CZ286524B6 - Derivát kyseliny 5-amino-8-methyl-7-pyrrolidinylchinolin-3-karboxylové, jeho stereoizomer a sůl, způsob přípravy a farmaceutický prostředek jej obsahující - Google Patents

Abstract

Popisuje se derivát kyseliny 5-amino-8-methyl-7-pyrrolidinylchinolin-3-karboxylové obecného vzorce I, kde R.sup.2.n. je atom vodíku nebo C.sub.1.n.-C.sub.4.n. alkylová skupina, C.sub.1.n.-C.sub.6.n. alkanoylová skupina, halogenovaná C.sub.1.n.-C.sub.4.n. alkanoylová skupina nebo esterový zbytek karboxylové kyseliny; R.sup.1.n. a R.sup.3.n. je atom vodíku nebo C.sub.1.n.-C.sub.4.n. alkylová skupina; R.sup.4.n., R.sup.5.n. nebo R.sup.6.n. jsou každý nezávisle atom vodíku nebo C.sub.1.n.-C.sub.4.n. alkylová skupina; nebo dva z R.sup.4.n., R.sup.5.n. a R.sup.6.n. tvoří dohromady skupinu -(CH.sub.2.n.).sub.n.n.-, kde n je 1 nebo 2, jeho stereoizomer nebo jeho farmakologicky přijatelná sůl, způsob přípravy těchto sloučenin, farmaceutický prostředek, který obsahuje účinné množství těchto sloučenin, popsány jsou i meziprodukty pro přípravu těchto sloučenin. Uvedené sloučeniny jsou účinné jako antibakteriální činidla.ŕ

Description

Deriváty kyseliny 5-amino-8-methyl-7-pyrrolidinylchinolin-3-karboxylové, způsoby jejich přípravy, meziprodukt pro jejich přípravu, farmaceutický prostředek je obsahující a jejich použití

Oblast techniky

Vynález se týká derivátů kyseliny 5-amino-8-methyl-7-pyrrolidinylchinolin-3-karboxylové, způsobů jejich přípravy, meziproduktu pro jejich přípravu, farmaceutického prostředku je obsahujícího a jejich použití. Jedná se o nové deriváty a jejich stereoizomery a farmakologicky přijatelné soli s vynikající antibakteriální účinností.

Dosavadní stav techniky

Ciprofloxacin je dobře dokumentované antibakteriální činidlo s chinolinovým jádrem, v němž je cyklopropylová skupina obsazena v poloze 1 (The Měrek Index, 1 l‘^h Edition, 2315).

Ve snaze zlepšit ciprofloxacin bylo připraveno mnoho substituentů v polohách 5, 7 a 8, nicméně tento vynález se týká první preparace nejnovější chinolinové sloučeniny s aminovou skupinou v poloze 5 a methylovou skupinou v poloze 8 v kombinaci s pyrrolidinylovou skupinou v poloze 7.

Až dosud byla antibakteriální účinnost chinolinových sloučenin buď nedostačující nebo, pokud byla dostatečná, byla doprovázena vážnými nepříznivými reakcemi, jako je fototoxicita, chromozomální aberace, konvulze, atd., a tak tato nedávná činidla nastolovala problémy, týkající se bezpečnosti.

Výše uvedené problémy, týkající se chinolinových antibakteriálních činidel, jsou dokumentovány v následujících publikacích:

1. „Quinoline Antimicrobial Agents“, 2. vydání, Kapitola 26, editor D. C. Hooper a J. S. Wolfson, Američan Socienty for Microbiology, Washington D. C., 1993, str. 489 (týká se fototoxicity, chromozomální aberace, konvulzí, atd.).

2. Mutagenity Tests, 2 (3), str. 154 (1993) (chromozomální aberace, atd.).

3. Environ. Mol. Mutagen., 13, str. 238 (1989) (chromozomální aberace, atd.).

Dále následují hlavní rysy vztahu určitých charakteristických vlastností substituentů, použitých v individuálních polohách, ku výše uvedeným problémům. Například se rozumí, že umístění relativně objemného substituentu, jako je atom chloru nebo methylová skupina, v poloze 8 chinolinového jádra je žádoucí z hlediska antibakteriální účinnosti, ale mnohé sloučeniny, mající atom chloru jako substituent v poloze 8 poskytují možnost zvýšení závažných nepříznivých reakcí, jako je fototoxicita nebo chromozomální aberace, atd., zatímco sloučeniny s methylovým substituentem poskytují možnost zvýšení závažných nepříznivých reakcí, jako jsou chromozomální aberace, atd. Takové sloučeniny nastolují velké problémy, pokud se týká jejich bezpečnosti.

Substituentem, široce používaným pro polohu 5, je aminová skupina, halogenový atom nebo methylová skupina, atd., avšak takové substituenty mají nevýhodu vtom, že snižují antibakteriální účinnost nebo jinak poskytují možnost zvýšení závažných nepříznivých reakcí, jako je fototoxicita, chromozomální aberace, atd., a tedy nastolují problémy, týkající se bezpečnosti.

-1 CZ 286524 B6

Dále, v poloze 7 používaná piperazinylová skupina neposkytuje dostatečnou antibakteriální účinnost, zatímco použití 3-aminopyrrolidinylové skupiny, jež má dostatečnou antibakteriální účinnost, poskytuje možnost zvýšení závažných nepříznivých reakcí, jako chromozomální aberace, atd., a tedy opět dochází k problémům, vzhledem k bezpečnosti.

EP 284 935 popisuje nové 5-substituované deriváty chinolinové a nafthyridinové karboxykyseliny jakož i jejich farmaceuticky přijatelné hydráty a jiné soli. Jedná se o bakteriální činidla vhodná pro humánní a veterinární medicínu, jež jsou účinná proti gram-pozitivním a negativním bakteriím.

EP 391 169 pojednává o enantiomemě čistých 3-karboxydihydrochinolinových nebo naftyridinových derivátech a jejich farmaceuticky přijatelných hydrátech a solích. Tyto jsou také vhodné jako bakteriální činidla, přičemž obvykle forma Sje aktivnější. Popisují se zde terapeutické použití jakož i ochrana materiálů, jako jsou polymery, papír, dřevo a voda. Tyto deriváty jsou účinné zejména proti enterobakteriím.

EP 237 955 popisuje chinoxalinové deriváty, jejich hydráty a farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami a alkáliemi. Tyto jsou také antibakteriální. Projevují vysokou účinnost proti anaerobním gram-negativním a gram-pozitivním bakteriím, jakož i proti anaerobním bakteriím a mykoplazmě. Popisuje se zde rovněž terapeutické použití.

EP360 258 pojednává o 7-pyrrolidinchinolinových a naftyridinových derivátech a jejich solích, používaných jako širokospektrálních antibakteriálních činidel s aktivitou proti jak grampozitivním tak i gram-negativním bakteriím, včetně enterobakteriím. Chemoterapeuticky aktivní sloučeniny jsou zde popisovány, jakož i čisticí roztoky pro inhibici povrchů před bakteriálním růstem a dále látky ke konzervování materiálů.

W092/10490 popisuje deriváty 7-substituované 6-fluor-l,4-dihydro—4-oxochinolin-3-karboxylové kyseliny a jejich soli. Mají antibakteriální aktivitu a jsou vhodné k léčení bakteriálních onemocnění a k dezinfekci povrchu.

W093/03026 pojednává o derivátech chinolinkarboxylové kyseliny s antibakteriální účinností.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou deriváty kyseliny 5-amino-8-methyl-7-pyrrolidinylchinolin-3karboxylové, obecného vzorce I

v němž

R¹ a R³ značí jednotlivě vodík nebo C1-C4 alkyl,

-2CZ 286524 B6

R² je vodík, C1-C4 alkyl, Ci-C₆ alkanoyl, C1-C4 alkanoyl halogenovaný 1 až 5 atomy halogenu a benzyloxykarbonyl nebo C1-C4 alkyloxykarbonyl,

R⁴, R⁵ a R⁶ značí jednotlivě vodík nebo C1-C4 alkyl, nebo dva ze substituentů R⁴, R⁵ a R⁶ tvoří skupinu —(CH₂)_n—, v níž n je 1 nebo 2, a jejich stereoizomery nebo farmakologický přijatelné soli.

Jednu výhodnou skupinu tvoří deriváty podle vynálezu, uvedeného obecného vzorce I, v němž R¹, R² a R³ značí jednotlivě vodík a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologický přijatelné soli.

Druhou skupinou jsou deriváty obecného vzorce I, v němž R⁴, R⁵ a R⁶ značí jednotlivě vodík nebo C1-C4 alkyl a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologický přijatelné soli.

Třetí výhodnou skupinou jsou deriváty obecného vzorce I, v němž R⁴, R⁵ nebo R⁶ značí jednotlivě methyl a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologický přijatelné soli.

Čtvrtou skupinu tvoří deriváty obecného vzorce I, v němž R⁴, R⁵ a R⁶ značí jednotlivě vodík a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologický přijatelné soli.

Pátou výhodnou skupinu představují deriváty obecného vzorce I, v němž R⁴ je methyl a R⁵ a R⁶ značí jednotlivě vodík a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologický přijatelné soli.

Další výhodnou skupinou jsou deriváty obecného vzorce I, v němž dva ze substituentů R⁴, R⁵ a R⁶ tvoří skupinu ~(CH₂)_n, v níž n je 1 nebo 2, a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologický přijatelné soli.

Ještě další výhodnou skupinou jsou deriváty obecného vzorce I, v němž R⁴ a R⁵ tvoří skupinu -(CH₂)_n-, v níž n je 1 nebo 2, a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologický přijatelné soli.

A poslední takovou skupinu tvoří deriváty obecného vzorce I, v němž R⁴ a R⁵ tvoří skupinu -(CH₂)₂- a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologický přijatelné soli.

Konkrétními výhodnými deriváty, stereoizomery nebo farmakologický přijatelnými solemi podle vynálezu jsou:

kyselina 5-amino-7-(3-amino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl4-oxochinolin-3-karboxylová, kyselina 5-amino-7-(3-amino-4-methyl-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro8-methyl—4-oxochinolin-3-karboxylová a kyselina 5-amino-7-(7-amino-5-azaspiro[2.4]hept-5-yl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová, a jejich stereoizomery a farmakologický přijatelné soli.

Předmětem vynálezu jsou také tři způsoby přípravy derivátů podle tohoto vynálezu.

-3 CZ 286524 B6

Při jednom způsobu přípravy derivátů podle vynálezu, obecného vzorce I, v němž všechny substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomerů nebo farmakologicky přijatelných solí, se derivát kyseliny chinolin-3-karboxylové, halogenovaný v poloze 7,

obecného vzorce III

NHj O 1 T Γ (ni) X Ϊ f ch=A

v němž X je halogen a R¹ má shora uvedený význam, uvede v reakci s pyrrolidinovým derivátem obecného vzorce IV

R⁴

v němž R², R³, R⁴, R⁵ a R⁶ mají shora uvedené významy, načež se získaný produkt popřípadě hydrolyzuje, a získané deriváty se popřípadě převedou na jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.

Při druhém postupu přípravy derivátů podle vynálezu, obecného vzorce I, v němž všechny substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomerů nebo farmakologicky přijatelných solí, se derivát obecného vzorce V

(V) v němž X je halogen, uvede v reakci s pyrrolidinovým derivátem shora uvedeného obecného vzorce IV, v němž R², R³, R⁴, R⁵ a R⁶ mají shora uvedené významy, načež se získaný produkt popřípadě dechelatuje a získané deriváty se popřípadě převedou na jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.

A při třetím možném způsobu přípravy předmětných derivátů, obecného vzorce I, v němž R² je vodík a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomerů nebo farmakologicky přijatelných solí, se derivát uvedeného obecného vzorce I, v němž R² je Ci-Cď alkanoyl nebo C|-C4 alkanoyl halogenovaný 1 až 5 atomy halogenu, hydrolyzuje, nebo se na derivát obecného vzorce I, v němž R² je esterový zbytek karboxylové kyseliny, působí kyselinou benzyloxykarbonylovou nebo kyselinou C]-C4 alkyloxykarbonylovou, a vzniklý derivát se popřípadě převede na jeho stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.

-4CZ 286524 B6

Předmětem vynálezu jsou také deriváty kyseliny 8-methylchinolin-3-karboxylové obecného vzorce II

v němž R⁷ je C1-C4 alkyl, R⁸ je nitroskupina nebo aminoskupina a X je halogen, jako meziprodukty pro přípravu derivátů obecného vzorce I podle vynálezu.

Ještě jiným předmětem vynálezu je farmaceutický prostředek pro léčení infekčních onemocnění, který obsahuje účinné množství alespoň jednoho derivátu podle vynálezu, jeho stereoizomeru nebo farmakologicky přijatelné soli ve spojení s farmaceuticky přijatelnými aditivy.

Posledním předmětem tohoto vynálezu je pak použití derivátů podle vynálezu, jejich stereoizomerů nebo farmakologicky přijatelných solí pro léčení infekčních nemocí.

Ve výše uvedených obecných vzorcích I a II může být C1-C4 alkylovou skupinou, značící R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶ a R⁷, například methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sek. butyl nebo terč, butyl. R² může také značit C1-C4 alkanoyl nebo halogenovaný Cj-C₄ alkanoyl nebo zbytek esteru karboxylové kyseliny. Značí-li R² alkanoyl obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, pak to může být například formyl, acetyl, propanoyl, butyryl nebo trimethylacetyl. Když R² je halogenovaný alkanoyl, obsahuje tento 1 až 4 atomy uhlíku a 1 až 5 atomů halogenu tvořených fluorem, chlorem a bromem. Může to být například fluoracetylová skupina, difluoracetylová skupina, trifluoracetylová skupina, chloracetylová skupina, dichloracetylová skupina nebo trichloracetylová skupina, atd., když R² reprezentuje zbytek esteru karboxylové kyseliny, je to nižší alkyloxykarbonylová skupina nebo aryloxykarbonylová skupina, a může to být například benzyloxykarbonylová skupina, ethoxykarbonylová skupina, methoxykarbonylová skupina nebo terc.butoxykarbonylová skupina atd., halogen reprezentovaný symbolem X může být například atom fluoru, atom chloru nebo atom bromu atd.

Dále dva z R⁴, R⁵ a R⁶ dohromady tvoří skupinu -(CH2)n-, (kde n je 1 nebo 2 v obecném vzorci) například R⁴ a R⁵ spojené dohromady tvoří buď CH2- skupinu nebo skupinu -(CH₂)₂-, zatímco R⁵ a R⁶ spojené dohromady tvoří skupinu -CH₂- nebo skupinu -(CH₂)₂Sloučenina podle tohoto vynálezu, reprezentovaná obecným vzorcem I, uvedeným výše, může být převedena, je-li to žádoucí, na farmakologicky přijatelnou sůl, a soli, které se takto připraví, mohou být převedeny zpět (rekonvertovány) za vzniku volných sloučenin.

Farmakologicky přijatelné soli sloučeniny podle tohoto vynálezu, reprezentované obecným vzorcem I, mohou být kyselé adiční soli nebo zásadité adiční soli. Kyselými adičními solemi mohou být například soli minerálních kyselin, jako hydrochloridy, hydrobromidy, hydrojodidy, dusičnany, sírany nebo fosforečnany, atd., a soli organických kyselin, jako acetát, maleát, fumarát. citrát, oxalát, malát, methansulfonát, p-toluensulfonát, mandelát, 10-kafrsulfonát, vinan nebo mléčnan, atd. Zásaditými adičními solemi mohu být soli anorganické zásadité, jako jsou sodné, draselné, vápenaté, hořečnaté nebo amonné soli, anorganické alkalické soli, jako jsou ethanolaminové soli nebo Ν,Ν-dialkylethanolaminové soli, atd.

Sloučenina, reprezentovaná obecným vzorcem I, jež je výše uvedený, má jeden nebo více asymetrických uhlíkových atomů; molekula; stereoizomery nebo směsi stereoizomerů jsou začleněny do obsahu tohoto vynálezu.

Jako skutečné příklady derivátu kyseliny 5-amino-8-methyl-7-pyrrolidinylchinolin-3-karboxylové podle tohoto vynálezu lze uvést následující sloučeniny, ovšem tyto sloučeniny, dále uvedené, nevyčerpávají možnosti příkladů tohoto vynálezu.

(1) 5-Amino-7-(7-amino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l ,4-dihydro-8methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina (2) 5-Amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-7-(7-methylamino-5-azaspiro[2,4] hept-5-yl)-4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina (3) 5-Amino-l-cyklopropyl-7-(7-dimethylamino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)-6-fluor-l,4dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina (4) 5-Amino-7-(3-amino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4oxochinolin-3-karboxylová kyselina (5) 5-Amino-7-(3-amino-4-methyl-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina (6) 5-Amino-7-(3-amino—4,4-dimethyl-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro8-methyl—4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina (7) 5-Amino-7-(3-amino-3-methyl-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8methyI-4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina (8) 5-Amino-7-(3-amino—4-methylen-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro8-methyl—4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina (9) 5-Amino-7-(l-amino-3-azabicyklo[3,l,0]hex-3-yI)-l-cykIopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina (10) 5-Amino-l-cyklopropyl-7-(3-dimethylamino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l,4-dihydro-8methyl—4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina (11) 5-Amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-7-(3-methylamino-l-pyrrolidinyl)-4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina, jejich stereoizomery nebo jejich farmakologicky přijatelné soli.

Výše uvedené sloučeniny, sloučeniny (1), (4) a (5), jejich stereoizomery a jejich farmakologicky přijatelné soli lze zvláště doporučit.

Podle tohoto vynálezu se poskytují rozmanité způsoby přípravy nového derivátu kyseliny 5amino-8-methyl-7-pyrrolidinylchinolin-3-karboxylové, reprezentovaného obecným vzorcem I, včetně způsobů, vysvětlených níže. Následující způsoby nemají být chápány jako vyčerpávající.

Podle jednoho příkladu způsobu přípravy podle tohoto vynálezu může být sloučenina obecného vzorce I připravena tak, že v rozpouštědle reaguje derivát kyseliny 7-halogenované chinolin-3karboxylové shora uvedeného obecného vzorce III, kde R¹ a X mají stejný význam, jak je výše uvedeno, s pyrrolidinovým derivátem shora uvedeného obecného vzorce IV,

-6CZ 286524 B6 kde R², R³, R⁴, R⁵ a R⁶ mají stejný význam jak je výše uvedeno, za přítomnosti nebo za nepřítomnosti zásadité látky, a pokud je to nezbytné, následuje hydrolýza.

Při způsobu podle tohoto vynálezu lze použít jakékoli vhodné inertní rozpouštědlo. Takovým inertním rozpouštědlem může například být alkohol, jako je methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol nebo n-butanol, atd.; aprotická polární rozpouštědla, jako je acetonitril, N,Ndimethylformamid, N-methyl-2-pyrrolidon, dimethylsulfoxid nebo triamid hexamethylenfosforečný, atd.; aromatické uhlovodíky, jako je benzen nebo toluen, atd.; organické zásadité látky, jako je pyridin, pikolin, lutidin a kolidin, atd.; nebo směsi výše uvedených rozpouštědel, atd. Lze použít zásadité látky, jako je triethylamin, Ν,Ν-diisopropylethylamin, 1,8-diazabicyklo[5,4,0]-7-undecen, 1,2,2,6,6-pentamethylpiperidin, l,4-diazabicyklo[2,2,2]oktan, uhličitan sodný, uhličitan draselný, hydrogenuhličitan sodný nebo hydrogenuhličitan draselný, atd. Dále pokud se jako rozpouštědlo použije organická zásaditá látka, pak může být tato zásaditá látka použita místo výše uvedeného.

Reakce může být prováděna při teplotě v rozmezí od teploty při chlazení ledem do teploty, při níž se pod zpětným chladičem vaří rozpouštědlo, použité při reakci.

Hydrolýza může být prováděna známým způsobem za přítomnosti kyselé nebo zásadité látky. Při kyselé hydrolýze může být použita kyselina, jako je kyselina chlorovodíková nebo kyselina sírová, atd., při alkalické hydrolýze může být jako zásaditá látka použit hydroxid sodný, nebo hydroxid draselný, atd. Tyto kyselé nebo zásadité látky mohou být použity jako vodné roztoky, nebo alternativně, jako roztoky v organickém rozpouštědle, jako je methanol, ethanol, n-butanol, sek.butanol nebo terc.butanol, atd., jež mohou být popřípadě přidány s vodou. Hydrolýza může být prováděna při teplotě v rozmezí od teploty místnosti do teploty, při níž se pod zpětným chladičem vaří rozpouštědlo, použité pro reakci.

Podle druhého příkladu způsobu přípravy podle tohoto vynálezu se mohou sloučeniny obecného vzorce I, jež je výše uveden, připravovat tak, že v rozpouštědle reaguje derivát kyseliny orthoborité shora uvedeného obecného vzorce V, kde X má stejný význam, jak je výše definováno, s pyrrolidinovým derivátem výše uvedeného obecného vzorce IV, za přítomnosti nebo za nepřítomnosti zásadité látky, a pokud je to nezbytné, následuje dechelatační zpracování za použití protického polárního rozpouštědla za přítomnosti nebo za nepřítomnosti zásadité látky.

Při způsobu reagování sloučenin výše uvedeného obecného vzorce V, se sloučeninami výše uvedeného obecného vzorce IV, lze použít vhodného inertního rozpouštědla. Mezi raková inertní rozpouštědla patří například methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol nebo n-butanol, atd.; aprotická polární rozpouštědla, jako je acetonitril, Ν,Ν-dimethylformamid, N-methyl-2pyrrolidon, dimethylsulfoxid nebo triamid hexamethylfosforečný, atd.; aromatické uhlovodíky, jako je benzen nebo toluen, atd.; organické zásadité látky, jako je pyridin, pikolin, lutidin nebo kolidin, atd.; halogenované uhlovodíky, jako je dichlormethan, 1,2-dichlorethanu nebo chloroform, atd.; nebo směsi jakýchkoli z výše uvedených rozpouštědel, atd.

Lze použít zásadité látky, jako je triethylamin, Ν,Ν-diisopropylethylamin, 1,8-diazabicyklo[5,4,0]-7-undecen, 1,2,2,6,6-pentamethylpiperidin, l,4-diazabicyklo[2,2,2]oktan, uhličitan sodný, uhličitan draselný, hydrogenuhličitan sodný nebo hydrogenuhličitan draselný, atd. Kromě toho, pokud se organická zásaditá látka použije jako rozpouštědlo, lze tuto zásaditou látku použít místo těch, jež jsou uvedeny výše. Reakce může být prováděna při teplotě v rozmezí od teploty, jež odpovídá chlazení ledem, po teplotu, při níž se použité reakční rozpouštědlo vaří pod zpětným chladičem.

Při dechelataci může být použito protického polárního rozpouštědla, přičemž mezi taková rozpouštědla patří alkoholy, jako je methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol nebo n-butanol, atd.; voda; nebo směs výše uvedených rozpouštědel, nebo směs aprotického rozpouštědla, jako je acetonitril, N,N-dimethylformamid, N-methyl-2-pyrrolidon, dimethylsulfoxid, triamid hexamethylfosforečný, benzen, toluen, pyridin, pikolin, lutidin, kolidin, dichlormethan, 1,2— dichlorethan nebo chloroform, atd. a protického polárního rozpouštědla, jako je alkohol nebo voda, atd. Reakce se může provádět v rozmezí teploty od teploty, odpovídající chlazení ledem, po teplotu, při níž se použité reakční rozpouštědlo vaří pod zpětným chladičem.

Podle třetího příkladu způsobu přípravy podle tohoto vynálezu může být sloučenina podle tohoto vynálezu, reprezentovaná výše uvedeným obecným vzorcem I, kde R² je atom vodíku, hydrolyzováním sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I, kde R² je nižší alkanoylová skupina nebo halogenovaná nižší alkanoylová skupina, nebo působením na sloučeninu výše uvedeného obecného vzorce I, kde R² je zbytek esteru karboxylové kyseliny, kyselinou v rozpouštědle nebo bez rozpouštědla, za přítomnosti nebo bez přítomnosti kolektoru, zachycujícího kationty.

Hydrolýza může být prováděna některým známým způsobem za přítomnosti kyseliny nebo zásadité látky. Takovou kyselinou, použitou při kyselé hydrolýze může být kyselina chlorovodíková nebo kyselina sírová, atd.; při zásadité hydrolýze lze použít zásaditou látku, jako je hydroxid sodný nebo hydroxid draselný, atd. Tyto kyselé nebo zásadité látky mohou být použity jako vodné roztoky, nebo alternativně, jako roztoky v organických rozpouštědlech, jako je methanol, ethanol, n-butanol, sek.butanol nebo terc.butanol, atd., jež mohou být popřípadě přidávány s vodou. Hydrolýza může být prováděna při teplotě v rozmezí od teploty místnosti po teplotu, při níž se použité reakční rozpouštědlo vaří pod zpětným chladičem.

Zbytek esteru karboxylové kyseliny se může odstraňovat pomocí rozpouštědla, jako je kyselina octová, ethylacetát, dioxan, voda, methanol, ethanol nebo jejich směsi, atd.; jako kolektor, zachycující kationty, je možné použít například anisol, thioanisol, atd.; jako kyselinu lze použít kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu bromovodíkovou, kyselinu trifluoroctovou, atd. Odstraňování zbytku esteru karboxylové kyseliny lze provádět při teplotě, odpovídající teplotě chlazení ledem, až po teplotu, při níž se použité reakční rozpouštědlo vaří pod zpětným chladičem.

Podle čtvrtého příkladu způsobu přípravy podle tohoto vynálezu může být sloučenina podle tohoto vynálezu, reprezentovaná výše uvedeným obecným vzorcem I, kde R² a/nebo R³ jsou každý nižší alkylová skupina, reagováním sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce I, kde R² a/nebo R³ jsou každý atom vodíku, s halogenovaným nižším alkylem v rozpouštědle, za přítomnosti nebo za nepřítomnosti zásadité látky; nebo s aldehydovou sloučeninou následujícího obecného vzorce VI:

R⁹-CHO (VI) kde R⁹ je atom vodíku nebo nižší alkylová skupina, za přítomnosti kyseliny mravenčí.

Při tomto způsobu přípravy může být v případě použití halogenovaného nižšího alkylu použito takové rozpouštědlo, jako je Ν,Ν-dimethylformamid, aceton, ethanol, tetrahydrofuran, benzen nebo chloroform, atd., a zásaditá látka, jako je triethylamin nebo uhličitan draselný, atd. V případě použití aldehydové sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce VI, lze použít jako aldehyd formaldehyd, acetaldehyd nebo propionaldehyd, atd., přičemž je žádoucí použít formaldehyd jako vodný roztok (formalin); a v použití acetaldehydu nebo propionaldehydu je žádoucí použít jako rozpouštědlo nitrobenzen. Všechny výše uvedené reakce se mohou provádět v rozmezí teplot od teploty místnosti do teploty, při níž se použité reakční rozpouštědlo vaří pod zpětným chladičem.

-8CZ 286524 B6

Při způsobu přípravy podle tohoto vynálezu lze připravit výchozí látky, reprezentované výše uvedenými obecnými vzorci III a V, následujícími způsoby, jež jsou dále podrobněji popsány v dalším textu, v dále uvedených Příkladech.

Sloučeniny, uvedené dále, jež jsou reprezentovány obecným vzorcem VII, jsou známé sloučeniny z japonské dosud nepřezkoušené patentové přihlášky č. 62-215572.

CH₃ (vu) krok

C₂H₅OMgCH(C0₂C₂H₅)₂ krok nitra

(X)

(XI)

(XIV (Π))

krok S

H*

CO₂H krok 10

F₃BO(C₂H₅)₂

io kde X má stejný význam, jak již bylo definováno a Y je halogenová atom.

-9CZ 286524 B6

Krok 1) Nitrací 3-methyl-2,4,5-trihalogenované benzoové kyseliny obecného vzorce VII se získá sloučenina obecného vzorce VIII. V tomto kroku může být jako nitrační činidlo použita kyselina dusičná, dusičnan draselný nebo dusičnan amonným, atd.; a jako rozpouštědlo může být použita kyselina sírová, kyselina octová, acetanhydrid nebo trifluoracetanhydrid.

Krok 2) Na sloučeninu obecného vzorce VIII se působí chloračním činidlem, jako je dichlorid thionylu nebo oxalyl chlorid atd., bez rozpouštědla nebo v rozpouštědle, jako je chloroform, methylenchlorid nebo 1,2-dichlorethan, atd., za nepřítomnosti nebo za přítomnosti N,Ndimethylformamidu, přičemž se získá chlorid kyseliny obecného vzorce IX.

Krok 3) Sloučenina obecného vzorce IX a diethylethoxymagnéziummalonat, který se připraví odděleně s ethanolem, diethylmalonatem a hořčíkem, se kondenzují v rozpouštědle, jako je benzen nebo toluen, atd., a tím vzniká sloučenina obecného vzorce X.

Krok 4) Sloučenina obecného vzorce X se hydrolyzuje a dekarboxyluje zahříváním s vodou za přítomnosti kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, kyselin sírová nebo kyselina p-toluensulfonová, atd., a takto vzniká sloučenina obecného vzorce XI.

Krok 5) Sloučenina obecného vzorce XI se podrobí reakci s ethylorthoformiatem za přítomnosti nebo za nepřítomnosti Lewisovy kyseliny jako je chlorid zinku, atd., v acetanhydridu a tím vznikne sloučenina obecného vzorce XII.

Krok 6) Sloučenina obecného vzorce XII se podrobí reakci s cyklopropylaminem v rozpouštědle za vzniku sloučeniny obecného vzorce XIII. V tomto kroku lze použít jakékoli vhodné inertní rozpouštědlo, včetně alkoholů, jako je methanol nebo ethanol, atd.; halogenovaných uhlovodíků, jako je chloroform nebo 1,2-dichlorethan atd.; aromatických uhlovodíků, jako je benzen nebo toluen, atd.; nebo aprotických polárních rozpouštědel, jako je acetonitril nebo N,N-dimethylformamid, atd.

Krok 7) Sloučenina obecného vzorce XIII se podrobí cyklizaci se zásaditou látkou v rozpouštědle za přítomnosti nebo za nepřítomnosti katalyzátoru, a takto vznikne sloučenina obecného vzorce (XIV(II)). V tomto kroku může být jako zásaditá látka použit uhličitan draselný, hydrid sodný nebo terc.butoxid draselný, atd.; jako rozpouštědlo lze použít ethery, jako je dioxan nebo tetrahydrofuran, atd.; nebo aprotická polární rozpouštědla, jako je acetonitril nebo Ν,Ν-dimethylformamid, atd.; korunové ethery, jako je tetrabutylamonium bromid nebo benzyltriethylamonium bromid, atd., lze použít jako katalyzátor.

Krok 8) Sloučenina obecného vzorce (XIV(II)) se redukuje za pomoci katalyzátoru, jako je Raneyův nikl, uhlíkové palladium nebo oxid platiny, atd., nebo se redukuje za kyselých podmínek kovy jako je železo, cín nebo zinek, atd., a takto vznikne sloučenina obecného vzorce (IlI-a(II)). V tomto kroku lze použít jako rozpouštědlo kyselinu octovou, vodu, methanol, ethanol nebo Ν,Ν-dimethylformamid, atd.; jako kyselinu při redukování kovy lze použít kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu octovou nebo kyselinu bromovodíkovou, atd.

Krok 9) Sloučenina obecného vzorce (IlI-a(II)) se hydrolyzuje v rozpouštědle, jako je voda, kyselina octová, alkohol nebo vodný alkohol, atd., za kyselých podmínek, kyselinou chlorovodíkovou, kyselinou octovou nebo kyselinou bromovodíkovou, atd. a takto vzniká sloučenina obecného vzorce (III—b).

Krok 10) Sloučenina obecného vzorce (III—b) se podrobí reakci s trifluoridem etheratem boru v rozpouštědle, jako je ether, aceton nebo methylisobutylketon, atd., a takto vznikne sloučenina obecného vzorce V.

-10CZ 286524 B6

Farmaceutický prostředek, obsahující účinné množství jedné nebo více sloučenin podle nového derivátu kyseliny 5-amino-8-methyl-7-pyrrolidinylchinolin-3-karboxylové, jež je znázorněn obecným vzorcem I, jeho stereoizomer nebo jeho farmakologicky přijatelnou sůl, jež se připravují výše popsaným způsobem, může být ve formě kapslí, tablet, jemných granulí, granulí, prášku nebo sirupu, atd., pro orální podávání, nebo ve formě injekcí, čípků, očních kapek, oční masti, očního roztoku, nebo ve formě dermatologické dávky. Farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu může být připraven přidáváním farmaceuticky přijatelných aditiv k derivátu kyseliny 5-amino-8-methyl-7-pyrrolidinylchinolin-3-karboxylové, jejímu stereoizomeru nebo její farmakologicky přijatelné soli, a poté se přistupuje k obvyklým preparačním způsobům. Při přípravě farmaceutického prostředku, vhodného pro orální podávání nebo pro čípky, mohou být aditiva taková, jako ředidla, to mohou být laktosa, D-mannitol, kukuřičný škrob nebo krystalická celulóza, atd.; dezintegrátory jako karboxymethylcelulóza nebo kalcium-karboxymethylcelulóza, atd.; pojivá, jako hydroxypropylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza nebo polyvinylpyrrolidon atd.; mazadla jako magnézium-stearát nebo talek atd.; činidla pro povrchovou úpravu (povlaky, potahy) jako hydroxypropylmethylcelulóza, sacharosa nebo oxid titanu atd.; plastifikátory, jako polyethylenglykol, atd.; nebo zásadité látky jako polyethylenglykol nebo tuky, atd. Farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu, vhodný pro injekce, pro použití na oční kapky nebo na ušní kapky, může obsahovat nosiče, jako solubilizační činidlo nebo rozpouštědlo, například destilovanou vodu pro injekce, fyziologický roztok nebo propylenglykol, atd., což je vhodné pro vodné prostředky nebo pro prostředky pro přípravu vodného roztoku před použitím; činidla pro úpravu pH, jako anorganické a organické zásadité látky nebo kyseliny; izotonická činidla, jako chlorid sodný, glukosa nebo glycerin, atd.; nebo stabilizátor, atd. lze též použít. Pro přípravu farmaceutického prostředku, vhodného pro oční masti nebo pro dermatologickou medicínu, lze použít aditiva, jako vhodnou farmaceutickou ingredienci, například bílý petrolatum (typ bílé vazelíny), makrogol, glycerin, kapalný parafin, nebo tkanina, atd., jež se používá na masti, krémy, náplasti, atd.

Použití farmaceutického prostředku podle tohoto vynálezu v sobě zahrnuje podávání výše uvedeného prostředku orálně nebo parenterálně pacientům. Dávka tohoto farmaceutického prostředku dospělému pacientovi může být obvykle od 10 do 1 000 mg na den při orálním podávání nebo od 1 do 500 mg za den při parenterálním podávání, přičemž může být zvyšována nebo snižována v závislosti na stavu léčeného pacienta.

Farmakologický účinek

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou pečlivě 5-amidovaná, 8-methylovaná nebo 7-pyrrolidinylovaná analoga následujících referenčních sloučenin. Mimořádnost sloučenin podle tohoto vynálezu převyšuje očekávání, zakládající se na vědomostech v dané oblasti techniky.

Přihlašovatelé tohoto vynálezu zjistili, že simultánní vnesení aminových methylových a pyrrolidinylových skupin do polohy 5, 8, případně Ί chinolonového jádra redukuje chromozomální aberační účinek těchto sloučenin. Takovýto vliv těchto substituentů nebyl dotud znám a tedy ani očekáván na základě vědomostí v dané oblasti techniky, zejména pak na základě strukturální konverze referenčních sloučenin. To je ukázáno na následujících výsledcích chromozomálních aberačních testů (způsob použitého testování je popsán v následujícím).

Výsledky jsou shrnuty v Tabulkách 1 až 3.

Jako referenční sloučeniny byly použity následující sloučeniny.

-11CZ 286524 B6

. Referenční sloučenina A:	hydrochlorid kyseliny 7-((S)-7-amino-5-azaspiro[2,4]hept-5-y 1)-1 -cyklopropyl-6-fluor-1,4-d i hydro-4-oxochinolin-3-karboxylové (známá sloučenina, japonská nepřezkoumaná patentová přihláška č. 95176/1991)
. Referenční sloučenina B:	Hydrochlorid kyseliny 5-amino-7-((S)-7-amino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro4-oxochinolin-3-karboxylové (nová sloučenina)
. Referenční sloučenina C:	Kyselina 7-((S)-7-amino-5-azaspiro[2,4]-hept-5-yl)-lcyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová (známá sloučenina, japonská nepřezkoumaná patentová přihláška č. 95176/1991)
. Referenční sloučenina D:	kyselina 7-((S)-3-amino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl- 6-fluor-1,4-dihydro-4-oxoch inol in-3-karboxy lová (známá sloučenina, japonská nepřezkoumaná patentová přihláška č. 258855/1988)
. Referenční sloučenina E:	kyselina 5-amino-7-((S)-3-amino-l-pyrrolidinyl)-lcyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-4—oxochinolin-3karboxylová (nová sloučenina)
. Referenční sloučenina F:	Kyselina 7-((S)-3-amino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl- 6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karbo- xylová (nová sloučenina)
. Referenční sloučenina G:	Kyselina 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-4oxo-7-piperazinylchinolin-3-karboxylová (známá sloučenina, japonská nepřezkoumaná patentová přihláška č. 28157/1991
. Referenční sloučenina H:	Hydrochlorid kyseliny l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl—4-oxo-7-piperazinylchinolin-3-karboxylové (známá sloučenina, japonská nepřezkoumaná patentová přihláška č. 215572/1987)
. Referenční sloučenina I:	Hydrochlorid kyseliny 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluorl,4-dihydro-8-methyl-4-oxo-7-piperazinylchinolin-3karboxylové (známá sloučenina, japonská nepřezkoumaná patentová přihláška č. 215572/1987)

1) 5-Amidace (5-H -> 5-NH₂)

Tabulka 1 ukazuje následující:

Zkoumání relativních účinků referenčních sloučenin A a B ((-) -> (+)), D a E ((-) -A· (3+)) vede k domněnce, že zavedení aminové skupiny v poloze 5 chinolinového jádra nebude zvyšovat chromozomální aberační účinek.

Tedy se očekávalo, že sloučeniny (Příklady 10 a 12) podle tohoto vynálezu, považované za 5amidovaná analoga referenčních sloučenin C a F budou prokazovat silnější účinek, než

-12CZ 286524 B6 referenční sloučeniny C a F s vysokým chromozomálním aberačním účinkem. V protikladu s tímto očekáváním prokazují sloučeniny podle tohoto vynálezu (-). Takovéto výsledky nebyly v dané oblasti techniky očekávány.

2) 8-Methylace (8-H -> 8-Me)

Tabulka 2 ukazuje následující:

Na základě zkoumání relativních účinků referenčních sloučenin A a C ((+) -> (3+)), D a F ((-) —> (3+)), se očekávalo, že zavedením methylové skupiny do polohy 8 chinolinového jádra se zvýší chromozomální aberační účinek.

Tedy bylo možné očekávat, že sloučeniny (Příklady 10 a 12) podle tohoto vynálezu, považované za 8-methylovaná analoga referenčních sloučenin B a E budou prokazovat silnější účinek, než referenční sloučeniny B a E s chromozomálním aberačním účinkem. V protikladu s tímto očekáváním prokazují sloučeniny podle tohoto vynálezu (-). Takovéto výsledky nebyly v dané oblasti techniky očekávány.

3) 7-Pyrrolidinylace (7-Piperazinyl -> 7-Pyrrolidinyl)

Tabulka 3 ukazuje následující:

Na základě zkoumání relativních účinků referenčních sloučenin G a B ((-) -> (+)), H a C ((-) -> (3+)), G a E ((-) -> (3+)), H a F ((-) -> (3+)), se očekávalo, že nahrazením piperazinylové skupiny skupinou pyrrolidinylovou v poloze 7 chinolinového jádra by se zvýšil chromozomální aberační účinek.

Tedy se ukázalo, že sloučeniny (Příklady 10 a 12) podle tohoto vynálezu, považované za 7pyrrolidinylovaná analoga referenční sloučeniny I, budou prokazovat pozitivní údaje, a silnější účinek, než referenční sloučenina I. V protikladu s tímto očekáváním prokazují tyto sloučeniny podle tohoto vynálezu (-). Takovéto výsledky nebyly v dané oblasti techniky očekávány.

Tabulka 1: 5-Amidace (5-H -> 5-NH₂)

-13CZ 286524 B6

Testováná sloučenina	Struktura	ChromozoMální Aberace	Testováná sloučenina	Struktura	Chromozomální aberace
Z' Z2 Z3	Z* Z2 Z3
(Oblast tec	iniky známá)	(Oblast techniky známá)
A	H	N- H	(-)])	D	H H	(-)
B	NH2	H	(+)°	E	NH> Β- H	(3+)
(Tento vynález)	(Tento vynález)
C	H	“\ N- CH3	(3+)	F	Η Γ/Ν_ <*3	(3+)
Příklad 10	NH; H^X	\- t___/ CH3	(-)	Příklad 12	K N- NH2 1 / ch3	(-)

' Frekvence chromozomální aberace u CHL buněk, na než se působí 30 pg/ml testované sloučeniny. U ostatních jsou údaje, vztahující se působení 100 pg/ml testované sloučeniny.

(-: < 10 %, +: 10 až 20 %, 2+: 20 až 50 %, 3+: > 50 %)

Tabulka 2: 8-methylace (8-H -» 8-CH₃)

CCGH

Testováná sloučenina	Struktura	Chromozomální aberace	Testováná sloučenina	Struktura	ChromozoMální Aberace
Z1	z2 z3	Z1 Z2 Z3
(Oblast tec	miky známá)	(Oblast techniky známá)
A	H HjN^	N- H	+)	D	r> „ HjN^	(-)
C	H iVr	N- ch3	(3+)	F	H RN CH3	(3+)

-14CZ 286524 B6

Tabulka 2 - pokračování

Testováná sloučenina	Struktura	Chromozomální aberace	Testováná sloučenina	Struktura	ChromozoMální Aberace
Z1 Z2 Z3	Z1 Z2 Z3
B	NHj	N- H	(+)°	E	Γ/- H	(3+)
Příklad 10	NHj	N- _7 ch3	(-)	Příklad 12	\l- NHj 1___f CH3	(-)

^!) Frekvence chromozomální aberace u CHL buněk, na které působí 30 pg/ml testované sloučeniny. U ostatních se údaje vztahují na působení 100 pg/ml testované sloučeniny.

(-: < 10 %, +: 10 až 20 %, 2+: 20 až 50 %, 3+: > 50 %)

Tabulka 3: 7-pyrrolidinylace (7-piperazinyl -> 7-pyrrolidinyl)

Testovaná sloučenina (Oblast tec

Struktura

Z¹ Z² Z³ miky známá)

CCOH

Chromozomální aberace (-) ω^υ (-) (3+)

Testovaná sloučenina

Struktura

Z¹ Z² Z³ (Oblast techniky známá)

NHo / \ ⁷ HN NH / \ CH₃

HN Nv_/

Chromozomální aberace (-)

3+) (-) (3+) (Tento vynález) (Tento vynález) ¹

CH₃

Příklad (-) (-)

Příklad (-) (-)

I

-15CZ 286524 B6 ⁰ Frekvence chromozomální aberace u CHL buněk, na které působí 30 pg/ml testované sloučeniny. U ostatních se údaje vztahují na působení 100 pg/ml testované sloučeniny. (-: < 10 %, +: 10 až 20 %, 2+: 20 až 50 %, 3+: > 50 %)

Speciální charakteristiky sloučenin podle tohoto vynálezu

Vynikající účinky sloučenin podle tohoto vynálezu jsou shrnuty v Tabulce 4 až 6, kde jsou ukázány výsledky testů následujících vlastností: antibakteriální účinnost vůči laboratorním 10 standardním kmenům a klinicky izolovaným kmenům současně způsobujících infekční onemocnění, chromozomální aberace, mikronukleový test, fototoxicita, pozorování konvulzí a distribuce tkání. Jako referenční sloučenina se použil ciprofloxacin (The Měrek Index, 11. vydání, č. 2315).

1. Antibakteriální účinnost

Minimální inhibiční koncentrace (MIC) testovaných sloučenin se stanovují agarovým zřeďovacím způsobem, jak je popsán ve standardní metodě Japan Society of Chemotherapy (Chemotherapy (Tokyo), 29,1, 76 (1981)). Byly použity následující kmeny:

Staphylococcus aureus (S. aureus)

Enterococcus faecalis (E. faecalis)

Escherichia coli (E. coli)

Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae)

Serratia marcescens (S. marcescens)

Enterobacter cloacae (E. cloacae)

Acinetobacter calcoaceticus (A. calcoaceticus)

Výsledky ukazuje Tabulka 4-A a 4-B.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu prokazují vynikající antibakteriální účinnost vzhledem k izolovaným kmenům, a dosažené výsledky jsou vynikající v porovnání s uvedenou referenční sloučeninou (ciprofloxacin). Zejména je významný rozdíl v účinnosti vůči gram-pozitivním bakteriím.

Tabulka 4-A: Antibakteriální účinnost (laboratorní standardní kmeny, MIC pg/ml)

Kmen	Gram	Příklad 10	Příklad 12	Příklad 14	Příklad 16	Příklad 18	Ciprofloxacin
S. aureus FDA 209P JC-1	+	0,025	0,025	0,012	0,025	0,025	0,20
E. coli NIHL JC-2	—	0,012	0,025	0,012	0,05	0,025	0,025
K. pneumoniae PCI-602	-	0,003	0,006	0,006	0,003	0,006	0,012
S. marcescens LAM 1184	-	0,10	0,10	0,20	0,39	0,20	0,10
E. cloacae 963	-	0,025	0,025	0,05	0,05	0,05	0,05

-16CZ 286524 B6

Tabulka 4-B: Antibakteriální účinnost (klinicky izolované kmeny, MIC pg/ml)

Kmen	Gram	Příklad 10	Příklad 12	Příklad 14	Příklad 16	Příklad 18	Ciprofloxacin
S.aureus HPC527	+	0,025	0,025	0,025	0,025	0,05	0,39
S.aureus HPC308	+	0,39	0,78	0,39	0,39	0,78	25
S.aureus HPC292	+	1,56	1,56	1,56	1,56	6,25	50
E.faecalis HPC984	+	0,10	0,10	0,20	0,20	0,20	0,39
E.faecalis HPC948	+	0,39	0,39	0,39	0,39	0,78	3,13
E.faecalis HPC975	+	1,56	1,56	1,56	1,56	3,13	50
E.cloacae HNR1939	-	0,10	0,20	0,20	0,39	0,39	0,78
E.cloacae HNR1946	-	0,20	0,20	0,20	0,39	0,39	0,78
E.cloacae HNR1941	-	3,13	6,25	6,25	12,5	12,5	25
A.calcoaceticus HNR916	-	0,012	0,05	0,025	0,025	0,05	0,39
A.calcoaceticus HNR939	-	0,20	0,78	0,20	0,39	0,78	6,25
A.calcoaceticus HNR904	-	1,56	12,5	3,13	6,25	12,5	100
K.pneumoniae HNR858	-	0,20	0,20	0,20	0,39	0,39	0,78
K.pneumoniae HNR869	-	1,56	1,56	1,56	3,13	3,13	3,13
K.pneumoniae HNR828	-	3,13	3,13	3,13	12,5	6,25	12,5
S.marcescens HNR1544	-	0,05	0,05	0,05	0,10	0,10	0,10
S.marcescens HNR1792	-	3,13	1,56	3,13	6,25	3,13	6,25
S.marcescens HNR1767	-	6,25	12,5	6,25	25	25	50

2. Testování chromozomální aberace

Testování chromozomální aberace se provádí s plícemi čínského křečka, přesněji splicní buněčnou linií (CHL - lung cell line). Pro pozitivní porovnávací pokus se použije 2-(2-furyl)3-(5-nitro-2-furyl)akrylamid. Buňky, na které se působilo testovanými sloučeninami, se kultivují po dobu 6 hodin při teplotě 37 °C v 5 % CCT-vlhčeným vzduchem. Následujících 6 hodin se buňky zpracovávají a promývají. K promytým buňkám se přidá čerstvé médium a buňky se kultivují po dalších 18 hodin. Ke kulturám se přidá kolcemid (colcemide) 2 hodiny před fixací chromozómového preparátu, aby se zachytily metafázované buňky. Frekvence chromozomální aberace CHL buněk zpracovaných se 100 pg/ml testované sloučeniny je ukázána v Tabulce 5-A.

Údaje sloučenin podle tohoto vynálezu byly všechny (-).

3. Mikronukleový test

Pro tento test se použijí samečkové BDF 1 myší ve věku devět týdnů. Testované sloučeniny se podávají injekčně intraperitoneálně v dávce 250 mg/kg. Po 24 hodinách se myši usmrtí a ze stehenní kosti se vybere kostní dřeň. Kostní dřeň se rozetře na podložním sklíčku s methanolem a zbarví se pomocí činidla Giemsa podle obvyklého způsobu. U každého zvířete se pod mikroskopem stanovuje počet mikronukleovaných polychromatických erytrocytů (MNPCEs) na 1 000 polychromatických erytrocytů (PCEs). Pro pozitivní porovnávací pokus se použije cyklofosfamid. Výskyt MNPCEs (udává se v procentech, stanovených z počtu MNPCEs na 1 000 PCEs) je uveden v Tabulce 5-B.

U sloučenin podle tohoto vynálezu nebylo zjištěno, že by vyvolávaly nějaký statisticky významný vzestup výskytu MNPCEs v porovnání se srovnávacím pokusem (fyziologický roztok).

-17CZ 286524 B6

4. Fototoxicita

Samečkům morčat Hartley se intravenózně podávají testované sloučeniny v dávkování 10 mg/kg a bezprostředně poté jsou zády vystaveni působení UVA po dobu 90 minut. Po působení UVA záření po dobu 24 hodin se zjišťují ve vystavených zadních částech těl erytrazmy. Počet morčat s erytrazmy uvádí Tabulka 5-C.

Žádná ze sloučenin podle tohoto vynálezu neprokazuje fototoxicitu.

5. Konvulze

1) Intraperitoneální (i.p.) podávání

Hladovějícím samečkům ICR myší ve věku pěti týdnů se orálně podává fenbufen v dávkování 100 mg/kg. Třicet minut později jim jsou injektovány intraperitoneálně testované sloučeniny v dávkování 100 mg/kg. Potom se zaznamenává počátek konvulzí. Počet myší s konvulzemi ukazuje Tabulka 5-C.

Podle údajů nevyvolává žádná ze sloučenin podle tohoto vynálezu konvulze.

2) Intracerebroventrikulámí (i.c.v.) podávání

Samečkům krys Wistar o hmotnosti 180 až 220 g byla dána narkóza pentobarbitalem sodným (45 mg/kg, i.p.) a byli fixováni ve sterotaxické aparatuře. Pro umožnění intracerebroventikulámí injekce byla každé kryse implantována ocelová zaváděcí kanyla o průměru 0,6 mm, s umístěním 1,5 mm nad levou postranní mozkovou komorou (A. 6,2, R: 1,0, H: + 1,0) podle atlasu De Groota (1959). Zaváděcí kanyla se fixuje dentálním cementem k lebce a uzavírá se ocelovou jehlou o průměru 0,3 mm. Pro prevenci před infekcí se krysám dává nitrosvalově injekce 10 000 jednotek draselného penicilinu G. Krysy jsou ponechány několik dní po operačním zásahu na zotavení.

Pro měření konvulzí se 30 minut po intraperitoneálním injekčním podání 50 mg/kg fenbufenu, podává 20 pg testované sloučeniny skrze ocelovou kanylu o průměru 0,3 mm, a to pomocí polyethylenového katétru, který je o 1,5 mm delší než zaváděcí kanyla, aby mohl být zaveden do pravé mozkové komory (H: + 1,0). Pro každou studii byly testovány tři krysy a nepřítomnost nebo přítomnost projevu konvulzí se pozorovala alespoň čtyři hodiny. Poloha intracerebroventikulámí kanyly byla potvrzena injekcí 10 pg 1 % Evansovy modři, jež byla následně aplikována po krájení tkáně mozku každé krysy, použité pro daný pokus.

Počet krys s konvulzemi uvádí Tabulka 5-C. Žádná ze sloučenin podle tohoto vynálezu nevyvolávala konvulze.

(Odkazy)

De Groot J. (1959). The rat forebrain in stereotaxic coordinates. Ver. Kon. Nd. Acad. Wet., Natuurkunde 52: 1 až 40.

-18CZ 286524 B6

Tabulka 5-A: Testování chromozomální aberace

Testovaná sloučenina	Frekvence chromozomální aberace1)
Příklad 10	(-)
Příklad 12	(-)
Příklad 14	(-)
Příklad 16	(-)
Příklad 18	(-)
Ciprofloxacin	(-)

Frekvence chromozomální aberace u CHL buněk se 100 pg/ml testované sloučeniny. (-: < 10 %, +: 10-20 %, 2+: 20-50 %, 3+: > 50%)

Tabulka 5-B: Mikronukleový test

Testovaná	Výskyt
sloučenina	MNPCEs') (%)
Fyziol. roztok	0,18
Příklad 10	0,18
Příklad 12	0,16
Cyklofosfamid	2,9

^Procento počtu MNPCEs na 1 000 PCEs.

Tabulka 5-C: Fototoxicita, konvulze

Testovaná sloučenina	Fototoxicita')	Konvulze2)
i.p	i.c.v.
Příklad 10	0/5	0/6	0/3
Příklad 12	0/5	0/6	0/3
Příklad 14	0/5	0/6	0/3
Ciprofloxacin	3/5	3/6	3/3

’ Počet zvířat s erytrazmy/počet zvířat testovaných.

²⁾ Počet zvířat s konvulzemi/počet testovaných zvířat.

6. Distribuce tkání

K pokusům se použijí samečkové krys Sprague-Dawley ve věku sedmi týdnů. Testované sloučeniny se podávají orálně v dávkování 5 mg/kg krysám, které přes noc hladověly. V intervalech 0,083, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 12 a 24 hodin po podávání byla krysám dána narkóza pomocí etheru a z břišní aorty se odebíraly vzorky krve. Ze vzorků krve se každý den získávaly vzorky krevní plazmy. Po odebrání krve byly odstraněny plíce a ledviny a homogenovány s 4 ml a 7 ml lM-HCl-citrátovým tlumivým roztokem (pH 4,0).

Koncentrace testovaných sloučenin v biologických tekutinách (v každé tkáni byla testována plazma) se zjišťovala způsobem HPLC. K 0,5 ml plazmy nebo 0,5 g každého homogenátů tkáně se přidala kyselina chlorovodíková a ether. Směs se protřepala a odstřeďovala. Po odstranění organické fáze se k vodné fázi přidal vodný roztok NaOH, fosfátový tlumivý roztok (pH 7,0) a chloroform. Směs se protřepala a pak odstředila. Organická fáze se koncentrovala. Zbytek se

-19CZ 286524 B6 rozpustil a podrobil HPLC. Koncentrace každé testované sloučeniny v každé biologické tekutině ukazuje při T_max (doba maximální koncentrace v plazmě) Tabulka 6.

Kolona

Mobilní fáze

Rychlost průtoku Injekční objem Detegováno UV při

TSK gel-ODS 80™ pH 2,5 0,03M fosfátový tlumivý roztok:CH₃CN(3:l) 1,2 ml/min

100 μΐ

308 nm

Koncentrace sloučenin podle tohoto vynálezu v plících a v ledvinách, léčebných orgánech sterčovitými buňkami, byly 16krát a 7,4krát vyšší než u těchže orgánů s případným ciprofloxacinem. Dále koncentrační poměry (tkáň/plazma) sloučenin podle tohoto vynálezu v plících a v ledvinách byly také 8,6krát a 4,2krát vyšší než v těchže orgánech v případě ciprofloxacinu. Údaje indikují, že sloučeniny podle tohoto vynálezu mají dobrou distribuci tkání.

Tabulka 6: Distribuce tkání

Testovaná sloučenina	T 1) 1 max (h)	Koncentrace v biologických tekutinách (pg/ml, pg/g) 2)
plazma	plíce	ledviny
Příklad 10 a	0,25	0,58	4,0 (6,9)	8,5(15)
Ciprofloxacin b	I	0,32	0,25 (0,8)	1,15(3,6)
a/b	-	-	16(8,6)	7,4 (4,2)

^} Doba maximální koncentrace testované sloučeniny v plazmě.

²⁾ Koncentrace testované sloučeniny v každé biologické tekutině při T_raax. Každá hodnota v závorkách je koncentrační poměr (tkáň/plazma). Hodnoty ciprofloxacinu jsou citovány z brožury o ciprofloxacinu ze sympózia New Drug Symposium I (the 32^nd Generál Meeting of West Japanese Blanch of Japan Society of Chemotherapy).

Porovnání s analogickými sloučeninami

Vynikající účinky sloučenin podle tohoto vynálezu byly porovnány s účinky analogických sloučenin, které mají pouze jeden odlišný substituent mezi 5-, 7- a 8-substituenty vůči sloučeninám podle tohoto vynálezu. Porovnávané údaje jsou uvedeny v Tabulce 7 a 8.

Veškerá data o antibakteriální účinnosti, chromozomální aberaci, fototoxicitě a vyvolání konvulzí, byla získána podle stejných způsobů testování, jako je popsáno výše. Mezi nimi jsou data o antibakteriální účinnosti v Tabulce 7 a 8 jsou MICs (minimální inhibiční koncentrace) hodnoty proti klinicky izolovaným kmenům (HPC527, HPC308 a HPC292) S.aureus, která jsou 35 reprezentativní gram-pozitivní bakterie.

Tabulka 7 uvádí následující:

Sloučenina (Příklad 10) podle tohoto vynálezu prokazuje vyšší antibakteriální účinnost, než 40 analogická referenční sloučenina B (která má pouze jeden odlišný substituent v poloze 8, lišící se od sloučeniny podle tohoto vynálezu). Sloučeniny podle tohoto vynálezu neprokazují toxicitu (chromozomální aberaci a fototoxicitu) pozorovanou u referenční sloučeniny B.

Sloučenina (Příklad 10) podle tohoto vynálezu prokazuje vynikající antibakteriální účinnost i 45 sílu jako analogická referenční sloučenina C (která má pouze jeden odlišný substituent v poloze 5, lišící se od sloučeniny podle tohoto vynálezu) a také neprokazuje toxicitu (chromozomální aberace) pozorovanou u referenční sloučeniny C. Ačkoli referenční sloučenina C neprokazuje

-20CZ 286524 B6 žádnou fototoxicitu podobně jako je tomu u sloučeniny podle tohoto vynálezu, způsobuje podávání referenční sloučeniny to, že jeden křeček z pěti zemřel. Tyto výsledky indikují, že referenční sloučenina C má vyšší toxicitu než sloučenina podle tohoto vynálezu.

Sloučenina (Příklad 10) podle tohoto vynálezu prokazuje vyšší antibakteriální účinnost než analogická referenční sloučenina I (která má pouze jeden odlišný substituent v poloze 7, lišící se od sloučeniny podle tohoto vynálezu) a také neprokazuje toxicitu (konvulze) pozorovanou u referenční sloučeniny I.

Toto bylo také prezentováno na ICAAC (31. konference Interscience Conference on Microbial Agents and Chemotherapy, Chicago, Illionois, Abstract No. 1507 (1991)), týkající se chromozomální aberační účinnosti referenční sloučeniny C.

Tabulka 8 uvádí následující:

Sloučenina (Příklad 12) podle tohoto vynálezu prokazuje mnohem vyšší antibakteriální účinnost, než analogická referenční sloučenina E (která má pouze jeden odlišný substituent v poloze 8, lišící se od sloučeniny podle tohoto vynálezu), a také neprokazuje toxicitu (chromozomální aberace), pozorovanou u referenční sloučeniny E. Referenční sloučenina E neprokazuje žádnou fototoxicitu jako je tomu u sloučeniny podle tohoto vynálezu také, avšak po podávání referenční sloučeniny E se stalo, že dva z pěti křečků zemřeli. Tyto výsledky indikují, že referenční sloučenina E má mnohem vyšší toxicitu než sloučenina podle tohoto vynálezu.

Sloučenina (Příklad 12) podle tohoto vynálezu prokazuje vyšší antibakteriální účinnost, než analogická referenční sloučenina F (která má pouze jeden odlišný substituent v poloze 5, lišící se od sloučeniny podle tohoto vynálezu), a také neprokazuje toxicitu (chromozomální aberace a fototoxicita), pozorovanou u referenční sloučeniny F.

Sloučenina (Příklad 12) podle tohoto vynálezu prokazuje mnohem vyšší antibakteriální účinnost, než analogická referenční sloučenina I (která má pouze jeden odlišný substituent v poloze 7, lišící se od sloučeniny podle tohoto vynálezu), a také neprokazuje toxicitu (konvulze), pozorovanou u referenční sloučeniny I.

Toxicita (například chromozomální aberace, fototoxicita a konvulze), způsobovaná některými antibakteriálními činidly s chinolonovými jádry, přináší při klinickém používání takových činidel velmi vážné problémy. Sloučeniny podle tohoto vynálezu řeší takovéto problémy a proto mají velký význam jako nová generace antibakteriálních činidel.

Tabulka 7: Porovnávací data 1

Z

O

CCOH

-21CZ 286524 B6

Testovaná sloucenina	Struktura	Antibakteriální účinnost	Chromozomální aberace	Fototoxicita	Konvulze
Z1	z2 z3	i.p.	i.c.v.
Příklad 10	NH; H>N'		~Λ N- __/ CHj	0,025 0,39 0,56	(-)	0/5	0/6	0/3
B	NH; H^T		N- H	0,025 0,78 3,13	(+)»	3/5	0/6	-
C	H		N- CH3	0,025 0,39 1,56	(3+)	0/4 (jedno morče zemřelo)	0/6	-
I	<x3 HN N-	0,10 6,25 25	(-)	0/5	0/62)	3/3

Frekvence chromozomální aberace u CHL buněk, na které působí 30 pg/ml testované sloučeniny. Všechny ostatní buňky zahynuly po působení 100 pg/ml testovaných sloučenin, frekvence chromozomální aberace nemohla být pozorována.

Všechny myši, použité pro testování, měly příznak sedativa, považovaný za prekurzor konvulzí.

Antibakteriální účinnost: MIC (pg/ml)testované sloučeniny proti 3 kmenům S.aureus HPC527, HPC308 a HPC292.

(homí hodnoty: HPC527, střední hodnoty: HPC308, dolní hodnoty: HPC292) Chromozomální aberace: Frekvence chromozomální aberace u CHL buněk, na něž působí 100 pg/ml testované sloučeniny.

(-: < 10 %, +: 10 až 20 %, 2+: 20 až 50 %, 3+: > 50 %)

Fototoxicita: Morče, 10 mg/kg, i.v.

Konvulze: Myš, 100 mg/kg, i.p., a krysa, 20 pg, i.c.v.

Tabulka 8: Porovnávací data 2

-22CZ 286524 B6

Testováná sloučenina	Struktura	Antibakteriální účinnost	Chromozomální aberace	Fototoxicita	Konvulze
Z1 Z2 Z3	i.p.	i.c.v
Příklad 12	P- NHj 1___f CH,	0,025 0,78	(-)	0/5	0/6	0/3
	p	1,56
E	Γ/- H	0,05 3,13	(3+)	0/3 (dvě morčata	0/6	- .
		50		zemřela)
F	H D- CH3	0,05 0,78 3,13	(3+)	4/5	0/6	-
I	F~\ ch3	0,10			0/6°
	HN^___ N-	6,25	(-)	0/5	3/3
		25

⁰ Všechny myši, použité pro testování, měly příznak sedativa, považovaný za prekurzor konvulzí.

Antibakteriální účinnost: MIC (pg/ml) testované sloučeniny proti 3 kmenům S.aureus HPC527, HPC308 a HPC292.

(horní hodnoty: HPC527, střední hodnoty: HPC308, dolní hodnoty: HPC292) Chromozomální aberace: Frekvence chromozomální aberace u CHL buněk, na něž působí 100 pg/ml testované sloučeniny.

(-: < 10 %, +: 10 až 20 %, 2+: 20 až 50 %, 3+: > 50 %)

Fototoxicita: Morče, 10 mg/kg, i.v.

Konvulze: Myš, 100 mg/kg, i.p., a kiysa, 20 pg i.c.v.

Příklady provedení vynálezu

Dále bude tento vynález ilustrován následujícími Příklady, jejichž účelem je pouze vynález blíže vysvětlit, avšak žádným způsobem neomezují jeho obsah ani rozsah.

Příklad 1

Kyselina 2,4,5-trifluor-3-methyl-6-nitrobenzoová

Ke směsi 370 ml koncentrované kyseliny sírové a 61,2 ml 70%ní kyseliny dusičné se přidá 36,6 g kyseliny 2,4,5-trifluor-3-methylbenzoové a to po částech při teplotě 55 až 70 °C a za míchání. Po dvou hodinách při teplotě místnosti se reakční směs nalije do ledu a extrahuje se isopropyletherem. Spojené extrakty se promyjí solankou, suší a odpaří se, čímž se získá 30,6 žádané sloučeniny jako žluté krystaly.

NMR spektrum δ (CD₃OD) ppm: 2,29 (3H, t, J = 2 Hz)

Příklad 2

Diethyl (2,4,5-trifluor-3-methyl-6-nitrobenzoyl)malonát

-23CZ 286524 B6

Suspenze 27,0 g kyseliny 2,4,5-trifluor-3-methyl-6-nitrobenzoové, 19,5 ml oxalylchloridu a několika kapek Ν,Ν-dimethylformamidu ve 270 ml methylenchloridu se míchá při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Reakční směs po odpaření poskytne 2,4,5-trifluor-3-methyl-6nitrobenzoylchlorid. Ručně se oddělí, k suspenzi se přidá 3,08 g hořčíku a několik kapek tetrachlormethanu v 6,4 ml absolutního ethanolu, roztok 19,2 ml diethylmalonátu ve 12 ml absolutního ethanolu po kapkách při teplotě 50 °C a poté se míchá za stejné teploty po dobu 1,5 hodin. Reakční směs se odpaří, rozpustí se v toluenu a potom se opět odpaří. K roztoku tohoto zbytku ve 30 ml toluenu se za chlazení ledem přikapává roztok 2,4,5-trifluor-3-methyl6-nitrobenzoylchloridu, připraveného výše uvedeným způsobem, ve 30 ml toluenu. Po dvou hodinách při teplotě místnosti se k reakční směsi přidá 100 ml 5%ní kyseliny sírové a výsledná reakční směs se extrahuje diethyletherem. Po promytí spojených organických extraktů solankou, vysušení a odpaření se získá 47,3 g žádané sloučeniny jako hnědého oleje.

NMR spektrum δ (CDC1₃) ppm: 1,12 (3H, t, J = 7,5 Hz), 1,38 (3H, t, J = 7,5 Hz), 2,33 (3H, t, J = 2 Hz), 3,36, 14,18 (celek 1H, každý s), 4,07 (2H, q, J = 7,5 Hz), 4,38 (2H, q, J = 7,5 Hz).

Příklad 3

Ethyl (2,4,5-trifluor-3-methyl-6-nitrobenzoyl)acetát

Suspenze 45,3g diethyl (2,4,5-trifluor-3-methyl-6-nitrobenzoyl)malonátu a 30 mg kyseliny ptoluensulfonové ve 120 ml vody se vaří pod zpětným chladičem po dobu 50 minut. Po ochlazení se reakční směs extrahuje diethyletherem. Spojené extrakty se promyjí solankou, po sušení a odpaření se získá 34,2 g žádané sloučeniny jako hnědého oleje.

NMR spektrum δ (CHC1₃ ppm: 1,26, 1,34 (celek 3H, každý t, J = 7 Hz), 2,33, 2,35 (celek 3H, každý t, J = 2,5Hz), 3,91, 5,48, 12,34 (celek 2H, každý s), 4,20, 4,28 (celek 2H, každý q, J = 7 Hz).

Příklad 4

Ethyl 3-cyklopropylamino-2-(2,4,5-trifluor-3-methyl-6-nitrobenzoyl)akrylát

Směs 31,9g ethyl (2,4,5-trifluor-3-methyl-6-nitrobenzoyl)acetátu, 26,2 ml ethyl orthoformátu a 23,8 ml acetanhydridu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Po odpaření reakční směsi se získá 46,2 g ethyl 3-ethoxy-2-(2,4,5-trifluor-3-methyl-6-nitrobenzoyl)akrylátu jako hnědého oleje. K roztoku 45,4 g této sloučeniny ve 328 g ethanolu se přikapává 9,6 ml cyklopropylaminu za chlazení ledem a za míchání. Po třiceti minutách za teploty místnosti se reakční směs odpaří a zbytek se purifikuje kolonovou chromatografíi (silikagel, nhexan:methylenchlorid v poměru 1 : 1), přičemž se získá 28,8 g žádané sloučeniny jako žluté krystaly. Rekrystalizací z isopropyletheru se získají žluté jehličky, 1.1. 115 až 115,5 °C.

Analýza pro Ci₆Hi5F₃N₂O₅

Vypočteno (%): C 51,62; H 4,06; N 7,52

Nalezeno (%): C 51,57; H 3,92; N 7,53

Příklad 5

Ethyl l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-5-nitro-4-oxochinolin-3-karboxylát

K roztoku 27,1 g ethyl 3-cyklopropylamino-2-(2,4,5-trifluor-3-methyl-6-nitrobenzoyl)akrylátu ve 270 ml 1,4-dioxanu se po dílech přidává 3,2 g hydridu sodného (60%ní disperze

-24CZ 286524 B6 v minerálním oleji) a míchá se po dobu jedné hodiny při teplotě místnosti. K této reakční směsi se přidá 300 ml vody a vyloučené krystaly se oddělí filtrací, přičemž se získá 19,5 g žádané sloučeniny jako bezbarvé krystaly, které se rekrystalují z Ν,Ν-dimethylformamidu za získání bezbarvých jehliček, 1.1. 260 až 263 °C.

Analýza pro Ci₆H]4F₂N₂O₅

Vypočteno (%): C 54,55; H 4,01; N 7,95 nalezeno (%): C 54,51; H 4,00; N 7,90

Příklad 6

Ethyl 5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylát

Suspenze 18,5 g ethyl l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-5-nitro-4-oxochinolin-3-karboxylátu, 10 ml Raneyova niklu a 300 ml kyseliny octové se hydrogenuje za teploty místnosti po dobu 1,5 hodiny za atmosférického tlaku. Katalyzátor se odfiltruje a výsledný filtrát se odpaří. K tomuto zbytku se přidá 150 ml 10%ního vodného roztoku uhličitanu draselného a směs se pak extrahuje methylenchloridem. Spojené organické extrakty se suší a odpaří se, přičemž se získá 14,8 g žádané sloučeniny jako světležluté krystaly, které se rekrystalují z acetonitrilu, čímž se získají světležluté jehličky, 1.1. 182,5 až 185,5 °C.

Analýza pro Ci6H|₆F₂N₂O3

Vypočteno (%): C 59,62; H 5,00; N 8,69

Nalezeno (%): C 59,74; H 5,08; N 8,60

Příklad Ί

Kyselina 5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl—4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs 14,8 g ethyl 5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin3-karboxylátu, 37,2 ml kyseliny chlorovodíkové a 150 ml 90%ní kyseliny octové se vaří pod zpětným chladičem po dobu 2 hodiny. Po ochlazení se vyloučené krystaly oddělí filtrací a promyjí se vodou; získá se 11,8 g žádané sloučeniny jako žluté krystaly. Krystaly se následně rekrystalují z Ν,Ν-dimethylformamidu, přičemž se získají žluté krystaly, 1.1. 290,5 °C (rozklad).

Analýza pro C]4H₁₂F₂N₂O3

Vypočteno (%): C 57,15; H 4,11; N 9,52

Nalezeno (%): C 57,10; H 4,03; N 9,53

Příklad 8 [5-Amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4—dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylátO³,O⁴]difluorboron (5-Amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová kyselina BF₂ chelát)

Směs 5,00 g 5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3karboxylové kyseliny, 3,13 ml trifluoridetherátu boritého a 75 ml methylisobutylketonu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Po ochlazení se vyloučené krystaly oddělí filtrací a promyjí se diethyletherem, přičemž se získá 5,38 g žádané sloučeniny jako žluté kiystaly.

-25CZ 286524 B6

NMR spektrum δ (DMSO-d₆) ppm: 1,08-1,15 (2H, m), 1,21-1,30 (2H, m), 2,67 (3H, d, J = 2,5 Hz), 4,52 - 4,59 (1H, m), 7,28 (2H, br-s), 9,10 (1H, s).

Příklad 9

Kyselina 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl—4-oxo-7-((S)-7-trifluoracetylamino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)chinolin-3-karboxylová kyselina

Směs 2,13 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3karboxylát-O³,O⁴]difluorboronu, 2,28 g (S)-7-trifluoracetylamino-5-azaspiro[2,4]heptanhydrochloridu ([α]ο²⁰ - 54,1° (c = 0,l, H₂O)), 3,12 ml triethylaminu a 8,5 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 4 dnů. K této reakční směsi se za chlazení ledem přidá voda. Výsledná směs se okyselí 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 3, extrahuje se methylenchloridem a spojené organické extrakty se promyjí solankou, suší se nad síranem sodným a po odpaření se získá 2,04 g tmavě hnědých krystalů. Tyto krystaly se purifikují pomocí kolonové chromatografíe (silikagel, methylenchlorid : methanol (50 : 1 až 10 : 1)), a získá se 0,38 g žlutých krystalů. Směs 0,38 g těchto krystalů, 0,38 ml triethylaminu a 8 ml methanolu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 9 hodin a poté se odpaří. K tomuto zbytku se přidá voda a vyloučené krystaly se oddělí filtrací, promyjí vodou, isopropanolem a diethyletherem, přičemž se získá 0,26 g žádané sloučeniny jako žluté krystaly. Tyto krystaly se následně rekrystalují ze směsi methylenchloridu a methanolu, přičemž se získají žluté krystaly, 1.1. 246,5 až 248 °C.

Analýza pro C₂₂H₂₂F₄O₄

Vypočteno (%): C 54,77; H 4,60; N 11,61

Nalezeno (%): C 54,77; H 4,70; N 11,56

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰- 135,6° (c = 0,1, DMF)

Příklad 10

Kyselina 5-amino-7-((S)-7-amino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs 0,26 g kyseliny 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxo-7-((S}7-trifluoracetylamino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)chinolin-3-karboxylové, 0,18 g hydroxidu draselného a 1,8 ml vody se míchá při teplotě místnosti po dobu 0,5 hodiny. Reakční směs se neutralizuje 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 8, vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí se vodou, přičemž se získá 0,21 g žádané sloučeniny, která se rekrystaluje z acetonitrilu, přičemž se získá 0,16 g žlutých hranolů, 1.1. 216,5 až 218 °C.

Analýza pro C₂₀H₂₃FN₄O₃

Vypočteno (%): C 62,16; H 6,00; N 14,50

Nalezeno (%): C 62,13; H 6,00; N 14,64

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰- 48,0° (c = 0,05, DMF)

Příklad 11

Kyselina 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl—4-oxo-7-((S)-3-trifluoracetylamino-l-pyrrolidinyl)chinolin-3-karboxylová

-26CZ 286524 B6

Směs 2,5 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3karboxyláto-O³,O⁴]difluorboronu, 3,20 g (Sy-3-trifluoracetylaminopyrrolidinhydrochloridu ([a]_D ²⁰ - 28,1° (c = 1, MeOH)), 3,26 ml triethylaminu a 10 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 3 dnů. Reakční směs se okyselí 10 ml 10%ní kyseliny chlorovodíkové, extrahuje se methylenchloridem, a spojené organické extrakty se suší a odpařují, čímž se získá 3,66 g žlutých krystalů. Směs 3,66 g těchto krystalů, 3,8 ml triethylaminu a 30 ml methanolu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 3,5 hodiny. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací, čímž se získá 0,72 g žádané sloučeniny jako žluté krystaly. Tyto krystaly se následně rekrystalují z acetonitrilu, přičemž se získá 0,41 g žlutých krystalů, 1.1. 238,5 až 240 °C.

Analýza pro C20C20F4N4O4

Vypočteno (%): C 52,63; H 4,42; N 12,28

Nalezeno (%): C 52,64; H 4,37; N 12,35

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ - 28,1° (c = 0,1, DMSO)

Příklad 12

Hydrochlorid kyseliny 5-amino-7-((S)-3-amino-l-pynOlidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l ,4dihydro-8-methyl—4-oxochinolin-3-karboxylové

Směs 0,62 g kyseliny 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxo-7-((S)3-trifluoracetylamino-l-pyrrolidinyl)chinolin-3-karboxylové, 0,57 g hydroxidu draselného a 10 ml vody se míchá při teplotě místnosti po dobu jedné hodiny. Reakční směs se neutralizuje 10%ní kyselinou chlorovodíkovou a odpaří se. Zbytek se zředí ethanolem, nerozpuštěné zbytky se odfiltrují a výsledný filtrát se odpaří. K roztoku zbytku v acetonu se přidá ethanolický hydrochlorid a vyloučené krystaly se oddělí filtrací; získá se 0,53 g žlutých krystalů. Krystaly se následně rekrystalují z ethanolu a získá se 40 mg žádané sloučeniny jako žluté krystaly, t. t. 263,5 °C (rozklad).

Analýza pro C18H21FN4O3.HCI

Vypočteno (%): C 54,48; H 5,59; N 14,12

Nalezeno (%): C 54,22; H 5,61; N 13,88

Specifická otáčivost [a]o²° - 37,4° (c = 0,1, H₂O)

Příklad 13

Kyselina 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-7-(cis—4—methyl-3-trifluoracetylamino-l-pyrrolidinyl)-4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs 4,00 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3karboxyláto-O³,O⁴]difluorboronu, 4,08 g cis—4-methyl-3-trifluoracetylaminopyrrolidin hydrochloridu, 5,09 ml Ν,Ν-diisopropylethylaminu a 16 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 3 dny. K této reakční směsi se za chlazení ledem přidá methylenchlorid a výsledná směs se míchá při teplotě místnosti. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí se methylenchloridem; získá se 0,99 g žlutavě hnědých krystalů (A). Methylenchloridová vrstva z filtrátu se promyje vodou a solankou, suší se nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se rozetře s methylenchloridem; získá se 1,15 g žlutavě hnědých krystalů (B). Filtrát se odpaří a zbytek se purifíkuje pomocí kolonové chromatografie (silikagel, methylenchlorid : methanol (100 : 1)). Získá se 0,25 g žlutohnědých krystalů (C). Směs těchto krystalů (A, B a C), 2,42 ml triethylaminu, 48 ml methanolu a 24 ml 1,2-dichlorethanu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 9 hodin a pak se odpaří. K tomuto zbytku se přidá voda a směs se okyselí 10%ní kyselinou

-27CZ 286524 B6 chlorovodíkovou na pH4. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí se vodou, isopropanolem a diethyletherem a získá se 2,24 g žádané sloučeniny jako žlutých krystalů. Tyto krystaly se následně rekrystalují ze směsi N,N dimethylformamidu a ethanolu; získají se žluté jehličky, 1.1. 253 až 254,5 °C.

Analýza pro C21H22F4N4O4

Vypočteno (%): C 53,62; H 4,71; N 11,91

Nalezeno (%): C 53,41; H 4,94; N 11,70

Příklad 14

Kyselina 5-amino-7-(cis-3-amino-4-methyl-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs kyseliny 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-7-(cis—4-methyl-3-trifluoracetylamino-l-pyrrolidinyl)-4-oxochinolin-3-karboxylové (2,00 g), 1,40 g hydroxidu draselného a 14 ml vody se míchá za teploty místnosti po dobu 1 hodiny, a pak se neutralizuje 10%ní vodnou kyselinou chlorovodíkovou na pH 8. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací a po promytí vodou, isopropanolem a diethyletherem se získá 1,65 g žádané sloučeniny jako žlutých krystalů. Tyto krystaly se následně rekrystalují ze směsi methylenchloridu a methanolu a získá se 1,32 g žlutých hranolů, 1.1. 213,5 až 215 °C.

Analýza pro C19H23FN4O3

Vypočteno (%): C 60,95; H 6,19; N 14,96

Nalezeno (%): C 60,83; H 6,35; N 14,83

Příklad 15

Kyselina 5-amino-l-cyklopropyl-7-((S)-4,4-dimethyl-3-trifluoracetylamino-l-pyrrolidinyl)6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs 4,00 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3karboxyláto-O³,O⁴]difluorboronu, 4,32 g (S)-4,4-dimethyl-3-trifluoracetylaminopyrrolidinu hydrochloridu ([a]_D ²⁰ + 25,6° (c=l, MeOH)), 5,09 ml Ν,Ν-diisopropylethylaminu a 16 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 3 dnů. Reakční směs se zředí vodou za chlazení ledem, okyselí se 10%ní vodnou kyselinou chlorovodíkovou na pH 3 a extrahuje se methylenchloridem. Spojené organické extrakty se promyjí vodou a solankou, suší se nad síranem sodným a odpařují se. Zbytek se purifikuje pomocí kolonové chromatografie (silikagel, methylenchlorid : methanol (100 : 1)) a získají se žlutohnědé krystaly. Tyto krystaly se promyjí diethyletherem za získání 0,68 g žlutohnědých krystalů. Směs těchto krystalů, 0,67 ml triethylaminu, 14 ml methanolu a 11 ml 1,2-dichlorethanu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 10 hodin a poté se odpaří. K tomuto zbytku se přidá voda a vyloučené krystaly se oddělí filtrací; získá se po promytí vodou 0,57 g žádané sloučeniny jako žlutých krystalů. Tyto krystaly se následně rekrystalují z methanolu za získání žlutých sloupcovitých krystalů, t. t. 253,5 až 255 °C.

Analýza pro C₂2H₂4F4N₄O4

Vypočteno (%): C 54,54; H 4,99; N 11,57

Nalezeno (%): C 54,33; H 4,88; N 11,63

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ + 42,6° (c = 0, 1, MeOH)

-28CZ 286524 B6

Příklad 16

Kyselina 5-amino-7-((S)-3-amino-4,4-dimethyl-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs 0,47 g kyseliny 5-amino-l-cyklopropyl-7-((S)-4,4-dimethyl-3-trifluoracetylamino-lpyrrolidinyl)-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylové, 0,32 g hydroxidu draselného a 3,2 ml vody se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Reakční směs se neutralizuje 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 8 a extrahuje se methylenchloridem. Spojené organické extrakty se promyjí vodou a solankou, suší nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se rozetře se směsí acetonu a diethyletheru; získá se 0,30 g žádané sloučeniny jako žlutých krystalů. Krystaly se následně rekrystalují z acetonitrilu a získá se 0,18 g žlutých jehliček, 1.1. 191,5 až 193 °C.

Analýza pro C20H25FN4O3

Vypočteno (%): C 61,85; H 6,49; N 14,42

Nalezeno (%): C 61,70; H 6,51; N 14,32

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ + 190,9° (c = 0,1, 0,lN-NaOH)

Příklad 17

Kysel ina 5-am ino-7-(3-terc. butoxykarbonylam ino-3-methy 1-1 -pyrrol id i ny 1)— 1 -cyklopropy 16-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinofin-3-karboxylová

Směs 3,00 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl—4-oxochinolin-3karboxyláto-O³,O⁴]difluorboronu, 2,11 g 3-terc.butoxykarbonylamino-3-methylpyrrolidinu, 1,53 ml Ν,Ν-diisopropylethylaminu a 12 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 2,5 dnů. Reakční směs se zředí vodou a extrahuje methylenchloridem. Spojené organické extrakty se promyjí solankou, suší nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se purifikuje pomocí kolonové chromatografie (silikagel, methylenchlorid : methanol (99 : 1)) a získá se 0,97 g žlutých krystalů. Směs 0,97 g těchto krystalů, 1,00 ml triethylaminu a 40 ml methanolu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 2,5 hodin a pak se odpaří. K tomuto zbytku se přidá voda a vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí se vodou; získá se 0,84 g žádané sloučeniny jako žluté krystaly, které se rekrystalují z acetonitrilu; získá se 0,76 g žlutých jehliček, t. t. 198 až 201 °C.

Analýza pro C24H31FN4O5

Vypočteno (%): C 60,75; H 6,58; N 11,81

Nalezeno (%): C 60,43; H 6,66; N 11,56

Příklad 18

Kyselina 5-amino-7-(3-amino-3-methyI-l-pyrroIidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová

K 0,76 g kyseliny 5-amino-7-(3-terc.butoxykarbonylamino-3-methyl-l-pyrrolidinyl)-lcyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylové se přidá 1,1 ml kyseliny chlorovodíkové a poté se míchá při teplotě místnosti po dobu 2 hodiny. K této reakční směsi se přidá roztok 0,89 g hydroxidu draselného v 1,8 ml vody za chlazení ledem a výsledná směs se neutralizuje 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 8. Vyloučené krystaly se oddělí

-29CZ 286524 B6 filtrací a promyjí se vodou, přičemž se získá 0,33 g žádané sloučeniny jako žluté krystaly. Tyto krystaly se následně rekrystalují ze směsi methylenchloridu a methanolu za získání 0,30 g žlutých krystalů, 1.1. 217 až 221 °C.

Analýza pro C19H23FN4O3.I/2H2O

Vypočteno (%): C 60,23; H 6,25; N 14,79

Nalezeno (%): C 59,98; H 6,25; N 14,53

Příklad 19

Kyselina 5-amino-7-((S)-7-terc.butoxykarbonylamino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs 6,0 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3karboxyláto-O³,O⁴]difluorboronu, 5,59 g (S)-7-terc.butoxykarbonylamino-5-azaspiro[2.4]heptanu ([a]_D ²⁰ - 46,6° (c=l, MeOH), 3,06 ml Ν,Ν-diisopropylethylaminu a 24 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 3 dnů. Reakční směs se zředí vodou, neutralizuje se 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 7 a extrahuje se methylenchloridem. Spojené extrakty se promyjí vodou a solankou, suší se nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se purifikuje pomocí kolonové chromatografie (silikagel, methylenchlorid : methanol (100 : 1)) a získají se žluté krystaly, které se promyjí směsí methylenchloridu a diethyletherem. Získá se 3,17 g světle žlutých krystalů. Směs 3,14 g těchto krystalů, 3,09 ml triethylaminu, 62 ml methanolu a 31 ml 1,2-dichlorethanu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 14 hodin a pak se odpaří. Zbytek se zředí vodou a neutralizuje se 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 7. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí se vodou, isopropanolem a diethyletherem; získá se 2,79 g žádané sloučeniny jako světle žluté krystaly, které se rekrystalizují ze směsi methylenchloridu a methanolu za získání světle žlutých jehliček, 1.1. 217,5 až 219 °C.

Analýza pro C25H31FN4O5

Vypočteno (%): C 61,72; H 6,42; N 11,52

Nalezeno (%): C 61,71; H 6,48; N 11,39

Specifická otáčivost [a]o²° - 96,6° (c = 0,1, DMF)

Příklad 20

Kyselina 5-amino-7-((S)-7-amino-5-azaspiro[2,4]hept—4-yl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová

K 8,80 g kyseliny 5-amino-7-((S)-7-terc.butoxykarbonylamino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)-lcyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylové se přidá 11 ml kyseliny chlorovodíkové a pak se míchá při teplotě místnosti po dobu 1,5 hodiny. K této reakční směsi se za chlazení ledem přidá roztok 10,5 g hydroxidu draselného ve 32 ml vody a výsledná směs se neutralizuje 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 8. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí vodou. Krystaly se zředí methylenchloridem, anorganické složky se odfiltrují a výsledný filtrát se odpaří. Zbytek se rozetře s diethyletherem; získá se 5,53 g žádané sloučeniny jako žlutých krystalů. Rekrystalizací z acetonitrilu se získají žluté hranoly, které byly identifikovány jako sloučenina z Příkladu 10.

Popsaným obvyklým způsobem se získají následující soli:

-30CZ 286524 B6

Methansulfonát

Popis: žluté jehličky (EtOH-H₂O)

1.1.: 263 až 264,5 °C (rozklad)

Analýza pro C₂₀H₂₂FN₄O₃.CH4O₃S

Vypočteno (%): C 52,27; H 5,64; N 11,61

Nalezeno (%): C 52,02; H 5,54; N 11,53

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ - 93,6° (c = 0,1, MeOH) p-Toluensulfonát

Popis: žluté krystaly (EtOH)

1.1.: 188 až 189,5 °C

Analýza pro C₂oH₂₃FN₄0₃.C7Hg0₃S.l/2H₂0 Vypočteno (%): C 57,13; H 5,68; N 9,87

Nalezeno (%): C 56,95; H 5,85; N 9,77

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ - 73,1° (c = 0,05, MeOH)

Hydrochlorid

Popis: žluté krystaly (EtOH-H₂O)

1.1.: 276 až 280 °C (rozklad)

Analýza pro C₂oH₂₃FN₄0₃.HC1

Vypočteno (%): C 56,80; H 5,72; N 13,25

Nalezeno (%): C 56,72; H 5,79; N 13,04

Příklad 21

Kyselina 5-amino-7-(3-terc.butoxykarbonylamino-3-methyl-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová (izomer A)

Směs 3,00 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3karboxylát-O³,O⁴]difluorboronu, 2,11 g 3-terc.butoxykarbonylamino-3-methylpyrrolidinu (izomer A, [a]_D ²⁰ + 7,4° (c = 0,5, MeOH)), 1,53 ml Ν,Ν-diisopropylethylaminu a 12 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 1,5 dne. Reakční směs se nalije do 60 ml ledové vody. K reakční směsi se přidá 60 ml methylenchloridu. Po míchání při teplotě místnosti se nerozpustné podíly odfiltrují a pak se vodná vrstva oddělí a extrahuje methylenchloridem. Spojené methylenchloridové vrstvy se promyjí solankou, suší nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se purifíkuje pomocí kolonové chromatografie (silikagel, methylenchlorid a methylenchlorid : methanolu (100 : 1)) a získá se 1,18 g žlutých krystalů. Směs 1,18 g těchto krystalů, 1,19 ml triethylaminu a 24 ml methanolu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin a pak se odpaří. Ke zbytku se přidá voda a vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí se vodou; získá se 0,96 g žádané sloučeniny jako žlutých krystalů, které se rekrystalují z acetonitrilu; získají se světle žluté jehličky, 1.1. 213,5 až 214,5 °C.

Analýza pro C₂4H₃iFN₄O₅

Vypočteno (%): C 60,75; H 6,58; N 11,81

Nalezeno (%): C 60,63; H 6,55; N 11,80

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ + 47,0° (c = 0,1, MeOH)

-31CZ 286524 B6

Příklad 22

Methansulfonát kyseliny 5-amino-7-(3-amino-3-methyl-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-65 fluor-1,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylové (izomer A)

K 0,80 g kyseliny 5-amino-7-(3-terc.butoxykarbonylamino-3-methyl-l-pyrrolidinyl)-lcyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylové (izomer A), získané v Příkladu 21, se za chlazení ledem přidá 0,98 ml kyseliny chlorovodíkové a pak se míchá za 10 teploty místnosti po dobu 2 hodiny. K této reakční směsi se přidá roztok 0,93 g hydroxidu draselného v 3,1 ml vody a potom se míchá za teploty místnosti po dobu 1 hodiny. Výsledná směs se neutralizuje 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 8. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí vodou; získá se 0,55 g žlutých krystalů, které se obvyklým způsobem převedou na methansulfonát. Rekrystalizací ze směsi ethanolu a vody (9:1) se získá 0,43 g žádané 15 sloučeniny jako žluté jehličky, 1.1. 261 až 262,5 °C.

Analýza pro C19H23FN4O3.CH4O3S

Vypočteno (%): C 51,05; H 5,78; N 11,91

Nalezeno (%): C 50,89; H 5,93; N 11,78

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ - 50,6° (c = 0,1, MeOH)

Příklad 23

Kyselina 5-amino-7-(3-terc.butoxykarbonylamino-3-methyl-l-pynOlidinyl)-l-cyklopropyl6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl—4-oxochinolin-3-karboxylová (izomer B)

Směs 3,00 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3karboxyláto-O³,O⁴]difluorboronu, 2,11 g 3-terc.butoxykarbonylamino-3-methylpyrrolididinu 30 (izomer B, [a]_D ²⁰ - 8,2° (c = 0,5, MeOH), 1,53 ml Ν,Ν-diisopropylethylaminu a 12 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 2 dnů. Reakční směs se nalije do 60 ml ledové vody. K reakční směsi se přidá 60 ml methylenchloridu. Po míchání při teplotě místnosti se nerozpustné podíly odfiltrují a pak se vodná vrstva oddělí a extrahuje se methylenchloridem. Spojené methylenchloridové vrstvy se promyjí solankou, suší nad síranem sodným a odpaří se. 35 Zbytek se purifikuje pomocí kolonové chromatografíe (silikagel, methylenchlorid a methylenchlorid : methanol (100 : 1)); získá se 0,91 g žlutooranžových krystalů. Směs 0,91 g těchto krystalů, 0,92 ml triethylaminu a 18 ml methanolu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin a potom se odpaří. K tomuto zbytku se přidá voda a vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí se vodou; získá se 0,86 g žádané sloučeniny jako žluté krystaly, které se rekrystalují 40 z acetonitrilu, přičemž se získají žluté jehličky, 1.1. 214,5 až 215,5 °C.

Analýza pro C24H31FN4O5

Vypočteno (%): C 60,75; H 6,58; N 11,81

Nalezeno (%): C 60,85; H 6,57; N 11,76

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ - 47,8° (c = 0,1, MeOH)

Příklad 24

Methansulfonát kyseliny 5-amino-7-(3-amino-3-methyl-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylové (izomer B)

-32CZ 286524 B6

K 0,70 g kyseliny 5-amino-7-(3-terc.butoxykarbonylamino-3-methyl-l-pyrrolidinyl)-lcyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl—4-oxochinolin-3-karboxylové (izomer B), získané v Příkladu 23, se za chlazení ledem přidá 0,86 ml kyseliny chlorovodíkové a míchá se při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. K reakční směsi se přidá 0,82 g hydroxidu draselného v 2,7 ml vody a potom se míchá za teploty místnosti po dobu 1 hodiny. Výsledná směs se neutralizuje 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 8. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí se vodou; získá se 0,48 g žlutých krystalů, které se obvyklým způsobem převedou na methansulfonát. Rekrystalizací ze směsi ethanolu a vody (9 : 1) se získá 0,31 g žádané sloučeniny jako žlutých jehliček, 1.1. 260,5 až 262 °C.

Analýza pro C19H23FN4O3.CH4O3S

Vypočteno (%): C 51,05; H 5,78; N 11,91

Nalezeno (%): C 50,75; H 5,88; N 11,69

Specifická otáčivost [a]o²⁰ + 46,6° (c = 0,1, MeOH)

Příklad 25

Kyselina 5-amino-7-((S)-3-terc.butoxykarbonylamino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6fluor-1,4-dihydro-8-methyl—4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs 2,0 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl—4-oxochinolin-3karboxyláto-0³,0⁴]difluorboron, 1,63 g (S)-3-terc.butoxykarbonylaminopyrrolidinu ([a]_D ²⁰25,0° (c = 1, MeOH), 1,02 ml Ν,Ν-diisopropylethylaminu a 8 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 22 hodin. Reakční směs se zředí vodou a extrahuje methylenchloridem. Spojené organické extrakty se promyjí vodou a solankou, suší se nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se purifikuje pomocí kolonové chromatografíe (silikagel, methylenchlorid : methanol (100 : 1)), přičemž se získá žlutavý olej, který se rozetře se směsí acetonu a diethyletheru a získá se 1,07 g žlutohnědých krystalů. Směs 1,07 g těchto krystalů, 1,11 ml triethylaminu, 22 ml methanolu a 11 ml 1,2-dichlorethanu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 10 hodin a poté se odpaří. Zbytek se zředí vodou, výsledná směs se neutralizuje 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 7 a vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí se vodou; získá se 0,95 g žádané sloučeniny jako žlutých krystalů, které se rekrystalují z methanolu a získají se žluté jehličky, 1.1. 135 až 136,5 °C.

Analýza pro C23H29FN4O5

Vypočteno (%): C 59,99; H 6,35; N 12,17

Nalezeno (%): C 59,98; H 6,45; N 11,99

Specifická otáčivost [a]o²⁰ - 33,3° (c = 0,1, DMF)

Příklad 26

Kyselina 5-amino-7-((S)-3-amino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová

K 4,07 g kyseliny 5-amino-7-((S)-3-terc.butoxykarbonylamino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl^4-oxochinolin-3-karboxylové se přidá 5,2 ml kyseliny chlorovodíkové za teploty místnosti a pak se míchá po dobu 30 minut při teplotě místnosti. K reakční směsi se přidá roztok 4,9 g hydroxidu sodného v 16 ml vody pro úpravu pH na 11 za chlazení ledem a výsledná reakční směs se neutralizuje 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 8. Vodná vrstva se odstraní dekantací a olej se rozetře s malým množstvím methanolu. Krystaly se oddělí filtrací a po promytí isopropanolem se získá 3,05 g žlutých krystalů. Tyto

-33CZ 286524 B6 krystaly se zředí methanolem, nerozpustné usazeniny se odfiltrují a získaný filtrát se odpaří. Zbytek se zředí směsí methylenchloridu a methanolu (19 : 1), nerozpustné sraženiny se odfiltrují a výsledný filtrát se odpaří, čímž se získá 2,58 g žádané sloučeniny jako žlutých krystalů, které se rekrystalují ze směsi methylenchloridu a methanolu a získají se světle žluté krystaly, 1.1. 202 až 104 °C (rozklad).

Analýza pro Ci₈H2iFN₄O₃.H₂O

Vypočítáno (%): C 57,13; H 6,13; N 14,81

Nalezeno (%): C 57,36; H 5,91; N 14,70

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ - 11,0° (c = 0,1, DMF)

Popsaným obvyklým způsobem se získají následující soli:

Methansulfonát

Popis: žluté jehličky (MeOH)

1.1.: 280 až 281,5 °C (rozklad)

Analýza pro Ci₈H2iFN₄O₃.CH4O₃S.l/4H2O

Vypočteno (%): C 49,50; H 5,58; N 12,15

Nalezeno (%): C 49,50; H 5,58; N 12,03

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ - 27,7° (c = 0,1, H₂O) p-Toluensulfonát

Popis: žluté jehličky (iso-PrOH-H₂O)

1.1.: 238 až 241 °C (rozklad)

Analýza pro Ci₈H2iFN₄O₃.C7H₈O₃S.l/2H₂O

Vypočteno (%): C 55,44; H 5,58; N 10,34

Nalezeno (%): C 55,47; H 5,56; N 10,22

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ - 24,0° (c = 0,1, H₂O)

Příklad 27

Kyselina 5-amino-l-cyklopropyl-7-((S)-3-dimethylamino-l-pyrrolidinyl)-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs 3,00 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3karboxyláto-O³,O⁴]difluorboronu, 1,20 g (S)-3-dimethylaminopyrrolidinu [a]_D ²⁰ - 13,4° (c=10, EtOH), 1,53 ml Ν,Ν-diisopropylethylaminu a 12 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 2 dny. Reakční směs se ředí vodou a extrahuje methylenchloridem. Spojené extrakty se promyjí vodou, suší nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se purifikuje kolonovou chromatografii (silikagel, methylenchlorid a methylenchlorid : methanol (30: 1), přičemž se získají žlutooranžové krystaly. Směs 1,18 g krystalů, 1,42 ml triethylaminu, 24 ml methanolu a 12 ml 1,2-dichlorethanu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin a pak se odpaří. Zbytek se ředí vodou a neutralizuje se 10%ním vodným hydroxidem sodným na pH 8. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací a po promytí vodou se získá 0,96 g žádané sloučeniny jako žlutých krystalů. Rekrystalizací z acetonitrilu se získají žluté jehličky, 1.1. 204 až 205,5 °C.

Analýza pro C₂₀H25FN₄O₃

Vypočteno (%): C 61,84; H 6,49; N 14,42

Nalezeno (%): C 61,72; H 6,46; N 14,44

Specifická otáčivost [a]_D ²⁰ + 156,0° (c = 0,1, MeOH)

-34CZ 286524 B6

Příklad 28

Kyselina 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxo-7-[3-(trifluoracetyl)(methyl)amino-l-pyrrolidinyl]chinolin-3-karboxylová

Směs 3,00 g [5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3karboxyláto-O³,O⁴]difluorboronu, 2,44 g 3-(trifluoracetyl)(methyl)aminopyrrolidin hydrochloridu, 3,36 ml Ν,Ν-diisopropylethylaminu a 12 ml dimethylsulfoxidu se míchá při teplotě 30 °C po dobu 4 dnů. Sraženiny se odfiltrují, výsledný filtrát se zředí vodou a vyloučené krystaly se oddělí filtrací. Krystaly se promyjí vodou a ethylacetátem a získají se žlutohnědé krystaly, které se purifikují kolonovou chromatografii (silikagel, methylenchlorid a methylenchlorid : methanol (50:1)) přičemž se získá 0,92 g žlutooranžových krystalů. Směs 0,90 g krystalů, 0,91 ml triethylenaminu, 18 ml methanolu a 9 ml 1,2-dichlorethanu se vaří pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin a poté se odpaří. Ke zbytku se přidá voda a vyloučené krystaly se oddělí filtrací; získá se 0,77 g žádané sloučeniny jako žlutých krystalů, které se rekrystalují z methanolu a získají se žluté krystaly, 1.1. 289 až 190 °C.

Analýza pro C21H22F4N4O4

Vypočteno (%): C 53,62; H 4,71; N 11,91

Nalezeno (%): C 53,50; H 4,42; N 11,84

Příklad 29

Kyselina 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-7-(3-methylamino-l-pyrrolidinyl)-4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs 0,60 g kyseliny 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxo-7-[3(trifluoracetyl)(methyl)amino-l-pyrrolidinyl]chinolin-3-karboxylová, 0,38 g hydroxidu draselného a 3,8 ml vody se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Reakční směs se neutralizuje 10%ní kyselinou chlorovodíkovou na pH 8 až 9 a vyloučené krystaly se oddělí filtrací a po promytí vodou se získá 0,47 g žádané sloučeniny jako žluté krystaly, které se rekrystalují z methanolu; získají se žluté sloupkovité krystaly, 1.1. 200,5 až 202 °C.

Analýza pro C19H23FN4O3

Vypočteno (%): C 60,95; H 6,19; N 14,96

Nalezeno (%): C 60,78; H 6,17; N 15,01

Příklad 30

Kyselina 5-amino-7-((S)-7-terc.butoxykarbonylamino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová

Směs 20,0 g kyseliny 5-amino-l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylové, 28,9 g (S)-7-terc.butoxykarbonylamino-5-azaspiro[2,4]heptanu ([a]_D ²⁰ - 47,2° (c = 1, MeOH) a 80 ml dimethylsulfoxidu se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 36 hodin. Reakční směs se nalije do 500 ml ledové vody. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací, promyjí se vodou a isopropanolem, a potom se rekrystalují ze směsi methylenchloridu a methanolu; získá se 14,7 g žádané sloučeniny, která je identifikována jako sloučenina z Příkladu 19.

-35CZ 286524 B6

Příklad 31

Ethyl l-cyklopropyl-6,7-difluor-l,4-dihydro-8-methyl-5-nitro-4-oxochinolin-3-karboxylát

K roztoku 10,0 g ethyl 3-cyklopropylamino-2-(2,4,5-trifluor-3-methyl-6-nitrobenzoyl)akrylátu a 0,1 g 18-crown-6-etheru ve 100 ml tetrahydrofuranu se přidá 8,04 g uhličitanu draselného a potom se směs míchá při teplotě místnosti po dobu 23 hodin. Vyloučené krystaly se oddělí filtrací a promyjí se tetrahydrofuranem, vodou a acetonem, přičemž se získá 8,56 g žádané sloučeniny. Rekrystalizací z Ν,Ν-dimethylformamidu se získají bezbarvé jehličky, které se 10 identifikují jako sloučenina z Příkladu 5.

Příklad 32

Připraví se farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu ve formě tablet obvyklým způsobem za použití následujících ingrediencí:

Sloučenina z Příkladu 10 110mg

Laktosaq.s.

Kukuřičný škrob 34mg

Magnéziumstearát 2mg

Hydroxypropylmethylcelulóza8 m

Polyethylenglykol 6000 0,5mg

Oxid titanu____________________________________0,5mg

210 mg

Příklad 33

Připraví se farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu ve formě kapslí obvyklým způsobem za použití následujících ingrediencí:

Sloučenina z Příkladu 10 Laktosa Karboxymethylcelulóza Hydroxypropylcelulóza Magnéziumstearát

110 mg q.s.

mg mg mg

160 mg

Příklad 34

Připraví se farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu ve formě prášku obvyklým způsobem za použití následujících ingrediencí:

Sloučenina z Příkladu 10 110mg

Laktosaq.s.

D-mannitol 500mg

Hydroxypropylcelulóza 5mg

Talek 2mg

000 mg

CZ 286524 B6

Příklad 35

Připraví se farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu ve formě injekcí obvyklým způsobem za použití následujících ingrediencí:

Sloučenina z Příkladu 10 Glukosa Kyselina chlorovodíková Destilovaná voda pro injekce

50 mg 1000 mg q.s. __ 20 ml

Příklad 36

Připraví se farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu ve formě čípků obvyklým způsobem za použití následujících ingrediencí:

Sloučenina z Příkladu 10 Tuhý tuk

100 mg 1300 mg 1400 mg

Příklad 37

Připraví se farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu ve formě masti obvyklým způsobem za použití následujících ingrediencí:

Sloučenina z Příkladu 10 Bílá (přírodní) vazelína Kapalný parafín

5 mg q.s. 70 mg 1000 mg

Stejným způsobem, jako je popsáno v Příkladech 9 a 10 se připraví následující referenční sloučeniny (A až I):

Referenční sloučenina A

Hydrochlorid kyseliny 7-((S)-7-amino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l ,4d ihydro-4-oxoch ino 1 in-3-karboxy lové

Popis: světležluté jehličky

1.1.: 284 až 288 °C (rozklad)

Referenční sloučenina B

Hydrochlorid kyseliny 5-amino-7-((S)-7-amino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)-l-cyklopropyl-6fluor-l,4-dihydro-4-oxochinolin-3-karboxylové

Popis: světležluté krystaly

1.t.: 276 až 279 °C

Referenční sloučenina C

Kyselina 7-((S)-7-amino-5-azaspiro[2,4]hept-5-yl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-<iihydro-8methyl-4-oxochinolin-3-karboxyIová

Popis: bezbarvé krystaly

1.1.: 176,5 až 178 °C

Referenční sloučenina D

Kyselina 7-((Sy-3-amino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxochinolin3-karboxylová

Popis: bezbarvé krystaly

1.1.: 253 až 254 °C (rozklad)

Referenční sloučenina E

Kyselina 5-amino-7-((S)-3-amino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-4oxochinolin-3-karboxylová

Popis: světlé žlutohnědé krystaly

1.1.: 226 až 228,5 °C (rozklad)

Referenční sloučenina F

Kyselina 7-((S)-3-amino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4oxochinolin-3-karboxylová

Popis: světlehnědé krystaly

1.1.: 192 až 193,5 °C (rozklad)

Referenční sloučenina G

Kyselina 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-piperazinylchinolin-3-karboxylová

Popis: světležluté krystaly

1.1.: 213 až 214,5 °C

Referenční sloučenina H

Hydrochlorid kyseliny l-cyklopropyl-6-fluor-l ,4-dihydro-8-methyl—4-oxo-7-piperazinylchinolin-3-karboxylové

Popis: světlehnědé jehličky

1.1.: 279 až 281 °C (rozklad)

Referenční sloučenina I

Hydrochlorid kyseliny 5-amino-l-cyklopropyl-6-fluor-l ,4-dihydro-8-methyl-4-oxo-7-piperaziny leh inol in-3-karboxy lové

-38CZ 286524 B6

Popis: žluté jehličky

1.t.: > 300 °C

Průmyslová využitelnost

Farmaceutický prostředek, obsahující účinné množství sloučeniny podle tohoto vynálezu nebo jejího stereoizomeru nebo její farmakologicky přijatelné soli, je významný pro farmaceutický průmysl.

Claims (18)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Deriváty kyseliny 5-amino-8-methyl-7-pyrrolidinylchinolin-3-karboxylové, obecného vzorce I v němž

   R'aR⁵ značí jednotlivě vodík nebo Cj-C₄ alkyl,

   R² je vodík, C]-C₄ alkyl, Ci-C₆ alkanoyl, Ci-C₄ alkanoyl halogenovaný 1 až 5 atomy halogenu a benzyloxykarbonyl nebo Cj-C₄ alkyloxykarbonyl jako esterový zbytek karboxykyseliny,

   R⁴, R⁵ a R⁶ značí jednotlivě vodík nebo Cj-C4 alkyl, nebo dva ze substituentů R⁴, R⁵ a R⁶ tvoří skupinu -(CH2)_n-, v níž n je 1 nebo 2, a jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
2. 2. Deriváty podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž R¹, R² a R³ značí jednotlivě vodík a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
3. 3. Deriváty podle nároku 1 nebo 2, obecného vzorce I, v němž R⁴, R⁵ a R⁶ značí jednotlivě vodík nebo Ci~C₄ alkyl a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
4. 4. Deriváty podle nároku 3, obecného vzorce I, v němž R⁴, R⁵ nebo R⁶ značí jednotlivě methyl a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.

   -39CZ 286524 B6
5. 5. Deriváty podle nároku 3, obecného vzorce I, v němž R⁴, R⁵ a R⁶ značí jednotlivě vodík a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
6. 6. Deriváty podle nároku 3, obecného vzorce I, v němž R⁴ je methyl a R⁵ a R⁶ značí jednotlivě vodík a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
7. 7. Deriváty podle nároku 1 nebo 2, obecného vzorce I, v němž dva ze substituentů R⁴, R⁵ a R⁶ tvoří skupinu _(CH₂)_n, v níž n je 1 nebo 2, a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
8. 8. Deriváty podle nároku 7, obecného vzorce I, v němž R⁴ a R⁵ tvoří skupinu -(CH₂)_n-, v níž n je 1 nebo 2, a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
9. 9. Deriváty podle nároku 8, obecného vzorce I, v němž R⁴ a R⁵ tvoří skupinu -(CH₂)₂- a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomeiy nebo farmakologicky přijatelné soli.
10. 10. Kyselina 5-amino-7-(3-amino-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l ,4-dihydro-8methyl—4-oxochinolin-3-karboxylová a její stereoizomery anebo farmakologicky přijatelné soli.
11. 11. Kyselina 5-amino-7-(3-amino-4-methyl-l-pyrrolidinyl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4-dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová a její stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
12. 12. Kyselina 5-amino-7-(7-amino-5-azaspiro[2.4]hept-5-yl)-l-cyklopropyl-6-fluor-l,4dihydro-8-methyl-4-oxochinolin-3-karboxylová a její stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
13. 13. Způsob přípravy derivátů podle nároků 1 až 9, obecného vzorce I, v němž všechny substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomerů nebo farmakologicky přijatelných solí, vyznačující se tím, že se derivát kyseliny chinolin-3-karboxylové, halogenovaný v poloze 7, obecného vzorce III <m) v němž X je halogen a R¹ má shora uvedený význam, uvede v reakci s pyrrolidinovým derivátem obecného vzorce IV

    R⁴ (IV)

    -40CZ 286524 B6 v němž R², R³, R⁴, R⁵ a R⁶ mají shora uvedené významy, načež se získaný produkt popřípadě hydrolyzuje, a získané deriváty se popřípadě převedou na jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
14. 14. Způsob přípravy derivátů podle nároků 1 až 9, obecného vzorce I, v němž všechny substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomerů nebo farmakologicky přijatelných solí, vyznačující se tím, že se derivát obecného vzorce V (V) v němž X je halogen, uvede v reakci s pyrrolidinovým derivátem shora uvedeného obecného vzorce IV, v němž R², R³, R⁴, R⁵ a R⁶ mají shora uvedené významy, načež se získaný produkt popřípadě dechelatuje a získané deriváty se popřípadě převedou na jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
15. 15. Způsob přípravy derivátů podle nároků 1 až 9, obecného vzorce I, v němž R² je vodík a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich stereoizomerů nebo farmakologicky přijatelných solí, vyznačující se tím, že se derivát obecného vzorce I, v němž R² je Ci-C₆ alkanoyl nebo C1-C4 alkanoyl halogenovaný 1 až 5 atomy halogenu, hydrolyzuje, nebo se na derivát obecného vzorce I, v němž R² je esterový zbytek karboxylové kyseliny, působí kyselinou benzyloxykarbonylovou nebo kyselinou C1-C4 alkyloxykarbonylovou, a vzniklý derivát se popřípadě převede na jeho stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli.
16. 16. Deriváty kyseliny 8-methylchinolin-3-karboxylové obecného vzorce II v němž R⁷ je C1-C4 alkyl, R⁸ je nitroskupina nebo aminoskupina a X je halogen, jako meziprodukt pro přípravu derivátů obecného vzorce I podle nároku 1.
17. 17. Farmaceutický prostředek pro léčení infekčních onemocnění, v y z n a č u j í c í se tím, že obsahuje účinné množství alespoň jednoho derivátu podle nároků 1 až 12, jeho stereoizomerů nebo farmakologicky přijatelné soli ve spojení s farmaceuticky přijatelnými aditivy.
18. 18. Deriváty podle nároků 1 až 12, jejich stereoizomery nebo farmakologicky přijatelné soli pro použití při léčení infekčních nemocí.