CZ303214B6

CZ303214B6 - Pyridiniová sloucenina, zpusob její výroby, její použití, farmaceutický prostredek ji obsahující, zpusob jeho výroby a jeho použití

Info

Publication number: CZ303214B6
Application number: CZ20011032A
Authority: CZ
Inventors: Sankaranarayanan@Alangudi
Original assignee: Torrent Pharmaceuticals Ltd
Priority date: 2001-03-21
Filing date: 2001-03-21
Publication date: 2012-05-30
Also published as: CZ20011032A3

Abstract

Je popsána pyridiniová sloucenina a její farmakologicky prijatelné soli užitecné pro ovládání vaskulárních komplikací spojených s diabetem a poruchami souvisejícími se stárnutím, mezi které patrí onemocnení ledvin, nervové poškození, ateroskleróza, retinopatie, dermatologické poruchy a zbarvení zubu. Je popsán také zpusob výroby této pyridiniové slouceniny, podle kterého se podle žádaného konecného produktu vyrobí patricne substituovaný pyridin a následuje jeho kvarternizace príslušným reakcním cinidlem na pyridiniovou slouceninu. Je popsán rovnež farmaceutický prostredek obsahující tuto pyridiniovou slouceninu, zpusob jeho výroby a jeho použití.

Description

Oblast techniky

Předložený vynález se týká nové skupiny pyridinových sloučenin ajejich použití pro léčení diabetů a souvisejících onemocnění. Podrobněji se tento vynález týká pyridin i ových sloučenin, způsobů jejich výroby, farmaceutického prostředku, který obsahuje tyto sloučeniny, a jejich io použití pro léčení komplikací diabetes mellitus. Sloučeniny této řady vykazují aktivitu štěpící

AGE, což je podstatné pro léčení diabetických a s věkem souvisejících komplikací, mezi které patří onemocnění ledvin, nervové poškození, ateroskleróza, retinopatie a dermatologické stavy. Tento vynález se týká také způsobu změny zabarvování zubů pocházejícího od neenzymatického hnědnutí v ústní dutině, který zahrnuje podávání takového množství, které je účinné pro změnění předem vytvořeného pokročilého gly kosy lačn ího zesíťování.

Dosavadní stav techniky

Maillard v roce 1912 zjistil, že redukující cukry, jako je glukóza a ribóza, reagují s proteiny za vzniku hnědých pigmentů. Další studie ukázaly, že jde o ireversibilní neenzymatickou reakci, která se vyskytuje v některých přirozených systémech, mezi které patří skladované potraviny. K Maillardově reakci dochází ve dvou stupních, časném a pokročilém. Na počátku proteiny reagují s glukózou za vzniku stabilních Amadoriho produktů, které se následně zesíťují za vzniku pokročilých glykačních konečných produktů (AGE). Ve většině případů je tvorba AGE doprovázena také hnědnutím proteinů a zvýšením fluorescence.

U diabetů, kde je hladina glukózy významně vyšší než normální hladina, reakce glukózy s několika proteiny, jako je hemoglobin, oční krystalický protein a kolagen, vede ke vzniku AGE, což je dále zodpovědné za komplikace související s diabetem, jako je retinopatie, mikroangiopatie, endoteltální dysfunkce a další orgánové dysfunkce. Navíc je oslabena také aktivita několika růstových faktorů, jako je růstový faktor bazických fibroblastů. AGE produkty, na rozdíl od normálních proteinů v tkáni mají nižší rychlost přeměny a doplňování. Bylo popsáno, že AGE produkty mohou skutečně vyvolávat komplexní imunologickou reakci zahrnující RAGE recepto35 ry (receptor pokročilých glykačních konečných produktů) a aktivaci několika neúplně definovaných imunologických procesů. Bylo dokumentováno, že diabetes s průkazem mikroangiopatie a makroangiopatie vykazuje také průkaz oxidačního stresu, jehož mechanismus nebyl objasněn.

In vitro tvorba AGE může být studována v laboratoři inkubováním redukujících cukrů, jako je ribóza nebo glukóza, s hovězím sérovým albuminem. Tvorba AGE může být detegována zvýšením fluorescence nebo zvýšením zkřížené reaktivity s anti-AGE protilátkami. Zdá se, že zvýšení fluorescence předchází tvorbě AGE specifických antigenových epitopů. Toto zvýšení fluorescence se používá pro sledování zvýšené tvorby in vitro (Brownlee M. aspoL·. Science 1986, 232, 1629 až 1632.). Vedle zvýšení fluorescence je jedním z nej důležitějších znaků in vitro tvorby

AGE tvorba antigenních epitopů, které jsou specifické pro AGE a ne pro přírodní proteiny. Je tedy možný vznik protilátek proti pokročilým glykačním konečným produktům jednoho proteinu ajejich použití pro detegování tvorby AGE v jiných proteinech. To slouží jako důležitý analytický nástroj při výzkumu AGE.

Díky klinickému významu tvorby AGE pro diagnostikování, předcházení nebo revertování tvorby AGE v těle použito mnoho přístupů. Tvorba AGE by mohla být inhibována zreagováním s produktem časné gly kosy láce, což vede k originální reakci mezi cílovým proteinem a glukózou. O inhibicí se předpokládá, že k ní dochází reakcí mezi inhibitorem a časným gly kosy lačním produktem, což přerušuje následnou reakci glykosylovaného proteinu s dalším proteinovým materiá- 1 CZ 303214 B6 lem za vzniku zesilovaného produktu posledního stupně. Sloučeniny, jako je aminoguanidin, působí tak, že tímto mechanismem i nh i bují tvorbu AGE.

Tvorba AGE na dlouhověkých proteinech souvisí také se zesíťováním těchto proteinů. Bylo ukázáno, že zesilování proteinů odvozené od AGE je štěpeno takovými sloučeninami, jako je jV-fenacy lth iazo liumbromid (PTB), který reaguje a štěpí kovalentní zesilování proteinů odvozené od AGE (Vasan aspoL, Nátuře 1996, 382, 275 až 278; USA patent 5 853 703, datum patentu: 29. prosinec 1998.). Očekává se, že mechanismus snižování obsahu AGE v tkáních probíhá relativně rychle, na rozdíl od aminoguanidinu, který působí pomalu jeho velmi přirozeným mechanismem působení. Předložený spis se týká pyridiniových sloučenin, které štěpí předem vytvořený AGE, podobně jako PTB, a v mnoha případech dokonce účinněji než PTB. Podstata vynálezu

Hlavním předmětem předloženého vynálezu je získat novou skupinu pyridiniových sloučenin, které jsou užitečné pro ovládání diabetů a vaskulámích komplikací souvisejících se stárnutím a zvláště léčení komplikací diabetes mellitus a dalších stavů souvisejících se stárnutím, mezi které patří onemocnění ledvin, nervové poškození, ateroskleróza, retinopatie a dermatologické stavy. Tento vynález zahrnuje také způsob reverse zbarvení zubů pocházejícího od neenzymatického hnědnutí v ústní dutině, který vyžaduje podávání množství účinného pro změnění dříve vytvořeného glykosylačního zesilování atd.

Jiným předmětem předloženého vynálezu je získání pyridiniových sloučenin, které mají aktivitu spočívající ve štěpení AGE.

Ještě dalším předmětem předloženého vynálezu je získat způsob výroby pyridiniových sloučenin, které mají aktivitu spočívající ve štěpení AGE.

Ještě dalším předmětem vynálezu je získání farmaceutických prostředků s novou skupinou pyridiniových sloučenin podle tohoto vynálezu a jejich farmaceuticky přijatelných solí v kombinaci s vhodnými nosiči, rozpouštědly, vehikuly, ředidly a dalšími médii normálně používanými při výrobě takových prostředků.

Dále se dá, podle vynálezu, podávat sloučeniny buď samostatně, nebo v kombinaci s léčivy pro antidiabetickou terapii nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí v požadovaných dávkách ve směsi s farmaceuticky přijatelným ředidlem, rozpouštědlem, vehikuly, nosiči nebo jinými médii podle vhodnosti pro daný účel diabetickému pacientovi.

V následující části je předložený vynález popsán podrobně.

Detailní popis vynálezu

Předložený vynález se týká nové skupiny sloučenin, které štěpí AGE, obecného vzorce I

-2CZ 303214 B6 v němž

Ri znamená skupinu -R4-R5 nebo -N(R₇)N(R₇)R₉,

R4 znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající ze skupiny -N(R₇)R6O-, -N(R₇)RóN(R₇)-, OR_ÓO a -OR6N(R₇>-, kde R^ znamená alkyl,

R₅ znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající z alkylu, arylu včetně heteroarylů, skupiny -COR₇, SO₂R₇, -C(S)NHR₇, -C(NH)NHR₇, -COR₎₀, -C(O)NHR₇ a

R7

I

-n(r₇jn=c ,

I

R10 kde R₇ znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající z atomu vodíku, alkylu a arylu včetně heteroarylů s tím, že R₇ může znamenat jinou skupinu pro Ri a jinou pro R₃ ve stejně sloučenině,

R₂ znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající z atomu fluoru, chloru, bromu a jodu, skupiny OR₇ a NO₂, alkylu, arylu včetně heteroarylů, formylu, acyiu, skupiny C(O)NR₇R₁₀, C(O)OR₇, NR₇R_]0, N=C(R_?XRi₀), SR₇, SO₂NH₂, SO₂alkyl a SO₂aryl a m znamená číslo 0, 1 nebo 2,

R₃ znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající ze skupiny R₇, OR₇, N(R₇)(Rio), N=C(R₇)(R,₀), N(R₇)N(R₇XR,_o), N(R₇)N=C(R₇XR₁₀) a CH(R₇)C(O)R8, kde R₈ znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající ze skupiny R₇, OR₇ a NR₇Ri₀,

R₉ znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající z atomu vodíku, alkylu, arylu včetně heteroarylů, skupiny C(0)Rio, - SO2R10, - C(S)NHRio, -C(NH)NH(Ri₀) a -C(O)NHR₁₀,

Rio znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající z atomu vodíku, alkylu nebo arylu včetně heteroarylů a v každém případě je popřípadě odlišná od substituentu Ri₀ s tím, že R₁₀ může zna30 menat jinou skupinu pro R| a jinou pro R₃ ve stejné sloučenině,

X znamená skupinu vybranou ze skupiny sestávající z halogenidového iontu, acetátového iontu, chloristanového iontu, sulfonátového iontu, oxalátového iontu, citrátového iontu, tosylátového iontu, maleinátového iontu, mesylátového iontu, uhličitanového iontu, siřičitanového iontu, hydrogenfosforitého iontu, fosfonátového iontu, fosforečnanového iontu, BF₄ a PF₆“, s tím, že

i) jestliže na stejném atomu uhlíku nebo dusíku jsou přítomny dvě alkylové skupiny, jsou popřípadě spolu spojeny za vzniku cyklické struktury, a ii) jestliže je přítomen atom dusíku heteroarylového kruhu skupiny R_l0, je tento atom dusíku popřípadě kvartemizován sloučeninou, jako je sloučenina obecného vzorce X-CH₂C(O)-R₃,

Pojem „alkyl“, jak je zde používán, znamená popřípadě substituovanou uhlovodíkovou skupinu napojenou jednoduchými vazbami atom uhlíku-atom uhlíku a s 1 až 8 atomy uhlíku spolu spojenými. Alkylová uhlovodíková skupina může být lineární, větvená nebo cyklická, nasycená nebo nenasycená nebo nenasycená. Substituenty mohou být vybrány z atomu fluoru, chloru, bromu, jodu, dusíku, síry a kyslíku a arylové skupiny. S výhodou nejsou přítomny více než tři substi50 tuenty.

Pojem „aryl“, jak je zde používán, znamená popřípadě substituovanou aromatickou skupinu s alespoň jedním kruhem, který má konjugovaný pí-elektronový systém, obsahující až dva konjugované nebo kondenzované kruhové systémy. Mezí aryly patří karbocyklická arylová, heterocyklická arylová a biarylová skupina, při čemž všechny mohou být popřípadě substituovány. Substituenty jsou vybrány z atomu fluoru, chloru, bromu, jodu, dusíku, síry a kyslíku a uhlovodíku s 1 až atomy uhlíku s přímým nebo větveným řetězcem.

Nové sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I, které mají v poloze 3 skupinu —COR| a v nichž m znamená číslo 0 nebo 1 Jsou uvedeny v tabulce 1 A. Nové sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I, které mají v poloze 4 skupinu -COR| a v nichž m znamená číslo 0, jsou uvedeny v tabulce 1B. Tyto sloučeniny mohou být dále definovány jejich následujícími chemickými názvy:

l-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-4-(fenylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 1), l-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-4-(fenylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 2),

1-(2-ethoxy-2-oxoethy 1)-3-( feny Isulfony lhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 3), l-(2-(2’,4’-dichlorfenyl)-2-oxoethyl)-3-(2(methoxy)ethyloxykarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 4), l-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-(2-(benzoyloxy)ethylaminokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 5),

1-(2-th ien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(fenylaminokarbonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 6), l-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(2-(acetoxy)ethylaminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 7), l -( feny lam ino-2-oxoethy l)-3-(feny lsu Ifony lhydrazinokarbony l)pyr id i n i umchlorid (sloučenina č. 8), l-(2-fenylamino-2-oxoethyI)-3-((4-methylfenyl)sulfonylhydrazinokarbonyI)pyridiniumchIorÍd (sloučenina č. 9), l-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(2-(benzoyloxy)ethyloxykarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 10), l —(2—th ien-2 ’-y l-oxoethy l)-3-(feny Ikarbony lhydrazinokarbony l)pyridiniumbromid (sloučeninač. ll), l-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-3-((fenylmethyl)sulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina Č. 12), l-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-((fenylmethyl)suIfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 13),

A',;V+di[3-karbonyl-l-(2-furan-2’-yl-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dibromid (sloučenina č. 14),

A'7V'-di[3-karbonyl-l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dichlorid (sloučenina č. 15), l-(2-th ien-2’-yl-2-oxoethyl )-3-((2-( l-oxo-3-cyktohexyl)propyl)hydrazinokarbonyl)pyridini um bromid (sloučenina č. 16), ~(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-( {2-( 1 —oxo-3-cykIohexy l)propyl} hydrazinokarbony I)pyridiniumbromid (sloučenina č. 17), l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-[2-(benzoyloxy)ethylaminokarbonyÍ]pyridiniumbromid (sloučenina č. 18),

-4CZ 303214 B6

1—(4—ethoxy-2,4—dioxobuty!)-3-(2-benzoyloxy)ethylaminokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 19), (l-(2’,4’-dichlorfenyl-2-oxoethyl)-3-(2-methoxyethylaminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 20), ;V,;V'—di[3-karbonyl-l—(2—cykiopropylamino~2—oxoethyl)pyridinium]hydrazin—dichlorid (sloučenina č. 21), l-(2-cyklopropylamino-2-oxoethyl)-3-(2-methoxyethylaminokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 22),

AYV’—di[3—karbonyl— 1—(2—isopropy lamino—2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dichlorid (sloučenina Č. 23), l-(2-thien—2’-yl-2-oxoethyl)-3-(2-(2-chlor-3-pyridoylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 24), l-(2-isopropy lam ino-2-oxoethyl)-3-(2-methylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridi ni umchlorid (sloučenina č. 25),

1-(2-(1-pyrrolidÍnyl)-2-oxoethyl)-3“(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniuinchlortd (sloučenina č. 26),

1—(2-thien—2’-yl—2—oxoethy l)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 27), jV,7V’-di[3—karbony l-l-(2-hydroxy-2—oxoethy l)pyridinium jhydrazin—dichlorid (sloučenina č. 28), l-(2-thien-2^,-yl-2-oxoethyl)-3-((2-methoxyethyl)aminokarbonyl)-5-brompyridiniumchlorid (sloučenina č. 29), l-(2-thien-2*-yl-2-oxoethyl)-3~[(2“methoxykarbonylpyridin-5-karbonyl)hydrazinokarbonyl]pyridin i umchlorid (sloučenina č. 30),

1-[1—(2-thien-2’-yl-2—oxoethyl)-6—methyl-3-karbonylpyridinium]-2-[l—(2-thien-2’-yl-2oxoethy I)-3-karbony lpyridinium]hydrazin-d ich lorid (sloučenina č. 31),

1—(2—thien—2’-yl-2-oxoethyl)-3—(isopropy lsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 32),

1-(2-(4-benzyIpiperidin-l-yl)-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 33),

1-(2-(2-ethoxykarbony lpyrrolidin-1-y l)-2-oxoethyl)-3-(2-methansulfonylhydrazinokarbony I)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 34), l-(2-thien—2’—yl—2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)-5-brompyridinium bromid (sloučenina č. 35), l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(ethoxykarbonyIhydrazÍnokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 36),

-(2-(5-ch lorthien—2-y l)-2-oxoethyl)-3-(methansulfony lhydrazinokarbony l)pyridin i umbrom id (sloučenina č. 37),

N_r N *-d i [3-karbony 1-1 -(2-(4-n itroth ien-2-y 1 )-2-oxoethy l)pyridin i um]hydrazin-d ich lo rid (sloučenina č. 38), ]-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)-6~methyIpyridiniumbromid (sloučenina č. 39),

W’-dí[3-karbonyl-l-(2-(5-methylthien-2-yl)-2-oxoethy l)pyridin i um] hydrazin-d ich lorid (sloučenina Č. 40), ;V, yV’—d i [3—karbonyl—1—(2—(2—ethoxy karbony Ipy rrol idin—1—yl)—2—oxoethy l)pyridin i um] hydrazin-d ich lorid (sloučenina č. 41),

1—[ 1 -(2-thien-2^,-yl-2-oxoethyl)-5-aminokarbonyl-3-karbonylpyridinium]-2-[l-(2-thien-2’yl-2-oxoethyl)-3-karbonylpyridinium]hydrazin-dichlorid (sloučenina č. 42), l<2-(4-karbethoxytliiazotidin-3-yl)-2-oxoetliyl)-3-(2-methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 43),

N,N'—di[3-karbonyl-l-(2-(5-chlorthÍen-2-yl)-2-oxoethyl)pyridÍnium]hydrazÍn-dich]orid (sloučenina č. 44),

1-(2-( 5-methylthien-2-yl)-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 45), l-(2-(4-nitrothien-2-yl)-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 46), l-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-(fenylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 47), io l-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-4-[2-(benzoyloxy)ethylaminokarbonyl]pyridiniumchlorid (sloučenina č. 48), l-(2-(5-nitrothien-2-yl)-2-oxoethyl>-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumch lorid (sloučenina č. 49), l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(trifluormethansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid is (sloučeninač. 50), l-(2-thien-2’-y|_2-oxoethyl)-3-(fenylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 51), l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(p-methoxyfenylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 52), l-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-3-(fenylaminokarbonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid 20 (sloučenina č. 53), l-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-3-(p-toluensuIfonyIhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 54), ]-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(fenylaminokarbonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 55), l-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-(benzylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 56),

I-<2-fenyl-2-oxoethyl)-4—(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 57), l-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(fenylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 58), !-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-4-[2-(benzoyloxy)ethylamÍnokarbonyl)pyridinÍumbromid (sloučenina č. 59), l-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-(3-(fenylliydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 60), l-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(p-methoxyfenylsulfonyIhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 61), l-(2-fenyl-2-oxoethyiy-4-[2-(benzoyloxy)ethylaminokarbonyl]pyridiniutTibromid (sloučenina č. 62 a

1-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-4-(p-methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 63).

-6CZ 303214 B6

Tabulka IA

Reprezentativní pyridiniové deriváty (m znamená číslo 0 nebo 1 a -CORi je v poloze 3, dále Ph označuje fenyl, Et značí ethyl a Me je značka pro methyl)

slou- čenina	-Rt	-r₂	-R₃	X
3	NHNH-SO₂Ph	-	OEt	Br
4	-OCH₂CH₂OCH₃	-	2,4-dichlorřenyl	Br
5	-NHCH₂CH₂OCOPh	-	NHfenyl	Cl
6	-NHNHCONHPh	-	2-thienyl	Br
7	NHCHjCH₂OCOCH₃	-	fenyl	Br
8	NHNHSOiPh	-	NH-fenyl	Cl
9	NHNHSO₂Ph(4-CH₃)	-	NH-fenyl	Cl
10	OCH₂CH₂OCOPh		fenyi	Br
11	-NHNHCOPh		2-thienyl	Br
12	NHNHSO₂CH₂Ph		OEt	Br
13	NHNHSO₂CH₂Ph		fenyi	Br
14	struktura vzorce a		2-furyl	Br
15	struktura vzorce b		2-thienyl	Cl
16	NH NHCOCHaCHa-cyklohexyl		2-thienyl	Br
17	NHNHCOCH₂CH2-cyklohexyl		NH-fenyl	Cl
18	NHCH₂CH2OCO-fenyl		2-thienyl	Br
19	ΝΗΟΗΣΟΗίΟΟΟ-ίβηγΙ	-	CHzCOs-ethyt	Cl
20	-NHCH₂CH₂OCH₃	-	-2,4-díchtorfenyl	Br
21	struktura vzorce c	-	NH-cyklopropyl	Cl
22	-NHCHsCHaOCHa	-	NH-cyklopropyl	Cl
23	struktura vzorce d	-	NH-ísopropyl	Cl
24	struktura vzorce e	-	2-thienyl	Cl
25	NHNHSO₂CH₃	-	NHďsopropyl	Cl

V7X

NHNHSO₂CH₃	-	1-pyrrolidinyl	Cl
nhnhso₂ch₃	-	2-thienyl	Cl
struktura vzorce f	-	-OH	Ci
NHCH₂CH₂OCH₃	-	2-thienyl	Cl
struktura vzorce g	-	2-thienyl	Cl
struktura vzorce h	-	2-thienyl	Cl
-NHNHSO₂-isopropyl	-	2-thienyl	Br
-NHNHSO2CH3	-	struktura vzorce i	Cl
-NHNHSO₂CH₃	-	struktura vzorce j	Cl
-nhnhso₂ch₃	5-Br	2-thienyl	Br
-nhnhcoc₂h₅	-	2-thienyl	Br
-nhnhso₂ch₃	-	5-chlor-2-thienyl	Br
struktura vzorce k	-	4-nitro-2-thienyl	Cl
-NHNHSO₂CH₃	6-Me	2-thienyl	Br
struktura vzorce 1	-	5-methyl-2-thienyl	Cl
struktura vzorce m	-	struktura vzorce j	Cl
struktura vzorce n	-	2-thienyl	Cl
-NHNHSO₂CH₃	-	struktura vzorce 0	Cl
struktura vzorce p	-	5-chlor-2-thienyl	Cl
-NHNHSO2CH3	-	5-methyl-2-thienyl	Cl
-NHNHSO₂CH₃	-	4-nitro-2-thienyl	Br
-NHNHPh	-	-NHPh	Cl
-NHNHSO₂CH₃	-	5-nitro-2-thienyl	Cl
-nhnhso₂cf₃	-	2-thienyl	Br
-NHNHPh	-	2-thienyl	Br
-NHNHSO₂-4-methoxyfenyl	-	2-thienyl	Br
-NHNHCONHPh	-	-OEt	Br
-NHNHSO₂-4-methylfenyl		-OEt	Br
-NHNHCONHPh	-	Ph	Br
-NHNHSOzCHaPh	-	-NHPh	Cl
-NHNHPh		Ph	Br

-8CZ 303214 B6

-NHNHPh - -OEt Br

-NHNHSOr-4-methoxyfenyl Ph Br

(c) (f)

9-~CZ 303214 B6

10CZ 303214 B6

Tabulka IB

Reprezentativní pyridin iové deriváty (m znamená číslo 0 a -CORi je v poloze 4)

sloučenina -Rt	-R₂ -R3	X
1	NHNHSOaPh	OEt	Br
2	NHNHSOíPh	NH-fenyl	Cl
48	-NHCH₂CH₂OCOPh	-NHPh	Cl
57	-NHNHSO₂CH₃	-Ph	Br
59	NHCH₂CH₂OCOPh	-OEt	Br
62	-NHCH^^OCOPh	-Ph	Br
63	-NHNHSO₂CH₃	-OEt	Br

Podle provedení předložené vynálezu se předložené sloučeniny ajejich farmaceuticky přijatelné soli používají pro léčení diabetických komplikací a komplikací souvisejících se stárnutím, mezi které patří onemocnění ledvin, nervové poškození, ateroskleróza, retinopatíe, dermatologické stavy a zbarvení zubů vyskytující se díky vyšším hladinám dříve vytvořených AGE. Zvýšené hlaio diny dříve vytvořených AGE se mohou regulovat rozštěpením AGE produktů použitím sloučenin uvedených v tomto vynálezu.

Tento vynález poskytuje také způsob výroby nových pyridiniových sloučenin.

Uvedený způsob výroby sloučeniny 15 zahrnuje přidání roztoku 2-chloracetylthiofenu v isopropanolu k W7V’-di(nikotinyl)hydrazinu rozpuštěnému v methanolu, vaření šest hodin pod zpětným chladičem, ochlazení, zfiltrování vysrážené pevné látky, promytí pevné látky horkým acetylátem a konečně vyčištění pevné látky 20 ml methanolu s ethylacetátem (3:1). Získá se tak žádaná sloučenina.

Podobně se vyrábějí další nové sloučeniny z příslušně substituovaných pyridinových derivátů s následující kvartemizaci příslušným reakčním činidlem vařením pod zpětným chladičem v alkoholických rozpouštědlech, jako je methanol, ethanol, propanol atd., a vysokovroucích

Aň-r rozpouštědlech, jako je toluen nebo xylen atd., po dobu 6 až 48 hodin. Získají se tak žádané sloučeniny.

Příklady substituovaných pyridinových derivátů, které lze použít pro výrobu specifických 5 sloučenin podle vynálezu, jsou uvedeny níže:

1. /V,/V’-di(nikotinyl)hydrazin,

2. 3-[(2-pyridyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

3. 3-[(2-methansulfonyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

4. 3-[(2-benzoyloxy)ethylaminokarbonyl]pyridin, io 5. 3-[(2-fenylsulfonyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

6. 3-[(2-acetoxy)ethyloxykarbonyl] pyridin,

7. 3-[( 2-benzoy loxy )ethy loxy karbony I ] pyrid i n,

8. 3-[(2-methoxy)ethyloxykarbonyl]pyridin,

9. 3-[(2-fenylaminokarbonyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

10. 3-[(2-acetoxy)ethylaminokarbonyl]pyridin,

3-[(2-(4-methy Ifeny lsulfonyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

12. 3-[(2-benzoyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

13. 3-[(2-fenylmethansulfonyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

14. 3-[(2-(3-cyklohexy Ipropanoy l)hydrazinokarbonyl]pyridin,

15. 3-[(2-methoxy)ethylaminokarbonyl]pyridin a

16. 3-[l-oxo-l-(2-methoxykarbonyl)pyridyl]hydrazinopyridin.

Příklady kvartem izačních činidel, která se mohou použít v této reakci, jsou uvedeny níže:

I. 2-bromacetylthiofen,

2. 2-chloracetylthiofen,

3. fenacyl bromid,

4. fenacylchlorid,

5. 2,4-dichlorfenacylbromid,

6. /V-fenylchloracetamid,

7. 7V-cyklopropylchIoracetamid,

8. ethylbromacetát,

9. bromacetylfuran,

10. TV-isopropylchloracetamid,

II. Λ'-chloracety 1-2-py rrolidon a

12. chloroctová kyselina.

In vitro testování aktivity štěpení AGE: In vitro tvorba AGE, studovaná v laboratoři inkubováním redukujícího cukru glukózy proteinem, hovězím sérovým albuminem, vedla ke zhnědnutí roztoku a zvýšení fluorescence. Pro sledování zvýšené tvorby AGE byla jako kritérium použita fluores40 cence.

Příklady provedení vynálezu

Příklad l

Aktivita štěpení AGE byla potvrzena níže uvedeným postupem testování.

- 12CZ 303214 B6

Materiály:

hovězí sérový albumin (frakce V) (BSA) glukóza pro analýzu fosforeěnanový pufr (PBS)

Zařízení:

čtečka mikrodesek ELISA - Spectramax Plus (Molecular Devices, USA) systém promývání mikrodesek (Bio-Tec Instruments, USA) pH-metr

Metody pokusu:

ELISA test (enzyme linked immunosorbent assay)

160 mg/ml proteinu, hovězího sérového albuminu, BSA, a 1,6M glukóza byly rozpuštěny ve fosforeěnanovém pufru, PBS. Jako ochranné činidlo byl přidán azid sodný v 0,02% (hmotn.) koncentraci. Tento roztok se asepticky zfiltruje 0,22μΜ filtrem a nechá se stárnout 16 týdnů při 37 °C. Po 16 týdnech byl roztok dialyzován proti PBS, rozdělen na podíly a skladování při -20 °C.

Pro stanovení aktivity štěpení AGE se 10 pg/ml šestnáctitýdenního AGE-BSA inkubuje s růz25 nými koncentracemi testovaných sloučenin 24 hodin při 37 °C. ELISA testem se stanoví aktivita štěpení AGE testovanými sloučeninami.

Test ELISA se provádí následujícím způsobem.

1. Různé koncentrace šestnáctitýdenního AGE-BSA se potáhnou na mikrotitrovací desku jako standard. Každá koncentrace se potáhne v trojím provedení.

2. Testované vzorky se potáhnou na mikrotitrovací desku v koncentraci 5 ng až 20 ng na jamku v trojím provedení.

3. Deska se inkubuje jednu hodinu při 37 °C.

4. Po inkubaci se deska promyje PBST (PBS s 0,05 % hmotn. Tweenu 20).

5. Provede se blokování 5% (hmotn.) sbíraným mlékem v PBS při 37 °C po dobu jedné hodiny.

6. Deska se promyje PBST.

7. Přidá se primární protilátka proti AGE-BSA a deska se inkubuje jednu hodinu při 37 °C.

8. Deska se promyje PBST.

9. Přidá se konjugát sekundární protilátka protikráličí HRPO (křenová peroxidáza) a deska se inkubuje jednu hodinu při 37 °C.

10. Deska se promyje PBST.

11. Provede se vybarvení OPD (dihydrochloridem orřAo-fenylendiaminu) a peroxidem vodíku.

12. Po 15 minutách inkubace při 37 °C se čtečkou mikrodesek ELISA změří OD (optická hustota) při 450 nm až 620 nm.

Aktivita štěpení sloučeninami byla stanovena podle následujícího vzorce:

% aktivity štěpení - [(OD450-620 kontroly - OD₄₅₀^,₂o testu) : (OD₄₅₀. ₆₂₀ kontroly)]. 100, kde “TICZ 303214 B6

OD450 ή2ο kontroly je absorbance 20 ng AGE-BSA po 24 hodinách inkubace při 37 °C bez testované sloučeniny a

OD450 620 testu je absorbance 20 ng AGE-BSA po 24 hodinách inkubace při 37 °C s testovanou sloučeninou.

Použitím specifických příkladů se vypočte % aktivity štěpení AGE a zaznamená se v tabulce 2.

o

Tabulka 2

vzorek	koncentrace (mM)	% štěpení
PTB	10	27
	20	47
sloučenina 4	10	13
	25	41
sloučenina 5	10	37
	25	90
sloučenina 14	10	14
sloučenina 15	5	20
sloučenina 20	5	17,66
sloučenina 21	5	22,8
sloučenina 22	10	12,38
sloučenina 24	10	12,51
sloučenina 25	10	10,85
sloučenina 27	10	17,53
sloučenina 29	10	32,38
sloučenina 31	2,5	85,67
sloučenina 32	10	31,45
sloučenina 33	10	20,94
sloučenina 34	10	25,34
sloučenina 35	2,5	29,36
sloučenina 36	10	33,43
sloučenina 37	10	40,85

-14CZ 303214 B6

sloučenina 38	10	75,92
sloučenina 39	1,0	77,69
sloučenina 40	10	81,95
sloučenina 41	10	20,31
sloučenina 42	1	95,36
sloučenina 43	10	25,06
sloučenina 44	10	78,41
sloučenina 45	10	25,17
sloučenina 46	10	60,94
sloučenina 47	2,5	68,35
sloučenina 48	10	19,07
sloučenina 49	1	42,01
sloučenina 50	10	92,64

Sloučeniny 5, 29, 31, 32, 35, 36 až 40, 42, 44, 46, 47, 49 a 50 mají tedy lepší aktivitu spočívající ve štěpení AGE při srovnání s PTB, při čemž účinnosti sloučenin 31, 38 až 40, 42, 44, 46, 47, 49 a 50 jsou významně vyšší.

In vivo testování aktivity štěpení AGE

Byly studovány příznivé účinky testovaných sloučenin na diabetickou neuropatii a nefřopatii u krysích modelů diabetů. Krysy byly rozděleny do tří skupin. První skupina byla neošetrená nediabetická zvířata ve stejném věku, druhá skupina byla diabetická kontrolní a třetí skupina byla diabetická skupina ošetřená testovanou sloučeninou. Každá ošetřená skupina měla svoji vlastní odpovídající kontrolní a diabetickou skupinu. Druhá a třetí skupina byla ošetřena Streptozotocinetn (STZ) v dávce 60 mg/kg pro indukování diabetů. Po skončení 12 týdnů diabetů byly krysy ošetřeny denním podáváním testované sloučeniny (dávky jsou uvedeny v tabulce) po dobu 8 týdnů, Na konci léčení bylo vyhodnoceno vymizení kreatininu a rychlost nervové vodivosti (NCV) zvířat.

Vymizení kreatininu krys bylo vyhodnoceno následujícím způsobem:

vymizení kreatininu = [(koncentrace kreatininu v moči): (koncentrace kreatininu v krvi)] krát ml moči prošlé/minutu vymizení kreatininu v neošetřené diabetické skupině bylo srovnáno s ošetřenou skupinou a procenta zlepšení jsou uvedena v tabulce 3.

Rychlost nervové vodivosti byla měřena použitím modifikovaného způsobu podle Biro aspoí (1998). Ve stručnosti - v anestezii byly ischiatické a tibiální nervy elektricky stimulovány v ischiatické incuzuře nebo kotníku. Elektromyogramy (EMG) zaznamenané v chodidlových svalech sestávaly ze dvou složek, a) přímé motorické odpovědi s krátkou latencí (M) a monosynapticky vyvolané senzorové odpovědi s dlouhou latencí (H, Hoffmannův reflex). Byla změřena latence a trvání M odpovědi. Rychlost vodivosti motorického nervu (MNCV) byla vypočtena následujícím způsobem:

-ŤA

MNC V = (vzdálenost mezi ischiatickými a tibiálními stimulačními body) : (rozdíly latence pro Mjschiatický U N^tibiálni)

Procento zlepšení rychlostí nervové vodivosti ve skupině ošetřené testovanými sloučeninami bylo vypočteno následujícím způsobem:

% zlepšení NCV ~ (NCV ošetřené skupiny — NC V diabetické skupiny): (NCV kontrolní skupiny - NCV diabetické skupiny) ,o

Tabulka 3

Účinek sloučeniny č. 14 a 21 na vymizení kreatininu a na rychlosti nervové vodivosti

parametry	sloučenina č. 15 (7,5 mg/kg, b.i.d.)	sloučenina č. 21 (6,0 mg/kg, b.i.d.)
% zvýšení vymizení kreatininu	103,0	5.0
% zvýšení NCV	60,0	58.4

Tyto výsledky ukazují, že sloučeniny této skupiny mají příznivé účinky na vymizení kreatininu a na rychlosti nervové vodivosti.

Diskuze výsledků testů

Všechny testované sloučeniny uvedené v předložené přihlášce měly in vitro účinek spočívající ve Štěpení AGE. Za podmínek chronické hyperglykemie u kiys existuje spontánní neenzymatická reakce mezi glukózou, lipidy a proteiny, která vede k tvorbě pokročilé glykosylace konečných produktů. U tohoto zvířecího modelu bylo demonstrováno snížení vymizení kreatininu a snížení rychlosti nervové vodivosti. Tyto změny souvisely s poškozením renálních a neuronálních tkání. U chronických NIDDM pacientů existuje snížení vymizení kreatininu jako projev diabetů indukovaného renálním poškozením. Jeden z hlavních faktorů, který přispívá k renálnímu poškození, je glykace proteinů s dlouhou životností v ledvinách. Je dobře známo, že u chronicky diabetických subjektů existuje snížení rychlosti nervové vodivosti, což se projevuje jako neuropatie.

Rozštěpení zesíťováných proteinů v neuronálních tkáních a související vaskulatuře by mohlo vést ke zlepšení neuronální funkce.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu vykazují funkční zlepšení jako v pojmech zlepšení vymizení kreatininu, tak zlepšení rychlosti nervové vodivosti. Shora uvedené důkazy jasně ukazují, že tyto sloučeniny by mohly hrát hlavní roli při prevenci a léčení různých diabetických komplikací a komplikací souvisejících se stárnutím, jako je nefropatie a neuropatie.

Následující příklady uvádějí způsoby výroby specifických nových sloučenin podle vynálezu, jak jsou tyto sloučeniny uvedeny v tabulce 1. Následující navržené sloučeniny jsou pouze příklady a v žádném případě neznamenají omezení tohoto vynálezu.

- 16CZ 303214 B6

Příklad 2

Výroba l-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-X-(fenylsulfonylhydrazinokarbonyt)pyridiniumbromidu (sloučenina 1)

K vroucímu roztoku 2V-(benzensulfonyl)isonikotinylhydrazidu (1,0 g, 0,036 molu) v isopropanolu (25 ml) se přidá roztok ethylbromacetátu (0,6 g, 0,036 molu) v isopropanolu (10 ml) a reakční smés se vaří 24 hodin pod zpětným chladičem. Reakční směs se ve vakuu zahustí (na 10 ml) a překrystaluje se ze směsi methanolu s ethylacetátem (3:1, 15 ml). Získá se tak pevná látka. Tato io pevná látka se dále promyje ethylacetátem (10 ml). Získá se tak 1,05 g žádaného produktu. Výtěžek 60% hmotn. T.t. 171 až 173 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 1745, 1685 a 1645. 'HNMR spektrum (dimethylsulfoxid-d₆, 400 MHz, δ): 11,41 (1 H, s), 10,39 (1 H, s), 9,10 (2 H, d), 8,27 (2 H, d), 7,82 až 7,80 (2 H, d), 7,60 až 7,57 (1 H, t), 7,50 až 7,46 (2 H, t), 5,63 (2 H, s), 4,18 až 4,12 (2 H, q), 1,19 až 1,15 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 364, 365 a 366.

Podle shora uvedeného postupu se syntetizují zreagováním odpovídajících pyridinových derivátů s příslušnými reakčními činidly varem pod zpětným chladičem v methanolu, ethanolu, propanolu, toluenu nebo xylenu po dobu 6 až 48 hodin. Získají se tak žádané sloučeniny.

Příklad 3 l-(2-Fenylamino-2-oxoethyl)-4-(fenylsulfonylhydrazinokarbonyI)pyridiniumchlorid (sloučenina 2)

Výtěžek 10 % hmotn. T.t. 225 až 227 °C. IČ spektrum (KBr. cm'¹): 1693, 1642 a 1592. ^lH NMR spektrum (DMSO -A, 400 MHz, δ): 11,55 (1 H, s), 10,99 (1 H, s), 10,49 (1 H, s), 9,20 (2 H, d),

8,34 (2 H, d), 7,89 (2 H, d) 7,73 až 7,64 (1 H, t), 7,61 až 7,56 (4 H, m), 7,37 až 7,33 (2 H, t), 7,12 až 7,09 (1 H, t), 5,73 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 411, 412,413 a 414.

Příklad 4 l-(2-Ethoxy-2-oxoethyl)-3-(fenylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina 3)

Výtěžek 75 % hmotn. T.t. 145 až 147 °C, IČ spektrum (KBr, cm¹): 1744, 1713 a 1633. ^!HNMR spektrum (DMSO -de, 400 MHz, δ): 11,27 (1 H, s), 10,36 (1 H, s), 9,28 (1 H, s), 9,09 (1 H, d), 8,83 (1 H, d), 8,27 až 8,24 (1 H, m), 7,82 až 7,79 (2 H, m), 7,58 (1 H, t), 7,48 (2 H, t), 5,59 (2 H, s), 4,17 až 4,12 (2 H, q), 1,16 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 364, 365 a 366.

Příklad 5 l-(2-(2’,4’-Dichlorfenyl)-2-oxoethyl)-3-(2(methoxy)ethyloxykarbonyl)pyridiniumbromÍd 45 (sloučenina 4)

Výtěžek 25 % hmotn. T.t. 156 až 158 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1731, 1706 a 1640. ’HNMR spektrum (DMSOA, 400 MHz, δ): 9,61 (1 H, s), 9,20 (1 H, d), 9,13 (1 H, d), 8,45 až 8,41 (1 H, m), 8,15 (1 H, d), 7,92 (1 H, d), 7,78 až 7,76 (1 H, m), 6,49 (2 H, s), 4,56 až 4,54 (2 H, m), 3,72 so až 3,69 (2 H, q), 3,31 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 368, 369, 370 a 371.

-Ί7CZ 303214 B6 příklad 6 l Y2-Fenylamino-2-oxoethyl>-3-(2“(benzoyloxy)ethylaminokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina 5)

Výtěžek 70% hmotn. T.t. 171 až 172 °C. IČ spektrum (KBr, cm ¹): 1720, 1692 a 1668. 'HNMR Spektrum (DMSO-d., 400 MHz, δ): 11,06 (I H, s), 9,67 (I H, t), 9,59 (I H, s), 9,20 (1 H, d), 9,11 ( 1 H, d), 8,36 až 8,32 (I H, m), 8,00 (2 H, d), 7,66 až 7,61 (3 H, m), 7,51 (2 H, t), 7,34 (2 H, t), 7,10 (1 H, t), 5,77 (2H, s), 4,45 (2H, s), 4,45 (2 H, t), 3,76 až 3,72 (2 H, q). Hmotnostní , o spektrum: m/z 404,405,406 a 407.

příklad 7 i £ i -(2-Thien-2’-yl-2-oxoethyl)“3-(fenylaminokarbonylhydrazÍnokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina 6)

Výtěžek 30% hmotn. T.t. 202 až 204°C. 1Č spektrum (KBr, cm¹): 1718 a 1673. 'HNMR spektrum (DMSO-d., 400 MHz, δ): 11,03 (1 H, s), 9,55 (1 H, s), 9,18 (I H, d), 9,10 (1 H, d), 9,00 (1 H, s), 8,57 (1 H, s), 8,46 až 8,42 (1 H, t), 8,25 až 8,22 (2 H, m), 7,47 až 7,45 (2 H, d), 7,43 až 7,41 (1 H, t), 7,29 až 7,25 (2 H, t), 7,0 až 6,96 (1 H, t), 6,46 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 381, 382 a 383.

příklad 8

-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-(2-(acetoxy)ethylaminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina 7) θ Výtěžek 55 % hmotn. T.t. 186 až 188 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1734, 1697 a 1679. ^]H NMR ³ spektrum (DMSO-d^ 400 MHz, 5): 9,47 (1 H, s), 9,36 (1 H, t), 9,13 až 9,05 (2 H, m), 8,42 až

8,38 (1 H, m), 8,06 (2 H, d), 7,80 (1 H, t), 7,67 (2 H, t), 6,54 (2 H, s), 4,18 (2 H, t), 3,61 až 3,57 (2 H, q), 2,02 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 327, 328 a 329.

Příklad 9 l-(Fenylamino-2-oxoethyl)-3~(fenylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridinÍumchlorid (sloučenina Č. 8)

Výtěžek 38 % hmotn. T.t. 232 až 234 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹). 1689, 1636 a 1596. 'H NMR spektrum (DMSO-dé, 400 MHz, δ): 11,30 (1 H, s), 10,80 (1 H, s), 10,37 (1 H, s), 9,29 (1 H, s), 9,09 (1 H, d), 8,81 (1 H, d), 8,81 (1 H, d), 8,25 až 8,21 (1 H, t), 7,82 až 7,80 (2 H, d), 7,59 až 7,46 (5 H, m), 7,28 až 7,24 (2 H, t), 7,04 až 7,00 (1 H, t), 5,62 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 411,412,413 a 414.

Příklad 10 l-(2-Fenylamino—2—oxoethyl)-3—((4—methylfenyl)sulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina 9)

Výtěžek 48 % hmotn. T.t. 205 až 206 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1712, 1681 a 1632. 'H NMR spektrum (DMSO-A, 400 MHz, δ): 11,35 (1 H, s), 10,86 (1 H, s), 10,36 (1 H, s), 9,38 (1 H, s), 9,17 (1 H, d), 8,90 (1 H, d), 8,34 až 8,30 (1 H, m), 7,78 až (2 H, d), 7,59 (2 H, d), 7,37 až 7,33

- 18CZ 303214 Bó (4 H, rn), 7,11 (1 H, t), 5,70 (2 H, s), 2,36 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 425, 426, 427 a 428.

Příklad 11 l-^2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-(2-(benzoyloxy)ethylkarbonyl)pyridiniumbromÍd (sloučenina 10)

Výtěžek 35 % hmotn. T.t. 132 až 134 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1730, 1705 a 1690. ‘H NMR io spektrum (DMSCXcU, 400 MHz, δ): 9,80 (1 H, s), 9,36 (1 H, d), 9,30 (1 H, d), 8,58 (1 H, t), 8,21 (2 H, d), 8,12 (2 H, d), 7,95 (1 H, t), 7,85 až 7,80 (3 H, m), 7,68 (2 H, t), 6,71 (2 H, s), 4,95 až

4,93 (2 H, m), 4,82 až 4,80 (2 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z 390, 391 a 392.

Příklad 12 ]-(2-thien-2’-yl-oxoethyJ)-3-(fenylkarbonylhydrazinokarbonyl)pyridÍnÍumbromid (sloučenina 11)

Výtěžek 45 % hmotn. T.t. 80 až 81 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1700, 1663 a 1631. 'H NMR spektrum (DMSO-d,, 400 MHz, δ): 11,49 (1 H, s), 10,95 (1 H, s), 9,67 (1 H, s), 9,34 (1 H, d), 9,27 (1 H, d), 8,52 až 8,48 (1 H, m), 8,29 až 8,28 (2 H, m), 8,00 (2 H, d), 7,68 (1 H, t), 7,59 (2 H, t), 7,46 (1 H, t), 6,63 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 366, 367,368 a 369,

Příklad 13 l-(2-Ethoxy-2-oxoethyl)-3-((fenylmethyl)sulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 12)

Výtěžek 50 % hmotn. T.t. 147 až 148 °C. IČ spektrum (KBr, cm^-1): 1749, 1698 a 1640. 'H NMR spektrum (DMSCM* 400 MHz, δ): 11,57 (1 H, s), 10,21 (1 H, s), 9,75 (1 H, s), 9,38 (1 H, d),

9,24 (1 H, d), 8,59 až 8,56 (1 H, m), 7,67 až 7,65 (2 H, m), 7,58 až 7,52 (3 H, m), 5,90 (2 H, s), 4,68 (2 H, s), 4,45 až 4,39 (2 H, q), 1,43 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 377, 378 a 379.

Příklad 14

I-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-((fenylmethyl)sulfonylhydrazinokarbonyI)pyridiniumbromid (sloučenina 13)

Výtěžek 80% hmotn. T.t. 205 až 207 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 1687 a 1637.'HNMR spektrum (DMSO-Λ, 400 MHz, δ): 11,59 (1 H, s), 10,20 (1 H, s), 9,71 (1 H, s), 9,33 (1 H, d), 9,27 (1 H, d), 8,62 až 8,59 (1 H, m), 8,25 až 8,23 (2 H, d), 7,99 až 7,95 (1 H, t), 7,86 až 7,82 (2 H, t), 7,67 až 7,65 (2 H, m), 7,57 až 7,52 (3 H, m), 6,72 (2 H, s), 4,69 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 410,411,412 a 413.

Příklad 15

W’-Di[3-karbonyl-l-(2-furan-2’-yl-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dibromid (sloučenina č, 14)

Výtěžek 23% hmotn. T.t. 267 až 269 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm¹): 1687 a 1660. 55 ’H NMR spektrum (DMSO-Λ, 400 MHz, δ): 11,65 (1 H, s), 9,56 (2 H, s), 9,21 až 9,15 (4 H, m), “T9CZ 303214 B6

8,48 až 8,44 (2 H, t), 8,23 (2 H, s), 7,74 až 7,73 (2 H, d), 6,91 až 6,90 (2 H, d), 6,34 (4 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 459, 460 a 461.

Příklad 16 iV,W’-di[3-karbonyl-l-(2_thien-2’-yl-2_oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dichlorid (sloučenina č. 15) io Výtěžek 35 % hmotn. T.t. 275 až 277 °C, IČ spektrum (KBr, cm’¹): 3374, 1665, 1632 a 1410. 'H NMR spektrum (DMSO-dó, 400 MHz, δ): 11,88 (2 H, s), 9,66 (2 H, s), 9,29 až 9,24 (4 H, m),

8,48 až 8,44 (2 H, m), 8,25 až 8,23 (4 H, m), 7,43 až 7,41 (2 H, m), 6,53 (4 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 491, 492, 493 a 494.

Příklad 17

-(2-thien-2’-yl-2-oxoethy 1)-3-((2-( 1 -oxo-3-cyklohexy l)propy l)hydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 16)

Výtěžek:15% hmotn. T.t. 217 až 2I9°C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm¹): 3190, 1708, 1667 a 1404. 'H NMR spektrum (DMSO-d«, 400 MHz, δ): 11,07 (1 H, s), 10,22 (1 H, s), 9,16 až 9,15 (1 H, d), 9,06 až 9,04 (1 H, d), 8,42 až 8,40 (1 H, m), 8,25 až 8,21 (2 H, m), 7,43 až 7,40 (I H, m), 6,44 (2 H, s), 2,25 až 2,22 (2 H, t), 1,72 až 1,60 (5 H, m), 1,49 až 1,43 (2 H, q), 1,24 až 1,10 (4 H, m), 0,9 až 0,85 (2 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z 400, 401,402 a 403.

Příklad 18

1 -(2-Fenylamino-2-oxoethyl)-3-({2-( l-oxo-3-cyklohexyl)propyl} hydrazinokarbonyl)pyridin i umbromid (sloučenina č. 17)

Výtěžek 25 % hmotn. T.t. 234 až 236 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm’¹): 1689, 1652 a 1625. 'H NMR spektrum (DMSO-cU, 400 MHz, δ): 11,11 (1 H, s), 10,95 (1 H, s), 10,23 (1 H, s), 9,56 (1 H, s), 9,23 až 9,21 (1 H, d), 9,06 až 9,04 (1 H, d), 8,38 až 8,35 (1 H, m), 7,62 až 7,60 (2 H, d),

7,37 až 7,33 (2 H, t), 7,12 až 7,09 (1 H, t), 5,75 (2 H, s), 2,25 až 2,22 (2 H, t), 1,72 až 1,60 (5 H, m), 1,49 až 1,43 (2 H, m), 1,25 až 1,10 (4 H, m), 0,91 až 0,83 (2 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z 409,410,411 a 412.

Příklad 19

M2-thien-2’-yI-2-oxoethyl)-3-[2-{t>enzoyloxy)ethylaminokarbonyl]pyridiniumbromid (sloučenina č. 18)

Výtěžek 40 % hmotn. T.t. 125 až 127 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1710 a 1675. ¹H NMR spektrum (DMSO-d*, 400 MHz, δ): 9,48 (1 H, s), 9,43 až 9,41 (1 H, t), 9,12 až 9,11 (1 H, d), 9,05 až 9,02 (1 H, d), 8,40 až 8,36 (1 H, m), 8,25 až 8,20 (2 H, m), 8,00 až 7,98 (2 H, m), 7,68 až 7,64 (1 H, m), 7,54 až 7,50 (2 H, m), 7,42 až 7,40 (1 H, m), 6,43 (2 H, s), 4,46 až 4,43 (2 H, t), 3,77 až

3,73 (2 H, q). Hmotnostní spektrum: m/z 395, 396,397 a 398.

-20CZ 303214 B6

Příklad 20

-(4-Ethoxy-2,4-dioxobuty l)-3-(2-benzoy loxy)ethylaminokarbonyl)pyrid iniumchlorid 5 (sloučenina č. 19)

Výtěžek 35 % hmotn. T.t. 147 až 149 °C. IČ spektrum (KBr, cm'): 1743, 1720, 1680 a 1627.

'H NMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, 5): 9,62 až 9,59 (1 H, t), 9,32 až 9,29 (1 H, s), 9,05 až

9,03 (I H, d), 8,93 až 8,90 (1 H, d), 8,27 až 8,24 (1 H, m), 7,92 až 7,89 (2 H, d), 7,59 až 7,55 io (1 H, m), 7,45 až 7,41 (2 H, m), 5,82 (2 H, s), 4,37 až 4,34 (2 H, t), 4,08 až 4,03 (2 H, q), 3,80 (2 H, s), 3,67 až 3,63 (2H,q), 1,15 až 1,11 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 399,400 a 401.

Příklad 21 15 (l-(2\4’-Dichlorfenyl-2-oxoethyl)“3-(2-methoxyethylaminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 20)

Výtěžek 70 % hmotn. T.t. 93 až 95 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 1704, 1664 a 1636. 'HNMR 20 spektrum (DMSO-d^, 400 MHz, δ): 9,48 (1 H, s), 9,29 (1 H, široký s), 9,11 až 9,08 (2 H, m),

8,41 až 8,38 (1 H, m), 8,15 až 8,13 (1 H, d), 7,92 až 7,91 (1 H, t), 7,78 až 7,75 (1 H, m), 6,44 (2 H, s), 3,52 (2 H, široký s), 3,51 (2 H,široký s), 3,28 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 367, 368, 369 a 370.

Příklad 22

N, N -Di [3-karbonyl- l-(2-cyklopropylamino_2-Oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dichlorid (sloučenina Č. 21)

Výtěžek 40 % hmotn. T,t. 228 až 230 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 1675, 1636 a 1298. 'HNMR spektrum (DMSO-tU 400 MHz, δ): 11,85 (2 H, s), 9,59.(2 H, s), 9,25 až'9,19 (4 H, m), 9,00 až 8,99 (2 H, m), 5,53 (4 H, s), 2,73 až 2,66 (2 H, m), 0,78 až 0,62 (4 H, m), 0,53 až 0,49 (4 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z 437,438 a 439.

Příklad 23 l-(2-Cyklopropylaniino-2-oxoethyl}-3-(2-methoxyethylaminokarbonyl)pyrÍdiniumchlorid 40 (sloučenina č. 22)

Výtěžek 10% hmotn. T.t. 122 až 124 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1661, 1633, 1549 a 1121. ^lH NMR spektrum (DMSO-dé, 400 MHz, δ): 9,40 (I H, s), 9,08 až 9,02 (2 H, m), 8,28 až 8,25 (1 H, m), 5,53 (2 H, s), 3,66 až 3,61 (4 H, m), 3,39 (3 H, s), 2,78 až 2,74 (1 H, m), 0,80 až 0,75 (2 H, m), 0,64 až 0,61 (2 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z 278, 279 a 280.

Příklad 24

AXV-Di[3-karbonyl-l-(2-isopropylamino-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dichlorid (sloučenina č. 23)

Výtěžek 35 % hmotn. T.t. 114 až 116 °C (rozkk). IČ spektrum (KBr, cm '): 1707, 1668 a 1637. 'H NMR spektrum (DMSO-Λ, 400 MHz, δ): 11,84 (2 H, s), 9,59 (2 H, s), 9,21 až 9,18 (4 H, m),

- ZT CZ 303214 B6

8,74 až 8,72 (2 H, d), 8,39 až 8,35 (2 H, m), 5,53 (4 H, s), 3,92 až 3,84 (2 H, m), 1,14 až 1,02 (12 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 441,442 a 443.

Příklad 25

-(2-th ien-2 ’-y l-2-oxoethy I)—3—(2—<2—ch Ior-3-pyridoy Ihydrazinokarbony l)pyrid iniumchlorid (sloučenina č. 24)

Výtěžek 56% hmotn. T.t. 233 až 235 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1680, 1637, 1404 a 1293. ίο 'H NMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 11,62 (1 H, s), 11,05 (1 H, s), 9,62 (1 H, s), 9,24 až

9,23 (1 H, d), 9,18 až 9,16 (1 H, d), 8,58 až 8,56 (1 H, m), 8,46 až 8,43 (1 H, m), 8,26 až 8,24 (2 H, m), 8,02 až 8,00 (1 H, m), 7,61 až 7,58 (1 H, m), 7,43 až 7,41 (1 H, m), 6,51 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 401, 402,403,404 a 405.

Příklad 26

I-(2-lsopropylamino-2-oxoethyl)-3-(2-methylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 25)

Výtěžek 10% hmotn. T.t. 227 až 229 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1691, 1670, 1566 a 1330. 'HNMR spektrum (DMSO-d«, 400 MHz, δ): 11,55 (1 H, s), 9,94 (1 H, s), 9,52 (1 H, s), 9,16 až

9,14 (1 H, m), 9,09 až 9,07 (1 H, m), 8,72 až 8,70 (1 H, m), 8,34 až 8,30 (1 H, m), 5,50 (2 H, s), 3,89 až 3,84 (1 H, m), 3,11 (3 H, s), 1,13 až 1,12 (6 H, d). Hmotnostní spektrum: m/z 315,

316 a317.

Přiklad 27

1-(2-( l-Pyrrolidinyl)-2-oxoethyl)-3-(methansulfbnylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 26)

Výtěžek 21,00% hmotn. T.t. 205 až 207 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1699, 1646 a 1589. Ή NMR spektrum (DMSO-cU, 400 MHz, δ): 11,50 (1 H, s), 9,94 (1 H, s), 9,46 (1 H, s), 9,11 až

9,06 (2 H, m), 8,36 až 8,33 (1 H, t), 5,75 (2 H, s), 3,55 až 3,48 (3 H, m), 3,10 (3 H, s), 2,00 až

1,95 (2 H, m), 1,87 až 1,81 (2 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z 327, 328, 329 a 330.

Příklad 28

-(2-th ien-2 ’-y l-2-oxoethy l)-3-(methansuIfony lhy drazí nokarbonyl)pyridin i umchlorid (sloučenina č. 27)

Výtěžek 31,00% hmotn. T.t. 215 až 217°C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1685, 1666 a 1635. 45 'H NMR spektrum (DMSO-d«, 400 MHz, δ): 11,49 (1 H, s), 9,96 (1 H, s), 9,55 (1 H, s), 9,18 (1 H, d), 9,10 (1 H, d), 9,10 (I H, d), 8,43 až 8,39 (1 H, t), 8,25 až 8,22 (2 H, m), 7,42 (I H, t),

6,47 (2 H, s), 3,09 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 340, 341, 342 a 343.

Příklad 29

V,,V’-Di[3-karbonyl-l-(2-hydroxy-2-oxoethyl)pyrÍdinium]hydrazin-dichlorid (sloučenina ě. 28)

-22CZ 303214 B6

Výtěžek 43,00% hmotn. T.t 235 až 240 °C (rozkl). IČ spektrum (KBr, cm '): 1743, 1700 a 1672. 'H NMR spektrum (DMSOX, 400 MHz, δ): 11,89 (2 H, s), 9,69 (2 H, s), 9,31 až 9,29 (2 H, d), 9,25 až 9,23 (2 H, d), 8,43 až 8,39 (2 H, t), 5,70 (4 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 360, 361 a 362.

Příklad 30 lY2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3“((2-methoxyethyl)aminokarbonyl)-5-brompyridiniumchlorid io (sloučenina č. 29)

Výtěžek 31,00% hmotn. T.t. 180 až 182 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 1661 a 1620. 'HNMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 9,58 až 9,54 (2 H, d), 9,43 až 9,39 (2 H, d), 8,25 až 8,21 (2 H, m), 7,41 (1 H, t), 6,43 (2 H, s), 3,51 (4 H, m), 3,29 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 384,

385, 386, 387 a 388.

Příklad 31 l-(2-4hien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-[(2-methoxykarbonylpyridin-5-karbonyl)hydrazinokarbonyl]pyridiniumchlorid (sloučenina č. 30)

Výtěžek 30,00% hmotn. T.t 222 až 225 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1726, 1708 a 1662. *H NMR spektrum (DMSO-Y, 400 MHz, δ): 11,47 (1 H, s), 11,23 (1 H, s), 9,58 (1 H, s), 9,22 až

9,15 (3 H, m), 8,56 až 8,53 (1 H, d), 8,46 až 8,43 (1 H, t), 8,25 až 8,21 (3 H, m), 7,42 (1 H, t),

6,49 (2 H, s), 3,95 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 425,426 a 427.

Příklad 32 l-[l-(2-Thien-2’-yl-2-oxoethyl)-6-methyl-3-karbonylpyridinium]-2-[l-(2-thien-2^,-yl-2oxoethyl)-3-karbonylpyřidÍiřium]hydrazin-dichlorid (sloučenina č. 31) *

Výtěžek 40 % hmotn. T.t. 76 až 80 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm“¹): 1637 a 1513. ‘H NMR 35 spektrum (DMSO-Y, 400 MHz, δ): 11,69 (2 H, s), 9,59 až 9,53 (2 H, d), 9,19 (2 H, m), 9,05 (1 H, d), 8,46 až 8,43 (1 H, t), 8,34 (1 H, d), 8,27 až 8,23 (4 H, m), 7,45 az 7,41 (2 H, m), 6,56 (2 H, s), 6,48 (2 H, s), 2,81 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 505, 506 a 507.

Příklad 33 l-(2-Thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-{isopropylsuÍfonylhydrazÍnokarbonyÍ)pyridiniumbromid (sloučenina č. 32)

Výtěžek 70 % hmotn. T.t. 90 až 95 °C (rozkl). IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1638 a 1589. ‘H NMR spektrum (DMSO-dé, 400 MHz, δ): 11,27 (1 H, s), 9,91 (1 H, s), 9,60 (1 H, s), 9,19 až 9,15 (2 H, m), 8,42 až 8,36 (1 H, m), 8,25 až 8,21 (2 H, m), 7,43 až 7,41 (1 H, t), 6,45 (2 H, s), 1,35 až 1,34 (6 H, d). Hmotnostní spektrum: m/z 368, 369 a 370.

Příklad 34 l-(2-(4-Benzylpiperidin-l-yl)-2-oxoethyl)-3-{methansulfbnylhydrazinokarbonyl)pyridinium chlorid (sloučenina č. 33) ^23CZ 303214 B6

Výtěžek 17% hmotn. T.t. 76 až 78 °C. IČ spektrum (KBr, cm '): 1684, 1650, 1556 a 1540. 'H NMR spektrum (DMSO-d», 400 MHz, δ): 11,46 (I H, s), 9,55 (I H, s), 9,46 (1 H, s), 9,09 až 9,03 (2 H, m), 8,36 až 8,32 (I H, t), 7,33 až 7,29 (2 H, m), 7,23 až 7,19 (3 H, m), 5,88 až 5,79 (2 H, m), 4,30 až 4,27 (I H, d), 3,76 až 3,73 (1 H, d), 3,10 (4 H, m), 2,64 (1 H, t), 2,57 až 2,55 (2H, d), 1,85 (1 H, široký s), 1,72 až 1,63 (2 H, t), 1,36 až 1,28 (1 H, q), 1,13 Hmotnostní spektrum: m/z 431,432 a 433.

Příklad 35 io l-(2-(2-Ethoxykarbonylpyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)-3-(2-methansulfonylhydrazinokarbonyOpyridiniumchlorid (sloučenina č. 34)

Výtěžek 14% hmotn. T.t. 88 až 91 °C. 1Č spektrum (KBr, cm'): 1735, 1665 a 1539. 'HNMR 15 spektrum (DMSO-d», 400 MHz, δ): 11,48(1 H,s),9,96(1 H,s), 9,46(1 H, s), 9,09 až 9,05 (2 H, m), 8,38 až 8,34 (1 H, t), 5,94 až 5,80 (2 H, q), 4,37 až 4,36 (1 H, d), 4,08 až 4,06 (2 H, d), 3,68 až 3,65 (2 H, m), 3,09 (4 H, m), 2,23 až 2,18 (2 H, m), 2,04 až 1,93 (3 H, m), 1,18 až 1,09 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 399,400 a 401.

Příklad 36

1-(2-Thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)-5-brompyridiniumbromid (sloučenina č. 35)

Výtěžek 54% hmotn. T.t. nad 190 až 195 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm^-1): 1682, 1557, 1540 a 1520. ^]H NMR spektrum (DMS04» 400 MHz, δ): 11,35(1 H, s), 10,01 (1 H, s), 9,57 až 9,54 (2 H, d), 9,32 (1 H, s), 8,26 až 8,22 (2 H, m), 7,42 (1 H, s), 6,39 (2 H, s), 3,08 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 418, 419 a 420.

Příklad 37 l~(2-Thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(ethoxykarbonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid) (sloučenina č. 36)

Výtěžek 69 % hmotn. T.t. 155 až 157 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1731, 1665 a 1637. ^]H NMR spektrum (DMSO-d₆,400 MHz, δ): 11,04 (1 H, s), 9,59 (1 H, s), 9,53 (1 H, d), 9,18 (1 H, s), 9,05 až 9,04 (1 H, d), 8,42 (1 H, s), 8,25 až 8,23 (2 H, m), 7,43 (1 H, s), 6,46 (2 H, s), 4,12 až 4,11 (2 H, s), 1,23 (3 H, s), 1,23 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 334, 335 a 336.

Příklad 38 l-(2-(5-Chlorthien-2-yl)-2-ox0ethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučeninač. 37)

Výtěžek 87% hmotn. T.t. 228 až 230 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1708, 1664, 1631 a 1550, 'HNMR spektrum (DMSO-d», 400 MHz, δ): 11,40 (1 H, s), 9,98 (I H, s), 9,50 (1 H, s), 9,15 (I H, d), 9,06 (1 H, d), 8,43 až 8,39 (1 H, t), 8,16 až 8,15 (1 H, d), 7,51 až 7,50 (I H, d), 6,41 (2 H, s), 3,09 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 374, 375, 376 a 377.

-24CZ 303214 B6

Příklad 39 jV,/V’-di[3-karbonyI-l-(2-(4-nitrothien-2-yl)-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dichlorid 5 (sloučenina č. 38)

Výtěžek 27 % hmotn. T.t. 204 až 207 °C. IČ spektrum (KBr, cm^-1): 1681, 1539 a 1514. 'HNMR spektrum (DMSO-dí, 400 MHz, δ): 11,90 (2 H, s), 9,63 (2 H, s), 9,31 až 9,30 (4 H, m), 9,24 až 9,22 (2 H, m), 8,87 (2 H, s), 8,49 až 8,46 (2 H, t), 6,56 (4 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 581, io 582 a 583.

Příklad 40

1 -(2-Thien-2’-yl-2-oxoethy 1)-3-( methan sul fonylhydrazinokarbony l)-6-methylpyridiniumbromid (sloučenina č. 39)

Výtěžek 14 % hmotn. T.t. 90 až 95 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1677 a 1575. *H NMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 11,32 (1 H, s), 9,97 (1 H, s), 9,52 (1 H, s), 8,94 až 8,92 (1 H,

d), 8,32 až 8,24 (3 H, m), 7,44 (1 H, t), 6,54 (2 H, s), 3,08 (3 H, s), 2,79 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 354, 355 a 356.

Příklad 41 ,V,V’-Dí[3-karbonyl-l-(2-(5-methylthien-2-yl)-2-oxoethyl)pyridiniumJhydrazin-dichlorid (sloučenina č. 40)

Výtěžek 37 % hmotn. T.t. nad 166 až 168 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm“¹): 1666 a 1500. 30 ’H NMR spektrum (DMSO-A, 400 MHz, δ): 11,73 (2 H, s), 9,59 (2 H, s), 9,19 až 9,15 (4 H, d),

8,45 až 8,42 (2 H, t), 8,06 až 8,05 (2 H, d), 7,15 až 7,14 (2 H, d), 6,43 (4 H, s), 2,59 (6 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 519, 520, 521 a 522.

Příklad 42

V,jV-Di[3-karbonyl-l-(2-(2-ethoxykarbonylpyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dichlorid (sloučenina č. 41)

Výtěžek 28% hmotn. T.t. 118 až 120°C. IČ spektrum (KBr, cm“¹): 1660 a 1510.^lHNMR spektrum (DMSO-dé, 400 MHz, δ): : 11,75 (2 H, s), 9,51 (2 H, s), 9,20 až 9,10 (4 H, m), 8,43 až 8,40 (2 H, t), 5,97 až 5,83 (4 H, m), 4,39 až 4,36 (2 H, m), 4,27 až 4,22 (1 H, q), 4,12 až 4,05 (4 H, m), 3,71 až 3,63 (4 H, m), 3,48 až 3,40 (1 H, m), 2,26 až 2,19 (2 H, m), 2,05 až 1,91 (5 H, m), 1,30 až 1,27 (1 H, t), 1,19 až 1,15 (5 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 609, 610 a 611.

Příklad 43 l-[ 1 -(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-5-aminokarbony l-3-karbonylpyridinium]-2-[ 1 -<2-thien-2’50 yl-2-oxoethyl)-3-karbonylpyridinxum]hydrazin-dichlorid (sloučenina Č. 42)

Výtěžek 54 % hmotn. T.t. nad 127 až 129 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm“¹): 1678 a 1513. 'H NMR spektrum (DMSO-A 400 MHz, δ): 11,86 (2 H, s), 9,83 až 9,64 (4 H, t), 9,24 až 9,23 (2 H, s), 8,82 (1 H, s), 8,48 až 8,45 (1 H, t), 8,34 (1 H, s), 8,26 až 8,24 (4 H, m), 7,44 až 7,42 (2 H, d), 6,52 až 6,46 (4 H, d). Hmotnostní spektrum: m/z 534, 535 a 536.

”25 CZ 303214 B6

Příklad 44 l-(2-(4-Karbethoxythiazolidin-3-yl)-2-oxoethyl)-3-(2-methansulfonyIhydrazinokarbonyI)5 pyridiniumchlorid (sloučenina č. 43)

Výtěžek 29% hmotn. T.t. 190 až 192 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹); 1673 a 1541.'H NMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 11,50 (1 H, s), 9,55 (1 H, s), 9,48 (1 H, s), 9,12 až 9,08 (2 H, m), 8,39 až 8,34 (I H, t), 6,04 až 5,99 (2 H, m), 4,94 až 4,91 (1 H, m), 4,87 až 4,84 (1 H, d), 4,73 io až 4,71 (1 H, d), 4,28 až 4,23 (1 H, q), 4,14 až 4,09 (1 H, q), 3,43 až 3,38 (1 H, m), 3,27 až 3,22 (I H, m), 3,10 (3 H, s), 1,30 až 1,27 (1 H, t), 1,20 až 1,17 (2 H, m). Hmotnostní spektrum: m/z

439, 440 a 441.

Příklad 45

N, N -Di [3-karbony I-1 -(2-(5-chlorthien-2-y l)-2-oxoethy l)pyridin i um] hydrazin-d ich lorid (sloučenina Č. 44)

Výtěžek 35% hmotn. T.t. nad 200 až 295 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1674, 1590 a 1500. 'H NMR spektrum (DMSO-d,, 400 MHz, δ): 11,90 (2 H, s), 9,64 až 9,61 (2 H, d), 9,29 až 9,20 (4 H, m), «,47 až 8,44 (2 H, t), 8,18 až 8,17 (2 H, d), 7,51 až 7,50 (2 H, d), 6,49 až 6,48 (4 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 559, 560, 561, 562, 563 a 564.

Příklad 46

1-(2-( 5—Methy lthien-2-y l)-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 45)

Výtěžek 22% hmotn. T.t. 196 až 198 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 1689 a 1657. 'HNMR spektrum (DMSO-d₆,400 MHz, δ): 11,47 (1 H, s), 9,98 (1 H, s), 9,53 (1 H, d), 9,17 až 9,16 (1 H,

d), 9,09 až 9,07 (1 H, d), 8,42 až 8,38 (1 H, t), 8,06 až 8,05 (1 H, d), 7,15 až 7,14 (1 H, d), 6,41 (2 H, s), 3,09 (3 H, s), 2,59 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 354, 355, 356 a 357.

Příklad 47

1--(2-( 4-Nitrothien-2-yl)-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 46)

Výtěžek 52% hmotn. T.t. nad 200 až 205 °C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm“¹): 1688, 1631 a 1541.'HNMRspektrum (DMSO-d,,400MHz,δ): 11,41 (1 H, s),9,50(1 H, s),9,309 až9,306 (1 H, d), 9,17 až 9,15 (1 H, d), 9,09 až 9,07 (1 H, d), 8,866 až 8,862 (1 H, d), 8,45 až 8,41 (1 H, t), 6,50 (2 H, s), 3,09 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 385, 386 a 387.

Příklad 48

1 -(2-Fenylamino-2-oxoethyl)-3-(fenylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 47)

Výtěžek 45 % hmotn. T.t. 165 až 167 °C. IČ spektrum (KBr, cm“¹). 1679, 1626, 1600 a 1497. ‘HNMRspektrum (DMSOA, 400 MHz, δ): 11,18 (1 H, s), 11,10 (1 H, s), 9,62 (1 H, s), 9,24 až 9,22(1 H, d), 9,17 až 9,15 (1 H, d), 8,40 až 8,36(1 H, t), 8,19(1 H, s), 7,63 až 7,61 (2 H, d), 7,37

-26CZ 303214 B6 až 7,33 (2 H, t), 7,20 až 7,16 (2 H, t), 7,12 až 7,09 (1 H, t), 6,88 až 6,86 (2 H, d), 6,78 až 6,74 (1 H, t), 5,78 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 347, 348 a 349.

Příklad 49 l-(2-Fenylannno-2-oxoethyl)~4-[2-(benzoyloxy)ethylaminokarbonyl]pyridiniumchlorid (sloučenina č, 48)

Výtěžek 40 % hmotn. T.t. 178 až 180 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1700, 1666 a 1559. ‘H NMR io spektrum (DMSO-A, 400 MHz, δ): 11,13 (1 H, s), 9,74 až 9,71 (1 H, t), 9,23 až 9,22 (2 H, d),

8,52 až 8,50 (2 H, d), 8,01 až 7,99 (2 H, d), 7,68 až 7,60 (3 H, m), 7,54 až 7,51 (2 H, t), 7,36 až 7,32 (2 H, t), 7,12 až 7,08 (1 H, t), 5,75 (2 H, s) 4,47 až 4,45 (2 H, t), 3,77 až 3,72 (2 H, q). Hmotnostní spektrum: m/z 404, 405 a 406.

Příklad 50 l-(2-(5-NÍtrothien-2-yl)-2-oxoethyI)“3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 49) ²⁰

Výtěžek 10% hmotn. T.t. nad 105 až 110°C (rozkl.). IČ spektrum (KBr, cm¹): 1680 a 1620. 'HNMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 11,48 (1 H, s), 9,98 (1 H, s), 9,52 (1 H, s), 9,16 až

9,10 (2 H, m), 8,45 až 8,41 (1 H, t), 8,35 až 8,34 (1 H, d), 8,25 až 8,24 (1 H, d), 6,50 (2 H, s), 3,09 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 385, 386 a 387.

Příklad 51 l-(2-Thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(trifluormethansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid 30 (sloučenina č. 50)

Výtěžek 22 % hmotn. T.t. 77 až 79 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 2960, 1690, 1673 a 1591. 'H NMR spektrum (DMSO-dé, 400 MHz, δ): 11,76 (1 H, s), 11,27 (1 H, s), 9,61 (1 H, s), 9,20 až

9,19 (1 H, d), 9,07 až 9,05 (1 H, d), 8,44 až 8,41 (1 H, t), 8,25 až 8,22 (2 H, m), 7,34 až 7,41 (1 H, m), 6,46 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 394, 395 a 396.

Příklad 52

1 -{2-Thien-2’-yl2-oxoethyl)-3-(fenylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 51)

Výtěžek 10 % hmotn. T.t. 192 až 194 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 1669, 1663 a 1603. *HNMR spektrum (DMSO-d^, 400 MHz, δ): 10,99 (I H, s), 9,54 (1 H, s), 9,17 až 9,14 (2 H, t), 8,44 až

8,41 (1 H, t), 8,25 až 8,22 (2 H, m), 7,43 až 7,41 (1 H, t), 7,20 až 7,16 (2 H, t), 6,87 až 6,85 (2 H,

d), 6,79 až 6,75 (1 H, t), 6,46 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 338, 339 a 340.

Příklad 53

I -(2-Thien_2 ’-yl-2-oxoethy l)-3-(p-methoxyfeny Isulfonylhydrazinokarbony I)py ridini umbromid (sloučenina č. 52)

Výtěžek 28 % hmotn. T.t. 126 až 128 °C. IČ spektrum (KBr, cín'): 1672, 1653 a 1596. 'H NMR spektrum (DMSO-tU 400 MHz, δ): 11,34 až 11,33 (1 H, d), 10,27 až 10,26 (1 H, d) 9,34 (1 H,

s), 9,13 až 9,12 (1 H, d), 8,94 až 8,92 (1 H, d), 8,38 až 8,34 (1 H, t), 8,24 až 8,19 (2 H, m), 7,82

-27CZ 303214 B6 až 7,75 (2 H, m), 7,42 až 7,40 (1 H, t), 7,07 až 7,04 (2 H, d), 6,40 (2 H, s), 3,81 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 432,433 a 434.

Příklad 54

1-(2-Ethoxy-2-oxoethyl)-3-{fenylaminokarbonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 53)

Výtěžek 25 % hmotn. T.t. 183 až 185 °C. IČ spektrum (KBr, cm^-1): 1746, 1717 a 1682. 'H NMR spektrum (DMSCM₆, 400 MHz, δ): 11,02 (1 H, s), 9,57 (1 H, s), 9,22 až 9,21 (1 H, d), 9,11 až

9,09 (1 H, d), 9,00 (1 H, s), 8,57 (1 H, s), 8,44 až 8,41 (1 H, m), 7,47 až 7,45 (2 H, d), 7,29 až

7,25 (2 H, t), 7,00 až 6,96 (1 H, t), 5, 74 (2 H, s), 4,28 až 4,23 (2 H, q), 1,28 až 1,25 (3 H, t).

Hmotnostní spektrum: m/z 344,344, 345 a 346.

Příklad 55

1-(2-Ethoxy-2-oxoethyl}-3-(p-toluensulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid 20 (sloučenina č. 54)

Výtěžek 54 % hmotn. T.t. 174 až 176 °C. IČ spektrum (KBr, cm '): 1746, 1712 a 1634. 'H NMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 11,33 (1 H, s), 10,36 (1 H, s), 9,37 (1 H, s), 9,18 až 9,16 (1 H, d), 8,93 až 8,91 (1 H, d), 8,37 až 8,33 (I H, t), 7,78 až 7,76 (2 H, d), 7,37 až 7,35 (2 H, d),

5,68 (2 H, s), 4,26 až 4,20 (2 H, q), 2,37 (3 H, s), 1,27 až 1,23 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z

378, 379,380 až 381.

Příklad 56 l-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-(fenylaminokarbonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 55)

Výtěžek 70 % hmotn. T.t. 206 až 208 °C. IČ spektrum (KBr, cm^-1): 1713, 1684 a 1634. *H NMR 35 spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 11,05 (1 H, s), 9,55 (1 H, s), 9,18 až 9,13 (2 H, m), 9,02 (1 H, s), 8,59 (1 H, s), 8,49 až 8,45 (1 H, m), 8,09 až 8,07 (2 H, d), 7,84 až 7,80 (1 H, t), 7,71 až 7,67 (2 H, t), 7,49 až 7,47 (2 H, d), 7,30 až 7,26 (2 H, t), 7,01 až 6,97 (1 H, t), 6,56 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 375, 376 a 377.

Příklad 57

M2-Fenylamino-2-oxoethyI)-3-(benzylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchlorid (sloučenina č. 56)

Výtěžek 48 % hmotn. T.t. 208 až 210 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1712, 1681 a 1632. ^]H NMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 11,46 (1 H, s), 10,80 (1 H, s), 9,59 (1 H, s), 9,22 až 9,20 (1 H, d), 9,08 až 9,06 (1 H, d), 8,38 až 8,36 (1 H, t), 7,60 až 7,58 (2 H, d), 7,49 (2 H, m), 7,39 až

7,34 (5 H, m), 7,13 až 7,10 (1 H, t), 5,74 (2 H, s), 4,52 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 425,

426,427 a 428.

-28CZ 303214 B6

Příklad 58 l/2-Fenyl-2-oxoethyl)-4~(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid 5 (sloučenina č. 57)

Výtěžek 10 % hmotn. T.t. 190 až 192 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1679, 1630 a 1650. 'HNMR spektrum (DMSO-Λ, 400 MHz, δ): 11,54 (1 H, s), 10,03 (1 H, s), 9,20 až 9,18 (2 H, d), 8,59 až

8,57 (2 H, d), 8,10 až 8,08 (2 H, d), 7,84 až 7,80 (1 H, t), 7,71 až 7,67 (2 H, t), 6,56 (2 H, s), 3,08 io (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 334, 335 a 336.

Příklad 59 l-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-3-(fenylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina ě. 58)

Výtěžek 36 % hmotn. T.t. 204 až 206 °C. IČ spektrum (KBr, cm¹): 1686, 1653 a 1630. ‘H NMR spektrum (ΟΜ8ΟΛ, 400 MHz, δ): 11,01 (1 H, s), 9,53 (1 H, s), 9,17 až 9,16 (2 H, m), 8,46 až

8,42 (1 H, t), 8,09 až 8,07 (2 H, d), 7,82 až 7,78 (1 H, t), 7,69 až 7,65 (2 H, t), 7,20 až 7,16 (2 H,

t), 6,88 až 6,86 (2 H, d), 6,79 až 6,75 (1 H, t), 6,56 (2 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 332 a 333.

Příklad 60 l-(2-Ethoxy-2-oxoethyl)-4-[2-(benzoyloxy)ethylaminokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina ě. 59)

Výtěžek 82 % hmotn. T.t 154 až 156 °C. IČ spektrum (KBr, cm'¹): 1742, 1719, 1707 a 1675. 'H NMR spektrum (DMSO-Λ, 400 MHz, δ): 9,57 až 9,54 (1 H, t), 9,22 až 9,20 (2 H, d), 8,51 až

8,49 (2 H, d), 8,00 až 7,98 (2 H, d), 7,68 až 7,64 (1 H, t), 7,54 až 7,51 (2 H, t), 5,72 (2 H, s), 4,47 až 4,44 (2 H, t), 4,27 až 4,21 (2 H, q), 3,76 až 3,72 (2 H, q), 1,27 až 1,24 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 357, 358 a 359.

Příklad 61 l-{2-Ethoxy-2-oxoethyl)-(3-(fenylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 60)

Výtěžek 37% hmotn. T.t. 185 až 187 °C. IČ spektrum (KBr, cm’¹): 1740, 1690 a 1630. 'HNMR 40 spektrum (DMSO-Λ, 400 MHz, δ): 11,01 (1 H, s), 9,58 (1 H, s), 9,23 až 9,14 (2 H, m), 8,42 až

8,39 (I H, t), 8,19 (1 H, s), 7,20 až 7,16 (2 H, t), 6,87 až 6,85 (2 H, d), 6,78 až 6,75 (1 H, t), 5,75 (2 H, s), 4,28 až 4,22 (2 H, q), 1,28 až 1,24 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 300, 301 a 302.

Příklad 62 ]-(2-Fenyl—2-oxoethyl)-3-(p-methoxyfenylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 61)

Výtěžek 59 % hmotn. T.t. 188 až 190 °C. IČ spektrum (KBr, cm-'): 1671, 1634a 1580. 'HNMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, 8): 11,26 až 11,25 (1 H, d), 10,17 až 10,16 (1 H, d), 9,24 (1 H, s), 9,03 až 9,01 (1 H, d), 8,87 až 8,85 (1 H, d), 8,31 až 8,27 (1 H, t), 7,97 až 7,96 (2 H, d), 7,74 až 7,69 (3 H, m), 7,60 až 7,56 (2 H, t), 6,99 až 6,97 (2 H, d), 6,40 (2 H, s), 3,73 (3 H, s). Hmotnostní spektrum: m/z 426, 427,428 a 429.

-29 -CZ 303214 B6

Příklad 63 l-(2-Fenyl-2-oxoethyl)-4-[2-(benzoyloxy)ethylaminokarbonyl]pyriďiniumbromid 5 (sloučenina č. 62)

Výtěžek 92 % hmotn. T.t. 202 až 204 °C. IČ spektrum (KBr, cm '): 1715, 1692 a 1650. *H NMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 9,55 (1 H, s), 9,14 až 9,13 (2 H, d), 8,52 až 8,51 (2 H, d), 8,07 až 7,99 (4 H, m), 7,80 až 7,51 (6 H, m), 6,52 (2 H, s), 4,46 (2 H, s), 3,76 až 3,75 (2 H, s).

io Hmotnostní spektrum: m/z 389, 390, 391 a 392.

Příklad 64 l-(2-Ethoxy-2-oxoethyl)-4-{p-methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromid (sloučenina č. 63)

Výtěžek 45% hmotn. T.t. 94 až 96°C, IČ spektrum (KBr, cm¹): 1726, 1681 a 1643. 'HNMR spektrum (DMSO-d₆, 400 MHz, δ): 11,49 (1 H, s), 9,98 (1 H, s), 9,23 až 9,21 (2 H, d), 8,54 až

8,52 (2 H, d), 5,73 (2 H, s), 4,28 až 4,22 (2 H, q), 3,09 (3 H, s), 1,28 až 1,25 (3 H, t). Hmotnostní spektrum: m/z 302,303, 304 a 305.

Farmaceutické prostředky

Farmaceutické prostředky se mohou vyrábět s farmaceuticky účinným množstvím sloučenin obecného vzorce I, jednotlivě nebo v kombinaci. Následující navržené farmaceutické prostředky jsou uvedeny jenom jako příklady a v žádném případě neomezují formy, v nichž se mohou používat.

Orální přípravky

Orální přípravky mohou být podávány jako pevné dávkové formy, například jako pelety, prášky, sáčky nebo diskrétní jednotky, jako jsou tablety nebo tobolky, a podobně. Mezi další orálně podávané farmaceutické přípravky patří jednofázové a dvoufázové kapalné dávkové formy buď pro okamžité použití, nebo ve formách vhodných pro rekonstituování, jako jsou směsi, sirupy, suspenze nebo emulze. Přípravky mohou dále obsahovat ředidla, dispergační činidla, pufry, stabilizační činidla, rozpouštěcí činidla, povrchově aktivní činidla, ochranná činidla, chelatační činidla a/nebo jiné farmaceutické přísady podle toho, jak se používají. Může se použít vodné nebo nevodné ředidlo nebo jeho kombinace. Jestliže je to žádoucí, prostředky mohou obsahovat sladid40 lo, ochucovací činidlo nebo podobné látky. V případě suspenze nebo emulze může být přítomno také vhodné zahušťující činidlo, suspendační činidlo nebo emulgační činidlo. Tyto sloučeniny se mohou podávat také jako takové vjejich čisté formě neasociované sjinými přísadami, například jako tobolky nebo sáčky. Mohou se podávat také spolu s ředidlem. Farmaceutické přípravky mohou mít pomalé, zpožděné nebo regulované uvolňování účinných složek, což se dosáhne matricí nebo difúzním regulačním systémem.

Jestliže předložený vynález nebo jeho soli nebo vhodné komplexy jsou přítomny jako diskrétní jednotková dávková forma, jako je tableta, může dále obsahovat lékařsky inertní ředidla, jako jsou ta, která se používají v oblasti techniky. Používat se mohou také ředidla, jako je škrob, laktosa, hydrogenfosforečnan vápenatý, talek, stearát horečnatý, polymerní látky, jako je methylcelulóza, mastné kyseliny a jejich deriváty, sodná sůl glykolátu škrobu atd.

-30CZ 303214 B6

Příklad 65

Výroba orální lékové formy 5 Typická tableta má následující složení:

účinná složka obecného vzorce I laktosa škrob polyvinylpyrrolidon (K-30) talek stearát hořečnatý jak shora uvedeno 135 mg 76 mg 2 mg 1,5 mg 1,0 mg

Parenterální přípravky

Pro parenterální podávání jsou sloučeniny nebojejich soli nebojejich vhodné komplexy přítomio ny ve sterilním ředidle, které může znamenat vodné nebo nevodné ředidlo nebojejich kombinaci.

Příklady ředidel jsou voda, ethyloleát, oleje a deriváty polyolů, glykolů ajejich deriváty. Mohou obsahovat přísady obvyklé pro injektovatelné přípravky, jako jsou stabilizátory, solubilízátory, činidla upravující pH, pufry, antioxidační činidla, korozpouštědla, komplexující činidla, činidla upravující tonicitu atd.

Některými vhodnými přísadami jsou například vínanové, citrátové nebo podobné pufry, alkohol, chlorid sodný, dextrosa a polymery s vysokou molekulovou hmotností. Jinou alternativou je rekonstituce sterilního prášku. Sloučeniny se mohou podávat ve formě injekce při více než jednom podávání denně, jako intravenózní inťuze/kapačka nebo jako vhodný depotní přípravek.

Příklad 66

Přípravek vhodný pro parenterální podávání

Přípravek vhodný pro parenterální podávání má následující složení:

účinná složka obecného vzorce I polyethylenglykol (400) disinčitan sodný isotonický solný roztok/WFl * jak shora uvedeno 0,75 ml 0,01 % hmotn. q.s.

* WFI označuje vodu nutnou pro parenterální podání

Další přípravky

Pro dermatologickou aplikaci a pro odbarvování zubů jsou doporučenými přípravky lotiony, ústní voda a zubní pasta obsahující příslušné množství sloučenin obecného vzorce f.

•-31 CZ 303214 B6

Shora uvedené příklady jsou zde uvedeny jenom jako ilustrace a v žádném případě neomezují rozsah tohoto vynálezu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY io 1, Pyridiniová sloučenina, která je vybrána ze skupiny sestávající z následujících sloučenin:

a) /V,/V'-di[3-karbonyl-l-(2-thÍen-2^,-yl-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dÍchloridu,

b) W,A’-di[3-karbonyl-l-(2-cyklopropylamino-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dichloridu,

c) l-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-4-(fenylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchloridu a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

15 d) 1-(2-(2’,4’-dichlorfenyl)-2-oxoethyI)-3-(2-(methoxy)ethyloxykarbonyI)pyridjniumbromidu a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

e) l-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-<(benzoyloxy)ethylaminokarbonyl)pyridiniumchloridu a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

f) l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(fenylaminokarbonylhydrazinokarbonyl)pyridinium20 bromidu a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

g) 1 -(2-fenyI-2-oxoethyl}-3-(2-(acetoxy)ethy (aminokarbony l)pyridiniumbromidu a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

h) 1-(2-fenyIamino-2-oxoethyl)-3-(fenylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridinÍumchloridu a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

25 i) 1 ~(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-((4-methylfenyl)sulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchloridu a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

j) 1 -(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(2-(benzoy loxy )ethy loxy karbony I)pyridin i um brom idu a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

k) l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(fenylkarbonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu

30 a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

l) l-(2-cthoxy-2-oxoethy 1)-3-(( feny Imethy I)sulfony Ihydrazinokarbony l)pyridiniumbromidu a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

m) !-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-{(fenylmethyI)sulfonylhydrazinokarbonyI)pyridiniumbromidu a jeho farmaceuticky přijatelných solí,

35 n) jV,A’-di[3—kar bony 1-1-(2-furan-2’-y 1-2—oxoethy l)pyridinium] hydrazin—d ibromidu,

o) l-(2’,4’-dichlorfenyl-2-oxoethyl)-3-(2-methoxyethoxyethylaminokarbonyl)pyridÍniumbromidu,

p) l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-((2-methoxyethyl)aminokarbonyl)-5-brompyridiniumchloridu,

40 q) l -(2-thien-2’-y I-2-oxoethy 1)-3-( methan sulfony Ihydrazinokarbony l)pyridiniumchloridu,

r) l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(2-(2-chlor-3-pyridoylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchloridu,

s) l-{2-cykIopropylamino-2-oxoethyl)-3-(2-tnethoxyethylaminokarbonyl)pyridiniumchloridu,

45 t) l-(2-isopropylamino-2-oxoethyl)-3-(2-methylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchloridu,

u) 1 -(2-feny lam i no-2-oxoethy 1)-3-( {2-( l-oxo-3-cyklohexyl)-propyl} hydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu,

-32CZ 303214 B6

v) l-(2-thien-2'-yl-2-oxoethyl)-3-[2-(benzoyloxy)ethylaminokarbonyl]pyridiniumbromidu,

w) l-(4-ethoxy-2,4-dioxobutyl)-3-(2-(benzoyloxy)etliylaminokarbonyl)pyridiniumchloridu,

x) l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-[(2-methoxykarbonylpyridin-5-karbonyl)hydrazinokarbonyljpyridiniumchlorid,

5 y) 1 -[ l-(2-th ien-2’-y 1-2-oxoethyl)-5-aminokarbonyl-3-karbonyl pyridin ium]-2-[l -{2thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-karbonyIpyridinium]hydrazin-dichloridu,

z) 1 —(2—thíen—2’-yl-2-oxoethyl)-3-(trifluormethansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu, aa) t-[ 1-(2-thien-2’-y 1-2-oxoethyl)-6-methy 1-3-karbonyIpyridinium]-2-[l-(2-thien-2’-yΙιο 2-oxoethy l)-3-karbonylpyridinium] hydrazi n-d ichloridu, ab) jV,A^r’-di[3-karbonyl-l-(2-(5-methylthien-2-yl)-2-oxoethyl)pyrÍdínium]hydrazin-dichloridu, ac) jV.iV ’-di[3-karbonyI-1-(2-(5-chlorthien-2-yl)-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dichloridu,

15 ad) 1 -(2-th ien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(methansulfony lhydrazinokarbony l]-6-methy 1pyridiniumbromidu, ae) jV,N’-di[3-karbonyl-l-(2-(4-nitrothien-2-yl)-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazin-dichloridu, af) l-(2-fenylamino-2-oxoethyl)-3-(fenylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchloridu, ag) 1-(2-( 4-nitrothien-2-yl)-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridinium20 bromidu, ah) l-(2-(5-nitrothien-2-yl)-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchloridu, ai) 1-(2-( 5-chIorthien-2-yl)-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyI)pyridiniumbromidu,

25 aj) l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(ethoxykarbonylhydrazinokarbonyI)pyridiniumbromidu, ak) l-(2-thien-2’-yI-2-oxoethyl)-3-(isopropylsuIfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu, al) l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(methansulfonyIhydrazinokarbonyl>-5-brompyridiniumbromidu, am) 1 -(2-<2-ethoxykarbonylpyrrolidin-1 -yl)-2-oxoethyl)-3-(2-methansulfonylhydrazino30 karbony l)pyri din iumchloridu, an) 1-(2-( 5-methylthien-2-yl)-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchloridu, ao) 1 -(2-(4-karbethoxythiazolid in-3-yl)-2-oxoethyl)-3-(2-methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridin iumchloridu,

35 ap) l-(2-(4-benzylpiperidin-l-yl)-2-oxoethyl)-3-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchloridu, aq) yV,A^f’-di[3-karbonyl-l-(2-(2-ethoxykarbonylpyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)pyridinium]hydrazi n-dichloridu, ar) l-(2-feny lam ino-2-oxoethyl)-4-[2-benzoy loxy )ethy lam inokarbonyl] pyridin iumchloridu, 40 as) l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(fenylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu, at) l-(2-thien-2’-yl-2-oxoethyl)-3-(p-methoxyfenylsulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu, au) l-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-3-(fenylaminokarbonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu, av) l-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-3-(p-toluensulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu,

45 aw) l-(2-fenyl-2-oxoethyl)-3-(fenyIaminokarbonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu, ax) l-(2-fenylamino-2—oxoethyl)-3-(benzensulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumchloridu,

33 CZ 303214 B6 ay) l-(2-feny l-2-oxoethyl)D-(methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu, az) 1-(2-feny l-2-oxoethyl)-3-( feny lhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu, ba) l-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-4-[2-(benzoyloxy)ethylaminokarbonyl)pyridiniumbromidu, bb) l-(2-ethoxy-2-oxoethy 1)-3-(fenylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu,

5 bc) 1 -(2-feny l-2-oxoethy l)-3-(p-methoxyfenylsulfonylhydrazÍnokarbonyl)pyridiniumbromidu, bd) 1-(2-feny l-2-oxoethyl)-4-[2-(benzoyIoxy)ethylaminokarbonyl]pyridiniumbromidu a be) l-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-4-(A^methansulfonylhydrazinokarbonyl)pyridiniumbromidu.

io 2. Způsob výroby pyridiniových sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že se vaří pyridinové deriváty vybrané ze skupiny obsahující

1. V,jV’-di(nikotinyl)hydrazin,
2. 3-[(2-pyridyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,
3. 3-[(2-methansulfonyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

15 4. 3-[(2-benzoyloxy)ethylaminokarbonyl]pyridin,

5. 3-[(2-fenylsulfonyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

6. 3-[(2-acetoxy)ethyloxykarbonyl]pyridin,

7. 3-[(2-benzoyloxy)ethyloxykarbonyl]pyridin,

8. 3-[(2-methoxy)ethy loxy karbonyl] pyridin,

20 9. 3-[(2-fenylaminokarbonyl)hydrazínokarbonyl]pyridin,

10. 3-[(2-acetoxy)ethylaminokarbonyl]pyridin,

11 3-[(2-(4-methylfenylsulfonyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

12. 3-[(2-benzoyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

13. 3-[(2-fenylmethansulfonyl)hydrazinokarbony 1]pyridin,

25 14. 3-[(2-(3-cyklohexylpropanoyl)hydrazinokarbonyl]pyridin,

15. 3-[(2-methoxy)ethylaminokarbonyl]pyridin a

16. 3-[l-oxo-l-(2-methoxykarbonyl)pyridyl]hydrazinopyridin.

s kvartemizačními činidly vybranými ze skupiny obsahující

30 1. 2-bromacetylthiofen,

2. 2-chloracetylthiofen,

3. fenacylbromid,
4. fenacylchlorid,
5. 2,4-dichlorfenacylbromid,

35 6. TV-fenylchloracetamid,

7. TV-cyklopropylchloracetamid,

8. ethylbromacetát,

9. bromacetyl furan,

10. JV-isopropylchloracetamid,

40 11. /V-chloracetyl-2-pyrrolidon a

12. chloroctová kyselina, v alkoholických rozpouštědlech, jako je methanol, ethanol, propanol, a/nebo vysoko vroucích rozpouštědlech, jako je toluen nebo xylen, po dobu 6 až 48 hodin pod zpětným chladičem,

-34CZ 303214 B6 a dále se izolují vzniklé sloučeniny.

3. Použití pyridiniové sloučeniny podle nároku 1 pro výrobu léčiva diabetických komplikací

5 a onemocnění souvisejících se stárnutím, mezi něž patří onemocnění ledvin, nervová poškození, retinopatie, ateroskleróza, mikroangiopatie, endoteliální dysfunkce, dermatologické stavy, zabarvení zubů.

4. Farmaceutický prostředek pro léčení diabetických komplikací a onemocnění souvisejících se io stárnutím, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceuticky efektivní množství jedné nebo více pyridiniových sloučenin podle nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí ve směsi s farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem, rozpouštědlem nebo vehikulem.

15 5. Farmaceutický prostředek podle nároku 4, vyznačující se tím, že je ve formě orálního přípravku.
6. Farmaceutický prostředek podle nároku 5, vyznačující se tím, že farmaceuticky přijatelný nosič je vybrán ze skupiny sestávající ze škrobu, laktosy, polyvinylpyrrolidonu K-30,

2o talku a stearátu hořečnatého.
7. Farmaceutický prostředek podle nároku 4, vyznačující se tím, že je ve formě parenterálního přípravku.

25
8. Způsob výroby parenterálního přípravku podle nároku 7, vyznačující se tím, že se jedna nebo více sloučenin podle nároku l rozpustí v polyethylenglykolu 400 a takto získaný roztok se zředí isotonickým roztokem nebo vodou na žádanou koncentraci.
9. Farmaceutický prostředek podle nároku 6, vyznačující se tím, že existuje ve for30 mě lotionu, ústní vody a zubní pasty.
10. Použití sloučeniny z nároku 1 samostatně nebo v kombinaci s ostatními léčivy určenými pro antidiabetickou terapii pro výrobu farmaceutického prostředku, určeného pro léčbu diabetického pacienta a podávaného v terapeuticky efektivním množství tomuto pacientovi, aby došlo ke

35 zničení AGE vytvořeného u tohoto pacienta, přičemž AGE je označení bílkovin, které vznikají neenzymovou glykosylací, zejména u diabetů.
11. Použití sloučeniny z nároku 1 pro výrobu farmaceutického přípravku v kombinaci s farmaceuticky akceptovatelným nosičem, rozpouštědlem nebo vehikulem pro předcházení onemocnění

40 způsobených diabetem nebo při onemocněních způsobených diabetem a při komplikacích souvisejících se stárnutím.
12. Použití podle nároku 11, kde onemocnění způsobené diabetem je nefrologická porucha, neurologická porucha, ateroskleróza, retinální porucha, dermatologická porucha, ne-enzymatické

45 hnědnutí ústní dutiny, endoteliální orgánová dysfunkce a růstová porucha nebo pro prevenci těchto onemocnění.