaci diastereomerů v pozdějších stupních syntézy.
Odborníkovi v oboru je rovněž zřejmé, že výše uvedená schémata syntézy nemají zahrnovat vyčerpávající seznam všech způsobů, kterými lze sloučeniny podle vynálezu (nebo meziprodukty) syntetizovat. Odborníkovi v oboru jsou zřejmé další způsoby nebo modifikace výše uvedených obecných schémat.
Sloučeniny podle vynálezu lze modifikovat připojením vhodných funkčních skupin pro zesílení selektivních biologických vlastností. Taková modifikace jsou v oboru známé a patří mezi ně modifikace, které zvyšují biologickou penetraci do daného biologického systému (například krve, lymfatického systému, centrálního nervového systému), zvyšují orální dostupnost, zvyšují rozpustnost pro umožnění injekčního podání, mění metabolismus nebo mění rychlost exkrece.
Sloučeniny podle vynálezu se vyznačují svojí schopností zvyšovat, obnovovat nebo udržovat citlivost MDR-buněk na cytotoxické sloučeniny, jako jsou například sloučeniny typicky používané v terapii. Na základě této schopnosti se sloučeniny podle vynálezu výhodně používají jako chemosenzitizační činidla pro zvýšení účinnosti chemoterapie u jedinců, kteří jsou postiženi rakovinami, nádory, metastázami nebo chorobami rezistentními vůči více léčivům. Kromě toho jsou sloučeniny podle vynálezu schopné udržovat citlivost na terapeutická nebo profýlatická činidla u nerezistentních buněk. Sloučeniny podle vynálezu jsou tudíž u pacienta vhodné pro léčení nebo prevenci rezistence vůči více léčivům u pacienta. Specifičtěji, tyto sloučeniny jsou užitečné při léčbě nebo prevenci P-glykoproteinem vyvolané MDR nebo MRP vyvolané MDR.
Termín „pacient“ jak se zde používá, označuje savce včetně člověka: Termín „buňka“ označuje savčí buňky, včetně lidských buněk.
Termíny „senzitizační činidlo“, „senzitizér“, „chemosenzitizační činidlo“, „chemosenzitizér“ a „MDR modifikátor“, jak se zde používají, označují sloučeninu, která má schopnost zvyšovat nebo obnovovat citlivost MDR-buněk nebo udržovat citlivost nerezistentních buněk na jedno nebo několik terapeutických nebo proíylaktických činidel. Termín „MDR-senzitizace“, senziti-7CZ 298586 B6 zace“ a „resenzitizace“ označuje působení takovéto sloučeniny při udržování, zvyšování nebo obnovování citlivosti na léčiva.
Sloučeniny podle vynálezu lze použít ve formě farmaceuticky přijatelných solí odvozených od anorganických nebo organických kyselin a bází. Mezi takové soli s kyselinami patří následující soli: acetáty, adipáty, algináty, aspartáty, benzoáty, benzensulfonáty, hydrogensulfáty, butyráty, citráty, kafráty, kafrsulfonáty, cyklopentanpropionáty, diglukonáty, dodecylsulfáty, ethansulfonáty, fumaráty, flukoheptanoáty, glycerofosfáty, hemisulfáty, heptanoáty, hexanoáty, hydrochloridy, hydrobromidy, hydrojodidy, 2-hydroxyethansulfonáty, laktáty, maleáty methansulfonáty,
2-naftalensulfonáty, nikotináty, oxaláty, pamoáty, pektináty, persulfáty, 3-fenylpropionáty, pikráty, pivaláty, propionáty, sukcináty, tartráty, thiokyanáty, tosyláty a undekanoáty. Mezi soli s bázemi patří amoniové soli, soli s alkalickými kovy, jako jsou sodné a draselné soli, soli s kovy alkalických zemin, jako jsou soli s dicyklohexylaminem, N-methyl-D-glukaminem a soli s aminokyselinami, jako je arginin, lysin atd. Skupiny obsahující bazický dusík mohou být také kvar15 temizovány činidly, jako jsou nižší alkylhalogenidy, jak jsou methyl-, ethyl-, propyl- a butylchloridy, -bromidy a -jodidy, dialkylsulfáty, jako jsou dimethyl-, diethyl-dibutyl- a diamylsulfáty, halogenidy s dlouhým řetězcem, jako jsou decyl-, lauryl-, myristyl- a stearylchloridy, bromidy a -jodidy a arylkylhalogenidy, jak oje benzylbromid a fenylethylbromid a jiné. Takovouto kvartemizací lze získat ve vodě či v oleji rozpustné nebo dispergovatelné produkty.
Sloučeniny podle vynálezu lze podávat orálně, parenterálně, pomocí inhalačního spraye, místně, rektálně, nasálně, bukálně, vaginálně nebo pomocí implantovaného zásobníku v dávkách ve formě obsahující běžné netoxické farmaceuticky přijatelné nosiče, pomocné látky a vehikula. Termín „parenterální“, jak se zde používá zahrnuje subkutánní, intravenosní, intramuskulámí, intra25 artikulámí, intrasynoviální, intrastemální, intratekální, intrahepatické, intralézní a intrakraniální injekce nebo infúzní techniky.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu obsahují libovolnou sloučeninu podle vynálezu nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, spolu s libovolným nosičem, pomocnou látkou nebo vehiku30 lem. Mezi farmaceuticky přijatelné nosiče, pomocné látky a vehikula, která je možno použít ve farmaceutických prostředcích podle vynálezu patří, aniž by tím byl jakkoliv omezen jejich rozsah, iontoměniče, oxid hlinitý, stearát hlinitý, lecitin, sérové proteiny, jako je albumin séra člověka, látky působící jako pufry, jako jsou fosfáty, glycin, kyselina sorbová, sorbát draselný, směsi parciálních esterů glycerolu s nasycenými rostlinnými mastnými kyselinami, voda, soli nebo elektrolyty, jako je protamin-sulfát, hydrogenfosforečnan sodný, hydrogenfosforečnan draselný, chlorid sodný, soli zinku, koloidní oxid křemičitý, magnesium-trisilikát, polyvinylpyrrolidon, látky na bázi celulózy, polyethylenglykol, natrium-karboxymethylcelulóza, polyakryláty, vosky, blokové polymery polyethylenu a polyoxypropylenu, polyethylenglykol a vosk z ovčí vlny.
Podle vynálezu mohou být farmaceutické prostředky ve formě sterilního injikovatelného přípravku, například jako sterilní injikovatelná sodná nebo olejovitá suspenze. Tuto suspenzi lze vytvořit pomocí postupů známých v oboru za použití vhodných dispergaěních činidel nebo smáčedel a suspendaěních činidel. Sterilním injikovatelným přípravkem může být též sterilní injiko45 vatelný roztok nebo suspenze v netoxickém parenterálně přijatelném ředidle nebo rozpouštědle, například roztok v 1,3-butandiolu. Mezi přijatelná ředidla a rozpouštědla, která lze použít, patří voda, Ringerův roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Kromě toho se jako rozpouštědlové nebo suspendující prostředí běžně používají sterilní nevysychavé oleje. Pro tento účel je možné použít jakýkoliv nedráždivý nevysychavý olej včetně syntetických mono- nebo diglyceridů. Pro výrobu injikovatelných přípravků jsou vhodné mastné kyseliny, jako je kyselina olejová a její glyceridové deriváty, jakož i farmaceuticky přijatelné oleje, jako je olivový olej nebo ricinový olej, zejména v jejich polyoxyethylovaných formách. Tyto olejové roztoky nebo suspenze mohou též obsahovat jako ředidlo nebo dispergátor alkohol s dlouhým řetězcem, jako je Ph. Helv nebo podobný alkohol.
-8CZ 298586 B6
Farmaceutické prostředky podle vynálezu lze orálně podávat v orálně přijatelných dávkovačích formách mezi které patří, aniž by se tím jejich rozsah jakkoliv omezoval, kapsle, tablety a vodné suspenze nebo roztoky. V případě tablet pro orální použití patří mezi nosiče, které se běžně používají, laktóza a kukuřičný škrob. Typicky se přidávají též kluzné látky, jako je stearát hořečnatý, laktóza a sušený kukuřičný škrob. Jsou-li pro orální podání potřeba vodné suspenze, je účinná látka v kombinaci s emulgačními a suspendujícími činidly. Pokud je to žádoucí, je možné přidat některá sladidla, chuťové přísady nebo barviva.
Alternativně lze farmaceutické prostředky podle vynálezu podávat ve formě čípků pro rektální podání. Tyto prostředky lze připravit smícháním činidla s vhodnou nedráždivou nosnou látkou, která je pevná při teplotě místnosti, ale kapalná při teplotě rekta, a tudíž se v rektu rozpustí a uvolní se z ní léčivo. Mezi takovéto materiály patří kakaové máslo, včelí vosk a polyethylenglykoly.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu lze rovněž aplikovat místně, zejména pokud cíl ošetření zahrnuje oblasti nebo orgány, které jsou pomocí místní aplikace snadno přístupné, včetně případů, kdy se jedná o choroby očí, kůže nebo spodní části intestinálního traktu. Pro všechny tyto oblasti nebo orgány se vhodné prostředky pro místní aplikaci snadno připraví.
Místní aplikaci v případě spodní části intestinálního traktu lze provést pomocí rektálních čípků (viz výše) nebo ve vhodných klystýrech. Možné je také použít místní transdermální náplasti.
Pro místní aplikaci je možné farmaceutický prostředek formulovat jako vhodnou mast obsahující účinnou látku suspendovanou nebo rozpouštěnou v jednom nebo několika nosičích. Mezi nosiče pro místní podání sloučenin podle vynálezu patří, aniž by se tímto rozsah jakkoliv omezoval, minerální oleje, petrolatum, propylenglykol, polyoxyethylen, polyoxypropylenová sloučenina, emulguj ící vosk a voda. Alternativně, farmaceutický prostředek může být formulován ve vhodném omyvadle nebo krému, obsahující aktivní složku suspendovanou nebo rozpouštěnou v jednom nebo více farmaceuticky přijatelných nosičích. Mezi vhodné nosiče patří, aniž by se tím rozsah jakkoliv omezoval, minerální oleje, sorbitan-monostearát, polysorbát 60, vosky na bázi cetylester, cetylarylalkohol, 2-oktyldodekanol, benzylalkohol a voda.
Pro oftalmické použití je možné farmaceutické prostředky formulovat jako jemné suspenze v izotonickém sterilním roztoku s upraveným pH, nebo výhodně jako roztoky v izotonickém sterilním fyziologickém roztoku s upraveným pH, buďto za přítomnosti nebo za nepřítomnosti konzervační přísady, jako je benzalkoniumchlorid. Alternativně lze pro oftalmické použití farmaceutické prostředky formulovat v masti, jako je petrolatum.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu lze podávat rovněž jako nasální aerosol nebo inhalaci.
Takovéto prostředky se připrav pomocí v oboru známých postupů pro vytváření farmaceutických prostředků, a lze je připravit jako roztoky ve fyziologickém roztoku, za použití benzylalkoholu nebo jiných vhodných konzervačních přísad, látek podporujících absorpci pro rozšíření biologické dostupnosti, fluorovaných uhlovodíků, nebo/a jiných běžných rozpouštědel, nebo dispergátorů.
Množství účinné látky, které lze kombinovat s nosnými materiály pro vytvoření jednotkové dávkovači formy se mění v závislostí na ošetřovaném pacientovi a na konkrétním způsobu podání. Je však třeba vzít v úvahu, že specifické dávky a režimy léčení konkrétního pacienta závisí na řadě faktorů, včetně účinnosti dané použité sloučeniny, věku, tělesné hmotnosti, celkovém zdravotním stavu, pohlaví, typu stravy, doby podání, rychlosti exkrece sloučeniny, kombinace léčiv, úsudku ošetřujícího lékaře a závažnosti konkrétní ošetřované choroby. Množství účinné látky může záviset rovněž na terapeutickém nebo profylaktickém činidle, pokud se takovéto činidlo používá, se kterým je látka společně podávána. Termín „farmaceuticky účinné množství“, jak je zde používán, označuje množství účinné pro prevenci vzniku rezistence vůči více léčivům nebo pro udržo55 vání, zvyšování nebo obnovování citlivosti vůči léčivům u MDR-buněk.
-9CZ 298586 B6
Vhodné jsou dávky účinné sloučeniny mezi přibližně 0,01 a přibližně 100 mg/kg tělesné hmotnosti a den, výhodně mezi přibližně 0,5 a přibližně 50 mg/kg tělesné hmotnosti a den. Typický přípravek obsahuje od přibližně 5 % do přibližně 95 % účinné sloučeniny (hmotnost/hmotnost).
Výhodně takové přípravky obsahují od přibližně 20 % do přibližně 80 % účinné sloučeniny.
Pokud se sloučeniny podle vynálezu podávají v kombinační terapii s jinými činidly, lze je podávat pacientovi postupně nebo současně. Alternativně mohou farmaceutické nebo proíylaktické prostředky podle vynálezu obsahovat kombinaci sloučeniny podle vynálezu a jiného terapeutic10 kého nebo profylaktického činidla.
Sloučeniny podle vynálezu lze podávat například samotné nebo v kombinaci s jedním nebo několika terapeutickými činidly, jako jsou chemoterapeutická činidla (například aktinomycin D, doxorubicin, vincristin, vinblastin, etoposid, amsacrin, mitoxantron, tenipasid, taxol a kolchicin) a/nebo chemosenzitizační činidla (například cyklosporin A a jeho analogy, fenothiaziny a thioxanthery), za účelem zvýšení citlivosti MDR-buněk pacienta na činidlo nebo činidla.
Z důvodu úplnějšího pochopení vynálezu jsou dále popsány příklady provedení vynálezu. Tyto příklady jsou uvedeny pouze pro ilustraci a v žádném směru neomezují rozsah vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Obecné postupy
Spektrum protonové nukleární rezonance ('H NMR) se stanovuje při 500 MHz na přístroji Bruker AMX 500. Chemické posuny jsou uváděny v ppm (δ) oproti tetramethylsilanu jako vnitřnímu standardu (δ 0,0). Analytická vysoceúčinná kapalinová chromatografie se provádí na kapalinovém chromatografu Waters 600E nebo Hewlett Packard 1050.
Příklad 1
1.5- Di(pyrid-4-yl)-pent-l,4-dien-3-on (sloučenina 1)
K roztoku 1,3-aceton dikarboxylové kyseliny (21,0 g, 0,144 mmol) v absolutním ethanolu (200 ml) se přidá po kapkách 4-pyridinkarboxaldehyd (30,8 g, 0,288 mmol). V průběhu adice dochází k uvolňování plynu. Po míchání při teplotě místnosti po dobu 2 hodin se reakční směs zpracuje koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou (100 ml) a pak se zahřívá na teplotu 80 °C, přičemž se pomalu tvoří žlutá sraženina. Přidá se dalších 500 1 ethanolu, aby bylo možné suspenzi míchat. Po 1 hodině zahřívání na teplotu 80 °C se sraženina sebere filtrací, promyje se ethanolem a suší se ve vakuu a získá se žádaný produkt jako žlutá pevná látka. Vzniklá dihydrochloridová sůl se rekrystalizuje z methylenchloridu a získá se čistá sloučenina 1.
Příklad 2
1.5- Di(pyrid-4-yl)-pentan-3-on (sloučenina 2)
Ke kaši sloučeniny 1 (21,3 g, 67,4 mmol) v 1,4-dioxanu (40 ml) se přidá triethylamin (48,1 ml, 0,346 mol), kyselina mravenčí (6,54 ml, 0,145 mol) a 10% palladium na uhlí (0,7 g) a vzniklá směs se zahřívá pod zpětným chladičem k varu. Po jednohodinovém míchání a zahřívání pod zpětným chladičem k varu se reakční směs ochladí na teplotu místnosti, filtruje se a koncentruje se ve vakuu. Vzniklý zbytek se chromatografuje přes silikagel za použití 5% methanolu v methylenchloridu se získá žádaná sloučenina.
-10CZ 298586 B6
Příklad 3 (4-Fluorbenzyl)-(3-(pyrid-4-yl)-l-(2-(pyrid-4-yl)ethyl)propyl)amin (sloučenina 3)
Do nádoby opatřené Dean-Starkovým odlučovačem se přidá sloučenina 2 (12,46 g, 51,91 mmol), 4-fluorbenzylamin (5,93 ml, 51,91 mmol) a benzen (50 ml) a vzniklá směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem. Po přidání 930 μΐ vody se reakční směs ochladí a koncentruje. Zbytek se převede do ethanolu (50 ml) a přidá se ke kaši borohydridu sodného (2,96 g, 77,8 mmol) ío v ethanolu (50 ml) a směs se zahřívá na teplotu 80 °C a míchá se 1 hodinu. Reakční směs se ochladí a koncentruje. Zbytek se převede do vody a okyselí se na pH 3,0 pomocí 6N kyseliny chlorovodíkové. Vodná fáze se dvakrát promyje ethylacetátem. Vodná fáze se alkalizuje hydroxidem sodným na pH 10 a produkt se extrahuje dvakrát methylenchloridem. Organická fáze se spojí, promyjí se solankou, suší přes bezvodý síran hořečnatý, filtrují se a koncentrují ve vakuu.
Chromatografií zbytku před silikagel za použití 5% methanolu v methylenchloridu se získá sloučenina 3.
Příklad 4 (5)-/V-(4-Fluorbenzyl)-2-(jV-methyl-V-tórc-butylkarbamoyl)-amino-3-fenyl-2V-(3-(pyrid-4yl)-l-(2-(pyrid-4-yl)ethyl)propyl)propionamid (sloučenina 4)
K roztoku sloučeniny 3 (550 mg, 1,66 mmol) a (L)-BOC-V-methylfenylalaninu (700 mg, 2,5 25 mmol) v methylenchloridu (4,0 ml) obsahující diisopropylethylamin (300 μΐ, 1,72 mmol) se přidá hydrochloríd (3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (480 mg, 2,5 mmol) a reakční směs se míchá 48 hodin. Reakční směs se zředí ethylacetátem a vodou. Vrstvy se rozdělí a vodná fáze se znovu extrahuje ethylacetátem. Organické extrakty se spojí, promyjí se nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou, solankou, suší se před bezvodý síran hořečnatý, filtrují se a koncentrují se ve vakuu. Chromatografií zbytku přes silikagel za použití 5% methanolu v methylenchloridu se získá sloučenina 4.
Příklad 5 (S)-V-(4-Fluorbenzyl)-2-methylamino-3-fenyl-iV-(pyridin^4-yl)-l-(2-(pyrid-4-yl)ethyl)propyl)propionamid (sloučenina 5)
Sloučenina 4 se rozpustí v methylenchloridu (10 ml) a zpracuje se trifluoroctovou kyselinou 40 (4,0 ml). Po míchání při teplotě místnosti po dobu 1,5 hodiny se reakční směs koncentruje ve vakuu. Zbytek se neutralizuje nasyceným uhličitanem draselným a extrahuje se dvakrát ethylacetátem. Extrakty se spojí, promyjí vodou, suší se přes bezvodý síran hořečnatý, filtrují a koncentrují se ve vakuu a získá se sloučenina 5.
Příklad 6 (S)-N-(4-Fluorbenzyl)-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl-N(3-(pyrid-4-yl)-l-(2-(pyrid-4-yl)-ethyl)propyl)propionamid (sloučenina 6)
K roztoku sloučeniny 5 (500 mg, 0,98 mmol) a 3,4,5-trimethoxybenzoylmravenčí kyseliny (294 mg, 1,22 mmol) v methylenchloridu (4,0 ml) obsahující ΛξΑ-dimethylformamid (0,4 ml) se přidá hydrochloríd (3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (235 mg, 1,22 mmol) a reakční směs se míchá 24 hodin. Reakční směs se zředí ethylacetátem a vodou. Vrstvy se oddělí a vodná fáze se znovu extrahuje ethylacetátem. Organické extrakty se spojí, promyjí se nasyceným
-11 CZ 298586 B6 hydrogenuhličitanem sodným, vodou, solankou, suší se přes bezvodý síran hořečnatý, filtrují a koncentrují se ve vakuu. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití 5% methanolu v methylenchloridu a získá se žádaný produkt. 'H NMR jako směs rotomerů (500 Hz, CDC13) δ 8,48 - 8,44 (m), 8,38 (dd), 7,36 - 7,33 (m), 7,28 - 7,18 (m), 7,13 - 7,02 (m), 6,97 - 6,87 (m),
6,58 (d), 6,00 (dt), 5,81 (t), 4,97 (š, s), 4,81 (d), 4,23 - 4,16 (m), 3,93 (s), 3,90 (s), 3,85 (s), 3,76 (s), 3,59 (dd), 3,28 (dd), 3,20 (s), 3,15 (s), 3,04 - 2,96 (m), 3,02 (s), 3,01 (s), 2,94 (dd), 2,63 (dt), 2,53 - 2,37 (m), 1,92- 1,78 (m), 1,72- 1,62 (m), 1,52- 1,42 m).
ío Příklad 7 (*S)-A'-Benzyl-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl-7V-(3(pyrid-4-yl)-l-(2-pyrid-4-yl-ethyl)propyl)propionamid (sloučenina 7)
Sloučenina 7 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 3 až 6 nahrazením 4-fluorbenzylaminu benzylaminem. 'HNMR jako směs rotomerů (500 MHz, CDC13) δ 8,48 (dd), 8,53 (dd), 8,43 (dd), 8,35 (dd), 7,38 (d), 7,30-7,18 (m), 7,17 - 7,02 (m), 6,93 (s), 6,89 (d), 6,54 (d), 6,03 (dd), 5,86 (t), 5,08 (š, d), 4,88 (d), 4,32 4,18 (m), 3,95 (s), 3,89 (s), 3,86 (s), 3,73 (s), 3,63 (dd), 3,23-3,19 (m), 3,09 (dd), 3,05 (s), 3,03 (s), 2,97 (dd), 2,63 (dt), 2,57 - 2,37 (m), 2,24 (dt),
2,06 (m), 1,95 - 1,76 (m), 1,74 - 1,63 (m), 1,54-1,44 (m).
Příklad 8 (5)-jV-(4-Chlorbenzyl)-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl2V-(3-(pyridin-4-yl)-l-(2-pyrid-4-yl)-ethyl)propyl)propionamid (sloučenina 8)
Sloučenina 8 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 3 až 6 nahrazením 4-fluorbenzylaminu 4-chlorbenzylaminem. 'H NMR jako směs rotomerů (500 MHz, CDC13) δ 8,49 (dt),
8,45 (dd), 8,40 (dd), 7,69 (d), 7,31 - 7,14 (m), 7,12 (s), 7,08-7,03 (m), 6,98 (s), 6,94 - 6,91 (m),
6,85 (d), 6,02 (dd), 5,79 (t), 4,99 (š d), 4,83 (d), 4,22 - 4,16 (m), 3,96 (m), 3,91 (s), 3,88 (s), 3,87 (s), 3,81 (s), 3,78 (s), 3,61 (dd), 3,33 (dd), 3,21 (s), 3,17 (s), 3,04 (s), 3,03 (s), 3,03 - 3,00 (m), 2,95 (dd), 2,65 (dt), 2,56 - 2,40 (m), 2,28 (dt), 1,90 - 1,80 (m), 1,75 - 1,66 (m), 1,52 - 1,43 (m).
Příklad 9 (S)-lV-Benzyl-3-(4-chlorfenyl)-2-(methyl-(2-oxo-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino-2V(3-(pyrid-4-yl)ethyl)propyl)propionamid (sloučenina 9)
Sloučenina 9 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 3 až 6 nahrazením 4-fluorbenzylaminu benzylaminem a (L)-BOC-jV-methylfenylalaninu (Lj-BOC-jV-methyl-4-chlorfenylaninem. 'HNMR jako směs rotamerů (500 MHz, CDC13) δ 8,48 (dd), 8,45 (dt), 8,38 (dd), 7,32-6,87 (m), 6,58 (d), 5,94 (dd), 5,78 (t), 5,05 (šd), 4,83 (d), 4,26 (dd), 4,15 (m), 3,97 (s), 3,89 (s), 3,86 (s), 3,75 (s), 3,57 (dd), 3,20 (s), 3,15 (s), 3,15 - 3,09 (m), 3,05 - 2,96 (m), 3,01 (s), 3,00 (s), 2,91 (dd), 2,65 - 2,38 (m), 2,26 (dt), 1,94 - 1,47 (m).
Příklad 10 50 (*S)-2-(Methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl-2V-(4-fenylbutyl)-jV[(pyrid-4-yl)methyl]propionamid (sloučenina 10)
Sloučenina 10 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 3 až 6 nahrazením 4-fluor55 benzylaminu 4-fenylbutylaminem a sloučeniny 2 s 4-pyridinkarboxaldehydem. 'H NMR jako
- 12CZ 298586 B6 směs rotomerů (500 MHz, CDC13) δ 8,46 (dd), 8,42 (dd), 7,30 - 7,23 (m), 7,18 - 7,11 (m), 7,11 (s), 7,10 (s), 6,90 (d), 6,77 (d), 5,88 (t), 5,60 (dd), 4,85 (d), 4,50 (d), 4,28 (d), 3,93 (s), 3,83 (s), 3,81 (s), 3,80 (s), 3,65 - 3,50 (m), 3,37 (m), 3,20 - 3,15 (m), 3,08 - 3,06 (m), 3,06 (s), 3,05 (s), 2,92 (dd), 2,60 (m), 2,54 (m), 1,60 - 1,48 (m), 1,38-1,2 (m).
Příklad 11
1,7-di(pyrid-4-yl)-heptan-4-on (sloučenina 11) io
K roztoku l,7-di(pyrid-4-yl)-heptan-4-onu (4,1 g, 15,2 mmol) v methylenchloridu (50 ml) se při teplotě 0 °C přidá bromid draselný (180 mg) a 2,2,6,6-tetramethyl-l-piperidinyloxy, volný radikál (71 mg). Ke vzniklé směsi se přidá po kapkách roztok hydrogenuhličitanu sodného (510 mg) v chlornanu sodném (65 ml). Po skončeném přidávání se reakční směs ohřeje na teplotu místnosti a míchá se 30 minut. Směs se potom zředí ethylacetátem a vodou. Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se znovu extrahuje ethylacetátem. Organické extrakty se spojí, promyjí se vodou a solankou, suší se přes bezvodý síran hořečnatý, filtrují se a koncentrují se ve vakuu. Chromatografíí zbytku přes silikagel za použití 5% methanolu v methylenchloridu se získá sloučenina 11.
Příklad 12 (S)-V-Benzyl-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl-V-(3pyrid-4-yl)-l-(2-pyrid-4-yl)-propyl)-butyl)propionamid (sloučenina 12)
Sloučenina 12 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 3 až 6 nahrazením 4-fluorbenzylaminu benzylaminem a sloučeniny 2 sloučeninou 11. ’H NMR jako směs rotomerů (500 MHz, CDC13) δ 8,43 - 8,38 (m), 8,30 (m), 8,16 (m), 7,53 - 7,45 (m), 7,34 (m), 7,32 (m), 7,26 - 7,222 (m), 7,19 - 7,07 (m), 7,00 - 6,83 (m), 5,89 (dd), 5,72 (t), 4,90 (d), 4,72 (d), 4,10 (d),
4,00 (d), 3,93 (s), 3,81 (s), 3,85 (s), 3,74 (s), 3,52 (dd), 3,16 - 3,10 (m), 3,04 (s), 2,99 (dd), 2,93 (s), 2,84 (dd), 2,67 - 2,38 (m), 2,30 (m), 2,22 (m), 1,63 - 1,12 (m), 0,94 (m).
Příklad 13
Methyl-{3-{pyrid-4-yl)-l-(pyrid-4-yl)-ethyl)propyl)-amin (sloučenina 13)
Ke kaši methylaminhydrochloridu (1,7 g, 25,4 mmol) a octanu sodného (2,5 g, 30,48 mmol) v methanolu (20 ml) se přidá roztok sloučeniny 2 (1,21 g, 5,08 mmol) v methanolu (5 ml).
Vzniklá směs se zpracuje roztokem kyanborohydridu sodného (370 mg, 6,09 mmol) v methanolu (5 ml) a zahřívá se na teplotu 80 °C. Po 1 hodině při teplotě 80 °C se reakční směs ochladí na teplotu místnosti a koncentruje se ve vakuu. Zbytek se převede do methylenchloridu a 2N hydroxidu sodného. Vrstvy se oddělí a organická vrstva se promyje solankou, suší se přes bezvodý síran hořečnatý, filtruje se a koncentruje se ve vakuu a získá se sloučenina 13.
Příklad 14 (5)-V-Methyl-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl-V-(3-pyri50 din-4-yl)-l-(2-(pyrid-4-yl)-ethyl)propyl)propionamid (sloučenina 14)
Sloučenina 14 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 4 až 6 nahrazením sloučeniny 3 sloučeninou 13. *H NMR jako směs rotomerů (500 MHz, CDC13) δ 8,50 - 8,46 (m), 8,37 (d), 7,32 - 7,26 (m), 7,21-7,16 (m), 7,10 - 7,06 (m), 6,97 (d), 6,93 (d), 5,93 (d), 5,54 (t), 4,72 (š, s),
-13CZ 298586 B6
4,17 (m), 3,94 (s), 3,92 (s), 3,84 (s), 3,82 (s), 3,51 (dd), 3,38 (dd), 3,29 (s), 3,11 (dd), 3,06 (s), 3,00 (s), 2,97 (dd), 2,86 (s), 2,82 (s), 2,49 (m), 2,37 - 2,23 (m), 2,17-1,98 (m), 1,85 - 1,55 (m).
Příklad 15 (6)-jV-Methyl-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl-jV-(3(pyrid-4-yl)-l-(2-pyrid-4-yl)propyl)butyl)propionamid (sloučenina 15) ío Sloučenina 15 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 13 až 14 nahrazením sloučeniny 2 sloučeninou 11. *H NMR jako směs rotomerů (500 MHz, CDC13) δ 8,44 - 8,38 (m), 8,37 - 8,30 (m), 7,50 - 7,43 (m), 7,08 (m), 7,04 (s), 7,03 - 6,98 (m), 6,90 - 6,86 (m), 5,83 (dd), 5,74 (t), 4,75 (t), 4,65 (m), 3,94 - 3,93 (m), 3,92 (s), 3,90 (s), 3,84 (s), 3,83 (s), 3,44 (dd), 3,32 (dd), 3,20 (s), 3,01 (dd), 2,95 (s), 2,91 (s), 2,87 (dd), 2,59 (s), 2,58 - 2,37 (m), 1,68 - 1,00 (m).
Příklad 16
Benzyl (3-(pyrid-4-yl)-1 -(2-(pyrid-4-yl)ethyl)propyl)am id (S)-4-methyl-2-(methyl-(2-oxo20 2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)pentanové kyseliny (sloučenina 16)
Sloučenina 16 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 3 až 6 nahrazením 4-fluorbenzylaminu benzylaminem a (L)-BOC-N-methylfenylalaninu (Sj-BOC-TV-methylleucinem.
Příklad 17
4-Fluorbenzyl-(3-pyrid-4-yl-l-(2-(pyrid-4-yl)ethyl)propyl)amid (5)-4-methyl-2-(methyl(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)pentanové kyseliny (sloučenina 17)
Sloučenina 17 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 4 až 6 nahrazením (L)-Boc-/Vmethylfenylalaninu (S)-Boc-2V-methylleucinem. 'HNMR jako směs rotomerů (500 MHz, CDC13) 8,48 (m), 8,45 (d), 7,32 (m), 7,18 (s), 7,12 (s), 7,09 - 6,92 (m), 6,84 (d), 5,72 (dd), 5,48 (dd), 4,99 (š, d), 4,68 (d), 4,42 (d), 4,36 (d), 4,29 (m), 3,94 (s), 3,94 (s), 3,91 (s), 3,87 (s), 3,83 (s), 2,96 (s), 2,92 (s), 2,69 (dt), 2,62 - 2,55 (m), 2,52 - 2,44 (m), 2,12 - 1,73 (m), 1,63 - 1,57 (m),
1,48 - 1,39 (m), 1,23 (m), 1,03 (t), 0,90 (d), 0,69 (d).
Příklad 18 40
4-Chlorbenzyl-(3-pyrid-4-yl-l-(2-pyrid-4-yl)ethyl)propyl)amid (ó)-4-methyl-2-(methyl-(2oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)pentanové kyseliny (sloučenina 18)
Sloučenina 18 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 3 až 6 nahrazením 4-fluor45 benzylaminu 4-chlorbenzylaminem a (Áj-Boc-V-methylfenylalaninu (6>-Boc-jV-methylleucinem. ’H NMR jako směs rotomerů (500 MHz, CDC13) δ 8,50 (m), 8,47 (d), 7,37 (d), 7,30 - 7,26 (m), 7,19 (s), 7,13 (s), 7,10 (d), 7,04 (d), 6,98 (d), 6,84 (d), 5,73 (dd), 5,47 (dd), 5,03 (š d), 4,69 (d), 4,42 (d), 4,36 (d), 4,41 (m), 3,95 (s), 3,93 (s), 3,88 (s), 3,84 (s), 2,97 (s), 2,94 (s), 2,70 (dt), 2,63-2,43 (m), 2,12-1,56 (m, 1,48 - 1,40 (m), 1,25 (m), 1,04 (t), 0,91 (d), 0,70 (d).
Příklad 19 (5j-2V-(4-Fluorbenzyl)-3-(4-chlorfenyl)-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)55 amino)-N-(3-pyrid-4-yl-l-(2-pyridin—4-ylethyl)propyl)propionamid (sloučenina 19)
- 14CZ 298586 B6
Sloučenina 19 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 4 až 6 nahrazením (L)-Boc-jVmethylfenylalaninu (L)-Boc-7V-methyl^l-chlorfenylalaninem. 'HNMR jako směs rotomerů (500 MHz, CDC13) δ 8,49 - 8,41 (m) 7,34 (s), 7,28 - 7,20 (m), 7,10 - 6,90 (m). 6,64 (d), 5,92 (dd), 5,74 (t), 4,95 (š s), 4,74 (d), 4,24 - 4,13 (m), 3,94 (s), 3,90 (s), 3,86 (s), 3,77 (s), 3,54 (dd),
3,23 - 3,17 (m), 2,99 (s), 2,98 (s), 2,90 (d), 2,63 (dt), 2,59 - 2,37 (m), 2,28 (dt), 1,94 - 1,70 (m), 1,57- 1,47 (m)
Příklad 20 (4-Chlorbenzyl)-(3-imidazol-l-yl-propyl)amin (sloučenina 20)
K roztoku l-(3-aminopropyl)imidazolu (2,1 g, 16,8 mmol), diisopropylethylaminu (3,5 ml,
20,0 mmol) a 4-7V,7V-dimethylaminopyridinu (200 mg, 1,7 mmol) v methylenchloridu (15 ml) se při teplotě 0 °C přidá po kapkách 4-chlorbenzoylchlorid (2,1 ml, 16,8 mmol). Reakční směs se potom nechá ohřát na teplotu místnosti. Po 5 hodinách se reakční směs zředí methylenchloridem, promyje se 1N hydroxidem sodným, solankou, suší se přes bezvodý síran hořečnatý, filtruje se a koncentruje se ve vakuu a získá se pevná bílá látka. Tento materiál se promyje diethylethrem a získá se V-(3-imidazol-l-yl-propyl)-4-chlorbenzamid. Ke kaši shora uvedeného amidu (1,58 g, 6,0 mmol) v tetrahydrofuranu (30 ml) se pomalu přidá lithiumaluminiumhydrid (456 mg, 12,0 mmol), přičemž se reakce stane exotermickou. Směs se zahřeje na teplotu 80 °C, míchá se 1 hodinu a ochladí se na teplotu 0 °C a přidá se voda (0,5 ml), 15% hydroxid sodný (0,5 ml) a další 1,5 ml vody. Reakční směs se zředí ethylacetátem, suší se přes bezvodý síran hořečnatý, filtruje se a koncentruje se ve vakuu a získá se sloučenina 20.
Příklad 21 (ó)-V-(4-Chlorbenzyl)-V-(3-imidazol-l-yl-propyl)-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenylpropionamid (sloučenina 21)
Sloučenina 21 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 4 až 6, nahrazením sloučeniny 3 sloučeniny 20. *H NMR jako směs rotomerů (500 MHz, CDC13) δ 8,48 (m), 7,44 (š s), 7,37 (š s),
7,30 - 7,16 (m), 7,10 - 7,02 (m), 6,95 (d), 6,83 (m), 5,78 (t), 5,72 (t), 4,77 (d), 4,57 (d), 4,26 (dd),
3,94 (s), 3,93 (s), 3,88 - 3,77 (m), 3,80 (s), 3,48 (dt), 3,42 - 3,33 (m), 3,19-3,14 (m), 3,13 (s), 3,12 (s), 3,13 - 2,97 (m), 2,89 (t), 2,80 (m), 2,74 (t), 2,65 (m), 2,08 - 1,98 (m), 1,90 (m), 1,80 1,60 (m).
Příklad 22
V-(l//-Imidazol-2-yl-methyl)-y-(l-fenylethyl-3-fenylpropyl)amin (sloučenina 22)
K roztoku 1,5-difenylpentan-3-onu (5,26 g, 22,1 mmol), octanu amonného (8,52 g, 110,5 mmol) a octanu sodného (9,06 g, 110,5 mmol) v methanolu (80 ml) se přidá roztok kyanborohydridu sodného (1,67 g, 26,52 mmol) v methanolu (20 ml) a reakční směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem. Potom se míchá při varu pod zpětným chladičem 30 minut a reakční směs se ochladí a koncentruje se do sucha. Zbytek se rozdělí mezi methylenchlorid a 2N hydroxid sodný. Orga50 nická fáze se oddělí, promyje se solankou, suší se přes bezvodý síran hořečnatý, filtruje se a koncentruje se ve vakuu. Chromatografií zbytku na silikagelu za použití 2 až 5% methanolu v methylenchloridu se získá jV-(l-fenylethyl-3-fenylpropyl)amin. K roztoku shora uvedeného aminu (2,1 g, 8,82 mmol) v ethanolu (50 ml) se přidá 2-imidazolkarboxaldehyd (813 mg, 8,47 mmol) a reakční směs se zahřívá na teplotu 50 °C.potom se směs míchá 2 hodiny, výsledný homogenní roztok se zpracuje borohydridem sodným (400 mg, 10,58 mmol) a nechá se míchat
-15CZ 298586 B6 přes noc. Reakční směs se koncentruje do sucha a zbytek se rozdělí mezi m ethylenchlorid a 2N hydroxid sodný. Organická fáze se oddělí, promyje solankou, suší přes bezvodý síran hořečnatý, filtruje a koncentruje se ve vakuu. Chromatografií zbytku na silikagelu za použití 5% methanolu v methylenchloridu se získá sloučenina 22.
Příklad 23 (δ)-Α-( 1 //-Imidazol-2-y 1-methy l)-2-(methy l-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)ío amino)-V-(l-fenylethyl-3-fenylpropyl)-3-fenylpropionamid (sloučenina 23)
Sloučenina 23 se připraví podle postupů popsaných v příkladech 4 až 6 nahrazením sloučeniny 3 sloučeninou 22. ’H NMR jako směs rotomerů (500 MHz, CDC13) δ 7,40 - 7,00 (m), 6,95 - 6,87 (m), 5,95 (t), 5,69 (t), 4,66 (d), 4,46 (d), 4,12 (m), 3,94 (s), 3,92 (s), 3,82 (s), 3,81 (s), 3,80 (s),
3,47 (s), 3,43 (dd), 3,34 (dd), 3,22 (s), 3,15 (s), 3,03 (dd), 3,00 (s), 2,60 (dt), 2,45 - 2,22 (m), 1,80
-1,78 (m)
Příklad 24
Test senzitizace MDR-buněk
Pro testování schopnosti sloučenin podle vynálezu zvyšovat antiproliferační účinnost léčiva lze použít buněčné linie, o kterých je známo, že jsou rezistentní vůči konkrétnímu léčivu. Mezi tyto buněčné linie patří, aniž by šlo o omezující výčet, buněčné linie L1210, P388D, CHO a MCF7. Alternativně je možné rezistentní buněčné linie vyvinout. Buněčná linie se vystaví působení léčiva, vůči kterému je rezistentní nebo testované sloučeniny. Poté se změří životaschopnost buněk a srovná se s životaschopností buněk, které jsou vystaveny působení léčiva v přítomnosti testované sloučeniny.
Byly prováděny testy za použití myších leukemických buněk L1210 transformovaných retrovirem pHaMDRl/A a nesoucím cDNA MDR1, Pastan a kol., Proč. Nattl. Acad. Sci., svazek 85, 4486 - 4490 (1980). Rezistentní linie označenou L1210VMDRC.06 poskytl Dr. Μ. M. Gottesman z institute National Cancer Institute. Tyto transfektované buňky rezistentní vůči léči35 vům byly selektovány pomocí kultivace buněk v 0,06 mg/ml kolchicinu.
Testy rezistence vůči více léčivům byly prováděny umístěním buněk v množství 2 x 103, 1 x 104 nebo 5 x 104 do mikrotitračních destiček s 96 jamkami a jejich vystavením působení deoxorubicinu v rozmezí koncentrací 50 nM - 10 μΜ v přítomnosti nebo nepřítomnosti sloučenin modifi40 kujících rezistenci vůči léčivům („MDR-inhibitorů“) podle vynálezu v koncentraci 1, 2,5 nebo 10 μΜ, jak popsali Ford a kol., Cancer Res., svazek 50, 1748 až 1756 (1990). Po kultivaci po dobu 3 dnů byla určena životaschopnost buněk za použití barviva MTT (Mossman) nebo XTT pro stanovení mytochondriální funkce. Všechna zjišťování byla prováděna ve čtyřech nebo osmi opakováních. Viz též Mossman T., J. Immunol. Methods, svazek 65, 53 až 63 (1983).
Výsledky byly stanoveny srovnáním IC50 pro samotný doxorubicin (IC50 Dox) a pro doxorubicin s MDR inhibitorem (IC50 Dox + inhibitor). Byl vypočítán MDR poměr (IC50 Dox / IC50 Dox + inhibitor) a celková hodnota použita pro srovnání účinnosti sloučenin.
Ve všech testech byla u sloučenin podle vynálezu testována skutečná antiproliferační nebo cytotoxická účinnost. Výsledky jsou shrnuty níže v tabulce 2. Jak vyplývá z tabulky 2, sloučeniny obecně způsobovaly <10% cytotoxicinu v koncentracích 10 μΜ nebo vyšších. V tabulce 2 „NT“ znamená, že sloučenina nebyla v příslušné koncentraci testována.
- 16CZ 298586 B6
Tabulka 2
Zhodnocení sloučenin z hlediska změny rezistence vůči více léčivům
Slou- čeni- na IC^qDox samotný ICsqDox + 1 μΜ IC5QDox •4- 1,0 μΜ MDR poměr 0,5 μΜ MDR poměr 1,0 μΜ
6 350 65 <50 5,4 >7,0
7 425 95 <50 4,5 >8,5
8 600 55 150 4,0 10, 9
9 275 <50 <50 >5,5 >5,5
10 400 170 65 2,4 6,1
12 460 125 <50 3,2 >9,2
14 775 610 350 1,3 2,2
15 375 375 175 1,0 2,1
16 350 65 <50 5,4 >7,0
21 350 275 85 1,3 4,1
23 600 125 <50 4,8 >12,0
CsA 500 NT <55 NT >9,1
Příklad 25
Inhibice MRP-zprostředkovaná MDR
Za účelem demonstrace, že sloučeniny podle vynálezu jsou účinné při potlačení MPR-vyvolané MDR navíc k P-glykoproteinem vyvolané MDR byla provedena zkouška inhibice u non-P-glykoproteinových expresujících buněčných linií.
Buňky HL60/ADR byly umístěny v množství 4 x 104 do mikrotitračních destiček s 96 jamkami a byly vystaveny působení doxorubicinu v rozmezí koncentrací 50 nM - 10 μΜ v přítomnosti nebo nepřítomnosti sloučenin podle vynálezu v koncentracích 0,5-10 μΜ. Po kultivaci po dobu 3 dnů byly určena jejich životaschopnost za použití barviva XTT pro stanovení mitochondriální funkce. Výsledky byly stanoveny srovnáním IC50 pro samotný doxorubicin a IC50 pro doxorubicin sMDR inhibitorem. Hodnoty IC50 jsou vyjádřeny vnM. Ve všech zkouškách byla stanovena antiproliferační nebo cytotoxická aktivita inhibitorů MDR pro buňky HL60/ADR. Výsledky této zkoušky jsou uvedeny v tabulce 3 níže.
- 17CZ 298586 B6
Tabulka 3
Hodnocení sloučenin z hlediska MDR způsobené MRP v buňkách HL60/ADR
Skxič 10« Dox Ssunouiý C* Dox* 08pM Sklič IC. Dox* 1 pM Slet»: ICg Dox* 28pM SlotX. Dox* 5 pM < Sfouc. ic* Dox* 10pM SIqoč. MDR pomét 08pM MDR pnměi 1 pM MDR I Poměr 28pM MDR Poměr SpM MOR 1 Poměr 10pM
7 5 18 14 0825 0.4 008 4.4 48 8 128 «ps |
8 S 14 08 08 0.4 08 48 68 10 128 25
9 $ 1 08 08 08 0.04 5 88 25 25 125
Ačkoliv byla popsána řada provedení vynálezu, je zřejmé, že základní interpretace se mohou lišit pro vytvoření jiných provedení, která využívají produkty a způsoby podle vynálezu. Je tedy třeba vzít v úvahu, že rozsah vynálezu je definován připojenými patentovými nároky a nikoliv kon10 krétními provedeními, která byla uvedena jako příklady.

Claims (11)

1. Derivát aminokyseliny obecného vzorce I nebo obecného vzorce II 15 ve kterých J a K znamenají přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo skupinou Ar substituovanou přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující
20 1 až 6 atomů uhlíku;
přičemž každá skupina Ar je nezávisle vybrána ze souboru sestávajícího z fenylové skupiny, 2pyridylové skupiny, 3-pyridylové skupiny, 4-pyridylové skupiny a imidazolylové skupiny,
25 přičemž uvedená skupina Ar může obsahovat jeden nebo více substituentů, které jsou nezávisle vybrány ze souboru sestávajícího z atomu vodíku, hydroxylové skupiny, nitroskupiny, trofluormethylové skupiny, přímé nebo rozvětvené alkylové skupiny obsahující 1 až 6 atomy uhlíku, přímé nebo rozvětvené O-alkylové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, atomu halogenu, skupinu SO3H a skupiny NR3R4, kde R3 a R4 jsou nezávisle vybrány ze souboru sestávajícího
30 z přímé nebo rozvětvené alkylové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, přímé nebo rozvětvené alkenylové skupiny obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, atomu vodíku a benzylové skupiny; nebo kde R3 a R4 společně mohou tvořit pěti- až šestičlenný heterocyklický kruh; a kde w znamená 1 nebo 2.
-18CZ 298586 B6
2. Derivát aminokyseliny obecného vzorce Γ vybraný ze souboru, ve kterém B, D, J, K a Ri mají, pro každý z derivátů, význam definovaný níže:
Slouč. B* D* J K P, 6 4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-(CH,),- CH, PhCH, 4-F-PhCH,- 7 4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-(CH2)2- o X PhCH, PhCH,- 8 4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-(CH,),- CH, PhCH, 4-CI-PhCH,- 9 ..........4-Pyr-(CH,)r 4-Pyr-(CH,),- CH, 4-Cl-PhCH, PhCH,- 10 H- PhíCH,), CH, PhCH, 4-Pyr-CH, 12 3-Pyr-(CH,)s- 3-Pyr-(CH,),- CH, PhCH, PhCH,- 16 4-Pyr-(CH,},- 4-Pyr-(CH,),- CH, (CH,),CHCH,- PhCH,- 17 .. 4-Pyr-(CH?)2~ 4-Pyr-(CH,),- CH, (CH,),CHCH,- 4-F-PhCH,- 18 4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-{CH,),- CH, (CH,),CHCH,- 4-CI-PhCH,- 19 4-Pyr-(CH,),- 4-Pyr-(CH,),- CH, 4-CI-PhCH, 4-F-PhCH,- 21 H- .......3-lm-(CH,}, CH, PhCH, PhCH,- 23 Pb(CH,},- ..........Ph(CH2)2- CH, PhCH, 1H-im-CH,
přičemž Pyr znamená pyridylovou skupinu, pH znamená fenylovou skupinu a Im znamená imidazolylovou skupinu.
3. Derivát aminokyseliny vybraný ze souboru, který sestává z:
15 GS')-jV-ý4-fluorbenzyl)-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl-AL(3-(pynd-4-yl)-l-(2-(pyrid-4-yl)ethyl)propyl)propionamidu, tj. sloučeniny 6; (5)-/V-(4-chlorbenzyl)-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-3-fenyl-jV(3-(pyrid—4-yl)-l-{2-(pyrid-4-yl)ethyl)propyl)propionamidu, tj. sloučeniny 8; (Sý-ÍV-benzyl-3-(4-chlorfenyl-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-trimethoxyfenyl)acetyl)amino)-jV20 (3-(pyrid-4-yl)-l-(2-(pyrid-A-yl)ethyl)propyl)propionamidu, tj. sloučeniny 9; a (iS)-2V-{4-fluorbenzyl)-3-(4-chlorfenyl)-2-(methyl-(2-oxo-2-(3,4,5-tnmethoxyfenyl)acetyl)amino)-7V-(3-(pyrid-4-yl)-l-(2-(pyrid-4-yl)ethyl)propyl)propionamidu, tj. sloučeniny 19.
4. Farmaceutická kompozice pro léčení nebo prevenci mnohočetné lékové rezistence,
25 vyznačující se tí m , že obsahuje farmaceuticky účinné množství derivátu aminokyseliny podle libovolného z nároků 1 až 3 a farmaceuticky přijatelný nosič, pomocnou látku nebo vehikulum.
-19CZ 298586 B6
5. Farmaceutická kompozice podle nároku 4, vyznačující se tím, že dále obsahuje chemoterapeutické činidlo.
6. Farmaceutická kompozice podle nároku 4 nebo 5, vyznačující se tím, že dále 5 obsahuje chemosensitizer, jiný než derivát aminokyseliny podle libovolného z nároků 1 až 3.
7. Použití derivátu aminokyseliny podle libovolného z nároků 1 až 3 k výrobě léčiva pro léčení nebo prevenci mnohočetné lékové rezistence.
ío
8. Použití podle nároku 7, při němž je uvedené léčivo určeno pro perorální podávání.
9. Použití derivátu aminokyseliny podle nároku 7 nebo 8, při němž je uvedená mnohočetná léková rezistence zprostředkována P-glykoproteinem.
15
10. Použití podle nároku 7 nebo 8, při němž je uvedená mnohočetná léková rezistence zprostředkována MRP.
11. Způsob syntézy derivátu aminokyseliny obecného vzorce I, II nebo Γ podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že zahrnuje stupně, při nichž se (a) kopuluje aminokyselina obecného vzorce IV s aminem obecného vzorce V:
25 za zisku amidu obecného vzorce VI:
(VI) , kde P je běžná chránicí skupina, (b) odstraní chránicí skupina amidu obecného vzorce VI za zisku aminoamidu obecného vzorce VII:
(VII), 35 (c) acyluje aminoamid obecného vzorce Vil sloučeninou obecného vzorce VIII:
-20CZ 298586 B6 (VIII), kde
B je atom vodíku nebo -CH2-(CH2)W-Ar; D je -CH2-(CH2)W-Ar; X je Ar; Ri je -CH2-Ar; m je 0; a
J, K a Ar mají význam definovaný v nároku 1.
CZ0149197A 1994-11-16 1995-11-13 Deriváty aminokyselin se zlepšenou úcinností vucimnohocetné lékové rezistenci, zpusob jejich prípravy a farmaceutické prostredky s jejich obsahem CZ298586B6 (cs)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US34083094A 1994-11-16 1994-11-16
US08/377,285 US5543423A (en) 1994-11-16 1995-01-23 Amino acid derivatives with improved multi-drug resistance activity
PCT/US1995/014841 WO1996015101A1 (en) 1994-11-16 1995-11-13 Novel amino acid derivatives with improved multi-drug resistance activity

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ149197A3 CZ149197A3 (en) 1997-10-15
CZ298586B6 true CZ298586B6 (cs) 2007-11-14

Family

ID=26992255

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0149197A CZ298586B6 (cs) 1994-11-16 1995-11-13 Deriváty aminokyselin se zlepšenou úcinností vucimnohocetné lékové rezistenci, zpusob jejich prípravy a farmaceutické prostredky s jejich obsahem

Country Status (25)

Country Link
EP (1) EP0797567B1 (cs)
JP (1) JP3921239B2 (cs)
AP (1) AP781A (cs)
AT (1) ATE259349T1 (cs)
AU (1) AU689991B2 (cs)
BR (1) BR9509698A (cs)
CA (1) CA2224198A1 (cs)
CZ (1) CZ298586B6 (cs)
DE (1) DE69532561T2 (cs)
DK (1) DK0797567T3 (cs)
ES (1) ES2216022T3 (cs)
FI (1) FI972086A0 (cs)
HK (1) HK1003636A1 (cs)
HU (1) HU226136B1 (cs)
IL (1) IL115685A (cs)
MX (1) MX9703621A (cs)
NO (1) NO323292B1 (cs)
NZ (2) NZ296474A (cs)
PL (1) PL182327B1 (cs)
PT (1) PT797567E (cs)
RO (1) RO121113B1 (cs)
SI (1) SI0797567T1 (cs)
SK (1) SK282069B6 (cs)
TJ (1) TJ321B (cs)
WO (1) WO1996015101A1 (cs)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5798355A (en) * 1995-06-07 1998-08-25 Gpi Nil Holdings, Inc. Inhibitors of rotamase enzyme activity
US5846981A (en) * 1993-05-28 1998-12-08 Gpi Nil Holdings Inc. Inhibitors of rotamase enzyme activity
US5696135A (en) * 1995-06-07 1997-12-09 Gpi Nil Holdings, Inc. Inhibitors of rotamase enzyme activity effective at stimulating neuronal growth
US5859031A (en) * 1995-06-07 1999-01-12 Gpi Nil Holdings, Inc. Small molecule inhibitors of rotamase enzyme activity
US5801197A (en) * 1995-10-31 1998-09-01 Gpi Nil Holdings, Inc. Rotamase enzyme activity inhibitors
US6218424B1 (en) 1996-09-25 2001-04-17 Gpi Nil Holdings, Inc. Heterocyclic ketone and thioester compounds and uses
US5801187A (en) 1996-09-25 1998-09-01 Gpi-Nil Holdings, Inc. Heterocyclic esters and amides
US5786378A (en) * 1996-09-25 1998-07-28 Gpi Nil Holdings, Inc. Heterocyclic thioesters
US5840736A (en) * 1996-11-13 1998-11-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods and compositions for stimulating neurite growth
US5780484A (en) * 1996-11-13 1998-07-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods for stimulating neurite growth with piperidine compounds
US5811434A (en) * 1996-11-13 1998-09-22 Vertex Pharmacueticals Incorporated Methods and compositions for stimulating neurite growth
US6242468B1 (en) * 1997-02-27 2001-06-05 Jia-He Li Carbamate and urea compositions and neurotrophic uses
US5846979A (en) * 1997-02-28 1998-12-08 Gpi Nil Holdings, Inc. N-oxides of heterocyclic esters, amides, thioesters, and ketones
US6268384B1 (en) 1997-08-29 2001-07-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds possessing neuronal activity
WO1999062484A1 (en) * 1998-06-03 1999-12-09 Gpi Nil Holdings, Inc. Small molecule carbamate or urea hair growth compositions and uses
US6339101B1 (en) 1998-08-14 2002-01-15 Gpi Nil Holdings, Inc. N-linked sulfonamides of N-heterocyclic carboxylic acids or isosteres for vision and memory disorders
US6399648B1 (en) 1998-08-14 2002-06-04 Gpi Nil Holdings, Inc. N-oxides of heterocyclic ester, amide, thioester, or ketone for vision and memory disorders
US6337340B1 (en) 1998-08-14 2002-01-08 Gpi Nil Holdings, Inc. Carboxylic acids and isosteres of heterocyclic ring compounds having multiple heteroatoms for vision and memory disorders
US6333340B1 (en) 1998-08-14 2001-12-25 Gpi Nil Holdings, Inc. Small molecule sulfonamides for vision and memory disorders
US6395758B1 (en) * 1998-08-14 2002-05-28 Gpi Nil Holdings, Inc. Small molecule carbamates or ureas for vision and memory disorders
US6384056B1 (en) 1998-08-14 2002-05-07 Gpi Nil Holdings, Inc. Heterocyclic thioesters or ketones for vision and memory disorders
US6218423B1 (en) 1998-08-14 2001-04-17 Gpi Nil Holdings, Inc. Pyrrolidine derivatives for vision and memory disorders
US6335348B1 (en) 1998-08-14 2002-01-01 Gpi Nil Holdings, Inc. Nitrogen-containing linear and azepinyl/ compositions and uses for vision and memory disorders
US6506788B1 (en) 1998-08-14 2003-01-14 Gpi Nil Holdings, Inc. N-linked urea or carbamate of heterocyclic thioesters for vision and memory disorders
US7338976B1 (en) 1998-08-14 2008-03-04 Gpi Nil Holdings, Inc. Heterocyclic esters or amides for vision and memory disorders
US6376517B1 (en) 1998-08-14 2002-04-23 Gpi Nil Holdings, Inc. Pipecolic acid derivatives for vision and memory disorders
US6462072B1 (en) 1998-09-21 2002-10-08 Gpi Nil Holdings, Inc. Cyclic ester or amide derivatives
AU6060099A (en) * 1998-09-30 2000-04-17 Procter & Gamble Company, The 2-substituted ketoamides
US6300341B1 (en) 1998-09-30 2001-10-09 The Procter & Gamble Co. 2-substituted heterocyclic sulfonamides
US6307049B1 (en) 1998-09-30 2001-10-23 The Procter & Gamble Co. Heterocyclic 2-substituted ketoamides
EP1140844A1 (en) * 1999-01-08 2001-10-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process for the formation of intermediates useful for the preparation of pharmaceuticals
JP2001031635A (ja) * 1999-07-14 2001-02-06 Ajinomoto Co Inc 光学活性n−保護−n−メチル−フェニルアラニン誘導体の製造方法
US6693099B2 (en) 2000-10-17 2004-02-17 The Procter & Gamble Company Substituted piperazine compounds optionally containing a quinolyl moiety for treating multidrug resistance
CN1293042C (zh) * 2002-02-07 2007-01-03 远藤仁 芳香族氨基酸衍生物及其药物组合物
CN102655865A (zh) 2009-09-11 2012-09-05 沃泰克斯药物股份有限公司 N-苄基-3-(4-氯苯基)-2-[甲基-[2-氧代-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)乙酰基]氨基]-n-[3-(4-吡啶基)-1-[2-(4-吡啶基)乙基]丙酰胺的组合物及其用途

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994007858A1 (en) * 1992-09-28 1994-04-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 1-(2-oxo-acetyl)-piperidine-2-carboxylic acid derivatives as multi-drug-resistent cancer cell sensitizers

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2074061A1 (en) * 1991-08-26 1993-02-27 Ivo Monkovic Benzamide multidrug resistance reversing agents
US5744485A (en) * 1994-03-25 1998-04-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Carbamates and ureas as modifiers of multi-drug resistance

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994007858A1 (en) * 1992-09-28 1994-04-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 1-(2-oxo-acetyl)-piperidine-2-carboxylic acid derivatives as multi-drug-resistent cancer cell sensitizers

Also Published As

Publication number Publication date
ES2216022T3 (es) 2004-10-16
CA2224198A1 (en) 1996-05-23
DE69532561T2 (de) 2004-12-23
DK0797567T3 (da) 2004-06-14
IL115685A0 (en) 1996-01-19
HK1003636A1 (en) 1998-11-06
WO1996015101A1 (en) 1996-05-23
JPH10509151A (ja) 1998-09-08
SK61197A3 (en) 1997-11-05
RO121113B1 (ro) 2006-12-29
AU689991B2 (en) 1998-04-09
EP0797567A1 (en) 1997-10-01
HUT77977A (hu) 1999-01-28
NZ296474A (en) 1999-01-28
AU4109996A (en) 1996-06-06
SI0797567T1 (en) 2004-06-30
AP781A (en) 1999-11-04
FI972086A (fi) 1997-05-15
NO972217L (no) 1997-06-17
DE69532561D1 (de) 2004-03-18
PL320227A1 (en) 1997-09-15
NZ333373A (en) 2000-07-28
FI972086A0 (fi) 1997-05-15
ATE259349T1 (de) 2004-02-15
AP9700999A0 (en) 1997-07-31
BR9509698A (pt) 1998-06-30
MX9703621A (es) 1997-08-30
EP0797567B1 (en) 2004-02-11
CZ149197A3 (en) 1997-10-15
PT797567E (pt) 2004-06-30
NO323292B1 (no) 2007-03-05
HU226136B1 (en) 2008-05-28
SK282069B6 (sk) 2001-10-08
PL182327B1 (pl) 2001-12-31
NO972217D0 (no) 1997-05-14
IL115685A (en) 2000-08-31
JP3921239B2 (ja) 2007-05-30
TJ321B (en) 2001-10-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ298586B6 (cs) Deriváty aminokyselin se zlepšenou úcinností vucimnohocetné lékové rezistenci, zpusob jejich prípravy a farmaceutické prostredky s jejich obsahem
KR100404717B1 (ko) 우수한다제내성활성을가진신규한아미노산유도체
JP4421680B2 (ja) 多剤耐性のモディファイアーとしての新規カルバメートおよびウレア
MXPA97003621A (en) New derivatives amino acids with improved activity for multip drug resistance
RU2158258C2 (ru) Производные 1-(2-оксоацетил)пиперидин- или пирролидин-2-карбоновых кислот, фармацевтическая композиция, способ лечения, способ получения
US5935954A (en) Compounds with improved multi-drug resistance activity
CZ364197A3 (cs) Deriváty tetralinu s aktivitou MDR, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
US20040157818A1 (en) Cxcr4-antagonistic drugs composed of nitrogen-containing compound
US6127343A (en) Somatostatin agonists and antagonists
JP2003533511A (ja) インテグリン受容体拮抗薬としてのプロパン酸誘導体
US6159941A (en) Use of somatostatin agonists and antagonists for treating diseases related to the eye
AU681342B2 (en) Amine derivatives of oxo- and hydroxy-substitued hydrocarbons
MXPA93002392A (es) Derivados amino de hidrocarburos-oxo e hidroxi-substituidos.
JPH07188214A (ja) 4−アミノキナゾリン誘導体、その製造方法およびそれを含有する医薬品

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 19951113