CZ291144B6 - Prostředek proti houbovým infekcím - Google Patents

Abstract

P°edm tem °e en je pou it terbinafinu a azolov ho inhibitoru 14.alfa.-methyldemethyl zy pro p° pravu l iva pro l en houbov²ch infekc , vyvol van²ch azol-rezistentn mi kmeny hub.\

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká léčení houbových infekcí u lidí. Týká se prostředků proti houbovým infekcím, které jsou použitelné při léčení houbových infekcí vyvolávaných azol-rezistentními kmeny kvasinek; tyto prostředky obsahující terbinafin spolu sazolovým inhibitorem 14a-methyldemethylázy, jako je azol flukonazol a/nebo itrakonazol.

Dosavadní stav techniky

Ačkoliv jsou houby často přítomny jako benigní symbiotické organismy v zahřívacím traktu zdravých individuí, vyvolávají zejména druhy Candida ve značném rozsahu vážná onemocnění u ohrožených hostitelů. Tyto infekce jsou zřetelně na vzestupu. Orofarylgeální kandidiáza je nejobvyklejší houbovou infekcí u pacientů infikovaných virem humánní imunitní nedostatečnosti (HIV). Zavedením azolových protihoubových prostředků, které jsou biologicky dostupné po perorálním podání, je možný přístup k léčení závažných infekcí druhy Candida. U ketokonazolu, prvního z těchto prostředků, který byl zpřístupněn, bylo záhy nalezeno, že je účinný při zklidňování chronické mukokutánní kandidiázy. Zanedlouho po zavedení tohoto prostředku však byla oznámena klinická selhání ve spojitosti se zvýšenými minimálními inhibičními koncentracemi (MIC) ketokonazolu, které se vyvinuly v průběhu dalšího léčení. Tento problém nabyl na důležitosti při následujícím zavedení flukonazolu. Flukonazol, triazol rozpustný ve vodě, s vyšší než 90% biologickou dostupností po perorální aplikaci, je ve značném rozsahu používán při léčení velké oblasti infekcí druhu Candida. Především je široce aplikován jako terapeutikum při orofaryngeální kandidáze u pacientů s pokročilou infekcí HIV a AIDS. Ačkoliv orofaryngeální kandidáza zpravidla reaguje dobře na flukonazol, je nesnadné infekci úplně odstranit a často se objevuje zhoršení zdravotního stavu v průběhu několika měsíců po ukončení léčení. Z tohoto důvodu mnoho pacientů s AIDS užívá flukonazol buď kontinuálně, nebo přerušovaně po dlouhá časová období.

Ve větším rozsahu než u ostatních azolů se vyvinula rezistence proti flukonazolu a stala se signifikantním klinickým problémem, jako bylo potvrzeno izolací četných kmenů Candida u pacientů, především sAIDS, vykazujících rezistenci (viz například D. Law se sp., J. Antimicrob. Chemother. 34, 1994, 659-668).

Nyní bylo s překvapením zjištěno, že kombinace sklovanového inhibitoru epoxidázy terbinifínu (Lamisil^R) a azolového inhibitoru 14a-methyldemethylázy, jako je flukonazol a/nebo itrakonazol, je účinná proti azol-rezistentním kmenům hub. Při použití této kombinace sloučenin se získá způsob léčení humánních houbových infekcí, které jsou vyvolávány azol-rezistentními kmeny hub.

Vhodnými azolovými inhibitory 14a-methyldemethylázy jsou především imidazolové a triazolové antifungálně účinné deriváty.

Výhodnými antifungálně účinnými deriváty imidazolu jsou klotrimazol (Arzneim.-Forsch. 22, 1972, 1280); mikonazol (Arzneim.-Forsch. 21, 1971, 256); ekonazol (Arzneim.-Foirsch. 25, 1975, 224); izokonazol (Arzneim.-Forsch. 29, 1979, 1344); triokonazol (Antimicrobial Agents Chemotherapy 15, 1979, 597-602); sulkonazol (Eumycetes and Mycosis 23, 1982, 314-317); oxikonazol (Arzneim.-Forsch. 32, 1982, 17-24); klokonazol (J. Med. Chem. 26, 1983, 768-770); bifonazol (Arzneim.-Forsch. 33, 1983, 517-524); butokonazol (J. Med. Chem. 21, 1978, 840); fentikonazol (Arzneim.-Forsch. 31, 1981, 2127); zikonazol (J. Med. Chem. 26, 1983, 442-445) a ketokonazol (J. Med. Chem. 22,1979, 1003-1005).

-1 CZ 291144 B6

Výhodnými antifungálně účinnými deriváty triazolu jsou terkonazol (J. Med. Chem. 26. 1983, 611-613); itrakonazol (Antimicrobial Agents and Chemotherapy 26, 1984, 5-9); vibunazol (Arzneim.-Forsch. 33, 1983, 546); Flukonazol (Antimicrobial Agents and Chemotherapy 27, 1985, 815-818) a (R)-(-)-a-(4-chlorfenyl)-a-(l-cyklopropyl-l-methylethyl)-lH-l,2,4-tri5 azol-l-ethanol ve volné formě nebo ve formě soli nebo komplexu s kovem (britský pat. spis č. 2 161 483), (v dalším, ve volné formě, označovaný jako „sloučenina A“).

Obzvláště výhodnými azoly jsou itrakonazol a flukonazol.

Ne všechny kombinace prostředků proti houbovým infekcím vykazují synergické nebo dokonce aditivní účinky, a stejně tak byly popsány v literatuře i antagonistické účinky. Tak například v publikaci E. Martin se sp„ Antimicr. Agents and Chemother. 38, 1994, 1331-1338, bylo sděleno, že flukonazol antagonizuje kandidacidni aktivitu amfotericinu B; dále v publikaci Abstr. Ann. Meeting Am. Soc. Microbiol 87, 1987, 392, bylo sděleno, že použití terbinafinu a ketokonazolu u Candida albicans nezvyšuje protihoubový účinek; v publikaci Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis., 7, 1988, 732-735 bylo potvrzeno, že terbinafin in vitro pravděpodobně působí antagonisticky proti azolům; a v publikaci Drugs Today 24, 1988, 705-715, je opět uvedeno, že při kombinační terapii ne všechny kombinace prostředků proti houbovým infekcím vykazují synergické nebo dokonce aditivní účinky. Z toho vysvítá, že kombinační terapie 20 s antimykotiky je značně nepředvídatelná.

Zatímco by se tedy mohlo na základě teoretických důvodů předpokládat, že kombinace farmakologicky aktivních látek, které inhibují jednu biosyntetickou cestu ve dvou oddělených stupních, jsou normálně aktivnější než ty, které působí pouze v jednom stupni a že kombinace 25 například terbinafinu s azoly, jako je flukonazol a/nebo itrakonazol, by měly mít alespoň aditivní účinek; je velmi překvapující, že z neznámých důvodů jsou takové kombinace přesto účinné, i když se již vyvinula rezistence proti azolům a že zejména synergické účinky zůstávají zachovány i za situací, kdy se kmeny hub staly rezistentní proti azolům.

Podstata vynálezu

Podle vynálezu obsahuje prostředek pro léčení humánních houbových infekcí, vyvolávaných azol-rezistentními kmeny hub, azolový inhibitor, 14a-methyldemethylázy, jako je flukonazo 35 a/nebo itrakonazol a inhibitor epoxidázy na bázi arylmethylaminoderivátu skvalenu terbinafin vzorce I

/1/, v podobě volné báze nebo adiční sole s kyselinou, například v podobě adiční sole s chlorovodíkovou kyselinou.

Nejvýhodnějším azolem je flukonazol. Terbinafin je s výhodou ve farmaceuticky přijatelné formě, přednostně ve formě hydrochloridu. Výhodnými houbami jsou kvasinky, především pokud jsou s výhodou rodu Candida, obzvláště to je Candida albicans. Mykóza, která je vyvolána rezistencí proti azolům, může být buď povrchová, nebo systémová, především je však 45 orofaryngeiální. Poškozuje například kůži nebo sliznice.

-2CZ 291144 B6

Rezistance proto azolům může být zkříženou rezistancí a zahrnuje více azolů.

Prostředek proti houbovým infekcím podle tohoto vynálezu se připravuje smícháním arylmethylaminu vzorce I s azolovým protihoubovým derivátem, inhibitorem 14a-methyldemethylázy, jako je flukonazol a/nebo itrakonazol.

Vynález se tedy týká prostředku proti houbovým infekcím k použití při léčení houbových infekcí vyvolávaných azol-rezistentními kmeny hub, k předcházení nebo omezení zhoubné mykózy způsobené rezistancí proti azolům, jenž obsahuje terbinafin definovaný výše a azolový inhibitor 14a-methyldemethylázy, jako je flukonazol a/nebo itrakonazol.

Vynález se dále týká použití prostředku proti houbovým infekcím, který obsahuje terbinafin definovaný výše a azolový inhibitor 14a-methyldemethylázy, jako je flukonazo a/nebo itrakonazol, při přípravě léčiva pro upotřebení při léčbě houbových infekcí, vyvolávaných azol-rezistentními kmeny hub, k předcházení nebo omezení zhoubné mykózy, způsobené rezistencí proti azolům, u lidského subjektu ohroženého takovou rezistencí proti azolům.

Vynález se dále týká způsobu přípravy prostředku proti houbovým infekcím, jak je definován výše, kde se smíchává terbinafin, jak je definován výše, s azolovým protihoubovým prostředkem, inhibitorem 14a-methyldemethylázy, jako je flukonazol a/nebo itrakonazol.

Vynález se dále týká způsobu léčení azol-rezistentní houbové infekce, způsobené azol-rezistentními kmeny hub, k předcházení nebo omezení zhoubné mykózy, způsobené rezistencí proti azolům, kde se podává terapeuticky účinné množství prostředku proti houbovým infekcím, jak je definován výše, pacientovi v případě potřeby takového léčení.

V prostředku proti houbovým infekcím podle tohoto vy nálezu se může hmotnostní poměr protihoubově účinného azolu k protihoubově účinnému arylmethylaminu měnit v širokém rozmezí, ale s výhodou je v rozmezí asi od 100: 1 až do 1 : 500, výhodněji od 25 : 1 až do 1 : 125. Smícháním protihoubově účinného azolu s protihoubově účinným arylmethylaminem terbinafinem v hmotnostním poměru ve výše uvedeném rozmezí, lze získat vynikající účinek při léčení mykóz, vyvolávaných azol-rezistentními kmeny hub, především kmeny kvasinek, například kmeny Candida, jako je Candida albicans, Candida (=Torulopsis) glabrata, Candida, krusei a Candida tropicalis; dále kmeny Cryptococcus, jako je Cryptococcus neoformans, nebo kmeny Trychophyton, například Trichophyton mentagrophytes; a obzvláště kmeny Candida, především Candida albicans.

Prostředek podle tohoto vynálezu může být upraven pro lokální aplikaci a může být inkorporován v obvyklém farmaceutickém nosiči v širokém rozmezí koncentrací (obvykle v množství asi od 0,1 % až asi do 10 % hmotn., vztaženo na celý prostředek), aby se připravila žádaná formulace. Prostředek podle tohoto vynálezu může být užíván při perorálním podávání ve formě tablet, tobolek nebo tekutiny, a může být rovněž užíván i při jiném než perorálním podávání, například formou subkutánní, intramuskulámí nebo intravenózní injekce. Obvykle je to tedy stálá kombinace. Ovšem podávání účinných látek může být také realizováno v podobě volné kombinace, tj. odděleně, například po sobě, v libovolném pořadí.

Příznivá aktivita může být prokázána in vitro s použitím různých azol-rezistentních kmenů. Test se provádí s médiem RPMi 1640 na mikrotitračních deskách s 96 jamkami s plochým dnem a s použitím šachovnicového systému ředění účinné látky. Terbinafín (ve formě hydrochloridu jako soli) a azol se používají v koncentracích od 100 pg/ml do 0,006 pg/ml. Minimální inhibiční koncentrace (MIC) se zjišťují po 48 hodinách inkubace při 37 °C. Minimální fungicidní koncentrace (MFC) se vyhodnocují 24 h po přenesení testovaných buněk do média bez účinné látky. Konečnými body používanými pro stanovení MIC je buď 100% inhibice (tabulky 1 a 4),

-3CZ 291144 B6 nebo (jak je obvyklé) 80% inhibice (tabulky 2 a 3); (Terb = terbinafin; Flu = flukonazol; Itra = itrakonazol; C. = Candida).

Tabulka 1

Testování kombinace terbinafin/flukonazo in vitro proti flukonazol-rezistentním kmenům Candida albicans, C. glabrata, C. krusei a C. tropicalis

Kmen	MIC při 100% inhibici pg/ml)
	Samotný	Kombinace
	Terb	Flu	Terb	Flu
C. albicans	>100	>100	12,5	6,25
C. albicans	>100	>100	12,5	12,5
C. albicans	>100	>100	12,5	6,25
C. albicans	>100	>100	3,13	12,5
C. tropicalis	>100	>100	>100	>100
C. glabrata	>100	>100	3,13	25,0
C. albicans	>100	>100	3,13	50,0
C. krusei	>100	50,0	3,13	50,0

Na rozdíl od expozice houby samotnému flukonazolu nebo terbinafinu byl růst houby 100% inhibován u všech kmenů kromě jednoho, když byla použita kombinace flukonazolu a terbinafinu. U čtyř kmenů měla kombinace obou účinných látek v koncentracích od 100 pg/ml fungicidní účinek, výsledek, který nemohl být dosažen s látkami samotnými.

Tabulka 2

Testování kombinace terbinafin/flukonazol in vitro proti flukonazol-rezistentním izolátům 20 kmene Candida

Kmen	MIC při 80% inhibici pg/ml)
	Samotný	Kombinace
	Flu	Terb	Flu	Terb
C. albicans	>16	>1	0,25	0,1
C. albicans	>16	>1	16	0,5
C. tropicalis	>16	>1	>0,125	0,06
C. grabrata	>16	>1	16	0,125

Tabulka 3

Testování kombinace terbinafln/itrakonazol in vitro proti itrakonazol-rezistentním izolátům kmene Candida

Kmen	MIC při 80% inhibici pg/ml)
	Samotný	Kombinace
	Itra	Terb	Itra	Terb
C. albicans	>4	>1	<0,03	0,03
C. tropicalis	>4	>1	<0,03	0,03

-4CZ 291144 B6

Tabulka 4

Testování kombinace terbinafm/sloučenina A in vitro proti flukonazol-rezistentním izolátům kmene Candida

Kmen	MIC při 100% inhibici pg/ml)
	Samotný	Kombinace
	Sloučenina A	Terb	Sloučenina A	Terb
C. albicans	>100	>100	0,4	3,13
C. albicans	100	>100	0,4	3,13
C. albicans	100	>100	1,56	3,13
C. albicans	100	>100	0,8	3,13

Tabulka 5

Souhrn azol-rezistentních kmenů hub, u kteiých bylo nalezeno, že kombinace terbinafínu s azolem je účinná a je uveden azol, u kterého se vyskytla rezistence

Druhy houby	Azol	Poměr kmenů vykazujících aktivitu
C. albicans	Fluconazol	5 z 10
C. albicans	Itraconazol	9 z 10
C. tropicalis	Fluconazol	2z2
C. krusei	Fluconazol	1 z4
C. paratropicalis	Fluconazol	1 zl
C. glabrata	Fluconazol	1 z2
Cryptococcus neoformans	Fluconazol	3zl0
C. albicans	Sloučenina A	4 ze 4

Průmyslová využitelnost

Prostředek proti houbovým infekcím, obsahující dvě antimikoticky účinné složky, jejichž smícháním a zpracováním podle běžné farmaceutické praxe se mohou připravovat žádané lékové formy, prokázal v testech s vybranými kmeny hub, zejména rodu Candida, v některých případech i s azol-rezistentními, význačnou aktivitu, využitelnou zejména při léčení pacientů se sníženou imunitou (HIV, AIDS).

Claims (4)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   5 1. Použití terbinafinu obecného vzorce I ve formě volné báze nebo adiční soli s kyselinou v kombinaci sazolovým inhibitorem 14a-methyldemethylázy, pro přípravu léčiva pro léčení houbových infekcí vyvolaných azol-rezistentními kmeny hub, k předcházení nebo omezení zhoubné mykózy u člověka ío ohroženého takovou rezistencí vůči azolům.
2. 2. Použití podle nároku 1, kde terbinafin je ve formě hydrochloridu.
3. 3. Použití podle nároku 1, kde azolem je flukonazol.
4. 4. Použití podle nároku 1, kde azolem je (Rý-f-HH^-chlorfenylj-a-fl-cyklopropyl-lmethylethyl)-lH-l,2,4-triazo!-l-ethanol ve volné formě nebo ve formě soli nebo komplexu s kovem.