CS272562B1 - Průmyslový kmenhouby Clavicepa purpurea (Pr.) Tul. 88-EP/1988 pro přípravu elymoklaviau - Google Patents
Průmyslový kmenhouby Clavicepa purpurea (Pr.) Tul. 88-EP/1988 pro přípravu elymoklaviau Download PDFInfo
- Publication number
- CS272562B1 CS272562B1 CS305488A CS305488A CS272562B1 CS 272562 B1 CS272562 B1 CS 272562B1 CS 305488 A CS305488 A CS 305488A CS 305488 A CS305488 A CS 305488A CS 272562 B1 CS272562 B1 CS 272562B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- strain
- elymoclavine
- medium
- tul
- preparation
- Prior art date
Links
- DAVNRFCJMIONPO-UHFFFAOYSA-N elymoclavine Natural products C1=CC(C2C=C(CO)CN(C2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 DAVNRFCJMIONPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 20
- IAOSEBXZNXDPEE-UKRRQHHQSA-N elymoclavine Chemical compound C1=CC=C2[C@H]3C=C(CO)CN(C)[C@@H]3CC3=CN=C1[C]32 IAOSEBXZNXDPEE-UKRRQHHQSA-N 0.000 title claims abstract 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 8
- 241000233866 Fungi Species 0.000 title 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 241000221751 Claviceps purpurea Species 0.000 claims description 10
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical class N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical class [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011707 mineral Chemical class 0.000 claims 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 12
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 abstract description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 7
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 7
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 abstract description 6
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 abstract 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 19
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 13
- DAVNRFCJMIONPO-UKRRQHHQSA-N Elymoclavine Chemical compound C1=CC([C@H]2C=C(CO)CN([C@@H]2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 DAVNRFCJMIONPO-UKRRQHHQSA-N 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 8
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 8
- 239000007739 pm medium Substances 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 4
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 206010028400 Mutagenic effect Diseases 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 2
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 2
- 231100000243 mutagenic effect Toxicity 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- XJOOMMHNYOJWCZ-UHFFFAOYSA-N Agroclavine Natural products C1=CC(C2C=C(C)CN(C2C2)C)=C3C2=CNC3=C1 XJOOMMHNYOJWCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000393427 Cepaea hortensis Species 0.000 description 1
- 241000124232 Claviceps fusiformis Species 0.000 description 1
- 241000237369 Helix pomatia Species 0.000 description 1
- IFQSXNOEEPCSLW-DKWTVANSSA-N L-cysteine hydrochloride Chemical compound Cl.SC[C@H](N)C(O)=O IFQSXNOEEPCSLW-DKWTVANSSA-N 0.000 description 1
- YSEXMKHXIOCEJA-FVFQAYNVSA-N Nicergoline Chemical compound C([C@@H]1C[C@]2([C@H](N(C)C1)CC=1C3=C2C=CC=C3N(C)C=1)OC)OC(=O)C1=CN=CC(Br)=C1 YSEXMKHXIOCEJA-FVFQAYNVSA-N 0.000 description 1
- HDKDEPNNJHUYAT-UHFFFAOYSA-N [O-][N+](=O)NC(/N)=N/CN=O Chemical compound [O-][N+](=O)NC(/N)=N/CN=O HDKDEPNNJHUYAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPKBEIIDYOMDQW-UKRRQHHQSA-N agroclavine Chemical compound C1=CC=C2[C@H]3C=C(C)CN(C)[C@@H]3CC3=CN=C1[C]32 UPKBEIIDYOMDQW-UKRRQHHQSA-N 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000018842 conidium formation Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 229960003133 ergot alkaloid Drugs 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000012499 inoculation medium Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 150000004682 monohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 229960003642 nicergoline Drugs 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000001054 red pigment Substances 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
SeSení spadá do oblasti farmakologického
průmyslu. Týká se nového průmyslového
kmene, který v podmínkách kultivace
na kapalných médiích produkuje za dobu
kratší než dříve popsané kmeny vysoké koncentrace
alkaloidu elymoklaviau o dostačující
čistotě při vyloučení prodúkoe exooelulárních
polysaoharidů a koaidií. Účelem
řeSení jé urychlení a zefektivnění
fermentační produkce elymoklavinu.
Description
Vynález se týká průmyslového kmene houby Claviceps purpurea (Fr.)Tul. pro přípravu elymoklavinu. .
Alkaloid elymoklavin obecného vzorce I
(I) se stal významnou farmaceutickou surovinou pro přípravu semisyntetických derivátů námelových alkaloidů, využívaných jako léčiva, například. Nicergolinu (US Pat. 2835675).
Elymoklavin se vyrábí převážně submersní fermentací pomocí průmyslových kmenů Claviceps purpurea a Claviceps fusiformis.
Nevýhodami dosud využívaných, kmenů je pomalý nástup produkce, kdy ekonomicky zajímavých koncentrací alkaloidu je dosahováno až 21, den kultivace, dále tvorba doprovodného alkaloidu agroklavinu, který je nutno následnou separací od elymoklavinu odstraňovat, a také produkce exocelulárních glukanů a konidií, které vyvolávají tvorbu emulsí a tak snižují filtravatelnost fermentační tekutiny a komplikují extrakci alkaloidů.
Uvedené nevýhody odstraňuje kmen Claviceps purpurea (Er.)Tul. 88-EP podle vynálezu, který se vyznačuje rychlým nástupem produkce elymoklavinu při submersní kultivaci. Již 16. den fermentaoe produkuje průměrně 2 500 mg elymoklavinu/L· média o čistotě cca 90 %. Přitom se netvoří nežádoucí konidie ani exocelulární glukany.
Vzorky nového kmene jsou uloženy ve sbírce mikroorganismů Mikrobiologického ústavu ČSAV v Praze pod označením Claviceps purpurea pod číslem 88-EP/1988.
Charakteristika nového kmene Claviceps purpurea (Fr.)Tul. 88-EP:
Nárůst kultury kmene na tuhém agarovém médiu NL 829 (viz Tabulka 2) (Maier a kol., Planta Medica 40, 104, 1980) je souvislý, slabě zvrásnělý. Mycelium kmene je šedivé až šedobílé. Po delší době kultivace produkuje do půdy hnědočervený pigment. Kolonie kmene v UV světle tmavěmodře fluoreskují. Kmen nesporuluje na pevném ani kapalném médiu. V kapalném médiu tvoří ojedinělé blastospory a arthospory. Mycelium submersní kultury kmene je převážně sfaceliálního typu a je provázeno řídkým výskytem shluků sklerociálních buněk. Na půdách CS2, (viz Tabulka 2) tvoří submersní kultura sespenzní, snadno filtrovatelné mycelium bez nežádoucích, execelulárních. glukanů. Hnědý až hnědočervený rozpustný pigment je tvořen až v konečné fázi kultivace - po 20. dnu. '
Kmen podle vynálezu se od původního rodičovského kmene liší ztrátou tvorby konidií, změnou spektra alkaloidů (z ergotoxinů na elymoklavin) a vyšší produkcí alkaloidů.
Uchovávání kmene Claviceps purpurea 88-EP
Krátkodobě lze kmen podle vynálezu uchovávat na agarovém médiu NI 829 (jako 20 až 22 denní kultury) při teplotě 4 °C. Kmen je nutno přeočkovávat po 2 až 3 měsících, delším skladováním se podstatně snižuje jeho životaschopnost.
Pro dlouhodobé uchovávání kmene lze s výhodou použít lyofilizace podle postupu: Konzervační roztok ml> 6Q% rozt. sacharosy sterilizovaného v autoklávu při 115 °C/15 min. 15 mL rozt. sušeného netučného mléka (12,5 g/100 ml dest. H20) sterilizuje se v autoklávu při 105 až 110 °C 10 až 15 min (nesmí zhnědnout), po sterilizaci se oba roztoky sterilně smísí a přidá se promyté mycelium kmene připravené 6 až 8 denní kultivací, na médiu TI promlčíme, rozpl3
CS 272 562 Bl 2 nine do ampuli, lyofilizujeme, ampule uzavřeme zatavením a uchováváme při 4 °C. Za těchto podmínek si kmen podle vynálezu uchová vitalitu minimálně 1 rok.
Suspenzi mycelia kmene podle vynálezu lze v konzervačním roztoku pouze zmrazit a bez lyofilizace ji uchovávat minimálně 6 měsíců při -18 °C. Rozmražením a opětným zmrazením ztrácí kmen životaschopnost.
Postup získání nového kmene podle vynálezu:
Kmen Claviceps purpurea (Fr.)Tul 88-EP byl získán kombinovanou mutační technikou a následujícím testováním asi 500 izolátů (Tab. 1). '
Protoplasty kmenů v průběhu šlechtění byly připravovány následujícím postupem:
Submersní kultivací kmene v médiu TI (viz Tabulka 2) 4 dny za podmínek uvedených v příkladu 1 bylo získáno mycelium, které bylo odstředěno a promyto 2x médiem PM (viz Tabulka 2). Do sterilní baňky (100 mL) se vloží 500 mg vlhké váhy mycelia, přidá 10 mL média PM a 1 až 2 mL roztoku (5 %) gastrické šíávy (helikasa) z hlemýždě zahradního Helix pomatia a za mírného třepání se inkubuje asi 2 h při 28 °C, směs se přefiltruje přes fritu SI a odstředí se (10 min/5 000 rpm). Protoplasty se nashromáždí na hladině, odkud se stáhnou Pasteurovou pipetou. Protoplasty se potom naředí médiem PM a buS se přímo vysévají na médium NL 829, nebo se ozařují UV světlem, popřípadě se na ně působí N-nitro-N'-nitrosomethylguanidinem (NNTG). NNTG se rozpustí v malém množství acetonu a doplní se na koně. 1/mg/mL médiem PM. K 5 mL suspenze protoplastů v médiu PM se přidá 0,5 mL rozt. NNTG. Po 1 h inkubaci při 24 °C ve tmě se protoplasty odstředí, promyjí médiem PM a vysévají na médium NL 829. Samotný proces přípravy protoplastů helikasou vyvolává mutagenní účinky; helikasa je mírným mutagenem (Černá, Mutat. Res. j.43, str 169, (1985)).
Mutageneze hyfových fragmentů:
Mycelium připravené obdobně jako pro tvorbu protoplastů se důkladně zhomogenizuje mixérem Ultra-Turrax. Stupeň homogenizace se kontroluje mikroskopicky. Suspenzí takto připravených hyfových fragmentů ozáříme UV světlem a potom se vysévá na médium NL 829.
Kolonie, které po cca 23 dnech kultivace při 24 °C vyrostly ze zárodků mutovaných různým postupem, se potom přeočkují na šikmé agary s médiem NL 829 a testují na produkci elymoklavinu kultivačním způsobem na médiu OS2.
Způsob kultivace kmene C. purpurea 88-EP podle vynálezu pro získání výchozí suroviny k izolaci elymoklavinu a k následné výrobě finálních produktů a léčebných preparátů je doložen v příkladech použití, aniž by se tímto příkladem jakkoliv omezovaly vlastnosti nového kmene, způsob jeho kultivace a použití při průmyslové výrobě.
Příklad 1
Výchozí inokulum kmene pro submersní fermentaoi elymoklavinu se připraví ze zásobní kultury kmene C. purpurea 88-EP narostlé na agarovém médiu NL 829 v Endově zkumavce. Kultura má být stará 21 až 25 dní, nejlépe bez uchovávání v chladničce. Veškeré kultivace kmene podle vynálezu probíhají ve tmě při teplotě 24 °C. Mycelium kultury takto narostlé je velmi křehké a je možno ho snadno smýt uříznutou pipetou do inokulačního média TI (Spala C., ing Genetics of Industrial Microorganisms, eds. Z. Vaněk et al., Elsevier, Amsterdam 1973, str. 393). Zaočkované médium (60 mL ve 300 mL Erlenmayerově baňce) se kultivuje na rotační třepačce (240 rpm, 5,5 cm excentr.) s výhodou 6 dní, popřípadě i déle. Z takto získaného inokula je 5 mL přeneseno do Erlenmayerových baněk (300 mL) s médiem GS2 (60 mL) (AO 199986). Kultury se kultivují 16 až 21 dní. Produkce celkových alkaloidů v 16. dni fermentace činí 2 100 až 2 500 mg/L s obsahem elymoklavinu až 90 %, produkce v 21. dni je 2 800 až 3 500 mg/L s obsahem elymoklavinu 70 až 80 %.
Příklad 2
Kultivace probíhá za obdobných podmínek, jak je uvedeno v příkladu 1, pouze místo produkčního média CS2 je použito média 0S25, popřípadě média CS30 a vyššími koncentracemi sacharosy. Tento postup dává o 10 až 20 % vyšší výtěžky elymoklavinu a nástup produkce to3
CS 272 562 Bl hoto alkaloidu je rychlejší, než při použití média CS2.
Tabulka 1 Postup přípravy nového kmene Clavieeps purpurea (Fr. )Tul 88-EP kombinovaným mutačním šlechtěním (na médiu CS2)
Generalogie Clavieeps purpurea pracovní označení । | Mutace | Produkce alkaloidů agro- elymo- klavin (%) klavin (%) | ||
objekt (mezistupně) mutagenese | mutagen | celková (mg/L) | ||
1. (výchozí kmen) | P - | 900^ | stopy stopy | |
2 | E protoplasty | C | 900 až 1 | 100 10 80 |
3 | E-I protoplasty | c | 1 300 | • 10 80 |
4. | E-HF . fragmenty hyf | UV 80 mJ/cm2 | 1 700 | 15 70 |
5 | EK 10 protoplasty | UV 40 mJ/cm2 | 2 000 až 2 | 200 15 75 |
6 | 88-EP protoplasty | NNTG 0,1 mg/mL | 2 100 až 2 | 500 5 90 |
(působení 1 h) a16. den submersní fermentace bkmen P produkoval převážně ergotoxiny cvýeev intaktních protoplastů - potenciální mutagenní účinek helikasy při přípravě protoplastů
Tabulka 2
Složení použitých médií:
Bř-222 | g/L | TI | g/L |
sacharosa | 100 | sacharosa | 100 |
Ii-asparagin | 10 | kvas, extrakt | 0,1 |
Ca(H03)2.4H2 | 1 | L-asparagin | .10 |
KH2P°4 | 0,25 | Ca(K03)2.4H20 | 1 |
MgS°4.7H2° | 0,30 | L-cystein.HC1 | 0,1 |
Kvasničný extrakt Difco | o,i | kh2p°4 | 0,25 |
FeSO4.7H2O | 0,02 | MgS04.7H20 | 0,3 |
ZnS0A*7H20 | . 0,02 | ZnS04.7^0 | 0,02 |
KC1 | 0,1 | (kh4)2so4 | 10 |
agar | ’ 25 | voda vodovodní | |
H20 destilovaná pH upravit KH^OH | 5,4 až 5,6 | pH upravit NaOH | 5,5 |
EM | mol/I> z | CS2 | g/L |
sacharosa | 0,8 ' | sacharosa | 100 |
MgCl2 . | 0,01 | kys. citrónová | |
CaCl2 | 0,01 | monohydrát | 16,8 |
citrát sodný | 0,01 | CaCl2 | 1,2 |
pH (NaOH) | 4,8 | KOI · | 0,12 |
destilovaná voda | kh2po4 | 0,25 | |
MgS04.7H20 | 0,25 | ||
FeS04.7H20 | 0,02 | ||
ZnS04«7H2O | 0,015 | ||
(^4)2^4, | 10 | ||
voda vodovodní pH upravit NaOH | 5,5 |
CS 272 562 Bl | . 4 | ||
CS25 | g/L | CS30 | g/L |
sacharosa ostatní komponenty jako médium 0S2 | 250 | sacharosa ostatní komponenty jako médium CS2 | ’ 300 |
PŘEDMĚT VYNÁLEZU
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUPrůmyslový kmen houby Claviceps purpurea (Fr.)Tul, pro přípravu elymoklavinu kultivací na tekutých médiích, které obsahují zdroj asimilovatelného uhlíku, dusíku, minerální sole, stopové a/nebo biologicky aktivní látky, uložený ve Sbírce mikroorganismů Mikrobiologického ústavu ČSAV v Praze pod číslem 88-BP/1988.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS305488A CS272562B1 (cs) | 1988-05-05 | 1988-05-05 | Průmyslový kmenhouby Clavicepa purpurea (Pr.) Tul. 88-EP/1988 pro přípravu elymoklaviau |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS305488A CS272562B1 (cs) | 1988-05-05 | 1988-05-05 | Průmyslový kmenhouby Clavicepa purpurea (Pr.) Tul. 88-EP/1988 pro přípravu elymoklaviau |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS305488A1 CS305488A1 (en) | 1990-05-14 |
CS272562B1 true CS272562B1 (cs) | 1991-02-12 |
Family
ID=5369484
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS305488A CS272562B1 (cs) | 1988-05-05 | 1988-05-05 | Průmyslový kmenhouby Clavicepa purpurea (Pr.) Tul. 88-EP/1988 pro přípravu elymoklaviau |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CS (1) | CS272562B1 (cs) |
-
1988
- 1988-05-05 CS CS305488A patent/CS272562B1/cs not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CS305488A1 (en) | 1990-05-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CS272562B1 (cs) | Průmyslový kmenhouby Clavicepa purpurea (Pr.) Tul. 88-EP/1988 pro přípravu elymoklaviau | |
DE3104151C2 (cs) | ||
RU2118661C1 (ru) | Штамм гриба claviceps purpurea (fr.) tul. - продуцент эргокриптинов | |
KR100754821B1 (ko) | 벌 동충하초 j―201 균주의 균사체와 그 세포외 다당체의대량 생산방법 | |
Selim et al. | Specific long-chain fatty acids promote optimal growth of Frankia: accumulation and intracellular distribution of palmitic and propionic acid | |
Shirane et al. | Mineral salt medium for the growth of Botrytis cinerea in vitro | |
Malinka | Saprophytic cultivation of Claviceps | |
CS276627B6 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu druhu Claviceps purpurea (Fr.) TUL. CCM 8059 | |
CS245153B1 (en) | Strain of acremonium chrysogenum microorganism | |
FR2550549A1 (fr) | Nouvelle souche produisant de la clavine, procede pour sa preparation, ainsi qu'un procede microbiologique de production d'alcaloides de la clavine | |
CZ283773B6 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea /Fr./ Tul. | |
CS253097B1 (cs) | Průmyslový kmen houby Claviceps fusiformis Loveless F 27 CC-4/85 | |
Nnoruka | EV J\LUJ\TION Of DTECJ I AND HEXAGON TB KITS USED fOR DIAGNOSIS Of TUBERCULOSJS JN NIGERIA. | |
RU2226547C1 (ru) | Штамм гриба entomophthora thaxteriana (petch.) (zygomycetes; entomophthorales) № 9 (визр) - продуцент биопрепарата энтокс | |
CZ279533B6 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea /Fr./ Tul. | |
CS225272B1 (cs) | Nový průmyslový kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) TUL, CCM F-721 | |
CZ282335B6 (cs) | Vysokoprodukční kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenum CCM 8197 | |
CN102604838A (zh) | 少孢节丛孢菌菌株n及其应用 | |
CS262188B1 (cs) | Kmen mikroorganismu Penicillium chrysogenuniCCM F-8012 | |
CZ239691A3 (en) | novel industrial strain of micro-organisms claviceps purpurea (fr.) tul., ccm 8058 | |
CZ405598A3 (cs) | Průmyslový produkční kmen mikroorganismu Claviceps purpurea (Fr.) Tul. | |
DE2336765A1 (de) | Verfahren zur herstellung von mutterkornalkaloiden, vorzugsweise von ergokryptin und ergokornin, durch fermentation | |
CH501728A (de) | Verfahren zur Herstellung eines Gemisches von Mutterkornalkaloiden der Polypeptid- und der Ergobasin-Gruppe | |
HU195249B (en) | Process for producing ergot alkaloides first of all ergochristine by parasites | |
CZ282334B6 (cs) | Vysokoprodukční kmen mikroorganismu penicillium chrysogenum CCM 8196 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20020505 |