CZ27198A3 - Způsob stanovení albuminu ve vzorku obsahujícím volný hemoglobin - Google Patents
Způsob stanovení albuminu ve vzorku obsahujícím volný hemoglobin Download PDFInfo
- Publication number
- CZ27198A3 CZ27198A3 CZ98271A CZ27198A CZ27198A3 CZ 27198 A3 CZ27198 A3 CZ 27198A3 CZ 98271 A CZ98271 A CZ 98271A CZ 27198 A CZ27198 A CZ 27198A CZ 27198 A3 CZ27198 A3 CZ 27198A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- albumin
- hemoglobin
- measurement
- determination
- wavelength
- Prior art date
Links
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 title claims abstract description 74
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 title claims abstract description 74
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 41
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 title claims description 102
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 title claims description 102
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims abstract description 110
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 62
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 23
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N Bromocresolgreen Chemical compound CC1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C(=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 14
- 101100298295 Drosophila melanogaster flfl gene Proteins 0.000 claims description 5
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 claims 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 50
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 19
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 11
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 10
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 5
- MKNQNPYGAQGARI-UHFFFAOYSA-N 4-(bromomethyl)phenol Chemical compound OC1=CC=C(CBr)C=C1 MKNQNPYGAQGARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 4
- 108010036302 hemoglobin AS Proteins 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 239000003633 blood substitute Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- PREOBXYMXLETCA-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-carboxyphenoxy)-4-oxobutanoyl]oxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1OC(=O)CCC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O PREOBXYMXLETCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-amino-4-(trifluoromethyl)-1,3-thiazole-5-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C=1SC(N)=NC=1C(F)(F)F XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 238000008941 Albumin Reagent Methods 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- SWGJCIMEBVHMTA-UHFFFAOYSA-K trisodium;6-oxido-4-sulfo-5-[(4-sulfonatonaphthalen-1-yl)diazenyl]naphthalene-2-sulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].C1=CC=C2C(N=NC3=C4C(=CC(=CC4=CC=C3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=CC=C(S([O-])(=O)=O)C2=C1 SWGJCIMEBVHMTA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6827—Total protein determination, e.g. albumin in urine
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu stanovení albuminu sáhujícím volný hemoglobin, optickým měřením týká odstraňování hemoglobinem způsobených poruch při stanovení albuminu.
Dosavadní stav techniky
Je známo, Se neimunologické stnovení albuminu v séru a v plasmě (například způsobem bromkresolové zeleně) je narušováno hemoglobinem (Hb) a analogy hemoglobulinu do té míry, Se za přítomnosti těchto ruěivých látek se získávají chybné vyšší hodnoty albuminu. Příčina spočívá v reakci hemoglobulinu s barvivém, čímS je Hb kvantitativně pojímán jako albumin (Doumas a kol., Clin. Chim. Acta 31, str. 87 aS 96, 1971).
V evropském patentovém spise číslo EP O 268 025 BI se poukazuje na to, Še Hb-narušování a lbůmi nových testů nemůže být odstraněno konvenčním dvoubodovým měřením. Navrhuje se však stanovit korekční faktor se závislosti mezi stupněm hemolysy a chybou měření a jeho pomocí (v návaznosti na separátní stnovení stupně hemolysyl početně korigovat chybný výsledek albuminu získaný u určitého vzorku.
Jay a Provasek (Clin.Chem. 39/9 str. 1804 aš 1810, 19931 uvádějí, še v jejich laboratoři se u poznatelně hemolytického vzorku určí odděleně obsah Hb a pomocí počítačového programu se (chybný) výsledek analysy početně koriguje. Velikost této korekce se pak udává u nálezu analysy.
4 4 4 4 4
Další možnost, jak korigovat, rušeni Hb u albuminu, popisuje zveřejněná přihláška vynálezu číslo DE 4427492 Al. Zde odpadá separátní stanovení stupně henolysy, jelikož muže být odvozeno z předběžné reakce, předřazené vlastní hlavní reakci. Tak zvaným způsobem Ratepius se početně koriguje výsledek měření z hlavní reakce s využitím souvislosti mezi stupněm bemo1ysy a rušivým příspěvkem.
Hb př i
U dosud popsaných způsobů odstraňování rušivých účinků stanovení albuminu je všeobecně nutná početní korekce výsledků analysy o částku odpovídající obsahu Hb. Přitom se obsah Hb, případně stupeň hemolysy vyšetřuje buď separátním měřením, (například analysou více vlnových délek nebo nezávislou Metodou), nebo se odvozuje předběžnou reakcí, přičemž je vždy nutný test se dvěma reakčními činidly.
V současné době však probíhá stanovení albuninu často jako jednobodové měření pomocí monoreakčnibo činidla, přičemž barevná reakce se iniciuje smísením vzorku s reakčním činidlem (například s albuminovým reakčním činidlem firmy Boebringer, Mannheim, GmbH!. Výhodou takového stanovení je vedle jednoduché manipiulace také nízká cena. Nákladné je však odstraněni rušeni Hb: buď monoreakce a separátní stanovení obsahu Hb, nebo test se dvěma reakčními činidly a zavrhnutí separátního stanovení obsahu Hb, V každém případě musí však být získaný výsledek analysy následně početně korigován.
Nadto je při stanovení vzorků séra nebo plasmy obsahujících hemoglobin hlavní reakce (albuninu s testovacím reakčním činidlem) překryta rušivou reakcí (hemoglobinu s testovacím reakčním činidlem) a s poklesem absorpčního signálu hemoglobinu souvisejícím s rušivou reakcí. Dodatečně se absorpční spektra jak hlavní reakce, tak také rušivé reakce odlišují v závislosti na použitých reakČních činidlech, testujících albumin • ·
- 3 • fl
S překvapením se zjistilo, Že vliv rušivé reakce na výsledek hlavní reakce závisí na kombinaci použitých měřicích vlnových délek a kromě toho také na době reakce.
Odstranění hemoglobinového rušení při stanovení albuminu je tím velmi složité, jelikož nejde o rušivý signál v obvyklém smyslu, který lze odstranit jednoduchým bichromatickým měřením, případně jednoduchým měřením prázdné hodnoty v2orku. Spíše reaguje rušivá látka, váný nebo rekombinantně to jest nativní, zesítěný, polymeropři pravený hemoglobin sám s reakěí látkou. Musí se tedy hledat kombinace měřicích vlnových délek, při které je tato rušivá reakce jednoznačně od hlavní reakce odli ši te1ná.
Tento úkol je řešen změnou kombinace měřicích vlnových délek, tedy hlavní a vedlejší měřicí vlnové délky při bichromatickém měření. S překvapením se zjistilo, že při změněné kombinaci vlnových délek se nechá měřicí pole, vyvolané volným hemoglobinem ve vzorku, , 3, 4, 5, 7, 8, 10 a 11) délek, které obecně neleží v absorpční do značné míry potlačit íviz obr. Při těchto kombinacích vlnových maximu testovacích reakčních látek, se měřicí signál vzorku, obsahujícího hemoglobin, mění v závislosti na čase, zatímco měřici signál vzorku prostého hemoglobinu zůstává v podstatě konstantní.
Tento jev se však nepozoruje u kombinace vlnových délek běžně používaných ke stanovení albuminu, tedy hlavní vlnové délky 600 nm a vedlejší vlnové délky 700 nm. Zde se nachází velká chyba měření u vzorku obsahujícího hemoglobin oproti vzorku prostému hemoglobinu (porovnej obr. 2, 6 a 9).
Podstata vynálezu
Způsob stanovení albuminu ve vzorku obsahujícím volný hemoglobin optickým měřením při alespoň dvou vlnových délkách, * * · · • · · · ·
- 4 dostatečně spočívá podle vynálezu v Lom, že (a) při první vlnové délce existuje ke stanovení velký měřicí signál pro albumin, ( b) při druhé vlnové délce signál pro (i) neexistuje měřicí albumin, nebo (ii) existuje v porovnání s měřicím signálem první měřicí vlnové délky menší signál pro albumin a (c) při první a při druhé měřicí vlnové délce existuje porovnatelně vysoký rušivý signál, který je vytvořen reakcí hemoglobinu s testovací reakční látkou použitou k určení albuminu a mění se v závislosti na čase.
Způsob podle vynálezu používá kombinace měřicích vlnových délek, kde při první vlnové délce existuje dostatečně velký měřicí signál pro albumin postačující ke stanovení. Přitom se připomíná, že první měřicí vlnová délka nemusí ležet v absorpčním maximu použitých testovacích látek, nýbrž s výhodou dokonce mimo absorpční maximum. Při druhé vlnové délce existuje měřicí signál pro albumin, který je v porovnání s měřicím signálem první měřicí vlnové délky zřetelně menší měřicí signál při první vlnové délce nejméně o
1ášť výhodně nejméně o 50 mE vyšší než při druhé měřicí vlnové délce.
S výhodou je 20 mE a obzvDále má při první i při druhé měřicí vlnové délce existovat porovnatelně vysoký poruchový signál, který se mění v závislosti na čase. S výhodou se proto volí při jednobodovém měření měřicí bod tak, že rušivý signál, způsobený reakcí hemoglobinu s testovací reakční látkou při první i při druhé měřící vlnové délce, je stejný nebo přibližně stejně velký.
Při vícebodovém měření, například při dvoubodovém měření, (test se dvěma reagenčními látkami s měřením hodnoty prázdného vzorku a hodnoty analytu) se měřicí body volí s výhodou tak, že při respektování zřeďovacího faktoru z pipetovanýcb jednotlivých reakčních látek, je rušivý objemů signál v okamžicích • · 0
- 5 0 0 * 0 0 0 0000 0 0 · · 0 0000 0 000 0 0
0 000 000 00000 00 0 00 00 měření, například při prvním a druhém okamžiku měření stejný nebo přibližně stejný. Vícebodové měření se provádí s výhodou jako konečné bodové měření, i když kinetická měření jsou také možná.
Obsah albuminu způsobem podle vynálezu se stanovuje optickým měřením přes reakci barviva. S výhodou se stanoví obsah albuminu metodou bromkresolové zeleně nebo bromkresolové červeně .
Zkoumáním mohly být dosud určeny pro stanovení albuminu metodou bromkresolové zeleně a jantaranového pufru tři výhodné kombinace měřicích vlnových délek. U prvního výhodného provedení se provádí stanovení při první měřicí vlnové délce 560 až 600 nm, obzvláště 560 až 580 nm a zejména při 570 JO 5 nm a nejvýhodněji při přibližně 570 nm a při druhé měřicí vlnové délce 540 až 552 nm, zejména při 546 W 5 nm a nejvýhodněji při přibližně 546 nm.
Ve druhém výhodném provedení vynálezu se provádí stanovení při první měřicí vlnové délce 640 až 680 nm a zejména při 660 JO 5 nm a nej výhodně ji při přibližně 660 nm a při druhé měřicí vlnové délce 470 až 490, zejména při 480 JO 5 nm a nejvýhodněji při přibližně 480 nm.
Ve třetím výhodném provedení vynálezu se provádí stanovení při první měřicí vlnové délce 620 až 640 nm, zejména při 630 IQ 5 nm a nejvýhodněji při přibližně 630 nm a pří druhé měřicí vlnové délce 590 až 610, zejména při 600 JO 5 nm a nej výhodněji při přibližně 600 nm.
Při stanovení albuminu metodou bromkresolové zeleně a citrátového pufru se používá s výhodou první měřicí vlnové délky 560 až 580 nm, zejména 570 10 5 nm a nej výhodně ji přibližně 570 nm a druhé měřicí vlnové délky 490 až 520 nm, zejmé·<···· ·· · ·· • · · 4 · · · * * · · · • · a · ♦····· ·a· · · • 9 a · 9 · a ·
- 6 na 505 B 5 nm a nejvýhodněji přibližně 505 nm.
Při použit, i jiných testovacích 1átek a/nebo jiných pufrových látek muže pracovník v oboru jednoduchými pokusy, například analysou spekter diodových paprsků a Sašově závislých absorpčních měřeni identifikovat další vhodné kombinace měřicích vlnových délek.
Pomocí těchto kombinaci vlnových délek se s překvapením 2Íská při měření vzorku, obsahujícího hemoglobin, přinejmenším do značné míry nezkreslená hodnota koncentrace albuminu, která se už nemusí početně korigovat. Způsobem podle vynálezu se dá dosáhnout opětovného nalezení albuminu v rozsahu 10O B 1O % a s výhodou 100 B 5 %, zejména při hodnotách albuminu ve spodním rozhodujícím rozsahu z lékařského hlediska přibližně 3,5 g/dl .
Optimální reakční doba pro způsob podle vynálezu může být odvozena jednoduchými předběžnými zkouškami z diagramu závislosti absorpce/čas, ve kterém se znázorní průběh reakce a obecně Siní 0,2 až 10 minut. Ke stanovení albuminu metodou bromkrezolové zeleně v jantaranovém pufru, se u jednoho vzorku, který obsahuje hemoglobin z hemolysy, zjistilo, že při měření s kambinací vlnových délek í al je měřicí signál v reakSní době 1 až 10 minut v podstatě konstantní, takže měření může proběhnout v libovolných okamžicích v tomto časovém intervalu nebo popřípadě potom.
U vzorku, který jako krevní náhradu obsahuje zesítěný hemoglobin, například diaspirinem zesítěný (DCL) hemoglobin, se provádí jednobodové měření s monoreakcí při kombinaci íal vlnových délek s výhodou po reakSní době 3 až 10 minut, obzvlášť výhodně 5 až 7 minut a nejvýhodněji přibližně 6 minut. Při kombinaci íbl vlnových délek se naproti tomu provádí měření s výhodou po reakSní době 1 až 4 minuty, obzvlášť výhodně 2 až
V · * v · 4
- 7 4 · ·4 minuty a nejvýhodněji přibližně 2,5 minuty po započetl reakce .
U vzorku, který jako krevní náhradu obsahuje rekoMbinantně získaný hemoglobin, se provádí jednobodové měření s monoreakcí při kombinaci (a) vlnových délek s výhodou po reakční době 1 až 3 minuty, obzvlášť výhodně 1 až 2 minuty a nejvýhodněji přibližně 1,5 minut. Při kombinaci (b) vlnových délek se naproti tomu provádí měření s výhodou po reakční době 1 až 4 minuty. Ke stanovení albuminu metodou bromkrezolové zeleně v citrátovém pufru se při vzorku, který obsahuje DCL-hemoglobin, provádí měření hodnoty analytu při monoreakci s výhodou po 20 až 90 sekundách a obzvláště po 30 až 60 sekundách a nejvýhodněji po 30 až 60 sekundách a při testu se dvěma reakčními činidly s výhodou po 0,2 až 5 minutách po přidání reakčního činidla 2 ístartovací reakční činidlo).
Také při stanovení albuminu metodou bormkresolové purpurové červeně mohly být vyšetřeny dvě výhodné kombinace měřicích vlnových délek, při kterých může být rušivý vliv volného hemoglobinu ve vzorku do značné míry odstraněn. U prvního výhodného provedení probíhá stanovení při první měřicí vlnové délce 560 až 580 nm, obzvlášť výhodně 570 10 5 nm a nej výhodněji přibližně 570 nm a při druhé měřicí vlnové délce 490 až 520 nm, obzvlášť výhodně 505 10 5 nm a nej výhodně ji přibližně 505 nm.
U druhého výhodného provedeni probíhá stanovení při první měřicí vlnové délce 560 až 580 nm, obzvlášť výhodně 570 10 5 nm a nejvýhodněji přibližně 570 nm a při druhé měřicí vlnové délce 540 až 552 nm, obzvlášť výhodně 546 H) 5 nm a ne jvýhodně j i přibližně 546 nm.
U vzorku, který jako krevní náhradu obsahuje zesítěný hemoglobin, například hemoglobin DCL, se provádí měření hodnoty analytu při testu se dvěna reakčními činidly s výhodou 0,2 až 8 minut, obzvlášť výhodně přibližně 5 minut, po přidání reakční látky 2 (výchozí reakční či ni dlol . Měření prázdného vzorku se provádí při první kombinaci vlnových dělek (570/546 nm) 1 až 4 minuty, obzvlášť výhodně přibližně 2,5 minuty po přísadě reakční ho činidla 1 k vzorku. Při druhé kombinaci vlnových délek probíhá měření prázdného vzorku s výhodou 0,2 až 4 minuty, obzvlášť výhodně 0,2 až 1 minutu a nejvýhodněji přibližně 0,5 minuty po přidání reakčníého činidla 1 ke vzorku.
Pro způsob podle vynálezu je však rozhodující nová kombinace hlavní a měřicí vlnové délky. Měření v různých optimálních okamžicích pro různé druhy Hb může být použito k dalšímu zmenšení chyby měření.
Tímto způsobem je poprvé umožněno stanovit správný obsah albuminu pouze v jednom měřicím úkonu, tedy jako 1-bodové měření bez přídavného vyšetřování obsahu hemoglobinu nebo stupně hemolysy a bez dodatečného početního korigování výsledku analysy, zkresleného hemoglobinem. Další rozhodující předností je, že stanovení správných hodnot albuminu je možné s jedním reakčním činidlem. To je spojeno s manipulačními a cenovými výhodám i.
Testu se dvěma reakčními činidly je nadále možno používat, není ho však nutně potřeba. Avšak i pro test se dvěma reakční mi činidly dochází vlivem vynálezu k výhodě v tom, že může být upuštěno od vyšetřování stupně hemolysy s navazující početní korekturou hemoglobinem zkreslených naměřených hodnot a1bumi nu.
Jako vzorků, ohsahující hemoglobin, se obvykle používá vzorků sera nebo plasmy. K tomu je třeba připomenout, že označení volný hemoglobin” se ve smyslu vynálezu vztahuje stejně na hemolytické vzorky, jako na vzorky, ke kterým byla přidána analogická sloučenina hemoglobinu jako náhrada krve, například • 0 »*··
- 9 modifikovaný, polymerovaný a/nebo příčně zesítěný derivát lidského nebo hovězího hemoglobinu, například diaspirinem zesítěný ÍDCL1 hemoglobin nebo také rekombinantně připravený bemog1 ob i n.
Výhodné je dále, ěe způsob podle vynálezu se provádí na analytickém automatu. Příkladem vhodného analytického automatu je přístroj Boehringer Mannheim/Hitaschi 717.
Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení pomocí přiložených obrázku.
Seznam obrázků
Na obr. 1 je časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu s monoreačním činidlem při kombinaci měřicích vlnových délek 546/570 nm (jantaranový pufr) v přítomnosti zesítěného hemoglobinu (DCL-Hb) podle vynálezu.
Na ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro pro vzorek bez hemoglobul i nu (Hbl, čárkovaná pro 1000 mg/dl Hb a tečkovaná pro 2000 mg/dl Hb.
Na obr. 2 je časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu s monoreačním Činidlem při kombinaci měřicích vlnových délek 700/600 nm (jantaranový pufr) v přítomnosti zesítěného hemoglobinu (DCL-Hb) podle stavu techniky.
Na ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro pro vzorek bez bemog1 obul i nu (Hbl, čárkovaná pro Í000 mg/dl Hb a tečkovaná pro 2000 mg/dl Hb.
Na obr. 3 je časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu s monoreačním činidlem při kombinaci měřicích vlnových délek 546/570 nm (jantaranový pufr) v přítomnosti rekombinantně připraveného hemoglobinu podle vynálezu.
Na ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro • · · *
Β Β · · 4 • Β 4
- 10 pro vzorek bez hemoglobul i nu (Hb) , čárkovaná pro 1000 mg/dl Hb a tečkovaná pro 2000 mg/dl Hb.
Na obr. 4 je časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu s monoreačním Činidlem při kombinaci měřicích vlnových délek 546/570 nm tjantaranový pufr) v přítomnosti hemoglobinu z hemolysy podle vynálezu.
Na ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro pro vzorek bez hemoglobul i nu (Hb), Čárkovaná pro 1000 mg/dl Hb
Na obr. 5 je časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu s monoreačním činidlem při kombinaci měřicích vlnových délek 480/660 nm (jantaronový pufr) v přítomnosti hemoglobinu DCI. podle vynálezu.
Na ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro pro vzorek bez hemoglobul i nu (Hb), čárkovaná pro 1000 mg/dl Hb a tečkovaná pro 2000 mg/dl Hb.
Na obr. 6 je časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu s monoreačním Činidlem při kombinaci měřicích vlnových délek 700/600 nm (citrátový pufr) v přítomnosti hemoglobinu DCL podle stavu techniky.
Na ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro pro vzorek bez hemoglobul i nu (Hb), čárkovaná pro 1000 mg/dl Hb _ J. Λ XI, X —ϊΛΛΛ TTV.
α υκνΛυναπα lj zíwww m t li i nu.
Na obr. 7 je časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu s monoreačním činidlem při kombinaci měřicích vlnových délek 505/570 nm fcitrátový pufr) v přítomnosti hemoglobinu DCL podle vynálezu.
Na ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro pro vzorek bez hemoglobul i nu (Hb), čárkovaná pro 1000 mg/dl Hb a tečkovaná pro 2000 mg/dl Hb.
Na obr. 8 je časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu se dvěma reakčními činidly při kombinaci měřicích vlno• · ♦ ·
-11výcb délek 505/570 nm (citrátový pufr) v přítomnosti hemoglobinu DCL podle vynálezu.
Ne ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro pro vzorek bez hemoglobulinu (Hb), čárkovaná pro 1OOO mg/dl Hb a tečkovaná pro 2000 mg/dl Hb.
Na obr. 9 je časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu metodou bromkresolové purpurové červeně se dvěma reakčními činidly při kombinaci měřicích vlnových délek 700/600 nm v přítomností hemoglobinu DCL podle stavu techniky.
Na ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro pro vzorek bez hemoglobulinu (Hb), čárkovaná pro 1000 mg/dl Hb a tečkovaná pro 2000 mg/dl Hb.
Na obr. 10 je Časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu metodou bromkresolové červeně se dvěma reakčními činidly při kombinaci měřicích vlnových délek 505/570 nm v přítomnosti hemoglobinu DCL podle vynálezu.
Na ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro pro vzorek bez hemoglobulinu (Hb), čárkovaná pro 1000 mg/dl Hb a tečkovaná pro 2000 mg/dl Hb.
Na obr. 11 je časový průběh měřicího signálu při stanovení albuminu metodou bromkresolové červeně se dvěma reakčními činidly při kombinaci měřicích vlnových délek 546/570 nm v přítomnosti hemoglobinu DCL podle vynálezu.
Na ose x je čas v sekundách, na ose y extinkce, pevná čára pro pro vzorek bez hemoglobulinu (Hb), čárkovaná pro 1000 mg/dl Hb a tečkovaná pro 2000 mg/dl Hb.
Na obr. 12 je spektrum diodového paprsku ke stanovení albuminu s monoreakčním činidlem (jantaranový pufr).
Na ose x je vlnová délka v nm, na ose y absorbance, pevná čára 1 pro NaCl (0,9%), čára 2 pro sérum + NaCl, čára 3 pro sérum + DC1-Hb, reakční doba je 90 sekund.
· · ·»»♦
- 12 • 0 0 000 0000 0 0 0 « 0 · 0000 0 0 * 0 0 0000 0 000 0 0 0 0 000 000 *000 0 00 0 00 · ·
Na obr. 13 je spektrum diodového paprsku ke stanovení albuminu s monoreakčním činidlem (citrátový pufr).
Na ose x je vlnová délka v nm, na ose y absorbance, pevná čára 1 pro NaCl (0,9%), čára 2 pro sérum + NaCl, čára 3 pro sérum + DCl-Hb, reakční doba je 90 sekund.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Provede se stanovení albuminu s monoreakčním činidlem metodou bromkresolové zeleně (Doumas a kol. Clin. Chim. Acta 31, str. 87 až 96, 1971) v jantaranovém pufru. Jako reakční činidlo se použije jantaranový pufr 75 mmol/1, pH 4,2: 0,15 mmol/1 bromkresol ové zeleně. Test probíhá následovně'·
Do 3 ul vzorku se přidá 350 nl reakčního činidla a stanoví se časový průběh měřicího signálu (mE) ,
Stanovení probíhá v analytickém přístroji Boebringer Mannheim/Hitachi 717 za použití kombinace vlnových délek 700/600 nm (stav techniky) a 546/570 nm případně 480/660 nm (podle vynálezu).
Průběh časové závislosti měřicího signálu pro vzorky bez hemoglobinu, s 1000 mg/dl hemoglobinu a s 2000 mg/dl hemoglobinu ve formě zesítěného hemoglobinu (DCL-Hh) je znázorněn na obr. 2 pro kombinaci měřicích vlnových délek 700/600.
Je zřejmé, že při kombinaci meřících vlnových délek 546/570 dochází s rostoucí dobou reakce k poklesu měřicího signálu u vzorků obsahujících hemoglobin, zatímco měřicí signál pro vzorek bez hemoglobinu zůstává v podstatě konstantní. Výhodná doba reakce, při které měřicí signál odpovídá signálu vzorku bez hemoglobinu, je přibližně 5 až 7 minut. Obr. 2 uka·· ····
- 13 suje, že při použití kombinace měřicích vlnových délek 700/600 zůstávají signály vzorku bez hemoglobinu stejně jako signály vzorů s hemoglobinem v podstatě konstantní.
V tabulce I je uveden percentuelηí znovu nalezený obsah albuminu ve vzorcích s různým obsahem hemoglobinu. Při kombinaci měřicích vlnových délek 700/600 nm podle stavu techniky (měření po době reakce 80 sekund) se zjišťuje s rostoucím obsahem hemoglobinu silné zkreslení výsledků měření. Při kombinaci měřicích vlnových délek 546/570 nm (měření po době reakce 340 sekund) a 480/660 nm (měření po době reakce 140 sekund) se naopak získalo nové zjištění 100 Rl 2 % nezávislé na obsahu hemog1 ob i nu .
Na obr. 3 je časový průběh měřicího signálu pro vzorky bez Hb a s 1000, případně 2000 mg/dl rekombinantně získaného hemoglobinu při kombinaci měřicích vlnových délek 546/570 nm. Výhodná doba reakce je přibl i žně 1 až 2 minuty.
Na obr. 4 je časový průběh měřicího signálu pro vzorky bez Hb a s 1000 mg/dl hemoglobinu z hemolysy.
Na obr. 5 je časový průběh měřicího signálu pro vzorky bez Hb a s 1000, případně 2000 mg/dl Hb při kombinaci měřicích vlnových délek 480/660 nm, Výhodná doba reakce, při které měřicí signál vzorku obsahujícího DCL-Hb odpovídá signálu vzorku bez Hb je přibližně 1 až 3 minuty.
U vzorků obsahujících hemoglobin z hemolysy nebo rekombinantně vyrobený, je možno při použití kombinace měřicích vlnových délek 480/660 nm rovněž dosáhnout dobrého odstranění rušivého vlivu.
• · ·«·* ·· ♦ ·· ·« • · · « « · · · « · • ···« · · ·· * · · · » ···· * ··· · · • · ««· ··* ···· · · « ··
- 14 Příklad 2
Provede se stanovení albuminu monoreakčním činidlem způsobem bromkresolové zeleně v citrátovén pufru (95 mmol/1, hodnota pH 4,1; 0,11 mmol/1 bromkresolové zeleně; detergent).
Provedení testu je popsáno v příkladu 1. Stanovení probíhá za použití kombinace měřicích vlnových délek 700/600 (stav techniky) a 505/570 (podle vynálezu) a s okamžikem měření 80 sekund (stav techniky) a 40 až 60 sekund, s výhodou 50 sekund po začátku reakce (podle vynálezu).
Časový průběh měřicího signálu pro vzorky bez hemoglobinu, s 1OOO mg/dl hemoglobinu a 2000 mg/dl hemoglobinu ve formě hemoglobinu DCL je pro kombinaci vlnových délek 700/600 nm znázorněn na obr. 6 a pro kombinaci vlnových délek 505/5700 nm na obr. 7.
Je patrno, že při kombinaci vlnových délek podle vynálezu 505/570 nm s rostoucí dobou reakce dochází k poklesu měřicího signálu u vzorků obsahujících hemoglobin, zatímco měřicí signál vzorku bez hemoglobinu zůstává v podstatě konstantní. Výhodnou dobou reakce, při které odpovídá měřici signál vzorku bez hemoglobinu je přibližně 20 až 90 sekund.
V tabulce II je uvedeno percentuelnl nové zjištění obsahu albuminu ve vzorcích s různým obsahem hemoglobinu. Při kombinaci měřicích vlnových délek 505/570 nm podle vynálezu (měření po době reakce 60 sekund) se zjišťuje obsah hemoglobinu vzorku při nezávislém opětném zjištění 100 U 5 zatímco při kombinaci měřicích vlnových délek 700/600 nm podle stavu techniky se zjišťuje silné zkreslení naměřené hodnoty.
U vzorků obsahujících hemoglobin z hemolysy nebo rekombinantně vyrobený, je možno při použití kombinace vlnových délek
podle vynálezu rovněž dosáhnout dohráho odstranění rušivého vl i vii,
Příklad 3
Provede se stanovení albuminu metodou bromkresolové zeleně v citrátovém pufru s testem se dvěma reakčnfmi činidly. Jako reakčních činidel se použije:
reakční činidlo 1: citrátový pufr 95 mmol/1, pH 4,1; detergent reakční činidlo 2: citrátový pufr 95 mmol/1, pH 4,1; 0,66 mmol/1 bromkresolové zeleně; debergent.
Teši. se provádí následovně:
Do 3 ql vzorku se přidA 250 ul reakční ho činidla 1 a přibližně 4,5 minub nabo se měří hodnoba prázdného vzorku El. PřidA se 50 ql reakčníbo činidla 2 a po pul minubě se měří měřicí hodnoba analytu E3. Kromě bobo se po celou dobu určuje časový průběh měřicího signAlu. Sbanovení probíhA za použibí analybického přísbroje Boehrionger Mannheim/Hibacbi 717 za použibí kombinace měřicích vlnových délek 505/570 nm (podle vynAlezu). Jako porovnAní slouží monoreakčnf činidlo zmíněné v příkladě 2 za použibí kombinace měřicích vlnových délek 700/600 nm (stav techniky).
CasovA závislost, průběhu měřicího signAlu pro vzorky bez hemoglobinu, s 1000 mg/dl hemoglobinu a s 2000 mg/dl hemoglobinu ve formě hemoglobinu DCL· je pro kombinaci vlnových délek 505/570 nm znAzorněn na obr. 8.
Je pabrno, Se při kombinaci vlnových délek 505/570 nm dochází k poklesu měřicího signAlu u vzorků obsahujících hemoglobin. Výhodné okamžiky měření se volí bak, Se při respektování faktoru zředění z pipebovanýcb objemů je rušivý signál, způsobený hemoglobinem, v obou okamžibích měření stejný. S výhodou budiž se měří Ei (hodnoba prázdného vzorku) přibližně *· ···· ·· ·· • « · · · · · • * »··· t · ·· • a « a a aaaa a aaa a · • a a a β aaa ···· * «· * aa aa
- 16 4,5 minuty po přísadě reakčního činidla 1 do vzorku a E2 (analytová hodnot.a) přibližně 0,5 minuty po přidání reakčního činidla 2.
V tabulce Til je uvedeno percentuelní nová zjištění obsahu albuminu ve vzorcích s různým obsahem hemoglobinu. Při kombinaci měřicích vlnových dálek 505/570 nm podle vynálezu se zjišťuje obsah hemoglobinu vzorku při nezávislém opětném zjištění 10O KI 2 %, zatímco při kombinaci měřicích vlnových délek 700/600 nm podle stavu techniky se zjišťuje silné zkreslení naměřené hodnoty.
Příklad 4
Provede se stanovení albuminu metodou bromkresolové purpurové červeně v citrátovém pufru s testem se dvěma reakčními činidly.
* Jako reakčních činidel se použije:
reakční činidlo 1: acetátový pufr 100 mmol/1, pH 5,3: detergent ' reakční činidlo 2: acetátový pufr 100 mmol/1, pH 5,3: detergent,
526 qmol/1 bromkresolové purpurové červeně
Test se provádí následovně:
Do 3 ql vzorku se přidá 250 ni reakčního činidla 1 a přibl i žně 2,5 minut nato se měří bodnot.a prázdného vzorku Ei. Přidá se 150 14I reakčního činidla 2 a po 5 minutách se měří měřicí hodnot.a analytu E2 - Kromě toho se po celou dobu určuje časový průběh měřicího signálu.
Stanovení se provádí za použiti analytického přístroje Boehringer Mannheim/Hitachi 717 za použití kombinace měřicích vlnových délek 700/600 nm (stav techniky) a 505/570 nm, případně 546/570 nm (podle vynálezu).
Časová závislost průběhu měřicího signálu pro vzorky bez · ····
• ·♦·· · ·« · • · ··
hemoglobinu, *3 IOOO mg/dl hemoglobinu a s 2000 mg/dl hemoglobinu ve formě hemoglobinu DCL je pro kombinaci vlnových délek 700/600 nm znázorněn na obr. 9 pro kombinaci vlnových délek 505/570 na obr. 10 a pro kombinaci vlnových délek 546/570 na obr. 11.
Je patrno, že při kombinaci vlnových délek 700/600 nm je nárůst signálu způsobený hemoglobinem po přidání reakčního činidla 2 vyšší než před přidáním reakčníbo činidla 2. Je to důkaz toho, že hemoglobin se sám podílí na reakci s bromkresolΟνου červení a tím je stanovení albuminu rušeno. Měřicí signál vzorků s Hemoglobinem i vzorku bez hemoglobinu je však před přidáním reakčního Činidla 2 i po jeho přidání přibližně konstantní.
Naproti tomu je při kombinaci vlnových délek 505/570 patrný pokles měřicího signálu s rostoucí dobou reakce u vzorků obsahujících hemoglobin, zatímco signál u vzorku bez hemoglobinu zůstává v podstatě konstantní. K zabráněni rušení hemoglobinem je třeba vhodné okamžiky reakce volit tak, aby při respektování faktoru zředění zůstával rušivý signál, způsobený hemoglobinem před přidáním reakčníbo činidla 2 stejný nebo přibližně stejně velký jako rušivý signál způsobený hemoglobinem po přidání reakčníbo činidla 2. V příkladu je proto okamžik měření Ej přibližně 2,5 minuty f505/570 nml případně 0,5 minuty Í546/57O nm) po přidání reakčního Činidla 1 do vzorku a E2 při obou kombinacích vlnových délek přibližně 5 minut po přidání reakčníbo činidla 2.
V tabulce TV je uvedeno percentuální nové zjištění obsahu albuminu ve vzorcích s různým obsahem hemoglobinu. Při kombinaci měřicích vlnových délek 505/570 nm a 546/570 nm podle vynálezu se zjišťuje obsah hemoglobinu vzorku při nezávislém opětném zjištění 1OO !0 4 %, zatímco při kombinaci měřicích vlnových délek 700/600 nm podle stavu techniky se zjišťuje silné φφ φφφφ φφ φφ ·φ • φ φ · · · φφφφ • · · φ φ φ φ φ φφ • φ » · φ φφφφ · φφφ φ φ φ φφφ φφφ φφφφφ φφ φ φφ φφ
- 18 vkreslení naměřené hodnoty.
U vzorků, které obsahují hemoglobin z hemolysy se daří rovněž dosáhnout za použití kombinací vlnových délek podle vynálezu dobrého odstranění rušivého účinku.
Příklad 5
Na obr. 12 a 13 jsou znázorněna spektra diodových paprsku závislá na vlnové délce stanovení albuminu podle metody bromkresolové zeleně s monoreakfiním činidlem v jantaranovém, případně v citrátovém pufru. Vzorek 1 je kontrolní s 0,9 5» NaCl. Vzorek 2 je sérum + NaCl a vzorek 2 je sérum + hemoglobin DCL. Reakční doba je vždy 90 sekund.
Z obr. 12 je zřejmé, že vedle výhodných kombinací vlnových délek 546/570 nm, případně 480/660 nm je vhodná též kombinace vlnových délek 600/630.
Tabulky
Tabulky I, TI a III se týkají vlivu hemoglobinu (DCl-Hb) na stanovení albuminu BCG, přičemž se tabulka I týká tohoto stanovení v jantaranovém pufru a tabulka II a III v citrátovém pufru. Tabulka IV se týká vlivu hemoglobinu íree-Hb) na stanovení albuminu BCP. Ve všech případech se k měření používá aparátu BM/Hitachi 717. Zkratka ZN znamená “znovu nalezeno, zkratka 0M znamená “okamžik měření“.
Průmyslová využitelnost
Využití kombinacei vhodných vlnových délek pro odstranění chyb stanovení albuminu způsobených hemoglobinem.
flfl flflflfl flfl · flfl flfl flfl · flflfl flflflfl fl · flflflfl flflfl* fl flflfl flflflfl · flflfl · · fl · flflfl flflfl flflflfl · flfl fl flflflfl
- 19 Tabulka
- 20 • 0 0000 00 · 00 00 · 000' 0 0 0 ·
0 «00« 000· * 0 0 0 0 00*0 0 000 0 0
0 000 000 0 00 0 0 00 0 »0 0 0
Tabulka IT
• to to··» ·· to • to ·· • to * · · ···· to · · · · · · · ·· * · · · · ···· · «toto to · to «toto toto· •to·· to ·· to ·· «to
- 21 Tabulka ITT
| £ 01 ϋ c ® « ť 5- ¢5 ε ,* Xl! c 73 Ě 1 C Ol o (ň ř. to «o m o oi >o E- | 2 SS N —1 | ooooooooooS τ* v Τ’ v ·ν v τ- v v· v |
| Albumin [g/dij | ncocor-r-oiotn^-tMoo tOtO<D(O<O(O(OtO(O<0tO M ** ·* »T ** ηηηηοηποπηη | |
| 0 •c c 00 c' £ >C .O kz c E C c J- ° o o C (O ° o r o h- | - γ-ί Z N EL. | □ OllOxír-CllílNCOinr· OOT-CMOO^IOlOtOH. vt— |
| Albumin [g/dl] | vOtOtOCWOtOOOlOtD to^ σ»_ rt_ o__ oj, to, r- σ>. v„ r? pf tj- m· tt~ uf uf uf uf uf uf* | |
| Hb (DCI-Hb) [mg/dl] | ooooSSS000 oooo©2£ 200° M^SeoOhiTttocoo t-v-t-t— t-CM |
···· t
• 4 »4
4 · · 4 4 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 4 4 44
4 4 4 4 4444 * 444 4 4 • 4 444 444
4«*4 4 44 4 4· 44
- 22 Tabulka IV
| Test se dvěma reagenciemi 505/570 nm, OM 14-50 | 2 N ’ | gr>.to<or-~cogJZgg?! °σισ>οισισι°θ®®® |
| Albumin [g/di] | <n_ oo^ cq^ co co co σι__ oi^ o> σ> cT cT CM cm* cP oP cí* CM* cí* CM* c-P | |
| »«-> E Φ r ° £ <D , θ' ττ 3 « ÍJ V «3 5. i > c Ό o o (U JO ra o o ra o ř- | 2 3 N £1 | OT-CMtOOCQCOOCnfOCO OOOOv-v-v-vv-CNCM t— t— t-v-v τ-Ύ“^-τ-^— r- |
| C ! | £ a < | ’ίίΟντ-’ί’ί^τΝ^'Ο O_ O, Τζ_ CM_ «O_ CD_ to t Ol rP rP rP n o cP rP n~ co* cp~ rP | |
| Hb (rec-Hb) [mg/dl] | Ο0θθθ°0000 οοοοοοθθθο° °N°S§o<M'*<Deos v-T-T-T-T“CM |
TV
Β · » · » · · · Β ·
Β « · * Β··♦ h · »Β ·· · * 4
Β « 4
Claims (9)
- (po mez i nárorin í m průzkumu!1 . Způsob st.annvpní albuminu ve vzorku obsahujícím volný hemoglobin optickým měřením při alespoň dvou vlnových délkách, vyznačující se i. ím, še (al při první vlnové délce existuje ke stanovení dostatečně velký měřicí signál pro albumin, (b) při druhé vlnové délce ( il neexistuje měřicí signál pro albumin, nebo (i i) existuje v porovnání s měřicím signálem první měřicí vlnové délky menší signál pro albumin a (cl při první a při druhé měřicí vlnové délce existuje porovnatelně vysoký rušivý signál, který je vytvořen reakcí hemoglobinu s testovací reakční látkou použitou k určení albuminu a mění se v závislosti na čase.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačuj ící se tím, še se stanovení provádí jako jednobodové měřeni,
- 3. Způsob podle nároku 1, vyznačuj ící se t í m, še se stanovení provádí jako dvoubodové nebo vícebodové měřen í.
- 4. Způsob podle nároku 1 až 3, vyznačuj ící se tím, še se stanovení albuminu provádí metodou bromkresolové zeleně v jantaranovém pufru.
- 5. Způsob podle nároku 4, vyznačuj ící t í m, še se stanovení provádí (a) při první vlnové délce 560 až 580 nm a při druhé vlnové délce 540 aš 552 nm, (b) při první vlnové délce 640 aš 680 nm a při druhé vlnové délce 470 aš 490 nm, (cl při první vlnové délce 620 aš 640 nm a při druhé vlnové délce 590 aš 610 nm.*·*·V*· «· fl • · · · · fl flflflfl • fl flflflfl ···« • « · · · flflflfl fl flflfl * · • · flflfl flflfl flflflfl· flfl fl fl* «·- 24
- 6. Způsob podle nároku 1 aš 3, vyznačující se t, í m, Se se stanovení albuminu provádí metodou bromkresol ové zeleně v nitrátovém pufru.
- 7. Způsob podle nároku 6, vyznačující se tím, še se stanovení provádí při první vlnové délce 560 až 580 nm a při drubé vlnové délce 490 až 520 nm.
- 8. Způsoh podle nároku 1 až 3, vyznačující se t í m, že se stanovení albuminu provádí metodou bromkresolové pupurové červeně.
- 9. Způsob podle nároku 8, vyznačuj ící že se stanovení provádí
í a) př i prvn í v1nové délce 560 aá 580 nm př i druhé vlnové dé 1 ce 490 a£ 520 nm íbl při prvn í vlnové dé 1 ce 560 až 580 nm při druhé vlnové dé 1 ce 540 až 552 nm
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19622091A DE19622091A1 (de) | 1996-05-31 | 1996-05-31 | Verfahren zur Beseitigung von Hämoglobin-Störungen bei der Bestimmung von Albumin |
| US4799797P | 1997-05-28 | 1997-05-28 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ27198A3 true CZ27198A3 (cs) | 1998-07-15 |
Family
ID=26026235
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ98271A CZ27198A3 (cs) | 1996-05-31 | 1997-06-02 | Způsob stanovení albuminu ve vzorku obsahujícím volný hemoglobin |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0906567B1 (cs) |
| JP (1) | JP2000512381A (cs) |
| KR (1) | KR20000016035A (cs) |
| CN (1) | CN1214770A (cs) |
| AT (1) | ATE199781T1 (cs) |
| AU (1) | AU3171797A (cs) |
| CA (1) | CA2255855C (cs) |
| CZ (1) | CZ27198A3 (cs) |
| DK (1) | DK0906567T3 (cs) |
| ES (1) | ES2155690T3 (cs) |
| HU (1) | HUP9900723A2 (cs) |
| IL (1) | IL127276A0 (cs) |
| NZ (1) | NZ332629A (cs) |
| PL (1) | PL330221A1 (cs) |
| WO (1) | WO1997045728A1 (cs) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19846301A1 (de) | 1998-10-08 | 2000-04-13 | Roche Diagnostics Gmbh | Verfahren zur Bestimmung von alkalischer Phospatase unter Beseitigung von Hämoglobin-Störungen |
| DE19846300A1 (de) * | 1998-10-08 | 2000-04-13 | Roche Diagnostics Gmbh | Verfahren zur Bestimmung von alkalischer Phosphatase unter Reduzierung von Hämoglobin-Störungen durch das Rate-Blank-Verfahren |
| EP2657681A1 (en) * | 2012-04-26 | 2013-10-30 | Roche Diagnostics GmbH | Improvement of the sensitivity and the dynamic range of photometric assays by generating multiple calibration curves |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6350743A (ja) * | 1986-08-20 | 1988-03-03 | Hitachi Ltd | 溶血のある血液試料の分析方法 |
| JPH0635982B2 (ja) * | 1987-01-07 | 1994-05-11 | 株式会社島津製作所 | 抗原−抗体反応の高感度測定法 |
| US5284777A (en) * | 1991-03-04 | 1994-02-08 | Isolab, Inc. | Combined glycated hemoglobin and immunoturbidometric glycated albumin assay from whole blood lysate |
| JPH07294519A (ja) * | 1994-03-04 | 1995-11-10 | Kyoto Daiichi Kagaku:Kk | 尿中成分の測定方法 |
| DE4427492A1 (de) * | 1994-08-03 | 1996-02-08 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur Analyse einer medizinischen Probe unter Vermeidung von Störbeiträgen aufgrund von Hämolyse |
-
1997
- 1997-06-02 WO PCT/EP1997/002862 patent/WO1997045728A1/de not_active Application Discontinuation
- 1997-06-02 NZ NZ332629A patent/NZ332629A/xx unknown
- 1997-06-02 IL IL12727697A patent/IL127276A0/xx unknown
- 1997-06-02 AT AT97927108T patent/ATE199781T1/de active
- 1997-06-02 JP JP09541636A patent/JP2000512381A/ja active Pending
- 1997-06-02 EP EP97927108A patent/EP0906567B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-06-02 KR KR1019980709598A patent/KR20000016035A/ko not_active Application Discontinuation
- 1997-06-02 DK DK97927108T patent/DK0906567T3/da active
- 1997-06-02 HU HU9900723A patent/HUP9900723A2/hu unknown
- 1997-06-02 AU AU31717/97A patent/AU3171797A/en not_active Abandoned
- 1997-06-02 ES ES97927108T patent/ES2155690T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-06-02 CZ CZ98271A patent/CZ27198A3/cs unknown
- 1997-06-02 CA CA002255855A patent/CA2255855C/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-06-02 CN CN97193424A patent/CN1214770A/zh active Pending
- 1997-06-02 PL PL97330221A patent/PL330221A1/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2000512381A (ja) | 2000-09-19 |
| DK0906567T3 (da) | 2001-04-17 |
| CA2255855A1 (en) | 1997-12-04 |
| EP0906567B1 (de) | 2001-03-14 |
| IL127276A0 (en) | 1999-09-22 |
| PL330221A1 (en) | 1999-05-10 |
| ATE199781T1 (de) | 2001-03-15 |
| EP0906567A1 (de) | 1999-04-07 |
| KR20000016035A (ko) | 2000-03-25 |
| CN1214770A (zh) | 1999-04-21 |
| CA2255855C (en) | 2005-10-11 |
| NZ332629A (en) | 1999-11-29 |
| AU3171797A (en) | 1998-01-05 |
| HUP9900723A2 (hu) | 1999-07-28 |
| WO1997045728A1 (de) | 1997-12-04 |
| ES2155690T3 (es) | 2001-05-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0315864B1 (en) | Denaturant reagents for convenient determination of hemoglobin derivatives in blood | |
| EP0928967A2 (en) | Method and apparatus for the determination of a substance coexisting with another substance | |
| Burnett et al. | Recommendations for measurement of and conventions for reporting sodium and potassium by ion-selective electrodes in undiluted serum, plasma or whole blood | |
| CA2634654A1 (en) | Reagent compositions for analytical testing | |
| EP0618449B1 (en) | Method for the determination of hemoglobin adducts | |
| EP0243200B1 (en) | Method of measuring lipid-bound sialic acid and reagent kit for use therein | |
| JP2004535568A (ja) | 全血、血漿、および血清における外因性血液代用物による干渉によって影響を受けた血液分析パラメータ結果の自動補正法 | |
| CN112485443A (zh) | 一种灵敏度高的抗Ro52抗体检测试剂盒 | |
| CZ27198A3 (cs) | Způsob stanovení albuminu ve vzorku obsahujícím volný hemoglobin | |
| KR102502572B1 (ko) | HbA1c 측정법 | |
| CN111929446B (zh) | 一种定量定性检测抗lkm-1抗体的试剂盒及其制备方法 | |
| JP3814300B2 (ja) | ヘモグロビンを含有する医療サンプルの分析方法 | |
| Brady et al. | Interference due to haemolysis in routine photometric analysis—a survey | |
| JP3177863B2 (ja) | 不安定型糖化ヘモグロビンの除去方法 | |
| JP3598273B2 (ja) | ヘモグロビン妨害を排除しつつアルカリホスファターゼを測定する方法 | |
| US20200283741A1 (en) | Glycated hemoglobin oxidase variant and method for measurement | |
| US4348208A (en) | Uric acid assay and reagent system therefor | |
| NZ331491A (en) | Process to eliminate haemoglobin errors when analysing medical samples using a main and a secondary measuring wavelength | |
| EP0751394A1 (en) | Method for detecting of human parvovirus and reagent therefor | |
| Moon-Massat et al. | Hitachi Hemolytic Index correlates with HBOC-201 concentrations: impact on suppression of analyte results | |
| US6713275B1 (en) | Method for determining alkaline phosphatase | |
| AU675289B2 (en) | Method for the determination of hemoglobin adducts | |
| Soleimani et al. | Research Article Lipemia Interferences in Biochemical Tests, Investigating the Efficacy of Different Removal Methods in comparison with Ultracentrifugation as the Gold Standard | |
| Johnson | Necessity for high-quality reference materials in the harmonization of laboratory assays | |
| Hyder et al. | Visual hemolysis Index for routine clinical chemistry laboratory parameters |