CZ235498A3 - Farmaceutický prostředek pro inhibici nádorů tlustého střeva savců zvláště lidí - Google Patents

Farmaceutický prostředek pro inhibici nádorů tlustého střeva savců zvláště lidí Download PDF

Info

Publication number
CZ235498A3
CZ235498A3 CZ982354A CZ235498A CZ235498A3 CZ 235498 A3 CZ235498 A3 CZ 235498A3 CZ 982354 A CZ982354 A CZ 982354A CZ 235498 A CZ235498 A CZ 235498A CZ 235498 A3 CZ235498 A3 CZ 235498A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
formula
compound
tumors
pharmaceutical composition
cells
Prior art date
Application number
CZ982354A
Other languages
English (en)
Inventor
Marie Luisa Brandi
Francesco Tonelli
Original Assignee
Eli Lilly And Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9603150.5A external-priority patent/GB9603150D0/en
Application filed by Eli Lilly And Company filed Critical Eli Lilly And Company
Publication of CZ235498A3 publication Critical patent/CZ235498A3/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4535—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a heterocyclic ring having sulfur as a ring hetero atom, e.g. pizotifen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Description

Farmaceutický prostředek pro inhibici nádorů tlustého střeva savců zvláště lidí
Oblast techniky
Vynález se týká farmaceutického prostředku pro inhibici nádorů tlustého střeva.
Dosavadní stav techniky
Nádor tlustého střeva zahrnující například rektální a kolorektální adenokarcinom, primární nebo metasázový adenokarcinom je se zřetelem na četnost onemocnění středem pozornosti. Zjistilo se, že u jednoho z 25 Američanů se vyvine určitá forma rakoviny tlustého střeva v průběhu jeho života (Sugarbaker P.H. a kol., Cancer, DeVita, V.T. a kol., (vyd.) Lippincott Publ. Philadelphia, str. 795 až 884, 1985).
Z hlediska ošetření se v široké míře používá chirurgie s dobrými, smíšenými nebo méně než příznivými výsledky. Obzvláště u nemocných rakovinou tlustého střeva s místně pokročilým nebo metastazujícím onemocněním je prognóza mimořádně nepříznivá s vysokou nemocností a úmrtností.
Drogová terapie se provádí s menšími než příznivými výsledky. Hlavní drogou, používanou při ošetřování rakoviny tlustého střeva, je antineoplastická sloučenina 5-fluorouraci1 (5-FU), který však vykazuje pouze nepatrné účinky. 5-FU může dočasně snižovat velikost nádoru, je však málo důkazů, že by se čas přežití ošetřovaných jedinců podstatněnji prodloužil, nebo že by se dosáhlo vyléčení (se zřetelem na pětileté periody remise). Chemoterapie 5-FU se použila u pacientů s metastázami do jater avšak dočasné zlepšení se pozorovalo pouze u 25 % nebo v ještě menší míře u ošetřovaných případů a celkové přežití se léčbou významněji neovlivnilo (LaMont J.T. a Isselbacher K., Harrison's Principles of Internal Medicine (10. vydání), McGraw-Hill, New York, str. 1764, 1983). Vedle nepatrné • · • · · · * · • · · · · · účinnosti 5-FU žádná jiná drogová nebo kombinovaná terapie se přesvědč i vě neosvědč ila kol., Cancer, DeVita, Philadelphia, str. 795 jako efektivnější (Sugarbaker P.H. a V.T. a kol., (vyd.) Lippincott Publ. až 884, 1985; Wooley P.V. a kol., New
England J. Med. 312, str. 1465, 1985).
Drogová terapie se hodnotí se zřetelem na ošetřování 1idskě rakoviny, například 1idskébo nádoru tlustého střeva xenoimplantátovými liniemi, při kterých se lidské nádory sériově heterotransplantují do imunodeficientních tak zvaných nahých” myší, a myši se pak zkoušejí na svoji schopnost odezvy na určitou drogu (Giovanella B.C. a kol., Cancer 5(7), str. 1146, 1983). Hodnoty, získané při těchto testech, silně podporují přesvědčivost heterotransplantovaných lidských nádorů, včetně nádorů tlustého střeva do imunodeficientní myši, například nahé myši jako predikátivního modelu pro zkoušení účinnosti prot i nádorových činí de1.
Sodná sůl přírodně se vyskytujícího alkaloidu, kaptothecin, se použila při krátkém klinickém testu k hodnocení toxického působení pro pacienty s pokročilou neléčitelnou rakovinou (Gottlieb G.A. a kol., Cancer Chemoterapy Rep. 5E, str. 461, 1970). Z této studie je možno učinit několik závěrů, přičemž však střední přežití pro takové pacienty s odezvou na ošetření vzrostlo o přibližně dva až tři a půl měsíce.
Deriváty kaptothecinu nebo jeho analogů byly syntetizovány a použity jako anti 1eukemická činidla v případě myši (například Wani M.C. a kol., J. Med. Chem. 23, str. 544, 1980; Váni M.C. a kol., J. Med. Chem. 30, str. 1774, 1987; a Wani M. C. a kol., J. Med. Chem. 30, str. 2317, 1987).
V americkém patentovém spise číslo 4 473692 a 4 545880 (Miyasaka a kol.) se popisuje v poloze 10 substituovaný kaptothecinový derivát a způsob jeho přípravy. Uvádí se, že v po• · · · · ·
loze 10 substituovaný kaptothecinový derivát má protinádorovou účinnost, se sníženou nebo mírnou toxicitou ve srovnání s mateřskou kaptothecinovou sloučeninou. Miyasaka a kol. neuvádějí specifické terčoví té nádory ani neuvádějí jaké hladiny snížené nebo mírné toxicity se dosahuje při použití jejich v poloze IO substituovaného kaptotheci nového derivátu.
Nejnověji se zkoušel enzym, lidská topoisomeráza I, v případě různých lidských rakovin, například leukemie a lymphomu (Potměšil M. a kol., Cancer Res. 48, str. 3537, 1988). Je známo, že lidská topoisomeráza I je monomem i protein se zdánlivou molekulovou hmotností 100000 daltonů. Spirálovitá funkce enzymu byla implikována do různých DNA transkripcí (replikace, transkripce a rekombinace). Čištěná savčí topoisomeráza I uvolňuje pozitivně suerspirálovou jakož také negativně superspirálovou DNA v mechanismu, který zahrnuje dočasný lom jednoho nebo dvou DNA řetězců a formaci kovalentního topoisomerázového I-DNA komplexu. V tomto komplexu je enzym kovalentně vázán na 3 -fosforylový konec lomené DNA kostry.
Nejnověji se zjistilo, že hladiny enzymu topoisomeráza I jsou průměrně vyšší v rakovinové tkáni, například v chirurgických vzorcích kolorektálního karcinomu ve srovnání s hladinou enzymu v mormální sliznici (Hsiang, Y.-H. a kol., Proč. Ann Meet of the Amer. Assoc. Cancer Res. 29, str. 172, 1988, Abstract). Jakkoliv se uvádí, že topoisomeráza I se může považovat za alternativní terč v chemoterapii tohoto onemocnění (kolorektálηí karcinom) není nic známo o droze, která by vzájemně reagovala s topoisomerázou I.
Se zřetelem na velmi špatné pětileté přežívání (přibližně 50 % nebo méně) pacientů, které prodělají běžné ošetření rakoviny tlustého střeva, například chirirgické vyříznutí nebo chemoterapii 5-FU, se považuje za mimořádně užitečné objevit novou cestu k účinnému ošetření maligního nádoru tlustého «· » « • · ·· · střeva za použití drogy nebo sloučeniny po chirurgickém zásahu, například která by pomohla stabilizovat diagnózu a odstranění rakovinového nádoru. Ošetření by také bylo užitečné pro pacienty s pokročilým onemocněním, které metastázovalo nebo se rozšířilo do různých orgánů, kdy chirurgie neumožňuje odstranění všech rakovinových tkání.
Podstata vynálezu
Farmaceutický prostředek pro inhibici nádorů tlustého střeva savců spočívá podle vynálezu v tom, že obsahuje jako účinnou látku derivát 2-feny1-3-aroy1benzothiofenu obecného vzorce I
kde znamená
R1 a R3 na sobě nezávisle atom vodíku, methylovou skupinu, skupinu vzorce
-C = O nebo -C = 0 (Ci- 6 alky 1) Ar kde znamená Ar popřípadě substituovnou fenylovou skupinu,
R2 pyrro1idinoskupinu, hexamethyleniminoskupinu nebo piper id inoskupinu, • · • · « ·· · ···· ··· · · · · · · · • ···· · · · · · ··* · · • · · · · · · · ··· · · ·· · ·* ··
- 5 nebo jeho farmaceuticky vhodné soli a solváty.
Vynález je založen na objevu, Se vybrané deriváty 2-fenyl3-aroylbenzothiofenu (benzothiofenyl obecného vzorce I jsou uši tečné pro inhibici nádorů tlustého střeva.
Podle vynálezu se postupuje tak, Se se lidem, kteří takové ošetření potřebují, podává dávka vybraného derivátu 2-fenyl -3-aroylbenzothiofenu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodné soli nebo solvátu, účinná pro inhibici nádorů tlustého střeva. Inhibice zde má obecně známý význam a zahrnuje prohibici, prevenci, potlačení, zpomalení a zastavení nebo recidivu progrese, závažnost nebo následné symptomy nebo působení .
RaIoxi fen, sloučenina spadající pod obecný vzorec I, je bydrocbloridovou solí sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená R1 a R3 atom vodíku a R2 1-piperidinylovou skupinu a je nukleární regulátorovou molekulou. Ukázalo se, še raloxifen se váže na estrogenový receptor a původně se považoval za molekulu, jejíš funkce a farmakologie byla antiesterogenní v tom, še blokoval schopnost estrogenu aktivovat děložni tkáň a rakoviny prsu, závislé na estrogenu. Tím raloxifen blokuje činnost estrogenu v některých buňkách avšak v buňkách jiného typu aktivuje raloxifen některé geny jako estrogen a má stejnou farmakologii, například osteoporosu a hyper1ipidemii. Proto se raloxifen označuje jako antiestrogen se smíšenými agonist-antagonistovými vlastnostmi. Jedinečný profil, který raloxifen má, a odlišnost od estrogenu se nyní považuji za jedinečné k aktivaci a/nebo k potlačování různých funkcí genu raloxifen-estrogenovým receptorovým komplexem jako protikladu k aktivaci a/ nebo k potlačování genů estrogenovým receptorovým komplexem. Proto jakkoliv raloxifen a estrogen využívají stejného receptoru, farmakologický výsledek z regulace genu těmito dvěma látkami neni snadno předpovědi telný a je pro každou z nich je4 4
Obecně se sloučeniny zpracovávají s běžnými excipienty,
4 • 444 4
·
4 4 • 4 4 4 dinečný.
ředidly nebo nosiči a lisují se na tablety nebo se zpracovávají na elixíry nebo roztoky pro běžně orální podání nebo pro intramuskulární nebo intravenosní podání. Sloučeniny obecného vzorce I se také mohou podávat transdermálně a mohou se formulovat na farmaceutické prostředky s prodlouženým uvolňováním.
Deriváty 2-fenyl-3-aroylbenzothiofenu obecného vzorce I se mohou připravovat o sobě známými způsoby nebo způsoby podrobně popsanými v amerických patentových spisech číslo 4133814, 4 418068 a 4 380635. Obecně se vychází z benzo[b]thiofenu majícího v poloze 6 hydroxylovou skupinu a 2-(4-hydroxyfenyl)ovou skupinu. Do výchozí látky se zavádí chránící skupina, sloučenina se alkyluje, chránící skupina se odstraní za získání sloučeniny obecného vzorce I. Příklady způsobu přípravy takových sloučenin jsou popsány ve shora uvedených amerických patentových spisech. Jakožto substituovaná fenylová skupina se uvádějí fenylová skupina substituovaná jedním nebo dvěma substítuenty ze souboru zahrnujícího alkylovou skupinu s 1 aš 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 aš 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, nitroskupinu, atom chloru nebo fluoru nebo trichlormethylovou nebo trífluormethy1ovou skupinu.
Deriváty 2-fenyl-3-aroylbenzothiofenu (benzothiofeny) obecného vzorce I, používané podle vynálezu, vytvářejí farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinou nebo se zásadou s nejrůznějšími anorganickými a organickými kyselinami a zásadami a vynález se tedy také týká fysiologicky vhodných solí, běžně používaných ve farmaceutickém průmyslu
Jakožto příklady farmaceuticky vhodných minerálních kyselin, použitelných pro přípravu farmaceuticky vhodných solí, se uvádějí příkladně kyselina chlorovodíková, bromovodíková, jo4444 • 4
444«
- 7 4 4 · · • · · · · · · • 4 4 4 4 44 • 44 · · · 4 · · • 4 4 4 4 ·
4 44 44 dovodíková, dusičná, fosforečná, fosforná a sírová. Může se také používat solí odvozených od organických kyselin, jako jsou například alifatické monokarboxylové a dikarboxylové kyseliny, fenylovou skupinou substituované alkanoové kyseliny, hydroxyalkanoové a hydroxyalkandioové kyseliny, aromatické kyseliny, alifatické a aromatické sulfonové kyseliny.
Jakožto takové farmaceuticky vhodné soli, připravené za použití minerálních nebo organických kyselin, se uvádějí příkladně acetát, fenylacetát, trifluoracetát, akrylát, askorbát, benzoát, chiorbenzoát, methylbenzoát, methoxybenzoát, dinitrobenzoát, hydroxybenzoát, o-acetoxybenzoát, naftalen-2-benzoát, bromid, isobutyrát, fenylbutyrát, beta-hydroxybutyrát, butin1,4-dioát, hexin-1,6-dioát, kaprát, kaprylát, chlorid, cinnamát, citrát, formát, fumarát, glýkolát, heptanoát, hippurát, laktát, malát, maleát, hydroxymaleát, malonát, mandělát, mesylát, nikotinát, isonikot inát, nitrát, oxalát, ftalát, tereftalát, fosfát, monohydrogenfosfát, dihydrogenfosfát, metafosfát, pyrofosfát, propiolát, propionát, fenylpropionát, salicylát, sebakát, sukeinát, suberát, sulfát, hydrogensulfát, pyrosulfát, sulfit, hydrogensulfit, sulfonát, benzensulfonát, p-bromfenylsulfonát, chiorbenzensulfonát, ethansulfonát, 2-hydroxyethansulfonát, methansulfonát, naftalen-1-sulfonát, naftalen2-sulfonát, p-toluensulfonát, xylensulfonát a tartrát. Výhodnou je hydrochloridová sůl.
Farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinou se zpravidla připravují reakcí sloučeniny obecného vzorce I s ekvimolekulárním nebo s nadbytečným množství kyseliny. Reakční složky se zpravidla mísí v rozpouštědle obou složek, jako jsou diethylether nebo benzen. Soli se zpravidla vysrážejí z roztoku v průběhu jedné hodiny až deseti dnů a mohou se izolovat filtrací nebo se rozpouštědlo může odehnat o sobě známými způsoby
Jakožto zásady, používané pro přípravu adičních solí se tf· tftftftf • · tftf·· ·· 4 • · · zásadami, se uvádějí příkladně hydroxid amonný a hydroxidy, uhličitany a hydrogenuhliči taný alkalických kovů a kovů alkalických zemin, jakož také alifatické a primární, sekundární a terciární aminy, alifatické diaminy a hydroxyalkylaminy. Jakožto obzvláště vhodné zásady pro přípravu adičních solí se zásadou se uvádějí hydroxid amonný, uhličitan draselný, hydrogenuhličitan sodný, hydroxid vápenatý, methylamín, diethylamin, ethylendiamin a cyklohexylamin.
Farmaceuticky vhodné adiční soli mají obecně zlepšenou rozpustnost ve srovnání se sloučeninou, od které jsou odvozeny a proto se jich s výhodou používá pro připravů kapalin nebo emulzí.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu se připravují o sobě známými způsoby. Například se sloučeniny obecného vzorce I mohou zpracovávat s běžnými excipienty, ředidly nebo nosiči na formu tablet, pilulek, kapslí, suspenzí a prášků.
Jakožto příklady vhodných nosičů, excipientů a ředidel se uvádějí plnidla a nastavovače, jako jsou škrob, cukry, fflannitol a deriváty kyseliny křemičité; pojidla, jako jsou karboxymethyl celulóza a jiné deriváty celulózy, algináty, želatina a polyvinylpyrrolidon; zvlhčovalda, jako je glycerol; rozptylovací přísady, jako je uhličitan vápenatý a hydrogenuhličitan sodný; činidla, zpomalující rozpouštění, jako je parafin; činidla urychlující resorpci, jako jsou kvarterní amoniové sloučeniny; povrchově aktivní činidla, jako je cetylalkohol, glycerol monostearát; adsorpční nosiče, jako jsou kaolin a bentonit; a mazadla, jako je mastek, stearát vápenatý a hořečnatý a pevné polyethylenglykoly.
Sloučeniny obecného vzorce I se také mohou zpracovávat na elixíry a roztoky pro běžné orální podání nebo na roztoky, vhodné pro parenterální podání, například intramuskulámí, • · ···· ·· »· «· ·♦ · ·»·« • a · ·· a a aaa » a··· · a a a » aaa a a a a aaa aaa aaa a aaa aaaa subkutannt nebo intravenozní cestou. Kromě toho jsou sloučeniny obecného vzorce I velmi dobře vhodné pro přípravu farmaceutických prostředků s pozdrženým uvolňováním účinné látky. Farmaceutické prostředky se mohou připravovat také tak, aby uvolňovaly účinnou látku pouze nebo výhodně v určité části zažívacího traktu po možnosti po určitou dobu. Povlaky, obaly a chránící matrice se mohou připravovat například z polymerních látek nebo z vosků.
Určitá dávka podávané sloučeniny obecného vzorce I, potřebná pro inhibici nádorů tlustého střeva nebo jiných onemocnění, závisí na závažnosti stavu, na cestě podání a na podobných skutečnostech a stanovuje ji lékař. Zpravidla je denní dávka účinné látky přibližně 0,1 aě přibližně 1OOO mg/den, zpravidla přibližně 50 aě přibližně 200 mg/den. Taková dávka se podává najednou nebo ve třech denních podílech nebo i častěji podle potřeby efektivní inhibice nádorů tlustého střeva.
Obecně je výhodné podávat sloučeninu obecného vzorce I ve formě adiční soli s kyselinou, jak je běžné pro sloučeniny, které mají zásaditou skupinu, například piperidinový kruh. Vhodné je podávání orální cestou. Pro takový způsob jsou vhodné následující orální dávkovači formy.
Následující příklady farmaceutických prostředků vynález toliko objasňují a nijak jej neomezují. Účinnou látkou se vědy myslí sloučenina obecného vzorce I.
Příklady provedení
Příklad farmaceutického prostředku 1 - želatinová kapsle
Tvrdé žeiatinové kapsle se připravují z následujících slo
• · · • t · ** »··· • · · • ♦ · »
• · > • ·«·· • · · · * • · · · »
• · • ·· · · »· · ♦ ♦ ··
- 10 Množství (mg/kapsle)
účinná látka 0, 1 až 1000
škrob, NF 0 až 650
škrob, rosplývavý prášek 0 až 650
silikonová kapalina 350 mPas 0 až 15
Uvedené složky se smísí, vedou se sítem No. 45 mesh U.S.
(průměr ok 355 mikrometrů) a plní se do tvrdých že1at i nových
kapslί.
Jakožto příklady určitých farmaceutických prostředků ve formě kapslí se uvádějí prostředky obsahující účinnou látku obecného vzorce T, kde znamená R2 piperidinoskupinu a R1 a R3 atom vodíku (raloxifen). Takové kapsle mají následující složení :
Příklad farmaceutického prostředku 2 - raloxifenová kapsle
Množství (mg/kapsle)
raloxifen 1,0
škrob, NF 112, 0
škrob, rozplývavý prášek 225, 3
silikonová kapalina 350 mPas 1,7
Příklad farmaceutického prostředku 3 - raloxifenová kapsle
Množstv í (mg/kaps1
raloxifen 5, 0
škrob, NF 108, 0
škrob, rosplývavý prášek 225, 3
silikonová kapalina 350 mPas 1,7
* ♦ • · · ·
-11»* fcfcfc· * ·
9 9
9 9
9 9
9 • 9 99
9 9 9 • 9 9 9
999 9 9
9 9
9 9 9
Přiklad farmaceutického prostředku 4 - raloxifenová kapsle
Množství (mg/kapsle) raloxifen 10,0 škrob, NF 103,0 škrob, roHplýuavý prášek 225,3 silikonová kapalina 350 MPas 1,7
Příklad farmaceutického prostředku 5 - raloxifenová kapsle
Množstv í (mg/kapsle) raloxifen 50,0 škrob, NF 150,0 škrob, rozplývavý prášek 397,0 silikonová kapalina 350 mPas 3,0
Určité složení takových farmaceutických prostředků se může měnit podle účelu použití.
Příklad farmaceutického prostředku 6 - tablety
Tablety se připravují 2 následujících složek:
Množství í mg/tableta) účinná látka celulóza, mikrokrystalická oxid křemičitý, sublimovaný kyselina stearová
0,1 až 1OOO až 650 až 650 až 15
Uvedené složky se smísí a lisují se o sobě známým způsobem na tablety.
Příklad farmaceutického prostředku 7 - tablety
Tablety, obsahující vždy 0,1 až 1000 mg účinné látky obectata · ·>· · • · • · ·· ··«· ·
- 12 • ta • tatata • ta • * • · · · • 1 ·· • ta< · · • ta · ·· · · ného vzorce I se také mohou připravovat následujícím způsobe»:
Množství (mg/tableta) účinná látka 0,1 až 1000 škrob 45,0 celulóza, mikrokrystalická 35,0 polyvinylpyrrolidon (10% roztok ve vodě) 4,0 natriumkarboxymethylováný škrob 4,5 stearát hořečnatý O, 5 mastek 1,0
Účinná látka, škrob a celulóza se vedou sítem No.45 mesh LI.S. (průměr ok 355 mikrometrů) a důkladně se promísí. Se získaným práškem se smísí roztok polyvinylpyrrolidonu a směs se vede sítem No. 14 mesh U.S. (průměr ok 1400 mikrometrů).
O
Takto získané granule se suší při teplotě 50 až 60 C, vedou sítem No.18 mesh U.S. (průměr ok 1000 mikrometrů). Natriumkarboxymethyl ováný škrob, stearát hořečnatý a mastek se vedou sítem No. 60 mesh U.S. (průměr ok 250 mikrometrů), přidají se do granulí, promísí se a směs se lisuje na tablety.
Příklad farmaceutického prostředku 8 - suspenze
Supenze obsahující vždy 0,1 až 1000 mg účinné látky obecného vzorce I na 5 ml dávku se připravuje následujícím způsobem
účinná látka 0,1 až 1000 mg
natr i umkarboxymethy1ce1ulóza 50,00 mg
sirup 1,25 mg
roztok kyseliny benzoové 0, 10 ml
chuťová přísada q. v.
barvivo q. v.
čištěná voda do 5, 0 i ml
Účinná látka se vede sítem No. 45 mesh U.S. (průměr ok ·· »*·· • » · « · ·
• · ♦ • · · ·« «
355 mikrometrů) a smlsl se s natriumkarboxymethylcelulózou a se sirupem za vzniku hladké pasty. Přidá se za míchání roztok kyseliny benzoové, chuťové přísady a barviva, zředěné trochou vody. Pak se přidá dostatečné množství vody k dosažení požadovaného objemu.
Desmoidní nádory jsou zřídka se vyskytující nemetastazující nádory fihrozního původu. Klinické zkušenosti naznačují, še steroidní hormony mají význam v historii těchto nádorů: vyskytují se hlavně u šen v období plodnosti a pokles výskytu těchto nádorů je spojen s menopauzou nebo s antiestrogenovou terapi í.
Úkolem této práce je identifikovat estrogenové receptory v desmoidních nádorových primárních buňkách a hodnotit vliv sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu na desmoidní buňky v primární kultuře.
Jelikož se desmoidní nádory vyvíjejí s familiální adenomátožní polyposis (FAP), která může vést k rakovině tlustého střeva nebo konečníku, zkouší se inhibiční vliv sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu na buněčný růst linie adenokarcinomálních buněk (HCT8) a fibroblastů z bioptických vzorků rakoviny tlustého střeva.
Sloučeninou obecného vzorce la je sloučenina obecného vzorce I, kde znamená R2 pyrrolidinoskupinu, R1 a R3 atom vodíku.
Studie vázání se provádějí na nedotčených buňkách. Desmoidální buňky se nanesou na šestidůlkovou destičku s růstovým prostředím íCoonovo modifikované Ham fl2 prostředí doplněné ECS). Po 24 hodinách se růstové prostředí nahradí pevným prostředím bez fenolové červeně a buňky se ponechají hladovět po dobu 24 hodin. Potom se buňky inkubují po dobu jedné hodiny ·« * Φ· ··»· ·· ·· • 99 9 9 9 ··« · · * · · · « 99
9999 9 9 9 9 · ·*· » »
9 9 9 9 9 9 9
9999 9 99 9 ·· 99
- 14 s 1 ml prostředí bea fenolové červeně obsahujícím 25 mM HEPES a Oj 5% ethanol (vasný pufr) a koncentrace se zvyšuje (0,05 až 10 nM) [3H]17betaE2 a sloučeniny obecného vzorce Ta. Po inkubaci se buňky promyjí dvakrát 800 ul vazného pufru a o
provádí se lýze IN roztokem hydroxidu sodného o teplotě 70 C po dobu 30 minut. Přidá se 4N kyselina chlorovodíková do každého důlku za účelem neutralizace. Měří se radioaktivita kapalinovou scinti lační spektroskopií. Scatchardovou analýzou se hodnotí ER vazná afinita a vazná kapacita.
Všechny následné stupně se provádějí za teploty 0 aš 4 β
C. Práškovitá tkáň se homogenizuje se dvěma 10 skundovými rázy v polytronovém homogenizátoru oddělenými 30 sekundovými periodami chlazení v pufru tohoto složeni: 10 mM Tris-HCl, 5 mM
EDTA, 10 mM molybdenanu sodného, IO mM dithiothreitolu, 10 % glycerolu (objemově), hodnota pH pufru je 7,4. Homogenizát se odstřeďuje při 7000 g po dobu 20 minut a pelety se vyhodí, supernatant se opět odstřeďuje pří 105000 g po dobu 60 min k získání cytosolu pro estrogenovou receptorovou analýzu. Cytosol se zředí na 1 až 2 mg proteinu/ml. Cytosolový protein se stanovuje způsobem, který popsal Bradford. Pro posouzení estrogenového receptorů se cytosol inkubuje po dobu 16 hodin při teplotě 4 C v koncentračním rozmezí 0,05 aš 5 nM [3H]17betaE2 za použití 500 násobného nadbytku neznačeného 17betaE2 a sloučeniny obecného vzorce la nebo bez nich. Scatchardovou analýzou se hodnotí ER vazná afinita a vazná kapacita.
Buňky se nanesou na šest idůlkovou destičku v hustotě 8 x 104 buněk na důlek s růstovým prostředím. Po 24 hodin se buňky stimulují v růstovém prostředí bez dodání fenolové červeně s 0,1 % dimethylformamidu, O,1 % ethanolu a s různými koncentracemi sloučeniny obecného vzorce la (2 x 105M, 10“5M, 5 x
10“6M, 10~6M).
Buňky se inkubují po dobu šesti dnů, zpracují se roztokem • · · »···
- 15 ···· fe · • fefefe · • fe fefe ř fefe fe
I fefefe • fefefe « • · · • fe ·♦ trypsin/ethylendiamintetraoctová kyselina a růst se hodnotí čítáním pod mikroskopem. Stejného způsobu se použije pro buněčnou linii primárních fibroplastů stlustého střeva. Pro buněčnou linii HCTS : tato linie se kultivuje v RPMI a inkubuje se po dobu čtyř dnů po stimulaci.
Kolagen typu I v kultivačním prostředí a buněčné vrstvy se měří za použití enzymem navozené imunozkoušky (ELISA!. Buňky se inkubují po dobu 24 hodin v doplňků prostém prostředí Coonově modifikovaném Ham F12 prostředím obsahujícím 50 qg/ml askorbové kyseliny a 100 ng/ml beta-aminopropionitrylfumarátu.
Kultivační prostředí se shromáždí a vhodně se ředí pufrem 0, 1 M uhličitan/hydrogenuhli čitan (hodnota pH 9,6) a pak se ho používá pro pokrytí ELISA destiček, destičky ELISA se fe ponechají přes noc při teplotě 4 C a inkubují se po dobu 1,5 hodin při teplotě 37 C v PBS obsahujícím 5 % práškového mléka (PBS Blotto) k nasycení nespecifických míst vázání, dvě hodiny při teplotě 37 C v PBS obsahujícím kozí antikráličí konjugovaný komplex IgG-alkalický fosfát (Sigma CHemical Co., St. Louis, MO).
Na vzorky se pak působí 10% di ethanol am i nem ( hodnota pil 9,8) s 50 qg/Mg++ a 1 mg/ml páránitrofenylfosfátem jakožto substrátem alkalické fosfatázy při teplotě místnosti. Optická hustota se odečítá při 405 nM a koncentrace se vypočítá na základě standardní křivky. Shromáždí se buněčné monovrstvy v 0,5 N hydroxidu sodném a za použití zvuku se stanoví celulární kolagen typu I. Buněčné extrakty se pak zředí v pufru 0,1 M uh1ičitan/hydrogenuhličitan (hodnota pH 9,6) a používá se jich pro pokrytí ELISA destiček. Standardy a vzorky se zkoušejí vždy třikrát. Výsledky se vyjadřují jako qg proteinu/qg celulární DNA. DNA obsah se měří spektrofluorimetricky.
Zkoušky vázání se provádějí za použití [3H]17betaE2 ja44 4 44 4444 44 44
444 44 · 4444
444 44 4 44*4
4444 4444 4 444 4 4
4 4*4 444
4444 4 4* 4 4« 4*
- 16 kožto ligandů v buňkách primárního desmoidního nádoru a ve zmrazených vzorcích desmoidního nádoru.
Při obou zkouškách se vázání [3H]17betaE2 mírně (přibližně 10%) posune 500 násobným nadbytkem jak značeného estrogenu tak sloučeniny obecného vzorce Ia. Scatchardova analýza vázání [3H]17betaE2 za použití počítačového programu LIGAND (Munson P.J., Rodbard D., Anal. Biochem. 107, str. 220 až 239, 1980) dokládá obsah ER ve třech různých kulturách a ve dvou různých cytosolových prostředcích bioptických vzorků desmoidních nádorů.
Při růstové zkoušce se desmoidní nádorové primární buňky stimulují vystavením působení různých koncentrací sloučeniny obecného vzorce Ia. Výsledkem je inhibice buněčného růstu se šoupající koncentrací sloučeniny obecného vzorce Ia (tabulka I). Podobné výsledky se získají s buněčnou linikí HCT8 (tabulka II a s fibroblastovou buněčnou linií rakoviny tlustého střeva (tabulka III).
Při růstové zkoušce se desmoidní nádorové primární buňky stimulují vystavením působení různých koncentrací sloučeniny obecného vzorce Ia. Výsledkem je inhibice buněčného růstu se šoupající koncentrací sloučeniny obecného vzorce Ia (tabulka I). Podobné výsledky se získají s buněčnou linikí HCT8 (tabulka II a s fibroblastovou buněčnou linií rakoviny tlustého střeva (tabulka III).
Desmoidní buňky se inhibují mírou závislou na dávce sloučeniny obecného vzorce Ia v koncentracích 10-5 M, 5 χ ΙΟ-6 M, 10_6M, přičemž se maximálního inhibičního účinku dosahuje při koncentraci 105 M (tabulka IV).
Sloučenina obecného vzorce Ia je schopná posunovat vázání 17betaE2 na desmoidní tkáň pouze při velmi vysokých koncentra·· * ·
- 17 ···· • · · • ···· • » ···· · ·· • * • t • · · • · ·· • * * • »· ··» · « * · * ·· ·· cích (500 násobná nadbytek).
Sloučenina obecného vzorce la je schopná inhibovat proliferaci desmoidních buněk v mikromolárních koncentracích. Kromě toho v podobných koncentracích sloučenina obecného vzorce la inhibuje proliferaci epitheliálních a fihroblastických buněk odvozených od rakoviny lidského tlustého střeva.
Produkce kolagenu typu I se také výrazně snižuje v desmoidních buňkách v primární kultuře působením sloučeniny obecného vzorce la.
Za všech podmínek (elektroporace, Ca/P přecipitáce, lyposomy) zkoušených pro transfekci desmoidních buněk s prvky s odezvou na estrogen, se buňky poškozují a nejsou vhodné pro analýzu in vitro.
Tabulka I
Sloučenina la (mol/1) kontrola
2. 10-5
IO®
5.10-5 IO’6
Tabulka II
Sloučenina la (mol/1 kontrola
2.IO5
IO'5
5.IO6
Buňka χ 10-4 12, 3
0, 1 2. 8 7,0
10, 0
Buňka χ 10-4 150
115 φφ φφφφ φφ · φ φ φ φφφ • φφφφ φ φ • ΦΦΦ φ
- 18 φφ φφ » φ φ φ > φ φφ φφ φ φ · φ φ · φφ φφ
Tabulka III
Sloučenina la (mol/1 kontrola 2.10-5 IO'5 5.IO6 IO'6
Buňka x 10'4
7,6 O, 1 5,4
6, 3
7. 6
Tabulka IV
Kontrola DNA (0:D.) 4,85+/-0,32 DNA (ug) 1,36+/-0,06 Kolagen typ I (pg/důlek) 47,82+/-4,15 Kolagen typ i (qg/iigDNA) 35,00+/-1,41 P hodnoty
Sloučenina la 8,20+/-0,23 1,97+/-0,05 43,78+/-5,23 22,00+/-1,46 P < 0,005
1 uH
Sloučenina la 6,90+/-0,50 1,85+/-0,24 38,01+/-6,24 20,50+/-0,61 P ( 0,005
5 uH
Sloučenina la 7,90+/-1,46 1,96+/-0,29 35,16+/-2,44 18,00+/-1,41 P < 0,005
uli
Průmyslová využitelnost
Derivát 2-feny!-3-aroylbenzothiofenu nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl nebo solvát pro výrobu farmaceutického prostředku pro inhibici nádorů tlustého střeva.

Claims (3)

1. Farmaceutický prostředek pro inhibici nádorů tlustého střeva savců zvláště lidí, vyznačující se tím, že jako účinnou látku obsahuje derivát 2-feny1-3-aroy1benzothiofenu obecného vzorce I (I) kde znamená
R1 a R3 na sobě nezávisle atom vodíku, methylovou skupinu, skupinu vzorce
-C = 0 nebo -C = 0
I I (Ci - 6 a 1ky1) Ar kde znamená Ar popřípadě substituovnou fenylovou skupinu,
R2 pyrrolidinoskupinu, hexamethyleniminoskupinu nebo piper idinoskupinu, nebo jeho farmaceuticky vhodné soli a solváty.
2. Farmaceutický prostředek podle nároku 1, v y z n a č uj í c í s e t í m , že jako účinnou látku obsahuje derivát
2-feny1-3-aroy1benzothiofenu obecného vzorce I, kde jednotlivé
4444
4 4 • 4
44 44 44
4 44 4 4 4 4 4· 4
4 4 4 4 4 44
4 4 4 4 444 4 4
4 4 4 4 4
444 4444 44 44 symboly mají v nároku 1 uvedený význam, ve formě hydrochloridové soli.
3. Farmaceutický prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že jako účinnou látku obsahuje derivát 2-fenyl-3-aroylbenzothiofenu vzorce nebo jeho hydroch1oridovou sůl.
CZ982354A 1996-01-29 1997-01-27 Farmaceutický prostředek pro inhibici nádorů tlustého střeva savců zvláště lidí CZ235498A3 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US1077296P 1996-01-29 1996-01-29
GBGB9603150.5A GB9603150D0 (en) 1996-02-15 1996-02-15 Methods of inhibiting colon tumors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ235498A3 true CZ235498A3 (cs) 1999-02-17

Family

ID=26308709

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ982354A CZ235498A3 (cs) 1996-01-29 1997-01-27 Farmaceutický prostředek pro inhibici nádorů tlustého střeva savců zvláště lidí

Country Status (19)

Country Link
EP (1) EP0921799A4 (cs)
JP (1) JP2000503994A (cs)
KR (1) KR19990082054A (cs)
CN (1) CN1209745A (cs)
AR (1) AR010978A1 (cs)
AU (1) AU707892B2 (cs)
BR (1) BR9700778A (cs)
CO (1) CO4761062A1 (cs)
CZ (1) CZ235498A3 (cs)
EA (1) EA001104B1 (cs)
ID (1) ID15917A (cs)
IL (1) IL125521A (cs)
MX (1) MX9806036A (cs)
NO (1) NO983451D0 (cs)
NZ (1) NZ331105A (cs)
PL (1) PL328147A1 (cs)
TW (1) TW446560B (cs)
WO (1) WO1997026877A1 (cs)
YU (1) YU2397A (cs)

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW366342B (en) * 1992-07-28 1999-08-11 Lilly Co Eli The use of 2-phenyl-3-aroylbenzothiophenes in inhibiting bone loss
JPH07149638A (ja) * 1993-10-15 1995-06-13 Eli Lilly & Co 耐性新生物の治療法
US5574047A (en) * 1993-12-21 1996-11-12 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting imperfect tissue repair

Also Published As

Publication number Publication date
AU707892B2 (en) 1999-07-22
EA001104B1 (ru) 2000-10-30
KR19990082054A (ko) 1999-11-15
ID15917A (id) 1997-08-21
NO983451L (no) 1998-07-27
YU2397A (en) 1999-11-22
MX9806036A (es) 1998-11-29
BR9700778A (pt) 1998-10-06
EP0921799A1 (en) 1999-06-16
TW446560B (en) 2001-07-21
PL328147A1 (en) 1999-01-18
AR010978A1 (es) 2000-08-02
CN1209745A (zh) 1999-03-03
IL125521A0 (en) 1999-03-12
JP2000503994A (ja) 2000-04-04
WO1997026877A1 (en) 1997-07-31
EA199800677A1 (ru) 1999-02-25
AU2123997A (en) 1997-08-20
NZ331105A (en) 2000-06-23
NO983451D0 (no) 1998-07-27
IL125521A (en) 2001-11-25
EP0921799A4 (en) 2002-03-13
CO4761062A1 (es) 1999-04-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL177348B1 (pl) Środek farmaceutyczny do stosowania w inhibitowaniu ubytku kości u ludzi
NZ250486A (en) Benzothiophene derivatives used to lower serum cholesterol
CZ248297A3 (cs) Použití benzothiofenu pro přípravu terapeutického prostředku
US5604248A (en) Method for minimizing the uterotrophic effect of tamoxifen and tamoxifen analogs
CZ253894A3 (en) Pharmaceutical preparation for inhibiting uterus fibrosis
CZ320594A3 (en) Pharmaceutical preparation for increasing libido of post-menopausal women
CZ321294A3 (en) Pharmaceutical preparation for inhibiting derangement of mammae
US5843974A (en) Methods of inhibiting melanoma using Benzothiophenes as cytotoxic agents per se
MXPA97009466A (en) Medicine to inhibit the melan
CZ235498A3 (cs) Farmaceutický prostředek pro inhibici nádorů tlustého střeva savců zvláště lidí
CZ106098A3 (cs) Použití benzothiofenu k přípravě farmaceutického prostředku k inhibici inhibitoru 1 plasminogenového aktivátoru
US5843964A (en) Methods of inhibiting endometrial mitoses
CA2198119A1 (en) Methods of inhibiting endometrial cancer
CZ235398A3 (cs) Farmaceutický prostředek pro inhibici muskuloaponeurotických fibromatóz savců zvláště lidí
US5670523A (en) Methods of inhibiting musculoaponeurotic fibromatoses (desmoid tumors)
EP0729755A2 (en) 2-Phenyl-3-aroylbenziothiophenen for inhibiting ovarian cancer
CA2244247A1 (en) Methods of inhibiting musculoaponeurotic fibromatoses (desmoid tumors)
MXPA97006520A (en) Methods to inhibit the ova cancer
PL190551B1 (pl) Zastosowanie chlorowodorku raloksyfenu

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic