JP2014520829A - 多価免疫グロブリン濃縮物の製造方法 - Google Patents
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Abstract
Description
(a)、カプリル酸によってタンパク汚染菌を除去してプロテアーゼを含まない溶液を得る段階
(b)その後の上記のプロテアーゼを含まない溶液の流動床でのクロマトグラフィ段階、
本発明のこの方法によってヒト多価免疫グロブリンの濃縮物を、血漿の初期溶液または免疫グロブリンを濃縮した血漿画分1リットル当たり4.5g以上の免疫グロブリンの収率で得ることができる。
ヨーロッパ薬局方、第7.5版(01/2012:0918)規格2.6.15
溶出段階はGタイプの免疫グロブリン(IgG)を選択的に抽出するように定義するのが有利である。
(a)酸性pHでカプリル酸によってタンパク汚染菌を除去してプロテアーゼを含まない溶液を得る段階、
(b)酸性pHでの清澄段階、
(c)上記のプロテアーゼを含まない溶液の流動床でのクロマトグラフィ段階、
(d)緩衝液で溶出し免疫グロブリンを溶出する段階。
ヨーロッパ薬局方の第7.5版(01/2012:0918)
キストラーおよびニッチマン法(the method of Kistler and Nitschmann) (1962, Vox Sang. 7, 14))
(1)アルブミン、トランスフェリン、α\och2-マクログロブリン、プラスミノーゲン、フィブリノゲン等、
(2)凝固因子、例えばFX, FXI,またはFXII(これらに限定されるものではない)
(3)プロテアーゼ、例えばカリクレイン、プレカリクレインまたはプレカリクレインのアクチベーター(これらに限定されるものではない)、
(4)抗Aおよび抗B 赤血球凝集素。
(1)予めpH4.5〜8, 特に 4.5〜7.5; 4.5 〜7.0; 4.5〜 6.8; 4.5 〜 6.5; 5.0〜7.0; 5.0〜6.5; 5.5〜6.3;または5.7 〜 6.3の緩衝液で平衡化したクロマトグラフィカラムに、深層濾過による清澄段階が実施された、予め同じpH、すなわちpH4.5〜8, 特に 4.5〜7.5; 4.5 〜7.0; 4.5〜 6.8; 4.5 〜 6.5; 5.0〜7.0; 5.0〜6.5; 5.5〜6.3;または5.7 〜 6.3に調整された溶液を供給し、
(2)カラムで全ての非吸着タンパクが除去されるまでカラムを緩衝液で洗浄し、
(3)カラム上に吸着された多価免疫グロブリンを、pH8〜10, 好ましくは8〜9.8; 8.3〜9.8; 8.5 〜 9.8; 8.8 〜 9.8; 9.0〜 9.8; 9.5 〜 9.8に調整した溶出緩衝液で溶出し、
(4)ヒト多価免疫グロブリンを濃縮した溶液を回収する。
(i)ウイルス不活化段階、
(ii)ウイルス不活化段階で用いられる化学成分の除去と、IgAおよびIgM 汚染菌の減少を目的とした、前段階の最後に得られる溶液の陰イオン交換クロマトグラフィ段階、
(iii)前段階の最後に得られる溶液から抗A抗体および抗B抗体を除去する段階、
(iv)孔径が100から15nmまでのナノメートルフィルタに通す濾過段階、
(v)前段階からの溶液を限外濾過によって濃縮し、配合処理する段階、
(vi)通常の滅菌濾過段階。
(i)カプリル酸によってタンパク汚染菌を除去する段階、
(ii)深層濾過による清澄段階、
(iii)「混合モード」タイプの流動床クロマトグラフィ段階、
(iv)溶剤/洗剤処理によるウイルス不活化段階、
(v)陰イオン交換クロマトグラフィ段階、
(vi)抗A抗体および抗B抗体を除去する段階、
(vii)孔径が100から15nmのナノメートルフィルターに通す濾過段階、
(viii)前段階からの溶液を限外濾過で濃縮し、配合処理する濃縮段階と、それに続く通常の滅菌濾過段階。
(i)初期溶液またはエタノール分画によって免疫グロブリンを濃縮した血漿または血漿画分を処理し、コーン法(非特許文献1)または非特許文献5(キストラーおよびニッチマン法(the method of Kistler and Nitschmann) (1962, Vox Sang. 7, 414))に従って「I+II+III」沈殿物または「II+III」沈殿物を得る段階、
(ii)「I+II+III」沈殿物または「II+III」沈殿物を、撹拌下に、20℃(好ましくは4〜15℃)でWFI(注射用水)水を用いて溶液にする段階。沈殿した多価免疫グロブリンを溶液化を容易にするために、種々のイオン、例えば陽イオン例えばNa+、陰イオン例えばCl-、例えばNaClを供給できる。塩の濃度は20mM以下、好ましくは5〜15mM、より好ましくは10mMであり、例えばモル濃度が10mMのNaClである。
(iv) (iii)段階から生じるプロテアーゼを含まない血漿溶液を深層フィルターによって酸性pHで濾過する段階。深層フィルターは流動床モードで使用するクロマトグラフィカラムに濾液を注入できるだけの大きな孔径を有する。
(vi)前段階の最後に得られる溶液を流動床クロマトグラフィに通してヒト多価免疫グロブリンを濃縮した血液溶液を得る段階。このクロマトグラフィは本発明方法の次の段階に必要な緩衝液に近い緩衝液中で多価免疫グロブリンを溶出でき、それによって、透析、限外濾過段階または溶液の再配合処理に必要な任意段階に起因する多価免疫グロブリンの減少を少なくするのが有利である。
(viii)前段階の最後に得られる溶液をTMAE基をグラフトした、架橋多糖類またはビニルポリマーゲルを用いた陰イオン交換クロマトグラフィによって、前段階で用いた溶剤および洗剤を除去し且つIgAおよびIgMタイプの汚染菌を除去する段階。
(x)孔径が50nm(例えばPALL DV20フィルター)または孔径が35nm(例えばPLANOVA 35 Nフィルター)の前置フィルター、その後に続く、孔径が20nm(例えばPLANOVA 20 Nフィルター)または孔径が15nm(例えばPLANOVA 20 NまたはBIOEXフィルター)のフィルターを用いて、前段階の最後に得られる溶液をナノ濾過し、(ix)段階の処理に耐性を示すプリオンまたはウイルスを除去する段階。
(xi)前段階の最後に得られる溶液を濃縮または透析濾過して、少なくとも50 g/Lの多価免疫グロブリンを含む溶液を得る段階。
ヨーロッパ薬局方の第6.7版(01/2012:0918)
(a)本発明方法で得られるヒト多価免疫グロブリンの濃縮物に、一種または複数の医薬上許容可能な安定剤を添加する段階、
(b)必要に応じて行なう、前段階で得られる医薬品を凍結または凍結乾燥して、医薬品を液体、凍結または凍結乾燥した形態にする段階。
1.1 「I+II+III」沈殿物を溶液化
出発材料としてはコーン法または非特許文献5に従ってエタノール分画された血漿から得られる「I+II+III」沈殿物を用いる。この沈殿物を、228 mLの脱塩水に対して56.7 gの量または同等の比率で溶液化する。混合物を15ーC ア 5ーCで20分間撹拌した後、温度を22ーC ア 2ーCに上げ、カプリル酸(1重量%/容量)を、溶液化した「I+II+III」沈殿物に徐々に添加する。カプリル酸を添加して得られた溶液のpHを4.8に調整し、溶液を撹拌下に60分間維持する。
得られた溶液をSEITZ(登録商標)T 2600 フィルター(Pall Corporation)の深層濾過によって清澄化する。この濾過は「I+II+III」沈殿物中に存在する濾過アジュバントと、カプリル酸の添加によって生じたタンパク沈殿物の両方を保持する。
濾過収率を最適化するためにサンプルのpHを調べることも有利である。
タンパク溶液のpHは濾過した後にだけ6.0に調整する。すなわち、pHを4.8から6.0に調整すると、フィルターに保持されたわずかな沈殿物(不溶性の多価免疫グロブリン)が生じ、従って、多価免疫グロブリンの濾過収率が低下する。
フィルターのリンス容量(無熱性精製水)は最終収率を最適化するために初期サンプルの容量と同じにする。
運転条件は以下の通り:
・平衡化および洗浄緩衝液: 20 mM Na/Na2PO4、pH 6
・溶出緩衝液 20 mM グリシン/20 mM NaCl、pH 9.8
Gly/NaCl緩衝液のpH作用による溶出を選択することで単なる希釈(伝導率およびpHの調整)によってイオン交換カラム(TMAE Fractogel)に直ちに注入できる状態のサンプルを得ることができる。
実施例1.3による「混合モード」タイプの流動床クロマトグラフィからの溶出液に、NeurathおよびHorowitzの特許文献7(米国特許第4,764,369号明細書)に記載のような溶剤/洗剤によるウイルス不活化処理を実施する。
10倍濃縮した溶剤/洗剤混合物は3%のTnBP (トリ(n-ブチル) ホスフェート) および10%のオクトキシノールを含む。溶出液中の最終濃度は0.3%のTnBP および 1% のオクトキシノールである。
1時間の不活化後、溶出液をpH9.0に調整し、水に希釈して1,100 μS/cm 以下の伝導率を得る。
使用するイオン交換ゲルはTMAE-Fractogel(登録商標)(Merck)である。
・予備平衡化緩衝液: グリシン 80 mM / NaCl 80 mM、pH 9
・平衡化緩衝液: グリシン 9 mM / NaCl 9 mM、pH 9。
サンプルを入れた後、カラムを平衡化緩衝液で洗浄し、次いで、20 mM Na/Na2 PO4 緩衝液、pH 6.2中で溶出する。
使用するアフィニティゲルはIso A/Iso B Hypercel(Pall Corporation)である。
TMAEクロマトグラフィの溶出液に、このアフィニティクロマトグラフィを実施し、抗A抗および抗B抗体を除去する。目的の多価免疫グロブリンは保持されずにカラムを通過する。
・脱塩水によるゲルの平衡化
・カラム洗浄を用いない非吸着画分の回収。
アフィニティクロマトグラフィからのタンパク溶液を深層フィルター90LA CUNO、3M、次いで、0.2 μmフィルターで濾過する。これらのフィルターを水洗し、リンス溶液は濾液と混合する。
前段階の濾液をpH4.5に調整し、Fluorodyne IIフィルター0.1 μm(Pall Corporation)でオンラインで前置濾過し、DV50フィルター(Pall Corporation)、次いで、Planova 20N フィルター(Asahi)でナノ濾過する。
カットオフ閾値が30 kDaのカセットで限外濾過によって、産物を約80 g/Lに予備濃縮し、次いで、伝導率が<600 μS/cmになるまで定容で透析濾過する。産物を次いで配合し、50 g/Lのタンパクに調整する。
本発明方法をパイロット規模で用いて多価免疫グロブリン濃縮物を得る
2.1 「I+II+III」沈殿物の溶液化
出発材料としては非特許文献5に従ってエタノールで分画した血漿から得られる「I+II+III」沈殿物を用いる。この沈殿物を、12Lの脱塩水に対して3kgの量で溶液化する。混合物を少なくとも10ーC ± 3ーCで20分間撹拌する。次いで、温度を22ーC ± 2ーCに上げ、溶液に戻した「I+II+III」沈殿物にカプリル酸(1重量%/容量)を徐々に添加する。カプリル酸を添加して得られた溶液のpHを4.8に調整し、溶液を撹拌下に60分間維持する。
得られた溶液をSEITZ(登録商標)T 2600 フィルター(Pall Corporation)での深層濾過で清澄化する。この濾過は「I+II+III」沈殿物中に存在する濾過アジュバントと、カプリル酸の添加によって生じるタンパク沈殿物の両方を保持する。このテストで用いた表面積は1m2の濾過媒体当たり8.7kgの沈殿物である。
フィルターのリンス容量(無熱性精製水)は初期サンプルの容量、すなわち15Lと同じである。
使用するクロマトグラフィゲルはRhobust IGIVゲル(Upfront)である。
直径10cmのカラム中に4.3 Lのゲル。
運転条件は以下の通り:
・平衡化および洗浄緩衝液: 20 mM Na/Na2PO4、pH 6
・溶出緩衝液 20 mM グリシン/20 mM NaCl、pH 9.8
「混合モード」タイプの流動床クロマトグラフィからの溶出液に、NeurathおよびHorowitzの特許文献7に記載のような溶剤/洗剤によるウイルス不活化処理を実施する。
10倍濃縮した溶剤/洗剤混合物は3%のTnBP (トリ(n-ブチル) ホスフェート) および10%のオクトキシノールを含む。溶出液中の最終濃度は0.3%のTnBP および 1% のオクトキシノールである。
少なくとも1時間の不活化の後、溶出液をpH9.0に調整し、水に希釈して1,100 オS/cm 以下の伝導率を得る。
適用するイオン交換ゲルはEMD-TMAE-Fractogel(登録商標)(Merck)である。
直径12.7cmのカラム中に4 Lのゲル。
・予備平衡化緩衝液: グリシン 80 mM / NaCl 80 mM、pH 9
・平衡化緩衝液: グリシン 9 mM / NaCl 9 mM、pH 9。
サンプルを入れた後、カラムを平衡化緩衝液で洗浄し、次いで、20 mM Na/Na2 PO4 緩衝液、pH 6.2中で溶出する。
使用するアフィニティゲルはIso A/Iso B Hypercel(Pall Corporation)である。直径7cmのカラム中の154mLのゲル。
TMAEクロマトグラフィからの溶出液に、このアフィニティクロマトグラフィを実施し、抗A抗体および抗B抗体を除去する。目的の多価免疫グロブリンは保持されずにカラムを通過する。
・脱塩水によるゲルの平衡化
・カラム洗浄を用いない非吸着画分の回収。
Iso A/Iso B Hypercelアフィニティクロマトグラフィからのタンパク溶液を深層フィルター90LA CUNO、3M、次いで、0.2 μmフィルターで濾過する。これらのフィルターを水洗したリンス溶液は濾液に合せる。
pH4.5に調整された前段階の濾液を、Fluorodyne IIフィルター0.1 オm(Pall Corporation)でオンラインで前置濾過し、DV50フィルター(Pall Corporation)、次いで、Planova 20N フィルター(Asahi)でナノ濾過する。
カットオフ閾値が30 kDaのカセットで限外濾過して、産物を約80 g/Lに予備濃縮し、次いで、伝導率が<600 オS/cm以下になるまで定容で透析濾過する。産物を次いで配合し、50 g/Lのタンパクに調整する。
本発明方法の収率
実施例1および実施例3に記載の本発明方法に従って3つの異なる「I+II+III」沈殿物を用いて3つのバッチ(ロット)を作った。1%のカプリル酸を用いてプロテアーゼを除去した。濾過はSEITZ T 2600 プレートフィルタープレスで行う。
対照ロットは特許文献2(欧州特許出願第1 385 886号公報)に記載の参照方法に従って処理した。
本発明の新規な方法の収率結果を[表1]に示す:
上記実施例におけるゲインは、本発明のバッチと同じ沈殿物から作られた対照バッチとの間で、0.26 gIgG/血漿である。
抗補体活性
3つの異なる「I+II+III」沈殿物から本発明方法に従って3つの試験的バッチをパイロット規模で作った。これらのバッチを同じ規模(パイロットサイズ)であるが特許文献2(欧州特許出願第1 385 886号公報)に記載の静脈注射によって免疫グロブリンを産生する工業的方法に従って作ったバッチと、同じ沈殿物から作られた特許文献2(欧州特許出願第1 385 886号公報)に記載の方法に従って調製された3つの工業的バッチと比較した。
パイロットサイズで作られたバッチは、工業的バッチの少なくとも10%のサイズを有するバッチに対応する。
本発明のバッチは、非特許文献4(ヨーロッパ薬局方の第7.5版(01/2012:0918)のパラグラフ2.6. 17)のテストに従って測定した抗補体活性(ACA)が、特許文献2(欧州特許出願第1 385 886号公報)に記載の方法で作られたバッチの抗補体活性より常に低い。さらに、この基準で18カ月以内に観察される進行率は本発明で作られたバッチの方が低い。
抗補体活性(ACA)の結果は[表2]に示してある:
本発明方法で生産した免疫グロブリンの純度
実施例2に記載のパイロットバッチに関する純度分析データを[表3]にまとめた。
本発明方法で生産した免疫グロブリンの安定性
実施例2に記載のパイロットバッチからの配合処理済み製品を4℃に維持し、また、同じ初期沈殿物で工業的バッチのアリコートを作り、同じ条件下に同じ段階で維持した。6カ月ごとに実施したサンプリングによって、下記の3つの基準で、本発明で得られたバッチ(パイロットバッチ1、2、3)と、工業的参照方法である特許文献2(欧州特許出願第1 385 886号公報)で得られるバッチ(工業的バッチ1、2、3)の間に差が認められた。
測定された3つの基準は以下の通り:
(1)非特許文献9(ヨーロッパ薬局方の第6.7版(Pharmeuropa, volume 21, number 2, April 2009), パラグラフ2.7.1)に記載の方法による免疫グロブリンG (IgG)の濃度の測定および抗Hb免疫グロブリンの濃度の測定、および、
(2)非特許文献10(ヨーロッパ薬局方の第6.7版(Pharmeuropa, volume 21, number 2, April 2009), パラグラフ2.2.29)に記載の方法による分子の大きさ(ポリマー、ダイマー、モノマーおよび画分)の決定
ヨーロッパ薬局方の第6.7版(Pharmeuropa, volume 21, number 2, April 2009), パラグラフ 2.7.1 ヨーロッパ薬局方の第6.7版(Pharmeuropa, volume 21, number 2, April 2009), パラグラフ 2.2.29
(1)7つのバッチの18カ月にわたるIgG濃度の安定性および均一性、
(2)18カ月にわたる抗Hb Igの濃度の安定性、各バッチはこの基準に固有のものである、
(3)各バッチに対して18カ月にわたるヨーロッパ薬局方が要求する85%以上の一定の「モノマー+ダイマー」の合計。
カプリル沈殿段階、清澄段階、「混合モード」タイプき流動床クロマトグラフィ段階を含む方法
カプリル酸による処理は、血漿から汚染タンパクの一部(溶液中に残る免疫グロブリン)、特にプロテアーゼを沈殿によって除去する目的がある。用いるカプリル酸の百分比と上清および沈殿物の分離方法に依存して程度の差はあるが免疫グロブリンのかなりの部分が失われる可能性がある。流動床クロマトグラフィと両立可能なできるだけ最も粗い清澄化を実施することで免疫グロブリンの減少が最小になるように、実験条件をテストした。そのために、第1段階ではカプリル沈殿なしで、孔径をだんだんに大きくした複数のフィルターを比較し、次いで、異なる濃度のカプリル酸処理で確認した。
プロテアーゼの沈殿および溶液の濾過性に影響を与える添加カプリル酸の百分比(濾過アジュバントき添加なしのカプリル酸の範囲は0.5 〜1 %)を試験した。得られた結果を、単純な遠心分離による対照清澄化で得られた結果と比較する。
収率を上げるために、より少ない量(210 mLの代わりに180 mL)を用い且つ[表7]に記載のリンス緩衝液で沈殿物の洗浄量を増やすことによって下記のテストを行った。
IgG溶液化の改良
実施例2に記載の新規な方法に従ってパイロットサイズのバッチを作り、特許文献2(欧州特許出願第1 385 886号公報)に記載の方法に従って同じ規模(10AXTO1064015)で調製されたバッチと比較した。「I+II+III」沈殿物の溶液化を改良できることがわかる。すなわち、[表8]に示すように、この段階で少なくとも1 g/IgGの差が観察される(容量は同等である)。
さらに、カプリル酸によるタンパク汚染菌の沈殿も4.8以下のpHで改良できる。特に、4.6のpHによってこの改良は可能になる。
これらの改良を考慮に入れてパイロットサイズのバッチ(「新規なバッチ」)を作り、本発明に従って予め作られた3つのバッチ(バッチ1、2、3)を用いた「ロバストクロマトグラフィ溶出液」段階と比較した。
(1)使用した血漿1リットル当たりの免疫グロブリンの収率がより良い、
(2)免疫グロブリン/総タンパク比に関する純度がより良い。
「II+III」沈殿物への本発明の応用
「II+III」沈殿物はポリクローナルIgGの精製用原料源としての「I+II+III」沈殿物の代替物である。
ここでは本発明の2つのバッチを種々の「II+III」沈殿物から作った。これらの原料の両者から得られる第1の評価の結果を「流動床クロマトグラフィ溶出液」段階と比較した。
(1)抽出収率:清澄化段階およびロバストアフィニティクロマトグラフィ段階の累積収率は、例えバッチの一つが少し失敗しても、同程度である。しかし、「I+II+III」沈殿物と比較してエタノールによる追加の分画段階を実施した「II+III」沈殿物は、収率(IgGのグラム/L血漿)が「I+II+III」沈殿物で得られる収率より15%少ない。この不足はエタノールによる追加の分画段階でのIgGの一部の損失に関連する。
(2)純度:溶液化し、カプリル酸で処理し且つpHを4.6に調整した「II+III」沈殿物で得られるIgG/総タンパク比は、溶液化し、カプリル酸処理し且つpHを4.8に調整した「I+II+III」沈殿物で得られた収率と同等である。
Claims (17)
- 血漿の初期溶液または免疫グロブリンを濃縮した血漿画分からヒト多価免疫グロブリンの濃縮物を製造する方法であって、下記(a)と(b)、:
(a)カプリル酸によってタンパク汚染菌を除去してプロテアーゼを含まない溶液を得る段階と、
(b)その後に上記のプロテアーゼを含まない溶液を流動床クロマトグラフィする段階と、
を含み、ヒト多価免疫グロブリンの濃縮物を、使用した血漿1リットル当たり4.5g以上の免疫グロブリンの収率で得ることができることを特徴とする方法。 - 用いるカプリル酸の濃度が0.5〜1.5%、好ましくは0.8〜1.2%、特に0.9〜1.1%である請求項1に記載の方法。
- カプリル酸によってタンパク汚染菌を除去する段階(a)を4.3〜4.9、好ましくは4.6〜4.8のpHで行う請求項1または2に記載の方法。
- カプリル酸によってタンパク汚染菌を除去する段階(a)と流動床クロマトグラフィする段階(b)との間に、酸性pHでの清澄段階、好ましくは深層濾過段階を含む請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- プロテアーゼを含まない溶液を得るための流動床クロマトグラフィ段階(b)を、イオン交換タイプ、アフィニティタイプ、「偽アフィニティタイプ」または「混合モード」タイプのクロマトグラフィ担体を用いて行う請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- 「混合モード」タイプの流動床クロマトグラフィ段階が下記(1)〜(4)の段階を含む請求項5に記載の方法:
(1)予めpH4.5〜8の緩衝液で平衡化したクロマトグラフィカラムに、深層濾過によって清澄段階を実施した、予め同じpHに調整された溶液を供給し、
(2)カラムに吸着されなかった全てのタンパクが除去されるまでカラムを緩衝液で洗浄し、
(3)カラムに吸着された多価免疫グロブリンをpH8〜10に調整した溶出緩衝液で溶出し、
(4)ヒト多価免疫グロブリンを濃縮した溶液を回収する。 - (b)段階の後に下記(i)〜(vi)の一つまたは複数の段階をさらに有する請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法:
(i)ウイルスの不活化段階、
(ii)上記段階の最後に得られる溶液を陰イオン交換クロマトグラフィする段階、
(iii)上記段階の最後に得られる溶液から抗A抗体と抗B抗体とを除去する段階、
(iv)孔径が100から15nmまで下がるナノメートルフィルターに通す濾過段階、
(v)上記段階の溶液を限外濾過によって濃縮し、配合処理する段階、
(vi)次いでおこなう通常の滅菌濾過段階。 - 初期溶液が、エタノール分画またはクロマトグラフィ分離によって免疫グロブリンを濃縮した血漿画分である請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
- 上記の初期溶液が、エタノール分画された血漿から得られる「I+II+III」沈殿物または「II+III」沈殿物を溶液にしたものである請求項8に記載の方法。
- 上記の「I+II+III」沈殿物または「II+III」沈殿物を注射用精製水中またはイオンを含む溶液中の溶液にする請求項9に記載の方法。
- 上記のイオンを含む溶液が、NaClを20mM以下、好ましくは5〜15mM、より好ましくは10mMの濃度で含む溶液である請求項10に記載の方法。
- 上記の「I+II+III」沈殿物または「II+III」沈殿物を、濃度が20mM以下、好ましくは5〜15mMのCaCl2溶液で処理し、好ましく10mMの CaCl2溶液で処理する請求項8〜11のいずれか一項に記載の方法。
- 下記(i)〜(viii)の段階を含む請求項1〜12のいずれか一項に記載の方法:
(i)カプリル酸によってタンパク汚染菌を除去する段階、
(ii)深層濾過による清澄段階、
(iii)「混合モード」タイプの流動床クロマトグラフィ段階、
(iv)溶剤/洗剤処理によるウイルス不活化段階、
(v)陰イオン交換クロマトグラフィ段階、
(vi)抗A抗体および抗B抗体を除去する段階、
(vii)孔径が100から15nmまで下がるナノメートルフィルターに通す濾過段階、
(viii)前段階の溶液を限外濾過によって濃縮し、配合処理し、その後、通常の滅菌濾過する段階。 - 下記(a)と(b)の段階をさらに含む請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法:
(a)請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法で得られるヒト多価免疫グロブリンの濃縮物に、一種または複数の医薬上許容可能な安定剤を添加する段階、
(b)必要に応じて行なう、上記段階で得られた医薬品を凍結または凍結乾燥して、医薬品を液体、凍結または凍結乾燥した形態にする段階。 - 上記濃縮物が30%以下の抗補体活性を有することを特徴とする請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法で得られるヒト多価免疫グロブリンの濃縮物。
- 液体または凍結または凍結乾燥したヒト多価免疫グロブリンの医薬組成物の下記の群に含まれる症状を治療するための薬剤の製造での使用:脱髄性多発性神経障害、多発性硬化症、ランバート−イートン(Lambert-Eaton)筋無力症候群、皮膚筋炎、先天性無ガンマグロブリン血症および先天性低ガンマグロブリン血症のような原発性免疫不全、分類不能原発性免疫不全、重症複合免疫不全、ウィスコット・アルドリッチ症候群、骨髄腫または重症続発性低ガンマグロブリン血症および再発性感染を有する慢性リンパ性白血病、HIV感染小児の再発性感染での代替治療、低ガンマグロブリン血症または体液性免疫の機能障害を有する原発性免疫不全の治療、体液性免疫の続発性免疫不全、特に低ガンマグロブリン血症を有し且つ再発性感染を伴う慢性リンパ性白血病または骨髄腫の治療、感染を伴う低ガンマグロブリン血症を有する造血幹細胞の同種移植、激しい出血の危険がある場合または医療手術または外科手術の前に行う成人および小児の特発性血小板減少性紫斑病(ITP)の免疫調節治療、バードショット(Birdshot)脈絡網膜炎、ギラン・バレー症候群、多巣性運動ニューロパチー(MMN)、慢性炎症性脱髄性多発性神経障(CIDP)および川崎病の免疫調節。
- 使用する多価免疫グロブリンの医薬組成物が請求項14に記載の方法に従って得られる組成物である請求項16に記載の使用。
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