CZ295706B6

CZ295706B6 - Derivát 5´-deoxycytidinu, způsob jeho výroby a použití a farmaceutická kompozice a kit s jeho obsahem

Info

Publication number: CZ295706B6
Application number: CZ19981675A
Authority: CZ
Inventors: Kazuo Hattori; Tohru Ishikawa; Hideo Ishitsuka; Yasunori Kohchi; Nobuhiro Oikawa; Nobuo Shimma; Hitomi Suda
Original assignee: F. Hoffmann-La Roche Ag
Priority date: 1997-06-02
Filing date: 1998-05-29
Publication date: 2005-10-12
Also published as: CA2237368A1; ES2329428T3; AU6798598A; CA2237368C; DE19823484A1; NO316609B1; RU2238278C2; MA26503A1; FR2763953B1; PL192832B1; CN1197871C; PE79599A1; GB2325931A; ES2142763B1; HUP9801256A3; CZ167598A3; ATE440854T1; ES2142763A1; TR199800988A2; RS50010B

Abstract

Derivát 5'-deoxycytidinu obecného vzorce I, kde R.sup.1.n. je H nebo acetyl, propionyl, benzoyl, toluoyl, glycyl, alanyl, .beta.-alanyl, valyl nebo lysyl; R.sup.2.n. je H nebo -CO-OR.sup.4.n., kde R.sup.4.n. je uhlovodíková skupina sestávající z 1 až 15 C atomů nebo -(CH.sub.2.n.).sub.n.n.-Y, kde Y je cyklohexyl nebo fenyl, a n je 0 až 4; R.sup.3.n. je H, brom, jod, CN, C.sub.1-4.n. alkyl, popřípadě halogensubstituovaný, vinyl, nebo ethynyl, v obou případech popřípadě substituovaný atomem nebo atomy halogenu, C.sub.1-4.n.alkylem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem s 1 nebo více dusíkovými heteroatomy; přičemž R.sup.2.n. a R.sup.3.n. neznamenají současně atomy H; způsob jeho výroby a použití a farmaceutická kompozice a kit s jeho obsahem. Tento derivát pomáhá dodávat 5-fluoruracil a jeho deriváty do nádorových tkání.

Description

Derivát 5’-deoxycytidinu, způsob jeho výroby a použití a farmaceutická kompozice a kit s jeho obsahem

Oblast techniky

Vynález se týká určitých derivátů 5’-deoxycytidinu, způsobů jejich výroby a použití a farmaceutických kompozic a kitů s jejich obsahem. Tyto deriváty pomáhají dodávat 5-fluoruracil a jeho deriváty do nádorových tkání.

Dosavadní stav techniky

Ačkoli 5-fluoruracil (5-FU) nebo jejich deriváty jsou klinicky užitečnými protinádorovými prostředky pro léčení různých závažných nádorů, obecně nejsou ještě dostatečnými, pokud jde o jejich účinnost a bezpečnost. Tyto nevýhody jsou zejména způsobeny rychlou inaktivací 5-FU dihydropyrimidindehydrogenasou (DPD) a/nebo nedostatečného dodání 5-FU do nádorových tkání s ohledem na nádorovou selektivitu. Pokusy zvýšit protinádorovou účinnost 5-FU nebo jeho derivátů inhibici DPD již byly uváděny: současné podávání 5-FU nebo jeho derivátu s DPD inhibitorem jako je uráčil (patent US 4 328 229), 5-ethynyluracil (W092/04901), 5chlor-2,4-dihydroxypyridin (patent US 5 525 603) atd. Takovéto současné podávání vedlo ke zvýšení protinádorové účinnosti 5-FU nebo jeho derivátů, ale bezpečnostní profil nebyl dost zvýšen vlivem nedostatečné selektivity v dodávání DPD inhibitoru do nádorových tkání (jako důsledek se zvýšila hladina 5-FU jak v nádoru tak v plazmě).

Na rozdíl od toho, u předloženého vynálezu bylo zjištěno, že současné podávání nového 5’deoxycytidinového derivátu představeného obecným vzorcem I s5-FU nebo jeho derivátem vede k významně zvýšené dodávce 5-FU selektivně do nádorových tkání ve srovnání s kombinací 5FU nebo jeho derivátu se známým DPD inhibitorem jako je 5-ethynyluracil, a ukazuje významně zvýšenou protinádorovou účinnost u lidských rakovinných xenoimplantátových modelů.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je derivát 5’-deoxycytidinu obecného vzorce I

(i), kde

R¹ je atom vodíku nebo skupina snadno hydrolyzovatelná za fyziologických podmínek, kterou je acetyl, propionyl, benzoyl, toluoyl, glycyl, alanyl, β-alanyl, valyl nebo lysyl;

-1 CZ 295706 B6

R² je atom vodíku nebo -CO-OR⁴ skupina, kde R⁴ je nasycená nebo nenasycená rozvětvená nebo nerozvětvená uhlovodíková skupina sestávající z 1 až 15 atomů uhlíku nebo skupina vzorce -(CH₂)_n-Y, ve které Y je cyklohexyl nebo fenyl a n je celé číslo od 0 do 4;

R³ je atom vodíku, brom, jod, kyano, C₁₄alkylová skupina, která může být substituována atomem nebo atomy halogenu, vinylová nebo ethynylová skupina, přičemž vinylová nebo ethynylová skupina může být substituována atomem nebo atomy halogenu, C^alkylem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem, který může obsahovat 1 nebo více dusíkových heteroatomů;

za předpokladu, že R² a R³ neznamenají současně atomy vodíku.

Příslušné skupiny obecného vzorce I jsou vysvětleny detailněji následovně.

Ve výše uvedené skupině R⁴ (která je již zmiňována v definici R²) výraz „nasycená nebo nenasycená přímá nebo rozvětvená uhlovodíková skupina sestávající z 1 až 15 atomů uhlíku“ výhodně znamená methyl, ethyl, n-propyl, l-isopropyl-2-methylpropyl, 1,1,2-trimethylpropyl, nbutyl, isobutyl, 2-ethylbutyl, 3,3-dimethylbutyl, n-pentyl, isopentyl, neopentyl, 2-propylpentyl, n-hexyl, 2-ethylhexyl, n-heptyl, n-oktyl, allyl, 2-buten-l-yl, 3-buten-l-yl, 3-penten-l-yl, 4penten-l-yl, 3-hexen-l-yl, 4—hexen-l-yl, 5-hexen-l-yl, n-tridecyl a podobně.

Výraz „skupina vzorce -(CH₂)_n-Y (ve které je Y cyklohexyl nebo fenyl, n je celé číslo od 0 do 4)“ výhodně znamená cyklohexyl, cyklohexylmethyl, 2-cyklohexylethyl, 3-cyklohexylpropyl, 4-cyklohexylbutyl, fenyl, benzyl, fenethyl, 3-fenylpropyl, 4-fenylbutyl, 2,6-dimethylcyklohexyl, 3-methoxyfenyl a podobně. V nejvýhodnějších provedeních sloučenin podle předloženého vynálezu R⁴ znamená n-propyl, n-butyl, n-pentyl, isopentyl, neopentyl, n-hexyl, 3,3-dimethylbutyl, 2-ethylbutyl, fenylethyl a cyklohexylmethyl.

Ve skupině R³ výraz „Ci^alkylová skupina, která může být substituována atomem nebo atomy halogenů“ výhodné znamená methyl, trifluormethyl, ethyl, propyl a podobně.

Výraz „vinylová nebo ethynylová skupina (která může být substituována atomem nebo atomy halogenů, Cj^alkylem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem, který může obsahovat 1 nebo více dusíkových heteroatomů)“ výhodně znamená vinyl, 1-chlorvinyl, 2-bromvinyl, 2-brom-2-chlorvinyl, ethynyl, prop-l-ynyl, but-l-ynyl, pent-l-ynyl, hex-l-ynyl, 3,3-dimethyl-but-l-ynyl, cyklopentylethynyl, cyklohexylethynyl, fenylethynyl, 3-fenyl-prop1-ynyl, pyrid-2-ylethynyl, imidazol-2-ylethynyl a pod. Nejvýhodnější skupina je ethynyl, vinyl a jod, zvláště vinyl.

Výhodné 5’-deoxycytidinové deriváty tohoto vynálezu jsou:

’-deoxy-5-ethynylcytidin, ’-deoxy-5-prop-l-ynylcytidin,

5-but-l-ynyl-5 ’-deoxycytidin, ’-deoxy-5-pent-l-ynylcytidin, ’-deoxy-5-hex-l-ynylcytidin, ’-deoxy-5-j odcytidin,

5-brom-5 ’-deoxycytidin,

5-( l-chlorvinyl)-5 ’-deoxycytidin, ’-deoxy-5-vinylcytidin ’-deoxy-5-trifluormethylcytidin,

-2CZ 295706 B6

5-(3-benzyloxybenzyl)-5’-deoxycytidin,

5-kyan-5 ’-deoxycytidin, 5’-deoxy-A^-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, 5’-deoxy-A^-(n-pentyloxykarbonyl)-5-prop-l-ynylcytidin, 5-but-1 -ynyl-5 ’-deoxy-A^-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, 5 ’-deoxy-5-pent-1 -ynyl-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, 5 ’-deoxy-5-hex-1 -ynyl-A^-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, 5 ’-deoxy-5-j od-?/-(n--pentyloxykarbonyl)cytidin, 5-brom-5’-deoxy“7Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, 5-( 1 -chlorvinyl)-5 ’-deoxy-Ý-(n-pentyl oxykarbonyl)cytidin, 7Ý-(ethoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-vinylcytidin, 5’-deoxy-A^-(n-propoxykarbonyl)-5-vinylcytidin, 2Ý-(n-butoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-vinylcytidin, 5’-deoxy-?/-(n-pentyloxykarbonyl)---5-vinylcytidin, A^-(benzyloxykarbonyl)-5’-deoxy-5-vinylcytidin, 5’-deoxy-7Ý-(n~perityloxykarbonyl)-5-trifluormethylcytidin, 5-kyan-5’-deoxy-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, 5’-deoxy-5-ethynyl-2/-(methoxykarbonyl)cytidin, 5’-deoxy-A^-(ethoxykarbonyl)-5-ethynylcytidin, 5’-deoxy-5-ethynyl-2Ý-(n-propoxykarbonyl)cytidin, 5’-deoxy-5-ethynyl-7/-(isopropoxykarbonyl)cytidin, A^-(n”butoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-ethynylcytidin, 5 ’-deoxy-5-ethynyl-A^r/-(isobutoxykarbonyl)cytidin, 5’-deoxy~5-ethynyl-7/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, 5’-deoxy-5-ethynyl-7/-[(2-propylpentyloxy)karbonyl]cytidin, S^deoxy-S-ethynyl-TVGfísopentyloxykarbonyljcytidin, 5’-deoxy-5-ethynyl-/V⁴-[(2-methylpentyloxy)karbonyl]cytidin, 5’-deoxy~5-ethynyl-7V^/-[(3-methylpentyloxy)karbonyl]cytidin, 5’-deoxy-5-ethynyl-?/-(n-hexyloxykarbonyl)cytidin, ’-deoxy-V*-[(2-ethylbutyl)oxykarbonyl]-5-ethynylcytidin, ’-deoxy-7V⁴-[(2-ethylhexyl)oxykarbonyl]-5-ethynylcytidin, ’-deoxy-5-ethynyl-7V*-[(2-fenylethoxy)karbonyl] cytidin, 7/-(cyklohexyloxykarbonyl)-5’-deoxy-5-ethynylcytidin, AA-[(cyklohexylmethoxy)karbonyl]-5’-deoxy-5-ethynylcytidin, 5’-deoxy-5-ethynyl-M-(neopentyloxykarbonyl)cytidin, '-deoxy-A^-fG, 3-dimethylbutoxy)karbonyl]-5-ethynylcytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-ethynyl--Ý-(n-propoxykarbonyl)cytidin,

-3CZ 295706 B6 ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-ethynyl-AA-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin,

2’ ,3 ’-di-<9-acetyl-M-(ethoxykarbonyl)-5 ’-deoxy-5-vinylcytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-7Ý-(n-propoxykarbonyl)-5-vinylcytidin,

2’ ,3 ’-di-(9-acetyl-A^-(n-butoxykarbonyl)-5 ’-deoxy-5- vinylcytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-ŽV⁴-(n-pentyloxykarbonyl)-5-vinylcytidin, ’ ,3 ’-di-0-acetyl-?/-(benzyloxykarbonyl)--5 ’-deoxy-5-vinylcytidin,

5’-deoxy-5-ethynyl-AA-(n-decyloxykarbonyl)cytidin,

5’~deoxy-5-ethynyl-Ý-[(2,6-dimethylcyklohexyloxy)karbonyl]cytidin, 5’-deoxy-5-ethynyl-AA-(benzyloxykarbonyl)cytidin,

5’-deoxy-5-ethynyl-A^-[(l-isopropyl-2-methylpropoxy)karbonyl]cytidin a 5’-deoxy-5-ethynyl-7V⁴-[(3-methoxybenzyloxy)karbonyl]cytidin.

Nejvýhodnějším derivátem 5’-deoxycytidinu je 2’,3’-de-O-acetyl-5’-deoxy-5-vinylcytidin.

Nové 5’-deoxycytidinové deriváty představené vzorcem I mohou být vytvořeny následujícími postupy .V následujícím postupu A až F, P¹ představuje hydroxy chránící skupinu jako je acetyl, benzoyl, trimethylsilyl, /erc-butyldimethylsilyl, a podobně.

Postup A

Sloučeniny představené vzorcem I, kde R¹, R² a R³ jsou tytéž jak jsou definovány výše, mohou být připraveny reakcí sloučeniny představenou vzorcem II nh₂ n-^r³

(Π),

ΡΌ ÓP¹ kde P¹ je hydroxy-chránicí skupina, a R³ je stejný jak je výše definováno), se sloučeninou představenou obecným vzorcem III

R⁴OCOX (ΠΙ), kde R⁴ je stejný jak je definováno výše, x je chlor nebo brom, v přítomnosti akceptoru kyseliny, načež následuje, když je to nutné, odstranění chránící skupiny nebo skupin.

Postup B

Sloučeniny představené vzorcem I, kde R¹ a R² jsou stejné jak jsou výše definovány a R³ je ethynylová nebo vinylová skupina, která může být substituována halogenovým atomem nebo atomy, Ci ₄alkylem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem, který může mít 1 nebo více heteroatomů, mohou být připraveny reakcí sloučeniny představené vzorcem IV

-4CZ 295706 B6

(IV), kde P¹ a R² jsou stejné jak jsou výše definovány, s acetylenovým nebo vinylovým derivátem v přítomnosti palladiového katalyzátoru, načež následuje, když je třeba, odstranění chránící skupiny nebo skupin.

Postup C

Sloučeniny představené vzorcem I, kde R¹ a R² jsou stejné, jak jsou výše definovány a R³ je kyanová skupina, mohou být připraveny reakcí sloučeniny představené vzorcem IV

(IV),

kde P¹ a R² jsou stejné jak jsou výše definovány, s kyanidem alkalického kovu, načež následuje, když je třeba, odstranění chránící skupiny nebo skupin.

Postup D

Sloučeniny představené vzorcem I, kde R¹ a R³ jsou stejné jak jsou definovány výše a R² je atom vodíku, mohou být připraveny reakcí sloučeniny představené vzorcem V

(V), kde P¹ a R³ jsou stejné jak jsou definovány výše, s fosforylchloridem v přítomnosti akceptoru kyseliny, načež následuje zpracování s amoniakem, které je následováno, když je třeba, odstraněním chránící skupiny nebo skupin.

-5CZ 295706 B6

Postup E

Sloučeniny představené vzorcem I, kde R¹, R² a R³ jsou stejné jak je výše definováno, mohou být připraveny sloučením sloučeniny představené vzorcem VI

(VI), kde R² a R³ jsou stejné jak je definováno výše, se sloučeninou představenou vzorcem VII

(VII) kde P¹ je stejný jak je definován výše, v přítomnosti katalyzátoru Lewisovy kyseliny, načež následuje, když je třeba, odstranění chránící skupiny nebo skupin.

Postup F

Sloučeniny představené vzorcem I, kde R³ je vinylová skupina, která může být substituována atomem halogenů nebo atomy halogenů, C ^alkylem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem, který může mít 1 nebo více heteroatomů, R¹ a R² jsou stejné jak jsou definovány výše, mohou být připraveny katalytickou hydrogenací sloučeniny představené vzorcem VIII

kde P¹ je hydroxy-chránicí skupina, R³ je ethynylová skupina, která může být substituována halogenovým atomem nebo atomy, C^alkylem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem, který může mít 1 nebo více heteroatomů, a R² je stejný jak je definován výše, s Lindlarovým katalyzátorem, načež následuje, když je to nutné, odstranění chránící skupiny nebo skupin.

Dále bude postup pro přípravu 5’-deoxycytidinových derivátů představených vzorcem I podle tohoto vynálezu, vysvětlen detailněji.

-6CZ 295706 B6

Postup A

Specifické příklady sloučenin představených obecným vzorcem II zahrnují

2’,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-ethynylcytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(Zerc-butyldirnethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-ethynylcytidin,

2’,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-prop-l-ynylcytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-prop-1 -ynylcytidin,

2’ ,3 ’-di-O-acetyl-5-but-l-ynyl-5 ’-deoxycytidin,

2’,3’-bis-O-(terc-butyldimethylsilyl)-5-but-l-ynyl-5’-deoxycytidin,

2’ ,3 ’-di-(9-acetyl-5 ’-deoxy-5-pent-l-ynylcytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(terc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-pent-l-ynylcytidin,

2’,3’-di-O-acetyl-5’-deoxy-5-hex-l-ynylcytidin,

2’,3 ’-bis-<9-(/erc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-hex-l -ynylcytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-j odcytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-j odcytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5-brom-5 ’-deoxycytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5-brom-5 ’-deoxycytidin, ’ ,3 ’-di-O-acety 1-5-( l-chlorvinyl)-5 ’-deoxycycytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5-( l-chlorvinyl)-5 ’-deoxycytidin, ’ ,3 ’-di-C*-acetyl-5 ’-deoxy-5-vinylcytidin, ’,3 ’-bis-6>-(/é7r-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-vinylcytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-trifluormethylcytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(terc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-trifluormethylcytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5-(3-benzyloxybenzyl)-5 ’-deoxycytidin, ’,3 ’-di-<9-acetyl-5-kyan-5 ’-deoxycytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(tórc-butyldimethylsilyl)-5-kyan-5 ’-deoxycytidin, a podobně.

Reakce sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce II se sloučeninou výše uvedeného vzorce ΙΠ může být prováděna v rozpouštědle jako je pyridin, dioxan, tetrahydrofuran, acetonitril, chloroform, dichlormethan a podobně v přítomnosti akceptoru kyseliny jako je triehtylamin, pyridin, pikolin, 4-(Á,jV-dimethylamino)pyridin, lutidin, a podobně. Reakce může být prováděna při teplotě 0 až 30 °C.

Chránící skupina nebo skupiny mohou být odstraněny, když je to nutné, po reakci postupy známými odborníkům v oboru, například zásaditou nebo kyselou hydrolýzou nebo zpracováním fluoridovým aniontem.

-7CZ 295706 B6

Postup B

Specifické příklady sloučenin představených obecným vzorcem IV zahrnují ’ ,3 ’-bis-O-(fórc-butyldirnethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-j od-M-(methoxykarbonyl)cytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(Zerc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-V*-(ethoxykarbonyl)-5-j odcytidin, 2’,3’-bis-ť?-(Zerc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-jod-jV⁴-(n-propoxykarbonyl)cytidin, 7Ý-(n-butoxykarbonyl)-2’,3’-bis-<9-(Zerc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-jodcytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(Zerc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-j od-7/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(Zerc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-j od-?/-(isopentyloxykarbonyl)cytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(Zerc-butyldimethylsilyI)-5 ’-deoxy-5-j od-?/~(n-hexyloxykarbonyl)cytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(Zerc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-?7*-[(2-ethylbutyl)oxykarbonyl]-5-j odcytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(Zerc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-j od-7V⁴-[(2-fenylethoxy)karbonyl] cytidin, 2’,3’-bis-O-(Zerc-butyldimethylsilyl)-V⁴-[(cyklohexylmethoxy)karbonyl]-5’-deoxy-5-jodcytidin,

2’ ,3 ’-bis-(9-(Zerc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-jod-7/-(neopentyloxykarbonyl)cytidin,

23’-bis-0-(Zerc-~butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-A7-[(3,3-dimethylbutoxy)karbonyl]-5-j odcytidin,

2’,3’-di-(7-acetyl-5^,-deoxy-5-jod-7V⁴-(ethoxykarbonyl)cytidin,

2’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-j od-M-(n-propoxykarbonyl)cytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-?/-(n-butoxykarbonyl)-5 ’-deoxy-5-j odcytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-jod-Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, a podobně.

Specifickými příklady acetylenových nebo vinylových derivátů použitých pro tuto slučovací reakci jsou trimethylacetylen, Zerc-butyldimethylsilylacetylen, 1-butyn, 1-pentyn, 1-hektyn, 1hexyn; 3-methyl-l-butyn, 3,3-dimethyl-l-butyn, cyklohexylacetylen, fenylacetylen, 3-fenyl1-propyn, 3-n-butyl(vinyl)stanan a podobně.

Slučovací reakce sloučeniny představené vzorcem IV s acetylenovým derivátem může být prováděna v přítomnosti palladiového katalyzátoru jako je bis(trifenylfosfín)chlorid palladnatý-jodid měďný, bis(bistrifenylfosfín)octan palladnatý-jodid měďný a podobně.

Slučovací reakce sloučeniny představené vzorcem IV s vinylovým derivátem může být prováděna v přítomnosti palladiového katalyzátoru jako je tris(dibenzylidenaceton)dipalladium, tetrakis(trifenylfosfm)palladium, bis(acetonitril)chlorid palladnatý v přítomnosti tri-2-furylfosfínu, trifenylfosfinu a podobně.

Tyto reakce mohou být prováděny v rozpouštědle jako je chloroform, dichlormethan, tetrahydrofuran, V-methylpyrrolidon, ΛζΑ-dimethylformamid, a podobně.

Reakce může být prováděna při teplotě mezi 0 až 80 °C, výhodně mezi 10 až 60 °C.

Postup C

Reakce sloučeniny výše uvedeného vzorce IV s kyanidem alkalického kovu jako je kyanid sodný, kyanid draselný atd. může být prováděna v rozpouštědle jako je A/V-dimethylformamid, dimethylsulfoxid, acetonitril a podobně. Reakce může být prováděna při teplotě mezi 0 až 100 °C, výhodně mezi 10 až 30 °C.

Postup D

Specifické příklady sloučenin představených obecným vzorcem V zahrnují ’ ,3 ’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-ethynyluridin,

2’,3’-bis-C>-(/erc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-prop-l-ynyluridin, ’ ,3 ’-bis-O-(tórc-butyldimethylsilyl)-5-but-l-inyl-5 ’-deoxyuridin, ’ ,3 ’-bis-O-(Zerc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-pent-l-ynyluridin, ’ ,3 ’-bis-O-(terc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-hex-1 -ynyluridin, ’ ,3 ’-bis-O-(tórc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-j oduridin,

5-brom-2 ’ ,3 ’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxyuridin, ’ ,3 ’-bis-C>-(terc-butyldimethylsilyl)-5-( 1 -chlorvinyl)-5 ’-deoxyuridin, ’ ,3 ’-bis-C>-(/ďrc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-vinyluridin,

2’,3’-bis-O-(terc-butyldimethylsilyl)-5 -deoxy-5-trifluormethyluridin,

2’ ,3 ’-bis-O-(tórc-butyldimethylsilyl)-5-kyan-5 ’-deoxyuridin a podobně.

Výchozí materiály, které jsou uvedeny výše, mohou být připraveny ze známých 5-substituovaných uracilových derivátů způsobem podobným postupu E, kde 5-substituovaný uracilový derivát je použit místo 5-substituovaného cytosinového derivátu.

Reakce sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce V s fosforylchloridem může být prováděna v rozpouštědle jako je pyridin, dioxan, tetrahydrofuran, acetonitril, chloroform, dichlormethan a podobně, v přítomnosti akceptoru kyseliny jako je triethylamin, pyridin, pikolin, 4—(7V,7V—dimethylammo)pyridin, lutidin, imidazol, TV-methylimidazol, triazol a podobně při teplotě mezi 0 až 30 °C, načež následuje zpracování vodným amoniakem nebo plynným amoniakem v rozpouštědle jako je methanol, ethanol, acetonitril, ΛζΑ-dimethylformamid a podobně při teplotě mezi 0 až 30 °C.

Postup E

Specifickými příklady sloučenin představených obecným vzorcem VI jsou 5-ethynylcytosin, 5-prop-l-ynylcytosin, 5-but-l-ynyl-5’-deoxycytosin, 5-pent-l-ynylcytosin, 5-hex-l-ylcytosin, 5-jodcytosin, 5-bromcytosin, 5-(l-chlorvinyl)cytosin, 5-vinylcytosin, 5-trifluormethylcytosin, 5-ethynyl-7Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytosin, a podobně.

Specifické příklady sloučenin představených obecným vzorcem VII zahrnují známý 3-deoxy1,2,3-O-triacetyl-D-ribofuranosid, 5-deoxy-l,2,3-CMribenzoyl-D-ribofuranosid a podobně.

Sloučenina vzorce VI může být nejdříve převedena na trimethylsilylový derivát silylačním prostředkem jako je hexamethyldisilazan, načež následuje kondenzační reakce se sloučeninou před

-9CZ 295706 B6 stavenou vzorcem VII v přítomnosti Lewisovy kyseliny jako katalyzátoru, jako je chlorid cíničitý, chlorid titaničitý a podobně. Tato kondenzační reakce probíhá v rozpouštědle jako je acetonitril, dichlormethan, chloroform, 1,2-dichlorethan, nitromethan, toluen a podobně při teplotě mezi 0 až 30 °C, výhodně mezi 0 až 10 °C.

Postup F

Specifické příklady sloučenin představených obecným vzorcem VIII zahrnují ’-deoxy-5-ethynylcytidin,

5’-deoxy-?/-(ethoxykarbonyl)-5-ethynylcytidin, 5’-deoxy-5-ethynyl-AA-(n-propoxykarbonyl)cytidin, //-(n-butoxykarbonylj-S^deoxy-S-ethynylcytidm, 5’-deoxy-5-ethynyl-7/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, AÚ-(benzyloxykarbonyl)-5’-deoxy-5-ethynylcytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-ethynylcytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-ethynyl-7/-(ethoxykarbonyl)cytidin, ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-^thynyl-.AÚ-(n--propoxykarbonyl)cytidin,

2’,3 ’-di-(9-acetyl-5 ’-deoxy-5-ethynyl-A?*—(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, a podobně.

Katalytická hydrogenace ethynylové skupiny sloučeniny vzorce VIII může být prováděna za použití Lindlarova katalyzátoru způsobem známým odborníkům v oboru (viz Synthetic. Method, 1952, sv. 7, P38 (Interscience Publishers, lne., New York)).

Nové 5 ’-deoxycytidinové deriváty tohoto vynálezu mohou být použity jako protinádorové prostředky spolu se známými fyziologicky akceptovatelnými farmaceutickými nosiči.

Předložený vynález také zajišťuje farmaceutickou kompozici obsahující 5’-deoxycytidinový derivát představený obecným vzorcem I a 5-fluoruracil (5-FU) nebo jeho derivát. U této kompozice 5’-deoxycytidinový derivát potencuje protinádorový účinek 5-fluoruracilu nebo jeho derivátu dodáním významně vyššího množství 5-FU selektivně do nádorových tkání bez významného vzrůstu 5-FU koncentrace v plazmě.

Pro kombinaci 5-deoxycytidinového derivátu představeného obecným vzorcem I s 5-FU nebo jeho derivátem pro léčení rakoviny se zvýšenou účinností a bezpečnostním profilem, je 5-FU derivát výhodně vybrán ze skupiny zahrnující

5-fluor-1 -(2-tetrahydrofuryl)uracil,

-(n-hexyloxykarbonyl)-5-fluoruracil, ’-deoxy-5-fluoruridin,

5’-deoxy-5-fluor-?/-(n-propoxykarbonyl)cytidin, 7'/-(n-butoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-fluorcytidin, 5’-deoxy-5-fluor-M-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, S^deoxy-S-fluor-A^-íisopentyloxykarbonyljcytidin, 5’-deoxy-5-fluor-7Ý-(n-hexyloxykarbonyl)cytidm,

-10CZ 295706 B6

5’-deoxy-/Ý-[(2-ethylbutyl)oxykarbonyl]-5-fluorcytidin,

5’-deoxy-5-fluor-?/-[(3-fenylethoxy)karbonyl]cytidin, ?Č-[(cyklohexylmethoxy)karbonyl]-5’-deoxy-5-fluorcytidin, 5’-deoxy-5-fluor-7V⁴-(neopentyloxykarbonyl)cytidin, ’-deoxy-A^-[(3,3-dimethylbutoxy)karbonyl]-5-fluorcytidin, '-deoxy-S-fluor-A^-fy ,5-dimethylbenzoyl)cytidin,

5’-deoxy“5-fluor-7V⁴-(3,5-dichlorbenzoyl)cytidin, ’ ,3 ’-di-(2-acetyl-5 ’-deoxy-5-fluor-A^-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin a podobně.

Sloučenina vzorce I může být podávána buď samotná nebo současně s 5-FU nebo jeho derivátem.

Tudíž farmaceutická kompozice tohoto vynálezu může být získána formulací sloučeniny vzorce I a 5-FU nebo jeho derivátu do jediného přípravku nebo může být opatřena ve formě dvou oddělených individuálních přípravků.

Farmaceutická kompozice vzorce I může být podávána před nebo současně s podáváním 5-FU nebo jeho derivátu, výhodně ve 3 hodinách před nebo současně s podáváním 5-FU nebo jeho derivátu.

Ve farmaceutické kompozici tohoto vynálezu obsahující 5-FU nebo jeho derivát a 5’-deoxycytidinový derivát představený obecným vzorcem I, vhodný molámí poměr těchto dvou složek je asi 0,001 až 10 mol, výhodně 0,002 až 0,5 mol sloučeniny vzorce I na mol 5-FU nebo jeho derivát.

Předložený vynález také zajišťuje soupravu farmaceutické kompozice (složka A) obsahující sloučeninu vzorce I a farmaceutické kompozice (složka B) obsahující 5-FU nebo jeho derivát.

Takto se předložený vynález také týká farmaceutických kompozic sloučeniny vzorce I a případně

5-FU nebo jeho derivátu a jejich souprav pro léčení kolorektální rakoviny, rakoviny prsu, rakoviny žaludku, rakoviny plic, cervikální rakoviny, rakovin měchýře a jiných zhoubných nemocí a podobně.

Farmaceutické směsi a složky A a B soupravy tohoto vynálezu mohou být podávány jakýmkoli způsobem například jako tablety, pilulky, čípky, tobolky, granule, prášky nebo emulze a podobně. Farmaceuticky akceptovatelné nosiče a excipienty výhodné při formulaci farmaceutické kompozice tohoto vynálezu jsou takové, které jsou běžně používány.

Farmaceuticky akceptovatelné materiály mohou být organické nebo anorganické inertní nosiče vhodné pro enterální, perkutánní nebo parenterální podávání jako je voda, želatina, arabská guma, škrob, stearan hořečnatý, talek, rostlinné oleje, polyalkylenglykoly a ropná vazelína.

Farmaceutická kompozice vytvořená podle předloženého vynálezu může být podávána orálně například ve formě tablet, tobolek, pilulek, prášků, granulí, roztoků, sirupů, suspenzí nebo elixírů. Podávání může být také prováděno parenterálně například ve formě sterilních roztoků, suspenzí nebo emulzí, nebo lokálně například ve formě roztoků, suspenzí, mastí, prášků nebo aerosolu.

Farmaceutická kompozice může být sterilizována a/nebo může obsahovat další adjuvans jako jsou konzervační, stabilizační, ztužovací, emulgační prostředky, aromatizační prostředky, soli pro úpravu osmotického tlaku nebo látky působící jako pufry.

-11 CZ 295706 B6

Farmaceutická kompozice může být připravena konvenčním způsobem.

Dávková rozmezí pro farmaceutickou kompozici tohoto vynálezu závisejí na způsobu podávání, věku, hmotnosti a stavu pacienta a na příslušné nemoci, která má být léčena. V případě orálního, rektálního nebo parenterálního podávání pro dospělé jsou přibližné denní dávky v rozmezí od mg do asi 2000 mg sloučeniny vzorce I a od 10 mg do asi 4000 mg 5-FU nebo jeho derivátu v závislosti na druhu použitého 5-FU derivátu. Orální podávání je preferovaný způsob podávání farmaceutické kompozice podle tohoto vynálezu.

Selektivní dodávka 5-FU do nádoru vzhledem k selektivní inhibici nádorové DPD sloučeninou vzorce I je evidentní z dále popsaného testu.

1. Selektivní inhibice nádorové DPD sloučeninou A z příkladu 6

Aktivita sloučeniny A z příkladu 6 inhibovat účinek DPD byla srovnána s aktivitou známého DPD inhibitoru 5-ethynyluracilu (5-EU) u BALB/c holých myší nesoucích xenoimplantát PC-3 lidské rakoviny prostaty. Játra a nádorové tkáně byly resekovány z každé skupiny 3 myší po a 3 hodinách po podání sloučeniny A (0,5 mmol/kg) a 5-EU (0,05 pmol/kg). DPD aktivita v těchto tkáních pak byla měřena jak je popsáno jinde (Naguib a j., Cancer. Research 45, 5405-5412, 1985). 5-EU inhiboval DPD aktivitu jak v játrech, tak v nádorové tkáni, zatímco sloučenina A silně inhibovala aktivitu jen v nádorové tkáni (tabulka 1). Tyto výsledky naznačují, že sloučenina A z Příkladu 6 inhibuje DPD aktivitu selektivně v nádorové tkáni.

Tabulka 1

Inhibice DPD aktivity sloučeninou A z příkladu 6

DPD aktivity (pmol/mg proteinu/min)

tkáně	kontrola	5-EU	sloučenina A
2h	8h	2h	8h	2h	8h
játra	288	162	46	83	177	326
nádor	31	29	17	13	9	9

2. Selektivní zvýšení hladin 5-FU v nádorech sloučeninou A z příkladu 6 u myší ošetřených fluorpyrimidiny

Experiment znázorněný v tabulce 2 demonstruje, že sloučenina A z příkladu 6 zvyšuje 5-FU AUC (o vlas pod křivkou) selektivně v nádoru u myší ošetřených fluorpyrimidiny. V této studii fluorpyrimidiny jako je 5-FU, doxifluoridin (5’-deoxy-5-fluoruridiny a capecitabin (5’-deoxy5-fluor-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin) byly podávány BALB/c holým myším nesoucím lidský žaludeční rakovinný xenoimplantát MKN28 v kombinaci s buď sloučeninou A nebo 5-EU. Pak byly měřeny hladiny 5-FU v plazmě a nádorových tkáních v 0,25, 0,5, 4 a 7 hodinách po každém podání fluorpyrimidinu (n = 3 myši) a byly vypočteny 5-FU AUC. Známý DPD inhibitor 5-EU značně zvýšil 5-FU AUC jak v plazmě tak v nádorových tkáních u myší ošetřených buď 5-FU, capecitabinem nebo doxifluoridinem. Protože vzrůst 5-FU hladin v plazmě má za následek systemickou toxicitu 5-FU, by zvýšil jak účinek, tak toxicitu fluorpyrimidinu.

V kontrastu s tím sloučenina A značně zvyšuje 5-FU AUC jen v nádorových tkáních pravděpodobně jako výsledek nádorově selektivní inhibice DPD aktivity sloučeninou A, která katabolizuje 5-FU. Sloučenina A z příkladu 6 tudíž zvyšuje účinek fluorpyrimidinů s malým zvýšením jejich toxicity.

-12CZ 295706 B6

Tabulka 2

5-FU AUC v plazmě a nádorech u myší ošetřených fluorpyrimidiny

Testované sloučeniny (pmol/kg)	Fluorpyrimidiny (mmol/kg)	5-FU AUC (nmol/hr/ml)
plazma	nádor
Exp.l	5-FU (0,3)	9,3	1,3
sloučenina A	5-FU (0,3)	9,5	6,0
5-EU (1)	5-FU (0,3)	75	48
-	capecitabin (1,5)	1,3	30
sloučenina A (2)	capecitabin (1,5)	3,1	67
5-EU (1)	capecitabin (1,5)	53	120
Exp.2	doxifluoridin (0,75)	2,6	8,0
sloučenina A(2)	doxifluoridin (0,75)	11	30
5-EU (1)	doxifluoridin (0,75)	86	73
-	capecitabin (1,5)	1,5	30
slouč. A (2)	capecitabin (1,5)	3,8	76
5-EU (1)	capecitabin (1,5)	54	120

3. Zvýšení protinádorového účinku capecitabinu sloučeninou z příkladu 6

Sloučenina A z příkladu 6 byla zkoušena na svůj účinek k zvýšení účinnosti capecitabinu u BALB/c holých myší nesoucích rakovinný implantát PC-3 rakoviny lidské prostaty. Sloučenina A a capecitabin byly podávány orálně simultánně nebo postupně 5 po sobě jdoucích dnů v týdnu po dobu 3 týdnů začínajíce v den 53 po nádorové inokulaci, když se nádor stal hmatným. V den 75 byl vypočten objemový přírůstek a procentáž inhibice nádorového růstu.

Jak tabulka 3 ukazuje, capecitabin inhibuje růst nádoru ve větší míře, když je přidána sloučenina A v kombinaci buď současně nebo následně. Protože sloučenina A sama o sobě není cytotoxická (údaje nejsou uvedeny), zvyšuje účinnost capecitabinu inhibicí DPD aktivity.

Tabulka 3

Zvýšení účinnosti capecitabinu sloučeninou A z příkladu 6
capecitabin	sloučenina A	změna objemu	inhibice růstu	změna tělesné přežití 75. den
(mmol/kg/d)	(pm/kg/d)	nádoru (mm³)	nádoru (%)	hmotnosti (g)
		den 53-75	den 75	den 75
—	—	981	—	- 3,6 5/5
1,0	—	757	23	- 3,4 5/5
1,0	1,0	323^x)	67	-1,8 5/5
1,0	l,0^M)	201^x)	80	- 0,3 4/5

^x) p menší než 0,05 ve srovnání s kontrolní skupinou sloučenina A byla podána 1 hodinu před podáním capecitabinu

-13CZ 295706 B6

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady jsou určeny k podrobnější ilustraci předloženého vynálezu, ale nejsou určeny k jakémukoli omezení jeho rozsahu.

Referenční příklad 1

a) Příprava 2’,3’-di-(9-acetyl-5’-deoxy-5-ethynyluridinu

5-Ethynyluracil (12 g, 88,2 mmol) byl suspendován v roztoku síranu amonného (570 mg, 4,3 mmol) v hexamethyldisilazanu (240 ml). Suspenze byla refluxována po dobu 6 hodin. Po koncentraci reakční směsi za sníženého tlaku byl ke zbytku přidán roztok 5-deoxy-l,2,3-tri-č?acetyl-D-ribofranosidu (27,5 g, 105,8 mmol) v acetonitrilu (300 ml). Pak byl do směsi po kapkách přidán roztok bezvodého chloridu cíničitého (27,6 g, 105,8 mmol) v nitromethanu (60 ml) při udržování teploty pod 0 °C. Po míchání směsi při 0 °C po další 4 hodiny byl přidán hydrogenuhličitan sodný a následoval přídavek vody po kapkách. Po míchání směsi po dobu 2 hodin byla reakční směs zfíltrována k odstranění nerozpustného materiálu, který byl promyt ethylacetátem. Filtrát a výplachy byly sloučeny a vysušeny nad MgSO₄ a filtrovány. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku.

Vyčištění zbytku silikagelovou chromatografíí (za použití n-hexan:ethylacetát =1:2 jako eluentu) poskytlo 2’,3’-di-O-acetyl-5’-deoxy-5-ethynyluridin (13,7 g, 48% výtěžek).

MALDI-MS: (m/z) 359 [M+Na]⁺, 375 [M+K]⁺ ‘H-NMR: (270 MHz; CDC1₃): δ 1,47 (3H, d, J = 6,6), 2,10 (3H, s), 2,12 (3H, s), 3,23 (1H, s), 4,19-4,28 (1H, m), 5,01-5,05 (1H, m), 5,30-5,34 (1H, m), 5,90 (1H, d, J = 4,95), 7,57 (1H, s), 8,34 (1H, br, s)

b) Příprava 2 ’ ,3 ’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-ethynyluridinu

Do roztoku 2’,3’-di-(?-acetyl-5’-deoxy-5-ethynyluridinu (13,7 g, 4,7 mmol) rozpuštěného v methanolu (100 ml) byl přidán po kapkách roztok hydroxidu sodného (3,3 g, 81,4 mmol) ve vodě (10 ml) za míchání při 0 °C. Po míchání při 0 °C dalších 30 minut byla reakční směs nastavena na pH 7 vodným roztokem IN chlorovodíkové kyseliny. Pak byla směs odpařena za sníženého tlaku.

Zbytek byl rozpuštěn v DMF (250 ml) a do roztoku byl přidán imidazol (41,6 g, 610 mM) a íerc-butyldimethylchlorsilan (30,7 g, 203 mmol) za míchání. Míchání směsi pokračovalo po dobu 23 hodin. Reakční směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Vodná vrstva byla zpětně extrahována ethylacetátem. Sloučené organické vrstvy byly promyty solankou, vysušeny nad síranem sodným, zfiltrovány a odpařeny za sníženého tlaku.

Vyčištění zbytku silikagelovou chromatografíí (za použití eluentu n-hexan:ethylacetát = 3:1) poskytlo 2’,3’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-ethynyluridm (14,9 g, 76% výtěžek).

FAB-MS: (m/z) 481 [M+H]⁺ ‘H-NMR: (270 MHz; CDC1₃): δ 0,10-0,13 (12H, m), 0,91 (18H, m), 140 (3H, d, J = 6,6), 3,21 (1H, s), 3,58 (1H, dd, J = 4,29, 6,6), 4,08-4,17 (2H, m), 5,62 (1H, d, J = 2,64), 7,68 (1H, s), 8,24 (1H, br, s)

-14CZ 295706 B6

Následující sloučeniny byly připraveny stejným způsobem jak je popsáno výše za použití odpovídajících známých 5-substituovaných uracilových derivátů.

’ ,3 ’-bis-(9-(/erc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-joduridin

FAB-MS: (m/z) 583 [M+H]⁺, 605 [M+Na]⁺ ‘H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ -0,09 (3H, s), -0,03 (3H, s), 0,00 (3H, s), 0,02 (3H, s), 0,75 (9H, s), 0,81 (9H, s), 1,24 (3H, d, J = 6,6), 3,75 (1H, dd, J = 4,6, 4,0), 3,86 (1H, m), 4,36 (1H, dd, J = 5,3, 5,0), 5,59 (1H, d, J = 5,6), 7,91 (1H, s), 11,69 (1H, br, s) ’,3 ’-bis-C>-(/erč'-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-trifluormethyluridin

FAB-MS: (m/z) 525 [M+H]⁺ ’Η-NMR: (400 MHz; CDC1₃): δ 0,00 (6H, s), 0,02 (3H, s), 0,06 (3H, s), 0,83 (9H, s), 0,83 (9H, s), 1,32 (3H, d, J = 5,9), 3,47 (1H, m), 4,05 (1H, m), 4,16 (1H, m), 5,54 (1H, d, J = 2,2), 7,84 (1H, s), 8,43 (1H, br, s)

Následující sloučeniny mohou být připraveny stejným způsobem jak je výše popsáno za použití odpovídajících známých 5-substituovaných uracilových derivátů.

’ ,3 ’-bis-č)-(terc-butyldímethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-prop-l-ynyl-uridin, ’ ,3 ’-bis-O-(terc-butyldimethylsilyl)-5-but-l-ynyl-5 ’ deoxyuridin, ’ ,3 ’-bis-(9-(fórc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-pent-l-ynyluridin,

2’,3’-bis-O-(terc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-hex-l-ynyluridin,

5-brom-2 ’ ,3 ’-bis-O-(terc-butyldimethylsilyl)-5-deoxyuridin, ’,3 ’-bis-<9-(íerc-butyldimethylsilyl)-5-( l-chlorvmyl)-5 ’-deoxyuridin, ’ ,3 ’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-vinyluridin.

Příklad 1

Příprava 2’,3 ’-bis-<9-(terc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-ethynylcytidinu

Do roztoku dimethylaminopyridinu (19,0 g, 155,5 mmol) v acetonitrilu (120 ml) a pyridinu (12,6 ml, 155,5 mmol) byl přidán fosforylchlorid (14,4 g, 93,8 mmol) po kapkách v ledové lázni pod atmosférou argonu. Po míchání směsi po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti byl přidán roztok 2’,3’-bis-(9-(íerc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-ethynyluridinu (14,9 g, 31,1 mmol) v acetonitrilu (80 ml) při teplotě 5 °C za chlazení v ledové lázni. Směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Pak byl přidán 25% vodný roztok amoniaku (10 ml) v 1 podílu do reakční směsi, přičemž se udržovala teplota pod 10 °C. Druhý podíl 25 °C vodného roztoku amoniaku (65 ml) byl přidán do reakční směsi, zatímco byla udržována teplota pod 10 °C.

Směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 45 minut. Pak byla reakční směs zředěna vodou (200 ml) při teplotě místnosti a extrahována třikrát ethylacetátem. Sloučené organické vrstvy byly promyty postupně vodným roztokem IN kyseliny chlorovodíkové, vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou. Organická vrstva byla vysušena nad síranem hořečnatým, zfíltrována a odpařena za sníženého tlaku. Vyčištění zbytku silikagelovou chroma

-15 CZ 295706 B6 tografíí (za použití eluentu n-hexan:ethylacetát = 2:1) poskytlo 2’,3 ’-bis-O-(Zerc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-ethynylcytidin (14,8 g, 99% výtěžek).

MALDI-MS: (m/z) 502 [M+Na]⁺, 518 [M+K]⁺ 'H-NMR: (400 MHz; CDC1₃): δ 0,05 (3H, s), 0,06 (3H, s), 0,12 (3H, s), 0,94 (3H, s), 0,89 (9H, s), 0,92 (9H, s), 1,41 (3H, d, J = 6,35), 3,36 (1H, s), 3,46 (1H, dd, J = 3,91, 7,81), 4,19-4,26 (2H, m), 5,57 (1H, s), 5,79 (1H, br, s), 7,57 (1H, br, s), 7,80 (1H, s)

Následující sloučeniny byly získány způsobem analogickým způsobu z příkladu 1.

Příklad 2 ’ ,3 ’-bis-O-(/erc-butyldnnethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-j odcytidin

FAB-MS: (m/z) 582 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆) δ 0,00 (3H, s), 0,02 (3H, s), 0,06 (3H, s), 0,08 (3H, s), 0,82 (9H, s), 0,88 (9H, s), 1,30 (3H, d, J = 6,6), 3,78 (1H, dd, J = 4,6,4,3), 3,93 (1H, m), 4,33 (1H, dd, J = 4,9, 4,6), 5,67 (1H, d, J = 5,0), 6,67 (1H, br, s), 7,87 (2H, br, s)

Příklad 3 ’ ,3 ’-bis-O-(terc-butyldirnethylsilyl)-5 ’-deoxy-3-trifluormethylcytidin

FAB-MS: (m/z) 524 [M+H]⁺

Ή-NMR: (400 MHz; CDC1₃): δ 0,00 (6H, s), 0,08 (3H, s), 0,19 (3H, s), 0,84 (9H, s), 0,87 (9H, s), 1,35 (3H, d, J = 6,6), 3,38 (1H, m), 4,15 (1H, m), 4,21 (1H, m), 5,51 (1H, s), 7,97 (1H, s)

Příklad 4 ’ ,3 ’-bis-(9-(/erc-butyldimethylsilyl)-5-kyan-5 ’-deoxycytidin

FAB-MB: (m/z) 481 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ -0,04 (3H, s), 0,00 (3H, s), 0,03 (3H,s), 0,76 (9H, s), 0,82 (9H, s), 1,21 (3H, d, J = 6,3), 3,81 (1H, m), 4,05 (1H, t, J = 5,0), 4,71 (1H, t, J = 5,0), 5,65 (1H, d, J = 5,3), 6,41 (1H, s), 7,69 (1H, br, s), 7,85 (1H, br, s)

Následující sloučeniny mohou být získány způsobem analogickým způsobu z příkladu 4.

2’,3’-bis-C>-(/erí^>-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-prop-l-ynylcytidin, ’ ,3 ’-bis-O-(tórc-butyldimethylsilyl)-5-but-l-ynyl-5 ’-deoxycytidin,

2’,3’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-pent-l-ynylcytidin, ’,3 ’-bis-O-(/^rc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-hex-l-ynylcytidin,

5-brom-2’,3 ’-bis-O-(terc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxycytidin,

-16CZ 295706 B6 ’ ,3 ’-bis-O-(/ere-butyldimethylsilyl)-5-( 1 -chlorvinyl)-5 ’-deoxycytidin, ’ ,3 ’-bis-O íerc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-vinylcytidin.

Příklad 5

Příprava 5 ’-deoxy-5-ethynyl-7V⁴-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu

a) 2\3’-Bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-ethynylcytidin (45 mg, 0,09 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu (1 ml a pyridinu (33 pl, 0,42 mM). Do směsi byl přidán n-pentylchlorformát (42,0 mg, 0,28 mmol) po kapkách v ledové lázni pod argonem. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Byla přidána voda a reakční směs byla míchána po dobu 50 minut. Reakční směs rozdělena mezi dichlormethan a vodu. Vodná vrstva byla extrahována dichlormethanem. Sloučené organické vrstvy byly vysušeny nad Na₂SO₄ a zfiltrovány. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku.

Vyčištění zbytku silikagelovou chromatografíí (za použití eluentu n-hexamethylacetát = 4:1) poskytlo 2 ’ ,3 ’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-ethynyl-A^-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin (40 mg, 72% výtěžek).

FAB-MS: (m/2) 594 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; CDC1₃): δ 0,12-0,37 (12H, m), 0,90-0,92 (21H, m), 1,26-1,42 (7H, m), 1,64-1,74 (2H, m), 3,25-3,51 (2H, m), 4,15-4,23 (4H, m), 5,55-5,60 (1H, m), 7,62 (0,5H, br, s), 7,73 (0,5H, br, s), 8,00 (0,5H, br, s), 12,3 (0,5H, br, s)

b) Do roztoku 2’,3’-bis-O-(tórc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-ethynyl-V^/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu (19 mg, 0,03 mmol) v tetrahydrofuranu (500 pm) byl po kapkách přidán tetrabutylamoniumfluorid (93 pm, 0,09 mmol) (l,0M tetrahydrofuranový roztok) při teplotě místnosti pod argonovou atmosférou. Po míchání směsi při teplotě místnosti po dobu 2 hodin byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Zbytek byl rozdělen mezi dichlormethan a vodu. Vodní vrstva byla zpětně extrahována dichlormethanem. Sloučené organické vrstvy byly vysušeny nad Na₂SO₄, zfíltrovány a odpařeny za sníženého tlaku.

Vyčištění zbytku silikagelovou chromatografíí (za použití eluentu dichlormethammethanol = 20:1) poskytlo 5’-deoxy-5-ethynyl-A^-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin (sloučenina A) (9 mg, 81% výtěžek).

FAB-MS: (m/z) 366 [M+H]⁺

Ή-NMR: (400 MHz; DMSO-d₆) ; δ 0,88 (3H, t, J = 6,84), 1,30-1,32 (7H, m), 1,59-1,63 (2H, m), 3,67-3,71 (1H, m), 3,90-4,46 (5H, m), 5,07 (1H, m), 5,42 (1H, m), 5,66 (1H, m), 7,89 (0,5H, br, s), 8,14 (0,5H, br, s), 9,53 (0,5H, br, s), 11,7 (0,5H, br, s)

Následující sloučeniny (příklady 6 až 39) byly získány způsobem analogickým způsobu z příkladu 5.

-17CZ 295706 B6

Příklad 6

5’-deoxy-5-ethyl-7Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 370 [M+H]⁺ 'H-NMR: (270 MHz; CDC1₃): δ 0,91 (3H, t, J = 6,33), 1,16 (3H, t, J = 7,5), 1,36 (4H, m), 1,41 (3H, d, J = 6,6), 1,72 (2H, m), 2,47 (2H, q, J = 7,5), 3,22 (1H, br, s), 3,93 (1H, m), 4,16 (2H, t, J = 6,93), 4,28 (2H, m), 4,49 (1H, br, s), 5,66 (1H, d, J = 3,63), 7,87 (1H, br, s), 12,46 (1H, br, s)

Příklad 7 ’-deoxy-5-j od-7Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 468 [M+H]⁺, 490 [M+Na]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,36 (3H, t, J = 7,0), 1,76-1,78 (7H, m), 2,09 (2H, m), 4,18 (1H, m), 4,36 (1H, m), 4,54 (2H, t, J = 5,9), 5,94 (1H, br.d, J = 5,0), 5,84 (1H, br.d, J = 5,0), 6,09 (1H, d, J = 4,3), 8,47 (1H, s), 12,24 (1H, br, s)

Příklad 8

5’-deoxy-?/-(n-pentyloxykarbonyl)-5-trifluormethylcytidin

FAB-MS: (m/z) 410 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; CDC1₃): δ 0,88-0,94 (3H, m), 1,32-1,39 (4H, m), 1,42 (3H, d, J = 6,6), 1,68-1,75 (2H, m), 3,09-3,30 (1H, m), 3,92 (1H, m), 4,15-4,27 (5H, m), 5,67 (1H, d, J = 3,3), 8,05-8,31 (1H, m), 12,6 (1H, br, s)

Příklad 9

5-kyan-5’-deoxy-7Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 367 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,88 (3H, t, J = 6,9), 1,30 (4H, s), 1,31 (3H, d, J = 6,3), 1,62 (2H, m), 3,81 (1H, kvin., J = 6,3), 3,91 (1H, kvin., J = 6,3), 4,13 (2H, t, J = 6,6), 4,39 (1H, m), 5,09 (1H, d, J = 6,3), 5,31 (1H, d, J = 5,3), 5,83 (1H, d, J = 4,0), 7,57 (1H, s), 11,23 (1H, br, s)

Příklad 10

5’-deoxy-5-ethynyl-7Ý-(n-propoxykarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 338 [M+H]⁺, 360 [M+Na]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,91 (3H, t, J = 7,3), 1,31 (3H, d, J = 6,3), 1,63 (2H, sextet, J = 7,3), 3,69 (1H, dt, J = 5,9, 5,3), 3,91 (1H, kvin., J = 5,9), 4,03 (2H, t, J = 6,6), 4,13 (1H, dt, J = 5,0, 4,3), 4,35 (1H, br, s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,41 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 8,01 (1H, br, s)

-18CZ 295706 B6

Příklad 11

5’-deoxy-5-ethynyl-2Ý-(isopropoxykarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 338 [M+H]⁺ ’H-NMR: (370 MHz; DMSO-d₆): δ 1,24 (6H, d, J = 5,9), 1,31 (3H, d, J = 6,6), 3,68 (1H, dt, J = 5,9, 5,6), 3,90 (1H, kvin., J = 5,9), 4,12 (1H, m), 4,30 (1H, s), 4,85 (1H, m), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,40 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 3,6), 8,02 (1H, br, s)

Příklad 12

N^#-(isobutoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-ethynylcytidin

FAB-MS: (m/z) 352 [M+H]⁺ *H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,91 (6H, d, J = 6,6), 1,30 (3H, d, J = 6,3), 1,91 (2H, m), 3,68 (1H, dt, J = 5,9, 5,3), 3,84 (2H, d, J = 6,6), 3,89 (1H, kvin., 6,3), 4,11 (1H, m), 4,30 (1H, s), 5,03 (1H, d, J = 5,9), 5,38 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 7,96 (1H, s)

Příklad 13

5’-deoxy-5-ethynyl-/Ý-[(2-methylpentyloxy)karbonyl]cytidin

FAB-MS: (m/z) 380 [M+H]⁺, 402 [M+Na]⁺ ’Η-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,85-0,93 (7H, m), 1,31 (3H, d, J = 6,3), 1,28-1,37 (3H, m), 1,77 (1H, m), 3,69 (1H, dt, J = 5,9, 5,6), 3,88 (2H, m), 3,93 (1H, m), 4,13 (1H, dt, J = 4,9, 4,6), 4,37(1H, br, s), 5,06 (1H, d, J = 5,9), 8,41 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 8,02 (1H, br, s)

Příklad 14 ’-deoxy-5-ethynyl-//-[(3-methylpentyloxy)karbonyl] cytidin

FAB-MS: (m/z) 380 [M+H]⁺ ’Η-NMR: (270 MHz; CDC1₃): δ 0,86-0,98 (6H, m), 1,15-1,80 (8H, m), 3,25-3,26 (1H, m), 3,53 (1H, br, s), 3,90-3,95 (1H, m), 4,25-4,37 (4H, m), 5,33 (1H, br, s), 5,71 (1H, d, J = 4,28), 7,69 (1H, br, s), 8,13 (lH,br, s)

Příklad 15 ’-deoxy-5—ethynyl-//-[(2-propylpentyloxy)karbonyl] cytidin

MALDI-MS: (m/z) 408,5 [M+H]⁺, 430,5 [M+Na]⁺, 446 [M+K]⁺ ’H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,87 (6H, br.m), 1,29 (11H, br.m), 1,66 (1H, br.m), 3,69 (1H, br.m), 3,94-4,5 (5H, br.m), 5,06 (1H, br.m), 5,42 (1H, br.m), 5,66 (1H, br.m), 7,90 (0,5H, br, s), 8,14 (0,5H, br, s), 9,53 (0,5H, br, s)

-19CZ 295706 B6

Příklad 16

5’-deoxy-5-ethynyl-V-(n-oktyloxykarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 408 [M+H]⁺, 430 [M+Na]⁺ ‘H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,86 (3H, t, J = 5,0), 1,26 (10H, m), 1,31 (3H, d, J = 6,0), 1,60 (2H, m), 3,69 (1H, dt, J = 5,9, 5,6), 3,90 (1H, kvin., J = 6,3), 4,06 (2H, t, J = 6,3), 4,13 (1H, m), 4,35 (1H, br, s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,41 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 8,02 (1H, br, s)

Příklad 17

5’-deoxy-/Ý-[(2-ethylhexyl)oxykarbonyl]-5-ethynylcytidin

FAB-MS: (m/z) 408 [M+H]⁺ ‘H-NMR: (270 MHz; CDC1₃): δ 0,88-0,94(6H, m), 1,30-1,41 (12H, m), 3,25 (1H, d, J = 3,63), 3,53(1H, m), 3,92-3,94(lH, m), 4,15-4,37 (4H, m), 5,32 (1H, m), 5,70 (1H, dt, J = 4,61), 7,86 (lH,br, s), 8,14(lH,br, s)

Příklad 18

5’-deoxy-5-ethynyl-7Ý-[(2-fenylethoxy)karbonyl]cytidin

FAB-MS: (m/z) 400 [M+H]⁺ ‘H-NMR: (270 MHz; DMSO-4₆): δ 1,31 (3H, d, J = 6,3), 2,94 (2H, t, J = 6,9), 3,69 (1H, dt, J = 5,9, 5,6), 3,90 (1H, kvin., J = 6,3), 4,14 (1H, m), 4,28 (2H, t, J = 6,9), 4,31 (1H, br, s), 5,05 (1H, d, J = 5,6), 5,41 (1H, d, J = 4,9), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 7,27 (5H, m), 8,01 (1H, br, s)

Příklad 19 ?/-(cyklohexyloxykarbonyl)-5’-deoxy-5-ethynylcytidin

FAB-MB: (m/z) 378 [M+H]⁺ ‘H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,06-1,48 (9H, m), 1,69 (2H, m), 1,86 (2H, m), 3,65-3,72 (1H, m), 3,88-3,93 (1H, m), 4,13-4,61 (3H, m), 5,06 (1H, d, J = 6,27), 5,42 (1H, d, J = 4,95), 5,66 (1H, d, J = 3,63), 7,9-8,1 (1H, m), 9,4 (0,5H, br, s), 11,8 (0,5H, br, s)

Příklad 20

N⁴-[(cyklohexylmethoxy)karbonyl]-5’-deoxy-5-ethynylcytidin

FAB-MS: (m/z) 392 [M+H]⁺, 414 [M+Na]⁺ ‘H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,86-1,25 (5H, m), 1,31 (3H, d, J = 6,3), 1,61-1,72 (6H, m), 3,69 (1H, dt, J = 5,9, 5,6), 3,89 (2H, d, J = 6,3), 3,90 (1H, m), 4,14 (1H, m), 4,36 (1H, br, s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,41 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 4,0), 8,02 (1H, br, s).

-20CZ 295706 B6

Příklad 21

5’-deoxy-5-ethynyl-?f-(neopentyloxykarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 366 [M+H]⁺, 388 [M+Na]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,93 (9H, s), 1,30 (3H, br.d), 3,67-4,27, (5,5H, br.m), 4,47 (0,5H, br, s), 5,06 (IH, br.m), 5,39 (IH, br.m), 5,43 (IH, br.m), 7,88 (0,5H, br, s), 8,16 (0,5H, br, s), 9,56 (0,5H, br, s), 11,69 (0,5H, br, s)

Příklad 22 ’-deoxy-A^-[(3,3-dimethylbutoxy)karbonyl]-5-ethynylcytidin

FAB-MS: (m/z) 380 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,01 (9H, s), 1,39 (3H, br,d), 1,63 (2H, br,t), 3,77 (lH,br,m), 3,98-4,32 (4,5H, br,m), 4,56 (0,5H, br, s), 5,13 (IH, br,m), 5,45-5,51 (IH, br,m), 5,73-5,75 (IH, br,m), 7,96 (0,5H, br, s), 8,23 (0,5H, br, s), 9,57 (0,5H, br, s), 11,76 (0,5H, br, s)

Příklad 23

5’-deoxy-5-ethynyl-?/-(tridecyloxykarbonyl)cytidín

MALDI-MS: (m/z) 478 [M+H]⁺, 516 [M+K]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,85 (3H, d, J = 4,6), 1,24 (20H, m), 1,30 (3H, d, J = 6,5), 1,60 (2H, m), 3,68 (IH, dt, J = 5,9, 5,6), 3,90 (IH, kvin., J = 6,3), 4,05 (2H, t, J = 6,6), 4,13 (IH, dt, J = 5,0, 4,3), 4,34 (IH, br, s), 5,05 (IH, d, J = 5,9), 5,40 (IH, d, J = 5,3), 5,65 (IH, d, J = 3,6), 8,00 (IH, br, s)

Příklad 24

7/-(n-butoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-ethynylcytidin

FAB-MS: (m/z) 352 [M+H]⁺, 374 [M+Na]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,89 (3H, t, J = 7,2), 1,28-1,41 (5H, m), 1,53-1,64 (2H, m), 3,64-3,71 (IH, m), 3,85-3,92 (IH, m), 4,03-4,15 (3H, m), 4,34 (IH, s), 5,04 (IH, d, J = 5,9), 5,39 (IH, d, J = 5,3), 5,64 (IH, d, J = 3,6), 8,06 (IH, br, s)

Příklad 25

5’-deoxy-5-ethynyl-A^r/-(n-hexyloxykarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 380 [M+H]⁺, 402 [M+Na]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,95 (3H, t, J = 6,6), 1,38-1,40 (9H, m), 1,63-1,71 (2H, m), 3,74-3,80 (IH, m), 3,94-4,03 (IH, m), 4,14 (2H, t, J = 6,6), 4,19-4,24 (IH, m), 4,43 (IH, s), 5,13 (IH, d, J = 5,9), 5,49 (IH, d, J = 5,3), 5,74 (IH, d, J = 4,0), 8,09 (IH, br, s)

-21 CZ 295706 B6

Příklad 26

5’-deoxy-5-ethynyl-7Ý-(n-decyloxykarbonyl)cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 436 [M+H]⁺ ’Η-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,85 (3H, t, J = 6,4), 1,15-1,42 (17H, m), 1,60 (2H, m), 3,69 (1H, m), 3,90 (1H, m), 4,05 (2H, t, J = 6,6), 4,13 (1H, m), 4,34 (1H, br, s), 5,04 (1H, d, J = 5,6), 5,40 (1H, d, J = 4,9), 5,66 (1H, d, J = 3,6), 8,01 (1H, br, s)

Příklad 27

5’-deoxy-6~ethynyl-?/-[(2,6-dimethylcyklohexyloxy)karbonyl]cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 406 [M+H]⁺ ’Η-NMR: (370 MHz; DMSO-d₆): δ 0,83 (36H, d, J = 6,3), 1,20-1,50 (9H, m), 1,55-1,75 (2H, m), 3,68 (1H, m), 3,93 (1H, m), 412-4,20 (2H, m), 4,45 (0,7H, s), 4,86 (0,3H, s), 5,04 (1H, d, J = 5,6), 5,43 (1H, br, s), 5,67 (1H, br, s), 7,96 (0,3H, br, s), 8,14 (0,7H, br, s), 9,50 (0,7H, br, s) 12,00 (0,3H, br, s)

Příklad 28

5’-deoxy-5-ethynyl-2V⁴-(benzyloxykarbonyl)cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 386 [M+H]⁺ ’Η-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,30 (3H, d, J = 6,3), 3,69 (1H, m), 3,89 (1H, m), 4,13 (1H, m), 4,35 (1H, br, s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,14 (2H, s), 5,41 (1H, d, J = 5,3), 5,66 (1H, d, J = 3,6), 7,31-7,45 (5H, m), 8,01 (1H, br, s)

Příklad 29

5’-deoxy-5-ethynyl-7/-[(l-isopropyl-2-methylpropoxy)karbonyl]cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 394 [M+H]⁺ ’H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,93 (12H, d, J = 6,6), 1,40 (3H, d, J = 6,6), 1,97 (2H, m), 3,33 (1H, d, J = 3,6), 3,55 (1H, s), 3,.91 (1H, m), 4,30 (1H, m), 4,36 (1H, m), 4,62 (1H, m), 5,40 (1H, s), 5,72 (1H, d, J = 4,3), 7,69 (1H, s), 8,11 (lH,s)

Příklad 30 ’-deoxy-5-ethynyl-7Ý-[(5-methylbenzyloxy)karbonyl] cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 416 [M+H]⁺ ’Η-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,31 (3H, d, J = 6,0), 3,70 (1H, m), 3,76 (3H, s), 3,90 (1H, m) 4,14 (1H, m), 4,26 (0,5H, br, s), 4,44 (0,5H, br, s), 5,06 (2H, s), 5,16 (1H, br, s), 5,41 (1H, br,

-22CZ 295706 B6

s), 5,66 (1H, m), 6,91 (1H, d, J = 7,9), 7,00 (2H, m), 7,30 (1H, dd, J = 7,9, 7,9), 7,89 (0,5H, br, s),

8,14 (0,5H, br, s), 9,72 (0,5H, br, s), 11,7 (0,5H, br, s)

Příklad 31

S^deoxy-S-ethynyl-TV^-řmethoxykarbonyljcytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 310 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,30 (3H, d, J = 6,3), 3,66 (3H, s), 3,70 (1H, m), 3,90 (1H, kvin., J = 6,3), 4,13 (1H, m), 4,34 (1H, s), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,40 (1H, d, J = 5,3) 5,66 (1H, d, J = 4,0), 8,00 (1H, br, s)

Příklad 32

S-deoxy-S-ethynyl-TÝ-fythyloxykarbonyljcytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 324 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,23 (3H, t, J = 6,93), 1,31 (3H, d, J = 6,27), 3,69 (1H, m), 3,90 (1H, m), 4,08-4,14 (3H, m), 4,35 (1H, br, s), 5,05 (1H, d, J = 5,94), 5,40 (1H, d, J = 5,27), 5,66 (1H, d, J = 3,63), 8,02 (1H, br, s)

Příklad 33

5’-deoxy-Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin

FAB-MS: (m/z) 342 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-de): δ 0,88 (3H, t, J = 6,9), 1,31 (4H, m), 1,32 (3H, d, J = 6,3), 1,55-1,63 (2H, m), 3,63 (1H, dt, J - 5,6, 5,6), 3,93 (1H, kvin., J = 6,3), 3,98 (1H, m), 4,01 (2H, t, J = 6,9), 5,04 (1H, d, J = 5,9), 5,42 (1H, d, J = 4,6), 5,73 (1H, d, >3,0), 7,07 (1H, d, J = 7,6), 7,97 (1H, d, J = 7,6), 10,66 (lH,br,s)

Příklad 34

5’-deoxy-A^n-pentyloxykarbonyl)-5-vinylcytidin

MS:LC-MS: (m/z) 368 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,88 (8H, t, J = 7,1), 1,31 (7H, m), 1,61 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,91 (1H, m), 4,06 (2H, t, J = 6,4), 4,22 (1H, m), 5,08 (1H, d, J = 5,3), 5,20 (1H, d, J =11,3), 5,40 (1H, d, J = 4,9), 5,69 (1H, d, J = 4,0), 5,88 (1H, d, J = 17,9), 6,57 (1H, dd, J =11,3, 17,9), 7,78 (lH,s), 11,88 (1H, s)

Příklad 35

5’-deoxy-Ý-(benzyloxykarbonyl)-5-vmylcytidm

MS:FAB-MS: (m/z) 388 [M+H]⁺, 410 [M+Na]⁺,

-23 CZ 295706 B6 ’Η-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,30 (3H, d, J = 6,3), 3,73 (1H, m), 3,92 (1H, m), 4,23 (1H, m), 5,13 (2H, s), 5,04-5,22 (2H, m), 5,42 (1H, d, J = 5,3), 5,69 (1H, d, J = 4,3), 5,69 (1H, dd, J = 15,8, 2,0), 6,55 (1H, dd, J = 11,2,15,8), 7,36-7,42 (5H, m), 7,78 (1H, s), 11,87 (1H, s).

Příklad 36

7/-(ethoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-vinylcytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 326 [M+H]⁺, 348 [M+NA]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): A 1,23 (3H, t, J = 7,26), 1,32 (3H, d, J = 6,27), 3,70-3,76 (1H, m), 3,89-3,94 (1H, m), 4,11 (2H, q, J = 7,26), 4,22 (1H, m), 5,09 (1H, d, J = 5,61), 5,18-5,22 (1H, m), 5,42 (1H, d, J = 5,61), 5,69 (1H, d, J = 3,96), 5,85-5,92 (1H, m), 6,57 (1H, dd, J = 11,88, 17,82), 7,79 (1H, s), 11,88 (1H, br, s)

Příklad 37 ’-deoxy-5-j od-/Ý-[(2-fenylethoxy)karbony1] cytidin

MS:FAB-MS: (m/z) 502 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,30 (3H, d, J = 6,3), 2,96 (2H, t, J =7,1), 3,69 (1H, m), 3,88 (1H, m), 4,17 (1H, m), 4,29 (2H, t, J = 7,1), 5,07 (1H, d, J = 5,9), 5,38 (1H, d, J = 5,3), 5,62 (1H, d, J = 4,6), 7,19-7,35 (5H, m), 8,01 (1H, s), 11,70 (1H, br, s)

Příklad 38 ’-deoxy-5-j od-M-(isopropoxykarbonyl)cytidin

MS:MALDI-TOF: (m/z) 462,5 [M+Na]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,24 (6H, d, J = 6,3), 1,30 (3H, d, J = 6,3), 3,69 (1H, m), 3,88 (1H, m), 4,17 (1H, m), 4,87 (1H, m), 5,07 (1H, d, J = 5,6), 5,38 (1H, d, J = 5,3), 5,62 (1H, d, J = 4,3), 8,02 (1H, s), 11,77 (1H, br, s)

Příklad 39

N⁴-(cyklohexyloxykarbonyl)-5 ’-deoxy-5-j odcytidin

MS:LC-MS: (m/z) 479,9 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,23-1,42 (6H, m), 1,29 (3H, d, J = 6,3), 1,70 (2H, m), 1,89 (2H, m), 3,69 (1H, m), 3,88 (1H, m), 4,16 (1H, m), 4,60 (1H, m), 5,05 (1H, d, J = 5,9), 5,37 (1H, d, J = 5,3), 5,62 (1H, d, J = 4,3), 8,00 (1H, s)

Následující sloučeniny mohou být také získány způsobem analogickým způsobu z příkladu 5.

5’-deoxy-/Ý-(n-pentyloxykarbonyl)-5-prop-l-ynylcytidin,

5-but-1 -ynyl-5 ’-deoxy-7V*-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin

-24CZ 295706 B6 ’-deoxy-5-pent-1 -ynyl-/V⁴-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, ’-deoxy-5-hex-1 -ynyl-A^-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, 5’-deoxy-5“brom-7/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin, ’-deoxy-5-( 1 --chlorvmyl)-/V^/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidm, 5’-deoxy-?/-~(n-pentyloxykarbonyl)-5-vinylcytidin, ’-deoxy-5-ethynyl-A'⁴-(isopentyloxykarbonyl)cytidin, a 5’-deoxy-7Ý-[(2-ethylbutyl)oxykarbonyl]-5-ethynylcytidin.

Příklad 40

Příprava 2’,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-jodcytidinu

5-Jodcytosin (1,0 g, 4,22 mmol) a katalytické množství (NH^SCL byly suspendovány v roztoku toluenu (10 ml) a hexamethyldisilazanu (20 ml). Suspenze byla zahřívána při 110 °C po dobu 18 hodin, čímž vznikl čirý roztok. Po zkoncentrování reakčního roztoku za sníženého tlaku byl přidán ke zbytku acetonitril (25 ml) a 5-deoxy-l,2,3-tri-C>-acetyl-D-ribofuranosid (1,32 g, 5,05 mmol). Pak byl po kapkách přidán bezvodý chlorid cíničitý (1,58 ml, 5,06 mmol) vnitromethanu (5 ml) do směsi během 5 minut. Během přídavku byla směs udržována pod 0 °C za chlazení ledem. Po míchání směsi při 0 až 5 °C po dobu 2 hodin byly přidány 2 g hydrogenuhličitanu sodného, načež následoval přídavek vody po kapkách (0,7 ml). Po tomto přídavku byla směs živě míchána při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Reakční směs byla zfiltrována, čímž se odstranil nerozpustný materiál, který byl promyt CH₂C1₂. Filtrát a výplachy byly sloučeny a promyty vodou a nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitnu sodného a pak vysušeny nad síranem sodným a zfíltrovány. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku.

Surový produkt byl vyčištěn mžikovou chromatografíí na SiO₂ (eluent: 5% MeOH/CH₂Cl₂) čímž se získal 5’-deoxy-2’,3’-di-O-acetyl-5-jodcytidin jako bezbarvá tuhá látka (1,22 g, 66% výtěžek).

FAB-MS: (m/z) 438 [M+H]⁺, 460 [M+Na]⁺ ^]H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,32 (3H, d, J = 6,3), 2,04 (3H, s), 2,06 (3H s), 4,02 (1H, kvin., J = 6,3), 5,14 (1H, t, J = 6,6), 5,48 (1H, dd, J = 6,6, 4,3), 5,69 (1H, d, J = 4,0), 6,78 (1H, br, s), 8,01 (1H, br, s), 8,11 (1H, s)

Příklad 41

Příprava 2’,3 ’-bis-O-(tórc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-jod-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu

a) 5’-deoxy-2’,3’-di-O-acetyl-5-jodcytidin (200 mg, 0,46 mmol) byl rozpuštěn v methanolu (5 ml). Do tohoto roztoku byl po kapkách přidán při 0 °C roztok 1 mol/1 hydroxidu sodného. Po míchání po dobu 10 minut byla reakční směs nastavena na pH 7 roztokem IN kyseliny chlorovodíkové. Reakční směs byla odpařena za sníženého tlaku.

Ke zbytku byla přidána směs imidazolu (467 mg, 6,9 mmol) v DMF (5 ml). Pak byl ke směsi přidán terc-butyldimethylchlorsilan (345 mg, 2,29 mmol). Reakční směs byla míchána při 50 °C po dobu 1 hodiny. Směs byla extrahována dichlormethanem, promyta vodou a pak vysušena nad síranem sodným a zfiltrována. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku. Surový produkt byl vyčištěn mžikovou chromatografíí na SiO₂ (eluent: 70 % EtOAc/n-hexan do 100 % EtOAc), čímž se

-25 CZ 295706 B6 získal 5’-deoxy-2’,3’-di-O-/erc-butyldimethylsilyl-5-jodcytidin jako bezbarvá tuhá látka (176,5 mg, 66% výtěžek).

FAB-MS: (m/z) 582 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆) δ 0,00 (3H, s), 0,02 (3H, s), 0,06 (3H, s), 0,08 (3H, s), 0,82 (9H, s), 0,88 (9H, s), 1,30 (3H, d, J = 6,6), 3,78 (1H, dd, J = 4,6, 4,3), 3,93 (1H, m), 4,33 (1H, dd, j = 4,9, 4,6), 5,67 (1H, d, J = 5,0), 6,67(1H, br, s), 7,87(2H, br, s)

b) Do míchaného roztoku 5’-deoxy-2’,3’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5-jodcytidinu (116 mg, 0,200 mmol) v CH₂C1₂ (2 ml), pyridinu (84 μΐ, 1,0 mmol), Λζ/V-dimethylammopyndinu (6 mg, 0,05 mmol) a n-pentylchlorformát (95 μΐ, 0,600 mmol) byl přidán při teplotě místnosti pod argonem. Po míchání po dobu 30 minut byla reakční směs rozdělena dichlormethanem a vodou a organická fáze byla separována a vodná fáze byla extrahována CH₂C1₂ (4x 15 ml). Sloučená organická fáze byla promyta vodou a solankou, vysušena nad síranem sodným a zfiltrována. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku.

Surový produkt byl vyčištěn mžikovou chromatografíí na SiO₂ (20% EtOAc/n-hexan), čímž se získal 2 ’ ,3 ’-bis-O-fórc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-j od-7Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidm jako bezbarvá amorfní tuhá látka (132,4 mg, 91% výtěžek).

FAB-MS: (m/z) 696 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 0,00 (3H, s), 0,03 (3H, s), 0,05 (3H, s), 0,07 (3H, s), 0,77 (9H, s), 0,81 (9H, s), 1,20-1,27 (10H, m), 1,46-1,55 (2H, m), 3,74 (1H, dd, J = 4,6, 4,6), 3,89-4,01 (3H, m), 4,37 (1H, dd, J = 4,5,4,6), 5,55 (1H, d, J = 4,6), 7,92 (1H, s), 11,70 (1H, br, s)

Tuto sloučeninu je možno převést na sloučeninu z příkladu 7 způsobem podle příkladu 5b.

Příklad 42

Příprava 2’,3 ’-bis-O-(/erc-butyldimethylsilyl)-5 ’-deoxy-5-[(trimethylsilyl)ethynyl]-A^r/-(npentyloxykarbonyl)cytidinu

Do roztoku 2 ’,3 ’-bis-č?-(/erc-butyIdimethylsilyl)-5 -deoxy-S-jod-TÝ-ín-pentyloxykarbonyl)cytidinu (130 mg, 0,18 mmol) vCH₂Cl₂ (2 ml) a Et₃N (2 ml), CuJ (10,7 mg, 0,1056 mmol), Pd(Ph₃)₂Cl₂ (2,6 mg, 0,0036 mmol) a trimethylsilylacetylen (58,6 μΐ, 0,40 mmol) byly přidány a míchány po dobu 2 hodin při teplotě místnosti pod argonem ve tmě. Reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku a zbytek byl rozpouštěn v EtOAc (3 x 25 ml), promyta 2% vodným EDTAo2Na (2 x 10 ml), vodou a solankou, vysušena Na₂SO₄ a zfiltrována. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku.

Surový produkt byl vyčištěn mžikovou chromatografíí na SiO₂ (eluent: 10% EtOAc/n-hexan), čímž se získal 2’,3’-bis-č)-(/erc-butyldimethylsilyl)-5’-deoxy-5-[(trimethylsilyl)ethynyl]-7V⁴(n-pentyloxykarbonyl)cytidin jako bezbarvá amorfní tuhá látka (30,2 mg, 26% výtěžek).

FAB-MS: (m/z) 666 [M+H]⁺, 688 [M+Na]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ -0,18 (5H, s), -0,16 (3H, s), -0,14 (3H,s), -0,12 (3M, s), 0,00 (9H, s), 0,64 (9H, s), 0,65 (3H, s), 0,67 (9H, s), 1,01 (4H, m), 1,14 (3H, d, J = 6,6), 1,40 (2H, m), 3,58 (1H, t, J = 4,9), 3,79 (1H, m), 3,87 (2H, m), 4,20 (1H, m), 5,43 (1H, d, J = 3,6), 7,88 (1H, br, s)

-26CZ 295706 B6

Tuto sloučeninu je možno podrobit deprotekci za vzniku 5’-deoxy-5-ethynyl-JV-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu.

Příklad 43 ’-Deoxy-2 ’ ,3 ’-bis-C>-(terc-butyldimethylsilyl)-5-kyancytidin

Do míchaného roztoku 5’-deoxy-2’,3’-bis-(O-terc-butyldimethylsilyloxy)-5-jodcytidinu (153 mg, 0,263 mmol) v DMF (5 ml) byl přidán NaCN (34,3 mg, 0,70 mmol) při teplotě místnosti. Po míchání po dobu 1 dne byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Surový produkt byl rozpuštěn v EtOAc a pak promyt vodou a solankou. Extrakt byl vysušen nad síranem sodným a zfiltrován. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku.

Surový produkt byl vyčištěn mžikovou chromatografíí na SiO₂ (eluent: EtOAc), čímž se získal 5’-deoxy-2’,3’-bis-(7-(/erc-butyldimethylsilyl)-5-kyancytidin jako bleděžlutá tuhá látka (71,1 mg, 55% výtěžek).

FAB-MS: (m/z) 481 [M+H]⁺ ‘H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ -0,04 (3H, s), 0,00 (3H, s), 0,02 (3H,s), 0,76 (9H, s), 0,82 (9H, s), 1,21 (3H, d, J = 6,3), 3,81 (1H, m), 4,05 (1H, t, J = 5,0), 4,71 (1H, t, J = 5,0), 5,65 (1H, d, J = 5,3), 6,41 (1H, s), 7,69 (1H, br, s), 7,85 (1H, br, s)

Tuto sloučeninu je možno podrobit deprotekci za vzniku 5’-deoxy-5-kyanocytidinu.

Příklad 44

Příprava 2’,3’-di-O-acetyl-5’-deoxy-5-jodcytidinu, (1,6 g, 3,66 mmol) v 10 ml DMFd byl přidán Pd₂ (dba)₃ (67 mg, 0,073 mmol) a tri-2-furylfosfín (85 mg, 0,366 mmol) a tri-n-butyl(vinyl)stanan (2,1 ml, 7,318 mmol) pod argonovou atmosféru při teplotě místnosti. Po míchání po dobu 19 hodin byl do reakční směsi přidán tri-n-butyl(vinyl)stanan (2,1 ml, 7,318 mmol) a pak byla reakční směs zahřívána na 40 °C za míchání po dobu 24 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno za vakua a zbytek byl vyčištěn na sloupci silikagelu (eluent: ethylacetát ~ VH₂Cl₂:MeOH = 95:5), čímž se získal 2’,3’-di-O-acetyl-5’-deoxy-5-vinylcytidin (1,13 g, 92 %) jako bezbarvá tuhá látka.

MS:FAB-MS: (m/z) 338 [M+H]⁺ ‘H-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,33 (3H, d, J = 6,3), 2,05 (3H, s), 2,06 (3H, s), 4,05 (1H, kvin., J = 6,3), 5,14 (1H, d, J = 10,8), 5,16 (1H, t, J = 6,6), 5,54 (1H, d, J=17,2), 5,53 (1H, dd, J = 6,9, 5,9), 5,73 (1H, d, J= 4,3), 6,55 (1H, dd, J =17,2, 10,8), 7,20 (1H, br, s), 7,57 (1H, br, s), 7,88 (1H, s)

Příklad 45

Příprava 5’-deoxy-3-vinylcytidinu

Do roztoku 2’,3’-di-O-acetyl-5’-deoxy-5-vinylcytidinu (111 mg, 3,29 mmol) v 5 ml methanolu byl přidán IN NaOH (0,32 ml, 0,32 mmol) při teplotě místnosti. Po míchání po dobu 1 hodiny byla do reakční směsi přidána IN HC1 a pak byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl vyčištěn extrakcí tuhé fáze (MEGA Bond Elute LRC, eluent:

-27CZ 295706 B6

H₂O~H₂O:MeOH = 1:1, stupňový gradient), čímž se získal 5’-deoxy-3-vinylcytidin (82 mg, 98 %) jako bezbarvá tuhá látka.

MS:LC-MS: (m/z) 253,9 [M+H]⁺

Ή-NMR: (270 MHz; DMSO-d₆): δ 1,29 (3H, d, J = 6,3), 3,68 (1H, m), 3,86 (1H, m), 4,08 (1H, m), 4,97 (1H, d, J = 5,9), 5,12 (1H, d, J = 11,1), 5,28 (1H, d, J = 5,3), 5,50 (1H, d, J = 17,2), 5,70 (1H, d, J = 3,6), 6,58 (1H, dd, J = 11,1, 17,2), 7,10 (1H, br, s), 7,42 (1H, br, s), 7,64 (1H, s)

Následující příklady znázorňují farmaceutické přípravky obsahující sloučeninu vytvořenou tímto vynálezem.

Příklad A

Do sebe zapadající želatinové tobolky, každá obsahující následující složky, byly vyrobeny o sobě známým způsobem.

SMeoxy-S-ethynyl-jÝ-Cn-pentyloxykarbonyljcytidin laktóza kukuřičný škrob stearan hořečnatý crospovidon

40 mg 70 mg 25 mg 1 mg 4 mg 140 mg

Příklad B

5’-deoxy-5-fluor-7V^/-(ⁿ~pentyloxykarbonyl)cytidm 5’-deoxy-5-ethynyl-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin laktóza kukuřičný škrob stearan hořečnatý crospovidon

100 mg 10 mg 70 mg 25 mg 1 mg 4 mg 210 mg

Příklad C

Tablety, každá obsahující následující složky, byly vyrobeny o sobě známým způsobem.

5’-deoxy-5-ethynyl-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin laktóza stearan hořečnatý crospovidon povidon

40 mg 70 mg 3 mg 7 mg 10 mg 130 mg

Když je to nutné, tableta je pokryta filmem s hydroxypropylmethylcelulózou, talkem a barvivém.

-28CZ 295706 B6

Příklad D

5’-deoxy-5-fluor-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin	300 mg
5’-deoxy-5-ethynyl-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidin	20 mg
laktóza	70 mg
stearan hořečnatý	3 mg
crospovidon	7 mg
povidon	10 mg
186 mg

Když je to nutné, tableta je povlečena filmem s hydroxypropylmethylcelulózou, talkem a barvivém.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Derivát 5 ’-deoxycytidinu obecného vzorce I (I), kde

R¹ je atom vodíku nebo skupina snadno hydrolyzovatelná za fyziologických podmínek, kterou je acetyl, propionyl, benzoyl, toluoyl, glycyl, alanyl, β-alanyl, valyl nebo lysyl;

R² je atom vodíku nebo -CO-OR⁴ skupina, kde R⁴ je nasycená nebo nenasycená rozvětvená nebo nerozvětvená uhlovodíková skupina sestávající z 1 až 15 atomů uhlíku nebo skupina vzorce -(CH₂)_n-Y, ve které Y je cyklohexyl nebo fenyl a n je celé číslo od 0 do 4;

R³ je atom vodíku, brom, jod, kyano, C^alkylová skupina, která může být substituována atomem nebo atomy halogenu, vinylová nebo ethynylová skupina, přičemž vinylová nebo ethynylová skupina může být substituována atomem nebo atomy halogenu, C^alkylem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem, který může obsahovat 1 nebo více dusíkových heteroatomů;

za předpokladu, že R² a R³ neznamenají současně atomy vodíku.

-29CZ 295706 B6
2. Derivát 5’-deoxycytidinu podle nároku 1, vzorce I, kde R³ je atom vodíku, brom, jod, trifluormethyl, ethyl, propyl, kyano, vinyl, 1-chlorvinyl, ethynyl, prop-l-ynyl, but-l-ynyl, pent1-ynyl, hex-l-ynyl nebo bromethynyl.
3. Derivát 5’-deoxycytidinu podle nároku 1 nebo 2 vybraný ze skupiny sestávající z

5 ’-deoxy-5-ethynylcytidinu,

5 ’-deoxy-5-prop-l-ynylcytidinu,

5-but-l-ynyl-5 ’-deoxycytidinu,

5 ’-deoxy-5-pent-l -ynylcytidinu,

5 ’-deoxy-5-hex-l-ynylcytidinu,

5 ’-deoxy-5-j odcytidinu,

5-brom-5 ’-deoxycytidinu,

5-( 1 -chlorvinyl)-5 ’-deoxycytidinu,

5 ’-deoxy-5-vinylcytidinu

5 ’-deoxy-5-trifluormethylcytidinu,

5-kyano-5 ’-deoxycytidinu,

5’-deoxy-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu, 5’-deoxy-N⁴-(n-pentyloxykarbonyl)-5-prop-l-ynylcytidinu, 5-but-l-ynyl-5’-deoxy-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu, 5 ’-deoxy-5-pent-1 -ynyl-7/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu, 5 ’-deoxy-5-hex-1 -ynyl-7/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu, 5 ’-deoxy-5-j od-7Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu, 5-brom-5’-deoxy-/V^/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu, 5-( l-chlorvinyl)-5 ’-deoxy-?/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu, ?/-(ethoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-vmylcytidinu, 5’-deoxy-?V*-(n-propoxykarbonyl)-5-vmylcytidinu, 7Ú-(n-butoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-vmylcytidmu, 5’-deoxy-?/-(n-pentyloxykarbonyl)-5-vinylcytidinu, 5’-deoxy-7V*-(n-pentyloxykarbonyl)-5-trifluormethylcytidmu, S-P-benzyloxybenzylj-S^deoxy-TÝ-ín-pentyloxykarbonyljcytidinu, 5-kyano-5’-deoxy-7Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu, 5’-deoxy-5-ethynyl-?/-(methoxykarbonyl)cytidinu, 5’-deoxy-7/-(ethoxykarbonyl)-5-ethynylcytidinu, 5’-deoxy-5-ethynyl-//-(n-propoxykarbonyl)cytidinu, 5’-deoxy-5-ethynyl-/V^/-(isopropoxykarbonyl)cytidinu, ?/-(n-butoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-ethynylcytidinu, 5’-deoxy-5-ethynyl-?/-(isobutoxykarbonyl)cytidinu, S^deoxy-S-ethynyl-A^-Cn-pentyloxykarbonyljcytidinu,

-30CZ 295706 B6

5’-deoxy-5-ethynyl-/Ý-[(2-propylpentyloxy)karbonyl]cytidinu,

5’-deoxy-5-ethynyl-A^-(isopentyloxykarbonyl)cytidinu,

5’-deoxy-5-ethynyl-7Ý-[(2-methylpentyloxy)karbonyl]cytidinu,

5 ’-deoxy-5-ethynyl-7Ý-[(3-methylpentyloxy)karbonyl] cytidinu, 5’-deoxy-5-ethynyl-Ý-(n-hexyloxykarbonyl)cytidmu, 5’-deoxy-2Ý-[(2-ethylbutyl)oxykarbonyl]-5-ethynylcytidinu, 5’-deoxy-5-ethynyl-7Ý-[(2-fenylethoxy)karbonyl]cytidinu, ?/-(cyklohexyloxykarbonyl)-5’-deoxy-5-ethynylcytidinu, 7Ý-[(cyklohexylmethoxy)karbonyl]-5’-deoxy-5-ethynylcytidinu, 5’-deoxy-5-ethynyl-7Ý-(neopentyloxykarbonyl)cytidinu,

5 ’-deoxy-Ý-[(3, 3-dimethylbutoxy)karbonyl]-5-ethynylcytidinu,

2 ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-ethynyl-jV^/-(n-propoxykarbonyl)cytidinu,

2 ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-ethynyl~-?/^/-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu_>

2 ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-vinylcytidinu,

2 ’ ,3 ’-di-O-acetyl-7Ý-(ethoxykarbonyl)-5 ’-deoxy-5-vinylcytidinu,

2 ’ ,3 ’-di-(9-acetyl-5 ’-deoxy-.Ý-(n-propoxykarbonyl)-5-vinylcytidinu,

2 ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-7Ý-(n-pentyloxykarbonyl)-5-vmylcytidinu,

2 ’ ,3 ’-di-O-acetyl-Ý-(benzyloxykarbonyl)-5 ’-deoxy-5-vinylcytidinu,

5’-deoxy-5-ethynyl-M-(n-decyloxykarbonyl)cytidinu, 5’-deoxy-5-ethynyl-7V⁴-[(2,6-dimethylcyklohexyloxy)karbonyl]cytidinu, 5’-deoxy-5-ethynyl-ÍÝ-(benzyloxykarbonyl)cytidinu,

5’-deoxy-5-ethynyl-7Ý-[(l-isopropyl-2-methylpropoxy)karbonyl]cytidinu a 5’-deoxy-5-ethynyl-2Ý-[(3-methoxybenzyloxy)karbonyl]cytidinu.
4. Derivát 5’-deoxycytidinu podle nároku 1, 2 nebo 3 pro použití v lékařské terapii.
5. Derivát 5’-deoxycytidinu podle nároku 1, 2 nebo 3 pro použití při léčení nádoru.
6. Farmaceutická kompozice, vyznačující se t í m , že jako aktivní složku obsahuje derivát 5’-deoxycytidinu definovaný v nároku 1, 2 nebo 3.
7. Farmaceutická kompozice pro léčení nádoru, vyznačující se tím, že jako aktivní složku obsahuje derivát 5’-deoxycytidinu definovaný v nároku 1, 2 nebo 3, spolu s přídavnou aktivní složkou.
8. Farmaceutická kompozice podle nároku 7, vyznačující se tím, že jako přídavnou aktivní složku obsahuje 5-fluoruracil nebo jeho derivát.
9. Farmaceutická kompozice podle nároku 8, vyznačující se tím, že 5-fluoruracil nebo jeho derivát je vybrán ze skupiny sestávající z

5-fluor-l-(2-tetrahydrofuryl)uracilu, l-(n-hexyloxykarbonyl)-5-fluoruracilu,

-31 CZ 295706 B6

5 ’-deoxy-5-fluoruridínu,

5’-deoxy“-5-fluor-ú/-(n-propoxykarbonyl)cytidinu,

A^-(n-butoxykarbonyl)-5’-deoxy-5-fluorcytidinu,

5’-deoxy-5-fluor-Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu,

5’-deoxy-5-fluor-/V⁴-(isopentyloxykarbonyl)cytidinu,

5’-deoxy-5-fluor-Ý-(n-hexyloxykarbonyl)cytidmu, 5’-deoxy-7/-[(2-ethylbutyl)oxykarbonyl]-5-fluorcytidmu, 5 ’-deoxy-5-fluor-A^rí,-[(2-fenyIethoxy)karbonyl] cytidinu, 7Ý-[(cyklohexylmethoxy)karbonyl]-5’-deoxy-5-fluorcytidinu, 5’-deoxy-~5-fluor-A^-(neopentyloxykarbonyl)cytidinu,

5 ’-deoxy-A^-[(3,3-dimethylbutoxy)karbonyl]-5-fluorcytidinu,

5 ’-deoxy-5-fluor-A^r/-(3,5-dimethylbenzoyl)cytidinu,

5 ’-deoxy-5-fluor-7Ý-(3,5-dichlorbenzoyl)cytidinu a

2 ’ ,3 ’-di-O-acetyl-5 ’-deoxy-5-fluor-2Ý-(n-pentyloxykarbonyl)cytidinu.
10. Farmaceutická kompozice podle nároku 8 pro použití pro léčení nádoru.
11. Použití derivátu 5 ’-deoxycytidinu podle nároku 1, 2 nebo 3 pro výrobu léčiva při léčení nádoru.
12. Kit, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceutickou kompozici obsahující derivát 5’-deoxycytidinu podle nároku 1, 2 nebo 3 jako aktivní složku a farmaceutickou kompozici obsahující 5-fluoruracil nebo jeho derivát jako aktivní složku.
13. Způsob výroby derivátu 5’-deoxycytidinu obecného vzorce I kde

R¹ je atom vodíku nebo skupina snadno hydrolyzovatelná za fyziologických podmínek, kterou je acetyl, propionyl, benzoyl, toluoyl, glycyl, alanyl, β-alanyl, valyl nebo lysyl;

R² je atom vodíku nebo -CO-OR⁴ skupina, kde R⁴ je nasycená nebo nenasycená rozvětvená nebo nerozvětvená uhlovodíková skupina sestávající z 1 až 15 atomů uhlíku nebo skupina vzorce -(CH₂)_n-Y, ve které Y je cyklohexyl nebo fenyl a n je celé číslo od 0 do 4;

-32CZ 295706 B6

R³ je atom vodíku, brom, jod, kyano, C^alkylová skupina, která může být substituována atomem nebo atomy halogenu, vinylová nebo ethynylová skupina, přičemž vinylová nebo ethynylová skupina může být substituována atomem nebo atomy halogenu, C₁₄al kýlem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem, který může obsahovat 1 nebo více dusíkových heteroatomů;

za předpokladu, že R² a R³ neznamenají současně atomy vodíku, vyznačující se tím, že (A) pro výrobu sloučeniny obecného vzorce I, kde R² představuje skupinu vzorce -CO-OR⁴a R¹, R³ a R⁴ jsou definovány výše, se nechá reagovat sloučenina vzorce II nh₂ (Π),

P'0 ÓP¹ kde P¹ je hydroxy chránící skupina a R³ je definován výše, se sloučeninou obecného vzorce III

R⁴OCOX (ΠΙ), kde R⁴ je definován výše a

X je chlor nebo brom, v přítomnosti akceptoru kyseliny, načež popřípadě následuje odstranění chránící skupiny nebo skupin, (B) pro výrobu sloučeniny vzorce I, kde R¹ a R² jsou definovány výše a R³ je ethynylová nebo vinylová skupina, z nichž každá může být substituována atomem nebo atomy halogenu, C]_₄alkylem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem, který může mít 1 nebo více dusíkových heteroatomů, se nechá reagovat sloučenina vzorce IV (IV), kde P¹ a R² jsou definovány výše, s acetylenovým nebo vinylovým derivátem v přítomnosti palla diového katalyzátoru, načež popřípadě následuje odstranění chránící skupiny nebo skupin, (C) pro výrobu sloučeniny vzorce I, kde R¹ a R² mají výše uvedený význam a R³ je kyanová skupina, se nechá reagovat sloučenina vzorce IV

-33CZ 295706 B6 (IV), kdo P^J a R² mají výše uvedený význam, s kyanidem alkalického kovu, načež popřípadě následuje odstranění chránící skupiny nebo skupin, (D) pro výrobu sloučeniny vzorce I, kde R¹ a R³ mají výše uvedený význam a R² je atom vodíku, se nechá reagovat sloučenina vzorce V (V), kde P¹ a R³ mají výše uvedený význam, s fosforylchloridem v přítomnosti akceptoru kyseliny, načež následuje zpracování s amoniakem, a popřípadě odstranění chránící skupiny nebo skupin, (E) pro výrobu sloučeniny vzorce I, kde R¹, R² a R³ jsou definovány výše, se kopuluje sloučenina vzorce VI .R²HN (vi), kde R² a R³ jsou definovány výše, se sloučeninou vzorce VII (Vil) kde P¹ má význam definovaný výše, v přítomnosti Lewisovy kyseliny jako katalyzátoru, načež popřípadě následuje odstranění chránící skupiny nebo skupin, (F) pro výrobu sloučeniny vzorce I, kde R³ je vinylová skupina, která může být substituována atomem nebo atomy halogenu, C_l_₄alkylem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem, který může obsahovat 1 nebo více dusíkových heteroatomů a R¹ a R² mají význam definovaný výše, se provede katalytická hydrogenace sloučeniny vzorce VIII

-34CZ 295706 B6 (VHI), kde

P¹ je hydroxy chránící skupina,

R³ je ethynylová skupina, která může být substituována atomem nebo atomy halogenu, Ci_₄alkylem, cykloalkylem, aralkylem nebo aromatickým kruhem, který může obsahovat jeden nebo více dusíkových heteroatomů a

R² má význam definovaný výše, s Lindlarovým katalyzátorem, načež popřípadě následuje odstranění chránící skupiny nebo chránících skupin.