CZ289573B6 - Sacharinové deriváty, farmaceutický prostředek obsahující tyto deriváty a pouľití těchto sacharinových derivátů - Google Patents

Abstract

Sacharinov deriv ty obecn ho vzorce I, ve kter m R.sub.1.n., R.sub.2.n., R.sub.3.n., X a Y maj specifick² v²znam, kter p°edstavuj l tky · inn p°i l en degenerativn ch nemoc . Do rozsahu °e en rovn n le farmaceutick² prost°edek obsahuj c tyto l tky a pou it k v² e uveden²m · el m.\

Description

Vynález se týká sacharinových derivátů, které inhibují enzymatickou aktivitu proteolytických enzymů, farmaceutického prostředku obsahujícího tyto deriváty a použití těchto sacharinových derivátů pro přípravu léčiva pro léčení degenerativních onemocnění.

Dosavadní stav techniky

Použití inhibitorů proteolytických enzymů je vhodné při léčení degenerativních poruch, jako je například rozedma, revmatoidní zánět kloubů a pankreatitida, u nichž je základním aspektem proteolýza. Serinové proteinázy jsou nejrozšířenější používanou skupinou proteolytických enzymů. Některé serinové proteinázy jsou charakterizovány jako podobné chymotrypsinu nebo podobné elastace, na základě specifíty jejich substrátu. Chymotrypsinové a chymotrypsinu podobné enzymy štěpí normálně peptidovou vazbu v proteinu v místě, kde zbytek aminokyseliny na karbonylové straně je tvořen zbytkem tryptofanu, tyrosinu, fenylalaninu, methioninu, leucitinu nebo zbytkem jiné aminokyseliny, který má aromatický nebo dlouhý alkylový boční řetězec. Elastáza a elastáze podobné enzymy štěpí normálně peptidovou vazbu v místě, kde zbytek aminokyseliny na karbonylové straně vazby je tvořen zbytkem alaninu, valinu, šeřinu, leucinu nebo jiné krátké aminokyseliny. Jak chymotrypsinu podobné, tak elastáze podobné enzymy, byly nalezeny v leukocytech, žímých buňkách a pankreatických šťávách u vyšších organismů a jsou vylučovány mnoha typy bakterií, kvasinek a parazitů.

V mezinárodní publikované patentové přihlášce PCT WO 90/13549 (Dunlap a kol.) se popisuje řada 2-substituovaných sacharinových derivátů, které jsou použitelné jako inhibitory proteolytického enzymu.

V patentu Spojených států amerických č. 2 855 401 (Barber a kol.) se uvádí sloučeniny obecného vzorce

ve kterém

Ri a R₂ každý jednotlivě znamená atom vodíku, nižší alkylové skupiny a nižší hydroxyalkylové skupiny, n představuje celé číslo od 5 do 9 a

R₃ je skupina zvolená ze souboru zahrnujícího methansulfonamidoskupiny, benzensulfonamidoskupiny a o-sulfonbenzimidoskupiny.

V tomto dokumentu se uvádí, že tyto sloučeniny jsou vhodné pro ošetřování bilharziosy.

V patentu Spojených států amerických č. 3 220 940 (autor Brown a kol.) se popisuje použití kyselých niklových lázní sloučenin obecného vzorce

-1CZ 289573 B6

A

Ac ΐ ^N-[CH(R)]n-(O)n_r[GH(R)]n2-SO₃H ^Ac'

II o

ve kterém:

A je zvolen ze souboru zahrnujícího benzenový, bifenylový a naftalenový kruh,

R je zvolen ze souboru zahrnujícího atom vodíku, hydroxyskupinu, atom chloru, atom bromu, sulfoskupinu a methylovou skupinu, n představuje celé číslo od 1 do 4 včetně, ni znamená nulu nebo číslo 1, n₂ představuje číslo nulu, 1 nebo 2 a pokud n₂ je nula, potom ni znamená nulu, nebo nikelnatých, sodných, kobaltnatých, draselných, litných, hořečnatých a podobných solí s kyselinou sulfonovou.

V evropské patentové přihlášce č. 253 092 (autor Sunket a kol.) se popisuje 2-sacharinyl-(nižší aIkyl)-l,4-dihydropyridin-3-karboxyláty, které mají inhibiční účinek na agregaci krevních destiček a antitrombotický účinek. V podstatě stejné skutečnosti je možno najít v článku Sunketa a kol. v J. Med. Chem. 31,1886-1890 (1988).

V patentu Spojených států amerických č. 4 195 023 (autor Mulvay a kol.) se uvádí

Ri-2-R₂-CO-l,2-benzizothiazol-3-ony, kde Ri znamená atom halogenu, alkoxyskupinu, alkylaminoskupinu, dialkylaminoskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu, aminoskupinu, nitroskupinu nebo atom vodíku v benzenoidním kruhu a R₂ představuje atom vodíku, alkylovou skupinu, alkenylovou skupinu, alkinylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, halogenfenylovou skupinu nebo heteroarylovou skupinu, nebo substituované heteroarylové Ri-2-A-CO-sachariny, kde R] má stejné významy jako substituenty v uvedeném benzenoidním kruhu v 1,2-benzizothiazol-3-onech a A znamená alkylovou skupinu, alkenylovou skupinu, alkinylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, fluorfenylovou skupinu, heteroarylovou skupinu nebo substituovanou heteroarylovou skupinu. V tomto dokumentu je uvedeno, že tyto sloučeniny mají účinek inhibitoru elastázy a jsou vhodné při léčení rozedmy. Podobné skutečnosti je možno nalézt ve francouzském patentu č. 2 321 288.

V evropské patentové přihlášce č. 483 928 AI (autor Dunlap a kol.) se popisují 4-R⁴-R⁵-2-sacharinylmethyl(arylkarboxyláty) a 4,5,6,7-tetrahydro-2-sacharinylmethyl(arylkarboxyláty), o kterých se zde uvádí, že mají účinek inhibitoru proteázy a jsou vhodné pro léčení degenerativních onemocnění. Podobné skutečnosti jsou uvedeny v patentu Spojených států amerických č. 5 128 339.

V patentu Spojených států amerických č. 4 276 298 (autor Jones a kol.) se uvádí

2-R-l,2-benzizothiazolinon-l,l-dioxidy, ve kterých R znamená fenylovou skupinu substituovanou fluorem,

-2CZ 289573 B6 dinitrotrifluormethylovou skupinou, kyanoskupinou, alkoxykarbonylovou skupinou, alkylkarbonylovou skupinou, karboxyskupinou, karbamoylovou skupinou, alkylacylaminovou skupinou, alkylsulfonylovou skupinou, N,N-dialkylsulfamoylovou skupinou, trifluormethoxyskupinou, trifluormethylthioskupinou, trifluormethylsulfonylovou skupinou nebo trifluormethylsulfmylskupinou nebo pyridylovou skupinou, substituovanou stejně jako v případě R, kdy R znamená fenylovou skupinu, s tím rozdílem, že pyridylová skupina může být také mononitrosubstituována. O těchto sloučeninách se zde uvádí, že vykazují inhibiční účinek na enzym proteázu, především inhibiční účinek na elastázu, přičemž jsou tyto sloučeniny vhodné pro léčení rozedmy, revmatoidní artritidy a jiných zánětlivých onemocnění.

Podstata vynálezu

Vynález se týká sacharinových derivátů obecného vzorce I:

ve kterém:

Ri znamená alkylovou skupinu obsahující 1 až 10 atomů uhlíku,

R₂ znamená jeden až tři substituenty v libovolné z poloh 5-, 6- nebo 7- nebo ve všech těchto polohách, přičemž je vybrán ze skupiny zahrnující

B=N-(CH₂)pC(O)O(CH₂)p, -O- a R-oxy-alkoxyskupinu obsahující v alkoxy-části 1 až 10 atomů uhlíku, p a p' znamenají celá čísla od 1 do 4,

R představuje fenyl-alkylovou skupinu obsahující v alkylové části 1 až 10 atomů uhlíku,

B=N znamená dialkylaminovou skupinu obsahující v alkylové části 1 až 10 atomů uhlíku,

R₃ znamená atom vodíku,

X znamená atom vodíku nebo halogenu, a

-Y- znamená skupiny N=C(Z)-N-(Z)- nebo N=C(R')-N-(R')-, kde

R' skupiny společně znamenají skupinu -(CH2)n,- která je připojena k atomům uhlíku a dusíku, n' je celé číslo od 3 do 5, a

Z” skupiny společně s atomy uhlíku a dusíku, na které jsou připojeny, tvoří pyridoskupinu,

-3CZ 289573 B6 a farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami, pokud tato sloučenina má bazickou funkční skupinu, nebo farmaceuticky přijatelná adiční sůl s bazickou látkou, pokud tato sloučenina má acidickou funkční skupinu.

Ve výhodném provedení v tomto výše uvedeném obecném vzorci n' znamená 4.

Podle dalšího výhodného provedení ve výše uvedeném obecném vzorci I Ri znamená izopropylovou skupinu, R₂ znamená dimethylamino-CH₂C(0)0(CH₂)₂-O- skupinu nebo 6-benzyloxyethoxyskupinu, a X znamená atom vodíku.

Podle vynálezu je dále výhodný sacharinový derivát, který má obecný vzorec:

ve kterém:

R₂ znamená dimethylamino-CH₂C(0)0(CH₂)₂-0— skupinu nebo benzyloxyethoxyskupinu, a Z představuje jednu ze skupin následujících strukturních vzorců:

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží farmaceutický prostředek pro léčení degenerativních onemocnění, který obsahuje některou z výše definovaných sloučenin obecného vzorce I v koncentraci inhibující proteolytický enzym, a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží použití některé z výše definovaných sloučenin podle vynálezu k přípravě léčiva pro léčení pacienta trpícího degenerativní nemocí.

Postup výroby sloučenin obecného vzorce I podle předmětného vynálezu spočívá v kondenzaci odpovídající sloučeniny obecného vzorce II, vyjádřeného strukturou vzorce

(Π),

-4CZ 289573 B6 ve kterém:

Q představuje atom chloru nebo atom bromu, s odpovídající sloučeninou obecného vzorce III:

(III) v přítomnosti báze nebo s odpovídající bazickou solí uvedené sloučeniny obecného vzorce ΠΙ.

Sloučeniny obecného vzorce I inhibují enzymatický účinek proteolytických enzymů a jsou vhodné pro léčení degenerativních onemocnění.

Část sloučenin obecného vzorce I, která obsahuje strukturní vzorec

je také popisována dále jako sloučeniny, které obsahují skupinu vzorce -Z. Sloučeniny obecného vzorce III jsou proto popisovány dále též jako sloučeniny obecného vzorce

H-O-Z.

Sacharin je l,2-benzizothiazol-3(2H)-on-l,l-dioxid a sloučeniny obecného vzorce I, které jsou

2-[Z-O-CH(R₃)H-Ri-(5,6 a/nebo

7J-R2-1,2-benzizothiazol-( 1 H)-3-on-l, 1-dioxidy, jsou proto 2-[Z-O-CH(R₃)]-4-R]-(5,6 a/nebo 7)-R2-sachariny.

U sloučenin obecného vzorce I až III výraz „odpovídající“ znamená, že definované substituenty v jednom vzorci mají stejně vymezené významy jako u jiného vzorce.

V následujícím textu část uhlíkatého řetězce obsahuje od 1 do 10 atomů uhlíku, výhodně od 1 do 4 atomy uhlíku, přičemž tento řetězec může být rozvětvený nebo nerozvětvený: nižší alkylová skupina, perfluor-(nižší alkylová) skupina, perchlor-(nižší alkylová) skupina, (nižší alkoxy)karbonylová skupina, (nižší alkyl)-aminoskupina, di-(nižší alkyl)-aminoskupina, nižší alkoxyskupina, karboxy-(nižší alkyl)-aminoskupina, 4-(nižší alkyl)-l-piperazinylová skupina, fenyl(nižší alkylová) skupina, pyridyl—(nižší alkylová) skupina, (nižší alkyl)-aminokarbonylová skupina, di-(nižší alkyl)-aminokarbonylová skupina, (nižší alkyl)-thioskupina a karboxy-(nižší alkyl)-aminoskupina.

V dále uvedených částech má uhlíkatý řetězec od 2 do 10 atomů uhlíku, výhodně obsahuje od 2 do 4 atomy uhlíku, přičemž tento řetězec je rozvětven nebo nerozvětven. Jde o tyto části: nižší alkenylovou skupinu, nižší alkinylovou skupinu, amino-(nižší alkylovou) skupinu, nižší alkoxylovou část B=N-(nižší alkoxyskupiny), nižší aíkanoylovou skupinu, B=N-{nižší alkylovou) skupinu, B=N-(nižší aíkanoylovou) skupinu a B=N-(nižší alkoxy)karbonylovou skupinu. Halogenem je atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu.

-5CZ 289573 B6

Ve sloučeninách obecného vzorce I je Rj výhodně primární nebo sekundární alkylová skupina se 2 až 4 atomy uhlíku nebo nižší alkoxyskupina a R₂ je výhodně umístěn v poloze 6, přičemž nejvýhodněji jde o skupiny vzorce B=N-(CH₂)_pC(Ó)O(CH₂)p,-O- nebo R-oxy-(nižší alkoxy)skupinu. Dále -Y- znamená výhodně -(CH₂)_m- -C(=O)-, -(CH₂)_m-O-, -CHR-O-, -CRr-O-, -C/(CH₂)„/-O-, -C/CH₂CH₂N(R)CH₂CH₂/-O-, -(CH₂)_ra-N(R')-, -CHR-N(R')~, -CRr-N(R')-, -C(R')=C(R')-O-, -C(R')=C(R')-N(R')-, -C(=O)-C(R)=C(R)-, -C(Z')=C(Z')-, -C(Z')=C(Z')-O-, -C(Z')=C(Z')-N(R')-, -N(Z)-C(Z)=N-, -N=C(Z}-N(Z)-, C(Z')~ C(Z')-S- N=C(R')-N(R')- nebo -C(R)=C(L)-N(L}-, kde skupiny Z' tvoří dohromady s atomy uhlíku, ke kterým jsou vázány, benzoskupinu, skupiny R' tvoří dohromady s atomy uhlíku nebo atomy dusíku, ke kterým jsou vázány, skupinu vzorce -(CH₂)n,-, -(CH₂)_qN(R*)(CH₂)q,- nebo thiazolovou skupinu, skupiny L tvoří dohromady s atomy uhlíku nebo atomy dusíku, ke kterým jsou vázány, pyridoskupinu, n' představuje celé číslo do 3 do 5,

R* znamená atom vodíku, fenylovou skupinu, fenyl-(nižší alkylovou) skupinu nebo nižší alkylovou skupinu, q představuje číslo 1 nebo 2, q' znamená číslo 1 nebo 2,

R znamená atom vodíku, kyanoskupinu, skupinu vzorce CO₂L' nebo SO₂L nebo nitroskupinu,

L' znamená atom vodíku, nižší alkylovou skupinu nebo di—(nižší alkyl)-aminoskupinu,

L znamená hydroxyskupinu, nižší alkyloxyskupinu, di—(nižší alkyl)-aminoskupinu nebo trifluormethyl, m představuje číslo 1,2,3 nebo 4, n znamená číslo 3,4 nebo 5,

R jsou stejné nebo rozdílné a znamenají nižší alkylovou skupinu, fenyl nebo fenyl-(nižší alkylovou) skupinu,

R' znamená atom vodíku nebo skupinu vzorce R,

R znamená atom vodíku nebo skupinu vzorce R nebo skupiny R tvoří dohromady s atomy uhlíku, ke kterým jsou vázány, furanovou skupinu, skupiny Z' tvoří dohromady s atomy uhlíku, ke kterým jsou vázány, benzoskupinu, furanovou skupinu, pyridovou skupinu, pyrimidinylovou skupinu nebo pyridazinoskupinu a skupiny Z' tvoří dohromady s atomy uhlíku nebo atomy dusíku, ke kterým jsou vázány, pyridovou skupinu, pyrimidinovou skupinu nebo pyridazinovou skupinu, přičemž fenylová skupina, benzoskupina, furanová skupina, pyridová skupina, pyrimidinová skupina nebo pyridazinová skupina mohou obsahovat od jednoho do tří substituentů, zvolených ze souboru zahrnujícího nižší alkylové skupiny, B=N-karbonylové skupiny, B=N, nižší alkoxyskupiny, B=N-(nižší alkoxyskupiny) a atomu halogenu, kde B=N má význam vymezený výše.

-6CZ 289573 B6

Zvláště výhodné sloučeniny jsou sloučeniny, kde n' znamená číslo 4, R* představuje atom vodíku, q znamená číslo 1, q' znamená číslo 2, R představuje atom vodíku, kyanoskupinu, skupinu vzorce CO₂L' nebo SO₂L, L' znamená nižší alkylovou skupinu a L znamená di—(nižší alkyl)-aminoskupinu, zvláště pokud Rj znamená nižší alkylovou skupinu, R₂ představuje di—(nižší alkyl)-amino-(CH₂)pC(O)O(CH₂)p,-O- nebo fenyl-(nižší alkoxy)-(nižší alkoxyskupinu), R₃ znamená atom vodíku a X představuje atom vodíku, atom halogenu, nižší alkylovou skupinu, fenyl, fenyl-(nižší alkylovou) skupinu, fenylkarbonyl, B=N, B=N-(nižší alkylovou) skupinu, fenoxyskupinu nebo (nižší alkoxy)-karbonylovou skupinu.

Nejvýhodnější sloučeniny jsou sloučeniny, kde R] znamená izopropyl, R₂ představuje 6-dimethylamino-CH₂C(O)O(CH₂)₂-O- skupinu nebo 6-benzyloxyethoxyskupinu a X znamená atom vodíku, zvláště pokud Z představuje jeden z dále uvedených strukturních vzorců

Při provádění výroby sloučenin obecného vzorce I z odpovídajících sloučenin obecného vzorce II a odpovídajících sloučenin obecného vzorce III v přítomnosti bazické látky může být touto bazickou sloučeninou libovolná báze, která není sama reakčním činidlem za reakčních podmínek a výhodně je touto látkou hydrid alkalického kovu, uhličitan alkalického kovu, alkoxid alkalického kovu, tri—(nižší alkyl)-amin, (nižší alkoxid) thalnatý, l,8-diazabicyklo[5,4,0]undec7-en nebo

7-methyl-l,5,7-triazabicyklo[4,4,0]dec-5-en. Za reakčních podmínek báze může tvořit bazickou sůl sloučeniny obecného vzorce III, která se potom nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce II. Bazická sůl sloučeniny obecného vzorce III může také vznikat odděleně a potom se může kondenzovat se sloučeninou obecného vzorce II, přičemž výhodně se jedná o sůl sloučeniny s alkalickým kovem, zvláště s cesiem nebo thaliem. Kondenzace se provádí v organickém rozpouštědle nebo směsi organických rozpouštědel inertních za reakčních podmínek, jako je například aceton, methylethylketon, acetonitril, tetrahydrofuran, diethylether, dimethylformamid, N-methylpyrrolidon, dichlormethan, xylen, toluen nebo nižší alkanol nebo jejich směsi, za teploty v rozmezí od teploty místnosti do teploty varu rozpouštědla nebo směsi rozpouštědel.

Sloučeniny obecného vzorce II a III jsou známé látky nebo se jedná o látky, které se mohou vyrobit známými způsoby nebo způsoby popsanými dále.

Sloučeniny obecného vzorce II, ve kterém R₃ představuje atom vodíku, se mohou vyrobit diazotací odpovídajícího (nižší alkylj-esteru kyseliny 2-amino-(3,4 nebo 5)-R₂-6-Ri-benzoové, chlorsulfonylací výsledné 2-diazoniové soli (nižší alkyl)-esteru kyseliny (3,4 nebo -Sj-Rr-óRi-benzoové oxidem siřičitým a chloridem měďným a cyklizací výsledného (nižší alkyl)-esteru kyseliny 2-chlorsulfonyl-(3,4 nebo Sj-Rr-ó-Ri-benzoové amoniakem, za vzniku odpovídající sloučeniny obecného vzorce (IV):

(IV)₍ ve kterém

Ri a R₂ mají významy uvedené výše.

Hydroxymethylace této sloučeniny formaldehydem poskytne odpovídající 2-hydroxymethyl-4R_t-(5, 6 nebo 7)-R₂-sacharin a náhrada hydroxylové skupiny v této sloučenině chloridem nebo bromidem, za použití například thionylchloridu, thionylbromidu, chloridu fosforečného nebo bromidu fosforečného, skýtá odpovídající sloučeninu obecného vzorce II.

Sloučeninu obecného vzorce Π, ve kterém R₃ znamená atom vodíku a Q představuje atom chloru, je rovněž možno vyrobit v jednom stupni zodpovídající sloučeniny obecného vzorce IV chlormethylací formaldehydem a chlortrimethylsilanem v přítomnosti Lewisovy kyseliny, jako například chloridu cíničitého.

Sloučenina obecného vzorce Π, ve kterém R₃ znamená nižší alkylovou skupinu a Q představuje atom chloru, se může vyrobit vinylací odpovídající sloučeniny obecného vzorce IV odpovídajícím substituovaným nebo nesubstituovaným vinylesterem nižší alkanové kyseliny v přítomnosti dinatriumpaladiumtetrachloridu a potom zpracováním výsledného 2-(substituovaný nebo nesubstituovaný vinyl)-4-Ri-(5, 6 nebo 7)-R₂-sacharinu s chlorovodíkem. Při použití nesubstituovaného vinylacetátu se například získá odpovídající sloučeninu obecného vzorce II, ve kterém R₃ představuje methylovou skupinu.

Sloučenina obecného vzorce II, ve kterém R₃ znamená atom vodíku nebo fenylovou skupinu, se může vyrobit fenylthio-R₃-methylací odpovídající sloučeniny obecného vzorce IV nebo její bazické soli odpovídajícím fenyl-Rr-chlormethylsulfidem za vzniku odpovídajícího 2-(fenylthio-R₃-methyl)-4-Ri-(5, 6 nebo 7)-R₂-sacharinu a náhradou fenylthioskupiny v této sloučenině atomem chloru nebo atomem bromu, za použití například sulfurylchloridu nebo sulfuiylbromidu.

Sloučenina obecného vzorce IV se může vyrobit lithiací odpovídajícího 2-R,-(3, 4 nebo 5)-R2N,N-di-(nižší alkylj-benzamidu (nižší alkyl)-lithiem, aminosulfonylací výsledného 2-R]-(3, 4 nebo 5)-R₂-6-lithio-N,N-di-(nižší alkyl)-benzamidu oxidem siřičitým a poté hydroxylaminem kyseliny O-sulfonové nebo sulfurylchloridem a poté amoniakem, a cyklizací výsledného 2-R](3, 4 nebo 5)-R₂-6-aminosulfonyl-N,N-di-(nižší alkyl)-benzamidu kyselinou octovou za varu pod zpětným chladičem.

Sloučenina obecného vzorce IV, ve kterém R| znamená primární nebo sekundární alkylovou skupinu obsahující 2 až 4 atomů uhlíku, se může vyrobit lithiací odpovídající sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém Ri znamená methylovou skupinu, působením 2 molámích ekvivalentů (nižší alkyl)—lithia v inertním rozpouštědle, například tetrahydrofuranu, a alkylací výsledného 4-lithiomethyl-(5,6 nebo 7)-R₂-sacharinu příslušným alkylhalogenidem. Obě reakce se provádějí za teploty v rozmezí od -80 do -50 °C. Výše popsaný 2-R]-(3,4 nebo 5)-R₂-N,Ndi—(nižší alkyl)-benzamid, ve kterém Ri znamená primární nebo sekundární alkylovou skupinu se 2 až 4 atomy uhlíku, se může vyrobit podobným postupem za použití lithia a alkylací, při které se vychází zodpovídajícího 2-(methyl, ethyl nebo propyl)-(3, 4 nebo 5)-R₂-N,N-di(nižší alkyl)-benzamidu.

Sloučenina obecného vzorce TV, ve kterém R, znamená primární nebo sekundární alkylovou skupinu obsahující 2 až 4 atomy uhlíku, se může také vyrobit zavedením R] na začátku syntézy. Konjugovanou adicí odpovídajícího Rj-měďnanu na 2-cyklohexenon a methylkarbonylací výsledného enolátu mědi methylkyanmravenčanem způsobem, který popsal Winkler a kol. (Tetrahedron Letters, str. 1051 (1987), Journal of Organic Chemistry 54, 4491 (1989)) se připraví odpovídající 2-methoxykarbonyl-3-R]-cyklohexanon, při jehož enolové etherifikaci benzylthiolem v přítomnosti kyselé hlinky se získá směs odpovídajícího methylesteru kyseliny 6-Ri-2-benzylthio-l-cyklohexenkarboxylové a methylesteru kyseliny 6-R]-2-benzylthio-3

-8CZ 289573 B6 cyklohex-karboxylové. Aromatizací této směsi dichlordikyanbenzochinonem se získá odpovídající methylester kyseliny 2-Ri-6-benzylthiobenzoové, přičemž oxidace, chlorace a debenzylace této sloučeniny chlorem ve vodné kyselině octové poskytne methylester kyseliny

2-Ri-6-chlorsulfonylbenzoové, jehož cyklizace amoniakem vede k odpovídajícímu 4-R]sacharinu obecného vzorce IV.

Výroba určitých sloučenin obecného vzorce IV vyžaduje vytvoření obou jeho kruhů. Například pro výrobu sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém fy znamená nižší alkoxyskupinu a R₂ znamená hydroxyskupinu, se kyselina 3,3-thiobispropionová převede za použití thionylchloridu na bis-acylchlorid, který se převede za použití benzaminu na bis-benzylamid, kteiý cyklizací sulfurylchloridem poskytne 5-chlor-2-benzyl-2H-izothiazol-3-on. Oxidací 1 molámím ekvivalentem peroxykyseliny se získá 5-chlor-2-benzyl-2H-izothiazol-3-on-l-oxid, který zahříváním za tlaku s 2—(nižší alkoxy)-furanem vede k 4—(nižší alkoxy)-7-hydroxy-2-benzyl1,2-benzoizothiazo 1-2H-3-on-l-oxidu a oxidace 1 molámím ekvivalentem peroxykyseliny vede k odpovídajícímu 4—(nižší alkoxy)-7-hydroxy-2-benzyl-l,2-benzoizothiazol-2H-3-on1,1-dioxidu. Debenzylace katalytickou hydrogenací poskytne odpovídající 4-(nižší alkoxy)-7hydroxysacharin obecného vzorce IV.

Podobně alkylace takto vyrobeného 4—(nižší alkoxy)-7-hydroxy-2-benzyl-l,2-benzoizothiazol2H-3-on-l-oxidu (nižší alkyl)-halogenidem nebo příslušně substituovaným (nižší alkyl)halogenidem s následující oxidací a debenzylací poskytne odpovídající 4—(nižší alkoxy)-7-R₂sacharin obecného vzorce IV, ve kterém R₂ je nižší alkoxyskupina, cykloalkoxyskupinu, B=N(nižší alkoxyskupina), hydroxy-(nižší alkoxyskupina), polyhydroxy-(nižší alkoxyskupina) nebo její acetal nebo ketal, (nižší alkoxy)-(nižší alkoxyskupina), poly-(nižší alkoxy)(nižší alkoxyskupina), hydroxy-poly-(nižší alkylenoxyskupina) nebo (nižší alkoxy)-poly(nižší alkylenoxyskupina).

K provedení výměn funkčních skupin u sloučenin podle předmětného vynálezu je možno použít jednoduchých chemických přeměn, které jsou běžné a dobře známé odborníkům pracujícím v daném oboru chemie. Příkladem je katalytická redukce heterocyklického kruhového systému za vzniku odpovídajícího částečně nasyceného heterocyklického kruhového systému, katalytická debenzylace benzyletherů za vzniku odpovídajících alkoholů, vázání alkoholů na kyseliny v přítomnosti kopulačního činidla za vzniku odpovídajících esterů nebo desilylace sílyletherů za vzniku odpovídajících alkoholů.

Farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami nebo bázemi mohou být libovolné farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami nebo adiční soli s bázemi, ale s výhodou mají společný anion, jako je tomu například v případě hydrochloridu nebo mají společný kation, jako je tomu například v případě sodné nebo draselné soli. Pokud sůl obsahující společný anion nebo kation je nepřijatelný, protože nedochází k její krystalizaci, je nedostatečně rozpustná nebo je hygroskopická, může se použít sůl obsahující méně obvyklý společný anion, jako je například methansulfonát, nebo méně obvyklý společný kation, například jako v případě diethylaminové soli. V kterémkoli případě při použití u savců, adiční sůl s kyselinou nebo bází musí být netoxická a nesmí rušit inhibiční účinek na elastázu sloučeniny obecného vzorce I ve formě volné báze nebo volné kyseliny.

Příklady provedení vynálezu

V příkladech popisujících přípravu a v příkladech jako takových, které se uvádějí dále, jsou určeny struktury produktů ze známých struktur výchozích sloučenin a očekávaných průběhů preparativních reakcí. Čištění nebo čistota a potvrzení struktury výchozích látek a produktů se provádí nebo měří stanovením rozmezí teploty tání, optické otáčivosti, elementární analýzy, infračervené spektrální analýzy, ultrafialové spektrální analýzy, hmotnostní spektrální analýzy, jaderné magnetické resonanční spektrální analýzy, plynové chromatografie, sloupcové

-9CZ 289573 B6 chromatografíe, vysoko účinné kapalinové chromatografíe, účinné kapalinové chromatografíe prováděné při střední tlaku a/nebo chromatografíe na tenké vrstvě.

Vynález bude nyní popsán s ohledem na dále uvedené příklady, které v žádném případě nejsou zamýšleny jako omezení rozsahu tohoto vynálezu.

Příklad 1

Způsob výroby výchozích sloučenin

a) Způsob výroby 2-chlormethyl-4-izopropylsacharinu (II, Ri = i-Pr, R₂ = H, R₃ = H, Q = Cl)

100 ml 2,5-molámího n-butyllithia se přidá během 10 minut za míchání pod dusíkovou atmosférou při teplotě 0 až 5 °C k roztoku 2-izopropylbrombenzenu v 500 ml bezvodého etheru. Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a za teploty místnosti míchá po dobu 6 hodin a nato ochladí na teplotu -60 °C. K ochlazené reakční směsi se přidá roztok 34 g diethylkarbamoylchloridu v 50 ml bezvodého etheru během 20 minut, přičemž teplota se udržuje pod -50 °C. Teplota se nechá vystoupit na teplotu místnosti během 1 hodiny a přidá se 100 ml vody. Etherová vrstva se promyje 200 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým a ether se odstraní stripováním. Destilací odparku za teploty 80 až 90 °C a tlaku 133 Pa se dostane 44 g 2-izopropyl-N,N-diethylbenzamidu. Výtěžek odpovídá 80 % teorie.

K roztoku 25,5 g Ν,Ν,Ν',Ν'-tetramethylethylendiaminu v 600 ml bezvodého etheru se přidá 170 ml (1,3 mol) sek.-butyllithia a směs se ochladí na teplotu -70 °C pod dusíkovou atmosférou. Ke směsi se přikape během 20 minut roztok 44 g 2-izopropyl-N,N-diethylbenzamidu ve 300 ml bezvodého etheru. Během přidávání se udržuje teplota -60 °C nebo nižší. Po přidání se směs míchá za teploty -70 °C po dobu 30 minut, nechá se ohřát na teplotu -50 °C a na této teplotě se udržuje po dobu 10 minut a poté se opět ochladí na teplotu -70 °C. Zaváděcí trubicí se zavede roztok 50 g oxidu siřičitého v 50 ml bezvodého etheru, předem ochlazený na teplotu -60 °C, za přetlaku dusíku během 10 minut. Teplota reakční směsi se během přidávání udržuje pod -50 °C. Takřka ihned se oddělí bílá práškovitá sraženina aryllithiumsulfínátu. Teplota se nechá vystoupit na teplotu místnosti během jedné hodiny. V průběhu 15 minut se za nepřetržitého míchání přikape 54 g sulfurylchloridu. Po dalším třicetiminutovém míchání za teploty 0 až 5 °C se bílá sraženina odfiltruje a promyje 2 litry bezvodého etheru. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a dostane se slabě nažloutlý olej, který se rozpustí ve 150 ml tetrahydrofuranu. Roztok se ochladí na teplotu 0 °C a po částech se během 15 minut přidá 60 ml koncentrovaného (28%) vodného amoniaku. Po dobu přidávání se udržuje teplota 10 °C nebo nižší. Po patnáctiminutovém míchání za teploty místnosti se tetrahydrofuran a přebytek amoniaku oddestilují za sníženého tlaku a odparek se okyselí 2-normální kyselinou chlorovodíkovou na hodnotu pH 1. Výsledná bílá tuhá látka se zachytí filtrací, promyje 200 ml vody a 200 ml hexanu a vysuší. Tak se dostane 54 g 2-aminosulfonyl-6-izopropyl-4-methoxy-N,N-diethylbenzamidu. Výtěžek odpovídá 90 % teorie.

Roztok 60 g 2-aminosulfonyl-6-izopropyl-4—methoxy-N,N-diethylbenzamidu ve 400 ml kyseliny octové se vaří pod zpětným chladičem po dobu 24 hodin a potom se ochladí na teplotu místnosti. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, olejový odparek se rozpustí v 500 ml vody a hodnota pH se upraví na 1 pomocí 2-normální kyseliny chlorovodíkové. Surová látka se odfiltruje, promyje 300 ml vody, suší za teploty 60 °C po dobu 18 hodin a rekrystaluje ze směsi etheru a hexanu. Získá se 40 g 4-izopropylsacharinu (sloučeniny obecného vzorce IV, kde R] znamená izopropyl a R₂ znamená atom vodíku), o teplotě tání 177 °C. Výtěžek odpovídá 90 % teorie.

-10CZ 289573 B6

Směs 37,9 g 4-izopropylsacharinu, 33,3 g fenylchlormethylsulfidu, 5,4 g tetrabutylamoniumbromidu a 200 ml toluenu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 24 hodin a poté se těkavé látky odstraní stripováním. Sloupcovou chromatografií odparku na 485 g silikagelu a eluci nejprve hexanem, potom směsí hexanu a dichlormethanu v poměru 1:1a nato dichlormethanem se dostane v hexan-dichlormethanovém eluátu 53,5 g 2-fenylthiomethyl-4-izopropylsacharinu, jako světle žlutého oleje. Výtěžek odpovídá 92 % teorie.

53,5 g 2-fenylthiomethyl-4-izopropylsacharinu, 67,2 g (40 ml) sulfurylchloridu a 250 ml dichlormethanu se smíchá za míchání při teplotě místnosti. Ve směsi proběhne slabě exotermní reakce a poté se směs nechá se stát po dobu 17 hodin za teploty místnosti a nato se těkavé látky odstraní stripováním. Odparek se krystaluje z hexanu a poskytne tři podíly (33,65 g látky o teplotě tání 101 až 102 °C, 3,45 g látky o teplotě tání 100 až 101 °C a 0,45 g látky o teplotě tání 99 až 100 °C, celkem 38,55 g, co odpovídá výtěžku 91 % teorie). Všechny tři podíly se spojí a rekrystalují ze směsi 30 ml izopropylalkoholu a 270 ml hexanu. Dostane se 33,5 g 2-chlormethyl-4—izopropylsacharinu, ve dvou podílech (33,5 g látky o teplotě tání 101 až 102,5 °C a 2,65 g látky o teplotě tání 100 až 101 °C).

b) Způsob výroby 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu (II, Ri = i-Pr, R₂ = 6-OMe, R₃ = H, Q = Cl)

K roztoku 300 ml Ν,Ν,Ν',Ν'-tetramethyl-ethylendiaminu ve 4 litrech bezvodého etheru se přidají 4 litry 1,3-molámího roztoku sek.-butyllithia a směs se ochladí na teplotu -70 °C pod dusíkovou atmosférou. Ke směsi se přikape během 30 minut roztok 454,2 g 2-izopropyl-4methoxy-N,N-diethylbenzamidu ve 300 ml bezvodého etheru. Během přidávání se udržuje teplota -60 °C nebo nižší. Po přidání se směs míchá za teploty -70 °C po dobu jedné hodiny, nechá se ohřát na teplotu -50 °C a na této teplotě se udržuje po dobu 30 minut a poté se opět ochladí na teplotu -70 °C. Zaváděcí trubicí se zavede roztok 200 g oxidu siřičitého ve 200 ml suchého etheru, předem ochlazený na teplotu -40 °C, za přetlaku dusíku během 20 minut. Teplota reakční směsi se během přidávání udržuje pod -40 °C. Takřka ihned se oddělí bílá práškovitá sraženina aryllithiumsulfmátu. Poté co je přidávání ukončeno, odstraní se chladicí lázeň a směs se míchá za teploty místnosti po dobu 2 hodin a potom se ochladí na teplotu -5 °C. Během 15 minut se za nepřetržitého míchání přikape 190 ml sulfurylchloridu, přičemž se teplota udržuje pod 10 °C. Po dalším třicetiminutovém míchání za teploty 0 až 5 °C se bílá nerozpustná sraženina odfiltruje a promyje 2 litry bezvodého etheru. Rozpouštědlo se odpaří za atmosférického tlaku a dostane se tmavý olej, který se rozpustí v 1,4 litru tetrahydrofuranu. Roztok se ochladí na teplotu -10 °C a po částech se během 15 minut přidá 540 ml koncentrovaného (28%) vodného amoniaku. Po dobu přidávání se udržuje teplota 15 °C nebo nižší. Po patnáctiminutovém míchání za teploty místnosti se tetrahydrofuran a přebytek amoniaku oddestilují za sníženého tlaku. Dostane se tmavý olej, který se zředí 6,0 litry vody a okyselí

3-normální kyselinou chlorovodíkovou na hodnotu pH 1. Výsledná světle žlutá tuhá látka se zachytí filtrací, promyje 800 ml vody, vysuší za teploty 60 °C za sníženého tlaku během 18 hodin a rekrystaluje ze směsi 800 ml ethylacetátu a 3 litrů hexanu. Tak se dostane 429,6 g 2-aminosulfonyl-6-izopropyl-4-methoxy-N,N-diethylbenzamidu, který má teplotu tání 122 až 125 °C. Výtěžek odpovídá 72 % teorie.

Roztok 429,6 g 2-aminosulfonyl-6-izopropyl-4-methoxy-N,N-diethylbenzamidu v 1,5 litru kyseliny octové se vaří pod zpětným chladičem po dobu 20 hodin a poté se ochladí na teplotu místnosti. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, olejový odparek se rozpustí v 6 litrech vody a vzniklá směs se 6-normální kyselinou chlorovodíkovou upraví na hodnotu pH 1. Surová látka se zachytí filtrací, promyje 2 litry vody, suší za teploty 60 °C po dobu 18 hodin a rekrystaluje ze směsi ethylacetátu a hexanu. Dostane se 303 g 4-izopropyl-6-methoxysacharinu (sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém Ri znamená izopropyl a R₂ představuje methoxyskupinu v poloze 6), který má teplotu tání 188 °C. Výtěžek odpovídá 91 % teorie.

-11CZ 289573 Β6

Κ suspenzi 24 g paraformaldehydu a 86,4 g chlortrimethylsilanu ve 200 ml 1,2-dichlorethanu se přidá 0,8 ml suchého chloridu cíničitého a výsledný roztok se míchá na parní lázni po dobu jedné hodiny. K čirému roztoku se přidá 51,4 g 4-izopropyl-6-methoxysacharinu a směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 18 hodin, ochladí na teplotu místnosti a poté vylije na vodu. Organická vrstva se oddělí, promyje 50 ml 2-normálního vodného roztoku hydroxidu sodného, vysuší bezvodým síranem hořečnatým a odpaří za sníženého tlaku. Odparek se čistí krystalizaci ze směsi ethylacetátu a hexanu. Dostane se 57 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu, který má teplotu tání 151 °C. Výtěžek činí 87 % teorie.

c) Způsob výroby 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-/2-(benzyloxy)ethoxy/sacharinu (II, Rj = i-Pr, R₂ = 6-OCH₂CH₂OCH₂Ph, R₃ = H, Q = Cl)

K roztoku 1,0 g (0,0039 mol) 4-izopropyl-6-methoxysacharinu v 15 ml methylendichloridu se přidá za teploty místnosti 1,28 g (5,12 ml) 1-molámí bromidu boritého v methylendichloridu. Když je přidávání ukončeno, reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu přibližně 5 hodin, ochladí, odpaří dosucha za sníženého tlaku a odparek se zpracuje s ledem a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Vodný roztok se jednou extrahuje ethylacetátem a poté okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na hodnotu pH 1. Extrakcí vzniklé směsi směsí ethylacetátu a diethyletheru v poměru 8:2, vysušením organických extraktů a odpařením rozpouštědla za sníženého tlaku se dostane 0,9 g 6-hydroxy~4-izopropylsacharinu (sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R] znamená izopropylovou skupinu a R₂ znamená hydroxyskupinu v poloze 6), jako bílé krystalické tuhé látky, která se použije jako taková v následujícím stupni. Výtěžek odpovídá 96 % teorie.

Také se používá alternativní způsob výroby. K míchané suspenzi 62,74 g (0,47 mol) chloridu hlinitého v 500 ml chloroformu se za teploty 0 °C přidá 43,9 g (0,7 mol) ethanthiolu. Během okamžiku se vytvoří čirý roztok. K tomuto roztoku se během 30 minut přidá roztok 20,0 g (0,078 mol) 4-izopropyl-6-methoxysacharinu v 550 ml chloroformu. Roztok se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá po dobu 3 až 4 hodin za teploty 60 °C. Po ochlazení se směs vylije na led s vodou a okyselí zředěnou kyselinou chlorovodíkovou. Tuhá látka, která se oddělila, se zachytí filtrací, promyje vodou a vysuší. Dostane se 18,4g 6-hydroxy-4-izopropylsacharinu. Výtěžek odpovídá 97 % teorie.

30,0 g (0,12 mol) 6-hydroxy-4-izopropylsacharinu v methanolu se zpracuje s 20,28 g (0,062 mol) uhličitanu česného. Směs se míchá za teplotu místnosti po dobu 3 až 4 hodin, přebytek methanolu se odpaří za sníženého tlaku a odparek se vysuší za vysokého vakua. Odparek se zředí dimethylformamidem a k reakční směsi se přidá 21,72 g (0,14 mol) chlormethylfenylsulfidu. Směs se zahřívá na teplotu 70 až 80 °C po dobu 24 hodin, ochladí, zpracuje s ledem a vodou a extrahuje směsí ethylacetátu a etheru. Organická vrstva se promyje vodou, poté roztokem chloridu sodného a vysuší. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování směsí ethylacetátu a hexanu. Dostane se 30,5 g 4-izopropyl-6-hydroxy-2-fenylthiomethylsacharinu. Výtěžek odpovídá 67 % teorie.

K roztoku 2,0 g (5,5 mol) 4-izopropyl-6-hydroxy-2-fenylthiomethylsacharinu ve 40 ml tetrahydrofuranu se přidá 1,46 g (5,56 mmol) trifenylfosfinu, 0,87 g (5,71 mmol) 2-benzyloxyethanolu a 0,99 g (5,68 mmol) diethylazodikarboxylátu. Směs se míchá za teplotu místnosti po dobu 16 hodin, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování 20% ethylacetátem v hexanu. Dostane se 2,1 g

4-izopropyl-6-/2-(benzyloxy)ethoxy/-2-fenylthiomethylsacharinu, který má teplotu tání 98 až 99 °C. Výtěžek odpovídá 77 % teorie.

0,37 ml (4,65 mmol) sulfurylchloridu se přidá k roztoku 2,1 g (4,22 mmol) právě vyrobené sloučeniny v dichlormethanu za teploty místnosti a směs se míchá po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku tuhá látka takto vzniklá se odfiltruje. Dostane se

- 12CZ 289573 B6

1,67 g 2-chlormethyl^4-izopropyl-6-/2-(benzyloxy)ethoxy/sacharinu, který má teplotu tání 101 až 102 °C. Výtěžek odpovídá 93 % teorie.

d) Způsob výroby 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-72-(triizopropylsilyloxy)ethoxy/sacharinu (II, R] = i-Pr, R₂ = 6-OCH₂CH₂OSi(i-Pr)₃, R₃ = H, Q = Cl)

K roztoku 2,0 g (5,509 mmol) 4-izopropyl-6-hydroxy-2-fenylthiomethylsacharinu v 35 ml tetrahydrofuranu, obsahujícím 1,59 g (6,06 mmol) trifenylfosfinu a 1,13 g (6,0 mmol) 2-(triizopropylsilyloxy))ethanolu se za teploty místnosti přidá 1,04 ml (6,6 mmol) diethylazodikarboxylátu. Směs se míchá přes noc (po dobu 16 hodin), rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování 10% ethylacetátem v hexanu. Ve formě oleje se dostane 2,66 g 4-izopropyl-6-/2-(triizopropylsilyloxy)ethoxy/-2-fenylthiomethylsacharinu. Výtěžek odpovídá 86 % teorie.

2,6 g (4,62 mmol) takto vyrobené sloučeniny ve 30 ml dichlormethanu se zpracuje s 0,65 g (4,51 mmol) sulfurylchloridu a směs se míchá po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se trituruje s hexanem. Látka se odfiltruje, aby se dostalo 1,73 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-/2-(triizopropylsilyloxy)ethoxy/sacharinu, který má teplotu tání 85 až 86 °C. Výtěžek odpovídá 76 % teorie.

e) Způsob výroby 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-(benzyloxykarbonylmethoxy)sacharinu (II, R! = i-Pr, R₂ = 6-OCH₂(CO)OCH₂Ph, R₃ = H, Q = Cl)

Směs 3,5 g (9,63 mmol) 4-izopropyl-6-hydroxy-2-fenylthiomethylsacharinu, 25 ml acetonu a 2,66 g (19,26 mmol) uhličitanu draselného se míchá pod dusíkovou atmosférou po dobu 2 minut a poté přidá 2,4 ml (14,45 mmol) benzylbromacetátu. Směs se míchá po dobu 6 hodin, filtruje a filtrát se odpaří za sníženého tlaku. Odparek se čistí účinnou chromatografií prováděnou za středního tlaku, při eluování 20% ethylacetátem v hexanu. Dostane se 4,67 g 4-izopropyl-6(benzyloxykarbonylmethoxy)-2-fenylthiomethylsacharinu. Výtěžek odpovídá 100 % teorie.

K roztoku 0,5 g (1,043 mmol) této sloučeniny v 5 ml dichlormethanu se za teploty místnosti přidá sulfurylchlorid. Směs se míchá během 4 hodin, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování 100% hexanem až 20% ethylacetátem v hexanu. Dostane se 0,37 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-(benzyloxykarbonylmethoxy)sacharinu. Výtěžek odpovídá 81 % teorie.

f) Způsob výroby 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-hydroxysacharinu (II, Ri = i-Pr, R₂ = 6-OH, R₃ = H, Q = Cl)

1,78 g 4-izopropyl-6-hydroxy-2-fenylthiomethylsacharinu v methylenchloridu se zpracuje s0,43 ml (0,73 g) sulfurylchloridu a dostane se 1,2 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-hydroxysacharinu, který má teplotu tání 149 až 150 °C. Výtěžek odpovídá 84 % teorie.

g) Způsob výroby 2-chlormethyl-4-sek.-butyl-6-methoxysacharinu (Π, R! = sek.-Bu, R₂ = 6-OMe, R₃ = H, Q = Cl)

Ke směsi 89,1 ml diethylaminu, 120,2 ml triethylaminu a 500 ml dichlormethanu, ochlazené na ledové lázni, se přikape 133,8 g p-anisoylchloridu během 40 minut. Reakční směs se míchá za teploty místnosti po dobu 40 minut, poté se směs filtruje, promyje etherem a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. K odparku se přidá ether a potom voda, nato se organická vrstva oddělí a promyje 5% roztokem hydroxidu sodného, nato kyselinou chlorovodíkovou, poté roztokem chloridu sodného a nakonec vysuší síranem sodným. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí destilací z límcové baňky za teploty 140 až 180 °C při vysokém vakuu. Dostane se 163,8 g 4-methoxy-N,N-diethylbenzamidu, který má teplotu tání 40 až 42 °C.

-13CZ 289573 B6

K roztoku 50,3 ml tetramethylethylendiaminu v 800 ml tetrahydrofuranu se při teplotě -78 °C přidá 308 ml 1,08-molámího roztoku sek.-butyllithia a poté 62,2 g 4-methoxy-N,N-diethylbenzamidu. Směs se míchá při za teploty -78 °C po dobu 70 minut a poté se přidá 26,63 g (333 mmol) ethyljodidu během 35 minut. Reakční směs se ohřeje na teplotu místnosti a míchá po dobu 90 minut. Reakční směs se nato rychle ochladí 100 ml nasyceného roztoku chloridu amonného. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Odparek se čistí destilací z límcové baňky za teploty 190 až 210 °C při vysokém vakuu. Dostane se 58,1 g 2-ethyl-4-methoxy-N,N-diethylbenzamidu.

Ke směsi 40,7 ml (290 mmol) diizopropylaminu v 800 ml tetrahydrofuranu za teploty -78 °C se přidá 100 ml (255 mmol) 2,15-molámího roztoku sek.-butyllithia. Směs se míchá 15 minut a poté přidá 235,3 g 2-ethyl-4-methoxy-N,N-diethylbenzamidu ve 300 ml tetrahydrofuranu za teploty -78 °C. Směs se míchá při této teplotě po dobu 2,5 hodin a při teplotě 0 °C během 1 hodiny a potom se přidá 23,2 ml ethyljodidu v 150 ml tetrahydrofuranu během 10 minut za teploty -78 °C. Reakční směs se míchá po dobu přibližně 1 hodiny, rychle ochladí 100 ml nasyceného roztoku chloridu amonného a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. K odparku se přidá ether a etherová vrstva se promyje 50 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, 1-normální kyselinou chlorovodíkovou, poté roztokem chloridu sodného a nato se etherová vrstva vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Odparek se čistí destilací za vysokého vakua (266 Pa). Dostane se 46,6 g 2-sek.-butyl-4-methoxy-N,Ndiethylbenzamidu. Výtěžek odpovídá 76 % teorie.

K roztoku 31 ml tetramethylethylendiaminu v 500 ml tetrahydrofuranu za teploty -78 °C se přidá 170 ml 1,1-molámího roztoku sek.-butyllithia a poté 45 g 2-sek.-butyl-4-methoxy-N,Ndiethylbenzamidu ve 150 ml tetrahydrofiiranu. Směs se míchá za teploty -78 °C po dobu 15 minut, poté za teploty 0 °C po dobu 30 minut a nato se ve směsi kondenzuje za teploty -78 °C 50 ml oxidu siřičitého. Směs se ohřeje na teplotu -10 °C a přidá se 17 ml sulíurylchloridu a potom se vzniklá směs pomalu ohřeje na teplotu místnosti a míchá přes noc. Reakční směs se přidá k roztoku 94 ml hydroxidu amonného ve 200 ml tetrahydrofuranu, směs se filtruje přes vrstvu oxidu křemičitého, síranu sodného a písku. Dostane se 51,8 g 2-aminosulfonyl-6-sek.~ butyl-4-methoxy-N,N-diethylbenzamidu.

Směs 200 ml kyseliny octové a 51,7 g 2-aminosulfonyl-6-sek.-butyl-4-methoxy-N,N-diethylbenzamidu se vaří pod zpětným chladičem přes noc. Kyselina octová se oddestiluje a odparek se vylije na 80 ml ledu a 2-molámího roztoku hydroxidu sodného. Vodný roztok se promyje dichlormethanem, okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou a vzniklá sraženina se odfiltruje. Dostane se 4-sek.-butyl-6-methoxysacharin (sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém Ri znamená sek.-butyl a R₂ znamená methoxyskupina).

Směs 3 g 4-sek.-butyl-6-methoxysacharinu, toluenu, 1,4 g terc.-butoxidu draselného a 0,4 g tetrabutylamoniumbromidu se uvede do varu pod zpětným chladičem a poté se přidá 1,8 ml fenylchlormethylsulfídu. Reakční směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu přibližně 27 hodin, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, odparek se extrahuje ethylacetátem, promyje roztokem chloridu sodného a vysuší síranem sodným. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování 10% ethylacetátem v hexanu. Dostane se 2,63 g 2-fenylthiomethyl-4-sek.-butyl-6-methoxysacharinu. Výtěžek odpovídá 60 % teorie.

K roztoku 2,6 g 2-fenylthiomethyl-4-sek.-butyl-6-methoxysacharinu ve 20 ml dichlormethanu se přidá 0,7 ml sulfurylchloridu. Směs se míchá za teploty místnosti přes noc a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Odparek se zpracuje s hexanem a směs se vystaví působení ultrazvuku na dobu 6 hodin. Vzniklá sraženina se odfiltruje a poskytne 1,33 g 2-chlormethyl-4-sek.-butyl6-methoxysacharinu.

-14CZ 289573 B6

h) Způsob výroby 2-chlormethyl^-sek-butylsacharinu (II, Rj = sek.-Bu, R₂ = H, R₃ = H, Q = Cl)

K roztoku 4,74 ml (0,031 mol) tetramethylethylendiaminu ve 300 ml tetrahydrofuranu (vedeného před použitím přes oxid hlinitý) se přidá 5,8 g (0,03 mol) 2-ethyl-N,N-diethylbenzamidu. Roztok se ochladí na -78 °C a zpracuje s 34,9 ml (0,031 mol) 0,9-molámího roztoku butyllithia v cyklohexanu. Poté co je přidávání dokončeno, směs se míchá během 20 minut a potom zpracuje s roztokem 3,2 ml (0,04 mol) ethyljodidu, přičemž se udržuje teplota -78 °C. Teplota se nechá vystoupit na teplotu místnosti, směs se míchá přibližně 16 hodin a poté vylije do vody. Výsledný olej se oddělí a chromatografuje na silikagelu, při eluování 10% ethylacetátem v hexanu. Tak se dostane 2,86 g 2-sek.-butyl-N,N-diethylbenzamidu jako žlutého oleje. Výtěžek odpovídá 43 % teorie.

10,45 g (0,045 mol) právě vyrobené sloučeniny, rozpuštěné v 70 ml tetrahydrofuranu, se přidá k roztoku, který sestává z 39,2 ml (0,047 mol) 1,2-molámího roztoku sek.-butyllithia v cyklohexanu a 7,1 ml (0,047 mol) tetramethylethylendiaminu v 250 ml tetrahydrofuranu, přičemž se udržuje teplota -78 °C. Když je přidávání dokončeno, směs se míchá dalších 30 minut za teploty -78 °C a poté zpracuje s oxidem siřičitým a teplota se nechá vystoupit na teplotu místnosti. Směs se odpaří dosucha za sníženého tlaku a odparek se rozpustí ve vodě a přidá za míchání k studenému roztoku 15,2 g (0,134 mol) hydroxylaminu kyseliny O-sulfonové a 15,4 ml (0,134 mol) 35% roztoku hydroxidu sodného. Tak se dostane 10,1 g 2-aminosulfonyl-6sek.butyl-N,N-diethylbenzamidu. Výtěžek odpovídá 72 % teorie.

6,83 g (0,22 mol) právě vyrobené sloučeniny se rozpustí ve 100 ml ledové kyseliny octové a roztok se vaří pod zpětným chladičem po dobu 13 hodin a poté odpaří dosucha. Odparek se trituruje diethyletherem a nato filtruje. Získá se 5,7 g diethylamonné soli 4-sek.-butylsacharinu. Výtěžek odpovídá 83 % teorie.

3,0 g (0,0096 mol) této sloučeniny po reakci s 1,13 ml (0,012 mol) chlormethylfenylsulfídu v toluenu poskytne 3,47 g 2-fenylthiomethyl-4-sek.-butylsacharinu. Výtěžek odpovídá 100% teorie.

Reakce 3,2 g (0,00097 mol) této sloučeniny s 2,3 ml (0,029 mol) sulfurylchloridu ve 20 ml methylenchloridu skýtá 2,4 g 2-chlormethyl-4-sek.-butylsacharinu. Výtěžek odpovídá 87 % teorie.

Způsob výroby konečných sloučenin

Příklad IA

Způsob výroby 2-/(2,5-dihydro-5-oxo-3-furanyl)oxymethyl/—4-izopropylsacharinu

Roztok 0,22 g kyseliny tetronové v 5 ml dimethylformamidu se přidá k suspenzi 0,10 g natriumhydridu (60% disperze v minerálním oleji) ve 4 ml dimethylformamidu pod dusíkovou

-15CZ 289573 B6 atmosférou za míchání a chlazení ledovou lázní. Ledová lázeň se odstraní, vmíchání se pokračuje po dobu 15 minut a nato se přikape roztok 0,547 g 2-chlormethyl-4-izopropylsacharinu v 10 ml dimethylformamidu. V míchání se pokračuje po dobu 2½ dne a směs se vylije do vody. Výsledná směs se extrahuje ethylacetátem. Ethylacetátová vrstva se vysuší síranem hořečnatým a stripováním se odstraní ethylacetát. Rekrystalizací výsledné bezbarvé tuhé látky o hmotnosti 0,60 g z ethylacetátu se dostane 0,34 g sloučeniny pojmenované v nadpise, která má teplotu tání 174 až 175 °C. Výtěžek odpovídá 51 % teorie.

Příklady 1B až 1W

Způsobem podobným způsobu z příkladu 1A uvedeného výše se z 2-chlormethyl-4-izopropylsacharinu nebo 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu a odpovídající sloučeniny obecného vzorce III

H-O-Z (ΠΙ) vyrobí sloučeniny charakterizované v tabulce I, která se uvádí dále.

-16CZ 289573 B6

Tabulka 1

Výtěžek (%) Rozmezí teploty tání(°C) Rekrystalizační

ch₃

ΙΕ H

204 až 207 ethanol

-17CZ 289573 B6

Výtěžek (%)

Rozmezí teploty tání ( °C)

Rekrystalizační rozpouštědlo

Pokračování:

Příklad

R₂

1F

1G

CH₃O

178 až 189,5 izopropylalkohol

172,5 až 174 ethylacetát

1H

CH₃O

II

CH₃O

CH₃O

168 až 170 ethylacetát

-18CZ 289573 B6

Výtěžek (%)

Rozmezí teploty tání (°C)

Rekrystalizační rozpouštědlo

Pokračování:

Příklad r₂

1K ch₃o

1L ch₃o

1M* ch₃o

126,5 až 128,5 ethylacetát

261,5 až 263 ethylacetát

129 až 131 ethylacetát a cyklohexan

IN

CH₃0

195 až 196,5 ethylacetát

CH₃0

136,5 až 137,5 chlorid uhličitý

-19CZ 289573 B6

Výtěžek (%)

Rozmezí teploty tání(°C)

Rekrystalizační rozpouštědlo

Pokračování: Příklad

IP

Rz

CH₃O

145 až 147 ethylacetát a cyklohexan

IQ

IR

1S

CH3O

CH3O

CHjO

CH3O

115 až 117 chlorid uhličitý

149,5 až 150,5 chlorid uhličitý

227 až 228 methanol

7,7 až 203 (rozklad) benzen a hexan (a)

-20CZ 289573 B6

Pokračování:	Výtěžek (%)
Příklad	r2	Z	Rozmezí teploty tání (°C) Rekrystalizační rozpouštědlo

1U CH₃O

22,5 pěna (b)

IV CH₃O

1W CH₃O

129 až 132 (rozklad) (c)

122,5 až 124 benzen a hexan (d) (a) Produkt se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování dichlor- methanem s následujícím proměnným množstvím ethylacetátu a hexanu, před rekrystalizací.

(b) Produkt se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování dichlormethanem s následujícím proměnným množstvím ethylacetátu a hexanu.

(c) Produkt se čistí dvakrát sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování dichlormethanem s následujícím proměnným množstvím ethylacetátu a hexanu.

(d) Produkt se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování ethylacetátem a hexanem v poměru 1 : 3 až 1 : 2.

* Kromě sloučeniny z příkladu 1M se izoluje 2-(l-methyl-2,6-dioxocyklohexyl)methyl-4izopropyl-6-methoxysacharin (teplota tání 159,5 až 161,5 °C, z ethylacetátu) ve výtěžku 38 % teorie.

-21 CZ 289573 B6

Příklad 2

Způsob výroby 2-( l-methylkarbostyryl-4-yl)oxymethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu

1,44 g 4-hydroxy-l-methylkarbostyrylu se přidá k suspenzi 0,36 g natriumhydridu (60% disperze v minerálním oleji) v dimethylformamidu za míchání. Směs se zahřeje na teplotu 100 °C, vmíchání se pokračuje po dobu 45 minut a nato se reakční směs vystaví působení ultrazvuku za teploty místnosti po dobu 30 minut. K reakční směsi se přidá 1,83 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu. Výsledná směs se zahřívá na teplotu 100 °C při pokračujícím mícháním po dobu 2 hodin a poté se vylije na 300 ml vody. Ke směsi se přidá 25 ml 1-normální kyseliny chlorovodíkové a vše se extrahuje chloroformem. Chloroformový extrakt se vysuší síranem sodným a chloroform se odstraní stripováním. Výsledná tuhá látka se podrobí velmi rychlé chromatografii na silikagelu, při použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 1:1 jako elučního činidla. Rekrystalizaci 0,7 g výsledné tuhé látky (výtěžek odpovídá 28 % teorie) z 90% ethanolu se dostane sloučenina pojmenovaná v nadpise, ve formě žluté tuhé látky o hmotnosti 0,39 g, která má teplotu tání 198 až 200 °C. Výtěžek odpovídá 15 % teorie.

Příklad 3A

Způsob výroby 2-( l-fenyl-3-acetylkarbostyryl-4-yl)oxymethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu

CH₃O

Směs 0,52 g 3-acetyl-4-hydroxy-l-fenylkarbostyrylu, 0,28 g uhličitanu draselného a 7 ml dimethylformamidu se míchá za teploty místnosti po dobu 30 minut. K reakční směsi se přidá 0,71 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu a směs se vystaví působení ultrazvuku za teploty 40 °C na dobu 1 hodiny. Reakční směs se potom míchá za teploty místnosti po dobu 16 hodin. Další vystavení účinkům ultrazvuku nezpůsobí změnu rozsahu reakce, jak je zřejmé z chromatografie na tenké vrstvě. Reakční směs se vylije na vodu a vzniklá směs se extrahuje ethylcetátem. Ethylacetátový extrakt se vysuší a ethylacetát se odstraní stripováním. Účinnou kapalinovou chromatografií za středního tlaku odparku o hmotnosti 0,5 g na silikagelu, při použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 3:7 jako elučního činidla a rekrystalizaci

-22CZ 289573 B6 z produktu z methanolu se dostane 0,24 g sloučeniny pojmenované v nadpise, která má teplotu tání 210 až 212 °C. Výtěžek odpovídá 24 % teorie.

Příklad 3B

Způsob výroby 2-( l-methyl-3-acetylkarbostyryl-4-yl)oxymethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu

Způsobem podobným způsobu z příkladu 3A výše se kondenzuje 0,63 g 3-acetyl-4-hydroxy-lmethylkarbostyrylu s 1,10 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu a získaná látka se čistí krystalizaci ze směsi methanolu a etheru. Dostane se 0,28 g sloučeniny pojmenované v nadpise ve formě bělavého prášku, který má teplotu tání 194 až 196 °C. Výtěžek odpovídá 20 % teorie.

Příklad 4A

Způsob výroby 2-(2,5-dihydro-2-oxo-3-fenylfuran-4-yl)oxymethyl-4-izopropyl-6-methoxy· sacharinu

CH₃q

0,82 g uhličitanu česného se vnese do roztoku 0,88 g 3-fenyl-2(5H)-fÍiranonu v 15 ml methanolu a směs se míchá za teploty místnosti po dobu 1 hodiny a stripováním se odstraní methanol. 1,52 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu se přidá k roztoku odparku v 15 ml dimethylformamidu a získaná směs se míchá za teploty místnosti po dobu 2 dnů. K reakční směsi se potom přidá 4,4 g silikagelu, těkavé složky se odpaří za sníženého tlaku a tuhá látka se podrobí velmi rychlé chromatografií na silikagelu, při použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 3:7 jako elučního činidla. Rekrystalizací produktu ze směsi ethanolu a etheru se dostane sloučenina pojmenovaná v nadpise ve formě bezbarvé tuhé látky o hmotnosti 0,45 g, která má teplotu tání 180 až 182 °C. Výtěžek odpovídá 20 % teorie.

-23CZ 289573 B6

Příklady 4B až 41

Způsobem podobným způsobu z příkladu 4A uvedeného výše se z 2-chlormethyl-4-izopropyl6-methoxysacharinu a odpovídající sloučeniny obecného vzorce III

H-O-Z (III) vyrobí sloučeniny charakterizované v tabulce II, která se uvádí dále.

Tabulka II

tání (°C) Rekrystalizační

4D

225 až 227 methanol a dichlormethan

-24CZ 289573 B6

4G

4H

až 88 žádné

20,5

133 až 135 (jako monohydrát) ethanol a voda (a)

3,9

218 až 220 (jako 1/4-hydrát) acetonitril (b) (a) Reakční směs se zpracuje vylitím na led s vodou, extrahuje ethylacetátem, organická vrstva se promyje 5% roztokem hydroxidu sodného, 1-normální kyselinou chlorovodíkovou, vodou a poté roztokem chloridu sodného na nato se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Odparek se potom čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém při eluování 40% ethylacetátem v hexanu, před rekrystalizací.

(b) Reakční směs se zpracuje vylitím do vody, přidáním 5% roztoku hydroxidu sodného, extrakcí směsí ethylacetátu a dichlormethanu, spojením organických vrstev, promytím organických vrstev vodou a poté vysuší síranem sodným. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém při eluování 25% ethylacetátem v hexanu až 100% ethylacetátem, před rekrystalizací.

-25CZ 289573 B6

Příklad 4J

Způsob výroby 2-(4-oxo-4H-pyrido[ 1,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-4-izopropyl-6-(benzy 1· oxykarbonylmethoxy)sacharinu

Způsobem podobným jako je popsán v příkladu 4A se vyrobí 0,71 g sloučeniny pojmenované v nadpise, která má teplotu tání 69 až 71 °C. Výtěžek odpovídá 62,8 % teorie. Přitom se vychází z 0,876 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-(benzyloxykarbonylmethoxy)sacharinu, 0,326 g uhličitanu česného, 0,324 g 2-hydroxypyrido[l,2-a]pyrimidin-4-onu a 5 ml dimethylformamidu. Reakční směs se zpracuje jejím vylitím na led s vodou, extrakcí ethylacetátem, oddělením organické vrstvy a promytím této organické vrstvy roztokem chloridu sodného a potom vysušením síranem sodným.

Příklad 4K

Způsob výroby 2-(4-oxo-4H-pyrido[ 1,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-4-sek.-butyl-6-methoxysacharinu

Způsobem podobným jako je popsán v příkladu 4A se vyrobí 0,267 g sloučeniny pojmenované v nadpise, která má teplotu tání 160 až 185 °C. Výtěžek odpovídá 58 % teorie. Přitom se vychází z 0,318 g (1,0 mmol) 2-chlormethyl-4-sek.-butyl-6-methoxysacharinu, 0,18 g (1,11 mmol) 2-hydroxypyrido[l,2-a]pyrimidin-4-onu, 0,18 g (0,56 mmol) uhličitanu česného, 5 ml methanolu a dimethylformamidu. Reakční směs se zpracuje jejím vylitím na nasycený roztok chloridu amonného, extrakcí ethylacetátem, odpařením organické vrstvy za sníženého tlaku a čištěním odparku sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování 50% ethylacetátem v hexanu a poté 5% methanolem v ethylacetátu.

Příklad 5

Způsob výroby 2-/3-(4-morfolinylmethyl)-4-oxo-4H-pyrido[l,2-a]pyrimidin-2-yl/oxymethyI-4~izopropyl-6-methoxysacharinu

-26CZ 289573 B6

Směs 0,6 g hydrochloridu 3-(4-morfolinylmethyl)pyrido[l,2-a]pyrimidin-2,4-dionu a 0,49 g terc.-butoxidu draselného ve 20 ml dimethylformamidu se míchá za teploty místnosti 5 minut. K reakční směsi se přidá 0,61 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu a v míchání se pokračuje za teplotu místnosti po dobu 1 hodiny. Reakční směs se zředí 50 ml vody a třikrát extrahuje vždy 200 ml dichlormethanu. Dichlormethanový extrakt se vysuší síranem sodným a těkavé látky se odstraní stripováním a nakonec za vysokého vakua. 780 mg surové látky se spojí s 0,65 g látky s jiného pokusu prováděného ve stejném měřítku, ale za použití 0,19 g natriumhydridu (60% disperze v minerálním oleji), na místo terc.-butoxidu draselného, a čistí se sloupcovou chromatografií na silikagelu, při použití směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 95:5 jako elučního činidla. Dostane se 500 mg sloučeniny pojmenované v nadpise. Část této sloučeniny, která se rekrystalizovala z ethanolu, má teplotu tání 177 až 180 °C. Výtěžek odpovídá 23 % teorie.

Příklad 6

Způsob výroby 2-(3,5,6-trimethyl-l ,4-dioxo-2,5-cyklohexadien-2-yl)oxymethyl-4-izopropyl6-methoxysacharinu

CH₃

0,34 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu se vnese za míchání při teplotě místnosti do roztoku 0,182 g 2-hydroxy-3,5,6-trimethyl-l,4-chinonu a 0,18 g methyltriazabicyklodecenu ve 20 ml acetonitrilu. V míchání za teploty místnosti se pokračuje po dobu 24 hodin a poté se tmavě zbarvený roztok vylije na led s vodou, obsahující několik kapek kyseliny chlorovodíkové. Výsledná hnědá tuhá látka se čistí nejprve sloupcovou chromatografií na silikagelu a poté rekrystalizací z horkého ethanolu. Dostane se 60 mg sloučeniny pojmenované v nadpise, která má teplotu tání 164 až 166 °C. Výtěžek odpovídá 12,7 % teorie.

-27CZ 289573 B6

Příklad 7

Způsob výroby 2-(5-acetyl-4,7-dihydro-4,7-dioxobenzofuran-6-yl)oxymethyl-4-izopropyl-6methoxysacharinu

0,5 g 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu se přidá za míchání při teplotě místnosti k roztoku 0,39 g 4,7-dimethoxy-5-acetyl-6-hydroxybenzofuranu a 0,28 g methyltriazabicyklodecenu ve 20 ml acetonitrilu. Směs se míchá za teploty místnosti přes noc. Protože chromatografie na tenké vrstvě ukazuje na nezreagovaný 4,7-dimethoxy-5-acetyl-6-hydroxybenzofuran, přidá se další 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharin a kapka báze, vmíchání se pokračuje celkem 24 hodiny a reakční směs se vylije na led s vodou, obsahujíc několik kapek kyseliny chlorovodíkové. Výsledná zlatě zbarvená tuhá látka se částečně čistí dichlormethanem jako promývacím činidlem. Reakční směs se opakovaně míchá přes noc za teploty 35 až 40 °C, na místo za teploty místnosti. Získaná látka a částečně vyčištěná látka z první reakce se spojí a čistí sloupcovou chromatografií na silikagelu. Dostane se 0,4 g 2-(4,7-dimethoxy-5-acetylbenzofuran-6-yl)oxymethyl-4—izopropyl-6-methoxysacharinu. Výtěžek odpovídá 24 % teorie.

Roztok 0,98 g tricertetraamoniumhexanitrátu ve 3 ml vody se přikape k roztoku 0,3 g 2-(4,7dimethoxy-5-acetylbenzofuran-6-yl)oxymethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu v 5 ml acetonitrilu. Směs se míchá za teploty místnosti po dobu 15 minut a vylije na led s vodou. Výsledná zlatě zbarvená směs se čistí rychlou chromatografií na silikagelu, při eluování směsí dichlormethanu a etheru v poměru 95:5 jako elučním činidlem, a krystaluje za působení ultrazvuku z ethanolu. Dostane se 0,13 g sloučeniny pojmenované v nadpise, která má teplotu tání 193 až 195 °C (za rozkladu). Výtěžek odpovídá 46,6 % teorie.

Příklad 8

Způsob výroby 2-(3-chlor-6-methyl-2-oxo-2H-pyran-4-yl)oxymethyl-4-izopropyl-6methoxysacharinu

Směs 0,493 g (3,07 mmol) 3-chlor-4-hydroxy-6-methyl-2H-pyran-2-onu, dimethylformamidu a 0,467 g (3,38 mmol) uhličitanu draselného se míchá za teploty místnosti pod dusíkovou atmosférou po dobu 30 minut a poté se najednou přidá 0,978 g (3,22 mmol) 2-chlormethyl-4izopropyl-6-methoxysacharinu. Směs se míchá za teploty místnosti po dobu 3 hodin a potom za teploty 75 °C rovněž po dobu 3 hodin. Získaná směs se vylije na vodu, extrahuje ethylacetátem

-28CZ 289573 B6 a organická vrstva se promyje roztokem chloridu sodného a vysuší. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování 30% ethylacetátem v hexanu. Dostane se 0,25 g sloučeniny pojmenované v nadpise, která má teplotu tání 182,5 až 183,5 °C, po rekrystalizaci ze směsi etheru a hexanu. Výtěžek odpovídá 18,1 % teorie.

Příklady 9A až 9J

Sloučeniny charakterizované v tabulce III uvedené dále se vyrobí podle tohoto obecného předpisu:

Směs odpovídající sloučeniny obecného vzorce ΙΠ

H-O-Z (in), přibližně 1,0 až 1,5 ekvivalentu odpovídající báze a vhodného rozpouštědla, se míchá za teploty místnosti po dobu přibližně 0 až 60 minut a poté se přidá 1,0 až 1,2 ekvivalentu odpovídajícího 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-R2-sacharinu. Směs se míchá za teploty ležící od přibližně teploty místnosti do zhruba 90 °C přibližně po dobu okolo 1 až 48 hodin a potom se zpracuje, jak je uvedeno dále.

Způsob 1

Reakční směs se vylije na led s vodou a buď

a) extrahuje vhodným rozpouštědlem (například ethylacetátem, chloroformem nebo methylenchloridem) a organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným, filtruje a odpaří a odparek takto získaný se čistí jak je uvedeno v tabulce III, nebo

b) produkt se vysráží z ledu a vody a filtruje a čistí, jak je uvedeno v tabulce III.

Způsob 2

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí jak je uvedeno v tabulce III.

Tabulka III (CH

-29CZ 289573 B6

Příklad

R₂

	Způsob	Teplota
Báze/	zpraco-	tání (°C)	Rekrystalizační
Rozpouštědlo	vání	Výtěžek (%)	rozpouštědlo

9A

K₂CO₃

DMF

#1

211 až213 9,3

voda

		Et2O/
#1	197 až 200	CH3CN (a)

	K2CO3 #1	217až218	EtOAc/
CH3O	N-methyl-2-pyrrolidinon	26	Et2O

9D

CH₃O (iPr)₂NEt CH₃CN

#1	250 až 252	DMF/
	31,8	voda (b)

9E

methyltriaza- #1 bicyklodecen/ CHjCN

228 až 230 (c) (rozklad) (HC1 sůl)

43,5

9F

methyltriazabicyklodecen #2

176,5 až 178 benzen/

22,8 hexan (d)

PhCH₂O K₂CO₃ (CH₂)₂O- DMF #1 pěna (e)

methyltriaza- #1	pěna	(0
bicyklodecen/	31
DMF

-30CZ 289573 B6

Tabulka III - pokračování

R₂

	Způsob	Teplota
Báze/	zpraco-	tání (°C)	Rekrystalizační
Rozpouštědlo	vání	Výtěžek (%)	rozpouštědlo

(iPr)₂NEt

H DMF #1

208,5 až 210 EtOAc

45,2 methyltriazabicyklodecen/ #1 CH₃O CHjCN

189 až 193

20,9 benzen/ hexan (g)

Vysvětlivky k tabulce III:

(a) Produkt se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém při eluování 5% methanolem v chloroformu, před rekrystalizací.

(b) Produkt se čistí rekrystalizací z acetonitrilu a potom sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém při eluování 5% ethylacetátem v dichlormethanu, před rekrystalizací.

(c) Volná báze produktu se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém při eluování směsí 65 % ethylacetátu, 30 % methanolu a 5 % triethylaminu, před vznikem hydrochloridu zpracováním s 4,6-normální ethanolickou kyselinou chlorovodíkovou.

(d) Produkt se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém při eluování hexanem a ethylacetátem v poměru 3:1 až 2:1, před rekrystalizací.

(e) Produkt se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém při eluování 60% ethylacetátem v hexanu.

(f) Produkt se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém při eluování 40% ethylacetátem v hexanu.

(g) Produkt se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém při eluování ethylacetátem v hexanu v poměru od 1:7 do 1:6, před rekrystalizací.

Příklad 10

Způsob výroby sloučeniny vzorce

Směs 0,359 g (0,834 mmol) sloučeniny z příkladu 4H, 35 ml ethylacetátu a palladia na uhlí se hydrogenuje za tlaku 34 kPa v Parrově hydrogenačním přístroji po dobu 105 minut. Poté se přidá dalších 0,16 g palladia na uhlí a reakce pokračuje další 2 hodiny. Katalyzátor se odfiltruje a filtrát se odpaří za sníženého tlaku. Surová látka se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, za použití systému ethylacetát, methanol a triethylamin v poměru 88,5:7,5:4 jako

-31 CZ 289573 B6 elučního činidla. Dostane se 0,132 g požadované sloučeniny ve formě volné báze. Výtěžek odpovídá 36,5 % teorie. Tato báze se rozpustí v ethanolu a zpracuje s kyselinou citrónovou rozpuštěnou v ethanolu. Dostane se 0,142 g sloučeniny pojmenované v nadpise ve formě soli s kyselinou citrónovou. Tato sloučenina má teplotu tání 198 až 200 °C.

Příklad 11

Způsob výroby 2-/3-(ethoxykarbonyl)-4-oxO“4H-pyrimido[ 1,2-a]pyrimidin-2-yl/oxymethyl4-izopropyl-6-methoxysacharinu

0,70 g (3,0 mmol) ethyl-/5-oxo-2(pyrimidin-2-yl)-2,5-dihydroizoxazol-4-karboxylátu/ se přidá ke směsi 0,37 g (3,3 mmol) terc.-butoxidu draselného v 20 ml tetrahydrofuranu a směs se míchá za teploty 40 °C pod dusíkovou atmosférou po dobu 30 minut. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se vysuší za vysokého vakua. Odparek se uvede do styku s 20 ml dimethylformamidu a zpracuje s 0,91 g (3,0 mmol) 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-methoxysacharinu v 5 ml dimethylformamidu. Směs se míchá za teploty místnosti po dobu přibližně 3 dnů, vylije na led s vodou a extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se oddělí, vysuší síranem sodným a odpaří za sníženého tlaku. Odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování 5% methanolem v ethylacetátu. Dostane se 0,18 g sloučeniny pojmenované v nadpise, která má teplotu tání 189 až 191 °C, po rekrystalizaci ze směsi toluenu a hexanu. Výtěžek odpovídá 12 % teorie.

Příklad 12

Způsob výroby 2-(4-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-4H-pyrido[ 1,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-4izopropyl-6-(2-hydroxyethoxy)sacharinu

Směs 1,35 g sloučeniny z příkladu 9G ve směsi 200 ml ethylacetátu a 5 ml methanolu a 0,5 g 10% palladia na uhlí se hydrogenuje za tlaku 34 kPa v Parrově hydrogenačním přístroji po dobu 3 hodin. Poté se přidá dalších 0,5 g palladia na uhlí a směs se hydrogenuje dále 8 až 9 hodin. Směs se filtruje a filtrát se odpaří za sníženého tlaku. Odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, za použití ethylacetátu jako elučního činidla. Dostane se 0,89 g sloučeniny pojmenované v nadpise, ve formě bílé pěny.

-32CZ 289573 B6

Příklad 13

Způsob výroby 2-(4-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-4H-pyrido[ 1,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-4izopropyl-6-/2-(dimethylaminomethylkarbonyloxy)ethoxy/sacharinu

K roztoku 0,8 g (1,72 mmol) sloučeniny z příkladu 12 v 25 ml dichlormethanu, obsahujícím 1,06 g (5,14 mmol) 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu se přidá 0,19 g (1,9 mmol) dimethylglycinu a poté 0,21 g (1,72 mmol) 4-dimethylaminopyridinu. Směs se míchá za teplotu místnosti po dobu 2 hodin, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování 10% methanolem v ethylacetátu. Získá se 0,64 g sloučeniny pojmenované v nadpise jako bílé pěny. Výtěžek odpovídá 68 % teorie.

Příklad 14

Způsob výroby 2-(3-chlor-4-oxo-pyrido[l,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-4-izopropyl-6-(2hydroxyethoxy)sacharinu

K suspenzi 0,76 g sloučeniny z příkladu 9H ve 30 ml ethanolu se přidá tetrahydrofuran a poté 20 až 30 ml 2-normální kyseliny chlorovodíkové. Směs se míchá po dobu 4 až 5 hodin, poté se přidá další 2-normální kyselina chlorovodíková a vzniklá směs se míchá přes noc. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, odparek se zředí tetrahydrofuranem a zpracuje s 2 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Reakční směs se míchá po dobu 5 až 6 hodin, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou, roztokem chloridu sodného a vysuší. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování 80% ethylacetátem v hexanu. Získá se 0,43 g sloučeniny pojmenované v nadpise, která má teplotu tání 214,5 až 215,5 °C.

Příklady 15A až 15C

Způsobem podobným způsobu z příkladu 9D, ale při náhradě odpovídající sloučeniny obecného vzorce III

H-O-Z (III)

-33CZ 289573 B6 se předpokládá, že se vyrobí dále uvedené sloučeniny obecného vzorce

15B

15C

Příklad 16

a) Způsob výroby 2-(3-chlor-4-oxo~4H-pyrido[ 1,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-6-hydro10 xy-4-izopropylsacharinu

-34CZ 289573 B6

Předpokládá se, že se způsobem podobným způsobu z příkladu 6 může vyrobit sloučenina pojmenovaná v nadpise ze 2 ekvivalentů 3-chlor-pyrido[l,2-a]pyrimidin-2,4-dionu, 2 ekvivalentů methyltriazabicyklodecenu, dimethylformamidu a 2-chlormethyl-4-izopropyl-6-hydroxysacharinu.

b) Způsob výroby 2-(3-chlor-4-oxo-4H-pyrido[l,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-4-izopropyl-6-/l-(5-dimethylaminomethyl-2-furanyl)methoxy/sacharinu (CHgJgN

Předpokládá se, že sloučenina pojmenovaná v nadpise se může vyrobit zpracováním roztoku 2-(3-chlor-4-oxo-4H-pyrido[l,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-6-hydroxy-4-izopropylsacharinu v dimethylformamidu s trifenylfosfinem, 5-dimethylaminomethyl-2-hydroxymethylfuranem a diethylazodikarboxylátem.

Příklad 17

Způsob výroby 2-(4-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-4H-pyrido[ 1,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-4izopropyl-6-methoxysacharinu

Směs 0,3 g (0,708 mmol) sloučeniny z příkladu 4C, 14 ml ethylacetátu a 0,3 g 10% palladia na uhlí se hydrogenuje v Parrově hydrogenačním přístroji za tlaku 34 kPa po dobu 7 hodin. Reakční směs se filtruje přes celit, filtrát se odpaří za sníženého tlaku a odparek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování 50% ethylacetátem v hexanu až 70% ethylacetátem v hexanu. Dostane se 0,165 g sloučeniny pojmenované v nadpise, která má teplotu tání 183,5 až 185,5 °C, po rekrystalizaci ze směsi ethylacetátu a hexanu. Výtěžek odpovídá 54% teorie.

Příklad 18

Způsob výroby 2-(3-chlor-4-oxo-4H-pyrido[ 1,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethylsacharinu

-35CZ 289573 B6

Ke směsi 0,324 g 2-hydroxy-3-chlorpyrido[l,2-a]pyrimidin-4-onu a 0,24 ml methyltriazabicyklodecenu v 15 ml dimethylformamidu se přidá 0,414 g 2-brommethylsacharinu. Směs se míchá přes noc, vylije do vody a vzniklá sraženina se odfiltruje a rekrystaluje z dimethylformamidu. Dostane se 0,371 g sloučeniny pojmenované v nadpise. Výtěžek odpovídá 65% teorie.

Příklad 19 A)

Způsob výroby 2-(3-chlor-4-oxc>-4H-pyrido[ 1,2-a]pyrimidin-2-yl)oxymethyl-4-sek.-butylsacharinu a příklad 19B)

Způsob výroby 2-(3-chlor-2-OXO-2H-pyrido[ 1,2-a]pyrimidin-4-yl)oxymethyl-4-sek.-butylsacharinu

přiklad 19A) příklad 19B)

Ke směsi 6,29 g 2-hydroxy-3-chlorpyrido[l,2-a]pyrimidin-4-onu a 0,22 ml methyltriazabicyklodecenu ve 12 ml dimethylformamidu se přidá 0,39 g 2-chlormethyl-4-sek.-butylsacharinu. Reakční směs se míchá po dobu 8 hodin, vylije do vody a sraženina, která se vytvořila, se odfiltruje. Tuhý zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém, při eluování směsí hexanu a ethylacetátu v poměru 2:1 až směsí hexanu a ethylacetátu v poměru 1:1. Dostane se 0,284 g sloučeniny pojmenované v nadpise z příkladu 19A), která má teplotu tání 211 až

-36CZ 289573 B6

212 °C, po rekrystalizaci z ethylacetátu, a 0,027 g sloučeniny pojmenované v nadpise z příkladu 19B), která má teplotu tání 268 až 271 °C (za rozkladu), po rekrystalizaci z dichlormethanu.

Využitelnost

Jak je uvedeno výše, sloučeniny obecného vzorce I inhibují enzymatický účinek proteolytických enzymů a jsou vhodné pro ošetřování degenerativních onemocnění. Tyto sloučeniny zvláště působí inhibičně na lidskou leukocytovou elastázu a enzymy podobné chymotrypsinu a jsou 10 vhodné pro ošetřování rozedmy, reumatoidní artritidy, zánětu slinivky břišní, cystické fibrosy, chronické bronchitidy, příznaků dýchacích potíží dospělých, zánětlivých chorob střev, lupénky, bulosního pemfigoidu a nedostatečnosti α-1-antitrypsinu. Toto použití se dokládá testem in vitro inhibičního účinku sloučenin obecného vzorce I proti lidské leukocytové elastáze.

Měření inhibiční konstanty (Κ;) inhibitorového komplexu lidské leukocytové elastázy popsal Cha vBiochemical Pharmacology, 24, 2177-2185 /1975/ pro pravé reversibilní inhibiční konstanty, obvykle se týkající kompetitivních inhibitorů. Sloučeniny obecného vzorce I netvoří pravé reversibilní inhibitorové komplexy, ale jsou spíše v určitém rozsahu spotřebovány enzymem. Na místo toho se proto stanoví konstanta Kj*, která je definována jako hodnota reaktivace enzymu 20 dělená hodnotou inaktivace enzymu (Ις,β/ΐς,η). Hodnoty kos a Κ>_η se měří a konstanta Kj* se zjišťuje výpočtem.

Hodnota ko_n se stanovuje měřením aktivity enzymu z alikvotu enzymu, jako funkce času po podání testované sloučeniny (inhibitoru). Vynesením log enzymové aktivity proti času se dostane 25 pozorovaná hodnota inaktivace (ko_bs) podle vztahu ko_bs = ln 2/ti/2, kde tj/2 označuje čas potřebný pro pokles enzymové aktivity na 50 %. Hodnota k<,_n se potom dostane ze vztahu k_on = ko_bs/[I], kde [I] znamená koncentraci inhibitoru. Hodnota Ις,β· se stanoví podobně a konstanta Kj* se dostane ze vztahu K,* = Κ,α/Κ,π.

Výsledky uvedené v tabulce IV byly získány pro sloučeniny obecného vzorce I z příkladů.

Tabulka IV

Inhibice lidské leukocytové elastázy

Sloučenina z příkladu Kj* (nmol)

IA	0,4
1B	0,22
1C	0,7
ID	0,25
IE	0,035
1F	0,22
1G	0,05
IH	0,027
11	0,25
1J	0,85
1K	0,013
1L	0,09
1M	0,18
IN	0,052
10	0,016
IP	0,041
iq	0,06
IR	0,038
2	0,5

-37CZ 289573 B6

3A	0,43
3B	0,27
4A	0,025
4B	0,9
4C	0,078
4D	0,066
4E	0,093
5	0,23
6	0,92
7	17

Inhibiční účinky na lidskou leukocytovou elastázu representativních sloučenin podle tohoto vynálezu jsou také doloženy těmito postupy:

Testovaná sloučenina (inhibitor) se rozpustí v dimethylsulfoxidu v lékovce a připraví se zásobní roztok inhibitoru, který má koncentraci v rozmezí od 200 do 1000 pmol. Zásobní roztok inhibitoru se ředí (v poměru 1:4, 1:16 a 1:64) do zkušebních lékovek (lékovky 1, 2 a 3), které obsahují 2,4 ml roztoku pufru (50 mmol kyseliny N-(2-hydroxyethyl)piperazin-N'-(2-ethansulfonové) a hydroxidu sodného a 500 mmol chloridu sodného, hodnota pH 7,8 při teplotě 25 °C) a dimethylsulfoxid se přidává tak, že celkový objem v každé lékovce činí 3,2 ml. 70 μΐ, 50 μΐ, 35 μΐ a 25 μΐ inhibitoru ze zkušební lékovky 1 se umístí do prvních čtyř jamek mikrotitrační desky opatřené 96 jamkami a každá jamka se upraví na celkový objem 90 μΐ přídavkem 25% dimethylsulfoxidu v roztoku pufru. Inhibitory ze zkušebních lékovek 2 a 3 se upraví podobným způsobem a umístí do jamek 5 až 12, aby se dostalo celkem 12 rozdílných koncentrací inhibitoru. Čtyři jamky (jamky 13 až 16) obsahující 90 μΐ 25% dimethylsulfoxidu v roztoku pufru, avšak žádný inhibitor, se také podrobí měření, současně s jamkami obsahujícími inhibitor, jako kontrolní stanovení. Do každé ze 16 jamek se potom současně přidá 150 μΐ roztoku substrátu [připraveného přidáním 500 μΐ HLE (lidského leukocytového elastázového) substrátu MeOSucAla-Ala-Pro-Val-pNA (18,7 mmol v dimethylsulfoxidu) k 19,5 ml roztoku pufru] a roztok v každé jamce se důkladně promíchá.

Mikrotitrační deska s 96 jamkami se potom umístí do spektrofotometru (Microplate Reader #89815A) a přidá se současně do každé ze 16 jamek 110 μΐ roztoku enzymu (připraveného tím, že se směs 20 ml roztoku pufru a 20 mg hovězího sérového albuminu opatrně promíchá vířivým pohybem v scintilační nádobce) a 5 μΐ HLE zásobního roztoku (1 mg/ml) rozpuštěn v deionizované vodě). Každý z roztoků v jamkách se důkladně promíchá a poté se shromažďují hodnoty absorbance v závislosti na čase při absorbance 410 mM, dokud zkouška není ukončena. Je třeba poznamenat, že ačkoli se zkušební metoda může provádět manuálně, je výhodné zkoušku provádět roboticky za použití zařízení Hewlett Packard MicroAssay Systém Robot.

Vynesení absorbance proti hodnotám času tak poskytne progresní křivky s konečným sklonem, který je roven konečné rychlosti v ustáleném stavu (V_F). Za použití programu ENZFITTER (software Elsevier), progresní křivky pro čtyři kontrolní zkoušky ([I] = 0) jsou uzpůsobeny lineární regresí k poskytnutí hodnot rychlosti reakce enzymu v nepřítomnosti inhibitoru (V_o), které jsou zprůměrovány k vytvoření jediné fixní hodnoty. Inhibiční konstanta Ki (nmol) se potom dostane vynesením [I]

--------- proti Vo/V_F ,

1-V_F/V_O co dovoluje lineární plocha, kde

-38CZ 289573 B6 [S] sklon = Ki (1 +---),

K_m přičemž [S] je koncentrace substrátu a

K_m je Michaelisova konstanta.

Dále uvedená tabulka shrnuje výsledky dosažené u testovaných reprezentativních sloučenin za použití právě popsaného způsobu.

Tabulka V

Inhibice lidské leukocytové elastázy

Sloučenina z příkladu K; (nmol)

1S	0,22
IT	0,083
1U	0,078
IV	0,033
1W	0,034
4F	0,08
4G	0,20
4H	0,066
41	0,19
4J	0,120
4K	2,5
8	0,025
9A	0,044
9B	0,12
9C	0,058
9D	0,081
9E	0,035
9F	0,138
9G	0,140
91	0,210
9J	0,021
10	0,120
11	0,40
12	0,130
13	0,063
14	0,095
17	0,110
18	14,0
19A	0,72
19B	4,7

Množství sloučeniny obecného vzorce I inhibující proteolytický enzym se může stanovit na základě výsledků testu inhibice lidské leukocytové elastázy a může se dostatečně měnit pro jednotlivé pacienty v závislosti na fyzickém stavu pacienta, cestě podání, trvání ošetření a odezvě pacienta. Účinnou dávku sloučeniny obecného vzorce I tak může stanovit pouze lékař, po zvážení všech příslušných kriterií a za použití nejlepších znalostí v zájmu pacienta.

-39CZ 289573 B6

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou zpracovat pro farmaceutické použití jejich vpravením do farmaceutických prostředků pro perorální podání, parenterální podání nebo k zavádění inhalací ve formě aerosolu, které mohou být v tuhé nebo kapalné dávkové formě včetně tablet, kapslí, roztoků, suspenzí a emulzí a které obsahují alespoň jedno vhodné adjuvants (pomocnou látku). Výhodné jsou tuhé jednotkové dávky ve formě tablet nebo kapslí pro perorální podání. K tomuto účelu pomocnými látkami může být například jedna nebo několik látek, které jsou zvoleny ze souboru zahrnujícího uhličitan vápenatý, škrob, laktózu, mastek, stearát hořečnatý a arabskou gumu. Prostředky se vyrábějí běžnými farmaceutickými technickými postupy.

PATENTOVÉ

NÁROKY

Claims (6)

1. Sacharinové deriváty obecného vzorce I:

ve kterém:

Ri znamená alkylovou skupinu obsahující 1 až 10 atomů uhlíku,

R₂ znamená jeden až tři substituenty v libovolné z poloh 5-, 6- nebo 7- nebo ve všech těchto polohách, přičemž je vybrán ze skupiny zahrnující

B=N-(CH2)pC(O)O(CH2)p,-O- a R-oxy-alkoxyskupinu obsahující v alkoxy-části 1 až 10 atomů uhlíku, p a p' znamenají celá čísla od 1 do 4,

R představuje fenylalkylovou skupinu obsahující v alkylové části 1 až 10 atomů uhlíku,

B=N znamená dialkylaminovou skupinu obsahující v alkylové části 1 až 10 atomů uhlíku,

R₃ znamená atom vodíku,

X znamená atom vodíku nebo halogenu, a

-Y- znamená skupiny -N=C(Z)-N(Z)- nebo -N=C(R')-N(R')-, kde

R' skupiny společně znamenají skupinu -(CH₂)_n,-, která je připojena k atomům uhlíku a dusíku, n' je celé číslo od 3 do 5, a

Z skupiny společně s atomy uhlíku a dusíku, na které jsou připojeny, tvoří pyridoskupinu,

-40CZ 289573 B6 a farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami, pokud tato sloučenina má bazickou funkční skupinu, nebo farmaceuticky přijatelná adiční sůl s bazickou látkou, pokud tato sloučenina má acidickou funkční skupinu.

2. Sacharinový derivát podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém n' je 4.

3. Sacharinový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I, ve kterém Rj znamená izopropylovou skupinu, R₂ znamená dimethylamino-CH₂C(O)O(CH₂)₂-O- skupinu nebo 6-benzyloxyethoxyskupinu, a X znamená atom vodíku.

4. Sacharinový derivát podle nároku 2, který má obecný vzorec:

ve kterém:

R₂ znamená dimethylamino-CH₂C(0)0(CH₂)₂-0- skupinu nebo benzyloxyethoxyskupinu, a Z představuje jednu ze skupin následujících strukturních vzorců:

5. Farmaceutický prostředek pro léčení degenerativních onemocnění, vyznačující se t í m , že obsahuje sloučeninu obecného vzorce I podle některého z nároků 1 až 4 v koncentraci inhibující proteolytický enzym, a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

6. Použití sloučeniny podle některého z nároků 1 až 4 k přípravě léčiva pro léčení pacienta trpícího degenerativní nemocí.