CZ286271B6 - Způsob výroby prostředku anti-D imunoglobulinu G a farmaceutický prostředek obsahující anti-D IgG - Google Patents
Způsob výroby prostředku anti-D imunoglobulinu G a farmaceutický prostředek obsahující anti-D IgG Download PDFInfo
- Publication number
- CZ286271B6 CZ286271B6 CZ19952492A CZ249295A CZ286271B6 CZ 286271 B6 CZ286271 B6 CZ 286271B6 CZ 19952492 A CZ19952492 A CZ 19952492A CZ 249295 A CZ249295 A CZ 249295A CZ 286271 B6 CZ286271 B6 CZ 286271B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- igg
- plasma
- immunoglobulin
- concentrate according
- adsorbent
- Prior art date
Links
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 title claims abstract description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 title abstract 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims abstract description 16
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 claims abstract description 12
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims abstract description 8
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 30
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 21
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 13
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 12
- -1 diethylaminoethyl groups Chemical group 0.000 claims description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 7
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 5
- STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N tributyl phosphate Chemical compound CCCCOP(=O)(OCCCC)OCCCC STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 claims description 3
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 2
- 238000011140 membrane chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 claims description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 claims 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 abstract 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 abstract 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 16
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 16
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 14
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 14
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N [CH2]CN(CC)CC Chemical group [CH2]CN(CC)CC MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 8
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 7
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 7
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000006167 equilibration buffer Substances 0.000 description 5
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 4
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 4
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 3
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 3
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 3
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N Acrinol Chemical compound CC(O)C(O)=O.C1=C(N)C=CC2=C(N)C3=CC(OCC)=CC=C3N=C21 IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 239000005635 Caprylic acid (CAS 124-07-2) Substances 0.000 description 2
- 108010091326 Cryoglobulins Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 2
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 2
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N nifedipine Chemical compound COC(=O)C1=C(C)NC(C)=C(C(=O)OC)C1C1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002446 octanoic acid Drugs 0.000 description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 2
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 2
- 238000002616 plasmapheresis Methods 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 206010049466 Erythroblastosis Diseases 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 101000894412 Mycolicibacterium paratuberculosis (strain ATCC BAA-968 / K-10) Bacterioferritin Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940024545 aluminum hydroxide Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000011210 chromatographic step Methods 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 229940081001 glycine 20.6 mg/ml Drugs 0.000 description 1
- 229940026527 glycine 50 mg Drugs 0.000 description 1
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000009832 plasma treatment Methods 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
- C07K16/065—Purification, fragmentation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/34—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against blood group antigens
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Je popsán způsob výroby prostředku anti-D imunoglobulinu G z lidské plazmy obsahující anti-D IgG nebo plazmové frakce obsahující anti-D IgG, podle kterého: A) plazma nebo frakce plazmy s pH 3,5 až 6,5 a vodivosti v rozmezí od 2 do 4 mS/cm se chromatografuje na iontoměničovém adsorbentu, který má jako funkční skupiny karboxymethylové skupiny, anti-D IgG se naváže na adsorbent, B) adsorbent s navázaným anti-D IgG se nejdříve promyje roztokem s pH 5 až 8 a vodivostí 2 až 4 mS/cm, anti-D IgG se eluuje a potom se C) eluovaný anti-D IgG s pH 6 až 8 a vodivostí 2 až 4 mS/cm nechá zreagovat s alkalickým adsorbentem s iontoměničovými vlastnostmi, aby se navázaly nežádoucí složky, a nakonec se anti-D IgG zahustí. Neinfekční anti-D koncentrát získaný ve vysokém výtěžku má vysokou specifickou aktivitu více než 1% hmot. anti-D IgG na gram celkového IgG.ŕ
Description
Oblast techniky
Tento vynález se týká způsobu výroby prostředku anti-D imunoglobulinu G a farmaceutického prostředku obsahujícího anti-D IgG.
Dosavadní stav techniky
Morbus haemolyticus neonatarum je obecné označení hemolytické anemie plodů a novorozenců způsobené protilátkami matky. Tyto protilátky jsou směrovány proti antigenům na povrchu plodových erythrocytů. Jsou tedy zasaženy buď Rh-antigeny, ABO, nebo systémy jiných krevních skupin.
Nejdůležitějšími antigeny krevních skupin opic jsou D, zřetelně méně imunogenní antitetické antigeny C, c a E, e stejně jako D“. Dále je známo před dalších 40 opičích antigenů. Klinickou důležitost opičí nesnášenlivosti má především opičí antigen D (RhD, Rh0), membránový protein eiythrocytů, který byl nedávno klonován a jehož primární struktura byla nedávno popsána (Van Kim a spol.: Proč. Nati. Acad. Sci, USA 89, 10925 (1992)). D-antigen lze nalézt u přibližně 85 % Kavkazanů v Evropě. Jedinci, kteří mají D-antigen, se nazývají Rh-positivní. Jednotlivci, kterým D-antigen chybí, se nazývají Rh-negativní. Protilátky specifičnosti anti-D jsou nejobvyklejšími nepravidelnými opičími protilátkami a vznikají během Rh-inkompatibilního těhotenství a následující transfusí Rh-inkompatibilní krve. Anti-D protilátky náležejí převážně k IgG podtřídám 1 a 3 (IgGl a IgG3).
Až dosud není známo žádné spolehlivé účinné příčinné léčení na Rh-citlivých těhotných žen. Jelikož desenzibilizace není pravděpodobně možná, pro Rh-negativní ženy, v době porodu, je zásadně důležitá profylaxe Rh-senzibilizace imunoglobulinovým anti-D.
Bez léčení až 17% poprvé těhotných žen s Rh-konstelací (matka Rh-negativní, dítě Rhpositivní) bude během těhotenství nebo během porodu citlivých na opičí antigen.
Anti-D prostředky se úspěšně používají po dobu 30 let pro prevenci Rh-negativních nebo respektive Du-positivních, žen na opičí faktor D, nebo respektive D“, a tím pro předcházení s anti-D souvisejících onemocnění novorozenců, konkrétně Rh erythroblastosy ve všech jejích formách.
Riziko Rh-citlivosti se zvyšuje s množstvím přicházejících plodových Rh-positivních erythrocytů. Léčení dávkou doporučenou WHO 200 pg anti-D IgG jako postpartum profylaxe postačuje ke zneutralizování až 10 ml plodových erythrocytů (což odpovídá přibližně 20 ml krve plodu) a chrání tak proti Rh-citlivosti v přibližně 90 % případů, dokonce i s větším množstvím přiváděných erythrocytů. Díky tomu je citlivost na Rh-antigen stále ještě očekávána, ale už jen u pouze 1 až 2 % všech prvorodiček s konstelací Rh. Další rutinní Rh profylaxí během těhotenství (antepartum prophylaxis) se zbývající riziko citlivosti může snížit dále na 0,1 až 0,2 % všech prvorodiček s Rh konstelací.
Anti-D se dále také používá po chybné transfuzi Rh-positivní krve Rh-negativním pacientům. Dávkování se přizpůsobí množství přiváděných Rh-positivních erythrocytů.
Několik let se diskutuje také o použití anti-D imunoglobulinu pro léčení idiopatické thrombocytopenické purpury (ITP).
- 1 CZ 286271 B6
Farmakokinetiky intramuskulámě a intravenózně injektovaného IgG do organismu jasně ukazují, že intravenózní aplikace je ve všech případech výhodná. U intramuskulámí injekce se musí očekávat zpoždění maximální aktivity a ztráta účinnosti díky pomalé absorpci z místa svalu a lokální proteolyse. Maximální IgG koncentrace v plazmě se u zdravých testovaných subjektů nedosáhne dříve než 4 dny po injekci, u ležících testovaných subjektů ne dříve než 6 dnů po injekci. Navíc, maximální koncentrace IgG v plazmě u zdravých testovaných subjektů je pouze 30 % injektované dávky, u ležících pouze 20 %.
Při srovnání přináší intravenózní aplikace značné výhody. Pouze v tomto případě aplikace je účinná plná podaná dávka bez ohledu na fyzickou aktivitu. Hladina IgG v plazmě klesá během 5 dnů, prakticky nezávisle na fyzické aktivitě na asi 35 až 40 % podané dávky. Teprve pátý den tedy dosahuje maximální koncentrace v plazmě, které se dosáhne intramuskulámí injekcí (Morell A. a spol.: Vox Sang. 38, 272 (1980).).
Pro výroby imunoglobulinových prostředků v průmyslovém měřítku se dnes používají různé frakcionační postupy:
Způsoby srážení studeným ethanolem, například podle Cohna, nebo modifikovaným způsobem podle Cohna, jsou vhodné především pro zpracování plazmy v množství přes 500 1 za týden. Po specielním zpracování, například s pepsinem při pH 4, imunoglobuliny izolované tímto způsobem mohou být intravenosně dobře snášeny. Jiné způsoby srážení jsou založeny na specifickém srážení imunoglobulinu síranem amonným, síranem sodným, polyethylenglykolem, kyselinou kaprylovou nebo rivanolem (pro souhrn viz například Curling J. M.: Separation of Plasma Proteins, J. M. Curlin, Red., Pharmacia, Uppsala, Švédsko, 1983.).
Způsob izolace imunoglobulinu dávkovou absorpcí na iontoměničích byl poprvé popsán již v roce 1964 (Baumstark J.S. a spol.: Arch Biochem. Biophys. 108. 514 (1964).). V následujících letech byly vyvinuty četné postupy na kolonách (švýcarský patentový spis 572745, USA patent 3 869 436, evropská patentová přihláška 0 085 747) a použity, mimo jiné, pro fřakcionaci anti-D imunoglobulinů (Friesen A.D. a spol.: J. Appl. Biochem. 3, 164 (1981).).
Všemi popsanými postupy se dosáhne vysokého výtěžku celkového IgG s vysokým stupněm čistoty a nezměněnou distribucí IgG podtřídy, ale žádná specifická koncentrace jistých IgG podtříd specifických IgG molekul, jako je například anti-D IgG.
Většina anti-D hyperimunoglobulinových prostředků je vhodná pouze pro intramuskulámí aplikaci. Na světovém trhu je rozšířeno jenom několik intravenózně dobře tolerovaných prostředků. Jedním takovým prostředkem je anti-D SRK podle autora tohoto vynálezu, který se vyrábí fřakcionaci podle Kistlera a Nitschmanna (Kistler P. a Nitschmann H.: Vox Sng. 7, 414 (1962).) a který se vyrábí jako intravenózně dobře tolerovaný způsob mírného zpracování s pepsinem při pH 4. Jelikož výtěžek specifických anti-D protilátek je u tohoto způsobu fřakcionace velmi nízký a současně anti-D hyper-imunní plazma je vzácná, existuje potřeba nového způsobu, který na rozdíl od popsaných způsobů, by vedl také u plazmy s nízkým titrem anti-D, k čistému IgG prostředku, který má vysoký výtěžek a vysokou specifickou anti-D aktivitu.
Předmětem tohoto vynálezu je tedy získat způsob výroby čistého anti-D koncentrátu, v němž jsou specificky zkoncentrovány anti-D imunoglobuliny IgG podtřídy A a 3. Bylo objeveno, že to lze udělat překvapivě jednoduchým způsobem, za současného odstranění více než 85 % nespecifického IgG a téměř veškerých dalších nežádoucích složek v plazmě tak, že se krevní plazma nebo frakce obsahující imunoglobulin získané z plazmy specielně vybraných a specielně imunizovaných dárců krve, které mají titr s výhodou vyšší než 30 pg/ml anti-D IgG, podrobí
-2CZ 286271 B6 chromatografii na katexu za podmínek podle tohoto vynálezu. Anti-D koncentrát získaný ve vysokém výtěžku má dále zvýšenou aktivitu (gram anti-D IgG na gram celkového IgG) a lze ho dále čistit dalším působením jiných iontoměničů nebo gelu hydroxidu hlinitého jednotlivě nebo ve vhodné kombinaci.
Jiným předmětem tohoto vynálezu je získat anti-D prostředek, který obsahuje IgA pouze ve stopách, který je dobře snášen a který po přidání vhodných stabilizátorů, nebo také lyofílizován nebo s výhodou v roztoku, lze skladovat několik měsíců beze ztráty aktivity. Bylo zjištěno, že čistý anti-D koncentrát získaný způsoby podle vynálezu splňuje tyto požadavky, tj. že má, mimo jiné, specifickou aktivitu, které nikdy před tím nebylo dosaženo, je intravenózně dobře snášen a má mimořádně nízký obsah IgA. Navíc, anti-D koncentrát má abnormální distribuci IgG podtříd vtom, že způsoby podle vynálezu jsou velice obohaceny IgG podtřídy 1 a 3 a velice zredukovány podtřídy 2 a 4.
Podstata vynálezu
Předmětem tohoto vynálezu je tedy způsob výroby prostředku anti-D imunoglobulinu G s specifickou aktivitou vyšší než 1 % hmotn. anti D IgG na gram celkového IgG z lidské plazmy, vyznačující se tím, že plazma z Rh-negativní krve dárců senzibilizovaných opičím faktorem D nebo frakce plazmy obsahují anti—D IgG:
A) s pH 3,5 až 6,5 a vodivostí od 2 do 4 mS/cm se chromatografuje na iontoměničovém adsorbentu, který má jako funkční skupiny karboxymethylové skupiny, anti-D IgG se naváže na adsorbent,
B) adsorbent s navázaným anti-D IgG se nejprve promyje roztokem s pH 5 až 8 a vodivostí 2 až 4 mS/cm, anti-D IgG se eluuje a potom se
C) eluovaný anti-D IgG s pH 6 až 8 a vodivostí 2 až 4 mS/cm nechá zreagovat s alkalickým adsorbentem s iontoměničovými vlastnostmi, aby se navázaly nežádoucí složky, a nakonec se anti-D IgG zahustí.
Způsobem podle tohoto vynálezu se imunoglobulin může získat přímo z lidské plazmy. Výchozím materiálem je plazma z Rh-negativních dárců senzibilizovaných na opičí faktor D. Jednotlivé darované dávky získané plazmaferezou se před frakcionací a spojováním s výhodou zmrazí a pečlivě se roztají při 0 až 4 C. Spojená plazma by měla obsahovat více než 10 pg anti-D IgG na ml, s výhodou více než 30 pg anti-D IgG na ml. Frakce plazmy se před použitím chromatografie na katexu může předem vyčistit jakýmkoli známým způsobem, jako je například oddělením kryoglobulinů nebo frakčním srážením ethanolem (Cohn E.J. a spol.: J. Amer. Chem. Soc. 68, 459 (1946), Kistler a Nitschmann H.: Vox Sang. 7, 414 (1962).) nebo jinými způsoby srážení, jako je srážení imunoglobulinů síranem amonným, síranem sodným, polyethylenglykolem, kyselinou kaprylovou nebo rivanolem, nebo chromatografickými způsoby nebo kombinací těchto způsobů. Před chromatografii na katexu podle vynálezu se plazma bez kryoglobulinu nebo frakce plazmy obsahující imunoglobulin rozpuštěná v ekvilibračním pufru s výhodou zfiltruje a pro deaktivaci skrytých virů se nechá zreagovat s biokompatibilním organickým rozpouštědlem, jako je například tributylfosfát, a detergentním činidlem, jako je například O-[4-(l,l,3,3-tetramethylbutyl)-fenyl]-dekaoxyethylen) (Triton^ X-1000) podle způsobu popsaného Horowitzem (Thrombosis and Haemostasis 65, 1163 (1991).). Směs plazmy, rozpouštědla a detergentního činidla se pak inkubuje při 37 °C. Potom se fáze oddělí. Čirá dolní fáze se oddělí, zředí, zfiltruje a upraví se na ekvilibrační podmínky chromatografie na katexu, teplota pro následující stupně je, zpravidla, nad 10 °C a s výhodou 20 až 25 °C. V prvním hlavním stupni čištění se anti-D IgG z předem zpracovaného produktu naváže na slabě kyselý
-3CZ 286271 B6 gel iontoměniče s výhodou s karboxymethylovou (CM) skupinou jako funkční skupinou. Vymyje se tak nad 98 % hmot, cizích proteinů; oddělí se zde pravděpodobně rozpouštědla a detergentní činidla použitá pro deaktivaci viru. Anti-D IgG IgG podtříd 1 a 3 specificky zkoncentrovaných tímto způsobem se eluují gelem iontoměniče zvyšující se vodivostí nad lOmS/cm. Eluátem je čistá IgG frakce. Obsahuje méně než 15 % hmot, z celkové IgG frakce a má změněné spektrum IgG podtříd: IgGl a IgG3 jsou silně zkoncentrovány, IgG2 a IgG4 jsou značně sníženy. Tato anti-D IgG frakce se pak vyčistí dalším zpracováním s druhým, slabě alkalickým gelem iontoměniče, s výhodou s diethylaminoethylovou (DEAE) skupinou jako funkční skupinou, anti-D IgG se za zvolených podmínek neváže na iontoměniče. Pro zvýšení koncentrace se vyčištěná anti-D IgG frakce s výhodou naváže podruhé na gel CM ionexu a eluuje se co nejkoncentrovanější za vhodných podmínek. Pak se z ní vyrobí konečný produkt. Pro dosažení podmínek podle vynálezu není významné, jestli anti-D IgG frakce se eluuje zvyšováním koncentrace iontů, posunem pH nebo změnou pufru v prostředku. Pro snížení koncentrace dalších nežádoucích složek, jako jsou například proteázy, se roztok imunoglobulinu může dále nechat zreagovat s adsorbentem, jako je například gel hydroxidu hlinitého, během kteréhokoliv stupně tohoto procesu. Zpracování s rozpouštědlem a detergentním činidlem lze nahradit nebo doplnit jakýmkoliv známým stupněm inaktivace/odstraňování virů, například působením tepla, jako je pasterizace, nebo nanofiltrace.
Anti-D IgG vyrobený podle vynálezu je částečně stabilní. Je dobře snášen při intravenózním podávání, obsah IgA má nižší než 5 pg/ml a obsah IgG 1 až 10 mg/ml. pH je přibližně 5,2. Tento prostředek obsahuje s výhodou až 25 mM fosfátu, až 200 mM NaCl a až 100 mg/ml lidského albuminu, a také 250 až 300 mM aminokyseliny, jako je například glycin, nebo až 100 mg/ml disacharidu, jako je například sacharóza, nebo 50 mg/ml monosacharidu, jako je například manitol.
Anti-D IgG vyrobený podle tohoto vynálezu lze také lyofilizovat při pH přibližně 6,6 při přidání disacharidu, jako je například 100 mg/ml sacharózy, v dávce 2000 pg anti-D IgG.
Připojený výkres slouží jako ilustrace tohoto vynálezu bez tohoto, aby znamenal jakékoliv omezení. Ukazuje typický chromatogram první chromatografíe na katexu v příkladu 1.
Způsob podle vynálezu bude podrobněji vysvětlen v následujících příkladech.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Výchozím materiálem je plazma Rh-negativní ženy nebo Rh-negativního muž, kteří byly senzibilizováni na Rh faktor D pečlivě vybranými erythrocyty. Každá darovaná krev je testována na přítomnost HBs-antigenů, HIV protilátek a protilátek hepatitidy C a na zvýšenou ALAT aktivitu. Plazma, která se získá plazmoforesou, se jednotlivě zmrazí a před frakcionací a spojením se pečlivě roztaje při 0 až 4 °C. Spojená plazma bez ledu s obsahem anti-D 25 pg/ml se odstřeďuje (1 1/min, 12 000 otáček za minutu) v kontinuální odstředivce (Cepa, Lahr, Německo) při 2 až 4 °C. Supematant se zfiltruje 1,2 pm filtrem (Opticap^, Millipore, Bedford, Ma., USA). Potom se deaktivuje virus podle Horowitze a spol. (Thrombosis and Haemostasis 65, 1163 (1991).) působením detergentního činidla s 1 % Tritonu^ X-100 (Rohm a Haas, Frankfurt, Německo) a 1 % tributylfosfátu (Měrek, Darmstadt, Německo) 4 až 4,5 h při 30 °C. Roztok s deaktivovaným virem se nechá stát 10 až 18 h při 37 °C. Čirá dolní fáze se oddělí a zfiltruje se 0,2 pm filtrem (Sealkleen NFP 7002, Pall, Dreieich, Německo). 25 1 zfiltrované plazmy, která byla zpracována s rozpouštědlem a detergentním činidlem, se zředí 1 OmM pufřem fosforečnanu
-4CZ 286271 B6 sodného na vodivost ekvilibračního pufru (50mM pufr fosforečnanu sodného, pH 5,5, 3,2 mS/cm), pH se upraví na 5,5, zfiltruje 1,2 pm filtrem (Opticap(R>, Millipore, Bedford, Ma., USA) a naváže se na MacroPrep(R) 50 CM (BioRad, Hercules, Ka., USA) na koloně s plochou 706 cm2, výškou vrstvy 7,5 cm a průtokem 150 cm/h. Gel se předem ekvilibruje pufrem 50mM fosforečnanu sodného, pH 5,5. Teplota se udržuje na 20 až 25 °C. Kolona se následně promyje 40 objemy kolony pufru 25mM fosforečnanu sodného, pH 7,0. IgG frakce obsahující anti-D se eluuje pufrem 25mM fosforečnanu sodného + 0,2M chloridu sodného, pH 7,2. Typický chromatogram, který se takto získá, je uveden na přiloženém obrázku 1. Na diagramu je znázorněn průběh optické hustoty (OD) při 280 nm s časem (t). Z obrázku je vidět, že během napájení a promývání se většina nežádoucích produktů oddělí, zatímco během eluce se získá hlavní úzké maximum, které obsahuje žádaný anti-D IgG silně zkoncentrovaný v IgG podfrakci. Specifická aktivita je tedy vyšší než 2 % hmotn. anti-D IgG na g celkového IgG. Tento eluát se zředí vodou na vodivost 3,3 mS/cm (1 objem eluátu + přibližně 5 objemů vody), pH se upraví 0,2M NaOH na 7,5 a adsorbuje se dávkovým způsobem 2,5 h na 100 g nosiče DEAESephadex(R) A50 dry (Pharmacia, Uppsala, Švédsko). DEAE gel se předem ekvilibruje pufrem 25mM fosforečnanu sodného, pH 7,5. Nenavázaná anti-D IgG frakce se zfiltruje polypropylenovou sítí a pH se upraví na 5,5. Pro zvýšení koncentrace se DEAE filtrát naváže podruhé na MacroPrep(R) 50 CM (BioRad, Hercules, Ka., USA) na koloně s plochou 71 cm2, výškou vrstvy 12,5 cm a průtokem 230 cm/h. Gel se předem ekvilibruje pufrem 50mM fosforečnanu sodného, pH 5,5. IgG frakce obsahující anti-D se eluuje pufrem 25mM fosforečnanu sodného + 0,2M chloridu sodného, pH 5,5. CM gely se regenerují 1N NaOH, promyjí se tak aby byly nepyrogenní. Takto se mohou opět použít alespoň dvacetkrát. DEAE gel se po každém použití odstraní.
Příklad 2
Výchozím materiálem je plazma Rh-negativní ženy nebo Rh-negativního muže, kteří byly senzibilizováni na Rh faktor D pečlivě vybranými erythrocyty. Každá darovaná krev je testována na přítomnost HBs-antigenů, HIV protilátek a protilátek hepatitidy C a na zvýšenou ALAT aktivitu. Plazma, která se získá plazmaferezou, se jednotlivě zmrazí a před frakcionací a spojením se pečlivě roztaje při 0 až 4 °C. Spojená plazma bez ledu se odstřeďuje (1 1/min, 12 000 otáček za minutu) v kontinuální odstředivce (Cepa, Lahr, Německo). Supematant se zfiltruje 1,2 pm filtrem (Opticap(R), Millipore, Bedford, Ma., USA). Potom se deaktivuje virus podle Horowitze a spol. (Thrombosis and Haemostasis 65, 1163 (1991)) působením detergentního činidla s 1 % Tritonem^ X-100 (Rohm a Haas, Frankfurt, Německo) a 1 % tributylfosfátu (Měrek, Darmstadt, Německo) 4 až 4,5 h při 30 °C. Roztok s deaktivovaným virem se nechá stát 10 až 18 h při 37 °C. Čirá dolní fáze se oddělí a zfiltruje se 0,2 pm filtrem (Sealkleen NFP 7002, Pall, Dreieich, Německo). 25 1 zfiltrované plazmy, která byla zpracována s rozpouštědlem a detergentním činidlem, se zředí lOmM pufrem fosforečnanu sodného na vodivost ekvilibračního pufru (50mM pufr fosforečnanu sodného, pH 5,5, 3,2 mS/cm), pH se upraví na 5,5, zfiltruje 1,2 pm filtrem (Opticap(R), Millipore, Bedford, Ma., USA) a naváže se na MacroPrep(R) 50 CM (BioRad, Hercules, Ka., USA) na koloně s plochou 706 cm2, výškou vrstvy 7,5 cm a průtokem 150 cm/h. Gel se předem ekvilibruje pufrem 50mM fosforečnanu sodného, pH 5,5. Teplota se udržuje na 20 až 25 °C. Kolona se následně promyje 40 objemy kolony pufru 25mM fosforečnanu sodného, pH 7,0. IgG frakce obsahující anti-D se eluuje pufrem 25mM fosforečnanu sodného + 0,2M chloridu sodného, pH 7,5. Při pH 6,6 po přidání 100 mg/ml sacharózy na dávku 200 pg anti-D IgG se eluát zfiltruje 0,2pm filtrem (Millidisk(R) MCGL-10, Millipore, Bedford, Ma., USA) a následně se lyofilizuje.
-5CZ 286271 B6
Příklad 3 ml plazmy, která byla zpracována s rozpouštědlem a detergentním činidlem a zředěna na vodivost ekvilibračního pufru (3,3 mS/cm), se chromatografuje na koloně s plochou 2 cm2 a výškou vrstvy 5 cm při průtoku 30 cm/h s nosičem DEAE-Sephadex(R) A50 (Pharmacia, Uppsala, Švédsko). Předtím se gel ekvilibruje pufrem 25mM fosforečnanu sodného, pH 7,5. Teplota se udržuje na přibližně 20 až 25 °C. Pro další čištění se pH nenavázané IgG frakce upraví 0,2M HC1 na 5,5 a vodivost na 3,2 mS/cm a naváže se na MacroPrepw 50 CM (BioRad, Hercules, Ka., USA) na koloně s plochou 0,8 cm2, výškou vrstvy 6,5 cm a průtokem 230 cm/h. Gel se předem ekvilibruje pufrem 50mM fosforečnanu sodného, pH 5,5. IgG frakce obsahující anti-D se eluuje pufrem 25mM fosforečnanu sodného + 0,2M chloridu sodného, pH 5,5. DEAE SephadexfR)A50 gel se po každém použití odstraní, MacroPrep^ 50 CM gel se regeneruje 1N NaOH, promyje se tak, aby byl nepyrogenní. Takto se může opět použít alespoň dvacetkrát.
Příklad 4
Zopakují se způsoby podle příkladů 1 až 3, ale místo plazmy se jako výchozí materiál použije frakce plazmy obsahující imunoglobulin, která se vyrobí zodpovídajícího množství výchozí plazmy tak, že se získají frakce I+II+III nebo frakce II+III podle Cohna (Cohn E.J. a spo.: J. Amer. Chem. Soc. 68, 459 (1949) nebo precipitát A nebo precipitát gamaglobulinu podle Kistlera a Nitschmanna (Kistler P. a Nitschmann H.: Vox Sang 7, 414 (1962).) a rozpustí se v ekvilibračním pufru na koncentraci 30 g proteinu na 1. Získají se analogické výsledky.
Příklad 5
Zopakují se způsoby podle příkladů 1 až 4, při čemž se IgG frakce obsahující anti-D eluuje z MacroPrep^ 50CM gelu (BioRad, Hercules, Ka., USA) eluuje buď 0,lM glycinym + 0,5M chloridem sodným, pH 9, nebo obecně změnou pH a/nebo změnou iontové síly a/nebo jiným změnami ve složení pufru, místo pufrem 25 mM fosforečnanu sodného + 0,2M chloridu sodného, pH 7,5. Získají se analogické výsledky.
Příklad 6
Zopakují se způsoby podle příkladů 1 a 2, při čemž se MacroPrep^ 50CM gel (BioRad, Hercules, Ka., USA) promývá lOmM glycinem místo pufrem 25 mM fosforečnanu sodného, pH 7,0. Získají se analogické výsledky.
Příklad 7
Anti-D eluát získaný podle příkladu 1 se upraví na následující kapalné prostředky:
| kapalný prostředek I | kapalný prostředek II | kapalný prostředek ΙΠ | kapalný prostředek IV | |
| anti-D | 100 pg/ml | 100 pg/ml | 100 pg/ml | 100 pg/ml |
| glycin | 20,6 mg/ml | 20,6 mg/ml | 20,6 mg/ml | 20,6 mg/ml |
| albumin | - | 10 mg/ml | 50 mg/ml | 100 mg/ml |
| pH | 5,20 | 5,20 | 5,20 | 5,20 |
| dávka | 2 ml | 2 ml | 2 ml | 2 ml |
-6CZ 286271 B6
| kapalný prostředek V | kapalný prostředek VI | kapalný prostředek VII | kapalný prostředek vni | |
| anti-D | 100 pg/ml | 100 pg/ml | 100 pg/ml | 100 pg/ml |
| glycin | 50 mg/ml | 50 mg/ml | 50 mg/ml | 50 mg/ml |
| albumin | - | 10 mg/ml | 50 mg/ml | 100 mg/ml |
| pH | 5,20 | 5,20 | 5,20 | 5,20 |
| dávka | 2 ml | 2 ml | 2 ml | 2 ml |
a po zfíltrování 0,2 pm filtrem (Millipak(R)-20, Millipore, Bedford, Ma., USA) se za sterilních podmínek naplní do injekčních stříkaček Hypac pro okamžité použití (Vetter, Ravensburg, Německo).
Příklad 8
DEAE filtrát podle příkladu 1 při pH přibližně 5,5 se nechá reagovat s 0,2 g hydroxidu hlinitého na g proteinu 30 minut při 20 až 25 °C. Potom se postupuje dále podle příkladu 1.
Příklad 9
Zopakují se způsoby podle příkladů 1 až 6, při čemž se místo MacroPrep<R) 50CM použije jeden z následujících gelů se stejnými funkčními skupinami: CM-Spherodex(R) (Biosepra, Villeneuve la Garenne, Francie), CM-Trisacryl(R) (Biosepra, Villeneuve la Garenne, Francie), CMSepharose(R>FF (Pharmacia, Uppsala, Švédsko) nebo Fractogel(R)TSK CN-650 (Měrek, Darmstadt, Německo). Získají se analogické výsledky.
Příklad 10
Zopakují se způsoby podle příkladu 1 a 3 až 6, při čemž se místo DEAE-Sephadexu(R) A50 použije MacroPrep(R> DEAE (BioRad, Hercules, Ka., USA). Získají se analogické výsledky.
Chromatografické stupně se ve shora uvedených příkladech 1 až 6 provádějí jako dávkové, kolonové nebo membránové chromatografie. Získají se analogické výsledky.
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (13)
1. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G se specifickou aktivitou vyšší než 1 % hmotn. anti-D IgG na gram celkového IgG z lidské plazmy, vyznačující se tím, že plazma z rh negativní krve rh faktorem D senzibilizovaných donorů nebo plazmová frakce obsahující anti-D IgG:
A) s hodnotu pH v oblasti 3,5 až 6,5 s hodnotou vodivosti v rozmezí od 2 do 4 mS/cm se chromatografuje na iontoměničovém adsorbentu, který má jako funkční skupiny karboxymethylové skupiny, anti-D IgG se naváže na adsorbent,
-7 CZ 286271 B6
B) adsorbent s navázaným anti-D IgG se nejprve promyje roztokem s pH 5 až 8 a vodivostí 2 až 4 mS/cm, anti-D IgG se eluuje a potom se
C) eluovaný anti-D IgG s pH 6 až 8 a vodivostí 2 až 4 mS/cm nechá reagovat s alkalickým adsorbentem s iontoměničovými vlastnostmi, přičemž se navážou nežádoucí složky a nakonec se anti-D IgG zahustí.
2. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároku 1, vyznačující se tím, že anti-D IgG se zahustí ve stupni C) a že stupně A) a B) se alespoň jednou zopakují.
3. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunglobulinu G podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že se jako výchozí materiál používá plazma, která se předem nechá zreagovat s bazickým adsorbentem s iontoměničovými vlastnostmi, přičemž se navážou nežádoucí složky.
4. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že obsah proteázy v plazmě nebo ve frakci plazmy se v průběhu kteréhokoliv stupně procesu sníží během inkubace s adsorbentem, jako je gel hydroxidu hlinitého.
5. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že všechny chromatografické stupně na iontoměniči a jestliže je to nutné další adsorpční stupně, se provádějí také jako dávková chromatografie, sloupcová chromatografie nebo membránová chromatografie.
6. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že alkalický adsorbent ve stupni C) má jako funkční skupiny diethylaminoethylové skupiny.
7. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že eluce ve stupni B) se provádí se změnou pH a/nebo změnou pufru - změnou iontové koncentrace nebo vodivosti.
8. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že v alespoň jednom stupni se provádí inaktivace virů.
9. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároku 8, vyznačující se tím, že se provádí inaktivace virů tak, že se zpracuje plazma nebo frakce plazmy obsahující anti-D IgG s detergentním prostředkem a tributylfosfátem, fáze směsi obsahující rozpouštědlo a detergentní prostředek se oddělí a použije se čirá dolní fáze.
10. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároku 8, vyznačující se tím, že se provádí inaktivace virů tak, že se zpracují teplem.
11. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že v alespoň jednom stupni se provádí odstranění viru.
12. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároku 10, vyznačující se tím, že odstranění viru se provádí nanofiltrací.
-8CZ 286271 B6
13. Způsob výroby koncentrátu anti-D imunoglobulinu G podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že výchozí plazma nebo výchozí frakce plazmy se před stupněm chromatografie na iontoměniči ve stupni A) podrobí alespoň jednomu z následujících stupňů:
a) plazma se zmrazí, po jejím roztátí a před dalším použitím se kryosraženina oddělí pomocí filtrace a/nebo odstředění
b) plazma se nechá zpracovat se směsí rozpouštědla s detergentním činidlem, inkubuje se při
10 37 °C a fáze se oddělí.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP93810912A EP0659767B2 (de) | 1993-12-27 | 1993-12-27 | Verfahren zur Herstellung eines Konzentrates von Anti-D-Immunoglobulin G und pharmazeutische Zusammensetzung, die dieses enthält |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ249295A3 CZ249295A3 (en) | 1996-01-17 |
| CZ286271B6 true CZ286271B6 (cs) | 2000-03-15 |
Family
ID=8215103
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19952492A CZ286271B6 (cs) | 1993-12-27 | 1994-12-22 | Způsob výroby prostředku anti-D imunoglobulinu G a farmaceutický prostředek obsahující anti-D IgG |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5593675A (cs) |
| EP (1) | EP0659767B2 (cs) |
| JP (1) | JP2926463B2 (cs) |
| KR (1) | KR100368563B1 (cs) |
| AT (1) | ATE175979T1 (cs) |
| AU (1) | AU682243B2 (cs) |
| CA (1) | CA2138921C (cs) |
| CZ (1) | CZ286271B6 (cs) |
| DE (1) | DE59309332D1 (cs) |
| DK (1) | DK0659767T4 (cs) |
| ES (1) | ES2129076T5 (cs) |
| FI (1) | FI112168B (cs) |
| GR (1) | GR3029817T3 (cs) |
| HU (1) | HU216864B (cs) |
| NO (1) | NO315331B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ278057A (cs) |
| PL (1) | PL180358B1 (cs) |
| SI (1) | SI9420008B (cs) |
| TW (1) | TW311884B (cs) |
| WO (1) | WO1995018155A1 (cs) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999057134A1 (en) * | 1998-05-06 | 1999-11-11 | Genentech, Inc. | Protein purification by ion exchange chromatography |
| JP4685238B2 (ja) * | 1998-06-09 | 2011-05-18 | ツエー・エス・エル・ベーリング・アクチエンゲゼルシヤフト | 静脈投与用免疫グロブリン及び他の免疫グロブリン生成物の製造法 |
| DE19923027C2 (de) * | 1999-05-19 | 2002-09-19 | Aventis Behring Gmbh | Verfahren zur Inaktivierung von Viren |
| US6475749B1 (en) * | 1999-08-11 | 2002-11-05 | The Regents Of The University Of California | Rh hybrid antibody |
| SE0001128D0 (sv) * | 2000-03-30 | 2000-03-30 | Amersham Pharm Biotech Ab | A method of producing IgG |
| ES2184594B1 (es) * | 2001-01-17 | 2004-01-01 | Probitas Pharma Sa | Procedimiento para la produccion de gammaglobulina g humana inactivada de virus. |
| EP1532983A1 (en) * | 2003-11-18 | 2005-05-25 | ZLB Bioplasma AG | Immunoglobulin preparations having increased stability |
| CA2458750C (en) | 2004-02-23 | 2012-02-07 | Bayer Inc. | Isoolefin-diolefin production process and apparatus therefor |
| US20060263357A1 (en) * | 2005-05-05 | 2006-11-23 | Tedder Thomas F | Anti-CD19 antibody therapy for autoimmune disease |
| TWI391399B (zh) | 2005-05-25 | 2013-04-01 | Hoffmann La Roche | 測定溶離多肽之鹽濃度之方法 |
| EA017733B1 (ru) * | 2006-08-28 | 2013-02-28 | Арес Трейдинг С.А. | СПОСОБ ОЧИСТКИ Fc-СЛИТЫХ БЕЛКОВ |
| WO2008025748A1 (en) * | 2006-08-28 | 2008-03-06 | Ares Trading S.A. | Process for the purification of fc-containing proteins |
| IT1397061B1 (it) * | 2009-12-28 | 2012-12-28 | Kedrion Spa | Nuovo processo di purificazione su scala industriale di gammaglobuline da plasma umano per uso industriale. |
| JP6078344B2 (ja) | 2010-02-04 | 2017-02-08 | ツェー・エス・エル・ベーリング・アクチエンゲゼルシャフト | 免疫グロブリン製剤 |
| EP2361636A1 (en) | 2010-02-26 | 2011-08-31 | CSL Behring AG | Immunoglobulin preparation and storage system for an immunoglobulin preparation |
| RU2467783C2 (ru) * | 2010-07-30 | 2012-11-27 | Закрытое акционерное общество "БиоХимМак СТ" | Способ хроматографического выделения иммуноглобулина |
| EA027353B1 (ru) * | 2010-09-17 | 2017-07-31 | Баксалта Инкорпорейтид | СТАБИЛИЗАЦИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ С ПОМОЩЬЮ ВОДНОГО СОСТАВА С ГИСТИДИНОМ ПРИ pH ОТ СЛАБОКИСЛОГО ДО НЕЙТРАЛЬНОГО |
| CN103874708B (zh) | 2011-08-26 | 2018-07-10 | 百深有限责任公司 | 用于降低血浆来源免疫球蛋白组合物的血栓栓塞可能性的方法 |
| AU2013203043B2 (en) * | 2013-03-15 | 2016-10-06 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Methods to produce a human plasma-derived igg preparation enriched in brain disease-related natural iggs |
| US10287315B2 (en) * | 2014-03-11 | 2019-05-14 | Green Cross Holdings Corporation | Method for purifying immunoglobulin |
| KR101917197B1 (ko) * | 2014-03-11 | 2018-11-09 | 주식회사 녹십자홀딩스 | 면역글로불린의 정제방법 |
| CN106999588A (zh) | 2014-12-03 | 2017-08-01 | 瑞士杰特贝林生物制品有限公司 | 具有增加的稳定性的包含免疫球蛋白的药物产品 |
| MA52945A (fr) * | 2018-06-22 | 2021-04-28 | Genmab As | Procédé de production d'un mélange contrôlé d'au moins deux anticorps différents |
| EP4349859A1 (en) * | 2023-01-27 | 2024-04-10 | CSL Behring AG | Method to purify anti-d immunoglobulin g from plasma |
| WO2024156861A1 (en) * | 2023-01-27 | 2024-08-02 | Csl Behring Ag | Method for reducing protease activity in a solution comprising anti-d immunoglobulin g |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3869436A (en) * | 1971-06-01 | 1975-03-04 | Statens Bakteriologiska Lab | Method for fractionating plasma proteins using peg and ion-exchangers |
| ATE19735T1 (de) * | 1982-02-08 | 1986-05-15 | Schweiz Serum & Impfinst | Intravenoes verabreichbares humanes immunglobulin und verfahren zu dessen herstellung. |
| US4434093A (en) * | 1982-07-26 | 1984-02-28 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Methods for preparation of HBs Ag free gamma globulins |
| DE3640513A1 (de) * | 1986-11-27 | 1988-06-09 | Biotest Pharma Gmbh | Verfahren zur herstellung eines virussicheren, lagerstabilen und intravenoes vertraeglichen immunglobulin-g-praeparates |
| US5118796A (en) * | 1987-12-09 | 1992-06-02 | Centocor, Incorporated | Efficient large-scale purification of immunoglobulins and derivatives |
| US5138034A (en) * | 1989-07-12 | 1992-08-11 | The Green Cross Corporation | Method of fractionating plasma proteins |
| US5177194A (en) * | 1990-02-01 | 1993-01-05 | Baxter International, Inc. | Process for purifying immune serum globulins |
-
1993
- 1993-12-27 EP EP93810912A patent/EP0659767B2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-12-27 ES ES93810912T patent/ES2129076T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-12-27 AT AT93810912T patent/ATE175979T1/de active
- 1993-12-27 DE DE59309332T patent/DE59309332D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-12-27 DK DK93810912T patent/DK0659767T4/da active
-
1994
- 1994-12-21 US US08/360,334 patent/US5593675A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-12-22 CA CA002138921A patent/CA2138921C/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-12-22 SI SI9420008A patent/SI9420008B/sl unknown
- 1994-12-22 CZ CZ19952492A patent/CZ286271B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-12-22 PL PL94310435A patent/PL180358B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1994-12-22 KR KR1019950703644A patent/KR100368563B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1994-12-22 HU HU9502514A patent/HU216864B/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-12-22 AU AU14143/95A patent/AU682243B2/en not_active Ceased
- 1994-12-22 NZ NZ278057A patent/NZ278057A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-12-22 WO PCT/EP1994/004267 patent/WO1995018155A1/en not_active Ceased
- 1994-12-23 NO NO19945032A patent/NO315331B1/no not_active IP Right Cessation
- 1994-12-27 JP JP6337017A patent/JP2926463B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1994-12-27 FI FI946103A patent/FI112168B/fi not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-01-10 TW TW084100147A patent/TW311884B/zh not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-03-30 GR GR990400907T patent/GR3029817T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ286271B6 (cs) | Způsob výroby prostředku anti-D imunoglobulinu G a farmaceutický prostředek obsahující anti-D IgG | |
| KR100501263B1 (ko) | 정맥 주사용 면역글로불린의 제조 방법 및 그 외의 면역글로불린 제품 | |
| US7186410B2 (en) | Method for preparing human immunoglobulin concentrates for therapeutic use | |
| JP4685238B2 (ja) | 静脈投与用免疫グロブリン及び他の免疫グロブリン生成物の製造法 | |
| US5886154A (en) | Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies | |
| KR20000015935A (ko) | 농축 항체 제제 | |
| US6955917B2 (en) | Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies | |
| TWI610937B (zh) | 用於降低血漿來源免疫球蛋白組成物之血栓性栓塞可能性的方法 | |
| JP2014520829A (ja) | 多価免疫グロブリン濃縮物の製造方法 | |
| JPH0365327B2 (cs) | ||
| Wordell | Use of intravenous immune globulin therapy: an overview | |
| HK1009277A1 (en) | Process to prepare an anti-d immunoglobulin g concentrate and pharmaceutical compositions comprising it | |
| HK1009277B (en) | Process to prepare an anti-d immunoglobulin g concentrate and pharmaceutical compositions comprising it | |
| MXPA00012230A (en) | Process for producing immunoglobulins for intravenous administration and other immunoglobulin products | |
| Yap | Humoral Functions of Immunoglobulin: Relationship to Purification Technology of Intravenous Immunoglobulin | |
| Curling | Chromatographic Methods of Plasma Fractionation | |
| Patra | 6 Intravenous | |
| HK1151044B (en) | Process for manufacturing immunoglobulins for intravenous administration and other immunoglobulin-like products |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20131222 |