CZ20011808A3

CZ20011808A3 - Sloučenina pyridiniové řady, způsob její výroby a jejího použití, farmaceutický přípravek ji obsahující a jeho použití

Info

Publication number: CZ20011808A3
Application number: CZ20011808A
Authority: CZ
Inventors: Alangudi Sankaranarayanan
Original assignee: Torrent Pharmaceuticals Ltd
Priority date: 1999-10-06
Filing date: 1999-10-15
Publication date: 2001-08-15
Also published as: JP2003511370A; MXPA02003496A; EP1220843A1; HK1044336A1; WO2001025209A1; CA2351075A1; HUP0301687A2; PL348049A1; AU5994499A; CN1329597A; BR9915962A

Description

Oblast techniky

Předložený vynález se týká skupiny sloučenin pyridiniové řady a způsobu jejich výroby a jejich použití pro léčení diabetů a souvisejících nemocí. Podrobněji, tento vynález se týká sloučenin této řady, způsobů jejich výroby, farmaceutického prostředku obsahujícího tyto sloučeniny a jejich použití při léčení komplikací diabetes mellitus. Sloučeniny této řady vykazují aktivitu štěpící AGE, což je podstatné pro léčení diabetických komplikací a komplikací souvisejících se stárnutím zahrnujících onemocnění ledvin, nervové poškození, aterosklerózu, retinopatii a dermatologické stavy. Tento vynález se týká také způsobu změnění zabarvování zubů pocházejícího od neenzymatického hnědnutí orální dutiny, které zahrnuje podávání takového množství, které je účinné pro změnění předem vytvořeného pokročilého glykosylačního zesíťování.

Dosavadní stav techniky

Maillard v roce 1912 zjistil, že redukující cukry, jako je glukosa a ribosa, reagují s proteiny za vzniku hnědých pigmentů. Další studie ukázaly, že jde o irreversibilní neenzymatickou reakci, která se vyskytuje v některých přirozených systémech, mezi které patří skladované potraviny. K Maillardově reakci dochází ve dvou stupních, časném a pokročilém. Na počátku proteiny reagují s glukosou za vzniku stabilních Amadoriho produktů, které se následně zesíťují za vzniku pokročilých glykačních konečných produktů (AGE). Ve většině případů je tvorba AGE doprovázena také hnědnutím proteinů a zvýšením fluorescence.

U diabetů, kde je hladina krevní glukosy významně vyšší než normální hladina, reakce glukosy s několika proteiny, jako je hemoglobin, oční krystalický protein a kolagen, vede ke vzniku AGE, což je dále zodpovědné za komplikace související s •· ···· ·· ···· ·· • · · · · · · • · ····· ·· • ···· ···· diabetem, jako je nefropatie, mikroangiopatie, endoteliální dysfunkce a další orgánové dysfunkce. Navíc je oslabena také aktivita několika růstových faktorů, jako je růstový faktor bazických fibroblastů. AGE produkty, na rozdíl od normálních proteinů v tkáni, mají nižší rychlost přeměny a doplňování. Bylo popsáno, že AGE produkty mohou skutečné vyvolávat komplexní imunologickou reakci zahrnující RAGE receptory (receptor pokročilých glykačních konečných produktů) a aktivaci několika neúplně definovaných imunologických procesů. Bylo dokumentováno, že diabetes s průkazem mikroangiopatie a makroangiopatie vykazuje také průkaz oxidačního stresu, jehož mechanismus nebyl objasněn.

In vitro tvorba AGE může být studována v laboratoři inkubováním redukujících cukrů, jako je ribosa nebo glukosa, s hovězím sérovým albuminem. Tvorba AGE může být detegována zvýšením fluorescence nebo zvýšením zkřížené reaktivity s anti-AGA protilátkami. Zdá se, že zvýšení fluorescence předchází tvorbě AGA specifických antigenových epitopů. Toto zvýšení fluroescence se používá jako monitor zvýšené tvorby AGE in vitro (Brownlee M. a spol.: Science 1986, 232, 1629 až 1632.). Vedle zvýšení fluorescence je jedním z nejdůležitějších znaků in vitro tvorby AGE tvorba antigenních epitopů, které jsou specifické pro AGE a ne pro přírodní proteiny. Je tedy možný vznik protilátek proti pokročilým glykačním konečným produktům jednoho proteinu a jejich použití pro detegování tvorby AGE v jiných proteinech. To slouží jako důležitý analytický nástroj při výzkumu AGE.

Díky klinickému významu tvorby AGE bylo pro diagnostikování, předcházení nebo revertování tvorby AGE v těle použito mnoho postupů. Tvorba AGE by mohla být inhibována zreagováním s produktem časné glykosylace, což vede k originální reakci mezi cílovým proteinem a glukosou. O inhibici se předpokládá, že k ní dochází reakcí mezi inhibitorem a časným glykosylačním produktem, což přerušuje následnou reakci glykosylovaného proteinu s dalším proteinovým materiálem za vzniku zesnovaného produktu posledního stupně. Sloučeniny, jako je aminoguanidin, působí tak, že tímto mechanismem inhibují tvorbu AGE.

·«·· ·· ···· ·· • · · · · · · • · ···· · ·

Tvorba AGA na dlouhověkých proteinech souvisí také se zesíťováním těchto proteinů. Bylo ukázáno, že zesíťování proteinů odvozené od AGE je štěpeno takovými sloučeninami, jako je N-fenacylthiazoliumbromid (PTB), který reaguje a štěpí kovalentní zesíťování proteinů odvozené od AGE (Vasan a spol.: Nátuře 1996, 382,275 až 278; USA patent č. 5 853 703, datum patentu: 29. prosinec 1998.). Očekává se, že mechanismus snižování obsahu AGE v tkáních probíhá relativně rychle, na rozdíl od aminoguanidinu, který působí pomalu jeho velmi porozeným mechanismem působení. Předložený spis se týká pyridiniových sloučenin, které štěpí předem vytvořený AGE, podobně jako PTB, a v mnoha případech dokonce účinněji než PTB.

Podstata vynálezu

Hlavním předmětem předloženého vynálezu je získat skupinu sloučenin pyridiniové řady, které jsou užitečné pro ovládání diabetů a vaskulámích komplikací souvisejících se stárnutím a zvláště léčení komplikací diabetes mellitus a dalších stavů souvisejících se stárnutím, mezi které patří onemocnění ledvin, nervové poškození, ateroskleróza, retinopatie a dermatologické stavy. Tento vynález zahrnuje také způsob změny zbarvení zubů pocházejícího od neenzymatického hnědnutí v ústní dutině, podle kterého se podává množství účinné pro změnění dříve vytvořeného glykosylačního zesíťování atd.

Jiným předmětem předloženého vynálezu je získání sloučenin pyridiniové řady, které mají aktivitu spočívající ve štěpení AGE.

Ještě dalším předmětem předloženého vynálezu je získat způsob výroby sloučenin pyridiniové řady, které mají aktivity spočívající ve štěpení AGE.

Ještě dalším předmětem vynálezu je získání farmaceutických prostředků s novou skupinou sloučenin pyridiniové řady podle tohoto vynálezu a jejich farmaceuticky přijatelných solí v kombinaci s vhodnými nosiči, rozpouštědly, vehikuly, ředidly a dalšími medii normálně používanými při výrobě takových prostředků.

·· ···· ·· ···· ·· • · · · · · · • · ····· ·· • ···· · ♦ · ·

Ještě jiným předmětem vynálezu je získat způsob léčení diabetického pacienta podáváním sloučenin podle vynálezu, buď samostatně nebo v kombinaci s léčivy pro antidiabetickou terapii, nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí v požadovaných dávkách ve směsi s farmaceuticky přijatelným ředidlem, rozpouštědlem, vehikuly, nosiči nebo jinými medii, podle vhodnosti pro daný účel.

V následující části je předložený vynález popsán podrobně.

Předložený vynález se týká nové skupiny činidel, která štěpí AGA, obecného vzorce I

O (I).

v němž

R¹ znamená skupinu -Y-R³,

Y znamená atom kyslíku nebo skupinu NH,

R³ znamená atom vodíku, alkyl nebo aryl,

R² je vybrán ze skupiny sestávající z alkylu, -Oalkylu, arylu, -Oarylu, -NHalkylu a -NHarylu,

X je vybrán ze skupiny sestávající z halogenidového iontu, acetátového iontu, chloristanového iontu, sulfonátového iontu, šťavelanového iontu, citrátového iontu, tosylátového iontu, maleinátového ionmtu.mesylátového iontu, uhličitanového iontu, ·· · ··· «·· • · «···· ·· • · · · · · « · · siřičitanového iontu, hydrogenfosforečnanového iontu, fosfonátového iontu, fosforečnanového iontu, BF₄’ a PF_e’ s tím, že

a) jestliže R¹ znamená fenyl, potom R² také znamená fenyl a

b) jestliže R² znamená fenyl a X znamená halogenidový ion, potom R¹ znamená jinou skupinu nebo -OCH₃.

Pojem alkyl, jak je zde používán, znamená popřípadě substituovanou nasycenou uhlovodíkovou skupinu napojenou jednoduchými vazbami atom uhlíku - atom uhlíku a s 1 až 4 atomy spolu spojenými uhlíky. Nasycená alkylová uhlovodíková skupina může být lineární nebo větvená. Substituent znamená skupinu -OH.

Pojem aryl, jak je zde používán, znamená popřípadě substituovanou aromatickou skupinu s alespoň jedním kruhem, který má konjugoovaný pí-elektronový systém, obsahující až dva konjugované nebo kondenzované kruhové systémy. Mezi aryly patří karbocyklická arylová a heterocyklická arylová skupina, při čemž všechny mohou být popřípadě substituovány atomem halogenu, sulfonamidovou skupinou, thioskupinou, aminovou skupinou, kyanovou skupinou, -Oalkylem, -NHalkylem, hydroxylem, formylem, -Oarylem a -NHarylem.

Representativní sloučeniny obecného vzorce I, které jsou nové, jsou uvedeny v tabulce IA. Tyto sloučeniny s následujícími chemickými názvy jsou zde navrženy jako příklady a v žádném případě neznamenají omezení tohoto vynálezu.

3-Karbonylamino-1 -(2-(2,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 1)· 3-(Tetrahydrobenzothiazol-2-yl)aminokarbonyl)-1-(2-(2,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 2).

1-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 3).

3-Karbonylamino-1-(2-thien-2'-yl-2-oxoethyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 4).

• · · · · · ·· ···· ·· • · · · · · * • · ····· ·· • ···· ·«··

1-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-((p-sulfonamidofenylen)aminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 5).

1-(2-Ethoxy-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 6).

1-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-(isopropyloxykarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 7). 1-(2-Methyl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 8).

1-(2-Thien-2-yl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 9).

1-(2-(2,4-Dichlorfenyl-2-oxoethyl)-3-(isopropyloxykarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 10).

1-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-((4-methylthiazol-2-yl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 11).

1-(2-Fenylamino-2-oxoethyl)-3-(butyloxykarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 12).

-(2-Fenylamino-2-oxoethyl)-3-(butylaminokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 13).

1-(2-Fenylamino-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 14).

-(2-(2,4-Dichlorfenyl-2-oxoethyl)-3-(butoxykarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 15).

1-(2-(2,4-Dichlorfenyl)-2-oxoethyl)-3-(butylaminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina 16).

Dále pak byly některé pyridinové deriváty studovány na jejich aktivitu štěpení AGE, která nebyla dříve pro tyto molekuly známa. Jejich seznam je uveden v tabulce IB s jejich chemickými názvy uvedenými níže.

-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-(1 -fenyl-1 -oxomethyl)pyridiniumbromid (sloučenina 17 (odkaz: Chemical Abstracts 1979 91, P47378Y)).

1-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-(methoxykarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina 18 (odkaz: Chemical Abstracts 1979 97, P47378Y)).

• · · ·

Tabulka ΙΑ

Pyridiniové deriváty (nové)

sloučenina č.	-R¹	-R²	-X
1	nh₂	2,4-dichlorfenyl	Br
2	tetrahydrobenzo-thiazol-2-yl-amino	2,4-dichlorfenyl	Br
3	NHCH₂CH₂OH	fenyl	Br
4	nh₂	2-thienyl	Br
5	(p-sulfonamido-fenylen)amino	fenyl	Br
6	NHCH₂CH₂OH	OEt	Br
7	OCH(CH₃)₂	fenyl	Br
8	NHCH2CH2OH	ch₃	Cl
9	NHCH2CH2OH	2-thienyl	Br
10	OCH(CH₃)₂	2,4-dichlorfenyl	Br
11	(4-methylthiazol-2-yl)amino	fenyl	Br
12	OCH₂CH₂CH₂CH₃	NHPh	Cl
13	nhch₂ch₂ch₂ch₃	NHPh	Cl
14	NHCH2CH2OH	NHPh	Cl
15	OCH₂CH₂CH₂CH₃	2,4-dichlorfenyl	Bri
16	nhch₂ch₂ch₂ch₃	2,4-dichlorfenyl	Br

Tabulka IB

Pyridiniové deriváty (známé)

sloučenina č.	-R¹	-R²	-X
17	fenyl	fenyl	Br
18	och₃	fenyl	Br

Podle jednoho provedení předloženého vynálezu se předložené sloučeniny používají pro léčení diabetických komplikací a komplikací souvisejících se stárnutím, mezi které patří onemocnění ledvin, nervové poškození, ateroskleróza, retinopatie, dermatologické stavy a zbarvení zubů vyskytující se díky vyšším hladinám drive vytvořených AGE. Zvýšené hladiny drive vytvořených AGE se mohou podrobit regulaci rozštěpením AGE produktů použitím sloučenin uvedených v tomto vynálezu.

Tento vynález poskytuje také způsob výroby sloučenin pyridiniové řady.

Uvedený způsob výroby sloučeniny 1 zahrnuje přidání roztoku 2,4-dichlorfenacylbromidu v toluenu k nikotinamidu rozpuštěnému v toluenu vroucím pod zpětným chladičem, vaření sedm a půl hodiny pod zpětným chladičem, ochlazení, zfiltrování vysrážené pevné látky, rozpuštění v methanolu, zpracování s aktivním uhlím, zahuštění ve vakuu a ochlazení ve směsi ledu se solí. Vysrážená pevná látka se odfiltruje, promyje se methanolem a získá se tak žádaná sloučenina.

Podobně se vyrábějí další sloučeniny obecného vzore» I z příslušně substituovaných pyridinových derivátů s následující kvartemizací příslušným reakčním činidlem vařením pod zpětným chladičem v alkoholických rozpouštědlech, jako je methanol, ethanol, propanol atd., a vysokovroucích rozpouštědlech, jako je toluen nebo xylen atd., po dobu 6 až 48 hodin. Získají se tak žádané sloučeniny.

·· ···> · · · φ«· · * • · 9 · · · · * · ····· · ♦ • ···· ····

Ιη vitro tvorba AGE, studovaná v laboratoři inkubováním redukujícího cukru ribosy proteinem, hovězím sérovým albuminem, vedla ke zhnědnutí roztoku a ke zvýšení fluroescence. Pro sledování zvýšené tvorby AGE byla jako kriterium použita fluorescence.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Aktivita štěpení AGE byla potvrzena níže uvedeným postupem testování.

Materiály:

hovězí sérový albumin (frakce V) (BSA) ribosa pro analýzu fosforečnanový pufr (PBS)

Zařízení:

čtečka mikrodesek ELISA - Spectramax Plus (Molecular Devices, USA) systém promývání mikrodesek (Bio-Tec Instruments, USA) pH-meter

Způsob pokusu

160 mg/ml proteinu, hovězí sérový albumin, BSA, a 1,6M glukosa byly rozpuštěny ve fosforečnanovém pufru, PBS. Jako ochranné činidlo byl přidán azid sodný v 0,02% (hmotn.) koncentraci. Tento roztok se asepticky zfiltruje 0,22μΜ filtrem a nechá se stárnout 16 týdnů při 37 °C. Po 16 týdnech byl roztok dialyzován proti PBS, rozdělen na podíly a skladován při -20 °C.

·· ···< 9 - ·· ·· » » • ·<»··» ► « • · *···« · « • ·«·· * · > 9

Pro stanovení aktivity štěpení AGE se 10 pg/ml a 100 pg/ml šestnáctitýdenního AGE-BSA inkubuje s různými koncentracemi testovaných sloučenin 24 hodin při 37 °C a ELISA testem se stanoví aktivita štěpení AGE testovanými sloučeninami.

Test ELISA se provádí následujícím způsobem:

1. Různé koncentrace šestnáctitýdenního AGE-BSA se potáhnou na mikrotitrovací desku jako standard. Každá koncentrace se potáhne v trojím provedení.

2. Testované vzorky se potáhnou na mikrotitrovací desku v koncentraci 5 ng až 20 ng na jamku v trojím provedení.

3. Deska se inkubuje jednu hodinu při 37 °C.

4. Po inkubaci se deska promyje PBST (PBS s 0,05 % hmotn. Tweenu 20).

5. Provede se blokování 5% (hmotn.) sbíraným mlékem v PBS při 37 °C po dobu jedné hodiny.

6. Deska se promyje PBST.

7. Přidá se primární protilátka proti AGE-BSA a deska se inkubuje jednu hodinu při 37 °C.

8. Deska se promyje PBST.

9. Přidá se konjugát sekundární protilátka protikráličí HRPO (křenová peroxidasa) a deska se inkubuje jednu hodinu při 37 °C.

10. Deska se promyje PBST.

11. Provede se vybarvení OPD (dihydrochloridem orthofenylendiaminu) a peroxidem vodíku.

12. Po 15 minutách inkubace při 37 °C se čtečkou mikrodesek ELISA změří OD (optická hustota) při 450 nm až 620 nm.

Aktivita štěpení sloučenin byla stanovena podle následujícího vzorce:

% aktivity štěpení = [(OD450620 kontroly - OD45&«2o testu): (OD45&«2o kontroly)]. 100.

OD450-620 kontroly znamená absorbanci 20 ng AGE-BSA po 24 hodinách inkubace při 37 °C bez testované sloučeniny.

OD45&620 testu znamená absorbanci 20 ng AGE-BSA po 24 hodinách inkubace pn 37 °C s potřebnou koncentrací testované sloučeniny.

Použitím specifických příkladů se vypočte % aktivity štěpení AGE a zaznamená se v tabulce 2.

Tabulka 2

vzorek	koncentrace	% štěpení
PTB	10mM	27
	20nM	47
sloučenina 3	10nM	5
sloučenina 4	10nM	3
sloučenina 6	10nM	43
sloučenina 9	10nM	50
sloučenina 12	10nM	57
sloučenina 13	10nM	27
sloučenina 14	20nM	48
sloučneina 17	5nM	45
sloučneina 18	20nM	36

Sloučenina 12 má tedy významnou aktivitu spočívající ve štěpení AGE, tj. má relativně mnohem lepší aktivitu při srovnání s PTB.

Následující příklady uvádějí způsoby výroby specifických sloučenin podle vynálezu, jak jsou tyto sloučeniny uvedeny v tabulce 1. Následující navržené sloučeniny jsou pouze příklady a v žádném případě neznamenají omezení tohoto vynálezu.

Příklad 2

Výroba 3-karbonylamino-1 -(2-(2,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)pyridiniumbromidu (sloučenina 1)

Nikotinamid (1,22 g, 0,01 molu) se rozpustí ve vroucím toluenu (40 ml) pod zpětným chladičem. Přidá se roztok 2,4-dichlorfenacylbromidu (3,0 g, 0,012 molu) v 10 ml toluenu. Reakční směs se vaří 7,5 hodiny pod zpětným chladičem a ochladí se. Vysrážená pevná látka se zfiltruje, rozpustí se v methanolu, odbarví se aktivním uhlím a ve vakuu se zahustí na čtvrtinu objemu. Ochladí se ve směsi ledu se solí. Vysrážená pevná látka se odfiltruje a promyje se methanolem (3x10 ml). Získá se tak čistá pevná látka. Výtěžek 39 % hmotn. T.t. 237 až 239 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 3331, 3133, 1706 a 1678. ¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 9,54 (1 H, s), 9,18 až

7,72 (1 H, m), 6,49 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 309, 310, 311, 312,187 a 159.

Podle shora uvedeného postupu se syntetizují následující sloučeniny zreagováním odpovídajících pyridinových derivátů s příslušnými reakčními činidly varem pod zpětným chladičem v alkoholických rozpouštědlech, jako je methanol, ethanol, propanol atd., a ve vysokovroucích rozpouštědlech, jako je toluen nebo xylen, po dobu 6 až 48 hodin. Získají se tak žádané sloučeniny.

Příklad 3

3-(Tetrahydrobenzothiazol-2-yl)aminokarbonyl)-1-(2-(2,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 2).

Výtěžek 48 % hmotn. T.t. 165 až 167 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm’¹): 3333, 1714, 1684 a 1635. ¹H NMR spektrum (CD₃OD, 400 MHz, δ): 9,45 (1 H, s), 9,27 až 9,24 (1 H, m), 8,92 až 8,91 (1 H, m), 8,24 až 8,21 (1 H, m), 8,01 až 7,99 (1 H, m), 7,72

až 7,71 (1 H, m), 7,57 až 7,54 (1 H, m), 2,59 až 2,57 (4 H, m), 1,85 (4 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z 446, 447,448,449, 416, 307 a 266.

Příklad 4

1-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyndiniumbromid (sloučenina č. 3)

Výtěžek 98 % hmotn. T.t. 182 až 184 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm'¹): 3289, 3241, 1690 a 1660.¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 9,47 (1 H, s), 9,21 (1 H, t), 9,09 (2H, t), 8,41 až 8,37 (1 H, m), 8,08 až 8,04 (2 H, m), 7,82 až 7,78 (1 H, m), 7,69 až 7,65 (2 H, m), 6,52 (2 H, s), 4,86 (1 H, t), 3,58 až 3,54 (2 H, m), 3,42 až 3,38 (2 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z 285, 242,149,119 a 91.

Příklad 5

3-Karbonylamino-1-(2-thien-2'-yl-2-oxoethyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 4)

Výtěžek 35 % hmotn. T.t. 212 až 215 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm'¹): 3295, 3126, 1680, 1671 a 1640. ¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 9,49 (1 H, s), 9,13 až 9,11 (1 H, d), 9,07 až 9,05 (1 H, d), 8,60 (1 H, široký s), 8,40 až 8,38 (1 H, m), 8,25 až 8,19 (3 H, m), 7,43 až 7,40 (1 H, t), 6,44 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 247, 248, 249 a 193.

Příklad 6

1-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-((p-sulfonamidofenylen)aminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 5)

Výtěžek 44 % hmotn. T.t. 188 až 190 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 3296,1700 a 1679.¹H NMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 11,25 (1 H, s), 9,58 (1 H, s), 9,25 (1

H, d), 9,16 (1 Η, d), 8,45 (1 Η, t), 8,10 (2 Η, d), 7,94 (2 Η, d), 7,86 (2 Η, d), 7,82 (1 Η, t), 7,68 (2 Η, t), 7,36 (2 Η, s), 6,5 (2 Η, s). Hmotnostní spektrum: m/z 396 a 277.

Příklad 7

1-(2-Ethoxy-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 6)

Výtěžek 87 % hmotn. T.t. 138 až 140 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 1748 a 1669. ¹H NMR spektrum (CD₃OD, 400 MHz, δ): 9,43 (1 H, s), 9,09 až 9,02 (2 H, m), 8,26 (1 H, m), 5,64 (2 H, s), 4,31 (2 H, q), 3,73 (2 H, t), 3,54 (2 H, t), 1,32 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 251, 252,165 a 166.

Příklad 8

1-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-(isopropyloxykarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 7)

Výtěžek 46 % hmotn. T.t. 172 až 174 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1726 a 1692. ¹H NMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 9,55 (1 H, s), 9,16 (1 H, d), 9,08 (1 H, d), 8,39 až 8,36 (1 H, m), 8,04 (2 H, d), 7,77 (1 H, t), 7,64 (2 H, t), 6,53 (2 H, s), 5,25 až 5,19 (1 H, m), 1,34 (6 H, d). Hmotnostní spektrum: m/z 284, 285 a 242.

Příklad 9

1-(2-Methyl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 8)

Výtěžek 47 % hmotn. T.t. 178 až 180 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1727 a 1660. ¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 9,33 (1 H, t), 9,30 (1 H, s), 9,06 (1 H, d), 8,90 (1 H, d), 8,25 až 8,21 (1 H, m), 5,75 (2 H, s), 4,84 (1 H, široký s), 3,47 (2 H, t), 3,30 (2 H, t), 2,23 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 223,224 a 225.

Příklad 10

1-(2-Thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 9)

Výtěžek 60 % hmotn. T.t. 207 až 209 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1673 a 1656. ¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 9,47 (1 H, s), 9,18 až 9,05 (3 H, m), 8,38 až 8,34 (1 H, m), 8,23 až 8,19 (2 H, m), 7,39 (1 H, t), 6,44 (2 H, s), 3,55 až 3,50 (2 H, m), 3,40 až 3,37 (2 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z 291, 292 a 293.

Přikladli

1-(2-(2,4-Dichlorfenyl-2-oxoethyl)-3-(isopropyloxykarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 10)

Výtěžek 26 % hmotn. T.t. 160 až 162 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1726 a 1705. ¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 9,55 (1 H, s), 9,15 (1 H, d), 9,08 (1 H, d), 8,40 až 8,36 (1 H, m), 8,11 (1 H, d), 7,89 (1 H, široký s), 7,75 až 7,72 (1 H, m), 6,44 (2 H, s), 5,26 až 5,20 (1 H, m), 1,34 (6 H, d). Hmotnostní spektrum: m/z 352, 353, 354 a 310.

Příklad 12

1-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-((4-methylthiazol-2-yl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 11)

Výtěžek 30 % hmotn. T.t. 165 až 167 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 3409, 3319 a 1698.¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 9,58 (1 H, s), 9,22 (1 H, d), 9,11 (1 H, d), 8,42 až 8,38 (1 H, m), 8,07 (2 H, d), 7,81 (1 H, t), 7,68 (2 H, t), 6,86 (1 H, široký s), 6,56 (2 H, s), 2,30 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 337, 338,232 a 105.

• · · • ·· •· • · ··

Příklad 13

1-(2-Fenylamino-2-oxoethyl)-3-(butoxykarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 12)

Výtěžek 10 % hmotn. T.t. 150 až 152 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 3228,1742 a 1687 (široký signál). ¹H NMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 10,96 (1 H, s), 9,65 (1 H, s), 9,28 (1 H, t), 9,09 (1 H, d), 8,37 až 8,34 (1 H, m), 7,62 až 7,59 (2 H, m), 7,37 až 7,33 (2 H, m), 7,11 (1 H, t), 5,79 (2 H, s), 4,41 (2 H, t), 1,76 až 1,72 (2 H, m), 1,48 až 1,43 (2 H, m), 0,94 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 314 a 315.

Příklad 14

-(2-Fenylamino-2-oxoethyl)-3-(butylaminokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 13)

Výtěžek 37 % hmotn. T.t. 182 až 185 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 3245,1742 a 1679.¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 10,97 (1 H, s), 9,50 (1 H, s), 9,24 (1 H, t), 9,13 (1 H, d), 9,02 (1 H, d), 8,28 až 8,25 (1 H, m), 7,57 (2 H, d), 7,30 (2 H, t), 7,05 (1 H, t), 5,70 (2 H, s), 3,30 až 3,26 (2 H, m), 1,52 až 1,48 (2 H, m), 1,34 až 1,30 (2 H, m), 0,86 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 312 a 313.

Příklad 15

1-(2-Fenylamino-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 14)

Výtěžek 58 % hmotn. T.t. 225 až 227 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 3448, 3271, 1702 a 1663.¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 11,07 (1 H, s), 9,58 (1 H, s),

9,35 (1 H, t), 9,17 (1 H, d), 9,11 (1 H, d), 8,33 až 8,29 (1 H, m), 7,60 (2 H, d), 7,32 (2 H, t), 7,08 (1 H, t), 5,75 (2 H, s), 4,90 (1 H, t), 3,57 až 3,53 (2 H, m), 3,40 až 3,36 (2 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z 300, 301 a 302.

...... :::

» · · · · · · ·· · • ···· ···· · ····· · · * · ···· ·· ·· ··· ·· ···

Příklad 16

-(2-(2,4-Dichlorfenyl)-2-oxoethyl)-3-(butoxykarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 15)

Výtěžek 38 % hmotn. T.t. 154 až 156 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 3435, 3389, 1731 a 1704.¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 9,60 (1 H, s), 9,21 (1 H, d), 9,14 (1 H, d), 8,43 (1 H, t), 8,16 (1 H, d), 7,92 (1 H, s), 7,78 až 7,76 (1 H, m), 6,51 (2 H, s), 4,42 (2 H, t), 1,76 až 1,72 (2H, m), 1,48 až 1,42 (2 H, m), 0,94 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 366, 367, 368, 369 a 370.

Příklad 17

-(2-(2,4-Dichlorfenyl)-2-oxoethyl)-3-(butylaminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 16)

Výtěžek 35 hmotn. T.t. 142 až 144 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 3382, 1698 a 1672. ¹H NMR spektrum (DMSO-de, 400 MHz, δ): 9,37 (1 H, s), 9,07 (1 H, t), 8,99 (2 H, t), 8,31 až 8,28 (1 H, m), 8,04 (1 H, d), 7,82 až 7,81 (1 H, d), 7,68 až 7,65 (1 H, m), 6,34 (2 H, s), 3,27 až 3,24 (2 H, m), 1,47 až 1,43 (2 H, m), 1,29 až 1,24 (2 H, m), 0,81 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 365, 366, 367, 368 a 369.

Farmaceutické prostředky

Farmaceutické prostředky se mohou vyrábět s farmaceuticky účinným množstvím sloučenin obecného vzorce I, jednotlivé nebo v kombinaci. Následující navržené farmaceutické prostředky jsou uvedeny jako poklady a v žádném případě neomezují formy, v nichž se mohou používat.

Orální přípravky

Orální přípravky mohou být podávány jako pevné dávkové formy, například pelety, prášky, sáčky nebo diskrétní jednotky, jako jsou tablety nebo tobolky, a podobné. Mezi další orálně podávané farmaceutické přípravky patří jednofázové a dvoufázové kapalné dávkové formy buď pro okamžité použití nebo ve formách vhodných pro rekonstituování, jako jsou směsi, sirupy, suspenze nebo emulze. Přípravky mohou dále obsahovat ředidla, dispergační činidla, pufry, stabilizační činidla, rozpouštécí činidla, povrchově aktivní činidla, ochranná činidla, chelatační Činidla a/nebo jiné farmaceutické přísady, jak se používají. Může se použít vodné nebo nevodné ředidlo nebo jejich kombinace. Jestliže je to žádoucí, prostředky mohou obsahovat sladidlo, ochucovací činidlo nebo podobné látky. V případě suspenze nebo emulze může být dále přítomno vhodné zahušťující činidlo, suspendační činidlo nebo emulgační činidlo. Tyto sloučeniny se mohou podávat také jako takové v jejich čisté formě neasociované s jinými přísadami, například jako tobolky nebo sáčky. Mohou se podávat také spolu s ředidlem. Farmaceutické přípravky mohou mít pomalé, zpožděné nebo regulované uvolňování účinných složek, což se dosáhne matricí nebo difuzním regulačním systémem.

Jestliže předložený vynález nebo jeho soli nebo vhodné komplexy jsou přítomny jako diskrétní jednotková dávková forma, jako je tableta, může dále obsahovat lékařsky inertní ředidla, jako jsou ta, která se používají v oblasti techniky. Používat se mohou také ředidla, jako je škrob, laktosa, hydrogenfosforečnan vápenatý, talek, stearát hořečnatý, polymemí látky, jako je methylcelulosa, mastné kyseliny a jejich deriváty, sodná sůl glykolátu škrobu atd.

Příklad 18

Výroba orální dávkové formy

Typická tableta má následující složení:

účinná složka obecného vzorce 1	jak shora uvedeno
laktosa	135 mg
škrob	76 mg
polyvinylpyrolidon (K-30) talek	2 mg 1,5 mg
stearát hořečnatý	1,0 mg

Parenterální přípravky

Pro parenterální podávání jsou sloučeniny nebo jejich soli nebo jejich vhodné komplexy přítomny ve sterilním ředidle, které může znamenat vodné nebo nevodné ředidlo nebo jejich kombinaci. Příklady ředidel jsou voda, ethyloleát, oleje a deriváty polyolů, glykolů a jejich deriváty. Mohou obsahovat přísady obvyklé pro injektovatelné přípravky, jako jsou stabilizátory, solubilizátory, činidla upravující pH, pufry, antioxidační činidla, korozpouštédla, komplexující činidla, činidla upravující tonicitu atd.

Některými vhodnými přísadami jsou například vínanové, citrátové nebo podobné pufry, alkohol, chlorid sodný, dextrosa a polymery s vysokou molekulovou hmotností. Jinou alternativou je rekonstituce sterilního prášku. Sloučeniny se mohou podávat ve formě injekce pro více než jedno podávání denně, jako intravenózní infuze/kapačka nebo jako vhodný depotní přípravek.

• ·

Příklad 19

Přípravek vhodný pro parenterální podávání

Přípravek vhodný pro parenterální podávání má následující složení:

účinná složka obecného vzorce I	jak shora uvedeno
polyethylenglykol (400) disiřičitan sodný isotonický solný roztok/WFI	0,75 ml 0,01 % hmotn. q.s.

Další přípravky

Pro dermatologickou aplikaci a pro odbarvování zubů jsou doporučenými přípravky lotiony, ústní voda a zubní pasta obsahující příslušné množství sloučenin obecného vzorce I.

Shora uvedené příklady jsou zde uvedeny jenom jako ilustrace a v žádném případě jako omezení rozsahu tohoto vynálezu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučenina pyridiniové řady obecného vzorce I v níž

R¹ znamená skupinu -Y-R³,

Y znamená atom kyslíku nebo skupinu NH,

R³ znamená atom vodíku, alkyl nebo aryl,

R² je vybrán ze skupiny sestávající z alkylu, -Oalkylu, arylu, -Oarylu, NHalkylu a -NHarylu,

X je vybrán ze skupiny sestávající z halogenidového iontu, acetátového iontu, chloristanového iontu, sulfonátového iontu, šťavelanového iontu, citrátového iontu, tosylátového iontu, maleinátového iontu, mesylátového iontu, uhličitanového iontu, siřičitanového iontu, hydrogenfosforečnanového iontu, fosfonátového iontu, fosforečnanového iontu, BF₄' a PF₆' s tím, že jestliže R¹ znamená fenyl, potom R² také znamená fenyl a jestliže R² znamená fenyl a X znamená halogenidový ion, potom R¹znamená jinou skupinu nebo -OCH₃, a její farmaceuticky přijatelné soli užitečné pro ovládání vaskulámích komplikací souvisejících s diabetem a poruchami souvisejícími se stárnutím.
2. Sloučenina pyridiniové řady podle nároku 1, v němž X znamená halogenidový ion.
3. Sloučenina pyridiniové řady podle nároku 1, která je vybrána ze skupiny obsahující následující sloučeniny:

a) 1-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-(butyloxykarbonyl)pyridiniumchlorid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

b) l-íž-thien-Ž-yl-ž-oxoethyO-S-^-hydroxyethyOaminokarbonyOpyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

c) 1-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

d) 1 -(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-(butylaminokarbonyl)pyridiniumchlorid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

e) 1-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumchlorid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

f) 1-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

g) 1-(2-methyl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

h) 1-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-((4-methylthiazol-2-yl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

i) 1-(2-(2,4-dichlorfenyl-2-oxoethyl)-3-(isopropyloxykarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

j) 3-(tetrahydrobenzothiazol-2-yl)aminokarbonyl)-1-(2-(2,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

k) 1-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-((p-sulfonamidofenylen)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

l) 3-karbonylamino-1-(2-thien-2'-yl-2-oxoethyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

m) 1-(2-(2,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)-3-(butylaminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl a • ♦ · · · · ·· «·· ·· ·♦·

η) 1 -(2-(2,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)-3-(butoxykarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.
4. Způsob výroby sloučenin pyridiniové řady podle nároku 1, vyznačující se t í m, že se připraví patřičně substituované pyridinové deriváty podle žádaných konečných produktů, následuje kvartemizace substituovaných pyridiniových derivátů příslušným reakčním činidlem varem pod zpětným chladičem v alkoholických rozpouštědlech a/nebo vysokovroucích rozpouštědlech po dobu 6 až 48 hodin, takže se získají žádané sloučeniny.
5. Použití sloučenin pyridiniové řady obencého vzorce I podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro diabetické komplikace a pro onemocnění související se stárnutím zahrnující onemocnění ledvin, nervové poškození, retinopatii, aterosklerózu, mikroangiopatii, endoteliální dysfunkce, dermatologické stavy, zabarvení zubů a další orgánové dysfunkce.
6. Použití podle nároku 5, v němž je sloučenina vybrána ze skupiny obsahující následující sloučeniny:

a) 1-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-(butyloxykarbonyl)pyridiniumchlorid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

b) 1-(2-thien-2-yl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

c) 1-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

d) 1 -(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-(butylaminokarbonyl)pyridiniumchlorid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

e) 1-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumchlorid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

f) 1-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

g) 1-(2-methyl-2-oxoethyl)-3-((2-hydroxyethyl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

h) 1-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-((4-methylthiazol-2-yl)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

i) 1-(2-(2,4-dichlorfenyl-2-oxoethyl)-3-(isopropyloxykarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

j) 3-(tetrahydrobenzothiazol-2-yl)aminokarbonyl)-1-(2-(2,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

k) 1-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-((p-sulfonamidofenylen)aminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

l) 3-karbonylamino-1-(2-thien-2'-yl-2-oxoethyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl,

m) 1-(2-(2,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)-3-(butylaminokarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl a

n) 1 -(2-(2,4-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)-3-(butoxykarbonyl)pyridiniumbromid nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.
7. Použití 1-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(1-fenyl-1-oxomethyl)pyridiniumbromidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro výrobu léčiva pro diabetické komplikace a pro onemocnění související se stárnutím zahrnující onemocnění ledvin, nervové poškození, retinopatii, aterosklerózu, mikroangiopatii, endoteliální dysfunkci, dermatologické stavy, zabarvení zubů a další orgánové dysfunkce.
8. Použití 1-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(methoxykarbonyl)pyridiniumbiOmidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro výrobu léčiva pro diabetické komplikace a onemocnění související se stárnutím zahrnující onemocnění ledvin, nervové poškození, retinopatii, aterosklerózu, mikroangiopatii, endoteliální dysfunkci, dermatologické stavy, zabarvení zubů a další orgánové dysfunkce.
9. Farmaceutický prostředek pro léčení diabetických komplikací a onemocnění souvisejících se stárnutím, vyznačující se tím, že obsahuje farma- r« ···· ··· • r · ·· · • · · · · ·· v · · · ·* • · · ·· «· · · · ·· ··· ceuticky účinné množství jedné nebo více sloučenin obecného vzorce I podle nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo jejích farmaceuticky přijatelných solí ve směsi s farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem, rozpouštědlem nebo excipiens.
10. Farmaceutický prostředek podle nároku 9, vyznačující se tím, že existuje ve formě orálního přípravku.
11. Farmaceutický prostředek podle nároku 10, v y z n a č uj í c í se t í m, že farmaceuticky přijatelný nosič znamená jednu nebo více z následujících sloučenin: škrob, laktosu, polyvinylpyrolidon (K-30), talek a stearat hořečnatý.
12. Farmaceutický prostředek podle nároku 9, v y z n a č u j í c í se t í m, že existuje ve formě parenterálního přípravku.
13. Způsob výroby parenterálního přípravku podle nároku 12, vyznačující se t í m, že se účinná složka obecného vzorce I podle nároku 1 rozpustí v polyethylenglykolu 400 a takto získaný roztok se zředí isotonickým roztokem nebo vodou na žádanou koncentraci.
14. Farmaceutický prostředek podle nároku 9, v y z n a č u j í c í se t í m, že existuje ve formě lotionů, orální vody a zubní pasty.
15. Způsob ošetření diabetického pacienta rozštěpením předem vytvořeného AGE u tohoto pacienta, vyznačující se tím, že se podává efektivní množství sloučeniny podle nároku 1, buď samostatně nebo v kombinaci se jinými léčivy pro antidiabetické léčení.
16. Způsob ošetření diabetického pacienta rozštěpením předem vytvořeného AGE u tohoto pacienta, vyznačující se tím, že se podává efektivní množství 1-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(1-fenyl-1-oxomethyl)pyridiniumbromidu nebo jeho • « • 9 · · • · · · ♦ · farmaceuticky přijatelné soli bud samostatné nebo v kombinaci s jinými léčivy pro antidiabetické léčení.
17. Způsob ošetření diabetického pacienta rozštěpením předem vytvořeného AGE u tohoto pacienta, vyznačující se tím, že se podává efektivní množství 1 -(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(methoxykarbonyl)pyridiniumbromidu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli buď samostatně nebo v kombinaci s jinými léčivy pro antidiabetické léčení.
18. Způsob předcházení nebo léčení onemocnění způsobených diabetem a komplikací souvisejících se stárnutím, vyznačující se tím, že se pacientovi, který to potřebuje, podává efektivní množství sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 buď samostatně nebo v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem nebo excipientem.
19. Způsob podle nároku 18, vyznačující se t í m, že onemocnění, kterému se předchází nebo které se léčí, znamená nefrologickou poruchu, neurologickou poruchu, aterosklerózu, retinální poruchu, dermatologickou poruchu, neenzymové hnědnutí orální dutiny, endoteliální nebo jinou orgánovou dysfunkci a zhoršení růstu.