JP4471141B2

JP4471141B2 - 老化関連及び糖尿病脈管合併症の管理のための新規化合物、その製造方法及び治療的使用

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Publication number: JP4471141B2
Application number: JP2001081819A
Authority: JP
Inventors: アラングディ・サンカラナラヤナン
Original assignee: Torrent Pharmaceuticals Ltd
Current assignee: Torrent Pharmaceuticals Ltd
Priority date: 2001-03-21
Filing date: 2001-03-22
Publication date: 2010-06-02
Anticipated expiration: 2021-03-22
Also published as: HK1045996B; ATE299496T1; EP1243581A1; ES2243389T3; JP2002275158A; CA2341949A1; DE60111919T2; PT1243581E; DE60111919D1; CN1148351C; CA2341949C; HK1045996A1; EP1243581B1; CN1377880A; DK1243581T3

Description

【０００１】
【発明の背景】
本発明は、新規な分類のピリジニウム系化合物類及び糖尿病及び関連する病気の治療におけるそれらの使用に関する。より詳細には、本発明は、この系の化合物、それらの製造方法、これらの化合物を含む医薬組成物及び真性糖尿病の合併症の治療におけるそれらの使用に関する。この系の化合物は、AGE分解活性（AGE breaking activity）を示し、そしてそれは、腎臓疾患、神経損傷、アテローム性動脈硬化症、網膜症及び皮膚科学的症状を含む糖尿病及び老化関連合併症の治療にとって極めて重要（essential）である。本発明は、すでに形成されている進行したグリコシル化架橋（glycosylation crosslinks）を逆進させる（reverse）のに有効な量の投与を含む、口腔の非酵素的褐変の結果である歯の変色の逆進（reversing）方法にも及ぶ。
【０００２】
正常よりも血糖値が顕著に高い糖尿病では、グルコースと幾つかのタンパク質類（例えば、ヘモグロビン、レンズクリスタリン及びコラーゲン）との反応は、AGEの形成を起こさせ、それは次には、糖尿病に関係する合併症（例えば、腎障害、微小欠陥障害、内皮機能障害及び他の臓器機能障害）の原因となる。さらに、幾つかの成長因子（例えば、塩基性線維芽細胞成長因子）の活性をも弱める。AGE生成物は、組織中の正常タンパク質類とは異なり、よりゆっくりした速度で代謝回転し、補充される。AGE生成物は、事実RAGE（進行型グリコシル化最終生成物に対するレセプター）レセプター類及び完全には定義されていない幾つかの免疫学的工程の活性化に関係する複雑な免疫学的反応を誘発し得ることが報告されている。微小血管障害及び巨大血管障害（macroangiopathy）の証拠を有する糖尿病は、その機構は明らかにされていないが、酸化的ストレスの証拠をも示すことが実証されている。
【０００３】
in vitroでのAGE形成は、還元糖類（例えばリボース又はグルコース）をウシ血清アルブミンと共にインキュベートすることによって研究室で研究できる。AGE形成は、蛍光の増加又は抗AGE抗体との交叉反応性の増加によって検出できる。蛍光の増加は、AGE特異的抗原性エピトープの形成に先行するように見える。この蛍光の増加を用いて、in vitroでの増加したAGE形成をモニターする（Brownlee Mら, Science 1986; 232:1629-1632）。蛍光の増加に加えて、in vitroでのAGE形成の最も重要な特徴の１つは、AGEに特異的であり、自然のタンパク質類には特異的でない抗原性エピトープの形成である。従って、あるタンパク質の進行型グリコシル化最終生成物に対する抗体を生成すること及びそれらを用いて他のタンパク質類でのAGE形成を検出することが可能である。これは、AGE研究の重要な分析ツールとして役立った。
【０００４】
AGE形成の臨床的重要性故に、生体でのAGE形成の診断、予防、又は逆進（revert）のために多くのアプローチが用いられている。AGE形成は、標的タンパク質とグルコースとの間の本来の反応から得られる初期グリコシル化生成物との反応によって阻害することができた。この阻害は、阻害剤と、グリコシル化されたタンパク質と追加的なタンパク質材料との続く反応を中断すると思われる初期グリコシル化生成物との間の反応として起き、架橋した後期段階の生成物を形成すると信じられていた。アミノグアニジンのような化合物類は、そのような機構によってAGE形成を阻害するように作用する。
【０００５】
長命のタンパク質類に関するAGE形成は、これらのタンパク質類の架橋にも関係する。AGE誘導タンパク質架橋は、AGE誘導タンパク質架橋と反応し、共有結合を開裂する、臭化N−フェナシルチアゾリウム（PTB）のような化合物類によって開裂されることが示されている（Vasanら, Nature 1996; 382:275-278；米国特許第5,853,703号明細書、特許日：1998年12月29日）。組織中のAGE含有量を低減する機構は、そのごく自然な作用機構によってゆっくりと作用するアミノグアニジンとは対照的に、比較的迅速に起きると予想されている。本明細書は、PTBのようなすでに形成されているAGEをある場合にはPTBによるよりもさらに効果的に分解するピリジニウム類の化合物に関する。
【０００６】
【発明の概要】
本発明の主たる目的は、糖尿病及び老化関連血管合併症の管理、特に真性糖尿病の合併症及び腎疾患、神経損傷、アテローム性動脈硬化症、網膜症及び皮膚科学的症状を含む他の老化関連症状の治療に有用な新規な分類のピリジニウム系化合物を提供することである。本発明は、すでに形成されている進行型グリコシル化架橋などを逆進するのに有効な量の投与を含む、口腔における非酵素的褐変からもたらされる歯の変色を逆進する方法にも及ぶ。
【０００７】
本発明の別の目的は、AGE分解活性を示すピリジニウム系化合物を提供することである。
【０００８】
本発明のさらに別の目的は、AGE分解活性を示すピリジニウム系化合物の製造方法を提供することである。
【０００９】
本発明のさらに別の目的は、好適なキャリア類、溶媒類、賦形剤類、希釈剤類及びそのような組成物の製造に通常用いられる他の媒体と組み合わされた、本発明による新規な分類のピリジニウム系化合物類及びそれらの医薬的に許容可能な塩類による医薬組成物を提供することである。
【００１０】
本発明のさらに別の目的は、単独又は抗糖尿病治療薬との組み合わせのいずれかによる、目的に対して適切であり得る医薬的に許容可能な希釈剤、溶媒、賦形剤類、キャリア類又は他の媒体と混合された必要な投薬形態の、本発明の化合物若しくはその医薬的に許容可能な塩類の投与による糖尿病患者の治療方法を提供することである。
【００１１】
本発明は、一般式(I)で示される新規な分類のAGE分解剤（AGE breaker）を提供する。
【００１２】
【化１】

【００１３】
｛式中、
R₁は、−R₄−R₅又は−N(R₇)N(R₇)R₉であり；
［R₄は、−N(R₇)R₆O−、−N(R₇)R₆N(R₇)−、−OR₆O−及び−OR₆N(R₇)−からなる群から選択される
ここで、
R₆は、アルキルであり；
R₅は、アルキル、ヘテロアリールを含むアリール、−COR₇、−SO₂R₇、−C(S)NHR₇、−C(NH)NHR₇、−COR₁₀、−C(O)NHR₇及び
【００１４】
【化２】

からなる群から選択される
【００１５】
（ここで、
R₇は、水素、アルキル及びヘテロアリールを含むアリールからなる群から選択され、但し、R₇は同じ化合物におけるR₁及びR₃と異なっていてもよい）］
R₂は、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、OR₇、NO₂、アルキル、ヘテロアリールを含むアリール、ホルミル、アシル、C(O)NR₇R₁₀、C(O)OR₇、NR₇R₁₀、N=C(R₇)(R₁₀)、SR₇、SO₂NH₂、SO₂アルキル及びSO₂アリールからなる群から選択され；及び
mは0、1又は2であり；
R₃は、R₇、OR₇、N(R₇)(R₁₀)、N=C(R₇)(R₁₀)、N(R₇)N(R₇)(R₁₀)、N(R₇)N=C(R₇)(R₁₀)及びCH(R₇)C(O)R₈からなる群から選択され、
【００１６】
（ここで、
R₈は、R₇、OR₇及びNR₇R₁₀からなる群から選択され；
R₉は、水素、アルキル、ヘテロアリールを含むアリール、−C(O)R₁₀、−SO₂R₁₀、−C(S)NHR₁₀、−C(NH)NH(R₁₀)及び−C(O)NHR₁₀からなる群から選択され；
R₁₀は、水素、アルキル又はヘテロアリールを含むアリールからなる群から選択され、各場合において、置換基R₇とは異なり、但し、R₁₀は、同一の化合物におけるR₁及びR₃と異なっていてもよい。）
Xは、ハロゲン化物イオン、酢酸イオン、過塩素酸イオン、スルホン酸イオン、シュウ酸イオン、クエン酸イオン、トシラート（tosylate）イオン、マレイン酸イオン、メシラート（mesylate）イオン、炭酸イオン、亜硫酸イオン、リン酸水素イオン、ホスホン酸イオン、リン酸イオン、BF₄ ⁻及びPF₆ ⁻などからなる群から選択される。
【００１７】
但し、
(i)同一の炭素又は窒素上に２つのアルキル基が存在する場合、それらは互いに結合して環状構造を形成してもよく、そして
(ii)R₁₀のヘテロアリール環に窒素が存在する場合、その窒素は、X-CH₂C(O)−R₃などの化合物で4級化されていてもよい。｝
【００１８】
ここで用いる「アルキル」とは、炭素−炭素単結合によって結合され、1〜8個の一緒に結合された炭素原子を有する任意に置換された炭化水素基をいう。アルキル炭化水素基は、直線状、分岐状若しくは環状で、飽和又は不飽和であり得る。置換基は、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、窒素、硫黄、酸素及びアリールから選択される。3個未満の置換基が存在しているのが好ましい。
【００１９】
ここで用いる「アリール」とは、pi電子系と共役しており、2つまでの共役又は融合環系を含む、少なくとも１つの環を有する任意に置換された芳香族基をいう。アリールとしては、炭素環状アリール、ヘテロ環状アリール及びビアリール基が挙げられ、それらは全て、任意に置換されていてもよい。置換基は、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、窒素、硫黄、酸素及び直鎖又は分岐C₁−C₆炭化水素から選択される。
【００２０】
mが0又は1であり、3位に−COR₁を有する一般式(I)で示される本発明の新規化合物を表1A（［表1〜表3］）に列挙し、mが0であり、4位に−COR₁を有する一般式(I)で示される本発明の新規化合物を表1B（［表4］）に列挙する。
【００２１】
これらの化合物は、さらにそれらの以下の化学名によって定義できる：
【００２２】
1−(2−エトキシ−2−オキソエチル)−4−(フェニルスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物1）；
1−(2−フェニルアミノ−2−オキソエチル)−4−(フェニルスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物2）；
1−(2−エトキシ−2−オキソエチル)−3−(フェニルスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物3）；
1−(2−(2',4'−ジクロロフェニル)−2−オキソエチル)−3−(2−(メトキシ)エチルオキシカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物4）；
1−(2−フェニルアミノ−2−オキソエチル)−3−((ベンゾイルオキシ)エチルアミノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物5）；
【００２３】
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(フェニルアミノカルボニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物6）；
1−(2−フェニル−2−オキソエチル)−3−(2−(アセトキシ)エチルアミノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物7）；
1−(2−フェニルアミノ−2−オキソエチル)−3−(フェニルスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物8）；
1−(2−フェニルアミノ−2−オキソエチル)−3−((4−メチルフェニル)スルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物9）；
1−(2−フェニル−2−オキソエチル)−3−(2−(ベンゾイルオキシ)エチルオキシカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物10）；
【００２４】
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(フェニルカルボニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物11）；
1−(2−エトキシ−2−オキソエチル)−3−((フェニルメチル)スルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物12）；
1−(2−フェニル−2−オキソエチル)−3−((フェニルメチル)スルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物13）；
N,N'−ビス[3−カルボニル−1−(2−フラン−2'−イル−2−オキソエチル)ピリジニウム]ヒドラジンジブロマイド（化合物14）；
N,N'−ビス[3−カルボニル−1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)ピリジニウム]ヒドラジンジクロライド（化合物15）；
【００２５】
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−((2−(1−オキソ−3−シクロヘキシル)−プロピル)−ヒドラジノカルボニル)−ピリジニウムブロマイド（化合物16）；
1−(2−フェニルアミノ−2−オキソエチル)−3−({2−(1−オキソ−3−シクロヘキシル)プロピル}−ヒドラジノ−カルボニル}−ピリジニウムブロマイド（化合物17）；
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−[2−(ベンゾイルオキシ)エチルアミノカルボニル]−ピリジニウムブロマイド（化合物18）；
1−(4−エトキシ−2,4−ジオキソブチル)−3−(2−(ベンゾイルオキシ)エチルアミノカルボニル)−ピリジニウムクロライド（化合物19）；
1−(2',4'−ジクロロ−フェニル−2−オキソエチル)−3−(2−メトキシエチルアミノカルボニル)−ピリジニウムブロマイド（化合物20）；
【００２６】
N,N'−ビス−[3−カルボニル−1−(2−シクロプロピルアミノ−2−オキソエチル)ピリジニウム]ヒドラジンジクロライド（化合物21）；
1−(2−シクロプロピルアミノ−2−オキソエチル)−3−(2−メトキシエチルアミノカルボニル)−ピリジニウムクロライド（化合物22）；
N,N'−ビス[3−カルボニル−1−(2−イソプロピルアミノ−2−オキソエチル)ピリジニウム]ヒドラジンジクロライド（化合物23）；
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(2−(2−クロロ−3−ピリドイルヒドラジノカルボニル)−ピリジニウムクロライド（化合物24）；
1−(2−イソプロピルアミノ−2−オキソエチル)−3−(2−メチルスルホニルヒドラジノカルボニル)−ピリジニウムクロライド（化合物25）；
【００２７】
1−(2−(1−ピロリジニル)−2−オキソエチル)−3−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物26）；
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物27）；
N,N'−ビス[3−カルボニル−1−(2−ヒドロキシ−2−オキソエチル)ピリジニウム]ヒドラジンジクロライド（化合物28）；
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−((2−メトキシエチル)アミノカルボニル)−5−ブロモピリジニウムクロライド（化合物29）；
1−(2'−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−[1−オキソ−1−(2−メトキシカルボニル)ピリジル]ヒドラジノピリジニウムクロライド（化合物30）；
【００２８】
1−[1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−6−メチル−3−カルボニルピリジニウム]−2−[1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−カルボニルピリジニウム)ヒドラジンジクロライド（化合物31）；
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(イソプロピルスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物32）；
1−(2−(4−ベンジルピペリジン−1−イル)−2−オキソエチル)−3−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物33）；
1−(2−(2−エトキシカルボニルピロリジン−1−イル)−2−オキソエチル)−3−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物34）；
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)−5−ブロモピリジニウムブロマイド（化合物35）；
【００２９】
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(エトキシカルボニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物36）；
1−(2−(5−クロロ−チエン−2−イル)−2−オキソエチル)−3−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物37）；
N,N'−ビス[3−カルボニル−1−(2−(4−ニトロ−チエン−2−イル)−2−オキソエチル)ピリジニウム]ヒドラジンジクロライド（化合物38）；
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)−6−メチルピリジニウムブロマイド（化合物39）；
N,N'−ビス[3−カルボニル−1−(2−(5−メチル−チエン−2−イル)−2−オキソエチル)ピリジニウム]ヒドラジンジクロライド（化合物40）；
【００３０】
N,N'−ビス[3−カルボニル−1−(2−(2−エトキシカルボニルピロリジン−1−イル)−2−オキソエチル)ピリジニウム]ヒドラジンジクロライド（化合物41）；
1−[1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−5−アミノカルボニル−3−カルボニルピリジニウム]−2−[1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−カルボニルピリジニウム]ヒドラジンジクロライド（化合物42）；
1−(2−(4−カルボエトキシ−チアゾリジン−3−イル)−2−オキソエチル)−3−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物43）；
N,N'−ビス[3−カルボニル−1−(2−(5−クロロ−チエン−2−イル)−2−オキソエチル)ピリジニウム]ヒドラジンジクロライド（化合物44）；
1−(2−(5−メチル−チエン−2−イル)−2−オキソエチル)−3−(メタスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物45）；
【００３１】
1−(2−(4−ニトロ−チエン−2−イル)−2−オキソエチル)−3−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物46）；
1−(2−フェニルアミノ−2−オキソエチル)−3−(フェニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物47）；
1−(2−フェニルアミノ−2−オキソエチル)−4−[2−(ベンゾイルオキシ)エチルアミノカルボニル]ピリジニウムクロライド（化合物48）；
1−(2−(5−ニトロ−チエン−2−イル)−2−オキソエチル)−3−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物49）；
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(トリフルオロメタンスルホニルヒドラジノカルボニル)−ピリジニウムブロマイド（化合物50）；
【００３２】
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(フェニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物51）；
1−(2−チエン−2'−イル−2−オキソエチル)−3−(p−メトキシフェニルスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物52）；
1−(2−エトキシ−2−オキソエチル)−3−(フェニルアミノカルボニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物53）；
1−(2−エトキシ−2−オキソエチル)−3−(p−トルエンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物54）；
1−(2−フェニル−2−オキソエチル)−3−(フェニルアミノカルボニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物55）；
【００３３】
1−(2−フェニルアミノ−2−オキソエチル)−3−(ベンジルスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムクロライド（化合物56）；
1−(2−フェニル−2−オキソエチル)−4−(メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物57）；
1−(2−フェニル−2−オキソエチル)−3−(フェニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物58）；
1−(2−エトキシ−2−オキソエチル)−4−[2−(ベンゾイルオキシ)エチルアミノカルボニル]ピリジニウムブロマイド（化合物59）；
1−(2−エトキシ−2−オキソエチル)−3−(フェニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物60）；
【００３４】
1−(2−フェニル−2−オキソエチル)−3−(p−メトキシフェニルスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物61）；
1−(2−フェニル−2−オキソエチル)−4−[2−(ベンゾイルオキシ)エチルアミノカルボニル]ピリジニウムブロマイド（化合物62）；
1−(2−エトキシ−2−オキソエチル)−4−(p−メタンスルホニルヒドラジノカルボニル)ピリジニウムブロマイド（化合物63）
【００３５】
【表１】

【００３６】
【表２】

【００３７】
【表３】

【００３８】
【化３】

【００３９】
【化４】

【００４０】
【化５】

【００４１】
【表４】

【００４２】
本発明の実施態様によれば、本発明の化合物は糖尿病合併症、及び腎疾患、神経損傷、アテローム性動脈硬化症、網膜症、皮膚科学的症状及び形成された高濃度のAGEによって起きる歯の着色を含む老化関連合併症の治療に使用される。形成されたAGEの増加した濃度は、本発明で述べた化合物を用いてAGE生成物を分解することによって抑制することができる。
【００４３】
本発明は、ピリジニウム系の新規化合物の製造方法をも提供する。
化合物15の該製造方法は、イソプロパノール中2−クロロアセチルチオフェンの溶液をメタノールに溶解したN,N'−ビス−(ニコチニル)ヒドラジンに添加し、6時間還流し、冷却し、沈殿した固体を濾集し、この固体を熱い酢酸エチルで洗浄し、最後にこの固体を20 mlのメタノール：酢酸エチル（3:1）で精製して、所望の化合物を得ることを含む。
【００４４】
同様に、他の新規化合物も、適切に置換されたピリジン誘導体類から、適切な試薬とともに、メタノール、エタノール、プロパノールなどのようなアルコール性溶媒及びトルエン又はキシレンなどのような高沸点溶媒中で6〜48時間還流して4級化し、所望の化合物を得ることによって製造される。
【００４５】
本発明の特定化合物の製造に使用できる置換ピリジン誘導体類の例を下記に示す：
１．N,N'−ビス(ニコチニル)ヒドラジン
２．3−[(2−ピリジル)ヒドラジノカルボニル]ピリジン
３．3−[(2−メタンスルホニル)ヒドラジノカルボニル]ピリジン
４．3−[(2−ベンゾイルオキシ)エチルアミノカルボニル]ピリジン
５．3−[(2−フェニルスルホニル)ヒドラジノカルボニル]ピリジン
【００４６】
６．3−[(2−アセトキシ)エチルオキシカルボニル]ピリジン
７．3−[(2−ベンゾイルオキシ)エチルオキシカルボニル]ピリジン
８．3−[(2−メトキシ)エチルオキシカルボニル]ピリジン
９．3−[(2−フェニルアミノカルボニル)ヒドラジノカルボニル]ピリジン
１０．3−[(2−アセトキシ)エチルアミノカルボニル]ピリジン
１１．3−[(2−(4−メチルフェニルスルホニル)ヒドラジノカルボニル)]ピリジン
【００４７】
１２．3−[(2−ベンゾイル)−ヒドラジノカルボニル]ピリジン
１３．3−[(2−フェニルメタンスルホニル)ヒドラジノカルボニル]ピリジン
１４．3−[(2−(3−シクロヘキシルプロパノイル)ヒドラジノカルボニル]ピリジン
１５．3−[(2−メトキシ)エチルアミノカルボニル]ピリジン
１６．3−[1−オキソ−1−(2−メトキシカルボニル)ピリジル]ヒドラジノピリジン
【００４８】
前記反応に使用できる4級化試薬の例を下記に示す：
１．2−ブロモアセチルチオフェン
２．2−クロロアセチルチオフェン
３．フェナシルブロマイド
４．フェナシルクロライド
５．2,4−ジクロロフェナシルブロマイド
６．N−フェニルクロロアセトアミド
【００４９】
７．N−シクロプロピルクロロアセトアミド
８．エチルブロモアセテート
９．ブロモアセチルフラン
１０．N−イソプロピルクロロアセトアミド
１１．N−クロロアセチル−2−ピロリジノン
１２．クロロ酢酸
【００５０】
AGE 分解活性についての in vitro スクリーニング
in vitroでのAGE形成を、研究室で、溶液の褐変及び蛍光の増加をもたらす、還元糖グルコースとタンパク質ウシ血清アルブミンとをインキュベートすることによって研究した。蛍光は、AGE形成の増加をモニターするための基準として用いた。
【００５１】
【実施例】
実施例１
AGE 分解剤活性を下記のスクリーニング手順によって確認した：
材料：
ウシ血清アルブミン（第V画分（fraction V））（BSA）
グルコース、分析級（analytical grade）
リン酸緩衝生理食塩水（PBS）
装置：
マイクロプレートELISAリーダー−Spectramax Plus（Molecular Devices社製、米国）
マイクロプレート洗浄機、（Bio-Tec Instruments社製、米国）
pHメーター
【００５２】
実験方法：ELISA（酵素結合免疫吸着剤アッセイ（Enzyme Linked Immunosorbent Assay））
タンパク質、ウシ血清アルブミン、BSA 160 mg/ml及び1.6 Mグルコース糖をリン酸緩衝生理食塩水、PBSに溶解した。アジ化ナトリウムを防腐剤として0.02％濃度で添加した。この溶液を0.22μMフィルターで無造作に（asceptically）濾過し、37℃で16週間老化させるために保持した。16週間後、この溶液をPBSに対して透析し、分割して、−20℃で貯蔵した。
【００５３】
AGE分解活性を測定するため、10μg/mlの16週間AGE-BSAを、異なる濃度の被験化合物と共に37℃で24時間インキュベートし、ELISAによって被験化合物のAGE分解活性を測定した。
【００５４】
ELISAは以下のように行った：
１．異なる濃度の16週間AGE-BSAを標準としてマイクロタイタープレート上にコート（coated）した。各濃度3つづつコートした。
２．被験試料を、3つづつ、ウエル当たり5 ng〜20 ngの濃度でマイクロタイタープレート上にコートした。
３．プレートを37℃で1時間インキュベートした。
４．インキュベーション後、プレートをPBST（0.05％ Tween 20を含有するPBS）で洗浄した。
【００５５】
５．PBS中の5％脱脂粉乳で、37℃で1時間ブロッキングを行った。
６．プレートをPBSTで洗浄した。
７．AGE-BSAに対する第１抗体（primary antibody）を添加し、プレートを37℃で1時間インキュベートした。
８．プレートをPBSTで洗浄した。
９．第２抗体抗ウサギHRPO（ホースラディッシュペルオキシダーゼ）コンジュゲートを添加し、プレートを37度で1時間インキュベートした。
１０．プレートをPBSTで洗浄した。
【００５６】
１１．OPD（オルトフェニレンジアミン二塩酸塩）及び過酸化水素による着色を行った。
１２．37℃で15分間インキュベート後、（450 nm読み取り−620 nm読み取り）でOD（光学密度）をマイクロプレートELISAリーダーで測定した。
【００５７】
化合物の分解剤活性を、下記式によって決定した：
【００５８】
【数１】

OD_450-620対照＝被験化合物なしで、37℃24時間インキュベート後の20 ng AGE-BSAの吸光度（Absorbance）
OD_450-620被験＝必要な（required）濃度の被験化合物とともに37℃24時間インキュベート後の20 ng AGE-BSAの吸光度
【００５９】
特定実施例を用いて、％AGE分解活性を算出し、表2（［表５］及び［表６］）に記録した。
【００６０】
【表５】

【００６１】
【表６】

【００６２】
このように、化合物5、29、31、32、35、36-40、42、44、46、47、49及び50は、PTBに比べて優れたAGE分解活性を有し、そのうち、化合物31、38-40、42、44、46、47、49及び50の有効性は有意に非常に高い。
【００６３】
AGE 分解活性についての in vivo スクリーニング
被験化合物を、糖尿病性ニューロパシー及び糖尿病ラットモデルでのネフロパシーに関するそれらの有利な効果について研究した。ラットを3つのグループに分けた。第１グループは、年齢相応の未処理非糖尿病動物からなっていた。第２グループは、糖尿病対照からなり、第３グループは、被験化合物で処理された糖尿病グループであった。各処理グループは、それ自身の対応する対照及び糖尿病グループを有していた。第２及び第３グループを、糖尿病を誘導するために60 mg/kgでストレプトゾトシン（STZ）で処理した。糖尿病の12週間の完了後、ラットを被験化合物で毎日（用量は表に示す）8週間の期間処理した。処理の終わりに、動物のクレアチニンクリアランス及び神経伝導速度（NCV）を評価した。
【００６４】
ラットのクレアチニンクリアランスは、下記のように評価した：
【数２】

【００６５】
未処理糖尿病グループのクレアチニンクリアランスを、処理グループと比較し、％改善率を表3（［表７］）に示す。
【００６６】
Biroら, 1998年の修飾方法を用いて神経伝導速度を測定した。簡単にいうと、エーテル麻酔下に、座骨神経及び頸骨神経を、それぞれ座骨切痕（sciatic notch）又は足首で電気的に刺激した。下記2つの構成成分からなる足底筋から筋電図（EMG's）を記録した：(1)短潜時直接運動応答（short latency direct motor response; M）及び(2)単シナプス誘導長潜時感覚応答（monosynaptically elicited long-latency sensory response; H、ホフマン反射）。M応答の潜時及び持続時間を測定し、運動神経伝導速度（MNCV）を下記のように算出した：
【００６７】
【数３】

【００６８】
被験化合物によって処理されたグループでの神経伝導速度の％改善率は、下記のように算出した：
【００６９】
【数４】

【００７０】
【表７】

結果は、この分類の化合物がクレアチニンクリアランス及び神経伝導速度に関して有利な効果を有することを示している。
【００７１】
試験結果の考察：
本明細書に記載の全ての被験化合物は、in vitroでAGE分解効果を示した。ラットの慢性的高血糖条件下では、後生的な（advanced）グリコシル化最終生成物の形成を導くグルコース、脂質及びタンパク質の間の自然に起きる非酵素的反応が存在する。この動物モデルでは、クレアチニンクリアランスの低下及び神経伝導速度の低下が示された。これらの変化は、腎臓組織及び神経組織への損傷と関係している。慢性的NIDDM患者では、腎臓損傷を誘導する糖尿病の徴候としてクレアチニンクリアランスが低下する。腎臓損傷に寄与する主な因子の１つは、腎臓中の長命なタンパク質（long-lived proteins）のグリケーション（glycation）である。慢性的糖尿病患者で神経伝導速度の低下が見られ、そしてそれはニューロパシーの徴候であることは十分に認識されている。神経組織及び関連する脈管構造において架橋されたタンパク質の分解は、神経機能に改善をもたらすことができるであろう。
【００７２】
本発明の化合物は、クレアチニンクリアランスにおける改善及び神経伝導速度における改善の両者に関して機能の改善を示した。上述した証拠は、これらの化合物が、ネフロパシー及びニューロパシーのような種々の糖尿病合併症及び老化関連合併症の予防並びに治療において主要な役割を果たすことができるだろうことを明確に示している。
【００７３】
下記実施例は、表1に示した本発明の特定の新規化合物の製造方法を示す。下記化合物は、実施例としての目的のみで提案されるものであり、本発明を何ら限定するものではない。
【００７４】
実施例２
1 − (2 −エトキシ− 2 −オキソエチル ) − 4 − ( フェニルスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 1 ）：
イソプロパノール（25 ml）中N−(ベンゼンスルホニル)−イソニコチン酸ヒドラジド（1.0 g, 0.036モル）の沸騰溶液に、10 mlイソプロパノール中エチルブロモアセテート（0.6 g, 0.036モル）の溶液を添加し、反応混合物を24時間還流した。反応混合物を減圧下（〜10 ml）に濃縮し、メタノール−酢酸エチル（3:1, 15 ml）の混合物から再結晶し、固体を得た。この固体をさらに（10 ml）酢酸エチルで洗浄して1.05 gの求める生成物を得た。
【００７５】
【化６】

【００７６】
上記工程に従って、対応するピリジン誘導体類と適当な試薬を、メタノール、エタノール、プロパノール、トルエン又はキシレン中で6〜48時間還流して反応させ、所望の化合物を得ることによって下記化合物を合成する。
【００７７】
実施例３
1 − (2 −フェニルアミノ− 2 −オキソエチル ) − 4 − ( フェニルスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 2 ）：
【００７８】
【化７】

【００７９】
実施例４
1 − (2 −エトキシ− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( フェニルスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 3 ）：
【００８０】
【化８】

【００８１】
実施例５
1 − (2 − (2',4' −ジクロロフェニル ) − 2 −オキソエチル ) − 3 − (2 − ( メトキシ ) エチルオキシカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 4 ）：
【００８２】
【化９】

【００８３】
実施例６
1 − (2 −フェニルアミノ− 2 −オキソエチル ) − 3 − (2 − ( ベンゾイルオキシ ) エチルアミノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 5 ）：
【００８４】
【化１０】

【００８５】
実施例７
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( フェニルアミノカルボニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 6 ）：
【００８６】
【化１１】

【００８７】
実施例８
1 − (2 −フェニル− 2 −オキソエチル ) − 3 − (2 − ( アセトキシ ) エチルアミノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 7 ）：
【００８８】
【化１２】

【００８９】
実施例９
1 − (2 −フェニルアミノ− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( フェニルスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 8 ）：
【００９０】
【化１３】

【００９１】
実施例１０
1 − (2 −フェニルアミノ− 2 −オキソエチル ) − 3 − ((4 −メチルフェニル ) スルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 9 ）：
【００９２】
【化１４】

【００９３】
実施例１１
1 − (2 −フェニル− 2 −オキソエチル ) − 3 − (2 − ( ベンゾイルオキシ ) エチルオキシカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 10 ）：
【００９４】
【化１５】

【００９５】
実施例１２
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( フェニルカルボニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 11 ）：
【００９６】
【化１６】

【００９７】
実施例１３
1 − (2 −エトキシ− 2 −オキソエチル ) − 3 − (( フェニルメチル ) スルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 12 ）：
【００９８】
【化１７】

【００９９】
実施例１４
1 − (2 −フェニル− 2 −オキソエチル ) − 3 − (( フェニルメチル ) スルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 13 ）：
【０１００】
【化１８】

【０１０１】
実施例１５
N,N' −ビス [3 −カルボニル− 1 − (2 −フラン− 2' −イル− 2 −オキソエチル）ピリジニウム ] ヒドラジンジブロマイド（化合物 14 ）：
【０１０２】
【化１９】

【０１０３】
実施例１６
N,N' −ビス [3 −カルボニル− 1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) ピリジニウム ] ヒドラジンジクロライド（化合物 15 ）：
【０１０４】
【化２０】

【０１０５】
実施例１７
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ((2 − (1 −オキソ− 3 −シクロヘキシル ) −プロピル ) −ヒドラジノカルボニル ) −ピリジニウムブロマイド（化合物 16 ）：
【０１０６】
【化２１】

【０１０７】
実施例１８
1 − (2 −フェニルアミノ− 2 −オキソエチル ) − 3 − ({2 − (1 −オキソ− 3 −シクロヘキシル ) −プロピル } −ヒドラジノ−カルボニル ) −ピリジニウムブロマイド（化合物 17 ）：
【０１０８】
【化２２】

【０１０９】
実施例１９
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − [2 − ( ベンゾイルオキシ ) エチルアミノカルボニル ] −ピリジニウムブロマイド（化合物 18 ）：
【０１１０】
【化２３】

【０１１１】
実施例２０
1 − (4 −エトキシ− 2,4 −ジオキソブチル ) − 3 − (2 − ( ベンゾイルオキシ ) エチルアミノカルボニル ) −ピリジニウムクロライド（化合物 19 ）：
【０１１２】
【化２４】

【０１１３】
実施例２１
1 − (2',4' −ジクロロ−フェニル− 2 −オキソエチル ) − 3 − (2 −メトキシエチルアミノカルボニル ) −ピリジニウムブロマイド（化合物 20 ）：
【０１１４】
【化２５】

【０１１５】
実施例２２
N,N' −ビス− [3 −カルボニル− 1 − (2 −シクロプロピルアミノ− 2 −オキソエチル ) ピリジニウム ] ヒドラジンジクロライド（化合物 21 ）：
【０１１６】
【化２６】

【０１１７】
実施例２３
1 − (2 −シクロプロピルアミノ− 2 −オキソエチル ) − 3 − (2 −メトキシエチルアミノカルボニル ) −ピリジニウムクロライド（化合物 22 ）：
【０１１８】
【化２７】

【０１１９】
実施例２４
N,N' −ビス [3 −カルボニル− 1 − (2 −イソプロピルアミノ− 2 −オキソエチル ) ピリジニウム ] ヒドラジンジクロライド（化合物 23 ）：
【０１２０】
【化２８】

【０１２１】
実施例２５
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − (2 − (2 −クロロ− 3 −ピリドイルヒドラジノカルボニル ) −ピリジニウムクロライド（化合物 24 ）：
【０１２２】
【化２９】

【０１２３】
実施例２６
1 − (2 −イソプロピルアミノ− 2 −オキソエチル ) − 3 − (2 −メチルスルホニルヒドラジノカルボニル ) −ピリジニウムクロライド（化合物 25 ）：
【０１２４】
【化３０】

【０１２５】
実施例２７
1 − (2 − (1 −ピロリジニル ) − 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 26 ）：
【０１２６】
【化３１】

【０１２７】
実施例２８
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 27 ）：
【０１２８】
【化３２】

【０１２９】
実施例２９
N,N' −ビス [3 −カルボニル− 1 − (2 −ヒドロキシ− 2 −オキソエチル ) ピリジニウム ] ヒドラジンジクロライド（化合物 28 ）：
【０１３０】
【化３３】

【０１３１】
実施例３０
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ((2 −メトキシエチル ) アミノカルボニル ) − 5 −ブロモピリジニウムクロライド（化合物 29 ）：
【０１３２】
【化３４】

【０１３３】
実施例３１
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − [1 −オキソ− 1 − (2 −メトキシカルボニル ) ピリジル ] ヒドラジノピリジニウムクロライド（化合物 30 ）：
【０１３４】
【化３５】

【０１３５】
実施例３２
1 − [1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 6 −メチル− 3 −カルボニルピリジニウム ] − 2 − [1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 −カルボニルピリジニウム ] ヒドラジンジクロライド（化合物 31 ）：
【０１３６】
【化３６】

【０１３７】
実施例３３
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( イソプロピルスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 32 ）：
【０１３８】
【化３７】

【０１３９】
実施例３４
1 − (2 − (4 −ベンジルピペリジン− 1 −イル ) − 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 33 ）：
【０１４０】
【化３８】

【０１４１】
実施例３５
1 − (2 − (2 −エトキシカルボニルピロリジン− 1 −イル ) − 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 34 ）：
【０１４２】
【化３９】

【０１４３】
実施例３６
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) − 5 −ブロモピリジニウムブロマイド（化合物 35 ）：
【０１４４】
【化４０】

【０１４５】
実施例３７
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( エトキシカルボニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 36 ）：
【０１４６】
【化４１】

【０１４７】
実施例３８
1 − (2 − (5 −クロロ−チエン− 2 −イル ) − 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 37 ）：
【０１４８】
【化４２】

【０１４９】
実施例３９
N,N' −ビス [3 −カルボニル− 1 − (2 − (4 −ニトロ−チエン− 2 −イル ) − 2 −オキソエチル ) ピリジニウム ] ヒドラジンジクロライド（化合物 38 ）：
【０１５０】
【化４３】

【０１５１】
実施例４０
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) − 6 −メチルピリジニウムブロマイド（化合物 39 ）：
【０１５２】
【化４４】

【０１５３】
実施例４１
N,N' −ビス [3 −カルボニル− 1 − (2 − (5 −メチル−チエン− 2 −イル ) − 2 −オキソエチル ) ピリジニウム ] ヒドラジンジクロライド（化合物 40 ）：
【０１５４】
【化４５】

【０１５５】
実施例４２
N,N' −ビス [3 −カルボニル− 1 − (2 − (2 −エトキシカルボニルピロリジン− 1 −イル ) − 2 −オキソエチル ) ピリジニウム ] ヒドラジンジクロライド（化合物 41 ）：
【０１５６】
【化４６】

【０１５７】
実施例４３
1 − [1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 5 −アミノカルボニル− 3 −カルボニルピリジニウム ] − 2 − [1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 −カルボニルピリジニウム ] ヒドラジンジクロライド（化合物 42 ）：
【０１５８】
【化４７】

【０１５９】
実施例４４
1 − (2 − (4 −カルボエトキシ−チアゾリジン− 3 −イル ) − 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 43 ）：
【０１６０】
【化４８】

【０１６１】
実施例４５
N,N' −ビス [3 −カルボニル− 1 − (2 − (5 −クロロ−チエン− 2 −イル ) − 2 −オキソエチル ) ピリジニウム ] ヒドラジンジクロライド（化合物 44 ）：
【０１６２】
【化４９】

【０１６３】
実施例４６
1 − (2 − (5 −メチル−チエン− 2 −イル ) − 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 45 ）：
【０１６４】
【化５０】

【０１６５】
実施例４７
1 − (2 − (4 −ニトロ−チエン− 2 −イル ) − 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 46 ）：
【０１６６】
【化５１】

【０１６７】
実施例４８
1 − (2 −フェニルアミノ− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( フェニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 47 ）：
【０１６８】
【化５２】

【０１６９】
実施例４９
1 − (2 −フェニルアミノ− 2 −オキソエチル ) − 4 − [2 − ( ベンゾイルオキシ ) エチルアミノカルボニル ] ピリジニウムクロライド（化合物 48 ）：
【０１７０】
【化５３】

【０１７１】
実施例５０
1 − 2 − (5 −ニトロ−チエン− 2 −イル ) − 2 −オキソエチル ) − 3 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 49 ）：
【０１７２】
【化５４】

【０１７３】
実施例５１
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( トリフルオロメタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) −ピリジニウムブロマイド（化合物 50 ）：
【０１７４】
【化５５】

【０１７５】
実施例５２
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( フェニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 51 ）：
【０１７６】
【化５６】

【０１７７】
実施例５３
1 − (2 −チエン− 2' −イル− 2 −オキソエチル ) − 3 − (p −メトキシフェニルスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 52 ）：
【０１７８】
【化５７】

【０１７９】
実施例５４
1 − (2 −エトキシ− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( フェニルアミノカルボニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 53 ）：
【０１８０】
【化５８】

【０１８１】
実施例５５
1 − (2 −エトキシ− 2 −オキソエチル ) − 3 − (p −トルエンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 54 ）：
【０１８２】
【化５９】

【０１８３】
実施例５６
1 − (2 −フェニル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( フェニルアミノカルボニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 55 ）：
【０１８４】
【化６０】

【０１８５】
実施例５７
1 − (2 −フェニルアミノ− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( ベンジルスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムクロライド（化合物 56 ）：
【０１８６】
【化６１】

【０１８７】
実施例５８
1 − (2 −フェニル− 2 −オキソエチル ) − 4 − ( メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 57 ）：
【０１８８】
【化６２】

【０１８９】
実施例５９
1 − (2 −フェニル− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( フェニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 58 ）：
【０１９０】
【化６３】

【０１９１】
実施例６０
1 − (2 −エトキシ− 2 −オキソエチル ) − 4 − [2 − ( ベンゾイルオキシ ) エチルアミノカルボニル ] ピリジニウムブロマイド（化合物 59 ）：
【０１９２】
【化６４】

【０１９３】
実施例６１
1 − (2 −エトキシ− 2 −オキソエチル ) − 3 − ( フェニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 60 ）：
【０１９４】
【化６５】

【０１９５】
実施例６２
1 − (2 −フェニル− 2 −オキソエチル ) − 3 − (p −メトキシフェニルスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 61 ）：
【０１９６】
【化６６】

【０１９７】
実施例６３
1 − (2 −フェニル− 2 −オキソエチル ) − 4 − [2 − ( ベンゾイルオキシ ) エチルアミノカルボニル ] ピリジニウムブロマイド（化合物 62 ）：
【０１９８】
【化６７】

【０１９９】
実施例６４
1 − (2 −エトキシ− 2 −オキソエチル ) − 4 − (p −メタンスルホニルヒドラジノカルボニル ) ピリジニウムブロマイド（化合物 63 ）：
【０２００】
【化６８】

【０２０１】
医薬組成物
医薬組成物は、医薬的有効量の一般式(I)で示される化合物を、個々に又は組み合わせて製造することができる。下記の医薬製剤は、実施例の目的のみで提示されるものであり、それらを用いることができる形態を何ら限定するものではない。
【０２０２】
経口製剤
経口製剤は、例えば、ペレット、粉末、小袋（sachets）又は錠剤若しくはカプセルなどの分別単位（discreet units）などの固形投薬形態として投与することができる。他の経口的に投与される医薬製剤としては、直ぐに使用できる形態又は混合物、シロップ、懸濁液又は乳濁液などの再構成に好適な形態のいずれかの単相性及び二相性液体投薬形態が挙げられる。製剤はさらに、希釈剤、分散剤、バッファー、安定化剤、可溶化剤、界面活性剤、防腐剤、キレート剤及び／又は用いられるような他の医薬添加物を含むことができる。水性若しくは非水性媒体又はそれらの組み合わせを用いることができ、所望ならば、好適な甘味料、調味料（flavoring agent）又は類似の物質を含むことができる。懸濁液又は乳濁液の場合には、好適な増粘剤又は懸濁化剤又は乳化剤をさらに存在させてもよい。あるいは、化合物を、他の添加物と関係ないそれらの純粋な形態（例えば、カプセル又は小袋）として投与することができる。それはまた、媒体と共に投与することもできる。医薬製剤は、マトリックス又は拡散制御システム（diffusion controlled system）によって提供されるような、有効成分のゆっくりな、遅延した又は制御された放出を有することができる。
【０２０３】
本発明の化合物若しくはその塩類又は好適な複合体が錠剤のような分別単位投薬形態として提供される場合、それはさらに当業界で用いられるような医学上不活性な賦形剤を含むことができる。澱粉、乳糖、リン酸二カルシウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、メチルセルロースのような高分子物質、脂肪酸類及び誘導体類、グリコール酸澱粉ナトリウムなどの希釈剤を用いることもできる。
【０２０４】
実施例６５
経口投薬形態の製造：
通常の錠剤は下記組成を有する：
式(I)で示される有効成分上記のとおり
乳糖 135 mg
澱粉 76 mg
ポリビニールピロリドン（K-30） 2 mg
タルク 1.5 mg
ステアリン酸マグネシウム 1.0 mg
【０２０５】
非経口製剤
非経口投与のためには、化合物若しくはそれらの塩類又はそれらの好適な複合体を、水性若しくは非水性媒体又はそれらの組み合わせである滅菌媒体中に存在させることができる。媒体の例としては、水、オレイン酸エチル、オイル類及びポリオール類、グリコール類及びそれらの誘導体類の誘導体類が挙げられる。それは、安定化剤、可溶化剤、pH調整剤（pH modifiers）、バッファー類、抗酸化剤類、補助溶媒類（cosolvents）、錯化剤類、張性調整剤類（tonicity modifieres）などのような注射可能製剤に共通の添加剤を含むことができる。
【０２０６】
幾つかの好適な添加剤は、例えば、酒石酸塩、クエン酸塩又は類似のバッファー類、アルコール、塩化ナトリウム、デキストロース及び高分子量ポリマー類である。もう一つの代替手段は、滅菌粉末再構成である。化合物は、一日1回より多い投与のための注射、又は静脈内輸液／点滴若しくは好適なデポ製剤（depot preparation）の形態で投与できる。
【０２０７】
実施例６６
非経口投与に好適な製剤は下記組成を有する：
式(I)で示される有効成分上記のとおり
ポリエチレングリコール（400） 0.75 ml
メタ重亜硫酸ナトリウム 0.01％
等張生理食塩水／WFI 十分な量
【０２０８】
他の製剤
皮膚科学的適用及び歯の着色については、推奨される製剤は、適当な量の一般式(I)で示される化合物を含むローション類、口内リンス（oral rinse）及び歯磨き剤（toothpaste）である。
【０２０９】
上記実施例は説明の目的のみで提示されるものであり、本発明の範囲を何ら限定するものではない。

Claims

（ｂ）Ｎ，Ｎ’−ビス［３−カルボニル−１−（２−シクロプロピルアミノ−２−オキソエチル）ピリジニウム］ヒドラジンジクロライド、
（ｃ）１−（２−フェニルアミノ−２−オキソエチル）−４−（フェニルスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｄ）１−（２−（２’，４’−ジクロロフェニル）−２−オキソエチル）−３−（２−（メトキシ）エチルオキシカルボニル）ピリジニウムブロマイド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｅ）１−（２−フェニルアミノ−２−オキソエチル）−３−（（ベンゾイルオキシ）エチルアミノカルボニル）ピリジニウムクロライド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｆ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（フェニルアミノカルボニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｇ）１−（２−フェニル−２−オキソエチル）−３−（２−（アセトキシ）エチルアミノカルボニル）ピリジニウムブロマイド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｈ）１−（２−フェニルアミノ−２−オキソエチル）−３−（フェニルスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｉ）１−（２−フェニルアミノ−２−オキソエチル）−３−（（４−メチルフェニル）スルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｊ）１−（２−フェニル−２−オキソエチル）−３−（２−（ベンゾイルオキシ）エチルオキシカルボニル）ピリジニウムブロマイド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｋ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（フェニルカルボニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｌ）１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−３−（（フェニルメチル）スルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｍ）１−（２−フェニル−２−オキソエチル）−３−（（フェニルメチル）スルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド及びその医薬的に許容可能な塩類、
（ｎ）Ｎ，Ｎ’−ビス［３−カルボニル−１−（２−フラン−２’−イル−２−オキソエチル）ピリジニウム］ヒドラジンジブロマイド、
（ｏ）１−（２’，４’−ジクロロ−フェニル−２−オキソエチル）−３−（２−メトキシエチルアミノカルボニル）−ピリジニウムブロマイド、
（ｐ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（（２−メトキシエチル）アミノカルボニル）−５−ブロモピリジニウムクロライド、
（ｒ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（２−（２−クロロ−３−ピリドイルヒドラジノカルボニル）−ピリジニウムクロライド、
（ｓ）１−（２−シクロプロピルアミノ−２−オキソエチル）−３−（２−メトキシエチルアミノカルボニル）ピリジニウムクロライド、
（ｔ）１−（２−イソプロピルアミノ−２−オキソエチル）−３−（２−メチルスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド、
（ｕ）１−（２−フェニルアミノ−２−オキソエチル）−３−（｛２−（１−オキソ−３−シクロヘキシル）−プロピル｝−ヒドラジノ−カルボニル）−ピリジニウムブロマイド、
（ｖ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−［２−（ベンゾイルオキシ）エチルアミノカルボニル］−ピリジニウムブロマイド、
（ｗ）１−（４−エトキシ−２，４−ジオキソブチル）−３−（２−（ベンゾイルオキシ）エチルアミノカルボニル）−ピリジニウムクロライド、
（ｘ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−［１−オキソ−１−（２−メトキシカルボニル）ピリジル］ヒドラジノピリジニウムクロライド、
（ｙ）１−［１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−５−アミノカルボニル−３−カルボニルピリジニウム］−２−［１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−カルボニルピリジニウム］ヒドラジンジクロライド、
（ｚ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（トリフルオロメタンスルホニルヒドラジノカルボニル）−ピリジニウムブロマイド、
（ａａ）１−［１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−６−メチル−３−カルボニルピリジニウム］−２−［１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−カルボニルピリジニウム］ヒドラジンジクロライド、
（ａｂ）Ｎ，Ｎ’−ビス［３−カルボニル−１−（２−（５−メチル−チエン−２−イル）−２−オキソエチル）ピリジニウム］ヒドラジンジクロライド、
（ａｃ）Ｎ，Ｎ’−ビス［３−カルボニル−１−（２−（５−クロロ−チエン−２−イル）−２−オキソエチル）ピリジニウム］ヒドラジンジクロライド、
（ａｄ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）−６−メチルピリジニウムブロマイド、
（ａｅ）Ｎ，Ｎ’−ビス［３−カルボニル−１−（２−（４−ニトロ−チエン−２−イル）−２−オキソエチル）ピリジニウム］ヒドラジンジクロライド、
（ａｆ）１−（２−フェニルアミノ−２−オキソエチル）−３−（フェニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド、
（ａｇ）１−（２−（４−ニトロ−チエン−２−イル）−２−オキソエチル）−３−（メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ａｈ）１−（２−（５−ニトロ−チエン−２−イル）−２−オキソエチル）−３−（メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド、
（ａｉ）１−（２−（５−クロロ−チエン−２−イル）−２−オキソエチル）−３−（メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ａｊ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（エトキシカルボニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ａｋ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（イソプロピルスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ａｌ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）−５−ブロモピリジニウムブロマイド、
（ａｍ）１−（２−（２−エトキシカルボニルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド、
（ａｎ）１−（２−（５−メチル−チエン−２−イル）−２−オキソエチル）−３−（メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド、
（ａｏ）１−（２−（４−カルボエトキシ−チアゾリジン−３−イル）−２−オキソエチル）−３−（メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド、
（ａｐ）１−（２−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−３−（メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド、
（ａｑ）Ｎ，Ｎ’−ビス［３−カルボニル−１−（２−（２−エトキシカルボニルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）ピリジニウム］ヒドラジンジクロライド、
（ａｒ）１−（２−フェニルアミノ−２−オキソエチル）−４−［２−（ベンゾイルオキシ）エチルアミノカルボニル］ピリジニウムクロライド、
（ａｓ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（フェニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ａｔ）１−（２−チエン−２’−イル−２−オキソエチル）−３−（ｐ−メトキシフェニルスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ａｕ）１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−３−（フェニルアミノカルボニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ａｖ）１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−３−（ｐ−トルエンスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ａｗ）１−（２−フェニル−２−オキソエチル）−３−（フェニルアミノカルボニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ａｘ）１−（２−フェニルアミノ−２−オキソエチル）−３−（ベンジルスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムクロライド、
（ａｙ）１−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４−（メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ａｚ）１−（２−フェニル−２−オキソエチル）−３−（フェニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ｂａ）１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−４−［２−（ベンゾイルオキシ）エチルアミノカルボニル］ピリジニウムブロマイド、
（ｂｂ）１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−３−（フェニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ｂｃ）１−（２−フェニル−２−オキソエチル）−３−（ｐ−メトキシフェニルスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド、
（ｂｄ）１−（２−フェニル−２−オキソエチル）−４−［２−（ベンゾイルオキシ）エチルアミノカルボニル］ピリジニウムブロマイド及び
（ｂｅ）１−（２−エトキシ−２−オキソエチル）−４−（ｐ−メタンスルホニルヒドラジノカルボニル）ピリジニウムブロマイド
からなる群から選択される化合物。
所望の最終生成物に従って置換ピリジンを製造し、次いで、適当な試薬と共に、アルコール性溶媒及び／又は高沸点溶媒中で６〜４８時間還流することによって該置換ピリジンを４級化し、所望の化合物を得ることを含む請求項１に記載の化合物の製造方法。
請求項１に記載の化合物（ｂ）〜（ｐ）及び（ｒ）〜（ｂｅ）からなる群から選択される化合物若しくはその医薬的に許容可能な塩を有効成分とする、糖尿病合併症、及び形成された高濃度のＡＧＥによって起きる、腎疾患、神経損傷、網膜症、アテローム性動脈硬化症、微小血管障害、内皮機能障害、皮膚科学的症状及び歯の着色からなる群から選択される老化関連合併症の治療剤。
医薬的に許容可能なキャリア、希釈剤、溶媒又は賦形剤と混合された、医薬的有効量の１種以上の、請求項１に記載された化合物（ｂ）〜（ｐ）及び（ｒ）〜（ｂｅ）からなる群から選択される化合物若しくはその医薬的に許容可能な塩（類）を含む医薬組成物。
経口製剤の形態であることを特徴とする、請求項４に記載の医薬組成物。
前記医薬的に許容可能なキャリアが、澱粉、乳糖、ポリビニルピロリドン（Ｋ−３０）、タルク及びステアリン酸マグネシウムからなる群から選択されることを特徴とする、請求項５に記載の医薬組成物。
非経口投与製剤の形態であることを特徴とする、請求項４に記載の医薬組成物。
請求項１に記載の化合物（ｂ）〜（ｐ）及び（ｒ）〜（ｂｅ）からなる群から選択される化合物若しくはその医薬的に許容可能な塩の１種以上をポリエチレングリコール４００に溶解し、得られた溶液を等張溶液又は水で希釈して所望の濃度とすることを含む、請求項７に記載の非経口製剤の製造方法。
ローション、口内リンス及び歯磨き剤の形態であることを特徴とする、請求項４に記載の医薬組成物。
請求項１に記載の化合物（ｂ）〜（ｐ）及び（ｒ）〜（ｂｅ）からなる群から選択される化合物若しくはその医薬的に許容可能な塩の有効量を、単独又は他の抗糖尿病治療薬との組み合わせで含む糖尿病患者にすでに形成されている（ｐｒｅｆｏｒｍｅｄ）ＡＧＥを分解することによる糖尿病治療剤。
請求項１に記載の化合物（ｂ）〜（ｐ）及び（ｒ）〜（ｂｅ）からなる群から選択される化合物若しくはその医薬的に許容可能な塩の有効量を、単独又は医薬的に許容可能なキャリア、希釈剤又は賦形剤との組み合わせで含む、糖尿病、及び形成された高濃度のＡＧＥによって起きる腎臓障害、神経学的障害、アテローム性動脈硬化症、網膜障害、皮膚科学的障害、口腔の非酵素的褐変、上皮の機能障害及び成長障害（ｇｒｏｗｔｈｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ）からなる群から選択される老化関連合併症によって引き起こされる疾患の予防又は治療剤。