CZ20021554A3 - Deriváty fenoxykarboxylové sloučeniny a prostředky pro dodávání aktivní sloľky - Google Patents

Deriváty fenoxykarboxylové sloučeniny a prostředky pro dodávání aktivní sloľky Download PDF

Info

Publication number
CZ20021554A3
CZ20021554A3 CZ20021554A CZ20021554A CZ20021554A3 CZ 20021554 A3 CZ20021554 A3 CZ 20021554A3 CZ 20021554 A CZ20021554 A CZ 20021554A CZ 20021554 A CZ20021554 A CZ 20021554A CZ 20021554 A3 CZ20021554 A3 CZ 20021554A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
custody
compound
alkyl
hydrogen
found
Prior art date
Application number
CZ20021554A
Other languages
English (en)
Inventor
Andrea Leone-Bay
Kelly Kraft
Destardi Moye-Sherman
Puchun Liu
John E. Smart
Jun Liao
Maria A. P. Boyd
David Gschneidner
Pingwah Tang
John J. Freeman Jr.
Original Assignee
Emisphere Technologies, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Emisphere Technologies, Inc. filed Critical Emisphere Technologies, Inc.
Publication of CZ20021554A3 publication Critical patent/CZ20021554A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C65/00—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C65/21—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C07C65/24—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups containing ether groups, groups, groups, or groups polycyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C229/06—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having only one amino and one carboxyl group bound to the carbon skeleton
    • C07C229/18—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having only one amino and one carboxyl group bound to the carbon skeleton the nitrogen atom of the amino group being further bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/52—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C229/54—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C229/56—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring with amino and carboxyl groups bound in ortho-position
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/28—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a non-condensed six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C07C237/30—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a non-condensed six-membered aromatic ring of the carbon skeleton having the nitrogen atom of the carboxamide group bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/58—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C07C59/64—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups containing six-membered aromatic rings
    • C07C59/66—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups containing six-membered aromatic rings the non-carboxylic part of the ether containing six-membered aromatic rings
    • C07C59/68—Unsaturated compounds containing ether groups, groups, groups, or groups containing six-membered aromatic rings the non-carboxylic part of the ether containing six-membered aromatic rings the oxygen atom of the ether group being bound to a non-condensed six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/76—Unsaturated compounds containing keto groups
    • C07C59/90—Unsaturated compounds containing keto groups containing singly bound oxygen-containing groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/40—Unsaturated compounds
    • C07C59/76—Unsaturated compounds containing keto groups
    • C07C59/92—Unsaturated compounds containing keto groups containing —CHO groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C65/00—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C65/32—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups containing keto groups
    • C07C65/40—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups containing keto groups containing singly bound oxygen-containing groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Description

Oblast techniky
Předložený vynález se týká sloučenin fenoxykarboxylové kyseliny pro dodávání aktivních složek, jako jsou biologicky nebo chemicky aktivní složky, do cíle. Tyto sloučeniny se dobře hodí pro tvorbu nekovalentních směsí . s aktivními činidly pro orální, intratračníkové, plicní a jiné cesty podání zvířatům. Také jsou popsány způsoby přípravy a podání takových prostředků.
Dosavadní stav techniky
Obvyklé prostředky pro dodávání aktivních složek jsou často silně omezeny biologickými, chemickými a fyzickými bariérami. Typicky jsou tyto bariéry tvořeny prostředím, ve kterém má k dodání dojít, prostředím cíle dodání a/nebo cílem samotným. Biologicky a chemicky aktivní činidla jsou vůči takovým bariérám obzvláště citlivá.
Při dodávání biologicky aktivních a chemicky aktivních farmakologických a terapeutických složek zvířatům jsou bariéry představovány tělem. Příklady fyzických bariér jsou kůže, lipidové dvouvrstvy a různé orgánové membrány, které jsou relativně neprostupné pro jisté aktivní složky, ale musí být prostoupeny před dosažením cíle, jako je oběhový systém. Chemické bariéry zahrnují změny pH v gastrointestinálním (GI) traktu a degradační enzymy, výčet tím však není omezen.
• · ·· 9 9 9 9 9 9 · 9 · ·
9 9 9 9 9 9 9999
Tyto bariéry jsou obzvláště významné při vytváření orálních systémů dodávání. Orální dodávání mnohých biologicky nebo chemicky aktivních činidel by bylo cestou volby pro podání zvířatům, kdyby nebylo biologických, chemických a fyzických bariér. Mezi četnými činidly, která nejsou typicky přístupné orálnímu podání jsou biologicky nebo chemicky aktivní peptidy, jako je kalcitonin a inzulín; polysacharidy a obzvláště mukopolysacharidy včetně heparinu, výčet tím však není omezen; heparinoidy; antibiotika a další organické látky. Tato činidla se mohou v gastrointetinálním traktu rychle inaktivovat nebo zničit kyselou hydrolýzou, enzymy apod. Kromě toho velikost a struktura makromolekulárních léčiv může zamezit absorpci.
Dřívější způsoby orálního podání citlivých farmakologických činidel spočívaly v současném podání pomocných látek (např. resorcinolů a neiontových povrchově aktivních látek, jako je polyoxyethylenoleylether a n-hexadecylpolyethylenether) k umělému zvýšení permeability střevních stěn, stejně jako v současném podání inhibitorů enzymů (např. inhibitorů pankreatického trypsinu, diisopropylfluorfosfátu (DFF) a trasylolu) k inhibici enzymatické degradace. Jako systémy dodávání inzulínu a heparinu byly rovněž popsány liposomy. Široké spektrum použití systémů dodávání léčiv je však vyloučeno v důsledku toho, že:
1) systémy vyžadují toxická množství pomocných látek nebo inhibitorů;
2) nejsou dostupné vhodné nálože s nízkou molekulovou hmotností, tj. aktivní činidla;
• · • 9 • · · · · · · · · · • · ♦ · · · · · • · ··· · · · ···· ···· ·· · 99 ····
3) systémy vykazují nízkou stabilitu a neodpovídající dobu použitelnosti;
4) systémy se obtížně vyrábějí;
5) systémy nechrání aktivní činidlo (nálož);
6) systémy nežádoucím způsobem mění aktivní činidlo nebo
7) systémy neumožňují nebo neusnadňují absorpci aktivního činidla.
V poslední době byly k dodávání farmaceutik použity proteinové mikrokuličky. Viz např. US patenty čísel 5 401 516, 5 443 841 a Re 35 862. Kromě toho byly k dodání farmaceutiky použity jisté modifikované aminokyseliny. Viz např. US patenty čísel 5 629 020, 5 643 957, 5 776 633,
776 888 a 5 866 536.
Existuje však stále potřeba jednoduchého, levného dodávacího systému, který se snadno připraví a který může dodávat širokou škálu aktivních činidel různými cestami.
Podstata vynálezu
Předložený vynález poskytuje sloučeniny a prostředky, které usnadňují dodávání aktivních činidel. Sloučeniny dodávacího činidla podle předloženého vynálezu zahrnují sloučeniny, které mají následující obecný vzorec
COOH • · • · ·♦ ··♦· · · · · ·· ·· • · · · a jejich soli, ve kterém
R1, R2, R3 a R4 jsou nezávisle atom vodíku, skupina -OH, atom halogenu, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, skupina -C(O)R8, skupina -N02, skupina ~NR9R10, nebo skupina -N+R9R10R11 (R12);
R5 je atom vodíku, skupina -OH, skupina -NO2, atom halogenu, skupina -CF3, skupina -NR14R15, skupina -N+R14R15R16 (R13)-, amid, alkoxyskupina s 1 až 12 atomy uhlíku, alkylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku, karbamát, uhličitan, močovina nebo skupina -C(O)R18;
R5 je případně substituován atomem halogenu, skupinou -OH, -SH nebo skupinou -COOH;
R5 je případně přerušen atomem kyslíku, dusíku, síry nebo skupinou -C(0)-;
R6 je alkyndiylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, alkenylenová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku nebo arylen;
R6 je případně substituován alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylem se 2 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinou -OH, skupinou -SH, atomem halogenu, ·· ·· ·» 99*9 9· ··
9*9 99 9 9 · 9 9
999999·· _ 9 9 9 9 · 9 · · J 9999 ···· ·· · 99 9999 skupinou -NH2 nebo skupinou -CO2R8;
R6 je případně přerušen atomem kyslíku nebo dusíku;
R7 je vazba nebo arylen;
R7 je případně substituován skupinou -OH, atomem halogenu, skupinou -C(O)CH3, skupinou -NR10R11 nebo skupinou -N+R10RuR12 (R13)';
R8 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 4 atomy uhlíku nebo skupinu -NH2;
R9, R11, R11 a R12 nezávisle jsou atom vodíku nebo alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku;
R13 je halogenid, hydroxid, sulfát, tetrafluorborát nebo fosfát a
R14, R15 a R16 jsou nezávisle atom vodíku, alkylová skupina s
1 až 10 atomy uhlíku, alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku substituovaná skupinou -COOH, alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku substituovaná skupinou -COOH, skupinou -C(O)R17;
R17 je skupina -OH, alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku nebo alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku a
R18 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku, skupina -OH, skupina -NR14R15 nebo skupina
• · •· ·· ·· ···· · · • · · · ·· · · ♦ ♦ ·
N+R14R15R16(R13) ;
za předpokladu, že když R1, R2, R3, R4 a R5 jsou atom vodíku a R7 je vazba, pak R6 není alkylová skupina s 1 až 6, 9 nebo 10 atomy uhlíku, když R1, R2, R3 a R4 jsou atom vodíku, R5 je skupina -OH a R7 je vazba, pak R6 není alkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku, když alespoň jeden z R1, R2, R3 a R4 není atom vodíku, R5 je skupina -OH a R7 je vazba, pak R6 není alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, když R1, R2 a R3 jsou atom vodíku, R4 je skupina -OCH3, R5 je skupina -0(0)0¾ a R6 je vazba, pak R7 není alkylová skupina s 3 atomy uhlíku a když R1, R2, R4 a R5 jsou atom vodíku, R3 je skupina -OH a R7 je vazba, pak R6 není methyl.
Podle jednoho z výhodných ztělesnění je R1 atom vodíku, R2, R3 a R4 jsou nezávisle atom vodíku, atom halogenu, skupina -OH nebo skupina -0CH3, R5 je atom vodíku, skupina -OH nebo skupina -C(O)CH3, R6 je alkyndiylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku a R7 je vazba nebo para-fenylen. R7 je výhodněji alkylová skupina se 7 až 9 atomy uhlíku.
Podle dalšího z výhodných ztělesnění je alespoň jeden z R1, R2, R3 a R4 atom vodíku, skupina -C(O)CH3, skupina -OH, atom chloru, skupina -OCH3, atom fluoru nebo • · · · ·· · · · · ·· ·· ·*···· · · 9 · · • · ··· · · · ···· ···· ·· · 4* ···· skupina -N02. V jednom výhodnějším ztělesnění R2 je skupina -C(O)CH3, skupina -OH, skupina -OCH3 nebo atom chloru.
V ještě dalším výhodnějším ztělesnění R3 je atom chloru, skupina -OCH3, atom fluoru nebo skupina -OH. V ještě dalším výhodnějším ztělesnění R4 je skupina -OCH3 nebo skupina -NO2.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R5 je skupina C(O)CH3, skupina -OH, atom vodíku, skupina -CH=CHCH3, skupina -NH2, skupina -N02, skupina -NHC(O)CH3, skupina -CH=CHCO2H, skupina -C(O)CH2CH3, skupina -C(O)NH2, skupina -C(O)NHCH3, skupina -COOH, skupina -C (0) NHCH2CH3, skupina C (0) NHCH (CH3) 2, skupina -OCH3, skupina -C(CH3)2OH, skupina -C(OH)(CH3)2 nebo skupina -CH(OH)CH3.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R6 je lineární alkyndiylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku. Výhodněji R6 je skupina -(CH2)n-, kde n je celé číslo od 1 do 10.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R4 a R5 nejsou alkyl nebo atom halogenu.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R7 je para-fenylen nebo vazba.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R6 je skupina -CH2- a R7 je fenylen a, výhodněji, para-fenylen. Výhodněji alespoň jeden z R1, R2, R3 a R4 je atom vodíku. Výhodněji R5 je skupina -C(0)CH3, skupina -OH nebo skupina -C(CH3)2OH.
·· ·· • · 9 9 9 9
9 9 9
9 9 9
99999999 99 ·· ··· ·
99
9 9 9 9
9 9 9
9 9 9
99 9999
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R7 je vazba, R5 je skupina -OH a R1, R2, R3 a R4 jsou atom vodíku. R6 je výhodně alkyndiylová skupina se 4 až 12 atomy uhlíku a, výhodněji, alkyndiylová skupina se 4 až 9 atomy uhlíku.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R7 je vazba, R5 je skupina -OH a alespoň jeden z R1, R2, R3 a R4 není atom vodíku. R6 je výhodně alkyndiylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, výhodněji alkyndiylová skupina s 5 až 12 atomy uhlíku a nej výhodněji alkyndiylová skupina s 5 až 9 atomy uhlíku.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R7 je vazba, R5 je skupina -C(O)CH3 a R1, R2, R3 a R4 jsou atom vodíku. R6 je výhodně alkyndiylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, výhodněji alkyndiylová skupina se 3 až 12 atomy uhlíku a nej výhodněji alkyndiylová skupina se 3 až 7 atomy uhlíku.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R7 je vazba a R1, R2, R3 a R4 jsou atom vodíku. Výhodně R6 je alkyndiylová skupina se 7 nebo 8 atomy uhlíku.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R7 je vazba, R5 je atom vodíku a alespoň jeden z R1, R2, R3 a R4 není atom vodíku. R6 je výhodně alkyndiylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, výhodněji alkyndiylová skupina se 4 až 9 atomy uhlíku a nej výhodněji alkyndiylová skupina se 7 nebo 8 atomy uhlíku.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R2 je skupina -OH. Výhodněji R7 je vazba a R5 je atom vodíku.
Výhodně R6 je alkyndiylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku,
00 • 0 0 ·
0
0 0000 0004 •0 0000
00 0 0 0 0
0 0
0 0
0044 výhodněji alkyndiylová skupina se nejvýhodněji alkyndiylová skupina až 9 atomy uhlíku a se 7 atomy uhlíku.
Podle ještě dalšího výhodného ztělesnění R3 je skupina -OH. Výhodně R7 je vazba a R5 je atom vodíku. Výhodně R6 je alkyndiylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, výhodněji alkyndiylová skupina se 3 až 9 atomy uhlíku a nej výhodněji alkyndiylová skupina se 7 atomy uhlíku.
Výhodné sloučeniny dodávacích složek zahrnují sloučeniny popsané v tabulce 1 uvedené dále a jejich soli, výčet tím však není omezen.
Tabulka 1
Slouč. č.! RÍ Rf R? R^ R7
1 H . H H H C(0)ch3 ch2 para-Ph*
2 ' H H H H OH ch2 para-Ph*
3 H H H H OH ch2 vazba
4 H H H H ' OH (CH2) 3 vazba
5 H H H H OH (CH2) 5 vazba
6 H H H H OH ( CH2) 6 vazba
7 H H H l-i OH (CH2) - vazba j
8 H H H H OH (CH2)9 vazba
9 H H H H . . C(0)CH3 (CH2) 3 vazba
10 H H H H C(O)ch3 (CH2 i < vazba
11 H H H H C(0)CH3 (CH2) 5 vazba
12 H H H H C(O)CH3 (CH2) 3 vazba
13 H H H H H CH2 ivazba
14 H H ’ H H H (CH2) 3 vazba
15 H H H H H (CH2) 5 vazba
16 H H H H H (CH2) 2 vazba
17 H H H H H (CH2) 10 vazba
18 H H H H CH=CHCH3 (ch2h vazba
19 H H H H nh2 (CH2)7 vazba
20 H H H H no2 <ch2h vazba
21 H H H H nh2 <CH2) 4 vazba
22 H H Cl H nh2 (CH2) 7 vazba
23 H H Cl H nh2 (CH2) < vazba
24 H H H H NHC(0)CH3 (CH2) 7 vazba
25 H H H H ch=chco2h (CH2) 7 vazba
26 H H H H C(0)ch2ch3 (CH2) 3 vazba
27 H H H H C(0)ch2ch3 (CH2)5 vazba
28 H H H H C(0)ch2ch3 (CH2) 7 vazba
29 H H H H C(0)ch2ch3 (CH2) s vazba
30 H H H H C(0)nh2 (CH2) 7 vazba
31 H H H H ' C(0)nhch3 (CH2) 7 vazba
32 H H H H .· COOH 1 (CH2) 7 vazba
···« ·· ·« • · · · · • · · · • » · · · • · · · • · · ·»·· • · · · « • · · <
·····*·« ··
SIouč. č. I? 5Í R3' ...... —J.- K i- í i i úd r;
33 H H H H C(O)NHCH?CH3 (CH?) ? vazba
34 H H H H C(O)NHCH (CH3) 2 (CH2)? vazba
35 H H H H OCH3 (CH2)7 vazba
36 H H H H CH(OH)CH3 (CH?)7 vazba
37 H H H H C (CH3) 2oh CH2 para-Ph*
38 H H H OH C(O)ch3 (CH?) 7 vazba
39 H H H OCH3 C(0)ch3 (CH2) 7 vazba
43 H OH H H H (CH2) 7 vazba
44 H OH H H H (CH2) 9 vazba
45 H OH H H H (CH2).5 vazba
46 H OH H H H (CH2) 3 vazba
47 H H OH H H (CH?) 7 vazba
48 H H OH H H (CH2) s vazba
49 H H OH H H (CH2) 5 vazba
50 H H OH H H (CH2) 3 vazba
51 H H H H C(0)NHCH3 (CH2)9 vazba
52 H H H H C(0)nh2 CH2 para-Ph* i
54 H H H H C(0)CH3 (CH2) 9 vazba
55 H H och3 H CIO)ch3 (CH;, ) 7 vazba
56 H och3 H H C(0)ch3 (CH?)? vazba
57 H H OH H C(0)ch3 (CH?) 7 vazba
58 H H CH3 H C(0)CH3 (CH?) 5 'vazbá
59 H H H H C (0) H ch2 -pa ra- Ph*
60 H H H H C (0) Η (CH?) 5 vazba
61 H H H H C (0) H (CH?) 7 vazba
62 H H C (0) ch3 H H (CH?)? vazba
6 3 H H C (O) CH2CH 3 H H (CH2) ? vazba
64 H C(O) ch3 H H H (CH2)7 vazba
65 H , Η H H H (CH2)? vazba
66 H H H H H CH? para- Ph*
67 H H OH H H CH2 para- Ph*
68 H Cl H H H (CH2)? vazba
69 H H OCH3 H H (CH2) 7 vazba
71 H H F H F (CH2) 7 vazba
72 H H H H OH (CH2) 10 vazba
73 H H H H Cl (CH2) 1 vazba
74 H z o H H OH (CH2) 7 vazba
7 5 H H H H F (CH2) 4 vazba
76 K H H H cf3 (CH?) „ vazba
77 F H H H F (CH2) 7 vazba
78 H H H H Cl CH2 para- -Ph*
79 H H H H OH CH2CH(OH) para- -Ph*
80 H H OCH3 H H (CH2) 6- CH (CH3) vazba
81 H H OH H H (CH2) 6- CH (CH3) vazba
82 H H OH H H (CH2) 6- CH (CH2CH2C h3) vazba
·* « · ··· » * 9>
* 9 • » »·»· ·* • · • » • · • 9 »* ·· • · * · ·* * • · · •99 *< · · ♦·
88 H H H H -C(0)NH(CH2)9-OH CH2 vazba
92 H H H H -0 (CH2) jCOOH (CH2) 5 vazba
93 H ch3 H H ch3 (CH2) 7 vazba
94 H ch3 H H ch3 (CH2) 5 vazba
95 H H no2 H H para-Ph vazba
96 H H nh2 H H para-Ph vazba
97 H ch3 H H ch3 (CH2)3- (C(CH3)2) vazba
98 H H H C(0) nh2 0- (CH2) 7COOH -(CHj)r vazba
* Pojem „para-Ph představuje para-fenylen.
Výhodnější sloučeniny zahrnují sloučeniny č. 5,
7, 11, 12, 43 a 47, výčet tím však není omezen.
Tento vynález také poskytuje prostředek obsahující zajedno sloučeninu dodávacího činidla obecného vzorce uvedeného výše včetně sloučenin vyloučených předpoklady a alespoň jedno aktivní činidlo. Tyto prostředky dodávají aktivní činidla do zvolených biologických systémů se zvýšenou nebo zlepšenou biologickou dostupností aktivního činidla ve srovnání s podáním aktivního činidla bez sloučeniny dodávacího činidla.
Jsou rovněž poskytnuty formy dávkové jednotky obsahující tyto prostředky. Dávková jednotka může být ve formě kapalné nebo tuhé, jako je tableta, kapsle nebo částice, včetně prášku nebo sáčku.
Dalším ztělesněním je způsob podávání aktivního činidla zvířeti, které aktivní činidlo potřebuje, podáním zvířeti prostředku obsahujícího zajedno sloučeniny dodávacího činidla obecného vzorce uvedeného výše včetně sloučenin vyloučených předpoklady a aktivní činidlo.
• · • · · · · · · • t ♦ · · * • · · r · · ··........ * *’ *'**
Výhodné cesty podání zahrnují orální, intratračníkovou a plicní cestu.
Ještě dalším ztělesněním je způsob léčení choroby nebo dosahování žádoucího fyziologického účinku u zvířete podáním prostředku podle předloženého vynálezu.
Ještě dalším ztělesněním je způsob přípravy prostředku podle předloženého vynálezu míšením alespoň jedné sloučeniny dodávacího činidla obecného vzorce uvedeného výše včetně sloučenin vyloučených předpoklady a alespoň jednoho aktivního činidla.
Detailní popis vynálezu
Sloučeniny dodávacího činidla
Pojmy „alkyl a „alkenyl jak se zde používají zahrnují lineární a rozvětvené alkylové respektive alkenylové substituenty.
Sloučeniny dodávacího činidla mohou být ve formě karboxylové kyseliny nebo její soli. Vhodné soli zahrnují organické a anorganické soli, například soli alkalických kovů, jako je sodík, draslík a lithium; soli kovů alkalických zemin, jako je hořčík, vápník nebo baryum; amonné soli; bázických aminokyselin, jako je lysin nebo arginin a organických aminů, jako je dimethylamin nebo pyridin, výčet tím však není omezen. Výhodně jsou solemi sodné soli. Tyto soli mohou být jedno- nebo vícemocnými solemi, jako jsou jednosodné soli a dvousodné soli.
Výhodnou dvousodnou solí je dvousodná sůl sloučeniny č. 47.
« 9 » Λ Λ »
9
Tyto soli mohou být také solváty, včetně ethanolických solvátů, a hydráty.
Soli sloučenin dodávacího činidla podle předloženého vynálezu mohou být připraveny způsoby známými v oboru. Například sodné soli mohou být připraveny rozpuštěním sloučeniny dodávacího činidla v ethanolu a přidáním vodného roztoku hydroxidu sodného.
Sloučenina dodávacího činidla může být čištěna rekrystalizací nebo frakcionací na jednom nebo více chromatografických nosičích, samostatně nebo spojených v tandemu. Vhodné systémy rekrystalizačních činidel zahrnují acetonitril, methanol a tetrahydrofuran, výčet tím však není omezen. Frakcionace se může provádět na vhodném chromatografickém nosiči, jako je oxid hlinitý, za použití směsí methanol/n-propanol jako mobilní fáze; chromatografie s reverzní fází za použití směsí kyselina trifluoroctová/acetonitril jako mobilní fáze a iontoměničové chromatografie za použití vody nebo příhodného pufru jako mobilní fáze. Pokud se provádí aniontoměničová chromatografie, použije se výhodně gradient chloridu sodného 0 až 500 mM.
Aktivní činidla
Aktivní činidla vhodná pro použití v předloženém vynálezu zahrnují biologicky aktivní činidla a chemicky aktivní činidla, včetně pesticidů, farmakologických činidel a terapeutických činidel, výčet tím však není omezen.
Například biologicky nebo chemicky aktivní činidla vhodná pro použití v předloženém vynálezu zahrnují • · • 9 9·· · · · • 9 9 9 ·· 9 · · 9 • 9 · 9 9 9 9 9 ···· ···· ·♦ · ·· ···» proteiny; polypeptidy; peptidy; hormony; polysacharidy a obzvláště směsi mukopolysacharidů; sacharidy, lipidy; malé polární organické molekuly (tj. polární organické molekuly, které mají molekulovou hmotnost 500 daltonů nebo nižší); další organické sloučeniny a obzvláště sloučeniny, které samy neprocházejí (nebo ze kterých prochází pouze část podané dávky) přes gastrointestinální sliznici a/nebo jsou citlivé na chemické štěpení kyselinami a enzymy v gastrointestinálním traktu nebo jejich kombinace, výčet tím však není omezen.
Další příklady zahrnují následující, včetně jejich syntetických, přírodních nebo rekombinantních zdrojů: růstové hormony, včetně lidských růstových hormonů (hGH), rekombinantní lidské růstové hormony (rhGH), hovězí růstové hormony a prasečí růstové hormony; růstové hormony uvolňující hormony; interferony včetně α, β a γ; interleukin-1; interleukin-2; inzulín včetně prasečího, hovězího, lidského a lidského rekombinantního, případně s ionty včetně zinečnatých, sodných, vápenatých a amonných; inzulínu podobný růstový faktor včetně IGF-1; heparin včetně nefrakcionovaného heparinu, heparinoidů, dermatanů, chondroitinů, heparinu s nízkou molekulovou hmotností, heparinu s velmi nízkou molekulovou hmotností a heparinu s mimořádně velmi nízkou molekulovou hmotností; kalcitonin včetně lososího, úhořího, prasečího a lidského; erythropoetin; atriální natriuretický faktor; antigeny; monoklonální protilátky; somatostatin; inhibitory proteázy; adrenokortikotropin, gonadotrpoin uvolňující hormon; oxytocin; luteinizační hormon uvolňující hormon; folikuly stimulující hormon; glukocerebrodidáza, trombopoetin; filgrastim; prostaglandiny; cyklosporin; vasopresin; sodná sůl kromolynu (kromoglykát sodný nebo dvoj sodný);
·· *· ·· ···· ·· ·· «··· 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 15 ........... ·· ···· vankomycin; desferrioxamin (DFO); bisfosfonáty včetně alendronátu, tiludronátu, etidronátu, klodronátu, pamidronátu, olpadronátu a inkadronátu; parathyroidní hormon (PTH) včetně jeho fragmentů; antimikrobiální látky včetně antibiotik, antibakteriálnich a antifungálních činidel; vitamíny; analoga, fragmenty, mimetika nebo polyethylenglykolem (PEG) modifikované deriváty těchto sloučenin nebo jakékoli jejich kombinace, výčet tím však není omezen. Neomezující příklady antibiotik zahrnují antibiotika proti grampozitivním bakteriím, bakteriocidní antibiotika, lipopeptidová a cyklická peptidová antibiotika, jako je daptomycin a jeho analoga.
Výhodným aktivním činidlem je daptomycin. Daptomycin popsal Baltz v Biotechnology of Antibiotics, 2. vydání, reaktor W. R. Strohl (New York: Marcel Dekker, lne.) 1997, str. 415 až 435. Daptomycin je cyklické lipopeptidové antibiotikum, které může být odvozeno z fermentace Streptomyces roseosporus. Daptomycin je členem antibiotik typu faktoru A-21978Co ze Streptomyces roseosporus a obsahuje n-dekanoylový vedlejší řetězec spojený prostřednictvím troj aminokyselinového řetězce na N-koncový tryptofan cyklického 10-aminokyselinového peptidu. V současnosti se vyvíjejí různé formulace s touto sloučeninou k léčení vážných infekcí způsobených bakteriemi včetně Staphylococus aureus resistetního na meticilin (MSRA) a enterokoků resistentních na vankomycin (VRE), výčet tím však není omezen. Způsoby syntézy daptomycinu jsou popsány v US patentech čísel Re. 32 333, Re. 32 455;
800 157, 4 885 243, Re. 32 310, Re. 32 311, 4 537 717,
482 487 a 4 524 135.
Dodávací systémy • · ·· ··
Prostředek podle tohoto vynálezu zahrnuje jednu nebo více sloučenin dodávacího činidla podle předloženého vynálezu včetně sloučenin vyloučených předpoklady a jedno nebo více aktivních činidel. Sloučenina dodávacího činidla a aktivní činidlo jsou typicky smíseny před podáním k vytvoření prostředku k podání.
Výhodné kombinace sloučenin dodávacího činidla a aktivních činidel zahrnují sloučeninu č. 12 a kalcitonin a obzvláště lososí kalcitonin; sloučeninu č. 12 a heparin; sloučeninu č. 5 a kalcitonin a obzvláště lososí kalcitonin; kteroukoli ze sloučenin č. 7, 11 a 43 a daptomycin; sloučeninu č. 7 a kromolyn a obzvláště sodnou sůl kromoiynu a sloučeninu č. 47 a lidský růstový hormon, výčet tím však není omezen.
Prostředky k podávání mohou být ve formě kapaliny. Rozpouštěcím prostředím může být voda (například pro lososí kalcitonin, parathyroidní hormon a erytropoetin), 25% vodný propylenglykol (například pro heparin) a fosfátový pufr (například pro rekombinantní lidský růstový hormon). Jiná dávkovači vehikula zahrnují polyethylenglykol. Dávkovači roztoky mohou být připraveny smísením roztoku sloučeniny dodávacího činidla s roztokem aktivního činidla těsně před podáním. Alternativně může být roztok sloučeniny dodávacího činidla (nebo aktivního činidla) smísen s tuhou formou aktivního činidla (nebo sloučeniny dodávacího činidla). Sloučenina dodávacího činidla a aktivní činidlo mohou také být smíseny jako suché prášky. Sloučenina dodávacího činidla a aktivní činidlo mohou být smíseny také během procesu výroby.
44 ·· ···· ·· ·· • 4 4 4 4 4 4 444
4444 4 4 4 4
Dávkovači roztoky mohou případně obsahovat přísady, jako jsou soli fosfátového pufru, kyselina citrónová, glykoly nebo další dispergační činidla. Do roztoku mohou být začleněny stabilizační přísady, výhodně v koncentraci od asi 0,1 do asi 20 % (hmotnost/objem).
Prostředky k podávání mohou alternativně být ve formě tuhé, jako je tableta, kapsle nebo částice, jako je prášek nebo sáček. Tuhé dávkové formy mohou být připraveny míšením tuhé formy sloučeniny s tuhou formou aktivního činidla. Alternativně muže být tuhá látka získána z roztoku sloučeniny a aktivního činidla způsoby známými v oboru, jako je lyofilizace, srážení, krystalizace a tuhá disperze.
Prostředky k podávání podle předloženého vynálezu mohou také zahrnovat jeden nebo více inhibitorů enzymu. Takové inhibitory enzymu zahrnují sloučeniny jako je aktinonin nebo epiaktinonin a jejich deriváty, výčet tím však není omezen. Další inhibitory enzymu zahrnují aprotinin (Trasyslol) a Browmanův-Birkův inhibitor, výčet tím však není omezen.
Množstvím aktivního činidla použitého v prostředku k podání podle předloženého vynálezu je množství účinné k uskutečnění účelu příslušného aktivního činidla pro cílovou indikaci. Množstvím aktivního činidla v prostředcích obvykle je farmakologicky, biologicky, terapeuticky nebo chemicky účinné množství. Množství však může být nižší než toto množství když se prostředek použije v jednotkové dávkové formě, protože jednotková dávková forma může obsahovat četné prostředky sloučeniny dodávacího činidla/aktivního činidla nebo může obsahovat dělené farmakologicky, biologicky, terapeuticky nebo chemicky
• 9 · 9 ···· • ·
9 9 99 9
účinné množství. Celkové účinné množství pak může být podáno v kumulativních dávkách obsahujících v součtu účinné množství aktivního činidla.
Celkové množství aktivního činidla, které má být použito se může stanovit způsoby známými odborníkovi v oboru. Protože prostředky podle tohoto vynálezu však mohou dodávat aktivní činidla účinněji než prostředky obsahující aktivní činidlo samotné, mohou být subjektu podána nižší množství biologicky nebo chemicky aktivních činidel než množství použitá v dosavadních jednotkových dávkových formách nebo systémech dodávání, přičemž se stále dosáhne stejných hladin v krvi a/nebo terapeutických účinků.
Zde popsané sloučeniny dodávacího činidla usnadňují dodávání biologicky a chemicky aktivních činidel, obzvláště v orálních, intranasálních, sublingválních, intraduodenálních, subkutánních, bukálních, intratračníkových, rektálních, vaginálních, slizničních, plicních, transdermálních, intradermálních, parenterálních, intravenózních, intramuskulárních a okulárních systémech, stejně jako při přechodu hematoencefalické bariéry.
Dávkové jednotkové formy mohou také zahrnovat kteroukoli nebo kombinaci pomocných látek, ředidel, desintegrancií, mazadel, plastikátorů, barviv, příchutí, činidel maskujících chuť, cukrů, sladidel, solí a dávkovačích vehikul včetně vody, 1,2-propandiolu, ethanolu, olivového oleje nebo jakékoli jejich kombinace, výčet tím však není omezen.
·· ····
Sloučeniny a prostředky podle tohoto vynálezu jsou užitečné pro podávání biologicky nebo chemicky aktivních činidel jakýmkoli živočichům včetně ptáků, jako jsou kuřata; savců, jako jsou hlodavci, krávy, prasata, psi, kočky, primáti a obzvláště člověk a hmyzu, výčet tím však není omezen.
Tento systém je obzvláště výhodný pro dodávání biologicky nebo chemicky aktivních činidel, která by jinak byla zničena nebo by byla snížena jejich aktivita v podmínkách přítomných předtím, než aktivní činidlo dosáhne cílovou zónu (tj . oblast, ve které aktivní činidlo prostředku pro dodávání má být uvolněno) a v těle živočicha, jemuž je podáno. Obzvláště jsou sloučeniny a prostředky podle tohoto vynálezu užitečné při orálním podání aktivních činidel, obzvláště činidel, která obvykle nelze orálně podat nebo činidel, u nichž je žádoucí zlepšené dodávání.
Prostředky obsahující sloučeniny a aktivní činidla jsou vhodná pro dodávání aktivních činidel do zvolených biologických systémů a ke zvýšení nebo zlepšení biologické dostupnosti aktivního činidla ve srovnání s podáním aktivního činidla bez dodávacího činidla. Dodávání může být zlepšeno dodáním většího množství aktivního činidla po určitou dobu nebo dodáváním aktivního činidla v určitý časový úsek (k navození rychlejšího nebo zpožděného dodání) nebo po určitou dobu (jako je prodloužené dodávání).
Dalším ztělesněním tohoto vynálezu je způsob léčení nebo prevence choroby nebo dosahování požadovaného fyziologického účinku, jako jsou účinky vyjmenované v dále
9··*
99 uvedené tabulce, u živočicha podáním prostředku podle předloženého vynálezu. Specifické indikace pro aktivní činidla lze nalézt v Physicians' Desk Reference (54. vydání, 2000, Medical Economics Company, lne., Montvale, NJ), která je zde zahrnuta formou odkazu. Aktivní činidla vyjmenovaná v tabulce uvedené dále zahrnují svá analoga, fragmenty, mimetika a deriváty modifikované polyethylenglykolem.
Aktivní činidlo Choroba a fyziologický účinek
Růstové hormony včetně lidských růstových hormonů (hGH), rekombinantních lidských růstových hormonů (rhGH), hovězích růstových hormonů a prasečích růstových hormonů; růstový hormon uvolňující hormony. Poruchy růstu
Interferony včetně a, Pa γ· Virová infekce včetně chronické rakoviny a roztroušené sklerózy
Interleukin-1, interleukin-2. Virová infekce, rakovina
Inzulín včetně prasečího, hovězího, lidského a lidského rekombinantního, případně obsahující opačně nabité ionty zahrnující zinečnaté, vápenaté a amoniové; růstový faktor podobný inzulínu včetně IGF-1. Diabetes
·· ··· · ·· 99 » · · <
► · « ··«· ···♦
Aktivní činidlo Choroba a fyziologický účinek
Heparin včetně nefrakcio- novaného heparinu, hepari- noidů, dermatanů, chondro- itinů, nízkomolekulárního heparinu, heparinu s velmi nízkou molekulovou hmotností a heparinu s mimořádně velmi nízkou molekulovou hmotností Trombóza; prevence srážení krve
Kalcitonin včetně lososího, úhořího, prasečího a lidského. Osteoporóza; choroby kosti
Erytropoetin Anémie
Atriální natriuretický faktor Vasodilatace
Antigeny Infekce
Monoklonální protilátky K prevenci odmítnutí štěpu; rakovina
Somatostatin Krvácející vřed, erosivní gastritida
Inhibitory proteázy AIDS
Adrenokortikotropin Vysoký cholesterol (ke snížení cholesterolu)
Gonadotropin uvolňující hormon Ovulační dysfunkce (ke stimulaci ovulace)
Oxytocin Poruchy porodu (ke stimulaci kontrakcí)
Luteinizační hormon uvolňující hormon; folikuly stimulující hormon Reguluje reprodukční fuunkce
44
4 4 4 4 4
4 4 4
4 4 4 «4444444 «4
Aktivní činidlo Choroba a fyziologický účinek
Glukocerebrosidáza Gaucherova choroba (k metabolizaci lipoproteinu)
Trombopoetin Trombocytopenie
Filgrastim Redukuje infekci u pacientů léčených chemoterapii
Prostaglandiny Hypertneze
Cyklosporin Odmítnutí transplantátu
Vasopresin Noční pomočování; antidiuretikům
Sodná sůl kromolynu (kromoglykát sodný nebo dvoj sodný); vankomycin Astma; alergie
Desferoxamin (DFO) Přetížení železem
Parathyroidní hormon (PTH) včetně fragmentů. Osteoporóza; chroroby kosti
Antimikrobiální látky včetně antibiotik, antibakteríálních a antifungálních činidel; grampozitivně působící, bakteriocidní, lipopeptidová a cyklická peptidová antibiotika zahrnující daptomycin a jeho analogy Infekce včetně grampozitivní bakteriální infekce
Vitamíny Nedostatek vitamínů
Bisfosfonáty včetně alendronátu, tiludronátu, etidronátu, klodronátu, pamidronátu, olpadronátu a inkadronátu. Osteoporóza a Pagetova choroba; inhibuje osteoklasty
9999 ·· »· • · ♦ · • · • · • · • ·«· ···· • · • · · • · · ·· ·
99
9 9 9 • 9 ·
9 9
9 9
9 9 9 9 9
Například jedním ztělesněním předloženého vynálezu je způsob léčení pacienta trpícího diabetem nebo majícího k němu sklon podáváním inzulínu a alespoň jedné ze sloučenin dodávacího činidla podle předloženého vynálezu.
Po podání se aktivní činidlo přítomné v prostředku nebo jednotkové dávkové formě dostane do oběhu. Biologická dostupnost činidla se snadno určí měřením známé farmakologické aktivity v krvi, např. prodloužení času srážení krve zapříčiněné heparinem nebo snížení hladin vápníku v oběhu navozené kalcitoninem. Alternativně mohou být hladiny samotného činidla v oběhu měřeny přímo.
Příklady provedení vynálezu
Následující příklady vynález ilustrují aniž by jej omezeovaly. Všechny podíl jsou uvedeny hmotnostně pokud není vyznačeno jinak.
Analýzy protonové nukleární magnetické rezonance (1H NMR) sloučenin uvedených dále se provádějí na spektrometru Bruker 300 MHz za použití dimethylsulfoxidu (DMSO-d6) jako rozpouštědla pokud není vyznačeno jinak.
Příklad 1
Příprava sloučenin
Příprava sloučeniny č. 1
Hydroxid draselný (8,82 g, 157,2 mmol) se drtí »ι ··« · ·· ** 4 4
v třecí misce na prášek, poté se přidá do 125ml Erlenmeyer banky obsahující 60 ml dimethylsulfoxidu. Výsledná směs se míchá 5 minut, poté se přidá 5,35 g (39,3 mmol) 2'-hydroxyacetofenonu. Směs se míchá dalších 15 minut, poté se přidá 5,39 g (25,1 mmol) 4-(brommethyl)benzoové kyseliny. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti asi 4 hodiny.
Ke hnědé reakční směsi se přidá destilovaná voda (200 ml) a výsledný roztok se ochladí na teplotu 0° C. Přidává se koncentrovaná vodná kyselina chlorovodíková až je pH roztoku okolo 5. Výsledná tuhá látka se zachytí filtrací a rekrystalizuje se ze směsi 50:50 (ethanol:voda) k poskytnutí 3,59 g (52,9 %) světle hnědého prášku.
Teplota tání: 170,5 až 172,0 °C.
Elementární rozbor: % C: 71,10 (vypočítáno), 70,81 (nalezeno); % H: 5,22 (vypočítáno), 5,25 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (dg-DMSO) : δ 13,0, s, 1H; 8,00 - 7,97, d,
2H; 7, 64 - 7,59, m 3H; 7, 55 - 7,49, dt, 1H; 7,25 - 7,22, d, 1H; 7,07 - 7,01, dt, 1H; 5,33, s, 2H; 2,54, s, 3H.
Sloučeniny č. 63, 62 a 64 se připraví tímto způsobem za použití příhodných výchozích materiálů s příhodnými výchozími materiály.
Sloučenina č. 63
Teplota tání: 91 až 94 °C.
Elementární rozbor: % C 69,62 (vypočítáno), 69,91 (nalezeno); % H: 8,53 (vypočítáno), 8,28 (nalezeno);
Analýza NMR: (dg-DMSO) : δ 12,0, široký s, 1H; 7,9, d,
2H; 7,0, d, 2H; 4,0, t, 2H; 3,0, q, 2H; 2,2, t, 2H;
δ 1,7, p, 2H; 1,5, p, 2H; 1,35, m, 6H; 1,05, t, 3H.
»« ·· • 4 4 4
4 • 4 ·
• 444 «444
4··4 *4 • 4 4 4
4 ·
4 4 •4 4444
Sloučenina č. 62
Teplota tání: 125 až 129°C.
Elementární rozbor: % C: 69,09 (vypočítáno), 68,91 (nalezeno); % H: 7,91 (vypočítáno), 8,04 (nalezeno); Analýza XH NMR: (dg-DMSO) : δ 12,0, široký s, 1H; 7,9, d,
2H; 7,02, d, 2H; 4,01, t, 2H; 2,52, s, 3H; 2,23, t, 2H;
l, 7, p, 2H; 1,5, p, 2H; 1,38, m, 6H.
Sloučenina č. 64
Teplota tání: 62 až 65°C.
Elementární rozbor: % C: 69,06 (vypočítáno), 69,32 (nalezeno); % H: 7,91 (vypočítáno), 7,97 (nalezeno); Analýza XH NMR: (d6-DMSO) δ 12,0, s, 1H; 7,5, d, 1H; 7,9, m, 2H; 7,19, dd, 1H; 4,02, t, 2H; 2,55, s, 3H; 2,2, t, 2H; 1,7, p, 2H; 1,5, p, 2H; 1,3, m, 6H.
Sloučeniny č. 66 a 52 se také připraví způsobem použitým k přípravě sloučeniny č. 1, přičemž 2'-hydroxyacetofenon se nahradí sloučeninou uvedenou v závorkách: 66 (fenol) a 52 (salicylamid).
Sloučenina č. 66
Teplota tání: 219 až 221°C.
Elementární rozbor: % C: 73,67 (vypočítáno), 73,70 (nalezeno); % H:5,30 (vypočítáno), 5,22 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (d6-DMSO): δ 13,0, s, 1H; 7,97, d, 2H;
7,57, d, 2H; 7,30, m, 2H; 7,01, m, 2H; 6,95, m, 1H; 5,19, s, 2H.
Sloučenina č. 52 * · • ·
9»·· «*.·
Teplota tání: 242 až 293 °C.
Elementární rozbor: % C 66,08 (vypočítáno), 65,74 (nalezeno); % H:4,86 (vypočítáno), 4,79 (nalezeno);
%N 5,14 (vypočítáno), 4,78 (nalezeno).
Analýza ΧΗ NMR:' (d6-DMSO): δ 13,0, s, 1H; 7,97, d, 2H;
7,75, dd, 1H; 7,64, široký s, 1H; 7,62, d, 2H; 7,56, široký s, 1H; 7,44, dt, 1H; 7,17, d, 1H; 7,03, t, 1H; 5,35, s, 2H.
Příprava sloučeniny č. 2
Hydroxid draselný (9,88 g, 176 mmol) se mele v třecí misce na prášek, poté se přidá do 125ml Erlenmeyer baňky obsahující 80 ml dimethylsulfoxidu a 5,54 g (50,3 mmol) katecholu. Výsledná směs se míchá 45 minut, přičemž se lehce zahřívá na teplotu 35 °C. Tmavá směs se zpracuje s roztokem 6,94 g (40,7 mmol) 4-(chlormethyl)benzoové kyseliny a 30 ml dimethylsulfoxidu. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti asi 17 hodin. Okyselení 4% vodnou kyselinou chlorovodíkovou navodí vývin tuhé látky. Tuhá látka se zachytí filtrací. Rekrystalizace ze směsi ethylacetát/methyl-terc-butylether/hexany a blesková chromatografie za použití 70% hexany/ethyi-acetát/1% kyselina octová jako eluentu poskytne sloučeninu 2 jako bílou tuhou látku (1,10 g (11% výtěžek)).
Teplota tání: 196 až 198 °C.
Elementární rozbor: % C: 68,85 (vypočítáno), 68,60 (nalezeno); % H: 4,95 (vypočítáno), 4,82 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (d6-DMSO): δ 12,96, s, 1H; 9,03, s, 1H;
7,97 d, 2H; 7,61, d, 2H; 6,95, dd, 1H; 6,83, dd, 1H; 6,78, td, 1H; 6,70, dt, 1H; 5,18, s, 2H.
• · · · · · • ·
99 ···· ·· · ·
Sloučeniny č. 79 a 59 se připraví stejným způsobem jako sloučenina č. 2.
Sloučenina č. 79
Teplota tání: 176 až 178 °C.
Elementární rozbor: % C 65,69 (vypočítáno), 65,53 (nalezeno); % H: 5,15 (vypočítáno), 5,00 (nalezeno); Analýza NMR: (d6-DMSO) : δ 13,0, široký s, 1H; 8,7, široký s, 1H; 7,9, d, 2H; 7,6, d, 2H; 6,9, d, 1H;, 6,75, m, 2H; 6,7, m, 1H; 5,9, široký s, 1H; 5,0, m, 1H; 4,1, dd, 1H 3,85, dd, 1H.
Sloučenina č. 59
Teplota tání: 164 až 167 °C.
Elementární rozbor: % C 70,31 (vypočítáno), 70,18 (nalezeno); % H: 4,72 (vypočítáno), 4,83 (nalezeno); Analýza 1H NMR: (dg-DMSO) : δ 13,0, široký s, 1H; 40,5, s, 1H; 8,7, široký s, 1H; 7,9, d, 2H; 7,6, d, 2H; 6,9, d, 1H; 6,75, m, 2H; 6,7, m, 1H; 5,9, široký s, 1H; 5,0, m, 1H; 4,1, dd, 1H; 3,85, dd, 1H.
Příprava sloučeniny č. 3
Sloučenina č. 3 se zakoupí u Lancaster Synthesis lne. (Windham, NH).
Příprava sloučeniny č. 6
Baňka s kulatým dnem o objemu 200 ml se naplní 11,2 g (9 ekv.) práškového hydroxidu draselného a
100 ml dimethylsulfoxidu. Tato směs se míchá při teplotě • 9
9 « 9 • 9 9 9 9 9 9 « • 9 9 9 9 9 9*9 P
9 999 999
.........* ’ ** *··· místnosti 5 minut. Přidá se 2-benzyloxyfenol (10 g, 1 ekv.) následovaný ihned přidáním ethyl-(7-bromheptanoatu) (19,6 ml, 1,5 ekv.). Výsledný roztok se míchá při teplotě místnosti 1 hodinu.
Reakční směs se vlije do 200 ml destilované vody a extrahuje se 5 x 100 ml methylenchloridu. Spojené organické vrstvy se poté promyjí vodou a roztokem chloridu sodného (vždy 20 ml) a odpaří. Tato kapalina se poté rozpustí ve 125 ml vodného methanolu. Přidá se tuhý hydroxid sodný (3 ekv., 3,7 g) a výsledný roztok se zahřívá na teplotu 80 °C 2 hodiny. Směs se ochladí na teplotu místnosti a methanol se odpaří. Vodná vrstva se extrahuje 150 ml etheru, poté se okyselí na hodnotu pH přibližně 2 pomocí koncentrované vodné kyseliny chlorovodíkové. Vodná vrstva se extrahuje ethyl-acetátem (2 x 300 ml), zfiltruje a vysuší k poskytnutí 19 g (2-benzyloxyfenyl)-7-oxyheptanové kyseliny.
Připraví se suspenze (2-benzyloxyfenyl)-7-oxyheptanové kyseliny (19 g, 58 mmol), 150 ml ethanolu a 150 mg palladiové černi a vloží do Parrova autoklávu. Tlak v reakční nádobě se zvýší na 689,4 kPa pomocí vodíku. Tato směs se 17 hodin míchá při teplotě 50 °C. Palladium se odfiltruje a filtrát se odpaří k poskytnutí produktu jako světle žluté tuhé látky. Surový materiál se vyčistí chromatografií na silikagelu za použití 30 až 60% směsi ethyl-acetát/hexany jako eluentu k poskytnutí 5 g (42 %) (2-hydroxyfenyl)-7-oxyheptanové kyseliny jako bělavé tuhé látky.
Teplota tání: 47 až 50 °C.
f) • « · * • · * ♦ · * • · · • · · · · ·
Elementární rozbor: % C: 65,53 (vypočítáno), 65,12 (nalezeno); % H: 7,61 (vypočítáno), 7,82 (nalezeno).
EI-MS: 238 (vypočítáno), 238(nalezeno).
Analýza NMR: (d6-DMSO): 8 12,0, s, 1H; 8,8, s, 1H;
6, 89-6, 86, m, 1H; 6, 80-6,87, m, 3 H; 3,94, t, 2H; 2,21/ t, 2H; 1,72-1,67, m, 2H; 1,55-1,25 m, 6H.
Příprava sloučeniny č. 7
Baňka s kulatým dnem o obsahu 200 ml se naplní 22,9 g (3 ekv.) čerstvě drceného hydroxidu sodného a 100 ml dimethylsulfoxidu. Tato směs se míchá při teplotě 25 °C 5 minut. Přidá se katechol (15 g, 1 ekv.) bezprostředně následovaný ethyl-8-bromoktanoátem (34,2 g, 1 ekv.). Tento tmavě hnědý roztok se poté míchá při teplotě 25 °C 2 hodiny.
Přidá se destilovaná voda (100 ml) a tento roztok se zahřívá na teplotu 85 °C 2 hodiny. Směs se ochladí, okyselí na hodnotu pH asi 2 koncentrovanou vodnou kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje ethyl-acetátem (300 ml x 2). Spojené organické vrstvy se vysuší síranem hořečnatým, zfiltrují a rozpouštědlo se odpaří. Surový materiál se vyčistí chromatografií na silikagelu za použití 30 až 60% směsi ethyl-acetát/hexany jako eluentu. Požadovaný produkt se zachytí a vysuší k poskytnutí 6,6 g (19 %) 8-(2-hydroxyfenoxy)oktanové kyseliny jako bělavé tuhé látky.
Teplota tání: 60 až 64 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,65 (vypočítáno), 66,65 (nalezeno); % H: 7,99 (vypočítáno), 8,10 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (ds-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 8,8, s, 1H;
9 9 9 9 9 9 99· 99 99
9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 ·
99999 9 9 9 ·
9 999 999 «999 9999 99 9 99 9999
6, 90-6, 86, m, 1H; 6,80-6, 76, m, 3 H; 3,92, t, 2H; 2,21, t, 2H; 1,75-1,66, m, 2H; 1,56-1,29 m, 8H.
Sloučeniny č. 4, 35, 38, 92 a 98 se také připraví tímto způsobem za použití příslušných výchozích materiálů.
Sloučenina č. 4
Teplota tání: 69 až 66 °C.
Elementární rozbor. % C: 67,22 (vypočítáno), 61,32 (nalezeno); % H:6,16(vypočítáno), 6,27 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (d6-DMSO): δ 12,1, s, 1H; 8,75, s, 1H; 6,90-6,87, m, 1H; 6,81-6,68, m, 3H; 3,98, t, 2H; 2,51, t, 2H; 1,98-1,89, m, 2H.
Sloučenina č. 35
Teplota tání: 77 až 80 °C.
Elementární rozbor: % C: 67,65(vypočítáno),
67,90(nalezeno) ; % H: 8,33(vypočítáno), 8,37 (nalezeno). Analýza NMR: (d6-DMSO): δ 11,9, s, 1H; 6,96-6,85, m, 4H; 3,99, t, 2H; 3,79, s, 3H; 2,23, t, 2H; 1,72-1,65, m, 2H; 1,53-1,98, m, 2H; 1,39-1,29, m, 6H. Sloučenina č. 38
Teplota tání: 75 až 76 °C.
Elementární rozbor: % C: 65,29(vypočítáno),
65,92(nalezeno); % H: 7,53 (vypočítáno), 7,97 (nalezeno). Analýza XH NMR: (d6-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 11,9, s, 1H;
7,35, t, 1H, 6,56, dd, 2H; 4,04, t, 2H; 2,55, s, 3H; 2,27, t, 2H; 1,79-1,70, m, 2H; 1,55-1,98, m, 2H; 1,45-1,37, m,
2H; 1,32-1,14, m, 9H.
• 44 ·
Sloučenina č. 92
Teplota tání: 107 až 108 °C.
Elementární rozbor: % C: 63,89 (vypočítáno), 63,98 (nalezeno); % H: 7,74 (vypočítáno), 7,72 (nalezeno).
Analýza 1H NMR: (dg-DMSO): δ 12,0, široký s, 2H; 6,95, m,
2H, 6,85, m, 2H; 3,9, t, 4H; 3,0, q, 2H; 2,2, t, 4H; 1,7, p, 4H; 1,55, p, 4H; 1,4, p, 4H.
Sloučenina č. 98
Teplota tání: 75 až 77 °C.
Elementární rozbor: % C: 63,16 (vypočítáno), 62,81 (nalezeno); % H: 8,01 (vypočítáno), 8,17 (nalezeno).
Analýza NMR: (d6-DMSO): δ 12,0, s, 2H; 7,60, s, 1H,
7,45, s, 1H; 7,03-7,21, m, 3H; 3,9, m, 4H; 2,14, t, 4H; 1,61, m, 4H; 1,22-1,55, m, 16H.
Alternativní příprava sloučeniny č. 7
Erlenmeyerova baňka o objemu 500 ml se naplní 28 g (4 ekv.) práškového hydroxidu draselného a 400 ml dimethylsulfoxidu. Tato směs se míchá při teplotě místnosti 5 minut. Přidá se 2-benzyloxyfenol (25 g, 1 ekv.) a následuje ihned přidání ethyl-8-bromoktanoátu (37,6 g, 1,2 ekv.). Výsledný roztok se míchá při teplotě místnosti 2 hodiny.
Reakční směs se vlije do 200 ml destilované vody a zahřívá se na teplotu 80 °C 3 hodiny. Tato směs se poté okyselí koncentrovanou vodnou kyselinou chlorovodíkovou na pH přibližně 2. Vysráží se bělavá tuhá látka.
• · »9 * · 4 9*9
Tato tuhá látka se isoluje vakuovou filtrací a nechá se přes noc vysušit při teplotě místnosti ve vakuu. Tento materiál se poté esterifikuje reakcí surové kyseliny s 1 litrem methanolu a 5 ml kyseliny sírové a následným zahříváním na teplotu 80 °C přes noc. Směs se ochladí a extrahuje ethyl-acetátem 3 x 400 ml, vysuší síranem hořečnatým, zfiltruje a odpaří k poskytnutí methylesteru v kvantitativním výtěžku.
Surový ester se poté rozpustí ve 150 ml ethanolu a smísí s 1 g palladia aktivním uhlí. Tato směs se vloží do Parrova autoklávu. Tlak v reakční nádobě se poté zvýší na 1378,8 kPa pomocí vodíku. Tato heterogenní směs se míchá při teplotě 50 °C 18 hodin. Palladium se odfiltruje a filtrát se odpaří k poskytnutí debenzylovaného produktu.
Methylester se zmýdelní za použití 10 g hydroxidu sodného, 400 ml methanolu a 50 ml vody. Roztok se zahřívá na teplotu 80 °C 1 hodinu a poté se nechá míchat při teplotě místnosti přes noc. Methanol se odpaří. Přidá se dalších 100 ml vody a vodná vrstva se okyselí koncentrovanou vodnou kyselinou chlorovodíkovou na hodnotu pH 2. Vodná fáze se poté extrahuje ethyl-acetátem, 3 x 300 ml, vysuší a odpaří k poskytnutí cílového materiálu. Surový materiál se poté vyčistí chromatografií na silikagelu za použití směsi ethyl-acetát/hexany 30 až 60%, jako eluentu, k poskytnutí 22,24 g (71 %) 8-(2-hydroxyfenoxy)oktanové kyseliny jako bělavé tuhé látky.
Teplota tání: 65 až 68 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,65 (vypočítáno), 66,98 (nalezeno); %H: 7,99 (vypočítáno) 8,22 (nalezeno).
• ·· ···· ·· · * • · · · · · · ♦ • · e 9 · » · • · ·· ····
Analýza NMR: (d6-DMSO) : δ 12,0, s, 1H; 8,8, s, 1H; 6,90 6,87, m, 1H; 6, 80-6, 67, m, 3H; 3,94, t, 2H; 2,23, t, 2H; 1,73, p, 2H; 1,53-1,29, m, 8H.
způsobem se také připraví tímto výchozích materiálů.
Sloučeniny č. 5, 8 a za použití příslušných
Sloučenina č. 5
Teplota tání: 51 až 53 °C.
Elementární rozbor: % C: 64,27 (vypočítáno), 64,26 (nalezeno); % H: 7,19 (vypočítáno), 7,00 (nalezeno).
Analýza 1H NMR: (de-DMSO) : δ 12, 0, široký s, 1H; 8,80,
široký s, 1H; 6, 90-6,85, m, 1H; 6,80-6, 68, m , 3H; 3,99, t
2H; 2,26, t, 2H, 1,76-1,67, m, 2H, 1,61-1,52 ,, m, 2H; 1,48
1,40, m, 2H.
Sloučenina č. 8
Teplota tání: 54 až 57 °C.
Elementární rozbor: % C: 68, 55 (vypočítáno), 68,78
(nalezeno); % H: 8,63 (vypočítáno), 8,43 (nalezeno). Analýza XH NMR: (d6-DMSO) : δ 8,8, široký s, 1H; 6, 92-6, 8 9, m, 1H; 6,82-6,71, m, 3H; 3,96, t, 2H; 2,24, t, 2H, 1,751,68, m, 2H, 1,54-1,39, m, 4H; 1,30, široký s, 8H.
Sloučenina č. 72
Teplota tání: 58 až 60 °C.
Elementární rozbor: % C: 69,36 (vypočítáno), 69,12 (nalezeno); % H: 8,90 (vypočítáno), 8,89 (nalezeno).
·> · · · ♦ ····*· · · ♦ t » • * · # 4 · · · • · ··· · · · <· · · · ···· ·· * ·· ···«
Analýza 3Η NMR: (dg-DMSO): δ 6, 88-6, 85, m, 1H; 6, 80-6,66, m, 3H; 3,93, t, 2H; 2,20, t, 2H, 1,74-1,65, m, 2H, 1,501,35, m, 4H; 1,25, široký s, 10H.
Příprava sloučeniny č. 12.
Hydroxid draselný (10,72 g, 191,1 mmol) se drtí v třecí misce až je práškový, poté se vloží do 250ml baňky s kulatým dnem obsahující 80 ml dimethylsulfoxidu. Výsledná směs se míchá 5 minut, poté se přidá 6,47 g (47,5 mmol) 2-hydroxyacetofenonu, ihned následuje 24,04 g (95,7 mmol) ethyl-8-bromoktanoátu. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 1 hodinu. Oranžová reakční směs se vlije do 200 ml destilované vody, poté,se 5-krát extrahuje 300 ml (celkem) methylenchloridu. Organické vrstvy se promyjí dvěma 50ml díly vody, poté odpaří k poskytnutí světle žluté kapaliny.
Kapalina se rozpustí ve 25 ml dioxanu. Přidá se vodný roztok hydroxidu sodného (1N, 20 ml) a výsledná kapalina se míchá a zahřívá (65 °C) 2 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu 0 °C, okyselí na pH 1 koncentrovanou vodnou kyselinou chlorovodíkovou, poté extrahuje dvěma lOOml díly ethyl-acetátu. Organická vrstva se odpaří k poskytnutí světle žlutého oleje. Olej se krystaluje směsí methanol:voda (1:1), poté rekrystaluje jednou směsí methanol:voda (1:1) a jednou směsí methylenchlorid:hexany (1:4) k poskytnutí 5,70 g (43,1 %) světle žluté až bělavé tuhé látky.
Teplota tání: 71,5 až 73,5 °C.
Elementární rozbor: % C: 69,04 (vypočítáno), 68,77 (nalezeno); % H: 7,97 (vypočítáno), 8,04 (nalezeno).
··· · »··♦ ♦ - ♦ · ♦··» ♦ · · * * · » » • · · · · · · · «··· ···· 99 * ** *··* 35
Analýza JH NMR: (d6-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 7,57, dd, 1H;
7,52, dt, 1H; 7,15, d, 1H; 7,00, dt, 1H, 4,09, t, 2H, 2,52, s, 3H; 2,20, t, 2H; 1,78, p, 2H; 1,46, m, 4H; 1,32, m, 4H.
Sloučeniny č. 9, 10, 11 a 71 se také připraví tímto způsobem za použití příslušných výchozích materiálů.
Sloučenina č. 9
Teplota tání: 94,5 až 94,9 °C.
Elementární rozbor: % C: 64,85 (vypočítáno), 64,81 (nalezeno); % H: 6,35 (vypočítáno), 6,30 (nalezeno).
*Η NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 7,58, dd, 1H;
7,5, dt, 1H; 7,15, dd, 1H; 7,0, dt, 1H; 4,15, t, 2H; 2,55, s, 3H; 2,45, t, 2H; 2,0, p, 2H.
Sloučenina č. 10
Teplota tání: 76 až 77 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,09 (vypočítáno), 65,83 (nalezeno); % H: 6,83 (vypočítáno), 6,76 (nalezeno).
2Η NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ 7,58, dd, 1H; 7,5, dt, 1H;
7,15, dd, 1H; 7,0, dt, 1H; 4,1, t, 2H; 2,55, s, 3H; 2,3, t, 2H; 1,8, dp, 2H; 1,6, dp, 2H.
Sloučenina č. 11
Teplota tání: 44 až 44 °C.
Elementární rozbor: % C: 67,18 (vypočítáno), 67,32
(nalezeno); % H: 7,25 (vypočítáno) >, 7 ,26 (nalezeno).
3H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 7,58, dd, 1H;
7,5, dt, 1H; 7,15, d, 1H; 7,0, t, 1H; 4,1 , t, 2H; 2,55
3H; 2,25, t, 2H; 1,8, p, 2H; 1,6, Pz 2H; 1,95, p, 2H.
« ♦ • · · · · «4 » * · · · · ··· ·····♦·· ·· « 4· ····
Sloučenina č. 71
Teplota tání: 61 až 63 °C.
Elementární rozbor: % C: 61,76 (vypočítáno), 61,69 (nalezeno); % H: 6,66 (vypočítáno), 6,59 (nalezeno). Analýza NMR: (dg-DMSO) : δ 12,0, široký s, 1H; 7,13-7,30, m, 2H; 6,99-7,02, m, 1H; 3,98-4,02, t, 2H; 2,17-2,22, t,
2H; 1,65-1,72, m, 2H; 1,28-1,52, m, 8H.
Následující sloučeniny se také připraví tímto způsobem, přičemž se 2'-hydroxyacetofenon nahradí sloučeninou uvedenou v závorkách: 18 (2-propenylfenol), 20 (2-nitrofenol), 24 (2-acetamidofenol), 26 až 29 (2-hydroxy propiofenon), 32 (methyl-salicylát) a 39 (6-methoxy-2-hydroxyacetofenon). Sloučeniny 18 a 20 se dále čistí sloupcovou chromatografií za použití 50% ethyl-acetátu v hexanech jako eluentu.
Sloučenina 18
Teplota tání: 79 až 81 °C.
Elementární rozbor: % C: 73,88 (vypočítáno), 73,85 (nalezeno); % H: 8,75 (vypočítáno), 8,77 (nalezeno).
Analýza ΧΗ NMR: (dg-DMSO): δ 12,0 , s, 1H; 7,38-7,41 , dd,
1H; 7,13-7 ,18, m, 1H; 6,93-6, 95, d, 1H; 6,84-6,89, t, 1H;
6,59-6,65, dd, 1H; 6,21-6,18, m, 1H; 3,94-3,98, t, 2H;
2,18-2,23, t, 2H; 1,83-1,86, dd, 2H; 1,69-1,78, m, 2H;
1,31-1,53, m, 9H.
Sloučenina č. 20:
Teplota tání: 81 až 88°C.
• 4 44 4· ···» 44 4*
44 « 4 4 4 4 44
4 444 4 4 ·
4444 4444 44 * 4* 44··
Elementární rozbor: % C: 59,78 (vypočítáno), 59,66 (nalezeno); % H: 6,81 (vypočítáno), 6,96 (nalezeno); % N: 4,98 (vypočítáno), 4,69 (nalezeno);
Analýza ΧΗ NMR : (d, s-DMSO): δ 12, 0, s, 1H; 7,82-7, 85, dd,
1H; 7,60-7,65, m, 1H; 7,33-7 , 36 , dd, 1H; 7,06-7, 11, m, 1H;
4,12-4,16, t, 2H; 2,15-2,27, t, 2H; 1,66-1,75, m ., 2H; 1,28
1,54, m, 8H.
Sloučenina č. 24
Teplota tání: 110 až 111 °C.
Elementární ro zboř : % C: 65, 51 (vypočítáno), 65, 97
(nalezeno); % H: 7,90 (vypočítáno), 7,73 (nalezeno); % N: 4,77 (vypočítáno), 4,65 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (300 MHz, d6-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 8,9, s, 1H; 7,8, d, 1H; 7,08-6,99, m, 2H; 6,89-6,84, m, 1H; 3,99, t, 2H; 2,20, t, 2H; 2,07, s, 3H; 1,75, p, 2H; 1,56-1,30, m, 8H.
Sloučenina č. 26
Teplota tání: 70 až 71,5 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,09 (vypočítáno), 65,92 (nalezeno); % H: 6,83 (vypočítáno), 6,67 (nalezeno).
Analýza 2H NMR: (d6-DMSO): δ 12,15, s, 1H; 7,56-7,45, m,
2H; 7,12, d, 1H; 7,00, t, 1H; 4,10, t, 2H; 2,92, q, 2H; 2,42, t, 2H; 2,00, p, 2H; 1,05, t, 3H.
Sloučenina č. 27
Teplota tání: 68 až 69,5 °C.
Elementární rozbor: % C: 68,16 (vypočítáno), 68,40 (nalezeno); % H: 7,63 (vypočítáno), 7,60 (nalezeno).
* 9
999· ·· ·* · · · «··« • 9 9 9 9 9 9 * • · 9 9 9 9 9 · • 999 9999 9 9 9 9 9 99· ·
Analýza *Η NMR: (d6-DMSO): δ 12,0, s, 1Η; 7,54-7,46, m, 2H 7,13, d, 1H; 6,99, t, 1H; 4,08, t, 2H; 2,93, q, 2H; 2,24, t, 2H; 1,77, p, 2H; 1,47, m, 2H; 1,05, t, 3H.
Sloučenina č. 28
Teplota tání: 85 až 86 °C.
Elementární rozbor: % C: 69,84 (vypočítáno), 69,59 (nalezeno); % H: 8,27 (vypočítáno), 7,98 (nalezeno). Analýza ΧΗ NMR: (d6-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 7,54-7,46, m, 2H
7,13, d, 1H; 6,99, t, 1H; 4,08, t, 2H; 2,93, q, 2H; 2,20,
t, 2H; 1,74, p, 2H; 1, 52-1,30, m, 8H; 1,05, t, 3H.
Sloučenina č . 29
Teplota tání : 67 až 69 °C.
Elementární rozbor: % C: 71,22 (vypočítáno), 71 , 06
(nalezeno); % H: 8,81 (vypočítáno), 9,02 (nalezeno). Analýza NMR: (d6-DMSO) : 12,0, s, 1H; 7,54-7,45 m, 2H;
7,12, d, 1H; 6,99, t, 1H; 4 ,06, t, 2H; 2,93, q, 2H; 2,18,
t, 2H; 1,76, p, 2H; 1, 51-1, 36, m, 12H; 1,05, t, 3H.
Sloučenina č . 32
Teplota tání : 89 až 92 °C.
Elementární rozbor: % C: 64 ,27 (vypočítáno), 63, , 96
(nalezeno); % H: 7,19 (vypočítáno), 7,40 (nalezeno) Analýza NMR: (d6-DMSO) : δ 12,2, široký s, 2H; 7,59 dd, 1H; 7,95, dt, 1H; 7,09, d, 1H; 6,97, t, 1H; 4,00, t, 2H; 2,20, t, 2H; 1,70, p, 2H; 1,54-1,27, m, 8H.
Sloučenina č. 39 ·
9 9 9 · 999
9999 9999 99 9 Μ 9999
Teplota tání: 69 až 70,5 °C.
Elementární rozbor: % C: 65,35 (vypočítáno), 65,39 (nalezeno); % H: 7,89 (vypočítáno), 7,80 (nalezeno). Analýza ΧΗ NMR: (ds-DMSO): δ 7,27, t, 1H; 6,67, d, 2H;
3,95, t, 2H; 3,73, s, 3H; 2,34, s, 3H; 2,18, t, 2H; 1,63, p, 2H; 1,49, p, 2H; 1,40-1,27, m, 6H.
Sloučeniny č. 19, 21, 22 a 23 se také připraví tímto způsobem s tím rozdílem, že se použije ekvivalent příslušného alkylačního činidla a dva ekvivalenty hydroxidu draselného a· estery meziproduktů se čistí MPLC (MediumPressure Liquid Chromatography - středotlaková kapalinová chromatografie) za použití ethyl-acetátu a hexanů jako mobilní fáze. Použijí se následující rozpouštědlové prostředky: 19 a 21 (20% ethylacetát) a 22 a 23 (10% ethylacetát).
Sloučenina č. 19
Teplota tání: 58 až 59 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,91 (vypočítáno), 66,73 (nalezeno); % H: 8,42 (vypočítáno), 8,01 (nalezeno).
Analýza NMR: (d6-DMSO) : δ 6, 74-6, 78, d, 1H; 6, 60-6, 68 m, 2H; 6,46-6,52, m, 1H; 3,88-3,93, t, 2H; 2,17-2,22, t, 2H; 1,66-1,76, m, 2H; 1,30-1,56, m, 8H.
Sloučenina č. 21
Teplota tání: 115 až 117 °C.
Elementární rozbor: % C: 63,14 (vypočítáno), 62,05 (nalezeno); % H: 7,23 (vypočítáno), 7,11 (nalezeno); % N: 6,69 (vypočítáno), 6,37 (nalezeno).
·· *·♦·
99 • * « 9
9 ·
9
9999
Analýza NMR: (d6-DMSO) : δ 6, 74-6, 77, dd, 1H; 6,60-6,68 m, 2H; 6,46-6,52, m, 1H; 3,90-3,94, t, 2H; 2,26-2,31, t, 2H; 1,63-1,78, m, 4H.
Sloučenina č. 22
Teplota tání: 69 až 71 °C.
Elementární rozbor: % C: 58,84 (vypočítáno), 58,84 (nalezeno); % H: 7,05 (vypočítáno), 7,08 (nalezeno); % N: 4,90 (vypočítáno), 4,83 (nalezeno).
Analýza ΧΗ NMR: (dg-DMSO) : δ 12,0, s, 1H; 6,72-6, 74, d, 1H; 6, 62-6,63, d, 1H; 6, 44-6, 48, dd, 1H; 5,0, s, 2H; 3,87-3,91, t, 2H; 2,17-2,22, t, 2H; 1,65-1,72, m, 2H; 1,28-1,52, m,
8H.
Sloučenina č. 23
Teplota tání: 80 až 81 °C.
Elementární rozbor: % C: 54,22 (vypočítáno), 54,15 (nalezeno); % H: 5,79 (vypočítáno), 5,74 (nalezeno); % N: 5,75 (vypočítáno), 5,66 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (d5-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 6,72-6,75, d, 1H; 6, 62-6,63, d, 1H; 6,95-6,99, dd, 1H; 5,0, široký s, 2H; 3,89-3,39, t, 2H; 2,25-2,30, t, 2H; 1,63-1,75, m, 4H.
Příprava sloučeniny č. 77
K přípravě volné kyseliny sloučeniny č. 77 se použije obecný postup přípravy sloučeniny č. 12 za použití příslušných výchozích materiálů. Volná kyselina sloučeniny č. 77 (10,4 g, 38,43 mmol) se rozpustí v ethanolu (83,0 ml). Přidá se 10,ON vodný roztok hydroxidu sodného (3,80 ml) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu přibližně
9«99
9999 99 9 9 99 9
9 999 9 9 ·
99999 999 9
9 999 999
9999 9999 99 9 99 9999 hodiny. Ethanol se odpaří k získání gelovitého vlhkého odparku. Odparek se rozpustí v deionizované vodě (200 ml) a extrahuje se ethyl-acetátem (2 x 100 ml). Zbývající ethyl-acetát se odpaří probubláváním reakční nádoby dusíkem. Vodný roztok se poté lyofilizuje k získání bílého prášku (6,50 g, 22,1 mmol, 58% výtěžek).
Teplota tání: větší než 230 °C s rozkladem.
FABMS (pos.), m/z 295,2 (M + H)+, 317,2 (M + Na)+.
Analýza XH NMR: (d6-DMSO) : δ 7,09-7,15, m, 3H; 4,05-4,09, t, 2 H; 1,81-1,86, t, 2H; 1,58-1,68, 10 m, 2H; 1,22-1,44, m, 8H.
Alternativní příprava sloučeniny č. 12.
Hydroxid draselný (43,28 g, 771,3 mmol) se drtí v třecí misce až je práškový, poté se přidá do 500ml Erlenmeyerovy baňky obsahující 250 ml dimethylsulfoxidu. Výsledná směs se míchá 15 minut, poté se přidá 27,47 g (201,8 mmol) 2-hydroxyacetofenonu, bezprostředně následuje přidání 50,7 g (201,9 mmol) ethyl-8-bromoktanoátu. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 3 hodiny. Zakalená, hustá oranžová reakční směs se vlije do 150 ml destilované vody a míchá se až je roztok čirý (okolo 15 minut).
Čirý oranžový roztok se ochladí na teplotu 0 °C v ledové lázni, poté se okyselí koncentrovanou vodnou kyselinou chlorovodíkovou až se vytvoří tuhá látka (pH =
7). Tuhá látka se zachytí filtrací a rekrystaluje ze směsi 50:50 ethanol:voda k poskytnutí 38,08 g (67,8 %) žluté tuhé látky.
Teplota tání: 72 až 73 °C.
4» ··»* • 4 • 444 44 4 «*44
4 4 * * · * *
44444 4 4 4 4 • 4 444 44 4 • 444 4444 44 4 44 44*·
Elementární rozbor: % C: 69,04 (vypočítáno), 69,10 (nalezeno); % H: 7,97 (vypočítáno), 7,99 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (d6-DMSO) : δ 12,0, s, 1H; 7,57, dd, 1H;
7,52, dt, 1H; 7,15, d, 1H; 7,00, dt, 1H; 4,09, t, 2H; 2,52, s, 3H; 2,20, t, 2H; 1,78, p, 2H;, 1,46, m, 4H; 1,32, m, 4H.
Sloučenina č. 54 připraví tímto způsobem za použití příslušných výchozích materiálů. Následující sloučeniny se také připraví tímto způsobem, přičemž místo 2'-hydroxyacetofenonu se použije sloučenina uvedená v závorce: 55 (2-hydroxy-5-methoxyacetofenon), 56 (2-hydroxy-4-methoxyacetofenon) a 58 (2-hydroxy-5-methylacetofenon).
Sloučenina č. 54
Teplota tání.: 71 až 73,5 °C.
Elementární rozbor pro Ci8H26O4 · 0, 068 H2O: % C: 70,28 (vypočítáno), 69,98 (nalezeno); % H: 8,56 (vypočítáno, 8,16 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (300 MHz, d6-DMSO): δ 11,8, s, 1H; 7,55, dd, 1H; 7,5, dt, 1H; 7,15, d, 1H; 7,0, dt, 1H; 9,1, t, 2H; 2,55, s, 3H; 2,2, t, 2H; 1,8, p, 2H; 7,5, m, 2H; 1,3, m, 10H.
Sloučenina č. 55
Teplota tání: 120,5 až 121,5 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,21 (vypočítáno), 66,00 (nalezeno); % H: 7,89 (vypočítáno), 7,54 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (d6-DMSO) : δ 12,0, s, 1H; 7,1, m, 3H; 4,03, t, 2H; 3,72, s, 3H; 2,54, s, 3H; 2,20, q, 2H; 1,76, p, 2H; 1,53-1,30, m, 8H.
·« ·«· · ·· ·· « · · * · · • · · · · ·♦*· ·*»·
Sloučenina č. 56
Teplota tání: 106 až 107,5 °C.
Elementární rozbor: % C: 65,87 (vypočítáno), 65,76 (nalezeno); % H: 7,86 (vypočítáno), 7,57 (nalezeno). Analýza NMR: (d6-DMSO) : δ 7,65, d, 1H; 6,61-6,55, m, 2H; 9,08, t, 2H; 3,82, s, 3H; 2,49, s, 3H; 2,19, q, 2H; 1,78, p, 2H; 1,54-1,29, m, 8H.
Sloučenina č. 58
Teplota tání: 121 až 123 °C.
Elementární rozbor: % C: 68,16 (vypočítáno), 67,88 (nalezeno); % H: 7,63 (vypočítáno), 7,65 (nalezeno). Analýza XH NMR: (d6-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 7,37, m, 1H;
7,30, m, 1H; 7,04, d, 1H; 4,09, t, 2H; 2,52, s, 3H; 2,24, m, 5H; 1,76, p, 2H; 1,59-1,41, m, 4H.
Příprava sloučeniny č. 13
Sloučenina č. 13 se zakoupí u Aldrich Chemical
Co. (Milwaukee, WI).
Příprava sloučeniny č. 15
Hydroxid draselný (28,60 g, 0,511 mol) se drtí v třecí misce až je práškový, poté se přidá do 500ml baňky obsahující 215 ml dimethylsulfoxidu. Tato směs se nechá míchat 5 minut. Ke směsi se přidá fenol (12,00 g, 0,1277 mol). Ten je ihned následován přidáním ethyl-6-bromhexanoátu (22,70 ml, 0,1277 mol). Tato směs se nechá míchat
4*44 4444 • 4
«4 44
4 9 9 4 • 4 · ··
4 9 4 ·
4 9 4
44 9449 přibližně 3 hodiny, po kteréžto době se reakční směs vlije do 500 ml vody. Reakční směs se poté zahřívá na teplotu 90 °C po dobu 1,5 hodiny než se zahřívání ukončí. Tato směs se poté nechá míchat přes noc při teplotě místnosti.
Reakční směs se okyselí 2N vodnou kyselinou chlorovodíkovou a vysráží se bílá sraženina. Bílá tuhá látka se isoluje vakuovou filtrací a nechá se sušit přes noc při teplotě místnosti ve vakuu. Získá se 25,09 g (94,5% výtěžek) produktu.
Teplota tání: 64 až 67 °C.
Elenmentární rozbor: % C: 69,23 (vypočítáno), 68,84 (nalezeno); % H: 7,69 (vypočítáno), 7,78 (nalezeno);
% N: 0,00 (vypočítáno), <0,02 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (300 MHz, ds-DMSO): δ 11,95, s, 1H; δ 7,27, m, 2H; δ 6,90, m, 3H; 3,93, t, 2H; 2,20, t, 2H; 1,70, p, 2H; 1,50, p, 2H; 1,30, m, 6H.
Sloučeniny č. 14, 16, 76, 75 a 68 se také připraví tímto způsobem za použití příslušných výchozích materiálů.
Sloučenina č. 14
Teplota tání: 57 až 60 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,67 (vypočítáno), 66,49 (nalezeno); % H: 6,67 (vypočítáno), 6,56 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (300 MHz d6-DMSO): δ 12,2, s, 1H; 7,25, m, 2H; 6,90, m, 3H; 3,95, t, 2H; 2,35, t, 2H; 1,90, p, 2H.
Sloučenina č. 16
Teplota tání: 72 až 75 °C.
• 4 4« • · · 4 4 4 • 4 4 4 4
44 44444 44 4 »
• 444
Elementární rozbor: % C: 72,73 (vypočítáno), 72,45 (nalez no); % H: 9,09 (vypočítáno), 8,92 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (300 MHz d6-DMSO): δ 12,0 s, 1H, 7,24, t, 2H; 6,88, m, 3H; 3,89, t, 2H; 2,15, t, 2H; 1,35, m, 4H; 1,21, m, 8H.
Sloučenina č. 75
Teplota tání: 55 až 57 °C.
Elementární rozbor: °C: 62,26 (vypočítáno), 61,93 (nalezeno); % H: 6,17 (vypočítáno), 5,89 (nalezeno); % F: 8,95 (vypočítáno), 9,11 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (d6-DMSO): 7,25-7,10, m, 3H; 6,95-6,83,
1H; 4,05, t, 2H; 2,31, t, 2H; 1,77-1,62, m, 4H.
Sloučenina č. 76
Teplota tání: 65 až 67 °C,
Elementární analýza: % C: 54,96 (vypočítáno) , 54,62
(nalezeno); % H: 5,0 (vypočítáno), 4,97 (nalezeno); % F: 21,73 (vypočítáno), 21,73 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (dg-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 7,61, d, 2H; 1,26, široký d, 1H; 7,10, široký t, 1H; 4,12, t, 2H; 2,31 t, 2H, 1,80-1,61, m, 4H.
Sloučenina č. 68
Teplota tání: 67 až 68 °C.
Elementární rozbor: % C: 62,11 (vypočítáno), 61,77 (nalezeno); % H: 7,07 (vypočítáno), 6,94 (nalezeno); % Cl 13,9 (vypočteno), 13,05 (nalezeno).
·· ·* • · · · 9 9
9994
99
9 9 9 · 9 · · ··<··««· 9* 9
Analýza NMR: (dg-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 7,32, t, 1H; 7,00-6,95, m, 2H; 6,91-6,88, m, 1H; 3,99, t, 2H; 2,23, t, 2H; 1,78, p, 2H; 1,62, p, 2H; 1,45-1,30, m, 6H.
Příprava sloučeniny č. 17
Sloučenina č. 17 se zakoupí u firmy Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI).
Příprava sloučeniny č. 25
Do 250ml baňky s kulatým dnem 'se vloží 5,57 g (33,9 mmol) kyseliny hydroxyskořicové, 80 ml methanolu a 6 kapek koncentrované kyseliny sírové. Výsledný čirý roztok se zahřívá na teplotu zpětného toku 6 hodin a poté se nechá vychladnout na teplotu místnosti. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu k získání lepivé bílé tuhé látky. Tuhá látka se rozpustí v 80 ml ethyl-acetátu a promyje se třemi 40ml díly 10% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, jedním 40ml dílem vody a dvěma 25ml díly roztoku chloridu sodného. Organická vrstva se odpaří ve vakuu k získání 5,51 g (91,4 %) methyl-(2-hydroxycinamátu) jako bílé tuhé látky.
Hydroxid draselný (1,63 g, 136,0 mmol) se drtí v třecí misce až je práškový, poté se přidá do 125ml Erlenmeyerovy baňky obsahující 75 ml dimethylsulfoxidu. Výsledná směs se míchá 10 minut, poté se přidá 5,49 g (30,8 mmol) methyl-(2-hydroxycinamátu) a 7,81 g (31,1 mmol) ethyl-(8-bromoktanoátu). Rakční směs se stále míchá při teplotě místnosti asi 5 hodin, poté se přidá 15 ml destilované vody. Žlutý roztok se míchá při teplotě místnosti přes noc, poté se promyje dvěma 80ml díly ethyl47 »· • 9 * • 9 9999 *9 *9
9 9 9 • · · · · • · 9 9
999 9 9999 99 • 9 9 9 9
9 9 9
99 99 9·
-acetátu. Vodná vrstva se ochladí na teplotu 0 °C. Přidává se koncentrovaná vodná kyselina chlorovodíková až hodnota pH roztoku je okolo 5. Výsledná tuhá látka se zachytí filtrací a rekrystaluje se ze směsi 50:50 (ethanol:voda) k poskytnutí 4,31 g (45,7 %) bílého prášku.
Teplota tání: 148 až 150 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,65 (vypočítáno) 66,59 (nalezeno); % H: 7,24 (vypočítáno), 7,24 (nalezeno).
Analýza 1H NMR: (300 MHz, ds-DMSO): δ 12,0, široký s, 2H; δ 7,86, s; 7,81, s, 1H; 7,67-7,63, dd, 1H; 7,39-7,33, dt, 1H; 7,07-7,04, d, 1H; 6,98-6,93, t, 1H; 6,55, s; 6,50, s, 1H; 4,04, t, 2H; 2,19, t, 2H; 1,76, p, 2H; 1,50, m, 2H; 1,431,28, m, 6H.
Příprava sloučeniny č. 30
Salicylamid (5,3 g, 0,03875 mol) se přidá do jednohrdlé baňky s kulatým dnem obsahující ethyl-(8-bromoktanoát) (15,0 g, 0,03875 mol). V jednom díle se přidá uhličitan draselný (6,43 g, 0,0465 mol) a 35 ml acetonu se použije jako rozpuštědlo. reakční směs se zahřívá přibližně 4 hodiny. Zahřívání se přeruší a reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a nechá se míchat přes víkend. HPLC ukáže jeden pík v retenčním čase 6,44 minut a reakce se zastaví. Reakční směs se zfiltruje ve vakuu a filtrační koláč se promyje acetonem. Filtrát se odpaří ve vakuu k odstranění přebytečného rozpouštědla (acetonu).
Tuhé látky se míchají v hexanech několik hodin, zfiltrují a poté isolují a vysuší ve vakuu přes noc. Tuhé látky (10,93 g 0,0439 mol) se míchají v 1,5 ekv. 2N • · · · » 4 » «9 4
4 ·
444 4944
4 ·
4949 hydroxidu sodného (32 ml, 0,0658 mol). Reakční směs se zahřívá a míchá až reakce proběhne úplně, což se zjistí pomocí HPLC. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti. Okolo reakční nádoby se umístí lázeň led/voda a suspenze se okyselí 2N vodnou kyselinou chlorovodíkovou. Tuhé látky se znovu získají vakuovou filtrací a filtrační koláč se promyje vodou. Tuhé látky se vysuší ve vakuu přes noc a poté se přenesou do Erlenmeyerovy baňky k rekrystalizací za použití směsi ethanol/voda. Tuhé látky se vysrážejí přes noc a isolují se a vysuší k poskytnutí 8,08 g 8-(2-karboxamidofenoxy)kaprylové kyseliny.
Teplota tání: 114 až 116 °C.
Elementární rozbor: % C: 64,51 (vypočítáno) 64,50 (nalezeno); % H: 7,52 (vypočítáno), 7,55 (nalezeno); % N: 5,02 (vypočítáno), 4,86 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (ds-DMSO) : δ 12,0, s, 1H; 7,82, dd, 1H;
7,55, široký s, 2H; 7,45, dt, 1H; 7,12, d, 1H; 7,01, t, 1H; 4,10, t, 2H; 2,20, t, 2H; 1,77, p, 2H; 1,54-1,29, m, 8H.
Příprava sloučeniny č. 33
Příprava N-ethylsalicylamidu
Dimethylacetamid (50 ml) a karsalam (10,00 g, 0,0613 mol) se vloží do baňky s kulatým dnem vybavené probubláváním dusíkem, chladičem chlazeným studenou vodou a magnetickým míchadlem. Přidá se uhličitan sodný (6,50 g, 0,0613 mol) a jodethan (4,38 ml, 0,0548 mol) a započne se se zahříváním reakční směsi. Zahřívání na teplotu 80 °C pokračuje 16 hodin, načež se zahřívání přeruší a reakční směs se nechá vychladnout na teplotu místnosti. Reakční směs se poté zfiltruje přes nálevku ze slinutého skla a
4?r.......
• · 9 9 · 9 ·· · · • » 9 9 · ·
9 9 9 9 9 * 99 9999 filtrát se zachytí. K tomuto filtrátu se přidává voda až se vysráží bílá sraženina. Tuhá látka se isoluje filtrací a umístí se do Erlenmeyerovy baňky s 2N vodným roztokem hydroxidu sodného (200 ml). Tato směs se přibližně 1 hodinu zahřívá na teplotu zpětného toku a poté se míchá přes noc při teplotě místnosti. Tato směs se okyselí 2N vodnou kyselinou chlorovodíkovou a pozoruje se oddělování žlutého oleje. Reakční směs se extrahuje dvakrát 200ml díly ethyl-acetátu. Spojené ethyl-acetátové vrstvy se promyji dvakrát 200ml díly deionizované vody, vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu. Methylsalicylamid se získá jako žlutý olej, který se po celonočním sušení ve vakuu isoluje s výtěžkem 7,93 g.
Příprava O-acetyl-N-ethylsalicylamidu
N-Ethylsalicylamid (7,93 g, 0,0481 mol), připravený podle postupu popsaného výše, a methylenchlorid (100 ml) se vloží do baňky s kulatým dnem vybavené probubláváním dusíkem, přikapávací nálevkou a magnetickým míchadlem. Tento roztok se ochladí v lázni led/voda a poté se přidá triethylamin (14,71 ml, 0,1057 mol). Do přikapávací nálevky se vloží acetylchlorid a ten se pomalu přikape během 10 minut k reakční směsi. Po 1 hodině se lázeň led/voda odstraní a reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti přes noc. Reakční směs se poté naředí dichlormethanem (100 ml) a extrahuje se napřed 100 ml 2N vodné kyseliny chlorovodíkové a poté dvěma lOOml díly deionizované vody. Methylenchloridová vrstva se poté vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu. Výsledný olej se poté vyčistí elucí přes sloupec silikagelu. Jako eluent se použije směs 60:90 hexan:ethyl-acetát a 15ml frakce se zachytí. Frakce obsahující požadovaný O-acetyl-N-ethyl• · · ·
5(f.......
-salicylamid se spojí a odpaří ve vakuu, čímž se získá 4,28 g produktu jako žlutého oleje.
Příprava 8-(2-(N-ethylbenzamid)oxy)oktanové kyseliny
Výše uvedený O-acetyl-N-ethyl-salicylamid (4,28 g, 0,0207 mol) a dimethylformamid (75 ml) se přidají do 250ml baňky s kulatým dnem vybavené probubláváním dusíkem, přikapávací nálevkou a magnetickým míchadlem. Tato směs se ochladí v lázni led/voda. Po přibližně 10 minutách míchání se přidá hydrid sodný (0,76 g, 0,0316 mol) následovaný roztokem ethyl-8-bromoktanoátu přidaným po kapkách (7,78 g, 0,0310 mol) v dimethylformamidu (25 ml) během 25 minut. Lázeň led/voda se poté odstraní a reakční směs se přes noc míchá při teplotě místnosti. K reakční směsi se přidá deionizovaná voda (75 ml), reakční směs se poté extrahuje třemi 75ml díly dichlormethanu. Spojené dichlormethanové vrstvy se poté promyjí třemi 75ml díly deiónizované vody, vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu. Výsledný hnědý olej se vyjme vodným roztokem hydroxidu sodného (2N,
200 ml), přibližně 2 hodiny se zahřívá na teplotu zpětného toku a poté se přes noc nechá ochladit na teplotu místnosti. Směs se okyselí 2N vodnou kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje se třemi lOOml díly ethyl-acetátu. Spojené ethyl-acetátové vrstvy se promyjí třemi lOOml díly deionizované vody a poté třemi lOOml díly roztoku chloridu sodného. Ethyl-acetátová vrstva se vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu. Výsledný olej se poté krystaluje ze směsi ethyl-acetát:hexan 30:70, přičemž se získá 3,24 g požadovaného produktu, 8-(2-(N-ethylbenzamid)oxy)oktanové kyseliny.
Teplota tání: 94 až 95 °C.
• ·· · 51........
• · · · · · •· · ·· ····
Elementární rozbor: % C: 67,29 (vypočítáno), 67,18 (nalezeno); % H: 8,41 (vypočítáno), 8,55 (nalezeno); % N 4,36 (vypočítáno), 4,25 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (dg-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 7,93, d, 1H; 7,75, dd, 1H; 7,40, td, 1H; 7,10, d, 1H; 6,98, td, 1H; 4,00, m, 3H; 2,15, t, 2H; 1,71, p, 2H; 1,25, m, 8H; 1,10 d, 6H.
Sloučeniny č. 31 a 34 se také připraví tímto způsobem za použití příslušného výchozího materiálu.
Sloučenina č. 31
Teplota tání: 91,5 až 94 °C.
Elementární rozbor: % C: 65,51 (vypočítáno), 65,35 (nalezeno); % H: 7,90 (vypočítáno), 8,03 (nalezeno); % N 4,77 (vypočítáno), 4,46 (nalezeno).
Analýza ΧΗ NMR: (300 MHz, dg-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 8,02, široký d, 1H; 7,72, dd, 1H; 7,42, dt, 1H; 7,11, d, 1H; 7,00, t, 1H; 4,08, t, 2H; 2,80, d, 3H; 2,20, t, 2H; 1,77 p, 2H; 1,53-1,25, m, 8H.
Sloučenina č. 34
Teplota tání: 94 až 95 °C.
Elementární rozbor: % C: 67,29 (vypočítáno), 67,18 (nalezeno); % H: 8,91 (vypočítáno), 8,55 (nalezeno); % N 4,36 (vypočítáno), 4,26 (nalezeno).
Analýza 7H NMR: (dg-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 7,93, d, 1H; 7,75, dd, 1H; 7,90, td, 1H; 7,10, d, 1H; 6,98, td, 1H; 4,00, m, 3H; 2,15, t, 2H; 1,71, p, 2H; 1,25, m, 8H; 1,10 d, 6H.
44 44
4 4 · 4 *
4 4 4
4 4 4
44444444 44
Příprava sloučeniny č. 36
Do 250ml baňky s kulatým dnem vybavené chladičem se přidá 5,00 g (17,4 mmol) sloučeniny č. 12 a 170 ml ethanolu. Baňka se probublává dusíkem. K čirému žlutému roztoku sloučeniny č. 12 se přidá borohydrid sodný (1,15 g, 30,4 mmol) ve třech dílech. Reakční směs se míchá 2 hodiny, poté se pomocí HPLC zjistí, zda proběhla úplně. Přidá se dalších 0,38 g (10,0 mmol) borohydridu sodného a reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Reakce se uhasí přidáním 30 ml 10% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, poté se zfiltruje přes podložku rozsivkové zeminy. Filtrát se odpaří ve vakuu k poskytnutí světle žlutého gelu. Gel se míchá v 60 ml 1N vodného roztoku hydroxidu sodného 2 hodiny, ochladí se na teplotu 0 °C, poté se okyselí na pH = 1 koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou. Vodná vrstva se extrahuje čtyřmi 30ml díly ethyl-acetátu. Spojené organické vrstvy se vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu k poskytnutí 2,96 g (48,8 %) jako čirého, viskózního žlutého oleje.
Elementární rozbor: % C: 67,51 (vypočítáno), 67,16 (nalezeno); % H: 8,67 (vypočítáno), 8,56 (nalezeno). (Je třeba vzít v potaz, že elementární rozbor zahrnuje 0,176 mol vody (z hodnoty KF) a 0,068 mol ethyl-acetátu (ukázáno v NMR)).
Analýza 7H NMR: (300 MHz, d6~DMSO): δ 7,45-7,42, dd, 1H; 7,18-7,12, dt, 1H; 6,93-6,88, t, 2H; 5,03-4,97, 1H; 3,993,91, m, 2H; 2,20, t, 2H; 1,72, p, 2H; 1,51, m, 2H; 1,391,30, m, 6H; 1,27-1,25, d, 3H.
Příprava sloučeniny č. 37
9 · β ·
9 9 9 ·9 » 9 9 I » · <
9 4
Roztok 10,0 ml (11,31 g, 83,1 mmol) 2'-hydroxyacetofenonu a 50 ml tetrahydrofuranu se vloží do ledové lázně a zpracuje se se 120,0 ml (168,0 mmol) 1,4M methyllithia v tetrahydrofuranu, které se přidá po kapkách během 30 minut. Reakční směs se napřed zakalí a poté se vyčeří. Po 18 hodinách míchání se roztok okyselí 4% vodnou kyselinou chlorovodíkovou. Vrstvy se oddělí. Organická fáze se promyje 30 ml roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a odpaří. Celkem se isoluje 12,05 g 2-(dimethylhydroxymethyl)fenolu.
Připraví se roztok 6,77 g (44,5 mmol) 2-(dimethylhydroxymethyl)fenolu a 50 ml dimethylsulfoxidu a zpracuje se s 9,90 g (176 mmol) čerstvě drceného hydroxidu draselného. Světle zelený roztok se míchá 20 minut než se přidá 9,85 g (45,8 mmol) 4-(brommethyl)benzoové kyseliny a 0,40 g (2,67 mmol) jodidu sodného. Hustá suspenze se míchá další 4 hodiny, načež se přidá dalších 1,66 g (7,72 mmol) 4-(brommethyl)benzoové kyseliny. Po dalších 2 hodinách míchání se reakční směs zpracuje s 50 ml vody. Po 20 hodinách míchání se roztok okyselí 4% vodnou kyselinou chlorovodíkovou, čímž se získá bílá tuhá látka, která se isoluje filtrací. Tuhá látka se rekrystaluje ze směsi ethanol/voda k získání 5,8 g produktu.
Teplota tání: 171 až 172 °C.
Elementární rozbor: % C: 71,31 (vypočítáno), 71,28 (nalezeno); % H: 6,34 (vypočítáno), 6,14 (nalezeno).
Analýza 2Η NMR: (300 MHz, d6-DMSO): δ 13,0, s, 1H; 8,0, d,
2H; 7,7, dd, 1H; 7,6, d, 2H; 7,2, dt, 1H; 7,1, d, 1H; 7,0, t, 1H; 5,25, s, 2H; 5,0, s, 1H; 1,55, s, 6H.
Příprava sloučeniny č. 67 • 9 • 9
9 9 9 ·
9
99 9 9999
9 9
9999
Roztok 50,1 g (455 mmol) hydrochinonu, 15,52 g (91,0 mmol) α-chlor-p-toluylové kyseliny, 1 g (6,7 mmol) jodidu sodného, 75 ml (750 mmol) ION vodného roztoku hydroxidu sodného a 300 ml vody se zahřívá na teplotu 70 °C 24 hodin pod atmosférou dusíku. Ochlazená reakční směs se okyselí 20% vodnou kyselinou chlorovodíkovou, což způsobí vývin hnědé sraženiny. Tuhé látky se isolují filtrací. Tuhé látky se vyjmou ethyl-acetátem. Nerozpuštěné tuhé látky se odfiltrují. Filtrát se promyje roztokem chloridu sodného, vysuší síranem sodným a odpaří. Odparek se krystaluje ze směsi ethanol/voda k poskytnutí 8,1 g sloučeniny č. 67.
Teplota tání: >230 °C.
Elementární rozbor: % C: 68,85 (vypočítáno), 68,44 (nelezeno); % H: 4,95 (vypočítáno), 4,93 (nalezeno).
Analýza ΧΗ NMR: (d6-DMSO): δ 9,0, s, 1H; 8,0, d, 2H; 7,5, d, 2H; 6,8, d, 2H; 6,7, d, 2H; 5,1, s, 2H.
Sloučeniny č. 78 a 73 se připraví stejným způsobem jako sloučenina č. 67 za použití příslušných výchozích materiálů.
Sloučenina č. 78
Teplota tání: 178 až 181 °C.
Elementární rozbor: % C: 64,01 (vypočítáno), 63,95 (nalezeno); % H: 4,22 (vypočítáno), 4,25 (nalezeno).
Analýza ΧΗ NMR: (dg-DMSO) : δ 8,0, d, 2H; 7,6, d, 2H; 7,95, dd, 1H; 7,3, dt, 1H; 1,2, dd, 1H; 7,0, dt, 1H; 5,3, s, 2H.
Sloučenina č. 73 • ·
9 • ·
9 9 9 • 999
99
9 · · 9
9 9 9
9 9 9 9
9 9 9
H <9 9999
Teplota tání: 63 až 65 °C.
Elementární rozbor: % C: 62,11 (vypočítáno), 62,02 (nalezeno); % H: 7,07 (vypočítáno), 7,04 (nalezeno);
Analýza ΧΗ NMR: (dg-DMSO) : δ 12,0, široký s, 1H; 7,4, dd,
1H; 7,3, dt, 1H; 7,1, dd, 1H; 6,95, dt, 1H; 4,0, t, 2H;
2,2, t, 2H; 1,75, p, 2H; 1,5, m, 4H; δ 1,35, m, 4H.
Příprava sloučeniny č. 60
Roztok 3,0 ml (3,44 g, 28,2 mmol) salicylaldehydu, 5,05 ml (6,33 g, 28,4 mmol) ethyl-(6-bromhexanoátu) a 50 ml ethanolu se zpracuje s 5,07 g (36,7 mmol) uhličitanu draselného. Suspenze se zahřívá na teplotu zpětného toku. Po 20 hodinách se reakční směs ochladí na teplotu 25 °C, zfiltruje se přes podložku rozsivkové zeminy (Celite) a odpaří. Odparek se propláchne hexany a poté se vyjme ethanolem a 10 ml 2N vodného roztoku hydroxidu sodného. Po 6 hodinách se ethanol stripuje. Směs se okyselí 4% vodnou kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje se ethyl-acetátem. Organická fáze se promyje 30 ml roztoku chloridu sodného, vysuší síranem sodným a odpaří. Rekrystalizace ze směsi ethanol/voda poskytne 3,0 g sloučeniny č. 60 jako hnědé tuhé látky
Teplota tání: 58 až 60 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,09 (vypočítáno), 61,39 (nalezeno); % H: 6,83 (vypočítáno), 6,98 (nalezeno).
MS 236 (M+ pík).
Analýza 1H NMR: (d6-DMSO): δ 12,0, široký s, 1H; 10,4, s,
1H; 7,7, dd, 1H; 7,65, dt, 1H; 7,2, d, 1H; 7,05 1,5, m, 2H.
Sloučenina č. 61 se připraví stejným způsobem
4444 «4
9 9 · ♦ 9 ·
4 *
9· · 4 · · · jako sloučenina č. 60 za použití příslušných výchozích materiálů. Teplota tání: 59 až 62 °C. Elementární rozbor: % C: 68,18 (vypočítáno), 67,59 (nalezeno); % H: 7,57 (vypočítáno), 7,63 (nalezeno). MS 264 (M+ pík). Analýza XH NMR: (d6~DMSO): δ 12,0, široký s, 1H; 10,4, s, 1H; 8,0, d, 2H; 7,75, dd, 1H; 7,65, dt, 1H; 7,65, d, 2H; 7,3, d, 1H; 7,1, t, 1H; 5,4, s, 2H.
Příprava sloučeniny č. 57
Karsalam (30,00 g, 0,1840 mol), jodmethan (10,23 ml, 0,1643 mol), uhličitan sodný (19,51 g, 0,1840 mol) a dimethylformamid (150 ml) se vloží do 500mi baňky s kulatým dnem. Reakční směs se přes noc zahřívá na teplotu 80 °C. Po ochlazení na teplotu místnosti se reakční směs zfiltruje a a bílá tuhá látka se zachytí. Ta se promyje vodou a zbývající tuhá látka se vloží do 250ml baňky s kulatým dnem. K filtrátu z počáteční filtrace se přidá voda a vysráží se další bílá tuhá látka. Tento materiál se spojí s tuhou látkou, která již je v 250ml baňce a přidá se 2N vodný roztok hydroxidu sodného (150 ml). Směs se zahřívá 1 hodinu než se zahřívání ukončí a reakční směs se nechá přes noc vychladnout. Přes noc se vysráží bílá tuhá látka a ta se isoluje filtrací a nechá se vysušit ve vakuu. Isoluje se 21,52 g N-methylsalicylamidu.
N-Methylsalicylamid (21,52 g, 0,1425 mol) a methylenchlorid se vloží do 1-litrové baňky s kulatým dnem. Baňka se chladí v lázni led/voda a přidá se triethylamin (43,62 ml, 0,3135 mol). Během 5 minut se pak po kapkách přidá acetylchlorid. Lázeň led/voda se poté odstraní a reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti.
K reakční směsi se přidá methylenchlorid (300 ml). Směs se • φ φφφφ • *
φ « φ φ φ φ · • · 9 9 9 9
9 9 9 9 9
9 99 9999 promyje dvěma 300ml díly 1N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a poté třemi 300ml díly deionizované vody. Methylenchloridový roztok se vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu k získání oranžové tuhé látky, která se rekrystaluje ze směsi 70:30 ethyl-acetát:hexan. Isoluje se 12,15 g O-acetyl,N-methylsalicylamidu.
O-Acetyl,N-methylsalicylamid {17,74 g, 0,979 mol), který se připraví podle popisu uvedeného výše, se vloží do 1-litrové baňky s kulatým dnem s dimethylformamidem (300 ml). Baňka se chladí v lázni led/voda a přidá se hydrid sodný (3,38 g, 0,1406 mol). Methyl-(8-bromdekanoát (36,59 g, 0,1379 mol) se rozpustí v dalším díle dimethylformamidu (100 ml) a tento roztok se po kapkách přidá k reakční směsi během 25 minut. Po asi půl hodině míchání se ledová lázeň odstraní a reakční směs se nechá míchat 3 dny při teplotě místnosti. Přidá se voda (300 ml) a tato směs se extrahuje dvěma 250ml díly methylenchloridu. Spojené methylenchloridové vrstvy se poté třikrát promyjí 150ml díly vody, vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu, čímž se získá hnědý olej. Tento olej se poté vyjme 2N vodným roztokem hydroxidu sodného (200 ml) a 45 minut se zahřívá. Po celonočním míchání při teplotě místnosti se přidá dalších 200 ml 2N vodného roztoku hydroxidu sodného a reakční směs se míchá až je čirá. Po ochlazení se reakční směs okyselí 2N roztokem vodné kyseliny chlorovodíkové a extrahuje se třemi 250ml díly ethyl-acetátu. Spojené ethyl-acetátové vrstvy se promyjí třemi 250ml díly vody a poté třemi 250ml díly roztoku chloridu sodného. Ethyl-acetátová vrstva se vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu, čímž se získá hnědá tuhá látka, která se rekrystaluje ze směsi ethyl-acetát:hexan (30:70). Produkt se isoluje jako bílá tuhá látka s výtěžkem 26,30 g.
·· 444·
4444 4444
4 • 41
4«
Analytické údaje pro sloučeninu č. 51:
Teplota tání: 81 až 84 °C.
Elementární rozbor: % C: 67,29 (vypočítáno), 67,17 (nalezeno); % H 8,91 (vypočítáno), 8,70 (nalezeno); % N: 4,36 (vypočítáno), 4,36 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (d6-DMSO) : δ 12,00, s, 1H; 7,98, d, 1H; 7,70-7,75, dd, 1H; 7,39-7,48, dt, 1H; 7,09-7,15, d, 1H; 6,95-7,05, td, 1H; 4,05, t, 2H; 2,75, d, 3H; 2,15, t, 2H; 1,70, p, 2H; 1,20-1,55, m, 12H.
Příprava sloučeniny č. 65
Hydroxid draselný (28,60 g, 0,511 mol) se vloží do 500ml baňky s kulatým dnem. Přidá se dimethylsulfoxid (215 ml) a započne míchání. Po asi 35 minutách míchání se přidá fenol (12,00 g, 0,1277 mol) následovaný přidáním ethyl-(8-bromoktanoátu) (32,04 g, 0,1277 mol). Tato směs se nechá 3 hodiny míchat při teplotě místnosti a přidá se 500 ml deionizované vody. Tato směs se zahřívá na teplotu zpětného toku. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a okyselí se 2N vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové. Výsledná tuhá látka se isoluje filtrací a nechá se vysušit přes noc ve vakuu. Získá se 27,74 g 8-fenoxyoktanové kyseliny.
Analytické údaje pro sloučeninu č. 65:
Teplota tání: 65 až 68 °C.
Elementární rozbor: % C: 71,19 (vypočítáno), 70,98 (nalezeno); % H 8,47 (vypočítáno), 8,70 (nalezeno). Analýza XH NMR: (dg-DMSO): δ 11,95, s, 1H; 7,23-7,31, m, 2H; 6,87-6,95, m, 3H; 3,90, t, 2H; 2,15, t, 2H; 1,45, p, 2H; 1,22-1,45, m, 6H.
·< «4··
59’ ♦
4 4 4 4 • 444 4444 44 ·
4» • · ·» • 4
4 4
4· 44*4
Příprava sloučeniny č. 43
Hydroxid draselný (2,62 g, 0,0467 mol) a dimethylsulfoxid (90 ml) se vloží do 500ml baňky s kulatým dnem pod atmosférou dusíku. Po 5 minutách míchání se přidá resorcinol-monobenzoát (10,0 g, 0,0967 mol) následovaný ethyl-(8-bromoktanoátem) (17,73 g, 0,0467 mol). Po celonočním míchání při teplotě místnosti se k reakční směsi přidá další díl hydroxidu draselného (2,62 g, 0,0967 mol) s cílem dosáhnout úplného průběhu reakce. Po dalších 5,5 hodinách míchání se přidá ke směsi voda (200 ml) a směs se poté extrahuje třemi díly dichlormethanu (lOOml díly). Spojené dichlormethanové díly se vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu. Pozoruje se, že výsledný hnědý olej má zápach po dimethylsulfoxidu a vyjme se vodou. Tato směs se poté extrahuje třemi díly ethyl-acetátu (lOOml díly). Spojené ethyl-acetátové vrstvy se poté promyjí třemi díly vody (lOOml díly). Ethyl-acetátová vrstva se vysuší síranem sodným a odpaří se ve vakuu. Výsledný hnědý olej se vyjme vodným roztokem hydroxidu sodného (2N, 100 ml). Poté se přidá tetrahydrofuran (50 ml) a směs se zahřívá na teplotu zpětného toku 2 hodiny než se zahřívání ukončí. Tetrahydrofuran se odpaří ve vakuu a reakční směs se okyselí 2N vodnou kyselinou chlorovodíkovou. Výsledná hnědá tuhá látka se několikrát promyje ve vodě o teplotě 40 až 50 °C a poté se rekrystaluje ze směsi voda:ethanol 80:20. Výsledná hnědá tuhá látka se rekrystaluje napřed ze směsi hexan:ethyl-acetát 90:10 a poté se přidá do vroucí vody. přidává se ethanol až se směs vyčeří. Během chlazení se vysráží hnědá tuhá látka a isoluje se filtrací, tento produkt se nechá vysušit ve vakuu a isoluje se s výtěžkem
5, 96 g.
·· ···« • 4 4 · · ·····«·· 4 4 ·
Analytické údaje pro sloučeninu č. 43:
Teplota táni: 89 až 91 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,67 (vypočítáno), 66,68 (nalezeno); % H: 7,94 (vypočítáno), 7,92 (nalezeno) Analýza NMR: (d6-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 9,3, s, 1H t, 1H; 6,29, m, 3H; 3,84, t, 2H; 2,15, t, 2H; 1,62, 1,95, 15 p, 2H; 1,23, m, 6H.
Sloučeniny č. 44, 45, 74 a 46 se připraví uvedeným způsobem za použití příslušného výchozího materiálu.
Sloučenina č. 44
Teplota tání: 89 až 92 °C.
Elementární rozbor: % C: 68,57 (vypočítáno), 68,71 (nalezeno); % H: 8,57 (vypočítáno), 8,58 (nalezeno) Analýza NMR: (d6-DMSO): δ 11,9, s, 1H; 9,2, s, 1H t, 1H; 6,29, m, 3H; 3,84, t, 2H; 2,15, t, 2H; 1,62, 1,30, p, 2H; 1,23, m, 8H.
Sloučenina č. 45
Teplota tání: 98 až 99,5 °C.
Elementární rozbor: % C: 64,29 (vypočítáno), 64,06 (nalezeno); % H: 7,14 (vypočítáno), 7,12 (nalezeno) Analýza TH NMR: (ds-DMSO): δ 12,0, s, 1H; 9,3, s, 1H t, 1H; 6,29, m, 3H; 3,84, t, 2H; 2,17, t, 2H; 1,62, 1,49, p, 2H; 1,35, m, 2H.
; 7,00 p, 2H výše ; 7,00 p, 2H : 7,00 p, 2H
Sloučenina č. 74
4* 44 * 4 4
4
4444
4 44
4 4 4
4 • 4
4444 4444
4 4
4
Teplota tání: 126 až 128 °C.
Elementární rozbor: % C: 56,57 (vypočítáno), 56,72 (nalezeno); % H: 6,39 (vypočítáno), 6,66 (nalezeno), % N: 4,71 (vypočítáno), 4,32 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (d6-DMSO) : δ 11,7, s, 1H; 10,4, s, 1H; 7,75-7,8, dd, 1H; 7,68-7,73, d, 1H; 6, 92-6, 99, d, 1H; 4,00, t,. 2H; 2,15, t, · 2H; 1,67, p, 2H; 1,22-1,55, m, 8H.
Sloučenina č. 46
Teplota tání: 93 až 95 °C.
Elementární rozbor: % C: 61,22 (vypočítáno), 61,20 (nalezeno); % H: 6,12 (vypočítáno), 6,02 (nalezeno).
Analýza XH NMR: (d6-DMSO) : δ 12,0, s, 1H; 9,3, s, 1H; 7,01, t, 1H; 6,30, m, 3H; 3,86, t, 2H; 2,35, t, 2H; 1,85, p, 2H.
Příprava sloučeniny č. 47
Hydroxid draselný (11,20 g, 200,0 mmol) se drtí v třecí misce až je práškový, poté se přidá do 500ml baňky s kulatým dnem obsahující 90 ml dimethylsulfoxidu. Výsledná směs se 5 minut míchá, poté se přidá 10,00 g (50,0 mmol) 4-benzyloxyfenolu bezprostředně následovaného 12,55 g (50,0 mmol) ethyl-(8-bromoktanoátu). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 2,5 hodiny. Reakční směs se vlije do 200 ml destilované vody. Směs se zahřívá na teplotu zpětného toku. Když je reakce úplná, reakční směs se nechá ochladnout na teplotu místnosti. Směs se okyselí 2N vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové a výsledná tuhá látka se isoluje filtrací. Tuhá látka se nechá vysušit ve vakuu přes noc. Isoluje se 17,96 g (9-benzyloxyfenyl)-8-oxyoktanové kyseliny. Tento materiál se použije jak je v dalším kroku.
4» ·«
4 4 4
4 4
4 4
4444 •4 4444
4
4444 4« 4 4 (4-Benzyloxyfenyl)-8-oxyoktanová kyselina se vloží do 500 ml baňky s kulatým dnem se 120 ml ethanolu. Směs se 15 minut probublává dusíkem než se k reakční směsi přidá palladium na aktivním uhlí. Baňka se poté odsaje a na vrchol baňky se umístí balón s vodíkem tak, že obsah baňky se udržuje pod atmosférou vodíku. Směs se nechá přes noc míchat při teplotě místnosti a poté se zfiltruje přes podložku z rozsivkové zeminy (Celíte). Ethanol se odpaří ve vakuu, čímž se získá bílá tuhá látka, která se napřed rekrystaluje ze směsi 90:10 ethanol:voda a poté se rozpustí v 2N vodném roztoku hydroxidu sodného. Směs se zfiltruje a okyselí 2N kyselinou chlorovodíkovou. Výsledná bílá tuhá látka se isoluje filtrací a nechá se vysušit ve vakuu, isoluje se 2,12 g 9-hydroxyfenyl)-8-oxyoktanové kyseliny.
Analytické údaje pro sloučeninu č. 97:
Teplota tání: 97 až 100 °C.
Elementární rozbor: % C: 66,61 (vypočítáno), 66,43 (nalezeno); % H: 7,94 (vypočítáno), 7,80 (nalezeno).
Analýza NMR: (d6-DMSO) : δ 12,0, s, 1H; 9,00 , s, 7H;
6,63, m, 4H; 3,75, t, 2H; 2,15, t, 2H; 1,60, p, 2H; 1,45, p, 2H; 1,20, m, 6H.
Sloučeniny č. 48, 49 a 50 se připraví výše uvedeným způsobem za použití příslušného výchozího materiálu.
Sloučenina č. 48
Teplota tání: 99 až 100 °C.
Elementární rozbor: % C: 68,57 (vypočítáno), 68,47 (nalezeno): % H: 8,57 (vypočítáno), 8,67 (nalezeno).
·· ♦ · ·» ·* • · 9 9 • · · • · · ·* «···
Analýza NMR: (d6-DMSO): 2, 15, t, 2H; 1, 60, p, 2H;
δ 6,63, m, 4H; 3,75, t, 2H; 1,45, p, 2H; 1,20, m, 10H.
Sloučenina č. 49
Teplota tání: 102 až 104 °C.
Elementární analýza: % C: 64,29 (vypočítáno) 64,53 (nalezeno); % H: 7,14 (vypočítáno), 7,32 (nalezeno). Analýza NMR: (dg-DMSO): δ 11,5, s, 1H; 8,5, s, 1H; 6,63, m, 4H; 3,75, t, 2H; 2,15, t, 2H; 1,60, p, 2H; 1,45, p, 2H; 1,30, m, 2H.
Sloučenina č. 50
Teplota tání: 117 až 120 °C.
Elementární rozbor: % C: 58,43 (vypočítáno), 58,63 (nalezeno); % H: 6,35 (vypočítáno), 6,40 (nalezeno). Analýza XH NMR: (d6-DMSO) : δ 12,0, s, 1H; 8,6, s, 1H; 6,62, m, 4H; 3,80, t, 2H; 3,80, t, 2H; 2,50, t, 2H; 1,80, p, 2H.
Příprava sloučeniny č. 57
2,5-Dihydroxyacetofenon (5,00 g, 0,0329 mol), benzylbromid (3,72 ml, 0,031 mol), uhličitan draselný (4,31 g, 0,031 mol) a aceton (150 ml) se přidají do 500ml baňky s kulatým dnem. Reakční směs se přes noc zahřívá na teplotu zpětného toku a poté se ochladí na teplotu místnosti. Když vychladne, přidá se k reakční směsi deionizovaná voda (150 ml) a reakční směs se extrahuje 3-krát lOOml díly diethyletheru. Spojené etherové vrstvy se vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu, čímž se získá tmavá tuhá látka. Tato tmavá tuhá látka se rekrystaluje ze směsi ethanol:voda 50:50, • 4 4» • 4 4 ·
4 4
4 4 •4 Ι|·» ··»· • · ····4«»4 čímž se získá 3,09 g 2-hydroxy-5-benzyloxyacetofenonu jako žlutých jehliček.
Hydroxid draselný (11,11 g, 0,1983 mol) a dimethylsulfoxid (90 ml) se přidají do 250ml baňky s kulatým dnem. Po 10 minutách se přidá 2-hydroxy-5-benzyloxyacetofenon (12,00 g, 0,0496 mol), připravený podle popisu uvedeného výše, následovaný přidáním ethyl-(8-bromokatanoátu) (12,95 g, 0,496 mol). Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Přidá se deionizovaná voda a reakční směs se zahřívá na teplotu místnosti 5 hodin. Na konci této doby se reakční směs nechá ochladit na teplotu místnosti a okyselí se 2N vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové. Výsledná hnědá tuhá látka se isoluje filtrací a dvakrát se promyje díly deionizované vody. Po sušení přes noc ve vakuu.se získá 16,75 g (9-benzyloxy-2-acetylfenyl)-8-oxyoktanové kyseliny.
(4-Benzyloxy-2-acetylfenyl)-8-oxyoktanová kyselina (16,75 g, 0,0435 mol) a ethyl-acetát (85 ml) se vloží do 300ml Parrovy reakční nádoby. Přidá se 10% palladium na aktivním uhlí a reakční nádoba se uzavře, odsaje a naplní vodíkem. Poté, co se přes noc reakční nádoba zahřívá na teplotu 50 °C se otevře a přidá se dalších 0,5 g 10% palladia na aktivním uhlí. Reakční nádoba se znovu uzavře, odsaje a naplní vodíkem. Když v reakční směsi během 2 dnů při teplotě místnosti nedojde k žádné změně, reakční nádoba se znovu otevře a reakční směs se zfiltruje. Filtrát se odpaří ve vakuu a odparek se znovu vloží do Parrovy reakční nádoby. Odparek se poté vyjme ethyl-acetátem a přidá se 10% palladium na aktivním uhlí. Reakční nádoba se uzavře, odsaje, naplní vodíkem a zahřívá přes noc na teplotu 50 °C. Po ochlazení na teplotu «« ·«·« v « » • « · ·· »· r · · » • · * r· ·«·· ·
• · »·s » >·«· místnosti se reakční nádoba otevře, palladium na aktivním uhlí se odfiltruje a reakční směs se odpaří ve vakuu. Výsledná žlutá tuhá látka se rekrystaluje ze směsi voda:ethanol 80:20. Žlutá tuhá látka vznikající při této rekrystalizaci se vyjme vroucím hexanem. Poté se přidává ethyl-acetát až se získá čirý roztok a směs se nechá ochladnout na teplotu místnosti. Filtrací se isoluje hnědá tuhá látka, která se vysráží a ta se vysuší ve vakuu. Získá se 6,23 g (4-hydroxy-2-acetylfenyl)-8-oxyoktanové kyseliny.
Analytické údaje pro sloučeninu č. 57:
Teplota tání: 112 až 115 °C.
Elementární rozbor: % C: 65,31 (vypočítáno), 65,32 (nalezeno); % H: 7,48 (vypočítáno), 7,39 (nalezeno).
Analýza NMR: (d6-DMSO) : δ 6,88-7,02, m, 3H; .3,92, t, 2H; 2,49, s, 3H; 2,15, t, 2H; 1,69, p, 2H; 1,20-1,59, m, 8H.
Příprava sloučeniny č. 81
Příprava ethylesteru 8-(4-benzyloxyfenoxy)-2-methyloktanové kyseliny
Během přenosu kapalin se použijí techniky bez přístupu vzduchu. Do plamenem vysušené 250ml trojhrdlé baňky s kulatým dnem obsahující míchadlo se vloží 14,0 g ethylesteru 8-(4-benzyloxyfenoxy)oktanové kyseliny (0,03778 mol, 1 ekv.). K ní se přidá 80 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Tato směs se míchá 10 minut nebo až se tuhá látka zcela rozpustí. Směs se ochladí na teplotu -78 °C za použití lázně suchého ledu a acetonu. Ke směsi se přidá 19,84 ml 2M roztoku lithiumdiisopropylamidu (0,03967 mol, 1,05 ekv.). Přidávání se provádí pomalu k udržení teploty pod -60 °C. Po dokončení přidávání se směs nechá 2,0 hodiny • 4 • · * · «······· ·*.
míchat, při teplotě -78 °C, načež se suspenze pomalu zalije 4,70 ml jodmethanu (0,07556 mol, 2,0 ekv.). Teplota se během přidávání nenechá vzrůst nad -50 °C. Reakční směs se nechá pomalu ohřát na teplotu místnosti a míchá se 3 dny. Roztok se odfiltruje ze sraženin a supernatant se odpaří ve vakuu na odparek. Odparek se vyjme 60 ml ethyl-acetátu a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a nasyceným roztokem chloridu sodného (50 ml). Ethyl-acetátová vrstva se poté vysuší 4,5 gramy bezvodého síranu sodného a zfiltruje. Organická vrstva se odpaří „ve vakuu na odparek. Konečným produktem je zlatavý olej s konečným hrubým výtěžkem 9,10 g (62,6% výtěžek). HPLC ukazuje, že malé množství výchozího materiálu zůstává spolu s malým množstvím dimethylovaného vedlejšího produktu. Tento meziprodukt se necharakterizuje a použije se jak je v příštím kroku.
Sloučenina se debenzyluje pomocí Pd/C a H2 podle popisu v přípravě sloučeniny č. 47. Výsledný produkt se hydrolyzuje podle způsobů popsaných pro sloučeninu č. 47 k vytvoření sloučeniny č. 81.
Výtěžek je 67,85 %. Produktem je bílá tuhá látka. Teplota tání je 67 až 70 °C. Elementární rozbor: Teoreticky C = 67,65 %, H = 8,33 %; nalezeno C = 67,56 %, H = 8,56 %; kvantitativní 13C NMR (d6-DMSO) : C=O (1C, 177,477); CAr-0 (2C, 151,467 a 151,015 ppm) ; CAr-H (4C, 115,617 a 115,209 ppm) ; CH2-CH2-O (1C, 67,939 ppm); CH-CH3 (1C, 38,689 ppm) ; -CH2- (5C, 33,211, 28,769, 26,645, 25,541 ppm); CH-CH3 (1C, 16,944 ppm).
Příprava sloučeniny č. 82 • · · · • · tp • * · 4 • t * + O · • ’ · · · · · · · ···· ···· ·· · ·· ····
Příprava ethylesteru 8-(4-benzyloxyfenoxy)-2-(propen-2-yl)oktanové kyseliny
Během přenosu kapalin se použijí techniky bez přístupu vzduchu. Do plamenem vysušené 250ml trojhrdlé baňky s kulatým dnem obsahující míchadlo se vloží 10,0 g ethylesteru 8-(4-benzyloxyfenoxy)oktanové kyseliny (0,02699 mol, 1 ekv.). K ní se přidá 100 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Tato směs se míchá 10 minut nebo až se tuhá látka zcela rozpustí. Směs se ochladí na teplotu -78 °C za použití lázně suchého ledu a acetonu. Ke směsi se přidá 24,0 ml 2M roztoku lithiumdiisopropylamidu (0,0480 mol, 1,7 ekv.). Přidávání se provádí pomalu k udržení teploty pod -60 °C.
Po dokončení přidávání se směs nechá 2,0 hodiny míchat při teplotě -78 °C, načež se suspenze pomalu zalije 5,0 ml allylbromidu (0,0577 mol, 2,13 ekv.). Teplota se během přidávání nenechá vzrůst nad -50 °C. Reakční směs se nechá pomalu ohřát na teplotu místnosti a míchá se 16 hodin. Roztok se odfiltruje ze sraženin a supernatant se odpaří „ve vakuu na odparek. Odparek se vyjme 60 ml ethyl-acetátu a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a nasyceným roztokem chloridu sodného (50 ml). Ethyl-acetátová vrstva se poté vysuší 4,5 gramy bezvodého síranu sodného a zfiltruje. Organická vrstva se odpaří na olej a chromatografuje se na silikagelu za použití směsi hexany:ethyl-acetát 9:1. Konečným produktem je zlatavý olej s konečným hrubým výtěžkem 7,0 g (64,1% výtěžek). Kvantitativní 13C NMR (d-CDCl3) : C=0 (1C, 175,462); CBn (6C, 137,188, 128,36, 127,679, 127,298 ppm); CAr-0 (2C, 153, 303 a 152, 683 ppm); CAr-H (4C, 115, 607 a 115,176 ppm); =CH2 (1C, 116, 484 ppm); (CH2)Bn (1C, 70,439 ppm); CH2-CH2-O (1C, • · · · « · ♦ · ···· 9 9 9 9 «9 9999
68,242 ppm); CH3-CH2-O (1C, 59,946 ppm); CH-CH3 (1C, 45,147 ppm); -CH2-CH= (1C, 36,404 ppm); -CH2- (5C, 31, 609, 29,121, 27,054, 25,745 ppm); CH2-CH3 (1C, 14,221 ppm).
Sloučenina se debenzyluje pomocí Pd/C a H2 podle popisu v přípravě sloučeniny č. 47. Výsledný produkt se hydrolyzuje podle způsobů popsaných pro sloučeninu č. 47 k vytvoření sloučeniny č. 82. Výtěžek je 67,66 %. Produktem je bílá tuhá látka. Teplota tání je 98 až 100 °C. Elementární rozbor: Teoreticky C = 69,36 %, H = 8,90 %; nalezeno C = 69,33 %, H - 8,96 %; kvantitativní 13C NMR (d6-DMSO) : C=O (1C, 177,226); CAr-O. (2C, 151,660 a 151,216 ppm); CAr-H (4C, 115,786 a 115, 368 ppm); CH2-CH2-O (1C,
67,908 ppm); CH-CH2 (1C, 44,887 ppm); -CH2- (5C, 34,341, 28,968, 27,071, 25,614 ppm); CH-CH2 (1C, 32,060 ppm) ;
CH2-CH3 (1C, 20,312 ppm); CH2-CH3 (1C, 14,007 ppm)
Příprava sloučeniny č. 80
Příprava ethylesteru 8-(4-methoxyfenoxy)oktanové kyseliny
Do 500ml trojhrdlé baňky s kulatým dnem se přidá 14,90 g 4-methoxyfenolu (0,12 mol), 30,0 g 8-bromethyloktanoátu (0,1265 mol), 10,36 g uhličitanu draselného (0,075 mol), 150 ml suchého acetonu a 2,5 mol jodidu draselného. Reakční směs se udržuje pod atmosférou dusíku a 2 dny se zahřívá na teplotu zpětného toku. Heterogenní směs se odpaří ve vakuu na tuhý odparek a smísí se s 600 ml stejných částí vody a ethyl-acetátu. Tyto dvě fáze se oddělí a organická vrstva se extrahuje 3N roztokem hydroxidu sodného (3 x 150 ml). Organická vrstva se vysuší bezvodým síranem horečnatým a zfiltruje. Organický roztok se poté odpaří na polovinu objemu (přibližně 180 ml)’ a • 9 · 9 ····«♦ 9 ·· « 9 9 «ι>· 9 9 9 · dolije se stejným množstvím hexanu. Tato směs se vloží přes noc do chladničky. Krystaly, které se vytvoří se vakuově zfiltrují a nechají se vyschnout na vzduchu. Produkt se dále neanalyzuje a použije se „jak je v následujících krocích.
Příprava ethylesteru 8-(4-methoxyfenoxy)-2-methyloktanové kyseliny
Během přenosu kapalin se použijí techniky bez přístupu vzduchu. Do plamenem vysušené 250ml trojhrdlé baňky s kulatým dnem obsahující míchadlo se vloží 14,0 g sloučenin vytvořených podle popisu uvedeného výše (0,03778 mol, 1 ekv.). K nim se přidá 80 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Tato směs se míchá 10 minut nebo až se tuhá látka zcela rozpustí. Směs se ochladí na teplotu -78 °C za použití lázně suchého ledu a acetonu. Ke směsi se přidá 19,84 ml 2M roztoku lithiumdiisopropylamidu (0,03967 mol, 1,05 ekv.). Přidávání se provádí pomalu k udržení teploty pod -60 °C. Po dokončení přidávání se směs nechá 2,0 hodiny míchat při teplotě -78 °C, načež se suspenze pomalu zalije 4,70 ml jodmethanu (0,7556 mol, 2,0 ekv.). Teplota se během přidávání nenechá vzrůst nad -50 °C. Reakční směs se nechá pomalu ohřát na teplotu místnosti a míchá se 16 hodin. Roztok se odfiltruje ze sraženin a supernatant se odpaří „ve vakuu na odparek. Odparek se vyjme 60 ml ethyl-acetátu a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a nasyceným roztokem chloridu sodného (50 ml). Ethyl-acetátová vrstva se poté vysuší 4,5 gramy bezvodého síranu sodného a zfiltruje. Organická vrstva se odpaří na odparek „ve vakuu. Konečným produktem je zlatavý olej s konečným hrubým výtěžkem 9,10 g (62,6% výtěžek). HPLC ukazuje, že malé množství výchozího materiálu zůstává spolu • · · ·
9 «999 9999 s malým množstvím dimethylovaného vedlejšího produktu.
Tento meziprodukt se necharakterizuje a použije se „jak je v příštím kroku.
Produktem je čirá kapalina, která se destiluje ve vakuu při teplotě 140 °C a tlaku 133,3 Pa. Konečný výtěžek je 55,38 % po destilaci.
Kvantitativní 13C NMR (d-CDCl3) : C=O (1C, 176, 508); CAr-0 (2C, 153,411 a .152, 935 ppm); CAr-H (4C, 115,09 a 114,299 ppm); CH2-CH2-O (1C, 68,186 ppm); CH3-CH2-O (1C, 59, 782 ppm); CH3-0 (1C, 55,339 ppm); CH-CH3 (1C, 39,329 ppm); -CH2(5C, 33,465, 29,030, 26,888, 25,666 ppm); CH-CH3 (1C,
16,835 ppm); CH2-CH3 (1C, 14,012 ppm).
Výsledný produkt se hydrolyzuje podle způsobů popisovaných pro sloučeninu č. 47 k vytvoření sloučeniny č. 80. Výtěžek je 82,3 %. Produktem je bělavá tuhá látka. Teplota tání je 71 až 73 °C. Elementární rozbor: Teoreticky C = 68,55 %, H = 8,63 %; nalezeno C = 68,04 %, H = 8,65 %; kvantitativní 13C NMR (d6-DMSO) : C=O (1C, 177,668); CAr-0 (2C, 153,243 a 152,733 ppm); CAr-H (4C, 115,265 a 114,554 ppm); CH2-CH2-O (1C, 67,818 ppm); OCH3 (1C, 55, 305 ppm) ; CH-CH3 (1C, 33,340 ppm); -CH2- (5C, 33,340, 28,805, 26,742, 25,487, ppm); CH-CH3 (1C, 17,075 ppm).
Příprava sloučeniny č. 69
Ethylester 8-(4-methoxyfenoxy)-2-methyloktanové kyseliny se připraví podle popisu uvedeného výše. Výsledný produkt se hydrolyzuje podle způsobů popsaných pro sloučeninu č. 47 k vytvoření sloučeniny č. 69.
« « • · · ·
Výtěžek je 74,6 %. Produktem je bílá tuhá látka.
Teplota tání je 96 až 97 °C. Elementární rozbor: Teoreticky C = 67,65 %, H = 8,33 %; nalezeno C = 67,74 %, H = 8,44 %; kvantitativní 13C NMR (d6-DMSO) : C=O (1C, 174,628); CAr-0 (2C, 153,291 a 152,7987 ppm); CAr-H (4C, 115,251 a 114,562 ppm); CH2-CH2-O (1C, 67,844 ppm); OCH3 (1C, 55, 301 ppm) ; CH2-C-O (1C, 39,343 ppm); -CH2- (5C, 33,747, 28,700.,
25,545, 24,575 ppm).
Příprava sloučeniny č. 88
Směs 6,525 g (40 mmol) karsalamu, 10,26 g (44 mmol) 9-brom-l-nonanolu a 5,30 g (50 mmol) uhličitanu sodného ve 30 ml N,N-dimethylacetamidu (DMA) se zahřívá na teplotu 75 až 80 °C 3 hodiny. TLC (eluent: ethyl-acetát/heptan) ukazuje, že reakce je úplná. Reakční směs se opatrně vlije do směsi led-voda. Výsledná tuhá látka se 1 hodinu míchá. Zachytí se na nálevce ze slinutého skla, promyje se vodou, hexanem a vysuší ve vakuu k získání 9,80 g 3-(9-hydroxynonyl)-2H-1,3-benzoxazin-2,4(3H)-dionu (80 %). K suspenzi 6,11 g (20 mmol) 3-(9-hydroxynonyl)-2H-1,3-benzoxazin-2,9(3H)-dionu v 10 ml N,N-dímethylacetamidu při teplotě místnosti se přidá 20,9 ml (20,9 mmol) terc-butoxidu draselného v roztoku tetrahydrofuranu. Čirý hnědý roztok se velmi zahustí. Přidá se další DMA (10 ml) a směs se zahřívá na teplotu místnosti 5 minut. Přidá se 0,664 g (9 mmol) jodidu draselného, následovaného po kapkách přidanými 3,39 g (20 mmol) ethylbrom-acetátu. Reakční směs se 1 hodinu zahřívá na teplotu zpětného toku, ochladí se na teplotu okolo 35 °C a vlije se do směsi led-voda. Vytvoří se gumovitá látka. Supernatantní kapalina se slije a přidá se čerstvá voda. Tento postup se dvakrát opakuje. Gumovitá látka se rozpustí tetrahydrofuranu. Tetrahydrofuranový • · · · roztok se opatrně vlije do hexanu. Výsledná tuhá látka se zachytí, promyje hexanem a vysuší ve vakuu. Hmotnost požadovaného produktu je 2,36 g (35 %) . HPLC: 4,39 minut; tepota tání: 125 až 128 °C. XH NMR(M DSO d6) : δ 1,25, 12H, m; 1,37, 2H, m; 1,53, 2H, m; 3,28, 2H, m; 3,36, 2H, t; 4,85, 2H, s; 7,07, 2H, m; 7,45, 1H, t; 7,88, 1H, d; 8,70, 1H, t. Analyticky vypočítáno pro C18H27NO5: C, 69,07; H, 8,07; N, 4,15. Nalezeno: C, 63,71; H, 8,29; N, 4,31.
Příprava sloučeniny č. 93
Teplota tání: 57 až 59 °C.
Elementární rozbor: % C: 72,39 (vypočítáno), 72,75 (nalezeno; % H: 9,15 (vypočítáno), 9,44 (nalezeno).
Příprava sloučeniny č. 94
Teplota tání: 59 až 61 °C.
Elementární rozbor: % C: 71,16 (vypočítáno), 71,08 (nalezeno; % H: 8,53 (vypočítáno), 8,99 (nalezeno).
Příprava sloučeniny č. 95
Tato sloučenina je dostupná u Contact Service Company z Moskvy, Rusko.
Příprava sloučeniny č. 96
Tato sloučenina je dostupná u Contact Service Company z Moskvy, Rusko.
Příprava sloučeniny č. 97 ·· ··
4 · · 4 ·
4· 44
4 4 ♦ · 4 ♦ 4 4 f ·
4 *' 4 ··«····· <4
4 4 4 4 • 4 4 4 • 4· 444·
Tato sloučenina je dostupná u Sigma Company z Milwaukee, WI.
Příklad 2
Lososí kalcitonin (sCT) - orální podání
Prostředky k orálnímu podávání (PO) sloučeniny dodávacího činidla a lososího kalcitoninu (sCT) v deionizované vodě se připraví podle popisu předloženého v tabulce 2 uvedené dále. Typicky se 450 mg sloučeniny dodávacího činidla přidá ke 2,0 ml vody. Použije se buď sodná sůl sloučeniny nebo se volná kyselina převede na sodnou sůl mícháním výsledného roztoku a přidáním 1 ekvivalentu hydroxidu sodného (1,ON) a naředěním vodou. Roztok se vortexuje, poté se zahřeje (okolo 37 °C) a vystaví se působení ultrazvuku. Hodnota pH se upraví na asi 7 (od asi 6,5 do asi 8,5) pomocí hydroxidu sodného nebo kyseliny chlorovodíkové. K roztoku se přidá 90 pg lososího kalcitoninu z mateřského roztoku lososího kalcitoninu (2 mg/ml připravený přidáním 1000 % fosfátového pufru s hodnotou pH 4 k lososímu kalcitoninu a umožněním jeho rozpuštění stáním po dobu 10 až 20 minut a periodickým jemným obracením). Poté se přidá voda k dosažení celkového objemu 3,0 ml (mění se v závislosti na rozpustnosti sloučeniny dodávacího činidla) . Dávkovači roztoky obsahující sloučeniny dodávacího činidla č. 3 a 15 vyžadují další ředění vodou, přičemž konečné dávky 3 nebo 2 ml/kg se podají k dosažení požadovaného množství sloučeniny dodávacího činidla a lososího kalcitoninu. Dávkovači roztoky mají konečnou dávku sloučeniny dodávacího činidla, dávku lososího kalcitoninu a objemy dávky uvedenu dále v tabulce 2.
»4 · * * ♦ » · · * 4 4 4·
Typické dávkovači a vzorkovací protokoly jsou následující. Krysy kmene Sprague-Dawley o hmotnosti 200 až 250 g se 24 hodin drží bez přístupu k potravě a podá se jim ketamin (44 mg/kg) a chlorpromazin (1,5 mg/kg) 15 minut před podáním a znovu podle potřeby k udržení anestezie. Dávkovači skupině o počtu 5 zvířat se podá 1 z dávkovačích roztoků. Pro orální podání se připevní llcm katetr Rusch 8 French na Iml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Stříkačka se naplní dávkovacím roztokem násátím roztoku přes katetr, ktepý se poté vytře do sucha. Katetr se vloží do jícnu, přičemž 1 cm přesahuje přes řezáky. Roztok se podá stlačením stříkačky.
Vzorky krve se odebírají po řadě z ocasní arterie, obvykle v čase 0, 10, 20, 30, 60 a 90 minut.
Sérový lososí kalcitonin se stanoví testováním pomocí kitu EIA (kit č. EIAS-6003 od firmy Peninsula Laboratories, lne. San Carlos, CA). Čísla se upraví podle základních hodnot získaných v čase 0. Výsledky získané na zvířatech v každé dávkovači skupině se pro každý čas zprůměrují. Maximální hodnota je uvedena dále v tabulce 2.
Tabulka 2
Lososí kalcitonin (sCT) - orální podání
Sloučenina / dodávacího činidla -j Dávka sloučeniny (mg/kg) Dávka sCT (Lig / kg) . Objem dávky (ml) Střední sérový; pík sCT p (pg/ml ± SD)(SE)
1 150 30 1 317+405
1 150 30 1 398+237
1 150 30 1 410+471
2 150 30 1 6281221
2 150 30 1 4491550
2 150 30 1 3201348
3 150 30 3 0181
4 150 30 1 187+177
4 150 30 1 195+436
5 150 30 1 3491348
6 150 30 1 316+189
6 150 30 1 144+200
7 150 30 1 6771429
99 • 9 9 9 ·
99 • 9 9 9
9 9
9 9
9 9 • · · 9 · ·
9999
9 «
9 9
9 9
9 9 ·
9999 9999
Sloučenina ' dodávacího činidla j Dávka ' sloučeniny (mg/kg) Dávka ' sCT ; (pg/kg) Objem dávky (ml) '—1s Střední sérový: ! píksCT Γ j (pq/ml ± SD) (SE) |'
7 150 30 1 87+135
7 150 30 1 149+103
7 150 30 1 216+180
7 150 30 1 313+381
7 150 30 1,16 297+270
7 150 30 1 181+197
7 50 100 0#5 81+137
7 50 100 2731303
7 50 100 1 116+170 i
7 150 30 1 1481152
7 150 30 1 0
7 150 30 1 279 1 369
7 150 30 1 2201126
7 150 30 1 4381154
7 150 30 1 86+146
8 150 30 1 1661190
8 150 30 1 194+239
8 150 30 2 36+49
8 150 30 1 327+323
9 150 30 1 278+286
9 150 30 1 133+172
9 150 30 1 2551249
9 150 30 1 2861126
10 150 30 1 246+2]2
10 1 50 30 1 119+131
10 150 30 1 100+224
10 150 30 1 3521445
11 150 30- 1 526+415
12 150 30 1 3911278
12 50 100 1 316+476
12 50 100 0,5 445+221
12 150 30 1 224+106
12 150 30 1 170+233
12 150 30 1 286+267
12 150 30 1 195+172
12 150 30 1 150+132
12 150 30 1 273+206
12 150 30 1 170148
12 150 30 1 0198
12 150 30 1 151+80
12 150 30 1 3141255
12 150 30 1 184+177
12 150 30 1 412+275
12 150 30 1 79+92
12 150 30 1 168+169
12 150 30 1 206+286
12 150 30 1 293+414
12 150 30 1 180+263
ΦΦ « · •Φ ·«·φ • Φ ·
Φ Φ Φ
Φ φ · • Φ Φ
ΦΦ φ
Φφ Φ·
φ· ΦΦΦΦ • Φ Φ Φ φ
Φ
ΦΦΦΦ
Sloučenina ' dodávacího činidla 1 Ďávka sloučeniny (mg/kg) Dávka sCT (pg/kg) Objem dávky (ml) Střední sérový · píksCT Γ (pg/ml i SD) (SE)
12 150 30 1 226+148
12 150 30 1 507+413
12 150 30 1 1771188
12 150 30 1 2031227
12 150 30 1 330+462
12 150 30 1 1601188
12 150 30 1 2911269
12 150 30 1 170+246
12 150 30 1 199+236
12 150 30 1 137+133
12 150 30 1 207+164
12 150 30 1 203+120
12 150 30 1 182+153 1
12 150 30 1 181+270
12 1.50 30 1 2191262
12 150 30 1 2761163
12 150 30 1 1961131
12 150 30 1 1851192
12 150 30 1 751169
12 150 30 1 1251164
12 150 30 1 1181265
12 150 30 1 2071207
12 . 150 30 1 2241313
12 150 30 1 190+244
12 150 30 1 336+347
12 150 30 1 2091118
12 150 30 1 302+257
12 150 30 1 225+258
12 150 30 1 227+233
12 150 30 1 172+296
14 150 30 1 568+247
14 150 30 1 ‘ 199+180
14 150 30 1 117+166
14 150 30 1 196+155
15 150 30 2 116+88
18 150 30 2 14+4183
19 150 30 1 206+131
19 150 30 1 79±176
19 150 30 1 224+501
19 150 30 1 1101125
19 150 30 1 170+161
19 150 30 1 1281155
20 150 30 1 138+107
20 150 30 1 8 5182
20 150 30 1 961135
21 150 30 1 181+128
21. '150 30 1 215+232
21 150 30 1 8 9+98
• 4 •4 ·4·4 ·· ·» * 4 ♦ 4
4 ' 4 · · • 44 ·· «444
4
Sloučenina f Dávka 5 Dávka Objem Střední sérový
dodávacího ; sloučeniny sCT dávky pík sCT
činidla_ _ j (mg/kg) (Hg/kg) (ml) (pg/ml 1 SD) (Sf.)
22 150 30 1 3091152
2 2 150 30 1 2901174
22 150 30 1 273+281
22 150 30 1 148+162
2 3 150 30 1 161+150
23 150 30 1 122+273
2 4 150 30 1' 1421135
24 150 30 1 2114 8
24 150 30 1 665+1487
25 150 30 1 53177
27 150 30 1 1631106
28 150 30 1 138190
29 150 30 1 2331207
29 150 30 1 1931215
29 150 30 1 921408
30 150 30 1 1661185
30 150 30 1 1661106
30 150 30 1 122+119
30 150 30 1 3131487
31 150 30 1 1651119
31 150 30 1 70+99
31 150 30 1 84+78
32 150 30 1 1751148
32 150 30 1 103+75
32 150 30 1 1871135
33 150 30 1 961209
34 150 30 1 103172
34 150 30 1 137+178
36 150 30 1 0162
37 150 30 1 126+48
37 150 30 1 1491184
37 150 30 1 179+232
37 150 30 1 63+91
38 150 30 1 200+158
• •♦4 • 4 4 4
4 *
· •444 4444
4 • 4
4
4
4
4
4
4
4 «
4
4444
Sloučenina ' Dávka 1 Dávka | Objem Střední sérový '· i
dodávacího sloučeniny ( sCT dávky píksCT
činidla i (mg/kg) | (pg/kg) (ml) (pg/mJ. 1 SD) ( SE )
38 150 30 1 104+130
39 150 30 1 1151120
39 150 30 1 1151178
43 150 30 1 50171
44 150 30 1 188+184
45 150 30 1 1251187
45 150 30 1 172+158
47 150 ' 30 1 62199
48 150 30 4 35 + 4 9
48 150 30 3 95+156
49 150 30 1 4791291
49 150 30 1 170+75
49 150 30 1 891129
51 150 30 1 4 9+4 5
51 150 30 1 203+227
51 150 30 1 207+207
51 150 30 1 226+220
52 150 30 1 163+300
54 150 30 1 '34+47
56 150 30 1 165+243
56 150 30 1 90+125
56 150 30 1 113+115
56 150 30 1 175+150
62 150 30 1 117+158
64 150 30 1 138+148
66 150 30 4 109+244
67 150 30 2 6811419
67 150 30 1 1421142
67 150 30 1 256+158
71 150 30 2 302+246
71 150 30 1 4 5+62
71 150 30 1 146+328
*·♦·
4« »99» 9 * • 4 4 ·
4 4
4444 444· 44 ·· 44 • 4 4·· • 4 4 4
Sloučenina dodávacího činidla Dávka sloučeniny (mg/kg) ! Dávka sCT (gg/kg) Objem dávky ' i (ml) Střední sérový γ pík sCT (pg/ml ± SD) (SE)
72 150 30 1 5581576
72 150 30 1 2241409
78 150 30 1 541121
78 150 30 1 1541167
78 150 30 1 1071158
79 150 30 1 133190
Příklad 3
Rekombinantní lidský růstový hormon (rhGH) - orální podání
Roztoky k orálnímu podávání sondou (PO) sloučeniny dodávacího činidla a rekombinantího lidského růstového hormonu (rhGH) ve fosfátovém pufru se připraví míšením. Roztok sloučeniny dodávacího činidla se připraví buď ze sodné soli sloučeniny dodávacího činidla nebo se volná kyselina převede na svou sodnou sůl. Obvykle se roztok sloučeniny dodávacího činidla připraví ve fosfátovém pufru a míchá se, přičemž se při přípravě sodné solí přidá · *···
4 4· • 4 · 4 4» 4 4
4444 44 4
4 4 44 4 44 δθ .................
ekvivalent hydroxidu sodného (l,0N). Konečné dávkovači roztoky se připraví smísením sloučeniny dodávacího činidla s matečným rotzokem rekombinantního lidského růstového hormonu (15 mg rekombinantního lidského růstového hormonu/ml připraveného smísením prášků 15 mg rekombinantního lidského růstového hormonu, 75 mg D-mannitolu, 15 mg glycinu a 3,39 hydrogenfosforečnanu sodného, poté naředěním 2% glycerolem) a naředěním na požadovaný objem (obvykle 3,0 ml). Hodnota pH se upraví, pokud je to nezbytné, na hodnotu od asi 7 do asi 8,5. Množství sloučenin dodávacího činidla a rekombinantního lidského růstového hormonu jsou uvedeny dále v tabulce 3.
Typické dávkovači a vzorkovací protokoly jsou následující. Krysy kmene Sprague-Dawley o hmotnosti 200 až 250 g se 24 hodin drží bez přístupu k potravě a podá se jim ketamin (44 mg/kg) a chlorpromazin (1,5 mg/kg) 15 minut před podáním a znovu podle potřeby k udržení anestezie. Dávkovači skupině o počtu 5 zvířat se podá 1 z dávkovačích roztoků, llcm katetr Rusch 8 French se připevní na lml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Stříkačka se naplní dávkovacím roztokem násátím roztoku přes katetr, který se poté vytře do sucha. Katetr se vloží do jícnu, přičemž 1 cm přesahuje přes řezáky. Dávkovači roztok se podá stlačením stříkačky.
Vzorky krve se odebírají po řadě z ocasní arterie, obvykle v čase 15, 30, 45, 60 a 90 minut. 5 vzorků z každého času odběru se slije (kromě vzorků, pro které je sdělena standardní odchylka (SD) a standardní chyba (SE)). Koncentrace sérového rekombinantního lidského růstového hormonu se kvantifikují pomocí imunologického křtu pro stanovení rekombinantního lidského růstového hormonu (kit »»»'
9 9» • 9 9 9 • ·
99
9 9 9
9 9
9 9
9999
č. K1F4015 od firmy Genzyme Corporation lne., Cambridge, MA) . Předchozí studie ukazují základní hodnoty okolo 0. Maximální koncentrace pro každou skupinu je uvedena dále v tabulce 3.
Tabulka 3
Rekombinantní lidský růstový hormon (rhGH) - orální podání
Sloučenina dodávacího činidla_____ Dávka sloučeniny dodávacího činidla (mg/kg) Dávka rhGH (mg/kg) Objem dávky (ml) Střední sérový pík (rhGH) (ng/ml)
1 200 3 1 95,5
1 200 3 1 30,9
1 200 3 1 76,2
1 200 3 1 37,2 ± 50
4 200 3 1 12,6
5 200 3 1 127
5 200 3 1 223
5 200 3 1 56,5
7 200 3 1 8,8
7 200 3 1 58,9
7 200 3 1 29,1 ± 58,2
8 200 3 1 4,88
9 200 3 1 1
10 200 3 1 34, 3
11 . 200 O u 1 - 35,4
12 200 3 1 12.,7
12 200 3 1 44,3
14 200 3 1 19,8
15 200 3 1 83,9
15 200 3 1 47,3
15 200 3 1 44.7
15 200 3 1 27,4 ± 37,3
18 200 3 1 22 3
18 162 2.6 1 3,1
19 200 3 1 39,5
20 200 3 1 22,6
21 200 3 1 19,6
22 200 3 1 0
24 200 3 1 1.7 6
25 200 3 1 0
26 200 3 1 8,3
27 200 3 1 12,9
28 200 3 1 90, 1
28 200 3 1 121
·· 9 9 • 999 4 9 4 • 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 • 4 4 4 4
4444 4444 44 4 e* ♦*»·
4
4444
Sloučenina ' dodávacího Situuj .Dávka sloučeniny dodávacího činidla (mg/kg) Dávka rhGH (mg/kg) Objem dávky (ml) Střední sérový pík (rhGH) (ng/ml)
r_> co 1 1 i 200 3 1 19,2
29 200 3 . 1 0
30 200 3 1 40,5
30 200 3 1 0
30 200 3 1 0
30 200 3 1 5,27
32 200 3 1 0
33 200 3 1 10,1
33 200 3 1 6, 9
34 200 3 1 0
34 200 3 1 7,8
36 200 3 1 0
37 200 3 1 29
39 200 3 1 0
43 200 3 1 9,49
43 200 3 1 42,2 ± 41
45 200 3 1 11.· 2
45 200 3 1 22,8
45 200 3 1 42,9
47 200 3 1 11,6
47 200 3 1 14 4
47 200 3 1 81,7
47 200 3 1 41,7
47 200 3 1 85,7
47 200 3 2 9,9 ± 22,1
47 200 3 1 34,1 ± 42,2
47 200 3 1 9,41
47 200 3 1 132
49 200 3 1 41,3
49 200 3 1 0
49 200 3 1 20,1
52 ' 200 3 1 0
54 200 3 1 6,37
55 200 3 1 12,4
56 200 3 1 0
60 200 3 1 1,5 ± 3,3
62 200 3 1 6,2
64 200 3 1 5
66 200 3 1 0
67 200 3 1 15
67 200 3 1 14,7
71 200 3 3 5,94
♦ · ·· ► 4 ♦ 4
9999
99
9 9 · • · * • 9 · • · · •4 4···
Sloučenina dodávacího činidla Dávka sloučeniny dodávacího činidla (mg / kg) Dávka rhGH (mg/kg) Objem dávky (ml) Střední sérový pík (rhGH) (ng/ml)
72 200 3 1 28
78 200 3 1 0
79 200 3 1 1,. 4 8
79 200 3 1 17,8
Příklad 4
Heparin - orální/intratračníkové podání
Dávkovači roztoky pro orální podání sondou (PO) a/nebo intratračníkové podání (IC) obsahující sloučeninu dodávacího činidla a sodnou sůl heparinu dle USP se připraví ve 25% vodném propylenglykolu. Použije se buď sodná sůl sloučeniny nebo se volná kyselina převede na sodnou sůl mícháním výsledného roztoku a přidáním 1 ekvivalentu hydroxidu sodného. Obvykle se sloučenina *« 00 0* 0000 4 4 0 0 0 · · • · 0 0 0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0000 0000 00 0
0 0 00 0000 dodávacího činidla a heparin (asi 166 až 182 m.j./mg) (obvykle 1669,9 m.j./mg) smísí vortexováním jako suché prášky. Tato suchá směs se rozpustí v objemově 25% vodném propylenglykolu, vortexuje se a vloží se do sonikátoru (při teplotě okolo 37 °C). Hodnota pH se upraví na hodnotu okolo 7 (6,5 až 8,5) pomocí vodného roztoku hydroxidu sdoného (2N). Dávkovači roztok se vystaví působení ultrazvuku k vytvoření čirého roztoku. Konečný objem se upraví na asi 3,0 ml. Dávka sloučeniny dodávacího činidla, dávka heparinu a objemy podaných dávek jsou uvedeny dále v tabulce 4.
Typické dávkovači a vzorkovací protokoly jsou následující. Krysy kmene Sprague-Dawley o hmotnosti 275 až 350 g se 24 hodin drží bez přístupu k potravě a anestetizují se ketaminem (88 mg/kg) intramuskulárně bezprostředně před podáním a znovu podle potřeby k udržení anestezie. Dávkovači skupině o počtu 5 zvířat se podá 1 z dávkovačích roztoků. Pro orální podání sondou se připevní llcm katetr Rusch 8 French na lml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Stříkačka se naplní dávkovacím roztokem násátím roztoku přes katetr, který se poté vytře do sucha. Katetr se vloží do jícnu, přičemž 1 cm přesahuje přes řezáky. Roztok se podá stlačením stříkačky. Pro intratračníkové (IC) podání se připevní 7,5cm katetr 8 fr Rusch na lml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Dávkovači katetr se zavede do tračníku konečníkem až není hadičku více vidět. Dávkovači roztok se vytlačuje pomalu do tračníku stlačením stříkačky.
Citrátované vzorky krve se odebírají kardiální punkcí po podání ketaminu (88 mg/kg), obvykle v čase 0,25, 0,5, 1,0 a 1,5 hodiny po podání. Absorpce heparinu se ověří prodloužením času srážení měřeného prostřednictvím aktivovaného částečného tromboplastinového času (APPT) • 99* • 9 *
· 4 9 9 » *
9 > 9 » · • 9 9*9
9999 9999 «» 9
9»
9 9 · • 9 9
9 · ·
9« »9 »e#· podle způsobu, který popsal J. B. Henry, Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, Filadelfie, PA, W.B. Saunders (1979). Předchozí studie ukazují základní hodnoty okolo 20 sekund. Výsledky ze zvířat v každé skupině se pro každý časový bod zprůměrují, přičemž nejvyšší z těchto průměrů (tj. střední píkový.APPT) je uveden dále v tabulce
4.
Tabulka 4
Heparin - orální/intratračníková podání
Sloučenina dodávacího činidla 1 Způsob podáni Dávka sloučeniny dodávacího činidla (mg/kg) Dávka heparinu (mg/kg) Objem ) dávky (ml) 1 Střední pík ' APTT (sek) ±SD
1 IC 50 25 1 130,84 ± 118,18
1 IC 50 25 1 231,34
2 IC 50 25 1 48,788 + 32,79
3 IC 50 25 1 16,046 ± 0,481
3 IC 5 0 25 1 16,984 ±
1,4 5
4 IC 50 25 1 40^3 ± 17 , 8
4 IC 50 25 1 23,076 ± 4.72
4 IC 50 25 1 37,148 ± 39.67
5 PO 300 100 3 135,7 ± 17,3
' 6 IC 50 25 1 157,4 ± 33,7
6 PO 300 100 3 193 ± 61,2
6 IC 50 25 1 99,8 ± 50,6
Ί IC 50 25 1 130,5 ± 42,6
7 IC 50 25 1 92 ± 40,3
7 IC 50 25 1 99,4 ± 25,5
8 IC 50 25 1 2 51,94 + 67.96
9 IC 50 25 1 21,45 ± 1,71
10 IC 50 25 1 81,8 + 7
10 IC 50 25 1 63,5
11 IC 50 25 1 39,53 ± 8,25
12 IC 50 25 1 219,5 ± 128,4
12 IC 50 25 1 169,6 ± 68.6
12 PO 300 100 3 201,4 ± 45„7
• · • · · : : . . · · • · .. » ·· ···· ······♦· · ·
Sloučenina dodávacího Činidla 3 Způsob podání Dávka sloučeniny dodávacího činidla (mg/kg) Dávka . heparinu (mg/kg) Objem dávky (ml) Střední pík APTT(sek) ) + SD
12 IC 50 25 1 115,81 ± 159,-53
12 IC 50 25 1 236,8
12 IC 50 25 1 300
12 IC 50 25 1 255,452 ± 41,99
12 IC 50 25 1 167,08 ± 81,62
12 IC 50 25 1 195,884 ± 142,628
12 IC 50 25 1 279^,076 ± 46,79
12 IC 50 25 1 220,164 ± 109,57
12 IC 50 25 1 300
22 IC 50 25 1 287,, 9 ±
120,1
26 IC 50 25 1 76,7
26 IC 50 25 1 4 1 j. 5 3 4 ± 2 5,56
27 IC 50 25 1 8 5,7
27 IC 50 25 1 279,182 ± 4 6,55
28 IC 50 25 1 . 143,6± 44
28 IC 50 25 1 251,1 ± 109,34
29 IC 50 25 1 105,01 ± 115,28
29 IC 50 25 1 111,46 ± 108ř58
30 IC 50 25 1 50,9 ± 20,5
31 IC 50 25 1 47 ± 23,1
32 IC 50 25 1 2 6,5 ±2-3
35 IC 50 25 1 65.8 ± 35,5
47 IC 50 25 1 370,3 ± 97.8
51 IC 50 25 1 92,5 + 41,5
54 IC 50 25 1 31,56 ± 7,54
62 IC 50 25 1 152,41± 136#63
62 IC 50 25 1 -91,204 + 117.43
64 IC 50 25 1 220,988 ± 122,2
64 IC 50 25 1 125,372 ± 114,72
• 9 «9 9999 • 9 ·· · · »99 9999
Příklad 5
Hepartin s nízkou molekulovou hmotností (LMWH) - orální /intratračníkové podání
Prostředky pro orální podání sondou (PO) a/nebo intratračníkové podání (IC) obsahující sloučeninu dodávacího činidla a heparin nízkou molekulovou hmotností (LMWH) se připraví ve 25% vodném propylenglykolu. Použije se buď sodná sůl sloučeniny nebo se volná kyselina převede na sodnou sůl mícháním výsledného roztoku a přidáním 1 ekvivalentu hydroxidu sodného. Obvykle se sloučenina dodávacího činidla a heparin s nízkou molekulovou hmotností (Parnaparin, 91 m.j./mg, průměrná molekulová hmotnost okolo 5000, dostupný od firmy Opocrin, Modena, Itálie) obvykle se 90 až 105 m.j./mg, průměrná molekulová hmotnost okolo 5000) smísí vortexováním jako suché prášky. Tato suchá směs se rozpustí v objemově 25% vodném propylenglykolu, vortexuje se a vloží se do sonikátoru (při teplotě okolo 37 °C). Hodnota pH se upraví na hodnotu okolo 7 (6,5 až 8,5) pomocí vodného roztoku hydroxidu sodného (2N). Dávkovači roztok se vystaví působení ultrazvuku k vytvoření čirého roztoku. Konečný objem se upraví na asi 3,0 ml. Konečná dávka sloučeniny dodávacího činidla, dávka heparinu a objemy podaných dávek jsou uvedeny dále v tabulce. 5.
Typické dávkovači a vzorkovací protokoly jsou následující. Krysy kmene Sprague-Dawley o hmotnosti 275 až 350 g se 24 hodin drží bez přístupu k potravě a anestetizují se ketaminem (88 mg/kg) intramuskulárně bezprostředně před podáním a znovu podle potřeby k udržení anestezie. Dávkovači skupině o počtu 5 zvířat se podá 1 z dávkovačích roztoků. Pro orální podání sondou se připevní llcm katetr • ·
Rusch 8 French na lml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Stříkačka se naplní dávkovačům roztokem násátím roztoku přes katetr, který se poté vytře do sucha. Katetr se vloží do jícnu, přičemž 1 cm přesahuje přes řezáky. Roztok se podá stlačením stříkačky. Pro intratračníkové (IC) podání se připevní 7,5cm katetr 8 fr Rusch na lml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Dávkovači katetr se zavede do tračníku konečníkem až není hadičku více vidět. Dávkovači roztok se vytlačuje pomalu do tračníku stlačením stříkačky.
Citrátované vzorky krve se odebírají kardiální punkcí po podání ketaminu (88 mg/kg), obvykle v čase 0,5, 1,0, 2,0, 3,0 a 4,0 hodiny po podání. Absorpce heparinu s nízkou molekulovou hmotností se měří stanovením pomocí protilátky proti faktoru Xa CHROMOSTRATE™ Heparin anti-Xa assay (dostupný od firmy Organon Teknika Corporation, Durham, NC). Plasmatické koncentrace heparinu s nízkou molekulovou hmotností u zvířat v každé skupině se zprůměrují pro každý časový bod a tyto střední plasmatické koncentrace heparinu s nízkou molekulovou hmotností se vynesou proti času. Pík těchto středních plasmatických koncentrací heparinu s nízkou molekulovou hmotností je uveden v tabulce 5
Tabulka 5
Heparin s nízkou molekulovou hmotností - orální/intratračníkové podání • «
Sloučenina ! dodávacího činidla | Způsob podání Dávka sloučeniny dodávacího činidla (mg/kg) Dávka LMWH (m.j./ kg) Objem dávky (ml/kg) Střední pík plasmatické koncentrace LMWH (m.j./ml) + SD
1 IC 50 750 1 1,038 ± 0.338
1 IC 50 750 1 1,734 ± 0,192
1 IC 25 750 1 1,022 ± 0,432
2 IC 50 750 1 1,038 ± 0,338
6 IC 25 750 1 0,47 ± 0.17
7 PO 300 3000 3 0.5 ± 0.412
7 IC 50 750 1 1.264 + 0,207
7 IC 50 750 1 1,716 ± 0,105
7 IC 25 750 1 0,9 ± 0,252
9 IC 50 750 1 0,474 ± 0,095
10 IC 50 750 1 0,088 ± 0f121
11 IC 50 750 1 θ’,91 ± 0,414
12’ PO 300 3000 3 0^,137 ± 0,18
12 IC 50 751 1 1,5 ± 0,23
12 IC 50 750 1 1,7 ± 0t308
12 IC 50 750 1 lf74 ± 0,304
12 IC 50 750 1 2,012 ± 0.124
12 IC 25 750 1 1,66 ± 0,302
12 IC 25 750 1 Oj 97 4 + 0,50 3
12 IC 10 750 1 0,2 ± 0,07 7
12 IC 25 750 1 0,624 ± 0f247 '
12 IC 50 750 1 1,498 ± 0,462
19 IC 50 750 1 0,65 ± 0,37
22 IC 50 . 750 1 1,842 ± 0,205
22 IC 25 750 1 1,496 ± 0,153
22 IC 10 . 750 1 0,396 ± 0,153
26 IC 50 750 1 0*262 ± 0,106
27 IC 50 750 1 1j 622 ± 0,265
28 IC 50 750 1 1,64 ± 0,45
28 IC 25 750 1 l' 4 3 + 0,31
30 IC 50 750 1 0,162 ± 0,094
30 • IC 50 750 1 θ', 288 ± 0,152
31 IC 50 750 1 0,47 ± 0,287
31 IC 50 750 1 0,47 ± 0.332
32 IC 50 750 1 0,07 + 0,01
54 IC 50 750 1 3,046 ± 0,422
65 IC 50 750 1 ři 0.64 2
66 IC 50 750 1 0 .· 952
66 IC 50 750 1 1 1
Příklad 6 tt »w·’
Parathyroidní hormon (PTH 1 až 34) - orální/intratračníkové podání
Připraví se roztoky k orálnímu podání sondou (PO) a/nebo intratračníkovému podání sloučeniny dodávacího činidla a zbytků lidského parathyroidního hormonu 1 až 34 (PTH) v deionizované vodě. Roztok sloučeniny se připraví buď ze sodné soli sloučeniny dodávacího činidla nebo se volná kyselina převede na svou sodnou sůl. Obvykle se roztok sloučeniny dodávacího činidla připraví ve vodě a míchá se, přičemž se při přípravě sodné soli přidá 1 ekvivalent hydroxidu sodného (l,0N). Konečné dávkovači roztoky se připraví smísením roztoku sloučeniny dodávacího činidla s matečným rotzokem parathyroidního hormonu (obvykle ve vodě s koncentrací 5 mg PTH/ml) a naředěním na požadovaný objem (obvykle 3,0 ml). Hodnota pH se upraví, pokud je to nezbytné, na hodnotu od asi 7 do asi 8,5. Konečné dávky sloučeniny dodávacího činidla a parathyroidního hormonu a objemy dávek jsou uvedeny dále v tabulce 6.
Typické dávkovači a vzorkovací protokoly jsou následující. Krysy kmene Sprague-Dawley o hmotnosti 200 až 250 g se 24 hodin drží bez přístupu k potravě a podá se jim ketamin (44 mg/kg) a chlorpromazin (1,5 mg/kg) 15 minut před podáním a znovu podle potřeby k udržení anestezie. Dávkovači skupině o počtu 5 zvířat se podá 1 z dávkovačích roztoků. Pro orápní podání sondou se připevní llcm katetr Rusch 8 French na lml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Stříkačka se naplní dávkovacím roztokem násátím roztoku přes katetr, který se poté vytře do sucha. Katetr se vloží do jícnu, přičemž 1 cm přesahuje přes řezáky. Dávkovači
· *
roztok se podá stlačením stříkačky. Pro intratračníkove (IC) podání se na stříkačku připevní pomocí špičky na Eppendorfovu pipetu 7,5cm hadička Ruschova katetru (French 8 nebo 6) . Stříkačka se naplní dávkovacím roztokem nasátím roztoku přes hadičku katetru. Hadička katetru se vytře do sucha. Na špičku se nanese K-Y gel, čímž se zamezí kontaktu s očkem hadičky a hadička se zavádí konečníkem do tračníku až není více vidět. Dávkovači roztok se injikuje stlačením stříkačky a hadička se vyjme.
Vzorky krve se odebírají postupně z ocasní arterie, obvykle v časech 0, 15, 30, 45, 60 a 90 minut pro oráoní a 0, 10, 20, 30, 60 a 90 minut pro intratračníkové podání. Koncentrace sérového parathyroidního hormonu se kvantifikují pomocí radioimunologického kitu pro parathyroidní hormon (kit č. RIK 6101 od firmy Peninsula laboratories, lne., San Carlos, CA). Předchozí studie ukazují, že základní hodnota je okolo 0. Výsledky získané na zvířatech se pro každý časový bod zprůměrují. Maximum těchto průměrů (tj. střední píková sérová koncentrace parathyroidního hormonu) je uvedena dále v tabulce 6.
Tabulka 6
Parathyroidní hormon - orální (PO) podání
Sloučenina dodávacího 1 činidla Dávka sloučeniny dodávacího činidla (mg/kg) Dávka » PTH (pg/kg) Objem ; dávky (ml/kg! Střední pík sérového PTH (pg/ml + SD
12 100 200 1 276 ± 252
30 100 200 1 78 ± 71
31 100 200 1 460 ± 194
33 100 200 1 837 + 347
34 100 200 1 538 ± 328
51 100 200 1 420 ± 305
51 100 200 1 287 + 120
51 100 200 1 478 ± 230
51 100 200 1 798 ± 518
• · · ·
• · • · · • ·
Příklad 7
Interferon - orální podání
Dávkovači roztoky sloučeniny dodávacího činidla a lidského interferonu se připraví v deionizované vodě. Volná kyselina sloučeniny dodávacího činidla se převede na sodnou sůl 1 ekvivalentem hydroxidu sodného. Obvykle se roztok sloučeniny dodávacího činidla připraví ve vodě a míchá se, přičemž se při přípravě sodné soli přidá 1 ekvivalent hydroxidu sodného (1,ON). Tato směs se vortexuje a vystaví se působení ultrazvuku (okolo 37 °C). Hodnota pH se upraví na od asi 7,0 do asi 8,5 pomocí vodného roztoku hydroxidu sodného. Směs se vortexuje k vytvoření jednolité suspenze nebo roztoku, rovněž za použití působení utrazvuku a zahřívání, pokud je to nezbytné. Pokud je to nezbytné přidá se k dosažení jednolité rozpustnosti další hydroxid sodný a hodnota pH se znovu upraví na od asi 7,0 do asi 8,5. Roztok sloučeniny dodávacího činidla se smísí s matečným roztokem interferonu (okolo 22,0 až 27,5 mg/ml ve fosfátem pufrovaném fyziologickém roztoku) a naředěním na požadovaný objem (obvykle 3,0 ml). Konečné dávky sloučeniny dodávacího činidla a interferonu a dávkovači objemy jsou uvedeny dále v tabulce 7.
Obvyklé dávkovači a vzorkovací protokoly jsou následující. Krysy kmene Sprague-Dawley o hmotnosti 200 až 250 g se 24 hodin drží bez přístupu k potravě a podá se jim ketamin (44 mg/kg) a chlorpromazin (1,5 mg/kg) 15 minut před podáním a znovu podle potřeby k udržení anestezie. Dávkovači skupině o počtu 5 zvířat se podá 1 z dávkovačích roztoků. Pro orální podání se připevní llcm katetr Rusch 8 French na lml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Stříkačka • · » · se naplní dávkovacím roztokem násátím roztoku přes katetr, který se poté vytře do sucha. Katetr se vloží do jícnu, přičemž 1 cm přesahuje přes řezáky. Dávkovači roztok se podá stlačením stříkačky.
Vzorky krve se odebírají po řadě z ocasní arterie, obvykle v čase 0, 15, 30, 45, S0 a 90 minut. Sérové koncentrace interferonu se stanoví pomocí kitu pro stanovení lidského interferonu-alfa Cytoscreen Immunoassay Kit (katalogové č. KHC4012 od firmy Biosource International, Camarillo, CA). Předchozí studie ukazují, že základní hodnota je okolo 0. Výsledky získané na zvířatech se pro každý časový bod zprůměrují. Maximum těchto průměrů (tj. střední píková sérová koncentrace interferonu) je uvedena dále v tabulce 7.
Tabulka 7
Interferon - orální podání
Sloučenina dodávacího činidla Dávka z sloučeniny , dodávacího' činidla (mg/kg) Dávka 1FN (mg/kg) Objem dávky (ml/kg) Střední pík sérového IFN ) (ng/ml) + SD
1 200 1 1 17f357 + 38
5 200 1 1 5,1042 ± 3,4
5 50 0.5 1 1,54 ± 0,2 6
5 200 1 1 1,1838 ± 1t42
5 50 0 . 5 1 2,1 ± 0,95
5 200 1 1 1,51 ± 1,9
• · ·· • · · ···· ·
1- Sloučenina dodávacího činidla Dávka sloučeniny dodávacího | činidla (mg/kg) Dávka IFN (mg/kg} Objem dávky (m 1 / k g ) Střední pík sérového IFN (ng/mii + SD
5 200 1 1 4,11 ± 2 '
5 200 1 1 7,5769 ± 5
6 200 1 1 0,5696 ± 0,8
7 400 1 1 0,223
7 200 1 1 3,9308 + 3.2
12 200 1 1 1 /63 62 ±1,68
15 200 1 1 6,0324 ± 2,8
28 200 1 1 2,185 ± 2,68
28 200 1 1 0.8 ±1,7 |
32 200 1 1 ’ o ‘
43 200 1 1 1 ± 2,1
43 200 1 1 1,206
47 200 1 1 1.1 ± 0,85
59 200 1 1 0.56 ± 1
59 2C0 1 1 0
67 200 1 1 3.4451 ± 4,5
73 200 1 i 0,76 ± 0,7
73 200 1 1 0^22 ± 0 „5
Příklad 8
Inzulín - orální podání
Dávkovači roztoky sloučeniny dodávacího činidla a lidského zinečnatého inzulínu (minimálně 26 m.j./mg dostupného od firmy Calbiochem - Novabiochem Corp, La Jolla, CA) se připraví v deionizované vodě. Obvykle se do 1,5 ml vody přidá 500 mg sloučeniny dodávacího činidla. Volná kyselina sloučeniny dodávacího činidla se převede na sodnou sůl mícháním výsledného roztoku a přidáním 1 ekvivalentu hydroxidu sodného. Roztok se vortexuje, poté se zahřeje (okolo 37 °C) a vystaví se působení ultrazvuku. Hodnota pH se upraví na hodnotu od asi 7,0 do asi 8,5 pomocí hydroxidu sodného nebo kyseliny chlorovodíkové.
Pokud je to nezbytné přidá se k dosažení jednolité rozpustnosti další hydroxid sodný a hodnota pH se znovu • · *· ·*. » · · « • ·· · ···· • · ·· ·· ···· upraví na od asi 7,0 do asi 8,5. Poté se přidá voda k dosažení celkového objemu okolo 2,4 ml a vortexuje se.
K roztoku se přidá 1,25 mg inzulinu z matečného roztoku inzulínu (15 mg/ml připravených z 0,5409 g inzulinu a 18 ml deionizované vody, hodnota pH se upraví na 8,15 pomocí kyseliny chlorovodíkové a hydroxidu.sodného a k získání čirého roztoku za použití 40 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové, 25 ml ION hydroxidu sodného a 50 ml 1N hydroxidu sodného) a mísí se obracením. Konečné dávky sloučeniny dodávacího činidla, dávky inzulinu a dávkovači objemy jsou uvedeny dále v tabulce 8.
Obvyklé dávkovači a vzorkovací protokoly jsou následující. Krysy kmene Sprague-Dawley o hmotnosti 200 až 250 g se 24 hodin drží bez přístupu k potravě a podá se jim ketamin (44 mg/kg) a chlorpromazin (1,5 mg/kg) 15 minut před podáním a znovu podle potřeby k udržení anestezie. Dávkovači skupině o počtu 5 zvířat se podá 1 z dávkovačích roztoků. Pro orální podání se připevní llcm katetr Rusch 8 French na lml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Stříkačka se naplní dávkovačům roztokem násátím roztoku přes katetr, který se poté vytře do sucha. Katetr se vloží do jícnu, přičemž 1 cm přesahuje přes řezáky. Dávkovači roztok se podá stlačením stříkačky.
Vzorky krve se odebírají po řadě z ocasní arterie, obvykle v čase 0, 15, 30, 60, 120 a 180 minut. Sérové hladiny inzulinu se stanoví pomocí Insulin ELISA Test Kit (kit č. DSL-10-1600 od firmy Díagnostíc Systems Laboratories, lne., Webster, TX) , přičemž standardní protokol se upraví k optimalizaci citlivosti a lineárního rozmezí standardní křivky pro objemy a koncentrace vzorků použitých v předloženém protokolu. Sérové koncentrace • · lidského inzulínu (pj/ml) se pro každý časový bod změří pro všech 5 zvířat v každé dávkovači skupině. 5 hodnot pro každý časový bod se zprůměruje a výsledky se vynesou jako sérová koncentrace inzulínu v čase. (Předchozí experimenty neodhalily žádné měřitelné hladiny lidského inzulínu po orálním podání samotného lidského inzulínu.) Maximum (pík) a plocha pod křivkou (AUC) jsou uvedeny dále v tabulce 8.
Tabulka 8
Inzulín - orální podání
' Sloučenina dodávacího . i činidla Dávka t sloučeniny dodávacího i činidla (mg/kg) Dávka inzulínu (mg/kg) Objem dávky (ml/kg) Střední pík sérového inzulínu 1 SD
1 100 3 1 74 f 23711144 ř49
3 200 °l5 1 29.95+46,,13
6 200 0f5 1 129,51131,5
7 100 3 1 130,9724+83,7
7 200 0Ě5 1 88,06+33 f72
7 200 1 320,1+520,4
7 200 0?5 1 200,21118, 7
7 200 0,5 1 164,2+134.7
7 200 0,5 1 214,7+100,86
7 200 0?5 1 56.71147,04
7 200 0f 5 1 17,4+21,8
8 200 - 0,5 1 13,1416.81
10 100 3 1 63.58841129,23
12 100 3 205,4+333,4
15 100 3 1 1332^211906,4
15 200 0?5 1 540,7+580,12
15 200 0,5 1 18,62+12,54
15 200 0,5 1 155,6+125,2
15 200 0ř 5 1 169,3+140,78
19 200 0,5 1 4,32+1,39
, 20 200 0,5 1 27,68+12,5
21 200 0ř 5 1 14.46121.61
22 200 0,5 1 2 4.16+2 8,11
«**:·”*. Γί .* .· ,· * : i 1 ··*» »*»· ** 4 • · ·
- Sloučenina / dodávacího Dávka sloučeniny Dávka ' inzulínu Objem dávky Střední pík sérového inzulínu
činidla j dodávacího činidla (mg/kg) (mg/kg) (ml/kg) ± SD
25 100 3 ' 1 47,2162+31,43
26 100 3 240,51528,29
30 200 °ř5 1 21,88+13' 4
31 100 3 0ξ5 21 f 26+6,22
32 200 3 1 6,3814,42
32 200 0f5 1 3.12+2,26
33 100 3 0,5 58,13152,86
33 200 0,5 1 1101128
33 200 0?5 1 14 ,88111,53
35 200 0..5 1 132,31154.5
38 100 3 1 74,6542157,28
43 200 Oj 5 1 82,81146,8
43 200 of 5 1 38,68135,09
44 100 3 0,5 97,491134.1
44 200 0,5 1 17.41110.47 .
44 200 Oj 5 1 46,76141,19
45 200 0. 5 1 70,321149,1
49 100 3 0,5 335,7+227.05
57 200 3 1 332212721
59 200 0. 5 1 315,531154,56
61 200 0,5 1 58.9Sz27.15
63 100 3 1 7,84 318,.527
68 200 3 1 76,23+76,88
72 200 3 1 4702,514700,4
72 200 Oj 5 1 108.33155,98
72 200 0,5 1 9.81+13.72
72 200 0,5 1 18,56119,89
73 100 3 0,5 147.661176.71
73 200 0; 5 1 51 ,.2 6+9,,4 4
73 200 0ř 5 1 16 t 01112^21
74 100 3 0,5 70,69+127,89
75 200 0,5 1 33,88+38,49
75 200 0,5 1 32 ,.54119,78
76 200 0?5 1 24,72+25,53
• · · 4 · · • · · · • · 9 4 4 ·······* ·· ·
4444
Sloučenina '· dodávacího činidla______ Dávka sloučeniny - dodávacího činidla (mg/kg) Dávka ! inzulínu ; (mg/kg) Objem 1 dávky (ml/kg) Střední pík sérového inzulínu ± SD
76 200 Oís 1 38,74+74,4
Příklad 9
Inzulín - plicní podání
Připraví se dávkovači roztoky sloučeniny dodávacího činidla a lidského inzulínu ve vodě. Obvykle se k 1,5 mg sloučeniny dodávacího činidla přidá deionizovaná voda do objemu 1,0 ml a roztok se vortexuje. Použije se buď sodná sůl sloučeniny dodávacího činidla nebo se na sodnou sůl převede volná kyselina mícháním výsledného roztoku a přidáním 1 ekvivalentu hydroxidu sodného (ION) a naředěním vodou. Roztok se vortexuje, poté se zahřeje (okolo 37 °C) a vystaví se působení ultrazvuku. Hodnota pH se upraví na hodnotu od asi 7,0 do asi 8,5 pomocí hydroxidu sodného nebo kyseliny chlorovodíkové. K roztoku se přidá 75 μΐ matečného roztoku lidského inzulínu (2 mg/ml) (Matečný roztok se připraví následovně. Ke 0,02 g inzulínu se přidají 3 ml roztoku kyseliny chlorovodíkové v deionizované vodě s hodnotou pH 3,0. Hodnota pH výsledného roztoku se upraví na hodnotu nižší než 3,0 (okolo 2,6) pomocí kyseliny chlorovodíkové a hydroxidu sodného a až je roztok čirý. Hodnota pH se poté zvýší na 7,6 za použití hydroxidu sodného a kyseliny chlorovodíkové. Konečný objem se upraví na 10 ml pomocí deionizované vody s hodnotou pH 7,5.
Konečná hodnota pH je 7,59.) Poté se přidá voda k úpravě • « celkového objemu na 2,0 ml a roztok se jemně několikrát obrátí. Konečná dávka sloučeniny dodávacího činidla, dávka inzulínu a dávkovači objemy jsou uvedeny dále v tabulce 9.
Obvyklé dávkovači a vzorkovací protokoly jsou následující. Krysy kmene Sprague-Dawley o hmotnosti 200 až 250 g se 24 hodin drží bez přístupu k potravě a podá se jim ketamin (44 mg/kg) a chlorpromazin (1,5 mg/kg) 15 minut před podáním a znovu podle potřeby k udržení anestezie (za použití stejného množství ketaminu a 1,5 mg chlorpromazinu). Obvykle se dávkovači skupině o počtu 5 zvířat podá 1 z dávkovačích roztoků. Kontrolní skupině 5 zvířat se pdá inzulín samotný. Tracheální instilátor pro hlodavce, vybavený světlem (dostupný od firmy Penn Century, lne., Pittsburg, PA) se naplní dávkovacím roztokem a zavádí se hrdlem až se jehla dostane do trachey (potvrdí se vizuálně) . Dávkovači roztok se podá stlačením stříkačky.
Vzorky krve se odebírají po řadě z ocasní arterie, obvykle v čase 5, 15, 30, 60 a 120 minut po podání. Sérové hladiny inzulínu se stanoví pomocí Insulin ELISA Test Kit (kit č. DSL-10-1600 od firmy Diagnostic Systems Laboratories, lne., Webster, TX) , přičemž standardní protokol se upraví k optimalzaci citlivosti a lineárního rozmezí standardní křivky pro objemy a koncentrace vzorků použitých v předloženém protokolu.
Sérové koncentrace lidského inzulínu ^j/ml) se pro každý časový bod změří pro všech 5 zvířat v každé dávkovači skupině. 5 hodnot pro každý časový bod se zprůměruje a výsledky se vynesou jako sérová koncentrace inzulinu v čase. Poměr plochy pod křivkou (AUC) testované skupiny a kontrolní skupiny je uveden dále. Poměr maximální sérové » · • 4 · * 4 · · • 4 · 4
4 4 4 4
4 4 4
44444444 44
4444
100 koncentrace inzulínu (Cmax) testované skupiny a kontrolní skupiny je také uveden dále.
Tabulka 9
Plicní podání inzulínu
Sloučenina . dodávacího činidla .....r----·- Objem dávky (ml/kg) Dávka sloučeniny dodávacího · činidla (mg/kg) Dávka inzulínu (mg/kg) Cmax Cmax / Cma x (kontrola) i Střední poměr .. , AUC inzulínu + slouč. versu;, AUC inzulínu samotného f a Ί η >>-
1 1 3 100 74,237 - -
7 0f4 0,03 0,3 - 0.53 -
7 1 3 100 130/9724 - -
10 1 3 100 63,5884 - -
20 -M.... 0,03 - 0,92 -
22 0,4 0,03 0,3 - 0,60 -
22 0,4 0,,03 -.0,3 - 0,60 -
22 0,4 0,03 0,-3 - 0,70 -
23 . 0,4 0,.03 0,3 - 0,65 -
25 1 3 100 47,2162 - -
26 0,4 0,,03 0,3 1 ,7 8 -
26 0,4 0,03 0,3 - 3,39 -
36. 0,4 0,03 0,3 - 1,4 0 -
36 0,4 0.03 0,3 - 1,01 -
37 0,4 0,03 0,3 - 1,08 -
38 1 • 3 100 74,6542 - -
39 0,4 0,03 0,3 0,30 -
43 0,4 0,03 0,3 - 1,02 1,44
44 0,4 0,03 0,3 - 0(72 0,76
45 0,4 0<03 0,3 - 1,02 1 -f01
47 0,4 0^03 0,3 - 0,57 0,63
48 0,4 0f 03 0 j 3 135,56+80 r.96 “ lř30
49 0,4 0/03 0,3 0,52 0ř54
52 0,4 0f 03 0,3 - θ'50
54 0,4 0 f 03 0:3 - 0,.51 -
55 0f 4 0,03 0,3 - 0/99 -
56 0,4 o03 0,3 - 1:24 -
63 1 3 100 7,843 -
66 0 ,4 0,03 0,3 “ i’............... 0- 84 -
66 0s4 0,03 0,3 0ž63 -
67 0,4 0,03 0ř3 - 1,53 -
67 0,4 0,03 0,3 - 1.Í51 -
67 o 3 0,03 0,3 - θ', 64 -
67 0,4 0 ] 03 0.3 - 0)71 -
67 0,4 0 , 03 0,3 - 2 i 20 ' -
67 0, 4 0 , 03 0,. 3 66,04±474 - 1
·· ·· ·* ···· ·· ·· * · · « · · · * · » « • t · * · ·· * • « · · · · · · · » • · ··· · e · «··· ···· ·· · ·· ····
101
Sloučenina dodávacího činidla ··{---···' Objem dávky (ml/kg) Dávka sloučeniny dodávacího činidla (mg/kg) Dávka inzulinu ; (mg/kg1 Cma x Cmax / Cmax (kontrola) 1 Střední poměr. AUC inzulínu ( + slouč. versus AUC inzulinu samotného
42
67 V 0t03 í 0f 06 82.23±47f ? 16 —
67 °d °{03 OjlS 84 .40+15. ' 06 1
67 0?03 0| 3 92.14+36( 17 ' —
67 M 0,03 r 0, 3 115 f04±68 J,23 —
67 0f4 0,03 / 0/15 91,20±37ř 30
67 0f 4 0;03 0,06 í 70ř85±36ř ‘24 ~~
71 0,-4 0t03 0(3 - 1,08 -
71 0f4 0(03 0ř3 - 1,53 -
71 0 f 4 0^03 0- 3 i 57 f 8 2±35(, ‘ 2 8
72 0ř4 0t03 0,3 - 0,96 -
78 0,4 0 ζο 3 0)3 - 1,, 01 -
78 0,4 o; 03 0,3 - 1 -3 6 -
78 0?4 0) 03 °<3 80(56±30, t í 51
79 -Μ..... 0,03 0,3 - 1,73 -
Příklad 10 • · • · · ·
«, · · · · · ·
102
Kromolyn - orální podání
Dávkovači roztoky obsahující sloučeninu dodávacího činidla (připraveného jako v příkladu 1) a kromolin, dvojsodnou sůl (kromolyn) (od firmy Sigma Chemical Co., St. Louis. MO), se připraví v deionizované vodě. Volná kyselina sloučeniny dodávacího činidla se převede na sodnou sůl mícháním výsledného roztoku a přidáním 1 ekvivalentu hydroxidu sodného. Roztok se vortexuje a vloží se do sonikátoru (okolo 37 °C). Hodnota pH se upraví na hodnotu od asi 7 do asi 7,5 pomocí vodného roztoku hydroxidu sodného. Pokud je to nezbytné přidá se k dosažení jednolité rozpustnosti další hydroxid sodný a hodnota pH se znovu upraví. Směs se vortexuje k vytvoření jednolitého roztoku, rovněž za použití ultrazvuku a zahřívání, pokud je to nezbytné. Roztok sloučeniny dodávacího činidla se smísí s kromolynem z matečného roztoku (175 mg kromolynu/ml v deionizované vodě, hodnota pH upravena, pokud je to nezbytné, pomocí hydroxidu sodného nebo kyseliny chlorovodíkové na hodnotu okolo 7,0, matečný roztok se skladuje.zmrazený zabalený ve fólii, poté se nechá roztát a před použím se zahřeje na teplotu okolo 30 °C). Směs se vortexuje k vytvoření jednolitého roztoku, rovněž za použití ultrazvuku a zahřívání, pokud je to nezbytné. Hodnota pH se upraví na hodnotu od asi 7 do 8 pomocí vodného roztoku hydroxidu sodného. Roztok se poté naředí vodou na požadovaný objem (obvykle 2,0 ml) a koncentraci a uchovává se před použitím zabalený ve fólii. Konečné dávky sloučeniny dodávacího činidla a kromolynu a dávkovači objemy jsou uvedeny dále v tabulce 10.
·· ·· ·· ···· ·· • · · · · · · ···· • · · · · ·· ♦ • · · · · · ··· · « · · ♦ · · » · ««·· ···· ♦· · ·· ····
103
Obvyklé dávkovači a vzorkovací protokoly jsou následující. Krysy kmene Sprague-Dawley o hmotnosti 200 až 250 g se 24 hodin drží bez přístupu k potravě a podá se jim ketamin (44 mg/kg) a chlorpromazin (1,5 mg/kg) 15 minut před podáním a znovu podle potřeby k udržení anestezie. Dávkovači skupině o počtu 5 zvířat se podá 1 z dávkovačích roztoků. Pro orální podání se připevní llcm katetr Rusch 8 French na lml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Stříkačka se naplní dávkovacím roztokem násátím roztoku přes katetr, který se poté vytře do sucha. Katetr se vloží do jícnu, přičemž 1 cm přesahuje přes řezáky. Dávkovači roztok se podá stlačením stříkačky.
Vzorky krve se odebírají po řadě z ocasní arterie, obvykle v čase 0,25, 0,5, 1,0 a 1,5 hodiny po podání. Sérové koncentrace kromolynu se měří pomocí HPLC. Vzorky se připraví následovně: 100 μΐ séra se spojí se 100 μΐ 3N kyseliny chlorovodíkové a 300 μΐ ethyl-acetátu v Eppendorfově zkumavce. Zkumavka se vortexuje 10 minut a poté se odstřeďuej 10 minut při frekvenci otáček 10 000 za minutu. 200 μΐ ethyl-acetátové vrstvy se přenese do Eppendorfovy zkumavky obsahující 67 μΐ 0,1Μ fosfátového pufru. Zkumavka se vortexuje 10 minut a poté se 10 minut odstřeďuje při frekvenci otáček 10 000 za minutu. Vrstva fosfátového pufru se poté přenese do skleničky pro HPLC a injikuje se do HPLC (sloupec = Keystone Exsil Amino 150x2 mm i.d., 5 μιη, 10 nm, mobilní fáze = 35% pufr (68 mM dihydrogenfosforečnanu draselného upraveno pH na hodnotu 3,0 pomocí 85% kyseliny fosforečné)/acetonitril, injikovaný objem = 10 μΐ, rychlost průtoku - 0,30 ml za minutu, retenční čas kromolynu = 5,5 minut, detekovaná absorbance = 240 nm). Předchozí studie ukazují základní hodnoty okolo 0.
··· · • 4 4 4 · «··«··!· · · ·
4 4
4» 444·
104
Výsledky získané na zvířatech v každé skupině se zprůměrují pro každý časový bod a nejvyšší z těchto hodnot (tj. střední píková sérová koncentrace kromolynu) je uvedena dále v tabulce 10.
Tabulka 10
Kromolyn orální podání
Sloučenina ' dodávacího Dávka sloučeniny Dávka kromolynu Objem dávky Střední pík sérového kromolynu
činidla .1 dodávacího činidla (mg/kg) (mg/kg) (ml/kg) + SD (SE)
5 200 25 1 0.63 ± 0,47 |
7 200 25 1 0.81 ± 0ř85
7 200 25 1 0,68 ± 0,34
7 200 25 1 0.56 ± 0Í39
15 200 25 1 0,38 ± 0.15
47 200 25 2 0,55 ± 0,12
47 200 25 1 0,56 ± 0,k39
60 200 25 1 1,57 ± 0s38
60 200 25 1 0.82 ± 0,24
60 200 25 1 0,76 ± 0,34
61 200 25 1 0,54 ± 0e39
61 200 25 1 0,57 ± 0f36
61 200 25 2 0,39 ± 0 í,2 1
Příklad 11
Daptomycin - orální podání
Dávkovači roztoky obsahující sloučeninu dodávacího činidla a daptomycin (Cubist Pharmaceuticals,
Cambridge, MA) se připraví v 0,9% roztoku chloridu sodného.
• 9 99 • 9 9 9 9 9 • # 9 9 9 9
9 9 9 9
99999999 99 9
105
Roztok sloučeniny se připraví buď ze sodné soli sloučeniny nebo převedením volné kyseliny na sodnou sůl. Volná kyselina sloučeniny dodávacího činidla se převede na sodnou sůl mícháním výsledného roztoku a přidáním 1 ekvivalentu hydroxidu sodného. Tato směs se vortexuje a vloží se do sonikátoru (okolo 37 °C). Hodnota pH se upraví na hodnotu od asi 7 do asi 7,5 pomocí vodné kyseliny chlorovodíkové nebo vodného roztoku hydroxidu sodného. Pokud je to nezbytné přidá se k dosažení jednolité rozpustnosti další hydroxid sodný a hodnota pH se znovu upraví. Směs se vortexuje k vytvoření jednolitého roztoku, rovněž za použití ultrazvuku, pokud je to nezbytné. Roztok sloučeniny dodávacího činidla se smísí s daptomycinem z matečného roztoku (200 mg daptomycinu/ml v deionizované vodě, hodnota pH upravena, pokud je to nezbytné, pomocí hydroxidu sodného nebo kyseliny chlorovodíkové na hodnotu 6,0 až 7,0).
Matečný roztok se skladuje zmrazený (-20 °C) zabalený ve fólii, poté se nechá roztát a před použím se zahřeje na teplotu okolo 25 °C. Směs dodávací činidlo-daptomycin se vortexuje pří nízké rychlosti k vytvoření jednolitého roztoku. Hodnota pH se upraví na hodnotu od asi 7 do 7,0 pomocí vodného roztoku hydroxidu sodného. Roztok se poté naředí 0,9% roztokwem chloridu sodného na požadovaný objem (obvykle 2,0 ml) a koncentraci a uchovává se před použitím zabalený ve fólii. Konečné dávky sloučeniny dodávacího činidla a daptomycinu a dávkovači objemy jsou uvedeny dále v tabulce 11.
Obvyklé dávkovači a vzorkovací protokoly jsou následující. Krysy kmene Sprague-Dawley o hmotnosti 200 až 250 g se 24 hodin drží bez přístupu k potravě a podá se jim ketamin (44 mg/kg) a chlorpromazin (1,5 mg/kg) 15 minut před podáním a znovu podle potřeby k udržení anestezie.
····
106
Dávkovači skupině o počtu 5 zvířat se podá 1 z dávkovačích roztoků. Pro orální podání se připevní llcm katetr Rusch 8 French na lml stříkačku pomocí pipetovací špičky. Stříkačka se naplní dávkovačům roztokem násátím roztoku přes katetr, který se poté vytře do sucha. Katetr se vloží do jíonu, přičemž 1 cm přesahuje přes řezáky. Dávkovači roztok se podá stlačením stříkačky.
Heparinizované vzorky krysí krve se odebírají po řadě z ocasní arterie, obvykle v čase 0,25, 0,5, 0,75, 1,0, 2,0 a 4,0 hodiny po podání a skladují se na ledu. Vzorky krve se poté 4 minuty odstřeďují při frekvenci otáček 11 000 za minutu při teplotě 4 °C k získání plasmy (supernatant), která se skladuje pří teplotě -70 °C. Plasmatícké koncentrace daptomycinu se měří pomocí isokratické HPLC s reverzní fází, přičemž během analýzy se teplota vzorků udržuje na 4 °C. Studie na slepých vzorcích plasmy ukazují základní hodnoty 0.
Výsledky koncentrací daptomycinu v krvi získané na jednotlivých zvířatech v každé skupině se zprůměrují pro každý časový bod. Střední píková sérová koncentrace daptomycinu (Cmax) a plocha pod křivkou po expozici daptomycinu (AUC) jsou uvedeny dále v tabulce 11.
Tabulka 11
Daptomycin orální podání
Sloučenina ! Dávka Dávka Objem Střední AUC
dodávacího sloučeniny daptomy- dávky plasmatický Ug-
činidla j dodávacího cirm___ (ml / Cmax daptomycinu, min/
činidla (mg/kg) (mg/kg) kg) , ± SD, pg/mL ml
2 200 50 1 5ř07 ± 0,61 -
5 200 50 1 7ť 082 ± 3 ,«8 6
Ί 200 50 1 10,45 ± 2,87
Ί 100 50 1 13,05 + 4,62 i
7 100 50 °! 5 7,09 ± 5,35 -
7 50 50 0.5 5,77 + 1,49- -
7 50 50 0, 5 59,-14 ± 3,11
7 200 50 1 5.-06 ± 1,73
· ·· • 4
4
4 • 4 444·
4 4 ····
107
Sloučenina dodávacího činidla Dávka sloučeniny dodávacího činidla (mg/kg) 200 Dávka daptomy- cinu (mg/kg) 50 Objem dávky (ml / ' kg) ---. Střední plasmatický Cmax daptomycinu J ± SD, pg/ml· 8,04 ± 6/03 AUC | pg min/ • ml /
11 200 50 1 113,27 ± 13,43 —
12 200 50 1 16,11 ± 17,.58 -
14 200 50 1 14/ ± 24,84 -
15 200 50 1 /5 ± 5./49 -
30 200 50 1 3.06 ± 0,78 -
43 200 50 1 21,44 ±' 6 4555*
43 200 50 1 10,56 ±3,37 2895*
43 200 50 1 12,94 ± 6,6 2820*
57 2 00. 50 1 8,59 ± 4,21 -
*auc = cel ková'auc (O-ž“)
Výše uvedené patenty, přihlášky vynálezů, testovací metody a publikace jsou zde zahrnuty formou odkazu v jejich celistvosti.
Mnohé 'variace předloženého vynálezu budou odborníkvi v oboru ve světle výše uvedeného popisu zřejmé. Všechny takovéto zřejmé, variace plně spadají do zamýšleného rozsahu připojených patentových nároků.

Claims (10)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Sloučenina obecného vzorce ,R‘ 6 COOH 'R a její sůl, ve kterém
    R1, R2, R3 a R4 jsou nezávisle atom vodíku, skupina -OH, atom halogenu, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, skupina -C(O)R8, skupina -NO2, skupina -NR9R10, nebo skupina -N+R9R10R11 (R12);
    Rje atom vodíku, skupina -OH, skupina -NO2, atom halogenu, skupina -CF3, skupina skupina -N+R14R15R16 (R13)-, amid, alkoxyskupina s 1 až 12 atomy uhlíku, alkylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku, karbamát, uhličitan, močovina nebo
    -NR14R15, skupina -C(O)R je případně substituován atomem halogenu, skupinou -OH, -SH nebo skupinou -COOH;
    44 4444
    44 44
    4 4 4 4
    4 4 »4 44
    4 4 4 • ·
    4 4
    4444 4444
    4 4
    109
    R5 je případně přerušen atomem kyslíku, dusíku, síry nebo skupinou -C(O)-;
    R6 je alkyndiylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, alkenylenová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku nebo arylen;
    R6 je-případně substituován alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylem se 2 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinou -OH, skupinou -SH, atomem halogenu, skupinou —NH2 nebo skupinou -CO2R8;
    R6 je případně přerušen atomem kyslíku nebo dusíku;
    R7 je vazba nebo arylen;
    R7 je případně substituován skupinou -OH, atomem halogenu, skupinou -C(O)CH3, skupinou -NR10R11 nebo skupinou -N+R10Ri:LR12 (R13)-;
    R8 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 4 atomy uhlíku nebo skupinu -NH2;
    R9, R11, R11 a. R12 nezávisle jsou atom vodíku nebo alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku;
    R13 je halogenid, hydroxid, sulfát, tetrafluorborát nebo fosfát a
    R14, R15 a R16 jsou nezávisle atom vodíku, alkylová skupina s
    44 444· «4 44
    4 4 4 4 4 4 • 4 · · 4 • · · 4 4 ········ 44 · ·* ··
    4 4 4 4
    4 4 4
    110 r18
    1 až 10 atomy uhlíku, alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku substituovaná skupinou -COOH, alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku substituovaná skupinou -COOH, skupinou -C(O)R17;
    je skupina -OH, alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku nebo alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku a je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku, skupina -OH, skupina -NR14R15 nebo skupina N+R14R15R16 (R13) ;
    za předpokladu, že když R1, R2, R3, R4 a R5 jsou atom vodíku a R7 je vazba, pak R6 není alkylová skupina s 1 až 6, 9 nebo 10 atomy uhlíku, když R1, R2, R3 a R4 jsou atom vodíku, R5 je skupina -OH a R7 je vazba, pak R6 není alkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku, když alespoň jeden z R1, R2, R3a R4 není atom vodíku, R5 je skupina -OH a R7 je vazba, pak R6 není alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, když R1, R2 a R3 jsou atom vodíku, R4 je skupina -OCH3, R5 je skupina -C(O)CH3 a R6 je vazba, pak R7 není alkylová skupina s 3 atomy uhlíku a když R1, R2, R4 a R5 jsou atom vodíku, R3 je skupina -OH a R7 je vazba, pak R6 není methyl.
    »· «« »· • · * ·» · » • · · · • · · · * • · · · ·»«»··· > ·« »«fc· ·« ·« • 4 · ·' ·
    9 9 9 9 • 4 · · * • · · · • »· 44 » »
    111
  2. 2. Sloučenina zvolená ze skupiny sestávající z
    Slouč. č.· É R* R? R? I? 1 H H H H C(O)CH3 ch2 para-Ph* 2 H H H H OH ch2 para-Ph * 3 H H H H OH ch2 vazba 4 H H H H OH (Ch2)3 vazba 5 H H H H OH (CH2)5 vazba 6 H H H H OH ÍCH2)6 vazba 7 H H H ! H OH ( CH; ! ; vazba 8 1-1 H H H OH (CH,) c. vazba 9 H H 11 H , . C (0) CH3 (CH;). vazba 10 II 11 H H ClOlCHj (CH;)í vazba 11 H H H H C(O)CH3 (CH2)i vazba 12 H H H H C(O)CH3 (CH2)7 vazba 13 H H H H H CH, vazba 14 H H H H H (CH2)5 (vazba 15 H H H H H (CH;)5 vazba 16 H H H H H (CH2)o vazba 17 H H H H H ÍCH2) 10 vazba 18 H H H H CH=CHCH3 (CH2), vazba 19 H H H ‘ H nh2 (CH2)i vazba 20 H H H H NO? (CH2), vazba 21 H H H H NH2 (CH2)4 vazba 22 H H Cl H nh2 (CH2)7 vazba 23 H H Cl H nh2 (CH2)4 vazba 24 H H H H NHC(O)CH3 (CH2)7 vazba 25 H H H H ch=chco2h (CH2) 7 vazba 26 H H H H C(O)CH2CH3 (CH2) 3 vazba 27 H H H H C(0)CH2CH3 (CH2)5 vazba 28 H H H H C(O)ch2ch3 (CH2) 7 vazba 29 H H H H C(O)CH2CH3 (CH2)5 vazba 30 H H H H C(O)nh2 (CH2) 7 vazba 31 H H H H ' C(O)NHCH3 (CH,) 7 vazba 32 H H H H COOH (CH2)7 vazba 33 H H H H C(O)NHCH,CH3 (CH,) 7 vazba 34 H H H H C (O)NHCH (CH3) 2 (CH,)7 vazba 35 H H H H och3 ÍCH2) 7 vazba 3 6 H H H H CH(OH)CH3 (CH,) 7 vazba 37 H H H H C(CH3)2OH CH2 para-Ph* 38 H H H OH C(O)CH3 (CH,) 7 vazba 39 H H H OCH3 C(O)CH3 (CH2) 7 vazba 43 H OH H H H (CH2) 7 vazba 44 H OH H H H (CH2) 9 vazba 45 H OH H H H (CH2) 5 vazba 46 H OH H H H (CH2) 3 vazba , 4Ί H H OH H H • (CH,) 7 vazba 48 H H OH H H (CH2)5 vazba 49 H H OH H H (CH2)5 vazba 50 . H H OH H H (CH,)3 vazba 51 H H H H C(O)nhch3 (CH2) 5 vazba 52 H H H H C(O)NH; ch2 para-Ph*
    ·« · «<
    112
    Slouč. č. R1 i Rf Rf K R* ...... R~ ~ ' 1 54 H H H H C(O)CH3 (CHz) 9 vazba j 5 5 H H OCHj H C(O)CH3 (CH ·) , vazba 56 H OCH3 H H C(0)CH3 (CH?b vazba 5 ? H H OH H C(O)CHj (CH; ) 7 “vazba 58 H H CHj H C(O)CH3 ( CH? ) 'vazba 59 H H H H C{0) H CH? pa ra- PH ‘ ; 60 H H H H C (0) H (CH;;) . vazba i 61 H H H H C (0) H (CH?)? vazba 62 H H C (O) ch3 11 H (CH-> - vazba 63 H H C (0) ch2ch 3 H H (CHj)? vazba 64 H C (0) ch3 H H H (CH2) 7 vazba 65 H H H H H (CH2)7 vazba 66 H H H H H CH, para-Ph* 67 H H OH H H CH2 para-Ph* 68 H Cl H H H (CHZ) 7 vazba 69 H H och3 H H (CH2) 7 vazba 71 H H F H F (CHz)? vazba 72 H H H H OH (CH?) io vazba 73 Ή H H H Cl (CH2) ? vazba 74 H no2 H H OH (CH2)? vazba 75 H H H H F (CHz) , vazba 76 H H H H cf3 (CH?) , vazba 7 7 F H H H F (CHz)7 vazba 78 H H H H Cl ch2 para-Ph * 79 H H H H OH CH2CH(OH) pa ra-Ph * 80 H H och3 H H (CHz)6CH (CH3) vazba 81 H H OH H H (CHz)6CH (CH3) vazba 82. H H OH H H (CHz)6CH (CH2CH2C h3) vazba 88 H H Η H -C(0)NH(CH2)9-OH CHz vazba 92 H H H H -0(CH2) jCOOH (CHz)s vazba 93 H ch3 Η H ch3 (CH2) 7 vazba.
    • · · · · · ··· · ··
    113
    ”9 4 H ch3 H H ch3 (CH2) 5 vazba 95 H H no2 H H pa ra-Ph vazba 1. 96 H H nh2 H H pa ra -Ph vazba 97 H CH3 H H ch3 (CH2i 3(C (CH3) 2) vazba 98 H H H C(0)- nh2 o-(Ch2>7- COOH - (CH2) 7- vazba
    a její soli.
  3. 3. Prostředek vyznačující se tím, že obsahuj e:
    A) aktivní činidlo a B) alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce 1 R3\ ^l^R5 I /Rt /COOH R2^ 0 R a její soli, R1 ve kterém R1, R2, R3 a R4 jsou nezávisle atom vodíku, skupina
    atom halogenu, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, skupina -C(O)R8, skupina -NO2, skupina -NR9R10r nebo skupina ~N+R9R10R11 (R12);
    ·· ···
    114
    R5 je atom vodíku, skupina -OH, skupina -NO2, atom halogenu, skupina -CF3, skupina -NR14R15, skupina -N+R14R15R16 (R13)-, amid, alkoxyskupina s 1 až 12 atomy uhlíku, alkylová skupina s 1 až 12 . atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku, karbamát, uhličitan, močovina nebo skupina -C(O)R18;
    R5 je případně substituován atomem halogenu, skupinou -OH, -SH nebo skupinou -COOH;
    R5 je případně přerušen atomem kyslíku, dusíku, síry nebo skupinou -C(O)-;
    R6 je alkyndiylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, alkenylenová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku nebo arylen;
    R6 je případně substituován alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylem se 2 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinou -OH, skupinou -SH, atomem halogenu, skupinou -NH2 nebo skupinou -CO2R8;
    R6 je případně přerušen atomem kyslíku nebo dusíku;
    R7 je vazba nebo arylen;
    R7 je případně substituován skupinou -OH, atomem halogenu, skupinou -C(O)CH3, skupinou -NR10Rn nebo skupinou -N+R10RuR12 (R13);
    • · .· · ·..· : ......
    ···· ···· ·
    115
    R8 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 4 atomy uhlíku nebo skupinu -NH2;
    R9, R11, R11 a R12 nezávisle jsou. atom vodíku nebo alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku;
    R13 je halogenid, hydroxid, sulfát, tetrafluorborát nebo fosfát a
    R14, R15 a R16 jsou nezávisle atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku, alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku substituovaná skupinou -COOH, alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku substituovaná skupinou -COOH, skupinou -C(O)R1/;
    R17 je skupina -OH, alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku nebo alkenylová skupina se 2 až 12 atomy uhlíku a
    R18 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku, skupina -OH, skupina -NR14R15 nebo skupina N+R14R15R16(R13) ;
    za předpokladu, že když R1, R2, R3, R4 a R5 jsou atom vodíku a R7 je vazba, pak R6 není alkylová skupina s 1 až 6, 9 nebo 10 atomy uhlíku, když R1, R2, R3 a R4 jsou atom vodíku, R5 je skupina -OH a R7 je vazba, pak R6 není alkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku, • · · · ·· ♦· • :* :
    • ♦ »·
    116 když alespoň jeden z R1, R2, R3a R4 není atom vodíku, R5 je skupina -OH a R7 je vazba, pak R6 není alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, když R1, R2 a R3 jsou atom vodíku, R4 je skupina -OCH3, R5 je skupina -C(O)CH3 a R° je vazba, pak R7 není alkylová skupina s 3 atomy uhlíku a když R1, R2, R4 a R5 jsou atom vodíku, R3 je skupina -OH a R7 je vazba, pak R6 není methyl.
  4. 4. Prostředek vyznačující se tím, že obsahuje:
    A) aktivní činidlo a
    B) alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce
    R4
    R1
    Slouč. č.\ R? R? R? R^ R^ íť 1 H H H H C(0)ch3 CH2 para-Ph* 2 H H H H OH ch2 para-Ph* 3 H H H H OH ch2 vazba 4 H H H H OH !CH2)3 vazba 5 H H H H OH (CH2)5 vazba 6 . H H H H OH (CH2)6 vazba 7 H H H i-: OH (CH? J : vazba 8 l-l H H h : OH (CH2) i vazba 9 H H H H . . 1 C (O) Cti-, (CH;) , vazba 10 11 il II li C(O!CH j ( Cli; i í vazba 11 H H H H C(O)CH3 (CH?) i vazba 12 H H H H C(0)ch3 (CH,) , vazba 13 H H H H H CH, vazba 14 H H H H H (CH2), 'vazba 15 H H H H H (CH,), vazba 16 H H H H H (CH2)9 vazba
    ····
    H
    I··· ····
    9999 i 17
    Slouč. č. W r3T - - - · y· η r7-----------'Η - ! 17 H H H H H (CH2) io vazba 18 H H H H CH=CHCH3 (CH2), vazba 19 H H H H nh2 (CH2)7 vazba 20 H H H H no2 (CH2), ' vazba 21 H H H H nh2 (CH2) 4 vazba 22 H H Cl H nh2 (CH?), vazba 23 H H Cl H nh2 (CH2) 4 vazba 24 H H H H NHC(0)CH3 (CH2) , vazba 25 H H H H ch=chco2h (CH2) 7 vazba 26 H H H H C(O)CH2CH3 (CH21 3 vazba 27 H H H H C(0)ch2ch3 (CH2) 5 vazba 28 H H H H C(0) ch2ch3 (CH2) 7 vazba 29 H H H H C(0)ch2ch3 (CH2) 5 vazba 30 H H H H C(0)nh2 (CH2)7 vazba 31 H H . H H ' C(01nhch3 (CH2) 7 vazba 32 H H H H COOH (CH2) 7 vazba 33 H H H H C(0)nhch2ch3 (CH?) , vazba 34 H H H H C(0)NHCH <CH3) 2 (CH2) 7 vazba 35 H H H H och3 (CH2) 7 vazba 36 H H H H CH(0H)CH3 (CH?)? vazba 37 H H H H C(CH3)2OH CH2 para-Ph* 38 H H H OH C(O)CH3 (CH?), vazba 39 H H H 0CH3 C(O)CH3 (CH2) 7 vazba 43 H OH H H H (CH2) 7 vazba 44 H .OH H H H (CH2)o vazba - 4 5. H OH H H H (CH2) s vazba 46 H OH H H H (CH2) 3 vazba , 4 7 H H OH H H (CH?) ? vazba 48 H H OH H H (CH2) 9 vazba 49 H H OH H H (CH2)J vazba 50 H H OH H H (CH2) j vazba 51 H H H H C(0)nhch3 <CH2)5 vazba 52 H H H H C(0)nh2 ch2 para-Ph* 54 H H H H C(O)CH3 (CH2) 9 vazba 55 H H OCW3 H C(0)CH, (CH ) ; vazba 5 6 H OCH-, H H C(0)ch3 (CH?) i vazba ........ 57 H H OH H C(0)ch, i <CH; ) 7 vazba “vazba 58 H H C H) li CíO)CH3 (CH?) ... 59 H H H li C (0) H ch2 para-Ph' ! 60 H H H H C (0) H (CH.:) <. i vazba 61 H H H H C (0) H (CH?) ? vazba 62 H H C (0) ch3 H H i ( CH; i ? vazba 6 3 H H C (0) CH2CH 3 H H (CH?) i vazba 64 H C (0) CH3 H H H (CH?)7 vazba 65 H H H H H (CH2) 7 vazba 66 H H H H H ch2 para-Ph* 67 H H OH H H ch2 para-Ph* 68 H Cl H H H (CH2) 7 vazba 1 69 H H och3 H H (CH2), vazba
    ···· ·λ>
    ···* ··
    118
    71 H H F H F (CH2)7 vazba 72 H H H H OH (CHj) 10 vazba 73 H H H H Cl ( CH2 ) 7 vazba 74 H no2 H H OH (CH2) 7 vazba 75 H H H H F (CH2) 4 vazba 76 H H H H cf3 (CH; ) 4 vazba 77 F H H H F (CH2)7 vazba 78 H H H H Cl ch2 para-Ph* 79 H H H H OH CH2CH(OH) . para-Ph * 80 H H OCH3 H H (CHíU- CH <CH3) vazba 81 H H OH H H (CH2) 6 CH (CH3) vazba 82 H H OH H H (CH2) 6 CH (CH2CH2C · H3) vazba 88 H H H H -C(0)NH(CH2) g-OH ch2 vazba 92 H H H H -0 (CH2) sCOOH (CH2) 5 vazba 93 H ch3 H H CH3 • (CH2) 7 vazba. 94 H CHj H H ch3 (CH2) 5 vazba 95 H H no2 H H para-Ph vazba 96 H H nh2 H H para -Ph vazba 97 H ch3 H H ch3 (CH2) 3(C(CH3)2) vazba 98 H H H C (0> - NH2 0- (CH2) ·,COOH - (CH2)7- vazba
    a její solí.
  5. 5. Prostředek podle nároku 4, vyznačující se tím, že aktivní činidlo je zvoleno ze skupiny sestávající z biologicky aktivního činidla, chemicky aktivního činidla a jejich kombinace.
  6. 6. Prostředek podle nároku 5, vyznačující se tím, že biologicky aktivní činidlo obsahuje alespoň jeden protein, polypeptid, peptid, hormon, polysacharid, mukopolysacharid, sacharid, malé polární organické molekuly nebo lipid.
    ···· ·· ····
    119
  7. 7. Prostředek podle nároku 5, vyznačující se tím, že biologicky aktivní činidlo je zvoleno ze skupiny sestávající z růstových hormonů, lidských růstových hormonů (hGH), rekombinantních lidských růstových hormonů (rhGH), hovězích růstových hormonů, prasečích růstových hormonů, růstový hormon uvolňujících hormonů, interferonů, a-interferonu, β-interferonu, γ-interferonu, interleukinu1, interleukinu-2, inzulínu, prasečího inzulínu, hovězího inzulínu, lidského inzulínu a lidského rekombinantního inzulínu, inzulínu podobného růstového faktoru (IGF),
    IGF-1, heparinu, nefrakcionovaného heparinu, heparinoidů, dermatanů, chondroitinů, heparinu s nízkou molekulovou hmotností, heparinu s velmi nízkou molekulovou hmotnosti, heparinu s mimořádně velmi nízkou molekulovou hmotností, kalcitoninu, lososího kalcitoninu, úhořího kalcitoninu, prasečího kalcitoninu, lidského kalcitoninu, erythropoetinu, atriálního natriuretického faktoru, antigenů, monoklonálních protilátek, somatostatinu, inhibitorů proteázy, adrenokortikotropinu, gonadotrpoin uvolňujícího hormonu, oxytocinu, luteinizační hormon uvolňujícího hormonu, folikuly stimulujícího hormonu, glukocerebrodidázy, trombopoetinu, filgrastimu, prostaglandinů, cyklosporinu, vasopresinu, sodné soli kromolynu (kromoglykát sodný nebo dvoj sodný), vankomycinu, desferrioxaminu (DFO), bisfosfonátů, alendronátu,. tiludronátu, etidronátu, klodronátu, pamidronátu, olpadronátu, inkadronátu, parathyroidního hormonu (PTH), fragmentů parathyroidního hormonu, antimikrobiálních látek, daptomycinu, antifungálních činidel, vitamínů, analogů, fragmentů, mimetik a polyethylenglykolem (PEG) modifikovaných derivátů těchto sloučenin a jakékoli jejich kombinace.
    ··· · *· ··. > · · · ·♦ ··. , · · <
    ·· ····
    120
  8. 8. Prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že biologicky aktivní činidlo zahrnuje inzulín, nefrakcionovaný heparin, heparin s nízkou molekulovou hmotností, heparin s velmi nízkou molekulovou hmotností, heparin s mimořádně velmi nízkou molekulovou hmotností, kalcitonin, parathyroidní hormon, erytropoetin, daptomycin, lidské růstové hormony, analoga, fragmenty, mimetika a polyethylenglykolem (PEG) modifikované deriváty těchto sloučenin a jakékoli jejich kombinace.
  9. 9. Prostředek podle nároku 8, vyznačující se tím, že biologicky aktivní činidlo zahrnuje kalcitonin.
  10. 10. Prostředek podle nároku 8, vyznačující se tím, že sloučenina má vzorec
CZ20021554A 1999-11-05 2000-11-06 Deriváty fenoxykarboxylové sloučeniny a prostředky pro dodávání aktivní sloľky CZ20021554A3 (cs)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US16380699P 1999-11-05 1999-11-05
US23183600P 2000-09-06 2000-09-06
US23723300P 2000-10-02 2000-10-02

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20021554A3 true CZ20021554A3 (cs) 2002-10-16

Family

ID=27388931

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20021554A CZ20021554A3 (cs) 1999-11-05 2000-11-06 Deriváty fenoxykarboxylové sloučeniny a prostředky pro dodávání aktivní sloľky
CZ20021570A CZ20021570A3 (cs) 1999-11-05 2000-11-06 Fenylaminkarboxylové kyseliny a kompozice pro dodávání aktivních činidel

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20021570A CZ20021570A3 (cs) 1999-11-05 2000-11-06 Fenylaminkarboxylové kyseliny a kompozice pro dodávání aktivních činidel

Country Status (17)

Country Link
EP (2) EP1226104B1 (cs)
JP (2) JP2004501057A (cs)
KR (1) KR100788970B1 (cs)
CN (1) CN1384814B (cs)
AT (1) ATE427925T1 (cs)
AU (3) AU2622301A (cs)
BR (1) BRPI0015567B8 (cs)
CA (2) CA2390025A1 (cs)
CZ (2) CZ20021554A3 (cs)
DE (1) DE60041976D1 (cs)
HK (1) HK1048801B (cs)
HU (1) HU229415B1 (cs)
IL (4) IL149337A0 (cs)
MX (2) MXPA02004451A (cs)
NZ (1) NZ530450A (cs)
PL (1) PL201505B1 (cs)
WO (2) WO2001032596A1 (cs)

Families Citing this family (65)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6916489B2 (en) 1992-06-15 2005-07-12 Emisphere Technologies, Inc. Active agent transport systems
US6610329B2 (en) 1993-04-22 2003-08-26 Emisphere Technologies Inc. Compositions for the delivery of antigens
AU2595697A (en) 1996-03-29 1997-10-22 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
CA2339765C (en) 1998-08-07 2009-04-28 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US6991798B1 (en) 1998-08-07 2006-01-31 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US7151191B2 (en) 2000-01-13 2006-12-19 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
ATE391708T1 (de) 2000-06-29 2008-04-15 Emisphere Tech Inc Verbindungen und gemische zur verabreichung eines aktiven agens
US7227033B2 (en) 2002-01-09 2007-06-05 Emisphere Technologies, Inc. Polymorphs of sodium 4-[(4-chloro-2-hydroxybenzoyl) amino] butanoate
BR0114799A (pt) * 2000-09-06 2003-12-30 Emisphere Tech Inc Compostos de ácido cianofenoxi carboxìlico e composições para liberar agentes ativos
JP4354698B2 (ja) 2001-03-01 2009-10-28 エミスフェアー・テクノロジーズ・インク ビスホスホネートデリバリー用組成物
EP1448509B1 (en) * 2001-09-26 2012-12-19 Emisphere Technologies, Inc. Method of preparing phenoxy alkanoic acids and salts thereof via a dicarboxylate intermediate
WO2003045306A2 (en) * 2001-11-13 2003-06-05 Emisphere Technologies, Inc. Phenoxy amine compounds and compositions for delivering active agents
CA2466863A1 (en) 2001-11-29 2003-06-05 Emisphere Technologies, Inc. Oral pharmaceutical compositions comprising cromolyn sodium and an acylated amino acid
CN1332711C (zh) 2002-02-20 2007-08-22 埃米球科技有限公司 施用glp－1分子的方法
WO2004104018A2 (en) * 2003-05-14 2004-12-02 Emisphere Technologies, Inc. Compositions for delivering peptide yy and pyy agonists
ATE361294T1 (de) 2003-08-20 2007-05-15 Lilly Co Eli Verbindungen, verfahren und formulierungen zur oralen verabreichung einer glucagonartigen peptid (glp)-1-verbindung oder eines melanocortin-4- rezeptor-(mc4-)agonistschen peptids
ES2278346T3 (es) 2003-08-20 2007-08-01 Eli Lilly And Company Compuestos, procedimientos y formulaciones para suministro oral de un compuesto peptido (glp)-1 del tipo de glucagon o un peptido agonista (glp)-4 del receptor 4 de melacortina (mc4).
US20060286129A1 (en) 2003-12-19 2006-12-21 Emisphere Technologies, Inc. Oral GLP-1 formulations
MXPA06011903A (es) 2004-04-16 2007-03-21 Emisphere Tech Inc 8-(2-hidroxi-fenoxi)-octil-dietanolamida y sales de la misma para el suministro de agentes activos.
EP1750729A2 (en) 2004-05-06 2007-02-14 Emisphere Technologies, Inc. Solid dosage form of wetted heparin
RU2530889C2 (ru) * 2004-05-14 2014-10-20 Эмисфире Текнолоджис, Инк. Соединения и составы для доставки активных веществ
NZ551196A (en) 2004-05-14 2010-08-27 Emisphere Tech Inc Compounds and compositions for delivering active agents
JP4995080B2 (ja) 2004-05-14 2012-08-08 エミスフェアー・テクノロジーズ・インク 活性薬剤を送達するためのアリールケトン化合物および組成物
BRPI0510906A (pt) * 2004-05-19 2007-11-06 Emisphere Tech Inc composição farmacêutica tópica, composição para administração tópica e seu uso
CA2566741C (en) 2004-05-19 2014-06-10 Emisphere Technologies, Inc. Acyclovir formulations
WO2006017251A2 (en) 2004-07-12 2006-02-16 Emisphere Technologies, Inc. Compositions for delivering peptide yy and pyy agonists
JP2008509145A (ja) 2004-08-03 2008-03-27 エミスフィアー テクノロジーズ インコーポレイテッド 抗糖尿病性経口インスリン−ビグアニドの組み合わせ
JP2008509933A (ja) * 2004-08-13 2008-04-03 エミスフェアー・テクノロジーズ・インク 送達剤のマイクロ粒子またはナノ粒子を含む医薬製剤
BRPI0517574A (pt) 2004-12-29 2008-10-14 Emisphere Tech Inc formulação farmacêutica, método para tratar ou prevenir hipercalcemia e método para preparar formulação farmacêutica
US8110547B2 (en) 2005-01-12 2012-02-07 Emisphere Technologies, Inc. Compositions for buccal delivery of parathyroid hormone
FR2880887B1 (fr) * 2005-01-14 2009-01-30 Merck Sante Soc Par Actions Si Derives d'hydroxyphenols, procedes pour leur preparation, compositions pharmaceutiques les contenant et applications en therapeutique
WO2007011958A2 (en) 2005-07-15 2007-01-25 Emisphere Technologies, Inc. Intraoral dosage forms of glucagon
US8927015B2 (en) 2006-04-12 2015-01-06 Emisphere Technologies, Inc. Formulations for delivering insulin
CA2646503C (en) 2006-04-18 2015-06-30 Emisphere Technologies, Inc. Dialkyl ether delivery agents
WO2007133944A2 (en) 2006-05-09 2007-11-22 Emisphere Technologies, Inc. Topical administration of acyclovir
US9364502B2 (en) 2006-06-28 2016-06-14 Emisphere Technologies, Inc. Gallium nitrate formulations
CA2661018C (en) 2006-08-18 2015-11-24 Emisphere Technologies, Inc. Synthesis of propyl phenoxy ethers and use as delivery agents
WO2008027958A2 (en) 2006-08-31 2008-03-06 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
CN105233294A (zh) 2007-02-08 2016-01-13 爱密斯菲尔科技公司 苯烷基羧酸输送剂
PL3050568T3 (pl) 2007-03-13 2021-06-14 Jds Therapeutics, Llc Sposoby i kompozycje do przedłużonego uwalniania chromu
WO2009002867A2 (en) 2007-06-26 2008-12-31 Nutrition 21, Inc. Multiple unit dosage form having a therapeutic agents in combination with a nutritional supplement
WO2011017346A2 (en) 2009-08-03 2011-02-10 Emisphere Technologies, Inc. Fast-acting naproxen composition with reduced gastrointestinal effects
AU2011213175A1 (en) * 2010-02-04 2014-02-20 Michael M. Goldberg Use of oral heparin preparations to treat urinary tract diseases and conditions
WO2012119007A1 (en) 2011-03-01 2012-09-07 N21 Acquisition Holding, Llc Compositions of insulin and chromium for the treatment and prevention of diabetes, hypoglycemia and related disorders
SI3738434T1 (sl) 2011-12-28 2024-01-31 Global Blood Therapeutics, Inc. Vmesne spojine za pridobivanje substituiranih benzaldehidnih spojin in postopki njihove uporabe pri povečanju oksigenacije tkiv
IN2014MN01484A (cs) * 2011-12-28 2015-05-01 Artur Viktorovich Martynov
HK1203412A1 (en) 2011-12-28 2015-10-30 Global Blood Therapeutics, Inc. Substituted heteroaryl aldehyde compounds and methods for their use in increasing tissue oxygenation
BR112015003761B1 (pt) 2012-08-23 2022-02-15 Emisphere Technologies, Inc Composto, composição farmacêutica, forma unitária de dosageme método para preparar uma composição
WO2014145040A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Global Blood Therapeutics, Inc. Substituted aldehyde compounds and methods for their use in increasing tissue oxygenation
US10266551B2 (en) 2013-03-15 2019-04-23 Global Blood Therapeutics, Inc. Compounds and uses thereof for the modulation of hemoglobin
US9458139B2 (en) 2013-03-15 2016-10-04 Global Blood Therapeutics, Inc. Compounds and uses thereof for the modulation of hemoglobin
EP2968299B1 (en) 2013-03-15 2021-01-20 Global Blood Therapeutics, Inc. Compounds and uses thereof for the modulation of hemoglobin
KR102293060B1 (ko) 2013-03-15 2021-08-23 글로벌 블러드 테라퓨틱스, 인크. 헤모글로빈 조정을 위한 화합물 및 이의 용도
US9422279B2 (en) 2013-03-15 2016-08-23 Global Blood Therapeutics, Inc. Compounds and uses thereof for the modulation of hemoglobin
SG10201802911RA (en) 2013-03-15 2018-05-30 Global Blood Therapeutics Inc Compounds and uses thereof for the modulation of hemoglobin
US8952171B2 (en) 2013-03-15 2015-02-10 Global Blood Therapeutics, Inc. Compounds and uses thereof for the modulation of hemoglobin
EA202092627A1 (ru) 2013-11-18 2021-09-30 Глобал Блад Терапьютикс, Инк. Соединения и их применения для модуляции гемоглобина
KR102345380B1 (ko) 2014-02-07 2021-12-29 글로벌 블러드 테라퓨틱스, 인크. 2-하이드록시-6-((2-(1-이소프로필-1h-피라졸-5-일)피리딘-3-일)메톡시)벤즈알데하이드의 유리 염기의 결정성 다형체
WO2016128973A1 (en) 2015-02-09 2016-08-18 Entera Bio Ltd. Treatment of osteoporosis
DK3383392T3 (da) 2015-12-04 2025-08-18 Global Blood Therapeutics Inc Doseringsskema for 2.HYDROXY.6.((2.(1.ISOPROPYL.1H.PYRAZOL.5.YL)PYRIDIN.3.YL)METHOXY)BENZALDEHYD
EP3413900A1 (en) 2016-02-11 2018-12-19 Nutrition 21, LLC Chromium containing compositions for improving health and fitness
TWI825524B (zh) 2016-05-12 2023-12-11 美商全球血液治療公司 用於合成2-羥基-6-((2-(1-異丙基-1h-吡唑-5-基)-吡啶-3-基)甲氧基)苯甲醛之方法
CN116831977A (zh) 2016-08-17 2023-10-03 安提拉生物有限公司 用于口服的活性剂的制剂
TW202332423A (zh) 2016-10-12 2023-08-16 美商全球血液治療公司 包含2-羥基-6-((2-(1-異丙基-1h-吡唑-5-基)吡啶-3-基)甲氧基)-苯甲醛之片劑
EP3860975B1 (en) 2018-10-01 2023-10-18 Global Blood Therapeutics, Inc. Modulators of hemoglobin for the treatment of sickle cell disease

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2375138A (en) * 1942-05-01 1945-05-01 American Cyanamid Co Alkamine esters of aryloxymethyl benzoic acid
NL133069C (cs) * 1966-07-29
JPS55145648A (en) * 1979-05-02 1980-11-13 Hisamitsu Pharmaceut Co Inc New derivative of anthranylic acid
ZA803880B (en) * 1979-06-29 1982-02-24 Wellcome Found Pharmaceutical ethers,preparation,use and intermediates therefor and their preparation
JPS5750946A (en) * 1980-09-10 1982-03-25 Hisamitsu Pharmaceut Co Inc Novel anthranilic acid derivative
DE3206030A1 (de) * 1981-02-19 1982-09-09 Fuji Photo Film Co., Ltd., Minami-Ashigara, Kanagawa Verfahren zur bildung von polymeren bildern und druckplatten
IE54269B1 (en) * 1981-12-30 1989-08-02 Ici America Inc Pharmaceutically active phenylcarboxylic acid derivatives
JPS58142901A (ja) * 1982-02-19 1983-08-25 Nippon Zeon Co Ltd ゴムの変性方法
JPH0245481A (ja) * 1988-08-03 1990-02-15 Yamamura Kagaku Kenkyusho:Kk クマラン化合物の製造法
DE4142514A1 (de) * 1991-12-21 1993-06-24 Basf Ag Verfahren zur bekaempfung von pilzen
FR2687316B3 (fr) * 1992-02-13 1994-08-12 Rolland Sa A Nouvelle utilisation de compositions pharmaceutiques a base de derives phenoxyacetiques en vue de la restauration des fonctions nerveuses.
IL104283A (en) * 1992-12-30 1996-12-05 Agis Ind 1983 Ltd Non-emulsion antiviral topical pharmaceutical composition comprising acyclovir an aqueous gel agent and an alkali oleate
US5364767A (en) * 1993-02-11 1994-11-15 Research Organics, In. Chromogenic compounds and methods of using same
FR2710782A1 (fr) * 1993-09-29 1995-04-07 Sodern Tube neutronique à confinement magnétique des électrons par aimants permanents et son procédé de fabrication.
US5837702A (en) * 1993-10-07 1998-11-17 Bristol-Myers Squibb Co. 4-arylamino-benzopyran and related compounds
TW270114B (cs) * 1993-10-22 1996-02-11 Hoffmann La Roche
US5783593A (en) * 1993-11-04 1998-07-21 Abbott Laboratories Inhibitors of squalene synthetase and protein farnesyltransferase
US5650386A (en) * 1995-03-31 1997-07-22 Emisphere Technologies, Inc. Compositions for oral delivery of active agents
US5824638A (en) * 1995-05-22 1998-10-20 Shire Laboratories, Inc. Oral insulin delivery
US5747537A (en) * 1995-09-05 1998-05-05 Washington University Method of inhibiting parasitic activity
JPH09207543A (ja) * 1996-02-08 1997-08-12 Denso Corp 空調装置
JP2001527517A (ja) * 1996-07-26 2001-12-25 スーザン・ピー・ペリーネ 血液、ウイルス性および細胞性疾患の治療組成物
PL191399B1 (pl) * 1996-10-28 2006-05-31 Gen Mills Inc Sposób kapsułkowania lub osadzania składnika w osnowie w procesie ciągłym, sposób kapsułkowania i/lub osadzania składników w osnowie opartej na węglowodanach, sposób kapsułkowania i/lub osadzania składników w osnowie oraz kapsułka
KR100610403B1 (ko) * 1998-01-20 2006-08-10 어플라이드 애널리티컬 인더스트리즈, 인크. 경구용 액상 또는 반-고체 조성물을 포함하는 약제학적 조성물 및 이의 제조방법

Also Published As

Publication number Publication date
HU229415B1 (en) 2013-12-30
PL354996A1 (en) 2004-03-22
AU2622301A (en) 2001-05-14
NZ530450A (en) 2004-06-25
IL149337A0 (en) 2002-11-10
EP1226109A2 (en) 2002-07-31
AU1655401A (en) 2001-05-14
HK1048801B (en) 2009-08-28
MXPA02004092A (es) 2003-02-12
IL149336A0 (en) 2002-11-10
HK1048801A1 (en) 2003-04-17
KR100788970B1 (ko) 2007-12-27
WO2001032596A1 (en) 2001-05-10
JP2004501057A (ja) 2004-01-15
ATE427925T1 (de) 2009-04-15
IL195055A (en) 2015-07-30
AU783157B2 (en) 2005-09-29
EP1226109A4 (en) 2005-01-26
IL149337A (en) 2010-04-15
AU2005248960A1 (en) 2006-02-02
DE60041976D1 (de) 2009-05-20
EP1226104B1 (en) 2009-04-08
MXPA02004451A (es) 2002-10-23
HUP0600033A2 (en) 2006-08-28
CN1384814B (zh) 2015-11-25
CA2388240C (en) 2010-04-20
CA2390025A1 (en) 2001-05-10
BR0015567A (pt) 2002-07-16
PL201505B1 (pl) 2009-04-30
WO2001032130A3 (en) 2002-03-14
WO2001032596A8 (en) 2001-08-09
KR20020060222A (ko) 2002-07-16
AU2005248960B2 (en) 2009-01-29
CZ20021570A3 (cs) 2002-10-16
CA2388240A1 (en) 2001-05-10
CN1384814A (zh) 2002-12-11
BRPI0015567B1 (pt) 2016-10-25
JP5117658B2 (ja) 2013-01-16
JP2003513060A (ja) 2003-04-08
EP1226104A4 (en) 2005-05-04
BRPI0015567B8 (pt) 2021-05-25
IL195055A0 (en) 2009-08-03
WO2001032130A2 (en) 2001-05-10
EP1226104A1 (en) 2002-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20021554A3 (cs) Deriváty fenoxykarboxylové sloučeniny a prostředky pro dodávání aktivní sloľky
US7951971B1 (en) Phenoxy carboxylic acid compounds and compositions for delivering active agents
US7977506B2 (en) Compounds and compositions for delivering active agents
US7390834B2 (en) Cyanophenoxy carboxylic acid compounds and compositions for delivering active agents
US7138546B2 (en) Compounds and compositions for delivering active agents
RU2300516C2 (ru) Соединения феноксикарбоновой кислоты и композиции для доставки активных веществ
US7279597B1 (en) Phenyl amine carboxylic acid compounds and compositions for delivering active agents
CA2662853C (en) Compounds and compositions for delivering active agents